JPH10290687A

JPH10290687A - 微生物の培養方法、有機化合物の生合成方法、微生物の汚染物質分解活性の維持方法、汚染物質の分解方法及び環境の修復方法

Info

Publication number: JPH10290687A
Application number: JP3624498A
Authority: JP
Inventors: Akira Kuriyama; 朗栗山; Takeshi Imamura; 剛士今村; Yasutsugu Yamada; 康嗣山田; Tetsuya Yano; 哲哉矢野; Shinya Furusaki; 眞也古崎
Original assignee: Canon Inc
Current assignee: Canon Inc
Priority date: 1997-02-18
Filing date: 1998-02-18
Publication date: 1998-11-04

Abstract

(57)【要約】【課題】微生物の増殖率や、微生物による化合物の合
成あるいは分解機能を向上させる方法を提供すること。【解決手段】微生物を培養する培地や、微生物の機能
を利用する環境中に、水を電解槽内で電気分解すること
によって得られる処理水を含有させる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は微生物の培養方法、
微生物を用いた有機化合物の生合成方法、微生物の汚染
物質分解能の維持方法、微生物を用いた汚染物質の分解
方法、及び微生物を用いた環境の修復方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、微生物利用工学の発展とともに、
微生物を用いた有用物質の生産や汚染物質の分解などの
可能性が盛んに検討されるようになった。微生物を利用
した技術は当初は化学合成が困難でかつ付加価値の高い
医療品・ホルモンなどの合成や、処理量が膨大で物理・
化学的手法ではコスト的に見合わない下水・廃水処理な
どに主に使われていた。

【０００３】しかし、遺伝子工学的手法等の種々の技術
の飛躍的進歩によって様々な物質の生産・分解が可能に
なり、微生物のより多様な利用の可能性が益々高まって
いる。例えば、微生物分解による環境浄化の分野では、
近年生体に対し有害でありかつ難分解性である有機塩素
化合物による環境汚染の浄化が注目されてきている。

【０００４】例えば、国内外の紙・パルプ工業や精密機
械関連産業地域の土壌中にはテトラクロロエチレン（Ｐ
ＣＥ）やトリクロロエチレン（ＴＣＥ）、ジクロロエチ
レン（ＤＣＥ）などのハロゲン化脂肪族炭化水素化合物
による汚染がかなりの範囲で拡がっていると考えられて
おり、実際に環境調査などで検出された事例が多数報告
されている。これらの有機塩素化合物は土壌中に残留し
たものが雨水等により地下水中に溶解して周辺地域一帯
に拡がるとされている。このような化合物は発癌性の疑
いがあり、また環境中で非常に安定であるため、特に飲
料水の水源として利用されている地下水の汚染は社会問
題となっている。

【０００５】そしてこのような、ハロゲン化脂肪族炭化
水素化合物の分解能を有する微生物として、例えば下記
のものが知られている。１）Welchia alkenophila sero 5; ATCC53570 (USP4,87
7,736) ２）Welchia alkenophila sero 33, ATCC53571 (USP4,8
77,736) ３）Methylocystis sp. strain M (Agric. Biol. Chem.
53,2903 (1989), Biosci. Biotech. Biochem. 56,486
(1992),ibid. 56,736 (1992) ４）Methylosinus trichosporium OB3b (Am. Chem. So
c. Natl. Meet. Dev. Environ. Microbiol. 55,3155 (1
989), Appl. Environ. Microbiol., 55,3155 (1989), A
ppl. Biochem. Biotechnol., 28,887 (19991), 特開平
２−９２２７４号公報、特開平３−２９２９７０号公
報）５）Methylomonas sp. MM2 (Appl. Environ. Microbio
l., 57,236 (1991)) ６）Alcaligenes denitrificans sp. xylosoxidans JE7
5 (Arch. microbiol., 154,410 (1990)) ７）Alcaligenes eutrophus JMP134 (Appl. Environ. M
icrobiol., 56,1179 (1990) ８）Alcaligenes eutrophus FERM P-13761（特開平７−
１２３９７６号公報）９）Pseudomonas aeruginosa Jl104（特開平７−２３６
８９５号公報）１０）Mycobacterium vaccae JOB5; ATCC29678 (J. Ge
n. Microbio., 82,163 (1974).Appl. Environ. Microbi
ol., 54,2960 (1989)) １１）Pseudomonas putida BH （下水道協会誌、２４，
２７（１９８７））１２）Pseudomonas sp. G4; ATCC53617 (Appl. Enviro
n. Microbiol., 52,383 (1986), ibid. 53,949 (1987),
ibid. 54,951 (1988), ibid. 56,1279 (1990), ibid.
57,1935 (1991), USP4,925,802) １３）Pseudomonas mendocina KR-1 (Bio/Technol. 7,2
82 (1989) １４）Pseudomonas putida F1 (Appl. Environ. Microb
iol., 54,1703 (1988),ibid. 54,2578 (1988)) １５）Pseudomonas flourescens PFL12 (Appl. Enviro
n. Microbiol., 54,2578(1988)) １６）Pseudomonas putida KWl-9（特開平６−７０７５
３号公報）１７）Pseudomonas cepacia KK01（特開平６−２２７７
６９号公報）１８）Nitrosomonas europaea (Appl. Environ. Microb
iol., 56,1169 (1990)) １９）Lactobacillus vaginalis sop. nov; ATCC49540
(Int. J. syst. Baceriol., 39,368 (1969)) ２０）Nocardia corallina B-276: FERM BP-5124, ATCC
31338 （特開平８−７０８８１号公報）また、微生物による物質合成の分野では、薬理活性物質
や酵素などの生合成が注目されてきている。

【０００６】ところで、上記したような微生物利用工学
の各分野に共通の課題として挙げられるのが高いコスト
である。この課題に関して例えば微生物による物質合成
の分野では、例えば特開平０４−２３１６０１号公報や
特開平０６−２１０２９７号公報に開示されているよう
に、連続式のリアクタにおいて、最適の菌体量と基質・
空気量との関係をあらかじめ設定しておき、リアクタ内
の菌体濃度や酸化還元電位を測定しながらリアクタを運
転し最適な基質投入量や曝気量を決定して供給すること
で、無駄のないリアクタ運転行う方法が提案されてい
る。また特開平０６−０６２８３１号公報では、リアク
タ形状を工夫することにより効率的に合成微生物を増殖
させ微生物と合成産物を回収することが提案されてい
る。

【０００７】また微生物による有機化合物の分解及び環
境浄化の分野においても有機化合物の分解効率の改善を
目的として種々の技術開発が行なわれている。例えば特
開平８−１１７７７７号に記載されているように液流式
の生化学反応装置において微生物を保持した担体の攪拌
効率を向上させる方法等が提案されている。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らが、微生物
工学、より具体的には微生物を用いた物質生産や微生物
を用いた有機化合物の分解の、より一層の効率化という
課題に対して種々の検討を行ったところ、微生物を用い
て効率的に物質生産を行う上で極めて好ましい微生物の
増殖のより一層の効率化、及び微生物による有機化合物
の分解効率のより一層の向上に電解水を用いることが有
効であるとの新たな知見を得た。すなわち微生物を電解
水を含む培地で増殖させた場合に、対照例と比較して増
殖速度及び最大到達菌数が増大すること、また微生物を
用いて有機化合物を分解させる際に電解水を共存させた
場合、対照例と比較して分解されるべき有機化合物をよ
り短時間で分解できることを見出した。

【０００９】本発明はこのような新たな知見に基づきな
されたものであり、本発明の目的は微生物をより効率的
に増殖させることのできる微生物の培養方法を提供する
点にある。また本発明の他の目的は、微生物を用いてよ
り一層効率的に有機化合物を生産する方法を提供する点
にある。本発明の他の目的は、汚染物質分解能を備えた
微生物の汚染物質分解能を維持させる方法を提供する点
にある。本発明の他の目的は、微生物を用いて有機化合
物をより一層の効率的に分解する方法を提供する点にあ
る。また本発明の更に他の目的は、微生物を用いた環境
浄化方法において、より一層の効率化を図ることのでき
る方法を提供する点にある。

【００１０】

【課題を解決するための手段】そして、上記目的を達成
し得る微生物の培養方法の一態様は、微生物が資化し得
る炭素源、及び水を電解槽内で電気分解することによっ
て得られる処理水を含む培地において該微生物を培養す
る工程を含むことを特徴とするものである。

【００１１】また、上記目的を達成し得る微生物の培養
方法の他の態様は、微生物が資化し得る炭素源、及びｐ
Ｈ１〜４、酸化還元電位が８００ｍＶ以上１５００ｍＶ
以下の酸性水を含む培地において該微生物を培養する工
程を含むことを特徴とするものである。

【００１２】更に、上記目的を達成し得る微生物の培養
方法の他の態様は、微生物が資化し得る炭素源、及び水
素イオン濃度（ｐＨ値）が１０〜１３、及び酸化還元電
位（作用電極；プラチナ電極、参照電極：銀−塩化銀電
極）が−１０００ｍＶ〜８００ｍＶのアルカリ性水を含
む培地において該微生物を培養する工程を含むことを特
徴とするものである。

【００１３】係る構成を採用することによって微生物の
増殖速度及び最大到達菌数をより増加させることができ
るという効果を奏するものである。

【００１４】また、上記目的を達成し得る有機化合物の
合成方法の一態様は、第１の有機化合物から第２の有機
化合物を生産可能な能力を備えて微生物と第１の化合物
とを反応させて第２の有機化合物を合成する工程を有す
る有機化合物の生合成方法において、前記工程を、水を
電解槽内で電気分解することによって得られる処理水の
共存下で行うことを特徴とするものである。

【００１５】また、上記目的を達成し得る有機化合物の
合成方法の他の態様は、第１の有機化合物から第２の有
機化合物を生産可能な能力を備えた微生物を、ｐＨ１〜
４、酸化還元電位が８００ｍＶ以上１５００ｍＶ以下の
酸性水の存在下で該第１の有機化合物と反応させる工程
を有することを特徴とするものである。

【００１６】更に、上記目的を達成し得る有機化合物の
合成方法の他の態様は、第１の有機化合物から第２の有
機化合物を生産可能な能力を備えた微生物を、水素イオ
ン濃度（ｐＨ値）が１０〜１３、及び酸化還元電位（作
用電極：プラチナ電極、参照電極：銀−塩化銀電極）が
−１０００ｍＶ〜８００ｍＶのアルカリ性水及び該第１
の有機化合物の共存下で培養する工程を有することを特
徴とするものである。

【００１７】更にまた、上記目的を達成し得る有機化合
物の合成方法の一態様は、第１の有機化合物から第２の
有機化合物を生産可能な能力を備えた微生物を炭素源及
び水を電解槽内で電気分解することによって得られる処
理水を含む培地で増殖させ、次いで増殖した微生物を単
離する工程：及び単離した微生物を第１の有機化合物と
反応させて第２の有機化合物を合成する工程、を有する
ことを特徴とするものである。

【００１８】そして、係る構成を採用することによっ
て、微生物を用いた物質生産における生産性をより一層
向上させることができる。

【００１９】上記目的を達成し得る、微生物の汚染物質
分解能の維持方法は、汚染物質分解能を発現している微
生物を水を電解槽内で電気分解することによって得られ
る処理水を含む培地にて培養する工程を含むことを特徴
とするものである。

【００２０】上記目的を達成し得る汚染物質の分解方法
の一態様は、汚染物質と該汚染物質の分解能を具備した
微生物とを接触させる工程を有する、微生物を用いた汚
染物質の分解方法において、上記汚染物質と該汚染物質
の分解能を具備した微生物とを接触させる工程を水を電
解槽内で電気分解することによって得られる処理水を含
む水の存在下で行うことを特徴とするものである。

【００２１】また上記目的を達成し得る汚染物質の分解
方法の他の態様は、汚染物質と該汚染物質の分解能を具
備した微生物とを接触させる工程を有する、微生物を用
いた汚染物質の分解方法において、該汚染物質と該汚染
物質の分解能を具備した微生物とを接触させる工程を、
ｐＨ１〜４、酸化還元電位が８００ｍＶ以上１５００ｍ
Ｖ以下の酸性水を含む水の存在下で行うことを特徴とす
るものである。

【００２２】更に上記目的を達成し得る汚染物質の分解
方法の他の態様は、汚染物質と該汚染物質の分解能を具
備した微生物とを接触させる工程を有する、微生物を用
いた汚染物質の分解方法において、上記汚染物質と該汚
染物質の分解能を具備した微生物とを接触させる工程を
水素イオン濃度（ｐＨ値）が１０〜１３、及び酸化還元
電位（作用電極：プラチナ電極、参照電極：銀−塩化銀
電極）が−１０００ｍＶ〜８００ｍＶであるアルカリ性
水を含む水の存在下で行うことを特徴とするものであ
る。

【００２３】上記目的を達成し得る環境の修復方法の一
態様は、環境中に含まれる汚染物質と該汚染物質の分解
能を有する微生物とを接触させて汚染物質を分解する工
程を有する環境の修復方法において、前記汚染物質と該
汚染物質の分解能を有する微生物とを接触させて該汚染
物質を分解する工程を、水を電解槽内で電気分解するこ
とによって得られる処理水を含む水の存在下で行うこと
を特徴とするものである。

【００２４】また上記目的を達成し得る環境の修復方法
の他の態様は、環境中に含まれる汚染物質と該汚染物質
の分解能を有する微生物とを接触させて汚染物質を分解
する工程を有する環境の修復方法において、前記汚染物
質と該汚染物質の分解能を有する微生物をと接触させて
該汚染物質を分解する工程を、ｐＨ１〜４、酸化還元電
位が８００ｍＶ以上１５００ｍＶ以下である酸性水を含
む水の存在下で行うことを特徴とするものである。

【００２５】更に上記目的を達成し得る環境の修復方法
の他の態様は、環境中に含まれ汚染物質と該汚染物質の
分解能を有する微生物とを接触させて汚染物質を分解す
る工程を有する環境の修復方法において、前記汚染物質
と該汚染物質の分解能を有する微生物とを接触させて該
汚染物質を分解する工程を、水素イオン濃度（ｐＨ値）
が１０〜１３、及び酸化還元電位（作用電極：プラチナ
電極、参照電極：銀−塩化銀電極）が−１０００ｍＶ〜
８００ｍＶであるアルカリ性水を含む水の存在下で行う
ことを特徴とするものである。

【００２６】そしてこれらの構成を採用することによっ
て、汚染物質をより一層効率よく分解することができ、
また環境の浄化を効率的に行うことができるという効果
を奏するものである。更にこれらの構成によれば微生物
の活動にとって劣悪な条件、例えば４℃といった低温
や、培地中の有機溶媒の濃度が１％以上のような、一般
的な微生物の生存・生育の過酷な条件の下でも活動させ
ることができるという効果を奏するものである。

【００２７】

【発明の実施の形態】

（電解水を用いた微生物の培養／有機化合物の合成方
法）本発明の微生物の培養方法の一実施態様は、微生物
が資化し得る炭素源、及び水を電解槽内で電気分解する
ことによって得られる処理水を含む培地において該微生
物を培養する工程を含むことを特徴とするものである。

【００２８】そしてこのような発明は、例えば水を電解
槽にて電気分解することによって得られる処理水が微生
物の増殖速度や最大到達菌数を増加させ、あるいは微生
物が汚染物質分解能を有するものである場合にはその分
解能を長期間維持せしめるという効果を奏するという本
発明者らの新たな知見に基づきなされたものである。

【００２９】また本発明の有機化合物の合成方法の一実
施態様は、第１の有機化合物から第２の有機化合物を生
産可能な能力を備えた微生物と第１の化合物とを反応さ
せて第２の有機化合物を合成する工程を有する有機化合
物の生合成方法において、前記工程を、水を電解槽内で
電気分解することによって得られる処理水の共存下で行
うことを特徴とするものである。そしてこの発明は、例
えば水を電解槽にて電気分解することによって得られる
処理水が微生物の物質変換能を向上させるとの本発明者
らの新たな知見に基づきなされたものである。

【００３０】ここで処理水とは例えば以下の方法によっ
て製造される電解水を挙げることができる。図１は電解
水製造装置の概略図であり、係る構成に類似した装置は
例えば特開昭６４−１１６９３号公報、特開平３−３９
２９３号及び特開平３−２３８０８４号公報に開示され
ている。そして図１において１は電解槽、２は隔膜、３
は陽極、４は陰極、５は給水口、６は陽極側に生成した
電解水の取水口、そして７は陰極側に生成した電解水の
取水口である。給水口５から水槽１の陽極３側及び陰極
４側に水を供給し、次いで該電極間に直流電圧を印加
し、水の電気分解を行うことによって陰極４側には陽イ
オンを含むアルカリ性を示す（以降「アルカリ性水」）
が集まり、陽極３側には陰イオンを含む酸性を示す水
（以降「酸性水」）が集まる。なお原料として給水口５
から水槽１に供給する水（以降「原水」）としては脱イ
オン水、純水等の何らかの処理を施した水であってもよ
く、また水道水や地下水等を用いても良い。

【００３１】そしてこのようにして得られた酸性水やア
ルカリ性水は、上記した各々の実施態様の処理水として
好適に用いることができる。ここで酸性水としては例え
ば水素イオン濃度（ｐＨ値）が１〜４、作用電極をプラ
チナ電極として参照電極を銀−塩化銀としたときの酸化
還元電位が８００〜１５００ｍＶの性状を有する酸性水
が好適に用いられ、特にはｐＨが２．８以下で酸化還元
電位が８００ｍＶ以上、更にはｐＨが２．８以下で酸化
還元電位が１１００ｍＶ以上の酸性水は微生物の増殖、
最大到達菌数の増大という観点から好ましいものであ
る。

【００３２】また、アルカリ性水としては、例えば水素
イオン濃度（ｐＨ値）が１０〜１３、作用電極をプラチ
ナ電極とし、参照電極を銀−塩化銀としたときの酸化還
元電位が−１０００〜８００ｍＶの性状を有するアルカ
リ性水が好適用いられ、特にはｐＨが１０．５以上で酸
化還元電位が−６００ｍＶ以下、更にはｐＨが１１以上
で酸化還元電位が−８００ｍＶ以下のアルカリ性水は微
生物の増殖、最大到達菌数の増大という観点から好まし
いものである。

【００３３】そしてこのような性状の酸性水やアルカリ
性水は例えば電解質（例えば、塩化ナトリウムや塩化カ
リウムなど）を原水に溶解し、この水を一対の電極を有
する水槽内で電気分解を行なうことによってその陽極近
傍で得ることができる。ここで電解前の原水中の電解質
の濃度は例えば塩化ナトリウムでは２０ｍｇ／ｌ〜２０
００ｍｇ／ｌが望ましく、そのときの電解電流値は２Ａ
〜２０Ａとするのが望ましい。また、このとき、隔膜２
として、例えば陰極側及び陽極側の電解質水溶液を各々
反対側に移動させず、陽極側に存在する陽イオン（例え
ばＮａ⁺、Ｃａ² ⁺、Ｍｇ²⁺、Ｋ⁺等）の陰極側への不可逆
的な移動を許容し、また陰極側に存在する陰イオン（例
えばＣｌ^- ，ＳＯ₄ ^2-，ＨＣＯ₃ ^-等）の陽極側への不可
逆な移動を許容するようなイオン交換膜を用いた場合、
陽極近傍に生成される酸性水と陰極近傍にて生成するア
ルカリ性の水との混合を防ぐことができ、上記した性状
の酸性水やアルカリ性水を効率よく得ることができる。
そしてこのような機能水を得る手段としては、市販の強
酸性電解水生成器（例えば、商品名：オアシスバイオハ
ーフ；旭硝子エンジニアリング（株）社製等）を利用す
ることができる。ここで電解質としては塩化ナトリウム
以外に塩化カリウム、塩化カルシウムや炭酸カルシウム
等の塩類を用いることもできる。

【００３４】ところで電解質として例えば塩化ナトリウ
ム等の塩化物を用いた場合、酸性水には塩素が溶存する
ため、微生物との接触に先立って脱塩素の処理を行なう
ことが好ましい。脱塩素処理の方法としては、例えば上
記した電解装置によって得られる酸性水を紫外線を照射
しながら攪拌する方法が挙げられる。そして塩素濃度と
しては例えばＣＬメータ（商品名：ＥＭ−２４０Ｗ；コ
スモス電機（株）製）等によって測定した結果が０．４
ｐｐｍ以下、特には０．３ｐｐｍ以下にまで下げること
が微生物の増殖速度の増加、あるいは有機化合物の効率
的な生合成には好ましい。（培養方法）次に本実施態様に係る培養方法は、電解水
を含む水を含み、かつ培養しようとする微生物が資化可
能な炭素源を含む培地において該微生物を培養する点に
特徴を有する。ここで電解水は、全培地の重量の１０重
量（ｗｔ）％以上、特には６０ｗｔ％以上含有させるこ
とが好ましい。電解水を含む微生物の培地の製法として
は、例えば電解水に培地の組成として必要な塩類を溶解
させる方法が挙げられる。培地の例としては例えば下記
表１に示す組成の塩類を含むＭ９培地や下記表２に示す
組成の塩類を含むＭＳＢ培地等の基礎塩培地を含む。

【００３５】また培養方法としては、微生物が電解水を
含む培地で増殖可能であればいかなる方法でも用いるこ
とができる。具体例としては、例えばバッチ法、半連続
法、連続法等が含まれる。更には閉鎖系や開放系も適宜
選択することが可能である。

【００３６】

【表１】

【００３７】

【表２】 *1)Hunlner's vitamine-free mineral base：ニトリロ三酢酸・・・１０．０ｇＭｇＳＯ₄ ・・・１４．４５ｇＣａＣｌ₂・２Ｈ₂Ｏ・・・３．３３５ｇ（ＮＨ₄）₆Ｍｏ₇Ｏ₂₄・Ｈ₂Ｏ・・・９．２５ｍｇＦｅＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ・・・９９ｍｇメタルズ“４４”^*2) ・・・５０ｍｌ蒸留水（全量で１０００ｍｌとする。） *2)メタルズ“４４”（Ｍｅｔａｌｓ“４４”）：エチレンジアミン四酢酸・・・２５０．０ｍｇＺｎＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ・・・１０９５．０ｍｇ（２５０ｍｇＺｎ）ＦｅＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ・・・５００．０ｍｇ（１００ｍｇＦｅ）ＭｎＳＯ₄・Ｈ₂Ｏ・・・１５４．０ｍｇ（５０ｍｇＭｎ）ＣｕＳＯ₄・５Ｈ₂ Ｏ３９．２ｍｇ（１０ｍｇＣｕ）Ｃｏ（ＮＯ₃）₂・６Ｈ₂Ｏ・・・１４．８ｍｇ（５ｍｇＣｏ）Ｎａ₂Ｂ₄Ｏ₇・１０Ｈ₂Ｏ・・・１７．７ｍｇ（２ｍｇＢ）（数滴の硫酸を加えて沈澱を防止する。）蒸留水・・・１００ｍｌ（微生物について）培養に用いる微生物としては、電解
水を含む培地で増殖可能であればよく、例えば自然界に
存在し、自然界から単離された微生物、自然界から単離
した微生物に人工的に突然変異をかけて得られた微生
物、更には自然界から単離された微生物（例えば大腸菌
ＪＭ１０９等）の遺伝子を人工的に組換えた微生物等を
用いることができる。より具体的には自然界から単離さ
れた微生物としてはＪ１株（ＦＥＲＭＢＰ−５１０
２）、シュードモナス・セパシア（Pseudomonas cepaci
a)ＫＫ０１（ＦＥＲＭＢＰ−４２３５）等が挙げられ
る。なお、シュードモナス・セパシアに属する細菌はバ
ークホルデリア・セパシア（Burkholderia cepacia）へ
と移行された。自然界から単離した微生物に人工的に突
然変異をかけた得られた微生物としては例えばＪＭ１株
（ＦＥＲＭＢＰ−５３５２）やＪＭ２Ｎ株（ＦＥＲＭ
ＢＰ−５９６１）等が挙げられる。（培養条件）培養条件は用いる微生物にとっての至適条
件で行なうことが好ましく、その条件は用いる微生物に
応じて適宜設定すれば良い。例えばある微生物では好気
条件下で行うことができ、また液体培養や固体培養で培
養すればよく、更に培養温度もその至適温度ですれば良
い。また微生物は担体等に固定させておいてもよく、ま
た微生物の生育を促進する公知の各種の方法を併用して
も良い。更に培養の途中で微生物の増殖に必要な栄養を
補充しても良い。（有機化合物の生合成方法）次の本実施態様に係る有機
化合物の生合成方法は、例えば第１の有機化合物から第
２の有機化合物を生産可能な能力を備えた微生物と第１
の有機化合物の反応を、処理水の共存下で行うことによ
って達成可能である。そして処理水としては前記した電
解水を同様に用いることができる。また反応時には該処
理水は例えば微生物棲息環境を構成する培地の全重量の
１０ｗｔ％以上、特に６０ｗｔ％以上含有させることが
好ましい。

【００３８】また微生物としては上記したように電解水
を含む培地で増殖可能な微生物であって、かつ第１の有
機化合物から第２の有機化合物を生合成可能なものが好
適に用いられる。そして係る微生物は主に２つの種類に
分けられる。すなわち第１の有機化合物から第２の有機
化合物への物質変換能を構成的に発現しているものと、
誘導物質（インデューサー）の存在下での培養によって
該物質変換能が誘導的に発現してくるものである。

【００３９】例えばＪＭ１株（ＦＥＲＭＢＰ−５３５
２）やＪＭ２Ｎ株（ＦＥＲＭＢＰ−５９６１）は、第
１の有機化合物としてのインドールから第２の有機化合
物としてのインジゴを生産する能力を構成的に備えてお
り、本実施態様には好適に用い得る微生物である。

【００４０】またＪ１株（ＦＥＲＭＢＰ−５１０２）
は、物質変換能を誘導的に発現する微生物である。この
微生物を本実施態様に用いる場合には、初めに該微生物
を炭素源及び誘導物質（例えばフェノールやトルエン等
の芳香族化合物等）の共存下で増殖させ、この増殖工程
によって得られる微生物を第１の有機化合物と反応させ
ることが好ましい。

【００４１】ところでこの実施態様において微生物と第
１の有機化合物との反応工程に該微生物の炭素源もしく
は炭素源とインデューサーを共存させ、微生物の増殖を
図りつつ第２の有機化合物の生合成を行っても良い。こ
れによって第２の有機化合物をより一層効率的に合成す
ることができる。ただし本発明者らは微生物と炭素源の
組み合わせによっては微生物の第１の有機化合物から第
２の有機化合物への変換能が、増殖によって低下する場
合があるとの知見を得ている。例えばＪＭ１株の場合リ
ンゴ酸ナトリウムやグルタミン酸ナトリウム等を共存さ
せた場合には微生物の増殖は第２の有機化合物の生合成
能力を何ら阻害しないが、乳酸ナトリウムやピルビン酸
ナトリウムを共存させると第２の有機化合物の生合成能
力が低下してしまう。したがって用いる微生物と炭素源
の組み合わせを考慮して炭素源を共存させるか否かを決
定することが好ましい。

【００４２】また第２の有機化合物の生合成方法の他の
実施態様としては、例えば第１の有機化合物から第２の
有機化合物を生合成可能な微生物を炭素源及び処理水の
共存下で培養して増殖させ、次いで微生物を単離して第
１の有機化合物と反応させることによっても第２の有機
化合物を効率的に生合成可能である。これは前記したよ
うに処理水の共存下で微生物を培養することで増殖速
度、及び最大到達菌数を向上させることができるという
効果を利用したものである。なおこのときも炭素源とし
ては微生物の物質変換能が低下しないような材料を選択
することが好ましく、例えば微生物としてＪ１株、ＪＭ
１株やＪＭ２Ｎ株を用いる場合にはリンゴ酸ナトリウム
やグルタミン酸ナトリウムを用いることが好ましい。（汚染物質の分解活性維持方法／汚染物質の分解方法／
環境の修復方法）次に本実施態様に係る微生物の汚染物
質の分解活性を維持する方法は、汚染物質分解活性を備
えた微生物を、水を電解槽内で電気分解することによっ
て得られる処理水を含む培地にて培養することによって
達成可能である。

【００４３】また本実施態様に係る汚染物質を分解する
方法は、汚染物質と該汚染物質の分解能を具備した微生
物とを、水を電解槽内で電気分解することによって得ら
れる処理水を含む水の存在下で接触させることによって
達成可能である。

【００４４】更に本実施態様に係る環境の修復は、環境
中に含まれる汚染物質と該汚染物質の分解能を有する微
生物とを水を電気槽内で電気分解することによって得ら
れる処理水を含む水の存在下で接触させることによって
達成可能である。

【００４５】上記３つの実施態様に用い得る処理水とし
ては、前記したものと全く同様の電解水が挙げられる。
また上記各実施態様において、処理水は例えば微生物棲
息環境を構成する培地の全重量に対して約１０ｗｔ％以
上、特には６０ｗｔ％以上含有させることが好ましい。

【００４６】また微生物としては、上記したように電解
水を含む培地で増殖可能な微生物であって、かつ汚染物
質の分解能を備えたものが好適に用いられる。汚染物質
の分解能を備えた微生物は主に２つのタイプに分けられ
る。一つは分解能が誘導物質（インデューサー）の存在
下で増殖させることによって発現するタイプであり、も
う一つは分解能を構成的（コンスティテューティブ）に
備えているタイプである。そして、上記した３つの実施
態様においてはどちらのタイプも使用可能である。

【００４７】例えば汚染物質の分解活性維持に、誘導物
質を必要とする微生物を用いる場合には、あらかじめ該
誘導物質の共存下で増殖させた後に該処理水を含む培地
で培養するか、または処理水を含む培地に誘導物質及び
炭素源を加えておくことが好ましい。そして培地に誘導
物質及び炭素源を加えておく場合には、前記したように
処理水による汚染物質分解活性の維持効果が微生物の増
殖によって阻害されないように微生物と炭素源との組合
わせを適宜選択することが好ましい。

【００４８】同様に上記した汚染物質の分解方法や環境
の修復方法に、誘導物質を必要とする微生物を用いる場
合には、あらかじめ該誘導物質の共存下で増殖させた後
に該処理水を含む水の存在下で汚染物質と接触させる
か、または処理水を含む水と誘導物質と炭素源の存在下
で汚染物質と接触させることが好ましい。そして処理水
を含む水と誘導物質と炭素源の存在下で汚染物質と微生
物を接触させる場合には上記したように処理水による汚
染物質分解効率の上昇を阻害しないように微生物と炭素
源との組合わせを適宜選択することが好ましい。

【００４９】また上記の汚染物質の分解活性維持方法
に、分解能を構成的に発現している微生物を用いる場合
には、この微生物を処理水を含み、炭素源を含まない培
地で培養するか、または処理水及び炭素源を含む培地で
培養すれば良い。同様に記した汚染物質の分解方法や環
境の修復方法に、分解能を構成的に発現している微生物
を用いる場合には、この微生物を処理水を含む水が共存
し、しかし炭素源が共存しない条件の下で汚染物質と接
触させるか、または処理水を含む水と炭素源の共存下で
汚染物質と接触させることが好ましい。ただし炭素源を
共存させる場合には上記した通り、処理水による汚染物
質分解効率の上昇を阻害しないように微生物と炭素源と
の組合わせを適宜選択することが好ましい。

【００５０】ここで微生物の具体例を挙げると、例えば
芳香族化合物（例えばフェノール、トルエン、クレゾー
ル等）やハロゲン化脂肪族炭化水素化合物（例えばトリ
クロロエチレンやジクロロエチレン等の塩素化脂肪族炭
化水素化合物等）の分解活性を誘導的に備えた微生物と
しては、例えばシュードモナス・セパシアＫＫ０１（Ｆ
ＥＲＭＢＰ−４２３５）やＪ１株（ＦＥＲＭＢＰ−
５１０２）等が挙げられる。そしてこれらの微生物にと
ってのインデューサーとしては例えば芳香族化合物（フ
ェノール、トルエン等）やメタン等が挙げられる。

【００５１】また上記と同様の汚染物質の分解能を構成
的に備えた微生物としては例えばＪＭ１株（ＦＥＲＭ
ＢＰ−５３５２）、ＪＭ２Ｎ株（ＦＥＲＭＢＰ−５９
６１）等が挙げられる。そしてこれらの微生物にとって
処理水との共存によっても処理水による効果を損ねない
炭素源としては例えばリンゴ酸ナトリウムやグルタミン
酸ナトリウム等が挙げられる。（環境修復の方法）（媒体）次に汚染物質の分解方法、及び環境の修復方法
についてより詳細に説明する。これらの方法においては
微生物を汚染物質と接触させることが好ましい。そして
その具体的な方法として、例えば汚染物質を含む媒体を
微生物及び電解水を含む反応槽に導入する方法や環境中
に直接微生物と電解水を含む水を導入する方法がある。
ここで上記媒体としては例えば汚染物質が溶解している
水性媒体が挙げられ、また類似の環境としては汚染物質
が溶解している地下水等がある。また媒体の他の例とし
ては汚染物質が吸着している固体が挙げられ、これと類
似の環境としては汚染物質が吸着した土壌が挙げられ
る。更に媒体の他の例としては汚染物質を含む気体があ
り、類似の環境としては汚染物質を含む空気が挙げられ
る。

【００５２】該汚染物質が水性媒体に含まれ、あるいは
処理すべき環境が地下水等の水性媒体の場合、水性媒体
中の汚染物質と微生物とを接触させる方法としては、例
えば水性媒体中に直接微生物を、処理水を含む水と共に
導入する方法が挙げられる。この場合、電解処理水は、
処理すべき水性媒体により希釈されるので、電解処理水
が該微生物に与える効果が十分示される範囲で導入する
必要がある。

【００５３】また水性媒体中の汚染物質と微生物とを接
触させる他の方法としては、ａ）培養槽にて微生物を処理水を含む環境下で培養し、
その培養槽に汚染物質を含む水性媒体を導入する形態、ｂ）培養槽にて微生物を処理水を含まない環境で培養
し、その培養槽に処理水を含む水及び汚染物質を含む水
性媒体を導入する形態、ｃ）培養槽で処理水を含まない環境中で培養した微生物
を処理水を含む培地の入った反応槽に移し、そこで培養
しつつ汚染物質を含む水性媒体を導入する形態、等が挙
げられる。

【００５４】培養槽や反応槽への水性媒体の導入及び排
出は連続して行っても良いが、処理能力に応じて間欠的
に、あるいはバッチ式で処理することも可能である。ま
た水性媒体の導入及び排出を上記いずれの方法で行う場
合でも培養槽または分解槽中の処理水を含む培地の濃度
を一定に保っておくことが好ましい。

【００５５】また微生物を担体に付着させ、これを処理
水を含む反応槽に充填し、反応槽に水性媒体を導入し分
解処理を行う形態も挙げられる。ここで用い得る担体と
しては微生物の保持能力に優れ、通気性を損なわないよ
うなものがより好ましい。このような担体の例として
は、例えば多孔質ガラス、セラミクス、金属酸化物、活
性炭、カオリナイト、ベントナイト、ゼオライト、シリ
カゲル、アルミナ、アンスラサイト等の無機粒子、デン
プン、寒天、キチン、キトサン、ポリビニアルコール、
アルギン酸、ポリアクリルアミド、カラギーナン、アガ
ロース、ゼラチン等のゲル状担体、イオン交換性セルロ
ース、イオン交換樹脂、セルロース誘導体、グルタルア
ルデヒド、ポリアクリル酸、ポリウレタン、ポリエステ
ル等が挙げられる。また、天然物としては土壌粒子、
綿、麻、紙等のセルロース系、木粉、樹皮等のリグニン
系のものが挙げられる。（固体（土壌））該汚染物質が固体に含まれ、あるいは
処理すべき環境が土壌等の固体の場合、固体中の汚染物
質と微生物とを接触させる方法としては、例えば固体中
に直接微生物を処理水を含む水と共に導入する方法が挙
げられる。

【００５６】具体的には汚染物質が土壌に含まれている
場合、土壌中に微生物を処理水を含む培地と共に導入す
る。導入の方法としては例えば土壌表面に散布する方法
や地中に挿入したパイプから地中に微生物を処理水を含
む培地と共に導入する方法が挙げられる。（気相（空気））該汚染物質が気体に含まれ、あるいは
処理すべき環境が空気等の気体の場合、気体中の汚染物
質と微生物とを接触させる方法としては、例えば微生物
と処理水を含む水とを含む反応槽中に気体を導入する方
法が挙げられる。

【００５７】気体の導入方法については何ら制限はない
が、気体の導入によって反応槽中の微生物及び処理水を
含む水が攪拌されエアレーションが促進されるようにす
ることが好ましい。気体の導入及び排出は連続して行っ
ても良いが、微生物の処理能力や汚染物質濃度に応じて
間欠的にあるいはバッチ式で導入しても良い。

【００５８】ところで上記した種々の反応形態におい
て、汚染物質の分解の際には微生物の周囲の条件（例え
ばｐＨ、塩濃度、温度、そして汚染物質濃度等）の調整
を行うことが好ましいが、特に環境の修復においては微
生物の活動にとっての最適な条件を設定することが困難
な場合も少なくない。そして処理水を用いる本実施態様
は驚くべきことに、これらの条件が微生物の生存に極め
て厳しい場合にも汚染物質の分解、環境の修復を効率的
に行なわせ得る。例えば前記した本発明の各々の実施態
様に用い得る微生物であるＪＭ１株、ＪＭ２Ｎ株等はフ
ェノールやトルエン、クレゾール等の芳香族化合物やＴ
ＣＥ、ＤＣＥ等のハロゲン化脂肪族炭化水素化合物をイ
ンデューサーを用いることなしに分解可能であるという
非常に優れた特性を有する菌株である。そしてこれらの
微生物の培養に適した温度は約１５〜３０℃であり、低
温（例えば４℃等）では汚染物質分解能を発揮させるこ
とは困難である。

【００５９】しかし本実施態様に係る処理水の共存下で
汚染物質とこれらの微生物とを接触させた場合、４℃と
いう微生物にとって過酷な条件でも汚染物質の分解能を
更に向上せしめることができる。よって従来と比較して
汚染物質の分解時の条件の調整の幅が広がり、微生物を
用いた水性媒体中の汚染物質の分解、水性媒体の修復の
適用範囲を広げることが可能である。

【００６０】以上説明したように本発明に係る各々の実
施態様によれば、例えば下記の効果を得られる。１）微生物の増殖速度を向上させ、また最大到達菌数を
増やすことができる。２）微生物を用いた物質生産において、その生産性を向
上させることができる。３）芳香族化合物やハロゲン化脂肪族炭化水素化合物等
の有機化合物の分解能を構成的に、あるいは誘導的に備
えている微生物の該分解能を長期に亘って維持すること
ができる。４）汚染物質の分解効率をより一層改善することができ
る。５）汚染環境の修復をより効率的に行なうことができ
る。

【００６１】そして係る効果が得られることにより、物
質の生産や環境修復に対する微生物の適用範囲をより広
範なものとすることができると考えられる。以下に実施
例を用いて、より一層具体的に本発明に係わる実施態様
を説明する。

【００６２】

【実施例】実施例で用いた微生物は、芳香族資化性のＴ
ＣＥなどの有機塩素化合物分解菌であるＪ１株（ＦＥＲ
ＭＢＰ−５１０２）、その変異株であり、該有機塩素
化合物分解の際に通常必要とされる誘導物質（インデュ
ーサー）が不要となった株であるＪＭ１株（ＦＥＲＭ
ＢＰ−５３５２）及び、ＪＭ２Ｎ株（ＦＥＲＭＢＰ−
５９６１）、更に、遺伝子工学分野で頻繁に用いられる
大腸菌であるＪＭ１０９株（東洋紡社製：Competent Ce
ll Kit Code No. DNA-900）である。［実施例１］（電解水Ｍ９培地の調製）実験に用いた酸性水及びアル
カリ性水は電解水製造装置（商品名：オアシスバイオハ
ーフＯＷ−ＯＨ；旭硝子エンジニヤリング（株）社
製）により作成し、酸性水はビーカーに移した後、紫外
線を照射しながらスターラーで攪拌し、溶存塩素濃度が
０．３ｐｐｍ以下になるまで脱塩素処理を行い、アルカ
リ性水はそのまま用いた。

【００６３】このような酸性水及びアルカリ性水を各々
５０％及び１００％を含む水に前記のＭ９培地組成とな
るように各種塩類を溶解し、０．２２μｍのフィルター
で濾過滅菌した後、電解水Ｍ９培地として用いた（以
後、酸性水Ｍ９培地Ａ及びＢ、アルカリ性水Ｍ９培地Ａ
及びＢとする）。塩類を溶解させた時点で各々の培地の
ｐＨは６．５〜７．５付近の中性、酸化還元電位は３０
０（２００〜４００）ｍＶ程度であった。

【００６４】（１）（ＪＭ１株の生菌率に対するアルカ
リ性水の効果−１）５０ｍｌ容のグライナーチューブ２本を用意し、各々に
リンゴ酸１％を含むアルカリ性水Ｍ９培地Ａ及びＢを１
５ｍｌ加え、更に寒天培地上のＪＭ１株のコロニーを接
種し、各々のグライナーチューブを１５℃で振盪培養し
た。これらのグライナーチューブから菌液１０マイクロ
リットルづつを定期的に採取し、蒸留水で１０倍に希釈
した後、生菌と総菌（生菌と死菌の合計）とを同時に検
出できるLIVE/DEAD BacLight Viability Kit（米国 Mol
ecular Probes, Inc. 製）を０．３μｌ加え約３０分室
温で染色した後、フローサイトメトリ（FACScan 米国 B
ecton Dickinson 製）で総菌濃度と生菌濃度を測定し
た。総菌数に占める生菌数の割合を表す生菌率の経時変
化を図２に示す。この結果、約２０日後アルカリ性水Ｍ
９培地Ｂでは総菌の５５．６％、アルカリ性水Ｍ９培地
Ａでは７８．６％のＪＭ１株が生菌で代謝活性を維持し
ている。また約２７日後では、それぞれ４２．７％、５
６．６％のＪＭ１株が生菌である事がわかった。

【００６５】（２）（ＪＭ１株の生菌率に対する酸性水
の効果−１）上記（１）のアルカリ性水Ｍ９培地Ａ及びＢを各々酸性
水Ｍ９培地Ａ及びＢに代えた以外は上記（１）と同様に
して生菌率の経時変化を測定した。その結果は図２に示
した通り、約２０日後酸性水Ｍ９培地Ｂでは総菌の７
８．７％、酸性水Ｍ９培地Ａでは６５．８％のＪＭ１が
生菌で代謝活性を維持し、約２７日後ではそれぞれ６
０．９％、４７．５％であった。

【００６６】（３）（コントロール）前記（１）のアルカリ性水Ｍ９培地Ａをリンゴ酸１％を
含む、滅菌蒸留水で調製したＭ９培地１５ｍｌに代えた
以外は前記（１）と同様にして生菌率の経時変化を測定
した。その結果は図２に示す通り、約１４日後には、平
均生菌率は３３．４％に低下していることがわかった。［実施例２］（１）（ＪＭ１株の生菌率に対するアルカリ性水の効果
−２）振盪培養を２５℃で行った以外は実施例１−（１）と同
様にして生菌率の経時変化を測定した。その結果は図３
に示す通り、約２０日後アルカリ性水Ｍ９培地Ｂでは総
菌の４２．６％、アルカリ性水Ｍ９培地Ｂでは４６．２
％のＪＭ１が生菌で代謝活性を維持し、約２７日後で
は、それぞれ１８．９％、２１．２％であった。

【００６７】（２）（ＪＭ１株の生菌率に対する酸性水
の効果−２）振盪培養を２５℃で行った以外は実施例１−（２）と同
様にして生菌率の経時変化を測定した。その結果は図３
に示す通り、約２０日後酸性水Ｍ９培地Ｂでは総菌の５
７．７％、酸性水Ｍ９培地Ａでは４９．１％のＪＭ１が
生菌で代謝活性を維持し、約２７日後では、それぞれ３
３．７％、２９．１％であった。

【００６８】（３）（コントロール）前記実施例２−（１）のアルカリ性水Ｍ９培地Ａをリン
ゴ酸１．０％を含む、滅菌蒸留水で調製したＭ９培地に
代えた以外は実施例２−（１）と同様にして生菌率の経
時変化を測定した。その結果は図３に示す通り、約１１
日後には、平均生菌率は１４．２％に低下していること
がわかった。［実施例３］（Ｊ１株の増殖に対する酸性水、アルカリ性水及びその
混合水の効果）リンゴ酸ナトリウム１．０％含有Ｍ９寒
天培地上のＪ１株のコロニーを、５００ｍｌ容振盪フラ
スコ中のリンゴ酸ナトリウム１．０％含有Ｍ９培地２０
０ｍｌに接種し、１５℃で３日間振盪培養した。

【００６９】次に５０ｍｌ容培養チューブを４本用意し
（培養チューブ〜）、各々に下記の培地を１０ｍｌ
づつ加えた。なお、何れの培地も濾過滅菌済である。培地チューブ：１０倍に濃い濃度で調製したＭ９培地
を実施例１で調製した脱塩素処理した酸性水で１０倍に
希釈したＭ９培地にリンゴ酸ナトリウム１％含有させた
培地。培養チューブ：１０倍に濃い濃度で調製したＭ９培地
を実施例１で調製したアルカリ性水で１０倍に希釈した
Ｍ９培地にリンゴ酸ナトリウム１％を含有させた培地。培養チューブ：１０倍に濃い濃度で調製したＭ９培地
を実施例１で調製したアルカリ性水と脱塩素処理した酸
性水とを等量混合した混合水で１０倍に希釈したＭ９培
地にリンゴ酸ナトリウム１％を含有させた培地。培養チューブ：１０倍に濃い濃度で調製したＭ９培地
を脱イオン水で１０倍に希釈したＭ９培地にリンゴ酸ナ
トリウム１％を含有させた培地。

【００７０】培養チューブ〜の各々に上記のように
培養したＪ１株の菌液０．１ｍｌを接種し、それぞれ１
５℃で振盪培養を行った。このように培養した菌液を経
時的にサンプリングし、分光光度計（増田理化工業株式
会社製、SMART PLUS 3255）にて、６６０ｎｍの濁度
（ＯＤ）を測定した。結果を図４に示す。なお、ＯＤの
値が０．５を超えるものについては３倍希釈して測定
し、後に換算した。培養チューブ〜中のＪ１株は、
培養チューブ中のＪ１株と比較して増殖速度、最大到
達菌数とも飛躍的に向上していることが示された。［実施例４］（ＪＭ１株の増殖に対する酸性水、アルカリ性水及びそ
の混合水の効果）実施例３において、Ｊ１株をＪＭ１株
に代えた以外は実施例３と同様にして微生物の増殖速度
及び最大到達菌数を測定した。その結果は図５に示すよ
うに培養チューブ〜中のＪＭ１株は培養チューブ
中のＪＭ１株と比較して増殖速度、最大到達菌数共に飛
躍的に向上していることが示された。［実施例５］（ＪＭ２Ｎ株の増殖に対する酸性水、アルカリ性水及び
その混合水の効果）実施例３において、Ｊ１株に代えて
ＪＭ２Ｎ株（ＦＥＲＭＢＰ−５９６１）を用いた以外
は実施例３と同様にして増殖速度及び最大到達菌数を測
定した。その結果は図６に示す通り、培養チューブ〜
中のＪＭ２Ｎ株は、培養チューブ中のＪＭ２Ｎ株に
比べ、増殖速度、最大到達菌数ともに飛躍的に向上して
いることが示された。［実施例６］（大腸菌ＪＭ１０９株の増殖に対する酸性水、アルカリ
性水及びその混合水の効果）ＬＢ寒天培地上のＪＭ１０
９株のコロニーを、５００ｍｌ容振盪フラスコ中のグル
コース１．０％含有Ｍ９培地２００ｍｌに接種し、室温
（２３℃）で３日間振盪培養した。

【００７１】次に実施例３と同様にして５０ｍｌ容培養
チューブ４本各々に培地を加えた。なお、実施例３にお
いて炭素源として各培養チューブに添加したリンゴ酸ナ
トリウム１％は、グルコース０．２％に代えた。このよ
うにして調製した各々の培地に、上記のように培養した
ＪＭ１０９株の菌液０．１ｍｌを接種し、それぞれ１５
℃で振盪培養を行った。このようにして培養した菌液を
経時的にサンプリングし、分光光度計（増田理化工業株
式会社製、SMART PLUS 3255）にて、６６０ｎｍの濁度
（ＯＤ）を測定した。結果を図７に示す。

【００７２】ＪＭ１０９株においても、ＪＭ１株と同
様、酸性水、アルカリ性水、混合水、いずれの場合にお
いても脱イオン水で調製したコントロール培地に比べ、
増殖速度、最大到達菌数とも飛躍的に向上していること
が示された。［実施例７］（ＪＭ１株によるインジゴ生産における電解水の効果）
実施例１と同様にして酸性水Ｍ９培地Ｂ及びアルカリ性
Ｍ９培地Ｂを調製した。次いで、寒天培地上のＪＭ１株
のコロニーをリンゴ酸ナトリウム２％を含むＭ９培地２
００ｍｌに接種し、坂口フラスコ中１５℃で７０時間振
盪培養を行った。次に、５０ｍｌ容の滅菌チューブを４
本用意し各々に、上記のＪＭ１株培養液を４５ｍｌ入れ
て遠心分離を行い、上澄を除いてＪＭ１株の菌ペレット
を得た。そして菌ペレットの入った各々の滅菌チューブ
に、以下に示す溶液を１０ｍｌ加え、菌懸濁液を得た。Ａ：通常のＭ９培地Ｂ：酸性水Ｍ９培地Ｂを９０％及び通常のＭ９培地１０
％の混合溶液Ｃ：アルカリ性水Ｍ９培地Ｂを９０％及び通常のＭ９培
地１０％の混合溶液Ｄ：酸性水Ｍ９培地Ｂを５０％及びアルカリ性水Ｍ９培
地を５０％の混合溶液各菌懸濁液にインドールを、最終濃度１ｍＭとなるよう
に加え、２５℃で２４時間振盪した。生成したインジゴ
量をKeilらの方法（J. Bacteriol., 169, 764-770(198
7)）に従い、定量した。試料Ａの生成量を１００とした
時のそれぞれの試料のインジゴ生成量相対値を表３に示
す。

【００７３】

【表３】以上の結果より、通常の条件より電解水を用いた方が明
らかにインジゴの生産性が向上し、ＪＭ１株によるイン
ジゴ生産における電解水の効果が示された。［実施例８］（ＪＭ１株によるＴＣＥ分解に対する酸性水の効果−
１）寒天培地上のＪＭ１株のコロニーを、リンゴ酸ナト
リウム２．０％を含むＭ９培地２００ｍｌに接種し、坂
口フラスコ中１５℃で７０時間振盪培養を行った。

【００７４】このように培養した菌液１０ｍｌを遠心分
離して集菌し、上澄を除去したものを６本用意し、酸性
水を０（コントロール）、１、５、１０、２０、及び５
０％含んだＭ９培地を１０ｍｌ加え、菌ペレットを懸濁
した。この時の菌濃度は３×１０⁸ＣＦＵ／ｍｌであっ
た。

【００７５】これらの懸濁液をそれぞれ２７ｍｌ容バイ
アル瓶に移し、ブチルゴム栓及びアルミキャップで密閉
した後、ＴＣＥ含有空気（１０００ｐｐｍのＴＣＥ水溶
液１０ｍｌを２７ｍｌ容バイアル瓶に入れて密栓し、２
５℃で１時間静置したものの気相部分）１ｍｌをシリン
ジで注入し、２５℃で振盪しながらバイアル瓶中の気相
のＴＣＥ濃度の変化をガスクロマトグラフィー（島津制
作所製ＧＣ−１４Ｂ、ＦＩＤ検出器）にて測定した。ま
た、対照（ブランク）として酸性水０％及び５０％でＪ
Ｍ１を加えていないものも同時に測定した。結果を図８
に示す。

【００７６】ブランクにおいて、酸性水０％及び５０％
でＴＣＥ濃度に殆ど差がないことから、酸性水そのもの
によるＴＣＥの分解はなされていないことが示され、Ｊ
Ｍ１添加系において酸性水濃度２０％及び５０％で、コ
ントロールに比べ明らかにＴＣＥの分解が促進されたこ
とが示された。［実施例９］（ＪＭ１株によるＴＣＥ分解に対する酸性水の効果−
２）実施例８と同様の方法で、酸性水濃度を０（コント
ロール）、６０、７０、８０、及び９０％として実験を
行った。またブランクは酸性水濃度０及び９０％で行っ
た。結果を図９に示す。

【００７７】ブランクにおいて、酸性水０％及び９０％
でＴＣＥ濃度に殆ど差がないことから、酸性水そのもの
によるＴＣＥの分解はなされていないことが示され、Ｊ
Ｍ１添加系において酸性水濃度６０％以上のいずれの場
合においても、コントロールに比べ明らかにＴＣＥの分
解が促進されたことが示された。［実施例１０］（ＪＭ１株によるＴＣＥ分解に対するアルカリ性水の効
果−１）実施例８と同様の方法で、アルカリ性水濃度を
０（コントロール）、１０、２０、３０、４０、及び５
０％として実験を行った。またブランクはアルカリ性水
濃度０及び５０％で行った。結果を図１０に示す。

【００７８】ブランクにおいて、アルカリ性水０％及び
５０％でＴＣＥ濃度の殆ど差がないことから、アルカリ
性水そのものによるＴＣＥの分解はなされていないこと
が示され、ＪＭ１添加系においてアルカリ性水濃度１０
％以上のいずれの場合においても、コントロールに比べ
明らかにＴＣＥの分解が促進されたことが示された。［実施例１１］（ＪＭ１株によるＴＣＥ分解に対するアルカリ性水の効
果−２）実施例８と同様の方法で、アルカリ性水濃度を
０（コントロール）、６０、７０、８０、及び９０％と
して実験を行った。またブランクはアルカリ性水濃度０
及び９０％で行った。結果を図１１に示す。

【００７９】ブランクにおいて、アルカリ性水０％及び
９０％でＴＣＥ濃度に殆ど差がないことから、アルカリ
性水そのものによるＴＣＥの分解はなされていないこと
が示され、ＪＭ１添加系においてアルカリ性水濃度６０
％以上のいずれの場合においても、コントロールに比べ
明らかにＴＣＥの分解が促進されたことが示された。［実施例１２］（ＪＭ１株によるＤＣＥ分解に対する酸性水の効果）実
施例９と同様の方法で、分解対象物質を１，１−ＤＣＥ
（１，１ジクロロエチレン）、ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥ
（ｃｉｓ−１，２ジクロロエチレン）及びｔｒａｎｓ−
１，２−ＤＣＥ（ｔｒａｎｓ−１，２−ジクロロエチレ
ン）として実験を行った。これらはいずれもＴＣＥと同
様に含有空気の形で加え、初期濃度は１，１−ＤＣＥは
５ｐｐｍ、１，２−ＤＣＥはそれぞれ１０ｐｐｍとし
た。実験開始より８時間後の残留濃度を表４に示す。

【００８０】

【表４】ブランクにおいて、酸性水０％及び９０％でＤＣＥ濃度
に殆ど差がないことから、酸性水そのものによるＤＣＥ
の分解はなされていないことが示され、ＪＭ１添加系に
おいて酸性水濃度６０％以上のいずれの場合において
も、コントロールに比べ明らかにＤＣＥの分解が促進さ
れたことが示された。［実施例１３］（ＪＭ１株によるＤＣＥ分解に対するアルカリ性水の効
果）実施例１１と同様の方法で、分解対象物質を１，１
−ＤＣＥ（１，１−ジクロロエチレン）、ｃｉｓ−１，
２−ＤＣＥ（ｃｉｓ−１，２−ジクロロエチレン）及び
ｔｒａｎｓ−１，２−ＤＣＥ（ｔｒａｎｓ−１，２−ジ
クロロエチレン）として実験を行った。これらはいずれ
もＴＣＥと同様に含有空気の形で加え、初期濃度は１，
１−ＤＣＥは５ｐｐｍ、１，２−ＤＣＥはぞれぞれ１０
ｐｐｍとした。実験開始より８時間後の残留濃度を表５
に示す。

【００８１】

【表５】ブランクにおいて、アルカリ性水０％及び９０％でＤＣ
Ｅ濃度に殆ど差がないことから、アルカリ性水そのもの
によるＤＣＥの分解はなされていないことが示され、Ｊ
Ｍ１添加系においてアルカリ性水濃度６０％以上のいず
れの場合においても、コントロールに比べ明らかにＤＣ
Ｅの分解が促進されたことが示された。［実施例１４］（ＪＭ１株による芳香族化合物分解に対する電解水の効
果）実施例９及び１１の方法に準じて、分解対象物質Ｔ
ＣＥをフェノール、ｏ−クレゾール、ｍ−クレゾール、
及びトルエンに代えて実験を行った。酸性水及びアルカ
リ性水の濃度は９０％（コントロールは０％）とし、い
ずれもＪＭ１株添加系及び無添加系（ブランク）で実施
した。フェノール及びクレゾールは培地に直接加え、ト
ルエンはＴＣＥと同様に含有空気の形で加えた。初期濃
度はフェノールは４００ｐｐｍ、クレゾールはそれぞれ
３００ｐｐｍ、トルエンは２００ｐｐｍとした。定量方
法は、フェノールは４−アミノアンチピリンを用いた吸
光光度法（ＪＩＳＫ０１０２−１９９３２８．
１）、クレゾールはｐ−ヒドラジノベンゼンスルホン酸
を用いた吸光光度法（ＪＩＳＫ０１０２−１９９３
２８）、トルエンはガスクロマトグラフィー法（島津製
作所製ＧＣ−１４Ｂ、ＦＩＤ検出器）にて行った。実験
開始より８時間後の残留濃度を表６に示す。

【００８２】

【表６】ブランクにおいて、酸性水及びアルカリ性水９０％と０
％との間で各芳香族化合物濃度に殆ど差がないことか
ら、酸性水及びアルカリ性水そのものによる各芳香族化
合物の分解はなされていないことが示され、ＪＭ１添加
系においてコントロールに比べ明らかに各芳香族化合物
の分解が促進されたことが示された。［実施例１５］（ＪＭ１株を用いたＴＣＥ汚染土壌分解処理に対する電
解水の効果）神奈川県厚木市森の里で採取した褐色森林
土１ｇを２７ｍｌ容バイアル瓶に入れ、ブチルゴム栓及
びアルミキャップで密閉した後、実施例８と同様にして
調製したＴＣＥ含有空気３ｍｌをシリンジで加え、１５
℃で３日間放置した後、実施例８と同様に調製した溶液
１０ｍｌを各バイアル瓶に注加し、２３℃で経時的にＴ
ＣＥ濃度の測定を行った。実験開始より８時間後の残留
濃度を表７に示す。

【００８３】

【表７】ブランクにおいて、酸性水及びアルカリ性水９０％と０
％との間でＴＣＥ濃度に殆ど差がないことから、酸性水
及びアルカリ性水そのものによるＴＣＥの分解はなされ
ていないことが示され、ＪＭ１添加系においてコントロ
ールに比べ明らかにＴＣＥ汚染土壌分解処理が促進され
たことが示された。［実施例１６］（ＪＭ１株を用いた培養液曝気による気相中のＴＣＥ分
解処理に対する電解水の効果）実施例８と同様に調製し
た溶液１０ｍｌを各バイアル瓶に注加し、これにＴＣＥ
飽和溶液中で曝気した空気を流量６０ｍｌ／分で溶液中
に３分間流した後、ブチルゴム栓、アルミシールで完全
密封し、２５℃で経時的にＴＣＥ濃度の測定を行った。
実験開始より８時間後の残留濃度を表８に示す。

【００８４】

【表８】ブランクにおいて、酸性水及びアルカリ性水９０％と０
％との間でＴＣＥ濃度に殆ど差がないことから、酸性水
及びアルカリ性水そのものによるＴＣＥの分解はなされ
てないことが示され、ＪＭ１添加系においてコントロー
ルに比べ明らかにＴＣＥ汚染空気分解処理が促進された
ことが示された。［実施例１７］（４℃におけるＪＭ１株による水溶液中ＴＣＥ分解に対
する酸性水の効果）寒天培地上のＪＭ１株のコロニー
を、リンゴ酸ナトリウム２．０％を含むＭ９培地２００
ｍｌに接種し、坂口フラスコ中１５℃で７０時間振盪培
養を行った。

【００８５】次に、５０ｍｌ容の滅菌チューブに、Ａ：リンゴ酸ナトリウム２．０％を含むＭ９培地（コン
トロールとする）、Ｂ：Ａ液の溶媒が６０％酸性水の培地、Ｃ：Ａ液の溶媒が７５％酸性水の培地、Ｄ：Ａ液の溶媒が９０％酸性水の培地をそれぞれ０．２２μｍフィルターで濾過滅菌したもの
１０ｍｌ加え、それぞれの培地に上記のように調製した
ＪＭ１株の培養液０．１ｍｌを添加して、４℃で振盪培
養した。

【００８６】１０日間培養した後、これらの培養液をそ
れぞれ２７ｍｌ容バイアル瓶に移し、ブチルゴム栓及び
アルミキャップで密閉した後、ＴＣＥ含有空気（ＴＣＥ
原液０．５ｍｌを２７ｍｌ容バイアル瓶に入れて密栓
し、２５℃で１時間静置したものの気相部分）を、初期
濃度５０ｐｐｍ（全てのＴＣＥが培養液中に溶解したと
考えた場合の濃度）となるようにシリンジで注入し、４
℃で振盪しながらバイアル瓶中の気相のＴＣＥ濃度の変
化をガスクロマトグラフィー（島津製作所製ＧＣ−１４
Ｂ、ＦＩＤ検出器）にて測定した。また、対照（ブラン
ク）として酸性水９０％でＪＭ１を加えていないものも
同時に測定した。振盪３日後の各サンプルのＴＣＥ濃度
を表９に示す。

【００８７】

【表９】ブランクにおいて、酸性水９０％でＴＣＥ濃度が殆ど減
少していないことから、酸性水そのものによるＴＣＥの
分解はなされていないことが示され、ＪＭ１添加培養系
において酸性水濃度６０％以上の系において、コントロ
ールに比べ明らかにＴＣＥの分解が促進され、４℃とい
う低温中におけるＴＣＥの分解処理において、酸性水存
在下における培養系が非常に効果的であることが示され
た。［実施例１８］（４℃におけるＪＭ１株による水溶液中ＴＣＥ分解に対
するアルカリ性水の効果）寒天培地上のＪＭ１株のコロ
ニーを、リンゴ酸ナトリウム２．０％を含むＭ９培地２
００ｍｌに接種し、坂口フラスコ中１５℃で７０時間振
盪培養を行った。次に、５０ｍｌ容の滅菌チューブに、Ａ：リンゴ酸ナトリウム２．０％を含むＭ９培地（コン
トロールとする）、Ｂ：Ａ液の溶媒が６０％アルカリ性水の培地、Ｃ：Ａ液の溶媒が７５％アルカリ性水の培地、Ｄ：Ａ液の溶媒が９０％アルカリ性水の培地をそれぞれ０．２２μｍフィルターで濾過滅菌したもの
を１０ｍｌ加え、それぞれの培地に上記のように調製し
たＪＭ１株の培養液０．１ｍｌを添加して、４℃で振盪
培養した。

【００８８】１０日間培養した後、これらの培養液をそ
れぞれ２７ｍｌ容バイアル瓶に移し、ブチルゴム栓及び
アルミキャップで密閉した後、ＴＣＥ含有空気（ＴＣＥ
原液０．５ｍｌを２７ｍｌ容バイアル瓶に入れて密栓
し、２５℃で１時間静置したものの気相部分）を、初期
濃度５０ｐｐｍ（全てのＴＣＥが培養液中に溶解したと
考えた場合の濃度）となるようにシリンジで注入し、４
℃で振盪しながらバイアル瓶中の気相のＴＣＥ濃度の変
化をガスクロマトグラフィー（島津製作所製ＧＣ−１４
Ｂ、ＦＩＤ検出器）にて測定した。また、対照（ブラン
ク）としてアルカリ性水９０％でＪＭ１を加えていない
ものも同時に測定した。振盪３日後の各サンプルのＴＣ
Ｅ濃度を表１０に示す。

【００８９】

【表１０】ブランクにおいて、アルカリ性水９０％でＴＣＥ濃度が
殆ど減少していないことから、アルカリ性水そのものに
よるＴＣＥの分解はなされていないことが示され、ＪＭ
１添加培養系においてアルカリ性水濃度６０％以上の系
において、コントロールに比べ明らかにＴＣＥの分解が
促進され、４℃という低温中におけるＴＣＥの分解処理
において、アルカリ性水存在下における培養系が非常に
効果的であることが示された。［実施例１９］（４℃におけるＪＭ１株による水溶液中ＴＣＥ分解に対
する混合水の効果）寒天培地上のＪＭ１株のコロニー
を、リンゴ酸ナトリウム２．０％を含むＭ９培地２００
ｍｌに接種し、坂口フラスコ中１５℃で７０時間振盪培
養を行った。次に、５０ｍｌ容の滅菌チューブに、Ａ：リンゴ酸ナトリウム２．０％を含むＭ９培地（コン
トロールとする）、Ｂ：Ａ液の溶媒が６０％混合水の培地、Ｃ：Ａ液の溶媒が７５％混合水の培地、Ｄ：Ａ液の溶媒が９０％混合水の培地をそれぞれ０．２２μｍフィルターで濾過滅菌したもの
を１０ｍｌ加え、それぞれの培地に上記のように調製し
たＪＭ１株の培養液０．１ｍｌを添加して、４℃で振盪
培養した。

【００９０】なお、本実施例で用いた混合水は、実施例
１の様に調製した酸性水及びアルカリ性水を等量混合し
たものである。

【００９１】１０日間培養した後、これらの培養液をそ
れぞれ２７ｍｌ容バイアル瓶に移し、ブチルゴム栓及び
アルミキャップで密閉した後、ＴＣＥ含有空気（ＴＣＥ
原液０．５ｍｌを２７ｍｌ容バイアル瓶に入れて密栓
し、２５℃で１時間静置したものの気相部分）を、初期
濃度５０ｐｐｍ（全てのＴＣＥが培養液中に溶解したと
考えた場合の濃度）となるようにシリンジで注入し、４
℃で振盪しながらバイアル瓶中の気相のＴＣＥ濃度の変
化をガスクロマトグラフィー（島津製作所製ＧＣ−１４
Ｂ、ＦＩＤ検出器）にて測定した。また、対照（ブラン
ク）として混合水９０％でＪＭ１株を加えていないもの
についても同時に測定した。振盪３日後の各サンプルの
ＴＣＥ濃度を表１１に示す。

【００９２】

【表１１】ブランクにおいて、混合水９０％でＴＣＥ濃度が殆ど減
少していないことから、混合水そのものによるＴＣＥの
分解はなされていないことが示され、ＪＭ１株添加培養
系において混合水濃度６０％において、コントロールに
比べ明らかにＴＣＥの分解が促進され、４℃という低温
中におけるＴＣＥの分解処理において混合水存在下にお
ける培養系が非常に効果的であることが示された。［実施例２０］（４℃におけるＪＭ２Ｎ株による水溶液中ＴＣＥ分解に
対する各電解水の効果）寒天培地上のＪＭ２Ｎ株のコロ
ニーを、リンゴ酸ナトリウム２．０％を含むＭ９培地２
００ｍｌに接種し、坂口フラスコ中１５℃で７０時間振
盪培養を行った。次に、５０ｍｌ溶の滅菌チューブに、Ａ：リンゴ酸ナトリウム２．０％を含むＭ９培地（コン
トロールとする）、Ｂ：Ａ液の溶媒が９０％酸性水の培地、Ｃ：Ａ液の溶媒が９０％アルカリ性水の培地、Ｄ：Ａ液の溶媒が９０％混合水の培地をそれぞれ０．２２μｍフィルターで濾過滅菌したもの
１０ｍｌ加え、それぞれの培地に上記のように調製した
ＪＭ２Ｎ株の培養液０．１ｍｌを添加して、４℃で振盪
培養した。

【００９３】１０日間培養した後、これらの培養液をそ
れぞれ２７ｍｌ溶バイアル瓶に移し、ブチルゴム栓及び
アルミキャップで密閉した後、ＴＣＥ含有空気（ＴＣＥ
原液０．５ｍｌを２７ｍｌ容バイアル瓶に入れて密栓
し、２５℃で１時間静置したものの気相部分）を、初期
濃度５０ｐｐｍ（全てのＴＣＥが培養液中に溶解したと
考えた場合の濃度）となるようにシリンジで注入し、４
℃で振盪しながら、バイアル瓶中の気相のＴＣＥ濃度の
変化をガスクロマトグラフィー（島津製作所製ＧＣ−１
４Ｂ、ＦＩＤ検出器）にて測定した。また、対照（ブラ
ンク）としてＪＭ２Ｎ株を加えていないものも同時に測
定した。振盪３日後の各サンプルのＴＣＥ濃度を表１２
に示す。

【００９４】

【表１２】この結果より、ＪＭ２Ｎ株添加培養系において各電解水
添加系とも、コントロールに比べ明らかにＴＣＥの分解
が促進され、ＪＭ２Ｎ株においても、４℃という低温中
におけるＴＣＥの分解処理において電解水存在下におけ
る培養系が非常に効果的であることが示された。［実施例２１］（４℃におけるＪ１株による水溶液中芳香族化合物分解
に対する各電解水の効果）寒天培地上のＪＩ株のコロニ
ーを、酵母エキス０．２％を含むＭ９培地２００ｍｌに
接種し、坂口フラスコ中２５℃で２４時間振盪培養を行
った。次に、５０ｍｌ溶の滅菌チューブに、Ａ：酵母エキス０．２％を含むＭ９培地（コントロール
とする）、Ｂ：Ａ液の溶媒が９０％酸性水の培地、Ｃ：Ａ液の溶媒が９０％アルカリ性水の培地、Ｄ：Ａ液の溶媒が９０％混合水の培地をそれぞれ０．２２μｍフィルターで濾過滅菌したもの
１０ｍｌを加え、それぞれの培地に上記のように調製し
たＪＩ株の培養液０．１ｍｌを添加したものを各４本ず
つ用意し、それぞれ４℃で振盪培養した。

【００９５】１０日間培養した後、これらの培養液をそ
れぞれ２７ｍｌ溶バイアル瓶に移し、一連ずつにフェノ
ール、ｏ−クレゾール、ｍ−クレゾール、トルエンを各
々２００ｐｐｍとなるように加えた。フェノール、ｏ−
クレゾール、ｍ−クレゾールは水溶液の形で加えた後ブ
チルゴム栓及びアルミキャップで密閉し、トルエンは密
閉した後、ＴＣＥと同様の方法で、トルエンガスをシリ
ンジで注入し、４℃で振盪しながら各化合物濃度を測定
した。

【００９６】定量方法は、フェノールは４−アミノアン
チピリンを用いた吸光光度法（ＪＩＳＫ０１０２−
１９９３２８．１）、クレゾールはｐ−ヒドラジノベ
ンゼンスルホン酸を用いた吸光光度法（ＪＩＳＫ０
１０２−１９９３２８．２）、トルエンはガスクロマ
ログラフィー法（島津製作所製ＧＣ−１４Ｂ、ＦＩＤ検
出器）にて行った。また、対照（ブランク）としてＪ１
株を加えていないものも同時に測定した。振盪３日後の
各サンプルの濃度を表１３に示す。

【００９７】

【表１３】この結果より、Ｊ１株添加培養系において各電解水添加
系とも、コントロールに比べ明らかに各芳香族化合物の
分解が促進され、４℃という低温中における芳香族化合
物の分解処理において電解水存在下における培養系が非
常に効果的であることが示された。［実施例２２］（４℃におけるＪＭ１株による水溶中ＤＣＥ分解に対す
る各電解水の効果）寒天培地上のＪＭ１株のコロニー
を、リンゴ酸ナトリウム２．０％を含むＭ９培地２００
ｍｌに接種し、坂口フラスコ中１５℃で７０時間振盪培
養を行った。

【００９８】次に、５０ｍｌ溶の滅菌チューブに、Ａ：リンゴ酸ナトリウム２．０％を含むＭ９培地（コン
トロールとする）、Ｂ：Ａ液の溶媒が９０％酸性水の培地、Ｃ：Ａ液の溶媒が９０％アルカリ性水の培地、Ｄ：Ａ液の溶媒が９０％混合水の培地をそれぞれ０．２２μｍフィルターで濾過滅菌したもの
１０ｍｌを加え、それぞれの培地に上記のように調製し
たＪＭ１株の培養液０．１ｍｌを添加したものを各３本
ずつ用意し、それぞれ４℃で振盪培養した。

【００９９】１０日間培養した後、これらの培養液をそ
れぞれ２７ｍｌ溶バイアル瓶に移し、ブチルゴム栓及び
アルミキャップで密閉した後、各一連ずつに、１，１−
ジクロロエチレン（１，１−ＤＣＥ）、ｃｉｓ−１，２
−ジクロロエチレン（ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥ）、及び
ｔｒａｎｓ−１，２−ジクロロエチレン（ｔｒａｎｓ−
１，２−ＤＣＥ）を、ＴＣＥの場合と同様にガスの形
で、初期濃度１５ｐｐｍ（全てのＤＣＥが培養液中に溶
解したと考えた場合の濃度）となるようにシリンジで注
入し、４℃で振盪しながらバイアル瓶中の気相のＤＣＥ
濃度の変化をガスクロマトグラフィー（島津製作所製Ｇ
Ｃ−１４Ｂ、ＦＩＤ検出器）にて測定した。また、対照
（ブランク）としてＪＭ１株を加えていないものも同時
に測定した。振盪３日後の各サンプルの各ＤＣＥ濃度を
表１４に示す。

【０１００】

【表１４】この結果より、ＪＭ１株添加培養系において各電解水添
加系とも、コントロールに比べ明らかに各ＤＣＥの分解
が促進され、４℃という低温中におけるＤＣＥの分解処
理において電解水存在下における培養系が非常に効果的
であることが示された。［実施例２３］（ＪＭ１株を用いたＴＣＥ汚染土壌分解処理に対する各
電解水の効果）神奈川県厚木市森の里より採取した褐色
森林土１ｇを２７ｍｌ溶バイアル瓶に入れ、ブチルゴム
栓及びアルミキャップで密閉した後、実施例８と同様に
して調製したＴＣＥ含有空気をシリンジで加え、４℃で
３日間放置した後、実施例８と同様に調製したそれぞれ
の培養液（５０ｍｌ容の滅菌チューブに、Ａ：リンゴ酸
ナトリウム２．０％を含むＭ９培地（コントロールとす
る）、Ｂ：Ａ液の溶媒が９０％酸性水の培地、Ｃ：Ａ液
の溶媒が９０％アルカリ性水の培地、Ｄ：Ａ液の溶媒が
９０％混合水の培地をそれぞれ０．２２μｍフィルター
で濾過滅菌したものを１０ｍｌ加え、それぞれの培地に
実施例８のように調製したＪＭ１株の培養液０．１ｍｌ
を添加して、４℃で１０日間振盪培養したもの）１０ｍ
ｌを各バイアル瓶にシリンジで注加し、４℃で静置し
て、ＴＣＥ濃度の測定を行った。また、対照（ブラン
ク）としてＪＭ１株を加えていないものも同時に測定し
た。

【０１０１】

【表１５】この結果により、ＪＭ１株添加培養系において各電解水
添加系とも、コントロールに比べ明らかに土壌中ＴＣＥ
の分解が促進され、４℃という低温中におけるＴＣＥ汚
染土壌分解浄化処理において電解水存在下における培養
系が非常に効果的であることが示された。［実施例２４］（ＪＭ２Ｎ株を用いた培養液曝気による気相中ＴＣＥ分
解処理に対する電解水の効果）実施例２０と同様に調製
した液１０ｍｌを各バイアル瓶に注加し、これにＴＣＥ
飽和溶液中で曝気した空気を流量６０ｍｌ／分で溶液中
に３分間流した後、ブチルゴム栓、アルミシールで完全
密封し、４℃で経時的にＴＣＥ濃度の測定を行った。

【０１０２】また、対照（ブランク）としてＪＭ２Ｎ株
を加えていないものも同時に測定した。３日後のＴＣＥ
濃度を表１６に示す。

【０１０３】

【表１６】この結果より、ＪＭ２Ｎ株添加培養系において各電解水
添加系とも、コントロールに比べ明らかに気相中ＴＣＥ
の分解が促進され、４℃という低温中におけるＴＣＥ汚
染空気分解浄化処理において電解水存在下における培養
系が非常に効果的であることが示された。［実施例２５］（ブタノール存在下におけるＪＭ１株による水溶液中Ｔ
ＣＥ分解に対する各電解水の効果）寒天培地上のＪＭ１
株のコロニーを、リンゴ酸ナトリウム２．０％を含むＭ
９培地２００ｍｌに接種し、坂口フラスコ中１５℃で７
０時間振盪培養を行った。

【０１０４】次に、２７ｍｌ容バイアル瓶に、Ａ：リンゴ酸ナトリウム２．０％を含むＭ９培地（コン
トロールとする）、Ｂ：Ａ液の溶媒が９０％酸性水の培地、Ｃ：Ａ液の溶媒が９０％アルカリ性水の培地、Ｄ：Ａ液の溶媒が９０％混合水の培地をそれぞれ０．２２μｍフィルターで濾過滅菌したもの
１０ｍｌを加え、それぞれに１−ブタノールを体積比で
１．０％になるように加えた後、上記のように調製した
ＪＭ１株の培養液０．２ｍｌを添加して、ブチルゴム栓
及びアルミキャップで密閉した。ＴＣＥ含有空気（ＴＣ
Ｅ原液０．５ｍｌを２７ｍｌ容バイアル瓶に入れて密栓
し、２５℃で１時間静置したものの気相部分）を、初期
濃度５０ｐｐｍ（全てのＴＣＥが培養液中に溶解したと
考えた場合の濃度）となるようにシリンジで注入し、２
３℃で振盪培養した。

【０１０５】振盪３日後の各サンプルのＴＣＥ濃度をガ
スクロマトグラフィー（島津製作所製ＧＣ−１４Ｂ、Ｆ
ＩＤ検出器）にて測定した結果を表１７に示す。また、
対照（ブランク）としてＪＭ１株を加えていないものも
同時に測定した。

【０１０６】

【表１７】この結果より、ＪＭ１株添加培養系において各電解水添
加系とも、コントロールに比べ明らかにＴＣＥの分解が
促進され、１．０％ブタノール存在下という劣悪な環境
中におけるＴＣＥの分解処理において電解水存在下にお
ける培養系が非常に効果的であることが示された。

【０１０７】

【発明の効果】本発明の方法によれば、微生物の活性持
続期間を長くして、また微生物の増殖速度及び最大到達
菌数を改善することで、効率の良い微生物利用が可能と
なる。更に、例えば低温状態、有機溶媒存在下といった
劣悪な環境下においても、芳香族化合物及び塩素化脂肪
族炭化水素化合物を含む水性媒体、土壌、及び気相の効
率良い微生物分解処理が可能となる。

【図面の簡単な説明】

【図１】処理水の製造装置の概略断面図である。

【図２】実施例１における、炭素源とアルカリ性水を含
むＭ９培地、炭素源と酸性水を含むＭ９培地、及びコン
トロール培地において１５℃で培養したときのＪＭ１株
の生菌率を示すグラフである。

【図３】実施例２における、炭素源とアルカリ性水を含
むＭ９培地、炭素源と酸性水を含むＭ９培地、及びコン
トロール培地において２５℃で培養したときのＪＭ１株
の生菌率を示すグラフである。

【図４】実施例３における、各種培地を用いてＪ１株を
培養したときの増殖速度、及び最大到達菌数を示すグラ
フである。

【図５】実施例４における、各種培地を用いてＪＭ１株
を培養したときの増殖速度、及び最大到達菌数を示すグ
ラフである。

【図６】実施例５における、各種培地を用いてＪＭ２Ｎ
株を培養したときの増殖速度、及び最大到達菌数を示す
グラフである。

【図７】実施例６における、各種培地を用いてＪＭ１０
９株を培養したときの増殖速度、及び最大到達菌数を示
すグラフである。

【図８】実施例８における、酸性水存在下、及び非存在
下でのＪＭ１株によるＴＣＥ分解能を示すグラフであ
る。

【図９】実施例９における、酸性水存在下、及び非存在
下でのＪＭ１株によるＴＣＥ分解能を示すグラフであ
る。

【図１０】実施例１０における、アルカリ性水存在下、
及び非存在下でのＪＭ１株によるＴＣＥ分解能を示すグ
ラフである。

【図１１】実施例１１における、アルカリ性水存在下、
及び非存在下でのＪＭ１株によるＴＣＥ分解能を示すグ
ラフである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＣ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｎ 1/20 ＦＺＡＢＺＡＢＤ 1/21 1/21 1/38 1/38 //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:19） (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｎ 1/21 Ｃ１２Ｒ 1:19） (Ｃ１２Ｎ 1/38 Ｃ１２Ｒ 1:19） (Ｃ１２Ｎ 1/38 Ｃ１２Ｒ 1:01） (72)発明者矢野哲哉東京都大田区下丸子３丁目30番２号キヤノン株式会社内 (72)発明者古崎眞也東京都大田区下丸子３丁目30番２号キヤノン株式会社内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】微生物が資化し得る炭素源、及び水を電
解槽内で電気分解することによって得られる処理水を含
む培地において該微生物を培養する工程を含むことを特
徴とする微生物の培養方法。
【請求項２】該処理水が酸性水を含む請求項１に記載
の培養方法。
【請求項３】該酸性水がｐＨ１〜４、酸化還元電位が
８００ｍＶ以上１５００ｍＶ以下である請求項２に記載
の培養方法。
【請求項４】該酸性水がｐＨ１〜３、酸化還元電位が
８００ｍＶ以上である請求項２または３に記載の培養方
法。
【請求項５】該酸性水がｐＨ１〜２．８、酸化還元電
位が１１００ｍＶ以上である請求項２〜４のいずれかに
記載の培養方法。
【請求項６】該酸性水の塩素濃度が０．４ｐｐｍ以下
である請求項３〜５のいずれかに記載の培養方法。
【請求項７】該塩素濃度が０．３ｐｐｍ以下である請
求項３から６のいずれかに記載の培養方法。
【請求項８】該処理水がアルカリ性水を含む請求項１
に記載の培養方法。
【請求項９】該アルカリ性水の水素イオン濃度（ｐＨ
値）が１０〜１３、及び酸化還元電位（作用電極：プラ
チナ電極、参照電極：銀−塩化銀電極）が−１０００ｍ
Ｖ〜８００ｍＶである請求項８に記載の培養方法。
【請求項１０】該アルカリ性水がｐＨ１０．５以上、
酸化還元電位が−６００ｍＶ以下である請求項８または
９に記載の培養方法。
【請求項１１】該アルカリ性水がｐＨ１１以上、酸化
還元電位が−８００ｍＶ以下である請求項８〜１０のい
ずれかに記載の培養方法。
【請求項１２】該処理水が酸性水及びアルカリ性水を
含む請求項１に記載の培養方法。
【請求項１３】該微生物が自然界に存在するものであ
る請求項１に記載の培養方法。
【請求項１４】該微生物が大腸菌である請求項１３に
記載の培養方法。
【請求項１５】該微生物がＪ１株（ＦＥＲＭＢＰ−
５１０２）である請求項１３に記載の培養方法。
【請求項１６】該微生物が人工的に突然変異をかけら
れたものである請求項１に記載の培養方法。
【請求項１７】該微生物がＪＭ１株（ＦＥＲＭＢＰ
−５３５２）である請求項１４に記載の培養方法。
【請求項１８】該微生物がＪＭ２Ｎ株（ＦＥＲＭＢ
Ｐ−５９６１）である請求項１４に記載の培養方法。
【請求項１９】該微生物が遺伝子組み換えを行ったも
のである請求項１に記載の培養方法。
【請求項２０】該微生物が汚染物質の分解能を備えて
いる請求項１３〜１９のいずれかに記載の培養方法。
【請求項２１】該汚染物質が芳香族化合物である請求
項２０に記載の培養方法。
【請求項２２】該芳香族化合物がフェノール、トルエ
ン及びクレゾールの少なくとも１つである請求項２１に
記載の培養方法。
【請求項２３】該汚染物質が揮発性有機ハロゲン化合
物である請求項２０に記載の培養方法。
【請求項２４】該揮発性有機ハロゲン化化合物が、ハ
ロゲン化脂肪族炭化水素化合物である請求項２３に記載
の培養方法。
【請求項２５】該ハロゲン化脂肪族炭化水素化合物が
トリクロロエチレン及びジクロロエチレンの少なくとも
一方である請求項２４に記載の培養方法。
【請求項２６】微生物が資化し得る炭素源、及びｐＨ
１〜４、酸化還元電位が８００ｍＶ以上１５００ｍＶ以
下の酸性水を含む培地において該微生物を培養する工程
を含むことを特徴とする微生物の培養方法。
【請求項２７】該酸性水がｐＨ１〜３、酸化還元電位
が８００ｍＶ以上である請求項２６に記載の培養方法。
【請求項２８】該酸性水がｐＨ１〜２．８、酸化還元
電位が１１００ｍＶ以上である請求項２６に記載の培養
方法。
【請求項２９】該酸性水の塩素濃度が０．４ｐｐｍ以
下である請求項２６〜２８のいずれかに記載の培養方
法。
【請求項３０】該塩素濃度が０．３ｐｐｍ以下である
請求項２９に記載の培養方法。
【請求項３１】微生物が資化し得る炭素源と、水素イ
オン濃度（ｐＨ値）が１０〜１３及び酸化還元電位（作
用電極：プラチナ電極、参照電極：銀−塩化銀電極）が
−１０００ｍＶ〜８００ｍＶのアルカリ性水とを含む培
地において該微生物を培養する工程を含むことを特徴と
する微生物の培養方法。
【請求項３２】該アルカリ性水がｐＨ１０．５以上、
酸化還元電位が−６００ｍＶ以下である請求項３１に記
載の培養方法。
【請求項３３】該アルカリ性水がｐＨ１１以上、酸化
還元電位が−８００ｍＶ以下である請求項３２に記載の
培養方法。
【請求項３４】第１の有機化合物から第２の有機化合
物を生産可能な能力を備えた微生物と第１の化合物とを
反応させて第２の有機化合物を合成する工程を有する有
機化合物の生合成方法において、前記工程を、水を電解槽内で電気分解することによって
得られる処理水の共存下で行うことを特徴とする有機化
合物の生合成方法。
【請求項３５】該処理水が酸性水を含む請求項３４に
記載の生合成方法。
【請求項３６】該酸性水がｐＨ１〜４、酸化還元電位
が８００ｍＶ以上１５００ｍＶ以下である請求項３５に
記載の生合成方法。
【請求項３７】該酸性水がｐＨ３以下、酸化還元電位
が８００ｍＶ以上である請求項３５に記載の生合成方
法。
【請求項３８】該酸性水がｐＨ２．８以下、酸化還元
電位が１１００ｍＶ以上である請求項３７に記載の生合
成方法。
【請求項３９】該酸性水の塩素濃度が０．４ｐｐｍ以
下である請求項３５〜３８のいずれかに記載の生合成方
法。
【請求項４０】該塩素濃度が０．３ｐｐｍ以下である
請求項３９に記載の生合成方法。
【請求項４１】該処理水がアルカリ性水を含む請求項
３４に記載の生合成方法。
【請求項４２】該アルカリ性水の水素イオン濃度（ｐ
Ｈ値）が１０〜１３、及び酸化還元電位（作用電極：プ
ラチナ電極、参照電極：銀−塩化銀電極）が−１０００
ｍＶ〜８００ｍＶである請求項４１に記載の生合成方
法。
【請求項４３】該アルカリ性水がｐＨ１０．５以上、
酸化還元電位が−６００ｍＶ以下である請求項４２に記
載の生合成方法。
【請求項４４】該アルカリ性水がｐＨ１１以上、酸化
還元電位が−８００ｍＶ以下である請求項４２に記載の
生合成方法。
【請求項４５】該処理水が酸性水及びアルカリ性水を
含む請求項３４に記載の生合成方法。
【請求項４６】該微生物が該汚染物質の分解能を構成
的に発現している請求項３４に記載の生合成方法。
【請求項４７】該微生物がＪＭ１株（ＦＥＲＭＢＰ
−５３５２）である請求項４６に記載の生合成方法。
【請求項４８】該微生物がＪＭ２Ｎ株（ＦＥＲＭＢ
Ｐ−５９６１）である請求項４６に記載の生合成方法。
【請求項４９】該微生物を増殖させる工程を、前記工
程に先立って行う請求項４６に記載の生合成方法。
【請求項５０】前記工程を該微生物が資化し得る炭素
源を共存下で行う請求項４６に記載の生合成方法。
【請求項５１】該微生物がＪＭ１株及びＪＭ２Ｎ株の
少なくとも一方であり、該炭素源がリンゴ酸ナトリウム
及びクエン酸ナトリウムの少なくとも一方を含む請求項
５０に記載の生合成方法。
【請求項５２】該微生物が該汚染物質分解活性を誘導
的に発現するものである請求項３４に記載の生合成方
法。
【請求項５３】該微生物がＪ１株（ＦＥＲＭＢＰ−
５１０２）である請求項５２に記載の生合成方法。
【請求項５４】該微生物を該微生物が資化し得る炭素
源及びインデューサーを含む培地で増殖させる工程を、
前記工程に先立って行う請求項５２に記載の生合成方
法。
【請求項５５】該微生物がＪ１株、該炭素源がリンゴ
酸ナトリウム及びクエン酸ナトリウムの少なくとも一方
を含み、また該インデューサーが芳香族炭化水素化合物
である請求項５４に記載の生合成方法。
【請求項５６】該第１の有機化合物がインドールであ
り、該第２の有機化合物がインジゴである請求項３４に
記載の生合成方法。
【請求項５７】第１の有機化合物から第２の有機化合
物を生産可能な能力を備えた微生物を、ｐＨ１〜４、酸
化還元電位が８００ｍＶ以上１５００ｍＶ以下の酸性水
の存在下で該第１の有機化合物と反応させる工程を有す
ることを特徴とする有機化合物の生合成方法。
【請求項５８】該酸性水がｐＨ３以下、酸化還元電位
が８００ｍＶ以上である請求項５７に記載の生合成方
法。
【請求項５９】該酸性水がｐＨ２．８以下、酸化還元
電位が１１００ｍＶ以上である請求項５７に記載の生合
成方法。
【請求項６０】該酸性水の塩素濃度が０．４ｐｐｍ以
下である請求項５７〜５９のいずれかに記載の生合成方
法。
【請求項６１】該塩素濃度が０．３ｐｐｍ以下である
請求項６０に記載の生合成方法。
【請求項６２】第１の有機化合物から第２の有機化合
物を生産可能な能力を備えた微生物を、水素イオン濃度
（ｐＨ値）が１０〜１３、及び酸化還元電位（作用電
極：プラチナ電極、参照電極：銀−塩化銀電極）が−１
０００ｍＶ〜８００ｍＶのアルカリ性水及び該第１の有
機化合物の共存下で培養する工程を有することを特徴と
する有機化合物の生合成方法。
【請求項６３】該アルカリ性水がｐＨ１０．５以上、
酸化還元電位が−６００ｍＶ以下である請求項６２に記
載の生合成方法。
【請求項６４】該アルカリ性水がｐＨ１１以上、酸化
還元電位が−８００ｍＶ以下である請求項６２に記載の
生合成方法。
【請求項６５】第１の有機化合物から第２の有機化合
物を生産可能な能力を備えた微生物を炭素源及び水を電
解槽内で電気分解することによって得られる処理水を含
む培地で増殖させ、次いで増殖した微生物を単離する工
程：及び単離した微生物を第１の有機化合物と反応させ
て第２の有機化合物を合成する工程、を有することを特
徴とする有機化合物の生合成方法。
【請求項６６】汚染物質分解活性を備えた微生物の、
汚染物質の分解活性の維持方法であって、汚染物質分解
能を発現している微生物を水を電解槽内で電気分解する
ことによって得られる処理水を含む培地にて培養する工
程を含むことを特徴とする維持方法。
【請求項６７】該処理水が酸性水を含む請求項６６に
記載の維持方法。
【請求項６８】該酸性水がｐＨ１〜４、酸化還元電位
が８００ｍＶ以上１５００ｍＶ以下である請求項６７に
記載の維持方法。
【請求項６９】該酸性水がｐＨ１〜３、酸化還元電位
が８００ｍＶ以上である請求項６７に記載の維持方法。
【請求項７０】該酸性水がｐＨ１〜２．８、酸化還元
電位が１１００ｍＶ以上である請求項６７に記載の維持
方法。
【請求項７１】該酸性水の塩素濃度が０．４ｐｐｍ以
下である請求項６７〜７０のいずれかに記載の維持方
法。
【請求項７２】該塩素濃度が０．３ｐｐｍ以下である
請求項７１に記載の維持方法。
【請求項７３】該処理水がアルカリ性水を含む請求項
６６に記載の維持方法。
【請求項７４】該アルカリ性水の水素イオン濃度（ｐ
Ｈ値）が１０〜１３、及び酸化還元電位（作用電極：プ
ラチナ電極、参照電極：銀−塩化銀電極）が−１０００
ｍＶ〜８００ｍＶである請求項７３に記載の維持方法。
【請求項７５】該アルカリ性水がｐＨ１０．５以上、
酸化還元電位が−６００ｍＶ以下である請求項７３に記
載の維持方法。
【請求項７６】該アルカリ性水がｐＨ１１以上、酸化
還元電位が−８００ｍＶ以下である請求項７３に記載の
維持方法。
【請求項７７】該処理水が酸性水及びアルカリ性水を
含む請求項６６に記載の維持方法。
【請求項７８】該微生物が該汚染物質の分解能を構成
的に発現している請求項６６に記載の維持方法。
【請求項７９】該微生物がＪＭ１株（ＦＥＲＭＢＰ
−５３５２）である請求項７８に記載の維持方法。
【請求項８０】該微生物がＪＭ２Ｎ株（ＦＥＲＭＢ
Ｐ−５９６１）である請求項７８に記載の維持方法。
【請求項８１】該微生物を増殖させる工程を、前記培
養工程に先立って行う請求項７８に記載の維持方法。
【請求項８２】該培地が該微生物の炭素源を更に含む
請求項７８に記載の維持方法。
【請求項８３】該微生物がＪＭ１株及びＪＭ２Ｎ株の
少なくとも一方であり、該炭素源がリンゴ酸ナトリウム
を含む請求項８２に記載の維持方法。
【請求項８４】該微生物が該汚染物質分解活性を誘導
的に発現するものである請求項６６に記載の維持方法。
【請求項８５】該微生物がＪ１株（ＦＥＲＭＢＰ−
５１０２）である請求項８４に記載の維持方法。
【請求項８６】該微生物をインデューサーを含む培地
で増殖させる工程を、前記培養工程に先立って行う請求
項８４に記載の維持方法。
【請求項８７】該培地が該微生物の炭素源及びインデ
ューサーを含む請求項８４に記載の維持方法。
【請求項８８】該微生物がＪ１株、該炭素源がリンゴ
酸ナトリウム、及び該インデューサーが芳香族炭化水素
化合物である請求項８７に記載の維持方法。
【請求項８９】汚染物質と該汚染物質の分解能を具備
した微生物とを接触させる工程を有する、微生物を用い
た汚染物質の分解方法において、上記汚染物質と該汚染物質の分解能を具備した微生物と
を接触させる工程を水を電解槽内で電気分解することに
よって得られる処理水を含む水の存在下で行うことを特
徴とする汚染物質の分解方法。
【請求項９０】該処理水が酸性を含む請求項８９に記
載の分解方法。
【請求項９１】該酸性水がｐＨ１〜４、酸化還元電位
が８００ｍＶ以上１５００ｍＶ以下である請求項９０に
記載の分解方法。
【請求項９２】該酸性水がｐＨ３以下、酸化還元電位
が８００ｍＶ以上である請求項９０に記載の分解方法。
【請求項９３】該酸性水がｐＨ２．８以下、酸化還元
電位が１１００ｍＶ以上である請求項９０に記載の分解
方法。
【請求項９４】該酸性水の塩素濃度が０．４ｐｐｍ以
下である請求項９１〜９３のいずれかに記載の分解方
法。
【請求項９５】該塩素濃度が０．３ｐｐｍ以下である
請求項９４に記載の分解方法。
【請求項９６】該処理水がアルカリ性水を含む請求項
８９に記載の分解方法。
【請求項９７】該アルカリ性水の水素イオン濃度（ｐ
Ｈ値）が１０〜１３、及び酸化還元電位（作用電極：プ
ラチナ電極、参照電極：銀−塩化銀電極）が−１０００
ｍＶ〜８００ｍＶである請求項９６に記載の分解方法。
【請求項９８】該アルカリ性水がｐＨ１０．５以上、
酸化還元電位が−６００ｍＶ以下である請求項９６に記
載の分解方法。
【請求項９９】該アルカリ性水がｐＨ１１以上、酸化
還元電位が−８００ｍＶ以下である請求項９６に記載の
分解方法。
【請求項１００】該処理水が酸性水及びアルカリ性水
を含む請求項８９に記載の分解方法。
【請求項１０１】該水に該電解水が１０％もしくはそ
れ以上含まれている請求項８９に記載の分解方法。
【請求項１０２】該汚染物質が芳香族化合物である請
求項８９に記載の分解方法。
【請求項１０３】該芳香族化合物がフェノール、トル
エン及びクレゾールの少なくとも一つを含む請求項１０
２に記載の分解方法。
【請求項１０４】該汚染物質がハロゲン化脂肪族炭化
水素化合物である請求項８９に記載の分解方法。
【請求項１０５】該ハロゲン化脂肪族炭化水素化合物
が塩素化脂肪族炭化水素化合物である請求項１０４に記
載の分解方法。
【請求項１０６】該塩素化脂肪族炭化水素化合物が、
トリクロロエチレン、及びジクロロエチレンの少なくと
も一方である請求項１０５に記載の分解方法。
【請求項１０７】該微生物が該汚染物質の分解能を構
成的に発現している請求項８９に記載の分解方法。
【請求項１０８】該微生物がＪＭ１株（ＦＥＲＭＢ
Ｐ−５３５２）である請求項１０７に記載の分解方法。
【請求項１０９】該微生物がＪＭ２Ｎ株（ＦＥＲＭ
ＢＰ−５９６１）である請求項１０７に記載の分解方
法。
【請求項１１０】該微生物を増殖させる工程を、前記
接触工程に先立って行う請求項１０７に記載の分解方
法。
【請求項１１１】該水が該微生物の炭素源を更に含む
請求項１０７に記載の分解方法。
【請求項１１２】該微生物がＪＭ１株及びＪＭ２Ｎ株
の少なくとも一方であり、該炭素源がリンゴ酸ナトリウ
ムを含む請求項１１１に記載の分解方法。
【請求項１１３】該微生物が該汚染物質分解活性を誘
導的に発現するものである請求項８９に記載の分解方
法。
【請求項１１４】該微生物がＪ１株（ＦＥＲＭＢＰ
−５１０２）である請求項１１３に記載の分解方法。
【請求項１１５】該微生物をインデューサーを含む培
地で増殖させる工程を、前記接触工程に先立って行う請
求項１１３に記載の分解方法。
【請求項１１６】該水が該微生物の炭素源及びインデ
ューサーを更に含む請求項１１３に記載の分解方法。
【請求項１１７】該微生物がＪ１株、該炭素源がリン
ゴ酸ナトリウム、及び該インデューサーが芳香族炭化水
素化合物である請求項１１６に記載の分解方法。
【請求項１１８】汚染物質と該汚染物質の分解能を具
備した微生物とを接触させる工程を有する、微生物を用
いた汚染物質の分解方法において、上記汚染物質と該汚染物質の分解能を具備した微生物と
を接触させる工程を、ｐＨ１〜４、酸化還元電位が８０
０ｍＶ以上１５００ｍＶ以下の酸性水を含む水の存在下
で行うことを特徴とする汚染物質の分解方法。
【請求項１１９】該酸性水がｐＨ３以下、酸化還元電
位が８００ｍＶ以上である請求項１１８に記載の分解方
法。
【請求項１２０】該酸性水がｐＨ２．８以下、酸化還
元電位が１１００ｍＶ以上である請求項１１９に記載の
分解方法。
【請求項１２１】該酸性水の塩素濃度が０．４ｐｐｍ
以下である請求項１１８に記載の分解方法。
【請求項１２２】該塩素濃度が０．３ｐｐｍ以下であ
る請求項１２１に記載の分解方法。
【請求項１２３】汚染物質と該汚染物質の分解能を具
備した微生物とを接触させる工程を有する、微生物を用
いた汚染物質の分解方法において、上記汚染物質と該汚染物質の分解能を具備した微生物と
を接触させる工程を水素イオン濃度（ｐＨ値）が１０〜
１３、及び酸化還元電位（作用電極：プラチナ電極、参
照電極：銀−塩化銀電極）が−１０００ｍＶ〜８００ｍ
Ｖであるアルカリ性水を含む水の存在下で行うことを特
徴とする汚染物質の分解方法。
【請求項１２４】該アルカリ性水がｐＨ１０．５以
上、酸化還元電位が−６００ｍＶ以下である請求項１２
３に記載の分解方法。
【請求項１２５】該アルカリ性水がｐＨ１１以上、酸
化還元電位が−８００ｍＶ以下である請求項１２４に記
載の分解方法。
【請求項１２６】環境中に含まれる汚染物質と該汚染
物質の分解能を有する微生物とを接触させて汚染物質を
分解する工程を有する環境の修復方法において、前記汚
染物質と該汚染物質の分解能を有する微生物とを接触さ
せて該汚染物質を分解する工程を、水を電解槽内で電気
分解することによって得られる処理水を含む水の存在下
で行うことを特徴とする環境の修復方法。
【請求項１２７】該処理水が酸性水を含む請求項１２
６に記載の修復方法。
【請求項１２８】該酸性水がｐＨ１〜４、酸化還元電
位が８００ｍＶ以上１５００ｍＶ以下である請求項１２
７に記載の修復方法。
【請求項１２９】該酸性水がｐＨ３以下、酸化還元電
位が８００ｍＶ以上である請求項６４または１２７に記
載の修復方法。
【請求項１３０】該酸性水がｐＨ２．８以下、酸化還
元電位が１１００ｍＶ以上である請求項１２７に記載の
修復方法。
【請求項１３１】該酸性水の塩素濃度が０．４ｐｐｍ
以下である請求項１２８〜１３０のいずれかに記載の修
復方法。
【請求項１３２】該酸性水の塩素濃度が０．３ｐｐｍ
以下である請求項１２８〜１３０のいずれかに記載の修
復方法。
【請求項１３３】該処理水がアルカリ性水を含む請求
項１２６に記載の修復方法。
【請求項１３４】該アルカリ性水の水素イオン濃度
（ｐＨ値）が１０〜１３、及び酸化還元電位（作用電
極：プラチナ電極、参照電極：銀−塩化銀電極）が−１
０００ｍＶ〜８００ｍＶである請求項１３３に記載の修
復方法。
【請求項１３５】該アルカリ性水がｐＨ１０．５以
上、酸化還元電位が−６００ｍＶ以下である請求項１３
４に記載の修復方法。
【請求項１３６】該アルカリ性水がｐＨ１１以上、酸
化還元電位が−８００ｍＶ以下である請求項１３５に記
載の修復方法。
【請求項１３７】該処理水が酸性水及びアルカリ性水
を含む請求項１２６に記載の修復方法。
【請求項１３８】該環境が水性媒体である請求項１２
６に記載の修復方法。
【請求項１３９】前記汚染物質と該汚染物質の分解能
を有する微生物とを接触させて該汚染物質を分解する工
程が、該環境としての水性媒体に該微生物及び該電解水
を含む水を投入する工程を含む請求項１２６に記載の修
復方法。
【請求項１４０】該微生物として、担体に担持させた
微生物を用いる請求項１３９に記載の分解方法。
【請求項１４１】前記汚染物質と該汚染物質の分解能
を有する微生物とを接触させて該汚染物質を分解する工
程が、該微生物を担持させた担体を収納し、第１の開口
及び第２の開口を備えた容器を用意する工程と該第１の
開口から該水性媒体を導入する工程を有する請求項１２
６に記載の修復方法。
【請求項１４２】該環境が土壌である請求項１２６に
記載の修復方法。
【請求項１４３】前記汚染物質と該汚染物質の分解能
を有する微生物とを接触させて該汚染物質を分解する工
程が、該微生物を含む液相中に該環境としての土壌を投
入する工程を含む請求項１２６に記載の修復方法。
【請求項１４４】前記汚染物質と該汚染物質の分解能
を有する微生物とを接触させて該汚染物質を分解する工
程が、該微生物を担持させた担体に該土壌のの水懸濁液
を接触させる工程を含む請求項１２６に記載の修復方
法。
【請求項１４５】該環境が空気である請求項１２６に
記載の修復方法。
【請求項１４６】前記汚染物質と該汚染物質の分解能
を有する微生物とを接触させて該汚染物質を分解する工
程が、該微生物を含む液相中に該環境としての空気を導
入する工程を含む請求項１２６に記載の修復方法。
【請求項１４７】前記汚染物質と該汚染物質の分解能
を有する微生物とを接触させて該汚染物質を分解する工
程が、該微生物を担持させた担体と該環境としての空気
とを接触させる工程を含む請求項１２６に記載の修復方
法。
【請求項１４８】前記汚染物質と該汚染物質の分解能
を有する微生物とを接触させて該汚染物質を分解する工
程が、該微生物を担持させた担体を収納し、第１の開口
及び第２の開口を備えた容器を用意する工程と該第１の
開口から該環境としての空気を導入する工程を有する請
求項１２６に記載の修復方法。
【請求項１４９】該水に該電解水が１０％もしくはそ
れ以上含まれている請求項１２６に記載の修復方法。
【請求項１５０】該汚染物質が芳香族化合物である請
求項１２６に記載の修復方法。
【請求項１５１】該芳香族化合物がフェノール、トル
エン及びクレゾールの少なくとも一つを含む請求項１５
０に記載の修復方法。
【請求項１５２】該汚染物質がハロゲン化脂肪族炭化
水素化合物である請求項１２６に記載の修復方法。
【請求項１５３】該ハロゲン化脂肪族炭化水素化合物
が塩素化脂肪族炭化水素化合物である請求項１５２に記
載の修復方法。
【請求項１５４】該塩素化脂肪族炭化水素化合物がト
リクロロエチレン、及びジクロロエチレンの少なくとも
一方である請求項１５３に記載の修復方法。
【請求項１５５】該微生物が該汚染物質の分解能を構
成的に発現している請求項１２６に記載の修復方法。
【請求項１５６】該微生物がＭＪ１株（ＦＥＲＭＢ
Ｐ−５３５２）である請求項１５５に記載の修復方法。
【請求項１５７】該微生物がＭＪ２Ｎ株（ＦＥＲＭ
ＢＰ−５９６１）である請求項１５５に記載の修復方
法。
【請求項１５８】該微生物を増殖させる工程を、前記
分解する工程に先立って行う請求項１５５に記載の修復
方法。
【請求項１５９】該水が該微生物の炭素源を更に含む
請求項１５５に記載の修復方法。
【請求項１６０】該微生物がＪＭ１株及びＪＭ２Ｎ株
の少なくとも一方であり該炭素源がリンゴ酸ナトリウム
を含む請求項１５９に記載の修復方法。
【請求項１６１】該微生物が該汚染物質分解活性を誘
導的に発現するものである請求項１２６に記載の修復方
法。
【請求項１６２】該微生物がＪ１株（ＦＥＲＭＢＰ
−５１０２）である請求項１６１に記載の修復方法。
【請求項１６３】該微生物をインデューサーを含む培
地で増殖させる工程を、前記分解の工程に先立って行う
請求項１６１に記載の修復方法。
【請求項１６４】該水が該微生物の炭素源及びインデ
ューサーを更に含む請求項１６１に記載の修復方法。
【請求項１６５】該微生物がＪＭ１株、該炭素源がリ
ンゴ酸ナトリウム及び該インデューサーが芳香族炭化水
素化合物である請求項１６４に記載の修復方法。
【請求項１６６】環境中に含まれる汚染物質と該汚染
物質の分解能を有する微生物とを接触させて汚染物質を
分解する工程を有する環境の修復方法において、前記汚
染物質と該汚染物質の分解能を有する微生物とを接触さ
せて該汚染物質を分解する工程を、ｐＨ１〜４、酸化還
元電位が８００ｍＶ以上１５００ｍＶ以下である酸性水
を含む水の存在下で行うことを特徴とする環境の修復方
法。
【請求項１６７】該酸性水がｐＨ３以下、酸化還元電
位が８００ｍＶ以上である請求項１６６に記載の修復方
法。
【請求項１６８】該酸性水がｐＨ２．８以下、酸化還
元電位が１１００ｍＶ以上である請求項１６７に記載の
修復方法。
【請求項１６９】該酸性水の塩素濃度が０．４ｐｐｍ
以下である請求項１６６に記載の修復方法。
【請求項１７０】該酸性水の塩素濃度が０．３ｐｐｍ
以下である請求項１６９に記載の修復方法。
【請求項１７１】環境中に含まれる汚染物質と該汚染
物質の分解能を有する微生物とを接触させて汚染物質を
分解する工程を有する環境の修復方法において、前記汚
染物質と該汚染物質の分解能を有する微生物とを接触さ
せて該汚染物質を分解する工程を、水素イオン濃度（ｐ
Ｈ値）が１０〜１３、及び酸化還元電位（作用電極：プ
ラチナ電極、参照電極：銀−塩化銀電極）が−１０００
ｍＶ〜８００ｍＶであるアルカリ性水を含む水の存在下
で行うことを特徴とする環境の修復方法。
【請求項１７２】該アルカリ性水がｐＨ１０．５以
上、酸化還元電位が−６００ｍＶ以下である請求項１７
１に記載の修復方法。
【請求項１７３】該アルカリ性水がｐＨ１１以上、酸
化還元電位が−８００ｍＶ以下である請求項１７２に記
載の修復方法。