JPS6361148A - 乾式分析方法における検量線の補正方法 - Google Patents
乾式分析方法における検量線の補正方法Info
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- JPS6361148A JPS6361148A JP61205345A JP20534586A JPS6361148A JP S6361148 A JPS6361148 A JP S6361148A JP 61205345 A JP61205345 A JP 61205345A JP 20534586 A JP20534586 A JP 20534586A JP S6361148 A JPS6361148 A JP S6361148A
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
-
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
［産業上の利用分野コ
本発明は乾式分析要素を用いて諸種の液体、特に血液に
代表される生物体液中の特定の成分を定量分析する方法
における検量線の補正方法に関するものである。
代表される生物体液中の特定の成分を定量分析する方法
における検量線の補正方法に関するものである。
［従来技術］
乾式分析要素を用いる分析法においては、分析すべき特
定成分（アナライト）の存在量または濃度（以下単に濃
度という）が既知である複数の液体試料を測定して、ア
ナライト濃度と光学濃度測定値との相関を表す検量線を
予め作成し、この検ｆｌ線に基づいて未知試料の光学濃
度測定値からそのアナライト濃度を求めている。
定成分（アナライト）の存在量または濃度（以下単に濃
度という）が既知である複数の液体試料を測定して、ア
ナライト濃度と光学濃度測定値との相関を表す検量線を
予め作成し、この検ｆｌ線に基づいて未知試料の光学濃
度測定値からそのアナライト濃度を求めている。
乾式分析要素の検量線は一般に全濃度範囲にわたり直線
となることは少なく曲線となることが多いので、高精度
の分析を行うためには濃度既知の試料３つ以上について
光学濃度を測定し、これらの測定値を結ぶようにして作
成するのが普通である。
となることは少なく曲線となることが多いので、高精度
の分析を行うためには濃度既知の試料３つ以上について
光学濃度を測定し、これらの測定値を結ぶようにして作
成するのが普通である。
乾式分析要素の特性は、保存中の試薬の経時変質、測定
温度、製造時の僅かな条件変動等によって若干変化する
ことがあり、同一アナライト濃度の液体試料について乾
式分析要素の光学濃度を測定しても測定値が異なる場合
がある。この場合の光学濃度値とアナライト濃度との関
係は例えば、第１図に曲線Ｂ（変異した検量線）で示す
ようになり、同一アナライト濃度の液体試料に対する光
学濃度値が予め作成した標準検量線Ａの光学濃度値と異
なる場合がある。このような場合、もし検量線の変化を
測定前に、又は測定の際に知ることができれば、変異し
た検量線Ｂを、例えば標準検量線Ａに実質的に一致する
ように補正して、正しいアナライト濃度を求めることが
できる。
温度、製造時の僅かな条件変動等によって若干変化する
ことがあり、同一アナライト濃度の液体試料について乾
式分析要素の光学濃度を測定しても測定値が異なる場合
がある。この場合の光学濃度値とアナライト濃度との関
係は例えば、第１図に曲線Ｂ（変異した検量線）で示す
ようになり、同一アナライト濃度の液体試料に対する光
学濃度値が予め作成した標準検量線Ａの光学濃度値と異
なる場合がある。このような場合、もし検量線の変化を
測定前に、又は測定の際に知ることができれば、変異し
た検量線Ｂを、例えば標準検量線Ａに実質的に一致する
ように補正して、正しいアナライト濃度を求めることが
できる。
乾式分析要素における検量線の補正方法としては、従来
、アナライトの濃度が既知の水性液体試０（検定液）を
、一つまたは二つ以上測定して得た光学濃度値をもとに
、予め定められている演算を用いて検量線を補正してい
た。
、アナライトの濃度が既知の水性液体試０（検定液）を
、一つまたは二つ以上測定して得た光学濃度値をもとに
、予め定められている演算を用いて検量線を補正してい
た。
しかしながら、これらの方法ではアナライトの濃度が既
知の検定液を、一つまたはそれ以上用意する必要があり
、また、−度検定液を測定した乾式分析要素は二度使用
できないので、検量線の補正を行うために一つまたはそ
れ以上の乾式成分要素を余分に使用する必要があった。
知の検定液を、一つまたはそれ以上用意する必要があり
、また、−度検定液を測定した乾式分析要素は二度使用
できないので、検量線の補正を行うために一つまたはそ
れ以上の乾式成分要素を余分に使用する必要があった。
この方法で検量線を補正するには、乾式分析要素に検定
液を点着して測定するのに必要な時間のほかに、検量線
を補正するための検定液そのもののアナライト濃度を他
の標準測定法で測定するための時間が必要となる。
液を点着して測定するのに必要な時間のほかに、検量線
を補正するための検定液そのもののアナライト濃度を他
の標準測定法で測定するための時間が必要となる。
また、アナライトの濃度が既知の検定液についても、経
時変質または異物の混入等によって、アナライト濃度が
変化する場合があり、必ずしも正しい検ｍ線補正を行う
ことができない。
時変質または異物の混入等によって、アナライト濃度が
変化する場合があり、必ずしも正しい検ｍ線補正を行う
ことができない。
乾式分析要素の検量線は直線とみなせる部分を含んでい
る場合があるが、一般に曲線である。従って検量線を補
正するためには１次式、２次式、さらに３次式以上の高
次式の順に補正が正確になると一般に考えられている。
る場合があるが、一般に曲線である。従って検量線を補
正するためには１次式、２次式、さらに３次式以上の高
次式の順に補正が正確になると一般に考えられている。
本発明者等は意外なことに乾式分析要素の未使用時、又
は測定対象アナライト不含有液体点着後の要素の光学濃
度値を測定し、特定の形式の１次式又は２次式で表され
る補正式で前記の光学濃度値を処理することにより高精
度で検量線の補正が可能であることを見出し本発明に到
達した。
は測定対象アナライト不含有液体点着後の要素の光学濃
度値を測定し、特定の形式の１次式又は２次式で表され
る補正式で前記の光学濃度値を処理することにより高精
度で検量線の補正が可能であることを見出し本発明に到
達した。
［発明の目的コ
本発明の目的は、長い保存期間での経時変質や高い周囲
温度の影響による変質等で性能が変化した乾式分析要素
、あるいは製造時の僅かな条件変動等による性能の変異
があり、標準の検量線と異なる変異した検量線を有する
（と推定される）乾式分析要素（以下、要補正乾式分析
要素という）を用いてアナライトの定量分析を実施する
際に、検定に！、（アナライトの濃度が既知の水性液体
試料）を用いずに要補正乾式分析要素の変異した検量線
を簡単にしかも実用上充分な程度に精度よく補正する方
法を提供するものである。
温度の影響による変質等で性能が変化した乾式分析要素
、あるいは製造時の僅かな条件変動等による性能の変異
があり、標準の検量線と異なる変異した検量線を有する
（と推定される）乾式分析要素（以下、要補正乾式分析
要素という）を用いてアナライトの定量分析を実施する
際に、検定に！、（アナライトの濃度が既知の水性液体
試料）を用いずに要補正乾式分析要素の変異した検量線
を簡単にしかも実用上充分な程度に精度よく補正する方
法を提供するものである。
［発明の構成コ
本発明の上記目的は乾式分析要素を用いて液体試料中の
特定の成分を定量分析する方法であって、液体を接触さ
せる前に測定した乾式分析要素の光学濃度を用いて前記
乾式分析要素の前記特定成分に対する検量線を補正する
ことを特徴とする方法によって達成された。
特定の成分を定量分析する方法であって、液体を接触さ
せる前に測定した乾式分析要素の光学濃度を用いて前記
乾式分析要素の前記特定成分に対する検量線を補正する
ことを特徴とする方法によって達成された。
本発明の特徴は、液体試料と未接触の変質した又は変質
したと推定される乾式分析要素の光学濃度（Ｆｇ ）を
測定するだけで検量線を補正することにある。
したと推定される乾式分析要素の光学濃度（Ｆｇ ）を
測定するだけで検量線を補正することにある。
［発明の構成の詳細な説明］
乾式分析要素においては、その上面又は多層分析要素の
展開層にアナライト濃度が未知の液体試料を１１、又は
数滴付着供給（以下点着という）させて、一定時間、一
定温度でインクベーションして生じた着色の光学濃度値
（の変化）を、予め作成した検量線に基づいてアナライ
ト濃度に換算している。すなわち、ある関数ｆに対して
、アナライト濃度Ｃと光学濃度値Ｄｓの間には、下記の
式が成立している。
展開層にアナライト濃度が未知の液体試料を１１、又は
数滴付着供給（以下点着という）させて、一定時間、一
定温度でインクベーションして生じた着色の光学濃度値
（の変化）を、予め作成した検量線に基づいてアナライ
ト濃度に換算している。すなわち、ある関数ｆに対して
、アナライト濃度Ｃと光学濃度値Ｄｓの間には、下記の
式が成立している。
Ｃ＝ｆ（Ｄｓ） ・・・［１コ式
［１コにおけるｆ（Ｄｓ）又はそれを数値表にしたもの
が検量線である。
［１コにおけるｆ（Ｄｓ）又はそれを数値表にしたもの
が検量線である。
正常な乾式分析要素と要補正乾式分析要素では同一アナ
ライト濃度の液体試料を点着測定しても光学濃度値が異
なる場合が多い。さらに正常な乾式分析要素と要補正乾
式分析要素では未使用（液体試料点着をせず、またイン
クベーションもしない）時、液体試料を点着せずにイン
クベーションだけを実施後、又は純水又は要素の測定対
象アナライト不含の水性液体（例、コントロール血清、
生理的塩類水溶液）を点着しインクベーション実施後の
乾式分析要素の着色光学濃度値が異なる場合が多い。こ
の異なる度合として、正常な乾式分析要素と要補正乾式
分析要素の上記の諸種の光学濃度値との間に一定の関係
があることが見出された。
ライト濃度の液体試料を点着測定しても光学濃度値が異
なる場合が多い。さらに正常な乾式分析要素と要補正乾
式分析要素では未使用（液体試料点着をせず、またイン
クベーションもしない）時、液体試料を点着せずにイン
クベーションだけを実施後、又は純水又は要素の測定対
象アナライト不含の水性液体（例、コントロール血清、
生理的塩類水溶液）を点着しインクベーション実施後の
乾式分析要素の着色光学濃度値が異なる場合が多い。こ
の異なる度合として、正常な乾式分析要素と要補正乾式
分析要素の上記の諸種の光学濃度値との間に一定の関係
があることが見出された。
すなわち、
測定対象アナライトの濃度が異なる２つの濃度既知の液
体試料又は検定液について正常な操作手順（液を乾式分
析要素に点着し、インクヘーションして、反射測光する
）で測定して得た正常な乾式分析要素の光学濃度値を
ＤｓＬ、Ｄｓ２、上記と同一の２つの液体試料
又は検定液を正常な操作手順で測定して得た要補正乾式
分析要素の光学濃度１直を ＤＬ
％Ｄ亮２、正常な乾式分析要素の未使用（液体試料点着
をせず、又インクベーションもしない）時、又は液体試
料を点着せずにインクペーション実施後、又は液体試料
点着後インクベーションせずに測定して得た光学濃度値
を ＦＤＩ、ＦＤ２、要補正乾式分析要
素の未使用（液体試料点着をせず、又インクベーション
もしない）時、又は液体試料を点着せずにインクベーシ
ョン実施後、又は液体試料点着後インクベーションせず
に測定して得た光学濃度値を Ｆｇｔ、
Ｆ６゜、とすると、 ＤＨ−Ｄ貴ｔ＝Ｃｚ（Ｆｏ＋−Ｆ３＋） ・−
・［２］Ｄ９２ Ｄｓ２＝ Ｇ２（ＦＤ２− Ｆｇ
２） −［：３コ一般的に、 Ｄｓ −ＤＨ＝Ｇ （Ｆｏ Ｆ８ ）
−［４コという関係がある。
体試料又は検定液について正常な操作手順（液を乾式分
析要素に点着し、インクヘーションして、反射測光する
）で測定して得た正常な乾式分析要素の光学濃度値を
ＤｓＬ、Ｄｓ２、上記と同一の２つの液体試料
又は検定液を正常な操作手順で測定して得た要補正乾式
分析要素の光学濃度１直を ＤＬ
％Ｄ亮２、正常な乾式分析要素の未使用（液体試料点着
をせず、又インクベーションもしない）時、又は液体試
料を点着せずにインクペーション実施後、又は液体試料
点着後インクベーションせずに測定して得た光学濃度値
を ＦＤＩ、ＦＤ２、要補正乾式分析要
素の未使用（液体試料点着をせず、又インクベーション
もしない）時、又は液体試料を点着せずにインクベーシ
ョン実施後、又は液体試料点着後インクベーションせず
に測定して得た光学濃度値を Ｆｇｔ、
Ｆ６゜、とすると、 ＤＨ−Ｄ貴ｔ＝Ｃｚ（Ｆｏ＋−Ｆ３＋） ・−
・［２］Ｄ９２ Ｄｓ２＝ Ｇ２（ＦＤ２− Ｆｇ
２） −［：３コ一般的に、 Ｄｓ −ＤＨ＝Ｇ （Ｆｏ Ｆ８ ）
−［４コという関係がある。
一方、この０１と０２との差と、ｐｓ＋とＤｓ２との差
には、前述のとおり、一定の関係があることが判明した
。
には、前述のとおり、一定の関係があることが判明した
。
すなわち、ある定数ａとｂについて
Ｇｌ −Ｇ２ ＝ａ （Ｄｓｔ−Ｄｓ２） ＝［
５］従って、式［５コを積分して一般的な形の式にする
と、ある定数ａとｂについて Ｇ ｚ ａ Ｄｓ十ｂ
−［６コ式［４］と式［６コから Ｄｓ Ｄａ＝（ａＤｓ＋ｂ）”（Ｆｏ−Ｆｇ）
・・・［’７コ式［１コと式［７］から Ｃ＝ｆ（（ａＤｓ＋ｂ）（Ｆｏ Ｆｇ）＋ＤＢ）・
・・［８コ従ってＦＤが予めわかっていれば、 ■要補正乾式分析要素の未使用時の光学濃度値Ｆ己を測
定するだけてその要補正乾式分析要素の変異した検量線
を正確に補正することができる。
５］従って、式［５コを積分して一般的な形の式にする
と、ある定数ａとｂについて Ｇ ｚ ａ Ｄｓ十ｂ
−［６コ式［４］と式［６コから Ｄｓ Ｄａ＝（ａＤｓ＋ｂ）”（Ｆｏ−Ｆｇ）
・・・［’７コ式［１コと式［７］から Ｃ＝ｆ（（ａＤｓ＋ｂ）（Ｆｏ Ｆｇ）＋ＤＢ）・
・・［８コ従ってＦＤが予めわかっていれば、 ■要補正乾式分析要素の未使用時の光学濃度値Ｆ己を測
定するだけてその要補正乾式分析要素の変異した検量線
を正確に補正することができる。
同様にして、
■要補正乾式分析要素に液体試料を点着せずにインクヘ
ーション実施後の要素の着色光学濃度値を測定するだけ
て、又は、 ■水（例、純水）又は要素の測定対象アナライト不含の
水性液体（例、コントロール血清、生理的塩類水溶ン夜
）を点着しインクヘーションせずに要素の着色光学濃度
値を測定するだけで、又は、■水又は要素の測定対象ア
ナライト不含の水性液体を点着しインクベーション実施
後の要素の着色光学濃度値を測定するだけで、 その要補正乾式分析要素の変異した検量線の正確な補正
が可能なことが判明した。
ーション実施後の要素の着色光学濃度値を測定するだけ
て、又は、 ■水（例、純水）又は要素の測定対象アナライト不含の
水性液体（例、コントロール血清、生理的塩類水溶ン夜
）を点着しインクヘーションせずに要素の着色光学濃度
値を測定するだけで、又は、■水又は要素の測定対象ア
ナライト不含の水性液体を点着しインクベーション実施
後の要素の着色光学濃度値を測定するだけで、 その要補正乾式分析要素の変異した検量線の正確な補正
が可能なことが判明した。
本発明の方法を適用できる乾式分析要素としては、特開
昭５５１６４３５６、特開昭５７−６６３５９等に記載
の織物展開層を有する一体型多層分析要素、特開昭６０
−２２２７６９等に記載の編物展開層を有する一体型多
層分析要素、特開昭５７−１４８２５０に記載の有機ポ
リマー繊維バルブ含有抄造紙からなる展開層を有する一
体型多層分析要素、特開昭６１−４９５９等に記載の多
孔性接着された多孔性層有する一体型多層分析要素、特
開昭５７−１２５８４７等に記載の繊維分散液を塗布し
て設けた繊維質展開層を有する一体型多層分析要素、特
公昭５３−２１６７７、米国特許３９９２１５８等に記
載のメンブランフィルタ（プラッシュポリマー層）、ポ
リマーミクロビーズ等が親水性ポリマーバインダーに侃
持されてなる連続微空隙含有多孔性層等の非繊維等方的
多孔性層間層を有する一体型多層分析要素、特開昭５５
−９０８５９等に記載のポリマーミクロビーズが水で膨
潤しないポリマー接着剤で点接触状に接着されてなる連
続微空隙含有多孔性、Ｉ！ｌ（三次元格子状粒状構造物
Ｎ）からなる非繊維等方的多孔性展開層展開層を有する
一体型多層分析要素等に代表される一体型多層分析要素
、特開昭４９−１１３９５等に記載の多孔性Ｐｉを積層
固定した多層分析要素、特開昭５９−７７３５６等に記
載の繊維質多孔性層を有するイムノアッセイ用多層分析
要素、特開昭５７−５３６６Ｌ特開昭５８−４５５６５
等に記載の改良スティックタイプ分析器具等がある。
昭５５１６４３５６、特開昭５７−６６３５９等に記載
の織物展開層を有する一体型多層分析要素、特開昭６０
−２２２７６９等に記載の編物展開層を有する一体型多
層分析要素、特開昭５７−１４８２５０に記載の有機ポ
リマー繊維バルブ含有抄造紙からなる展開層を有する一
体型多層分析要素、特開昭６１−４９５９等に記載の多
孔性接着された多孔性層有する一体型多層分析要素、特
開昭５７−１２５８４７等に記載の繊維分散液を塗布し
て設けた繊維質展開層を有する一体型多層分析要素、特
公昭５３−２１６７７、米国特許３９９２１５８等に記
載のメンブランフィルタ（プラッシュポリマー層）、ポ
リマーミクロビーズ等が親水性ポリマーバインダーに侃
持されてなる連続微空隙含有多孔性層等の非繊維等方的
多孔性層間層を有する一体型多層分析要素、特開昭５５
−９０８５９等に記載のポリマーミクロビーズが水で膨
潤しないポリマー接着剤で点接触状に接着されてなる連
続微空隙含有多孔性、Ｉ！ｌ（三次元格子状粒状構造物
Ｎ）からなる非繊維等方的多孔性展開層展開層を有する
一体型多層分析要素等に代表される一体型多層分析要素
、特開昭４９−１１３９５等に記載の多孔性Ｐｉを積層
固定した多層分析要素、特開昭５９−７７３５６等に記
載の繊維質多孔性層を有するイムノアッセイ用多層分析
要素、特開昭５７−５３６６Ｌ特開昭５８−４５５６５
等に記載の改良スティックタイプ分析器具等がある。
本発明の方法は、これらの乾式分析要素うちで、一体型
多層分析要素に特に適している。
多層分析要素に特に適している。
以下に本発明の方法を実施例により具体的に詳細に説明
する。
する。
回Ｔ歪Ｉ
参考例１
ゼラチン下塗りを有する厚さ１８５Ｌ！ＩＩ＋の無色透
明ポリエチレンテレフタレー）（ＰＥＴ）フィルム（支
持体）の上に、グルコース測定用呈色試薬組成物が下記
の被覆量になるようにして水溶液を塗布乾燥して呈色試
薬層を設けた。
明ポリエチレンテレフタレー）（ＰＥＴ）フィルム（支
持体）の上に、グルコース測定用呈色試薬組成物が下記
の被覆量になるようにして水溶液を塗布乾燥して呈色試
薬層を設けた。
口 Ｉｊ
ベルオキシターセ５ｏｏｏＩＵ／ＩＩ＋２１．７−シヒ
ドロキシナフタレン ２５０Ｂ＃ｏ２４−アミノ−
２，３−ジメチル−１−（２，４，６−）リクロロフェ
ニル）−３−ピラゾリン−５−オン １．８．ｇ／ｍ
２ゼラチン ２０ｇ／ＩＷ
２ノニルフエノキシボリエトキシエタノール（平均１０
オキシ工チレン単位含有） ２００ｍｇ／ｍ２呈色試
薬層の上にグルコースオキシダーゼ含有光遮蔽層をその
成分が下記の被覆量になるようににして水溶液を塗布乾
燥して設けた。
ドロキシナフタレン ２５０Ｂ＃ｏ２４−アミノ−
２，３−ジメチル−１−（２，４，６−）リクロロフェ
ニル）−３−ピラゾリン−５−オン １．８．ｇ／ｍ
２ゼラチン ２０ｇ／ＩＷ
２ノニルフエノキシボリエトキシエタノール（平均１０
オキシ工チレン単位含有） ２００ｍｇ／ｍ２呈色試
薬層の上にグルコースオキシダーゼ含有光遮蔽層をその
成分が下記の被覆量になるようににして水溶液を塗布乾
燥して設けた。
＋ １
グルコースオキシダーゼ ４０００１Ｕ＃ｏ２
ノニルフエノキシボリエトキシエタノール（平均１０オ
キシ工チレン単位含有） ２００ｍｇ／ｍ２二酸化チ
タン微粒子 ４０ｇ／慣２グルコースオ
キシダーゼ含有光遮蔽層の上に下記の被覆量になるよう
にして接着層を水溶液を用いて塗布し乾燥した。
ノニルフエノキシボリエトキシエタノール（平均１０オ
キシ工チレン単位含有） ２００ｍｇ／ｍ２二酸化チ
タン微粒子 ４０ｇ／慣２グルコースオ
キシダーゼ含有光遮蔽層の上に下記の被覆量になるよう
にして接着層を水溶液を用いて塗布し乾燥した。
１豊ｌ夏１１１
ゼラチン ６．７ｇ／市２
ノニルフエノキシボリエトキシエタノール（平均ｌＯオ
キシエチレン単位含有） ２００Ｂ／ｍ”次に、接着
層に３０ｇ／ｍ２の割合で水を浸し水として供給、湿潤
させた後締１００％のブロード布を軽く圧着ラミネート
し、乾燥させて多孔性展開層を設け、グルコース定量用
一体型多層分析要素を完成した。
ノニルフエノキシボリエトキシエタノール（平均ｌＯオ
キシエチレン単位含有） ２００Ｂ／ｍ”次に、接着
層に３０ｇ／ｍ２の割合で水を浸し水として供給、湿潤
させた後締１００％のブロード布を軽く圧着ラミネート
し、乾燥させて多孔性展開層を設け、グルコース定量用
一体型多層分析要素を完成した。
この多層分析要素を１５ｍｍＸ１５ｎｍの正方形チップ
に裁断し、特開昭５７−６２４５２に記載のプラスチッ
クマウントに収めてグルコース定量分析スライドを完成
した。
に裁断し、特開昭５７−６２４５２に記載のプラスチッ
クマウントに収めてグルコース定量分析スライドを完成
した。
実施例１
次の４種のグルコース濃度既知の液体試料を調製又は用
意した。グルコース濃度はへキソキナーゼー〇−６−Ｐ
ＤＨ法で測定した。
意した。グルコース濃度はへキソキナーゼー〇−６−Ｐ
ＤＨ法で測定した。
試料１１ ヒト血清アルブミン ７ｏｏｌＴ１
ｇ塩化ナトリウム ９０ｍｇ水を加えて
ＩＯｍＬにするグルコース濃度 Ｏｍｇ／
ｄＬ 試料１２ モニトロールＩＸ（？メリカシ・テート−
社製）グルコース濃度 ９０ｍ８／ｄＬ 試０１３ モニトロールＩＩＸ （？メリカン・チー
１社製）グルコース濃度 ２２９ｍｇ／ｄＬ 試料１４ グルコースを添加溶解したモニトロールＩ
ｘグルコース濃度 ４９釦ｇ／ｄＬ 試料１５ ヒト血清アルブミン ７００ｍｇ塩
化ナトリウム ９０ｍｇグルコース
ｌｏｎｇ水を加えて ＩＯｍ
Ｌにするグルコース濃度 １００ｍｇ／ｄＬ 試料１６ ヒト血清アルブミン ７００ｍｇ塩
化ナトリウム ９０ｍ８グルコース
３０ｍｇ水を加えて １０ｍＬ
にするグルコース濃度 ３００ｍｇ／ｄＬ 周囲温度３５℃相対湿度３０％の環境にそれぞれ、３力
月、７力月、１２力月放置して強制経時変質させた参考
例１のグルコース定量分析スライド（要補正分析スライ
ド）、及び製造直後のく新鮮）正常な性能の参考例】の
グルコース定量スライド（標準検量線の分析スライド）
を用意し、液体試料を点着せずインクベーションもせず
、そのままＰＥＴ支持体側から中心波長５［Ｏｒ＋ｍの
可視光で呈色試薬層の光学濃度を反射測光したところ反
射光学濃度値（新鮮：Ｆ ｏ ：要補正二Ｆ♂）は第１
表のとおりであった。
ｇ塩化ナトリウム ９０ｍｇ水を加えて
ＩＯｍＬにするグルコース濃度 Ｏｍｇ／
ｄＬ 試料１２ モニトロールＩＸ（？メリカシ・テート−
社製）グルコース濃度 ９０ｍ８／ｄＬ 試０１３ モニトロールＩＩＸ （？メリカン・チー
１社製）グルコース濃度 ２２９ｍｇ／ｄＬ 試料１４ グルコースを添加溶解したモニトロールＩ
ｘグルコース濃度 ４９釦ｇ／ｄＬ 試料１５ ヒト血清アルブミン ７００ｍｇ塩
化ナトリウム ９０ｍｇグルコース
ｌｏｎｇ水を加えて ＩＯｍ
Ｌにするグルコース濃度 １００ｍｇ／ｄＬ 試料１６ ヒト血清アルブミン ７００ｍｇ塩
化ナトリウム ９０ｍ８グルコース
３０ｍｇ水を加えて １０ｍＬ
にするグルコース濃度 ３００ｍｇ／ｄＬ 周囲温度３５℃相対湿度３０％の環境にそれぞれ、３力
月、７力月、１２力月放置して強制経時変質させた参考
例１のグルコース定量分析スライド（要補正分析スライ
ド）、及び製造直後のく新鮮）正常な性能の参考例】の
グルコース定量スライド（標準検量線の分析スライド）
を用意し、液体試料を点着せずインクベーションもせず
、そのままＰＥＴ支持体側から中心波長５［Ｏｒ＋ｍの
可視光で呈色試薬層の光学濃度を反射測光したところ反
射光学濃度値（新鮮：Ｆ ｏ ：要補正二Ｆ♂）は第１
表のとおりであった。
第 １ 表
上記の分析スライドそれぞれに液体試料１１〜１４の１
０ｕＬを点着し、３７℃で６分インクベーションし、直
ちにＰＥＴ支持体側から中心波長５１０ｎｒａの可視光
で呈色試薬層の光学濃度を反射測光したところ反射光学
濃度値（新鮮’ Ｄ Ｓ ：要補正：Ｄｉ）は第２表の
とおりであった。
０ｕＬを点着し、３７℃で６分インクベーションし、直
ちにＰＥＴ支持体側から中心波長５１０ｎｒａの可視光
で呈色試薬層の光学濃度を反射測光したところ反射光学
濃度値（新鮮’ Ｄ Ｓ ：要補正：Ｄｉ）は第２表の
とおりであった。
第 ２ 表 （Ｄｓ ： Ｄ亮 ）従って参考例１
のグルコース定量分析スライドについての標準検量線と
強制経時変質により変異した３つの検量線は、第２図の
概念図のようになる。
のグルコース定量分析スライドについての標準検量線と
強制経時変質により変異した３つの検量線は、第２図の
概念図のようになる。
一方、周囲温度３５℃相対湿度３０％の環境に５力月放
置して強制経時変質させた参考例１のグルコース定量分
析スライド（要補正分析スライド）、及び製造直後のく
新鮮）正常な性能の参考例１のグルコース定量スライド
（標準検量線の分析スライド）を用意し、液体試料を点
着せずインクベーションもせずそのままＰＥＴ支持体側
から中心波長５１０止の可視光で呈色試薬層の光学濃度
を反射測光したところ反射光学濃度値（新鮮” Ｆ Ｄ
：要補正：Ｆ♂）は第３表のとおりであった。
置して強制経時変質させた参考例１のグルコース定量分
析スライド（要補正分析スライド）、及び製造直後のく
新鮮）正常な性能の参考例１のグルコース定量スライド
（標準検量線の分析スライド）を用意し、液体試料を点
着せずインクベーションもせずそのままＰＥＴ支持体側
から中心波長５１０止の可視光で呈色試薬層の光学濃度
を反射測光したところ反射光学濃度値（新鮮” Ｆ Ｄ
：要補正：Ｆ♂）は第３表のとおりであった。
第 ３ 表
上記の分析スライドそれぞれに液体試料１５、Ｉ６の１
０ｕＬを点着し、３７℃で６分インクベーションし、直
ちにＰ’ＥＴ支持体側から中心波長５１０ｎｍの可視光
を用いて呈色試薬層の光学濃度を反射測光したところ反
射光学濃度値（新鮮：Ｄｓ；要補正：Ｄ−）は第４表の
とおりてあった。
０ｕＬを点着し、３７℃で６分インクベーションし、直
ちにＰ’ＥＴ支持体側から中心波長５１０ｎｍの可視光
を用いて呈色試薬層の光学濃度を反射測光したところ反
射光学濃度値（新鮮：Ｄｓ；要補正：Ｄ−）は第４表の
とおりてあった。
第 ４ 表
上記のＦ。、Ｆ♂、試料１５．１６それぞれのＤＳ、Ｄ
；の値を式［７］に代入し、連立方程式を解いてａとｂ
を計算したところ ａ ＝ −３，４９２； ｂ ＝ ＋ １．６４４そこ
で、このａ、ｂと式［７コを用いて、第２表の光学濃度
値り二からＤｓを計算したところ、第５表のとおりであ
った。
；の値を式［７］に代入し、連立方程式を解いてａとｂ
を計算したところ ａ ＝ −３，４９２； ｂ ＝ ＋ １．６４４そこ
で、このａ、ｂと式［７コを用いて、第２表の光学濃度
値り二からＤｓを計算したところ、第５表のとおりであ
った。
予め製造直後の正常な性能の参考例１の定量分析スライ
ドで作成した標準検量線（式［１コ）で、第２表の光学
濃度値をグルコース濃度に換算すると第６表のとおり、
第５表の光学濃度値をグルコース濃度に換算すると第７
表のとおりてあった。
ドで作成した標準検量線（式［１コ）で、第２表の光学
濃度値をグルコース濃度に換算すると第６表のとおり、
第５表の光学濃度値をグルコース濃度に換算すると第７
表のとおりてあった。
第 ６ 表 （Ｄｓ ）
第 ６ 表 （単位 ｍｇ／ｄＬ）第 ７
表 （単位 ｍｇ／ｄＬ）第７表と第６表の濃度値を
比較すると、式［７］で補正した光学濃度値を用いるこ
とにより、グルコース濃度の広い範囲にわたって強制経
時変質させたスライドによっても、製造直後の正常な性
能の定量スライドと同等の正確なグルコース濃度値が得
られることが明らかである。
表 （単位 ｍｇ／ｄＬ）第７表と第６表の濃度値を
比較すると、式［７］で補正した光学濃度値を用いるこ
とにより、グルコース濃度の広い範囲にわたって強制経
時変質させたスライドによっても、製造直後の正常な性
能の定量スライドと同等の正確なグルコース濃度値が得
られることが明らかである。
実施例２
次の７種のビリルビン濃度既知の液体試料を用意又は調
製した。ビリルビン濃度はＪｅｎｄｒａｓｓｉｋ −Ｇ
ｒ６ｆによるジアゾ法で測定した。
製した。ビリルビン濃度はＪｅｎｄｒａｓｓｉｋ −Ｇ
ｒ６ｆによるジアゾ法で測定した。
試料２１ モニトロールＩＸ
ビリルビン濃度 ０．９ｍｇ／ｄＬ
試料２２ モニトロール■Ｘ
ビリルビン濃度 ４．５ｍｇ／ｄＬ
試料２３ ビリルビンを添加溶解したモニトロールＩ
Ｘビリルビン濃度 ８．４ｍ、ｇ／ｄＬ 試料２４ ビリルビンを添加溶解したモニトロールＩ
Ｘビリルビン濃度 １３．０ｍｇ／ｄＬ 試料２５ ビリルビン・コントロール（アメリカシ・
テーード社製） ビリルビン濃度 １７．１ｍｇ／ｄＬ 試料２６ ヒト血清アルブミン ？００ｍｇ塩
化ナトリウム ９０ｎ＋ｇビリルビン
０．１ｍｇ水を加えて ＩＯｍ
Ｌにするビリルビン濃度 １．０ｍｇ／ｄＬ 試料２７ ヒト血清アルブミン ７００ｍｇ′
塩化ナトリウム ９０ｍｇビリルビン
１ｍｇ水を加えて ＩＯｍ
Ｌにするビリルビン濃度 １０．１ｍｇ／ｄＬ 周囲温度４５℃相対湿度３０％の環境にそれぞれ、４日
、７日、１０日、１４日放置して強制経時変質させた参
考例１と同様のプラスチックマウントに収めた特開昭６
１−７１３６３明細書実施例１に記載のビリルビン定量
用一体型多層分析要素（以下、血中総ビリルビン定量分
析スライドという）（要補正分析スライド）及び製造直
後の（新鮮）正常の性能の血中総ビリルビン定量スライ
ド（標準検量線の分析スライド）を用意し、液体試料を
点着せずインクベーションもせず、そのままＰＥＴ支持
体側から中心波長５４０ｎｍの可視光で呈色試薬層の光
学濃度を反射測光したところ反射光学濃度値（新鮮：Ｆ
Ｄ：要補正二Ｆも）は第８表のとおりであった。
Ｘビリルビン濃度 ８．４ｍ、ｇ／ｄＬ 試料２４ ビリルビンを添加溶解したモニトロールＩ
Ｘビリルビン濃度 １３．０ｍｇ／ｄＬ 試料２５ ビリルビン・コントロール（アメリカシ・
テーード社製） ビリルビン濃度 １７．１ｍｇ／ｄＬ 試料２６ ヒト血清アルブミン ？００ｍｇ塩
化ナトリウム ９０ｎ＋ｇビリルビン
０．１ｍｇ水を加えて ＩＯｍ
Ｌにするビリルビン濃度 １．０ｍｇ／ｄＬ 試料２７ ヒト血清アルブミン ７００ｍｇ′
塩化ナトリウム ９０ｍｇビリルビン
１ｍｇ水を加えて ＩＯｍ
Ｌにするビリルビン濃度 １０．１ｍｇ／ｄＬ 周囲温度４５℃相対湿度３０％の環境にそれぞれ、４日
、７日、１０日、１４日放置して強制経時変質させた参
考例１と同様のプラスチックマウントに収めた特開昭６
１−７１３６３明細書実施例１に記載のビリルビン定量
用一体型多層分析要素（以下、血中総ビリルビン定量分
析スライドという）（要補正分析スライド）及び製造直
後の（新鮮）正常の性能の血中総ビリルビン定量スライ
ド（標準検量線の分析スライド）を用意し、液体試料を
点着せずインクベーションもせず、そのままＰＥＴ支持
体側から中心波長５４０ｎｍの可視光で呈色試薬層の光
学濃度を反射測光したところ反射光学濃度値（新鮮：Ｆ
Ｄ：要補正二Ｆも）は第８表のとおりであった。
上記分析スライドそれぞれに液体試料２１〜２５の１０
ｕＬを点着し、３７℃で６分インクヘーションし、直ち
にＰＥＴ支持体側から中心波長５４０ｎｍの可視光で呈
色試薬層の光学濃度を反射測光したところ反射光学濃度
値（新鮮’ Ｄ Ｓ ：要補正：Ｄｓ）は第９表のとお
りであった。
ｕＬを点着し、３７℃で６分インクヘーションし、直ち
にＰＥＴ支持体側から中心波長５４０ｎｍの可視光で呈
色試薬層の光学濃度を反射測光したところ反射光学濃度
値（新鮮’ Ｄ Ｓ ：要補正：Ｄｓ）は第９表のとお
りであった。
第 ８ 表
第 ９ 表 （Ｄｓ； Ｄ邑）
一方、周囲温度４５℃相対湿度３０％の環境に１２日放
置して強制経時変質させた血中総ビリルビン定量分析ス
ライド（要補正分析スライド）、及び製造直後の（新鮮
）正常な性能の血中総ビリルビン定量スライド（標準検
量線の分析スライド）を用意し、液体試料を点着せずイ
ンクベーションもせず、そのままＰＥＴ支持体側から中
心波長５４０ｎｍの可視光で呈色試薬層の光学濃度を反
射測光したところ反射光学濃度値（新鮮：ＦＤ；要補正
：Ｆ♂）は第１０表のとおりであった。
置して強制経時変質させた血中総ビリルビン定量分析ス
ライド（要補正分析スライド）、及び製造直後の（新鮮
）正常な性能の血中総ビリルビン定量スライド（標準検
量線の分析スライド）を用意し、液体試料を点着せずイ
ンクベーションもせず、そのままＰＥＴ支持体側から中
心波長５４０ｎｍの可視光で呈色試薬層の光学濃度を反
射測光したところ反射光学濃度値（新鮮：ＦＤ；要補正
：Ｆ♂）は第１０表のとおりであった。
第１０表
上記の分析スライドそれぞれに液体試料２６．２７のｌ
０ｕＬを点着し、３７℃で６分インクベーションし、直
ちにＰＥＴ支持体側から中心波長５４０ｎｍの可視光で
呈色試薬層の光学濃度を反射測光したところ反射光学濃
度値（新鮮’ Ｄ Ｓ ：要補正：ＤＨ）は第１１表の
とおりであった。
０ｕＬを点着し、３７℃で６分インクベーションし、直
ちにＰＥＴ支持体側から中心波長５４０ｎｍの可視光で
呈色試薬層の光学濃度を反射測光したところ反射光学濃
度値（新鮮’ Ｄ Ｓ ：要補正：ＤＨ）は第１１表の
とおりであった。
第１１表
上記のＦｏ、Ｆｇ、試料２６．２７それぞれのＤＳ。
Ｄ二の値を式［７コに代入し、連立方程式を解いてａと
ｂを計算したところ ａ ＝ −０，９２３； ｂ ＝ ＋ １．２６６そこ
で、このａ、ｂと式［７コを用いて、第９表の光学濃度
値りるからＤｓを計算したところ、第１２表のとおりで
あった。
ｂを計算したところ ａ ＝ −０，９２３； ｂ ＝ ＋ １．２６６そこ
で、このａ、ｂと式［７コを用いて、第９表の光学濃度
値りるからＤｓを計算したところ、第１２表のとおりで
あった。
■Ｔ至亘
第１２表（Ｄ、）
予め製造直後の正常な性能の血中総ビリルビン定量スラ
イドで作成した標準検量線（式［１コ）て、第９表の光
学濃度値から総ビリルビン濃度に換算したところ第１３
表のとおり、第１２表の光学１度値から総ビリルビン濃
度に換算したところ第１４表のとおりであった。
イドで作成した標準検量線（式［１コ）て、第９表の光
学濃度値から総ビリルビン濃度に換算したところ第１３
表のとおり、第１２表の光学１度値から総ビリルビン濃
度に換算したところ第１４表のとおりであった。
図工■コ
第 １３ 表 （単位 ｍｇ／ｄＬ）第 １４
表 （単位 １ｍｇ／ｄＬ）第１３表と第１４表の濃
度値を比較すると、式［７］で補正した光学濃度値を用
いることにより、ビリルビン濃度の広い範囲にわたって
強制経時変質させたスライドによっても、製造直後の正
常な性能の定量スライドと同等の正確なビリルビン濃度
値が得られることが明らかである。
表 （単位 １ｍｇ／ｄＬ）第１３表と第１４表の濃
度値を比較すると、式［７］で補正した光学濃度値を用
いることにより、ビリルビン濃度の広い範囲にわたって
強制経時変質させたスライドによっても、製造直後の正
常な性能の定量スライドと同等の正確なビリルビン濃度
値が得られることが明らかである。
第１図は正常な検量線Ａと変異した検量線Ｂを示す概念
図である。 第２図は実施例１第２表の反射光学濃度値に基づく標準
検ｍ線及び強制経時変質により変異した３つの検量線を
示す概念図である。
図である。 第２図は実施例１第２表の反射光学濃度値に基づく標準
検ｍ線及び強制経時変質により変異した３つの検量線を
示す概念図である。
Claims (1)
- 乾式分析要素を用いて液体試料中の特定の成分を定量分
析する方法であって、液体を接触させる前に測定した乾
式分析要素の光学濃度を用いて前記乾式分析要素の前記
特定成分に対する検量線を補正することを特徴とする方
法。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61205345A JPH076917B2 (ja) | 1986-09-01 | 1986-09-01 | 乾式分析方法における検量線の補正方法 |
| DE87112746T DE3786799T2 (de) | 1986-09-01 | 1987-09-01 | Verfahren zur Korrektur der Kalibrierungskurve bei einem trockenen analytischen Prozess. |
| EP87112746A EP0305563B1 (en) | 1986-09-01 | 1987-09-01 | Method for correction of calibration curve in dry analytical process |
| US07/091,886 US4832488A (en) | 1986-09-01 | 1987-09-01 | Method for correction of calibration curve in dry analytical process |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61205345A JPH076917B2 (ja) | 1986-09-01 | 1986-09-01 | 乾式分析方法における検量線の補正方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6361148A true JPS6361148A (ja) | 1988-03-17 |
| JPH076917B2 JPH076917B2 (ja) | 1995-01-30 |
Family
ID=16505351
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61205345A Expired - Fee Related JPH076917B2 (ja) | 1986-09-01 | 1986-09-01 | 乾式分析方法における検量線の補正方法 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4832488A (ja) |
| EP (1) | EP0305563B1 (ja) |
| JP (1) | JPH076917B2 (ja) |
| DE (1) | DE3786799T2 (ja) |
Cited By (5)
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|---|---|---|---|---|
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