JPH10327878A - 腫瘍壊死因子関連のレセプター、ｔｒ６ - Google Patents
腫瘍壊死因子関連のレセプター、ｔｒ６Info
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- JPH10327878A JPH10327878A JP10065256A JP6525698A JPH10327878A JP H10327878 A JPH10327878 A JP H10327878A JP 10065256 A JP10065256 A JP 10065256A JP 6525698 A JP6525698 A JP 6525698A JP H10327878 A JPH10327878 A JP H10327878A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 慢性および急性炎症、関節炎、敗血症、自己
免疫疾患、移植片拒絶反応、移植片対宿主疾患、感染、
卒中、虚血症、成人呼吸窮迫症候群、再狭窄、脳損傷、
ＡＩＤＳ、骨疾患、癌、アテローム性動脈硬化症および
アルツハイマー病を含め、機能不全または疾患の予防、
改善または矯正において役割を果たしうる、システイン
プロテアーゼのメンバーを同定および特徴付ける必要が
ある。 【解決手段】 本発明は、配列番号２のＴＲ６のポリペ
プチドをコードするヌクレオチド配列とその全長にわた
って少なくとも８０％の同一性を有するヌクレオチド配
列、またはそのヌクレオチド配列に相補的なヌクレオチ
ド配列を有してなる単離されたポリヌクレオチドを提供
するものである。
免疫疾患、移植片拒絶反応、移植片対宿主疾患、感染、
卒中、虚血症、成人呼吸窮迫症候群、再狭窄、脳損傷、
ＡＩＤＳ、骨疾患、癌、アテローム性動脈硬化症および
アルツハイマー病を含め、機能不全または疾患の予防、
改善または矯正において役割を果たしうる、システイン
プロテアーゼのメンバーを同定および特徴付ける必要が
ある。 【解決手段】 本発明は、配列番号２のＴＲ６のポリペ
プチドをコードするヌクレオチド配列とその全長にわた
って少なくとも８０％の同一性を有するヌクレオチド配
列、またはそのヌクレオチド配列に相補的なヌクレオチ
ド配列を有してなる単離されたポリヌクレオチドを提供
するものである。
Description
【０００１】本願は、１９９７年３月１４日出願の米国
仮出願第６０／０４１２３０号の権利に基づく、１９９
７年５月９日出願の米国特許出願第０８／８５３６８４
号の一部継続出願である。
仮出願第６０／０４１２３０号の権利に基づく、１９９
７年５月９日出願の米国特許出願第０８／８５３６８４
号の一部継続出願である。
【０００２】
【発明の属する技術分野】本発明は、新たに同定された
ポリヌクレオチド、それによりコードされるポリペプチ
ド、このようなポリヌクレオチドおよびポリペプチドの
使用およびその生成に関する。さらに詳しくは、本発明
のポリヌクレオチドおよびポリペプチドは腫瘍壊死因子
関連のファミリー（以下、ＴＲ６という）に関する。本
発明はまた、かかるポリヌクレオチドおよびポリペプチ
ドの作用を阻害または活性化することに関する。
ポリヌクレオチド、それによりコードされるポリペプチ
ド、このようなポリヌクレオチドおよびポリペプチドの
使用およびその生成に関する。さらに詳しくは、本発明
のポリヌクレオチドおよびポリペプチドは腫瘍壊死因子
関連のファミリー（以下、ＴＲ６という）に関する。本
発明はまた、かかるポリヌクレオチドおよびポリペプチ
ドの作用を阻害または活性化することに関する。
【０００３】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】多く
の生物学的作用、例えば、特定の刺激および自然の生物
学的プロセスに対する応答は、サイトカインなどの因子
により制御される。サイトカインの多くは、レセプター
を拘束し、細胞内応答を生じさせることにより、レセプ
ターを介して作用する。例えば、腫瘍壊死因子（ＴＮ
Ｆ）αおよびβは、ＴＮＦレセプターを介して作用し、
感染ならびにショックおよび炎症疾患の誘発に対する防
御を含め、多くの生物学的プロセスを調節するサイトカ
インである。ＴＮＦ分子は、「ＴＮＦ−リガンド」超科
に属し、そのレセプターまたはカウンターリガンド、す
なわち、「ＴＮＦ−レセプター」超科と一緒になって作
用する。これまで、９種のＴＮＦ−リガンド超科が同定
され、１０種のＴＮＦ−レセプター超科が特徴付けられ
ている。
の生物学的作用、例えば、特定の刺激および自然の生物
学的プロセスに対する応答は、サイトカインなどの因子
により制御される。サイトカインの多くは、レセプター
を拘束し、細胞内応答を生じさせることにより、レセプ
ターを介して作用する。例えば、腫瘍壊死因子（ＴＮ
Ｆ）αおよびβは、ＴＮＦレセプターを介して作用し、
感染ならびにショックおよび炎症疾患の誘発に対する防
御を含め、多くの生物学的プロセスを調節するサイトカ
インである。ＴＮＦ分子は、「ＴＮＦ−リガンド」超科
に属し、そのレセプターまたはカウンターリガンド、す
なわち、「ＴＮＦ−レセプター」超科と一緒になって作
用する。これまで、９種のＴＮＦ−リガンド超科が同定
され、１０種のＴＮＦ−レセプター超科が特徴付けられ
ている。
【０００４】そのリガンドには、ＴＮＦ−α、リンホト
キシン−α（ＬＴ−α、ＴＮＦ−βとしても知られてい
る）、ＬＴ−β（ヘテロトリマーＬＴ−α２−β複合体
中で見つけられた）、ＦａｓＬ、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ２７
Ｌ、ＣＤ３０Ｌ、４−１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌおよび神経
生長因子（ＮＧＦ）が含まれる。ＴＮＦレセプターの超
科は、ｐ５５ＴＮＦレセプター、ｐ７５ＴＮＦレセプタ
ー、ＴＮＦレセプター関連タンパク質、ＦＡＳ抗原また
はＡＰＯ−１、ＣＤ４０、ＣＤ２７、ＣＤ３０、４−１
ＢＢ、ＯＸ４０、低親和性ｐ７５およびＮＧＦ−レセプ
ターを包含する（Meager, A.、Biologicals, ２２：２
９１−２９５（１９９４））。ＴＮＦ−リガンド超科の
多くは活性化Ｔ−細胞により発現され、それはそのＴＮ
Ｆ−リガンド超科が細胞個体発生および機能の根底にあ
る他の細胞型とのＴ−細胞相互作用に必要であることを
意味する（Meager, A..、前掲）。
キシン−α（ＬＴ−α、ＴＮＦ−βとしても知られてい
る）、ＬＴ−β（ヘテロトリマーＬＴ−α２−β複合体
中で見つけられた）、ＦａｓＬ、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ２７
Ｌ、ＣＤ３０Ｌ、４−１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌおよび神経
生長因子（ＮＧＦ）が含まれる。ＴＮＦレセプターの超
科は、ｐ５５ＴＮＦレセプター、ｐ７５ＴＮＦレセプタ
ー、ＴＮＦレセプター関連タンパク質、ＦＡＳ抗原また
はＡＰＯ−１、ＣＤ４０、ＣＤ２７、ＣＤ３０、４−１
ＢＢ、ＯＸ４０、低親和性ｐ７５およびＮＧＦ−レセプ
ターを包含する（Meager, A.、Biologicals, ２２：２
９１−２９５（１９９４））。ＴＮＦ−リガンド超科の
多くは活性化Ｔ−細胞により発現され、それはそのＴＮ
Ｆ−リガンド超科が細胞個体発生および機能の根底にあ
る他の細胞型とのＴ−細胞相互作用に必要であることを
意味する（Meager, A..、前掲）。
【０００５】これらタンパク質の発現を破壊する変異体
を同定かつ形成することで、ＴＮＦレセプター科の数種
のレセプターの必須機能が十分に洞察された。例えば、
ＦＡＳ抗原およびそのリガンドで自然に起こる変異は、
プログラムされた細胞死の機能不全に影響を及ぼすであ
ろう、リンパ増殖性疾患を引き起こす（Watanabe−Fuku
naga, R.ら、Nature ３５６：３１４（１９９２））。
ＣＤ４０リガンドの変異は、不完全なＴ−細胞依存性Ｂ
−細胞活性化を意味する、血漿中の高レベルのイムノグ
ロブリンＭおよび低レベルのイムノグロブリンにより特
徴付けられるＸ−関連の免疫不全症状を引き起こす（Al
len, R.C.ら、Science ２５９：９９０（１９９
３））。低親和性神経生長因子レセプターの標的とする
変異は、末梢構造の不完全な感覚イノベーションにより
特徴付けられる障害をもたらす（Lee, K.F.ら、Cell ６
９：７３７（１９９２））
を同定かつ形成することで、ＴＮＦレセプター科の数種
のレセプターの必須機能が十分に洞察された。例えば、
ＦＡＳ抗原およびそのリガンドで自然に起こる変異は、
プログラムされた細胞死の機能不全に影響を及ぼすであ
ろう、リンパ増殖性疾患を引き起こす（Watanabe−Fuku
naga, R.ら、Nature ３５６：３１４（１９９２））。
ＣＤ４０リガンドの変異は、不完全なＴ−細胞依存性Ｂ
−細胞活性化を意味する、血漿中の高レベルのイムノグ
ロブリンＭおよび低レベルのイムノグロブリンにより特
徴付けられるＸ−関連の免疫不全症状を引き起こす（Al
len, R.C.ら、Science ２５９：９９０（１９９
３））。低親和性神経生長因子レセプターの標的とする
変異は、末梢構造の不完全な感覚イノベーションにより
特徴付けられる障害をもたらす（Lee, K.F.ら、Cell ６
９：７３７（１９９２））
【０００６】ＴＮＦおよびＬＴ−αは２種のＴＮＦレセ
プター（５５−および７５−ｋｄＴＮＦレセプター）に
結合する能力を有する。ＴＮＦおよびＬＴ−αにより惹
起され、そのレセプターを介して作用する多数の生物学
的作用は、移植腫瘍の出血性壊死、細胞毒性、エンドト
キシンショックにおける役割、炎症、免疫調節、増殖お
よび抗ウイルス性応答、ならびに電離放射線の有害な効
果に対する防御を包含する。ＴＮＦおよびＬＴ−αは、
エンドトキシンショック、脳性マラリア、腫瘍、自己免
疫疾患、ＡＩＤＳおよび移植片−宿主拒絶反応を含め、
広範囲の疾患の発生病理に関与している（Beutler, B.
およびVon Huffel, C.、Science ２６４：６６７−６６
８（１９９４））。ｐ５５レセプターの変異は微生物感
染に対する疑いを増加させる。
プター（５５−および７５−ｋｄＴＮＦレセプター）に
結合する能力を有する。ＴＮＦおよびＬＴ−αにより惹
起され、そのレセプターを介して作用する多数の生物学
的作用は、移植腫瘍の出血性壊死、細胞毒性、エンドト
キシンショックにおける役割、炎症、免疫調節、増殖お
よび抗ウイルス性応答、ならびに電離放射線の有害な効
果に対する防御を包含する。ＴＮＦおよびＬＴ−αは、
エンドトキシンショック、脳性マラリア、腫瘍、自己免
疫疾患、ＡＩＤＳおよび移植片−宿主拒絶反応を含め、
広範囲の疾患の発生病理に関与している（Beutler, B.
およびVon Huffel, C.、Science ２６４：６６７−６６
８（１９９４））。ｐ５５レセプターの変異は微生物感
染に対する疑いを増加させる。
【０００７】その上、ＴＮＦＲ１（Ｐ５５）およびＦａ
ｓのＣ−末端付近にある約８０個のアミノ酸のドメイン
は、プログラムされた細胞死についてのシグナルを変換
するのに関与している「死ドメイン」である報告されて
いる（Tartagliaら、Cell ７４：８４５（１９９
３））。ＴＮＦ科リガンドおよびＴＮＦ科レセプターの
作用は、哺乳動物系の生物学的プロセスにおいて、変化
し、正常および異常な両方の多数の機能に影響を及ぼ
す。したがって、正常および疾患状態にて、生物学的活
性に影響を及ぼすレセプターおよびリガンドを同定し、
かつ特徴付ける必要があるのは明らかである。特にＴＮ
Ｆレセプター科の新規なメンバーを単離し、特徴付ける
必要がある。
ｓのＣ−末端付近にある約８０個のアミノ酸のドメイン
は、プログラムされた細胞死についてのシグナルを変換
するのに関与している「死ドメイン」である報告されて
いる（Tartagliaら、Cell ７４：８４５（１９９
３））。ＴＮＦ科リガンドおよびＴＮＦ科レセプターの
作用は、哺乳動物系の生物学的プロセスにおいて、変化
し、正常および異常な両方の多数の機能に影響を及ぼ
す。したがって、正常および疾患状態にて、生物学的活
性に影響を及ぼすレセプターおよびリガンドを同定し、
かつ特徴付ける必要があるのは明らかである。特にＴＮ
Ｆレセプター科の新規なメンバーを単離し、特徴付ける
必要がある。
【０００８】これは、これらレセプターが治療標的とし
て確立され、かつ立証された歴史を有することを示して
いる。限定するものではないが、慢性および急性炎症、
関節炎、敗血症、自己免疫疾患（例えば、炎症性腸疾
患、乾癬）、移植片拒絶反応、移植片対宿主疾患、感
染、卒中、虚血症、急性呼吸疾患症候群、再狭窄、脳損
傷、ＡＩＤＳ、骨疾患、癌（例えば、リンパ増殖性障
害）、アテローム性動脈硬化症およびアルツハイマー病
を含め、機能不全または疾患の予防、改善または矯正に
おいて役割を果たしうる、さらなるレセプターを同定お
よび特徴付ける必要があるのは明らかである。
て確立され、かつ立証された歴史を有することを示して
いる。限定するものではないが、慢性および急性炎症、
関節炎、敗血症、自己免疫疾患（例えば、炎症性腸疾
患、乾癬）、移植片拒絶反応、移植片対宿主疾患、感
染、卒中、虚血症、急性呼吸疾患症候群、再狭窄、脳損
傷、ＡＩＤＳ、骨疾患、癌（例えば、リンパ増殖性障
害）、アテローム性動脈硬化症およびアルツハイマー病
を含め、機能不全または疾患の予防、改善または矯正に
おいて役割を果たしうる、さらなるレセプターを同定お
よび特徴付ける必要があるのは明らかである。
【０００９】
【課題を解決するための手段】一の態様において、本発
明はＴＲ６のポリペプチドおよび組換え材料ならびにそ
の製法に関する。本発明の別の態様は、そのようなＴＲ
６のポリペプチドおよびポリヌクレオチドを用いる方法
に関する。かかる使用は、とりわけ、慢性および急性炎
症、関節炎、敗血症、自己免疫疾患（例えば、炎症性腸
疾患、乾癬）、移植片拒絶反応、移植片対宿主疾患、感
染、卒中、虚血症、急性呼吸疾患症候群、再狭窄、脳損
傷、ＡＩＤＳ、骨疾患、癌（例えば、リンパ増殖性障
害）、アテローム性動脈硬化症およびアルツハイマー病
の治療を包含する。さらに別の態様において、本発明
は、該発明により得られる材料を用いてアゴニストおよ
びアンタゴニストを同定する方法、およびＴＲ６の平衡
異常に付随する症状をその同定した化合物を用いて治療
することに関する。本発明のさらに別の態様は不適当な
ＴＲ６活性またはレベルに伴う疾患を検出するための診
断アッセイに関する。
明はＴＲ６のポリペプチドおよび組換え材料ならびにそ
の製法に関する。本発明の別の態様は、そのようなＴＲ
６のポリペプチドおよびポリヌクレオチドを用いる方法
に関する。かかる使用は、とりわけ、慢性および急性炎
症、関節炎、敗血症、自己免疫疾患（例えば、炎症性腸
疾患、乾癬）、移植片拒絶反応、移植片対宿主疾患、感
染、卒中、虚血症、急性呼吸疾患症候群、再狭窄、脳損
傷、ＡＩＤＳ、骨疾患、癌（例えば、リンパ増殖性障
害）、アテローム性動脈硬化症およびアルツハイマー病
の治療を包含する。さらに別の態様において、本発明
は、該発明により得られる材料を用いてアゴニストおよ
びアンタゴニストを同定する方法、およびＴＲ６の平衡
異常に付随する症状をその同定した化合物を用いて治療
することに関する。本発明のさらに別の態様は不適当な
ＴＲ６活性またはレベルに伴う疾患を検出するための診
断アッセイに関する。
【００１０】
定義 以下の定義は、本明細書で汎用する用語の理解を容易に
するためのものである。「ＴＲ６」は、とりわけ、一般
に、配列番号2に示されるアミノ酸配列を有するポリペ
プチドまたはその対立遺伝子変種をいう。「ＴＲ６の活
性」または「ＴＲ６の生物学的活性」とは、類似の活性
または改良された活性あるいは望ましくない副作用の減
じたこれらの活性を含め、該ＴＲ６の代謝的または生理
学的機能をいう。該ＴＲ６の抗原的および免疫原的活性
も含まれる。
するためのものである。「ＴＲ６」は、とりわけ、一般
に、配列番号2に示されるアミノ酸配列を有するポリペ
プチドまたはその対立遺伝子変種をいう。「ＴＲ６の活
性」または「ＴＲ６の生物学的活性」とは、類似の活性
または改良された活性あるいは望ましくない副作用の減
じたこれらの活性を含め、該ＴＲ６の代謝的または生理
学的機能をいう。該ＴＲ６の抗原的および免疫原的活性
も含まれる。
【００１１】「ＴＲ６遺伝子」とは、配列番号１に示さ
れるヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドまたは
その対立遺伝子変種および／またはそれらの相補物をい
う。本明細書で用いる「抗体」は、ポリクローナルおよ
びモノクローナル抗体、キメラ、１本鎖、およびヒト化
抗体、ならびにＦａｂの産物または他の免疫グロブリン
発現ライブラリーを含め、Ｆａｂフラグメントを包含す
る。「単離」とは、「人間の手により」天然の状態から
変えられたことを意味する。「単離」された組成物また
は物質が天然に存在する場合、その本来の環境から変え
られるかもしくは取り除かれ、またはその両方がなされ
たことを意味する。例えば、天然の状態で生存動物に存
在するポリヌクレオチドまたはポリペプチドは「単離」
されていないが、その天然状態で共存する物質から分離
されているその同一のポリヌクレオチドまたはポリペプ
チドは、本明細書に用いる用語である、「単離」がなさ
れている。
れるヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドまたは
その対立遺伝子変種および／またはそれらの相補物をい
う。本明細書で用いる「抗体」は、ポリクローナルおよ
びモノクローナル抗体、キメラ、１本鎖、およびヒト化
抗体、ならびにＦａｂの産物または他の免疫グロブリン
発現ライブラリーを含め、Ｆａｂフラグメントを包含す
る。「単離」とは、「人間の手により」天然の状態から
変えられたことを意味する。「単離」された組成物また
は物質が天然に存在する場合、その本来の環境から変え
られるかもしくは取り除かれ、またはその両方がなされ
たことを意味する。例えば、天然の状態で生存動物に存
在するポリヌクレオチドまたはポリペプチドは「単離」
されていないが、その天然状態で共存する物質から分離
されているその同一のポリヌクレオチドまたはポリペプ
チドは、本明細書に用いる用語である、「単離」がなさ
れている。
【００１２】「ポリヌクレオチド」とは、一般に、修飾
されていないＲＮＡもしくはＤＮＡ、または修飾された
ＲＮＡもしくはＤＮＡであってよい、いずれかのポリリ
ボヌクレオチドまたはポリデオキシリボヌクレオチドを
いう。「ポリヌクレオチド」は、一本鎖および二本鎖Ｄ
ＮＡ、一本鎖および二本鎖領域の混合物であるＤＮＡ、
一本鎖および二本鎖ＲＮＡ、および一本鎖および二本鎖
領域の混合物であるＲＮＡ、一本鎖もしくはより典型的
には二本鎖、または一本鎖および二本鎖領域の混合物で
あってもよいＤＮＡおよびＲＮＡを含むハイブリッド分
子を包含するが、これに限定されるものではない。加え
て、「ポリヌクレオチド」は、ＲＮＡもしくはＤＮＡま
たはＲＮＡとＤＮＡの両方を含む三本鎖領域をいう。ポ
リヌクレオチドなる用語はまた、一つまたはそれ以上の
修飾された塩基を含有するＤＮＡまたはＲＮＡ、ならび
に安定性またはその他の理由で修飾された骨格を有する
ＤＮＡまたはＲＮＡを包含する。「修飾された」塩基
は、例えば、トリチル化された塩基およびイノシンなど
の通常でない塩基を包含する。種々の修飾がＤＮＡおよ
びＲＮＡに対してなされている。よって、「ポリヌクレ
オチド」は、典型的には天然において見いだされるよう
な化学的、酵素的または代謝的に修飾された形態のポリ
ヌクレオチド、ならびにウイルスおよび細胞に特徴的な
化学的形態のＤＮＡおよびＲＮＡを包含する。また、
「ポリヌクレオチド」は、しばしばオリゴヌクレオチド
と称される比較的短いポリヌクレオチドも包含する。
されていないＲＮＡもしくはＤＮＡ、または修飾された
ＲＮＡもしくはＤＮＡであってよい、いずれかのポリリ
ボヌクレオチドまたはポリデオキシリボヌクレオチドを
いう。「ポリヌクレオチド」は、一本鎖および二本鎖Ｄ
ＮＡ、一本鎖および二本鎖領域の混合物であるＤＮＡ、
一本鎖および二本鎖ＲＮＡ、および一本鎖および二本鎖
領域の混合物であるＲＮＡ、一本鎖もしくはより典型的
には二本鎖、または一本鎖および二本鎖領域の混合物で
あってもよいＤＮＡおよびＲＮＡを含むハイブリッド分
子を包含するが、これに限定されるものではない。加え
て、「ポリヌクレオチド」は、ＲＮＡもしくはＤＮＡま
たはＲＮＡとＤＮＡの両方を含む三本鎖領域をいう。ポ
リヌクレオチドなる用語はまた、一つまたはそれ以上の
修飾された塩基を含有するＤＮＡまたはＲＮＡ、ならび
に安定性またはその他の理由で修飾された骨格を有する
ＤＮＡまたはＲＮＡを包含する。「修飾された」塩基
は、例えば、トリチル化された塩基およびイノシンなど
の通常でない塩基を包含する。種々の修飾がＤＮＡおよ
びＲＮＡに対してなされている。よって、「ポリヌクレ
オチド」は、典型的には天然において見いだされるよう
な化学的、酵素的または代謝的に修飾された形態のポリ
ヌクレオチド、ならびにウイルスおよび細胞に特徴的な
化学的形態のＤＮＡおよびＲＮＡを包含する。また、
「ポリヌクレオチド」は、しばしばオリゴヌクレオチド
と称される比較的短いポリヌクレオチドも包含する。
【００１３】「ポリペプチド」は、ペプチド結合または
修飾されたペプチド結合、すなわち、ペプチドアイソス
ターにより互いに結合している２個またはそれ以上のア
ミノ酸を有してなるペプチドまたはタンパク質をいう。
「ポリペプチド」は、通常、ペプチド、オリゴペプチド
またはオリゴマーと称される短鎖、およびタンパク質と
称される長鎖の両方をいう。ポリペプチドは遺伝子によ
りコードされた２０種のアミノ酸とは異なるアミノ酸を
含有してもよい。「ポリペプチド」は、翻訳後プロセッ
シングなどの自然の工程により、または当業者に周知の
化学修飾技法により修飾されたアミノ酸配列を含有す
る。このような修飾は基本テキストにて、およびさらに
詳細な研究論文にて、ならびに膨大な研究文献において
詳しく記載されている。修飾は、ペプチド骨格、アミノ
酸側鎖およびアミノまたはカルボキシル末端を含め、ポ
リペプチドのどこででも起こり得る。同一の型の修飾が
所定のポリペプチドの幾つかの部位で、同一または異な
る程度で存在し得ることは理解されよう。また、所定の
ポリペプチドは多くの型の修飾を含んでいてもよい。ポ
リペプチドはユビキチネーションの結果として分岐して
いてもよく、分岐しているかまたはしていない、環状で
あってもよい。環状、分岐および分岐した環状ポリペプ
チドは翻訳後の天然プロセスにより生じたものであって
もよく、または合成法により製造されたものであっても
よい。修飾は、アセチル化、アシル化、ＡＤＰ−リボシ
ル化、アミド化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有
結合、ヌクレオチドまたはヌクレオチド誘導体の共有結
合、脂質または脂質誘導体の共有結合、ホスホチジルイ
ノシトールの共有結合、交差架橋、環化、ジスルフィド
結合形成、脱メチル化、交差架橋共有結合形成、システ
イン形成、ピログルタメート形成、ホルミル化、ガンマ
−カルボキシル化、糖鎖形成、ＧＰＩアンカー形成、ヒ
ドロキシル化、ヨード化、メチル化、ミリストイル化、
酸化、タンパク質分解的プロセッシング、リン酸化、プ
レニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫酸化、アルギニ
ル化などのトランスファーＲＮＡ媒介のタンパク質への
アミノ酸付加、ならびにユビキチネーションを包含す
る。例えば、PROTEINS‐STRUCTURE ANDMOLECULAR PROPE
RTIES、第２版、T.E.Creighton、W.H.Freeman and Comp
any、New York（1993）およびPOSTTRANSLATIONAL COVAL
ENT MODIFICATION OF PROTEINS、B.C.Johnson編、Acade
mic Press、New York（1983）のWold,F.、Posttranslat
ional Protein Modifications：Perspectives and Pros
pects、1〜12頁；Seifterら、“Analysis for protein
modifications and nonprotein cofactors”、Meth.Enz
ymol. 182：626-646（1990）およびRattanら、“Protei
n Synthesis：Posttranslational Modifications and A
ging"、Ann.N.Y.Acad.Sci.663：48-62（1992）を参照の
こと。
修飾されたペプチド結合、すなわち、ペプチドアイソス
ターにより互いに結合している２個またはそれ以上のア
ミノ酸を有してなるペプチドまたはタンパク質をいう。
「ポリペプチド」は、通常、ペプチド、オリゴペプチド
またはオリゴマーと称される短鎖、およびタンパク質と
称される長鎖の両方をいう。ポリペプチドは遺伝子によ
りコードされた２０種のアミノ酸とは異なるアミノ酸を
含有してもよい。「ポリペプチド」は、翻訳後プロセッ
シングなどの自然の工程により、または当業者に周知の
化学修飾技法により修飾されたアミノ酸配列を含有す
る。このような修飾は基本テキストにて、およびさらに
詳細な研究論文にて、ならびに膨大な研究文献において
詳しく記載されている。修飾は、ペプチド骨格、アミノ
酸側鎖およびアミノまたはカルボキシル末端を含め、ポ
リペプチドのどこででも起こり得る。同一の型の修飾が
所定のポリペプチドの幾つかの部位で、同一または異な
る程度で存在し得ることは理解されよう。また、所定の
ポリペプチドは多くの型の修飾を含んでいてもよい。ポ
リペプチドはユビキチネーションの結果として分岐して
いてもよく、分岐しているかまたはしていない、環状で
あってもよい。環状、分岐および分岐した環状ポリペプ
チドは翻訳後の天然プロセスにより生じたものであって
もよく、または合成法により製造されたものであっても
よい。修飾は、アセチル化、アシル化、ＡＤＰ−リボシ
ル化、アミド化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有
結合、ヌクレオチドまたはヌクレオチド誘導体の共有結
合、脂質または脂質誘導体の共有結合、ホスホチジルイ
ノシトールの共有結合、交差架橋、環化、ジスルフィド
結合形成、脱メチル化、交差架橋共有結合形成、システ
イン形成、ピログルタメート形成、ホルミル化、ガンマ
−カルボキシル化、糖鎖形成、ＧＰＩアンカー形成、ヒ
ドロキシル化、ヨード化、メチル化、ミリストイル化、
酸化、タンパク質分解的プロセッシング、リン酸化、プ
レニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫酸化、アルギニ
ル化などのトランスファーＲＮＡ媒介のタンパク質への
アミノ酸付加、ならびにユビキチネーションを包含す
る。例えば、PROTEINS‐STRUCTURE ANDMOLECULAR PROPE
RTIES、第２版、T.E.Creighton、W.H.Freeman and Comp
any、New York（1993）およびPOSTTRANSLATIONAL COVAL
ENT MODIFICATION OF PROTEINS、B.C.Johnson編、Acade
mic Press、New York（1983）のWold,F.、Posttranslat
ional Protein Modifications：Perspectives and Pros
pects、1〜12頁；Seifterら、“Analysis for protein
modifications and nonprotein cofactors”、Meth.Enz
ymol. 182：626-646（1990）およびRattanら、“Protei
n Synthesis：Posttranslational Modifications and A
ging"、Ann.N.Y.Acad.Sci.663：48-62（1992）を参照の
こと。
【００１４】本明細書で用いる「変種」なる用語は、各
々、対照ポリヌクレオチドまたはポリペプチドとは異な
るが、本質的な特性は保持している、ポリヌクレオチド
またはポリペプチドである。典型的なポリヌクレオチド
の変種は、別の対照ポリヌクレオチドとはヌクレオチド
配列が異なる。変種のヌクレオチド配列における変化
は、対照ポリヌクレオチドによりコードされるポリペプ
チドのアミノ酸配列と変わっていてもよく、変わってい
なくてもよい。ヌクレオチドの変化は、後記するよう
に、対照配列によりコードされるポリペプチドにおいて
アミノ酸置換、付加、欠失、融合および末端切断をもた
らしうる。典型的なポリペプチドの変種は、別の対照ポ
リペプチドとはアミノ酸配列が異なる。一般に、差異
は、対照ポリペプチドおよび変種の配列が、全体的に極
めて類似しており、多くの領域で同一であるように限定
される。変種および対照ポリペプチドは、１またはそれ
以上の置換、付加、欠失のいずれかの組み合わせによ
り、アミノ酸配列にて異なっていてもよい。置換または
挿入されたアミノ酸残基は、遺伝暗号によりコードされ
たものであってもなくてもよい。ポリヌクレオチドまた
はポリペプチドの変種は、対立遺伝子変種のような天然
物であってもよく、または天然に発生することが知られ
ていない変種であってもよい。ポリヌクレオチドおよび
ポリペプチドの天然に生じない変種は、突然変異誘発技
術により、または直接的合成により製造できる。
々、対照ポリヌクレオチドまたはポリペプチドとは異な
るが、本質的な特性は保持している、ポリヌクレオチド
またはポリペプチドである。典型的なポリヌクレオチド
の変種は、別の対照ポリヌクレオチドとはヌクレオチド
配列が異なる。変種のヌクレオチド配列における変化
は、対照ポリヌクレオチドによりコードされるポリペプ
チドのアミノ酸配列と変わっていてもよく、変わってい
なくてもよい。ヌクレオチドの変化は、後記するよう
に、対照配列によりコードされるポリペプチドにおいて
アミノ酸置換、付加、欠失、融合および末端切断をもた
らしうる。典型的なポリペプチドの変種は、別の対照ポ
リペプチドとはアミノ酸配列が異なる。一般に、差異
は、対照ポリペプチドおよび変種の配列が、全体的に極
めて類似しており、多くの領域で同一であるように限定
される。変種および対照ポリペプチドは、１またはそれ
以上の置換、付加、欠失のいずれかの組み合わせによ
り、アミノ酸配列にて異なっていてもよい。置換または
挿入されたアミノ酸残基は、遺伝暗号によりコードされ
たものであってもなくてもよい。ポリヌクレオチドまた
はポリペプチドの変種は、対立遺伝子変種のような天然
物であってもよく、または天然に発生することが知られ
ていない変種であってもよい。ポリヌクレオチドおよび
ポリペプチドの天然に生じない変種は、突然変異誘発技
術により、または直接的合成により製造できる。
【００１５】「同一性」は、ヌクレオチド配列またはア
ミノ酸配列のある程度の同一性をいう。一般に、配列は
最高の対合が得られるように配置される。「同一性」自
体は、当該分野にて認識されている意義を有しており、
公開されている方法を用いて計算することができる。例
えば、（COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY，Lesk,A.M.
編、Oxford University Press、New York、1988年；BIO
COMPUTING：INFORMATICS AND GENOME PROJECTS、Smith,
D.W.編、Academic Press、New York、1993年；COMPUTER
ANALYSIS OF SEQUENCE DATA，PARTＩ，Griffin,A.M.お
よびGriffin,H.G.編、Humana Press、New Jersey、1994
年；SEQUENCE ANALYSIS IN MOLECULAR BIOLOGY，von He
inje,G.、Academic Press、1987年；およびSEQUENCE AN
ALYSIS PRIMER，Gribskov,M.およびDevereux,J.編、Ｍ
Stockton Press、New York、1991年）を参照のこと。二
つのポリヌクレオチドまたはポリペプチド配列の間の同
一性を測定するのに多数の方法があるが、「同一性」な
る用語は当業者に周知である（Carillo,H.およびLipto
n,D.，SIAM J.Applied Math.，48：1073（1988））。２
つの配列間の同一性または類似性を測定するために通常
用いられる方法は、Guide to Huge Computers、Martin
J. Bishop,編、Academic Press、San Diego、1994年、
およびCarillo,H.およびLipton,D.，SIAM J.Applied Ma
th.，48：1073（1988）に開示されている方法を包含す
るが、これらに限定されるものではない。同一性および
類似性を決定するための方法はコンピュータープログラ
ムに集成されている。二つの配列間の同一性および類似
性を測定するための好ましいコンピュータープログラム
法は、ＧＣＧプログラムパッケージ（Devereux,J.ら、N
ucleic Acids Research 12（1）：387（1984））、BLAS
TP、BLASTN、FASTA（Atschul,S.F.ら、J.Molec.Biol. 2
15：215-403（1990））を包含するが、これらに限定さ
れるものではない。
ミノ酸配列のある程度の同一性をいう。一般に、配列は
最高の対合が得られるように配置される。「同一性」自
体は、当該分野にて認識されている意義を有しており、
公開されている方法を用いて計算することができる。例
えば、（COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY，Lesk,A.M.
編、Oxford University Press、New York、1988年；BIO
COMPUTING：INFORMATICS AND GENOME PROJECTS、Smith,
D.W.編、Academic Press、New York、1993年；COMPUTER
ANALYSIS OF SEQUENCE DATA，PARTＩ，Griffin,A.M.お
よびGriffin,H.G.編、Humana Press、New Jersey、1994
年；SEQUENCE ANALYSIS IN MOLECULAR BIOLOGY，von He
inje,G.、Academic Press、1987年；およびSEQUENCE AN
ALYSIS PRIMER，Gribskov,M.およびDevereux,J.編、Ｍ
Stockton Press、New York、1991年）を参照のこと。二
つのポリヌクレオチドまたはポリペプチド配列の間の同
一性を測定するのに多数の方法があるが、「同一性」な
る用語は当業者に周知である（Carillo,H.およびLipto
n,D.，SIAM J.Applied Math.，48：1073（1988））。２
つの配列間の同一性または類似性を測定するために通常
用いられる方法は、Guide to Huge Computers、Martin
J. Bishop,編、Academic Press、San Diego、1994年、
およびCarillo,H.およびLipton,D.，SIAM J.Applied Ma
th.，48：1073（1988）に開示されている方法を包含す
るが、これらに限定されるものではない。同一性および
類似性を決定するための方法はコンピュータープログラ
ムに集成されている。二つの配列間の同一性および類似
性を測定するための好ましいコンピュータープログラム
法は、ＧＣＧプログラムパッケージ（Devereux,J.ら、N
ucleic Acids Research 12（1）：387（1984））、BLAS
TP、BLASTN、FASTA（Atschul,S.F.ら、J.Molec.Biol. 2
15：215-403（1990））を包含するが、これらに限定さ
れるものではない。
【００１６】一例として、配列番号１の対照ヌクレオチ
ド配列に対して少なくとも、例えば９５％の「同一性」
を有するヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチド
は、そのポリヌクレオチド配列が配列番号１の対照ヌク
レオチド配列のヌクレオチド各１００個当たり５個まで
の点突然変異を有していてもよいことを除き、ポリヌク
レオチドのヌクレオチド配列が対照配列と同一であるこ
とを意図とする。言い換えれば、対照ヌクレオチド配列
と少なくとも９５％同一であるヌクレオチド配列を有す
るポリヌクレオチドを得るためには、その対照配列にお
けるヌクレオチドの５％までが欠失または別のヌクレオ
チドで置換されていてもよく、または対照配列における
全ヌクレオチドの５％までの数のヌクレオチドが対照配
列中に挿入されていてもよい。対照配列のこれらの変異
は、対照ヌクレオチド配列の５または３末端位置で、ま
たはそれら末端位置の間のどこで起こってもよく、対照
配列中のヌクレオチド間に個々に、または対照配列内の
一またはそれ以上の隣接する基において点在してもよ
い。
ド配列に対して少なくとも、例えば９５％の「同一性」
を有するヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチド
は、そのポリヌクレオチド配列が配列番号１の対照ヌク
レオチド配列のヌクレオチド各１００個当たり５個まで
の点突然変異を有していてもよいことを除き、ポリヌク
レオチドのヌクレオチド配列が対照配列と同一であるこ
とを意図とする。言い換えれば、対照ヌクレオチド配列
と少なくとも９５％同一であるヌクレオチド配列を有す
るポリヌクレオチドを得るためには、その対照配列にお
けるヌクレオチドの５％までが欠失または別のヌクレオ
チドで置換されていてもよく、または対照配列における
全ヌクレオチドの５％までの数のヌクレオチドが対照配
列中に挿入されていてもよい。対照配列のこれらの変異
は、対照ヌクレオチド配列の５または３末端位置で、ま
たはそれら末端位置の間のどこで起こってもよく、対照
配列中のヌクレオチド間に個々に、または対照配列内の
一またはそれ以上の隣接する基において点在してもよ
い。
【００１７】同様に、配列番号２の対照アミノ酸配列に
対して少なくとも、例えば９５％の同一性を有するアミ
ノ酸配列を有するポリペプチドは、そのポリペプチド配
列が配列番号２の対照アミノ酸のアミノ酸各１００個当
たり５個までのアミノ酸変異を有していてもよいことを
除き、そのポリペプチドのアミノ酸配列が、対照配列と
同一であることを意図とする。言い換えれば、対照アミ
ノ酸配列に対して少なくとも９５％同一であるアミノ酸
配列を有するポリペプチドを得るためには、その対照配
列におけるアミノ酸残基の５％までが欠失または別のア
ミノ酸で置換されていてもよく、または対照配列におけ
る全アミノ酸残基の５％までの数のアミノ酸が対照配列
中に挿入されていてもよい。対照配列のこれらの変化は
対照アミノ酸配列のアミノまたはカルボキシ末端位置
で、またはそれら末端位置の間のどこで起こってもよ
く、対照配列中の残基間に個々に、または対照配列内の
一またはそれ以上の隣接する基において点在してもよ
い。
対して少なくとも、例えば９５％の同一性を有するアミ
ノ酸配列を有するポリペプチドは、そのポリペプチド配
列が配列番号２の対照アミノ酸のアミノ酸各１００個当
たり５個までのアミノ酸変異を有していてもよいことを
除き、そのポリペプチドのアミノ酸配列が、対照配列と
同一であることを意図とする。言い換えれば、対照アミ
ノ酸配列に対して少なくとも９５％同一であるアミノ酸
配列を有するポリペプチドを得るためには、その対照配
列におけるアミノ酸残基の５％までが欠失または別のア
ミノ酸で置換されていてもよく、または対照配列におけ
る全アミノ酸残基の５％までの数のアミノ酸が対照配列
中に挿入されていてもよい。対照配列のこれらの変化は
対照アミノ酸配列のアミノまたはカルボキシ末端位置
で、またはそれら末端位置の間のどこで起こってもよ
く、対照配列中の残基間に個々に、または対照配列内の
一またはそれ以上の隣接する基において点在してもよ
い。
【００１８】本発明のポリペプチド 一の態様において、本発明はＴＲ６のポリペプチドに関
する。ＴＲ６のポリペプチドは、配列番号２および４の
ポリペプチド；ならびに配列番号２のアミノ酸配列から
なるポリペプチド；および配列番号２のアミノ酸配列と
その全長にわたって少なくとも８０％の同一性、より好
ましくは配列番号２と少なくとも９０％の同一性、さら
により好ましくは少なくとも９５％の同一性を有するア
ミノ酸配列からなるポリペプチドを包含する。さらに
は、少なくとも９７−９９％の同一性を有するポリペプ
チドが最も好ましい。ＴＲ６のポリペプチドはまた、配
列番号２のアミノ酸配列を有するポリペプチドとその全
長にわたって少なくとも８０％の同一性、より好ましく
は配列番号２と少なくとも９０％の同一性、さらにより
好ましくは少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸
配列からなるポリペプチドも包含する。さらには、少な
くとも９７−９９％の同一性を有するポリペプチドが最
も好ましい。好ましくは、ＴＲ６のポリペプチドは少な
くとも１つのＴＲ６の生物学的活性を示す。
する。ＴＲ６のポリペプチドは、配列番号２および４の
ポリペプチド；ならびに配列番号２のアミノ酸配列から
なるポリペプチド；および配列番号２のアミノ酸配列と
その全長にわたって少なくとも８０％の同一性、より好
ましくは配列番号２と少なくとも９０％の同一性、さら
により好ましくは少なくとも９５％の同一性を有するア
ミノ酸配列からなるポリペプチドを包含する。さらに
は、少なくとも９７−９９％の同一性を有するポリペプ
チドが最も好ましい。ＴＲ６のポリペプチドはまた、配
列番号２のアミノ酸配列を有するポリペプチドとその全
長にわたって少なくとも８０％の同一性、より好ましく
は配列番号２と少なくとも９０％の同一性、さらにより
好ましくは少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸
配列からなるポリペプチドも包含する。さらには、少な
くとも９７−９９％の同一性を有するポリペプチドが最
も好ましい。好ましくは、ＴＲ６のポリペプチドは少な
くとも１つのＴＲ６の生物学的活性を示す。
【００１９】ＴＲ６のポリペプチドは「成熟」タンパク
質の形態であってもよく、あるいは融合タンパク質など
の大型のタンパク質の一部であってもよい。分泌または
リーダー配列、プロ配列、複数のヒスチジン残基のごと
き精製を促進する配列、または組換え操作の間の安定性
のための付加的な配列を含む付加的なアミノ酸配列を含
んでいることが有利なことがよくある。
質の形態であってもよく、あるいは融合タンパク質など
の大型のタンパク質の一部であってもよい。分泌または
リーダー配列、プロ配列、複数のヒスチジン残基のごと
き精製を促進する配列、または組換え操作の間の安定性
のための付加的な配列を含む付加的なアミノ酸配列を含
んでいることが有利なことがよくある。
【００２０】ＴＲ６のポリペプチドのフラグメントも本
発明に含まれる。フラグメントは、前記のＴＲ６のポリ
ペプチドのアミノ酸配列のすべてではなく一部に対して
全く同一であるアミノ酸配列を有するポリペプチドであ
る。ＴＲ６のポリペプチドでは、フラグメントは「自立
している」であるか、またはフラグメントが一部分もし
くは一領域を形成する大型のポリペプチド内に含まれて
いてもよく、最も好ましくは単一の連続した領域として
含まれる。本発明のポリペプチドフラグメントの典型例
は、例えば、ＴＲ６のポリペプチドのアミノ酸番号約１
〜２０、２１〜４０、４１〜６０、６１〜８０、８１〜
１００および１０１から末端までからなるフラグメント
を包含する。この意味において、「約」とは、片方また
は両端において、特記された数よりも数個、５個、４
個、３個、２個または１個だけ多いかまたは少ない範囲
を含む。
発明に含まれる。フラグメントは、前記のＴＲ６のポリ
ペプチドのアミノ酸配列のすべてではなく一部に対して
全く同一であるアミノ酸配列を有するポリペプチドであ
る。ＴＲ６のポリペプチドでは、フラグメントは「自立
している」であるか、またはフラグメントが一部分もし
くは一領域を形成する大型のポリペプチド内に含まれて
いてもよく、最も好ましくは単一の連続した領域として
含まれる。本発明のポリペプチドフラグメントの典型例
は、例えば、ＴＲ６のポリペプチドのアミノ酸番号約１
〜２０、２１〜４０、４１〜６０、６１〜８０、８１〜
１００および１０１から末端までからなるフラグメント
を包含する。この意味において、「約」とは、片方また
は両端において、特記された数よりも数個、５個、４
個、３個、２個または１個だけ多いかまたは少ない範囲
を含む。
【００２１】好ましいフラグメントは、例えば、アミノ
末端を含む一連の残基が欠失、またはカルボキシル末端
を含む一連の残基が欠失、あるいは一方がアミノ末端で
もう一方がカルボキシル末端を含む２つの一連の残基が
欠失していること以外は、ＴＲ６のポリペプチドのアミ
ノ酸配列を有する切断ポリペプチドを包含する。また、
アルファーヘリックスおよびアルファーヘリックス形成
領域、ベータシートおよびベータシート形成領域、ター
ンおよびターン形成領域、コイルおよびコイル形成領
域、親水領域、疎水領域、アルファー両親媒性領域、ベ
ータ両親媒性領域、可変領域、表面形成領域、基質結合
領域および高抗原性指標領域を有するフラグメントなど
の構造的または機能的属性により特徴付けられるフラグ
メントも好ましい。他の好ましいフラグメントは生物学
的に活性なフラグメントである。生物学的に活性なフラ
グメントは、類似活性または改良された活性を有する、
あるいは望ましくない活性を減じたものを含め、レセプ
ター活性を媒介する、フラグメントである。動物、とり
わけヒトにおいて抗原的または免疫原的なフラグメント
もまた含まれる。
末端を含む一連の残基が欠失、またはカルボキシル末端
を含む一連の残基が欠失、あるいは一方がアミノ末端で
もう一方がカルボキシル末端を含む２つの一連の残基が
欠失していること以外は、ＴＲ６のポリペプチドのアミ
ノ酸配列を有する切断ポリペプチドを包含する。また、
アルファーヘリックスおよびアルファーヘリックス形成
領域、ベータシートおよびベータシート形成領域、ター
ンおよびターン形成領域、コイルおよびコイル形成領
域、親水領域、疎水領域、アルファー両親媒性領域、ベ
ータ両親媒性領域、可変領域、表面形成領域、基質結合
領域および高抗原性指標領域を有するフラグメントなど
の構造的または機能的属性により特徴付けられるフラグ
メントも好ましい。他の好ましいフラグメントは生物学
的に活性なフラグメントである。生物学的に活性なフラ
グメントは、類似活性または改良された活性を有する、
あるいは望ましくない活性を減じたものを含め、レセプ
ター活性を媒介する、フラグメントである。動物、とり
わけヒトにおいて抗原的または免疫原的なフラグメント
もまた含まれる。
【００２２】好ましくは、これらのポリペプチドフラグ
メントはすべて、抗原的活性を含め、レセプターの生物
学的活性を保持している。最も好ましいフラグメントに
は、配列番号４のアミノ酸配列を有するものがある。定
義した配列の変種およびフラグメントも本発明の一部を
形成する。好ましい変種は、同類アミノ酸置換により対
照と異なるものであり、すなわち、一の残基が同様の特
徴を有する他の残基により置換されているものである。
典型的なかかる置換は、Ala、Val、LeuおよびIleの間：
SerおよびThrの間；酸性残基AspおよびGluの間；Asnお
よびGlnの間；ならびに塩基性残基LysおよびArgの間；
あるいは芳香族残基PheおよびTyrの間におけるものであ
る。数個、５ないし１０個、１ないし５個、または１な
いし２個のアミノ酸がいずれかの組み合わせで置換、欠
失または付加されている変種が特に好ましい。
メントはすべて、抗原的活性を含め、レセプターの生物
学的活性を保持している。最も好ましいフラグメントに
は、配列番号４のアミノ酸配列を有するものがある。定
義した配列の変種およびフラグメントも本発明の一部を
形成する。好ましい変種は、同類アミノ酸置換により対
照と異なるものであり、すなわち、一の残基が同様の特
徴を有する他の残基により置換されているものである。
典型的なかかる置換は、Ala、Val、LeuおよびIleの間：
SerおよびThrの間；酸性残基AspおよびGluの間；Asnお
よびGlnの間；ならびに塩基性残基LysおよびArgの間；
あるいは芳香族残基PheおよびTyrの間におけるものであ
る。数個、５ないし１０個、１ないし５個、または１な
いし２個のアミノ酸がいずれかの組み合わせで置換、欠
失または付加されている変種が特に好ましい。
【００２３】いずれか適当な方法にて本発明のＴＲ６の
ポリペプチドを製造することができる。かかるポリペプ
チドは、単離された天然ポリペプチド、組換え技法で産
生されたポリペプチド、合成法により産生されたポリペ
プチド、またはこれらの方法の組み合わせにより産生さ
れたポリペプチドを包含する。かかるポリペプチドの製
造手段は当該分野においてよく知られている。
ポリペプチドを製造することができる。かかるポリペプ
チドは、単離された天然ポリペプチド、組換え技法で産
生されたポリペプチド、合成法により産生されたポリペ
プチド、またはこれらの方法の組み合わせにより産生さ
れたポリペプチドを包含する。かかるポリペプチドの製
造手段は当該分野においてよく知られている。
【００２４】本発明のポリヌクレオチド 本発明のもう一つ別の態様はＴＲ６のポリヌクレオチド
に関する。ＴＲ６のポリヌクレオチドは、ＴＲ６のポリ
ペプチドをコードする単離ポリヌクレオチドおよびフラ
グメント、ならびにそのポリヌクレオチドに密接に関連
するポリヌクレオチドに関する。さらに詳細には、本発
明のＴＲ６のポリヌクレオチドは、配列番号2のＴＲ６
のポリペプチドをコードする配列番号1に示されるヌク
レオチド配列を有してなるポリヌクレオチド、および配
列番号1および３の特定の配列を有するポリヌクレオチ
ドを包含する。ＴＲ６のポリヌクレオチドは、さらに
は、配列番号２のＴＲ６のポリペプチドをコードするヌ
クレオチド配列とその全長にわたって少なくとも８０％
の同一性を有するヌクレオチドからなるポリヌクレオチ
ド、および配列番号１とその全長にわたって少なくとも
８０％同一であるポリヌクレオチドを包含する。この点
において、少なくとも９０％同一であるポリヌクレオチ
ドが特に好ましく、少なくとも９５％同一であるのがさ
らに好ましい。さらには、少なくとも９７％同一である
のがより好ましく、少なくとも９８−９９％の同一性を
有するものがより一層好ましく、少なくとも９９％の同
一性を有するものが最も好ましい。さらに、増幅させる
のにあるいはプローブまたはマーカーとしての用途に用
いることのできる条件下で、ハイブリッド形成するのに
配列番号１に含まれるヌクレオチド配列と十分な同一性
を有するヌクレオチド配列もＴＲ６のポリヌクレオチド
に含められる。本発明はまた、かかるＴＲ６のポリヌク
レオチドに相補的なポリヌクレオチドを提供する。
に関する。ＴＲ６のポリヌクレオチドは、ＴＲ６のポリ
ペプチドをコードする単離ポリヌクレオチドおよびフラ
グメント、ならびにそのポリヌクレオチドに密接に関連
するポリヌクレオチドに関する。さらに詳細には、本発
明のＴＲ６のポリヌクレオチドは、配列番号2のＴＲ６
のポリペプチドをコードする配列番号1に示されるヌク
レオチド配列を有してなるポリヌクレオチド、および配
列番号1および３の特定の配列を有するポリヌクレオチ
ドを包含する。ＴＲ６のポリヌクレオチドは、さらに
は、配列番号２のＴＲ６のポリペプチドをコードするヌ
クレオチド配列とその全長にわたって少なくとも８０％
の同一性を有するヌクレオチドからなるポリヌクレオチ
ド、および配列番号１とその全長にわたって少なくとも
８０％同一であるポリヌクレオチドを包含する。この点
において、少なくとも９０％同一であるポリヌクレオチ
ドが特に好ましく、少なくとも９５％同一であるのがさ
らに好ましい。さらには、少なくとも９７％同一である
のがより好ましく、少なくとも９８−９９％の同一性を
有するものがより一層好ましく、少なくとも９９％の同
一性を有するものが最も好ましい。さらに、増幅させる
のにあるいはプローブまたはマーカーとしての用途に用
いることのできる条件下で、ハイブリッド形成するのに
配列番号１に含まれるヌクレオチド配列と十分な同一性
を有するヌクレオチド配列もＴＲ６のポリヌクレオチド
に含められる。本発明はまた、かかるＴＲ６のポリヌク
レオチドに相補的なポリヌクレオチドを提供する。
【００２５】ヒトＴＲ６をコードするｃＤＮＡを配列決
定した結果から明らかなように、本発明のＴＲ６は、腫
瘍壊死因子関連のファミリーの他のタンパク質に構造的
に関連付けられる。配列番号１のｃＤＮＡ配列は、配列
番号２の４１１個のアミノ酸のポリペプチドをコードす
る読み枠（ヌクレオチド番号９４から１３２９まで）を
含んでいる。表１（配列番号２）のアミノ酸配列は、Ｄ
Ｒ４、リガンドTRAILについてのレセプターと、４１１
個のアミノ酸残基にて、約５８％の同一性（ＧＡＰ（Ｇ
ＣＧから）を使用）を有する。（Pan, G.、O'Rourke,
K.、Chinnaiyan,A. M.、Gentz, R.、Ebner, R.、Ni, J.
およびDixit, V. M.、Science ２７６、１１１−１１３
（１９９７））。表１（配列番号１）のヌクレオチド配
列は、ＤＲ４、リガンドTRIALについてのレセプター
と、１３３５のヌクレオチド残基にて、約７０％の同一
性（ＧＡＰ（ＧＣＧから）を使用）を有する。ＴＲ４
は、ヒト・デス・レセプター４（ＤＲ４）の死ドメイン
と６４％同一であり（Pan, G.、O'Rourke, K.、Chinnai
yan,A. M.、Gentz, R.、Ebner, R.、Ni, J.およびDixi
t, V. M.、Science ２７６、１１１−１１３（１９９
７））、ヒト・デス・レセプター３（ＤＲ３）の死度メ
ントと３５.７％同一であり（A. M. Chinnaiyanら、Sci
ence ２７４（５２８９）、９９０−９９２（１９９
６））、ヒトＴＮＦＲ−１の死ドメイントと３２.７％
同一であり、およびＣＤ９５（Ｆａｓ）の死ドメインと
１９.６％である（Ｉ.Cascino、J.Immunol. １５４
（６）、２７０６−２７１３（１９９５））死ドメイン
（配列番号２のアミノ酸２９０ないし３２４）を含有す
る。
定した結果から明らかなように、本発明のＴＲ６は、腫
瘍壊死因子関連のファミリーの他のタンパク質に構造的
に関連付けられる。配列番号１のｃＤＮＡ配列は、配列
番号２の４１１個のアミノ酸のポリペプチドをコードす
る読み枠（ヌクレオチド番号９４から１３２９まで）を
含んでいる。表１（配列番号２）のアミノ酸配列は、Ｄ
Ｒ４、リガンドTRAILについてのレセプターと、４１１
個のアミノ酸残基にて、約５８％の同一性（ＧＡＰ（Ｇ
ＣＧから）を使用）を有する。（Pan, G.、O'Rourke,
K.、Chinnaiyan,A. M.、Gentz, R.、Ebner, R.、Ni, J.
およびDixit, V. M.、Science ２７６、１１１−１１３
（１９９７））。表１（配列番号１）のヌクレオチド配
列は、ＤＲ４、リガンドTRIALについてのレセプター
と、１３３５のヌクレオチド残基にて、約７０％の同一
性（ＧＡＰ（ＧＣＧから）を使用）を有する。ＴＲ４
は、ヒト・デス・レセプター４（ＤＲ４）の死ドメイン
と６４％同一であり（Pan, G.、O'Rourke, K.、Chinnai
yan,A. M.、Gentz, R.、Ebner, R.、Ni, J.およびDixi
t, V. M.、Science ２７６、１１１−１１３（１９９
７））、ヒト・デス・レセプター３（ＤＲ３）の死度メ
ントと３５.７％同一であり（A. M. Chinnaiyanら、Sci
ence ２７４（５２８９）、９９０−９９２（１９９
６））、ヒトＴＮＦＲ−１の死ドメイントと３２.７％
同一であり、およびＣＤ９５（Ｆａｓ）の死ドメインと
１９.６％である（Ｉ.Cascino、J.Immunol. １５４
（６）、２７０６−２７１３（１９９５））死ドメイン
（配列番号２のアミノ酸２９０ないし３２４）を含有す
る。
【００２６】
【表１】 1 CTTTGCGCCC ACAAAATACA CCGACGATGC CCGATCTACT TTAAGGGCTG 51 AAACCCACGG GCCTGAGAGA CTATAAGAGC GTTCCCTACC GCCATGGAAC 101 AACGGGGACA GAACGCCCCG GCCGCTTCGG GGGCCCGGAA AAGGCACGGC 151 CCAGGACCCA GGGAGGCGCG GGGAGCCAGG CCTGGGCCCC GGGTCCCCAA 201 GACCCTTGTG CTCGTTGTCG CCGCGGTCCT GCTGTTGGTC TCAGCTGAGT 251 CTGCTCTGAT CACCCAACAA GACCTAGCTC CCCAGCAGAG AGCGGCCCCA 301 CAACAAAAGA GGTCCAGCCC CTCAGAGGGA TTGTGTCCAc cTGGACACCA 351 TATCTCAGAA GACGGTAGAG ATTGCATCTC CTGCAAATAT gGACAGGACT 401 ATAGCACTCA aTGGAATGAC CTCCTTTTCT GCTTGCGCTG CACCAGGTGT 451 GATTCAGGTG AAGTGGAGCT AAGTCCCTGC ACCACGACCA GAAACACAGT 501 GTGTCAGTGC GAAGAAgGCA CCTTCCGGGA AGAAGATTCT CCTGAGATGT 551 GCCGGAAGTG CCGCACAGGG TGTCCCAgAG GGATGGTCAA GGTCGGTGAT 601 TGTACACCCT GGAGTGACAT CGAATGTGTC CACAAAGAAT CAGGCATCAT 651 CATAgGAGTC ACAGTTGCAG CCGTAGTCTT GATTGTGGCT GTGTTTGTTT 701 GcaAgTCTTT ACTGTGGAAg AAAGTCCTTC CTTACCTGAA AGGCATCTGC 751 TCAGGTGGTG GTGGGGACCC TGAGCGTGTG GACAGAAGcT CACAACGACc 801 TGGGGCTGAG GACAATGTCC TCAATGAGAT CGTGAGTATC TTGCAGCCCA 851 CCCAGGTCCC TGAGCAGGAA ATGGAAGTCC AGGAGCCAGC AGAGCCAACA 901 GGTGTCAACA TGTTGTCCCC CGGGGAGTCA GAGCATCTGC TGGAACCGGC 951 AGAAGCTGAA AGGTCTCAGA GGAGGAGGCT GCTGGTTCCA GCAAATGAAG 1001 GTGATCCCAC TGAGACTCTG AGACAGTGCT TCGATGACTT TGCAGACTTG 1051 GTGCCCTTTG ACTCCTGGGA gCCgCTCATG AGGAAGTTGG GCCTCATGGA 1101 CAATgAGATa aaGGTGGCTA AAGCTGAGGC AGCGGGCCAC AGGGACACCT 1151 TGTACACGAT GCTGATAAAG TGGGTCAACA AAACCGGGCG AGATGCCTCT 1201 GTCCACACCC TGCTGGATGC CTTGGAGACG CTGGGAGAGA GACTTGCCAA 1251 GCAGAAGATT GAGGACCACT TGTTGAGCTC TGGAAAGTTC ATGTATCTAG 1301 AAGGTAATGC AGACTCTGCC ATGTCCTAAG TGTGATTCTC TTCAGGAAGT 1351 CAGACCTTCC CTGGTTTACC TTTTTTCTGG AAAAAGCCCA ACTGGACTCC 1401 AGTCAGTAGG AAAGTGCCAC AATTGTCACA TGACCGGTAC TGGAAGAAAC 1451 TCTCCCATCC AACATCACCC AGTGGATGGA ACATCCTGTA ACTTTTCACT 1501 GCACTTGGCA TTATTTTTAT AAGCTGAATG TGATAATAAG GACACTATGG 1551 AAATGTCTGG ATCATTCCGT TTGTGCGTAC TTTGAgATTT GGTTTGGGAT 1601 GTCATTGTTT TCACAGCACT TTTTTATCCT AATGTAAATG CTTTATTTAT 1651 TTATTTGGGC TACATTGTAA gATCCATCTA CACAGTCGTT GTCCGACTTC 1701 ACTTGATACT ATATGATATG AACCTTTTTT GGGTGGGGGG TGCGGGGCAg 1751 TTCACTCTGT CTCCCAGGCT GGAGTGCAAT GGTGCAATCT TGGCTCACTA 1801 TAGCCTTGAC CTCTCAGGCT CAAGCGATTC TCCCACCTCA GCCATCCAAA 1851 TAGCTGGGAC CACAGGTGTG CACCACCACG CCCGGCTAAT TTTTTGTATT 1901 TTGTCTAgAT ATAGGGGCTC TCTATGTTGC TCAGGGTGGT CTCgAATTCC 1951 TGGAcTCAAG CAGTCTGCCC ACcTCAGAcT CCCAAAGCGG TGGAATTAGA 2001 GGCGTGAGCC CCCATGcTTG gCCTTACcTT TcTACTTTTA TAATTCTGTA 2051 TGTTATTATT TTATGAACAT GAAGAAACTT TAGTAAATGT ACTTGTTTAC 2101 ATAGTTATGT GAATAGATTA GATAAACATA AAAGGAGGAG ACATACAATG 2151 GGGGAAGAAG AAGAAGTCCC CTGTAAGATG TCACTGTcTG GGTTCCAGCC 2201 CTCCCTCAGA TGTACTTTGG CTTCAATGAT TGGCAACTTC TACAGGGGCC 2251 AGTCTTTTGA ACTGGACAAC CTTACAAGTA TATGAGTATT ATTTATAGGT 2301 AGTTGTTTAC ATATGAGTCG GGACCAAAGA GAACTGGATC CACGTGAAGT 2351 CCTGTGTGTG GCTGGTCCCT ACCTGGGCAG TcTCATTTGC ACCCATAGCC 2401 CCCATCTATG GACAGGCTGG GACAGAGGCA GATGGGTTAG ATCACACATA 2451 ACAATAGGGT CTATGTCATA TCCCAAGTGA ACTTGAGCCC TGTTTGGGCT 2501 CAGGAGATAG AAGACAAAAT CTGTCTCCCC ACGTCTGCCA TGGCATCAAG 2551 GGGGAAGAGT AGATGGTGCT tGAGAATGGT GTGAAATGGT TGCCATCTCA 2601 GGAGTAGATG GCCCGGCTCA CTTCTGGTTA TCtGTCACCC TGAGCCCAtG 2651 AGCTGCcTTT TAGGGTACAG ATTGCCTACT TGAGGACCTT GGCCGCTCTG 2701 TAAGCATCTG ACTCATCTCA GAAATGTCAA TTCTTAAACA CTGTGGCAAC 2751 AGGACCTAGA ATGGCTGACG CATTAAGGTT TTCTTcTTGT GTCCTGTTCT 2801 ATTAtTGTTT TAAGACCTCA GTAACCATTT CAGCCTCTTT CCAGCAAACC 2851 CTTCTCCATA GTATTTCAGT CATGGAAGGA TCATTTATGC AGGTAGTCAT 2901 TCCAGGAGTT TTTGGTCTTT TCTGTCTCAA GGCATTGTGT GTTTTGTTCC 2951 GGGACTGGTT TGGGTGGGAC AAAGTTAGAA TTGCCTGAAG AtcAcACATT 3001 CAGACTGTtG TGTCTGTGGA GTTTTAGGAG TGGGGGGTGA CCTTTcTGGT 3051 CTTtGcAcTT CCATCcTcTC CCAcTTCCAT cTGGCATCCC CACGcGTTGT 3101 CCCcTGCAcT TcTGGAAGGC ACAGGGTGCT GCTGCTTCCT GGTCTTTGCC 3151 TTTGCTGGGC cTTCTGTGCA GGACGCTCAG CCTCAGGGCT CAGAAGGTGC 3201 CAGTCCGGTC CCAGGTCCCT TGTCCCTTCC ACAGAGGCCT TCcTAGAAGA 3251 TGCATCTAGA GTGTCAGCCT TATCAGTGTT TAAGATTTTT CTTTTATTTT 3301 TAATTTTTTT GAGACAGAAT CTCACTCTCT CGCCCAGGCT GGAGTGCAAC 3351 GGTACGATCT TGGCTCAGTG CAACCTCCGC CTCCTGGGTT CAAGCGATTC 3401 TCGTGCCTCA GCCTCCGGAG TAGCTGGGAT TGCAGGCACC CGCCACCACG 3451 CCTGGCTAAT TTTTGTATTT TTAGTAGAGA CGGGGTTTCA CCATGTTGGT 3501 CAGGCTGGTC TCGAACTCCT GACCTCAGGT GATCCACNTT GGCCTCCGAA 3551 AGTGCTGGGa tatacaaggc GTGAGCCACC AGCCAGGCCA AGATATTNTT 3601 NTAAAGNNAG CTTCCGGANG ACATGAAATA ANGGGGGGTT TTGTTGTTTA 3651 GTAACATTNG GCTTTGATAT ATCCCCAGGC CAAATNGCAN GNGACACAGG 3701 ACAGCCATAG TATAGTGTGT CACTCGTGGT TGGTGTCCTT TCATGGTTcT 3751 GCCCTGTCAA AGGTCCCTAT TTGAAATGTG TTATAATACA AACAAGGAAG 3801 CACATTGTGT ACAAAATACT TATGTATTTA TGAATCCATG ACCAAATTAA 3851 ATATGAAACC TTATATAAAA AAAAAAAAAA A ヒトＴＲ６のヌクレオチド配列（配列番号１）
【００２７】
【表２】 Met Glu Gln Arg Gly Gln Asn Ala Pro Ala Ala Ser Gly Ala Arg Lys 16 Arg His Gly Pro Gly Pro Arg Glu Ala Arg Gly Ala Arg Pro Gly Pro 32 Arg Val Pro Lys Thr Leu Val Leu Val Val Ala Ala Val Leu Leu Leu 48 Val Ser Ala Glu Ser Ala Leu Ile Thr Gln Gln Asp Leu Ala Pro Gln 64 Gln Arg Ala Ala Pro Gln Gln Lys Arg Ser Ser Pro Ser Glu Gly Leu 80 Cys Pro Pro Gly His His Ile Ser Glu Asp Gly Arg Asp Cys Ile Ser 96 Cys Lys Tyr Gly Gln Asp Tyr Ser Thr Gln Trp Asn Asp Leu Leu Phe 112 Cys Leu Arg Cys Thr Arg Cys Asp Ser Gly Glu Val Glu Leu Ser Pro 128 Cys Thr Thr Thr Arg Asn Thr Val Cys Gln Cys Glu Glu Gly Thr Phe 144 Arg Glu Glu Asp Ser Pro Glu Met Cys Arg Lys Cys Arg Thr Gly Cys 160 Pro Arg Gly Met Val Lys Val Gly Asp Cys Thr Pro Trp Ser Asp Ile 176 Glu Cys Val His Lys Glu Ser Gly Ile Ile Ile Gly Val Thr Val Ala 192 Ala Val Val Leu Ile Val Ala Val Phe Val Cys Lys Ser Leu Leu Trp 208 Lys Lys Val Leu Pro Tyr Leu Lys Gly Ile Cys Ser Gly Gly Gly Gly 224 Asp Pro Glu Arg Val Asp Arg Ser Ser Gln Arg Pro Gly Ala Glu Asp 240 Asn Val Leu Asn Glu Ile Val Ser Ile Leu Gln Pro Thr Gln Val Pro 256 Glu Gln Glu Met Glu Val Gln Glu Pro Ala Glu Pro Thr Gly Val Asn 272 Met Leu Ser Pro Gly Glu Ser Glu His Leu Leu Glu Pro Ala Glu Ala 288 Glu Arg Ser Gln Arg Arg Arg Leu Leu Val Pro Ala Asn Glu Gly Asp 304 Pro Thr Glu Thr Leu Arg Gln Cys Phe Asp Asp Phe Ala Asp Leu Val 320 Pro Phe Asp Ser Trp Glu Pro Leu Met Arg Lys Leu Gly Leu Met Asp 336 Asn Glu Ile Lys Val Ala Lys Ala Glu Ala Ala Gly His Arg Asp Thr 352 Leu Tyr Thr Met Leu Ile Lys Trp Val Asn Lys Thr Gly Arg Asp Ala 368 Ser Val His Thr Leu Leu Asp Ala Leu Glu Thr Leu Gly Glu Arg Leu 384 Ala Lys Gln Lys Ile Glu Asp His Leu Leu Ser Ser Gly Lys Phe Met 400 Tyr Leu Glu Gly Asn Ala Asp Ser Ala Met Ser End 411 ヒトＴＲ６のアミノ酸配列（配列番号２）
【００２８】ヒト胸腺間質細胞、単細胞、末梢血管リン
パ球、一次樹状細胞および骨髄細胞のヒトの細胞中のｍ
ＲＮＡから由来のｃＤＮＡライブラリーより標準的クロ
ーニングおよびスクリーニングを用い、発現配列タグ
（ＥＳＴ）分析（Adams,M.D.ら、Science 252：1651-16
56（1991）；Adams,M.D.ら、Nature 355：632-634（199
2）；Adams,M.D.ら、Nature 377 Supp：3-174（199
5））を用いて、ＴＲ６をコードする本発明の１のポリ
ヌクレオチドを得てもよい。ゲノムＤＮＡライブラリー
のごとき天然源から本発明のポリヌクレオチドを得るこ
ともでき、あるいはよく知られ、かつ商業上利用可能な
方法を用いて合成することもできる。
パ球、一次樹状細胞および骨髄細胞のヒトの細胞中のｍ
ＲＮＡから由来のｃＤＮＡライブラリーより標準的クロ
ーニングおよびスクリーニングを用い、発現配列タグ
（ＥＳＴ）分析（Adams,M.D.ら、Science 252：1651-16
56（1991）；Adams,M.D.ら、Nature 355：632-634（199
2）；Adams,M.D.ら、Nature 377 Supp：3-174（199
5））を用いて、ＴＲ６をコードする本発明の１のポリ
ヌクレオチドを得てもよい。ゲノムＤＮＡライブラリー
のごとき天然源から本発明のポリヌクレオチドを得るこ
ともでき、あるいはよく知られ、かつ商業上利用可能な
方法を用いて合成することもできる。
【００２９】配列番号2のＴＲ６のポリペプチドをコー
ドするヌクレオチド配列は、表１（配列番号１のヌクレ
オチド数９４から１３２９）に含まれるポリペプチドを
コードする配列と同一であってもよく、または遺伝暗号
の重複性（縮重性）の結果として、配列番号２のポリペ
プチドをもコードする配列であってもよい。
ドするヌクレオチド配列は、表１（配列番号１のヌクレ
オチド数９４から１３２９）に含まれるポリペプチドを
コードする配列と同一であってもよく、または遺伝暗号
の重複性（縮重性）の結果として、配列番号２のポリペ
プチドをもコードする配列であってもよい。
【００３０】本発明のポリヌクレオチドをＴＲ６のポリ
ペプチドの組換え生産に用いる場合、ポリヌクレオチド
はそれ自体、成熟ポリペプチドまたはそのフラグメント
のコーディング配列を含むものであってもよく；読み枠
中に、リーダーまたは分泌配列、プレ、プロ、もしくは
プレプロタンパク質配列をコードするコーディング配
列、または他の融合ペプチド部分などの、他のコーディ
ング配列を伴った、成熟ポリペプチドまたはフラグメン
トのコーディング配列を含むものであってもよい。例え
ば、融合ポリペプチドの精製を促進するマーカー配列を
コードすることもできる。本発明のこの態様の特に好ま
しい具体例において、マーカー配列は、ｐＱＥベクター
（Qiagen,Inc.）で得られ、Gentzら、Proc.Natl.Acad.S
ci.,USA，86:821-824（1989）に記載されるような、ヘ
キサ−ヒスチジンペプチドであるか、またはＨＡタグで
ある。ポリヌクレオチドはまた、非コーディング５’お
よび３’配列、例えば、転写された非翻訳配列、スプラ
イスおよびポリアデニル化シグナル、リボソーム結合部
位およびmＲＮＡを安定化する配列などを含有していて
もよい。
ペプチドの組換え生産に用いる場合、ポリヌクレオチド
はそれ自体、成熟ポリペプチドまたはそのフラグメント
のコーディング配列を含むものであってもよく；読み枠
中に、リーダーまたは分泌配列、プレ、プロ、もしくは
プレプロタンパク質配列をコードするコーディング配
列、または他の融合ペプチド部分などの、他のコーディ
ング配列を伴った、成熟ポリペプチドまたはフラグメン
トのコーディング配列を含むものであってもよい。例え
ば、融合ポリペプチドの精製を促進するマーカー配列を
コードすることもできる。本発明のこの態様の特に好ま
しい具体例において、マーカー配列は、ｐＱＥベクター
（Qiagen,Inc.）で得られ、Gentzら、Proc.Natl.Acad.S
ci.,USA，86:821-824（1989）に記載されるような、ヘ
キサ−ヒスチジンペプチドであるか、またはＨＡタグで
ある。ポリヌクレオチドはまた、非コーディング５’お
よび３’配列、例えば、転写された非翻訳配列、スプラ
イスおよびポリアデニル化シグナル、リボソーム結合部
位およびmＲＮＡを安定化する配列などを含有していて
もよい。
【００３１】さらなる好ましい具体例は、表１（配列番
号２）のＴＲ６のポリペプチドのアミノ酸配列を有し、
数個、５ないし１０個、１ないし５個、１ないし３個、
１ないし２個または１個のアミノ酸残基がいずれかの組
み合わせで置換、欠失または付加されているＴＲ６の変
種をコードするポリヌクレオチドである。本発明の好ま
しいポリヌクレオチドには、表４（配列番号４）のアミ
ノ酸配列をコードする表３（配列番号３）に含まれるポ
リヌクレオチドがある。
号２）のＴＲ６のポリペプチドのアミノ酸配列を有し、
数個、５ないし１０個、１ないし５個、１ないし３個、
１ないし２個または１個のアミノ酸残基がいずれかの組
み合わせで置換、欠失または付加されているＴＲ６の変
種をコードするポリヌクレオチドである。本発明の好ま
しいポリヌクレオチドには、表４（配列番号４）のアミ
ノ酸配列をコードする表３（配列番号３）に含まれるポ
リヌクレオチドがある。
【００３２】
【表３】 1 ATGACCTCCT TTTCTGCTTG CGCTGCACCA GGTGTGATTC AGGTGAAGTG 51 GAGCTAAGTC CCTGCACCAC GACCAGAAAC ACAGTGTGTC AGTGCGAAGA 101 AgGCACCTTC CGGGAAGAAG ATTCTCCTGA GATGTGCCGG AAGTGCCGCA 151 CAGGGTGTCC CAgAGGGATG GTCAAGGTCG GTGATTGTAC ACCCTGGAGT 201 GACATCGAAT GTGTCCACAA AGAATCAGGC ATCATCATAg GAGTCACAGT 251 TGCAGCCGTA GTCTTGATTG TGGCTGTGTT TGTTTGCaAg TCTTTACTGT 301 GGAAgAAAGT CCTTCCTTAC CTGAAAGGCA TCTGCTCAGG TGGTGGTGGG 351 GACCCTGAGC GTGTGGACAG AAGcTCACAA CGACcTGGGG CTGAGGACAA 401 TGTCCTCAAT GAGATCGTGA GTATCTTGCA GCCCACCCAG GTCCCTGAGC 451 AGGAAATGGA AGTCCAGGAG CCAGCAGAGC CAACAGGTGT CAACATGTTG 501 TCCCCCGGGG AGTCAGAGCA TCTGCTGGAA CCGGCAGAAG CTGAAAGGTC 551 TCAGAGGAGG AGGCTGCTGG TTCCAGCAAA TGAAGGTGAT CCCACTGAGA 601 CTCTGAGACA GTGCTTCGAT GACTTTGCAG ACTTGGTGCC CTTTGACTCC 651 TGGGAgCCgC TCATGAGGAA GTTGGGCCTC ATGGACAATg AGATaaaGGT 701 GGCTAAAGCT GAGGCAGCGG GCCACAGGGA CACCTTGTAC ACGATGCTGA 751 TAAAGTGGGT CAACAAAACC GGGCGAGATG CCTCTGTCCA CACCCTGCTG 801 GATGCCTTGG AGACGCTGGG AGAGAGACTT GCCAAGCAGA AGATTGAGGA 851 CCACTTGTTG AGCTCTGGAA AGTTCATGTA TCTAGAAGGT AATGCAGACT 901 CTGCCATGTC CTAAGTGTGA TTCTCTTCAG GAAGTCAGAC CTTCCCTGGT 951 TTACCTTTTT TCTGGAAAAA GCCCAACTGG ACTCCAGTCA GTAGGAAAGT 1001 GCCACAATTG TCACATGACC GGTACTGGAA GAAACTCTCC CATCCAACAT 1051 CACCCAGTGG AT ヒトＲＴ６の部分ヌクレオチド配列（配列番号３）
【００３３】
【表４】 1 DLLFCLRCTR CDSGEVELSP CTTTRNTVCQ CEEGTFREED SPEMCRKCRT 51 GCPRGMVKVG DCTPWSDIEC VHKESGIIIG VTVAAVVLIV AVFVCKSLLW 101 KKVLPYLKGI CSGGGGDPER VDRSSQRPGA EDNVLNEIVS ILQPTQVPEQ 151 EMEVQEPAEP TGVNMLSPGE SEHLLEPAEA ERSQRRRLLV PANEGDPTET 201 LRQCFDDFAD LVPFDSWEPL MRKLGLMDNE IKVAKAEAAG HRDTLYTMLI 251 KWVNKTGRDA SVHTLLDALE TLGERLAKQK IEDHLLSSGK FMYLEGNADS 301 AMS* ヒトＴＲ６の部分アミノ酸配列（配列番号４）
【００３４】本発明は、さらには、本明細書において前
記した配列とハイブリッド形成するポリヌクレオチドに
も関する。この点において、本発明は、特に、本明細書
において前記したポリヌクレオチドにストリンジェント
な条件下でハイブリダイゼーションするポリヌクレオチ
ドに関する。本明細書で用いる用語の「ストリンジェン
トな条件」とは、配列間に少なくとも９５％、好ましく
は少なくとも９７％の同一性がある場合にのみハイブリ
ダイゼーションが起こることを意味する。
記した配列とハイブリッド形成するポリヌクレオチドに
も関する。この点において、本発明は、特に、本明細書
において前記したポリヌクレオチドにストリンジェント
な条件下でハイブリダイゼーションするポリヌクレオチ
ドに関する。本明細書で用いる用語の「ストリンジェン
トな条件」とは、配列間に少なくとも９５％、好ましく
は少なくとも９７％の同一性がある場合にのみハイブリ
ダイゼーションが起こることを意味する。
【００３５】本発明のポリヌクレオチドは、配列番号１
に含まれるヌクレオチド配列または配列番号３の部分ヌ
クレオチド配列を含め、そのフラグメントに対して同一
または十分に同一であり、ｃＤＮＡおよびゲノムＤＮＡ
用のハイブリダイゼーションプローブとして用いてＴＲ
６をコードする全長のｃＤＮＡおよびゲノムクローンを
単離し、ＴＲ６遺伝子に対して高配列類似性を有する他
の遺伝子のｃＤＮＡおよびゲノムクローンを単離するこ
とができる。かかるハイブリダイゼーション法は当業者
に知られている。典型的には、これらのヌクレオチド配
列は、対照配列と８０％同一、好ましくは９０％同一、
より好ましくは９５％同一である。一般に、プローブは
少なくとも１５個のヌクレオチドを含むであろう。好ま
しくは、かかるプローブは少なくとも３０個のヌクレオ
チドを有し、少なくとも５０個のヌクレオチドを有して
いてもよい。特に好ましいプローブは３０ないし５０個
のヌクレオチドの範囲にある。
に含まれるヌクレオチド配列または配列番号３の部分ヌ
クレオチド配列を含め、そのフラグメントに対して同一
または十分に同一であり、ｃＤＮＡおよびゲノムＤＮＡ
用のハイブリダイゼーションプローブとして用いてＴＲ
６をコードする全長のｃＤＮＡおよびゲノムクローンを
単離し、ＴＲ６遺伝子に対して高配列類似性を有する他
の遺伝子のｃＤＮＡおよびゲノムクローンを単離するこ
とができる。かかるハイブリダイゼーション法は当業者
に知られている。典型的には、これらのヌクレオチド配
列は、対照配列と８０％同一、好ましくは９０％同一、
より好ましくは９５％同一である。一般に、プローブは
少なくとも１５個のヌクレオチドを含むであろう。好ま
しくは、かかるプローブは少なくとも３０個のヌクレオ
チドを有し、少なくとも５０個のヌクレオチドを有して
いてもよい。特に好ましいプローブは３０ないし５０個
のヌクレオチドの範囲にある。
【００３６】一の具体例において、ＴＲ６のポリペプチ
ドをコードするポリヌクレオチドを得るには、適当なラ
イブラリーをストリンジェントなハイブリダイゼーショ
ン条件下で配列番号１を有する標識したプローブまたは
そのフラグメント（配列番号３のヌクレオチド配列を含
む）でスクリーニングし、該ポリヌクレオチド配列を含
有する全長のｃＤＮＡおよびゲノムクローンを単離する
工程からなる。そのようなハイブリダイゼーション法は
当業者に周知である。かくして、さらに別の態様にて、
本発明のＴＲ６のポリヌクレオチドは、さらに、ストリ
ンジェントな条件下で配列番号１を有するヌクレオチド
配列または配列番号３のヌクレオチド配列を含め、その
フラグメントとハイブリダイゼーションするヌクレオチ
ド配列を有するヌクレオチド配列を包含する。前記した
ハイブリダイゼーション条件下で得られるヌクレオチド
配列によりコードされるアミノ酸配列を有するポリペプ
チドもＴＲ６ポリペプチドに含まれる。ストリンジェン
トなハイブリダイゼーション条件は、前記されていると
おりであるか、あるいはまた５０％ホルムアミド、５ｘ
ＳＳＣ（１５０ｍＭ NaCl、１５ｍＭ クエン酸ナトリウ
ム）、５０ｍＭ リン酸ナトリウム（ｐＨ７.６）、５ｘ
Denhardt's溶液、１０％硫酸デキストランおよび２０マ
イクログラム／ｍｌの変性切断サケ精子ＤＮＡを有して
なる溶液中で一夜４２℃でインキュベートし、つづいて
そのフィルターを約６５℃で０.１ｘＳＳＣにて洗浄す
る条件である。研究試薬ならびに動物およびヒトの疾患
の治療および診断を見いだすための材料として本発明の
ポリヌクレオチドおよびポリペプチドを用いてもよい。
ドをコードするポリヌクレオチドを得るには、適当なラ
イブラリーをストリンジェントなハイブリダイゼーショ
ン条件下で配列番号１を有する標識したプローブまたは
そのフラグメント（配列番号３のヌクレオチド配列を含
む）でスクリーニングし、該ポリヌクレオチド配列を含
有する全長のｃＤＮＡおよびゲノムクローンを単離する
工程からなる。そのようなハイブリダイゼーション法は
当業者に周知である。かくして、さらに別の態様にて、
本発明のＴＲ６のポリヌクレオチドは、さらに、ストリ
ンジェントな条件下で配列番号１を有するヌクレオチド
配列または配列番号３のヌクレオチド配列を含め、その
フラグメントとハイブリダイゼーションするヌクレオチ
ド配列を有するヌクレオチド配列を包含する。前記した
ハイブリダイゼーション条件下で得られるヌクレオチド
配列によりコードされるアミノ酸配列を有するポリペプ
チドもＴＲ６ポリペプチドに含まれる。ストリンジェン
トなハイブリダイゼーション条件は、前記されていると
おりであるか、あるいはまた５０％ホルムアミド、５ｘ
ＳＳＣ（１５０ｍＭ NaCl、１５ｍＭ クエン酸ナトリウ
ム）、５０ｍＭ リン酸ナトリウム（ｐＨ７.６）、５ｘ
Denhardt's溶液、１０％硫酸デキストランおよび２０マ
イクログラム／ｍｌの変性切断サケ精子ＤＮＡを有して
なる溶液中で一夜４２℃でインキュベートし、つづいて
そのフィルターを約６５℃で０.１ｘＳＳＣにて洗浄す
る条件である。研究試薬ならびに動物およびヒトの疾患
の治療および診断を見いだすための材料として本発明の
ポリヌクレオチドおよびポリペプチドを用いてもよい。
【００３７】ベクター、宿主細胞、発現 本発明はまた、本発明のポリヌクレオチド（複数でも
可）を含むベクター、本発明のベクターで遺伝子操作す
る宿主細胞および組換え技法による本発明のポリペプチ
ドの製造にも関する。無細胞翻訳系を用い、本発明のＤ
ＮＡ構築物から由来のＲＮＡを用いてかかるタンパク質
を製造できる。
可）を含むベクター、本発明のベクターで遺伝子操作す
る宿主細胞および組換え技法による本発明のポリペプチ
ドの製造にも関する。無細胞翻訳系を用い、本発明のＤ
ＮＡ構築物から由来のＲＮＡを用いてかかるタンパク質
を製造できる。
【００３８】組換え体を製造するために、宿主細胞を遺
伝子操作して、本発明のポリヌクレオチドについての発
現系もしくはそれらの一部を組み込むことができる。ポ
リヌクレオチドの宿主細胞への導入は、Davisら、BASIC
METHODS IN MOLECULAR BIOLOGY（1986）；Sambrook
ら、MOLECUR CLONING：A LABORATORY MANUAL、第２版、
Cold Spring Harbor Laboratory Press、Cold Spring H
arbor、N.Y.（1989）のような、多くの標準的な実験マ
ニュアルに記載される方法により行うことができ、例え
ばリン酸カルシウムトランスフェクション、ＤＥＡＥ−
デキストラン媒介トランスフェクション、トランスベク
ション、マイクロインジェクション、陽イオン脂質媒介
トランスフェクション、エレクトロポレーション、トラ
ンスダクション、スクレープ負荷、バリスティック導入
または感染等がある。
伝子操作して、本発明のポリヌクレオチドについての発
現系もしくはそれらの一部を組み込むことができる。ポ
リヌクレオチドの宿主細胞への導入は、Davisら、BASIC
METHODS IN MOLECULAR BIOLOGY（1986）；Sambrook
ら、MOLECUR CLONING：A LABORATORY MANUAL、第２版、
Cold Spring Harbor Laboratory Press、Cold Spring H
arbor、N.Y.（1989）のような、多くの標準的な実験マ
ニュアルに記載される方法により行うことができ、例え
ばリン酸カルシウムトランスフェクション、ＤＥＡＥ−
デキストラン媒介トランスフェクション、トランスベク
ション、マイクロインジェクション、陽イオン脂質媒介
トランスフェクション、エレクトロポレーション、トラ
ンスダクション、スクレープ負荷、バリスティック導入
または感染等がある。
【００３９】適当な宿主の代表的なものとして、細菌細
胞、例えば連鎖球菌属（streptococci）、ブドウ球菌属
（staphylococci）、大腸菌（E.coli）、ストレプトミ
セス（Streptomyces）および枯草菌（Bacillus subtili
s）細胞；真菌細胞、例えば酵母細胞およびアスペルギ
ルス属（Aspergillus）細胞；昆虫細胞、例えばドロソ
フィラＳ２（Drosophila S2）およびスポドプテラＳｆ
９（Spodoptera Sf9）細胞；動物細胞、例えばCHO、CO
S、HeLa、Ｃ１２７、３Ｔ３、BHK、HEK２９３およびボ
ウズ（Bows）黒色腫細胞；ならびに植物細胞が挙げられ
る。
胞、例えば連鎖球菌属（streptococci）、ブドウ球菌属
（staphylococci）、大腸菌（E.coli）、ストレプトミ
セス（Streptomyces）および枯草菌（Bacillus subtili
s）細胞；真菌細胞、例えば酵母細胞およびアスペルギ
ルス属（Aspergillus）細胞；昆虫細胞、例えばドロソ
フィラＳ２（Drosophila S2）およびスポドプテラＳｆ
９（Spodoptera Sf9）細胞；動物細胞、例えばCHO、CO
S、HeLa、Ｃ１２７、３Ｔ３、BHK、HEK２９３およびボ
ウズ（Bows）黒色腫細胞；ならびに植物細胞が挙げられ
る。
【００４０】多種の発現系を用いることができる。この
ような系として、とりわけ、染色体、エピソームおよび
ウイルス由来系、例えば細菌プラスミドから、バクテリ
オファージから、トランスポゾンから、酵母エピソーム
から、挿入エレメントから、酵母染色体エレメントか
ら、バキュロウイルス、パポバウイルスなどの、例えば
ＳＶ４０、ワクシニアウイルス、アデノウイルス、鶏痘
ウイルス、仮性狂犬病ウイルスおよびレトロウイルス等
のウイルスから由来のベクター、ならびにその組み合わ
せから由来のベクター、例えばコスミドおよびファージ
ミドなどのプラスミドおよびバクテリオファージ遺伝因
子から由来のベクターが挙げられる。発現系は発現を制
御および引き起こす調節領域を含有していてもよい。一
般に、ポリヌクレオチドを保持、伸長または発現させ、
宿主にてポリペプチドを産生するのに適した系またはベ
クターを使用できる。種々の周知かつ慣用的な技法、例
えば、Sambrookら、MOLECULAR CLONING、A LABORATORY
MANUAL（前掲）に記載されている技法により、適当なヌ
クレオチド配列を発現系に挿入できる。
ような系として、とりわけ、染色体、エピソームおよび
ウイルス由来系、例えば細菌プラスミドから、バクテリ
オファージから、トランスポゾンから、酵母エピソーム
から、挿入エレメントから、酵母染色体エレメントか
ら、バキュロウイルス、パポバウイルスなどの、例えば
ＳＶ４０、ワクシニアウイルス、アデノウイルス、鶏痘
ウイルス、仮性狂犬病ウイルスおよびレトロウイルス等
のウイルスから由来のベクター、ならびにその組み合わ
せから由来のベクター、例えばコスミドおよびファージ
ミドなどのプラスミドおよびバクテリオファージ遺伝因
子から由来のベクターが挙げられる。発現系は発現を制
御および引き起こす調節領域を含有していてもよい。一
般に、ポリヌクレオチドを保持、伸長または発現させ、
宿主にてポリペプチドを産生するのに適した系またはベ
クターを使用できる。種々の周知かつ慣用的な技法、例
えば、Sambrookら、MOLECULAR CLONING、A LABORATORY
MANUAL（前掲）に記載されている技法により、適当なヌ
クレオチド配列を発現系に挿入できる。
【００４１】翻訳タンパク質を、小胞体内腔、周辺腔ま
たは細胞外環境へ分泌させるために、適当な分泌シグナ
ルを所望のポリペプチドに組み込むことができる。これ
らのシグナルはポリペプチドに固有のシグナルであって
もよく、あるいは異種性のシグナルであってもよい。Ｔ
Ｒ６のポリペプチドをスクリーニングアッセイにて用い
るために発現させる場合、一般に、そのポリペプチドを
細胞表面で生成させることが好ましい。この場合、スク
リーニングアッセイに使用する前に細胞を集めてもよ
い。ＴＲ６のポリペプチドが培地中に分泌されるなら
ば、培地を回収してポリペプチドを回収し精製すること
ができる。細胞内に生成されるならば、まず細胞を溶解
し、次いで、ポリペプチドを回収しなければならない。
たは細胞外環境へ分泌させるために、適当な分泌シグナ
ルを所望のポリペプチドに組み込むことができる。これ
らのシグナルはポリペプチドに固有のシグナルであって
もよく、あるいは異種性のシグナルであってもよい。Ｔ
Ｒ６のポリペプチドをスクリーニングアッセイにて用い
るために発現させる場合、一般に、そのポリペプチドを
細胞表面で生成させることが好ましい。この場合、スク
リーニングアッセイに使用する前に細胞を集めてもよ
い。ＴＲ６のポリペプチドが培地中に分泌されるなら
ば、培地を回収してポリペプチドを回収し精製すること
ができる。細胞内に生成されるならば、まず細胞を溶解
し、次いで、ポリペプチドを回収しなければならない。
【００４２】ＴＲ６のポリペプチドは、硫酸アンモニウ
ムまたはエタノール沈殿、酸抽出、陰イオンまたは陽イ
オン交換クロマトグラフィー、ホスホセルロースクロマ
トグラフィー、疎水相互作用クロマトグラフィー、アフ
ィニティークロマトグラフィー、ヒドロキシルアパタイ
トクロマトグラフィーおよびレクチンクロマトグラフィ
ーを含め、周知の方法により、組換え細胞培養物から回
収および精製できる。高性能液体クロマトグラフィーを
精製に用いるのが最も好ましい。ポリペプチドが単離お
よび／または精製中に変性する場合、タンパク質を再生
するための周知方法を用い、再び活性な立体配座とする
ことができる。
ムまたはエタノール沈殿、酸抽出、陰イオンまたは陽イ
オン交換クロマトグラフィー、ホスホセルロースクロマ
トグラフィー、疎水相互作用クロマトグラフィー、アフ
ィニティークロマトグラフィー、ヒドロキシルアパタイ
トクロマトグラフィーおよびレクチンクロマトグラフィ
ーを含め、周知の方法により、組換え細胞培養物から回
収および精製できる。高性能液体クロマトグラフィーを
精製に用いるのが最も好ましい。ポリペプチドが単離お
よび／または精製中に変性する場合、タンパク質を再生
するための周知方法を用い、再び活性な立体配座とする
ことができる。
【００４３】診断アッセイ 本発明はまた診断薬として用いるためのＴＲ６のポリヌ
クレオチドの使用にも関する。機能不全に関与するＴＲ
６遺伝子の変異形の検出は、ＴＲ６の過少発現、過剰発
現または発現の変化よりもたらされる疾患の診断または
疾患の疑いを特定することのできる診断手段を提供す
る。ＴＲ６遺伝子に変異のある個体は、種々の方法によ
りＤＮＡレベルで検出できる。
クレオチドの使用にも関する。機能不全に関与するＴＲ
６遺伝子の変異形の検出は、ＴＲ６の過少発現、過剰発
現または発現の変化よりもたらされる疾患の診断または
疾患の疑いを特定することのできる診断手段を提供す
る。ＴＲ６遺伝子に変異のある個体は、種々の方法によ
りＤＮＡレベルで検出できる。
【００４４】診断に供する核酸は、対象の細胞、例え
ば、血液、尿、唾液、組織生検または剖検材料より得る
ことができる。ゲノムＤＮＡは、検出するのに直接使用
してもよく、または分析の前にＰＣＲもしくはその他の
増幅法を用いることにより酵素的に増幅させてもよい。
ＲＮＡまたはｃＤＮＡもまた同じ方法で用いることがで
きる。正常な遺伝子型との比較における増幅産物の大き
さの変化により、欠失および挿入を検出できる。点突然
変異は、増幅ＤＮＡを標識化ＴＲ６のヌクレオチド配列
とハイブリッド形成させることにより同定できる。完全
に対合した配列はＲＮase消化により、または融解温度
の違いにより、誤対合二重らせんから区別できる。ＤＮ
Ａ配列の違いはまた、変性物質と一緒にまたはなしで、
ゲル中のＤＮＡフラグメントの電気泳動の移動度の変化
により、または直接的ＤＮＡ配列決定法により検出でき
る。例えばMyersら、Science 230：1242（1985）を参照
のこと。特異的な位置での配列の変化はまた、ヌクレア
ーゼ保護アッセイ、例えばRＮaseおよびＳ１保護または
化学的切断法によっても明らかにすることができる。Co
ttonら、Proc. Natl. Acad. Sci., USA，85：4397-4401
（1985）を参照のこと。もう１つの具体例において、Ｔ
Ｒ６のヌクレオチド配列またはそのフラグメントからな
るオリゴヌクレオチドプローブのアレイ（array）を構
築して、例えば遺伝的変異の効果的なスクリーニングを
行うことができる。アレイ法はよく知られており、適用
範囲が広く、その方法を用いて、遺伝子発現、遺伝的連
鎖および遺伝的変化を含め、分子遺伝学における種々の
問題と取り組むことができる（例えば、M.Cheeら、Scie
nce, Vol 274, pp610-613（1996）を参照のこと）。
ば、血液、尿、唾液、組織生検または剖検材料より得る
ことができる。ゲノムＤＮＡは、検出するのに直接使用
してもよく、または分析の前にＰＣＲもしくはその他の
増幅法を用いることにより酵素的に増幅させてもよい。
ＲＮＡまたはｃＤＮＡもまた同じ方法で用いることがで
きる。正常な遺伝子型との比較における増幅産物の大き
さの変化により、欠失および挿入を検出できる。点突然
変異は、増幅ＤＮＡを標識化ＴＲ６のヌクレオチド配列
とハイブリッド形成させることにより同定できる。完全
に対合した配列はＲＮase消化により、または融解温度
の違いにより、誤対合二重らせんから区別できる。ＤＮ
Ａ配列の違いはまた、変性物質と一緒にまたはなしで、
ゲル中のＤＮＡフラグメントの電気泳動の移動度の変化
により、または直接的ＤＮＡ配列決定法により検出でき
る。例えばMyersら、Science 230：1242（1985）を参照
のこと。特異的な位置での配列の変化はまた、ヌクレア
ーゼ保護アッセイ、例えばRＮaseおよびＳ１保護または
化学的切断法によっても明らかにすることができる。Co
ttonら、Proc. Natl. Acad. Sci., USA，85：4397-4401
（1985）を参照のこと。もう１つの具体例において、Ｔ
Ｒ６のヌクレオチド配列またはそのフラグメントからな
るオリゴヌクレオチドプローブのアレイ（array）を構
築して、例えば遺伝的変異の効果的なスクリーニングを
行うことができる。アレイ法はよく知られており、適用
範囲が広く、その方法を用いて、遺伝子発現、遺伝的連
鎖および遺伝的変化を含め、分子遺伝学における種々の
問題と取り組むことができる（例えば、M.Cheeら、Scie
nce, Vol 274, pp610-613（1996）を参照のこと）。
【００４５】診断アッセイは、記載した方法によりＴＲ
６遺伝子中の変異を検出することによる、慢性および急
性炎症、関節炎、敗血症、自己免疫疾患（例えば、炎症
性腸疾患、乾癬）、移植片拒絶反応、移植片対宿主疾
患、感染、卒中、虚血症、急性呼吸疾患症候群、再狭
窄、脳損傷、ＡＩＤＳ、骨疾患、癌（例えば、リンパ増
殖性障害）、アテローム性動脈硬化症およびアルツハイ
マー病の疑いを診断または測定する方法を提供する。
６遺伝子中の変異を検出することによる、慢性および急
性炎症、関節炎、敗血症、自己免疫疾患（例えば、炎症
性腸疾患、乾癬）、移植片拒絶反応、移植片対宿主疾
患、感染、卒中、虚血症、急性呼吸疾患症候群、再狭
窄、脳損傷、ＡＩＤＳ、骨疾患、癌（例えば、リンパ増
殖性障害）、アテローム性動脈硬化症およびアルツハイ
マー病の疑いを診断または測定する方法を提供する。
【００４６】加えて、慢性および急性炎症、関節炎、敗
血症、自己免疫疾患（例えば、炎症性腸疾患、乾癬）、
移植片拒絶反応、移植片対宿主疾患、感染、卒中、虚血
症、急性呼吸疾患症候群、再狭窄、脳損傷、ＡＩＤＳ、
骨疾患、癌（例えば、リンパ増殖性障害）、アテローム
性動脈硬化症およびアルツハイマー病は、対象から由来
の試料より、異常に上昇または低下したＴＲ６のポリペ
プチドまたはＴＲ６のｍＲＮＡのレベルを測定すること
を特徴とする方法によって診断することができる。発現
の増加または低下は、ポリヌクレオチドの定量法として
当該分野で周知の方法、例えば、ＰＣＲ、ＲＴ-ＰＣ
Ｒ、ＲＮase保護、ノーザンブロッティングおよび他の
ハイブリダイゼーション法を用いてＲＮＡレベルで測定
できる。宿主から由来の試料中のＴＲ６のポリペプチド
などのタンパク質のレベルを決定するために用いること
ができるアッセイ法は、当業者に周知である。このよう
なアッセイ法には、ラジオイムノアッセイ、競争結合ア
ッセイ、ウェスタンブロット分析およびＥＬＩＳＡアッ
セイが挙げられる。
血症、自己免疫疾患（例えば、炎症性腸疾患、乾癬）、
移植片拒絶反応、移植片対宿主疾患、感染、卒中、虚血
症、急性呼吸疾患症候群、再狭窄、脳損傷、ＡＩＤＳ、
骨疾患、癌（例えば、リンパ増殖性障害）、アテローム
性動脈硬化症およびアルツハイマー病は、対象から由来
の試料より、異常に上昇または低下したＴＲ６のポリペ
プチドまたはＴＲ６のｍＲＮＡのレベルを測定すること
を特徴とする方法によって診断することができる。発現
の増加または低下は、ポリヌクレオチドの定量法として
当該分野で周知の方法、例えば、ＰＣＲ、ＲＴ-ＰＣ
Ｒ、ＲＮase保護、ノーザンブロッティングおよび他の
ハイブリダイゼーション法を用いてＲＮＡレベルで測定
できる。宿主から由来の試料中のＴＲ６のポリペプチド
などのタンパク質のレベルを決定するために用いること
ができるアッセイ法は、当業者に周知である。このよう
なアッセイ法には、ラジオイムノアッセイ、競争結合ア
ッセイ、ウェスタンブロット分析およびＥＬＩＳＡアッ
セイが挙げられる。
【００４７】染色体アッセイ 本発明のヌクレオチド配列は染色体の同定にも価値があ
る。該配列は、個々のヒト染色体上の特定の位置を特異
的に標的とし、これとハイブリッド形成しうる。本発明
に従って、関連する配列を染色体にマッピングする工程
は、それらの配列を遺伝子関連疾患と関連づける重要な
第１工程である。配列を正確な染色体位置にマッピング
したならば、染色体上の配列の物理的位置を遺伝地図の
データと関連づけることができる。かかるデータは、例
えば、V. McKusick, Mendelian Inheritance in Man（J
ohns Hopkins University Welch Medical Libraryから
オンラインで利用できる）にて見られる。ついで、連鎖
分析（物理的に隣接する遺伝子の同時遺伝）により、同
じ染色体領域にマッピングされた遺伝子と疾患との関係
を同定する。罹病個体と未罹病個体との間のｃＤＮＡま
たはゲノム配列の相違も測定することができる。いくつ
かまたはすべての罹病個体において変異が観察される
が、正常個体においては観察されない場合、その変異は
該疾患の原因である可能性がある。ＴＲ６の３’非翻訳
領域は、マッピングされたＥＳＴ（Genbank ID：Ｄ２０
１５１）の２９５ｂｐのヌクレオチド配列と適合する。
このＥＳＴは、WhiteheadInstituteにより、染色体８連
鎖基の頂点から染色体８、９７.６８まで地図形成され
ている。
る。該配列は、個々のヒト染色体上の特定の位置を特異
的に標的とし、これとハイブリッド形成しうる。本発明
に従って、関連する配列を染色体にマッピングする工程
は、それらの配列を遺伝子関連疾患と関連づける重要な
第１工程である。配列を正確な染色体位置にマッピング
したならば、染色体上の配列の物理的位置を遺伝地図の
データと関連づけることができる。かかるデータは、例
えば、V. McKusick, Mendelian Inheritance in Man（J
ohns Hopkins University Welch Medical Libraryから
オンラインで利用できる）にて見られる。ついで、連鎖
分析（物理的に隣接する遺伝子の同時遺伝）により、同
じ染色体領域にマッピングされた遺伝子と疾患との関係
を同定する。罹病個体と未罹病個体との間のｃＤＮＡま
たはゲノム配列の相違も測定することができる。いくつ
かまたはすべての罹病個体において変異が観察される
が、正常個体においては観察されない場合、その変異は
該疾患の原因である可能性がある。ＴＲ６の３’非翻訳
領域は、マッピングされたＥＳＴ（Genbank ID：Ｄ２０
１５１）の２９５ｂｐのヌクレオチド配列と適合する。
このＥＳＴは、WhiteheadInstituteにより、染色体８連
鎖基の頂点から染色体８、９７.６８まで地図形成され
ている。
【００４８】抗体 本発明のポリペプチドもしくはそれらのフラグメントま
たはそのアナログ、あるいはそれらを発現する細胞を免
疫原として用いて、ＴＲ６のポリペプチドに対して免疫
特異的な抗体を得ることもできる。「免疫特異的」なる
語は、抗体が先行技術における他の関連ポリペプチドに
対するアフィニティーよりも、本発明のポリペプチドに
対して実質的により大きなアフィニティーを有すること
を意味する。
たはそのアナログ、あるいはそれらを発現する細胞を免
疫原として用いて、ＴＲ６のポリペプチドに対して免疫
特異的な抗体を得ることもできる。「免疫特異的」なる
語は、抗体が先行技術における他の関連ポリペプチドに
対するアフィニティーよりも、本発明のポリペプチドに
対して実質的により大きなアフィニティーを有すること
を意味する。
【００４９】ＴＲ６のポリペプチドに拮抗して生じる抗
体は、ポリペプチドまたはエピトープ担持フラグメン
ト、アナログまたは細胞を、動物、好ましくはヒト以外
の動物に、通常の実験法を用いて投与することにより得
ることができる。モノクローナル抗体の産生には、連続
的セルライン培養により得られる抗体を提供するいずれ
の方法も用いることができる。例えば、ハイブリドーマ
法（Kohler,G.およびMilstein,C.、Nature 256：495-49
7（1975）、トリオーマ法、ヒトB-細胞ハイブリドーマ
法（Kozborら、Immunology Today 4：72（1983）および
EBV-ハイブリドーマ法（Coleら、MONOCLONAL ANTIBODIE
S AND CANCER THERAPY、７７−９６頁、Alan R. Liss,
Inc.,（1985））が挙げられる。
体は、ポリペプチドまたはエピトープ担持フラグメン
ト、アナログまたは細胞を、動物、好ましくはヒト以外
の動物に、通常の実験法を用いて投与することにより得
ることができる。モノクローナル抗体の産生には、連続
的セルライン培養により得られる抗体を提供するいずれ
の方法も用いることができる。例えば、ハイブリドーマ
法（Kohler,G.およびMilstein,C.、Nature 256：495-49
7（1975）、トリオーマ法、ヒトB-細胞ハイブリドーマ
法（Kozborら、Immunology Today 4：72（1983）および
EBV-ハイブリドーマ法（Coleら、MONOCLONAL ANTIBODIE
S AND CANCER THERAPY、７７−９６頁、Alan R. Liss,
Inc.,（1985））が挙げられる。
【００５０】一本鎖抗体を産生するのに記載された技術
（米国特許第４９４６７７８号）を適用して、本発明の
ポリペプチドに対する一本鎖抗体を産生できる。また、
トランスジェニックマウスまたは他の哺乳動物を含め、
他の生物を用いて、ヒト化抗体を発現させることができ
る。前記した抗体を用いて、ポリペプチドを発現するク
ローンを単離または同定してもよく、あるいはアフィニ
ティークロマトグラフィーによりポリペプチドを精製し
てもよい。ＴＲ６のポリペプチドに対する抗体を用い
て、とりわけ、慢性および急性炎症、関節炎、敗血症、
自己免疫疾患（例えば、炎症性腸疾患、乾癬）、移植片
拒絶反応、移植片対宿主疾患、感染、卒中、虚血症、急
性呼吸疾患症候群、再狭窄、脳損傷、ＡＩＤＳ、骨疾
患、癌（例えば、リンパ増殖性障害）、アテローム性動
脈硬化症およびアルツハイマー病を治療してもよい。
（米国特許第４９４６７７８号）を適用して、本発明の
ポリペプチドに対する一本鎖抗体を産生できる。また、
トランスジェニックマウスまたは他の哺乳動物を含め、
他の生物を用いて、ヒト化抗体を発現させることができ
る。前記した抗体を用いて、ポリペプチドを発現するク
ローンを単離または同定してもよく、あるいはアフィニ
ティークロマトグラフィーによりポリペプチドを精製し
てもよい。ＴＲ６のポリペプチドに対する抗体を用い
て、とりわけ、慢性および急性炎症、関節炎、敗血症、
自己免疫疾患（例えば、炎症性腸疾患、乾癬）、移植片
拒絶反応、移植片対宿主疾患、感染、卒中、虚血症、急
性呼吸疾患症候群、再狭窄、脳損傷、ＡＩＤＳ、骨疾
患、癌（例えば、リンパ増殖性障害）、アテローム性動
脈硬化症およびアルツハイマー病を治療してもよい。
【００５１】ワクチン 本発明の別の態様は、哺乳動物における免疫学的応答を
誘起する方法であって、抗体および／またはＴ細胞免疫
応答を生じさせるに十分なＴＲ６のポリペプチドまたは
そのフラグメントを哺乳動物に接種して、とりわけ、慢
性および急性炎症、関節炎、敗血症、自己免疫疾患（例
えば、炎症性腸疾患、乾癬）、移植片拒絶反応、移植片
対宿主疾患、感染、卒中、虚血症、急性呼吸疾患症候
群、再狭窄、脳損傷、ＡＩＤＳ、骨疾患、癌（例えば、
リンパ増殖性障害）、アテローム性動脈硬化症およびア
ルツハイマー病から該動物を防御することからなる方法
に関する。本発明のもう１つ別の態様は、哺乳動物にお
ける免疫学的応答を誘導する方法であって、ＴＲ６のポ
リペプチドをベクターを介してデリバリーし、かかる免
疫学的応答を誘発させ、抗体を産生し、該動物を疾患か
ら保護するように、インビボにてＴＲ６のポリヌクレオ
チドの発現を指令することからなる方法に関する。
誘起する方法であって、抗体および／またはＴ細胞免疫
応答を生じさせるに十分なＴＲ６のポリペプチドまたは
そのフラグメントを哺乳動物に接種して、とりわけ、慢
性および急性炎症、関節炎、敗血症、自己免疫疾患（例
えば、炎症性腸疾患、乾癬）、移植片拒絶反応、移植片
対宿主疾患、感染、卒中、虚血症、急性呼吸疾患症候
群、再狭窄、脳損傷、ＡＩＤＳ、骨疾患、癌（例えば、
リンパ増殖性障害）、アテローム性動脈硬化症およびア
ルツハイマー病から該動物を防御することからなる方法
に関する。本発明のもう１つ別の態様は、哺乳動物にお
ける免疫学的応答を誘導する方法であって、ＴＲ６のポ
リペプチドをベクターを介してデリバリーし、かかる免
疫学的応答を誘発させ、抗体を産生し、該動物を疾患か
ら保護するように、インビボにてＴＲ６のポリヌクレオ
チドの発現を指令することからなる方法に関する。
【００５２】本発明のさらなる態様は免疫学的／ワクチ
ン処方（組成物）であって、哺乳動物宿主中に導入され
た場合、その哺乳動物にてＴＲ６のポリペプチドに対す
る免疫学的応答を誘導する処方（該組成物はＴＲ６のポ
リペプチドまたはＴＲ６遺伝子を含んでなる）に関す
る。ワクチン処方は、さらに適当な担体を含んでいても
よい。ＴＲ６のポリペプチドは胃で分解されるかもしれ
ないため、好ましくは非経口的（皮下、筋肉内、静脈
内、皮内注射等を包含する）に投与する。非経口投与に
適した処方は、抗酸化剤、バッファー、静菌剤および処
方を患者の血液と等張にする溶質を含有してもよい水性
および非水性滅菌注射用溶液；ならびに懸濁剤または増
粘剤を含んでいてもよい水性および非水性滅菌懸濁液を
包含する。処方を１回投与または複数回投与用容器、例
えば、密封アンプルおよびバイアルに入れて提供しても
よく、使用直前に滅菌液体担体を添加するだけでよい凍
結乾燥状態にて保存してもよい。またワクチン処方は、
水中油系および当該分野で知られた他の系などの処方の
免疫原性を高めるためのアジュバント系を含んでいても
よい。用量は、ワクチンの個々の活性に依存しており、
通常の実験により容易に決定することができる。
ン処方（組成物）であって、哺乳動物宿主中に導入され
た場合、その哺乳動物にてＴＲ６のポリペプチドに対す
る免疫学的応答を誘導する処方（該組成物はＴＲ６のポ
リペプチドまたはＴＲ６遺伝子を含んでなる）に関す
る。ワクチン処方は、さらに適当な担体を含んでいても
よい。ＴＲ６のポリペプチドは胃で分解されるかもしれ
ないため、好ましくは非経口的（皮下、筋肉内、静脈
内、皮内注射等を包含する）に投与する。非経口投与に
適した処方は、抗酸化剤、バッファー、静菌剤および処
方を患者の血液と等張にする溶質を含有してもよい水性
および非水性滅菌注射用溶液；ならびに懸濁剤または増
粘剤を含んでいてもよい水性および非水性滅菌懸濁液を
包含する。処方を１回投与または複数回投与用容器、例
えば、密封アンプルおよびバイアルに入れて提供しても
よく、使用直前に滅菌液体担体を添加するだけでよい凍
結乾燥状態にて保存してもよい。またワクチン処方は、
水中油系および当該分野で知られた他の系などの処方の
免疫原性を高めるためのアジュバント系を含んでいても
よい。用量は、ワクチンの個々の活性に依存しており、
通常の実験により容易に決定することができる。
【００５３】スクリーニングアッセイ 本発明者らは、この度、配列番号５のＴＬ２（別にTRAI
Lとしても知られている、Immunity（６）：６７３−６
８２（１９９５））がＴＲ６のリガンドであることを見
出した。かくして、本発明のＴＲ６ポリペプチド、およ
びそのリガンドの１つである、ＴＬ２を、該レセプター
またはそのリガンドに結合し、本発明のポリペプチドの
レセプターまたはそのリガンドＴＬ２の活性を活性化
（アゴニスト）するかまたは阻害（アンタゴニスト）す
る化合物をスクリーニングする方法に用いることができ
る。すなわち、本発明のポリペプチドを用いて、例え
ば、細胞、無細胞調製物、化学ライブラリーおよび天然
物の混合物における小型分子基質およびリガンドの結合
を評価してもよい。これらの基質およびリガンドは、天
然の基質およびリガンドであってもよく、あるいは構造
または機能を模倣したものであってもよい。Coligan
ら、Current Protocols in Immunology 1（2）：第5章
（1991）を参照のこと。
Lとしても知られている、Immunity（６）：６７３−６
８２（１９９５））がＴＲ６のリガンドであることを見
出した。かくして、本発明のＴＲ６ポリペプチド、およ
びそのリガンドの１つである、ＴＬ２を、該レセプター
またはそのリガンドに結合し、本発明のポリペプチドの
レセプターまたはそのリガンドＴＬ２の活性を活性化
（アゴニスト）するかまたは阻害（アンタゴニスト）す
る化合物をスクリーニングする方法に用いることができ
る。すなわち、本発明のポリペプチドを用いて、例え
ば、細胞、無細胞調製物、化学ライブラリーおよび天然
物の混合物における小型分子基質およびリガンドの結合
を評価してもよい。これらの基質およびリガンドは、天
然の基質およびリガンドであってもよく、あるいは構造
または機能を模倣したものであってもよい。Coligan
ら、Current Protocols in Immunology 1（2）：第5章
（1991）を参照のこと。
【００５４】ＴＲ６のポリペプチドは、種々の病原性を
含め、多くの生物学的機能に関与している。したがっ
て、一方でＴＲ６を刺激する化合物および薬剤を、他方
でＴＲ６の機能を阻害するかまたはＴＲ６を発現する細
胞を除去しうる化合物または薬剤を見いだすことが望ま
しい。アンタゴニスト、またはＴＲ６発現細胞を除去す
る薬剤は、慢性および急性炎症、関節炎、敗血症、自己
免疫疾患（例えば、炎症性腸疾患、乾癬）、移植片拒絶
反応、移植片対宿主疾患、感染、卒中、虚血症、成人呼
吸窮迫症候群、再狭窄、脳損傷、ＡＩＤＳ、骨疾患、癌
（例えば、リンパ増殖性障害）、アテローム性動脈硬化
症およびアルツハイマー病などの症状の種々の治療およ
び予防目的に用いることができる。アゴニストは、Ｔ細
胞ならびに免疫系の他の要素、例えば、癌およびＡＩＤ
Ｓの治療のための要素の活性化に応答する症状の治療お
よび予防目的に用いることができる。しかし、アゴニス
トはまた、慢性および急性炎症、関節炎、敗血症、自己
免疫疾患（例えば、炎症性腸疾患、乾癬）、移植片拒絶
反応、移植片対宿主疾患、感染、卒中、虚血症、急性呼
吸疾患症候群、再狭窄、脳損傷、ＡＩＤＳ、骨疾患、癌
（例えば、リンパ増殖性障害）、アテローム性動脈硬化
症およびアルツハイマー病などの症状に治療的または予
防的に用いると共に、Ｔ細胞および免疫活性の下方調整
をもたらす免疫系の他の要素を不当に刺激するのに用い
ることもできる。
含め、多くの生物学的機能に関与している。したがっ
て、一方でＴＲ６を刺激する化合物および薬剤を、他方
でＴＲ６の機能を阻害するかまたはＴＲ６を発現する細
胞を除去しうる化合物または薬剤を見いだすことが望ま
しい。アンタゴニスト、またはＴＲ６発現細胞を除去す
る薬剤は、慢性および急性炎症、関節炎、敗血症、自己
免疫疾患（例えば、炎症性腸疾患、乾癬）、移植片拒絶
反応、移植片対宿主疾患、感染、卒中、虚血症、成人呼
吸窮迫症候群、再狭窄、脳損傷、ＡＩＤＳ、骨疾患、癌
（例えば、リンパ増殖性障害）、アテローム性動脈硬化
症およびアルツハイマー病などの症状の種々の治療およ
び予防目的に用いることができる。アゴニストは、Ｔ細
胞ならびに免疫系の他の要素、例えば、癌およびＡＩＤ
Ｓの治療のための要素の活性化に応答する症状の治療お
よび予防目的に用いることができる。しかし、アゴニス
トはまた、慢性および急性炎症、関節炎、敗血症、自己
免疫疾患（例えば、炎症性腸疾患、乾癬）、移植片拒絶
反応、移植片対宿主疾患、感染、卒中、虚血症、急性呼
吸疾患症候群、再狭窄、脳損傷、ＡＩＤＳ、骨疾患、癌
（例えば、リンパ増殖性障害）、アテローム性動脈硬化
症およびアルツハイマー病などの症状に治療的または予
防的に用いると共に、Ｔ細胞および免疫活性の下方調整
をもたらす免疫系の他の要素を不当に刺激するのに用い
ることもできる。
【００５５】候補化合物は、無細胞または細胞をベース
とするいずれかのアッセイにて、ＴＬ２のＴＲ６への結
合を阻害する化合物を検出する方法を用いて同定するこ
とができる。適当な無細胞アッセイは当業者であれば容
易に決定することができる。例えば、精製したＴＲ６ま
たはＴＲ６の細胞外ドメインを含有するＴＲ６の精製し
た誘導体を、直接的または間接的（例えば、抗体を介し
てＴＲ６に）のいずれかで適当な表面に固定し、精製し
たＴＬ２のＴＲ６への結合を遮断する能力により候補化
合物を同定するELISAフォーマットを用いてもよい。適
当な検出システムは、ストレプトアビジン・ホースラデ
ィッシュ・ペルオキシダーゼ接合体またはタグ、例え
ば、フルオレセインによる直接的接合法を用いる。逆
に、精製されたＴＬ２を適当な表面に固定し、精製され
たＴＲ６のＴＬ２への結合を遮断するその能力により候
補化合物を同定してもよい。ＴＲ６とＴＬ２との結合
は、直接的または間接的にＴＲ６に結合した標識を用い
ることで検出することができる。ＴＲ６タンパク質およ
びそのリガンドを用いる多くの他のアッセイフォーマッ
トも利用可能である。
とするいずれかのアッセイにて、ＴＬ２のＴＲ６への結
合を阻害する化合物を検出する方法を用いて同定するこ
とができる。適当な無細胞アッセイは当業者であれば容
易に決定することができる。例えば、精製したＴＲ６ま
たはＴＲ６の細胞外ドメインを含有するＴＲ６の精製し
た誘導体を、直接的または間接的（例えば、抗体を介し
てＴＲ６に）のいずれかで適当な表面に固定し、精製し
たＴＬ２のＴＲ６への結合を遮断する能力により候補化
合物を同定するELISAフォーマットを用いてもよい。適
当な検出システムは、ストレプトアビジン・ホースラデ
ィッシュ・ペルオキシダーゼ接合体またはタグ、例え
ば、フルオレセインによる直接的接合法を用いる。逆
に、精製されたＴＬ２を適当な表面に固定し、精製され
たＴＲ６のＴＬ２への結合を遮断するその能力により候
補化合物を同定してもよい。ＴＲ６とＴＬ２との結合
は、直接的または間接的にＴＲ６に結合した標識を用い
ることで検出することができる。ＴＲ６タンパク質およ
びそのリガンドを用いる多くの他のアッセイフォーマッ
トも利用可能である。
【００５６】適当な細胞をベースとするアッセイは、当
業者であれば容易に決定できる。一般に、かかるスクリ
ーニング操作は、本発明のレセプターのポリペプチドを
細胞表面に発現する適当な細胞を作り出すことからな
る。かかる細胞は、哺乳動物、酵母、Drosophilaまたは
E.coli由来の細胞を包含する。ついで、レセプター（ま
たは発現したポリペプチドを有する細胞膜）を発現する
細胞を、ＴＬ２などの既知リガンド、または試験化合物
と接触させて結合または機能的応答の刺激もしくは阻害
を観察する。該アッセイは、候補化合物に直接または間
接的に結合した標識を用いて、あるいは標識競争物質、
例えば、リガンドＴＬ２との競争を用いるアッセイにお
いて、レセプターを有する細胞への付着を検出する、候
補化合物の結合を簡単に試験することができる。さらに
は、候補化合物がレセプターまたはそのリガンドの活性
化により発生するシグナルを生じるかどうかを、その表
面にレセプターまたはそのリガンドおよびその融合タン
パク質を有する細胞に適した検出系を用いて、これらの
アッセイにより試験してもよい。典型的な融合パートナ
ーは、レセプターまたはリガンドの細胞外ドメインが、
別のレセプターの細胞内チロシンキナーゼドメインと融
合するものである。活性化の阻害剤は、一般に、既知ア
ゴニスト、例えば、リガンドＴＬ２の存在下でアッセイ
され、候補化合物が存在することによるアゴニストの活
性化に対する作用を観察する。かかるスクリーニングア
ッセイを行うための標準操作は当該分野において周知で
ある。
業者であれば容易に決定できる。一般に、かかるスクリ
ーニング操作は、本発明のレセプターのポリペプチドを
細胞表面に発現する適当な細胞を作り出すことからな
る。かかる細胞は、哺乳動物、酵母、Drosophilaまたは
E.coli由来の細胞を包含する。ついで、レセプター（ま
たは発現したポリペプチドを有する細胞膜）を発現する
細胞を、ＴＬ２などの既知リガンド、または試験化合物
と接触させて結合または機能的応答の刺激もしくは阻害
を観察する。該アッセイは、候補化合物に直接または間
接的に結合した標識を用いて、あるいは標識競争物質、
例えば、リガンドＴＬ２との競争を用いるアッセイにお
いて、レセプターを有する細胞への付着を検出する、候
補化合物の結合を簡単に試験することができる。さらに
は、候補化合物がレセプターまたはそのリガンドの活性
化により発生するシグナルを生じるかどうかを、その表
面にレセプターまたはそのリガンドおよびその融合タン
パク質を有する細胞に適した検出系を用いて、これらの
アッセイにより試験してもよい。典型的な融合パートナ
ーは、レセプターまたはリガンドの細胞外ドメインが、
別のレセプターの細胞内チロシンキナーゼドメインと融
合するものである。活性化の阻害剤は、一般に、既知ア
ゴニスト、例えば、リガンドＴＬ２の存在下でアッセイ
され、候補化合物が存在することによるアゴニストの活
性化に対する作用を観察する。かかるスクリーニングア
ッセイを行うための標準操作は当該分野において周知で
ある。
【００５７】潜在的なＴＲ６のアンタゴニストの例は、
抗体、またはある場合には、ＴＲ６のリガンドに密接に
関連するオリゴヌクレオチドまたはタンパク質、例え
ば、リガンドＴＬ２のフラグメント、またはレセプター
の活性が妨げられるように、該レセプターまたはそのリ
ガンドに結合するが、応答を惹起しない、小型分子を包
含する。潜在的ＴＲ６アゴニストの例として、ＴＲ６、
そのリガンド、例えばＴＬ２に結合する抗体、またはそ
の誘導体およびＴＲ６に結合する小型分子が挙げられ
る。これらのアゴニストは、本来のリガンドと接触する
ことにより誘発される応答のすべてまたは一部を模倣す
る応答を惹起するであろう。
抗体、またはある場合には、ＴＲ６のリガンドに密接に
関連するオリゴヌクレオチドまたはタンパク質、例え
ば、リガンドＴＬ２のフラグメント、またはレセプター
の活性が妨げられるように、該レセプターまたはそのリ
ガンドに結合するが、応答を惹起しない、小型分子を包
含する。潜在的ＴＲ６アゴニストの例として、ＴＲ６、
そのリガンド、例えばＴＬ２に結合する抗体、またはそ
の誘導体およびＴＲ６に結合する小型分子が挙げられ
る。これらのアゴニストは、本来のリガンドと接触する
ことにより誘発される応答のすべてまたは一部を模倣す
る応答を惹起するであろう。
【００５８】ＴＬ２のヌクレオチド配列（配列番号５）
（Immunex Research and Development Corporation、Se
attle、Washingtonは、ＴＮＦ−関連アポトーシス誘発
リガンド（TNF−related apotosis−inducing ligand；
TRAIL）と、Twiley SRら、Immunity（６）：６７３−６
８２（１９９５）にて公表）は以下のとおりである。
（Immunex Research and Development Corporation、Se
attle、Washingtonは、ＴＮＦ−関連アポトーシス誘発
リガンド（TNF−related apotosis−inducing ligand；
TRAIL）と、Twiley SRら、Immunity（６）：６７３−６
８２（１９９５）にて公表）は以下のとおりである。
【００５９】
【表５】 1 CCTCACTGAC TATAAAAGAA TAGAGAAGGA AGGGCTTCAG TGACCGGCTG 51 CCTGGCTGAC TTACAGCAGT CAGACTCTGA CAGGATCATG GCTATGATGG 101 AGGTCCAGGG GGGACCCAGC CTGGGACAGA CCTGCGTGCT GATCGTGATC 151 TTCACAGTGC TCCTGCAGTC TCTCTGTGTG GCTGTAACTT ACGTGTACTT 201 TACCAACGAG CTGAAGCAGA TGCAGGACAA GTACTCCAAA AGTGGCATTG 251 CTTGTTTCTT AAAAGAAGAT GACAGTTATT GGGACCCCAA TGACGAAGAG 301 AGTATGAACA GCCCCTGCTG GCAAGTCAAG TGGCAACTCC GTCAGCTCGT 351 TAGAAAGATG ATTTTGAGAA CCTCTGAGGA AACCATTTCT ACAGTTCAAG 401 AAAAGCAACA AAATATTTCT CCCCTAGTGA GAGAAAGAGG TCCTCAGAGA 451 GTAGCAGCTC ACATAACTGG GACCAGAGGA AGAAGCAACA CATTGTCTTC 501 TCCAAACTCC AAGAATGAAA AGGCTCTGGG CCGCAAAATA AACTCCTGGG 551 AATCATCAAG GAGTGGGCAT TCATTCCTGA GCAACTTGCA CTTGAGGAAT 601 GGTGAACTGG TCATCCATGA AAAAGGGTTT TACTACATCT ATTCCCAAAC 651 ATACTTTCGA TTTCAGGAGG AAATAAAAGA AAACACAAAG AACGACAAAC 701 AAATGGTCCA ATATATTTAC AAATACACAA GTTATCCTGA CCCTATATTG 751 TTGATGAAAA GTGCTAGAAA TAGTTGTTGG TCTAAAGATG CAGAATATGG 801 ACTCTATTCC ATCTATCAAG GGGGAATATT TGAGCTTAAG GAAAATGACA 851 GAATTTTTGT TTCTGTAACA AATGAGCACT TGATAGACAT GGACCATGAA 901 GCCAGTTTTT TCGGGGCCTT TTTAGTTGGC TAACTGACCT GGAAAGAAAA 951 AGCAATAACC TCAAAGTGAC TATTCAGTTT TCAGGATGAT ACACTATGAA 1001 GATGTTTCAA AAAATCTGAC CAAAACAAAC AAACAGAAAA CAGAAAACAA 1051 AAAAACCTCT ATGCAATCTG AGTAGAGCAG CCACAACCAA AAAATTCTAC 1101 AACACACACT GTTCTGAAAG TGACTCACTT ATCCCAAGAA AATGAAATTG 1151 CTGAAAGATC TTTCAGGACT CTACCTCATA TCAGTTTGCT AGCAGAAATC 1201 TAGAAGACTG TCAGCTTCCA AACATTAATG CAATGGTTAA CATCTTCTGT 1251 CTTTATAATC TACTCCTTGT AAAGACTGTA GAAGAAAGCG CAACAATCCA 1301 TCTCTCAAGT AGTGTATCAC AGTAGTAGCC TCCAGGTTTC CTTAAGGGAC 1351 AACATCCTTA AGTCAAAAGA GAGAAGAGGC ACCACTAAAA GATCGCAGTT 1401 TGCCTGGTGC AGTGGCTCAC ACCTGTAATC CCAACATTTT GGGAACCCAA 1451 GGTGGGTAGA TCACGAGATC AAGAGATCAA GACCATAGTG ACCAACATAG 1501 TGAAACCCCA TCTCTACTGA AAGTGCAAAA ATTAGCTGGG TGTGTTGGCA 1551 CATGCCTGTA GTCCCAGCTA CTTGAGAGGC TGAGGCAGGA GAATCGTTTG 1601 AACCCGGGAG GCAGAGGTTG CAGTGTGGTG AGATCATGCC ACTACACTCC 1651 AGCCTGGCGA CAGAGCGAGA CTTGGTTTCA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA 1701 CTTCAGTAAG TACGTGTTAT TTTTTTCAAT AAAATTCTAT TACAGTATGT 1751 CAAAAAAAAA AAAAAAAAA
【００６０】ＴＬ２のアミノ酸配列（配列番号６）（Im
munex Research and Development Corporation、Seattl
e、Washingtonは、ＴＮＦ−関連アポトーシス誘発リガ
ンド（TRAIL）と、Twiley SRら、Immunity（６）：６７
３−６８２（１９９５）にて公表）は以下のとおりであ
る。
munex Research and Development Corporation、Seattl
e、Washingtonは、ＴＮＦ−関連アポトーシス誘発リガ
ンド（TRAIL）と、Twiley SRら、Immunity（６）：６７
３−６８２（１９９５）にて公表）は以下のとおりであ
る。
【００６１】
【表６】 Met Ala Met Met Glu Val Gln Gly Gly Pro Ser Leu Gly Gln Thr Cys 16 Val Leu Ile Val Ile Phe Thr Val Leu Leu Gln Ser Leu Cys Val Ala 32 Val Thr Tyr Val Tyr Phe Thr Asn Glu Leu Lys Gln Met Gln Asp Lys 48 Tyr Ser Lys Ser Gly Ile Ala Cys Phe Leu Lys Glu Asp Asp Ser Tyr 64 Trp Asp Pro Asn Asp Glu Glu Ser Met Asn Ser Pro Cys Trp Gln Val 80 Lys Trp Gln Leu Arg Gln Leu Val Arg Lys Met Ile Leu Arg Thr Ser 96 Glu Glu Thr Ile Ser Thr Val Gln Glu Lys Gln Gln Asn Ile Ser Pro 112 Leu Val Arg Glu Arg Gly Pro Gln Arg Val Ala Ala His Ile Thr Gly 128 Thr Arg Gly Arg Ser Asn Thr Leu Ser Ser Pro Asn Ser Lys Asn Glu 144 Lys Ala Leu Gly Arg Lys Ile Asn Ser Trp Glu Ser Ser Arg Ser Gly 160 His Ser Phe Leu Ser Asn Leu His Leu Arg Asn Gly Glu Leu Val Ile 176 His Glu Lys Gly Phe Tyr Tyr Ile Tyr Ser Gln Thr Tyr Phe Arg Phe 192 Gln Glu Glu Ile Lys Glu Asn Thr Lys Asn Asp Lys Gln Met Val Gln 208 Tyr Ile Tyr Lys Tyr Thr Ser Tyr Pro Asp Pro Ile Leu Leu Met Lys 224 Ser Ala Arg Asn Ser Cys Trp Ser Lys Asp Ala Glu Tyr Gly Leu Tyr 240 Ser Ile Tyr Gln Gly Gly Ile Phe Glu Leu Lys Glu Asn Asp Arg Ile 256 Phe Val Ser Val Thr Asn Glu His Leu Ile Asp Met Asp His Glu Ala 272 Ser Phe Phe Gly Ala Phe Leu Val Gly End 281
【００６２】予防および治療方法 本発明は、過剰および不十分な量の両方のＴＲ６活性に
関連する、慢性および急性炎症、関節炎、敗血症、自己
免疫疾患（例えば、炎症性腸疾患、乾癬）、移植片拒絶
反応、移植片対宿主疾患、感染、卒中、虚血症、急性呼
吸疾患症候群、再狭窄、脳損傷、ＡＩＤＳ、骨疾患、癌
（例えば、リンパ増殖性障害）、アテローム性動脈硬化
症およびアルツハイマー病などの、異常な症状の治療方
法を提供する。
関連する、慢性および急性炎症、関節炎、敗血症、自己
免疫疾患（例えば、炎症性腸疾患、乾癬）、移植片拒絶
反応、移植片対宿主疾患、感染、卒中、虚血症、急性呼
吸疾患症候群、再狭窄、脳損傷、ＡＩＤＳ、骨疾患、癌
（例えば、リンパ増殖性障害）、アテローム性動脈硬化
症およびアルツハイマー病などの、異常な症状の治療方
法を提供する。
【００６３】ＴＲ６活性が過剰な場合、いくつかの方法
を用いることができる。１の方法は、リガンドのＴＲ６
との結合を遮断することにより、または別のシグナルを
阻害することにより活性化を阻害するのに効果的な量の
前記した阻害化合物（アンタゴニスト）を医薬上許容さ
れる担体と共に対象に投与し、そのことにより異常な症
状を改善することからなる。もう１つ別の方法におい
て、内在性ＴＲ６と競争してリガンドとの結合能を有す
る可溶形のＴＲ６のポリペプチドを投与してもよい。か
かる競争物質の典型例はＴＲ６のポリペプチドのフラグ
メントからなる。
を用いることができる。１の方法は、リガンドのＴＲ６
との結合を遮断することにより、または別のシグナルを
阻害することにより活性化を阻害するのに効果的な量の
前記した阻害化合物（アンタゴニスト）を医薬上許容さ
れる担体と共に対象に投与し、そのことにより異常な症
状を改善することからなる。もう１つ別の方法におい
て、内在性ＴＲ６と競争してリガンドとの結合能を有す
る可溶形のＴＲ６のポリペプチドを投与してもよい。か
かる競争物質の典型例はＴＲ６のポリペプチドのフラグ
メントからなる。
【００６４】さらにもう１つ別の方法において、発現遮
断法を用いて内在性ＴＲ６をコードする遺伝子の発現を
阻害してもよい。公知のかかる方法は、内部生成した、
あるいは別個に投与されたアンチセンス配列の使用から
なる。例えば、Oligodeoxynucleotides as Antisense I
nhibitors of Gene Expression，CRC Press，Boca Rato
n, FL（1988）中、O'Connor、J.Neurochem 56：560（19
91）を参照のこと。別法として、遺伝子と共に三重らせ
んを形成するオリゴヌクレオチドを供給することもでき
る。例えば、Leeら、Nucleic Acids Res 6：3073（197
9）；Cooneyら、Science 241：456（1988）；Dervan
ら、Science 251：1360（1991）を参照のこと。これら
のオリゴマーはそれ自体投与することができ、あるいは
関連するオリゴマーをインビボで発現させることもでき
る。
断法を用いて内在性ＴＲ６をコードする遺伝子の発現を
阻害してもよい。公知のかかる方法は、内部生成した、
あるいは別個に投与されたアンチセンス配列の使用から
なる。例えば、Oligodeoxynucleotides as Antisense I
nhibitors of Gene Expression，CRC Press，Boca Rato
n, FL（1988）中、O'Connor、J.Neurochem 56：560（19
91）を参照のこと。別法として、遺伝子と共に三重らせ
んを形成するオリゴヌクレオチドを供給することもでき
る。例えば、Leeら、Nucleic Acids Res 6：3073（197
9）；Cooneyら、Science 241：456（1988）；Dervan
ら、Science 251：1360（1991）を参照のこと。これら
のオリゴマーはそれ自体投与することができ、あるいは
関連するオリゴマーをインビボで発現させることもでき
る。
【００６５】ＴＲ６およびその活性の過少発現に関連す
る異常な症状を治療するのに、またいくつかの方法が利
用可能である。１の方法は、ＴＲ６を活性化する治療上
有効量の化合物（すなわち、前記のアゴニスト）を医薬
上許容される担体とともに対象に投与し、そのことによ
り異常な状態を改善することからなる。別法として、遺
伝子治療を用いて、対象中の関連細胞によるＴＲ６の内
因的生成を有効ならしめてもよい。例えば、前記のごと
く、複製欠損レトロウイルスベクターにて発現するよう
に、本発明のポリヌクレオチドを操作してもよい。つい
で、該レトロウイルス発現構築物を単離し、本発明のポ
リペプチドをコードするＲＮＡ含有のレトロウイルスプ
ラスミドベクターでトランスダクションしたパッケージ
ング細胞中に導入して、パッケージング細胞が目的とす
る遺伝子を含む感染性ウイルス粒子を生成するようにし
てもよい。これらのプロデューサー細胞を対象に投与し
て細胞をインビボで操作し、インビボでポリペプチドを
発現するようにしてもよい。遺伝子治療の概説として
は、Human Molecular Genetics,T.Strachan and A. P.
Read, BIOS Scientific Publishers Ltd（1996）中、第
２０章、Gene Therapyand other Molecular Genetic-ba
sed Therapeutic Approaches（およびその中の引用文
献）を参照のこと。別法は、治療量のＴＲ６のポリペプ
チドを適当な医薬担体と組み合わせて投与することであ
る。
る異常な症状を治療するのに、またいくつかの方法が利
用可能である。１の方法は、ＴＲ６を活性化する治療上
有効量の化合物（すなわち、前記のアゴニスト）を医薬
上許容される担体とともに対象に投与し、そのことによ
り異常な状態を改善することからなる。別法として、遺
伝子治療を用いて、対象中の関連細胞によるＴＲ６の内
因的生成を有効ならしめてもよい。例えば、前記のごと
く、複製欠損レトロウイルスベクターにて発現するよう
に、本発明のポリヌクレオチドを操作してもよい。つい
で、該レトロウイルス発現構築物を単離し、本発明のポ
リペプチドをコードするＲＮＡ含有のレトロウイルスプ
ラスミドベクターでトランスダクションしたパッケージ
ング細胞中に導入して、パッケージング細胞が目的とす
る遺伝子を含む感染性ウイルス粒子を生成するようにし
てもよい。これらのプロデューサー細胞を対象に投与し
て細胞をインビボで操作し、インビボでポリペプチドを
発現するようにしてもよい。遺伝子治療の概説として
は、Human Molecular Genetics,T.Strachan and A. P.
Read, BIOS Scientific Publishers Ltd（1996）中、第
２０章、Gene Therapyand other Molecular Genetic-ba
sed Therapeutic Approaches（およびその中の引用文
献）を参照のこと。別法は、治療量のＴＲ６のポリペプ
チドを適当な医薬担体と組み合わせて投与することであ
る。
【００６６】処方および投与 可溶形のＴＲ６のポリペプチドのごときペプチド、なら
びにアゴニストおよびアンタゴニストペプチドまたは小
型分子を、適当な医薬担体と組み合わせて処方してもよ
い。かかる処方は、治療上有効量のポリペプチドまたは
化合物、および医薬上許容される担体もまたは賦形剤を
含んでなる。かかる担体としては、食塩水、緩衝食塩
水、デキストロース、水、グリセロール、エタノール、
およびその組み合わせを包含するが、これらに限定され
ない。処方は投与経路に適したものとすべきであり、当
業者によく知られている。さらに本発明は、前記した本
発明の組成物の１種またはそれ以上の成分を充填した、
１個またはそれ以上の容器を含んでなる医薬パックおよ
びキットにも関する。
びにアゴニストおよびアンタゴニストペプチドまたは小
型分子を、適当な医薬担体と組み合わせて処方してもよ
い。かかる処方は、治療上有効量のポリペプチドまたは
化合物、および医薬上許容される担体もまたは賦形剤を
含んでなる。かかる担体としては、食塩水、緩衝食塩
水、デキストロース、水、グリセロール、エタノール、
およびその組み合わせを包含するが、これらに限定され
ない。処方は投与経路に適したものとすべきであり、当
業者によく知られている。さらに本発明は、前記した本
発明の組成物の１種またはそれ以上の成分を充填した、
１個またはそれ以上の容器を含んでなる医薬パックおよ
びキットにも関する。
【００６７】本発明のポリペプチドおよび他の化合物を
単独で使用してもよく、あるいは治療化合物のごとき他
の化合物と一緒に使用してもよい。医薬組成物の全身系
投与の好ましい形態は、典型的には静脈注射による注射
を包含する。皮下、筋肉内または腹腔内などの他の注射
経路を用いることもできる。全身系投与のための別の手
段は、胆汁酸塩またはフシジン酸などの浸透剤または他
の界面活性剤を用いる経粘膜または経皮投与を包含す
る。加えて、腸溶処方またはカプセル処方にうまく処方
されるならば、経口投与も可能である。これらの化合物
の投与は、膏薬、パスタ、ゲル等の形態にて、局所的お
よび／または局在化であってもよい。
単独で使用してもよく、あるいは治療化合物のごとき他
の化合物と一緒に使用してもよい。医薬組成物の全身系
投与の好ましい形態は、典型的には静脈注射による注射
を包含する。皮下、筋肉内または腹腔内などの他の注射
経路を用いることもできる。全身系投与のための別の手
段は、胆汁酸塩またはフシジン酸などの浸透剤または他
の界面活性剤を用いる経粘膜または経皮投与を包含す
る。加えて、腸溶処方またはカプセル処方にうまく処方
されるならば、経口投与も可能である。これらの化合物
の投与は、膏薬、パスタ、ゲル等の形態にて、局所的お
よび／または局在化であってもよい。
【００６８】必要な用量範囲は、ペプチドの選択、投与
経路、処方の性質、対象の症状の性質、および顧問医の
判断に依存する。しかしながら、適当な用量は対象１ｋ
ｇ当たり０.１ないし１００μｇの範囲である。しか
し、使用可能な種々の化合物および種々の投与経路の効
力の違いを考慮すれば、必要な用量は広範囲なものと思
われる。例えば、経口投与には静脈注射よりも多い用量
が必要であると考えられる。当該分野においてよく知ら
れた最適化のための標準的な経験的慣用操作を用いてこ
れらの用量の変更を行うことができる。しばしば「遺伝
子治療」と称される前記した治療方法において、治療に
用いられるポリペプチドを対象中において内在的に得る
こともできる。よって、例えば、レトロウイルスプラス
ミドベクターを用いて対象由来の細胞をＤＮＡまたはＲ
ＮＡなどのポリヌクレオチドで操作し、ポリペプチドを
エクスビボでコードしてもよい。次いで、細胞を対象に
導入する。
経路、処方の性質、対象の症状の性質、および顧問医の
判断に依存する。しかしながら、適当な用量は対象１ｋ
ｇ当たり０.１ないし１００μｇの範囲である。しか
し、使用可能な種々の化合物および種々の投与経路の効
力の違いを考慮すれば、必要な用量は広範囲なものと思
われる。例えば、経口投与には静脈注射よりも多い用量
が必要であると考えられる。当該分野においてよく知ら
れた最適化のための標準的な経験的慣用操作を用いてこ
れらの用量の変更を行うことができる。しばしば「遺伝
子治療」と称される前記した治療方法において、治療に
用いられるポリペプチドを対象中において内在的に得る
こともできる。よって、例えば、レトロウイルスプラス
ミドベクターを用いて対象由来の細胞をＤＮＡまたはＲ
ＮＡなどのポリヌクレオチドで操作し、ポリペプチドを
エクスビボでコードしてもよい。次いで、細胞を対象に
導入する。
【００６９】
【実施例】以下の実施例は、特記する場合を除き、当業
者に周知かつ慣用的な、標準方法を用いて行う。実施例
は例示であって、本発明を限定するものではない。
者に周知かつ慣用的な、標準方法を用いて行う。実施例
は例示であって、本発明を限定するものではない。
【００７０】実施例１ ヒトＴＮＦレセプターと配列類似性を有する２種類のＥ
ＳＴ（ＥＳＴ＃１７６００５４およびＥＳＴ＃１６３５
７４４）を市販のＥＳＴデータベースで発見した。その
２種のヌクレオチド配列（各々、３４６６ｂｐおよび２
６４１ｂｐ）を分析し、各々が、完全なｃＤＮＡ配列の
部分配列であり、ヌクレオチドレベルで２２２６ｂｐ
の、１００％の同一性で重複することが明らかにされ
た。その２種の配列は共に、ＴＲ６と称されるＴＮＦレ
セプター超科の新規なメンバーについての読み枠をコー
ドする、３８８１ｂｐの完全な推定ｃＤＮＡ配列に含ま
れる。その推定タンパク質は、疎水性の膜スパンニング
領域を有する４１１個のアミノ酸の長さであり、少なく
とも１種の形態のＴＲ６が膜結合タンパク質として発現
されることを示唆する。ＴＲ６タンパク質配列と、他の
ＴＮＦレセプター科タンパク質を比較し、その配列が、
この科の細胞外ドメインの特徴である２個のシステイン
に富む反復体および細胞内死ドメインを有することがわ
かった。
ＳＴ（ＥＳＴ＃１７６００５４およびＥＳＴ＃１６３５
７４４）を市販のＥＳＴデータベースで発見した。その
２種のヌクレオチド配列（各々、３４６６ｂｐおよび２
６４１ｂｐ）を分析し、各々が、完全なｃＤＮＡ配列の
部分配列であり、ヌクレオチドレベルで２２２６ｂｐ
の、１００％の同一性で重複することが明らかにされ
た。その２種の配列は共に、ＴＲ６と称されるＴＮＦレ
セプター超科の新規なメンバーについての読み枠をコー
ドする、３８８１ｂｐの完全な推定ｃＤＮＡ配列に含ま
れる。その推定タンパク質は、疎水性の膜スパンニング
領域を有する４１１個のアミノ酸の長さであり、少なく
とも１種の形態のＴＲ６が膜結合タンパク質として発現
されることを示唆する。ＴＲ６タンパク質配列と、他の
ＴＮＦレセプター科タンパク質を比較し、その配列が、
この科の細胞外ドメインの特徴である２個のシステイン
に富む反復体および細胞内死ドメインを有することがわ
かった。
【００７１】ＴＲ６のノーザンブロット 種々の組織およびセルラインをノーザンブロットにより
ｍＲＮＡ発現についてスクリーンした。Tri−Reagent
（Molecular Research Center Inc.、Cincinnati、OH）
を用いて細胞およびセルラインよりＲＮＡを調製し、変
性アガロースゲル中に走らせ（Sambrookら、Molecular
Cloning：a laboratory manual、第２版、Cold Spring
Harbor Lab Press、NY（１９８９））、９０分間、２５
ｍM NaOH中、真空ブロッティングを介して、ゼータ−プ
ローブナイロン膜（Biorad、Hercules、CA）に移動させ
た。３M NaClを含有する１M トリス−HCl（ｐH７.５）
で５ないし１０分間中和した後、そのブロットを５０％
ホルムアミド、８％硫酸デキストラン、６ｘＳＳＰＥ、
０.１％ＳＤＳおよび１００ｍｇ／ｍｌの切断サケ精子
ＤＮＡと、４２℃で少なくとも３０分間プレハイブリダ
イズさせた。ｃＤＮＡプローブをランダムプライミング
により３２Ｐ−ＣＴＰ（Statagene、La Jolla、CA）で
標識化し、０.２５M NaOHで簡単に変性させ、そのプレ
ハイブリダイゼーション溶液に加えた。さらに４２℃で
少なくとも２４時間インキュベーションした後、ブロッ
トを高いストリンジェントな条件で洗浄し、X-線フィル
ムに曝した。
ｍＲＮＡ発現についてスクリーンした。Tri−Reagent
（Molecular Research Center Inc.、Cincinnati、OH）
を用いて細胞およびセルラインよりＲＮＡを調製し、変
性アガロースゲル中に走らせ（Sambrookら、Molecular
Cloning：a laboratory manual、第２版、Cold Spring
Harbor Lab Press、NY（１９８９））、９０分間、２５
ｍM NaOH中、真空ブロッティングを介して、ゼータ−プ
ローブナイロン膜（Biorad、Hercules、CA）に移動させ
た。３M NaClを含有する１M トリス−HCl（ｐH７.５）
で５ないし１０分間中和した後、そのブロットを５０％
ホルムアミド、８％硫酸デキストラン、６ｘＳＳＰＥ、
０.１％ＳＤＳおよび１００ｍｇ／ｍｌの切断サケ精子
ＤＮＡと、４２℃で少なくとも３０分間プレハイブリダ
イズさせた。ｃＤＮＡプローブをランダムプライミング
により３２Ｐ−ＣＴＰ（Statagene、La Jolla、CA）で
標識化し、０.２５M NaOHで簡単に変性させ、そのプレ
ハイブリダイゼーション溶液に加えた。さらに４２℃で
少なくとも２４時間インキュベーションした後、ブロッ
トを高いストリンジェントな条件で洗浄し、X-線フィル
ムに曝した。
【００７２】ＴＲ６ ＲＮＡの極めて高い発現が大動脈
内皮細胞にて検出された。高発現はまた単球でも検出さ
れた。低い発現が骨髄およびＣＤ４＋活性化ＯＢＬにて
検出された。極めて低いが、検出可能なレベルでＴＲ６
ＲＮＡが、ＣＤ１９＋ＰＢＬ、ＣＤ８＋ＰＢＬ（活性
化および非刺激の両方）および非刺激のＣＤ４＋ＰＢＬ
にて発現された。造血セルラインにて、低レベルのＴＲ
６ ＲＮＡが、ＨＬ６０（前骨髄球）、ＫＧ１ａ（前骨
髄芽球）およびＫＧ１（骨髄芽球）セルラインにて発現
された。極めて低いが、検出可能なレベルのＴＲ６ Ｒ
ＮＡがＵ９３７（単芽球）およびＴＨＰ−１（単球）セ
ルラインにて発現された。大部分のＲＮＡ形態は３.８
ｋｂの大きさであった。
内皮細胞にて検出された。高発現はまた単球でも検出さ
れた。低い発現が骨髄およびＣＤ４＋活性化ＯＢＬにて
検出された。極めて低いが、検出可能なレベルでＴＲ６
ＲＮＡが、ＣＤ１９＋ＰＢＬ、ＣＤ８＋ＰＢＬ（活性
化および非刺激の両方）および非刺激のＣＤ４＋ＰＢＬ
にて発現された。造血セルラインにて、低レベルのＴＲ
６ ＲＮＡが、ＨＬ６０（前骨髄球）、ＫＧ１ａ（前骨
髄芽球）およびＫＧ１（骨髄芽球）セルラインにて発現
された。極めて低いが、検出可能なレベルのＴＲ６ Ｒ
ＮＡがＵ９３７（単芽球）およびＴＨＰ−１（単球）セ
ルラインにて発現された。大部分のＲＮＡ形態は３.８
ｋｂの大きさであった。
【００７３】
（１）一般的情報 （ｉ）出願人：ディーン，キース・シー ヤング，ピーター・アール （ｉｉ）発明の名称： 腫瘍壊死因子関連のレセプタ
ー、ＴＲ６ （ｉｉｉ）配列の数：６ （ｉｖ）郵送先 （Ａ）名称：ラトナー＆プレスティア （Ｂ）通り名：ピー・オー・ボックス ９８０ （Ｃ）都市名：バレイ・フォージ （Ｄ）州名：PA （Ｅ）国名：USA （Ｆ）郵便番号：19482 （ｖ）コンピューター・リーダブル・フォーム： （Ａ）媒体タイプ：ディスケット （Ｂ）コンピューター：ＩＢＭコンパチブル （Ｃ）オペレーティング・システム：ＤＯＳ （Ｄ）ソフトウェア：Windowsバージョン２.０用FastSE
Q （ｖ）現出願データ： （Ａ）出願番号： （Ｂ）出願日：1997年8月22日 （Ｃ）分類番号：不明 （ｖｉ）先の出願データ： （Ａ）出願番号：08／853684 （Ｂ）出願日：1997年5月9日 （ｖｉｉｉ）代理人情報： （Ａ）名称：プレスティア，ポール・エフ （Ｂ）登録番号：２３０３１ （Ｃ）代理人等における処理番号：ＧＨ５０００８−1 （ｉｘ）テレコミュニケーション情報： （Ａ）電話番号：610-407-0700 （Ｂ）ファックス番号：610-407-0701 （Ｃ）テレックス番号：846169
ー、ＴＲ６ （ｉｉｉ）配列の数：６ （ｉｖ）郵送先 （Ａ）名称：ラトナー＆プレスティア （Ｂ）通り名：ピー・オー・ボックス ９８０ （Ｃ）都市名：バレイ・フォージ （Ｄ）州名：PA （Ｅ）国名：USA （Ｆ）郵便番号：19482 （ｖ）コンピューター・リーダブル・フォーム： （Ａ）媒体タイプ：ディスケット （Ｂ）コンピューター：ＩＢＭコンパチブル （Ｃ）オペレーティング・システム：ＤＯＳ （Ｄ）ソフトウェア：Windowsバージョン２.０用FastSE
Q （ｖ）現出願データ： （Ａ）出願番号： （Ｂ）出願日：1997年8月22日 （Ｃ）分類番号：不明 （ｖｉ）先の出願データ： （Ａ）出願番号：08／853684 （Ｂ）出願日：1997年5月9日 （ｖｉｉｉ）代理人情報： （Ａ）名称：プレスティア，ポール・エフ （Ｂ）登録番号：２３０３１ （Ｃ）代理人等における処理番号：ＧＨ５０００８−1 （ｉｘ）テレコミュニケーション情報： （Ａ）電話番号：610-407-0700 （Ｂ）ファックス番号：610-407-0701 （Ｃ）テレックス番号：846169
【００７４】（２）配列番号１に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３８８１塩基対 （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：一本 （Ｄ）トポロジー：線状 （ｉｉ）分子の型：ｃＤＮＡ （ｘｉ）配列の記載：配列番号１： CTTTGCGCCC ACAAAATACA CCGACGATGC CCGATCTACT TTAAGGGCTG AAACCCACGG 60 GCCTGAGAGA CTATAAGAGC GTTCCCTACC GCCATGGAAC AACGGGGACA GAACGCCCCG 120 GCCGCTTCGG GGGCCCGGAA AAGGCACGGC CCAGGACCCA GGGAGGCGCG GGGAGCCAGG 180 CCTGGGCCCC GGGTCCCCAA GACCCTTGTG CTCGTTGTCG CCGCGGTCCT GCTGTTGGTC 240 TCAGCTGAGT CTGCTCTGAT CACCCAACAA GACCTAGCTC CCCAGCAGAG AGCGGCCCCA 300 CAACAAAAGA GGTCCAGCCC CTCAGAGGGA TTGTGTCCAC CTGGACACCA TATCTCAGAA 360 GACGGTAGAG ATTGCATCTC CTGCAAATAT GGACAGGACT ATAGCACTCA ATGGAATGAC 420 CTCCTTTTCT GCTTGCGCTG CACCAGGTGT GATTCAGGTG AAGTGGAGCT AAGTCCCTGC 480 ACCACGACCA GAAACACAGT GTGTCAGTGC GAAGAAGGCA CCTTCCGGGA AGAAGATTCT 540 CCTGAGATGT GCCGGAAGTG CCGCACAGGG TGTCCCAGAG GGATGGTCAA GGTCGGTGAT 600 TGTACACCCT GGAGTGACAT CGAATGTGTC CACAAAGAAT CAGGCATCAT CATAGGAGTC 660 ACAGTTGCAG CCGTAGTCTT GATTGTGGCT GTGTTTGTTT GCAAGTCTTT ACTGTGGAAG 720 AAAGTCCTTC CTTACCTGAA AGGCATCTGC TCAGGTGGTG GTGGGGACCC TGAGCGTGTG 780 GACAGAAGCT CACAACGACC TGGGGCTGAG GACAATGTCC TCAATGAGAT CGTGAGTATC 840 TTGCAGCCCA CCCAGGTCCC TGAGCAGGAA ATGGAAGTCC AGGAGCCAGC AGAGCCAACA 900 GGTGTCAACA TGTTGTCCCC CGGGGAGTCA GAGCATCTGC TGGAACCGGC AGAAGCTGAA 960 AGGTCTCAGA GGAGGAGGCT GCTGGTTCCA GCAAATGAAG GTGATCCCAC TGAGACTCTG 1020 AGACAGTGCT TCGATGACTT TGCAGACTTG GTGCCCTTTG ACTCCTGGGA GCCGCTCATG 1080 AGGAAGTTGG GCCTCATGGA CAATGAGATA AAGGTGGCTA AAGCTGAGGC AGCGGGCCAC 1140 AGGGACACCT TGTACACGAT GCTGATAAAG TGGGTCAACA AAACCGGGCG AGATGCCTCT 1200 GTCCACACCC TGCTGGATGC CTTGGAGACG CTGGGAGAGA GACTTGCCAA GCAGAAGATT 1260 GAGGACCACT TGTTGAGCTC TGGAAAGTTC ATGTATCTAG AAGGTAATGC AGACTCTGCC 1320 ATGTCCTAAG TGTGATTCTC TTCAGGAAGT CAGACCTTCC CTGGTTTACC TTTTTTCTGG 1380 AAAAAGCCCA ACTGGACTCC AGTCAGTAGG AAAGTGCCAC AATTGTCACA TGACCGGTAC 1440 TGGAAGAAAC TCTCCCATCC AACATCACCC AGTGGATGGA ACATCCTGTA ACTTTTCACT 1500 GCACTTGGCA TTATTTTTAT AAGCTGAATG TGATAATAAG GACACTATGG AAATGTCTGG 1560 ATCATTCCGT TTGTGCGTAC TTTGAGATTT GGTTTGGGAT GTCATTGTTT TCACAGCACT 1620 TTTTTATCCT AATGTAAATG CTTTATTTAT TTATTTGGGC TACATTGTAA GATCCATCTA 1680 CACAGTCGTT GTCCGACTTC ACTTGATACT ATATGATATG AACCTTTTTT GGGTGGGGGG 1740 TGCGGGGCAG TTCACTCTGT CTCCCAGGCT GGAGTGCAAT GGTGCAATCT TGGCTCACTA 1800 TAGCCTTGAC CTCTCAGGCT CAAGCGATTC TCCCACCTCA GCCATCCAAA TAGCTGGGAC 1860 CACAGGTGTG CACCACCACG CCCGGCTAAT TTTTTGTATT TTGTCTAGAT ATAGGGGCTC 1920 TCTATGTTGC TCAGGGTGGT CTCGAATTCC TGGACTCAAG CAGTCTGCCC ACCTCAGACT 1980 CCCAAAGCGG TGGAATTAGA GGCGTGAGCC CCCATGCTTG GCCTTACCTT TCTACTTTTA 2040 TAATTCTGTA TGTTATTATT TTATGAACAT GAAGAAACTT TAGTAAATGT ACTTGTTTAC 2100 ATAGTTATGT GAATAGATTA GATAAACATA AAAGGAGGAG ACATACAATG GGGGAAGAAG 2160 AAGAAGTCCC CTGTAAGATG TCACTGTCTG GGTTCCAGCC CTCCCTCAGA TGTACTTTGG 2220 CTTCAATGAT TGGCAACTTC TACAGGGGCC AGTCTTTTGA ACTGGACAAC CTTACAAGTA 2280 TATGAGTATT ATTTATAGGT AGTTGTTTAC ATATGAGTCG GGACCAAAGA GAACTGGATC 2340 CACGTGAAGT CCTGTGTGTG GCTGGTCCCT ACCTGGGCAG TCTCATTTGC ACCCATAGCC 2400 CCCATCTATG GACAGGCTGG GACAGAGGCA GATGGGTTAG ATCACACATA ACAATAGGGT 2460 CTATGTCATA TCCCAAGTGA ACTTGAGCCC TGTTTGGGCT CAGGAGATAG AAGACAAAAT 2520 CTGTCTCCCC ACGTCTGCCA TGGCATCAAG GGGGAAGAGT AGATGGTGCT TGAGAATGGT 2580 GTGAAATGGT TGCCATCTCA GGAGTAGATG GCCCGGCTCA CTTCTGGTTA TCTGTCACCC 2640 TGAGCCCATG AGCTGCCTTT TAGGGTACAG ATTGCCTACT TGAGGACCTT GGCCGCTCTG 2700 TAAGCATCTG ACTCATCTCA GAAATGTCAA TTCTTAAACA CTGTGGCAAC AGGACCTAGA 2760 ATGGCTGACG CATTAAGGTT TTCTTCTTGT GTCCTGTTCT ATTATTGTTT TAAGACCTCA 2820 GTAACCATTT CAGCCTCTTT CCAGCAAACC CTTCTCCATA GTATTTCAGT CATGGAAGGA 2880 TCATTTATGC AGGTAGTCAT TCCAGGAGTT TTTGGTCTTT TCTGTCTCAA GGCATTGTGT 2940 GTTTTGTTCC GGGACTGGTT TGGGTGGGAC AAAGTTAGAA TTGCCTGAAG ATCACACATT 3000 CAGACTGTTG TGTCTGTGGA GTTTTAGGAG TGGGGGGTGA CCTTTCTGGT CTTTGCACTT 3060 CCATCCTCTC CCACTTCCAT CTGGCATCCC CACGCGTTGT CCCCTGCACT TCTGGAAGGC 3120 ACAGGGTGCT GCTGCTTCCT GGTCTTTGCC TTTGCTGGGC CTTCTGTGCA GGACGCTCAG 3180 CCTCAGGGCT CAGAAGGTGC CAGTCCGGTC CCAGGTCCCT TGTCCCTTCC ACAGAGGCCT 3240 TCCTAGAAGA TGCATCTAGA GTGTCAGCCT TATCAGTGTT TAAGATTTTT CTTTTATTTT 3300 TAATTTTTTT GAGACAGAAT CTCACTCTCT CGCCCAGGCT GGAGTGCAAC GGTACGATCT 3360 TGGCTCAGTG CAACCTCCGC CTCCTGGGTT CAAGCGATTC TCGTGCCTCA GCCTCCGGAG 3420 TAGCTGGGAT TGCAGGCACC CGCCACCACG CCTGGCTAAT TTTTGTATTT TTAGTAGAGA 3480 CGGGGTTTCA CCATGTTGGT CAGGCTGGTC TCGAACTCCT GACCTCAGGT GATCCACNTT 3540 GGCCTCCGAA AGTGCTGGGA TATACAAGGC GTGAGCCACC AGCCAGGCCA AGATATTNTT 3600 NTAAAGNNAG CTTCCGGANG ACATGAAATA ANGGGGGGTT TTGTTGTTTA GTAACATTNG 3660 GCTTTGATAT ATCCCCAGGC CAAATNGCAN GNGACACAGG ACAGCCATAG TATAGTGTGT 3720 CACTCGTGGT TGGTGTCCTT TCATGGTTCT GCCCTGTCAA AGGTCCCTAT TTGAAATGTG 3780 TTATAATACA AACAAGGAAG CACATTGTGT ACAAAATACT TATGTATTTA TGAATCCATG 3840 ACCAAATTAA ATATGAAACC TTATATAAAA AAAAAAAAAA A 3881
【００７５】（２）配列番号２に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：４１１アミノ酸 （Ｂ）配列の型：アミノ酸 （Ｃ）鎖の数：一本 （Ｄ）トポロジー：線状 （ｉｉ）分子の型：タンパク質 （ｘｉ）配列の記載：配列番号２： Met Glu Gln Arg Gly Gln Asn Ala Pro Ala Ala Ser Gly Ala Arg Lys 1 5 10 15 Arg His Gly Pro Gly Pro Arg Glu Ala Arg Gly Ala Arg Pro Gly Pro 20 25 30 Arg Val Pro Lys Thr Leu Val Leu Val Val Ala Ala Val Leu Leu Leu 35 40 45 Val Ser Ala Glu Ser Ala Leu Ile Thr Gln Gln Asp Leu Ala Pro Gln 50 55 60 Gln Arg Ala Ala Pro Gln Gln Lys Arg Ser Ser Pro Ser Glu Gly Leu 65 70 75 80 Cys Pro Pro Gly His His Ile Ser Glu Asp Gly Arg Asp Cys Ile Ser 85 90 95 Cys Lys Tyr Gly Gln Asp Tyr Ser Thr Gln Trp Asn Asp Leu Leu Phe 100 105 110 Cys Leu Arg Cys Thr Arg Cys Asp Ser Gly Glu Val Glu Leu Ser Pro 115 120 125 Cys Thr Thr Thr Arg Asn Thr Val Cys Gln Cys Glu Glu Gly Thr Phe 130 135 140 Arg Glu Glu Asp Ser Pro Glu Met Cys Arg Lys Cys Arg Thr Gly Cys 145 150 155 160 Pro Arg Gly Met Val Lys Val Gly Asp Cys Thr Pro Trp Ser Asp Ile 165 170 175 Glu Cys Val His Lys Glu Ser Gly Ile Ile Ile Gly Val Thr Val Ala 180 185 190 Ala Val Val Leu Ile Val Ala Val Phe Val Cys Lys Ser Leu Leu Trp 195 200 205 Lys Lys Val Leu Pro Tyr Leu Lys Gly Ile Cys Ser Gly Gly Gly Gly 210 215 220 Asp Pro Glu Arg Val Asp Arg Ser Ser Gln Arg Pro Gly Ala Glu Asp 225 230 235 240 Asn Val Leu Asn Glu Ile Val Ser Ile Leu Gln Pro Thr Gln Val Pro 245 250 255 Glu Gln Glu Met Glu Val Gln Glu Pro Ala Glu Pro Thr Gly Val Asn 260 265 270 Met Leu Ser Pro Gly Glu Ser Glu His Leu Leu Glu Pro Ala Glu Ala 275 280 285 Glu Arg Ser Gln Arg Arg Arg Leu Leu Val Pro Ala Asn Glu Gly Asp 290 295 300 Pro Thr Glu Thr Leu Arg Gln Cys Phe Asp Asp Phe Ala Asp Leu Val 305 310 315 320 Pro Phe Asp Ser Trp Glu Pro Leu Met Arg Lys Leu Gly Leu Met Asp 325 330 335 Asn Glu Ile Lys Val Ala Lys Ala Glu Ala Ala Gly His Arg Asp Thr 340 345 350 Leu Tyr Thr Met Leu Ile Lys Trp Val Asn Lys Thr Gly Arg Asp Ala 355 360 365 Ser Val His Thr Leu Leu Asp Ala Leu Glu Thr Leu Gly Glu Arg Leu 370 375 380 Ala Lys Gln Lys Ile Glu Asp His Leu Leu Ser Ser Gly Lys Phe Met 385 390 395 400 Tyr Leu Glu Gly Asn Ala Asp Ser Ala Met Ser End 405 410 411
【００７６】（２）配列番号３に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：１０６２塩基対 （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：一本 （Ｄ）トポロジー：線状 （ｉｉ）分子の型：ｃＤＮＡ （ｘｉ）配列の記載：配列番号３： ATGACCTCCT TTTCTGCTTG CGCTGCACCA GGTGTGATTC AGGTGAAGTG GAGCTAAGTC 60 CCTGCACCAC GACCAGAAAC ACAGTGTGTC AGTGCGAAGA AGGCACCTTC CGGGAAGAAG 120 ATTCTCCTGA GATGTGCCGG AAGTGCCGCA CAGGGTGTCC CAGAGGGATG GTCAAGGTCG 180 GTGATTGTAC ACCCTGGAGT GACATCGAAT GTGTCCACAA AGAATCAGGC ATCATCATAG 240 GAGTCACAGT TGCAGCCGTA GTCTTGATTG TGGCTGTGTT TGTTTGCAAG TCTTTACTGT 300 GGAAGAAAGT CCTTCCTTAC CTGAAAGGCA TCTGCTCAGG TGGTGGTGGG GACCCTGAGC 360 GTGTGGACAG AAGCTCACAA CGACCTGGGG CTGAGGACAA TGTCCTCAAT GAGATCGTGA 420 GTATCTTGCA GCCCACCCAG GTCCCTGAGC AGGAAATGGA AGTCCAGGAG CCAGCAGAGC 480 CAACAGGTGT CAACATGTTG TCCCCCGGGG AGTCAGAGCA TCTGCTGGAA CCGGCAGAAG 540 CTGAAAGGTC TCAGAGGAGG AGGCTGCTGG TTCCAGCAAA TGAAGGTGAT CCCACTGAGA 600 CTCTGAGACA GTGCTTCGAT GACTTTGCAG ACTTGGTGCC CTTTGACTCC TGGGAGCCGC 660 TCATGAGGAA GTTGGGCCTC ATGGACAATG AGATAAAGGT GGCTAAAGCT GAGGCAGCGG 720 GCCACAGGGA CACCTTGTAC ACGATGCTGA TAAAGTGGGT CAACAAAACC GGGCGAGATG 780 CCTCTGTCCA CACCCTGCTG GATGCCTTGG AGACGCTGGG AGAGAGACTT GCCAAGCAGA 840 AGATTGAGGA CCACTTGTTG AGCTCTGGAA AGTTCATGTA TCTAGAAGGT AATGCAGACT 900 CTGCCATGTC CTAAGTGTGA TTCTCTTCAG GAAGTCAGAC CTTCCCTGGT TTACCTTTTT 960 TCTGGAAAAA GCCCAACTGG ACTCCAGTCA GTAGGAAAGT GCCACAATTG TCACATGACC 1020 GGTACTGGAA GAAACTCTCC CATCCAACAT CACCCAGTGG AT 1062
【００７７】（２）配列番号４に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３０３アミノ酸 （Ｂ）配列の型：アミノ酸 （Ｃ）鎖の数：一本 （Ｄ）トポロジー：線状 （ｉｉ）分子の型：タンパク質 （ｘｉ）配列の記載：配列番号４： Asp Leu Leu Phe Cys Leu Arg Cys Thr Arg Cys Asp Ser Gly Glu Val 1 5 10 15 Glu Leu Ser Pro Cys Thr Thr Thr Arg Asn Thr Val Cys Gln Cys Glu 20 25 30 Glu Gly Thr Phe Arg Glu Glu Asp Ser Pro Glu Met Cys Arg Lys Cys 35 40 45 Arg Thr Gly Cys Pro Arg Gly Met Val Lys Val Gly Asp Cys Thr Pro 50 55 60 Trp Ser Asp Ile Glu Cys Val His Lys Glu Ser Gly Ile Ile Ile Gly 65 70 75 80 Val Thr Val Ala Ala Val Val Leu Ile Val Ala Val Phe Val Cys Lys 85 90 95 Ser Leu Leu Trp Lys Lys Val Leu Pro Tyr Leu Lys Gly Ile Cys Ser 100 105 110 Gly Gly Gly Gly Asp Pro Glu Arg Val Asp Arg Ser Ser Gln Arg Pro 115 120 125 Gly Ala Glu Asp Asn Val Leu Asn Glu Ile Val Ser Ile Leu Gln Pro 130 135 140 Thr Gln Val Pro Glu Gln Glu Met Glu Val Gln Glu Pro Ala Glu Pro 145 150 155 160 Thr Gly Val Asn Met Leu Ser Pro Gly Glu Ser Glu His Leu Leu Glu 165 170 175 Pro Ala Glu Ala Glu Arg Ser Gln Arg Arg Arg Leu Leu Val Pro Ala 180 185 190 Asn Glu Gly Asp Pro Thr Glu Thr Leu Arg Gln Cys Phe Asp Asp Phe 195 200 205 Ala Asp Leu Val Pro Phe Asp Ser Trp Glu Pro Leu Met Arg Lys Leu 210 215 220 Gly Leu Met Asp Asn Glu Ile Lys Val Ala Lys Ala Glu Ala Ala Gly 225 230 235 240 His Arg Asp Thr Leu Tyr Thr Met Leu Ile Lys Trp Val Asn Lys Thr 245 250 255 Gly Arg Asp Ala Ser Val His Thr Leu Leu Asp Ala Leu Glu Thr Leu 260 265 270 Gly Glu Arg Leu Ala Lys Gln Lys Ile Glu Asp His Leu Leu Ser Ser 275 280 285 Gly Lys Phe Met Tyr Leu Glu Gly Asn Ala Asp Ser Ala Met Ser 290 295 300
【００７８】（２）配列番号５に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：１７６９塩基対 （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：一本 （Ｄ）トポロジー：線状 （ｉｉ）分子の型：ｃＤＮＡ （ｘｉ）配列の記載：配列番号５： CCTCACTGAC TATAAAAGAA TAGAGAAGGA AGGGCTTCAG TGACCGGCTG CCTGGCTGAC 60 TTACAGCAGT CAGACTCTGA CAGGATCATG GCTATGATGG AGGTCCAGGG GGGACCCAGC 120 CTGGGACAGA CCTGCGTGCT GATCGTGATC TTCACAGTGC TCCTGCAGTC TCTCTGTGTG 180 GCTGTAACTT ACGTGTACTT TACCAACGAG CTGAAGCAGA TGCAGGACAA GTACTCCAAA 240 AGTGGCATTG CTTGTTTCTT AAAAGAAGAT GACAGTTATT GGGACCCCAA TGACGAAGAG 300 AGTATGAACA GCCCCTGCTG GCAAGTCAAG TGGCAACTCC GTCAGCTCGT TAGAAAGATG 360 ATTTTGAGAA CCTCTGAGGA AACCATTTCT ACAGTTCAAG AAAAGCAACA AAATATTTCT 420 CCCCTAGTGA GAGAAAGAGG TCCTCAGAGA GTAGCAGCTC ACATAACTGG GACCAGAGGA 480 AGAAGCAACA CATTGTCTTC TCCAAACTCC AAGAATGAAA AGGCTCTGGG CCGCAAAATA 540 AACTCCTGGG AATCATCAAG GAGTGGGCAT TCATTCCTGA GCAACTTGCA CTTGAGGAAT 600 GGTGAACTGG TCATCCATGA AAAAGGGTTT TACTACATCT ATTCCCAAAC ATACTTTCGA 660 TTTCAGGAGG AAATAAAAGA AAACACAAAG AACGACAAAC AAATGGTCCA ATATATTTAC 720 AAATACACAA GTTATCCTGA CCCTATATTG TTGATGAAAA GTGCTAGAAA TAGTTGTTGG 780 TCTAAAGATG CAGAATATGG ACTCTATTCC ATCTATCAAG GGGGAATATT TGAGCTTAAG 840 GAAAATGACA GAATTTTTGT TTCTGTAACA AATGAGCACT TGATAGACAT GGACCATGAA 900 GCCAGTTTTT TCGGGGCCTT TTTAGTTGGC TAACTGACCT GGAAAGAAAA AGCAATAACC 960 TCAAAGTGAC TATTCAGTTT TCAGGATGAT ACACTATGAA GATGTTTCAA AAAATCTGAC 1020 CAAAACAAAC AAACAGAAAA CAGAAAACAA AAAAACCTCT ATGCAATCTG AGTAGAGCAG 1080 CCACAACCAA AAAATTCTAC AACACACACT GTTCTGAAAG TGACTCACTT ATCCCAAGAA 1140 AATGAAATTG CTGAAAGATC TTTCAGGACT CTACCTCATA TCAGTTTGCT AGCAGAAATC 1200 TAGAAGACTG TCAGCTTCCA AACATTAATG CAATGGTTAA CATCTTCTGT CTTTATAATC 1260 TACTCCTTGT AAAGACTGTA GAAGAAAGCG CAACAATCCA TCTCTCAAGT AGTGTATCAC 1320 AGTAGTAGCC TCCAGGTTTC CTTAAGGGAC AACATCCTTA AGTCAAAAGA GAGAAGAGGC 1380 ACCACTAAAA GATCGCAGTT TGCCTGGTGC AGTGGCTCAC ACCTGTAATC CCAACATTTT 1440 GGGAACCCAA GGTGGGTAGA TCACGAGATC AAGAGATCAA GACCATAGTG ACCAACATAG 1500 TGAAACCCCA TCTCTACTGA AAGTGCAAAA ATTAGCTGGG TGTGTTGGCA CATGCCTGTA 1560 GTCCCAGCTA CTTGAGAGGC TGAGGCAGGA GAATCGTTTG AACCCGGGAG GCAGAGGTTG 1620 CAGTGTGGTG AGATCATGCC ACTACACTCC AGCCTGGCGA CAGAGCGAGA CTTGGTTTCA 1680 AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA CTTCAGTAAG TACGTGTTAT TTTTTTCAAT AAAATTCTAT 1740 TACAGTATGT CAAAAAAAAA AAAAAAAAA 1769
【００７９】（２）配列番号６に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２８１アミノ酸 （Ｂ）配列の型：アミノ酸 （Ｃ）鎖の数：一本 （Ｄ）トポロジー：線状 （ｉｉ）分子の型：タンパク質 （ｘｉ）配列の記載：配列番号６： Ｍｅｔ Ａｌａ Ｍｅｔ Ｍｅｔ Ｇｌｕ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ｇｌｙ
Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ｃｙｓ １ ５
１０ １５ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｉｌｅ Ｖａｌ Ｉｌｅ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ
Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｃｙｓ Ｖａｌ Ａｌａ ２０ ２５
３０ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ａｓｎ Ｇｌｕ
Ｌｅｕ Ｌｙｓ Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ｇｌｎ Ａｓｐ Ｌｙｓ ３５ ４０
４５ Ｔｙｒ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｉｌｅ Ａｌａ Ｃｙｓ Ｐｈｅ
Ｌｅｕ Ｌｙｓ Ｇｌｕ Ａｓｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｔｙｒ ５０ ５５
６０ Ｔｒｐ Ａｓｐ Ｐｒｏ Ａｓｎ Ａｓｐ Ｇｌｕ Ｇｌｕ Ｓｅｒ Ｍｅｔ
Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ｃｙｓ Ｔｒｐ Ｇｌｎ Ｖａｌ ６５ ７０
７５ ８０ Ｌｙｓ Ｔｒｐ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ａｒｇ
Ｌｙｓ Ｍｅｔ Ｉｌｅ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ｔｈｒ Ｓｅｒ ８５
９０ ９５ Ｇｌｕ Ｇｌｕ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｇｌｕ
Ｌｙｓ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ａｓｎ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ｐｒｏ １００ １０５
１１０ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ａｒｇ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ｇｌｙ Ｐｒｏ Ｇｌｎ Ａｒｇ
Ｖａｌ Ａｌａ Ａｌａ Ｈｉｓ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｇｌｙ １１５ １２０
１２５ Ｔｈｒ Ａｒｇ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｓｅｒ
Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ａｓｎ Ｇｌｕ １３０ １３５
１４０ Ｌｙｓ Ａｌａ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｌｙｓ Ｉｌｅ Ａｓｎ Ｓｅｒ
Ｔｒｐ Ｇｌｕ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｓｅｒ Ｇｌｙ １４５ １５０
１５５ １６０ Ｈｉｓ Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｈｉｓ Ｌｅｕ
Ａｒｇ Ａｓｎ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｉｌｅ １６５
１７０ １７５ Ｈｉｓ Ｇｌｕ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ｐｈｅ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｉｌｅ Ｔｙｒ
Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｐｈｅ Ａｒｇ Ｐｈｅ １８０ １８５
１９０ Ｇｌｎ Ｇｌｕ Ｇｌｕ Ｉｌｅ Ｌｙｓ Ｇｌｕ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ｌｙｓ
Ａｓｎ Ａｓｐ Ｌｙｓ Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ｖａｌ Ｇｌｎ １９５ ２００
２０５ Ｔｙｒ Ｉｌｅ Ｔｙｒ Ｌｙｓ Ｔｙｒ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ｔｙｒ Ｐｒｏ
Ａｓｐ Ｐｒｏ Ｉｌｅ Ｌｅｕ Ｌｅｕ Ｍｅｔ Ｌｙｓ ２１０ ２１５
２２０ Ｓｅｒ Ａｌａ Ａｒｇ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｃｙｓ Ｔｒｐ Ｓｅｒ Ｌｙｓ
Ａｓｐ Ａｌａ Ｇｌｕ Ｔｙｒ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｔｙｒ ２２５ ２３０
２３５ ２４０ Ｓｅｒ Ｉｌｅ Ｔｙｒ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｉｌｅ Ｐｈｅ Ｇｌｕ
Ｌｅｕ Ｌｙｓ Ｇｌｕ Ａｓｎ Ａｓｐ Ａｒｇ Ｉｌｅ ２４５
２５０ ２５５ Ｐｈｅ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ａｓｎ Ｇｌｕ Ｈｉｓ Ｌｅｕ
Ｉｌｅ Ａｓｐ Ｍｅｔ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｇｌｕ Ａｌａ ２６０ ２６５
２７０ Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ｐｈｅ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｐｈｅ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｇｌｙ ２７５ ２８０
Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ｃｙｓ １ ５
１０ １５ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｉｌｅ Ｖａｌ Ｉｌｅ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ
Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｃｙｓ Ｖａｌ Ａｌａ ２０ ２５
３０ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ａｓｎ Ｇｌｕ
Ｌｅｕ Ｌｙｓ Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ｇｌｎ Ａｓｐ Ｌｙｓ ３５ ４０
４５ Ｔｙｒ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｉｌｅ Ａｌａ Ｃｙｓ Ｐｈｅ
Ｌｅｕ Ｌｙｓ Ｇｌｕ Ａｓｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｔｙｒ ５０ ５５
６０ Ｔｒｐ Ａｓｐ Ｐｒｏ Ａｓｎ Ａｓｐ Ｇｌｕ Ｇｌｕ Ｓｅｒ Ｍｅｔ
Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ｃｙｓ Ｔｒｐ Ｇｌｎ Ｖａｌ ６５ ７０
７５ ８０ Ｌｙｓ Ｔｒｐ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ａｒｇ
Ｌｙｓ Ｍｅｔ Ｉｌｅ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ｔｈｒ Ｓｅｒ ８５
９０ ９５ Ｇｌｕ Ｇｌｕ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｇｌｕ
Ｌｙｓ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ａｓｎ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ｐｒｏ １００ １０５
１１０ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ａｒｇ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ｇｌｙ Ｐｒｏ Ｇｌｎ Ａｒｇ
Ｖａｌ Ａｌａ Ａｌａ Ｈｉｓ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｇｌｙ １１５ １２０
１２５ Ｔｈｒ Ａｒｇ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｓｅｒ
Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ａｓｎ Ｇｌｕ １３０ １３５
１４０ Ｌｙｓ Ａｌａ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｌｙｓ Ｉｌｅ Ａｓｎ Ｓｅｒ
Ｔｒｐ Ｇｌｕ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｓｅｒ Ｇｌｙ １４５ １５０
１５５ １６０ Ｈｉｓ Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｈｉｓ Ｌｅｕ
Ａｒｇ Ａｓｎ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｉｌｅ １６５
１７０ １７５ Ｈｉｓ Ｇｌｕ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ｐｈｅ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｉｌｅ Ｔｙｒ
Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｐｈｅ Ａｒｇ Ｐｈｅ １８０ １８５
１９０ Ｇｌｎ Ｇｌｕ Ｇｌｕ Ｉｌｅ Ｌｙｓ Ｇｌｕ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ｌｙｓ
Ａｓｎ Ａｓｐ Ｌｙｓ Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ｖａｌ Ｇｌｎ １９５ ２００
２０５ Ｔｙｒ Ｉｌｅ Ｔｙｒ Ｌｙｓ Ｔｙｒ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ｔｙｒ Ｐｒｏ
Ａｓｐ Ｐｒｏ Ｉｌｅ Ｌｅｕ Ｌｅｕ Ｍｅｔ Ｌｙｓ ２１０ ２１５
２２０ Ｓｅｒ Ａｌａ Ａｒｇ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｃｙｓ Ｔｒｐ Ｓｅｒ Ｌｙｓ
Ａｓｐ Ａｌａ Ｇｌｕ Ｔｙｒ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｔｙｒ ２２５ ２３０
２３５ ２４０ Ｓｅｒ Ｉｌｅ Ｔｙｒ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｉｌｅ Ｐｈｅ Ｇｌｕ
Ｌｅｕ Ｌｙｓ Ｇｌｕ Ａｓｎ Ａｓｐ Ａｒｇ Ｉｌｅ ２４５
２５０ ２５５ Ｐｈｅ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ａｓｎ Ｇｌｕ Ｈｉｓ Ｌｅｕ
Ｉｌｅ Ａｓｐ Ｍｅｔ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｇｌｕ Ａｌａ ２６０ ２６５
２７０ Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ｐｈｅ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｐｈｅ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｇｌｙ ２７５ ２８０
フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 39/395 ＡＢＥ Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ 48/00 ＡＥＤ 21/08 Ｃ０７Ｋ 14/705 Ａ６１Ｋ 37/02 ＡＢＢ 16/28 ＡＢＪ Ｃ１２Ｎ 5/10 ＡＤＵ Ｃ１２Ｐ 21/02 ＡＤＸ 21/08 Ｃ１２Ｎ 5/00 Ａ (72)発明者 ピーター・ロナルド・ヤング アメリカ合衆国08648ニュージャージー州 ローレンスビル、ヘンドリクソン・ロード 32番
Claims (20)
- 【請求項１】 配列番号２のＴＲ６のポリペプチドをコ
ードするヌクレオチド配列とその全長にわたって少なく
とも８０％の同一性を有するヌクレオチド配列、または
そのヌクレオチド配列に相補的なヌクレオチド配列を有
してなる単離されたポリヌクレオチド。 - 【請求項２】 ＤＮＡまたはＲＮＡである請求項１記載
のポリヌクレオチド。 - 【請求項３】 ヌクレオチド配列が配列番号１に含まれ
るヌクレオチド配列と少なくとも８０％同一である請求
項１記載のポリヌクレオチド。 - 【請求項４】 ヌクレオチド配列が配列番号１に含まれ
るＴＲ６のポリペプチドをコードする配列を有してなる
請求項３記載のポリヌクレオチド。 - 【請求項５】 配列番号１のポリヌクレオチドである請
求項３記載のポリヌクレオチド。 - 【請求項６】 発現系を有してなるＤＮＡまたはＲＮＡ
分子であって、発現系が適合可能な宿主細胞中にある場
合に、その発現系が配列番号2のポリペプチドと少なく
とも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を有してなる
ＴＲ６のポリペプチドを産生することができるＤＮＡま
たはＲＮＡ分子。 - 【請求項７】 請求項６の発現系を有してなる宿主細
胞。 - 【請求項８】 請求項７の宿主を、そのポリペプチドを
産生するのに十分な条件下で培養し、そのポリペプチド
を培養物から回収することからなるＴＲ６のポリペプチ
ドの産生法。 - 【請求項９】 ＴＲ６のポリペプチドを産生する細胞の
産生法であって、宿主細胞が、適当な培養条件下、ＴＲ
６のポリペプチドを産生するように、該宿主細胞を請求
項６の発現系で形質転換またはトランスフェクションす
ることからなる方法。 - 【請求項１０】 配列番号２のアミノ酸配列とその全長
にわたって少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸
配列からなるＴＲ６のポリペプチド。 - 【請求項１１】 配列番号２のアミノ酸配列からなる請
求項１０記載のポリペプチド。 - 【請求項１２】 請求項１０のＴＲ６のポリペプチドに
免疫特異的な抗体。 - 【請求項１３】 請求項１０のＴＲ６のポリペプチドの
活性または発現を強化する必要性のある対象の治療法で
あって、 （ａ）該対象に治療上有効量の該ポリペプチドに対する
アゴニストを投与し；および／または （ｂ）インビボにて該ポリペプチド活性を生じさせるよ
うな形態にて配列番号２のＴＲ６のポリペプチドをコー
ドするヌクレオチド配列とその全長にわたって少なくと
も８０％の同一性を有するヌクレオチド配列または該ヌ
クレオチド配列に相補的なヌクレオチド配列を有してな
る単離されたポリヌクレオチドを対象に付与することか
らなる方法。 - 【請求項１４】 請求項１０のＴＲ６のポリペプチドの
活性または発現を阻害する必要性のある対象の治療法で
あって、 （ａ）該対象に治療上有効量の該レセプターに対するア
ンタゴニストを投与し；および／または （ｂ）該対象に該レセプターをコードするヌクレオチド
配列の発現を阻害する核酸分子を投与し；および／また
は （ｃ）該対象にそのリガンドについて該レセプターと競
合する治療上有効量のポリペプチドを投与することから
なる方法。 - 【請求項１５】 対象での請求項１０のＴＲ６のポリペ
プチドの発現または活性に関連付けられる対象の疾患ま
たは疾患の疑いの診断方法であって、 （ａ）該対象のゲノム中のＴＲ６のポリペプチドをコー
ドするヌクレオチド配列における変異の有無を測定し；
および／または （ｂ）該対象から由来の試料中のＴＲ６のポリペプチド
の発現の存在または量について分析することからなる方
法。 - 【請求項１６】 請求項１０のＴＲ６のポリペプチドに
ついてのアゴニストの同定方法であって、 （ａ）ＴＲ６ポリペプチドを産生する細胞を候補化合物
と接触させ、 （ｂ）候補化合物がＴＲ６のポリペプチドの活性化によ
り生じるシグナルを発するかどうかを測定することから
なる方法。 - 【請求項１７】 請求項１６の方法により同定されるア
ゴニスト。 - 【請求項１８】 請求項１０のＴＲ６のポリペプチドに
対するアンタゴニストの同定方法であって、 （ａ）ＴＲ６ポリペプチドを産生する細胞をアゴニスト
と接触させ、 （ｂ）該アゴニストにより生じるシグナルが候補化合物
の存在で減じるかどうかを測定することからなる方法。 - 【請求項１９】 請求項１８の方法により同定されるア
ンタゴニスト。 - 【請求項２０】 請求項９の方法により産生される組換
え宿主細胞またはＴＲ６ポリペプチドを発現するその
膜。
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