KR100556865B1 - Fe(ⅲ), 폴리히드록실레이트 및 오브알부민으로 구성된 복합체 - Google Patents
Fe(ⅲ), 폴리히드록실레이트 및 오브알부민으로 구성된 복합체 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 Fe(Ⅲ), 폴리히드록실레이트 화합물 및 오브알브민으로 구성된 Fe(Ⅱ) 유기 복합체 및 그 제조 방법에 관한 것으로 상기 복합체는 철결핍성 빈혈 치료제로서 유용하다.
Description
철은 인간의 대사에서 중요한 생리적 역할을 한다. 대사에 필요한 철은 음식물을 통해 흡수되는데 철 흡수에 영향을 미치는 인자는 다양하다: 관강내 인자(장내분비와 장내 분해과정), 장점막 상태 및 생체 인자(철 교체, 적혈구 생성).
월경과 임신으로 인한 철 손실, 영양 결핍 및 철 흡수에 영향을 미치는 인자의 변화로 인한 소아와 노인의 철 흡수 불량 등으로 철결핍이 일어나고 이는 종종 심각한 임상 상태를 야기한다.
통상, 철결핍성 빈혈 환자에게 철함유 요법(martial therapy)을 시행하는 경우 철결핍으로 인한 증상은 사라지며 그 치료량이 적절하면 평균 헤모글로빈 양이 나날이 증가한다. 그러나 대다수의 경우 철함유 요법을 헤모글로빈 농도가 정상이 될 때까지 시행하는 것만으로는 충분치 않고 빈혈증이 바로잡힐때까지 몇 년간 이 요법을 지속할 필요가 있다.
다시말해서 철함유 요법은 일정 기간 계속되는 것이 일반적이며, 특별히 심각한 경우가 아닌때는 예컨대 무기염(황산 제1철)이나 다른 유기염(시트르산염, 푸마르산염, 글루콘산염등) 등의 철염의 형태로 경구투여되어야 한다. 이때 불내성과 독성이 문제되는데, 많은 철염들은 위장관에서 이러한 문제를 야기시키며 특히 무기염의 경우에 더 그러하다.
철염 뿐 아니라 철복합체도 철결핍성 빈혈치료제로서 제안되어 왔는데 철복합체는 철염보다 부작용은 적으나 생리적 관점에서 볼 때 효과가 떨어지는 단점이 있다. 실제 몇몇 복합체들의 경우 철은 상당히 강하게 킬레이트화 될 수 있어 그 생리 작용이 매우 낮다 (Remington's Pharmaceutical Science (1990), P826-828).
이러한 예의 복합체들은 문헌("Preparation and Properties of Iron(III)-L-Amino Acid Nitrates": Inorganica Chimica Acta, 54, 187-190 (1981), "Preparation and Properties of Iron(III)-Amino Acid Complexes Iron(III)-Alanine, a possible Ferritin Analog": J. American. Chem. Soc. 96, 2621 (1974))에 기술되어 있듯이 Fe(Ⅲ)-폴리올 아미노산으로 구성되어 있다.
이 복합체내에서 철(Ⅲ)의 산화물-수산화물과 수산기간에 배위결합이 일어나 사면체 단위를 기초한 하는 조밀 구조가 형성되며 이 조밀구조는 카르복실 측면작용기 (side group)나 다른 친전자기에 의해 안정화되어 있다. 기타 다른 단백질-철 복합체는 불안정하고 비균일하며 용해성이 그다지 좋지 않고 철 함유량이 낮다.
말 비장 또는 소 비장에서 추출해낸 페리틴의 사용으로 빈혈증 치료가 상당히 진보되었다.(Isolation, purification and characterization of Bovine Spleen Ferritin, N. Cetinkaya; F.W.Lengemann과 P.Kogan; Comp. Biochem. Physiol. Vol.80, No.4, p.773-78 (1985)). 페리틴은 위장벽을 손상시키지는 않지만 그 제조가 용이하지 않아 비용이 꽤 높다. 게다가 소 장기를 사용하는 것과 관련해서 소 장기가 BSE를 일으키는 등 신종 슬로우 바이러스의 전달체로 작용할 수 있다는 문제가 있다.
본 발명에 의해 Fe(Ⅲ), 폴리히드록실레이트 및 오브알부민으로 이루어진 복합체를 얻을 수 있었다. 본 발명에 따른 복합체는, 흡수력이 뛰어나고 부작용이 제거된 천연 페리틴 복합체와 유사한 화학적 특성 및 생물학적 특성을 갖는다.
본 발명의 방법은 다음과 같은 단계를 특징으로 한다.
A) 알부민 수용액에서 출발하여 오브알부민 수용액을 제조한다. 알부민 수용액을 포화도 0.32의 황산암모늄으로 처리하여 침전을 형성한 후 그 침전은 제거하고, 남은 용액을 다시 포화도 0.52의 황산 암모늄으로 처리하여 오브알부민 침전을 얻는다. 이 오브알부민 침전을 물에 다시 녹인후 정제하고 5% 정도로 농축한후 여기에 NaOH를 가해 pH 9로 만든다.
B) Fe(Ⅲ)과 폴리히드록실레이트 화합물로 이루어진 복합체 용액을 제조한다. 폴리히드록실레이트 화합물에 모어염 (Mohr's salt)를 가하고 이어서 H2O2를 가해 Fe(Ⅱ)을 Fe(Ⅲ)으로 산화시킨 후, pH 10.5가 될 때까지 NaOH를 가한다.
C) (A)와 (B)에 기재된 방법으로 얻은 용액을 혼합해 Fe(Ⅲ)-폴리히드록실레이트-오브알부민 복합체를 형성하고, pH 5.0-5.5가 될 때까지 아세트산을 가해 복합체를 침전시킨 후 정제한다.
본 발명에 따른 복합체는 철결핍성 빈혈증 치료에 활성 물질로 사용될 수 있다. 이 복합체는 균일성(Homogeneity)과 생물학적 이용율이 높은 것이 특징이다.
본 발명에 따른 복합체의 특성과 잇점 및 제조 방법은 후술하는 부분에서 보다 상세히 설명한다.
Fe(Ⅲ), 폴리히드록실레이트 화합물 및 오브알부민으로 이루어진 본 발명에 따른 복합체는 다음 단계에 따라 제조된다.
A) 오브알부민 용액의 제조;
B) Fe(Ⅲ)과 폴리히드록실레이트 화합물로 이루어진 복합체 용액의 제조;
C) (A)와 (B)의 용액 간의 반응
A) 오브알부민 용액은 신선한 알부민 원료 또는 알부민 플레이크를 사용하여 다음 단계에 따라 제조된다:
A1) 5-10℃에서 서서히 교반하면서 알부민을 2-5% 농도로 물에 녹인 다음, 인산이나 황산같은 무기산을 가해 pH 3-5로 한다.
A2) A1의 용액에 포화도 0.32의 황산암모늄을 가해 오브알부민보다 분자량이 큰 단백질 침전물을 얻는다. 이 단백질은 여과에 의해 분리된다.
A3) A2 단계에서 여과후에 얻은 용액에 포화도 0.52의 황산암모늄을 가해 오브알부민 침전물을 얻는다. 이때, 오브알부민보다 분자량이 작은 단백질은 용액에 잔류한다. 이 혼합물을 여과하고 여과기에 수집된 오브알부민을, 트리클로로아세트산에 반응을 보이는 성분이 없어질 때까지 황산암모늄으로 세척한다.
A4) 상기 오브알부민을 2중량%의 농도로 물에 녹인다. 이 용액을 여과한후 유기 불순물과 황산암모늄이 전부 제거될때까지, 분자 분류 칼럼 20,000(molecular fractionation)에 기초해 한외여과한다. 다음 이 용액을 알부민 약 5%농도까지 농축시킨후 NaOH 용액을 가해 pH 9로 한다.
B) 만니톨, 소르비톨 및 프럭토오스 중에서 선택된 폴리히드록실레이트 화합물과 제1철황산암모늄(Mohr's salt)을 원료로 하여 Fe(Ⅲ)와 폴리히드록실레이트 화합물로 이루어진 복합체 용액을 다음 단계에 따라 제조한다.
B1) 10-15℃에서 모어염을 물에 녹여 3-5% 용액을 만든다. 이 용액에 폴리히드록실레이트 화합물을 모어염 2.5mol당 0.5mol의 양으로 가한다. 반응은 즉각적으로 일어나고 맑고 거의 무색의 pH 4-4.5 용액이 얻어진다. 이 용액을 10-15℃에서 30분간 교반한다.
B2) 이어서, 36%의 H2O2를 모어염 2.5mol당 0.25mol의 양으로 천천히 가한다. Fe(Ⅱ)가 Fe(Ⅲ)로 산화되며, pH가 2.5-2.7 범위로 떨어지면서 용액의 색이 암적색으로 변한다. 이 용액을 교반하고, 온도가 약 30-35℃로 될 때까지 가열하여 15-20분간 방치한다.
B3) B2단계에서 얻은 용액에 모어염 2.5mol당 0.5mol의 양으로 20중량% NaOH 수용액을 점진적으로 가해 pH 10.5가 되게 한다. 처음에는 침전이 생기는데, 이 침전은 NaOH용액을 가함에 따라 용해된다. 약 1시간동안 80℃까지 가열하면 Fe(Ⅲ)-폴리히드록실레이트 화합물이 전량 용해됨으로써 반응이 완결된다. 동일량의 물로 용액을 희석하고 실온에서 10-15시간 동안 교반한다. 이 용액을 여과한 후 분자 분류 칼럼(1,000)를 통과시켜 유리 철(free iron)을 제거시켜 정제한다.
C) Fe(Ⅲ)-폴리히드록실레이트 화합물-오브알부민 복합체는 다음 단계에 따라 얻어진다.
C1) (A)에서 얻은 오브알부민 용액을 (B)에서 얻은 Fe(Ⅲ)-폴리히드록실레이트 화합물 복합체 용액에 다음과 같이 혼합한다: 모어염 2.5mol과 폴리히드록실레이트 화합물 0.5mol으로부터 얻은 복합체와 알부민 0.01mol을 혼합한다. 이 혼합물을 40℃에서 1시간동안 가열한다.
C2) 교반하면서 C1 용액에 아세트산을 점진적으로 가하면 복합체가 침전된다. 용액의 pH가 5.0-5.5가 될때까지 아세트산을 계속 가한다.
C3) 이 침전을 여과 분리하고 아세트산 1% 용액으로 철과 단백질간의 반응이 사라질때까지 세척한다. 이 침전을 글리세롤 10%를 함유하는 pH 8의 수용액에 녹인후 포화도 0.28의 황산 암모늄을 가해 이 복합체를 재침전시킨다; 최종적으로 이 침전을 여과하여 동일한 포화도를 갖는 황산암모늄으로 세척한다. 이 침전을 글리세롤 10중량%를 함유하는 pH 8의 수용액에 다시 녹인 후 황산염과의 반응이 사라질때까지 분자 분류 칼럼 20,000에 기초한 한외여과로 정제한다.
C4) C3의 최종 용액을 철의 농도가 약 5%에 달할때까지 농축시킨후 동결 건조하여 Fe(Ⅲ)-폴리히드록실레이트 화합물-오브알부민 복합체를 분말 형태로 얻는다.
전자상자기공명(Electron Paramagnetic Resonance: EPR) 분석법에 의하면 본 발명에 따른 복합체는 중심부분이 비이온성 다핵 철로 이루어져 있고 여기에 오브알부민이 배위결합되어 있으며, 이 배위결합은 폴리히드록실레이트 화합물과의 이온 결합에 의해 강화되어 있다. 이러한 구조는 소 비장 또는 말 비장에서 추출한 페리틴에 대해 상자기성 유사체이다. 이 복합체는 다음과 같은 화학적 특성을 지닌다.
-철 총량 135-185 mg/g
-유기철 전체 철의 95%
-유기질소 80-95 mg/g
빵과 우유만으로 짜여진 식단을 이용해 랫트에 유도시킨 철결핍성 빈혈증(모리스(Morrith) 방법에 따름)에 대해 상기 복합체의 항빈혈 활성이 약리학적으로 입증되었다. 모리스 식이 요법을 한지 약 16주 후 랫트는, 꼬리 정맥에서 취한 혈액 샘플로 측정했을 때의 헤모글로빈 수치가 약 60%로 떨어지는 것을 특징으로 하는 빈혈 상태가 되었다.
본 발명에 따른 복합체를 하이드로글리세린 용액의 형태로 우유에 첨가해 1 mg/day/animal 용량으로 투여하고 16주 동안 관찰하면, 대조군 집단에서는 혈색소 감소도가 그대로 유지된데 반해 실험군에서는 헤모글로빈 수치의 증가를 가져온다. 이 실험의 결과가 하기 표 1과 도 1 (도 1의 그래프에서 치료군은 완전히 검은 막대로 표시되어 있고, 대조군은 대응하는 치료군을 나타내는 검은 막대 우측에 흐릿한 검은 막대로 표시되어 있다)에 나타나 있다.
본 발명의 복합체를 투여함으로써 헤모글로빈 농도에 양성 변화 (positive variation)가 유도되었는데, 체중 증가, 소화기능 개선 및 설사현상이 사라지는 등 동물의 상태가 전체적으로 개선되었다.
이러한 활성으로 인해, 본 발명에 따른 복합체는 남성의 철결핍성 빈혈 치료용 약학적 조성물 제조시 활성 물질로 이용될 수 있으며, 식이요법 제품 제조시 생계 인자(maintenance factor)로서 이용될 수 있다.
남성의 철결핍성 빈혈을 치료하는데 있어서, 본 발명의 복합체의 경구투여량은 철의 양으로서 하루에 80-130mg 이다. 하기 실시예들은 본 발명의 예시를 위해 제공된다.
실시예 1
페리-만니톨-오브알부민의 제조.
A) 플레이크 형태의 알부민 0.6kg을 12시간 동안 10℃의 물 15리터에 교반하며 녹인 다음 pH 4가 될 때까지 황산을 가한다. 이렇게 하여 형성된 매우 탁한 용액에 포화도 0.32의 황산암모늄 3.8kg을 가한다. 하룻밤동안 방치한 후 용액을 따라 내고 여과한다. 포화도 0.52의 황산을 40% 농도에 이를때까지 여과액에 가한다. 침전된 오브알부민을 필터상에 모아서 이물 단백질이 모두 없어질때까지 40% 황산암모늄 용액으로 세척한다. 오브알부민을 2% 농도로 증류수에 녹인후 다시 여과한다. 반복된 세척과 농축을 통해 유기 불순물과 황산암모늄이 모두 제거될 때까지 분자 분류 칼럼 20,000에 기초해 한외여과하여 맑은 용액을 정제한다.
최종적으로 5% 농도 용액이 얻어지는데, 이 용액의 pH를 NaOH 용액을 이용하여 9로 만든다.
수율은 10리터당 약 450g 이다.
B) 제1철황산암모늄 (Mohr's salt) 1050kg을 10℃로 냉각된 20리터의 물에 녹인 후, 순수 만니톨 100g을 가하고 30분 후에 이 용액을 15분간 교반하면서 36%의 과산화수소 약 23ml을 가한다. 20% 수산화나트륨 100ml를 여기에 가하고 교반하면서 Fe(Ⅲ)-만니톨로 구성된 적갈색 복합체가 완전히 녹을때까지 1시간동안 가열한다. 여과한 후 분자 분류 칼럼(1000)를 이용해 용액을 정제하고 약 10리터까지 농축된 무색의 용출액이 얻어질 때까지 세척한다.
Fe(Ⅲ)-만니톨 복합체는 알칼리성 pH에서 녹고 pH 6-7에서 침전하고 산성 pH에서 다시 녹는, pH 9내지 pH 12에서의 거동으로 볼 때, 그 구조가 균일하고 안정하다는 것이 명백하다. 이 복합체는 철 0.35 eq/gram-atom에 상응하는 낮은 음이온 하전을 보인다.
셀룰로오스 아세테이트에서의 전기영동에 의하면 이 복합체는 산성 pH에서는 음극으로 이동하며 알칼리성 완충용액에서는 양극으로 이동한다. 9,000MHz의 주파수와 123°K에서 측정된 EPR 스펙트럼에 의하면 이 복합체는 쌍을 이룬 많은 상자기 중심계 즉, 고스핀(high spin)을 가진 철 3가이온의 다핵계가 존재하는 것을 알 수 있다. 3125가우스에 있는 약한 시그날은 매트릭스의 복잡성에서 기인하는 래디칼 때문이다.
C) Fe(Ⅲ)-만니톨 복합체 함유 용액을 오브알부민 함유 용액과 혼합한다.
얻어진 용액을 40℃까지 1시간동안 가열하고 25℃로 냉각시킨다. 아세트산을 가해 pH를 5까지 내리면 Fe(Ⅲ)-만니톨-오브알부민으로 구성된 복합체 침전이 생긴다. 여과로 이 침전을 분리한 후 1%의 아세트산 용액으로 세척한다. 이 침전을 pH 8에서 10% 글리세롤을 함유하는 수용액에 녹인 다음 포화도 0.28의 황산암모늄을 가해 재침전시킨다. 12시간 후에 여과로 침전을 분리한후 pH 8에서 수용액에 다시 녹인다. 이 용액을 분자 분류 칼럼 (20,000) 으로 황산염이 없어질때까지 정제하고 철의 총농도가 3%가 되도록 농축한다. 다음 이 용액을 동결건조시켜 다음의 화학적 특성을 갖는 적갈색 분말형의 복합체를 얻는다.
- 철 총량 145.5mg/g
- 유기 철 전체 철의 97%
- 유기 질소 85 mg/g
이 복합체는 오브알부민 1mol당 Fe(Ⅲ) 256mol(수산화철의 형태로서)과 만니톨(C6H14O6) 51mol을 함유한다. 따라서 화학양론적 조성은 다음과 같다:
분자량 80Kd의 [Fe(OH)3]256.[C6H14O6)51]·오브알부민
이 복합체의 안정성과 균일성은 다음과 같은 여러 특성들에 의해 명백해진다:
- 철과 단백질에 반응하는 전기영동에 있어서 제품의 특성에 따른 단일 밴드의 일정한 이동;
- 셀룰로오스 아세테이트 전기 영동에 있어서 오브알부민보다 더 높은 이동성;
- 철 검출과 단백질 검출간 SDS-PAGE에서의 기울기의 밀접한 대응성;
- 중성 및 알칼리성 pH에서의 즉각적인 용해성과 pH5-6에서의 침전 및 낮은 pH에서의 재용해성;
- pH 8, 4mg/ml 농도에서 90℃까지 가열시 응고 현상이 없는 안정성;
- 다양한 산성 pH값에서의 안정성;
- 친수성 용매와 염 용액(염화나트륨, 황산암모늄)에 의한 침전 후 단백질 변성이 없음;
- 가시광선 파장영역에 최대치가 없고 270nm에 뚜렷한 밴드가 있는, 가시광선-UV 흡수 스펙트럼;
- HPLC 분석에 의한 균일한 유기 복합체 검출;
- 123°K의 온도, 9GHZ의 주파수에서 배리안의 E/109 (Varian)에 의한 EPR 스펙트럼 (도 2)상에서, 3000가우스 근처의 강하고 상당히 넓은 시그날 존재함: 이는, 쌍을 이룬 다중 상자기 중심, 즉 고스핀(high spin)을 갖는 철 원자 다핵계가 존재하는 것을 나타낸다. 이러한 철 원자 다핵계의 존재는 페리틴의 중심에 존재하는 계와 (도 3) 비슷하며 철이 다핵 형태로 존재하지 않고 아미노산(트랜스페린)에 배위결합된 형태로 존재하는 (도 4) 다른 여타의 구조들과는 다르다. 이 스펙트럼상에는 1500가우스 근처에 매우 강한 시그날도 보인다.
이 복합체의 약물학적 특성은 발명의 상세한 설명에 기술되어 있다.
실시예 2
만니톨 대신 소비톨을 사용한 것을 제외히고는 실시예 1에 기재된 방법을 반복실시하였다.
실시예 1에서와 유사한 분석학적 특성 및 약물학적 특성을 가진 Fe(III)-소르비톨-오브알부민 복합체가 얻어진다.
실시예 3
만니톨 대신 프럭토오스를 사용한 것을 제외하고는 실시예 1에 기재된 방법을 반복실시하였다.
실시예 1에서와 유사한 분석학적 특성 및 약물학적 특성을 가진 Fe(III)-프럭토오스-오브알부민 복합체가 얻어진다.
본 발명의 복합체를 투여함으로써 헤모글로빈 농도에 양성 변화 (positive variation)가 유도되었는데, 체중 증가, 소화기능 개선 및 설사현상이 사라지는 등 동물의 상태가 전체적으로 개선되었다.
이러한 활성으로 인해, 본 발명에 따른 복합체는 남성의 철결핍성 빈혈 치료용 약학적 조성물 제조시 활성 물질로 이용될 수 있으며, 식이요법 제품 제조시 생계 인자(maintenance factor)로서 이용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 복합체의 하이드로글리세린 용액을 이용하여 헤모글로빈 시험을 실시하여 얻은 결과를 나타내는 그래프이다.
도 2는 페리-만니톨-오브알부민 복합체에 대한 EPR 스펙트럼을 나타낸다.
도 3은 페리틴에 대한 EPR 스펙트럼을 나타낸다.
도 4는 트랜스페린에 대한 EPR 스펙트럼을 나타낸다.
Claims (15)
- Fe(III), 폴리히드록실레이트 화합물 및 오브알부민으로 이루어진 복합체를 제조하는 방법에 있어서, 상기 폴리히드록실레이트 화합물이 만니톨, 소르비톨 및 프럭토오스로 이루어진 군으로부터 선택되며 상기 방법이,A) 알부민 수용액에서 출발하여 오브알부민 수용액을 제조하는 단계로서, 알부민 수용액을 포화도 0.32의 황산암모늄으로 처리하여 침전물을 형성한 다음, 그 침전물은 제거하고 생기는 용액을 다시 포화도 0.52의 황산 암모늄으로 처리하여 오브알부민 침전물을 얻은 후, 이 오브알부민 침전물을 물에 재용해시킨후 정제하고 약 5%로 농축한후 여기에 NaOH를 가해 pH를 9로 만드는 것을 특징으로 하는 단계;B) Fe(Ⅲ)과 폴리히드록실레이트 화합물로 이루어진 복합체 용액을 제조하는 단계로서, 폴리히드록실레이트 화합물에 모어염(Mohr's salt)을 가하고 이어서 H2O2를 가해 Fe(Ⅱ)을 Fe(Ⅲ)으로 산화시킨 후, pH 10.5가 될 때까지 NaOH를 가하는 것을 특징으로 하는 단계; 및C) (A)와 (B)에 기재된 방법으로 얻은 용액을 혼합하여 Fe(Ⅲ)-폴리히드록실레이트-오브알부민 복합체를 형성하고, pH가 5.0 내지 5.5가 될 때까지 아세트산을 가해 복합체를 침전시킨 후 정제하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 포화도 0.32의 황산암모늄으로 처리한 상기 알부민 용액은 농도가 2-5%이고 온도가 5-10℃이고 pH가 3-5인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 오브알부민 용액의 정제는 여과후 분자 분류 칼럼 분리 20,000 한외여과에 의해 수행되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 폴리히드록실레이트 화합물이 첨가되는 상기 모어염 수용액은 농도가 3-5%이고 온도가 10-15℃인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 폴리히드록실레이트 화합물은 모어염 2.5mol당 0.5mol의 양으로 모어염 용액에 첨가되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 과산화수소의 첨가량은 모어염 2.5mol당 과산화수소 0.25mol인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, (A)단계 및 (B)단계에서 얻어지는 용액의 혼합은, 모어염 2.5mol과 폴리히드록실레이트 화합물 0.5mol로부터 얻은 복합체와 0.01mol의 알부민을 혼합하는 것임을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 침전 화합물의 정제는, 이 침전을 글리세롤 10중량%를 함유하는 pH 8의 수용액에 녹인 후 포화도 0.28의 황산암모늄을 가해 재침전시킨 다음 여과 및 세척하고, 마지막으로 글리세롤 10중량%를 함유하는 pH 8의 수용액에 다시 녹인후 분자 분류 칼럼 20,000으로 한외여과하여 정제함으로써 이루어지는 것을 특징으로 하는 방법.
- Fe(Ⅲ), 폴리히드록실레이트 화합물 및 오브알부민으로 구성되는 Fe(Ⅲ) 유기 복합체.
- 제 9항에 있어서, 상기 폴리히드록실레이트 화합물은 만니톨, 소르비톨 및 프럭토오스로 구성된 군에서 선택되는 것임을 특징으로 하는 복합체.
- 제 9항에 있어서, 상기 복합체는 철의 총량이 135-185mg/g 이고 이중 유기 철의 함량이 97%이며 유기 질소의 함량이 80-95mg/g인 것을 특징으로 하는 복합체.
- 제 9항에 있어서, 가시광선-UV 스펙트럼에 있어서 가시광선 파장영역에는 최대치가 없고 270nm에는 밴드가 존재하며, 9GHZ의 주파수와 123°K의 온도에서의 전자상자기공명(EPR) 스펙트럼에 있어서 3000가우스 근처에 시그날이 존재하는 것을 특징으로 하는 복합체.
- 활성성분으로서 제 9항에 따른 Fe(Ⅲ) 유기 복합체를 포함하는 철결핍성 빈혈증 치료용 약제학적 조성물.
- 제 9항에 따른 Fe(Ⅲ) 유기 복합체를 유효량 경구투여하는 단계를 포함하는, 인간을 제외한 동물의 철결핍성 빈혈증 치료 방법.
- 제 9항에 따른 Fe(Ⅲ) 유기 복합체를 포함하는 식이요법제.
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