JPH0696718B2 - 酵素洗剤組成物 - Google Patents

酵素洗剤組成物

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JPH0696718B2
JPH0696718B2 JP62311793A JP31179387A JPH0696718B2 JP H0696718 B2 JPH0696718 B2 JP H0696718B2 JP 62311793 A JP62311793 A JP 62311793A JP 31179387 A JP31179387 A JP 31179387A JP H0696718 B2 JPH0696718 B2 JP H0696718B2
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Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、特定クラスのリパーゼおよび特定クラスのプ
ロテアーゼを含有する酵素洗剤組成物に係る。
本出願人の英国特許出願第8514707号において、特定ク
ラスのリパーゼを含有する洗剤組成物が記載されてい
る。この英国特許出願で、我々は、清浄なモデルシステ
ムにおいてプロテアーゼが存在した場合リパーゼがいか
に速くその活性を失うかを記載し、更に洗濯機中での実
際の洗浄ではプロテアーゼが存在したとしても、リパー
ゼによる実質的な利点が得られることも明らかにした。
本発明において、特定クラスのプロテアーゼを使用する
とリパーゼ含有洗剤組成物の性能が格段に向上するこ
と、すなわちリパーセの活性が他のプロテアーゼよりも
これらのプロテアーゼによって実質的に影響されること
がないことが判明した。この特定クラスのプロテアーゼ
は、10.0以下好ましくは約9以下の等電点を有するプロ
テアーゼからなる。このようなプロテアーゼは当業界に
公知であり、その典型例やアルカラーゼ(Alcalase)
(Novo Industri製)、マクサターゼ(Maxatase)(Gis
t Brocades製)オプティマーゼ(Optimase)(Miles-Ka
li Chemie製)、カズサーゼ(Kazusase)(Showa Denka
製)(=API−21=AP−1)、スブチリシンBPN′(Subt
ilisin BPN′)(B.amyloliquefaciensATCC 23844から
得ることができる。)などである。
カズサーゼは本発明の好ましいプロテアーゼである。そ
れはShowa Denkaのオランダ特許出願第8302790号明細書
に記載されている。この特許出願明細書によると、その
等電点は7.4である。上記の各市販プロテアーゼの等電
点はすべて8.7〜9.4の範囲内にある。
本発明によれば、前記プロテアーゼの混合物も使用でき
る。
一般に、洗剤組成物中のプロテアーゼの量は、最終洗剤
組成物に基づき、0.1〜50GU/mg、通常0.2〜40GU/mg、好
ましくは0.5〜30GU/mgである。GU(グリシン単位)と
は、標準的なインキュベーション条件下で1μg/mlグリ
シンに等価の末端NH2基の量を生産する酵素の量をい
う。
本発明で使用するリパーゼのクラスは、微生物クロモバ
クター ヴィスコサムの変異体であるリポリティカム
Chromobacter viscosum var.lipolyticum)NRRL B−3
673によって産生されるリパーゼの抗体と陽性の免疫学
的交叉反応を示すリパーゼを包含する。このリパーゼは
東洋醸造株式会社のオランダ特許第154,269号明細書に
記載されており、前記微生物は米国イリノイ州ペロリア
市に所在するthe United State Department of Agricul
ture,Agricultural Research Service,Northern Utiliz
ataion and Development Divisionで番号N°NRRL B−3
673のもとに入手可能である。このリパーゼを以下東洋
醸造リパーゼと称する。
本発明のリパーゼは、Ouchterlony(Acta.Med.Scan.,13
3,pages76−79(1950))の標準的な免疫拡散法を用い
た場合、東洋醸造リパーゼ抗体と陽性の免疫学的交叉反
応を示す。
抗血清の調製は次のようにして行うことができる。
等容量の0.1mg/ml抗原とフロイントアジュバント(完全
又は不完全)とを、エマルジョンが得られるまで混合す
る。下記のスキームに従い、2匹の雌ウサギにエマルジ
ョンサンプル2mlを注射する。
0日:完全フロイントアジュバント中の抗原 4日:完全フロイントアジュバント中の抗原 32日:不完全フロイントアジュバント中の抗原 60日:不完全フロイントアジュバント中の抗原の追加免
疫 所要の抗体を含む血清は、67日目に採取した凝固血液の
遠心分離から調製した。
抗東洋醸造リパーゼ抗血清の力価を、Ouchterlony法に
従い抗原と抗血清の連続希釈物の沈降検査により求め
た。抗血清の25倍の希釈物は、0.1mg/mlの抗原濃度でも
目視可能な沈降を認め得るものであった。
上記したように東洋醸造リパーゼ抗体と陽性の免疫学的
交叉反応を示すリパーゼは全て本発明のリパーゼであ
る。具体例としては、シュードモナス フルオレスセン
ス(Pseudomonas fluorescens)IAM 1057からのリパー
ゼ(Amano-Pリパーゼの商品名で入手可能)、シュード
モナス フラジャイ(Pseudomonas fragi)FERM P 1339
からのリパーゼ(Amano-Bの商品名で入手可能)、シュ
ードモナス ニトロレデュセンスの変異体であるリポリ
ティカム(Pseudomonas nitroreducens var.lipolyticu
m)FERM P 1338からのリパーゼ、シュードモナス種(Ps
eudomonas sp.)からのリパーゼ(Amono-CESの商品名で
入手可能)、シュードモナス セパシア(Pseudomonas
cepacia)からのリパーゼ、クロモバクター ヴィスコ
サム(Chromobacter viscosum)例えばクロモバクター
ヴィスコサムの変異体であるリポリティカム(Chromo
bacter viscosum var.lipolyticum)NRRL B−3673から
のリパーゼ(東洋醸造から市販されている)、クロモバ
クター ヴィスコサム(Chromobacter viscosum)から
のリパーゼ(米国のUS Biochemical Corp.およびオラン
ダのDiosynth Co.から入手可能)およびシュードモナス
グラジオリ(Pseudomonas gladioli)からのリパーゼ
などを挙げることができる。
本発明のリパーゼが洗浄漂白組成物中に含まれる量は、
最終組成物の脂肪分解酵素活性が100〜0.005LU/mg組成
物、好ましくは25〜0.05LU/mg組成物となるような量で
ある。
リパーゼ単位(LU)とは、下記条件下pH statで1分間
あたり1μmolの滴定可能脂肪酸を生成するリパーゼの
量をいう。ここにいう条件とは、温度30℃、pH9.0、基
質:5mmol/lのトリスバッファー中13mmol/lのCa2+と20mm
ol/lのNaClの存在下3.3wt%のオリーブ油と3.3%のアラ
ビアゴムのエマルジョンである。
一般に、上記リパーゼの混合物も使用可能である。リパ
ーゼは非精製形態でも、精製形態でも使用できる。精製
は、例えば、フエニルセファローズ充填カラム技術の如
き公知の吸着法を用いて行うことができる。
本発明の洗剤組成物は、更に、陰イオン性及び非イオン
性洗浄性表面活性剤を含む。これらの洗浄性表面活性剤
は当業界でよく知られており、その具体的な例はSchwar
tz,Perry and Berch“Surface Active Agents and Dete
rgents",VolI(1949)、Vol.II(1958)及びSchick,“N
onionic Surfactants",Vol.I(1967)に詳述されてい
る。
一般に、組成物は1〜50重量%、通常2〜30収量%、好
ましくは5〜25重量%の1つ又はそれ以上の洗浄性表面
活性剤を含む。
本発明の洗剤組成物は更に、常用の洗剤成分を常用の量
で含めることができる。該成分としてはビルダー成分で
あっても、非ビルダー成分であってもよいし、ゼロPタ
イプ(すなわち燐含有ビルダーを含まないもの)のもの
であってもよい。すなわち、同組成物は、1〜60重量
%、好ましくは5〜30重量%の1つ又はそれ以上の有機
及び/又は無機ビルダーを含有し得る。そのようなビル
ダーの典型例としては、アルカリ金属のオルト,ピロお
よびトリポリホスフエート,アルカリ金属の炭酸塩、こ
れらのいずれかと方解石、アルカリ金属のクエン酸塩、
アルカリ金属のニトリロトリアセテート、カルボキシメ
チルオキシサクシネート、ゼオライト、ポリアセタール
カルボキシレート等々との混合物などがある。更に、同
組成物は1〜35%の漂白剤又は漂白剤とその活性化剤と
からなる漂白システム(例えば過ホウ酸ナトリウムとテ
トラアセチルエチレンジアミン)を含んでもよい。
また、本発明組成物は、起泡剤、消泡剤、腐蝕防止剤、
汚れ懸濁剤、金属封鎖剤、汚れ再沈着防止剤、香料、染
料、酵素および漂白剤の安定化剤などを含むことも可能
である。リパーゼおよびプロテアーゼ以外の酵素、例え
ばアミラーゼ、オキシダーゼ、セルラーゼなどを含める
こともできる。
本発明組成物は所望の形態にすることができる。例えば
粉、バー、ペースト、液体などの形態である。
以下本発明を実施例に基づき説明する。
実施例1 下記条件下テルゴトメーター内で洗浄実験を行った。
洗浄時間と温度:14分、40℃(冷水で3回リンスす
る。) 洗剤組成物濃度:1.2g/l 水の硬度:16°FH 攪拌 :100rpm 供試布地:綿(AS 8/落花生オイル/ミルク粉で汚染) リパーゼ:Pseudomonas gladioliからの リパーゼ、Amano-Pリパーゼ、 Cepaciaリパーゼ(それぞれ 1LU/ml) プロテアーゼ濃度:アルカラーゼ(20GU/ml) 洗剤組成物の組成: 重量% 綿状ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム13.35 C12〜C13アルコール(6.5EO) 6.67 硫酸ナトリウム 炭酸ナトリウム 54.2 トリポリリン酸ナトリウム 9.01 ケイ酸ナトリウム 4.6 水酸化ナトリウム 1.66 カルボキシメチルセルロースナトリウム 0.5 Dequest 2006 1.9 香料、染料、水 十分量 供試布地の反射率は、光路上にUVフィルターを設け460n
mでリフレクトメーターにて測定した。供試布地上の脂
肪分の残留パーセントは、乾燥布地を石油エーテルで抽
出し、供試布地の重量損失量から脂肪分の量を求めた。
結果を次に示す。
実施例2 アルカラーゼ、カズサーゼおよび比較用としてエスペラ
ーゼ(Novo Industriの製品で等電点が10より大きいプ
ロテアーゼ)を用いて、実施例1を繰り返した。
実施例3 アルカリ性および強アルカリ性プロテアーゼの存在下、
洗濯機中供試布地に対するCepaciaリパーゼの活性を次
の洗剤組成物を用いて測定した。
重量部 ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム 8.5 7モルのエチレンオキシドと縮合させたC12〜C15の第1
級アルコール 4.0 硬化なたね油のナトリウム石鹸 1.5 トリポリリン酸ナトリウム 33.0 炭酸ナトリウム 5.0 ケイ酸ナトリウム 6.0 硫酸ナトリウム 20.0 水 9.0 蛍光物質、汚れ懸濁剤、染料、香料 少量 過ホウ酸ナトリウム 12.0 テトラアセチルエチレンジアミン(TAED)(粒状物)2.
0 蛋白質分解酵素(NOVO社製のサビナーゼ) 0.4 多段洗浄サイクル(MCSW)の4°洗浄結果 汚染:無機顔料、パーム油(A)および蛋白(カクテル
I(B))の混合物で汚染した綿 条件:5g/の洗剤成分 30分、30℃ 40°FH プロテアーゼ(20GU/ml) Cepaciaリパーゼ(1LU/ml) 3.5kgの汚染物負荷量;プロテアーゼの効果をモニター
するための単一洗浄モニターとしてのAS10 N:各MCSW実験の回数 エスペラーゼHAP Y:PI>10 アルカラーゼ カズサーゼ:PI<10 実施例4 アルカリ性および強アルカリ性プロテアーゼの存在下に
おける、洗濯機中での試供布地に対するCepaciaリパー
ゼの活性を実施例3の洗剤組成物を使用して測定した
(MCSWの4°洗浄結果)。
モニター シングル洗浄:AS10−(プロテアーゼ活性の
ため) マルチ洗浄:無機顔料、落花生油、蛋白質 (カクテルI)(無(A)、有
(B))で 汚染した綿の試供布地 条件 5g/l F.Skip 30分、30℃ 27°FH プロテアーゼ(20GU/ml) Cepaciaリパーゼ(1LU/ml) 3.5kg(汚染物質負荷量) 実施例5 実施例4を繰り返した。
条件‐汚染:落花生の代りにパーム油を使用 ‐Amano-Pリパーゼ:1LU/ml ‐Gladioliリパーゼ:1LU/ml 結果は次の通りであった。

Claims (4)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】非イオン性及び陰イオン性表面活性剤より
    なる、1〜50重量%の表面活性剤系と、0.1〜50GU/mgの
    プロテアーゼと、0.05〜100LU/mgのリパーゼとを含み、
    前記プロテアーゼが10.0以下の等電点を有し、前記リパ
    ーゼがクロモバクター ヴィスコサムの変異体であるリ
    ポリティカム(Chromobacter viscosumvar.lipolyticu
    m)NRRL B−3673から産生されるリパーゼの抗体と陽性
    の免疫学的交叉反応を示すものであることを特徴とする
    洗剤組成物(但し、プロテアーゼがアルカラーゼ(商
    標)でありかつリパーゼがPseudomonas cepaciaからの
    ものである洗剤組成物を除く。)。
  2. 【請求項2】プロテアーゼが9以下の等電点を有してい
    る特許請求の範囲第1項に記載の洗剤組成物。
  3. 【請求項3】プロテアーゼが7.4の等電点を有している
    特許請求の範囲第1項に記載の洗剤組成物。
  4. 【請求項4】リパーゼが、シュードモナス フルオレス
    センス(Pseudomonas fluorescens)、シュードモナス
    フラジャイ(Pseudomonas fragi)、シュードモナス
    ニトロレデュセンスの異性体であるリポリティカム
    (Pseudomonas nitroreducens var.lipolyticum)、シ
    ュードモナス セパシア(Pseudomonas cepacia)、シ
    ュードモナス グラジオリ(Pseudomonas gladioli)お
    よびクロモバクター ヴィスコサム(Chromobacter vis
    cosum)から産生され得る各リパーゼからなる群から選
    択される特許請求の範囲第1項に記載の洗剤組成物。
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