JPS59169486A - 薬用にんじん組織培養物の培養法 - Google Patents

薬用にんじん組織培養物の培養法

Info

Publication number
JPS59169486A
JPS59169486A JP58043725A JP4372583A JPS59169486A JP S59169486 A JPS59169486 A JP S59169486A JP 58043725 A JP58043725 A JP 58043725A JP 4372583 A JP4372583 A JP 4372583A JP S59169486 A JPS59169486 A JP S59169486A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
tissue culture
medium
sucrose
medicinal
culture
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP58043725A
Other languages
English (en)
Inventor
Yoshinori Miyamoto
宮本 芳則
Yoshie Ishida
石田 義枝
Hirohiko Oda
織田 裕比古
Keiichi Ushiyama
敬一 牛山
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nitto Denko Corp
Original Assignee
Nitto Electric Industrial Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nitto Electric Industrial Co Ltd filed Critical Nitto Electric Industrial Co Ltd
Priority to JP58043725A priority Critical patent/JPS59169486A/ja
Publication of JPS59169486A publication Critical patent/JPS59169486A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 技術分野: 本発明は、薬用にんじん(Panax ginseng
 C−AoMeyer)組織培養物の培養法、特に、古
米より有用生薬として珍重されている薬用にんじん植物
の生組織の一部を組織培養して得られる組織培養1勿を
独特の改良培地で培養することにより天然薬用にんじん
と同じ粗サポニンや粗すポゲニンなどの薬効生成分を多
量に含有する薬用にんじん組織培養物を高率で生産する
方法に関する。
従来技術: 薬用にんじん例えばオタネにんじん、チクセツにんじん
、アメリカにんじん、三七にんじんなどの根は有用漢方
薬として珍重され現在でも広く利用されている。薬効と
しては9強壮、長生、鎮静。
興奮、利尿作用などが明らかにされている。植物として
の薬用にんじんから傳られる生薬の薬効生成分は、サポ
ニンとサポゲニンである。薬用にんじんから抽出される
サポニンは多数の成分群Ro 。
Ra、 Rb、 Rc、 Rd、 k<e、 Rf、 
Rg gよひi(hを含むが薬効の中)bをなすものは
RbとRgである。Rhは鎮静作用を有し、 lLgは
興奮作用を有するといわれている。現在、野生の薬用に
んじんはほとんど存在せす、栽培が行われている。栽培
は大変むすかしく夏季冷涼な高地で排水のよい土地を用
い日覆その他特別な配慮を8賛とする。いったん栽培す
ると20〜50年は同じ湯肋で連作不能であり、その上
、収穫までに4〜7年かかる。この様な理由により非常
に高側jなものになっている。
薬用にんじん組織培養物を工業的に組織培養するには、
できるだけ単純な組成の培地を用いて冒収量を得る方法
が望ましい。植物組織培養に2いて組織培養物の生長速
度を上げかつ組織培養物の収量を向上させるためには、
従来から例えはMS培地(Murasbige and
 Skoog氏培地)、VVhice氏培地。
Gantherec氏培地、 −rulecke氏培地
、 More1氏培地。
Linsmaier=Skoog氏培地、 Hilde
brandt氏培地などの通常の植物組織培養用基本培
地が用いられ、これにカゼイン分解物、大豆粉、コーン
ステイープリカー、さらにはビタミン類を添加する方法
が用いられる。し71h L 、これらの方法は、従来
から用いられている上記基本培地の培地組成を複雑化し
・あるいはせっかく選別した薬用にんじん組織培養物の
性質を変装し薬効成分の生産を抑制することにもなりか
ねない。また、栄養源を単に量的に添加することは、微
生物の培養では有効であっても植物組織の培養では生長
阻害を引きおこしかねない0 発明の目的: 本発明の目的は、比較的星純なa成の培地を用いて尚収
量で薬用にんじん組織培養物を培養する培養法を提供す
ることにある。本発明の他の目的は、天然楽用にんじん
と同じ薬効成分の粗サポニンや粗すボゲニンを多量含有
する薬用にんじん組織培養物の培養法を提供することに
ある。
発明の要旨: 不発明は、植物生長にla、g phaseがあるのは
従来から培地の炭素源として用いられているシュクロー
スの分解に時間かかかるためであり初期生長を速めるた
めにはシュクロースの分解生成物の1っであるグルコー
スを当初刀・ら添加しておけばよい:そして、クルコー
スはタバコ、ニチニチソウノヨうな植物の生長に阻害的
に作用するとの従来の常識に反し薬用にんじんに対して
は炭素源として、億めて有効であるなどの本弁明者の新
しい知見、さらにはモ層用にんじんの絹織培#にはクル
コースとシュクロースとの量的バシンスも重要であると
の本発明者の新しい知見に基づいて完成された。
本発明の薬用にんじん組織培養物の培養法は、薬用にん
じんの生組織から得られる組織培養物を通常のMS培地
(シュクロース含有量:1〜3mR%)にグルコースを
加えてなる培地で培養するものである。このMS培地に
クルコースが約0.2〜約0.8東量係、好ましくは約
0.4〜約0.6市量係の範囲で加えられる。また、培
養開始時の上記MS培地の炭素源をクルコース約0.2
〜約0.8 N量係そしてシュクロース約1.0〜約3
.0:i%とし、約10〜約20日の培養ののちシュク
ロース約1〜約35市量係の範囲で補光して培養を研げ
るものである。
このことにより上d己目的が遠戚される。
実施例: 以下に本発明を実施例に基ついて詳述する。
実施例 炭素源をクルコース0〜0.8q量係およびシュクロー
ス1〜3 j4r量係に修正したMS培地150771
j?’l: 300ytliのエルレンマイヤーフラス
コに入几高圧滅菌した。寒天0.9%を宮むM5固形培
地にあらかじめ培養して方いた薬用にんじん組織培養物
8〜10gを上記修正MS培地に接種し毎分90ストロ
ークの往機伽とう磯にて250で2週間振とう培養した
。傅られた組織培養物の乾燥重電(50℃の温1侃乾保
機により恒市社になるまで乾燥して得た車量)を測定し
て俣た結果を第1図に示す。シュクロース3重量係では
クルコースの添加は組織培養物の生長にほとんど影響が
、+1)われないがシュクロース1〜2市量係ではグル
コース約0.2〜約0、8 Nl目、符にシュクロース
2市量係でクルコース約0,4〜ぞJo、6市量係の添
加で初期生長が促進されることが第1ヌ1からBgめら
れる。
次にグルコースを0.5M量係に固定し、シュクロース
濃度を1.0〜3.5M量係にわたって変化させた場合
の培養2週間後の薬用にんじん組織培養物の収量を調べ
た。その結果を第2図に示す。第2図は2週間の培養で
はシュクロース濃度は2車盾係のとき組織培養物収量が
最も高いことを示している。単純にMS培地のシュクロ
ース含量を3M量係に代えて4N量係以上にしても、第
3図から明らかなように9M癒培養物の生長がかえ−で
抑制される。これらの結果は、結局、グルコースとシュ
クロースとの適当な量的バランスが生長促進効果をもた
らすのであって、単に炭素源を増加すれは生長促進され
るわけではないことを示している。
このグルコース添加による生長促進効果は2週間という
培養初期だけに認められるのみならす。
第4図に示すように、4週間の培養朝間全体を通じて側
められた。第4図に示すように、6週間後の乾燥M量は
4週間培養後の乾燥重量より減少した。シュクロース濃
度を最初から3 N N %含有するMS培地に比較し
、グルコース0.5 N 量% 2よひシュクロース2
油量チに修正したMS培地を用いることにより、4週間
培養後の薬用にんじん組織培養物の収量は乾燥重量で約
40係も向上した。
実施例2 培地、培地量、接種組織培養物量およびその他の培養条
件を実施例1と同一にした。そして、シュクロースI 
M ift %とグルコース0.5N厳チおよびシュク
ロー72車盾係とグルコース0.5Niチとを含む修正
MS培地に、培養14日1に4重量係以下のシュクロー
スを補光し培養を継続した。培養4週間後には、第5図
に示すように、いづれの培地についても補充したシュク
ロース濃度が1〜3.5重量係、特に2〜3N量係に2
いて薬用ニンジン組織培養物の乾燥重量は実施例1の場
合よりさらに向上した。乾燥重量は第4図に示したシュ
クロース3N M % M S培地の場合の1.9倍、
シュクロースを補充しない場合の1.4倍であった。
実施例3 培地、培地量、接種組織培養物量およびその(lilの
培養条件を実施例1と同様にして、シュクロース2車盾
係と3市扉係の補充時期を検討した。その結果を第6ヌ
1に示す。第6図に示すように、培用開始後約10日〜
約20日目の+rn光に効果が認められ、1番に14日
l0補光により収量が著しく増大することが認められた
。なお、補充に際しては、シュクロース濃厚溶液が培4
−開始時のボ養欣容量の10係以下の量で添加された。
シュクロースの補充量は、培養開始時の培地1重量G1
.シュクロース補光欣車叶G 2そしてこのシュクロー
ス3 補充液中のシュクロースミル量G 3とすると、。1+
G2×100で算出される。
なお1本発明の実施例で用いた薬用にんじんから組織培
養物を取得する方法として1次の方法が用いられた。薬
用にんじんをよく水洗い候1番と根部分に分けて大きく
切断し1例えはブラシ粉濾液の様な殺閑剤にて滅菌し、
その仮滅菌水にてよく洗滌する。そして無菌的に適当な
大きさく例えは0.5〜1.0Crn)に切p丁し組織
片を寒天培地上に筒く。
この寒天培地に含まれる培地としては各種の無様塩にビ
タミノ性11.糖佃を9口えてIj、li−る既知の植
物絹’Ik培養用培地が用いられイ4?る。生長調i¥
lI物ノuとしテll−1,オー#シン翔としてβ−イ
ンドール酢酸(IAA)、  σ−ナフタリン酢酸(N
AA)、2・4−ジクロルフェノキシ15″1三酸(2
・4.−1))、そして、サイトカイニンイ自としてカ
イネチンジベレリンがそれぞれ単独または相合わぜて添
加さ力、る。こうすることにより、カルス化(脱分化)
がなされつる。ココナツミルク、酵刊、カゼイン加水分
解物(カザミノ酸) ’Qi’ f:単独または相合せ
て添加することにより効率よくカルス化が行われつる。
カルス化は。
暗所下、2:3〜28℃の糸トドて収1吻絹1r’l’
片のX111胞を垢’ +(fぜせることにより1週間
Ll +、riより始オリ約4週間でカルス化する。し
刀・しながら、このようにしてイ4?られる榮用にんじ
んカルスVこ。1:サポニンやツーボケニンなどの薬効
成分は含量f1.ない。j)ルスが再分化してい々いか
らである。
Si’、;用にんじんカルスを11分化させるために、
これをインドール 1溺岐21)pln 、サイトカイ
ニン0.lppm全含有するI覧is培s rtc置床
し白色光を100〜2000ルックスの状態で叩上する
。カルスは再分化する。同時に1株の選別を2こなって
天然薬用にんじんと同様の薬効主成分粗サポニンおよび
粗すポゲニンを含有する組織培養物を得る。本体の粗サ
ポニン含量は乾燥重量で約7〜10妬の程度であった。
発明の効果: 本発明によれば、炭素謡を修正したMS培地を用いるこ
とにより、天然の薬用にんじんと同様の薬効主収分であ
る粗サポニンや粗すポゲニンを含有するにんじん組織培
養物の収量を従来のシュクロース3重量係含有MS培地
による収量の約1.4〜1.9倍に高めることができる
。本発明では、いう蓼でもなく、従来からも用いられて
いるカゼイン分#物、大豆粉、コーンステイープリカー
、廃糖密、ビタミン類などの温潤を否定するものではな
い。
【図面の簡単な説明】
第1図はシュクロース濃度を特定したときのグルコース
濃度と薬用にんじん組織培養物収量との関係を示すグラ
フ、第2図にグルコース濃度を特定したときのシュクロ
ース濃度と交用にんじん組織培養物収量との関係を示す
グラフ、第3図はシュクロース濃度を変えたときの培養
期間と薬用にんじん組織培養物収餓との関係を示すグラ
フ。 第4図はシュクロース・グルコース修正MS培地および
無修正MS培地と薬用にんじん絹啼培養1勿収量との関
係を示すグラフ、第5図はシュクロース補充濃度と薬用
にんじん組織培養物収量との関係を示すグラフ、第6図
はシュクロースの袖光時何と薬用にんじん知識培養物収
量との関係を示すグラフである。 以上 代理人 弁理士 山 本 秀 策 f?¥1図 〕 歪 ゲll−1−又A7L(φン デB2じ く Φ 0    1    2    3 シユクロ一ス濃度(−/→ 第3図 つ 4’に期F4 CB) 第4図 −L+、鴇期間(す 第5図 つ ≧ 岬 0    1    2   3   4ミユクローλ
@充t(ヅ・)

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1、薬用にんじんの生組織から得られる組織培養物を、
    グルコースを加えたMS培地で培養する薬用にんじん組
    織培養物の培養法。 2、前記グルコース濃度が約0.2〜約0.8車量係で
    ある前記特許請求の範囲第1項に記載の薬用にんじん組
    織培養物の培養法。 3、薬用にんじんの生組織から得られる組織培養物を、
    グルコースを加えたMS培地に接種して培養を開始し、
    約10〜約20日の培養後、シュクロースを補光しさら
    に培養を続ける薬用にんじん組織培養物の培養法。 4、前記培養開始時のグルコース濃度が約0.2〜約0
    .8:ii係でかつシュクロースa度が約1.0〜約3
    .0車量係でおり、そして前記シュクロースの補光濃度
    が約1〜約3.5M量係である前記特許請求の範囲第3
    項に記載の薬用にんじん組織培養物の培養法。
JP58043725A 1983-03-15 1983-03-15 薬用にんじん組織培養物の培養法 Pending JPS59169486A (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP58043725A JPS59169486A (ja) 1983-03-15 1983-03-15 薬用にんじん組織培養物の培養法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP58043725A JPS59169486A (ja) 1983-03-15 1983-03-15 薬用にんじん組織培養物の培養法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JPS59169486A true JPS59169486A (ja) 1984-09-25

Family

ID=12671761

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP58043725A Pending JPS59169486A (ja) 1983-03-15 1983-03-15 薬用にんじん組織培養物の培養法

Country Status (1)

Country Link
JP (1) JPS59169486A (ja)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS63216478A (ja) * 1987-03-04 1988-09-08 Japan Bio Kenkyusho:Kk β―エグダイソンの製法
US5225343A (en) * 1989-10-26 1993-07-06 Nippon Oil Company, Ltd. Process for preparation of an adventive embryo of podophyllum
CN106358653A (zh) * 2016-08-25 2017-02-01 文山苗乡三七科技有限公司 三七工业化无农残栽培方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS4831917A (ja) * 1971-08-27 1973-04-26
JPS50135276A (ja) * 1974-04-16 1975-10-27
JPS5438199A (en) * 1977-09-01 1979-03-22 Nippon Telegr & Teleph Corp <Ntt> Calculation board

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS4831917A (ja) * 1971-08-27 1973-04-26
JPS50135276A (ja) * 1974-04-16 1975-10-27
JPS5438199A (en) * 1977-09-01 1979-03-22 Nippon Telegr & Teleph Corp <Ntt> Calculation board

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS63216478A (ja) * 1987-03-04 1988-09-08 Japan Bio Kenkyusho:Kk β―エグダイソンの製法
JPH0451158B2 (ja) * 1987-03-04 1992-08-18 Japan Baio Kenkyusho Kk
US5225343A (en) * 1989-10-26 1993-07-06 Nippon Oil Company, Ltd. Process for preparation of an adventive embryo of podophyllum
US5336605A (en) * 1989-10-26 1994-08-09 Nippon Oil Company, Ltd. Production of podophyllotoxins using podophyllum
CN106358653A (zh) * 2016-08-25 2017-02-01 文山苗乡三七科技有限公司 三七工业化无农残栽培方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2002515430A (ja) トリテルペン組成物及びその使用法
CN113041193B (zh) 一种抗刺激组合物及其制备方法和应用
US6713303B2 (en) Method for the mass propagation of adventitious roots of ginseng, camphor ginseng and wild ginseng by tissue culture and the improvement of their saponin content
Barnard et al. Metabolism of proline in maize root tips
JPS59169486A (ja) 薬用にんじん組織培養物の培養法
JPH0453495A (ja) 粘性多糖類の生産方法
US6326202B1 (en) Stable high ginsenoside-yielding callus line of Panax quinquefolium (American ginseng) and a method for developing such stable high ginsenoside-yielding callus line
KR100392513B1 (ko) 조직 배양에 의한 인삼, 장뢰삼, 산삼 부정근의 사포닌함량 개선 방법
KR20140142447A (ko) 기내배양을 이용한 4배체 도라지의 배양 및 부정근 유도 방법
CN112956415B (zh) 一种人参不定根培养的液体培养基及培养方法
CN109511678A (zh) 一种刺梨和白芨的套种方法
JPS6321470B2 (ja)
JP3302853B2 (ja) 薬用ニンジンカルスの培養方法
CN113647324A (zh) 一种人参不定根培养的液体培养基及培养方法
JPS63254982A (ja) 毛状根薬用人参の誘導法
Straus Spontaneous changes in corn endosperm tissue cultures
JPS63216432A (ja) ヨ−グルト
CN111109005B (zh) 一种野生灵芝的栽培方法
CN110916089A (zh) 一种高含量gaba的彩色软米发芽糙米及其食用原料的制作方法
CN110973491A (zh) 一种软米制备发芽糙米粉的工艺
KR20200011688A (ko) 2배체 및 4배체 더덕의 기내 배양용 조성물 및 이를 이용한 더덕의 대량 배양 방법
CN115304424B (zh) 一种含硅富硒的功能有机肥及开发工艺
Zobnina et al. Innovative approaches to obtaining a green sweetener
Indrayanto et al. Costus speciosus (Koenig) JE Smith: in vitro cultures, micropropagation, and the production of diosgenin and other phytosteroids
JP2631845B2 (ja) パナックス属植物の根様組織の培養製造法