JP6520153B2 - 酵素結合小分子の製造方法 - Google Patents
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Description
(1)酵素が結合した小分子を凍結乾燥した後、それを再度凍結乾燥することを特徴とする、酵素結合小分子の製造方法。
(2)酵素が結合した小分子を凍結乾燥した後、それをいったん溶媒に溶解して溶液とした後に、再度凍結乾燥する、(1)に記載の製造方法。
(3)酵素がアルカリホスファターゼである、(1)又は(2)に記載の製造方法。
(4)小分子が甲状腺ホルモン、ステロイド又はビタミン類である、(1)〜(3)いずれかに記載の製造方法。
免疫測定装置として全自動エンザイムイムノアッセイ装置(AIA−CL2400、東ソー社製)と免疫測定用試薬として当該装置用免疫反応試薬を用い、Delay 1ステップ競合法により各測定を行った。なお、各免疫反応試薬は後述したようにして調製した。
(1)固相懸濁液の調製
抗T4抗体固定化磁性微粒子をコラーゲンペプチド、糖、塩類等を含むMOPS緩衝液で希釈し、固相懸濁液を作製した。
糖としてスクロース、マンニトール、塩類として塩化マグネシウム、塩化亜鉛を含むTris緩衝液で保存しておいたアルカリホスファターゼ標識T4をガラスバイアルに入れ、凍結乾燥した。凍結乾燥後、純水で溶解したものをコラーゲンペプチド、糖としてスクロース、塩類として塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、塩化亜鉛を含むMOPS緩衝液で希釈し、検出用標識T4溶液を作製した。
固相懸濁液と検出用標識T4溶液それぞれを凍結乾燥し、FT4免疫反応試薬を調製した。アルカリホスファターゼ標識T4を事前に凍結乾燥しないFT4免疫反応試薬を試薬A(凍結乾燥を計1回行ったもの)、事前に凍結乾燥したFT4免疫反応試薬を試薬B(凍結乾燥を計2回行ったもの)とした。
結果を表1に示す。
(1)固相懸濁液の調製
抗T3抗体固定化磁性微粒子をコラーゲンペプチド、糖、塩類等を含むTris緩衝液で希釈し、固相懸濁液を作製した。
糖としてスクロース、マンニトール、塩類として塩化マグネシウム、塩化亜鉛を含むTris緩衝液で保存しておいたアルカリホスファターゼ標識T3をガラスバイアルに入れ、凍結乾燥した。凍結乾燥後、純水で溶解したものをミートペプトン、糖としてスクロース、塩類として塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、塩化亜鉛等を含むTris緩衝液で希釈し、検出用標識T3溶液を作製した。
固相懸濁液と検出用標識T3溶液をそれぞれ凍結乾燥し、T3免疫反応試薬を調製した。アルカリホスファターゼ標識T3を事前に凍結乾燥しないT3免疫反応試薬を試薬C(凍結乾燥を1回行ったもの)、事前に凍結乾燥したT3免疫反応試薬を試薬D(凍結乾燥を計2回行ったもの)とした。
Claims (2)
- アルカリホスファターゼが結合した小分子を凍結乾燥した後、それを2回以上凍結乾燥することを特徴とする、アルカリホスファターゼ結合小分子の製造方法。
- 小分子が甲状腺ホルモン、ステロイド又はビタミン類である、請求項1に記載の製造方法。
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