JPS59198989A - ペプチド性抗生物質ｋ５８２ｍの濃縮精製法 - Google Patents
ペプチド性抗生物質ｋ５８２ｍの濃縮精製法Info
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- JPS59198989A JPS59198989A JP7432783A JP7432783A JPS59198989A JP S59198989 A JPS59198989 A JP S59198989A JP 7432783 A JP7432783 A JP 7432783A JP 7432783 A JP7432783 A JP 7432783A JP S59198989 A JPS59198989 A JP S59198989A
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Landscapes
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- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明はペプチド性抗生物質に５８２Ｍの濃縮精製法に
関する。
関する。
ペプチド性抗生物質に５８２Ｍは、メタリジウム・アニ
ソプリエ・（メツシュ）・ソロクΦバール・アニソブリ
エ５８２ Ｍ （Ｍｅｔａｒ−ｈｉｇｊ、ｕｍ ａｎｉ
ｓｏｐｌｉａｅ（Ｍｅｔｓｃｂ） ８ｏｒｏｋ、 ｖ
ａｒ。
ソプリエ・（メツシュ）・ソロクΦバール・アニソブリ
エ５８２ Ｍ （Ｍｅｔａｒ−ｈｉｇｊ、ｕｍ ａｎｉ
ｓｏｐｌｉａｅ（Ｍｅｔｓｃｂ） ８ｏｒｏｋ、 ｖ
ａｒ。
ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ ５８２Ｍ）株（微工研菌寄第４
２１７号）を培養して得られるもので、各種真菌の発育
阻止、ウィルス感染抑制及び癌の発育阻止作用を有する
ことが知られている（特公昭５７−４４６６４号）。
２１７号）を培養して得られるもので、各種真菌の発育
阻止、ウィルス感染抑制及び癌の発育阻止作用を有する
ことが知られている（特公昭５７−４４６６４号）。
また、当該抗生物質に５８２Ｍは構成成分を異にする２
つの抗生物質に５８２Ｍ−Ａ及びに５８２Ｍ−Ｂの混合
物であり、これらは、例えばポリアミドゲル、ＣＭ−セ
ファデックス等を用いるクロマトグラフィー（％公昭５
７−４４６６４号）、あるいは両者をアリールアルデヒ
ドのシップ塩基とし、その溶解度の差を利用する方法（
特開昭５８−７５０９８号）Ｋよって分離することがで
きる。
つの抗生物質に５８２Ｍ−Ａ及びに５８２Ｍ−Ｂの混合
物であり、これらは、例えばポリアミドゲル、ＣＭ−セ
ファデックス等を用いるクロマトグラフィー（％公昭５
７−４４６６４号）、あるいは両者をアリールアルデヒ
ドのシップ塩基とし、その溶解度の差を利用する方法（
特開昭５８−７５０９８号）Ｋよって分離することがで
きる。
従来、５８２Ｍ株の培養液から抗生物質に５８２Ｍを単
離する方法としては、当該培養液をハイフロス−パーセ
ル等で炉遇し、そのろ液をイオン交換樹脂工ＲＣ−５０
を用いるカラムクロマトグラフィーに付し、その溶出液
を減圧濃縮した後、炭末によって脱色し、更にメタノー
ル抽出を繰ゆ返して脱塩を行う方法がとられていた（特
公昭５６−７５０９８号実施例 しかし、この方法は、脱塩をメタノール抽出を何回も繰
り返すことによって行っているが、それでも脱塩効率は
あまり良くなく、しかも操作が煩雑であると共に操作中
における １− 目的物の損失、すなわち収率の低下を免れなかった。
離する方法としては、当該培養液をハイフロス−パーセ
ル等で炉遇し、そのろ液をイオン交換樹脂工ＲＣ−５０
を用いるカラムクロマトグラフィーに付し、その溶出液
を減圧濃縮した後、炭末によって脱色し、更にメタノー
ル抽出を繰ゆ返して脱塩を行う方法がとられていた（特
公昭５６−７５０９８号実施例 しかし、この方法は、脱塩をメタノール抽出を何回も繰
り返すことによって行っているが、それでも脱塩効率は
あまり良くなく、しかも操作が煩雑であると共に操作中
における １− 目的物の損失、すなわち収率の低下を免れなかった。
そこで、本発明者は、５８２Ｍ株の培養液から抗生物質
に５Ｂ２Ｍを有利に単離する方法について鋭意研究を行
った結果、抗生物質に５８２Ｍは食塩濃度０．５Ｍ以上
においてイオン交換基をもたないポーラスポリマー樹脂
に吸着すること、そして斯くして吸着されたに５８２Ｍ
は水によって溶出され、これを利用すると濃縮、脱塩を
一挙に効率よく行うことができることを見出し、本発明
を完成した。
に５Ｂ２Ｍを有利に単離する方法について鋭意研究を行
った結果、抗生物質に５８２Ｍは食塩濃度０．５Ｍ以上
においてイオン交換基をもたないポーラスポリマー樹脂
に吸着すること、そして斯くして吸着されたに５８２Ｍ
は水によって溶出され、これを利用すると濃縮、脱塩を
一挙に効率よく行うことができることを見出し、本発明
を完成した。
従って、本発明は、ペプチド性抗生物質Ｘ５８２Ｍを含
む溶液を食塩濃度０．５Ｍ以上になるように調整し、こ
れをイオン交換基をもたないポーラスポリマー樹脂に接
触せしめて４− ペプチド性抗生物質に５８２Ｍを吸着させ、次いで水で
溶出することを特徴とするペプチド性抗生物質に５８２
Ｍの濃縮精製法である。
む溶液を食塩濃度０．５Ｍ以上になるように調整し、こ
れをイオン交換基をもたないポーラスポリマー樹脂に接
触せしめて４− ペプチド性抗生物質に５８２Ｍを吸着させ、次いで水で
溶出することを特徴とするペプチド性抗生物質に５８２
Ｍの濃縮精製法である。
本発明において、ペプチド性抗生物質に５８２Ｍを含む
溶液としては、５８２Ｍ株の培養液並びに各精製段階の
何れのものをも使用できるが、就中特に培養液をアンバ
ーライトエＲＯ−５０を用いるカラムクロマトグラフィ
ーに付して得られる溶出液を使用するのが好ましい。
溶液としては、５８２Ｍ株の培養液並びに各精製段階の
何れのものをも使用できるが、就中特に培養液をアンバ
ーライトエＲＯ−５０を用いるカラムクロマトグラフィ
ーに付して得られる溶出液を使用するのが好ましい。
ポーラスポリマー樹脂としては、その構造中トイオン交
換基をもたないものが使用され、例えばダイヤイオンＨ
Ｐ Ｉ Ｑ〜ｓｏ（三菱化成社製商品名）、ＸＡＤＩ〜
７（ローム・アンド・ハース社製商品名）等を挙げるこ
とができる。
換基をもたないものが使用され、例えばダイヤイオンＨ
Ｐ Ｉ Ｑ〜ｓｏ（三菱化成社製商品名）、ＸＡＤＩ〜
７（ローム・アンド・ハース社製商品名）等を挙げるこ
とができる。
本発明方法を実施するには、まず抗生物質に５８２Ｍを
含有する溶液に食塩を加えて塩濃度が０．５Ｍ以上にな
るように調整する。食塩濃度が０．５ Ｍより少ない場
合には該樹脂への抗生物質に５８２Ｍの吸着が不充分で
あり、例えば食塩濃度０．２５ Ｍでは９０％、０．１
Ｍでは３０％であるが、０．５Ｍではその吸着率は１０
０チと寿る。一般には食塩濃度を０．５〜ＩＭとするの
が好ましい。
含有する溶液に食塩を加えて塩濃度が０．５Ｍ以上にな
るように調整する。食塩濃度が０．５ Ｍより少ない場
合には該樹脂への抗生物質に５８２Ｍの吸着が不充分で
あり、例えば食塩濃度０．２５ Ｍでは９０％、０．１
Ｍでは３０％であるが、０．５Ｍではその吸着率は１０
０チと寿る。一般には食塩濃度を０．５〜ＩＭとするの
が好ましい。
次いで、食塩濃度を調整したに５８２Ｍ含有溶液を、上
記食塩濃度の水溶液で予め処理したポーラスポリマー樹
脂と接触させてに５８２Ｍを吸着させる。これを水で溶
出すれば、最初に食塩が溶出し、次いでに５８２Ｍが溶
出される。斯くするとき、Ｋ５８２Ｍは約１１５〜１／
６に濃縮されて採取され、しかも塩濃度は極めて低く、
かつ脱色も行われて極めて効率よく精製することができ
る。
記食塩濃度の水溶液で予め処理したポーラスポリマー樹
脂と接触させてに５８２Ｍを吸着させる。これを水で溶
出すれば、最初に食塩が溶出し、次いでに５８２Ｍが溶
出される。斯くするとき、Ｋ５８２Ｍは約１１５〜１／
６に濃縮されて採取され、しかも塩濃度は極めて低く、
かつ脱色も行われて極めて効率よく精製することができ
る。
更に使用したポーラスポリマー樹脂はｐＨを変えた水で
洗浄すれば伺回でも繰り返して使用できる。
洗浄すれば伺回でも繰り返して使用できる。
このように、本発明方法は極めて簡単な操作で、濃縮、
脱塩、脱色を一挙に行って高純度の抗生物質に５８２Ｍ
を得る仁とができる優れた発明である。
脱塩、脱色を一挙に行って高純度の抗生物質に５８２Ｍ
を得る仁とができる優れた発明である。
次に実施例を挙げて説明する。
実施例１゜
（＋）５８２Ｍ株の培養液（特公昭５７−４４６６４号
の実施例１で得たもの）５！を塩酸でｐＨ３，０とし、
ｐ過により菌体を除いたろ液を、１Ｒ−カセイソーダに
てｐＨ６，４修正し、アンバー２イトエＲｃ−５０（ｎ
ａ型）１００Ｎに吸着させた。Ｑ、５１１−７７モ＝７
水ＩＱＱｍ７！、水ｔｏｏｏｍｚで樹脂を洗った後、吸
着したに５８２Ｍを９Ｎ−１’ｌＯＪで溶出しｆ、 Ｎ
−カセイソーダにてｐＨ４，０とじ３００ゴの溶出液を
得た。
の実施例１で得たもの）５！を塩酸でｐＨ３，０とし、
ｐ過により菌体を除いたろ液を、１Ｒ−カセイソーダに
てｐＨ６，４修正し、アンバー２イトエＲｃ−５０（ｎ
ａ型）１００Ｎに吸着させた。Ｑ、５１１−７７モ＝７
水ＩＱＱｍ７！、水ｔｏｏｏｍｚで樹脂を洗った後、吸
着したに５８２Ｍを９Ｎ−１’ｌＯＪで溶出しｆ、 Ｎ
−カセイソーダにてｐＨ４，０とじ３００ゴの溶出液を
得た。
（ｉｉ）上記（＋）テ得た溶出液３ＱＱｍ／に０．５Ｍ
ＩＣ１るようＶＣＮ ａ ＯＪを加え、予め０．５ Ｍ
−Ｎａ０１！で処理したダイヤイオンＨＰ２０．１０
０１１Ｌｔを充填したカラムに通し、吸着させた。次い
で水で溶出し、始めに溶出する１１ａｔ、ｇ分画を除き
、抗生物質に５８２Ｍを含む分画６０ゴを得た。
ＩＣ１るようＶＣＮ ａ ＯＪを加え、予め０．５ Ｍ
−Ｎａ０１！で処理したダイヤイオンＨＰ２０．１０
０１１Ｌｔを充填したカラムに通し、吸着させた。次い
で水で溶出し、始めに溶出する１１ａｔ、ｇ分画を除き
、抗生物質に５８２Ｍを含む分画６０ゴを得た。
この分画を凍結乾燥して、白色粉末の抗生物質に５８２
Ｍ１．７ｆを得た。このものの強熱残分は０．３２−で
あった。
Ｍ１．７ｆを得た。このものの強熱残分は０．３２−で
あった。
実施例２゜
（＋）５８２Ｍ株をタンク培養して得た培養液１００１
を実施例１と同様に処理して溶出液５．４１を得た。
を実施例１と同様に処理して溶出液５．４１を得た。
（１１） この溶ｊｔ［５，４ＪにＮｅｃｏｌ ９０
ｆを加えて丁で尾含まれているＮａＣ７１を合せて、
Ｎａ（Ｊ含量０．５Ｍ以上に調整した。ダイヤイオン）
ＩＰ２０．１！をカラムに充填し、０．５ Ｍ −Ｎａ
Ｏ６を流し、次いで上で調製した溶出液を流して吸着さ
せた。このときの未吸着の抗生物質に５８２Ｍ活性は０
であった。次いで、純水を流して溶出を行い、最初に溶
出されるＮａ０Ａ’分ｉ１ＪＩＩ８００ｍＪを除き、Ｋ
５８２Ｍ活性分画９００１１１７ｆ：、得た。これによ
りに５８２Ｍ分画は、５．４１から９００１と１／６に
濃縮さ ６ − れた。
ｆを加えて丁で尾含まれているＮａＣ７１を合せて、
Ｎａ（Ｊ含量０．５Ｍ以上に調整した。ダイヤイオン）
ＩＰ２０．１！をカラムに充填し、０．５ Ｍ −Ｎａ
Ｏ６を流し、次いで上で調製した溶出液を流して吸着さ
せた。このときの未吸着の抗生物質に５８２Ｍ活性は０
であった。次いで、純水を流して溶出を行い、最初に溶
出されるＮａ０Ａ’分ｉ１ＪＩＩ８００ｍＪを除き、Ｋ
５８２Ｍ活性分画９００１１１７ｆ：、得た。これによ
りに５８２Ｍ分画は、５．４１から９００１と１／６に
濃縮さ ６ − れた。
（０１） 別にダイヤイオンＨＦ２ Ｑ、５００−を
充填したカラムにメタノール５００ｄ、次いでカセイソ
ーダでｌ）Ｈ７，５とした水を流し、更にこれに上で得
九に５８２Ｍ分画を流し、その通過液をＩＮ −Ｈａｔ
ｔでｐＨ４，９として比色足置シタとコロ、０Ｄａｔａ
＝０．０６６からＯＤ ４９６ ＝Ｑ、Ｑ ２０に脱
色された。
充填したカラムにメタノール５００ｄ、次いでカセイソ
ーダでｌ）Ｈ７，５とした水を流し、更にこれに上で得
九に５８２Ｍ分画を流し、その通過液をＩＮ −Ｈａｔ
ｔでｐＨ４，９として比色足置シタとコロ、０Ｄａｔａ
＝０．０６６からＯＤ ４９６ ＝Ｑ、Ｑ ２０に脱
色された。
（助 上記（１のの通過液（塩酸塩）をアンバー２イト
エＲＡ （Ｓｏ、型）２ｏｏｙのカラムを通して硫酸塩
とし、凍結乾燥して白色粉末の抗生物質に５８２Ｍ３５
．５Ｆを得た。このものの強熱残分け０．４３−であっ
た。
エＲＡ （Ｓｏ、型）２ｏｏｙのカラムを通して硫酸塩
とし、凍結乾燥して白色粉末の抗生物質に５８２Ｍ３５
．５Ｆを得た。このものの強熱残分け０．４３−であっ
た。
以上
Claims (1)
- １、 ペプチド性抗生物質に５８２Ｍを含む溶液を食塩
濃度０．５Ｍ以上になるように調整し、これをイオン交
換基をもたないポーラスポリマー樹脂に接着せしめてペ
プチド性抗生物質に５８２Ｍを吸着させ、次いで水で溶
出することを特徴とするペプチド性抗生物質に５８２Ｍ
の濃縮精製法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7432783A JPS59198989A (ja) | 1983-04-27 | 1983-04-27 | ペプチド性抗生物質ｋ５８２ｍの濃縮精製法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7432783A JPS59198989A (ja) | 1983-04-27 | 1983-04-27 | ペプチド性抗生物質ｋ５８２ｍの濃縮精製法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59198989A true JPS59198989A (ja) | 1984-11-10 |
| JPH0342079B2 JPH0342079B2 (ja) | 1991-06-26 |
Family
ID=13543899
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7432783A Granted JPS59198989A (ja) | 1983-04-27 | 1983-04-27 | ペプチド性抗生物質ｋ５８２ｍの濃縮精製法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59198989A (ja) |
-
1983
- 1983-04-27 JP JP7432783A patent/JPS59198989A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0342079B2 (ja) | 1991-06-26 |
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