JPH08504434A - 抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 抗腫瘍剤として有効な新規マイトセン類は、式ＩＩ： ［式中、Ｒ¹およびＲ²は、それらが結合する窒素とともに、環式または非環式第２級アミンを表し、Ｒ³は、水素またはアルキル基であり、Ｒ⁴およびＲ⁵は、各々独立に水素またはアルキル基てあり、Ｚは、脱離基である。］で表される化合物またはその塩である。

Description

【発明の詳細な説明】 抗腫瘍剤 本発明は、抗腫瘍剤として使用するに適当な新規シクロプロパピロロインドー ルキノン類に関する。 ある種のアジリジノピロロインドールキノン類は、マイトマイシンとして知ら れ、重要な抗腫瘍性抗生物質として知られて一定期間経つ。例としては、以下の 式Ｉ： ［式中、Ｘは、−ＮＨ₂（マイトマイシンＣ）または−ＯＭｅ（マイトマイシ ンＡである。］ で表されるマイトマイシンＣおよびマイトマイシンＡがある。マイトマイシン類 は、それらがＤＮＡと共有結合的に反応し、それらの細胞毒的作用を発揮する前 に、還元的な活性化を必要とすることがはるか以前より知られている。最近、こ の活性化プロセスの詳細が明らかになり始めている。活性化がアジリジン環の開 裂、および、ピロール環の２位を介してのＤＮＡ塩基との結合を含むことは、Mc Guinness et al.，J．Org．Chem.，（1991），56，4826-4829の研究より明らか である。活性化プロセスの機構を理解する上でのその他の研究としては、マイト マイシンＡのシクロプロパン類縁体［すなわち、ＸがＯＭｅであり、アジリジン 環がシクロプロパンで代替されている式Ｉ］の合成が挙げられる。この合成の意 図するところは、ＤＮＡ活性化プロセスにおけるＣ−１０の役割に注意を注ぐた めに、Ｃ−１における求電子性の少ない化合物を提供することであった［Jones et al，J．Chem．Soc．Chem．Commun.，（1989），186 to 187およびJ．Chem．S oc．Perkin Trans．l（1989），2449 to 2462参照］。 マイトマイシンＡから誘導されるマイトセンおよびＣ−６においてメチルを欠 くその対応する化合物のこのシクロプロパン類縁体が、また、抗腫瘍活性を示す ことが見いだされた。この後者の化合物は、数個のヒト腫瘍細胞系に対する通常 のオキシ条件（oxic conditions）下で試験した時、マイトマイシンＣよりも１ ０〜２０倍活性が低いと報告されており、他方、好気性および嫌気性条件下での チャイニーズハムスターV79細胞に対するこの化合物の生体外試験(in vitro tes t)は、マイトマイシンＣに対する値２に比べて、ほぼ３５倍も差のある細胞毒性 ［IC₅₀（空気）：IC₅₀（窒素）］を示した。 マイトマイシンのシクロプロパン類縁体が抗腫瘍活性を保持することが観測さ れることは、幾分予想外であったが、有意な利点は、明らかでなかった。一群の 新規シクロプロパピロロインドールキノン類縁体が、公知のマイトマイシン類お よび上記マイトマイシンＡのシクロプロピル類縁体と比較した時、かなり高い抗 腫瘍活性を示すことが見いだされ、好気性および酸素欠乏条件下でこうした細胞 毒性を示すことはこうした背景である。 したがって、本発明は、式ＩＩ： ［式中、Ｒ¹およびＲ²は、それらが結合した窒素とともに、環式または非環式 第２級アミンを表し、Ｒ³は、水素またはアルキル基であり、Ｒ⁴およびＲ⁵は、 各々独立に、水素またはアルキル基であり、Ｚは、脱離基である。］ で表される化合物またはその塩を提供する。適当な塩類としては、１個または両 窒素原子の酸、例えば、塩化水素酸、メタンスルホン酸、酒石酸またはその他の 特に、生理学的に許容される酸との酸付加塩が挙げられる。 好ましくは、Ｚは、カルバメート、アミド、エステル、エーテルおよびハロゲ ン置換基より選択される。好ましくは、Ｚは、−ＣＯＮＨ₂である。 Ｒ¹およびＲ²は、好ましくは、それらが結合した炭素原子とともに結合し、ヘ テロ環を形成する。ヘテロ環は、適宜、３員環〜６員環であってもよい。３員環 （アジリジン）が好ましく、これは、置換されていてもよい。Ｒ³は、好ましく は、水素である。Ｒ⁴およびＲ⁵は、各々独立に、アルキル基、例えば、メチルで あってもよいが、Ｒ⁴およびＲ⁵は、好ましくは、水素である。 式ＩＩで表され る好ましい化合物は、Ｒ¹およびＲ²が隣接窒素と合わさってアジリジン環を形成 し、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴が水素であり、Ｚが−ＯＣＯＮＨ₂である化合物である。 Ｚがアミドまたはエステル基である式ＩＩで表される化合物は、以下に記載す る反応スキームに従い製造することができる。Ｚが、アミドまたはエステル以外 の、例えば、ハライドである化合物は、熟練化学者に周知の方法を用いる所望さ れるスキームの変更、例えば、以下のスキーム、の最後から二番目の工程の変更 によって製造することができる。 上記反応スキームにおいて、Ｒ¹〜Ｒ⁵は、式ＩＩに対して上記定義された意昧 を有し、Ｒ⁶は、−ＣＯＣＨ₃または−ＣＯＮＨ₂である。Ｒ⁶が−ＣＯＣＨ₃であ る時、それは、ピリジン中でのアルコールの無水酢酸との反応によって導入する ことができる。Ｒ⁶が−ＣＯＮＨ₂である時、それは、アルコールのフェニルクロ ロホルメートとの反応および続くアンモニアとの反応によって導入することがで きる。ＴｓＮＨＮＨ₂は、４−トルエンスルホニルヒドラジンであり、フレミー （Fremy）の塩は、カリウムニトロソジスルホネートである。 したがって、本発明は、式ＩＩＩ： ［式中、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＺは、上記定義された通りである。］ で表される化合物の式Ｒ¹Ｒ²ＮＨ［式中、Ｒ¹およびＲ²は、上記定義された通り である。］で表される第２級アミンとの、適当な溶剤、例えば、ジメチルホルム アミドの存在中での反応を含む式ＩＩで表される化合物の製造方法を含む。 好ましくは、式ＩＩＩで表される化合物中のＺは、−ＣＯＮＨ₂であり、式Ｉ ＩＩで表される化合物は、式ＩＶ： ［式中、Ｒ³、Ｒ⁴およびＲ⁵は、上記定義された通りである。］ で表される化合物のフェニルクロロホルメートおよび続くアンモニアとの反応に よって製造された。 式ＩＩで表される化合物およびそれらの塩は、抗腫瘍剤としての用途を見いだ すことができる。したがって、本発明は、さらに、式ＩＩで表される化合物の少 なくとも一つまたはその薬学的に許容される塩を薬学的に許容される担体ととも に含む薬学的な組成物を含む。適当な担体は、組成物が投与される方法に依存す る。例えば、式ＩＩで表される化合物は、組成物、非経口投与に対しては、注射 可能な形態で使用することを意図し、したがって、無菌、かつ、発熱物質を含ま ない液体希釈剤を配合した、例えば、水性、油性または乳濁液組成物で使用する ことができる。これとは別に、組成物は、経口投与のためにも適当であり、この 場合、担体は、従来通りに、固形物質、例えば、澱粉、ラクトース、デキストリ ンまたはマグネシウムステアレートである。このような固形組成物は、便宜上、 錠剤またはカプセルに成形してもよい。その他の形態の投与、例えば、座薬また はペッサリーを用いることもできる。 使用される投与レベルは、配合の様式および使用目的に依存する。かくして、 例えば、組成物を静脈投与する場合、適当な投与量は、２４時間〜数週間の間隔 で、活性成分０．００１〜０．５mg/kgの範囲にある。 さて、本発明に従う化合物の製造を実施例によって説明する。実施例 １ ７−（アジリジン−１−イル）−９−ヒドロキシメチル−１，２−ジヒドロ−３ Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ［１，２ａ］インドール−５，８−ジオンカル バメート 表題化合物は、以下に記載するように、工程（ａ）〜（ｎ）によって、ｏ−バ ニリンから出発して製造した。 （ａ） ２−ベンジルオキシ−３−メトキシベンズアルデヒド 水酸化カリウムペレット（４０．６g，７２４mmol）をｏ−バニリン（１００ ．０g，６５７mmol）のエタノール（９９．７％，５９０cm³）の撹拌溶液に加え 、続いて、塩化ベンジル（８３．４５cm³，７２３mmol）を加えた。撹拌混合物 を１２時間還流し、ついで、水（１００cm³）を加え、混合物をエーテル（３× ７５０cm³）で抽出した。エーテル抽出物を水（３×２００cm³）、水酸化カリウ ム溶液（２M，５×５００cm³）、再び、水（２×１５０cm³）、ついで、塩水（ １５０cm³）で洗浄した。有機層を（ＭｇＳＯ₄で）乾燥し、ついで、減圧で濃縮 すると、軽油で粉砕して無色の固体として、表題化合物（９．２g，６２％）を 与えた。 （ｂ） メチル２−アジド−３−（２−ベンジルオキシ−３−メトキシフェニル ）プロペノエート ナトリウム金属（１２．５４g，５４５mmol）を乾燥メタノール（３００cm³） に加えた。この溶液を−１５℃に冷却し、メチルアジドアセテート（６１．００ g，５３０mmol）と２−ベンジルオキシ−３−メトキシベンズアルデヒド（３３ ．０７g，１３７mmol）との乾燥メタノール（２５cm³）溶液をシリンジにより滴 下した。混合物は、−１０℃で３時間、ついで、＋４℃で１２時間撹拌した。水 （１００cm³）を混合物に注意深く加え、ついで、これを酢酸エチル（３×５０ ０cm³）で抽出した。合わせた抽出物を水（３×５００cm³）、塩水（３００cm³ ）で洗浄し、（ＭｇＳＯ₄で）乾燥した。溶剤を減圧で除去すると、淡黄色の残 渣を与え、これは、エーテルで粉砕すると、淡黄色の結晶として、表題化合物（ ３８．０３g，８２％）を与えた。 （ｃ） メチル４−ベンジルオキシ−５−メトキシインドール−２−カルボキシ レート メチル２−アジド−３−（２−ベンジルオキシ−３−メトキシフェニル）プロ ペノエート（２．２０８g，６．５１３mmol）の乾燥キシレン（４８cm³）溶液を 、均圧滴下ロートにより、還流乾燥キシレン（２００cm³）に導入した。滴下が 完了した後（約３０分）、溶液をさらに４５分間還流した。溶剤を減圧で除去す ると、黄色の固体残渣を与え、これをエーテルから再結晶すると、無色の固体と して、表題化合物（１．３２３g，６５％）を与えた。 （ｄ） ４−ベンジルオキシ−５−メトキシインドール−２−メタノール メチル４−ベンジルオキシ−５−メトキシインドール−２−カルボキシレート （６．９７５g，２２．４mmol）の乾燥ＴＨＦ（２００cm³）溶液をリチウムアル ミニウムハイドライド（１．７０９g，４４．８mmol）の乾燥ＴＨＦ（８５cm³） 撹拌懸濁液に、混合物が穏やかに還流するように滴下した。３０分後、水（１． ７cm³）、１５％水酸化ナトリウム（１．７cm³），再び、水（５．１cm³）を混 合物に加え、生成する沈殿を濾過（セライト床を介して）によって除去した。濾 液を（ＭｇＳＯ₄で）乾燥し、ついで、減圧で農縮すると、無色の固体として、 表題化合物（５．８１６g，９２％）を与えた。 （ｅ） ４−ベンジルオキシ−５−メトキシインドール−２−カルボキシアルデ ヒド ４−ベンジルオキシ−５−メトキシ−４−メチルインドール−２−メタノール （５．８２g，２０．５６mmol）の乾燥ジクロロメタン（６５０cm³）撹拌溶液に 、二酸化マンガン（１７．４０g，２００．００mmol）を小分けしつつ、加えた 。ついで、懸濁液を１２時間還流した。混合物を濾過し、残渣を高温ジクロロメ タン（３×３００cm³）で洗浄した。合わせた濾液と洗浄液とを蒸発させると、 油状物を与え、これを、カラムクロマトグラフィによって精製すると、淡黄色の 表題化合物（３．５６g，６２％）を与えた。 （ｆ） １−アリル−４−ベンジルオキシ−５−メトキシインドール−２−カル ボキシアルデヒド 水素化ナトリウム（８０％，０．４７５g，１５．８４mmol）を入れたフラス コに、乾燥軽油（１０cm³）を加えた。混合物を１０分間撹拌し、前記軽油をシ リンジのより除去し、フラスコ内容物を減圧下で乾燥させた。ＤＭＦ（２６０cm³ ）中の４−ベンジルオキシ−５−メトキシインドール−２−カルボキシアルデ ヒド（３．５６２g，１２．６８mmol）を滴下し、混合物を室温で３０分間撹拌 した。アリルブロマイド（１．９０７g，１５．７６mmol）を加え、混合物を室 温で撹拌した。１時間後、水（１５０cm³）を注意深く加え、混合物を酢酸エチ ル（４×２５０cm³）で抽出した。合わせた抽出物を水（８×２００cm³）、塩水 （２００cm³）で洗浄し、（ＭｇＳＯ₄で）乾燥し、蒸発させると、褐色の固体と して、表題化合物（４．０７０g，９９％）を与えた。 （ｇ） １−アリル−４−ベンジルオキシ−５−メトキシインドール−２−カル ボキシアルデヒドトシルヒドラゾン ４−トルエンスルホニルヒドラジン（２．３３４g，１２．５３９mmol）のメ タノール（２５cm³）撹拌溶液に、１−アリル−４−ベンジルオキシ−５−メト キシインドール−２−カルボキシアルデヒド（３．０９５g，９．６４２mmol） を加えた。４０℃で１時間撹拌後、溶剤を減圧で除去し、残渣をクロマトグラフ ィにより精製し、エーテルで溶離することにより、淡黄色の固体として、表題化 合物（４．６９４g，９９％）を与えた。 （ｈ） ８−ベンジルオキシ−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１，２ −シクロプロパピロロ［１，２−ａ］インドール 上記（ｇ）のトシルヒドラゾン（２．６０２g，５．３２１mmol）の乾燥ＴＨ Ｆ（８０cm³）撹拌溶液に水素化ナトリウム（８０％，０．２３７g，７．９０７ mmol）を加えた。２５分後、溶液を濾過し、濾液を蒸発させた。残渣を乾燥クロ ロベンゼン（８００cm³）に溶解し、溶液を３時間還流させた。溶剤を蒸発さ せ、残渣をクロマトグラフィにより精製すると、無色の油状物として、表題化合 物（１．５３０g，９４％）を与えた。 2d=2がオーバーラップダブレットであることに注意。 （ｉ） ８−ベンジルオキシ−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１，２ −シクロプロパピロロ［１，２−ａ］インドール−９−カルボキシアルデヒド Ｎ−メチルホルムアニリド（１．２２２g，９．０３７mmol）とオキシ塩化リ ン（１．３８６g，９．０３７mmol）とを酸化カルシウム乾燥チューブ下２０分 間撹拌した。得られた沈殿を０℃に冷却し、１，２−ジクロロエタン（３４cm³ ）を加えた。８−ベンジルオキシ−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１ ，２−シクロプロパピロロ［１，２−ａ］インドール（２．２９７g，７．５３ １mmol）を加え、混合物を１．２５時間還流させた。酢酸ナトリウム（1M;４９c m³）を加え、混合物を酢酸エチル（２×２００cm³）で抽出した。合わせた抽出 物を水（３×２５０cm³）、塩水（２００cm³）で洗浄し、（ＭｇＳＯ₄で）乾燥 し、蒸発させた。カラムクロマトグラフィにより残渣を精製すると、表題化合物 （１．９０２g，７６％）を与えた。 （ｊ） ８−ヒドロキシ−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１，２−シ クロプロパピロロ ［１，２−ａ］インドール−９−カルボキシアルデヒド ８−ベンジルオキシ−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１，２−シク ロプロパピロロ［１，２−ａ］インドール−９−カルボキシアルデヒド（０．５ ００g，１．５０１mmol）の酢酸エチル（２５０cm³）溶液に、カーボンに担持さ れた１０％パラジウム触媒（０．１００g）と希硫酸（８滴）とを加えた。混合 物を水素雰囲気下で２時間撹拌した。この時間の後、懸濁液を濾過し、ＤＣＭで 洗浄した。濾液と洗浄液とを水（３×１００cm³）、塩水（７５cm³）で抽出し、 （ＭｇＳＯ₄で）乾燥した。有機層を蒸発乾固すると、褐色の固体残渣を与えた 。残渣をカラムクロマトグラフィにより精製すると、無色の固体として、表題化 合物（０．２８８g，７９％）を与えた。 （ｋ） ９−ホルミル−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１，２−シク ロプロパピロロ ［１，２ａ］インドール−５，８−ジオン 水（７０cm³）中のカリウムニトロソジスルホネート（１．４０７g，５．２４ ３mmol）を８−ヒドロキシ−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１，２− シクロプロパピロロ［１，２−ａ］インドール−９−カルボキシアルデヒド（０ ．５７９g，２．３８３mmol）のアセトン（２３２cm³）撹拌溶液に加えた。混合 物をリン酸二水素ナトリウム溶液（０．１６７M;７０cm³）溶液で緩衝させた。 室温で１２時間撹拌した後、混合物を減圧で濃縮し、濾過し、残渣をジクロロメ タン−軽油から再結晶させて、橙色の結晶として、表題化合物（０．５８１g， ９５％）を与えた。 （ｌ） ９−ヒドロキシメチル−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１， ２−シクロプロパピロロ［１，２−ａ］インドール−５，８−ジオン ナトリウムボロハイドライド（０．１８９g，４．９９６mmol）を９−ホルミ ル−７−メトキシ−１，２ジヒドロ−３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ［１， ２−ａ］インドール−５，８−ジオン（０．１７６g，０．６８５mmol）のメタ ノール（１３２cm³）撹拌溶液に加え、溶液を窒素で激しく脱気した。室温で４ 時間撹拌後、溶液に迅速に空気を吹き込み、混合物を分液ロートに移し、ジクロ ロメタン（３×２００cm³）で抽出した。合わせた抽出物を水（２×２００cm³） 、塩水（３００cm³）で洗浄し、（ＭｇＳＯ₄で）乾燥した。溶剤を蒸発させ、残 渣をカラムクロマトグラフィによって精製すると、赤色の固体として、表題化合 物（０．１５９g，９０％）を与えた。 （ｍ） ９−ヒドロキシメチル−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１， ２−シクロプロパピロロ［１，２−ａ］インドール−５，８−ジオンカルバメー ト 上記（ｌ）のアルコール（０．１００g，０．３８６mmol）の乾燥ピリジン（ ２５cm³）の撹拌氷冷溶液に、フェニルクロロホルメート（０．０８cm³，０．６ １８mmol）を滴下した。混合物を室温で２時間撹拌し、ついで、水（１０cm³） を加えた。混合物をジクロロメタン（３×５０cm³）で抽出し、合わせた抽出物 を水（３×５０cm³）、塩水（１００cm³）で洗浄し、（ＭｇＳＯ₄で）乾燥した 。溶剤を蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィにより精製すると、橙色のガ ム状の固体を与えた。 このフェニルカルバメートの乾燥ジクロロメタン（５５cm³）溶液を−７８℃ に冷却した。この溶液にアンモニアガスをほぼ４５分間バブルさせ（ＴＬＣによ って反応をモニターした）、その後、内容物を室温まで暖め、溶剤を減圧で除去 し た。残渣をジクロロメタン−軽油から再結晶すると、赤色の結晶固体として、表 題化合物（０．０９７g，８３％）を与えた。 （ｎ） ７−（アジリジン−１−イル）−９−ヒドロキシメチル−１，２−ジヒ ドロ −３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ［１，２−ａ］インドール−５，８−ジオンカルバメート ９−ヒドロキシメチル−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１，２−シ クロプロパピロロ［１，２−ａ］インドール−５，８−ジオンカルバメート（０ ．０１５g，０．０５０mmol）の乾燥ＤＭＦ（２．５cm³）溶液を過剰の蒸留アジ リジン（０．５cm³）で処理し、この混合物を窒素下室温で１５時間撹拌した。 その後、水（５cm³）を加え、ジクロロメタン（３×２５cm³）で抽出した。ジク ロロメタン抽出物を水（６×２５cm³）、塩水（３０cm³）で洗浄し、（ＭｇＳＯ₄ で）乾燥した。減圧で溶剤を除去すると、赤色の残渣を与え、これをジクロロ メタン−軽油から再結晶すると、赤色の固体として、表題化合物（０．０１３g ，８４％）を与えた。 実施例 ２ ９−ヒドロキシメチル−７−（２−メチルアジリジン−１−イル）−１，２−ジヒドロ −３Ｈ−１，２−ジクロプロパピロロ−［１，２−ａ］インドール−５ ，８−ジオンカルバメート 実施例１の工程（ａ）〜（ｍ）に記載したようにして製造した９−ヒドロキシ メチル−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ ［１，２−ａ］インドール−５，８−ジオンカルバメート（０．０１０g，０． ０３３mmol）の乾燥ＤＭＦ（１．５cm³）溶液を過剰の２−メチルアジリジン（ 最初０．２５cm³+２４時間後、０．２５cm³）で処理し、この混合物を窒素下室 温で４８時間撹拌した。その後、水（５cm³）を加え、ジクロロメタン（３×２ ５cm³）で抽出した。ジクロロメタン抽出物を水（５×２５cm³）、塩水（３０cm³ ）で洗浄し、（ＭｇＳＯ₄で）乾燥させた。溶剤を減圧で除去すると、赤色の残 渣を与え、これをカラムクロマトグラフィ（酢酸エチルで溶離）によって精製す ると、赤色の固体を与えた。赤色の残渣をジクロロメタン−軽油から再結晶する と、赤色の固体として、表題化合物（０．００７５g，６８％）を与えた。 実施例 ３ ９−ヒドロキシメチル−７−（ピロリジン−１−イル）−１，２−ジヒドロ−３ Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ−［１，２−ａ］インドール−５，８−ジオン カルバメート 実施例１の工程（ａ）〜（ｍ）に記載したようにして製造した９−ヒドロキシ メチル−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ ［１，２−ａ］インドール−５，８−ジオンカルバメート（０．０１０g，０． ０３３mmol）の乾燥ＤＭＦ（１．５cm³）溶液を蒸留ピロリジン（０．００８cm³ ，０．０９９mmol）で処理し、この混合物を窒素下室温で１５時間撹拌した。そ の後、水（５cm³）を加え、ジクロロメタン（３×２５cm³）で抽出した。ジクロ ロメタン抽出物を水（５×２５cm³）、塩水（３０cm³）で洗浄し、（ＭｇＳＯ₄ で）乾燥させた。溶剤を減圧で除去すると、紫色の残渣を与え、これをジクロロ メタン−軽油から再結晶すると、紫色の固体として、表題化合物（０．００８g ，７３％）を与えた。 ［★この化合物をＣＤＣｌ₃中で４５℃に加熱した。3.64ppmにおけるピークは、 この温度でブロードなピークからシャープなマルチプレットになった。］実施例 ４ ２−（アジリジン−１−イル）−９−ヒドロキシメチル−１，２−ジヒドロ−１ ａ，１ａ−ジメチル−３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ［１，２−ａ］インド ール−５，８−ジオンカルバメート ｏ−バニリンから出発し、実施例１の工程（ａ）〜（ｅ）を繰り返し、さらに 以下の工程（ｆ）〜（ｎ）を続けることによって表題化合物を製造した。 （ｆ） ４−ベンジルオキシ−５−メトキシ−１−（２−メチル−２−ブテニル ）インドール−２−カルボキシアルデヒド 水素化ナトリウム（８０％，０．３００g，１０．０００mmol）を入れたフラ スコに、乾燥軽油（５cm³）を加えた。混合物を１０分間撹拌し、シリンジによ って軽油を除去し、フラスコ内容物を減圧下で乾燥させた。ＤＭＦ（１７０cm³ ）中、４−ベンジルオキシ−５−メトキシインドール−２−カルボキシアルデヒ ド［実施例１の工程（ａ）〜（ｅ）に記載したようにして製造した］（２．３４ ０g，８．３２７mmol）を滴下し、混合物を室温で４５分間撹拌した。４−ブロ モ−２−メチルブテン（１．１５cm³，１０．０００mmol）を加え、混合物を室 温で撹拌した。１５時間後、水（２０cm³）を注意深く加え、混合物を酢酸エチ ル（３×１５０cm³）で抽出した。合わせた抽出物を水（８×１５０cm³）、塩水 （１５０cm³）で洗浄し、（ＭｇＳＯ₄で）乾燥させ、蒸発乾固させた。残渣をカ ラムクロマトグラフィ（５０％エーテル−５０％軽油で溶離する）により精製す ると、淡黄色の固体として、表題化合物（１．８９４g，６５％）を与えた。 （ｇ） ４−ベンジルオキシ−５−メトキシ−１−（２−メチル−２−ブテニル ）インドール−２−カルボキシアルデヒドトシルヒドラゾン ４−ベンジルオキシ−５−メトキシ−１−（２−メチル−２−ブテニル）イン ドール−２−カルボキシアルデヒド（１．８９４g，５．４２７mmol）の乾燥メ タノール（３０cm³）撹拌溶液に、乾燥メタノール（２０cm³）中の４−トルエン スルホニルヒドラジン（９７％，１．５１６g，８．１４１mmol）を加えた。４ ０℃で１５時間撹拌後、溶剤を減圧で除去し、残渣をクロマトグラフィ（７０％ エーテル−３０％軽油）によって精製すると、クリーム状の発泡体を与えた。こ の発泡体をジクロロメタン−軽油から再結晶すると、無色の固体として、表題化 合物（１．６８１g，６０％）を与えた。 （ｈ） ８−ベンジルオキシ−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−１，ａ，１ａ −ジメチル−３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ−［１，２−ａ］インドール 上記（ｇ）のトシルヒドラゾン（０．３６９g，０．７１１mmol）の乾燥ＴＨ Ｆ（１１cm³）撹拌溶液に水素化ナトリウム（８０％，０．０３２g，１．０６６ mmol）を加えた。２０分後、溶液を濾過し、濾液を蒸発させた。残渣を乾燥クロ ロベンゼン（１０５cm³）に溶解し、溶液を３．５時間還流させた。溶剤を蒸発 させ、残渣をクロマトグラフィ（勾配溶離−１００％軽油で開始し、５％間隔で 、６０％軽油−４０％エーテルと下降））により精製することによって、褐色の 油状物として、表題化合物（１０１４３g，６０％）を与えた。 （ｉ） ８−ベンジルオキシ−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−１ａ，１ａ−ジメチル −３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ−［１，２−ａ］インドール−９ −カルボキシアルデヒド Ｎ−メチルホルムアニリド（０．５cm³）とオキシ塩化リン（０．３８cm³）と を酸化カルシウムチューブ下、１０分間撹拌した。得られた沈殿を０℃に冷却し た。この黄色の沈殿（０．１５０g，Ｎ−メチルホルムアニリド０．０７０g，０ ．５１５mmol）とオキシ塩化リン（０．０８０g ０．０５１５mmol）とを、１， ２−ジクロロエタン（２cm³）中の８−ベンジルオキシ−７−メトキシ−１，２ −ジヒドロ−１，ａ，１ａ−ジメチル−３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ−［ １，２−ａ］インドール（０．１４３g，０．４３０mmol）に加えた。混合物を １．２５時間還流した。酢酸ナトリウム（1M，９cm³）を加え、混合物を酢酸エ チル（３×５０cm³）で抽出した。合わせた抽出物を水（２×５０cm³）、塩水（ ５０ cm³）で洗浄し、（ＭｇＳＯ₄で）乾燥し、蒸発させた。残渣のカラムクロマトグ ラフィによる精製（エーテルで溶離する）は、黄色の油状物として、表題化合物 （０．１１８g，７６％）を与えた。 （ｊ） ８−ヒドロキシ−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−１ａ，１ａ−ジメ チル −３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ−［１，２−ａ］インドール−９−カ ルボキシアルデヒド ８−ベンジルオキシ−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−１ａ，１ａ−ジメチ ル−３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ−［１，２−ａ］インドール−９−カル ボキシアルデヒド（０．３００g，０．８３１mmol）の酢酸エチル（１６０cm³） 溶液に、カーボン上に１０％パラジウム担持触媒（０．０６５g）、希硫酸（１ ０滴）を加え、混合物を水素雰囲気下で撹拌した。２．５時間後、懸濁液を濾過 し、ジクロロメタン（約１５０cm³）で洗浄した。有機層を水（３×５０cm³）、 塩水（５０cm³）で洗浄し、（ＭｇＳＯ₄で）乾燥し、蒸発させた。残渣のカラム クロマトグラフィ（勾配溶離液：５０％軽油：５０％エーテル−１００％エーテ ル、１０％間隔で）により、無色の固体として、表題化合物（０．１２３g，５ ５％）を与えた。 （ｋ） ９−ホルミル−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−１ａ，１ａ−ジメチ ル −３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ［１，２−ａ］インドール−５，８−ジ オン ８−ヒドロキシ−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−１ａ，１ａ−ジメチル− ３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ−［１，２−ａ］インドール−９−カルボキ シアルデヒド（０．１２３ｇ，０．４５４mmol）のアセトン（４４cm³）撹拌溶 液に、水（１３cm³）中のカリウムニトロソジスルホネート（０．２６８g，０． ９９８mmol）を滴下した。混合物をリン酸二水素ナトリウム溶液（０．１６７M ，１３cm³）溶液で緩衝した。室温で１２時間撹拌した後、混合物を減圧で濃縮 し、濾過し、残渣をジクロロメタン−軽油から再結晶して、橙色の結晶として、 表題化合物（０．１１１g，８６％）を与えた。 （ｌ） ９−ヒドロキシメチル−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−１ａ，１ａ −ジメチル−３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ−［１，２−ａ］インドール− ５，８−ジオン ９−ホルミル−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−１ａ，１ａ−ジメチル−３ Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ［１，２−ａ］インドール−５，８−ジオン（ ０．０７８g，０．２７４mmol）のメタノール（５３cm³）撹拌溶液に、ナトリウ ムボロハイドライド（０．０７１g，０．１８６１mmol）を加え、溶液を窒素で 激しく脱気した。窒素下室温で４時間撹拌後、溶液に空気を激しく５分間吹き込 む。混合物を分液ロートに移し、ジクロロメタン（３×１００cm³）で抽出し、 塩水（１００cm³）で洗浄し、（ＭｇＳＯ₄で）乾燥し、蒸発させた。残渣のカラ ムクロマ トグラフィ（勾配溶離：５０％酢酸エチル；５０％軽油で開始し、１００％酢酸 エチルで溶離する）による精製は、赤色固体として、表題化合物（０．０５４g ，６９％）を与えた。 （ｍ） ９−ヒドロキシメチル−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−１ａ，１ａ −ジメチル−３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ−［１，２−ａ］インドール− ５，８−ジオンカルバメート 上記工程（ｌ）のアルコール（０．０５０g，０．１７mmol）の蒸留ピリジン （１１cm³）撹拌氷冷溶液に、フェニルクロロホルメート（０．０４cm³，０．２ ８mmol）を滴下した。混合物を室温で２時間撹拌し、ついで、水（５cm³）を加 えた。混合物をジクロロメタン（３×５０cm³）で抽出し、合わせた抽出物を水 （３×５０cm³）、塩水（１００cm³）で洗浄し、（ＭｇＳＯ₄で）乾燥した。溶 剤を蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィ（エーテルで溶離する）によって 精製すると、橙色のガム状の固体を与えた。 このフェニルカーボネートの乾燥ジクロロメタン（３０cm³）溶液を−７８℃ に冷却した。この溶液にアンモニアガスを３０分間（約１００cm³）をバブルし 、その後、内容物を室温まで暖め、溶剤を蒸発させた。残渣をジクロロメタン− 軽油から再結晶すると、橙色の結晶固体として、表題化合物（０．０４０g，１ ０％）を与えた。 （ｎ） ７−（アジリジン−１−イル）−９−ヒドロキシメチル−１，２−ジヒ ドロ −１ａ，１ａ−ジメチル−３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ［１，２−ａ ］インドール−ジオンカルバメート ９−ヒドロキシメチル−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−１ａ，１ａ−ジメ チル−３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ−［１，２−ａ］インドール−５，８ −ジオンカルバメート（０．０１０g，０．０３０mmol）の蒸留ＤＭＦ（１．５c m³）溶液を蒸留アジリジン（０．００４g，０．０９１mmol）で処理し、混合物 を窒素下室温で４８時間撹拌した。その後、水（５cm³）を加え、混合物をジク ロロメタン（３×２５cm³）で抽出した。ジクロロメタン抽出物を水（８×２５c m³）、塩水（３０cm³）で洗浄し、（ＭｇＳＯ₄で）乾燥した。溶剤を減圧で除去 すると、赤色の残渣を与え、これをジクロロメタン−軽油から再結晶すると、赤 色の固体として、表題化合物（０．００７５g，７５％）を与えた。 実施例 ５ ９−ヒドロキシメチル−７−（ピロリジン−１−イル）−１，２−ジヒドロ−１ ａ，１ａ−ジメチル−３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ［１，２−ａ］インド ール−５，８−ジオンカルバメート 実施例１の工程（ａ）〜（ｅ）および実施例２の工程（ｆ）〜（ｍ）に記載し たようにして製造した９−ヒドロキシメチル−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ −１ａ，１ａ−ジメチル−３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ−［１，２−ａ］ インドール−５，８−ジオンカルバメート（０．０１０g，０．０３０mmol）の 蒸留ＤＭＦ（１．５cm³）溶液をピロリジン（０．００８cm³，０．０９１mmol） で処理し、混合物を窒素下室温で１５時間撹拌した。その後、水（５cm³）を加 え、ジクロロメタン（３×２５cm³）で抽出した。ジクロロメタン抽出物を水（ ８×２５cm³）、塩水（３０cm³）で洗浄し、（ＭｇＳＯ₄で）乾燥した。溶剤を 減圧で除去すると、紫色の残渣を与え、これをカラムクロマトグラフィ（勾配溶 離：５０％酢酸エチル：５０％軽油から酢酸エチル１００％まで）によって精製 すると、紫色の残渣を与えた。紫色の残渣をジクロロメタン−軽油から再結晶す ると、紫色の固体として、表題化合物（０．００８g，７３％）を与えた。 注−★¹ＨＮＭＲ（250MHz，CDCl₃+TMS）。第２の実験において、表題化合物をCD Cl₃+TMS中で４５℃に加熱した。３．５９ppmにおけるピークが、これより高温で は、ブロードなバンドから鋭いマルチプレットに変化した。実施例 ６−生物学的試験 （Ａ） 実施例１の化合物の好気毒性は、Ｖ７９細胞中で示し、マイトマイシン Ｃ［比較化合物（ａ）（“Com a"）］によって示されるものと、９−ヒドロキシ メチル−７−メトキシ−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１，２−シクロプロパピロロ ［１，２−ａ］−インドール−５，８−ジオンカルバメート［実施例１の工程（ ａ）〜（ｍ）に記載したようにして製造した−比較化合（ｂ）（“Com b"）］に よって示されるものと比較した。 毒性は、空気中、３７℃で、３時間、細胞に暴露し、その後、Stratford et a lによりInt．J．Radiat．Oncol．Biol．Phys．（1989），16，973に記載された ＭＴＴ分析法によって決定した。 結果は、図面の図１によって示される通りである。 （Ｂ） 実施例１の化合物および比較化合物（ｂ）への低酸素暴露中に酵素抑制 剤ジクマロール（dicoumarol）を細胞に添加する効果は、以下のように測定し、 その結果は、図２および図３に示すが、これは、実質的な保護が観測されること を示し、空気中での実施例１の化合物の活性化に関して、ＤＴ−ジアホラーゼ（ DT-diaphorase）が重要であることを意昧する。これは、この化合物が高レベル のＤＴジアホラーゼを有する細胞タイプを処理するのに用途を見いだすことがで きることを示唆する。 （Ｃ） 比較化合物（ｂ）と比較した実施例１の化合物の好気性および低酸素性 細胞の両者を殺す効果は、以下のように測定し、その結果は、図４および図５に 示し、これは、これら２つの化合物の間の挙動の著しい違いを示す。 （Ｄ） 実施例１の化合物の毒性を、それらの異なる修復能力に対して選択され た細胞系の範囲について、比較化合物（ａ）（マイトマイシンＣ）のそれと比較 した。 結果は、以下、表１に示す。 表１から理解できるように、実施例１の化合物は、ＩＲＳ−１およびＵＶ４１ 細胞の両者において、マイトマイシンＣに対する相並んだ感度を示し、これらの 薬剤によって生ずる分子の損傷性が同等であることを示す。実施例１の化合物が 常により有効であり、ＭＭＣ^R細胞を殺す効率は、最低であるが、抵抗（ＭＭＣ^R 対ＣＨＯ−Ｋｌ）の度合いは、マイトマイシンＣに対して観測されるよりもはる かに低く、恐らく、活性化に対して、Ｐ４５Ｏリダクターゼへの依存性が低いこ とを示す。 （Ｅ） 実施例１の化合物およびマイトマイシンＣのネズミの骨髄細胞に対する 生体外毒性を調べ、その結果を以下の表２に示す。 結果は、ネズミ骨髄毒性がマイトマイシンＣの使用に限定する投与であること を示す。しかし、生体外において、実施例１の化合物とマイトマイシンＣとの間 の毒性の差は、わずかにファクタ３のみであり、これは、表１におけるその他の 細胞タイプに対して認められる効能の差よりもはるかに少ない。これは、実施例 １の化合物に有利な明白な利点である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 式ＩＩ： ［式中、Ｒ¹およびＲ²は、それらが結合した窒素とともに、環式または非環式 第２級アミンを表し、Ｒ³は、水素またはアルキル基であり、Ｒ⁴およびＲ⁵は、 各々独立に、水素またはアルキル基であり、Ｚは、脱離基である。］ で表される化合物またはその塩。 ２． Ｚが、カルバメート、アミド、エステルおよびハロゲン置換基から選択さ れる、請求項１に記載の化合物。 ３． Ｚが、−ＯＣＯＮＨ₂である、請求項２に記載の化合物。 ４． Ｒ¹およびＲ²が、それらが結合した炭素原子とともに結合して、ヘテロ環 を形成する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物。 ５． Ｒ¹およびＲ²が、それらが結合した炭素原子とともにアジリジン環を形成 する、請求項４に記載の化合物。 ６． Ｒ³が、水素である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。 ７． Ｒ⁴およびＲ⁵が、水素である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合 物。 ８． 式ＩＩＩ： ［式中、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＺは、請求項１〜７のいずれか１項に定義され た通りである。］ で表される化合物を、式Ｒ¹Ｒ²ＮＨ［式中、Ｒ¹およびＲ²は、請求項１〜７のい ずれか１項で定義された通りである。］で表される第２級アミンと、適当な溶剤 の存在中で、反応させることを含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載された 式ＩＩの化合物の製造方法。 ９． 式ＩＩの化合物中のＺが、−ＣＯＮＨ₂であり、式ＩＩＩの化合物が、式 ＩＶ： ［式中、Ｒ³、Ｒ⁴およびＲ⁵は、請求項１〜７のいずれか１項に定義された通 りである。］ で表される化合物をフェニルクロロホルメートと反応させ、続いて、アンモニア で換言することによって製造された、請求項８に記載の方法。 １０． 請求項１〜７のいずれか１項に記載された式ＩＩで表される化合物また はその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物 。 １１． 請求項１〜７のいずれか１項に記載された式ＩＩで表される化合物また はその薬学的に許容される塩の抗腫瘍剤としての使用。