JPH078284A - パノースを含有するオリゴ糖の製造方法 - Google Patents

パノースを含有するオリゴ糖の製造方法

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JPH078284A
JPH078284A JP5182195A JP18219593A JPH078284A JP H078284 A JPH078284 A JP H078284A JP 5182195 A JP5182195 A JP 5182195A JP 18219593 A JP18219593 A JP 18219593A JP H078284 A JPH078284 A JP H078284A
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JP
Japan
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panose
maltose
culture
brettanomyces
producing
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JP5182195A
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English (en)
Inventor
Kiyotaka Nishida
清隆 西田
Toshiro Ochiai
敏郎 落合
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Nikken Chemicals Co Ltd
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Nikken Chemicals Co Ltd
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Abstract

(57)【要約】 【目的】 パノースを含有するオリゴ糖を発酵により製
造することを目的とする。 【構成】 炭素源としてマルトースを主成分として含有
する培地にブレタノミセス属に属するパノース生産能を
有する酵母、好ましくは、ブレタノミセスsp.SN−8
8菌株を接種し、好気的に培養して培地中にパノースを
生成蓄積せしめ、これを採取することよりなる、発酵に
よるパノースを含有するオリゴ糖の製造方法。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【産業上の利用分野】本発明はマルトースを原料とし
て、発酵法によりパノースを含有するオリゴ糖を安価に
製造する方法に関する。
【0002】
【従来の技術】パノースを含む分岐オリゴ糖は、ビフィ
ズス菌増強作用、結晶防止性、難老化性、保湿性などの
性質を有するほか、日本酒やみりんなどのコク味の重要
成分として注目され飲食物、医薬品等、広範囲に利用さ
れている。特にパノースは近年ストレプトコッカス・ミ
ュータンス(Streptococcus mutans)などの口腔内細菌
が生成する不溶性グルカンの原料基質にならないばかり
でなく、蔗糖からのこれらのグルカンが生成するのを阻
害し、更に虫歯の原因になる酸生成の基質にもならない
と言う、非う蝕性、抗う蝕性、非発酵性のオリゴ糖であ
ることがわかってきた。パノースは、水飴等に含まれる
天然物であることから従来より極めて安全なオリゴ糖の
1つと考えられてきたが、現在まで、大量生産を安価な
方法で行うことが困難であったため極めて高価な試薬と
して、各種アミラーゼの作用機構解明に利用されている
に過ぎない。
【0003】
【発明が解決しようとする問題点】従来、パノースを含
むオリゴ糖はアミロペクチン、グリコーゲンの部分水解
物より調製されることは広く知られていたが、そのパノ
ース含量は低く工業的生産を行うには不向きであった。
最近になり、バチルス・ステアロサーモフィルス(Baci
llus stearothermophilus)又は枯草菌(Bacillus subt
ilis)に由来するネオプルラナーゼを澱粉やプルランに
作用させパノースを含む澱粉糖や純度の高いパノースを
得る方法が報告されている。(特開平1ー171493号公報、
J.Ferment.Bioeng.vol73,No.3,198ー202.1992) しかし、これらの方法は高価なプルランを原料として用
いなくてはならないことや酵素の生産性が低いことなど
の理由で未だ工業的生産には至っていない。更に、前出
のネオプルラナーゼを澱粉等に作用させると、パノース
ではなく主としてイソパノース及び62−O−α−マル
トシルマルトースが得られる(特開平5-95768号公報)。
【0004】また、古くからカビの生産するトランスグ
ルコシダーゼ(Methods in Carbohydrate Chemistry Vo
l.1,p319〜324)を用いてマルトースからイソマルトー
スやパノースなどを調製する方法が知られており、これ
らを更に進めた研究がパノースについて特開昭63ー12269
6号公報に開示されている。同公報に開示されたトラン
スグルコシダーゼを用いたパノースの製造法は、原料と
して安価なマルトースや澱粉を用いることができ、工業
的生産に適した比較的良い方法ではあるが、生成したパ
ノースが減少しない様、反応の進行度合を厳密に制御し
なければならない点、酵素剤を別途用意しなければなら
ない点などに改良の余地が見られる。
【0005】
【問題点を解決するための手段】本発明者らは、上記の
ような従来法の欠点を改良するべく、種々研究した結
果、ブレタノミセスsp.SN−88菌株が炭素源として
マルトースが存在した場合、それを利用してパノースを
効率良く生成することを見い出し、更に研究を重ねて本
発明に到達した。即ち、本発明は従来法と異なり、酵素
剤の調製、反応条件の厳密な制御を必要としない発酵法
によるパノースを含有するオリゴ糖の製造方法に関す
る。
【0006】更に詳しくは、本発明は、炭素源としてマ
ルトースを主成分として含有する培地にブレタノミセス
属に属するパノース生産能を有する酵母を接種し、好気
的に培養して培地中にパノースを生成蓄積せしめ、これ
を採取することを特徴とする、発酵によるパノースを含
有するオリゴ糖の製造方法に関する。
【0007】以下、本発明を更に詳細に説明する。本発
明では、ブレタノミセス属に属するパノース生産能を有
する酵母の代表例として、ブレタノミセスsp.SN−8
8(Brettanomyces sp.SN-88)菌株(微工研菌寄第75
95号)を挙げることかできる。
【0008】本菌株の培養は、炭素源、窒素源、ビタミ
ン類、無機塩類等を含む液体培地を用いて好気的条件下
に攪拌培養により実施することが望ましい。当該液体培
地の炭素源としてはマルトース及びマルトースシラップ
等のマルトースを主成分として含有する糖質が使用され
るが、これらの糖質中のマルトース純度は50(W/
W)%以上のものが好ましく、特に発酵液に蓄積される
パノースの純度を考慮すると80(W/W)%以上のも
のを使用するのが好ましい。また、これらの糖質は、通
常、培地中に固形分換算で10〜60(W/V)%、好
ましくは30〜50(W/V)%の濃度となる範囲で添
加使用される。尚、以下の説明中で用いる%は、純度及
び固形分中の含有量等は重量(W/W)%を意味し、培
地中にしめるマルトース、酵母エキス等の含量(濃度)
は容量(W/V)%を意味する。
【0009】窒素源としては、使用する菌株に利用可能
な窒素化合物、例えば酵母エキス、トリプトン、麦芽エ
キス、カザミノ酸、コ−ンスチ−プリカ−、等が使用さ
れる。また硫酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、硝酸
アンモニウムなどのアンモニウム塩類や硝酸塩類なども
使用可能である。また、培地に加える無機塩類として
は、例えばリン酸、マグネシウム、カリウム、カルシウ
ム、鉄などの塩類が使用される。更に、必要に応じて酵
母の生育に必要な各種の有機物、無機物あるいは通常用
いられる消泡剤などを添加することができる。
【0010】培養は、前記組成の液体培地に本菌株を直
接接種するか、または別に前培養によって得られる種培
養液を接種して行われる。この種菌培養液の調製は、例
えば常法により斜面培養した菌をマルトース30%、酵
母エキス1%を含むpH4〜6の液体培地に1白金耳接
種して26〜36℃の温度で2〜5日間培養することに
より行なわれる。本発明の培養は、微生物が生育しうる
範囲内、通常24〜40℃、好ましくは28〜35℃の
培養温度で行われる。また、培地のpHは、3.5〜7.
0、特に4.0〜6.0の範囲が好ましい。培養期間は、
培養条件、使用する培地の種類及び炭素源である糖質の
濃度により異なるが、通常3〜6日間程度である。
【0011】本発明における培養は、培養液中のパノー
スの生成量が最高に達した時点で終了させることができ
るように、培養液中のパノース量を高速液体クロマトグ
ラフィ−、薄層クロマトグラフィー等の周知の方法によ
り測定しながら行なうことが望ましい。本発明では、パ
ノースの生成量が最高に達した時点で、通常、培養液中
の炭素源の約2〜3割が菌体に消費される。培養液中に
蓄積されたパノースを含むオリゴ糖は、培養終了後常法
によって培養液から精製される。即ち、斯かる場合に当
該分野において通常使用されている周知の手段、例えば
濾過、遠心分離、イオン交換又は吸着クロマトグラフィ
−、溶媒抽出などの操作が必要に応じて適宜組合せて用
いられる。一例を挙げれば、培養液から濾過、遠心分離
などによって菌体を除去し、次いでこの液を活性炭で処
理して着色物質などを除き、更にイオン交換樹脂により
脱イオンした後、液を濃縮してパノースを含有するオリ
ゴ糖のシロップとすることができる。また、本発明で
は、得られたシロップをゲル濾過、イオン交換樹脂カラ
ムクロマトグラフィー、カーボンカラムクロマトグラフ
ィー等で処理し、更にパノース含量の高い高純度のオリ
ゴ糖を得ることもできる。
【0012】次に、本発明を実施例により詳しく説明す
る。 実施例1 (a)種培養液の調製 グルコ−ス30(W/V)%、酵母エキス(ディフコ社
製)1.0(W/V)%、寒天1.5(W/V)%から成
る斜面培地にブレタノミセスsp.SN−88菌株(FERM
P-7595)の菌体を塗布し、30℃で2日間静置培養す
る。次に、マルトース30(W/V)%(純度95.5
(W/W)%、三和澱粉工業(株)「サンマルトS」、
以下同じ)、酵母エキス(ディフコ社製)1.0(W/
W)%を含む液体培地(pH5.5)50mlを入れた
500ml容量の三角フラスコを3本用意し、上記斜面
培養菌体を1白金耳宛植菌し、30℃で2日間振とう培
養して培養物を得る。 (b)本培養 マルトース40%(純度95.5%)、酵母エキス(メ
ルク社製)1.0%を含む液体培地(マルトースと酵母
エキスは予め別々に滅菌したものを使用)15リットル
を30リットル容量の発酵槽に入れ、上記(a)で調製
したブレタノミセスsp.SN−88菌株の種菌培養液1
50mlを加え、温度30℃、通気量0.5vvm、缶
内圧0.5Kg/cm2、回転速度180rpmで2日間
培養を行った。そのときの糖質の回収率は81%であっ
た。培養終了後、高速液体クロマトグラフィ−(HPL
C)で培養液中の糖組成を調べた。その結果を以下に示
す。
【0013】 培養液の糖組成 (固形分当りの含有量%) 分岐4糖 4.7 マルトトリオース 3.3 パノース 25.6 マルトース 40.9 イソマルトース 1.3 グルコース 17.3 その他 6.9
【0014】実施例2 マルトース30%(純度99.0%)、コ−ンスチ−プ
リカ−2.0%を含む液体培地50mlを500ml容
量の三角フラスコ入れ、120℃、15分間オートクレ
ーブ滅菌する。実施例1(a)で調製したブレタノミセ
スsp.SN−88(FERM P-7595)の種培養液100μ
lを植菌し、30℃、220rpmで2日間培養を行な
った。培養終了後高速液体クロマトグラフィー(HPL
C)にて培養液の糖組成をしらべた。その結果を以下に
示す。
【0015】 培養液の糖組成 (固形分当りの含有量%) 分岐4糖 2.6 マルトトリオース 4.0 パノース 22.1 マルトース 51.1 グルコース 16.1 その他 4.1
【0016】実施例3 マルトース30%(純度99.0%)、酵母エキス(デ
ィフコ社製)1.0%を含む液体培地50mlを500
ml容量の三角フラスコ入れ、120℃、15分間オー
トクレーブ滅菌する。実施例1(a)で調製したブレタ
ノミセスsp.SN−88(FERM P-7595)の種培養液1
00μlを植菌し、30℃、220rpmで2日間培養
を行なった。培養終了後高速液体クロマトグラフィー
(HPLC)にて培養液の糖組成をしらべた。その結果
を以下に示す。
【0017】 培養液の糖組成 (固形分当りの含有量%) 分岐4糖 3.0 マルトトリオース 4.7 パノース 23.0 マルトース 51.8 グルコース 11.1 その他 6.4
【0018】
【発明の効果】本発明によれば、培地の炭素源として比
較的安価なマルトースを使用し、高濃度の培地にブレタ
ノミセス属に属するパノース生産能を有する酵母を接種
し、発酵によりパノースを含有するオリゴ糖を効率よく
安価に製造することができる。よって、本発明は、パノ
ースを含有するオリゴ糖を工業的に製造する上で極めて
有益な方法である。

Claims (2)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】炭素源としてマルトースを主成分として含
    有する培地にブレタノミセス属に属するパノース生産能
    を有する酵母を接種し、好気的に培養して培地中にパノ
    ースを生成蓄積せしめ、これを採取することを特徴とす
    る、発酵によるパノースを含有するオリゴ糖の製造方
    法。
  2. 【請求項2】ブレタノミセス属に属する酵母がブレタノ
    ミセスsp.SN−88菌株である請求項1記載のパノー
    スを含有するオリゴ糖の製造方法。
JP5182195A 1993-06-29 1993-06-29 パノースを含有するオリゴ糖の製造方法 Pending JPH078284A (ja)

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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6199689B1 (en) 1998-06-29 2001-03-13 Sony Corporation Cartridge holder
WO2006118385A1 (en) * 2005-05-04 2006-11-09 Kook Je Precision Industrial Co., Ltd. Steel reinforcing coupler

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Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6199689B1 (en) 1998-06-29 2001-03-13 Sony Corporation Cartridge holder
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