JPH0750058B2 - Enzyme-immobilized electrode and a method of manufacturing the same - Google Patents

Enzyme-immobilized electrode and a method of manufacturing the same

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JPH0750058B2 JP1164797A JP16479789A JPH0750058B2 JP H0750058 B2 JPH0750058 B2 JP H0750058B2 JP 1164797 A JP1164797 A JP 1164797A JP 16479789 A JP16479789 A JP 16479789A JP H0750058 B2 JPH0750058 B2 JP H0750058B2
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【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 この発明は、グルコース等の基質検出用の電極などとして用いられる酵素固定化電極(「酵素電極」とも言う) BACKGROUND OF THE INVENTION [Field of the Industrial] This invention (also referred to as "enzyme electrode") substrate for detection of the electrode such as an enzyme-immobilized electrode used as a glucose etc.
およびその製造方法に関する。 And a method of manufacturing the same.

〔従来の技術〕 [Prior art]

酵素を白金等の電極本体(または電極素材。以下同様) The electrode body, such as platinum, the enzyme (or electrode material. Hereinafter the same)
表面上に固定化した酵素固定化電極として、ゼラチンおよび架橋剤としてのグルタルアルデヒドを含む希薄な酵素溶液を白金電極に塗布し、電極本体表面上で製膜を行うとともに、酵素を共有結合的に固定化して電極本体表面上に酵素固定化膜を形成したものがある。 As an enzyme-immobilized electrode was immobilized on the surface, a dilute enzyme solution containing glutaraldehyde as gelatin and crosslinking agent was applied to a platinum electrode, performs film on the electrode surface of the body, enzyme covalently immobilized on the electrode body on the surface is obtained by forming an enzyme immobilized membrane. ここで、ゼラチンは、酵素固定化膜のマトリックス成分となるものであって、希薄な酵素溶液と架橋剤としてのグルタルアルデヒドだけでは架橋反応により得られる酵素固定化膜の強度が弱いので、膜強度を高めるために使用される。 Here, gelatin, be comprised a matrix component of the enzyme immobilized membrane, since only glutaraldehyde as the crosslinking agent and dilute enzyme solution is weak strength of the enzyme immobilized membrane obtained by cross-linking reaction, the film strength It is used to enhance.
たとえば、グルコースオキシダーゼの固定化膜では、酵素に対して5〜10倍程度のゼラチンを加えてグルタルアルデヒドで架橋させて製膜するようにしている。 For example, the immobilized membrane glucose oxidase, so that form a film by crosslinking with glutaraldehyde by the addition of 5 to 10 times the gelatin to enzymatic.

このような酵素固定化電極を用いるに際しては、試料溶液中における被測定物質以外の多種多様の成分の妨害から酵素固定化電極を保護する必要がある。 Such upon an enzyme-immobilized electrode, it is necessary to protect the enzyme-immobilized electrode from interfering with a wide variety of components other than the substance to be measured in the sample solution. そのため、電極本体表面と酵素固定化膜の間などに妨害物質を除去する妨害物質除去膜(以下「妨害除去膜」と言う)を形成した妨害不感型酵素固定化電極が提案されている。 Therefore, the electrode body surface and an enzyme-immobilized membrane, such as a interfering substance removing interfering substance removing layer (hereinafter "interference rejection membrane" say) was formed interference insensitive enzyme-immobilized electrode between is proposed.

たとえば、特開昭62−88953号公報では、電極本体表面にグルコースオキシダーゼの固定化膜を設けたものを、 For example, in JP-A-62-88953, those having a fixed film of glucose oxidase on the electrode surface of the body,
ピロールおよびNaClを含む電解重合液中に浸して電解重合処理を行い、前記固定化膜の上に電解重合膜を備えた酵素固定化電極が記載されている。 Immersed in the electrolytic polymerization solution containing pyrrole and NaCl perform electrolytic polymerization process, the enzyme-immobilized electrode comprising an electrolytic polymerization film on the immobilization film is described. 同電解重合膜が妨害除去膜である。 The electrolytic polymerization film is a disturbance removal membrane. また、特開昭63−304150号公報では、電極本体表面に内側膜、中間膜および外側膜をこの順に設けた酵素固定化電極が記載されている。 Further, in JP-A-63-304150, the inner membrane to the electrode body surface, the enzyme-immobilized electrode in which a middle layer and an outer film in this order is described. 中間膜は、グルコースオキシダーゼの固定膜である。 Intermediate layer is a fixed layer of glucose oxidase. 外側膜は、ポリカーボネートフィルムであり、未希釈の血液または血清中のグルコース分子に比べて高分子物質の除去を行う。 Outer membrane is a polycarbonate film, to remove the polymeric material compared to the glucose molecules in the blood or serum of undiluted. 内側膜は、酢酸セルロースからなる膜であり、ポリカーボネートフィルムで除去されなかった妨害物質(たとえば、アスコルビン酸および尿酸)を除去する。 Inner membrane is a membrane made of cellulose acetate, interfering substances which were not removed in the polycarbonate film (e.g., ascorbic acid and uric acid) to remove.

〔発明が解決しようとする課題〕 [Problems that the Invention is to Solve]

電極本体表面上で製膜された妨害除去膜を備えた妨害不感型酵素固定化電極では、妨害除去膜が乾燥に弱いため、湿度の変化により膜の収縮が生じ、水溶液中での測定および乾燥を繰り返せば、電極本体表面から妨害除去膜および酵素固定化膜が剥離し、検出感度が低下するなどして使用できなくなるという欠点がある。 The interference insensitive enzyme-immobilized electrode with a film has been interference rejection membrane on the electrode surface of the body, because the interference rejection membrane is weak in drying shrinkage of the membrane caused by a change in humidity, measurement and drying in an aqueous solution by repeating, and peeling interference rejection membrane and the enzyme immobilized membrane from the electrode body surface, there is a disadvantage that the detection sensitivity can not be used by, for example, decreases.

また、第3図(a)にみるように、酵素を固定化していない妨害除去膜5は、湿度が低すぎると、電極本体1より剥離するため、酵素の固定化作業をたとえば湿度80%以上の調湿器内で行わなければならない。 Moreover, as seen in FIG. 3 (a), the interference rejection membrane 5 that is not immobilized enzyme, the humidity is too low, in order to peel the electrode body 1, an immobilized work of an enzyme e.g. humidity of 80% or more It must be carried out in the humidity vessel of.

この発明は、このような事情に鑑みてなされたものであって、電極本体からの妨害除去膜の剥離が生じにくく、 The present invention was made in view of such circumstances, separation of the interference-removing membrane from the electrode body is less likely to occur,
出力感度の初期変動の小さい酵素固定化電極を提供することを第1の課題とする。 To provide a small enzyme-immobilized electrode of the initial fluctuation of the output sensitivity and the first challenge. さらに、この発明は、妨害除去膜の上に酵素固定化膜を形成する場合に、雰囲気の調湿を行わなくてもよい酵素固定化電極の製造方法を提供することを第2の課題とする。 Furthermore, the present invention, when forming an enzyme-immobilized film on the interference removal membrane, a second object to provide a method for producing a good enzyme immobilization electrode even without moisture conditioning atmosphere .

〔課題を解決するための手段〕 [Means for Solving the Problems]

発明者らは、妨害除去膜の電極本体からの剥離を防いだり、雰囲気の調湿を行わずに妨害除去膜の上に酵素固定化膜を形成したりするための手段を検討した。 We examined a means for or to form an enzyme-immobilized film on the interference-removing membrane Guests prevent peeling from the electrode body of interference-removing membrane, without moisture conditioning atmosphere. その結果、妨害除去膜自体に保湿性を持たせればよいことを見出し、この発明を完成させた。 As a result, we found that it is sufficient to have the moisture in the interference-removing membrane itself, thereby completing the present invention.

したがって、上記第1の課題を解決するために、この発明にかかる酵素固定化電極は、導電性材料からなる電極本体に酵素固定化膜および妨害除去膜が設けられているものにおいて、前記妨害除去膜がコラーゲンを含んでいることを特徴とする。 Therefore, in order to solve the above first problem, the enzyme-immobilized electrode according to the present invention, in which the enzyme immobilized membrane and interference removal membrane is provided in the electrode body made of a conductive material, wherein the interference removal film is characterized in that it contains collagen.

上記第2の課題を解決するために、この発明にかかる酵素固定化電極の製造方法は、導電性材料からなる電極本体表面上に形成された妨害除去膜の上に酵素固定化膜を形成するにあたり、前記妨害除去膜にコラーゲンを含めておくことを特徴とする。 To solve the second object, a manufacturing method of enzyme immobilization electrode according to the invention form an enzyme-immobilized film on the interference removal layer formed on an electrode surface of the body made of a conductive material per in, characterized in that you include collagen to the interference-removing membrane.

この発明の酵素固定化電極は、電極本体表面上に少なくとも妨害除去膜および酵素固定化膜を備えている。 Enzyme-immobilized electrode of the invention comprises at least interference rejection membrane and the enzyme-immobilized membrane on the electrode surface of the body. 好ましくは、電極本体表面上に下地膜、妨害除去膜および酵素固定化膜の3層を少なくとも備えている。 Preferably, the base film on the electrode surface of the body comprises at least three layers of the interference-removing membrane and the enzyme immobilized membrane.

ここで、下地膜は、妨害除去膜の電極本体への密着性を良くするために必要に応じて用いられる。 Here, the base film is used as necessary in order to improve the adhesion to the electrode body of interference-removing membrane. 下地膜は、たとえば、ゼラチン水溶液などの生体高分子水溶液に架橋剤を添加したものを電極本体表面に塗布し、架橋反応を行って形成された膜である。 Base film, for example, a material obtained by adding a crosslinking agent to the biopolymer aqueous solution such as an aqueous gelatin solution was coated on the electrode surface of the main body, a film formed by performing a crosslinking reaction. 下地膜のマトリックス成分はゼラチンに限定されない。 Matrix component of the base film is not limited to gelatin. 架橋剤としては、たとえばグルタルアルデヒド等のジアルデヒドが用いられる。 The crosslinking agent, for example dialdehydes such as glutaraldehyde is used.

妨害除去膜は、マトリックス成分の少なくとも一部が保湿剤であり、たとえば、アルブミン等のタンパク、ポリアリルアミン等の水溶性高分子、保湿剤および架橋剤を含む溶液を電極本体または前記下地膜または酵素固定化膜上に所定量を塗布し、架橋反応を行わせて、電極表面上で製膜を行う。 Interference removal membrane is at least partially humectant matrix components, for example, proteins such as albumin, water-soluble polymer, humectants and solution electrode body or the underlayer, or an enzyme containing a crosslinking agent of polyallyl amine applying a predetermined quantity on the immobilization film, and to perform the crosslinking reaction is carried out a film on the electrode surface. 保湿剤としては、妨害除去膜の水分を保ったりあるいは高めたりするものであれば特に限定はないが、コラーゲン、界面活性剤、ポリビニルピロリドンなどの水溶性高分子があるが、妨害除去膜の保湿性を保ち、かつ、妨害除去効果の低下が少ないという点からは、コラーゲンを保湿剤として用いる。 The humectant is not particularly limited as long as or maintained or alternatively increasing the moisture interference-removing membrane, collagen, surfactants, there is a water-soluble polymer such as polyvinyl pyrrolidone, moisturizing disturbance removal membrane maintaining sexual and terms is less reduction in the interference removal effect, using collagen as a moisturizing agent. コラーゲンとしては、酸処理コラーゲン、アルカリ処理コラーゲン、酵素可溶性コラーゲンなどのいずれも使用可能であり、コラーゲンのタイプも特に限定はない。 The collagen, acid treatment collagen, alkali-treated collagen, any such enzyme soluble collagen may be used are not particularly limited types of collagen. 妨害除去膜を作製するための溶液(以下「妨害除去膜作製液」と言う)では、コラーゲンの濃度は、特に限定されないが、0.01〜 In solutions for making interference rejection membrane (hereinafter referred to as "interference rejection membrane produced fluid"), the concentration of collagen is not particularly limited, 0.01
0.1重量%の範囲が好ましい。 Preferably in the range of 0.1 wt%. 0.1重量%を越えると、膜の透過性が悪くなり、応答速度が悪くなる。 It exceeds 0.1 wt%, the poor permeability of the membrane, the response speed is deteriorated. この発明にかかる酵素固定化電極の応答性は、たとえば20〜30秒である。 Responsiveness of the enzyme-immobilized electrode according to the present invention, for example, 20 to 30 seconds. また、妨害除去膜の架橋の程度によって除去されうる物質の種類を適宜変えることも可能である。 It is also possible to vary the types of materials that can be removed by the degree of crosslinking of the interference-removing membrane appropriately. 妨害除去膜のマトリックス成分としては、コラーゲンを含むのであれば、上記のものに限定されない。 The matrix component of the interference removal layer, if containing collagen, but are not limited to those described above. 架橋剤としては、たとえばグルタルアルデヒド等のジアルデヒドが用いられる。 The crosslinking agent, for example dialdehydes such as glutaraldehyde is used.

酵素固定化膜は、グルコースオキシダーゼおよびコレステロールオキシダーゼ等の酵素、ゼラチン等の生体高分子、および、架橋剤を含む溶液(たとえば、水溶液)を電極本体上または妨害除去膜上に所定量塗布し、架橋反応を行わせて製膜を行うとともに固定化して作られる。 Enzyme immobilized membrane is an enzyme such as glucose oxidase and cholesterol oxidase, biopolymers such as gelatin, and a solution containing a crosslinking agent (e.g., aqueous solution) a predetermined amount is applied on the electrode body on or interference rejection membrane, crosslinked the reaction was carried out is made by immobilizing performs film formation while.
酵素は、1種類のみを用いるようにしてもよいし、失活などの悪影響が生じないのであれば、2種類以上を用いるようにしてもよい。 Enzymes may be used only one kind, if no adverse effects, such as deactivation, may be used two or more kinds. 酵素固定化膜のマトリックス成分としては、酵素の働きを損なわないのであれば、上記のものに限定されない。 The matrix component of the enzyme immobilized membrane, that these do not impair the function of the enzyme is not limited to those described above. 架橋剤としては、たとえばグルタルアルデヒド等のジアルデヒドが用いられる。 The crosslinking agent, for example dialdehydes such as glutaraldehyde is used.

このようにして得られるこの発明にかかる酵素固定化電極は、コラーゲンによって妨害除去膜の水分が保たれるため、保湿性を保つことができ、乾燥による妨害除去膜の電極本体からの剥離を防ぐことができる。 Enzyme-immobilized electrode according to the present invention thus obtained, since the water is maintained in the interference removal layer by collagen, it is possible to keep the moisture, prevents peeling from the electrode body of interference-removing membrane by drying be able to. また、測定溶液中での膨潤率、乾燥させたときの収縮率が小さくなり、酵素固定化電極として使用したときの感度のバラツキがなく、安定した測定を行うことができる。 The swelling ratio of the measurement solution, shrinkage when dried is reduced, there is no variation in sensitivity when used as an enzyme-immobilized electrode, it is possible to perform stable measurement.

また、妨害除去膜作製用の水溶液の塗布性も良くなり、 Further, it may be applied aqueous solutions for interference removal membrane produced,
電極表面上に膜厚が均一になるように製膜することができる。 Thickness on the electrode surface can be film formation to be uniform.

コラーゲンを含まない従来の妨害除去膜では、電極本体に妨害除去膜作製液を塗布後、調湿器の外、たとえば、 In a conventional interference removing film which does not contain collagen, after coating the interference rejection membrane prepared solution to the electrode body, humidistat outside, for example,
湿度40〜60%程度の雰囲気下に5〜10分間放置すると、 Upon standing for 5 to 10 minutes in an atmosphere of humidity of 40 to 60%
第3図(a)にみるように、妨害除去膜5が電極本体1から剥離してしまう。 As seen in FIG. 3 (a), the interference rejection membrane 5 peeled off from the electrode body 1. このため、調湿器内で湿度80%の雰囲気下に保って第3図(b)にみるように妨害除去膜4を作製する必要があった。 Therefore, it is necessary to produce an interference-removing membrane 4 as seen in Figure 3 kept in an atmosphere of 80% humidity (b) in a humidistat. これに対し、この発明にかかる酵素固定化電極の製造方法では、妨害除去膜の上に酵素固定化膜を形成するにあたり、あらかじめ前記妨害除去膜にコラーゲンを含ませておくので、調湿器の外、たとえば、湿度40〜60%程度の雰囲気下に5〜10分間放置しても、第3図(b)にみるように妨害除去膜4が形成され、剥離が生じにくい。 In contrast, in the manufacturing method of the enzyme-immobilized electrode according to the present invention, when forming an enzyme-immobilized film on the interference-removing membrane, so made to contain collagen in advance the interference removal layer, humidistat of outside, for example, even when left for 5-10 minutes in an atmosphere of humidity of about 40% to 60%, disturbance removal film 4 as seen in FIG. 3 (b) is formed, peeling hardly occurs. 第1〜3図中、3は、セラミック、合成樹脂等からなる絶縁性基板である。 In the first to third drawing, 3 is an insulating substrate made ceramic, a synthetic resin or the like. 電極本体1 Electrode body 1
は、たとえば、この基板3の上に形成されているが、このようなものに限定されない。 , For example, are formed on the substrate 3 is not limited to such.

なお、この発明にかかる酵素固定化電極は、1000回以上の連続測定も可能である。 Incidentally, the enzyme-immobilized electrode according to the invention can be also continuous measurement of more than 1000 times.

〔作用〕 [Action]

妨害除去膜がコラーゲンを含んでいることにより、乾燥・湿潤による収縮・膨潤の変化が小さくなり、剥離しにくくなる。 By interfering removal membrane contains collagen, contraction and changes in swelling with dry-wet is reduced, it becomes difficult peeling.

また、妨害除去膜がコラーゲンを含んでいることにより、同妨害除去膜の上に酵素固定化膜を形成するときの雰囲気の調湿を行わずにすみ、妨害除去膜が電極本体から剥離するのが防がれるという利点も得られる。 Further, by disturbing removal membrane contains collagen, the corner without humidifying atmosphere for forming the enzyme-immobilized film on the same interference-removing membrane, disturbance removal film is peeled off from the electrode body the advantage is also obtained that can be prevented.

〔実施例〕 〔Example〕

以下に、この発明の具体的な実施例および比較例を示すが、この発明は下記実施例に限定されない。 Hereinafter, specific examples and comparative examples of the present invention, the invention is not limited to the following examples.

−実施例1〜5および比較例− 第1表にみるような組成の下地膜作製溶液、妨害除去膜作製液および酵素固定化溶液を用いた。 - Examples 1 to 5 and Comparative Examples - the base film prepared solution of composition as seen in Table 1, with intervening removal membrane prepared solution and enzyme immobilization solution. 妨害除去膜のマトリックス成分としてポリアリルアミンおよびアルブミンを、架橋剤としてグルタルアルデヒドを、保湿剤としてコラーゲンをそれぞれ用いた。 Polyallylamine and albumin as a matrix component of the interference removal membrane, glutaraldehyde as the crosslinking agent, using collagen respectively as a humectant. 酵素固定化膜のマトリックス成分は、ゼラチン、ポリアリルアミン、アルブミンであり、架橋剤はグルタルアルデヒドである。 Matrix component of the enzyme immobilized membrane is gelatin, polyallylamine, an albumin, cross-linking agent is glutaraldehyde. 下地膜作製液を第1図にみるように、リード部2を有し、基板3上に設けられた電極本体(白金電極)1表面上に所定量塗布したのち架橋反応を行わせて下地膜を製膜した。 A base film produced fluid as seen in Figure 1, it has a lead portion 2, the electrode body provided on the substrate 3 (platinum electrode) to perform the crosslinking reaction after a predetermined amount coated on one surface of the base film the film was formed.
この下地膜の表面に第1表に示す組成の妨害除去膜作製液6を塗布して(第2図参照)架橋反応を行わせ、妨害除去膜4を形成した(第3図(b)参照)。 This surface of the base film interference removing film production fluid 6 having compositions shown in Table 1 was coated (second see figure) to perform the crosslinking reaction to form an interference removal layer 4 (FIG. 3 (b) see ). この妨害除去膜4の表面に第1表に示す組成の酵素固定化溶液を塗布して架橋反応を行わせ、酵素固定化膜を形成した。 This surface disturbance removal membrane 4 the enzyme immobilization solution having the composition shown in Table 1 was applied to perform the crosslinking reaction to form an enzyme immobilized membrane.

実施例および比較例において、電極面積は1×1mm 2 In the examples and comparative examples, the electrode area 1 × 1 mm 2,
溶液塗布量は0.5μlとした。 Solution coating amount was 0.5 [mu] l.

なお、比較例では、妨害除去膜作製液を第2図にみるように塗布してから湿度40〜60%の雰囲気下に5〜10分間放置したところ、第3図(a)にみるように、妨害除去膜5が電極本体1から剥離してしまった。 In the comparative example, was allowed to stand for 5 to 10 minutes after applying the disturbance removal film production fluid as seen in Figure 2 in an atmosphere of humidity of 40% to 60%, as seen in FIG. 3 (a) , the interference rejection membrane 5 had detached from the electrode body 1. このため、妨害除去膜作製液を塗布して調湿器内に入れ、湿度80%以上の雰囲気下で妨害除去膜の作製(第3図(b)参照)および酵素固定化膜の作製を行った。 Thus, placed in a coating to humidistat interference removing film production fluid, making the interference-removing membrane in an atmosphere of 80% humidity Preparation of (FIG. 3 (b) refer) and enzyme-immobilized film went It was.

上記実施例および比較例で用いたポリアリルアミンは平均分子量約60000であり、実施例で用いたコラーゲンは(株)高研製の牛真皮・可溶性タイプIコラーゲン溶液(pH3.0、濃度0.3%)のものであった。 Polyallylamine used in the above Examples and Comparative Examples are about 60000 average molecular weight, the collagen used in the Examples Corporation Koken Ltd. bovine dermal-soluble type I collagen solution (pH 3.0, 0.3% concentration) It was those.

実施例1〜5および比較例の各酵素固定化電極について検出感度(測定感度)、保湿性および感度変動を調べて結果を第1表に示した。 Detection sensitivity for each enzyme-immobilized electrode of Example 1-5 and Comparative Example (measurement sensitivity), the result looks moisturizing and sensitivity variations are shown in Table 1. 感度は、酵素固定化電極をポーラロアナライザ等の測定装置に接続し、電圧0.6V(対Ag Sensitivity connects an enzyme-immobilized electrode to a measuring device such as a polarographic analyzer, voltage 0.6V (vs. Ag
電極)、サンプル量を20μlとして測定した。 Electrode) was measured sample volume as 20 [mu] l. サンプルは、150mg/dlのグルコース溶液、100mg/dlのコレステロール溶液、妨害物質として、アスコルビン酸(濃度20mg Samples glucose solution 150 mg / dl, cholesterol solution 100 mg / dl, as interfering substance, ascorbic acid (concentration 20mg
/dl)、血液の凝固防止などに使用されるNaF(濃度50mg / Dl), NaF, such as those used in blood anti-coagulated (concentration 50mg
/dl)を用いた。 / Dl) was used. 保湿性は、妨害除去膜作製液を塗布後、湿度40〜60%の雰囲気下で5〜10分間程度のうちに妨害除去膜が剥離しない場合を○、剥離した場合を×で示した。 Moisturizing showed after application interference removing film production fluid, a case where disturbance removal membrane of about 5 to 10 minutes under an atmosphere of humidity of 40% to 60% is not peeled ○, a case where the peeling ×. 感度変動は、得られた酵素固定化電極を用いて標準液で20回測定したときの1回目の感度の測定値と20 Sensitivity variation, the measured value of the first sensitivity when measured 20 times in a standard solution using the obtained enzyme-immobilized electrode and 20
回目の感度の測定値との変化を下式により求めて示した。 A change in a measure of the round eye sensitivity shows calculated by the following equation.

第1表からわかるように、実施例1〜3の酵素固定化電極は、いずれもグルコースを感度良く検出することができ、実施例4および5の酵素固定化電極は、いずれもコレステロールを感度良く検出することができた。 As can be seen from Table 1, the enzyme-immobilized electrode of Example 1-3 are all able to sensitively detect glucose, the enzyme-immobilized electrode of Example 4 and 5 are both good sensitivity cholesterol It could be detected. また、 Also,
実施例1〜5では、妨害物質はほとんどまたは全く検出されなかった。 In Examples 1-5, the interfering substance is little or not at all detected. これに対し、比較例の酵素固定化電極では、感度変動が実施例のもの(±2%以内)よりも大きかった(±4〜5%)。 In contrast, in the enzyme-immobilized electrode of Comparative Example, the sensitivity variation is larger than that (within ± 2%) Example (± 4 to 5%). また、比較例のものは、湿度40 Further, those of the comparative example, humidity 40
〜60%RHの雰囲気下では、第3図(a)にみるように、妨害除去膜5が電極本体1から剥離したが、実施例のものでは、同じ条件下で剥離しなかった。 Under an atmosphere of RH to 60%, as seen in FIG. 3 (a), although the interference rejection membrane 5 was peeled from the electrode body 1, intended for example, it did not peel off under the same conditions.

なお、上記実施例では、固定化する酵素として、グルコースオキシダーゼおよびコレステロールオキシダーゼを用いたが、この発明において使用できる酵素はこれらの2者に限定されるものではない。 In the above embodiment, as an enzyme to be immobilized, but using glucose oxidase and cholesterol oxidase, the enzyme is not limited to the two parties that can be used in this invention. また、測定用の液も血液に限るものではない。 In addition, liquid for measurement is also not limited to the blood.

〔発明の効果〕 〔Effect of the invention〕

この発明にかかる酵素固定化電極は、導電性材料からなる電極本体に酵素固定化膜および妨害除去膜が設けられているものにおいて、前記妨害除去膜がコラーゲンを含んでいることを特徴とするので、妨害除去膜の剥離がなく、感度の良い、安定した測定を行うことができる。 Enzyme-immobilized electrode according to the present invention, the electrode body made of a conductive material in which the enzyme immobilized membrane and disturbance removal film is provided, since the interference removal membrane is characterized in that it contains collagen , there is no separation of the interference removal layer, a good sensitivity, it is possible to perform stable measurement.

この発明にかかる酵素固定化電極の製造方法は、導電性材料からなる電極本体表面上に形成された妨害除去膜の上に酵素固定化膜を形成するにあたり、前記妨害除去膜にコラーゲンを含めておくことを特徴とするので、妨害除去膜の上に酵素固定化膜を形成するときに、調湿する必要がある。 Method for producing enzyme-immobilized electrode according to the invention, on the interference removal layer formed on an electrode surface of the body made of a conductive material in forming an enzyme immobilized membrane, including the collagen to the interference removal layer since said placing, when forming an enzyme-immobilized film on the interference-removing membrane, it is necessary to moisture conditioning.

【図面の簡単な説明】 BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

第1図は、実施例および比較例に用いた白金電極の概略を表す斜視図、第2図は、同白金電極に妨害除去膜作製液を塗布した状態を表す概略断面図、第3図(a)は、比較例の酵素固定化電極における妨害除去膜形成後で酵素固定化膜形成前の状態を表す概略断面図、第3図(b) Figure 1 is a perspective view showing an outline of a platinum electrode used in Examples and Comparative Examples, Figure 2 is a schematic sectional view showing a state coated with interference rejection membrane prepared solution in the platinum electrode, Figure 3 ( a) is a schematic sectional view showing a state before the enzyme immobilized membrane formed after interference rejection membrane formed in the enzyme-immobilized electrode of Comparative example, FIG. 3 (b)
は、実施例の酵素固定化電極における妨害除去膜形成後で酵素固定化膜形成前の状態を表す概略断面図である。 Is a schematic cross-sectional view showing a state before the enzyme immobilized membrane formed after interference rejection membrane formed in the enzyme-immobilized electrode of Example. 1……電極本体、4……妨害除去膜 1 ...... electrode body, 4 ...... disturbance removal film

Claims (2)

    【特許請求の範囲】 [The claims]
  1. 【請求項1】導電性材料からなる電極本体に酵素固定化膜および妨害物質除去膜が設けられている酵素固定化電極において、前記妨害物質除去膜がコラーゲンを含んでいることを特徴とする酵素固定化電極。 1. A the electrode body made of a conductive material in the enzyme-immobilized electrode enzyme immobilized membrane and interfering substance removal membrane is provided, an enzyme, wherein the interfering substance removal membrane contains collagen immobilized electrode.
  2. 【請求項2】導電性材料からなる電極本体表面上に形成された妨害物質除去膜の上に酵素固定化膜を形成する酵素固定化電極の製造方法において、前記妨害物質除去膜にコラーゲンを含めておくことを特徴とする酵素固定化電極の製造方法。 2. A method for producing enzyme-immobilized electrode that forms an enzyme-immobilized film on the interfering substance removing film formed on the electrode body surface made of a conductive material, including collagen to the interfering substance removal membrane method for producing enzyme-immobilized electrode, wherein the keep.
JP1164797A 1989-06-27 1989-06-27 Enzyme-immobilized electrode and a method of manufacturing the same Expired - Lifetime JPH0750058B2 (en)

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AT397513B (en) * 1992-12-15 1994-04-25 Avl Verbrennungskraft Messtech Amperometric enzyme electrode
US5741319A (en) * 1995-01-27 1998-04-21 Medtronic, Inc. Biocompatible medical lead
US8688188B2 (en) 1998-04-30 2014-04-01 Abbott Diabetes Care Inc. Analyte monitoring device and methods of use
US8974386B2 (en) 1998-04-30 2015-03-10 Abbott Diabetes Care Inc. Analyte monitoring device and methods of use
US6338790B1 (en) 1998-10-08 2002-01-15 Therasense, Inc. Small volume in vitro analyte sensor with diffusible or non-leachable redox mediator
US6591125B1 (en) 2000-06-27 2003-07-08 Therasense, Inc. Small volume in vitro analyte sensor with diffusible or non-leachable redox mediator
US6560471B1 (en) 2001-01-02 2003-05-06 Therasense, Inc. Analyte monitoring device and methods of use
US7381184B2 (en) 2002-11-05 2008-06-03 Abbott Diabetes Care Inc. Sensor inserter assembly
US7811231B2 (en) 2002-12-31 2010-10-12 Abbott Diabetes Care Inc. Continuous glucose monitoring system and methods of use
US7766829B2 (en) 2005-11-04 2010-08-03 Abbott Diabetes Care Inc. Method and system for providing basal profile modification in analyte monitoring and management systems
US8226891B2 (en) 2006-03-31 2012-07-24 Abbott Diabetes Care Inc. Analyte monitoring devices and methods therefor
US7620438B2 (en) 2006-03-31 2009-11-17 Abbott Diabetes Care Inc. Method and system for powering an electronic device
US8123686B2 (en) 2007-03-01 2012-02-28 Abbott Diabetes Care Inc. Method and apparatus for providing rolling data in communication systems
US20100213057A1 (en) 2009-02-26 2010-08-26 Benjamin Feldman Self-Powered Analyte Sensor

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS63101743A (en) * 1986-10-18 1988-05-06 Matsushita Electric Works Ltd Functional electrode

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