JPH0768135B2 - ボツリヌス毒素の中和剤 - Google Patents
ボツリヌス毒素の中和剤Info
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- JPH0768135B2 JPH0768135B2 JP61064232A JP6423286A JPH0768135B2 JP H0768135 B2 JPH0768135 B2 JP H0768135B2 JP 61064232 A JP61064232 A JP 61064232A JP 6423286 A JP6423286 A JP 6423286A JP H0768135 B2 JPH0768135 B2 JP H0768135B2
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- JP
- Japan
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- botulinum toxin
- toxin
- neutralizing agent
- fat globule
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
- C07H15/10—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical containing unsaturated carbon-to-carbon bonds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/20—Milk; Whey; Colostrum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/02—Antidotes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Description
【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、ボツリヌス中毒症の予防および治療に有効
な、ボツリヌス毒素中和剤に関するものである。
な、ボツリヌス毒素中和剤に関するものである。
従来の技術 ボツリヌス毒素はボツリヌス菌が菌体外に産生する蛋白
質性末梢神経毒素であるが、分子サイズ等の相違する複
数種類のものが知られており、その中の主としてＡ型、
Ｂ型およびＥ型のものが、経口的に人体内に摂取される
といわゆるボツリヌス中毒を起こす。この中毒症は、特
有の麻痺症状を伴うものであって、ボツリヌス毒素が消
化管内で吸収されたのち副交感神経支配の神経筋接合部
に作用し、神経終末からのアセチルコリンの遊離を阻害
するために起こることが確認されている。そしてこの場
合のボツリヌス毒素の作用機構については、神経膜に存
在するガングリオシドGT1bが該毒素のレセプターになる
と考える説が最も有力である。ガングリオシドGQ1b、同
GD1b等もボツリヌス毒素との結合能を持つが、それらの
結合能はガングリオシドGT1bのそれに比べて弱いので、
ボツリヌス毒素の作用との関係は少ないと考えられてい
る。
質性末梢神経毒素であるが、分子サイズ等の相違する複
数種類のものが知られており、その中の主としてＡ型、
Ｂ型およびＥ型のものが、経口的に人体内に摂取される
といわゆるボツリヌス中毒を起こす。この中毒症は、特
有の麻痺症状を伴うものであって、ボツリヌス毒素が消
化管内で吸収されたのち副交感神経支配の神経筋接合部
に作用し、神経終末からのアセチルコリンの遊離を阻害
するために起こることが確認されている。そしてこの場
合のボツリヌス毒素の作用機構については、神経膜に存
在するガングリオシドGT1bが該毒素のレセプターになる
と考える説が最も有力である。ガングリオシドGQ1b、同
GD1b等もボツリヌス毒素との結合能を持つが、それらの
結合能はガングリオシドGT1bのそれに比べて弱いので、
ボツリヌス毒素の作用との関係は少ないと考えられてい
る。
ボツリヌス中毒の治療はきわめて困難であって、現状で
は、発症した場合は対症療法しかないといってよい。上
述のようなボツリヌス毒素の作用機構に鑑み、ガングリ
オシドGT1bをレセプター拮抗物質として経口投与し、こ
れをボツリヌス毒素と結合させることにより毒性発揮を
阻止する方法も考えられるが、使用可能なガングリオシ
ドGT1bとしては牛脳由来のものしかなく著しく高価であ
るため、上記中毒症防止法が実際に行われることはほと
んどなかった。
は、発症した場合は対症療法しかないといってよい。上
述のようなボツリヌス毒素の作用機構に鑑み、ガングリ
オシドGT1bをレセプター拮抗物質として経口投与し、こ
れをボツリヌス毒素と結合させることにより毒性発揮を
阻止する方法も考えられるが、使用可能なガングリオシ
ドGT1bとしては牛脳由来のものしかなく著しく高価であ
るため、上記中毒症防止法が実際に行われることはほと
んどなかった。
発明が解決しようとする問題点 本発明の目的は、上述のような現状に鑑み、上記拮抗法
に用いることのできる安価なボツリヌス毒素中和剤を提
供し、ボツリヌス毒素による中毒症の予防と治療を容易
にすることにある。
に用いることのできる安価なボツリヌス毒素中和剤を提
供し、ボツリヌス毒素による中毒症の予防と治療を容易
にすることにある。
問題点を解決するための手段 本発明者らは、獣乳から採取した脂肪球皮膜について研
究中、該脂肪球皮膜を構成する酸性糖脂質が強力なボツ
リヌス毒素中和能を有することを見いだした。
究中、該脂肪球皮膜を構成する酸性糖脂質が強力なボツ
リヌス毒素中和能を有することを見いだした。
本発明は上記の知見に基づいて完成されたものであっ
て、獣乳の脂肪球皮膜より分離された酸性糖脂質からな
るボツリヌス毒素中和剤を提供するものである。
て、獣乳の脂肪球皮膜より分離された酸性糖脂質からな
るボツリヌス毒素中和剤を提供するものである。
獣乳の脂肪球皮膜は、獣乳中の脂肪球を覆っている皮膜
であって、牛乳の場合、脂肪球直径は１〜10μ、皮膜厚
さは約10nmである。この皮膜は、獣乳の脂肪が乳線で分
泌されると同時に形成され、その組成は乳線細胞の原形
質膜と似ている。脂肪球皮膜を主要成分は、リン脂質、
酵素、蛋白質、糖蛋白質、トリグリセライド、コレステ
ロールなどであるが、蛋白質と脂質だけで90％以上を占
め、そのうちの約55％が脂質であり、約45％が蛋白質で
ある。脂質からは現在までのところ６種類のガングリオ
シドが確認されており、総量で、蛋白質1mg当り約6nmol
（但しシアル酸換算値）が含まれている。最も多量に存
在するのはガングリオシドGD3であり、他に同GM2、GM3
なども見いだされるが、前述のようにボツリヌス毒素の
レセプターとなることが知られているガングリオシドGT
1bは検出されない。
であって、牛乳の場合、脂肪球直径は１〜10μ、皮膜厚
さは約10nmである。この皮膜は、獣乳の脂肪が乳線で分
泌されると同時に形成され、その組成は乳線細胞の原形
質膜と似ている。脂肪球皮膜を主要成分は、リン脂質、
酵素、蛋白質、糖蛋白質、トリグリセライド、コレステ
ロールなどであるが、蛋白質と脂質だけで90％以上を占
め、そのうちの約55％が脂質であり、約45％が蛋白質で
ある。脂質からは現在までのところ６種類のガングリオ
シドが確認されており、総量で、蛋白質1mg当り約6nmol
（但しシアル酸換算値）が含まれている。最も多量に存
在するのはガングリオシドGD3であり、他に同GM2、GM3
なども見いだされるが、前述のようにボツリヌス毒素の
レセプターとなることが知られているガングリオシドGT
1bは検出されない。
次に本発明によるボツリヌス毒素中和剤の製造法につい
て詳述する。
て詳述する。
脂肪球皮膜は、常法によるバター製造工程において、獣
乳を遠心分離して得られるクリームをチャーンで処理
し、生じたバター粒を分離した後に残るいわゆるバター
ミルク中に濃縮されているから、本発明のボツリヌス毒
素中和剤の原料としてもこの獣乳画分を利用するのが最
も有利であるが、これに限られるものではなく、たとえ
ばクリームに水を混合したのち遠心分離することにより
洗浄する処理をあらかじめ施してからチャーニングして
得られるバターミルク相当物を用いてもよい。
乳を遠心分離して得られるクリームをチャーンで処理
し、生じたバター粒を分離した後に残るいわゆるバター
ミルク中に濃縮されているから、本発明のボツリヌス毒
素中和剤の原料としてもこの獣乳画分を利用するのが最
も有利であるが、これに限られるものではなく、たとえ
ばクリームに水を混合したのち遠心分離することにより
洗浄する処理をあらかじめ施してからチャーニングして
得られるバターミルク相当物を用いてもよい。
バターミルクまたはこれと同様の組成を持つ獣乳画分
は、そのままでは乳蛋白、乳糖等の乳成分が多くて酸性
糖脂質抽出原料として利用するのに適当ではないから、
通常はこれを透析、硫安分画、ゲル濾過、等電点沈殿な
どの方法により精製することが望ましい。また脂肪球皮
膜は多くの酵素を含むので、加熱処理してこれを失活さ
せることが必要である。そのための熱処理条件として
は、たとえば62℃で30分間以上の加熱、または100℃以
上の高温で短時間の熱処理を行ういわゆるUHT滅菌処理
に相当する加熱が適当である。
は、そのままでは乳蛋白、乳糖等の乳成分が多くて酸性
糖脂質抽出原料として利用するのに適当ではないから、
通常はこれを透析、硫安分画、ゲル濾過、等電点沈殿な
どの方法により精製することが望ましい。また脂肪球皮
膜は多くの酵素を含むので、加熱処理してこれを失活さ
せることが必要である。そのための熱処理条件として
は、たとえば62℃で30分間以上の加熱、または100℃以
上の高温で短時間の熱処理を行ういわゆるUHT滅菌処理
に相当する加熱が適当である。
以上の処理を経て得られる脂肪球皮膜は、脂肪球を包囲
していたときとあまり変らない大きさを持つ部分もある
ため、水に分散させても一部が沈殿し易い。したがっ
て、通常はこれに超音波処理等を施して微細な皮膜断片
とし、安定な水中懸濁液を形成し得るようにすることが
望ましい。
していたときとあまり変らない大きさを持つ部分もある
ため、水に分散させても一部が沈殿し易い。したがっ
て、通常はこれに超音波処理等を施して微細な皮膜断片
とし、安定な水中懸濁液を形成し得るようにすることが
望ましい。
すべての処理を終わった脂肪球皮膜は、凍結乾燥して保
存することができる。
存することができる。
本発明の中和剤は、上述のようにして得られる脂肪球皮
膜から任意の方法により酸性糖脂質を抽出し精製するこ
とにより製造することができる。製法の一例を示すと、
クロロホルム−メタノール混液等を抽出溶剤として脂肪
球皮膜より脂質を抽出し、この脂質からゲルろ過法によ
り酸性等脂質をとり出す。得られた酸性糖脂質画分は、
前述したとおりの、種々のガングリオシドの混合物であ
る。本発明の中和剤としてこれらのガングリオシドのす
べてが必須成分なのか一部のガングリオシドのみが有効
なのかは未だ確認されていない。したがって、上述のよ
うにして得られた酸性等脂質を更に分画して用いる場合
は、ボツリヌス毒素中和能の大小に着目した分画を行
う。単なる脱塩のための精製には、透析あるいはイオン
交換樹脂処理が有効である。
膜から任意の方法により酸性糖脂質を抽出し精製するこ
とにより製造することができる。製法の一例を示すと、
クロロホルム−メタノール混液等を抽出溶剤として脂肪
球皮膜より脂質を抽出し、この脂質からゲルろ過法によ
り酸性等脂質をとり出す。得られた酸性糖脂質画分は、
前述したとおりの、種々のガングリオシドの混合物であ
る。本発明の中和剤としてこれらのガングリオシドのす
べてが必須成分なのか一部のガングリオシドのみが有効
なのかは未だ確認されていない。したがって、上述のよ
うにして得られた酸性等脂質を更に分画して用いる場合
は、ボツリヌス毒素中和能の大小に着目した分画を行
う。単なる脱塩のための精製には、透析あるいはイオン
交換樹脂処理が有効である。
本発明によるボツリヌス毒素中和剤の毒素中和能は、原
料の獣乳の種類等によって異なり、一様ではない。した
がって本発明の中和剤の標準的な使用量を一律に示すこ
とはできず、多くの場合、後記実施例で示したような試
験法により個々の中和剤について毒素中和能を確認し、
それに使用条件等を勘案して好適使用量を知ることが望
ましい。しかしながら、ボツリヌス中毒症の治療または
予防の目的で内服する場合についておおよその服用量を
示すと、約２〜500μｇ（いずれも成人１日当りの量）
である。獣乳の脂肪球皮膜より分離された酸性糖脂質は
水溶性であり、且つ水溶液中での安定性もよいので、生
理食塩水に溶解して注射剤とするほか、任意の方法によ
り散剤、錠剤等にすることができ、製剤化は容易であ
る。
料の獣乳の種類等によって異なり、一様ではない。した
がって本発明の中和剤の標準的な使用量を一律に示すこ
とはできず、多くの場合、後記実施例で示したような試
験法により個々の中和剤について毒素中和能を確認し、
それに使用条件等を勘案して好適使用量を知ることが望
ましい。しかしながら、ボツリヌス中毒症の治療または
予防の目的で内服する場合についておおよその服用量を
示すと、約２〜500μｇ（いずれも成人１日当りの量）
である。獣乳の脂肪球皮膜より分離された酸性糖脂質は
水溶性であり、且つ水溶液中での安定性もよいので、生
理食塩水に溶解して注射剤とするほか、任意の方法によ
り散剤、錠剤等にすることができ、製剤化は容易であ
る。
本発明の中和剤は、経口的に使用するほか、消化管洗浄
液や食品に添加して使用することもできる。また、抗ボ
ツリヌス毒素血清と併用して血中に投与することもでき
る。
液や食品に添加して使用することもできる。また、抗ボ
ツリヌス毒素血清と併用して血中に投与することもでき
る。
作 用 本発明によるボツリヌス毒素中和剤の毒素中和作用は次
のように考えられている。すなわち、生体内に投与され
た場合は中和剤中のいくつかのガングリオシドがボツリ
ヌス毒素と遭遇したときレセプターとなって該毒素と結
合する。その結果、その毒素は生体の作用部位に結合す
ることなく排せつされる。食品に添加された場合はその
食品中で、ボツリヌス菌が毒素を産生したとき該毒素と
結合してこれを中和する。
のように考えられている。すなわち、生体内に投与され
た場合は中和剤中のいくつかのガングリオシドがボツリ
ヌス毒素と遭遇したときレセプターとなって該毒素と結
合する。その結果、その毒素は生体の作用部位に結合す
ることなく排せつされる。食品に添加された場合はその
食品中で、ボツリヌス菌が毒素を産生したとき該毒素と
結合してこれを中和する。
発明の効果 本発明の毒素中和剤は、バター製造工場において大量に
生成する安価なバターミルクを濃縮済み原料として有利
に利用し、これに簡単な抽出・精製処理を加えるだけで
製造できるので、従来の牛脳由来のガングリオシド製剤
に比べて大量生産が容易できわめて安価である。しかも
本発明による毒素中和剤は獣乳を原料として化学的処理
を施すことなしに分離処理のみによって作られるもので
あるから、安全性の点では全く問題がない。
生成する安価なバターミルクを濃縮済み原料として有利
に利用し、これに簡単な抽出・精製処理を加えるだけで
製造できるので、従来の牛脳由来のガングリオシド製剤
に比べて大量生産が容易できわめて安価である。しかも
本発明による毒素中和剤は獣乳を原料として化学的処理
を施すことなしに分離処理のみによって作られるもので
あるから、安全性の点では全く問題がない。
したがって本発明によれば、従来対症療法しかなかった
ボツリヌス毒素中毒症の実際的な治療の途がひらけると
ともに、本発明の毒素中和剤を食品等に添加するなどの
方法により該中毒症の予防を行うことも可能になる。
ボツリヌス毒素中毒症の実際的な治療の途がひらけると
ともに、本発明の毒素中和剤を食品等に添加するなどの
方法により該中毒症の予防を行うことも可能になる。
実施例 以下、実施例を示して本発明を説明する。
実施例 １ 脂肪分3.3％の牛乳１を3000rpmで５分間遠心分離して
クリームを得、これに水を加えて全量を440mlにし遠心
分離することにより洗浄した。同様の洗浄処理を更に３
回くり返したのち、洗浄ずみクリームを４℃で一夜保存
し、次いでチャーンで処理してバターミルクとバター粒
とに分離した。得られたバターミルクに硫安を加えて50
％飽和とした後、一夜保存し、3000rpmで30分間、遠心
分離を行なった。この後、浮上している脂肪球皮膜をと
って水に懸濁させ、蒸留水に対して４℃で透析後、10,0
00rpmで30分間遠心分離を行なった。沈殿した脂肪球皮
膜をとって凍結乾燥することにより、乾燥脂肪球皮膜65
0mgを得た。
クリームを得、これに水を加えて全量を440mlにし遠心
分離することにより洗浄した。同様の洗浄処理を更に３
回くり返したのち、洗浄ずみクリームを４℃で一夜保存
し、次いでチャーンで処理してバターミルクとバター粒
とに分離した。得られたバターミルクに硫安を加えて50
％飽和とした後、一夜保存し、3000rpmで30分間、遠心
分離を行なった。この後、浮上している脂肪球皮膜をと
って水に懸濁させ、蒸留水に対して４℃で透析後、10,0
00rpmで30分間遠心分離を行なった。沈殿した脂肪球皮
膜をとって凍結乾燥することにより、乾燥脂肪球皮膜65
0mgを得た。
次いでこれを水に懸濁させ、超音波処理を行なって皮膜
を破砕し、更に100℃で30分間加熱して酵素を失活させ
たものについて、下記の方法によりボツリヌス毒素中和
能を試験した。
を破砕し、更に100℃で30分間加熱して酵素を失活させ
たものについて、下記の方法によりボツリヌス毒素中和
能を試験した。
試験法：トリス−塩酸緩衝液（0.01M,pH7.2）1.5mlに試
料を溶解し、精製ボツリヌスＡ型毒素２μｇを加えて37
℃で30分間反応させた後、マウスを用いるtime to deat
h法（J.Bacteriology,Vol.92,No.5,1580）の常法により
残存毒素量を測定する。
料を溶解し、精製ボツリヌスＡ型毒素２μｇを加えて37
℃で30分間反応させた後、マウスを用いるtime to deat
h法（J.Bacteriology,Vol.92,No.5,1580）の常法により
残存毒素量を測定する。
この場合、残存毒素量を0.9％以下にするのに必要な試
料の量は30mgであった。
料の量は30mgであった。
次に、上記と同じ方法で得られた乾燥脂肪球皮膜1.0gか
ら20mlのクロロホルム／メタノール（2:1,v/v）及び10m
lのクロロホルム／メタノール（1:1,v/v）を用いて総脂
質を抽出した。得られた脂質は、セファデックスＡ−25
（アセテート型）カラムにより中性脂質と酸性糖脂質と
に分画した。次いで後者を弱アルカリで中和し、透析お
よびイオン交換樹脂処理により脱塩してから凍結乾燥す
ることにより、酸性糖脂質からなる本発明の中和剤0.8m
gを得た。
ら20mlのクロロホルム／メタノール（2:1,v/v）及び10m
lのクロロホルム／メタノール（1:1,v/v）を用いて総脂
質を抽出した。得られた脂質は、セファデックスＡ−25
（アセテート型）カラムにより中性脂質と酸性糖脂質と
に分画した。次いで後者を弱アルカリで中和し、透析お
よびイオン交換樹脂処理により脱塩してから凍結乾燥す
ることにより、酸性糖脂質からなる本発明の中和剤0.8m
gを得た。
上記中和剤4.7μｇを実施例１の場合と同様にして精製
Ａ型ボツリヌス毒素と反応させ、残存毒素量を測定した
ところ、0.9％以下であった。
Ａ型ボツリヌス毒素と反応させ、残存毒素量を測定した
ところ、0.9％以下であった。
比較のため、市販のガングリオシド混合物（Sigma,Type
II;GM1 20％,GD1a 40％,GD1b 20％,GT1b 20％）50μｇ
を用いて同様の試験を行なったところ、残存毒素量は9.
0％であった。
II;GM1 20％,GD1a 40％,GD1b 20％,GT1b 20％）50μｇ
を用いて同様の試験を行なったところ、残存毒素量は9.
0％であった。
実施例 ２ 脂肪分4.25％の山羊乳１を3000rpmで遠心分離し、得
られたクリームに水を加えて全量を570mlとし、再度遠
心分離することにより、クリーム中の脂肪球を洗浄し
た。この洗浄操作を更に３回くり返した後、４℃で一夜
保存し、次いでチャーンで処理して、バターミルクとバ
ター粒とに分離した。次いでバターミルクを、100℃で1
0分間加熱したのち、蒸留水に対して４℃で透析した。
得られた透析内容物を凍結乾燥することにより、乾燥脂
肪球皮膜760mgを得た。
られたクリームに水を加えて全量を570mlとし、再度遠
心分離することにより、クリーム中の脂肪球を洗浄し
た。この洗浄操作を更に３回くり返した後、４℃で一夜
保存し、次いでチャーンで処理して、バターミルクとバ
ター粒とに分離した。次いでバターミルクを、100℃で1
0分間加熱したのち、蒸留水に対して４℃で透析した。
得られた透析内容物を凍結乾燥することにより、乾燥脂
肪球皮膜760mgを得た。
上記乾燥脂肪球皮膜から、実施例１と同様の方法によ
り、酸性糖脂質からなる本発明の中和剤302μｇを得
た。
り、酸性糖脂質からなる本発明の中和剤302μｇを得
た。
この中和剤4.5μｇによるボツリヌスＡ型毒素２μｇの
中和剤を実施例１の場合と同様にして測定したところ、
残存毒素量は36％であった。
中和剤を実施例１の場合と同様にして測定したところ、
残存毒素量は36％であった。
実施例 ３ 実施例１で製造した本発明の中和剤および市販のバター
ミルクから製造した本発明の中和剤について、Ｂ型およ
びＥ型のボツリヌス毒素の中和能を確認した。なおバタ
ーミルクからの中和剤の製造法および試験法は次にとお
りである。製法:20mlのクロロホルム／メタノール（2:
1,v/v）および10mlのクロロホルム／メタノール（1:1,v
/v）を用いて、市販のバターミルク（雪印乳業株式会
社）1.0gから総脂質を抽出した。得られた脂質は、セフ
ァデックスＡ−25（アセテート型）カラムにより中性脂
質と酸性糖脂質とに分画した。次いで後者を弱アルカリ
で中和し、透析およびイオン交換樹脂処理により脱塩し
てから凍結乾燥することにより、酸性等脂質からなる本
発明の中和剤0.2mgを得た。
ミルクから製造した本発明の中和剤について、Ｂ型およ
びＥ型のボツリヌス毒素の中和能を確認した。なおバタ
ーミルクからの中和剤の製造法および試験法は次にとお
りである。製法:20mlのクロロホルム／メタノール（2:
1,v/v）および10mlのクロロホルム／メタノール（1:1,v
/v）を用いて、市販のバターミルク（雪印乳業株式会
社）1.0gから総脂質を抽出した。得られた脂質は、セフ
ァデックスＡ−25（アセテート型）カラムにより中性脂
質と酸性糖脂質とに分画した。次いで後者を弱アルカリ
で中和し、透析およびイオン交換樹脂処理により脱塩し
てから凍結乾燥することにより、酸性等脂質からなる本
発明の中和剤0.2mgを得た。
試験法：精製ボツリヌス毒素（Ｂ型またはＥ型）２μｇ
および中和剤（１μｇまたは10μｇ）をトリス−塩酸緩
衝液（0.01M,pH7.2）0.5mlに溶解し、37℃で30分間反応
させたのち、残存毒素量を実施例１の場合と同様にして
測定した。
および中和剤（１μｇまたは10μｇ）をトリス−塩酸緩
衝液（0.01M,pH7.2）0.5mlに溶解し、37℃で30分間反応
させたのち、残存毒素量を実施例１の場合と同様にして
測定した。
上記試験の結果を表１に示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 桜井 稔三 東京都港区東新橋１−１−19 株式会社ヤ クルト本社内 (72)発明者 馬田 三夫 東京都港区東新橋１−１−19 株式会社ヤ クルト本社内 (72)発明者 務台 方彦 東京都港区東新橋１−１−19 株式会社ヤ クルト本社内 (56)参考文献 特公 平３−31181（ＪＰ，Ｂ２)
Claims (1)
- 【請求項１】獣乳の脂肪球皮膜より分離された酸性糖脂
質よりなるボツリヌス毒素中和剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
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