JPH07184494A - 植物体細胞胚および発芽促進方法 - Google Patents
植物体細胞胚および発芽促進方法Info
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- JPH07184494A JPH07184494A JP33249493A JP33249493A JPH07184494A JP H07184494 A JPH07184494 A JP H07184494A JP 33249493 A JP33249493 A JP 33249493A JP 33249493 A JP33249493 A JP 33249493A JP H07184494 A JPH07184494 A JP H07184494A
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- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【構成】発芽前に植物生理活性物質の有効成分を含有す
る溶液に浸漬処理された植物体細胞胚および該植物体細
胞胚の発芽促進方法。 【効果】植物体細胞胚を植物生理活性物質に浸漬処理す
ることにより、体細胞胚の発芽率が向上し発芽後の生長
が促進させる。植物体再生率が高まるために植物の苗生
産等に有効な技術である。
る溶液に浸漬処理された植物体細胞胚および該植物体細
胞胚の発芽促進方法。 【効果】植物体細胞胚を植物生理活性物質に浸漬処理す
ることにより、体細胞胚の発芽率が向上し発芽後の生長
が促進させる。植物体再生率が高まるために植物の苗生
産等に有効な技術である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、発芽に優れた植物体細
胞胚および植物体細胞胚の発芽を促進させかつ発芽後の
生長を促進する方法に関するものである。
胞胚および植物体細胞胚の発芽を促進させかつ発芽後の
生長を促進する方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】体細胞胚を発芽させる場合において、健
全で正常な植物体の再生率を高めることは重要である。
植物種によっては発芽不良になりやすく、カルス化した
り、発根しなかったりする場合が多い。また、体細胞胚
そのものに形態的・生理的異常などの原因で植物体再生
率が低く体細胞胚誘導を利用した大量増殖が実用化され
た例は少ない。
全で正常な植物体の再生率を高めることは重要である。
植物種によっては発芽不良になりやすく、カルス化した
り、発根しなかったりする場合が多い。また、体細胞胚
そのものに形態的・生理的異常などの原因で植物体再生
率が低く体細胞胚誘導を利用した大量増殖が実用化され
た例は少ない。
【０００３】従来法では、体細胞胚を発芽させる時に発
芽異常がおきないように発芽培地の濃度を希釈するか培
地に植物ホルモンを添加する方法等が知られている。し
かしながら、これらの方法でも発芽不良を引き起こす場
合が多く、健全で正常な植物体再生のための方法が望ま
れている。
芽異常がおきないように発芽培地の濃度を希釈するか培
地に植物ホルモンを添加する方法等が知られている。し
かしながら、これらの方法でも発芽不良を引き起こす場
合が多く、健全で正常な植物体再生のための方法が望ま
れている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、植物生理活
性物質の有効成分を含有する溶液に浸漬処理された植物
体細胞胚および該体細胞胚の健全で正常な発芽率を高
め、且つ発芽後の生長を促進する方法を提供するもので
ある。
性物質の有効成分を含有する溶液に浸漬処理された植物
体細胞胚および該体細胞胚の健全で正常な発芽率を高
め、且つ発芽後の生長を促進する方法を提供するもので
ある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明は、植物体細胞胚
の発芽を促進する方法として植物体細胞胚を植物生理活
性物質を含有する溶液に浸漬処理する方法によって従来
の技術と比較し、より高い頻度で正常な発芽を誘導し発
芽後の生長を促進することが出来ることを見い出して本
発明を完成した。
の発芽を促進する方法として植物体細胞胚を植物生理活
性物質を含有する溶液に浸漬処理する方法によって従来
の技術と比較し、より高い頻度で正常な発芽を誘導し発
芽後の生長を促進することが出来ることを見い出して本
発明を完成した。
【０００６】すなわち、本発明は植物体の外植片もしく
は植物体外植片から誘導されたカルスから得られた体細
胞胚において、植物生理活性物質の有効成分を含有する
溶液に浸漬された体細胞胚および該体細胞胚の発芽促進
方法に関するものである。本発明における発芽前の植物
生理活性物質の浸漬方法は通常の方法に比較し正常発芽
率が著しく向上し発芽後の生長が促進される。ここでい
う正常発芽率とは、体細胞胚の胚軸の膨潤、カルス化、
肥大などの形態的異常がない体細胞の発芽の割合を示
す。
は植物体外植片から誘導されたカルスから得られた体細
胞胚において、植物生理活性物質の有効成分を含有する
溶液に浸漬された体細胞胚および該体細胞胚の発芽促進
方法に関するものである。本発明における発芽前の植物
生理活性物質の浸漬方法は通常の方法に比較し正常発芽
率が著しく向上し発芽後の生長が促進される。ここでい
う正常発芽率とは、体細胞胚の胚軸の膨潤、カルス化、
肥大などの形態的異常がない体細胞の発芽の割合を示
す。
【０００７】以下に本発明を詳細に説明する。本発明で
用いる植物体は体細胞胚が誘導される作物、野菜、カン
キツ、花き等があげられ、好ましくはイネ科、セリ科、
ナス科、ウリ科、ユリ科、マメ科、サクラソウ科などの
植物があげられ、さらに好ましくはイネ、ニンジン、セ
ロリー、ナス、メロン、キュウリ、アスパラガス、ダイ
ズなどがあげられる。
用いる植物体は体細胞胚が誘導される作物、野菜、カン
キツ、花き等があげられ、好ましくはイネ科、セリ科、
ナス科、ウリ科、ユリ科、マメ科、サクラソウ科などの
植物があげられ、さらに好ましくはイネ、ニンジン、セ
ロリー、ナス、メロン、キュウリ、アスパラガス、ダイ
ズなどがあげられる。
【０００８】本発明に使用される体細胞胚は、公知の技
術で誘導される方法で得られる。植物外植片からカルス
を誘導し増殖させた後体細胞胚を得ることが出来る。植
物外植片からカルスへの誘導は従来公知の方法に従って
誘導される。すなわち、Murashige-Skoog培地（ＭＳ培
地）,Linsmaier-Skoog培地（ＬＳ培地）,B5培地,Nitsch
&Nitsch培地,White培地等の基本培地にショ糖等の栄養
源を加え、これに植物生長ホルモンを加えた固体あるい
は液体培地で植物外植片を培養し、体細胞胚を形成する
能力を有するカルスを得る。これを固体あるいは液体培
地で増殖する。かくして得られたカルスから従来法によ
り体細胞胚を誘導するかあるいは通気性膜を使用して体
細胞胚を誘導（特公平４―７６６４６号公報）しても良
い。
術で誘導される方法で得られる。植物外植片からカルス
を誘導し増殖させた後体細胞胚を得ることが出来る。植
物外植片からカルスへの誘導は従来公知の方法に従って
誘導される。すなわち、Murashige-Skoog培地（ＭＳ培
地）,Linsmaier-Skoog培地（ＬＳ培地）,B5培地,Nitsch
&Nitsch培地,White培地等の基本培地にショ糖等の栄養
源を加え、これに植物生長ホルモンを加えた固体あるい
は液体培地で植物外植片を培養し、体細胞胚を形成する
能力を有するカルスを得る。これを固体あるいは液体培
地で増殖する。かくして得られたカルスから従来法によ
り体細胞胚を誘導するかあるいは通気性膜を使用して体
細胞胚を誘導（特公平４―７６６４６号公報）しても良
い。
【０００９】本発明では、かくして得られた体細胞胚を
植物生理活性物質の有効成分を含有する溶液に浸漬処理
後、発芽培地に移して発芽させる。植物生理活性物質と
しては、植物ホルモン、植物生長調整物質等があげら
れ、好ましくは、植物ホルモンのうちオーキシンとして
はインドール―３―酢酸、４―クロロインドール酢酸、
５，６−ジクロロインドール酢酸、５―クロル―３（１
Ｈ）―インダゾリル酢酸エチル、ナフタレン酢酸等、ジ
ベレリンとしてはジベレリンＡ3、ジベレリンＡ4，ジベ
レリンＡ7等、サイトカイニンとしてはゼアチン、ベン
ジルアデニン、フォクロルフェニュロン等、エチレンと
してはエチレンやエチレン作用を示すエセホン等、アブ
シジン酸、ブラシノライド、イナベンフィド、４，４，
４−トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪酸等が
あげられる。
植物生理活性物質の有効成分を含有する溶液に浸漬処理
後、発芽培地に移して発芽させる。植物生理活性物質と
しては、植物ホルモン、植物生長調整物質等があげら
れ、好ましくは、植物ホルモンのうちオーキシンとして
はインドール―３―酢酸、４―クロロインドール酢酸、
５，６−ジクロロインドール酢酸、５―クロル―３（１
Ｈ）―インダゾリル酢酸エチル、ナフタレン酢酸等、ジ
ベレリンとしてはジベレリンＡ3、ジベレリンＡ4，ジベ
レリンＡ7等、サイトカイニンとしてはゼアチン、ベン
ジルアデニン、フォクロルフェニュロン等、エチレンと
してはエチレンやエチレン作用を示すエセホン等、アブ
シジン酸、ブラシノライド、イナベンフィド、４，４，
４−トリフルオロ−３−（インドール−３−）酪酸等が
あげられる。
【００１０】本発明の体細胞胚の発芽促進方法におい
て、浸漬処理方法としては体細胞胚だけを植物生理活性
物質を含有する溶液に浸漬処理する方法と体細胞胚を誘
導した培地に直接植物生理活性物質を含有する溶液を加
える方法がある。前者の方法が夾雑物の影響を受けずに
化合物の効果が発揮されるのでより好ましい。化合物溶
液の有効成分濃度は、植物生理活性物質および体細胞胚
の種類によって異なるが、通常0.00001〜500mg/l、好ま
しくは0.0001〜50mg/lの濃度で使用される。浸漬時間
は、数秒〜９６時間、好ましくは１時間〜４８時間であ
る。浸漬処理後は体細胞胚を水洗するかもしくはそのま
ま発芽培地に移せば良い。
て、浸漬処理方法としては体細胞胚だけを植物生理活性
物質を含有する溶液に浸漬処理する方法と体細胞胚を誘
導した培地に直接植物生理活性物質を含有する溶液を加
える方法がある。前者の方法が夾雑物の影響を受けずに
化合物の効果が発揮されるのでより好ましい。化合物溶
液の有効成分濃度は、植物生理活性物質および体細胞胚
の種類によって異なるが、通常0.00001〜500mg/l、好ま
しくは0.0001〜50mg/lの濃度で使用される。浸漬時間
は、数秒〜９６時間、好ましくは１時間〜４８時間であ
る。浸漬処理後は体細胞胚を水洗するかもしくはそのま
ま発芽培地に移せば良い。
【００１１】発芽培地は前述の基本培地にショ糖等を栄
養源として加え、固体培地で発芽させる。発芽において
植物ホルモンは全く含まないか、または前段階より低い
濃度でしか含まない培地が用いられる。培養条件は、１
５〜３５℃、好ましくは２０〜３０℃の温度下で静置培
養することにより発芽する。以下に実施例を示すが、本
発明はこれらの実施例に限定されるものでない。
養源として加え、固体培地で発芽させる。発芽において
植物ホルモンは全く含まないか、または前段階より低い
濃度でしか含まない培地が用いられる。培養条件は、１
５〜３５℃、好ましくは２０〜３０℃の温度下で静置培
養することにより発芽する。以下に実施例を示すが、本
発明はこれらの実施例に限定されるものでない。
【００１２】
実施例１ 無菌的に生育させたニンジン（品種：新黒田五寸）芽生
えの胚軸部分から約５ｍｍの切片を作成し、２，４−ジ
クロロフェノキシ酢酸１mg/lの濃度になるように加えた
ＭＳ培地（３％ショ糖,０．８％寒天,ｐＨ５．８）に置
床した。２５℃、３，０００ｌｕｘに保たれた培養室で
３０日間培養しカルスを誘導した。誘導したカルスを
２，４−ジクロロフェノキシ酢酸１mg/lを含むＭＳ液体
培地にいれ１００ｒｐｍで水平回転培養で増殖させた。
えの胚軸部分から約５ｍｍの切片を作成し、２，４−ジ
クロロフェノキシ酢酸１mg/lの濃度になるように加えた
ＭＳ培地（３％ショ糖,０．８％寒天,ｐＨ５．８）に置
床した。２５℃、３，０００ｌｕｘに保たれた培養室で
３０日間培養しカルスを誘導した。誘導したカルスを
２，４−ジクロロフェノキシ酢酸１mg/lを含むＭＳ液体
培地にいれ１００ｒｐｍで水平回転培養で増殖させた。
【００１３】２週間毎に継代培養を行った。継代１４日
後に７５、３２μmのメッシュの順番でろ過し３２μmメ
ッシュ上に残った細胞塊をホルモンフリーのＭＳ液体培
地で３回洗浄した。ＰＣＶ（圧縮細胞量）の１，０００
倍量のホルモンフリーＭＳ液体培地で希釈し、その３０
ｍｌを１００ｍｌの三角フラスコに移し、２５℃、暗黒
下で水平回転培養（１００ｒｐｍ）し、体細胞胚を誘導
した。
後に７５、３２μmのメッシュの順番でろ過し３２μmメ
ッシュ上に残った細胞塊をホルモンフリーのＭＳ液体培
地で３回洗浄した。ＰＣＶ（圧縮細胞量）の１，０００
倍量のホルモンフリーＭＳ液体培地で希釈し、その３０
ｍｌを１００ｍｌの三角フラスコに移し、２５℃、暗黒
下で水平回転培養（１００ｒｐｍ）し、体細胞胚を誘導
した。
【００１４】体細胞胚誘導開始１４日後に魚雷型胚を所
定濃度の化合物溶液に１時間浸漬処理した。浸漬処理
後、発芽固体培地（１／２ＭＳ培地, １．５％ショ糖，
０．８％寒天，ｐＨ５．８）に移し、２５℃、３，００
０ＬＵＸ照明下で培養した。魚雷型胚置床後１６日に正
常発芽率、草丈および根長を測定した。全ての操作は、
無菌的に行った。測定結果の平均値を第１表に示した。
正常発芽率が向上し、草丈、根の生長が促進された。
定濃度の化合物溶液に１時間浸漬処理した。浸漬処理
後、発芽固体培地（１／２ＭＳ培地, １．５％ショ糖，
０．８％寒天，ｐＨ５．８）に移し、２５℃、３，００
０ＬＵＸ照明下で培養した。魚雷型胚置床後１６日に正
常発芽率、草丈および根長を測定した。全ての操作は、
無菌的に行った。測定結果の平均値を第１表に示した。
正常発芽率が向上し、草丈、根の生長が促進された。
【００１５】
【表１】 第１表 ─────────────────────────────── 化合物 濃度 正常 草丈 根長 (ppm) 発芽率(%) (mm) (mm) ─────────────────────────────── 5,6-Cl2 -IAA 0.01 80 38.7 49.8 Ethychlozate 0.1 75 44.6 45.5 TFIBA 1.0 80 40.4 42.0 対照区 − 45 18.0 18.0 ─────────────────────────────── 5,6-Cl2-IAA：５，６―ジクロロインドール酢酸 Ethychlozate：５―クロル―３（１Ｈ）―インダゾリル
酢酸エチル TFIBA：４，４，４−トリフルオロ−３−（インドール
−３−）酪酸
酢酸エチル TFIBA：４，４，４−トリフルオロ−３−（インドール
−３−）酪酸
【００１６】実施例２ ポットで栽培した１年生のアスパラガス（品種：ハイデ
ル）の若茎を採取し滅菌後、小側枝茎頂部からカルスを
誘導した。このカルスをＬＳ基本培地（ショ糖２％，
２，４−ジクロロフェノキシ酢酸１mg/l，ｐＨ５．８)
で増殖した。このカルス懸濁液を植物ホルモンの入って
いない培地で３回洗浄する。
ル）の若茎を採取し滅菌後、小側枝茎頂部からカルスを
誘導した。このカルスをＬＳ基本培地（ショ糖２％，
２，４−ジクロロフェノキシ酢酸１mg/l，ｐＨ５．８)
で増殖した。このカルス懸濁液を植物ホルモンの入って
いない培地で３回洗浄する。
【００１７】ＬＳ液体培地で圧縮細胞量を１００倍に希
釈し、この細胞懸濁液を次の体細胞胚誘導培地、すなわ
ちＬＳ基本培地（ショ糖２％，ゲルライト１％，ｐＨ
５．８）に移す。この時培養容器（１００ｍｌ三角コル
ベン）の口をテフロン製無菌通気膜で封じる。２５℃、
３，０００LUXで１ヶ月培養する。形成された体細胞胚
を、所定濃度の植物生理活性物質に３時間浸漬処理し水
洗後発芽固体培地（１／２ＬＳ基本培地，ショ糖２％，
ゲルライト０．２％，ｐＨ５．８）に置床して２５℃、
３，０００LUXで発芽させた。１区２０個体供試した。
体細胞胚置床後２８日に正常発芽率、草丈および根長を
測定した。全ての操作は、無菌的に行った。測定結果の
平均値を第２表に示した。発芽率が向上し、草丈、根の
生長が促進された。
釈し、この細胞懸濁液を次の体細胞胚誘導培地、すなわ
ちＬＳ基本培地（ショ糖２％，ゲルライト１％，ｐＨ
５．８）に移す。この時培養容器（１００ｍｌ三角コル
ベン）の口をテフロン製無菌通気膜で封じる。２５℃、
３，０００LUXで１ヶ月培養する。形成された体細胞胚
を、所定濃度の植物生理活性物質に３時間浸漬処理し水
洗後発芽固体培地（１／２ＬＳ基本培地，ショ糖２％，
ゲルライト０．２％，ｐＨ５．８）に置床して２５℃、
３，０００LUXで発芽させた。１区２０個体供試した。
体細胞胚置床後２８日に正常発芽率、草丈および根長を
測定した。全ての操作は、無菌的に行った。測定結果の
平均値を第２表に示した。発芽率が向上し、草丈、根の
生長が促進された。
【００１８】
【表２】 第２表 ─────────────────────────────── 化合物 濃度 発芽率 草丈 根長 (ppm) (%) (mm) (mm) ─────────────────────────────── 4-Clー IAA 0.1 50 38.7 39.8 対照区 − 25 28.0 29.0 ─────────────────────────────── 4-Cl-IAA：４―クロロインドール酢酸
【００１９】
【発明の効果】植物体細胞胚を発芽前に植物生理活性物
質に浸漬処理することにより、発芽率が高まり発芽後の
生長が促進される。体細胞胚の発芽を促進することは、
植物体再生率を高め植物体生産を向上させる重要な技術
である。
質に浸漬処理することにより、発芽率が高まり発芽後の
生長が促進される。体細胞胚の発芽を促進することは、
植物体再生率を高め植物体生産を向上させる重要な技術
である。
Claims (12)
- 【請求項１】 植物生理活性物質の有効成分を含有する
溶液に浸漬処理された発芽前の植物体細胞胚。 - 【請求項２】 植物が、イネ科、セリ科、ナス科、ウリ
科、ユリ科、マメ科またはサクラソウ科の植物である請
求項１記載の植物体細胞胚。 - 【請求項３】 植物が、イネ、ニンジン、セロリー、ナ
ス、キュウリ、アスパラガス、ダイズ、ホウレンソウま
たはレタスである請求項１記載の植物体細胞胚。 - 【請求項４】 植物生理活性物質が、植物生長調整物質
である請求項１記載の植物体細胞胚。 - 【請求項５】 植物生長調整物質が、植物ホルモン、イ
ナベンフィド、フォクロルフェニュロン、エセホンおよ
び４，４，４−トリフルオロ−３−（インドール−３
−）酪酸から選ばれた１種以上である請求項４記載の植
物体細胞胚。 - 【請求項６】 植物ホルモンが、オーキシン、サイトカ
イニン、ジベレリン、エチレン、アブシジン酸およびブ
ラシノライドから選ばれた１種以上である請求項５記載
の植物体細胞胚。 - 【請求項７】 発芽前の植物体細胞胚を、植物生理活性
物質の有効成分を含有する溶液に浸漬処理することを特
徴とする該体細胞胚の発芽促進方法。 - 【請求項８】 植物が、イネ科、セリ科、ナス科、ウリ
科、ユリ科、マメ科またはサクラソウ科の植物である請
求項７記載の方法。 - 【請求項９】 植物が、イネ、ニンジン、セロリー、ナ
ス、キュウリ、アスパラガス、ダイズ、ホウレンソウま
たはレタスである請求項７記載の方法。 - 【請求項１０】 植物生理活性物質が、植物生長調整物
質である請求項７記載の方法。 - 【請求項１１】 植物生長調整物質が、植物ホルモン、
イナベンフィド、フォクロルフェニュロン、エセホンお
よび４，４，４−トリフルオロ−３−（インドール−３
−）酪酸から選ばれた１種以上である請求項１０記載の
方法。 - 【請求項１２】 植物ホルモンが、オーキシン、サイト
カイニン、ジベレリン、エチレン、アブシジン酸および
ブラシノライドから選ばれた１種以上である請求項１１
記載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP33249493A JPH07184494A (ja) | 1993-12-27 | 1993-12-27 | 植物体細胞胚および発芽促進方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP33249493A JPH07184494A (ja) | 1993-12-27 | 1993-12-27 | 植物体細胞胚および発芽促進方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07184494A true JPH07184494A (ja) | 1995-07-25 |
Family
ID=18255573
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP33249493A Pending JPH07184494A (ja) | 1993-12-27 | 1993-12-27 | 植物体細胞胚および発芽促進方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07184494A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102763598A (zh) * | 2012-08-16 | 2012-11-07 | 云南省农业科学院花卉研究所 | 利用体细胞胚繁育文山兜兰苗的方法 |
| CN102893870A (zh) * | 2012-10-09 | 2013-01-30 | 冯志祥 | 牛大力种苗组织培养快速繁殖及育苗的方法 |
| CN103039361A (zh) * | 2013-01-11 | 2013-04-17 | 广西壮族自治区药用植物园 | 一种牛大力种子直接诱导丛生芽并快速繁育种苗的方法 |
| CN113854154A (zh) * | 2021-11-08 | 2021-12-31 | 江西省农业科学院蔬菜花卉研究所 | 芦笋与意大利野生种间杂交f1代再生植株的培养方法 |
-
1993
- 1993-12-27 JP JP33249493A patent/JPH07184494A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102763598A (zh) * | 2012-08-16 | 2012-11-07 | 云南省农业科学院花卉研究所 | 利用体细胞胚繁育文山兜兰苗的方法 |
| CN102893870A (zh) * | 2012-10-09 | 2013-01-30 | 冯志祥 | 牛大力种苗组织培养快速繁殖及育苗的方法 |
| CN103039361A (zh) * | 2013-01-11 | 2013-04-17 | 广西壮族自治区药用植物园 | 一种牛大力种子直接诱导丛生芽并快速繁育种苗的方法 |
| CN113854154A (zh) * | 2021-11-08 | 2021-12-31 | 江西省农业科学院蔬菜花卉研究所 | 芦笋与意大利野生种间杂交f1代再生植株的培养方法 |
| CN113854154B (zh) * | 2021-11-08 | 2022-05-20 | 江西省农业科学院蔬菜花卉研究所 | 芦笋与意大利野生种间杂交f1代再生植株的培养方法 |
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