JPH1084880A

JPH1084880A - 脂質代謝促進作用を有するリン脂質含有組成物

Info

Publication number: JPH1084880A
Application number: JP8243145A
Authority: JP
Inventors: Shinji Murozaki; 伸二室▲崎▼; Yoshihiro Yamamoto; 佳弘山本; Kotaro Muroyama; 幸太郎室山; Sanae Sumitani; 早苗墨谷; Hiroshi Harada; 宏原田; Yutaka Otani; 豊大谷; Kazuya Ikuta; 一哉幾田
Original assignee: Honen Corp; Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Honen Corp; Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1996-09-13
Filing date: 1996-09-13
Publication date: 1998-04-07

Abstract

(57)【要約】【解決手段】大豆から油脂を製造する工程で得られ
る、もしくは卵黄から得られるホスファチジルコリン、
ホスファチジルエタノールアミン等のリン脂質を有効成
分とする、脂質代謝促進作用を有するリン脂質含有組成
物。当該リン脂質含有組成物を公知の原材料に配合して
飲食物、動物用飼料もしくは医薬製剤となす。【効果】本発明により、副作用の懸念がなく安全な脂
質代謝促進作用を有するリン脂質含有組成物が提供され
る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は大豆または卵黄から得ら
れるリン脂質を有効成分とする脂質代謝促進作用を有す
るリン脂質含有組成物に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、食生活が豊かになったことに伴
い、肥満の増加が大きな問題となっている。また、健康
上の理由のみならず、美容的な目的からダイエットを試
みる人が増えてきている。肥満は主としてエネルギーの
過剰摂取が原因であり、したがって肥満の予防や治療に
は、摂取エネルギーを低減させることが基本となる。し
かし、食事制限などによるダイエットは、エネルギーだ
けでなく必須栄養素も制限されてしまい、栄養障害を引
き起こす危険性があった。

【０００３】これらの問題を解決する技術として、多く
の低カロリー型食品が開発されてきた。すなわち、カロ
リーを低く抑えながら、必要な栄養素を含む食品であ
る。しかしながら、これら低カロリー食品による食事は
空腹感を伴うために、長期間継続することが難しいとい
う欠点があった。また、これらの食品はカロリーを低く
抑えるために、脂肪や糖分の使用を控えたものが多く、
食味的にも満足のいくものではない。さらに、脂肪代替
物や低カロリー甘味料を使用した低カロリー食品もある
が、これらのものが一般に受け入れられているとは言い
がたい。

【０００４】一方、消化吸収や食欲を抑制することによ
るダイエット効果をうたった食品もある。その有効成分
の代表的なものとして、ギムネマ・シルベスタに含まれ
るギムネマ酸やガルシニア・カンボジアに含まれるヒド
ロキシクエン酸などが挙げられる。ギムネマ酸は糖の吸
収抑制作用があることが知られているが、ダイエットに
対する効果についてはまだ十分には解明されていない。
また、ヒドロキシクエン酸は食欲抑制効果や脂肪合成抑
制作用があるとされているが、インスリンやアドレナリ
ンの分泌、ステロイド系ホルモンの代謝等に影響を及ぼ
すことから、子供や妊産婦が摂取することは好ましくな
い。

【０００５】そこで上記従来の問題点を解決する手段と
して、大豆、ゴマ等の油糧種子から得られる糖脂質分画
物またはそれらの濃縮物を肥満予防剤として利用する方
法が提案されている（特開平７―１０７９３９号公
報）。当該公報の実施例によれば、脂肪の半分を当該糖
脂質分画物またはそれらの濃縮物に置き換えた食餌でラ
ットを飼育することで、体脂肪の蓄積が抑制されるとし
ている。しかしながら、この脂肪蓄積抑制効果が、脂肪
の摂取量が半減したことによるものなのか、あるいは当
該糖脂質分画物またはそれらの濃縮物の生理作用に基づ
くものなのか、はっきりとは述べられていない。また、
これはあくまでも体脂肪の蓄積を抑えて肥満を予防する
ことを期待するものであり、体脂肪の代謝を促進させて
肥満を改善・治療するものではない。

【０００６】本発明の課題は、これらの点に鑑みて、カ
ロリー制限を必要とせず、かつ副作用がなく安全に体脂
肪の代謝を促進させて肥満の改善および治療に利用でき
るような、脂質代謝促進作用を有する組成物を実現する
ことにある。

【０００７】

【課題を解決するための手段】上記目的に対し、本発明
者らは種々の植物成分と脂質代謝促進効果との関係につ
いて鋭意研究を重ねた結果、大豆中に含まれるリン脂質
に脂質代謝を促進させる効果のあることを見い出した。
さらに、植物成分ではないが、卵黄中に含まれるリン脂
質にも同様の効果のあることを見い出し、本発明を完成
するに至った。すなわち、本発明は大豆から油脂を製造
する工程で発生するレシチン分に含まれるリン脂質、も
しくは卵黄から得られるリン脂質を有効成分とする脂質
代謝促進作用を有するリン脂質含有組成物である。

【０００８】

【発明の実施の形態】大豆由来のリン脂質としては、大
豆油を製造する工程で発生する粗レシチンの形態のもの
でもよいが、該レシチンをアセトン、メタノール等で処
理した不溶画分が好ましい。また、該レシチンから精製
したホスファチジルコリンやホスファチジルエタノール
アミン単独でもよく、これらと他のリン脂質すなわちホ
スファチジルイノシトールやホスファチジン酸などとの
混合物でもよい。本発明のホスファチジルコリンあるい
はホスファチジルエタノールアミンを用いる場合は、大
豆より得られる粗レシチンをイオン交換カラムクロマト
グラフィー、シリカゲルカラムクロマトグラフィー、薄
層クロマトグラフィー等により分離精製することによっ
て得ることができる。また、ホスファチジルエタノール
アミンは酵素を用いた塩基交換反応によりホスファチジ
ルコリンから合成してもよい。常用名としてホスファチ
ジルコリンをレシチン、ホスファチジルエタノールアミ
ンをケファリンと呼ぶことがあるが、ここでいうレシチ
ンとは、数種類のリン脂質の混合物のことであり、ホス
ファチジルコリンとは区別して用いている。

【０００９】レシチンの構成成分であるリン脂質は、動
物、植物、酵母、カビ類に広く分布している代表的な複
合脂質であることが知られている。本発明者らは大豆由
来のレシチンに含まれるリン脂質が、上記特性を有する
ことを見いだしたことから、種々の動植物由来のリン脂
質について試験した結果、卵黄由来のリン脂質が同じ効
果を示すことを見いだしたものである。卵黄由来のリン
脂質はすでに知られており、したがって市販のものを用
いることができる。

【００１０】レシチンは従来から食品用乳化剤として幅
広く用いられており、安全性については問題のないもの
である。また、レシチンは動脈硬化の原因となる血中の
コレステロールを低下させる等、種々の生理機能がある
ことが知られており、これを脂質代謝促進作用を有する
リン脂質含有組成物として用いることができれば、極め
て有意義なことといえる。

【００１１】

【実施例】以下に実施例を示すが、本発明はこれらに限
られるものではない。粗大豆レシチンの製造例大豆油の製造工程において、原料大豆からへキサン抽出
することにより得られる粗油に対して、２重量％の温水
を加えて攪拌し、水和物を遠心分離によって回収した。
得られたガム状のレシチン水和物を脱水することによっ
て、粗大豆レシチン（アセトン不溶部約６０重量％）を
得た。このようにして得られた粗大豆レシチンを以下の
参考例で使用して、各試料を調製した。

【００１２】参考例１粗大豆レシチンに１０倍容の冷アセトンを加え、乳鉢の
中で十分に粉砕、分散させ、静置した。上澄を捨て、再
び１０倍容の冷アセトンを加えて、同様の操作を２回繰
り返した。アセトン不溶部を回収し、ロータリーエバポ
レーターで残留アセトンを留去してから、減圧下で乾燥
させることにより、粉末状のアセトン不溶部（ＡＹ１）
を得た。

【００１３】参考例２粗大豆レシチンに１０倍容のメタノールを加え、十分に
攪拌したのち、メタノール不溶部を回収した。ロータリ
ーエバポレーターでメタノールを留去したのち、この不
溶部を参考例１と同様の方法でアセトンで処理して粉末
状のアセトン不溶部（ＡＹ２）を得た。

【００１４】参考例３参考例２で得られた粗大豆レシチンメタノール不溶部の
アセトン不溶部をクロロホルムに溶解し、さらにメタノ
ールおよび蒸留水を加えて攪拌し、分液ロートにより下
層部を回収した。ロータリーエバポレーターで残留溶剤
を留去し、減圧下で乾燥させることにより、クロロホル
ム−メタノール可溶部（ＡＹ３）を得た。

【００１５】参考例４リン脂質単独での作用も調べるために、リン脂質の精製
を行った。まず、粗大豆レシチンに５倍容の熱メタノー
ル（６０℃）を加え十分に攪拌したのち、１０℃に冷却
静置し、不溶物を除去した。次に、このメタノール抽出
液を酢酸型の塩基性イオン交換樹脂に通液させ、最初に
溶出するリン脂質画分を回収した。ロータリーエバポレ
ーターで残留溶剤を留去し、減圧下で乾燥させることに
より、純度９７．４％のホスファチジルコリン（ＰＣ）
を得た。

【００１６】参考例５さらに、参考例４で得られたボスファチジルコリンをジ
エチルエーテルに溶解し、高濃度のエタノールアミン塩
酸塩を含むクエン酸緩衝液と混合し、ホスホリパーゼＤ
を加えて常温で激しく攪拌した。反応終了後、しばらく
静置してからジエチルエーテル層を回収し、これを蒸留
水で３回洗浄した。ロータリーエバポレーターで残留エ
ーテルを留去し、減圧下で乾燥させることにより、純度
９６．５％のホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）
を得た。

【００１７】試験例１上記の各参考例で得られたサンプルをクロロホルムに一
定量溶解し、このクロロホルム溶液をサンプル量が５ｍ
ｇになるようにナス型フラスコに入れ、ロータリーエバ
ポレーターを用いてクロロホルムを減圧除去し、サンプ
ルの薄膜を形成させた。その後、窒素を用いてクロロホ
ルムを完全に除去し、リン酸１０ｍＭ、ＨＥＰＥＳ（ヘ
ペス）５ＯｍＭ、ＮａＣｌ１２８ｍＭ、ＫＣｌ４．
７ｍＭ、ＣａＣｌ₂ １．２５ｍＭ、ＭｇＳ０₄ １．２５
ｍＭおよび牛血清アルブミン４．２％からなるＫＲＨ緩
衝液５ｍｌを加え、４５℃で５分間超音波処理して、サ
ンプル濃度１ｍｇ／ｍｌＫＲＨ緩衝液乳化液を調整し
た。更に、このｌｍｇ／ｍｌ乳化液をＫＲＨ緩衝液で希
釈した後、再度同様の方法で乳化を行い、サンプル濃度
０．５ｍｇ／ｍｌおよび０．２５ｍｇ／ｍｌの乳化サン
プルを調整した。

【００１８】３Ｔ３―Ｌ１細胞（ＣＣＬ９２．１）をコ
ラーゲンコート２４ウェル平底プレートに５×１０⁴ 個
／ウェルになるように１０％の牛胎児血清（和光純薬工
業（株）製）、デキサメサゾン０．２５μＭ（和光純薬
工業（株）製）、イソブチルメチルキサンチン０．５ｍ
Ｍ（和光純薬工業（株）製）および５μＭ／ｍｌインシ
ュリン（ＧＩＢＣＯＢＲＬ製）を含むダルベッコ改変
イーグル培地（ＩＣＮ製）で４８時間３７℃、５％炭酸
ガス雰囲気下で培養した。更に、１０％牛胎児血清を含
むダルベッコ改変イーグル培地で７日間培養し、脂肪細
胞へと分化させた。その後吸引によって培地を除去し、
更にリン酸１０ｍＭ、ＮａＣｌ１２８ｍＭ、ＫＣｌ
４．７ｍＭ、ＣａＣｌ₂ １．２５ｍＭおよびＭｇＳＯ₄
１．２５ｍＭからなるＫＲＰ緩衝液で数回洗浄すること
により、試験用脂肪細胞を調製した。その後、各ウェル
にサンプル乳化液（試験群Ａ）、あるいはカフェインを
０．５ｍｇ／ｍ１濃度で含むＫＲＨ緩衝液（対照群Ｂ）
を加え、３７℃、５％炭酸ガス雰囲気下９０分間静置培
養した。また、ＫＲＨ緩衝液のみで培養した場合を盲検
とした。

【００１９】脂質代謝促進活性は、培養終了後の上澄中
に放出されるグリセロール量（ｍｇ／ｄｌ）をトリグリ
セライドＥ−テストワコー（和光純薬工業（株）製）を
用いて測定した。ブランクとして各濃度の試験群Ａ、対
照群Ｂおよび盲検について、グリセロール量（ｍｇ／ｄ
ｌ）を測定し、

【数１】によって求めた値を比活性として、脂質代謝促進活性の
強さを表わす指標とした。

【００２０】表１に示したとおり、ＡＹ１とＡＹ２のｌ
ｍｇ／ｍｌ濃度投与群で、カフェイン０．５ｍｇ／ｍｌ
濃度投与群よりも強い脂質代謝促進活性が認められた。
また、ＡＹ３、ＰＣ、ＰＥにおいてもｌｍｇ／ｍｌ濃度
投与群で、カフェイン０．５ｍｇ／ｍｌと同等の脂質代
謝促進活性が認められた。

【００２１】

【表１】

【表２】

【００２２】試験例卵黄由来のホスファチジルコリン（Egg yolk PC ）お
よびホスファチジルエタノールアミン（Egg yolk PE
）をサンプルとして、試験例１と同様の実験を行っ
た。その結果、表２に示したとおり、ｌｍｇ／ｍｌ濃度
投与群で、いずれもカフェイン０．５ｍｇ／ｍｌ濃度よ
りも強い脂質代謝促進活性が認められた。

【００２３】

【表３】注）Egg yolk PC は和光純薬工業（株）製およびEgg yolk PE はフナコシ（株）製。

【００２４】試験例３食餌性肥満マウスのカロリー摂取を制限し、体脂肪の分
解・利用を必要とする状態にすると、体脂肪の分解・利
用の促進が肥満を改善する。このような条件下で、本発
明のリン脂質の作用を調べた。すなわち、５週齢の雄性
ＫＫマウスを使用し、表３記載の合成飼料を自由摂取さ
せた。１週間の予備飼育の後、高カロリー食で２週間飼
育し肥満にした後、さらに低カロリー食、あるいは、低
カロリー食に試験サンプルを加えた飼料で２週間飼育し
体脂肪を利用させた。飼育後、採血及び解剖を行った。
表３に示す低カロリー食を摂取させた群を対照群とし、
低カロリー食に試験サンプルを加えたものを摂取させた
群を試験群とした。

【００２５】

【表４】１）ミネラルミックスおよびビタミンミックスはオリエンタル酵母工業（株）製。

【００２６】低カロリー食にＰＣ、ＰＥをそれぞれ０．
０４重量％加えたもので試験を行った。その結果、摂取
カロリー量は両試験群とも対照群と比較して、高値傾向
を示したが、有意差はみられなかった。一方、皮下脂
肪、腎周囲および後腹膜脂肪、副睾丸脂肪、および腸間
膜脂肪組織の４脂肪組織合計重量において、対照群より
低値傾向を示した（表４参照）。また、低カロリー食に
ＡＹ３を０．０４重量％加えたもので試験を行った結
果、摂取カロリー量には差が認められないにもかかわら
ず、皮下脂肪、腎周囲および後腹膜脂肪、副睾丸脂肪組
織重量、および４脂肪組織合計重量において、対照群よ
り低値傾向を示し、腸間膜脂肪組織重量においては、対
照群に比べて有意に低値を示した（表５参照）。このよ
うに、ＰＣ、ＰＥ、ＡＹ３は体脂肪の分解・利用を促進
することで、肥満改善作用を示した。

【００２７】

【表５】注）各値は平均値±標準偏差で示した。１）（皮下＋腎周囲・後腹膜＋副睾丸＋腸間膜）脂肪組織重量。

【００２８】

【表６】

【表７】注）各値は平均値±標準偏差で示した。１）（皮下＋腎周囲・後腹膜＋副睾丸＋腸間膜）脂肪組織重量。２）危険率５％以下で、対照群と有意な差がある。

【００２９】上記実施例の中で、粗大豆レシチンについ
ては、油分を多く含むために正確な測定データが得られ
なかったことから、実験結果は記載していないが、粗大
豆レシチンのリン脂質組成はＡＹ１と基本的に同―であ
り、その違いは油分の含量だけであることから、粗大豆
レシチンにも脂質代謝促進作用のあることが十分に期待
される。

【００３０】

【発明の効果】以上説明したように、本発明のリン脂質
を有効成分とする脂質代謝促進作用を有するリン脂質含
有組成物は、脂肪細胞における脂肪分解を促進させる効
果を有し、食品として摂取することにより、肥満を予防
および治療する効果が期待される。当該脂質代謝促進作
用を有するリン脂質含有組成物は、公知の原材料に配合
して飲食物、動物用飼料もしくは医薬製剤となすことが
でき、カロリー制限を必要とせず、かつ副作用がなく安
全に使用できる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 31/685 ＡＤＮＡ６１Ｋ 31/685 ＡＤＮ (72)発明者室山幸太郎兵庫県伊丹市鋳物師２丁目69 メゾン・ド・オーク303号 (72)発明者墨谷早苗兵庫県神戸市東灘区住吉山手３−９−20 (72)発明者原田宏静岡県清水市追分１丁目７−40 (72)発明者大谷豊静岡県磐田郡浅羽町松原1055番地コットンフィールドＡ202号 (72)発明者幾田一哉静岡県清水市追分１丁目７−40

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】大豆から油脂を製造する工程で得られる
粗大豆レシチンに含まれるリン脂質を有効成分とする脂
質代謝促進作用を有するリン脂質含有組成物。
【請求項２】粗大豆レシチンをアセトンで処理した不
溶画分に含まれるリン脂質を有効成分とする請求項１に
記載のリン脂質含有組成物。
【請求項３】粗大豆レシチンをメタノールで処理した
不溶画分に含まれるリン脂質を有効成分とする請求項１
に記載のリン脂質含有組成物。
【請求項４】リン脂質がホスファチジルコリンである
請求項１ないし３のいずれか１項に記載のリン脂質含有
組成物。
【請求項５】リン脂質がホスファチジルエタノールア
ミンである請求項１ないし３のいずれか１項に記載のリ
ン脂質含有組成物。
【請求項６】卵黄から得られるリン脂質を有効成分と
する脂質代謝促進作用を有するリン脂質含有組成物。
【請求項７】リン脂質がホスファチジルコリンである
請求項６に記載のリン脂質含有組成物。
【請求項８】リン脂質がホスファチジルエタノールア
ミンである請求項６に記載のリン脂質含有組成物。