JP6663772B2 - レーザ走査型顕微鏡 - Google Patents

Description

本発明は、レーザ走査型顕微鏡に関するものである。

従来、透過観察や落射観察を行うレーザ走査型顕微鏡が知られている（例えば、特許文献１参照。）。透過観察や落射観察を行うレーザ走査型顕微鏡は、標本からの蛍光以外の光、例えば蛍光灯からの光などが標本の上方から光検出器に入射するのを防止するため、レーザ走査型顕微鏡を暗室内に設置したりレーザ走査型顕微鏡全体を暗箱で覆ったりして、暗い観察環境下で使用される。

特開平６−１６７６５４号公報

しかしながら、従来のレーザ走査型顕微鏡のように、暗室や暗箱などの暗い観察環境下で使用するのでは、レーザ走査型顕微鏡の操作部や標本をユーザが視認し難く、観察のための操作や標本の交換などが困難という問題がある。

本発明は上述した事情に鑑みてなされたものであって、観察時の操作性を向上して、標本の上方から外部の光が入射するのを防ぐことができるレーザ走査型顕微鏡を提供することを目的としている。

上記目的を達成するために、本発明は以下の手段を提供する。
本発明は、標本を載置するステージと、該ステージの下方に配置され、光源からのレーザ光を前記標本上に集光する対物レンズと、該対物レンズにより集光されるレーザ光を前記標本上で走査させるスキャナと、前記対物レンズとは前記ステージを挟んで反対側に配置され、前記対物レンズによってレーザ光が照射されることにより前記標本において透過側に発生する観察光を集光するコンデンサレンズと、該コンデンサレンズによって集光された前記観察光を検出する透過検出器と、前記コンデンサレンズと前記ステージとの間の光路上に配され、前記標本の上方から前記ステージを介して前記コンデンサレンズに入射する外部の光を遮断する遮光カバーとを備え、該遮光カバーが前記コンデンサレンズに固定され、かつ、前記遮光カバーに前記観察光を通過させる開口が設けられているレーザ走査型顕微鏡を提供する。

本発明によれば、例えば蛍光灯の光など、標本の上方からステージを通過して対物レンズに入射したりステージで反射されてコンデンサレンズに入射したりする外部の光が遮光カバーにより遮断される。したがって、レーザ走査型顕微鏡を暗室内で使用したり暗箱で覆って使用したりする必要がなく、観察時の操作性を向上して、標本の上方からの外部の光の入射を防ぐことができる。

上記発明においては、前記遮光カバーが前記コンデンサレンズに着脱可能に取り付けられ、該コンデンサレンズにおける前記遮光カバーの取付位置が前記コンデンサレンズの光軸方向に変更可能であってもよい。

このように構成することで、遮光カバーをステージにて支持する必要がなく、操作性を向上することができる。また、コンデンサレンズを移動させる際に遮光カバーも一緒に移動するので、標本の交換を容易にすることができる。この場合において、光軸方向のコンデンサレンズの位置に合わせて、コンデンサレンズの光軸方向における遮光カバーの取付位置を調節することにより、ステージから遮光カバーまでの光軸方向の距離を適切に保ち、遮光カバーによる標本の上方からの外部の光の遮断効率を維持することができる。

上記発明においては、前記遮光カバーが、前記ステージに載置された前記標本の上方で位置決めされる非可動部と、該非可動部に対して移動して前記標本の上方に開放された空間を形成可能な可動部とを備えることとしてもよい。
このように構成することで、標本を交換する際には、遮光カバーの可動部により標本の上方に開放された空間を形成して、標本の交換作業を容易にすることができる。

上記発明においては、前記遮光カバーが、前記コンデンサレンズの光軸に交差する方向に延びる鍔部を有し、該鍔部の幅寸法が、以下の条件式を満たすこととしてもよい。
Ｒ≧ｒ_Ｏ＋Ｌ_ＯｔａｎΘ_Ｏ
ここで、Ｒは遮光カバーの鍔部の幅寸法、ｒ_Ｏは対物レンズの口径半径、Ｌ_Ｏは対物レンズと遮光カバーとの間の光軸方向の距離、Θ_Ｏは対物レンズの開口角である。

落射観察において、標本の上方からステージを通過した外部の光が対物レンズに入射すると、その光が光検出器により検出されてしまう。遮光カバーの鍔部の幅寸法が上記条件式を満たすことで、落射観察時に、外部の光が標本の上方からステージを通過して対物レンズに入射するのを遮光カバーにより確実に防ぐことができる。

上記発明においては、前記遮光カバーが、前記コンデンサレンズの光軸に交差する方向に延びる鍔部を有し、該鍔部の幅寸法が、以下の条件式を満たすこととしてもよい。
Ｒ≧ｒ_Ｃ＋２Ｌ_ＣｔａｎΘ_Ｃ
ここで、Ｒは遮光カバーの鍔部の幅寸法、ｒ_Ｃはコンデンサレンズの口径半径、Ｌ_Ｃはステージと遮光カバーとの間の光軸方向の距離、Θ_Ｃはコンデンサレンズの開口角である。

透過観察において、標本の上方からステージにおいて反射された外部の光がコンデンサレンズに入射すると、その光が光検出器により検出されてしまう。遮光カバーの鍔部の幅寸法が上記条件式を満たすことで、透過観察時に、外部の光が標本の上方からステージにより反射されてコンデンサレンズに入射するのを遮光カバーにより確実に防ぐことができる。

上記発明においては、前記コンデンサレンズを挟んで前記ステージとは反対側に配され、前記コンデンサレンズの光軸の周囲を覆う遮光性を有する筒形状の遮光筒部材を備えることとしてもよい。
このように構成することで、透過観察において、標本の上方からコンデンサレンズにより反射されて検出されてしまう外部の光を遮光筒部材により遮断することができる。したがって、透過観察時における標本の上方からの外部の光の入射をより確実に防ぐことができる。

上記発明においては、前記遮光筒部材が光軸方向に伸縮可能であってもよい。
このように構成することで、光軸方向のコンデンサレンズの位置に合わせて遮光筒部材の光軸方向の長さを調節することにより、遮光筒部材による標本の上方からの外部の光の遮断効率を維持することができる。

本発明によれば、観察時の操作性を向上して、標本の上方から外部の光が入射するのを防ぐことができるという効果を奏する。

本発明の一実施形態に係るレーザ走査型顕微鏡を示す概略構成図である。 図１のレーザ走査型顕微鏡における顕微鏡本体の拡大図である。 図２の遮光カバーおよび遮光筒部材を示す斜視図である。 （ａ）はコンデンサレンズに近接した位置に遮光カバーを固定した状態を示す側面図であり、（ｂ）は（ａ）よりもコンデンサレンズから離した位置に遮光カバーを固定した状態を示す側面図である。 落射観察を行う場合は、遮光カバーの鍔部の幅寸法の条件式を説明する側面図である。 透過観察を行う場合は、遮光カバーの鍔部の幅寸法の条件式を説明する側面図である。 図３の遮光筒部材の縦断面図である。 図２のレーザ走査型顕微鏡から遮光カバーと遮光筒部材を外した顕微鏡本体の拡大図である。 遮光カバーの他の一例を示す斜視図である。 （ａ）は本発明の一実施形態の変形例に係る遮光カバーの非可動部と可動部とを周方向全体に配置した状態を示す斜視図であり、（ｂ）は非可動部と可動部を軸方向に重ね合わせた状態を示す斜視図である。 図１０（ａ）の遮光カバーの縦断面図である。 （ａ）は顕微鏡本体に装着した遮光カバーの非可動部と可動部とを周方向全体に配置した状態を示す斜視図であり、（ｂ）は顕微鏡本体に装着した遮光カバーの非可動部と可動部を軸方向に重ね合わせた状態を示す斜視図である。

本発明の一実施形態に係るレーザ走査型顕微鏡について図面を参照して以下に説明する。
本実施形態に係るレーザ走査型顕微鏡１は、図１に示されるように、倒立型の顕微鏡であり、顕微鏡本体３と、顕微鏡本体３に接続された落射観察用の光電子増倍管のような外部落射検出器５と、顕微鏡本体３に接続された透過観察用の光電子増倍管のような透過検出器７とを備えている。

顕微鏡本体３は、内部検出器等（いずれも図示略）を有する観察ユニット１１と、標本Ｓを載置するステージ１３と、ステージ１３を挟んで互いに鉛直方向に対向配置させられる対物レンズ１５およびコンデンサレンズ１７と、図示しないレーザ光源から発せられたレーザ光を対物レンズ１５に向けて反射するダイクロイックミラー１９と、レーザ光が照射されることによりステージ１３上の標本Ｓにおいて対物レンズ１５側に発生する蛍光等の観察光を外部落射検出器５に向けて反射する反射ミラー２１と、レーザ光が照射されることによりステージ１３上の標本Ｓにおいてコンデンサレンズ１７側に発生する蛍光や透過光（レーザ光）等の観察光を透過検出器７に向けて反射する反射ミラー２３とを備えている。

透過検出器７、コンデンサレンズ１７および反射ミラー２３は、顕微鏡本体３の鉛直方向に延びる透過支柱２５により支持され、それぞれステージ１３よりも上方に配置されている。

観察ユニット１１には、レーザ光源（図示略）から発せられたレーザ光を２次元的に走査させるガルバノミラーのようなスキャナと、レーザ光が照射された標本Ｓからスキャナを介してレーザ光の光路を戻る蛍光の通過を制限するピンホールと、ピンホールを通過した蛍光を検出する光電子増倍管のような内部検出器とが備えられている。

レーザ光源としては、例えば、半導体レーザのような１光子励起観察用の可視レーザ光を発生する連続レーザ光源と、２光子励起観察用のパルス状の近赤外レーザ光を射出するパルスレーザ光源とが用いられるようになっている。これら連続レーザ光源やパルスレーザ光源は、観察ユニット１１に対して、例えば、レーザ光を直接導入するかまたはレーザ光をファイバにより導入させるようになっている。
ピンホールは、対物レンズ１５の瞳位置と共役な位置に配置されており、標本Ｓにおける対物レンズ１５の焦点位置において発生した蛍光のみを通過させることができるようになっている。

対物レンズ１５は、ステージ１３の下方に鉛直上方を向いて配置されている。この対物レンズ１５は、レーザ光源から観察ユニット１１のスキャナとダイクロイックミラー１９等を介して入射されるレーザ光をステージ１３上の標本Ｓに下方から照射する一方、標本Ｓにおいて発生してレーザ光の光路を戻る蛍光（観察光）を集光するようになっている。

コンデンサレンズ１７は、ステージ１３の上方に鉛直下方を向いて配置され、透過支柱２５に設けられた上下移動機構２７により透過支柱２５に沿って移動可能に支持されている。このコンデンサレンズ１７は、対物レンズ１５によりステージ１３上の標本Ｓに下方からレーザ光が照射されることにより標本Ｓを透過する側に発生する透過光や蛍光（いずれも観察光）を集光するようになっている。また、コンデンサレンズ１７は、光軸に沿って鉛直下方に突出する筒形状の突部１７ａを有している。

ダイクロイックミラー１９は、レーザ光源から発せられて観察ユニット１１のスキャナにより走査されたレーザ光を対物レンズ１５に向けて反射する一方、対物レンズ１５により集光されてレーザ光の光路を戻る標本Ｓからの蛍光を観察ユニット１１のスキャナを介して内部検出器に入射する光路と、反射ミラー２１を介して外部落射検出器５に入射する光路とに分岐するようになっている。また、ダイクロイックミラー１９は、全反射ミラー（図示略）と共にターレット（図示略）により支持されている。

ターレットは、レーザ光の光路上にダイクロイックミラー１９と全反射ミラーとを択一的に配置することができるようになっている。
全反射ミラーは、ターレットによってレーザ光の光路上にダイクロイックミラー１９に代えて配置されることにより、レーザ光源から発せられて観察ユニット１１のスキャナにより走査されたレーザ光を対物レンズ１５に向けて反射する一方、対物レンズ１５により集光されてレーザ光の光路を戻る標本Ｓからの蛍光を観察ユニット１１に向けて反射するようになっている。

また、このレーザ走査型顕微鏡１には、図２に示すように、標本Ｓの上方からステージ１３を介して対物レンズ１５またはコンデンサレンズ１７に入射する外部の光を遮断可能な遮光性を有する遮光カバー３１と、標本Ｓの上方からコンデンサレンズ１７により反射されて透過検出器７に入射する外部の光を遮断可能な遮光性を有する遮光筒部材３７とが備えられている。

遮光カバー３１は、コンデンサレンズ１７とステージ１３との間の光路上に配置されている。この遮光カバー３１は、図３に示すように、コンデンサレンズ１７に着脱可能な筒形状の取付部３３と、取付部３３から径方向に延びる鍔部３５とを有している。

取付部３３は、図４（ａ），（ｂ）に示すように、コンデンサレンズ１７の突部１７ａを嵌合した状態で、固定ネジ３４により突部１７ａに固定されるようになっている。これにより、遮光カバー３１をステージ１３に固定する必要がないので、標本Ｓの交換などの操作性を向上することができる。また、上下移動機構２７によりコンデンサレンズ１７をステージ１３から透過支柱２５に沿って離間させた場合に、コンデンサレンズ１７と共に遮光カバー３１も移動するので、ステージ１３の上方に空間を確保して標本Ｓの交換を容易にすることができる。

また、取付部３３は、固定ネジ３４による固定位置を突部１７ａの長手方向にずらすことができるようになっている。これにより、図４（ａ），（ｂ）に示すように、コンデンサレンズ１７における遮光カバー３１の取付位置をコンデンサレンズ１７の光軸方向に変更することができるようになっている。これにより、標本Ｓの高さに対応することができる。図４（ａ）は遮光カバー３１をコンデンサレンズ１７に近接させた位置で固定した状態、すなわち遮光カバー３１をステージ１３から離間させた位置で固定した状態を示し、図４（ｂ）は遮光カバー３１をコンデンサレンズ１７から離間させた位置で固定した状態、すなわち遮光カバー３１をステージ１３に近接させた位置で固定した状態を示している。

鍔部３５は、例えば、図３に示すように、取付部３３の周囲に略矩状に広がる形状を有している。
落射観察を行う場合は、図５に示すように、鍔部３５の幅寸法が下記の条件式（１）を満たすことが好ましい。
Ｒ≧ｒ_Ｏ＋Ｌ_ＯｔａｎΘ_Ｏ・・・（１）
ここで、Ｒは遮光カバー３１の鍔部３５の幅寸法、ｒ_Ｏは対物レンズ１５の口径半径、Ｌ_Ｏは対物レンズ１５と遮光カバー３１との間の光軸方向の距離、Θ_Ｏは対物レンズ１５の開口角である。

遮光カバー３１の鍔部３５の幅寸法が条件式（１）を満たすことで、落射観察時に、外部の光が標本Ｓの上方からステージ１３を通過して対物レンズ１５に入射するのを遮光カバー３１により確実に防ぐことができる。

一方、透過観察を行う場合は、図６に示すように、鍔部３５の幅寸法が下記の条件式（２）を満たすことが好ましい。
Ｒ≧ｒ_Ｃ＋２Ｌ_ＣｔａｎΘ_Ｃ・・・（２）
ここで、ｒ_Ｃはコンデンサレンズ１７の口径半径、Ｌ_Ｃはステージ１３と遮光カバー３１との間の光軸方向の距離、Θ_Ｃはコンデンサレンズ１７の開口角である。

遮光カバー３１の鍔部３５の幅寸法が条件式（２）を満たすことで、透過観察時に、外部の光が標本Ｓの上方からステージ１３により反射されてコンデンサレンズ１７に入射するのを遮光カバー３１により確実に防ぐことができる。
落射観察と透過観察の両方に遮光カバー３１を適用させる場合は、条件式（１），（２）のうち、鍔部３５の幅寸法Ｒが大きい方を満たすことが好ましい。

遮光筒部材３７は、図２に示すように、コンデンサレンズ１７を挟んでステージ１３とは反対側に配置されている。具体的には、遮光筒部材３７は、透過支柱２５に取り付けられて、コンデンサレンズ１７と反射ミラー２３との間に配置されている。この遮光筒部材３７は、図７に示すように、入れ子構造の小径の筒部材３９Ａと大径の筒部材３９Ｂとにより構成されて、光軸方向（筒部材３９Ａおよび筒部材３９Ｂの中心軸方向）に伸縮可能に形成されている。

このように構成されたレーザ走査型顕微鏡１の作用について説明する。
本実施形態に係るレーザ走査型顕微鏡１により、ステージ１３上の標本Ｓを連続レーザ光源および内部検出器を用いて落射観察する場合は、ターレットによりレーザ光の光路上にダイクロイックミラー１９に代えて全反射ミラーを配置し、連続レーザ光源から可視レーザ光を発生させる。

連続レーザ光源から発せられた可視レーザ光は、観察ユニット１１のスキャナにより走査された後、全反射ミラーにより反射されて対物レンズ１５により標本Ｓに照射される。可視レーザ光が照射されることにより標本Ｓにおいて発生した蛍光の内、対物レンズ１５により集光された蛍光（観察光）は、全反射ミラーにより反射されて可視レーザ光の光路を戻り、スキャナを介してピンホールを通過して内部検出器により検出される。

次に、ステージ１３上の標本Ｓをパルスレーザ光源および外部落射検出器５を用いて落射観察する場合は、ターレットによりレーザ光の光路上に全反射ミラーに代えてダイクロイックミラー１９を配置し、パルスレーザ光源からパルス状の近赤外レーザ光を発生させる。

パルスレーザ光源から発せられた近赤外レーザ光は、観察ユニット１１のスキャナにより走査された後、ダイクロイックミラー１９により反射されて対物レンズ１５により標本Ｓに照射される。近赤外レーザ光が照射されることにより標本Ｓにおいて発生した蛍光の内、対物レンズ１５により集光された蛍光（観察光）は、ダイクロイックミラー１９を透過して反射ミラー２１により反射された後、外部落射検出器５により検出される。

これら落射観察の場合において、例えば、図８に示すように、顕微鏡本体３から遮光カバー３１を外すと、蛍光灯の光など、標本Ｓの上方からの外部の光がステージ１３を通過して対物レンズ１５に入射してしまう。

これに対し、図２に示すように、顕微鏡本体３に遮光カバー３１を装着することで、標本Ｓの上方からステージ１３を通過して対物レンズ１５に入射する外部の光が遮光カバー３１により遮断される。したがって、落射観察時に、外部からの光が観察光の光路に入射して内部検出器や外部落射検出器５により検出されてしまうことを防ぐことができる。

次に、ステージ１３上の標本Ｓを連続レーザ光源やパルスレーザ光源と透過検出器７により透過観察する場合は、ターレットによりレーザ光の光路上に全反射ミラーまたはダイクロイックミラー１９を配置し、連続レーザ光源から可視レーザ光を発生させるか、あるいは、パルスレーザ光源からパルス状の近赤外レーザ光を発生させる。

連続レーザ光源から発せられた可視レーザ光やパルスレーザ光源から発せられた近赤外レーザ光は、観察ユニット１１のスキャナにより走査された後、全反射ミラーまたはダイクロイックミラー１９により反射されて対物レンズ１５により標本Ｓに照射される。可視レーザ光が照射されることにより標本Ｓを透過した透過光（観察光）や、近赤外レーザ光が照射されることにより標本Ｓにおいて透過側に発生した蛍光（観察光）は、コンデンサレンズ１７により集光されて反射ミラー２３により反射された後、透過検出器７により検出される。

このような透過観察の場合において、図８に示すように、顕微鏡本体３から遮光カバー３１および遮光筒部材３７を外すと、蛍光灯の光など、標本Ｓの上方からの外部の光がステージ１３やコンデンサレンズ１７により反射されて、透過光や蛍光などの観察光の光路に入射してしまう。

これに対し、図２に示すように、顕微鏡本体３に遮光カバー３１を装着することで、標本Ｓの上方からステージ１３により反射されてコンデンサレンズ１７を介して観察光の光路に入射する外部の光が遮光カバー３１により遮断される。また、遮光筒部材３７を備えることで、標本Ｓの上方からコンデンサレンズ１７により反射されて観察光の光路に入射する外部の光が遮光筒部材３７により遮断される。したがって、透過観察時に、外部からの光が観察光の光路に入射して透過検出器７により検出されてしまうことを防ぐことができる。

以上説明したように本実施形態に係るレーザ走査型顕微鏡１によれば、遮光カバー３１および遮光筒部材３７により、標本Ｓの上方から顕微鏡本体３の観察光の光路に入射しようとする外部の光を遮断することができる。したがって、レーザ走査型顕微鏡１を暗室内で使用したり暗箱で覆って使用したりする必要がなく、観察時の操作性を向上して、標本Ｓの上方からの外部の光の入射を防ぐことができる。

また、光軸方向のコンデンサレンズ１７の位置に合わせて、図４（ａ），（ｂ）に示すように、コンデンサレンズ１７の光軸方向における遮光カバー３１の取付位置を調節することにより、ステージ１３から遮光カバー３１までの光軸方向の距離を適切に保ち、遮光カバー３１による標本Ｓの上方からの外部の光の遮断効率を維持することができる。

また、光軸方向のコンデンサレンズ１７の位置に合わせて遮光筒部材３７の光軸方向の長さを調節することにより、コンデンサレンズ１７と透過支柱２５との間の隙間を低減し、遮光筒部材３７による標本Ｓの上方からの外部の光の遮断効率を維持することができる。本実施形態においては、遮光筒部材３７を透過支柱２５に取り付けることとしたが、これに代えて、遮光筒部材３７をコンデンサレンズ１７に取り付けることとしてもよい。

また、本実施形態においては、遮光カバー３１が矩形状の鍔部３５を有することとしたが、これに代えて、鍔部３５の幅寸法が上記条件式（１），（２）を満たすものであればよく、例えば図９に示すように、遮光カバー３１が円板状の鍔部３５を有することとしてもよい。

また、本実施形態においては、遮光筒部材３７が入れ子構造の筒部材３９Ａ，３９Ｂにより構成されていることとしたが、遮光筒部材３７が光軸方向に伸縮可能であればよく、例えば、遮光筒部材３７が蛇腹構造を有することとしてもよい。

本実施形態は以下のように変形することができる。
例えば、遮光カバー３１の鍔部３５が、取付部３３の周方向に複数体に分割され、その内の少なくとも１つが取付部３３の周方向に移動可能であってもよい。例えば、図１０（ａ），（ｂ）および図１１に示す例では、鍔部３５が、取付部３３に一体的に形成された略半円状の非可動部３５Ａと、取付部３３に対して周方向に回転可能な略半円状の可動部３５Ｂとに分割されている。

非可動部３５Ａは、ステージ１３に載置された標本Ｓの上方で取付部３３と共に位置決めされるようになっている。可動部３５Ｂは、非可動部３５Ａに対して取付部３３の周方向に移動させることができるようになっている。この可動部３５Ｂは、例えば、図１０（ａ）に示すように非可動部３５Ａに対して取付部３３の周方向に位置をずらすことで、ステージ１３に載置された標本Ｓの上方を可動部３５Ｂおよび非可動部３５Ａにより覆ったり、図１０（ｂ）に示すように非可動部３５Ａに対して取付部３３の中心軸方向に重ね合わせることで、ステージ１３に載置された標本Ｓの上方に開放された空間を形成したりすることができるようになっている。

本変形例によれば、観察時には、図１２（ａ）に示すように、可動部３５Ｂにより標本Ｓの上方を非開放状態にして、可動部３５Ｂおよび非可動部３５Ａにより標本Ｓの上方の周方向の全域を覆うことにより、標本Ｓの上方からステージ１３を介して観察光の光路に入射しようとする光を遮断することができる。一方、標本Ｓの交換時には、図１２（ｂ）に示すように、可動部３５Ｂを周方向に移動させて標本Ｓの上方に開放された空間を形成することにより、透過支柱２５を傾けることができないレーザ走査型顕微鏡１においても、標本Ｓの交換作業を容易にすることができる。

本変形例においては、可動部３５Ｂが取付部３３の周方向に移動できることとしたが、非可動部３５Ａに対して可動部３５Ｂが移動することにより、標本Ｓの上方に開放された空間を形成することができればよく、可動部３５Ｂの移動方向は取付部３３の周方向に限定されるものではない。

１ レーザ走査型顕微鏡
１３ ステージ
１５ 対物レンズ
１７ コンデンサレンズ
３１ 遮光カバー
３５ 鍔部
３５Ａ 非可動部
３５Ｂ 可動部
３７ 遮光筒部材
Ｓ 標本

Claims (7)

1. 標本を載置するステージと、
   該ステージの下方に配置され、光源からのレーザ光を前記標本上に集光する対物レンズと、
   該対物レンズにより集光されるレーザ光を前記標本上で走査させるスキャナと、
   前記対物レンズとは前記ステージを挟んで反対側に配置され、前記対物レンズによってレーザ光が照射されることにより前記標本において透過側に発生する観察光を集光するコンデンサレンズと、
   該コンデンサレンズによって集光された前記観察光を検出する透過検出器と、
   前記コンデンサレンズと前記ステージとの間の光路上に配され、前記標本の上方から前記ステージを介して前記コンデンサレンズに入射する外部の光を遮断する遮光カバーとを備え、
   該遮光カバーが前記コンデンサレンズに固定され、かつ、前記遮光カバーに前記観察光を通過させる開口が設けられているレーザ走査型顕微鏡。
2. 前記遮光カバーが前記コンデンサレンズに着脱可能に取り付けられ、該コンデンサレンズにおける前記遮光カバーの取付位置が前記コンデンサレンズの光軸方向に変更可能である請求項１に記載のレーザ走査型顕微鏡。
3. 前記遮光カバーが、前記ステージに載置された前記標本の上方で位置決めされる非可動部と、該非可動部に対して移動して前記標本の上方に開放された空間を形成可能な可動部とを備える請求項１または請求項２に記載のレーザ走査型顕微鏡。
4. 前記遮光カバーが、前記コンデンサレンズの光軸に交差する方向に延びる鍔部を有し、 該鍔部の幅寸法が、以下の条件式を満たす請求項１から請求項３のいずれかに記載のレーザ走査型顕微鏡。
   Ｒ≧ｒ_Ｏ＋Ｌ_ＯｔａｎΘ_Ｏ
   ここで、Ｒは遮光カバーの鍔部の幅寸法、ｒ_Ｏは対物レンズの口径半径、Ｌ_Ｏは対物レンズと遮光カバーとの間の光軸方向の距離、Θ_Ｏは対物レンズの開口角である。
5. 前記遮光カバーが、前記コンデンサレンズの光軸に交差する方向に延びる鍔部を有し、 該鍔部の幅寸法が、以下の条件式を満たす請求項１から請求項３のいずれかに記載のレーザ走査型顕微鏡。
   Ｒ≧ｒ_Ｃ＋２Ｌ_ＣｔａｎΘ_Ｃ
   ここで、Ｒは遮光カバーの鍔部の幅寸法、ｒ_Ｃはコンデンサレンズの口径半径、Ｌ_Ｃはステージと遮光カバーとの間の光軸方向の距離、Θ_Ｃはコンデンサレンズの開口角である。
6. 前記コンデンサレンズを挟んで前記ステージとは反対側に配され、前記コンデンサレンズの光軸の周囲を覆う遮光性を有する筒形状の遮光筒部材を備える請求項１から請求項５のいずれかに記載のレーザ走査型顕微鏡。
7. 前記遮光筒部材が光軸方向に伸縮可能である請求項６に記載のレーザ走査型顕微鏡。

Images