JPH10132822A - 炭酸脱水酵素を指標とした大腸癌 スクリーニング法 - Google Patents
炭酸脱水酵素を指標とした大腸癌 スクリーニング法Info
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- JPH10132822A JPH10132822A JP8327494A JP32749496A JPH10132822A JP H10132822 A JPH10132822 A JP H10132822A JP 8327494 A JP8327494 A JP 8327494A JP 32749496 A JP32749496 A JP 32749496A JP H10132822 A JPH10132822 A JP H10132822A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 この発明は、便中の炭酸脱水酵素を検出する
ことによって、大腸癌患者及び大腸癌高度危険群のスク
リーニングを行う方法に関するものである。 【構成】 便から得られた抽出液を用い、酵素抗体法
（ＥＬＩＳＡ：Ｅｎｚｙｍｅ−Ｌｉｎｋｅｄ ｌｍｍｕ
ｎｏｓｏｒｂｅｎｔ Ａｓｓａｙ）によって便中の炭酸
脱水酵素を検出する。従来の便潜血検査法に比し優れた
感度と特異性をもって、大腸癌患者あるいは大腸癌高度
危険群をスクリーニングする。
ことによって、大腸癌患者及び大腸癌高度危険群のスク
リーニングを行う方法に関するものである。 【構成】 便から得られた抽出液を用い、酵素抗体法
（ＥＬＩＳＡ：Ｅｎｚｙｍｅ−Ｌｉｎｋｅｄ ｌｍｍｕ
ｎｏｓｏｒｂｅｎｔ Ａｓｓａｙ）によって便中の炭酸
脱水酵素を検出する。従来の便潜血検査法に比し優れた
感度と特異性をもって、大腸癌患者あるいは大腸癌高度
危険群をスクリーニングする。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は便中の炭酸脱水酵素をＥ
ＬＩＳＡ法を用いて測定することにより、大腸癌患者及
び大腸癌高度危険群のスクリーニングを可能にしたもの
である。
ＬＩＳＡ法を用いて測定することにより、大腸癌患者及
び大腸癌高度危険群のスクリーニングを可能にしたもの
である。
【０００２】
【従来の技術】従来の大腸癌スクリーニングは、大腸癌
又は大腸の前癌病変である腺腫より出る（微量の）血液
を便中から検出する便潜血反応に頼ってきた。現在、同
検査の中で最も信頼性が高いとされるものとして免疫学
的便潜血反応検査がある。しかし、その陽性率は大腸癌
患者で約３０〜８０％、健康人で（即ち、偽陽性率は）
約５％前後（参考文献 多田正大ら：早期大腸癌「免疫
便潜血検」．胃と腸２９；５−１１，１９９４）と、更
なる改善が望まれる状況にある。
又は大腸の前癌病変である腺腫より出る（微量の）血液
を便中から検出する便潜血反応に頼ってきた。現在、同
検査の中で最も信頼性が高いとされるものとして免疫学
的便潜血反応検査がある。しかし、その陽性率は大腸癌
患者で約３０〜８０％、健康人で（即ち、偽陽性率は）
約５％前後（参考文献 多田正大ら：早期大腸癌「免疫
便潜血検」．胃と腸２９；５−１１，１９９４）と、更
なる改善が望まれる状況にある。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】何れの便潜血反応にし
ても、大腸癌又は大腸の前癌病変である腺腫から出るで
あろう血液を検出するものであることに変わりはない。
ところが、大腸癌・腺腫から絶えず出血するとは限ら
ず、逆に、良性の大腸病変から出血することもある。こ
の点が便潜血検査の陽性率・偽陽性率に大きな影響を与
えているわけである。
ても、大腸癌又は大腸の前癌病変である腺腫から出るで
あろう血液を検出するものであることに変わりはない。
ところが、大腸癌・腺腫から絶えず出血するとは限ら
ず、逆に、良性の大腸病変から出血することもある。こ
の点が便潜血検査の陽性率・偽陽性率に大きな影響を与
えているわけである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】大腸発癌過程において、
大腸癌の発生母地となる大腸粘膜の炭酸脱水酵素は低下
し、同粘膜の細胞増殖能は穴進する（参考文献 横山幸
生ら：大腸発癌過程における炭酸脱水酵素の意義に関す
る実験的検討．１８；３４１−３４２，１９９３）。本
発明は、以上の２点に着目したものであり、便中の炭酸
脱水酵素を測定することに特徴がある。
大腸癌の発生母地となる大腸粘膜の炭酸脱水酵素は低下
し、同粘膜の細胞増殖能は穴進する（参考文献 横山幸
生ら：大腸発癌過程における炭酸脱水酵素の意義に関す
る実験的検討．１８；３４１−３４２，１９９３）。本
発明は、以上の２点に着目したものであり、便中の炭酸
脱水酵素を測定することに特徴がある。
【０００５】
【作用と実用例】次に、本発明の実施方法とその実験結
果を例に挙げて説明する。
果を例に挙げて説明する。
【０００６】第１例 フィルターペーパーに新鮮便を薄く均一に塗布。同ペー
パーをリン酸緩衝液に浸し便抽出液を作成。被覆緩衝液
で希釈した抽出液をマイクロタイタープレートに添加
し、便中の炭酸脱水酵素を同プレートに結合させる。一
次抗体（抗炭酸脱水酵素抗体）を加え、次いで、一次抗
体に対するビオチン化二次抗体を添加。アビジン−ビオ
チン−アルカリフォスファターゼ複合体を加え、ｐ−ニ
トロフェニルフォスフェートで染色。吸光度計を用いて
測定し、標準曲線をもとに便抽出液中の炭酸脱水酵素濃
度を決定する。この方法により得られた陽性率は、大腸
癌患者で８０．０％、健康人で４．８％と、免疫学的便
潜血検査に比し（夫々４４．０％、０％）良好であった
（Ｓ．Ｙｏｋｏｙａｍａ：Ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ
ｕｓｅｆｕｌｎｅｓｓｏｆ ｆｅｃａｌ ｃａｒｂｏ
ｎｉｃ ａｎｈｙｄｒａｓｅ Ｉａｎｄ ＩＩｉｎ ｓ
ｃｒｅｅｎｉｎｇ ｆｏｒ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃ
ａｎｃｅｒ．Ｔｈｅ ＸＶＩ ｔｈＢｉｅｎｎｉａｌ
Ｃｏｎｇｒｅｓｓ ｏｆ ｌｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ
Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｌ
ｏｎａｎｄ Ｒｅｃｔａｌ Ｓｕｒｇｅｏｎｓ，Ｌｉｓ
ｂｏａ，Ｐｏｒｔｕｇａｌ，Ａｐｒｉｌ １４−１８，
１９９６．）。
パーをリン酸緩衝液に浸し便抽出液を作成。被覆緩衝液
で希釈した抽出液をマイクロタイタープレートに添加
し、便中の炭酸脱水酵素を同プレートに結合させる。一
次抗体（抗炭酸脱水酵素抗体）を加え、次いで、一次抗
体に対するビオチン化二次抗体を添加。アビジン−ビオ
チン−アルカリフォスファターゼ複合体を加え、ｐ−ニ
トロフェニルフォスフェートで染色。吸光度計を用いて
測定し、標準曲線をもとに便抽出液中の炭酸脱水酵素濃
度を決定する。この方法により得られた陽性率は、大腸
癌患者で８０．０％、健康人で４．８％と、免疫学的便
潜血検査に比し（夫々４４．０％、０％）良好であった
（Ｓ．Ｙｏｋｏｙａｍａ：Ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ
ｕｓｅｆｕｌｎｅｓｓｏｆ ｆｅｃａｌ ｃａｒｂｏ
ｎｉｃ ａｎｈｙｄｒａｓｅ Ｉａｎｄ ＩＩｉｎ ｓ
ｃｒｅｅｎｉｎｇ ｆｏｒ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃ
ａｎｃｅｒ．Ｔｈｅ ＸＶＩ ｔｈＢｉｅｎｎｉａｌ
Ｃｏｎｇｒｅｓｓ ｏｆ ｌｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ
Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｌ
ｏｎａｎｄ Ｒｅｃｔａｌ Ｓｕｒｇｅｏｎｓ，Ｌｉｓ
ｂｏａ，Ｐｏｒｔｕｇａｌ，Ａｐｒｉｌ １４−１８，
１９９６．）。
【０００７】第２例 尚、マイクロタイタープレートに抗炭酸脱水酵素抗体
（Ａ）を結合させ、抽出した便中の炭酸脱水酵素を抗体
（Ａ）ともう一種類の抗炭酸脱水酵素抗体（Ｂ）によっ
て挟み撃ちするサンドイッチ法を用いれば、検査結果を
更に安定させる効果が期待される。又、（赤血球）表面
に抗炭酸脱水酵素抗体を付着させた赤血球を用いれば、
凝集反応として簡便に便中の炭酸脱水酵素を検出するこ
とが可能である。
（Ａ）を結合させ、抽出した便中の炭酸脱水酵素を抗体
（Ａ）ともう一種類の抗炭酸脱水酵素抗体（Ｂ）によっ
て挟み撃ちするサンドイッチ法を用いれば、検査結果を
更に安定させる効果が期待される。又、（赤血球）表面
に抗炭酸脱水酵素抗体を付着させた赤血球を用いれば、
凝集反応として簡便に便中の炭酸脱水酵素を検出するこ
とが可能である。
【０００８】
【発明の効果】短時間に多数の検体を処理することがで
き、精度の良いマススクリーニングが可能となる。
き、精度の良いマススクリーニングが可能となる。
Claims (1)
- 【請求項１】 ＥＬＩＳＡ（Ｅｎｚｙｍｅ−Ｌｉｎｋｅ
ｄ Ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ Ａｓｓａｙ）法を用
い、便中の炭酸脱水酵素を測定することにより、大腸癌
患者及び大腸癌高度危険群のスクリーニングを行う検査
法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8327494A JPH10132822A (ja) | 1996-11-01 | 1996-11-01 | 炭酸脱水酵素を指標とした大腸癌 スクリーニング法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8327494A JPH10132822A (ja) | 1996-11-01 | 1996-11-01 | 炭酸脱水酵素を指標とした大腸癌 スクリーニング法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10132822A true JPH10132822A (ja) | 1998-05-22 |
Family
ID=18199785
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8327494A Pending JPH10132822A (ja) | 1996-11-01 | 1996-11-01 | 炭酸脱水酵素を指標とした大腸癌 スクリーニング法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH10132822A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002034938A1 (fr) * | 2000-10-26 | 2002-05-02 | Eisai C0. Ltd. | Procede de diagnostic et d'examen du cancer du colon utilisant tannase en tant qu'indication |
-
1996
- 1996-11-01 JP JP8327494A patent/JPH10132822A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002034938A1 (fr) * | 2000-10-26 | 2002-05-02 | Eisai C0. Ltd. | Procede de diagnostic et d'examen du cancer du colon utilisant tannase en tant qu'indication |
| US7090997B2 (en) | 2000-10-26 | 2006-08-15 | Eisai Co., Ltd. | Diagnostic agent and test method for colon cancer using tannase as index |
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