JP7515475B2 - 二重特異性コンジュゲート - Google Patents
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Description
本発明は、コンジュゲート-タグ複合体を形成するようにタグ部分に結合することができる第二の結合分子に、特にペプチド結合を含めた共有結合を介して結合された、CD40に特異的に結合することができる第一の結合分子を含む新規コンジュゲートに関する。タグ部分は抗原をさらに含むタグ構築物の一部として提供されてもよい。本発明は、斯かるタグ-抗原構築物を伴ったコンジュゲートの複合体、及び治療法における、特に癌治療のための、斯かる複合体の使用にさらに関する。
免疫応答を調節するモノクローナル抗体(mAbs)は、斯かる応答が持続的な腫瘍の根絶を提供するのに利用できる増強された兆候により、癌治療において高効率であると判明している。免疫チェックポイントCTLA-4及びPD-1を標的化した、異なる標的に対する様々な抗体が開発され、そしてそれが、例えば、T細胞性免疫性が癌の効果的な治療を提供するという考えを立証している。有望な臨床データもまた、抗原提示細胞(APC)上の共刺激受容体CD40に作動的に結合する免疫賦活mAbsを用いて得られた。
i)CD40を結合する第一の特異的結合分子、ここで、前記の第一の特異的結合分子はCD40の作動薬であり;及び
ii)タグ部分を結合する第二の特異的結合分子、
を含むコンジュゲートであって、
ここで、前記の第一の特異的結合分子と第二の特異的結合分子は、共有結合で連結されている、コンジュゲートを提供する。
i)CD40を結合する少なくとも1つの第一の特異的結合分子、ここで、前記の第一の特異的結合分子は、CD40の作動薬であり、かつ、抗体の抗原結合性ドメインを含む抗原結合性タンパク質であり;及び
ii)タグ部分を結合する少なくとも1つの第二特異的結合分子、ここで、前記タグ部分は癌抗原でない、
を含むコンジュゲートであって;
ここで、前記の第一の特異的結合分子と第二の特異的結合分子は、抗体の抗原結合性ドメインを含む抗原結合性タンパク質であり、かつ、互いに共有結合で連結されている、コンジュゲートを提供する。
先に述べたように、ある実施形態において、特異的結合分子は、以下でさらに記載するように、特異的結合タンパク質、特に抗原結合性タンパク質、すなわち、抗体ベースの分子である。特定の実施形態において、第一の特異的結合分子は抗体である。別の具体的な実施形態において、第二の特異的結合分子は一本鎖抗体構築物である。
これにより、複合体は、CD40及び抗原に対して向けられた特異的結合分子を含む。抗原は、癌抗原又は病原菌の抗原であってもよい。抗原はT細胞によって認識され得(より特に、抗原は、MHC分子で提示されるとき、T細胞のTCRによって認識され得る)、そしてT細胞は、複合体によって活性化又は刺激され得る。T細胞は、特にエフェクターT細胞、より特にCD4+又はCD8+T細胞であってもよい。
i)タグ部分;及び
ii)抗原、そして前記の抗原は、癌抗原又は病原菌由来の抗原であり、
を含み、
ここで、前記タグ部分が前記抗原に共有結合で連結される、
タグ構築物も提供する。
i)癌抗原でないタグ部分;及び
ii)抗原、癌抗原又は病原菌由来の抗原であるもの、
を含み、
ここで、前記抗原はポリペプチドであり、及び前記タグ部分は、前記抗原に共有結合により連結される、
タグ構築物を提供する。
別の実施形態において、抗原は抗原ポリペプチドである。或いは又はさらに、タグ部分はタグペプチドである。
以下の:
i)本明細書中に定義されるコンジュゲート;又は
ii)本明細書中に定義されるタグ構築物;又は
iii)本明細書中に定義される複合体、
を、少なくとも1つの医薬的に許容される担体若しくは賦形剤と一緒に含む医薬組成物もまた提供される。
i)本明細書中に定義される複合体、又は前記複合体を含む医薬組成物;又は
ii)本明細書中に定義されるコンジュゲート(又は前記コンジュゲートを含む医薬組成物)と本明細書中に定義されるタグ構築物(又は前記タグ構築物を含む医薬組成物)、
をそれを必要としている対象に投与することを含む。
i)本明細書中に定義される複合体、又は前記複合体を含む医薬組成物;又は
ii)本明細書中に定義されるコンジュゲート(又は前記コンジュゲートを含む医薬組成物)と本明細書中に定義されるタグ構築物(又は前記タグ構築物を含む医薬組成物)、
を前記対象に投与することを含む。
開示は、対象の癌を治療若しくは予防するのに使用するための、又は感染症を治療若しくは予防するのに使用するための薬剤の製造における本明細書中に定義される複合体の使用を更に提供する。同様に、開示は、対象の癌を治療若しくは予防するのに使用するための、又は感染症を治療若しくは予防するのに使用するための薬剤の製造における本明細書中に定義されるコンジュゲート及び本明細書中に定義されるタグ構築物の使用を提供する。
i)本明細書中に定義されるコンジュゲートと本明細書中に定義されるタグ構築物、ここで、前記タグ構築物は、前記TCRによって認識される抗原を含み;
ii)本明細書中に定義される複合体、ここで、前記複合体のタグ構築物は前記TCRによって認識される抗原を含む、
と抗原提示細胞(APC)とを接触させることを含む。
特に、斯かる方法は、前記T細胞と前記APCを接触させることを含む。
本発明は、第一がCD40に特異的であり及び第二がタグ部分に特異的である、一緒に共有結合される少なくとも2つの特異的結合分子を含む二重特異性コンジュゲートに関する。
(v)US2017/0137528に記載のある抗体SEA-CD40。この抗体のVH及びVLアミノ酸配列は配列番号54及び55でそれぞれ提示されている。
(i) (a)VH領域は、それぞれ配列番号17、18及び19に規定されるアミノ酸配列を含む(ある実施形態において、それらから成る)VHCDR1、2及び3を含み、及び
(b)VL領域は、それぞれ配列番号20、21及び22に規定されるアミノ酸配列を含む(ある実施形態において、それらから成る)VLCDR1、2及び3を含み;又は
(b)VL領域は、それぞれ配列番号34、35及び36に規定されるアミノ酸配列を含む(ある実施形態において、それらから成る)VLCDR1、2及び3を含み;又は
(iii) (a)VH領域は、それぞれ配列番号58、59及び60に規定されるアミノ酸配列を含む(ある実施形態において、それらから成る)VHCDR1、2及び3を含み、及び
(b)VL領域は、それぞれ配列番号61、62及び63に規定されるアミノ酸配列を含む(ある実施形態において、それらから成る)VLCDR1、2及び3を含み;又は
(b)VL領域は、それぞれ配列番号67、68及び69に規定されるアミノ酸配列を含む(ある実施形態において、それらから成る)VLCDR1、2及び3を含み;又は
(v) (a)VH領域は、それぞれ配列番号138、139及び140に規定されるアミノ酸配列を含む(ある実施形態において、それらから成る)VHCDR1、2及び3を含み、及び
(b)VL領域は、それぞれ配列番号141、142及び143に規定されるアミノ酸配列を含む(ある実施形態において、それらから成る)VLCDR1、2及び3を含み;又は
(b)VL領域は、それぞれ配列番号147、148及び149に規定されるアミノ酸配列を含む(ある実施形態において、それらから成る)VLCDR1、2及び3を含み;
任意選択によりここで、配列番号21のVLCDR2以外の前記CDR配列の1若しくは複数が1、2又は3つの配列修飾で修飾されているか、又はここで、配列番号21のVLCDR2が1又は2つの配列修飾で修飾されている。
別の実施形態において、抗原結合性タンパク質は、配列番号24、28、38、53、55又は57のうちのいずれか1つに提示されるアミノ酸配列、或いは配列番号24、28、38、53、55又は57と少なくとも70%の配列同一性を有する配列を含むVL領域を含む。
(a)配列番号23に提示されるアミノ酸配列又は配列番号23と少なくとも70%の配列同一性を有する配列を含むVH領域、並びに配列番号24に提示されるアミノ酸配列又は配列番号24と少なくとも70%の配列同一性を有する配列を含むVL領域;又は
(b)配列番号27に提示されるアミノ酸配列又は配列番号27と少なくとも70%の配列同一性を有する配列を含むVH領域、並びに配列番号28に提示されるアミノ酸配列又は配列番号28と少なくとも70%の配列同一性を有する配列を含むVL領域;又は
(d)配列番号52に提示されるアミノ酸配列又は配列番号52と少なくとも70%の配列同一性を有する配列を含むVH領域、並びに配列番号53に提示されるアミノ酸配列又は配列番号53と少なくとも70%の配列同一性を有する配列を含むVL領域;又は
(f)配列番号56に提示されるアミノ酸配列又は配列番号56と少なくとも70%の配列同一性を有する配列を含むVH領域、並びに配列番号57に提示されるアミノ酸配列又は配列番号57と少なくとも70%の配列同一性を有する配列を含むVL領域。
i)1つのscFvが、前記抗体のそれぞれの重鎖のCH3ドメインに結合されるか;又は
ii)1つのscFvが、前記抗体のそれぞれの軽鎖のCLドメインに結合される)
を含む。(i)のコンジュゲート構造は図6に示されている。
本明細書中に記載したキット又は組み合わせ製品が、さらに、取扱説明書を含んでもよい。
先に説明したように、コンジュゲート、したがって、複合体中に含まれるCD40結合剤は、CD40を作動することによって免疫系を活性化する。特に、T細胞が活性化され得る。その後の免疫応答は、腫瘍によるCD40発現に関係なく、隣接しているか又は接触可能な腫瘍細胞に対して抗癌効果を発揮する。そのため、複合体は、CD40陽性癌及びCD40陰性癌の両方に対して有効であり得る。
(i)対象からT細胞を得;
(ii)標的癌抗原を認識するT細胞を単離し、そして任意選択で、単離されたT細胞を増やし;
(iii)単離されたT細胞を対象に再注入し;そして
(iv)本発明の複合体を対象に投与すること;ここで、タグ構築物は標的癌抗原を含む、
を含む。同様に、ステップ(iv)では、対象は、本発明のコンジュゲートと本発明のタグ構築物を別々に投与される場合が或いはあるであろう。
(i)対象又はドナーからT細胞を得;
(ii)標的癌抗原を認識するTCRを発現するT細胞の遺伝子を組み換え、そして任意選択で、遺伝的修飾前又は後にT細胞を増やし;
(iii)遺伝子を組み換えたT細胞を対象に注入し;そして
(iv)本発明の複合体を対象に投与すること、ここで、タグ構築物は標的癌抗原を含む、
を含む。同様に、ステップ(iv)では、対象は、本発明のコンジュゲートと本発明のタグ構築物を別々に投与される場合が或いはあるであろう。
i)高親和性で相互作用するタグ部分と第二の特異的結合分子を同定し;
ii)(i)の第二の特異的結合分子、(i)のタグ部分を含むと本発明のタグ構築物及び抗原を含む本発明のコンジュゲートを選択し;そして
iii)(ii)のタグ構築物と(ii)のコンジュゲートとの組み合わせを対象に投与すること、
を含む方法を提供する。
本発明は、以下の実施例によってさらに例示されが、該実施例は、限定と理解されるべきものではない。
材料と方法
細胞
マウスClass I MHC H2との関連でオボアルブミンペプチドOVA257-264(SIINFEKL、配列番号1)を認識するTCRを発現するマウスT細胞ハイブリドーマであるB3Z(Karttunen et al., PNAS 89(13): 6020-6024, 1992)を、ペプチド添加とその後の抗原提示を評価するために使用した。B3Z細胞はIL-2プロモーターの制御下でβ-ガラクトシダーゼを発現し、これにより、T細胞活性化と増殖時に、酵素を発現する。β-ガラクトシダーゼは基質クロロフェノールレッド-β-D-ガラクトピラノシド(CPRG)を加水分解でき、そしてそれは、B3Z T-細胞活性化のレベルに対応する度合いで色の変化につながる。したがって、B3Z活性化は、分光測光で検出及び計測できる。
抗CD40抗体を、Drug Discovery and Development(DDD)Platform、SciLifeLab(Sweden)によって製造するか、又はCP-870,893やABS-1150/1151(或いは本明細書中でABS-1150と呼ばれるときもある)の利用可能な軽鎖及び重鎖配列に基づいてAbsolute抗体(UK)からカスタム購入した。9つの二重特異性抗CD40抗体と6つの親作動性ヒト抗CD40抗体を試験した。表1に使用した抗体を記述した。抗体をHEK293細胞で発現させ、プロテインAを使用したアフィニティークロマトグラフィーによって精製し、続いて、調製用サイズ排除クロマトグラフィー(SEC)によって精製した。エンドトキシン濃度は、LAL色素エンドトキシンアッセイで測定すると、<1 EU/mgであった。合成長ペプチド(SLP)を、Capra Science(Sweden)からカスタム購入した。表2に使用したSLPのアミノ酸配列を提供した。
成熟C57BL/6マウス及び雄Pmel-1トランスジェニックマウスを、Uppsala Biomedical Center(BMC, Uppsala, Sweden)の動物飼育施設にて飼育した。すべての動物実験が、Uppsala地域の動物倫理委員会によって承認された。
骨髄細胞を、成熟雌tghCD40マウス(Mangsbo et al., Clin Cancer Res; 21(5); 1115-1126, 2015)の大腿骨と脛骨から無菌状態下で単離した。tghCD40からのBMDCはヒトCD40を発現する。軟組織の除去後に、骨を70%のエタノール中で消毒し、次に、骨の骨端を切り開くことによって骨髄を露出させた。骨の中心部が白くなるまでIMDM培地を使用して、骨髄細胞を骨から洗い流した。細胞塊を、70μmの細胞濾過器に通して単一細胞の懸濁液を得た。細胞を遠心分離で洗浄し、次に、10%のDMSOを追加したFBS中で-160℃にて使用時まで凍結した。
骨髄前駆細胞の分化の8日後に、96ウェルTCTプレート内に1ウェルあたり1×105個の未成熟BMDCを平板培養した。抗CD40抗体(表1を参照のこと)を500~0.0064nMの範囲に及ぶ濃度にて各ウェルに添加した。BMDCを、20ng/mLのmGM-CSFを補充したIMDM培地中で48時間培養し、その後、上清を回収し、IL-12に対するELISAを実施して、様々な抗体の作動性刺激能力を算定した。正の対照として、IL-12 ELISAを、(抗体の代わりに)1μg/mlのLPSの存在下で上述のとおり培養したBMDCの上清に対して実施し;陰性対照として、ELISAをIMDM培地に対して実施した。試験を二重反復試験でおこなった。
骨髄前駆細胞の分化の8日後に、25,000個の未成熟BMDCを96ウェルTCTプレート内でウェル単位で平板培養した。先に記載した様々な抗CD40抗体のうちの1つと組み合わせて、125nM又は250nMのいずれかの濃度にてUU-05又はUU-10SLP(表2)を含む混合物を、未成熟BMDC培養物に加えた。24時間後に、ペプチド/抗体混合物を含有する上清を、採集し、そしてBMDCに対する最小限の侵害で予め加温したIMDMを用いた遠心分離によってウェルを二度洗浄した。
成熟雌C57BL/6マウス(18~20g重量)をインビボ抗原取り込みモデルに使用した。C57BL/6マウス群(1群あたり6~10匹のマウス)は、0日目に尾静脈注射によってPmel-1マウス(i.v.)からの11×106個の脾細胞、及び1×105個のtghCD40未成熟BMDC(右側足蹠注射)を受けた。1日目に、UU-30ペプチド(gp100(25-33)配列を含有、表2)と一緒の抗CD40抗体の様々な組み合わせを右側足蹠で注射して、インビボにおけるペプチド取り込みを調査した。72時間後に、脾臓及び右側膝窩リンパ節を摘出し、70μmの細胞濾過器を通過させて単一細胞の懸濁液を得た。Pmel-1細胞蓄積と活性化を、CD90.1(宿主T細胞で発現されていない類遺伝子性マーカー)を染色したフローサイトメトリーによって膝窩リンパ節で評価した。結果の統計解析を、Dunnettの多重比較検定を用いた一元配置ANOVAを使用して実施した。
以下のBiolegend(USA)製の蛍光標識抗体をフローサイトメトリー(クローン)に使用した:CD11c(N418)、CD11b(M1/70)、CD90.1(OX-7)、ICOS(C398.4A)、I-A/I-E(M5/114.15.2)、CD86(GL-1)。BD Biosciences(USA)製のhCD40(5C3)抗体もまた、フローサイトメトリーに使用した。フローサイトメトリー染色において、1~5×105個の細胞を、遠心分離によってフローサイトメトリーチューブ/プレート内でペレット化し、その後、抗体染色カクテルを細胞に添加した。細胞を4℃にて20分間インキュベートし、次に、1%のBSAを補充したPBSで洗浄した。細胞を、CytoFLEX Flow Cytometer(Beckman Coulter Life Science、USA)に流し込んだ。
ELISAプレートを、4℃にて一晩、精製抗マウスIL-12抗体(クローンC15.6、Biolegend)でコートした。プレートを、1%のBSAを補充したPBSでブロッキングし、その後、直線領域内の予想される読み出しのために好適な濃度に希釈した。培養上清をELISAプレートに加えた。その後、二次ビオチン化抗マウスIL-12(クローンC17.8、Biolegend)を加え、次に、ストレプトアビジン/HRP(Code No.P0397、Dako/Agilent, USA)を加え、そして、プレートを室温にて1時間インキュベートした。最後に、ELISA反応をTMB(34028, Sigma, USA)の添加によって進め、次に、反応を1MのH2SO4で停止させた。吸光度を450~570nmにて読み出した。
フローサイトメトリーからのデータを、FlowJoソフトウェア(FlowJo, LLC, USA)を使用して分析した。GraphPad Prism7(GraphPad Software, USA)を使用して、グラフをプロットし、そして統計解析を実施した。
破傷風毒素ペプチドライブラリ(103個のペプチド、WO2011/115483の表1に列挙した)を、以下の特性を有するαヘリックス構造のペプチドをスクリーニングするために使用した:
・良好な溶解性
・好ましくは、タグ配列に対する内因性抗体応答がない。
CD分光法を実施するために、着目のペプチドを50mMのリン酸ナトリウム、pH6で0.2mg/mlの濃度に溶解した。JASCO J-1500 CDスペクトロメーターを使用し、そして分析前と各分析の間に、キュベットを水ですすいだ。各ペプチドの間には、Hellmanex 2%をキュベットを洗浄するのに使用した。バッファーをベースラインの計測のために使用した。
ビオチン化ペプチドをストレプトアビジンプレート上にコートし、次に、ELISAプレートをBSA含有溶液でブロッキングした。ブロッキング後に、ペプチドを、様々な濃度にてジフテリア、破傷風及び百日咳に対するワクチン接種前及び後のドナーからの血清と共にインキュベートし、それに続いて、抗ヒトIgG HRP抗体を、ペプチドに結合するヒト抗体を検出するために使用した。アッセイをTMBを使用して進め、反応を停止させるために、H2SO4を使用する。
インビトロBMDCとT細胞の活性化
BMDCのインビトロ活性化を、以下の濃度範囲にて二重特異性、かつ、親モノクローン抗体を使用して評価した:0.0064nm、0.032nm、0.16nm、0.8nm、4nm、20nm、100nm及び500nm。
BMDCとT細胞のインビトロ活性化を、表1で列挙した10個の二重特異性抗体及び6つの対応する親モノクローナル抗体を使用して試験した。このインビトロ作業の結果を、以下の表3に規定する。
マウスには、先に記載したように、Pmel-1T細胞を投与し、続いて、抗原性ペプチドUU-30と組み合わせた抗CD40抗体を投与した。UU-30は、配列番号5が規定されるアミノ酸配列を有し、かつ、そのN末端に配列番号6のMTTE配列を含み、そしてそのC末端直近が、配列番号9に規定するアミノ酸配列を有するヒトgp100エピトープの断片である。このgp100断片は、マウスH2Db Class I MHCとの関連で、同じMHC関係で、マウスgp100(25-33)断片に特異性を有する、TCRを発現するPmel-1マウスT細胞によって認識される。配列番号9は、マウス側方ペプチドが両側に配置されたヒトgp100エピトープを含んで、加工後にマウスAPCによって提示され得る合成の長いペプチドを作り出す。
好適なタグペプチドを、好適なタグ配列を同定するためのTTxタンパク質の断片に関するライブラリをスクリーニングすることによって同定した。完全長のTTxタンパク質は、配列番号16、UniProtエントリP04958に規定されるアミノ酸配列を有する。好適なタグペプチドは、以下の特性を示すことが望ましい:良好な溶解性、α-ヘリカル構造、及びあらゆる内因性免疫に関連しない(すなわち、配列がB細胞エピトープを含んではならない)。先に記載したように実施したコンピュータによる分析では、4つの特定の推定タグペプチドを同定した:SM083P001(配列番号10、配列番号16の第609~630アミノ酸に対応する);SM083P002(配列番号11、配列番号16の第81~101アミノ酸に対応する);SM083P003(配列番号12、配列番号16の第285~309アミノ酸に対応する);SM083P004(配列番号13、配列番号16の第225~245アミノ酸に対応する)。
材料と方法
成熟雌C57BL/6マウス(18~20g重量)には、上記の実施例1に記載(「インビボ実験の設定」を参照のこと)のPmel-1マウス及びtghCD40未成熟BMDCからのCFSE(カルボキシフルオレセインスクシンイミジルエステル)標識脾細胞を投与した。1日目に、抗体とUU-30ペプチドの様々な組み合わせを、先に記載したように投与した。この実施例で使用する抗体は、Ab-2とBi-10であり、そしてそれを7.5pmol(低い、L);15pmol(中程度、M);及び22.5pmol(高い、H)の用量で投与した。UU-30ペプチドを18.75pmol(L)、37.5pmol(M)、及び56.25pmol(H)の用量で投与した。
Bi-10抗体は、UU-30においてペプチドタグを結合することができる二重特異性抗体であり;Ab-2抗体は親抗CD40抗体であり、これによりUU-30ペプチドを結合することができない。Bi-10とUU-30の同時投与は、排出と非排出領域リンパ節の両方におけるすべての用量でのペプチド単独投与と比較して、促進されたT細胞増殖をもたらし、その一方で、UU-30とAb-2の同時投与は、T細胞増殖においてまったく増大を引き起こさない(図7)。T細胞増殖における統計的に有意な増大は、低用量のペプチドとBi-10抗体を使用することで、排出領域リンパ節で見られ;そして、非排出領域リンパ節では、高用量のペプチド及びBi-10抗体を使用することで見られた。本発明によるタグ構築物と二重特異性抗体の同時投与は、これにより、抗原特異的T細胞の増殖を駆動する。
材料と方法
二重特異性抗体Bi-17はFITC-8scFvを含んでおり、そしてそれは、FITCを認識する。scFvは、抗CD40抗体の重鎖のC末端に位置している(すなわち、それはIgG2定常領域からC末端をコードする)。FITC-8scFvのアミノ酸配列は配列番号70に規定されている。
末梢血単核細胞(PBMC)を、製造業者のプロトコルに従って細胞密度勾配Ficoll(登録商標)Paque Premium(GE Healthcare)と一緒にSepMate(Stemcell Technologies)を使用したフィコール分離によって、健常ボランティアによって提供されたBuffy Coatsから単離した。更なるCD14単球分離を、MACSヒトCD14マイクロビーズ分離キット(Miltenyi Biotec)を使用することで実施した。単離したCD14+細胞を、細胞の未成熟樹状細胞への分化を駆動するために、10%のFBS、100IU/mlの1% ペニシリン/ストレプトマイシン、10mMのHEPES及び0.1mMのβ-メルカプトエタノール(Gibco)、並びに150ng/mlのhGM-CSF及び50ng/mlのhIL-4(Peprotech)を補充した完全RPMI GlutaMAX培地中で6日間培養した。培地の半分を2~3日毎に(新鮮な培地で)置換した。
CD14+細胞を6日間培養し、その後、単球由来樹状細胞(MoDC)を採集し、そして1×105細胞/ウェルを96ウェル平底組織培養プレート(Sarstedt)に播種した。ペプチドUU-44のみ(900nM)、抗体Bi-17のみ(300nM)又はペプチドUU-44(900nM)及び抗体Bi-17(300nM)を各ウェルに加え、そして、培養物をインキュベートした。ペプチドUU-44は配列番号71で規定されるアミノ酸配列を有する。FITCは、アミノヘキサン酸リンカーを介してペプチドのN末端に結合する。配列番号71はCMVタンパク質pp65(配列番号72)からのヒトHLA A2エピトープを含んでいる。
UU-44ペプチドを、黒色のヌンク製MaxiSorpプレート内にPBS+1%のBSAで300nMの濃度に希釈した。標的化抗体Bi-17を連続的に希釈した。蛍光を、485nMでの励起及び520nMでの発光を用いてFLUOstar Omegaを使用して計測した。ペプチドのみの蛍光を0時点、次に、抗体添加の2、5及び30分後に計測した。
150~600 nMにてBi-17は、 300nMのペプチドUU-44の蛍光シグナルを完全にクエンチした(図8)。これは、Bi17中の両方のscFvsが2つのUU-44ペプチドが二重特異性抗体ごとに結合されるのに十分な機能性及びバインドアップ(bind up)タグであることを示す。クエンチングは、経時的に維持される(ここでは最長30分まで計測した)。遊離ペプチドの過剰量が存在するとき、蛍光強度(Y軸)は予想のとおり計測できる。よって、Bi-17抗体の抗FITC scFvの結合はすべてのFITC蛍光シグナルをクエンチする。この相互作用は低nM範囲で存在する(Soderlind et al., Nature Biotechnology 18: 852-856, 2000)。
材料と方法
単球とT細胞をCMV陽性、HLA-A2陽性ドナーから得、そして、血液からPBMCを単離するために、製造業者のプロトコルに従ってフィコール分離を実施した。更なる分離において、CD14+単球陽性選択とT細胞陰性選択の両方のために、製造業者のプロトコルに従ってMACSビーズを使用した。CD14+単球を、hGM-CSF及びIL4の存在下で6日間培養し、そして、サイトカインを0、3及び5日目に添加した。
Tukeyの多重比較検定を用いた一元配置ANOVAを、UU-44、Bi-17及びUU-44/Bi-17群間の差の統計的有意性を評価するために使用した。
UU-44のCMV pp65エピトープに特異的なそれぞれの培養物中のT細胞の割合を図10に示す。データは、ペプチドUU-44のみ又は二重特異性抗体Bi17のみと免疫細胞のインキュベーションが、対照に対してpp65特異的T細胞の少しの増大ももたらさないことを示している。二重特異性抗体Bi17と組み合わせたペプチドUU-44と免疫細胞のインキュベーションは、pp65特異的T細胞の統計的に有意な増大を結果として生じ、そして、本発明のコンジュゲート/ペプチドコンジュゲートの使用が抗原特異的T細胞の増大を駆動することを実証した。
材料と方法
ヒトCD14+細胞を、先に記載のとおり、6日間で未成熟DCに分化させ、そして1×105細胞/ウェルの密度にて96ウェル組織培養プレート(Sarsedt)内に播種した。ABS-1150/1151クローンであるX-SM083-ab-1(IgG1)とX-SM083-ab-2(IgG2)を、LPSと非刺激細胞を伴って滴定範囲(3.9~500 nM)で使用して、抗体の作動特性とCD40発現に対するそれらの効果を調査した。
本発明の抗体によるその関与時のCD40の内在化が、標的細胞による抗原取り込みを確実にするために必要である。IgG1又はIgG2フォーマットのいずれかにおけるABS-1150/1151抗体を、ヒトMoDCを刺激すること、及び標的タンパク質表面発現に伴う、2つの抗体の作動活性を調査することに使用した。ABS-1150/1151抗体のIgG2サブタイプは、非刺激細胞に対するCD86発現の倍率変化に関して、CD86の上方制御におけるIgG1サブタイプ(図11Aを参照のこと)より優れていた。他の活性化/成熟化マーカーの発現及びIL12産生に関しても、類似の結果を得た(データ未掲載)。
材料と方法
ペプチドUU-30(配列番号5)をCapra Science(Sweden)から購入した。二重特異性抗体X-SM083-bi-9とX-SM083-bi-12(略してBi-9とBi-12)、及びそれらの対応親モノクローナル抗体対応物X-SM083-ab-1とX-SM083-ab-3(ab-1とab3)は、Drug DiscoveryとDevelopment Platform, SciLifeLab(Sweden)によって製造された(実施例1と表1を参照のこと)。マウス血漿(抗凝血物質としてK2EDTAを含有)をInnovative Research(USA)から購入した。LCグレードのアセトニトリル(ACN)とメタノール(MeOH)をMilliporeから入手した。MSグレードのギ酸(HCOOH)をVWRから入手した。タイプ1milliQ水(25℃にて18.2mΩ.cm, Millipore)を移動相の調製に使用した。
より大きいタンパク質へのペプチドの結合は、理論上、ペプチドの血清安定性を改善する場合がある。よって、本発明によるペプチドタグ構築物は、二重特異性ペプチドとの複合体との関連で改善された半減期を有する場合がある。マススペクトル法を使用することにより、我々は、T細胞エピトープとMTTEタグを含む、UU-30ペプチドが、ペプチドが非結合抗体と一緒に混合されただけであるときと比較して、二重特異性抗体と複合化されたときに血漿中で改善された半減期を有するかどうか評価した。
本発明による二重特異性抗体とUU-30の複合体化は、ペプチドが血漿中で遊離状態にあったときと比べ、ペプチドの半減期の有意な延長をもたらしたことがわかった(図12及び表5)。
実施例1で同定した潜在的タグペプチドSM083P001(配列番号10)、SM083P003(配列番号12)及びSM083P004(配列番号13)を試験して、血漿中でのそれらの安定性を測定した。
3つのペプチドをCapra Scienceから購入した。
マウス血漿(抗凝血物質K2EDTA含有)をInnovative Researchから購入したが、それに対して、ヒト血漿(クエン酸ナトリウム抗凝血物質含有)をUppsala大学病院から入手した。LCグレードのアセトニトリル(ACN)とメタノール(MeOH)をMilliporeから入手した。MSグレードギ酸(HCOOH)をVWRから取り寄せた。タイプ1milliQ水(25℃にて18.2mΩ.cm, Millipore)を移動相の調製に使用した。
図13及び表6に示したように、3つのペプチドすべてが、マウス及びヒト血漿中の両方で良好な半減期を実証し、そしてそれは、タグペプチドとしての本発明におけるそれらの使用を支持している。
ファージディスプレイ選択を実施して、潜在的タグペプチドSM083P001-5(配列番号10-14)を認識するscFvsを単離した。
Naiveライブラリからのファージディスプレイ選択
5つのビオチン化ペプチド抗原(SM083P001-0005、実施例1を参照のこと)に関して、ファージディスプレイを、以前に報告されたもの(Sall, A. et al., Protein Eng Des Sel 29, 427-437, 2016)と、設計及び構造が類似した2つの社内構築ヒト合成scFvファージライブラリーSciLifeLib1及びSciLifeLib2を利用した、4ラウンドの濃縮を使用して実施した。選択を、ストレプトアビジンコート常磁性粒子(Dynabeads M-280, ThermoFisher Scientific, #11206D)上にペプチドを固定することによって実施し、選択過程におけるステップの大部分を、自動化し、Kingfisher Flexロボットを用いて実施した。ラウンド1及び2におけるファージ-抗原インキュベーションステップの前に、非特異的又はストレプトアビジン結合剤を取り除くために、ファージストックをストレプトアビジンコートビーズにより事前選択した。抗原量を徐々に減少させ(濃度範囲200~50nM)、かつ、洗浄の回数と強度を増強することによって(5~10)、異なるラウンド間での選択圧を増強した。ファージの溶出をトリプシンを使用して実施した。回収したファージを、寒天平板上で37℃にて一晩(ラウンド1)又は溶液中で30℃にて一晩(ラウンド2~4)のいずれかでTop10F' E.コリ(E. coli)内で増殖させた。ファージストックを、過剰量のM13K07介助ファージ(New England Biolabs, #N0315S)を用いて感染させ、そしてIPTGの添加によってscFv発現を誘発することによって作製した。一晩培養物を、PEG/ NaCl沈殿させ、選択バッファー(PBS中の2%(w/v)のBSA、0.05%(v/v)のTween-20)で再懸濁して、次のラウンドの選択に使用した。
可溶性scFvの製造を可能にするために、それぞれの選択手順の第三及び第四ラウンドからファージミドDNAを単離した。プールでは、scFv断片をコードする遺伝子をスクリーニングベクター内にサブクローン化し、そして、C末端で三重FLAGタグ及びヘキサヒスチジン(His)タグを伴ったscFvの分泌のためのシグナルを提供した。それに続いて、構築物をTOP10 E.コリ内に形質転換した。それぞれの選択手順に関しては、ラウンド3及び4からの合計188個のコロニーを釣菌し、そして96ウェルプレート内で培養し、scFv(上清)を発現させて、結合について評価した。
選択したscFvの結合をまずELISAによって評価した。各クローンをその標的ペプチド及びストレプトアビジンに対して、すべて二重反復試験で試験した。PBSで1μg/mlに希釈したストレプトアビジンを、4℃にて一晩ポリスチレン384ウェルプレート(#Corning, 3700)上にコートした。ビオチン化ペプチドをPBT(PBS中、0.5%(w/v)のBSA、0.05%(v/v)のTween-20)中に加え、続いて、scFv(培養上清)を加えた。結合の検出は、西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)結合α-FLAG M2抗体と、それに続く発色基質Ultra TMB-ELISAとのインキュベーションによって可能になった。シグナル発生を1Mの硫酸の添加によって終止させ、そして吸光度は450nmにて計測した。ELISAで陽性と見なされたクローンを、DNA配列決定(GATC Biotech, Cologne Germany)にかけた。
それぞれの選択手順について同定されたすべての配列が独特なクローンを、二次ELISAスクリーンでさらに分析した。ここで、SM083P001、SM083P003及びSM083P004のN末端ペグ化ペプチド変異体への結合を評価した。加えて、scFvのサブセットに対して、ファージ選択と一次ELISAスクリーンで使用したストレプトアビジンの代わりにビオチン化ペプチドに関する捕獲表面としてニュートラアビジンを使用する三次ELISAで結合を分析した。
親和性測定を、選択したscFvのサブセットに対してBiacore T200バイオセンサ装置(GE Healthcare)により実施した。SM083P003とSM083P004ペプチドを、予め固定したストレプトアビジンを用いてセンサーチップSA上に捕獲した。1つのストレプトアビジン表面を修飾しないまま残し、そして基準表面として使用した。0.16~100nMの範囲に及ぶ、それぞれのscFvクローンと基準抗体の5倍希釈系列を、動作バッファーで調製し、続いて、チップ表面上に注射した。解離相に続いて、チップ表面を10mMのグリシンHCl、pH2.1を用いて再生した。ストレプトアビジンを固定した表面である基準表面の反応曲線を引き算することによって、scFvクローンの反応曲線センサーグラムを得た。Biacore T200 Evaluation3.1ソフトウェアを使用してデータを分析し、そして、動力学的パラメーターを計算し、そして1:1ラングミュア結合モデルを仮定した。
SM083P003(Y-SM083-p03-B06とC06)及びSM083P004(Y-SM083-p04-C04、D04、F04、G04及びH04)に特異的なScFv結合剤を、15-merのペプチドを使用して、詳細にエピトープマッピングした。SM083P003には25aaの長さがあるのに対して、SM083P004は21aaであった。しかしながら、さらなる修飾が抗体結合に影響することなく可能であるか調査するために、37aa領域に及ぶ1セットの15-merのペプチドを評価した。すなわち、SM083P003に特異的なscFvを、以下の配列DANLISIDIKNDLYEKTLNDYKAIANKLSQVTSCNDP(配列番号73)に見られるペプチドに対して分析し、その一方で、抗SM083P004を、TIGKSKYFQDPALLLMHELIHVLHGLYGMQVSSHEII(配列番号74)に見られるペプチドに対して評価した。下線を引いた領域はそれぞれSM083P003とSM083P004に対応しており、そして、これらを囲む配列は、破傷風毒素において天然に見られるものである。合計で、N末端ビオチン部分、C末端のグリシンアミドを担持し、及び1つのアミノ酸シフトでSM083P003とSM083P004を網羅する46個の15-merのペプチドを、JPT Peptide Technologies GmbH(Germany)から注文した(表7)。
Naiveライブラリからのファージディスプレイ選択と、それに続く結合スクリーン及び配列決定
SciLifeLib1及び2を使用した5つのペプチドSM083P001-0005に関して並行して、合計10回のファージ選択手順を実施した。188個のクローンを釣菌し、一次ELISAで10個の実績物のそれぞれから分析した。陽性クローンをSM083P002以外のすべてのペプチドについて同定した。その後の陽性クローンの配列決定を合計22個の独特なクローンをもたらした(表8及び9)。
同族のペプチドへの結合に関する結合速度定数(kd(M-1 s-1))、解離速度定数(kd(s-1))及び平衡解離(KD(M))を含めた動力学的パラメーターを、表面プラズモン共鳴法によって、
scFvのサブセットに関して計算した。結果を表10に示す。
15-merのペプチドのアレイに対するエピトープマッピングによって、9~15aa長のウィンドウに対してscFvのエピトープをマッピングすることが可能であった(表11)。同族ペプチド及びより短い15-merのペプチドに対する相対的親和性を計算しなかったが、これはペプチドトリミングが可能であることを示している。
材料と方法
8週齢の雄B6.Cg-Thy1a/Cy Tg(TcraTcrb)8Rest/Jマウス(本明細書中でpmelマウスと呼ばれる)をインビボ腫瘍実験に使用した。マウスをUppsala Biomedicalセンターの動物飼育施設で飼育し、そして動物実験はUppsala動物試験倫理委員会、Uppsala, Swedenによって承認された。
図14に示したように、腫瘍接種後20日までに、ペプチドUU-30のみを用いてワクチン接種したマウスは400mm3超の平均体積の腫瘍を発症した。Bi-10と組み合わせたペプチドUU-30を用いてワクチン接種したマウスはたった約100mm3しかない平均体積の腫瘍を発症した。これは、本発明によるワクチン接種が抗腫瘍性免疫応答を刺激するのに有効であることを示している。
材料と方法
小規模生産と精製
IBIIICI及び14GIIICIIクローンのVH及びVLドメインの配列を、ハイブリドーマ細胞の配列決定によって得た(Absolute Antibody, Cleveland, UKによって実施)。
グリシン-セリンリンカー((Gly4Ser)4)を介して、抗体の重鎖の可変ドメインを軽鎖の可変ドメインに融合することによって、対応するscFv構築物を作り出した(配列番号47及び48)。scFv遺伝子をスクリーニングベクター内にサブクローン化し、C末端に三重FLAGタグ及びとヘキサヒスチジン(His)タグを伴ったscFv分泌のためのシグナルを提供した。scFv遺伝子の合成及びサブクローニングをGenScript(Piscataway, NJ, USA)に外注した。それに続いて、構築物をTOP10 E.コリ内に形質転換した。溶解細胞の細菌上清を、重力流下で固定化金属アフィニティークロマトグラフィー(IMAC)を使用してNi-NTA精製し、そしてPBSにバッファー交換した。精製scFv断片を、還元条件下のゲル電気泳動によって分析して、純度と完全性を測定した。
scFvクローンの親和性測定を、Biacore T200(GE Healthcare)を使用したSPRによって実施した。NHS-EDC化学反応を使用した一級アミンカップリングによってα-FLAG M2抗体をCM5 Sチップ上に固定し、それらのFlagタグによるscFvsの捕獲を可能にした。5つの異なる濃度(0.16nM~100nM)のビオチン化MTTE-ペプチド(配列番号6)から成る5倍希釈系列をフローセル中に連続して注射して、捕獲scFv断片に結合できるようにした。陰性対照として、スクランブルMTTE配列を同様に注射した。酸性条件下、pH2.2にて10mMのグリシン-HClを使用することで表面の再生を達成した。
得られた単一サイクルの動力学的データを1:1ラングミュア結合モデルに当てはめ、そして動力学的パラメーター、ka(1/Ms)、kd(1/s)及びKD(M)をソフトウェアBIAevaluationを使用して検索した。
小規模生産と精製
細菌に発現させ、そして精製したscFv断片のゲル電気泳動では、予想された分子量のscFvに対応する1つの主要タンパク質バンドにより高い純度を示した(データ未掲載)。
単一サイクルの動力学的アプローチを、MTTEペプチドに結合するIBIIICI-b及び14GIIICII-bの、結合速度定数(kd(M-1 s-1))、解離速度定数(kd(s-1))及び平衡解離(KD(M))を含めた動力学的パラメーターを測定するのに使用した。結果を表12に示す。スクランブル陰性対照ペプチドへの結合は検出できなかった(未掲載)。
Claims (31)
- i)CD40に結合する少なくとも1つの第一の特異的結合分子、ここで、前記の第一の特異的結合分子は、CD40の作動薬である;及び
ii)タグ部分に結合する少なくとも1つの第二特異的結合分子、ここで、前記タグ部分はペプチドでありかつ癌抗原でなく、前記ペプチドは配列番号6又は10~14のいずれか1つに記載のアミノ酸配列、または少なくとも5個のアミノ酸の配列番号6又は10~14のいずれか1つの断片を含む;
を含むコンジュゲートであって;
前記の第一の特異的結合分子と第二の特異的結合分子が、抗体の抗原結合性ドメインを含む抗原結合性タンパク質であり、かつ、共有結合で連結されている、コンジュゲート。 - 前記第一の特異的結合分子が:
(i)抗体のFc領域をさらに含み;及び/又は
(ii)二価であり;及び/又は
(iii)モノクローナル抗体であり;及び/又は
(iv)モノクローナル抗体のF(ab')2断片であり;及び/又は
(v)ヒトCD40に結合し、かつ、ヒトCD40の作動薬である、
請求項1に記載のコンジュゲート。 - 前記第一の特異的結合分子が、IgGアイソタイプの抗体である、請求項1又は2に記載のコンジュゲート。
- 前記第一の特異的結合分子がIgG2アイソタイプの抗体である、請求項3に記載のコンジュゲート。
- 前記第一の特異的結合分子が:CP-870,893、APX005M、ADC-1013、ChiLob 7/4、SEA-CD40及びABS-1150/1151から選択される抗体であるか、又は前記抗体のいずれか1つの抗原結合性ドメインを含む抗体である、請求項3又は4に記載のコンジュゲート。
- 前記第二の特異的結合分子がscFvである、請求項1~5のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
- 前記第一の特異的結合分子及び前記第二の特異的結合分子がともに、ヒトのものであるか、又はヒト化されている、請求項1~6のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
- 前記第二の特異的結合分子が、前記第一の特異的結合分子の軽鎖又は重鎖に共有結合により連結される、請求項1~7のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
- 前記コンジュゲートが、1つの第一の特異的結合分子及び2つの第二の特異的結合分子を含み、
前記1つの第一の特異的結合分子は抗体であり、
前記2つの第二の特異的結合分子はscFvsであり、かつ:
i)1つのscFvが、前記抗体のそれぞれの重鎖のCH3ドメインに結合されるか;又は
ii)1つのscFvが、前記抗体のそれぞれの軽鎖のCLドメインに結合される、請求項8に記載のコンジュゲート。 - 前記タグ部分がヒトB細胞エピトープを含まない、請求項1~9のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
- 前記タグ部分がB細胞エピトープを含む、請求項1~9のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
- 前記B細胞エピトープが非ヒトB細胞エピトープである、請求項11に記載のコンジュゲート。
- 前記ペプチドが、人工的なアミノ酸若しくは非天然のアミノ酸配列を含むか、又は哺乳類のタンパク質では見られないアミノ酸配列から成る、請求項1~12のいずれか1項に記載のコンジュゲート。
- 前記ペプチドが、非ヒトアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む、請求項1~12のいずれか1項に記載のコンジュゲート。
- 請求項1~14のいずれか一項に記載のコンジュゲートとタグ構築物を含む複合体であって、前記タグ構築物が抗原に共有結合で結合されたタグ部分を含み、ここで、前記タグ構築物のタグ部分が、第二の特異的結合分子に非共有結合で結合されており、かつ、前記タグ部分が請求項1又は11~14のいずれか一項に定義されるとおりのものである、複合体。
- 前記抗原が癌抗原である、請求項15に記載の複合体。
- 前記癌抗原が、新生抗原、腫瘍関連抗原又は腫瘍ウイルス由来の抗原である、請求項16に記載の複合体。
- 前記抗原が病原菌由来である、請求項15に記載の複合体。
- i)癌抗原でなく、配列番号6又は10~14のいずれか1つに記載のアミノ酸配列、または少なくとも5個のアミノ酸の配列番号6又は10~14のいずれか1つの断片を含むタグ部分;及び
ii)癌抗原又は病原菌由来の抗原;
を含むタグ構築物であって、
前記抗原はポリペプチドであり、かつ、前記タグ部分は、前記抗原に共有結合で連結される、タグ構築物。 - 前記タグ部分が、請求項11~14のいずれか一項に定義されるとおりのものである、請求項19に記載の構築物。
- i)請求項1~14のいずれか一項に記載のコンジュゲート;又は
ii)請求項19又は20に記載のタグ構築物;又は
iii)請求項15~18のいずれか一項に記載の複合体;
及び少なくとも1つの医薬的に許容される担体又は賦形剤、を含む医薬組成物。 - 請求項1~14のいずれか一項に記載のコンジュゲートと請求項19又は20に記載のタグ構築物を含むキット。
- 治療法における使用のための、請求項15~18のいずれか一項に記載の複合体又は請求項22に記載のキット。
- 治療法における別々の、同時の、又は連続した使用のための組み合わせ調製物として、請求項1~14のいずれか一項に記載のコンジュゲートと請求項19又は20に記載のタグ構築物を含む製品。
- 癌の治療又は予防における使用のための、請求項15~17のいずれか一項に記載の複合体。
- 癌の治療又は予防における使用のための、請求項22に記載のキット。
- 癌の治療又は予防における使用のための、請求項24に記載の製品。
- 感染症の治療又は予防における使用のための、請求項18に記載の複合体。
- 感染症の治療又は予防における使用のための、請求項22に記載のキット。
- 感染症の治療又は予防における使用のための、請求項24に記載の製品。
- 抗原を認識するTCRを発現するT細胞を活性化するインビトロ又はエクスビボの方法であって、
i)請求項1~14のいずれか一項に記載のコンジュゲートと請求項19又は20に記載のタグ構築物、ここで、前記タグ構築物が、前記TCRによって認識される抗原を含む;又は
ii)請求項15~18のいずれか一項に記載の複合体、ここで、前記複合体のタグ構築物が、前記TCRによって認識される抗原を含む、
と抗原提示細胞を接触させることを含む、方法。
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JP2015513314A (ja) | 2012-01-20 | 2015-05-07 | ジェノセア バイオサイエンシーズ, インコーポレイテッド | ストレプトコッカス・ニューモニエ(Streptococcuspneumoniae)に対する融合抗原ワクチンおよび組成物 |
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