JPH11322809A - 抗ヘリコバクター・ピロリ剤 - Google Patents
抗ヘリコバクター・ピロリ剤Info
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- JPH11322809A JPH11322809A JP15194698A JP15194698A JPH11322809A JP H11322809 A JPH11322809 A JP H11322809A JP 15194698 A JP15194698 A JP 15194698A JP 15194698 A JP15194698 A JP 15194698A JP H11322809 A JPH11322809 A JP H11322809A
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- Japan
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- helicobacter pylori
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Abstract
(57)【要約】
【目的】長期服用しても安全性が高く、しかも抗菌効果
の強い、抗ヘリコバクター・ピロリ剤を提供する。 【構成】平均分子量１５，０００の低分子キトサンの乳
酸塩で，酸，水，アルカリに可溶性を有する物質からな
る抗ヘリコバクター・ピロリ剤である。
の強い、抗ヘリコバクター・ピロリ剤を提供する。 【構成】平均分子量１５，０００の低分子キトサンの乳
酸塩で，酸，水，アルカリに可溶性を有する物質からな
る抗ヘリコバクター・ピロリ剤である。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は水溶性キトサンこと
に平均分子量１５，０００の低分子キトサンの乳酸塩
で，酸，水，アルカリに可溶性を有する抗ヘリコバクタ
ー・ピロリ剤に係る。
に平均分子量１５，０００の低分子キトサンの乳酸塩
で，酸，水，アルカリに可溶性を有する抗ヘリコバクタ
ー・ピロリ剤に係る。
【０００２】
【従来技術】キトサンはカニ、エビなどの甲殻類の外骨
格に含まれるキチンを脱アセチル化した塩基性多糖体で
抗菌作用、免疫賦活作用、コレステロール作用、創傷治
癒促進作用が知られている。本発明者はすでに高活性物
質として低分子性キトサンに着目し、各種の薬理作用を
発見している（特開平９ー３０９８７号等）。
格に含まれるキチンを脱アセチル化した塩基性多糖体で
抗菌作用、免疫賦活作用、コレステロール作用、創傷治
癒促進作用が知られている。本発明者はすでに高活性物
質として低分子性キトサンに着目し、各種の薬理作用を
発見している（特開平９ー３０９８７号等）。
【０００３】キトサンは塩基性多糖体として抗菌，抗カ
ビ作用は知られており消臭剤（特開平１ー３０８５６
５），肝疾患用剤（特開平１ー２９４６２７），炎症性
皮膚疾患，アトピー皮膚炎などへの効果（特開平２ー２
８９５２１）報告がある。
ビ作用は知られており消臭剤（特開平１ー３０８５６
５），肝疾患用剤（特開平１ー２９４６２７），炎症性
皮膚疾患，アトピー皮膚炎などへの効果（特開平２ー２
８９５２１）報告がある。
【０００４】一方、胃炎や胃潰瘍とヘリコバクター・ピ
ロリの関連性が明らかにされつつあり、ヘリコバクター
・ピロリを除菌することにより胃潰瘍が改善され、再発
が抑制される事が報告されている。
ロリの関連性が明らかにされつつあり、ヘリコバクター
・ピロリを除菌することにより胃潰瘍が改善され、再発
が抑制される事が報告されている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題、発明の目的】ヘリコバ
クター・ピロリの除菌には一剤のみでは抗菌力は不十分
で数々の抗生剤とプロトンポンプインヒビターが併用さ
れている。しかし、これらの使用薬剤は、ショック症状
等の副作用が多数報告され、徐菌失敗例も多数報告され
ている。ヘリコバクター・ピロリ感染性潰瘍は、感染経
路が確定されていない事から再発例も多く、耐性菌の可
能性も危惧される事から、感染経路の確定と共に、一剤
でしかも安全に除菌を行える薬剤の存在が望まれてい
た。
クター・ピロリの除菌には一剤のみでは抗菌力は不十分
で数々の抗生剤とプロトンポンプインヒビターが併用さ
れている。しかし、これらの使用薬剤は、ショック症状
等の副作用が多数報告され、徐菌失敗例も多数報告され
ている。ヘリコバクター・ピロリ感染性潰瘍は、感染経
路が確定されていない事から再発例も多く、耐性菌の可
能性も危惧される事から、感染経路の確定と共に、一剤
でしかも安全に除菌を行える薬剤の存在が望まれてい
た。
【０００６】
【課題を解決し、目的を達成するための手段】本発明者
はこのような観点のもとで、一剤でしかも安全に除菌を
行える薬剤を検討した。
はこのような観点のもとで、一剤でしかも安全に除菌を
行える薬剤を検討した。
【０００７】すなわち、キトサンは大腸菌、緑膿菌、黄
色ブドウ球菌、枯草菌に対して弱い抗菌活性がある事か
ら、キトサンの高活性物質の検索と共に、キトサンの抗
菌力と消化管内安定性をより高め、安全性の高い良吸収
性な物質の検索を行ったところ、水溶性キトサンことに
平均分子量１５，０００の低分子キトサン乳酸塩に強力
な抗ヘリコバクター・ピロリ除菌効果を見出だし本発明
を完成するに至った。
色ブドウ球菌、枯草菌に対して弱い抗菌活性がある事か
ら、キトサンの高活性物質の検索と共に、キトサンの抗
菌力と消化管内安定性をより高め、安全性の高い良吸収
性な物質の検索を行ったところ、水溶性キトサンことに
平均分子量１５，０００の低分子キトサン乳酸塩に強力
な抗ヘリコバクター・ピロリ除菌効果を見出だし本発明
を完成するに至った。
【０００８】キトサンの消化吸収についてはいまだ明ら
かではないが、リゾチームや腸内細菌の産生するキトサ
ナーゼにより分解され、キトサンオリゴ糖となり腸管か
ら吸収されると考えられている。
かではないが、リゾチームや腸内細菌の産生するキトサ
ナーゼにより分解され、キトサンオリゴ糖となり腸管か
ら吸収されると考えられている。
【０００９】本発明による抗ヘリコバクター・ピロリ除
菌効果は選択物質が酸にもアルカリにも溶解し、低分子
量であるため酵素的に分解されやすく、かつ消化菅から
の吸収がよいことが考えられるが、作用機構については
今後の研究が期待されている。
菌効果は選択物質が酸にもアルカリにも溶解し、低分子
量であるため酵素的に分解されやすく、かつ消化菅から
の吸収がよいことが考えられるが、作用機構については
今後の研究が期待されている。
【００１０】なお、本発明による低分子キトサンを医薬
品として使用する場合は、適当な安定化剤、増量剤を添
加することができ、散剤、錠剤などの経口剤として使用
される。
品として使用する場合は、適当な安定化剤、増量剤を添
加することができ、散剤、錠剤などの経口剤として使用
される。
【００１１】本発明は医薬品としてばかりでなく、機能
性食品、食品材料、医療用具・繊維素材等としても利用
されるものである。
性食品、食品材料、医療用具・繊維素材等としても利用
されるものである。
【００１２】本発明による製剤ことに固形剤以外の製剤
型を調製する場合は、分散剤、酸化防止剤ことに、ブチ
ルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、プロピルガレート
（ＰＧ）、カテキン類が使用される。
型を調製する場合は、分散剤、酸化防止剤ことに、ブチ
ルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、プロピルガレート
（ＰＧ）、カテキン類が使用される。
【００１３】また乳化剤としてモノグリセリド、レシチ
ンが、糖類としては庶糖、ブドウ糖、果糖、デキストリ
ン、増粘多糖類、糖アルコール等が、さらには糖類に代
えて、ガム質、繊維質、ゼラチン、水溶性高分子等を用
いる事ができる。
ンが、糖類としては庶糖、ブドウ糖、果糖、デキストリ
ン、増粘多糖類、糖アルコール等が、さらには糖類に代
えて、ガム質、繊維質、ゼラチン、水溶性高分子等を用
いる事ができる。
【００１４】
【発明の実施の形態】以下には本発明物質の実施例（薬
効薬理試験例等）をあげ本発明をさらに詳細に説明す
る。
効薬理試験例等）をあげ本発明をさらに詳細に説明す
る。
【００１５】製造例（キトサンの精製） カニ，エビ等のカワを希塩酸並びにアルカリ溶液で処理
し、炭酸カルシウム除蛋白操作によりキチンを製造し
た。得たるキチンを４０ー４５％水酸化ナトリウム溶液
中で８０ー１２０°Ｃで５時間加熱し，キチンのＮー脱
アセチル化を行いキトサンを得る。得たるキトサン分子
は脱アセチル化の過程で反応条件により低分子から高分
子のものを粘度により大まかに選別する方法で調製する
ことができる。
し、炭酸カルシウム除蛋白操作によりキチンを製造し
た。得たるキチンを４０ー４５％水酸化ナトリウム溶液
中で８０ー１２０°Ｃで５時間加熱し，キチンのＮー脱
アセチル化を行いキトサンを得る。得たるキトサン分子
は脱アセチル化の過程で反応条件により低分子から高分
子のものを粘度により大まかに選別する方法で調製する
ことができる。
【００１６】なお、本発明実施例ではキトサンを原料と
し、キトサナーゼ処理を施した後，乳酸塩とした平均分
子量１５，０００の低分子キトサンで，酸，水，アルカ
リ可溶性物質を使用した。
し、キトサナーゼ処理を施した後，乳酸塩とした平均分
子量１５，０００の低分子キトサンで，酸，水，アルカ
リ可溶性物質を使用した。
【００１７】試験例 試験方法 被験物質：１）in vitroの実験には水溶性キ
トサン（キトサン乳酸塩で、水、酸、アルカリに可溶、
平均分子量 15,000 ）（焼津水産化学工業）を、対照薬
としてアモキシシリンを使用した。また、２）in vivo
の実験にはキトサン（酸に溶解するが、水、アルカリに
不溶、平均分子量 25,000 〜50,000）（君津化学工業）
を使用した。
トサン（キトサン乳酸塩で、水、酸、アルカリに可溶、
平均分子量 15,000 ）（焼津水産化学工業）を、対照薬
としてアモキシシリンを使用した。また、２）in vivo
の実験にはキトサン（酸に溶解するが、水、アルカリに
不溶、平均分子量 25,000 〜50,000）（君津化学工業）
を使用した。
【００１８】１ー１）In vitro での抗菌活性：ヘリコ
バクター・ピロリ菌株として標準菌株、ATCC43504 （Am
erican Type Culture Collection）を使用した。継代培
地に変法スキロー培地（日水製薬）を、増菌用培地には
Brucella Broth（BBL社）に10% 子牛血清を加えた液体
培地を、また感受性測定培地にはBrucella Brothと1.2%
寒天末（関東化学）に5%馬脱繊維血液（東洋血液）を加
え、さらに水溶性キトサン希釈液を加えた培地を用い
た。
バクター・ピロリ菌株として標準菌株、ATCC43504 （Am
erican Type Culture Collection）を使用した。継代培
地に変法スキロー培地（日水製薬）を、増菌用培地には
Brucella Broth（BBL社）に10% 子牛血清を加えた液体
培地を、また感受性測定培地にはBrucella Brothと1.2%
寒天末（関東化学）に5%馬脱繊維血液（東洋血液）を加
え、さらに水溶性キトサン希釈液を加えた培地を用い
た。
【００１９】薬剤感受性試験には、日本化学療法学会に
準じて、寒天平板希釈法により行い、薬剤の最小発育阻
止濃度（MIC ）を求めた。すなわち、Brucella寒天培地
を滅菌、固化前に馬繊維血液を5%加えた培地を作成し
た。次にその培地９容に対して、被験薬剤の希釈液１容
を混じ、シャーレ（100 x 15ml）に20mlずつ分注し、薬
剤含有試験用培地を作成した。
準じて、寒天平板希釈法により行い、薬剤の最小発育阻
止濃度（MIC ）を求めた。すなわち、Brucella寒天培地
を滅菌、固化前に馬繊維血液を5%加えた培地を作成し
た。次にその培地９容に対して、被験薬剤の希釈液１容
を混じ、シャーレ（100 x 15ml）に20mlずつ分注し、薬
剤含有試験用培地を作成した。
【００２０】被験薬剤として水溶性キトサン及びアモキ
シシリン（対照薬）を用い、滅菌精製水に溶解し、ミリ
ポアフィルターで濾過滅菌して、実験に供した。接種菌
液は増菌用液体培地で２４〜４８時間培養後、リン酸緩
衝液で106 個/ml に調整し、その後各種濃度のキトサン
含有寒天培地上に５μｇずつ２箇所に滴下し、３日間培
養後、菌の発育を観察し、発育コロニーが認められない
ものを−、認められたものを＋とし、実験はそれぞれ２
回繰り返した。なお、培地は嫌気ジャーガスパックを用
い、37℃でＮ2 85% 、ＣＯ2 10% 、Ｏ2 5%の微好気性条
件下で行った。
シシリン（対照薬）を用い、滅菌精製水に溶解し、ミリ
ポアフィルターで濾過滅菌して、実験に供した。接種菌
液は増菌用液体培地で２４〜４８時間培養後、リン酸緩
衝液で106 個/ml に調整し、その後各種濃度のキトサン
含有寒天培地上に５μｇずつ２箇所に滴下し、３日間培
養後、菌の発育を観察し、発育コロニーが認められない
ものを−、認められたものを＋とし、実験はそれぞれ２
回繰り返した。なお、培地は嫌気ジャーガスパックを用
い、37℃でＮ2 85% 、ＣＯ2 10% 、Ｏ2 5%の微好気性条
件下で行った。
【００２１】１ー２）結果 in vitroでの抗菌活性 水
溶性キトサン２００，４００，８００及び１６００μｇ
／ｍｌの濃度で検討したが、４００μｇ／ｍｌ以上の濃
度で菌の発育阻止作用が認められた。結果を以下に示
す。
溶性キトサン２００，４００，８００及び１６００μｇ
／ｍｌの濃度で検討したが、４００μｇ／ｍｌ以上の濃
度で菌の発育阻止作用が認められた。結果を以下に示
す。
【００２２】 水溶性キトサン 菌株 アモキシシリン 菌株 （μｇ／ｍｌ） ATCC43504 （μｇ／ｍｌ） ATCC43504 ０ ＋ ０ ＋ ２００ ＋ ０．０１ ＋ ４００ − ０．１ − ８００ − １ − １６００ − １０ − 対照薬のアモキシシリンは０．１μｇ／ｍｌ以上の濃度
で菌の発育が阻止された。
で菌の発育が阻止された。
【００２３】２ー１）in vivo での効果：胃潰瘍を罹患
しているヒトからヘリコバクター・ピロリを採取し培養
後、ヘリコバクター・ピロリを109 CFU/animalの割合で
２４時間絶食した５週齢のMongolian Gerbil系の雄性ス
ナネズミ（n=5)に経口的に投与し、その後１カ月間はヘ
リコパクター・ピロリの胃内定着を図るため、蒸留水を
飲料水として与えた。
しているヒトからヘリコバクター・ピロリを採取し培養
後、ヘリコバクター・ピロリを109 CFU/animalの割合で
２４時間絶食した５週齢のMongolian Gerbil系の雄性ス
ナネズミ（n=5)に経口的に投与し、その後１カ月間はヘ
リコパクター・ピロリの胃内定着を図るため、蒸留水を
飲料水として与えた。
【００２４】ヘリコバクター・ピロリ投与１ケ月後から
グループ１の動物には５％キトサン酢酸溶液（2.5 ％酢
酸溶液に酸可溶性キトサンを終濃度５％となるように溶
解）を、対照のグループ２の動物にはキトサンを含まな
い2.5 ％酢酸溶液を毎日飲料水として与えた。キトサン
投与開始の１０ケ月後に胃を摘出し、胃の外観を写真撮
影し、撮影後胃を切開し、胃炎の程度を組織学的に評価
した。
グループ１の動物には５％キトサン酢酸溶液（2.5 ％酢
酸溶液に酸可溶性キトサンを終濃度５％となるように溶
解）を、対照のグループ２の動物にはキトサンを含まな
い2.5 ％酢酸溶液を毎日飲料水として与えた。キトサン
投与開始の１０ケ月後に胃を摘出し、胃の外観を写真撮
影し、撮影後胃を切開し、胃炎の程度を組織学的に評価
した。
【００２５】２ー２）in vivo での結果 マクロ所見において、対照のグループ２では胃全体が萎
縮したが、キトサン酢酸溶液を与えたグループ１では萎
縮は見られなかった。またグループ２には出血（出血源
はマクロ上わからず）が見られたが、グループ１では認
められなかった。ミクロ所見において対照のグループ２
においては、胃粘膜が全体で脱落し、正常な粘膜は全く
存在しなかった。粘液の産生も認められず、血管の破綻
が予想された。
縮したが、キトサン酢酸溶液を与えたグループ１では萎
縮は見られなかった。またグループ２には出血（出血源
はマクロ上わからず）が見られたが、グループ１では認
められなかった。ミクロ所見において対照のグループ２
においては、胃粘膜が全体で脱落し、正常な粘膜は全く
存在しなかった。粘液の産生も認められず、血管の破綻
が予想された。
【００２６】一方キトサンの酢酸溶液を与えたグループ
１では胃粘膜構造が保たれており、粘膜の欠損は認めら
れず、粘液の産生も十分認められた。
１では胃粘膜構造が保たれており、粘膜の欠損は認めら
れず、粘液の産生も十分認められた。
【００２７】考 察 In vitroの研究において、水溶性キトサンが４００μｇ
／ｍｌ以上の濃度でヘリコバクター・ピロリの発育阻止
作用を示す事が実証された。またin vivoの研究におい
てヘリコバクター・ピロリを経口摂取させたスナネズミ
では著しい粘膜欠損が観察されたが、キトサンがヘリコ
バクター・ピロリによる胃病変に対して改善効果を示す
ことが判明した。
／ｍｌ以上の濃度でヘリコバクター・ピロリの発育阻止
作用を示す事が実証された。またin vivoの研究におい
てヘリコバクター・ピロリを経口摂取させたスナネズミ
では著しい粘膜欠損が観察されたが、キトサンがヘリコ
バクター・ピロリによる胃病変に対して改善効果を示す
ことが判明した。
【００２８】一般にヘリコバクター・ピロリはじめ細菌
類は酸性環境下では発育が悪く、in vitroで抗菌活性を
試験する場合、pH７付近で溶解しない被験薬は測定でき
ない。キトサンはモノマーごとにアミノ基を持つ塩基性
多糖体で酸には溶解するが、水、アルカリ溶液には不溶
であり、キトサンの酢酸溶液はpH６以上になるとコロイ
ド状となるため、今回は水溶性キトサンを用いて抗菌活
性を測定した。
類は酸性環境下では発育が悪く、in vitroで抗菌活性を
試験する場合、pH７付近で溶解しない被験薬は測定でき
ない。キトサンはモノマーごとにアミノ基を持つ塩基性
多糖体で酸には溶解するが、水、アルカリ溶液には不溶
であり、キトサンの酢酸溶液はpH６以上になるとコロイ
ド状となるため、今回は水溶性キトサンを用いて抗菌活
性を測定した。
【００２９】キトサンはラットを用いた実験で優れた胃
粘膜保護作用および胃潰瘍治癒促進作用を示すことが報
告されており、今回、in vivo での研究においても、キ
トサンはヘリコバクター・ピロリによる胃粘膜欠損の発
生を強力に防御した。
粘膜保護作用および胃潰瘍治癒促進作用を示すことが報
告されており、今回、in vivo での研究においても、キ
トサンはヘリコバクター・ピロリによる胃粘膜欠損の発
生を強力に防御した。
【００３０】ヘリコバクター・ピロリは胃潰瘍患者の表
層粘液ゲル層や粘膜上皮細胞に生息しており、投与され
たキトサンは胃粘膜を被覆保護し、粘膜局所で、抗菌、
抗潰瘍作用を発揮したものと思われる。
層粘液ゲル層や粘膜上皮細胞に生息しており、投与され
たキトサンは胃粘膜を被覆保護し、粘膜局所で、抗菌、
抗潰瘍作用を発揮したものと思われる。
【００３１】また、粘液ゲル層の下部はアルカリ分泌の
ため中性pHを示し、この部位では高分子のキトサンはコ
ロイド化すると考えられるが、キトサン分解酵素のリゾ
チームにより、中性pHでも溶解する低分子キトサンとな
り、抗潰瘍、抗ヘリコバクター・ピロリ活性を示すと考
えられる。キトサンは現在健康食品としても販売されて
おり、長期間服用しても安全性の面では問題は少ないと
思われ、キトサンの臨床応用が本発明により完成された
と考えられる。
ため中性pHを示し、この部位では高分子のキトサンはコ
ロイド化すると考えられるが、キトサン分解酵素のリゾ
チームにより、中性pHでも溶解する低分子キトサンとな
り、抗潰瘍、抗ヘリコバクター・ピロリ活性を示すと考
えられる。キトサンは現在健康食品としても販売されて
おり、長期間服用しても安全性の面では問題は少ないと
思われ、キトサンの臨床応用が本発明により完成された
と考えられる。
【００３２】
【使用量】ヘリコバクター・ピロリに起因する抗潰瘍剤
としての効果を期待する本発明物質の使用量は成人１日
あたり、１０００ｍｇ以内が使用される。
としての効果を期待する本発明物質の使用量は成人１日
あたり、１０００ｍｇ以内が使用される。
【００３３】
【発明の効果】本発明は水溶性キトサンことに平均分子
量１５，０００の低分子キトサンの乳酸塩であり，酸，
水，アルカリに可溶性を有し、抗ヘリコバクター・ピロ
リ除菌効果を示す。
量１５，０００の低分子キトサンの乳酸塩であり，酸，
水，アルカリに可溶性を有し、抗ヘリコバクター・ピロ
リ除菌効果を示す。
Claims (1)
- 【請求項１】平均分子量１５，０００の低分子キトサン
の乳酸塩で，酸，水，アルカリに可溶性を有する物質か
らなる抗ヘリコバクター・ピロリ剤
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15194698A JPH11322809A (ja) | 1998-05-18 | 1998-05-18 | 抗ヘリコバクター・ピロリ剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15194698A JPH11322809A (ja) | 1998-05-18 | 1998-05-18 | 抗ヘリコバクター・ピロリ剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11322809A true JPH11322809A (ja) | 1999-11-26 |
Family
ID=15529670
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15194698A Pending JPH11322809A (ja) | 1998-05-18 | 1998-05-18 | 抗ヘリコバクター・ピロリ剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH11322809A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003054200A1 (fr) * | 2001-12-11 | 2003-07-03 | Sankyo Lifetech Company, Limited | Chitosanase et utilisation de celle-ci |
| KR20170001703A (ko) * | 2016-12-26 | 2017-01-04 | 가톨릭대학교 산학협력단 | 키토산을 포함하는, 헬리코박터 파이로리 광역동 치료효과 증진용 조성물 |
| CN115369061A (zh) * | 2022-08-24 | 2022-11-22 | 山东博科生物产业有限公司 | 一种选择性幽门螺旋杆菌培养基及其制备方法 |
-
1998
- 1998-05-18 JP JP15194698A patent/JPH11322809A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003054200A1 (fr) * | 2001-12-11 | 2003-07-03 | Sankyo Lifetech Company, Limited | Chitosanase et utilisation de celle-ci |
| KR20170001703A (ko) * | 2016-12-26 | 2017-01-04 | 가톨릭대학교 산학협력단 | 키토산을 포함하는, 헬리코박터 파이로리 광역동 치료효과 증진용 조성물 |
| CN115369061A (zh) * | 2022-08-24 | 2022-11-22 | 山东博科生物产业有限公司 | 一种选择性幽门螺旋杆菌培养基及其制备方法 |
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