JPWO2019226946A5

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Publication number: JPWO2019226946A5
Application number: JP2020564146A
Authority: JP
Publication date: 2022-05-25

Claims

操作された免疫細胞であって、
（ｉ）ＣＤ２標的化ドメイン、膜貫通ドメイン、および細胞内シグナル伝達ドメインを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）と、
（ｉｉ）前記細胞内で内因性ＣＤ２発現を下方制御するための標的ＣＤ２核酸配列の遺伝子修飾と、を含む、操作された免疫細胞。
前記遺伝子修飾が、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ、ジンクフィンガーヌクレアーゼ、ＴＡＬＥＮ、およびメガヌクレアーゼからなる群から選択されるシステムを使用するゲノム編集を含み、または前記遺伝子修飾が、短いヘアピンＲＮＡ、二本鎖ＲＮＡ、ｓｄＲＮＡ、短い阻害性ＲＮＡ、およびマイクロＲＮＡからなる群から選択されるシステムを使用する遺伝子サイレンシングを含み、任意選択的に、前記ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステムが、配列番号４４～４７からなる群から選択される核酸配列に対応するガイドＲＮＡを含む、請求項１に記載の操作された免疫細胞。
前記ＣＤ２標的化ドメインが、配列番号１８に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する可変重鎖（Ｖ_Ｈ）配列と、配列番号１９に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する可変軽鎖（Ｖ_Ｌ）配列とを含む、ｓｃＦｖを含み、または前記ＣＤ２標的化ドメインが、配列番号２０に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する可変重鎖（Ｖ _Ｈ）配列と、配列番号２１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する可変軽鎖（Ｖ _Ｌ）配列とを含む、ｓｃＦｖを含む、請求項１または２に記載の操作された免疫細胞。
ｉ）前記膜貫通ドメインが、ＣＤ８αのヒンジ－膜貫通ドメインを含む；
ｉｉ）前記細胞内シグナル伝達ドメインが、４－１ＢＢシグナル伝達ドメイン、ＣＤ２８シグナル伝達ドメイン、ＯＸ４０シグナル伝達ドメイン、およびＣＤ３ζシグナル伝達ドメインからなる群から選択される１つ以上を含む；
ｉｉｉ）前記ＣＡＲが、配列番号５に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む抗ＣＤ２－４－１ＢＢ－ＣＤ３ζ ＣＡＲである；
ｉｖ）前記操作された免疫細胞が、ＣＤ２＋細胞の細胞毒性を誘発する；および／または
ｖ）前記操作された免疫細胞が、相当する免疫細胞と実質的に同等の速度で増殖する、請求項１～３のいずれか一項に記載の操作された免疫細胞。
ｉ）前記操作された免疫細胞が、同種異系細胞である；
ｉｉ）前記操作された免疫細胞が、自家細胞である；
ｉｉｉ）前記操作された免疫細胞が、操作されたＴ細胞である；
ｉｖ）前記操作された免疫細胞が、操作されたガンマ－デルタＴ細胞である；または
ｖ）前記操作された免疫細胞が、操作されたＮＫ細胞である、
請求項１～４のいずれか一項に記載の操作された免疫細胞。
細胞局在化ドメインのＮ末端に連結された一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）を含む遮断ポリペプチドをさらに含み、
前記ｓｃＦｖが細胞表面分子に結合し、前記細胞局在化ドメインが、小胞体（ＥＲ）保持配列、ゴルジ体保持配列、およびプロテオソーム局在化配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記遮断ポリペプチドが、前記操作された細胞の細胞内に留まり、前記操作された細胞内で内因性細胞表面分子に結合する、請求項１～５のいずれか一項に記載の操作された免疫細胞。
前記ＥＲ保持配列が、ＫＤＥＬ（配列番号２４）、ＫＫＸＸ（配列番号２６）、およびＫＫＭＰ（配列番号２７）（式中、Ｘが任意のアミノ酸である）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、または前記ゴルジ体保持配列が、ＹＧＲＬ（配列番号４０）、ＹＱＲＬ（配列番号４１）、ＹＫＧＬ（配列番号４２）、およびＹＸＸＬ（配列番号４３）（式中、Ｘが任意のアミノ酸である）からなる群から選択される、請求項６に記載の操作された免疫細胞。
前記遮断ポリペプチドが、前記ｓｃＦｖと、ＫＫＭＰもしくはＫＫＴＮを含む前記ＥＲ保持配列ドメイン、またはＹＧＲＬ、ＹＱＲＬ、ＹＫＧＬを含む前記ゴルジ体保持配列ドメインのいずれかとの間に連結された膜貫通ドメインをさらに含み、前記膜貫通ドメインが、ＣＤ８α、ＣＤ８β、４－１ＢＢ、ＣＤ２８、ＣＤ３４、ＣＤ４、ＦｃεＲＩγ、ＣＤ１６、ＯＸ４０、ＣＤ３ζ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＴＣＲα、ＣＤ３２、ＣＤ６４、ＶＥＧＦＲ２、ＦＡＳ、およびＦＧＦＲ２Ｂからなる群のうちのいずれか１つから選択される膜貫通ドメインである、請求項６または７に記載の操作された免疫細胞。
前記膜貫通ドメインが、ＣＤ８αのヒンジ－膜貫通ドメインを含む、請求項６～８のいずれか一項に記載の操作された免疫細胞。
請求項１～９のいずれか一項に記載の操作された免疫細胞のうちの少なくとも１つ、または請求項１～９のいずれか一項に記載の操作された免疫細胞の単離された集団を含む、医薬組成物。
請求項１～９のいずれか一項に記載の操作された免疫細胞を含む、癌の治療を必要とする対象において癌を治療するための医薬組成物であって、任意選択的に、前記組成物が、薬学的に許容される担体をさらに含み、任意選択的に、前記癌が、Ｔ細胞悪性腫瘍またはＣＤ２関連癌であり、任意選択的に、前記Ｔ細胞悪性腫瘍または前記ＣＤ２関連癌が、Ｔ細胞白血病Ｔ細胞リンパ腫、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｔ－ＡＬＬ）、初期Ｔ細胞前駆細胞急性リンパ芽球性白血病（ＥＴＰ－ＡＬＬ）、Ｔ細胞前リンパ腫性白血病、Ｔ細胞大顆粒リンパ性白血病、腸疾患関連Ｔ細胞リンパ腫、肝脾Ｔ細胞リンパ腫、皮下脂肪織炎様Ｔ細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（ＣＴＣＬ）、ＣＴＣＬの任意のサブタイプ、菌状息肉症、セザリー症候群、原発性皮膚ガンマ－デルタＴ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）のＴ系統サブセットを伴う悪性腫瘍、特に明記されていない末梢Ｔ細胞リンパ腫（ＰＴＣＬ）（ＰＴＣＬ－ＮＯＳ）、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、および未分化大細胞リンパ腫からなる群から選択され、任意選択的に、前記投与が、静脈内注入、動脈内注入、腹腔内注入、腫瘍への直接注射および／もしくは手術後の腫瘍床の灌流、人工足場の腫瘍部位への移植、ならびに髄腔内投与からなる群から選択されるいずれか１つによる、医薬組成物。
請求項１～９のいずれか一項に記載の前記ＣＡＲをコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターを含む、発現ベクター組成物。
ヒトＣＤ２遺伝子に相補的なガイドＲＮＡのポリヌクレオチドと、Ｃａｓタンパク質をコードするポリヌクレオチドと、を含む１つ以上の発現ベクターを含む発現ベクター組成物であって、前記ガイドＲＮＡの前記ポリヌクレオチドが、配列番号４４～４７からなる群から選択されるいずれか１つを含む、発現ベクター組成物。
請求項６～９のいずれか一項に記載の前記遮断ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクターを含む、発現ベクター組成物。
請求項１～９のいずれか一項に記載の操作された免疫細胞を産生するための方法であって、請求項１２に記載の発現ベクター組成物、および請求項１３に記載の発現ベクター組成物を免疫細胞に導入することを含み、任意選択的に、請求項１４に記載の発現ベクター組成物を前記免疫細胞に導入することをさらに含み、任意選択的に、導入することが、前記発現ベクター組成物を同時にまたは連続的に前記免疫細胞に導入することを含む、方法。