JPH11513691A

JPH11513691A - 低分子量の細胞、骨髄及び免疫刺激剤

Info

Publication number: JPH11513691A
Application number: JP9516081A
Authority: JP
Inventors: タウブ，フロイド; ペルーン，トマス・ジェイ; マリ，クリストフアー・ケイ; ドーエンボー，ランドル・ジエイ; レドナイサー，ダニエル
Original assignee: ダヴテイル・テクノロジーズ・インコーポレイテツド; ハウザー・ケミカル・リサーチ・インコーポレイテツド
Priority date: 1995-10-17
Filing date: 1996-10-17
Publication date: 1999-11-24
Also published as: AU718140B2; US6007819A; WO1997014306A1; EP1018877A4; AU7461896A; CA2235245A1; US20020035118A1; US6498150B2; EP1018877A1

Abstract

(57)【要約】本発明はペプチド様化合物、例えばアミノカルボン酸アミド誘導体、及び前記化合物を使用して免疫計、骨髄及びその他の器官の細胞を刺激する方法に関する。本渇はワクチン接種を高め、血液細胞成分の合成を増やしそしてその機能を向上させ、さらには種々の薬剤の抗新生物作用を高めるために使用することができる。本発明の化合物は種々のさらなる薬理学的作用を作り出すために使用することができる。

Description

【発明の詳細な説明】低分子量の細胞、骨髄及び免疫刺激剤技術分野本発明はペプチド様化合物、例えばアミノカルボン酸アミド誘導体、及び前記化合物を使用して免疫系、骨髄及びその他の器官の細胞を刺激する方法に関する。本化合物はワクチン能力を高め、血液細胞成分の合成を増やしそしてその機能を向上させ、さらには種々の薬剤の抗新生物作用を高めるために使用することができる。本発明の化合物は種々のさらなる薬理学的作用を作り出すために使用することができる。発明の背景種々のポリペプチドのサイトカイン、ホルモン及び免疫系調節剤が骨髄由来細胞の生産及び活性を刺激するために使用されている。しかしながら、簡単な化学的に合成される小分子を使用して培養系及び生体内において同じような生理学的活性を得ることについては殆ど進歩が見られていない。例えば、赤血球（RBCs）及び白血球（WBCs）を含む（但しこれのみに限定されない）種々の血液成分の生産及び機能を刺激するため、ワクチン接種に対する応答を刺激するため、分化を促進するためそして新生物の無毒な治療の目的に簡単な小分子を使用することの報告は比較的少ない。本発明はそのような、並びにその他の方法及びこれらの方法における使用に適する化合物に関する。発明の目的及び要約免疫調節作用を発揮する化合物を提供することが本発明の目的である。細胞の生産性及び活性を変える（例えば刺激する）方法を提供すること及び細胞成長を調節する方法を提供することが本発明の別の目的である。免疫機能を調節する方法、例えば感染性及び自己免疫疾患、並びに免疫系が役割を果たすその他の疾患を含む疾患に対するワクチン接種又は治療を容易にするため前記方法を提供することが本発明の特定の目的である。血液細胞刺激（RBCs、WBCs、幹細胞、血小板などを含む）を果たす方法を提供することが本発明の別の特定の目的である。細胞分化及び細胞成長を高める方法並びに試験管内及び生体内において抗老化作用を発揮する方法を提供することがさらに別の特定の目的である。ニューロン、ナチュラルキラー（NK）細胞、繊維芽細胞及びその他の細胞型の生存力を生体内及び試験管内において維持する方法を提供することも本発明の特定の目的である。抗アルツハイマー病及び老化防止作用を発揮する方法並びに老化に関連する遺伝的疾患を治療する方法を提供することが本発明のさらに別の特定の目的である。化粧品及び美容薬剤として作用する化合物の生物活性を高める方法を提供することが本発明のさらに別の目的である。新生物性及び前新生物状態を治療する方法を提供することも本発明の特定の目的である。種々の抗新生物剤の副作用を軽減する方法を提供することが本発明の別の目的である。抗体生産を含む細胞タンパク質生産を変える（例えば刺激する）方法を提供することが本発明のさらに別の特定の目的である。上述の目的は生体内及び試験管内の両方において種々の生物調節作用を引き起こすために使用することができるアミノカルボン酸アミド誘導体を提供する本発明により満足される。本発明のさらに別の目的及び利点は以下の説明により明らかになるであろう。図面の簡単な説明図１は合成反応のスキームである。図２は炭素表示を付した本発明の特定の化合物を示す。図３は本発明の特定の化合物を示す。発明の詳細な説明第一の実施態様において、本発明は式（Ｉ）〔式中Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又はそれらの生理学的に加水分解され得る誘導体、又はＡが-S Hの場合それらのジスルフィドである。適当な塩はナトリウム、カリウム、カルシウム及び亜鉛を包含する。適当な加水分解され得る誘導体化される基はエステル、例えば置換された又は置換されていない低級アルキル（例えばC₁〜C₄）又はアリールアルキル（例えばベンジル）エステルを包含し； R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、例えばC₁〜C₆アルキル、アリールアルキル、例えばアルキル部分がC₁〜C₄アルキルでありそしてアリール部分が置換された（例えば低級アルキル又はハロゲン）又は置換されていないフェニル基であるアリールアルキル、又はアルケニル（例えばC₂〜C₆アルケニル）であり； R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、例えばC₁〜C₆アルキル、アルケニル、例えばC₂〜C₆アルケニル、アリールアルキル、例えばアルキル部分がC₁〜 C₄アルキルでありそしてアリール部分が置換された（例えば低級アルキル又はハロゲン）又は置換されていないフェニル基であるアリールアルキル；又はアシル、例えばアセチル、ベンゾイル、アリールスルホニル（例えば、アリール部分がフェニルである場合）；炭酸エステル例えばアルコキシカルボニル(例えば、C₁〜C₇アルコキシカルボニル)(例えば、-OCOC(CH₃ )₃)；アリルオキシカルボニル(例えば、-OCOCH₂CH=CH₂);シクロアルコキシカルボニル(例えば環がC₃〜C₈(C₅〜C₆が好ましい)でありそしてアルコキシ部分がC₁ 〜C₈である場合)(例えば、-OCOCH₂C₅H₉)；又は置換されていないアリールアルコキシカルボニル(例えば、-OCOCH₂C₆H₅)、又は置換基が例えばハロゲン、ニトロ基、アミノ基又はメトキシル基である置換されたアリールアルコキシカルボニルであり；もしくは、R¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環（例えばR¹及びR²は一緒になって-(CH₂)₄-、-(CH₂)₅又は-(CH₂)₆-であることができる）を形成し；そして L¹及びL²は炭化水素連結基、例えば式-(C_nH_2n)-の直鎖又は枝分かれ鎖(ここでｎは、例えばＬ¹の場合は１〜８でありそしてＬ²の場合はｎが１〜８であることができるＡが-PO₃H又は-SO₃Hである場合を除いて２〜８である)；３〜８個の炭素原子の、好ましくは５〜６個の炭素原子のシクロアの化合物に関する。有利には、L¹及びL²は-(C_nH_2n)-（ここでｎは、L¹の場合は１〜８であり又はL² の場合はｎが１〜８であることができるＡが-PO₃H又は-SO₃Hである場合を除いて２〜８である）である（枝分かれ鎖アルキルの例は-CH₂CHR-、-CH₂CHRCH₂-、- CHRCH₂CH₂-、及び-CH₂CH₂CHR-であり、ここでＲはアルキル基であり、そしてＲを含む炭素原子の合計の数は８を超えない）。本発明の化合物の特定の群はＡ、R¹、R²、L¹及びL²が前記第一の実施態様において上で定義した通りである式（Ｉ）の化合物であり、但しＡが -SO₃H又はそれらの薬学的に許容し得る塩又はそれらの生理学的に加水分解され得る誘導体である場合、R¹及びR²の一方はＨであり、そしてL¹及びL²が(CH₂)₂である場合R¹及びR²の他方はＨでないことを条件とする。本発明の化合物の別の特定の群はＡ、R¹、R²、L¹及びL²が前記第一の実施態様において上で定義した通りである式（Ｉ）の化合物であり、但しＡが-SO₃H又はそれらの薬学的に許容し得る塩又はそれらの生理学的に加水分解され得る誘導体である場合、R¹及びR²の一方はＨであり、そしてL¹及びL²が(CH₂)₂である場合R¹ 及びR²の他方はC₆H₅CH₂OCO-でないことを条件とする。本発明の化合物のさらに別の特定の群はＡが式-PO₃H又は-OPO(OH)₂、より特定すると-PO₃Hの基又はそれらの薬学的に許容し得る塩又はそれらの生理学的に加水分解され得る誘導体であり、そしてR¹、R²、L¹及びL²が前記第一の実施態様において上で定義した通りである式（Ｉ）の化合物である。本発明の化合物の別の特定の群はＡが式-SO₃H又は-OSO₂OH、より特定すると-O SO₂OHの基又はそれらの薬学的に許容し得る塩又はそれらの生理学的に加水分解され得る誘導体であり、そしてR¹、R²、L¹及びL²が前記第一の実施態様において上で定義した通りである式（Ｉ）の化合物である。上の但し書きはこの群の化合物にも同様に適用することができる。本発明の化合物のさらに別の特定の群はR¹及びR²の少なくとも一つがアルキル、有利には低級アルキル（例えばC₁〜C₆）であり、そしてＡ、L¹、L²及びR¹及び R²のもう一つが第一の実施態様において上で定義した通りである式（Ｉ）の化合物である。本発明の化合物の別の特定の群はR¹がアルキルそしてR²がアシルであり、そしてＡ、L¹及びL²が第一の実施態様において上で定義した通りである式（Ｉ）の化合物である。本発明の化合物のさらに別の特定の群はL¹が-(CH₂)-であり、そしてＡ、R¹、R² 及びL²が第一の実施態様において上で定義した通りである式（Ｉ）の化合物である。本発明の化合物のさらに別の特定の群はR¹及びR²が一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そしてＡ、L¹及びL²が第一の実施態様において上で定義した通りである式（Ｉ）の化合物である。本発明の化合物はタンパク質、例えば抗原又は他の免疫学的に活性のタンパク質、又は細胞標的タンパク質と共有結合して存在することができる。そのような複合体はこの技術分野で既知の方法により合成することができる。本発明の化合物は実施例及びUSP 4,102,948及びUSP 4,218,404に記載の方法を適当に使用して製造することができる。別の実施態様においては、生体内及び試験管内において上述の化合物を使用して細胞生産性及び生活力を変え（例えば増やす）、そして細胞の分化、成長及び／又は機能を調節する方法に関する。生体内において、本化合物は骨髄及び血小板生産を刺激し、赤血球形成を刺激し、免疫原応答性を変え（例えば高める）そして新生物を処置することを含めて種々の応答を引き出すために使用することができる。例えば、本化合物は貧血及び好中球減少症の治療に使用することができる。本発明の化合物は早期老化及び変性疾患の治療又は予防並びに遺伝性代謝疾患の治療に使用することができる。本発明の化合物は免疫不全の病気の治療に使用することができ、その例として慢性関節リウマチ、糖尿病、甲状腺炎、狼瘡(SLE)、結合組織疾患、多発性硬化症、サルコイドーシス、乾癬、肝炎、及び腎臓病のような自己免疫疾患を包含するがこれに限定されない。この化合物は、例えば老化の遺伝的疾患(運動失調症、毛細管拡張症、早老、及びウエルネル症候群)の治療に、(有機体の究極の生物学的能力と比較しての)加速された老化に、そしてアルツハイマー病の治療に使用することができる。本化合物は繊維芽細胞、神経、リンパ、上皮、内皮、間充織、神経外胚葉、中皮などの細胞の老化を遅らせるため、そして老化した細胞及び生物の機能及び健康を維持するために使用することができる。この化合物は特定の細胞型（例えば上皮細胞又は間充織細胞）の細胞数に変化を起こさせるために使用することができ（この化合物は、例えば赤血球又は白血球の数又は神経細胞の数を増やすために使用することができる）、又は細胞機能に変化を起こさせる（例えばマクロファージの食細胞活性を高める）ために使用することができる。免疫原応答性の見地から、本化合物は抗原プロセシング、細胞−細胞間伝達、細胞免疫、自然免疫、体液性免疫、マクロファージ機能、NK細胞機能、免疫監視、免疫応答及び免疫キリングを高めるために使用することができる。さらに又、本発明の化合物は抗原又は免疫原性複合体により引き出された応答を変える（例えば高める）ためワクチンプロトコルと連動させて使用することができる。本化合物は感染性、新生物性、自己免疫及びその他の病気に対するワクチンに使用することができる。特に、本発明は細菌及びウイルス性疾患、例えば肺炎、髄膜炎、結核、Ｂ型肝炎及びHIV並びに寄生虫病に対するワクチン能力を高めるために使用することができる。さらに別の例には細菌性疾患；化膿性球菌（ブドウ状球菌、咽頭炎、扁桃炎、静脈洞炎、連鎖状球菌、肺炎球菌、髄膜炎菌、淋菌）、腸内細菌（大腸菌、クレブシエラ、サルモネラ・シゲラ）、コレラ、シュードモナス（緑膿菌、シュードモナス・マレイ）、バクテロイデス、マイコバクテリア（結核）、スピロヘータ類（梅毒トレポネーマ（梅毒））、クロストリジウム、ジフテリア・ヘモフィルス及びボルデテラ捍菌、鼠頸部肉芽腫、ブルセラ、ツラレミア、炭疽、ペスト、マイコプラズマ、リステリア症；リケッチア症：チフス群、ロッキー山斑点熱、ライム病、ツツガムシ病、Ｑ熱；クラミジア症：トラコーマ及び包入体性結膜炎、性病性リンパ肉芽腫、及びオウム病；ウイルス病：皮膚ウイルス感染症（水痘、帯状疱疹、麻疹）、呼吸器系ウイルス感染症、中枢神経系ウイルス病、肝臓ウイルス病、唾液腺ウイルス病、及び感染性単核症；真菌症：カンジダ・アルビカンス、ムコール、ヒストプラズマ症、アスペルギルス症、分芽菌症、コクシジオイデス症、放線菌症及びノカルジア症；そして原虫（寄生性）病：ニューモシスティス症、アメーバ症、マラリア、トキソプラズマ病、レーシュマニア症、トリパノソーマ病、及びラムブル鞭毛虫症；寄生虫病（蠕虫）：旋毛虫症、糞虫症、蟯虫、フィラリア症、十二指腸虫症、回虫病、吸虫、条虫、サナダムシ、及び鞭虫症；そしてその他の病気：サルコイドーシス、猫ひっかき病、在郷軍人病が含まれる。本発明の化合物は免疫毒性及び発癌性薬剤に付随する毒性を抑制するために使用することができる。求める効果及び臨床的情況に応じて、本発明の化合物はワクチン接種の前、最中又は後に投与することができる。本化合物の使用はワクチン接種におけるより有効な注射及び／又は必要な注射の回数の減少の結果になることがあり得る。本発明の化合物は慢性感染症を含む感染症の治療に使用することもできる。特定の実施態様において、本発明は本化合物を使用してイソタイプ変換を達成する方法に関する。実施例IXに示すように、本発明の化合物は免疫グロブリンＧの迅速な誘導を実現するために使用することができる。これらのデータは本発明の化合物をワクチンに対する迅速な応答を引き出し、それにより必要な注射の回数を減らし及び／又はそれぞれの注射の効率を向上させるために使用し得ることを示している。本発明の化合物はそれがタンパク質担体と共有結合しているいないに拘わらずポリサッカライドの抗体生産に集中し、それによってポリサッカライド抗原に対する優れた応答を実現することができる。新生物治療に関しては、本発明の化合物は軟質（例えば血管リンパ様）及び固形腫瘍（例えば癌及び肉腫）の両方を包含する種々の前癌及び新生物性状態の治療に使用することができる。より特定すると、本発明の化合物は乳癌、前立腺癌、神経膠芽腫、黒色腫、骨髄腫、リンパ腫、白血病、肺癌、皮膚癌、膀胱癌、腎臓癌、脳癌、卵巣癌、膵臓癌、子宮癌、骨癌、結腸直腸癌、頸癌及び神経外胚葉癌、並びに前癌状態を治療するために使用することができ、前記前癌状態は単一クローン性高ガンマグロブリン血症、形成異常を含むがこれに限定されることなく、そして頸部及び口腔形成異常を含むがこれに限定されない。本発明の化合物は変化した分化（例えば色素形成、毛髪の喪失；乾癬を含む皮膚の変化；胃腸、腎臓、肝臓、脳、内分泌、免疫、肺臓、結合組織、血管又はその他の器官機能の変化）に関連する状態の治療にも使用することができる。本発明の化合物は局所、経口、直腸、膣内、静脈内、腹腔内、皮下、筋肉内又は鼻内の各径路で投与することができ、求める効果に適した径路を選択する。この化合物は経皮的に、例えば経皮パッチを使用して、又は噴霧により経粘膜的に又はその他の投与方法により投与することもできる。本化合物の投与量は病気治療養生法の中で、例えば病気予防の場合は体重kg当たりフェムトグラムからナノグラム、又は機能／健康回復の場合は体重kg当たり約10μgから約100mgに変化させることができる。いずれかの特定の情況に対する最適の用量はこの技術分野の熟練者により過度の実験なしに、しばしば試験管内又は動物モデルを適宜使用して決定することが可能である。本発明の化合物は典型的には上述のような式Ｉの化合物、又はそれらの塩又は加水分解され得る誘導体を薬学的に許容し得る希釈剤又は担体と配合してなる薬学的組成物の形で使用することができる。この組成物は投薬単位剤形、例えば錠剤、カプセル又は坐剤中に存在させることができる。この組成物は局所投与に適するように処方することができる（例えばゲル、クリーム、ローション又は軟膏として）。もしくは、組成物は注射、吸入、鼻内投与又は点眼又は適宜その他の部位に投与するのに適した溶液又は懸濁液（例えば無菌の）とすることができる。本発明の化合物は内部又は外部使用に適した徐放性処方物として製造することができる。この技術分野で既知の技法を使用して、本発明の化合物をポリマー、固体支持体、リポソーム又はゲルに閉じ込めるか又は結合させることができる。この技術分野で既知の担体及び希釈剤を使用することができ、そして組成物は、例えば錠剤又はカプセルの形体とする場合、腸溶コーティングを適用して作ることができる。本発明の組成物は式Ｉの化合物の外に活性剤を含有することができる。そのような追加の活性剤の例は癌化学療法剤、ホルモン、ビタミン、サイトカイン、酵素調節剤、調節高分子、調節チオール又はその他の小分子を包含する。本化合物は生体外適用も可能であり、それらは骨及び血管移植片を含む組織移植片の成長、維持又は分化、並びに例えば移植又は研究室における使用に先立つ細胞及び器官の処置に含められる。本発明の化合物は人間の療法的用途に適する一方で、式Ｉの化合物は温血動物例えばイヌ、ネコ、ウマ及びウシが罹患した同様の症状の獣医分野の治療にも有用である。そのような目的には、式Ｉの化合物は人間への投与に関して上に説明したのと類似の用量及び用法で投与することができる。本発明の化合物は昆虫、爬虫類、鳥類、魚類及びプランンクトン、微生物などの低級生物にも適用される。それらは海水又は淡水環境を含む水性環境に使用することができる。例えば、本発明の化合物は、例えば水産養殖における魚の成長、発生及び生殖を変える（例えば刺激する）ために使用することができる。無傷の動物（特に哺乳動物、但しこれに限定されない）の細胞、組織及び器官に関連する本発明化合物の有用性に加えて、本発明の化合物は植物の成長及び発生並びに植物機能及び生産性を変える（例えば刺激する）ため農業環境においても適用される。本発明の化合物は種々の既知のプロトコルのいずれかを使用して植物又は土壌に適用することができる。この化合物は単独で又は他の噴霧剤、肥料又は注入物と組み合わせて使用することができる。本化合物の特定の試験管内用途には培養への適応、分化及び機能の維持を容易にし、細胞生産性を刺激しそして細胞生活力を高めることが含まれる。この化合物の影響を受けやすい細胞の種類は、例えば哺乳動物組織又は昆虫もしくは蛛形類組織からの真核細胞、並びに植物組織に由来する細胞及び真菌（例えば酵母）細胞を含む。細菌細胞を含む原核細胞も使用することができる。細胞は任意の種々の利用可能な方法を使用して本化合物の存在下で成長させ又は貯蔵することができ、プラスチック又はガラス又はその他の支持体（例えばビーズ又は中空繊維）上の成長、懸濁物での成長（例えば液体又は半固体培地中で）、バイオリアクターでの成長、又は凍結又は乾燥状態での貯蔵を含む。主培養又は継代培養などを使用することができる。上に述べたように、本発明の化合物は細胞の生存力／生活力及び／又は生産性を変えるため適宜使用することができる。変わった生存力／生活力は、例えば老化における遅れ又は変わった培養への適応として証明することができる。変わった生産性は、例えば細胞特異的生産物例えばタンパク質の生産における変化、例えばハイブリドーマによる抗体生産における変化により証明することができる。本発明の化合物は組換え又は天然のタンパク質又は活性の宿主細胞による生産を刺激するために使用することができる。本発明の化合物は全細胞又は無細胞環境における構造又は酵素的活性の分子又はオルガネラの複製、転写、翻訳、輸送又は修飾を含む生化学反応を刺激し又は制御するために使用することもできる。使用する本発明の化合物の量及び露出の頻度はこの技術分野の熟練者が容易に決定することができ、そして細胞の種類、使用する化合物及び求める効果により変動するであろう。最適の濃度を決定するには、適当な試験管内アッセイをフェムトグラム／mlから数十mg／mlの範囲で実施する。本発明の種々の態様を以下の限定しない実施例において一層詳しく説明する。下に記述する合成方法のいくつかはKnight等，Cancer Research54: 5623(1994) 又はUSP 4,218,404に記述された方法に相当するか、又はそれらの変法を示す。さらに、WO 92／00955及びPCT／US 91／04725の開示は合成、投薬用量及び細胞培養処理プロトコルに関する部分を含めて本発明に関連しており、これらの用量及びプロトコルは本発明の化合物に適用可能である。実施例ＩＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリン亜鉛塩の合成方法ＩＮ−CBZ−β−アラニンからN,N′−ビス（CBZ）−β−アレシンの製造 250mlの丸底フラスコに撹拌棒、Ｎ−CBZ−アラニン（5.805ｇ，26.008mmol）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド(2.993ｇ，26.008mmol，１eq.)、及び1,3−ジシクロヘキシルカルボジイミド(5.366ｇ，26.008mmol，１eq.)を加えた。フラスコを隔壁で密封し、アルゴンでパージした。次いでCH₂Cl₂（86ml）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。CH₂Cl₂の添加に際してすべての固体は溶解しなかった。次に固体を予めアルゴンでパージした中間のフリット化ガラスブフナー漏斗を通す真空濾過により除いた。この漏斗にアルゴンパージ漏斗並びに撹拌棒とシスタミン・２HCl(1.464ｇ，6.502mmol，0.25eq.)とを含む500ml丸底フラスコを取り付けた。次いでフラスコと固体（白色）とを３×15mlのCH₂Cl₂ですすいだ。濾液は無色ないし淡黄色であった。フラスコを漏斗から離し、隔壁で密封し、そしてアルゴンでパージした。撹拌している溶液にEt₃N（2.9ml，20.806mmol，0.8 eq.）を添加した。すべての固体は溶解しなかった。反応を室温で一晩撹拌した。その後生成物を＃541 Whatman濾紙を付けた11cmのブフナー漏斗を使用して集めた。フラスコ及び固体（白色）を３×15mlのCH₂Cl₂ですすいだ。濾液は無色ないし黄色であった。固体を250mlの丸底フラスコに入れ、高真空下で一晩乾燥させた。粗生成物の重量を測定し、そしてDMSO(0.3ｇ／ml)を添加し、そして撹拌しながら70℃〜90℃に加熱して固体を溶解した。次いでH₂O(0.12ｇ／ml)を激しく撹拌しながらゆっくり添加した。混合物を室温に冷却し、そして３時間後＃54 1 Whatman濾紙を付けた11cmのブフナー漏斗を使用して集めた。固体（白色）及びフラスコを３×15mlのCH₂Cl₂、H₂O次いで２×15mlのEtOAcですすいだ。固体をスパチュラで切り刻み、250mlの丸底フラスコ中で高真空下で乾燥させた。収得量は3.568ｇで97.5％の収率に相当する。 N,N′−ビス(CBZ)−β−アレチンからＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリン亜鉛塩の製造（ZnO又はCa(OH)₂の少量添加） 250mlのエルレンマイヤーフラスコに撹拌棒、N,N′−ビス（CBZ）−β−アレチン（2.524ｇ，4.486mmol）、ジメチルスルホキシド（2.5ml）、N,N−ジメチルホルムアミド（2.5ml）、ピリジン（3.2ml）、CHCl₃（75ml）、及びH₂O（150ml ）を添加した。混合物を激しく撹拌するとエマルジョンが得られた（すべての固体は溶解しなかった）。pHメーターを水相に浸漬した。pHはほぼ7.3から7.7であった。次いでI₂(7.97ｇ，31.401mmol，7eq.)を添加した。最初は有機相は赤色そして水相は無色であった。反応の間、水相は暗赤色になり、エマルジョンは沈殿した。pHはI₂添加後10分以内に5.7に低下した。ZnO(100〜200mg，0.3〜0.6eq.) を少しづつ添加してpHを5.7〜6.0に保った。3.5時間後pHは安定し、そして反応をさらに２時間撹拌した(合計反応時間は5.5時間)。相を分離し(有機相は暗赤色であった)、水相を10mlのCHCl₃で洗浄した。水相（淡赤色）を追加のCHCl₃を使用して連続式液／液抽出器により一晩抽出した。水相（無色ないし極めて淡いピンク）を分離し、回転蒸発器で部分蒸発させて溶解した有機物を除き、棚凍結させ、そして凍結乾燥させた。残留物(鮮黄褐色)を１mlのH₂O及び３mlのアセトニトリルに溶解し、そして100mlのアセトニトリルに添加した。白色沈殿を＃541 W hatman濾紙上に集め、40mlのアセトニトリルですすいだ。収得量は1.676ｇの白色固体であり、52％の収率に相当する(Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル− タウリン亜鉛塩)。 N,N′−ビス(CBZ)−β−アレシンからＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリン亜鉛塩の製造（ZnOを最初に添加した） 125mlのエルレンマイヤーフラスコに撹拌棒、N,N′−ビス（CBZ）−β−アレシン（809mg，1.438mmol）、ジメチルスルホキシド（0.8ml）、N,N−ジメチルホルムアミド（0.8ml）、ピリジン(1.0ml)、CHCl₃(24ml)、H₂O (80ml)、及びZnO（526mg，6.470mmol，4.5eq.）を添加した。混合物を激しく撹拌するとエマルジョンが得られた(すべての固体は溶解しなかった)。次いでI₂（ 3.28ｇ，12.904mmol，９eq.）を添加した。最初は有機相は赤色そして水相は無色であった。反応の間、水相の色は暗赤色になり、エマルジョンは沈殿した。混合物を一晩撹拌した。次いで相を分離し（有機相は暗赤色であった）、水相を20 mlのCHCl₃で洗浄した。水相（淡赤色）を追加のCHCl₃を使用して連続液／液抽出器により一晩抽出した。水相(無色ないし極めて淡いピンク)を分離し、回転蒸発器で部分蒸発させて溶解した有機物を除き、棚凍結させ、そして凍結乾燥させた。残留物（鮮黄褐色）を0.5mlのH₂O及び２mlのアセトニトリルに溶解し、そして 75mlのアセトニトリルに添加した。白色沈殿を＃541 Whatman濾紙上に集め、20m lのアセトニトリルですすいだ。収得量は630mgの白色固体であり、61％の収率に相当する(Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリン亜鉛塩)。 ¹³CNMRスペクトルのデータは下表の通りであった(数表示については図２Ａを参照せよ)。シグナル DMSO 溶媒：カップルしたＣ−Ｈ 1 48.4 2 33.8 3 172.2 4 34.6 5 36.4 6 156.4 7 65.4 8 135.0 9 125.8 10 126.5 11 128.0 方法IIａＮ−(CBZ)−β−アラニンからＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリン（遊離酸及び亜鉛塩）の製造Ｎ−（CBZ）−β−アラニン（563mg，2.522mmol）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（290mg，2.522mmol）及びDCC（520mg，2.522mmol）をCH₂Cl₂（11.5ml，0 .22Ｍ溶液にする）に溶解した(不溶解物は認められなかった)。反応を室温で一晩混合した。粗反応混合物を焼結ガラス漏斗を通して濾過してジシクロヘキシル尿素（DCU）を除いた。反応を「無水状態」で316mg(2.522mmol)のタウリンを含むフラスコ中に濾過した。フィルターケーキを3.5mlのCH₂Cl₂で洗浄した。316μ lのEt₃N（１eq.）を添加した後、反応を室温で混合した。反応はNMRで完了するまで混合した。粗反応混合物をMeCNと一緒に摩砕して精製した。粗反応混合物を 14mlのCH₂Cl₂(0.2Ｍ)に溶解し、そして１eqのトリフルオロメタンスルホン酸を添加した。反応は15〜20分間混合したのみで完了したと認められたが、室温で一晩反応を混合した。反応混合物を濾過し、フィルターケーキをCH₂Cl₂で洗浄した。フィルターケーキ（遊離酸）を２つの部分に分割した。１つの部分（305mg）及び0.5eqのZn(OH)₂を５mlのH₂Oに溶解し、１時間混合し、その後凍結乾燥により濃縮して340mgを白色固体として得た(出発物質のＮ−(CBZ)−β−アラニンに対して66％)。他の部分を精製し、遊離酸（190mg）として特性値を分析した。NM Rデータを遊離酸及びZn塩の両者について求め、Zn塩がより純粋であった（反応スキームについては図１を参照せよ）。 ¹H NMRスペクトルのデータは下表の通りであった（アルファベット表示については図２Ｂを参照せよ）。シグナル D₂O溶媒ａ 2.99(t，J=12.8 Hz，2H) ｂ 3.48(t，J=12.8 Hz，2H)) ｃ水素結合のために見られないｄ 2.38(t，J=12.4 Hz，2H) ｅ 3.35(m，2H) ｆ水素結合のために見られないｇ 5.07(m，4H) ¹³C NMRスペクトルのデータは下表の通りであった(数表示については図２Ａを参照せよ)。シグナル DMSO 溶媒 1 51.1 2 36.1 3 170.2 4 36.4 5 37.7 6 156.6 7 65.7 8 137.8 9 128.3 10 128.9 11 128.9 方法IIｂＮ−(CBZ)−β−アラニンからＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリン（遊離酸及び亜鉛塩）の製造（スケールアップ）三つ頸１ＬフラスコにＮ₂ガス下でCBZ−β−アレシン（48.2ｇ，215.9mmol）を加えた。これに新たに蒸留した塩化メチレン(750ml)、次いでＮ−ヒドロキシスクシンイミド(24.85g，215.9mmol)を添加した。得られた懸濁液に1,3−ジシクロヘキシルカルボジイミド（DCC，44.54ｇ，215.9mmol）を添加した。このスケールにおいて反応からCH₂Cl₂を還流させるに十分な顕著な発熱が生じた。反応混合物をN₂ガス下で５時間撹拌し、この時点で混合物を焼結ガラスブフナー漏斗を通して濾過した。フィルターケーキをCH₂Cl₂（３×100mL）で洗浄した。濾液にタウリン(27.03ｇ，215.9mmol)及びトリエチルアミン（33.1 mL，237.5mmol）を添加した。反応をN₂ガス下で撹拌し、¹H-NMR分析により監視した。反応混合物はWhatman＃542濾紙を使用するブフナー漏斗を通して真空濾過した。濾液を減圧により蒸発させて油状物とし、次いでこれを高真空下に置いた。この「油状物」を未反応DCCをすべてクエンチするため１滴の水を加えたアセトニトリルと一緒に摩砕した。混合物を濾過し、MeCNを減圧下で除去し、次いで高真空下に置いた。得られた油状物を水（50mL）に溶解した。カード状の白色沈殿が形成され、さらに水(150mL)を添加し、生成した固体を濾去した。濾液中で油状物が溶液から沈殿した。¹H-NMRスペクトルを生成物の所在を決定するために求めた。生成物は予期した通り水相にあった。次に生成物を含む水相をH⁺イオン交換カラムを通して溶離した。画分(225mL)を集め、TLCにスポットした。所望の生成物は画分２〜７に存在した。これらの画分を合わせ、減圧下で水を除いた。得られた油状物にMeCN（１Ｌ）を添加し、溶液を撹拌した。残留する水をMeCNとの共沸蒸留により除いた。生じた固体を真空濾過により集め、MeCNで洗浄した。固体を１Ｌの丸底フラスコ中で真空乾燥させ、次いで風袋を計った４オンスの琥珀瓶に移した。最終のパッケージ重量は38.89ｇ（117.7mmol，収率54.5％）であった。亜鉛塩はH₂O中でZn(OH)₂で処理し、次いで凍結乾燥させることにより製造した。生成物のスペクトルデータはＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリン亜鉛塩の標準試料と正確に一致した。実施例 II β−アラニル−タウリンの合成（遊離酸及び亜鉛塩）Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリン(1.00ｇ，3.4mmol)を23mlの氷酢酸中でスラリーにした。混合物にAcOH中のHBr（30重量％）の3.4mLを添加すると透明な溶液になった。反応を40℃に加熱し、一晩混合した。生成物は溶液から沈殿し、そしてアセトニトリルを添加して強制沈殿させた。混合物を濾過し、フィルターケーキを洗浄し、そして生成物を集めた。粗Br塩をイオン交換カラム (Dowex AG1-XB8)に装荷した。カラムをH₂Oで溶離した。生成物の画分を集め、凍結乾燥させて583mg（87.3％）のβ−アラニル−タウリンを得た。亜鉛塩はH₂O中でZn(OH)₂で処理し、次に凍結乾燥させて製造した（反応スキームは図１を参照せよ）。 ¹H NMRスペクトルのデータは下表の通りであった（アルファベット表示については図２Ｃを参照せよ）。シグナル D₂O溶媒ａ 3.09(t，J=12 Hz，2H) ｂ 3.59(t，J=12 Hz，2H) ｃ水素結合のために見られないｄ 2.66(t，J=12 Hz，2H) ｅ 3.25(t，J=12 Hz，2H) ¹³C NMRスペクトルのデータは下表の通りであった(数表示については図２Ｄを参照せよ)。シグナル DMSO 溶媒 1 50.8 2 36.2 3 169.6 4 33.1 5 36.2 比較のためKnight等，Cancer Research 54: 5623(1994)の方法により製造した β−アラニル−タウリン亜鉛塩は下表の¹H NMRスペクトルを示した（アルファベット表示については図２Ｃを参照せよ）。シグナル D₂O溶媒ａ 2.93(t，J=12 Hz，2H) ｂ 3.42(t，J=12 Hz，2H) ｃ水素結合のために見られなかったｄ 2.50(t，J=12 Hz，2H) ｅ 3.10(t，J=12 Hz，2H) 実施例 III Ｎ−(CBZ)−β−アラニンからＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−エタノールアミンホスフェート（遊離酸及び亜鉛塩）の製造Ｎ−（CBZ）−β−アラニン（274mg，1.23mmol）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（141mg，1.23mmol）及びジシクロヘキシル尿素（DCU，253mg，1.23mmol）をテトラヒドロフラン（THF，4.1mL）に溶解した。反応を室温で一晩混合した後、濾過してジシクロヘキシル(DCU)尿素を除いた。濾液にH₂O（0.5ml）中の２− アミノエチル二水素リン酸（1.23mmol）の溶液を添加した。反応混合物に2.1モル当量のトリエチルアミンを添加した。反応を３日間混合した後THFを真空下で除いた。残った水相を濾過しそして調製したイオン交換カラム(Dowex AG 50W-X8 )に装荷した。カラムを水で溶離した。生成物の画分を集めて凍結乾燥させた。粗固体（260mg）をH₂O中1.0モル当量のZn(OH)₂で処理して塩を作った。粗固体（凍結乾燥後）をアセトニトリルと一緒に摩砕して集めた（50mg）。実施例 IV Ｎ−(CBZ)−β−アラニンからＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−アミノエチルホスホン酸（遊離酸及び亜鉛塩）の合成Ｎ−（CBZ）−β−アラニン（301mg，1.35mmol）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（155mg，1.35mmol）及びジシクロヘキシル尿素（DCU，278mg，1.23mmol）をテトラヒドロフラン（THF，4.5mL）に溶解した。反応を室温で一晩混合した後、濾過してジシクロヘキシル(DCU)尿素を除いた。濾液にH₂O（0.5ml）中の２− アミノエチルホスホン酸（1.35mmol）の溶液を添加した。反応混合物に2.1モル当量のトリエチルアミンを添加した。反応を３日間混合した後ＴＨＦを真空下で除いた。残った水相を濾過しそして調製したイオン交換カラム(Dowex AG 50W-X8 )に装荷した。カラムを水で溶離した。生成物の画分を集めて凍結乾燥させた。粗固体（270mg）をH₂O中1.0モル当量のZn(OH)₂で処理して塩を作った。粗固体（凍結乾燥後）をアセトニトリルと一緒に摩砕して集めた（50mg）。実施例ＶＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリン亜鉛塩による分化及び分化した生産物の生産の試験管内刺激ハイブリドーマ細胞(ATCC ＃CRL-8014，OKT-8，IgG２抗ヒトＴ細胞サブセット抗体を分泌する)をＴ25培養フラスコ中でＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル −タウリン亜鉛塩の存在下又は存在させないで増殖させた。細胞を10,000細胞／ mlの濃度で接種し、そしてHycloneから入手したHyQ-PF-MABを含有する５mlの無タンパク質培地中で500,000細胞／ml以下に保った。一部試料につきMab生産をサンドイッチELISA法により測定した。一部を標準範囲内に希釈し、そしてヒツジ抗マウスIgGを予めコートした平板に添加し、室温で２時間インキュベートした。ウェルを洗浄しそして希釈した上澄みと反応させ、次いで洗浄しそしてペルオキシダーゼで標識した抗マウス抗体を用いて検出した。結果を表１に示す。実施例 VI 哺乳動物細胞によるタンパク質生産の刺激組織プラスミノーゲン活性化因子(tPA)のクローン化した遺伝子を含むCHO細胞をATCCから＃CRL-9606として入手した。tPA遺伝子はプラスミドpETPFRのトランスフェクションにより導入された。細胞はT-25フラスコ中で10％ウシ胎児血清を添加したHamのF-12培地で増殖させた。細胞培養はT-25フラスコに２×10⁴細胞／ mlの細胞５mlを添加することにより接種した。 tPA生産に対するＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリン亜鉛塩の効果はこの化合物を増殖培地に添加し、そして指示した化合物の水準を細胞の数代（例えば６代）にわたって維持することにより試験した。対数増殖の末期に培養物をトリプシン処理により収穫した。１mlを遠心分離して細胞を除き、そして上澄みについてAmerican Diagnostica Inc.から入手したI MUBIND total tPA Stripwell ELISAを使用してtPAを測定した。表２に示す結果は化合物(Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリン亜鉛塩、表２の＃１、＃２及び＃３)はtPAの細胞当たり生産を約２倍に増大させたことを示している。ミリリットル当たり細胞数は血球計を用いてトリパンブルー染色細胞を直接数えて求めた。 ^*標準曲線は“Abs＝0.1154＋.029^*濃度”で、相関係数0.9977とする。実施例 VII 生体内同調的Ｔ細胞依存性応答遅延型過敏生体内同調的Ｔ細胞依存性応答を試験するため、遅延型過敏(DTH)を測定した。DTHは被験者が多くの抗原に対する免疫応答を有しているか否かを測定するため臨床的に使用される試験である。最もしばしば適用されるのはPPD又は尖叉試験(tine test)と称する結核に対する応答におけるDTHの測定である。又これは患者例えば癌患者が免疫系が不全になりそしてアネルギー性になったか否かを測定するためにも使用される。研究室においてはこの試験はマウスにおけるオキサゾロン（OX）に対する特異的応答の発生及び応答の測定を包含する。応答の発生（感作又は当初露出）は動物の毛を剃った腹部にOX（オリーブ油中1.2％OXの50μl）を塗ることにより起こさせた。応答の測定は動物の右耳にOX(５μl，1.2％)を塗布した後24及び48時間に行った。この実験では感作は０日、チャレンジは４日に行った。５日及び６日に耳の厚さを測定し、チャレンジ前の厚さを差し引いた。使用したOXの用量は正常な未処理の動物が知覚可能であるが、 24時間にOXに対して中位の応答を与えるように選択された。Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリン亜鉛塩の効果を測定するため、種々の投与量を−２、０、＋２及び＋４の各日に静脈内に注射した。１群10匹の動物を使用した。薬剤希釈は一つの装置で実行しそしてコード化され、そして独立した契約の装置（Midlantic Research）がすべての手順を「盲検」方式で実行した。コントロール（感作もチャレンジもされなかった試験区）の耳が40μを超える膨潤を示したことはなかった。50μから99μの膨潤を示した動物を中位の膨潤と評価した。３つのコントロール（食塩水注射）の動物は予期した通り24時間において中位の応答を有した。Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリン亜鉛塩は２つの異なる処理群において10匹中８匹まで応答評価を変えた（これは変化した応答に関して相対リスク指標による95％信頼限界を超える）。１fg／kgから１mg／kg間での投与を受けた動物のすべての群は食塩水注射群より中位応答個体数が多かった。 100μ又はそれを超える膨潤を示した動物は上位の免疫応答を有すると評価した。食塩水を注射した動物は24時間に上位の免疫応答を有したが、一方全部で14 匹のＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリン亜鉛塩処理した動物が上位の免疫応答を有した。１匹の薬剤非処理動物がチャレンジ後24又は48時間のいずれかに上位の応答を有したが、一方21匹のＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル −タウリン亜鉛塩処理した動物がこれらの時間の一つにおいて上位の応答を有した。データを表３に示す。 ^*コントロールと比較した相対リスク(RR)は95％信頼限界の最低未満においてさえ１を越える。RRは48時間におけるものは試験しなかった。実施例 VIII 血液細胞刺激ヒト造血先駆細胞のための96ウェル型懸濁培養系（Warren等，Stem Cells 13: 167(1995)）を試験管内でCD34＋細胞の拘束及び分化を監視するために使用した。培養における細胞の成熟及び直系マーカーの発現をELISAにより測定した。CD3 4＋細胞は臍帯血(90％純度)から分離し、そして96ウェル平板（ウェル当たり200 0）中で10日間液体培養した。適当な直系マーカーの発現を刺激する成長因子を組み合わせて添加した。培養は15％FBS添加IMDM、0.5ng／mlのIL-３、20ng／ml のSCF、１単位／mlのEPO、１ng／mlのGCSF及び指示した濃度の試験化合物からなっていた。その後、細胞をグルタルアルデヒド−パラホルムアルデヒド混合物で固定し、細胞をプラスチックにしっかり付着させた。細胞表面マーカーを指向する適当な一次抗体を使用してELISAを実行した（Warren等，Stem Cells13: 167(1995)）。３つの異なる直系マーカー、CD14（単球）、CD15（好中球）、及びグリコホリンＡ（赤芽球）を測定した。結果を表４に示す。 Taurox-BP＝Ｎ−カルボキシベンゾキシ−β−アラニルアミノエチルリン酸 Taurox-BOP＝Ｎ−カルボキシベンゾキシ−β−アラニル−エタノールアミンホスフェート Taurox-SB＝Ｎ−カルボキシベンゾキシ−β−アラニル−タウリン Taurox-S ＝ β−アラニル−タウリン研究２：左に同じ。但しウエル当たり1700細胞とする。実施例 IX 免疫刺激 BALB／ｃ雌マウス（４〜５週令）を前採血し、次いで−７日、−５日、−３日、及び０日に指示した化合物の0.1mlを腹腔内に注射した。０日に、それらは可溶性ポリサッカライド抗原Pn 14−破傷風毒素(TT)10μgを0.1mlの溶液として腹腔内投与を受けた。２つの他の群は完全フロインドアジュバント（CFA）の60％エマルジョン0.1ml中のPn 14−TT、10μgを０日に後脚の上の中線をわずかに外れた部位に皮下投与を受けた。２つのCFA群は同じく処理された。すべてのマウスは４日目及び14日目に採血した。84日目にマウスを採血し、そして５μfのPn 14（TTと結合していない）及び試験化合物又は不完全フロインドアジュバントのいずれかを用いてブーストした（これらは前にCFA の投与を受けた）。マウスは94日目に採血した。１：1000に希釈した血清につき ELISAにより抗Pn 14抗体を測定した。前採血の値を差し引いた。 O.D.における平均値の変化(光学密度O.D.は抗体の存在を示す) 注１．値は薬剤／投与量群当たり３匹の動物の平均値である。２．投与量は上述の試験化合物の動物の体重キログラム当たり５ng,５μg／kg、及び５mg／kg並びに複合抗原であり、これらを上表では“ng”、“μg”、及び “mg”で示した。３．CFA−完全フロインドアジュバントは現在の最も優れたワクチンアジュバントであるが、その毒性のため動物用としてのみ認可されている。各３匹の動物の２群を使用した。刊行されたデータはCFAが食塩水に比べて応答を10倍に刺激することを示している。討論ａ．本発明の化合物で処理した動物にのみ４日目の応答が認められる。ｂ．本発明の化合物で処理した動物にのみ非複合ポリサッカライドに対する応答が認められる。ｃ．14日目の応答は処理により大きくなる。実施例Ｘ合成Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−エタノールアミンスルフェート−Taurox BOS Ｎ−（CBZ）−β−アラニン及びＮ−ヒドロキシスクシンイミドのTHF溶液にDC Cを添加する。反応を室温で一晩混合する。粗反応混合物を焼結ガラス漏斗を通して丸底フラスコの中に濾過して形成されるDCUを除く。活性化エステルは溶液に残る。濃縮し、溶媒に再溶解した後、エタノールアミン又はアルコール保護誘導体を溶液として活性エステルを含有する溶液に添加することができる。トリエチルアミンを添加することもできる。反応を後処理しそして精製すると形成されたＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−エタノールアミンが得られる。遊離アルコールは種々の方法で硫酸化することができ、その結果Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−エタノールアミンスルフェートが形成される。 β−アラニル−エタノールアミンスルフェートの合成(Ｎ−カルボベンゾキシ− β−アラニル−エタノールアミンスルフェートから)−Taurox OS Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリンをβ−アラニル−タウリンに変換するのと同じ方法で、Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−エタノールアミンスルフェートをβ−アラニル−エタノールアミンスルフェートに変換することができる。変換はＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−エタノールアミンスルフェートを氷酢酸にスラリー化することにより実行することができる。混合物に酢酸中のHBr（30重量％）を添加する。反応は加熱してよく、そして１時間以上混合する。生成物は通常の後処理及び沈殿により単離することができる。 β−アラニル−エタノールアミンホスフェートの合成(Ｎ−カルボベンゾキシ− β−アラニル−エタノールアミンホスフェートから)−Taurox OP Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリンをβ−アラニル−タウリンに変換するのと同じ方法で、Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−エタノールアミンホスフェートをβ−アラニル−エタノールアミンホスフェートに変換することができる。変換はＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−エタノールアミンホスフェートを氷酢酸にスラリー化することにより実行することができる。混合物に酢酸中のHBr（30重量％）を添加する。反応は加熱してよく、そして１時間以上混合する。生成物は通常の後処理及び沈殿により単離することができる。 β−アラニル−アミノエチルホスホン酸の合成(Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−アミノエチルホスホン酸から)−Taurox P Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−タウリンをβ−アラニル−タウリンに変換するのと同じ方法で、Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−アミノエチルホスホン酸をβ−アラニル−アミノエチルホスホン酸に変換することができる。変換はＮ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−アミノエチルホスホン酸を氷酢酸にスラリー化することにより実行することができる。混合物に酢酸中のHBr(30重量％)を添加する。反応は加熱してよく、そして１時間以上混合する。生成物は通常の後処理及び沈殿により単離することができる。上の化合物の構造は表３に示す。上に引用したすべての文献はその全体を参照により本明細書に組み入れる。19 95年10月17日に提出した米国特許仮出願60／005,336の全内容は参照により本明細書に組み入れる。この技術分野の熟練者はこの開示を読むことにより、形及び細部に関する種々の変更を本発明の真の範囲から逸脱することなくなし得ることを理解するであろう。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ０１Ｎ 57/20 Ａ０１Ｎ 57/20 ＦＡ６１Ｋ 31/00 ６０７Ａ６１Ｋ 31/00 ６０７Ｃ６３５６３５６３７６３７Ｃ 31/255 31/255 31/66 ６０１ 31/66 ６０１６０３６０３Ｃ０７Ｃ 309/15 Ｃ０７Ｃ 309/15 Ｃ０７Ｆ 9/143 Ｃ０７Ｆ 9/143 9/40 9/40 Ｃ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ペルーン，トマス・ジェイアメリカ合衆国イリノイ州 60073．ラウンドレイク．ウエストニパーシンクロード 24794 (72)発明者マリ，クリストフアー・ケイアメリカ合衆国コロラド州 80503．ロングモント．ペブルビーチ3909 (72)発明者ドーエンボー，ランドル・ジエイアメリカ合衆国コロラド州 80503．ロングモント．ノースシクステイシクススストリート11022 (72)発明者レドナイサー，ダニエルアメリカ合衆国メリーランド州 20852. ロツクビル．ボウイロード826

Claims

【特許請求の範囲】１．式（Ｉ）（式中Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又は生理学的に加水分解され得る誘導体であるか、又はＡが -SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アリールアルキル又はアルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アルケニル、アリールアルキル、アシル、炭酸エステル、アリルオキシカルボニル、シクロアルコキシカルボニル、置換されていないアリールアルコキシカルボニル、又は置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して炭化水素連結基、シクロアルキル又はインターフェニレンである）の化合物（但し式Ｉの化合物はではない）、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィドの治療上有効な量を新生物性または前新生物状態の治療を必要とする哺乳動物に投与することからなる前記新生物性の又は前新生物状態を治療する方法。２．Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又はそれらの生理学的に加水分解され得る（C₁〜C₄）アルキル又はアリールアルキルエステルであるか、又はＡが-SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、又は（C₁〜C₆）アルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、（C₁〜C₆）アルケニル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、アセチル、ベンゾイル又はアリールスルホニル、（C₁〜C₇）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C H=CH₂、（Ｃ₃〜C₈）シクロ（C₁〜C₈）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C₆H₅又は置換基がハロゲン、ニトロ基、アミノ基又はメトキシル基である置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して、ｎが１〜８である式-(C_nH_2n)_-の直鎖又は枝分かれ鎖のアルキル；３〜８個の炭素原子のシクロアルキル、又はインターフェニレンであり、但し式Ｉの化合物はではなく、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィドである請求項１に記載の方法。３．式（Ｉ）（式中Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又は生理学的に加水分解され得る誘導体であるか、又はＡが -SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アリールアルキル又はアルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アルケニル、アリールアルキル、アシル、炭酸エステル、アリルオキシカルボニル、シクロアルコキシカルボニル、置換されていないアリールアルコキシカルボニル、又は置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して炭化水素連結基、シクロアルキル又はインターフェニレンである）の化合物（但し式Ｉの化合物はではない）、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィドの成長を高める量を細胞と接触させることからなる前記細胞の固体群の成長を高める方法。４．Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又はそれらの生理学的に加水分解され得る（C₁〜C₄）アルキル又はアリールアルキルエステルであるか、又はＡが-SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、又は（C₁〜C₆）アルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、（C₁〜C₆）アルケニル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、アセチル、ベンゾイル又はアリールスルホニル、（C₁〜C₇）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C H=CH₂、（Ｃ₃〜C₈）シクロ（C₁〜C₈）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C₆H₅又は置換基がハロゲン、ニトロ基、アミノ基又はメトキシル基である置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して、ｎが１〜８である式-(C_nH_2n)-の直鎖又は枝分かれ鎖のアルキル；３〜８個の炭素原子のシクロアルキル、又はインターフェニレンであり、但し式Ｉの化合物はではなく、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィドである請求項３に記載の方法。５．式（Ｉ）（式中Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO2OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又は生理学的に加水分解され得る誘導体であるか、又はＡが -SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アリールアルキル又はアルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アルケニル、アリールアルキル、アシル、炭酸エステル、アリルオキシカルボニル、シクロアルコキシカルボニル、置換されていないアリールアルコキシカルボニル、又は置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して炭化水素連結基、シクロアルキル又はインターフェニレンである）の化合物（但し式Ｉの化合物はではない）、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィドの分化を高める量を細胞分化を高めることを必要とする細胞と接触させることからなる前記細胞分化を高める方法。６．Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又はそれらの生理学的に加水分解され得る（C₁〜C₄）アルキル又はアリールアルキルエステルであるか、又はＡが-SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、又は（C₁〜C₆）アルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、（C₁〜C₆）アルケニル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、アセチル、ベンゾイル又はアリールスルホニル、（C₁〜C₇）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C H=CH₂、（Ｃ₃〜C₈）シクロ（C₁〜C₈）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C₆H₅又は置換基がハロゲン、ニトロ基、アミノ基又はメトキシル基である置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して、ｎが１〜８である式-(C_nH_2n)-の直鎖又は枝分かれ鎖のアルキル；３〜８個の炭素原子のシクロアルキル、又はインターフェニレンであり、但し式Ｉの化合物はではなく、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィドである請求項５に記載の方法。７．式（Ｉ）（式中Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又は生理学的に加水分解され得る誘導体であるか、又はＡが -SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アリールアルキル又はアルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アルケニル、アリールアルキル、アシル、炭酸エステル、アリルオキシカルボニル、シクロアルコキシカルボニル、置換されていないアリールアルコキシカルボニル、又は置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して炭化水素連結基、シクロアルキル又はインターフェニレンである）の化合物（但し式Ｉの化合物はではない）、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィドの老化を遅らせる量を細胞と接触させることからなる前記細胞の老化を遅らせる方法。８．Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又はそれらの生理学的に加水分解され得る（C₁〜C₄）アルキル又はアリールアルキルエステルであるか、又はＡが-SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、又は（C₁〜C₆）アルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、（C₁〜C₆）アルケニル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、アセチル、ベンゾイル又はアリールスルホニル、（C₁〜C₇）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C H=CH₂、(C₃〜C₈)シクロ（C₁〜C₈）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C₆H₅又は置換基がハロゲン、ニトロ基、アミノ基又はメトキシル基である置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して、ｎが１〜８である式-(C_nH_2n)-の直鎖又は枝分かれ鎖のアルキル；３〜８個の炭素原子のシクロアルキル、又はインターフェニレンであり、但し式Ｉの化合物はではなく、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィドである請求項７に記載の方法。９．式（Ｉ）（式中Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又は生理学的に加水分解され得る誘導体であるか、又はＡが -SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アリールアルキル又はアルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アルケニル、アリールアルキル、アシル、炭酸エステル、アリルオキシカルボニル、シクロアルコキシカルボニル、置換されていないアリールアルコキシカルボニル、又は置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して炭化水素連結基、シクロアルキル又はインターフェニレンである）の化合物（但し式Ｉの化合物はではない）、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィドの免疫機能を調節する量の治療上有効な量を免疫機能の調節を必要とする哺乳動物に投与することからなる前記免疫機能を調節する方法。 10．Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又はそれらの生理学的に加水分解され得る（C₁〜C₄）アルキル又はアリールアルキルエステルであるか、又はＡが-SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、又は（C₁〜C₆）アルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の(C₁〜C₆)アルキル、(C₁〜C₆)アルケニル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、アセチル、ベンゾイル又はアリールスルホニル、（C₁〜C₇）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂CH=CH₂ 、（C₃〜C₈）シクロ（C₁〜C₈）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C₆H₅又は置換基がハロゲン、ニトロ基、アミノ基又はメトキシル基である置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して、ｎが１〜８である式-(C_nH_2n)-の直鎖又は枝分かれ鎖のアルキル；３〜８個の炭素原子のシクロアルキル、又はインターフェニレンであり、但し式Ｉの化合物はではなく、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィドである請求項９に記載の方法。 11．抗原及び式（Ｉ）（式中Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又は生理学的に加水分解され得る誘導体であるか、又はＡが -SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アリールアルキル又はアルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アルケニル、アリールアルキル、アシル、炭酸エステル、アリルオキシカルボニル、シクロアルコキシカルボニル、置換されていないアリールアルコキシカルボニル、又は置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して炭化水素連結基、シクロアルキル又はインターフェニレンである）の化合物（但し式Ｉの化合物はではない）、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィドの有効な量を免疫の誘導を必要とする哺乳動物に投与することからなる前記抗原に対して前記免疫を誘導する方法。 12．Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又はそれらの生理学的に加水分解され得る（C₁〜C₄）アルキル又はアリールアルキルエステルであるか、又はＡが-SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、又は（C₁〜C₆）アルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、（C₁〜C₆）アルケニル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、アセチル、ベンゾイル又はアリールスルホニル、（C₁〜C₇）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C H=CH₂、（Ｃ₃〜C₈）シクロ（C₁〜C₈）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C₆H₅又は置換基がハロゲン、ニトロ基、アミノ基又はメトキシル基である置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して、ｎが１〜８である式-(C_nH_2n)-の直鎖又は枝分かれ鎖のアルキル；３〜８個の炭素原子のシクロアルキル、又はインターフェニレンであり、但し式Ｉの化合物はではなく、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィドである請求項10に記載の方法。 13．式（Ｉ）（式中Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又は生理学的に加水分解され得る誘導体であるか、又はＡが -SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アリールアルキル又はアルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アルケニル、アリールアルキル、アシル、炭酸エステル、アリルオキシカルボニル、シクロアルコキシカルボニル、置換されていないアリールアルコキシカルボニル、又は置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して炭化水素連結基、シクロアルキル又はインターフェニレンである）の化合物（但し式Ｉの化合物はではない）、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィドの機能を高める量を血液細胞と接触させることからなる前記血液細胞機能を高める方法。 14．Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又はそれらの生理学的に加水分解され得る（C₁〜C₄）アルキル又はアリールアルキルエステルであるか、又はＡが-SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、又は（C₁〜C₆）アルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、（C₁〜C₆）アルケニル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、アセチル、ベンゾイル又はアリールスルホニル、（C₁〜C₇）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C H=CH2、（C₃〜C₈）シクロ（C₁〜C₈）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C₆H₅又は置換基がハロゲン、ニトロ基、アミノ基又はメトキシル基である置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して、ｎが１〜８である式-(C_nH_2n)-の直鎖又は枝分かれ鎖のアルキル；３〜８個の炭素原子のシクロアルキル、又はインターフェニレンであり、但し式Ｉの化合物はではなく、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィドである請求項13に記載の方法。 15．式（Ｉ）（式中Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又は生理学的に加水分解され得る誘導体であるか、又はＡが -SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アリールアルキル又はアルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アルケニル、アリールアルキル、アシル、炭酸エステル、アリルオキシカルボニル、シクロアルコキシカルボニル、置換されていないアリールアルコキシカルボニル、又は置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して炭化水素連結基、シクロアルキル又はインターフェニレンである）の化合物（但し式Ｉの化合物はではない）、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィド、そしてR¹及びR²の少なくとも１つはアルキルであり、又はL¹及びL²の少なくとも１つは-(CH₂)₂-又は-(CH₂)₃-ではない。 16．Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又はそれらの生理学的に加水分解され得る（C₁〜C₄）アルキル又はアリールアルキルエステルであるか、又はＡが-SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、又は（C₁〜C₆）アルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、（C₁〜C₆）アルケニル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、アセチル、ベンゾイル又はアリールスルホニル、（C₁〜C₇）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C H=CH₂、（Ｃ₃〜C₈）シクロ（C₁〜C₈）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C₆H₅又は置換基がハロゲン、ニトロ基、アミノ基又はメトキシル基である置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して、ｎが１〜８である式-(C_nH_2n)-の直鎖又は枝分かれ鎖のアルキル；３〜８個の炭素原子のシクロアルキル、又はインターフェニレンであり、但し式Ｉの化合物はではなく、又はそれらの薬学的に許容し得る塩、それらのイオン化されていない形態、又はそれらのジスルフィドであり、そしてR¹及びR²の少なくとも１つはアルキルであり、又はL¹及びL²の少なくとも１つは-(CH₂)₂-又は-(CH₂)₃-ではない請求項15に記載の化合物。 17．式（Ｉ）（式中Ａは式-PO₃H、又は-OSO₂OHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又は生理学的に加水分解され得る誘導体であるか、又はＡが-SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アリールアルキル又はアルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アルケニル、アリールアルキル、アシル、炭酸エステル、アリルオキシカルボニル、シクロアルコキシカルボニル、置換されていないアリールアルコキシカルボニル、又は置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して炭化水素連結基、シクロアルキル又はインターフェニレンである）の化合物。 18．Ａは式-PO₃H、又は-OSO₂OH基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又はそれらの生理学的に加水分解され得る（C₁〜C₄）アルキル又はアリールアルキルエステルであるか、又はＡが-SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、又は（C₁〜C₆）アルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、（C₁〜C₆）アルケニル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、アセチル、ベンゾイル又はアリールスルホニル、（C₁〜C₇）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C H=CH₂、（Ｃ₃〜C₈）シクロ（C₁〜C₈）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C₆H₅又は置換基がハロゲン、ニトロ基、アミノ基又はメトキシル基である置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して、ｎが１〜８である式-(C_nH_2n)-の直鎖又は枝分かれ鎖のアルキル；３〜８個の炭素原子のシクロアルキル、又はインターフェニレンである請求項17に記載の化合物。 19．請求項15及び17の一つに記載の化合物及び薬学的に許容し得る担体からなる医薬組成物。 20．請求項15及び17の一つにに記載の化合物及び抗原からなるワクチン。 21．式（Ｉ）（式中Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又は生理学的に加水分解され得る誘導体であるか、又はＡが -SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アリールアルキル又はアルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アルケニル、アリールアルキル、アシル、炭酸エステル、アリルオキシカルボニル、シクロアルコキシカルボニル、置換されていないアリールアルコキシカルボニル、又は置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して炭化水素連結基、シクロアルキル又はインターフェニレンである）の化合物の有効な量をイソタイプ変換を高める必要がある哺乳動物に投与することからなる前記イソタイプ変換を高める方法。 22．Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又はそれらの生理学的に加水分解され得る（C₁〜C₄）アルキル又はアリールアルキルエステルであるか、又はＡが-SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、又は（C₁〜C₆）アルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の（C₁〜C₆）アルキル、（C₁〜C₆）アルケニル、置換された又は置換されていないフェニル（C₁〜C₄）アルキル、アセチル、ベンゾイル又はアリールスルホニル、（C₁〜C₇）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C H=CH₂、（Ｃ₃〜C₈）シクロ（C₁〜C₈）アルコキシカルボニル、-OCOCH₂C₆H₅又は置換基がハロゲン、ニトロ基、アミノ基又はメトキシル基である置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して、ｎが１〜８である式-(C_nH_2n)-の直鎖又は枝分かれ鎖のアルキル；３〜８個の炭素原子のシクロアルキル、又はインターフェニレンである請求項21に記載の方法。 23．式（Ｉ）（式中Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又は生理学的に加水分解され得る誘導体であるか、又はＡが -SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アリールアルキル又はアルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アルケニル、アリールアルキル、アシル、炭酸エステル、アリルオキシカルボニル、シクロアルコキシカルボニル、置換されていないアリールアルコキシカルボニル、又は置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して炭化水素連結基、シクロアルキル又はインターフェニレンである）の化合物の有効な量をポリサッカライドに対する免疫応答の生産を必要とする哺乳動物に投与することからなる前記ポリサッカライドに対する免疫応答を生産する方法。 24．（式中Ａは式-PO₃H、-SO₃H、-OPO-(OH)₂、-OSO₂OH、又は-SHの基、又はそれらの薬学的に許容し得る塩又は生理学的に加水分解され得る誘導体であるか、又はＡが -SHの場合それらのジスルフィドであり、 R¹はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アリールアルキル又はアルケニルであり、 R²はＨ、直鎖又は枝分かれ鎖の低級アルキル、アルケニル、アリールアルキル、アシル、炭酸エステル、アリルオキシカルボニル、シクロアルコキシカルボニル、置換されていないアリールアルコキシカルボニル、又は置換されたアリールアルコキシカルボニルであり、又はR¹及びR²は一緒になってそれらが結合している窒素と共に５〜７員環を形成し、そして L¹及びL²は独立して炭化水素連結基、シクロアルキル又はインターフェニレンである）である請求項23に記載の方法。