JPS62211556A - ノルメタネフリンの免疫学的測定方法およびそれに用いる試薬 - Google Patents
ノルメタネフリンの免疫学的測定方法およびそれに用いる試薬Info
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- JPS62211556A JPS62211556A JP5255086A JP5255086A JPS62211556A JP S62211556 A JPS62211556 A JP S62211556A JP 5255086 A JP5255086 A JP 5255086A JP 5255086 A JP5255086 A JP 5255086A JP S62211556 A JPS62211556 A JP S62211556A
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- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は血中あるいは尿中のノルメタネフリンを免疫学
的方法により測定する方法およびそれに用いる試薬に関
する。さらに詳しくはノルメタネフリンに対する特異抗
体及び標識剤により標識されている標識オクトパミンを
用いることを特徴とするノルメタネフリンの測定方法及
びそれに用いる測定用試薬に関するものである。
的方法により測定する方法およびそれに用いる試薬に関
する。さらに詳しくはノルメタネフリンに対する特異抗
体及び標識剤により標識されている標識オクトパミンを
用いることを特徴とするノルメタネフリンの測定方法及
びそれに用いる測定用試薬に関するものである。
交感神経および副腎髄質系の細胞は血中からチロシンを
取り込み、ドーパ、ドーパミン、ノルアドレナリン、ア
ドレナリンの順に合成する。ドーパミン、ノルアドレナ
リン、アドレナリンはカテコールアミンと総称され、ヒ
トでは主に脳、交感神経ならびに副腎髄質などに分布し
、ノルアドレナリンは神経刺激伝達物質として、アドレ
ナリンは副腎髄質ホルモンとして重要な役割を演じてい
る。カテコールアミンの測定は主に交感神経・副腎髄質
由来の腫瘍、すなわち褐色細胞腫や交感神経芽細胞腫の
診断、治療効果の判定、さらには高血圧の病因解明に有
用と考えられるが、その分泌量は必ずしも多くはなく、
代謝が速やかで、変動中も大であるため、また、測定法
の問題もあシ、実用的な測定法は確立されていない。す
なわち、螢光測定法、高速液体クロマトグラフィー法、
酵素アイソトープ法あるいはラジオレセプターアッセイ
などが試みられているが、その操作の煩雑さ、感度の低
さなどから実用化には至っていない。
取り込み、ドーパ、ドーパミン、ノルアドレナリン、ア
ドレナリンの順に合成する。ドーパミン、ノルアドレナ
リン、アドレナリンはカテコールアミンと総称され、ヒ
トでは主に脳、交感神経ならびに副腎髄質などに分布し
、ノルアドレナリンは神経刺激伝達物質として、アドレ
ナリンは副腎髄質ホルモンとして重要な役割を演じてい
る。カテコールアミンの測定は主に交感神経・副腎髄質
由来の腫瘍、すなわち褐色細胞腫や交感神経芽細胞腫の
診断、治療効果の判定、さらには高血圧の病因解明に有
用と考えられるが、その分泌量は必ずしも多くはなく、
代謝が速やかで、変動中も大であるため、また、測定法
の問題もあシ、実用的な測定法は確立されていない。す
なわち、螢光測定法、高速液体クロマトグラフィー法、
酵素アイソトープ法あるいはラジオレセプターアッセイ
などが試みられているが、その操作の煩雑さ、感度の低
さなどから実用化には至っていない。
また一般に微量物質の測定法としてラジオイムノアッセ
イなどの免疫学的測定法が繁用され、臨床面においても
広く利用されているが、ノルアドレナリンおよびアドレ
ナリンに対する特異抗体が得られず、これらのカテコー
ルアミンの免疫学的測定法は確立されていない。
イなどの免疫学的測定法が繁用され、臨床面においても
広く利用されているが、ノルアドレナリンおよびアドレ
ナリンに対する特異抗体が得られず、これらのカテコー
ルアミンの免疫学的測定法は確立されていない。
近年、これらカテコールアミンの代謝産物であるノルメ
タネフリン、メタネ7リンを測定することは生体内、特
に血中内でのカテコールアミンの代謝等を知る上に有用
でおると考えられ、ノルメタネフリン、メタネフリンの
611定によシ交感神経・副腎髄質の機能を判定しよう
とする試みがなされている。脳・交感神経、副腎髄質で
生合成、分泌されたノルアドレナリン、アドレナリンは
、神経終末や標的細胞内でカテコール−0−メチル転換
酵素(COMT)によってメチル化さね1.中間代謝産
物であるノルメタネフリン、メタネ7リンとなり、さら
にモノアミン酸化酵素(MAO)による酸化的膜アミン
反応によってバニルマンデル酸になる。血中に分泌され
九ノルアドレナリン、アドレナリンのうち約1%はその
ままの形で、約8%−I)i COMTの作用のみを受
けたノルメタネフリン、メタネフリンの形で、そして残
シの約91%がバニルマンデル酸の形で尿中に排泄され
る。血中、および、尿中のノルメタネフリン、メタネフ
リンの測定法としては比色法、螢光法、ガスクロマトグ
ラフィー・マススペクトロメトリー法、および、高速液
体クロマトグラフィー法などが挙げられるが、いずれの
方法も検体の前処理が煩雑で測定に長時間を要するなど
の問題があシ、臨床応用上広く普及することが困難であ
った。さらに、ラジオイムノアッセイについても報告さ
れているがノルメタネフリン、メタネフリンが酸化剤に
対して不安定でアシ、そのヨウ素による標識が不可能で
あるため標識剤としてトリチウムを用いている。トリチ
ウムによる標識は手技が煩雑であシ、さらにその放射能
量を測定するためにはシンチレーションカウンターによ
らなければならない等の欠点があり、実用的なラジオイ
ムノアッセイとは言い鐵く研究者レベルでの実施に限ら
れている。そのため、臨床的に用いることができる前処
理を必要としない、操作の簡便な特異性、感度に優れた
測定法の開発が望まれていた。
タネフリン、メタネ7リンを測定することは生体内、特
に血中内でのカテコールアミンの代謝等を知る上に有用
でおると考えられ、ノルメタネフリン、メタネフリンの
611定によシ交感神経・副腎髄質の機能を判定しよう
とする試みがなされている。脳・交感神経、副腎髄質で
生合成、分泌されたノルアドレナリン、アドレナリンは
、神経終末や標的細胞内でカテコール−0−メチル転換
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物であるノルメタネフリン、メタネ7リンとなり、さら
にモノアミン酸化酵素(MAO)による酸化的膜アミン
反応によってバニルマンデル酸になる。血中に分泌され
九ノルアドレナリン、アドレナリンのうち約1%はその
ままの形で、約8%−I)i COMTの作用のみを受
けたノルメタネフリン、メタネフリンの形で、そして残
シの約91%がバニルマンデル酸の形で尿中に排泄され
る。血中、および、尿中のノルメタネフリン、メタネフ
リンの測定法としては比色法、螢光法、ガスクロマトグ
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体クロマトグラフィー法などが挙げられるが、いずれの
方法も検体の前処理が煩雑で測定に長時間を要するなど
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った。さらに、ラジオイムノアッセイについても報告さ
れているがノルメタネフリン、メタネフリンが酸化剤に
対して不安定でアシ、そのヨウ素による標識が不可能で
あるため標識剤としてトリチウムを用いている。トリチ
ウムによる標識は手技が煩雑であシ、さらにその放射能
量を測定するためにはシンチレーションカウンターによ
らなければならない等の欠点があり、実用的なラジオイ
ムノアッセイとは言い鐵く研究者レベルでの実施に限ら
れている。そのため、臨床的に用いることができる前処
理を必要としない、操作の簡便な特異性、感度に優れた
測定法の開発が望まれていた。
本発明者等はオクトパミンが抗−ノルメタネフリン抗体
に対して、3〜7−程度の交叉反応性を示すに過ぎない
のに対し、オクトパミンを標識剤により標識して得た標
識オクトパミンは、抗−ノルメタネフリン抗体に対して
ほぼ100チの交叉性を示すという知見を得、本発明を
完成するに至ったものである。
に対して、3〜7−程度の交叉反応性を示すに過ぎない
のに対し、オクトパミンを標識剤により標識して得た標
識オクトパミンは、抗−ノルメタネフリン抗体に対して
ほぼ100チの交叉性を示すという知見を得、本発明を
完成するに至ったものである。
すなわち、本発明は特異性の高い抗−ノルメタネフリン
抗体および標識オクトパミンを用いることにより、血清
、血漿、尿等の中のノルメタネフリンを直接測定するこ
とのできる免疫学的測定方法を提供するものである1、 本発明は従来の測定法のよりな煩雑な前処理を必要とせ
ず、簡便性、多数検体を同時に処理できる点で優れてい
ると共に、%異性、感度の点においても優れている。
抗体および標識オクトパミンを用いることにより、血清
、血漿、尿等の中のノルメタネフリンを直接測定するこ
とのできる免疫学的測定方法を提供するものである1、 本発明は従来の測定法のよりな煩雑な前処理を必要とせ
ず、簡便性、多数検体を同時に処理できる点で優れてい
ると共に、%異性、感度の点においても優れている。
本発明によるノルメタネフリンの測定はノルメタネフリ
ンに対する特異抗体に対して、被検検体中のノルメタネ
フリンと標識オクトパミンとを競合反応させた後、抗−
ノルメタネフリン抗体に結合1〜た標識オクトパミン(
B)と結合していない標識オクトパミン(F)とを適当
な方法で分離(B/F分離)シ、分画の一方または両者
の8!識剤の活性を測定し、あらかじめ被検検体の代わ
りに濃度既知の標準物質で同様にして求めた標準曲線よ
り被検検体中のノルメタネ79ンの量を求めるものであ
る。
ンに対する特異抗体に対して、被検検体中のノルメタネ
フリンと標識オクトパミンとを競合反応させた後、抗−
ノルメタネフリン抗体に結合1〜た標識オクトパミン(
B)と結合していない標識オクトパミン(F)とを適当
な方法で分離(B/F分離)シ、分画の一方または両者
の8!識剤の活性を測定し、あらかじめ被検検体の代わ
りに濃度既知の標準物質で同様にして求めた標準曲線よ
り被検検体中のノルメタネ79ンの量を求めるものであ
る。
ノルメタネフリンに対する特異性の高い抗体は、ノルメ
タネフリンにマンニッヒ反応によシ牛血清アルブミン(
Bovine Serum Albumin : B
S A )を結合させたものを免疫原として用いること
によシ得ることができた。
タネフリンにマンニッヒ反応によシ牛血清アルブミン(
Bovine Serum Albumin : B
S A )を結合させたものを免疫原として用いること
によシ得ることができた。
免疫動物としてはヒト以外の動物、例えば、家兎、山羊
、馬、ニワトリ、羊、ラットなどを用いることができる
。
、馬、ニワトリ、羊、ラットなどを用いることができる
。
標識オクトパミンは通常用いられている既知の方法によ
シ得ることができ、オクトパミン、つ−1シ、式標識剤
が結合したものである。標識剤が3位または5位の一方
だけに結合したもの(モノ−標識型)と、3位および5
位の両方に結合したもの(ジー標識型)とで、抗−ノル
メタネフリン抗体に対する反応性において差は見られな
かったが、標識オクトパミンとしての安定性において、
モノー標識屋が優れているため、標識オクトパミンとし
てモノ−標識型を用いることが望ましい。しかしジー標
識型、あるいは、モノー標a型とジー標識屋との混合物
を標識オクトパミンとして用いることもできる。標識剤
としては放射性同位元素、酵素、螢光物質あるいは発光
物質など標識剤として通常用いられているものを使用す
ることができる。
シ得ることができ、オクトパミン、つ−1シ、式標識剤
が結合したものである。標識剤が3位または5位の一方
だけに結合したもの(モノ−標識型)と、3位および5
位の両方に結合したもの(ジー標識型)とで、抗−ノル
メタネフリン抗体に対する反応性において差は見られな
かったが、標識オクトパミンとしての安定性において、
モノー標識屋が優れているため、標識オクトパミンとし
てモノ−標識型を用いることが望ましい。しかしジー標
識型、あるいは、モノー標a型とジー標識屋との混合物
を標識オクトパミンとして用いることもできる。標識剤
としては放射性同位元素、酵素、螢光物質あるいは発光
物質など標識剤として通常用いられているものを使用す
ることができる。
B/F分離は、PEG法、二抗体法、固相法など既知の
方法によシ行うことができる。
方法によシ行うことができる。
被検検体としては、血清、血漿、尿などを用いることが
できる。
できる。
尿中ノルメタネフリンの測定は、−日蓄尿したものを被
検検体として用いることが望ましいが、クレアチニンを
ノルメタネフリンと同時に測定することによシ、一時尿
からノルメタネフリンの一日の排泄量を算出することも
可能である。
検検体として用いることが望ましいが、クレアチニンを
ノルメタネフリンと同時に測定することによシ、一時尿
からノルメタネフリンの一日の排泄量を算出することも
可能である。
本発明による尿中あるいは血中のノルメタネフリンの測
定は、褐色細胞腫の診断、さらには、高血圧の病因解明
に有用である。
定は、褐色細胞腫の診断、さらには、高血圧の病因解明
に有用である。
次に実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明
の本質は標識剤により標識したオクトパミンを用いる点
にあ石のであって、以下の実施例によシ限定されるもの
ではない。
の本質は標識剤により標識したオクトパミンを用いる点
にあ石のであって、以下の実施例によシ限定されるもの
ではない。
実施例1
ノルメタネフリンに対する抗血清の作製1−(1)
ノルメタネフリンへの牛血清アルブミン(BSA)の結
合 ノルメタネフリン溶液(5y/mj)2−に、BSA(
171N!/d ) 3−を加え攪拌した。さらに、3
M酢酸ナトリウム2rnt及び7.5%ホルマリン21
1Itを加え、3N塩酸によF)pHを6〜6.5に調
整した後、遮光しながら約20時間攪拌した。反応液を
精製水に対して十分透析し、内液をノルメタネフリンー
BSA結合物として免疫に使用した。
ノルメタネフリンへの牛血清アルブミン(BSA)の結
合 ノルメタネフリン溶液(5y/mj)2−に、BSA(
171N!/d ) 3−を加え攪拌した。さらに、3
M酢酸ナトリウム2rnt及び7.5%ホルマリン21
1Itを加え、3N塩酸によF)pHを6〜6.5に調
整した後、遮光しながら約20時間攪拌した。反応液を
精製水に対して十分透析し、内液をノルメタネフリンー
BSA結合物として免疫に使用した。
1−(2) ノルメタネフリンーBSA結合物による
家兎の免疫 ノルメタネフリンーBSA結合物溶液(ノルメタネフリ
ン1111!7相当)2mlを生理食塩水2−と混合し
た後、フロイント・コンプリート・アジュバント4−を
加えエマルジョンとした。このエマルジョンを2週間間
隔て家兎に5回注射した。最後の注射の2週間後に全採
血した抗血清を得た。
家兎の免疫 ノルメタネフリンーBSA結合物溶液(ノルメタネフリ
ン1111!7相当)2mlを生理食塩水2−と混合し
た後、フロイント・コンプリート・アジュバント4−を
加えエマルジョンとした。このエマルジョンを2週間間
隔て家兎に5回注射した。最後の注射の2週間後に全採
血した抗血清を得た。
実施例2
125■によるオクトパミンの標識
的1mC1のNa1251を反応用試験管に採取し、0
.5 Mリン酸緩衝液25μtとオクトパミン(1η/
ml ) 10μtを加え、pHが7〜8であることを
確認した後、クロラミンT (1’Q/at ) 25
μtをさらに加えて反応を行った。
.5 Mリン酸緩衝液25μtとオクトパミン(1η/
ml ) 10μtを加え、pHが7〜8であることを
確認した後、クロラミンT (1’Q/at ) 25
μtをさらに加えて反応を行った。
反応後ピロ亜硫酸す) IJウム溶液(1w9/me)
100μtを加え、反応を停止させた。キャリアとして
ヨウ化カリウムを加えた後、1N!Rを行った。
100μtを加え、反応を停止させた。キャリアとして
ヨウ化カリウムを加えた後、1N!Rを行った。
M製は、あらかじめ!W製水で平衡化した陽イオン交換
体CM−セルロースに反応液を導入し、精製水で未反応
のヨウ素(125工)を溶出させた。その後0. I
N塩酸によりヨウ化オクトパミン(125工)を溶出さ
せた。
体CM−セルロースに反応液を導入し、精製水で未反応
のヨウ素(125工)を溶出させた。その後0. I
N塩酸によりヨウ化オクトパミン(125工)を溶出さ
せた。
実施例3
ペルオキシダーゼ(POD)によるオクトハミンの標識
オクトパミン漕液(5v/ゴ)2ゴにPOD(15■/
mt):31Wtを加え攪拌を行い、さらに3M酢酸ナ
トリウム2−および7.5%ホルマリン2dを加え、3
N塩酸によりpHを6.0〜6,5に調整した後、遮光
しながら約20時間攪拌した。反応液を精製水に対して
十分透析し、内液をセファデックスG−25でゲル濾過
し、ノルメタネフリンーPOD結合物として希釈後、エ
ンザイムノムノアツセイ用のトレーサとして使用した。
mt):31Wtを加え攪拌を行い、さらに3M酢酸ナ
トリウム2−および7.5%ホルマリン2dを加え、3
N塩酸によりpHを6.0〜6,5に調整した後、遮光
しながら約20時間攪拌した。反応液を精製水に対して
十分透析し、内液をセファデックスG−25でゲル濾過
し、ノルメタネフリンーPOD結合物として希釈後、エ
ンザイムノムノアツセイ用のトレーサとして使用した。
゛実施例4
抗−家兎IgG抗血抗血束2抗体)の作製家兎r−グロ
ブリン11119を生理食塩水2mlに溶かし70イン
ド・コンプリート・アジュバント2mlを加えエマルジ
ョンとした。このエマルジョンを2週間間隔でヤギに5
回注射した。最後の注射の2週間後に全採血し抗血清を
得た。
ブリン11119を生理食塩水2mlに溶かし70イン
ド・コンプリート・アジュバント2mlを加えエマルジ
ョンとした。このエマルジョンを2週間間隔でヤギに5
回注射した。最後の注射の2週間後に全採血し抗血清を
得た。
実施例5
ラジオイムノアッセイ(二抗体法)による尿中ノルメタ
ネフリンの測定 濃度既知のノルメタネフリン標準液1007!tまたは
酸性蓄尿を加水分解後中和した尿検体100μtに12
5I標識オクトパミン100μを及び抗−ノルメタネフ
リン抗体100μtを加え2−8℃で1時間インキュベ
ーション後、抗−家兎1gG抗血清100μtを加え、
2−8℃で1時間インキュベーションした。インキュベ
ーション終了後2−8℃で300Orpm、30分間遠
心分離した後、デカンテーションし、沈殿の放射能を測
定した。
ネフリンの測定 濃度既知のノルメタネフリン標準液1007!tまたは
酸性蓄尿を加水分解後中和した尿検体100μtに12
5I標識オクトパミン100μを及び抗−ノルメタネフ
リン抗体100μtを加え2−8℃で1時間インキュベ
ーション後、抗−家兎1gG抗血清100μtを加え、
2−8℃で1時間インキュベーションした。インキュベ
ーション終了後2−8℃で300Orpm、30分間遠
心分離した後、デカンテーションし、沈殿の放射能を測
定した。
実施例6
ラジオイムノアッセイ(二抗体法)による血中ノルメタ
ネフリンの測定 濃度既知のフルメタネ7リン標準液100μmXまたは
血清100μtに125■標識オクトパミン100μt
1抗−ノルメタネフリン抗体100μを及び抗−家兎I
gG抗血清100μtを加え、2−8℃で4時間インキ
ュベーションシタ。インキュベーション終了後2−8℃
で300゜rpm、jO分間遠心分離した後、デカンテ
ーションし、沈殿の放射能を測定した。
ネフリンの測定 濃度既知のフルメタネ7リン標準液100μmXまたは
血清100μtに125■標識オクトパミン100μt
1抗−ノルメタネフリン抗体100μを及び抗−家兎I
gG抗血清100μtを加え、2−8℃で4時間インキ
ュベーションシタ。インキュベーション終了後2−8℃
で300゜rpm、jO分間遠心分離した後、デカンテ
ーションし、沈殿の放射能を測定した。
笑施例7
フルオレツセによるオクトハミンの標識オクトパミン溶
液(5■/ml ) 2 mlに、フルオレツセインア
ミン(0,5’1177m1 ) 3 mlを加え攪拌
した。さらに、3M酢酸ナトリウム2−および7.5%
ホルマリン2m1t加え、3N塩酸によシpHを6.0
〜6.5に調整した後、遮光しながら約40時間攪拌し
た。反応液を梢裂水に対して十分透析し、内液をセファ
デックスG−25でゲル濾過し、フルオレツセインーオ
クトパミン結合物として適当な濃度に希釈後、螢光イム
ノアッセイあるいは螢光偏光イムノアッセイ用のトレー
サとして使用した。
液(5■/ml ) 2 mlに、フルオレツセインア
ミン(0,5’1177m1 ) 3 mlを加え攪拌
した。さらに、3M酢酸ナトリウム2−および7.5%
ホルマリン2m1t加え、3N塩酸によシpHを6.0
〜6.5に調整した後、遮光しながら約40時間攪拌し
た。反応液を梢裂水に対して十分透析し、内液をセファ
デックスG−25でゲル濾過し、フルオレツセインーオ
クトパミン結合物として適当な濃度に希釈後、螢光イム
ノアッセイあるいは螢光偏光イムノアッセイ用のトレー
サとして使用した。
第4図は濃度既知のノルメタネ79ン標準液を用いて作
成した標準曲線の1例を示したものである。 第2図は3種類のノルメタネフリン含有血漿をそれぞれ
倍々希釈して求めた希釈曲線を示したものである。 第3図は本発明の方法により測定した尿中ノルメタネフ
リン濃度を示したものである。 第4図は本発明の方法により測定した血中ノルメタネフ
リン濃度を示したものである。
成した標準曲線の1例を示したものである。 第2図は3種類のノルメタネフリン含有血漿をそれぞれ
倍々希釈して求めた希釈曲線を示したものである。 第3図は本発明の方法により測定した尿中ノルメタネフ
リン濃度を示したものである。 第4図は本発明の方法により測定した血中ノルメタネフ
リン濃度を示したものである。
Claims (7)
- (1)被検試料中のノルメタネフリンを測定する方法に
おいて、標識剤により標識されている標識オクトパミン
及び抗−ノルメタネフリン抗体を用いることを特徴とす
るノルメタネフリンの免疫学的測定方法。 - (2)標識剤が放射性同位元素、酵素、螢光物質あるい
は発光物質である特許請求の範囲第1項に記載の方法。 - (3)放射性同位元素が^1^2^5Iである特許請求
の範囲第2項に記載の方法。 - (4)被検試料が血清、血漿、又は尿である特許請求の
範囲第1項に記載の方法。 - (5)標識剤により標識されている標識オクトパミンお
よび抗−ノルメタネフリン抗体を含むことを特徴とする
ノルメタネフリンの免疫学的測定用試薬。 - (6)標識剤が放射性同位元素、酵素、螢光物質あるい
は発光物質である特許請求の範囲第5項に記載の試薬。 - (7)放射性同位元素が^1^2^5Iである特許請求
の範囲第6項に記載の試薬。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP5255086A JPS62211556A (ja) | 1986-03-12 | 1986-03-12 | ノルメタネフリンの免疫学的測定方法およびそれに用いる試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP5255086A JPS62211556A (ja) | 1986-03-12 | 1986-03-12 | ノルメタネフリンの免疫学的測定方法およびそれに用いる試薬 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS62211556A true JPS62211556A (ja) | 1987-09-17 |
Family
ID=12917907
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP5255086A Pending JPS62211556A (ja) | 1986-03-12 | 1986-03-12 | ノルメタネフリンの免疫学的測定方法およびそれに用いる試薬 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS62211556A (ja) |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5326320A (en) * | 1976-08-25 | 1978-03-11 | Hoffmann La Roche | Analysis of cathecolamine |
-
1986
- 1986-03-12 JP JP5255086A patent/JPS62211556A/ja active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5326320A (en) * | 1976-08-25 | 1978-03-11 | Hoffmann La Roche | Analysis of cathecolamine |
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