JP6420055B2 - Diagnostic immunochromatographic reagent used colored particles and this immunochromatographic - Google Patents

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本発明は、診断用イムノクロマト試薬に好適に使用されるイムノクロマト用着色粒子と、該着色粒子を用いた診断用イムノクロマト試薬に関する。 The present invention includes a immunochromatography coloring particles suitable for use in diagnostic immunochromatographic reagent, diagnostic immunochromatographic reagent with colored particles.

従来より、種々の疾患の診断を目的として、被検物質に免疫学的に結合する物質とクロマトグラフィーの原理を組み合わせて被検物質を目視判定で検出する診断用イムノクロマト試薬が広く用いられている。 Conventionally, for the purpose of diagnosing various diseases, diagnostic immunochromatographic reagent by combining the principles of immunologically binding substance and chromatographed to detect visually determining an analyte are widely used test substance . 診断用イムノクロマト試薬は、被検物質である抗原(または抗体)に対する抗体(または抗原)をクロマトグラフ媒体に固定化して、免疫反応部位を作製したものを固定相とし、上記被検物質と結合可能な抗体(または抗原)によって感作された検出用担体と被検物質を含んだ検体とを接触させて抗原抗体複合体を形成させ、それらが含有された液体を移動相とした免疫クロマトグラフの測定方法に用いられる。 Diagnostic immunochromatographic reagent, the antibody (or antigen) to an antigen (or antibody) is a test substance immobilized on the chromatographic medium, a disk produced an immune reaction site to the stationary phase, it can bind to the test substance an antibody (or antigen) contacting the sample containing detection carrier and a test substance which is sensitized to form an antigen-antibody complex by, immune chromatograph them is contained a liquid mobile phase used in the measurement method.

当該測定方法において、検出用担体と接触した被検物質を含んだ検体は、免疫反応を行い、検出用粒子−感作に用いられた抗体(または感作に用いられた抗原)−検体中の抗原(または抗体)とからなる複合体が生成する。 In the measurement method, the sample containing the test substance in contact with the detection carrier, performs an immune reaction, detection particle - used to sensitize the antibody (or antigen used for sensitization) - in a sample complex is generated consisting of the antigen (or antibody). この複合体がクロマトグラフ上の反応部位まで達すると、再度免疫反応を行い、前記複合体が前記固定化抗体(または固定化抗原)に結合されて、検出用担体が捕捉される為、その捕捉の有無を目視判定することにより検体中の被検物質の存在を判定することができる(当該測定方法をイムノクロマトグラフ法という。)。 When the complex reaches the reaction site on the chromatographic performs again immune reaction, the conjugate is bound to said immobilized antibody (or immobilized antigen), for detecting the carrier is captured, the capture it is possible to determine the presence of the analyte in the sample by visually determining the presence or absence of (. the measurement method of immunochromatography).

上記イムノクロマトグラフ法では、目視判定を容易にするために、検出用担体に着色された微粒子が広く利用されている。 In the immunochromatography, in order to facilitate visual determination, it is colored to a detection carrier particles are widely used. このような検出用担体としては、その粒径や調製条件によって自然呈色するコロイド状金属粒子もしくはコロイド状金属酸化物粒子などのコロイド状粒子や、合成高分子よりなるラテックス粒子を着色することによって得られる着色ラテックス粒子、着色剤とともに単量体を重合して得られる着色ラテックス粒子などが用いられている。 Such detection carrier, by coloring the particle size and or colloidal particles such as colloidal metal particles or colloidal metal oxide particles naturally colored by preparation conditions, the latex particles consisting of synthetic polymers the resulting colored latex particles, such as colored latex particles obtained by polymerizing a monomer together with a colorant is used. しかしながら、上記コロイド状粒子は、その粒径及び調製条件によって色調が決定されてしまうため、所望の色に調製できない、また鮮明な濃い色調のものを得にくい等の問題点があった。 However, the colloidal particles, since thereby the color tone is determined by the particle size and preparation conditions, not be prepared to the desired color, also has a problem such that difficult to obtain those vivid dark shades. 一方、着色ラテックス粒子は、色調を自由に選択できる点で有利であるが、着色量を高める、つまりは濃い色調を得ることが難しく、イムノクロマトに用いた際に目視判定がしにくい等の問題点があった。 On the other hand, colored latex particles are advantageous in that it can freely select the color tone, enhance pigmenting amount, it is difficult that is, to obtain a dark color tone, problems such difficult to be visually determined when used in immunochromatography was there.

この問題を解決する為に、特許文献1では、着色ラテックス粒子中の着色剤の含有率が10重量%以上とする方法が示されており、目視判定性を向上させている。 To solve this problem, Patent Document 1, there is shown a method of the content of the colorant in the colored latex particles is 10 wt% or more, thereby improving the visual judgment of. しかし、この方法でも、まだ十分な感度が確保されているとは言えず、更に着色量を高めると、色素等がラテックス粒子の表面を覆うようになり、粒子本来の表面状態が損なわれる結果、非特異反応や過凝集による目詰まりなどを引き起こすことが問題となっていた。 However, even in this method, it can not be said yet sufficient sensitivity is ensured, further Increasing the pigmenting amount, results dyes is to cover the surface of the latex particles, impairing the particle original surface condition, can cause clogging due to non-reaction or over-aggregation has been a problem.

特開2003−202344号公報 JP 2003-202344 JP

そこで、更なる目視判定性の向上を達成しつつ、非特異反応や過凝集による目詰まり等を生じない検出用担体、つまりは検出用担体の濃色化及びラテックス粒子の表面状態の維持が望まれていた。 Therefore, while achieving further improvement in visual determination of detection carrier which does not cause clogging by non-specific reaction and excess aggregation, that is, to maintain the surface state of darkening and latex particles for detection carrier Nozomu rarely we have had.
本発明は、上記事情に鑑みてなされたもので、表面を形成する組成自身が着色性を示し、ラテックス粒子の表面組成が維持されており濃い色調を示すことができるイムノクロマト用着色粒子と、該着色粒子を用いた診断用イムノクロマト試薬を提供することを課題とする。 The present invention has been made in view of the above circumstances, the composition itself to form a surface exhibits a coloration, and immunochromatography colored particles for the surface composition of the latex particles, which may indicate a darker color tone is maintained, the providing a diagnostic immunochromatographic reagent using colored particles and an object.

本発明は、以下に関する。 The present invention relates to the following.
<発明1> <Invention 1>
表面を構成する成分としてπ共役化合物を含む高分子を含有することを特徴とするイムノクロマト用着色粒子。 Immunochromatographic coloring particles characterized by containing a polymer containing a π-conjugated compound as the ingredient forming the surface.
<発明2> <Invention 2>
前記着色粒子の平均粒径が50〜1000nmであることを特徴とする発明1に記載のイムノクロマト用着色粒子。 Immunochromatographic coloring particles according to the invention 1 the average particle diameter of the colored particles, characterized in that it is 50-1000 nm.
<発明3> <Invention 3>
炭化水素系微粒子の表面にπ共役化合物を含む高分子を被覆させたことを特徴とする発明1または2に記載のイムノクロマト用着色粒子。 Immunochromatographic coloring particles according to the present invention 1 or 2, characterized in that the polymer containing a π-conjugated compound to the surface of the hydrocarbon-based fine particles are coated.
<発明4> <Invention 4>
π共役化合物を含む高分子が、ポリアセチレン、ポリアニリン、ポリフラン、ポリピロール、ポリチオフェンからなる群から選ばれる少なくとも一種類以上であることを特徴とする発明1〜3のいずれか1項に記載のイムノクロマト用着色粒子。 Polymers containing π-conjugated compounds, polyacetylene, polyaniline, polyfuran, polypyrrole, immunochromatography coloring according to any one of invention 1 to 3, wherein the at least one or more selected from the group consisting of polythiophene particle.
<発明5> <Invention 5>
炭化水素系微粒子が、 Hydrocarbon particles,
(1)フェニル基を有する重合性単量体、メタクリロイル基を有する重合性単量体、アクリロイル基を有する重合性単量体からなる群から選ばれる一種以上の重合性単量体と、 (1) a polymerizable monomer having a phenyl group, a polymerizable monomer having a methacryloyl group, and one or more polymerizable monomers selected from the group consisting of a polymerizable monomer having an acryloyl group,
(2)フェニル基及びスルホン酸塩を有する重合性単量体を共重合させたことを特徴とする発明3または4に記載のイムノクロマト用着色粒子。 (2) phenyl group and immunochromatography Colored particles according to the invention 3 or 4, characterized in that the polymerizable monomer is copolymerized with a sulfonate.
<発明6> <Invention 6>
炭化水素系微粒子の表面にπ共役化合物を含む高分子を被覆させる際に、スルホン酸塩を有する重合性単量体を存在させることを特徴とする発明3〜5のいずれか1項に記載のイムノクロマト用着色粒子。 When to be surface coated with a polymer containing a π-conjugated compounds of the hydrocarbon-based particles, according to any one of invention 3-5, characterized in that the presence of a polymerizable monomer having sulfonate immunochromato for the colored particles.
<発明7> <Invention 7>
前記着色粒子が黒色粒子であることを特徴とする発明1〜6のいずれか1項に記載のイムノクロマト用着色粒子。 Immunochromatographic coloring particles according to any one of invention 1 to 6, wherein said colored particles are black particles.
<発明8> <Invention 8>
発明1〜7のいずれか1項に記載のイムノクロマト用着色粒子を用いたことを特徴とする診断用イムノクロマト試薬。 Diagnostic immunochromatographic reagents characterized by using an immunochromatography coloring particles according to any one of invention 1 to 7.
<発明9> <Invention 9>
発明8に記載のイムノクロマト試薬を用いたことを特徴とするイムノクロマト測定方法。 Immunochromatographic measurement method characterized by using the immunochromatographic reagent according to the invention 8.

本発明によれば、粒子表面を形成する組成自身が着色性を示すことで、ラテックス粒子の表面組成を維持し、濃い色調を示すことができるイムノクロマト用着色粒子が得られるため、従来より濃色化が図れる視認性の優れたイムノクロマト用着色粒子、及び該着色粒子を用いた診断用イムノクロマト試薬を提供できる。 According to the present invention, since the composition itself to form a particle surface exhibits a coloring property, and it is keeping the surface composition of the latex particles, immunochromatography coloring particles that can exhibit a deep color tone can be obtained, dark conventionally colored of visibility excellent immunochromatography for colored particles attained, and can provide a diagnostic immunochromatographic reagent with colored particles.

以下、本発明のイムノクロマト用着色粒子について詳細に説明する。 It will be described in detail below immunochromatographic colored particles for the present invention.
本発明のイムノクロマト用着色粒子は、表面を構成する成分としてπ共役化合物を含む高分子を含有する着色粒子である。 Immunochromatographic colored particles for the present invention is a colored particle containing a polymer containing a π-conjugated compound as the ingredient forming the surface. なかでも炭化水素系微粒子の表面にπ共役化合物を含む高分子を被覆させた着色粒子である。 Among them is a colored particle obtained by coating a polymer containing a π-conjugated compound to the surface of the hydrocarbon-based particles. これらは、イムノクロマト用の検出用担体として好適に用いられる。 It is preferably used as a detection carrier for immunochromatography.

上記炭化水素系微粒子は、 The hydrocarbon-based fine particles,
(1)フェニル基を有する重合性単量体、メタクリロイル基を有する重合性単量体、アクリロイル基を有する重合性単量体からなる群から選ばれる一種類以上の重合性単量体と、 (1) a polymerizable monomer having a phenyl group, a polymerizable monomer having a methacryloyl group, and one or more polymerizable monomers selected from the group consisting of a polymerizable monomer having an acryloyl group,
(2)フェニル基及びスルホン酸塩を有する重合性単量体を共重合させた粒子であれば特に限定されず、従来より免疫測定分野で用いられてきた粒子を用いることができる。 (2) If the phenyl group and the particles of the polymerizable monomer to be copolymerized with sulfonate not particularly limited, and may be a conventionally been used in the immunoassay art particles.

フェニル基を有する重合性単量体としては、例えば、スチレン、クロルスチレン、α−メチルスチレン、ビニルトルエンなどの重合性不飽和芳香族類が挙げられる。 The polymerizable monomer having a phenyl group, for example, styrene, chlorostyrene, alpha-methyl styrene, and a polymerizable unsaturated aromatics such as vinyl toluene. また、ジビニルベンゼン等の架橋性単量体も含まれ、適量を存在させても構わない。 Also, cross-linking monomer such as divinylbenzene may be included, it may be present an appropriate amount. メタクリロイル基またはアクリロイル基を有する重合性単量体としては、例えば、(メタ)アクリル酸メチル、(メタ)アクリル酸エチル、(メタ)アクリル酸エチルn-プロピル、(メタ)アクリル酸−2ヒドロキシエチル、(メタ)アクリル酸グリシジル等の重合性不飽和カルボン酸エステル類、(メタ)アクリル酸、イタコン酸、マレイン酸、フマル酸などの重合性不飽和カルボン酸類、またこれらの塩類、例えば、(メタ)アクリル酸ナトリウム、(メタ)アクリル酸カリウム、(メタ)アクリルアミド、N−メチロール(メタ)アクリルアミド、N,N−ジメチル(メタ)アクリレート等の重合性不飽和カルボン酸アミド類が挙げられる。 The polymerizable monomer having a methacryloyl group or an acryloyl group, e.g., methyl (meth) acrylate, (meth) acrylate, ethyl (meth) acrylate n- propyl, (meth) acrylic acid -2-hydroxyethyl , (meth) polymerizable unsaturated carboxylic acid esters of glycidyl acrylate, (meth) acrylic acid, itaconic acid, maleic acid, polymerizable unsaturated carboxylic acids such as fumaric acid, also their salts, for example, (meth ) sodium acrylate, (meth) potassium acrylate, (meth) acrylamide, N- methylol (meth) acrylamide, N, N- dimethyl (meth) polymerizable unsaturated carboxylic acid amides such as acrylate. また、エチレングリコール(メタ)アクリレートやプロピレングリコール(メタ)アクリレート、メチレンビス(メタ)アクリルアミド等の架橋性単量体も含まれ、適量を存在させても構わない。 The ethylene glycol (meth) acrylate or propylene glycol (meth) acrylate, methylenebis (meth) crosslinking monomer such as acrylamide are also included, it may be present an appropriate amount. これらの単量体は、1種または2種以上を混合して使用することができる。 These monomers may be used alone or in combination.

フェニル基及びスルホン酸塩を有する重合性単量体としては、例えば、スチレンスルホン酸ナトリウム、スチレンスルホン酸カリウム、スチレンスルホン酸リチウム等が挙げられる。 The polymerizable monomer having a phenyl group and a sulfonate, such as sodium styrene sulfonate, potassium styrene sulfonate, lithium styrene sulfonate, and the like.

これらのうち、特にスチレンとスチレンスルホン酸ナトリウムからなる共重合体、及びスチレンとメタクリル酸メチル及びスチレンスルホン酸ナトリウムからなる共重合体が好ましい。 Of these, a copolymer of styrene and sodium styrene sulfonate, and a copolymer of styrene and methyl and sodium styrene sulfonate methacrylic acid are preferred.

上記共重合体の重合方法としては、従来より公知の重合方法を用いることができ、分散重合法、懸濁重合法、乳化重合法、ソープフリー乳化重合法が挙げられるが、ソープフリー乳化重合法が好ましい。 As the polymerization method for the copolymer is known polymerization methods conventionally can be used, dispersion polymerization, suspension polymerization, emulsion polymerization method, but soap-free emulsion polymerization method and the like, soap-free emulsion polymerization method It is preferred. ソープフリー乳化重合法としては、例えば、特開2003−510956号公報等に記載の方法を用いることができる。 The soap-free emulsion polymerization method, for example, it is possible to use the method described in JP-A-2003-510956 or the like.

本発明は、表面を構成する成分としてπ共役化合物を含む高分子が含有されていることを特徴としている。 The present invention is characterized in that the polymer containing a π-conjugated compound as a component constituting the surface are contained. 尚、π共役化合物を含む高分子によって被覆される炭化水素系微粒子について前述したが、この炭化水素系微粒子が存在しない、すなわち、π共役化合物を含む高分子微粒子をπ共役化合物を含む高分子で被覆したイムノクロマト用着色粒子も本発明に含まれるのは言うまでもない。 Although described above for hydrocarbon-based fine particles are covered by a polymer containing a π-conjugated compound, the not hydrocarbon-based particles are present, i.e., the polymer fine particles containing a π-conjugated compound in a polymer containing a π-conjugated compound coated immunochromatography colored particles for also of course included in the present invention.

また、π共役化合物を含む高分子は、着色粒子の表面を構成する成分中に主成分として存在していればよい。 The polymer containing a π-conjugated compound may exist as a main component in the components making up the surface of the colored particles. 表面にπ共役化合物を主成分として含む場合には、該着色粒子は黒色を呈し、黒色着色粒子として好適に用いられる。 If it contains as a main component π-conjugated compounds on the surface, the colored particles exhibit a black color, is suitably used as the black coloring particles. ここで主成分とは全体の70質量%以上である成分を意味する。 Here main component means a component is the total 70% by mass or more. 主成分(π共役系化合物)以外の成分としては、チタンブラック、酸化鉄等の黒色無機材料が挙げられ、例えば本発明のイムノクロマト用着色粒子の表面は、π共役系化合物とともにこれらの黒色無機材料を30質量%以下の範囲で含有する組成物から形成されていてもよい。 Principal component The ([pi conjugated compound) components other than titanium black, include black inorganic material such as iron oxide, for example, the surface of the immunochromatography colored particles for the present invention, these inorganic black materials with [pi conjugated compound the may be formed from a composition comprising in the range below 30 wt%. その場合、重合または重縮合によりπ共役化合物を含む高分子を合成する際などに、これらの黒色無機材料を共存させればよい。 In this case, when, for example synthesizing a polymer containing a π-conjugated compound by polymerization or polycondensation, it is sufficient to coexistence of these black inorganic material. また、上記組成物には、主成分であるπ共役系化合物の他に、黒色粒子の黒色に影響を与えない範囲で、π共役系化合物以外のポリマーなどが含まれてもよい。 The aforementioned compositions, in addition to a a π conjugated compound main component in a range that does not affect the black black particles, may be included, such as polymers other than π conjugated compound.

π共役化合物を含む高分子とは、π共役化合物を含む高分子を形成し得る単量体を用いて製造された重合体であり、このような単量体(以下、π共役形成性単量体という場合がある。)としては、アセチレン、アニリン、フラン、ピロール、チオフェン及びこれらの誘導体が挙げられ、これらのうち1種以上を使用できる。 The polymers containing [pi conjugated compounds, a polymer prepared by using a monomer capable of forming a polymer comprising [pi conjugated compound, such monomers (hereinafter, [pi-conjugated form monomers it may be referred to the body. the), acetylene, aniline, furan, pyrrole, include thiophene and derivatives thereof, can be used one or more of these.

π共役化合物を含む高分子の具体例としては、アセチレン及びその誘導体を重合して得られるポリアセチレン、アニリン及びその誘導体を重合して得られるポリアニリン、フラン及びその誘導体を重合して得られるポリフラン、ピロール及びその誘導体を重合して得られるポリピロール、チオフェン及びその誘導体を重合して得られるポリチオフェンが挙げられ、これらのなかではポリピロールが好ましい。 Specific examples of the polymer containing the π-conjugated compounds, acetylene and polyacetylene obtained by polymerizing the derivatives, aniline and polyaniline obtained by polymerizing a derivative thereof, furan and polyfuran obtained by polymerizing a derivative thereof, pyrrole and polypyrrole obtained by polymerizing a derivative thereof, include polythiophene obtained by polymerizing thiophene and derivatives thereof, polypyrrole is preferred among these.

π共役化合物を含む高分子は、原料単量体の酸化重合、電解重合、ラジカル重合、カップリング反応等、公知の製造方法により製造できる。 Polymers containing π-conjugated compound, the oxidative polymerization of the starting monomer, electrolytic polymerization, radical polymerization, a coupling reaction or the like, can be produced by known production methods. また、該高分子の製造時には、公知の開始剤、重合時の安定性を高めるための添加剤、例えば、ポリアクリル酸、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコールなどの分散安定剤やドデシル硫酸ナトリウム、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、ポリオキシエチレンラウリルエーテルなどの界面活性剤等を適宜使用できる。 Further, at the time of manufacture of the polymer, known initiators, additives to improve the stability during the polymerization, for example, polyacrylic acid, polyvinyl pyrrolidone, a dispersion stabilizer and sodium dodecyl sulfate, such as polyvinyl alcohol, bromide hexa decyl trimethyl ammonium, surfactants such as polyoxyethylene lauryl ether or the like can be used appropriately. これらを使用することで、π共役系化合物を主成分として形成された表面のさらに外側に、これらの分散安定剤、界面活性剤等からなる極薄い膜が形成される場合がある。 By using these, the more outer surfaces formed a π-conjugated compound as a main component, there are cases where these dispersion stabilizers, is very thin film made of a surfactant or the like is formed. このような製造工程に由来する薄膜は、実質的には、粒子の表面を形成しているものとは言えない。 Films derived from such production processes is essentially not be assumed to form the surface of the particles. よって、本発明のイムノクロマト用着色粒子には、このような製造工程に由来する薄膜が結果的に最外表に形成されているものも含まれる。 Thus, the immunochromatography colored particles for the present invention also include those thin films derived from such manufacturing process is formed results in the outermost table.

上記分散安定剤、界面活性剤の有無に関わらず、フェニル基及びスルホン酸塩を有する重合性単量体を存在させて、炭化水素系微粒子の表面をπ共役化合物を含む高分子で被覆させたイムノクロマト用着色粒子も本発明の1つである。 The dispersion stabilizer, with or without surfactant, in the presence of a polymerizable monomer having a phenyl group and a sulfonate, the surface of the hydrocarbon-based fine particles are covered with a polymer containing a π-conjugated compound immunochromatographic colored particles for also one of the present invention.

π共役化合物を含む高分子がポリピロールである場合、イムノクロマト用着色粒子の表面は一定の正荷電を有するが、該表面にフェニル基及びスルホン酸塩を有する重合性単量体を存在させることで、負荷電を有する着色粒子とすることができ、正荷電では不都合な抗原や抗体を結合させる際に好適に用いられる。 If polymers containing π-conjugated compound is polypyrrole, the surface of the immunochromatographic coloring particles have a constant positive charge, the presence of the polymerizable monomer having a phenyl group and a sulfonate to the surface, It can be a colored particle having a negative charge, suitably used when coupling the undesirable antigen and antibody positive charge. また、フェニル基を有する成分が表面に一定割合で存在することになる為、適度な疎水性が与えられ、抗原や抗体の物理吸着に好都合な環境を付与できることも本発明の特徴の1つである。 Also, since that would component having a phenyl group is present at a constant ratio to the surface, suitable hydrophobic is given, one of the features of the invention to be imparted favorable environment for physical adsorption of the antigen or antibody is there.

本発明のイムノクロマト用着色粒子は、平均粒径が50〜1000nm、好ましくは、100〜500nmの粒子が用いられる。 Immunochromatographic colored particles for the present invention has an average particle size of 50-1000 nm, preferably, the particles of 100~500nm is used. CV値(粒径の変動係数)は10%以下であることが好ましい。 CV value (coefficient of variation of particle diameter) is preferably 10% or less. 尚、CV値は、「粒径分布の標準偏差÷平均粒径×100」により算出される。 Incidentally, CV value is calculated by the "standard deviation ÷ mean particle diameter × 100 particle size distribution". 着色粒子の平均粒径が50nm未満であると、視認性が劣り、1000nmを超えると、メンブレン中で目詰まりを起こす可能性が高まる。 When the average particle diameter of the colored particles is less than 50 nm, poor visibility, exceeds 1000 nm, it is more likely to clog in the membrane. 尚、本明細書における平均粒径とは、透過型電子顕微鏡により得られた任意の3視野における100個以上の粒子画像を画像解析装置を用いて解析して求めた値の平均値を示す。 Incidentally, the average particle diameter in the present specification indicates an average value of values ​​obtained with 100 or more particles images in any three fields of view obtained by transmission electron microscopy and analyzed using an image analyzer.

本発明のイムノクロマト用着色粒子の平均粒径は、例えば、粒径が一定の炭化水素系微粒子を用いる方法による制御、着色粒子合成時における分散安定剤による制御、乳化剤による制御、粒子電荷による制御、マイクロチャネル径による制御、撹拌操作による制御など、公知の方法により制御できるが、粒径が一定の炭化水素系微粒子を用いる方法が簡便で好ましい。 The average particle size of immunochromatography colored particles for the present invention are, for example, control by the method of particle size using certain hydrocarbon-based fine particles, control of the dispersion stabilizer at the time of coloring particle synthesis, controlled by the emulsifier, control of particle charge, control by the micro-channel diameter, such control by the stirring operation, can be controlled by a known method, a method of particle size using certain hydrocarbon-based fine particles is preferably simple. 尚、炭化水素系微粒子の粒径制御は、特開2003−510956号公報等に記載の方法で制御すればよく、例えば、重合開始剤の量を調整したり、重合温度を変化させるなどして、調整する方法が挙げられる。 Incidentally, the particle size control of hydrocarbon particles, may be controlled by the method described in JP 2003-510956 Patent Publication, for example, to adjust the amount of the polymerization initiator, and the like to change the polymerization temperature the method of adjusting the like.

本発明のイムノクロマト用着色粒子を検出用担体として用いた診断用イムノクロマト試薬も本発明の1つである。 Diagnostic immunochromatographic reagent using immunochromatography colored particles for the present invention as a detection carrier is also one of the present invention. 診断用イムノクロマト試薬として用いられる項目は、例えば、インフルエンザウイルス、RSウイルス、アデノウイルス、ロタウイルス、ノロウイルス等が挙げられる。 Items to be used as a diagnostic immunochromatographic reagent, for example, influenza virus, RS virus, adenovirus, rotavirus, norovirus, and the like. これらの項目に対応する抗体を本発明のイムノクロマト用着色粒子に結合させることで抗体感作粒子を作製し、イムノクロマト試薬とすることができる。 The antibodies corresponding to these fields to produce a antibody-sensitized particles by binding to the immunochromatographic colored particles for the present invention, it is possible to immunochromatographic reagent. 結合の方法としては特に限定されず、従来公知の方法を用いることができ、例えば、抗原(または抗体)を含む緩衝液中にイムノクロマト用着色粒子を浸漬させ、一定温度で一定時間インキュベートするなどで物理吸着させる方法などが挙げられる。 Is not particularly limited as binding method, conventionally known methods can be used, for example, an antigen (or antibody) is immersed immunochromatography colored particles for in a buffer containing, etc. incubated predetermined time at a constant temperature a scheme of physical adsorption and the like.

また、本発明の診断用イムノクロマト試薬を用いれば、例えばイムノクロマトグラフ法の原理を用いた診断用テストストリップにおいて、移動層の液体中に抗体感作粒子を含浸させることによってコンジュゲートパッドに含有させ、メンブレン上に免疫反応部位として固定化した被検物質である抗原(または抗体)に対する抗体(または抗原)と結合、凝集させることによって、検体中の被検物質の存在を判定することができる。 Further, by using the diagnostic immunochromatographic reagent of the present invention, for example, in diagnostic test strips using the principle of immunochromatography, it is contained in the conjugate pad by impregnating the antibody-sensitized particles in a liquid of the mobile phase, bound to the antibody (or antigen) to an antigen (or antibody) is a test substance immobilized as immunoreactive sites on the membrane, by agglomeration, it is possible to determine the presence of the analyte in the sample.

以下、本発明について実施例を挙げて具体的に説明する。 It will be specifically described by way of examples for the present invention.

[炭化水素系微粒子1の作製] [Preparation of hydrocarbon-based fine particles 1]
4ツ口セパラブルカバー、攪拌翼、還流用冷却管、温度検出器、窒素導入管を取り付けた2000mL容のセパラブルフラスコに、脱イオン水1100g、スチレン(和光純薬製)170g、パラスチレンスルホン酸ナトリウム(東京化成製)0.08g、重合開始剤として過硫酸カリウム0.36g(和光純薬製)を秤量した後、210r. 4-necked separable cover, a stirring blade, a reflux cooling tube, the temperature detector, the separable flask 2000mL capacity fitted with a nitrogen inlet tube, deionized water 1100 g, styrene (Wako Pure Chemical) 170 g, p-styrenesulfonic sodium acid (manufactured by Tokyo Kasei) 0.08 g, were weighed potassium persulfate 0.36 g (Wako pure Chemical Industries, Ltd.) as a polymerization initiator, 210r. p. p. m. m. で攪拌しながら、容器内を窒素置換し、70℃で18時間重合を行った。 In stirring, and was purged with nitrogen gas were carried out 18 hours polymerization at 70 ° C..
得られた白色溶液をペーパーろ紙でろ過、セルロースチューブにて透析精製(透析液:水、精製回数5回以上)し、目的の炭化水素系微粒子を得た(微粒子1とする)。 The resulting white solution filtered through a paper filter paper, dialyzed purified by cellulose tube (dialysate: water, purified number of times or more 5 times), (the nanoparticle 1) to obtain a hydrocarbon-based particles of interest. 得られた微粒子の粒径を透過型電子顕微鏡により粒径を測定したところ、301nm(CV6.0%)であった。 The particle size of the resulting particles was measured particle size with a transmission electron microscope, was 301nm (CV6.0%).

[炭化水素系微粒子2の作製] [Preparation of hydrocarbon-based fine particles 2]
スチレン170gをスチレン100g、メタクリル酸メチル70gの混合物としたこと、及びパラスチレンスルホン酸ナトリウムを0.05gとしたこと以外は、炭化水素系微粒子1の方法と同様にして、目的の炭化水素系微粒子を得た(微粒子2とする)。 Styrene styrene 170 g 100 g, it has a mixture of methyl methacrylate 70 g, and except that sodium p-styrenesulfonate was 0.05 g, was obtained in an analogous manner to that hydrocarbon-based fine particles 1, hydrocarbon particles of interest was obtained (the fine particles 2). 上記と同様に粒径を測定したところ、得られた微粒子の粒径は、235nm(CV5.3%)であった。 When the particle size was determined in the same manner as described above, the particle size of the obtained microparticles was 235nm (CV5.3%).

<実施例1> <Example 1>
4ツ口セパラブルカバー、攪拌翼、還流用冷却管、温度検出器、窒素導入管を取り付けた2000mL容のセパラブルフラスコに、脱イオン水700g、上述の微粒子1を10g、パラスチレンスルホン酸ナトリウム(東京化成製)20g、ピロール(和光純薬製)10gを秤量した後、210r. 4-necked separable cover, a stirring blade, a reflux cooling tube, the temperature detector, the separable flask 2000mL capacity fitted with a nitrogen inlet tube, deionized water 700 g, the particles 1 described above 10 g, sodium para-styrene sulfonate (Tokyo Kasei Co., Ltd.) 20g, pyrrole (manufactured by Wako pure Chemical Industries, Ltd.) was weighed 10g, 210r. p. p. m. m. で攪拌しながら、容器内を窒素置換し、60℃に昇温した。 In stirring, and was purged with nitrogen gas and heated to 60 ° C..
ついで、重合開始剤として過硫酸アンモニウム(和光純薬製)34.0gを脱イオン300gにて溶解させ、上記混合液中へ滴下した。 Then, ammonium persulfate as a polymerization initiator (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) 34.0 g was dissolved in deionized 300 g, it was added dropwise to the above mixture. 滴下終了後更に8時間加熱攪拌させた後、冷却して反応を停止した。 After stirring with heating After completion of the dropwise addition 8 hours, the reaction was stopped by cooling.
遠心分離を行い、適度な脱イオン水を添加し、超音波洗浄機にて再分散させた。 Centrifuged, the addition of moderate deionized water and redispersed by an ultrasonic cleaner. この操作を3回繰り返し、黒色着色粒子1を得た(ポリピロールによる着色粒子1)。 This operation was repeated three times to obtain a black colored particles 1 (colored particles by polypyrrole 1). 透過型電子顕微鏡にて得られた粒子の粒径を測定したところ、368nm(CV6.4%)であった。 When the particle size of the resulting particles with a transmission electron microscope were measured and found to be 368nm (CV6.4%).

<実施例2> <Example 2>
使用したパラスチレンスルホン酸ナトリウムの量を10gに、ピロールの量を5gに変更し、過硫酸アンモニウムの量を17.0gに変更した以外は、ポリピロールによる着色粒子1の作製方法と同様にして黒色着色粒子を得た(ポリピロールによる着色粒子2)。 The amount of para-styrene sodium sulfonate used in 10 g, and changing the amount of pyrrole 5g, except for changing the amount of ammonium persulfate in 17.0 g, in the same manner as the colored particles 1 by polypyrrole black coloring to obtain particles (colored particles by polypyrrole 2). 上記と同様に得られた粒子の粒径を測定したところ、342nm(CV6.3%)であった。 Measurement of the particle size of the as well as the resulting particles was 342nm (CV6.3%).

<実施例3> <Example 3>
微粒子1を微粒子2に変更した以外は、ポリピロールによる着色粒子1の作製方法と同様にして黒色着色粒子を得た(ポリピロールによる着色粒子3)。 Except for changing the fine particles 1 to the microparticles 2 were in the same manner as the colored particles 1 by polypyrrole obtain black colored particles (colored particles by polypyrrole 3). 上記と同様に得られた粒子の粒径を測定したところ、295nm(CV5.6%)であった。 Measurement of the particle size of the as well as the resulting particles was 295nm (CV5.6%).

<実施例4> <Example 4>
4ツ口セパラブルカバー、攪拌翼、還流用冷却管、温度検出器、窒素導入管を取り付けた2000mL容のセパラブルフラスコに、脱イオン水700g、上述の微粒子1を10g、ポリビニルピロリドン(K30、和光純薬製)10g、ピロール(和光純薬製)10gを秤量した後、210r. 4-necked separable cover, a stirring blade, a reflux cooling tube, the temperature detector, the separable flask 2000mL capacity fitted with a nitrogen inlet tube, deionized water 700 g, 10 g microparticles 1 above, polyvinyl pyrrolidone (K30, manufactured by Wako pure Chemical Industries, Ltd.) 10g, pyrrole (manufactured by Wako pure Chemical Industries, Ltd.) was weighed 10g, 210r. p. p. m. m. で攪拌しながら、容器内を窒素置換し、60℃に昇温した。 In stirring, and was purged with nitrogen gas and heated to 60 ° C..
ついで、重合開始剤として過硫酸アンモニウム(和光純薬製)34.0gを脱イオン300gにて溶解させ、上記混合液中へ滴下した。 Then, ammonium persulfate as a polymerization initiator (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) 34.0 g was dissolved in deionized 300 g, it was added dropwise to the above mixture. 滴下終了後更に8時間加熱攪拌させた後、冷却して反応を停止した。 After stirring with heating After completion of the dropwise addition 8 hours, the reaction was stopped by cooling.
遠心分離を行い、適度な脱イオン水を添加し、超音波洗浄機にて再分散させた。 Centrifuged, the addition of moderate deionized water and redispersed by an ultrasonic cleaner. この操作を3回繰り返し、黒色着色粒子4を得た(ポリピロールによる着色粒子4)。 This operation was repeated three times to obtain a black colored particles 4 (the colored particles by polypyrrole 4). 透過型電子顕微鏡にて得られた粒子の粒径を測定したところ、335nm(CV6.3%)であった。 When the particle size of the resulting particles with a transmission electron microscope were measured and found to be 335nm (CV6.3%).

<実施例5> <Example 5>
使用したピロールの量を5gに変更し、過硫酸アンモニウムの量を17.0gに変更した以外は、ポリピロールによる着色粒子4の作製方法と同様にして黒色着色粒子を得た(ポリピロールによる着色粒子5)。 The amount of pyrrole used was changed to 5g, except for changing the amount of ammonium persulfate in 17.0 g, in the same manner as the colored particles 4 due polypyrrole to obtain black colored particles (colored particles by polypyrrole 5) . 上記と同様に得られた粒子の粒径を測定したところ、323nm(CV6.2%)であった。 Measurement of the particle size of the as well as the resulting particles was 323nm (CV6.2%).

<実施例6> <Example 6>
微粒子1を微粒子2に変更した以外は、ポリピロールによる着色粒子4の作製方法と同様にして黒色着色粒子を得た(ポリピロールによる着色粒子6)。 Except for changing the fine particles 1 to the microparticles 2 were in the same manner as the colored particles 4 due polypyrrole obtain black colored particles (colored particles by polypyrrole 6). 上記と同様に得られた粒子の粒径を測定したところ、265nm(CV5.5%)であった。 Measurement of the particle size of the as well as the resulting particles was 265nm (CV5.5%).

<比較例1> <Comparative Example 1>
[市販色素による着色粒子の作製1] Preparation of colored particles with a commercial dye 1]
特開2003−202344号公報に記載の実施例1に従い、次のようにして着色粒子を作製した。 Patent in accordance with Example 1 described in 2003-202344 JP, to produce colored particles in the following manner.
油溶性色素オイルブルー(オリエント化学工業製)2.4gをメタノール(和光純薬製)2000mLに溶解させた色素溶液を、固形量で6gとなるように採取した微粒子1の白色溶液を遠心分離(12000rpm)にて上清を廃棄したものの中に添加し、45℃で3日間過熱攪拌処理を行った(この際メタノールを徐々に蒸発させた)。 Oil-soluble dye Oil Blue (manufactured by Orient Chemical Industries) methanol dye solution obtained by dissolving (produced by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) 2000 mL of an 2.4 g, white solution centrifuged microparticles 1 taken so as to 6g a solid amount ( It was added at 12000 rpm) in what the supernatant was discarded, and slow evaporation of 3 days superheated stirring treatment at 45 ° C. were conducted (this case methanol). 次いで遠心分離を行い、メタノールを廃棄後、適度な脱イオン水を添加し、超音波洗浄機にて再分散させた。 Then centrifuged, after disposal of methanol, was added an appropriate deionized water and redispersed by an ultrasonic cleaner. この操作を3回繰り返し、メタノールを完全に脱イオン水に置換した青色着色粒子を得た(市販色素による着色粒子1)。 This operation was repeated three times to obtain a blue colored particles were completely replaced with deionized water and methanol (colored particles with a commercial dye 1). 透過型電子顕微鏡にて粒径を測定したところ、325nm(CV6.8%)であった。 Measurement of the particle size with a transmission electron microscope, was 325nm (CV6.8%).

<比較例2> <Comparative Example 2>
[市販色素による着色粒子の作製2] Preparation of colored particles with a commercial dye 2]
微粒子1を微粒子2に変更した以外は、市販色素による着色粒子1の作製方法と同様にして青色着色粒子を得た(市販色素による着色粒子2)。 Except for changing the fine particles 1 to the microparticles 2, was obtained a blue colored particles in the same manner as the colored particles 1 with a commercial dye (colored particle 2 with a commercial dye). 同様に粒径を測定したところ、254nm(CV5.9%)であった。 Similarly was measured particle size was 254nm (CV5.9%).

[適用例] Application Example]
<インフルエンザウィルス測定用イムノクロマト試薬の作製> <Preparation of influenza virus measurement for Immunochromato reagent>
1. 1. 着色粒子標識抗A型インフルエンザウィルス抗体の調製(1)2wt%着色粒子を含む20mM MES(pH6.5)緩衝液5mLに2.5mg/mL抗A型インフルエンザウィルスモノクロナール抗体を含む20mM MES(pH6.5)緩衝液を5mL添加し、室温で2時間攪拌した。 Colored particles labeled anti-influenza A preparation of virus antibody (1) 20 mM containing 20mM MES (pH6.5) 2.5mg / mL anti-influenza A virus monoclonal antibody in a buffer 5mL containing 2 wt% colored particles MES (pH 6. 5) buffer was 5mL added and stirred for 2 hours at room temperature. その後、13,000rpmで10分間遠心分離し、上清を除去後、10%スクロース含有2%ウシ血清アルブミン(BSA)水溶液を10mL添加し、さらに2時間攪拌後、13,000rpmで10分間遠心分離し、抗体感作着色粒子を得た。 Then centrifuged 10 minutes at 13,000 rpm, after removing the supernatant, 10% sucrose containing 2% bovine serum albumin (BSA) solution was added 10 mL, After stirring for a further 2 hours, then centrifuged for 10 minutes at 13,000 rpm, to give the antibody-sensitized colored particles. その後、更に10%スクロース含有2%BSA水溶液を10mL添加し約1.0wt%着色粒子標識抗A型インフルエンザウィルス抗体(コンジュゲート)を得た。 Then, to obtain an additional 10% sucrose containing 2% BSA solution was 10mL added about 1.0 wt% colored particles labeled anti-influenza A virus antibody (conjugate).

2. 2. コンジュゲート塗布パッドの作製 上記1で調製したコンジュゲートを6.4 OD(λ650nm)/mLとなるように、0.5%カゼイン及び10%スクロース含有トリス緩衝液(pH8.5)と混合してコンジュゲート溶液を作製した。 The conjugate prepared in Preparation 1 above conjugates application pad so that the 6.4 OD (λ650nm) / mL, 0.5% casein and 10% sucrose-containing Tris buffer mixture to conjugate solution and the (pH 8.5) It was produced. 次に、グラスファイバー製パッド(Lydall社製)にイムノクロマトグラフ法用のディスペンサー「XYZ3050」(BIO DOT社製)を用いて該コンジュゲート溶液を10μl/cmで滲みこませた。 Next, a glass fiber pad Dispenser "XYZ3050" for (Lydall Co.) in immunochromatography using (BIO DOT Co.) was crowded blurring the conjugate solution at 10 [mu] l / cm. その後、ドライオーブン内で70℃、30分間加温して乾燥させ、コンジュゲート塗布パッドとした。 Thereafter, 70 ° C. in a dry oven and dried by warming for 30 minutes, was conjugated application pad.

3. 3. 抗インフルエンザウィルス抗体固定化膜の作製 ニトロセルロース膜(Sartorius社製)に、0.75mg/mLに調製した前記着色粒子標識抗A型インフルエンザウィルス抗体とはエピトープを異にする抗A型インフルエンザウィルス抗体及び2.5%スクロースを含む10mMリン酸緩衝液(pH 7.2)を、幅約1mmのライン状に塗布した。 To prepare a nitrocellulose membrane of anti-influenza virus antibody immobilized membrane (Sartorius Inc.), anti-influenza A virus antibodies and different in epitope from that of the colored particles labeled anti-influenza A virus antibodies prepared in 0.75 mg / mL 10mM phosphate buffer containing 2.5% sucrose (pH 7.2), was applied in a line shape having a width of about 1 mm. 塗布は、イムノクロマトグラフ法用のディスペンサー「XYZ3050」(BIO DOT社製)を用い、吐出量を1uL/cmとなるように設定した。 Coating, using a dispenser "XYZ3050" for immunochromatography (BIO DOT Co.), was set discharge amount such that the 1 uL / ​​cm. ライン塗布後のニトロセルロース膜をドライオーブン内で70℃、45分間乾燥させ、抗インフルエンザウィルス抗体固定化膜とした。 70 ° C. The nitrocellulose membrane after line coating in a dry oven and dried for 45 minutes, and the anti-influenza virus antibody immobilized membrane.

4. 4. テストストリップの作製 プラスチック製粘着シートに上記抗インフルエンザウィルス抗体固定化膜を貼り、上記2. Paste the anti-influenza virus antibody immobilized membrane prepared plastic adhesive sheet of the test strip, the two. で作製したコンジュゲート塗布パッドを配置装着し、反対側の端には吸収パッド(Whatman社製、740-E)を配置装着した。 In a conjugate application pad fabricated arranged mounted, the opposite side of the absorbent pad (Whatman Inc., 740-E) to the end and the arrangement is mounted. 最後に、抗体固定化膜および吸収パッドを被覆するように上面にポリエステルフィルムを配置装着し、ラミネートした。 Finally, a polyester film disposed mounted on the upper surface so as to cover the antibody immobilized membrane and the absorbent pad was laminated. このように各構成要素を重ね合わせた構造物を4mm幅に切断し、テストストリップを作成した。 Thus the structure obtained by superimposing each component was cut into 4mm width to prepare a test strip. 該テストストリップの寸法は、4mm×98mm(幅×長さ)であり、イムノクロマトテストストリップの形態にした。 The dimensions of the test strip is a 4 mm × 98 mm (width × length) were in the form of an immunochromatographic test strip.

5. 5. 検体抽出液及び感度確認用サンプルの調製 Preparation of specimen extract and sensitivity confirmation sample
200mM 塩化カリウム、150mM L-アルギニン、0.5% Brij35、0.25% BSA、及び0.05% プロクリン(登録商標)950を含む50mM トリス緩衝液(pH8.5)を検体抽出液とした。 200mM potassium chloride was 150 mM L-arginine, 0.5% Brij35,0.25% BSA, and 50mM Tris buffer containing 0.05% Proclin (TM) 950 (pH 8.5) and specimen extract. また、A型インフルエンザウィルス標準液を検体抽出液で段階希釈し、感度確認用サンプルとした。 Further, the influenza A virus standard was serially diluted with specimen extract was taken as the sensitivity check sample.

6. 6. 発色強度測定 感度確認用サンプルに上記4.で作製したテストストリップを浸し、10分後にラインの発色強度を測定した(表1)。 Immersing a test strip prepared above 4. color intensity measurement sensitivity confirmation samples were measured color intensity of the line after 10 minutes (Table 1). 発色強度測定には、青の発色見本から0.25単位で数値をつけたカラーチャート(0.25〜4.0)を用い、n=3の平均値をその感度確認用サンプルにおける発色強度とした。 The color intensity measured, using a color chart (0.25-4.0) wearing a number in 0.25 units from the color swatches blue was the average value of n = 3 and color intensity at the sensitivity check sample. 尚、黒色粒子の場合は、青の発色見本と同程度の濃さとなる発色見本を別途作製し、同様の評価を行った。 In the case of black particles, separately to prepare a color swatch a density comparable to the color samples of blue, was evaluated in the same manner. 発色強度はその数値が高いほど感度が高く、0.5以上が目視による検出が可能である。 Color intensity is sensitive higher the numerical value, 0.5 or higher can be detected visually.

表1の評価によれば、炭化水素系微粒子の表面にπ共役化合物を含む高分子を被覆させることで、同じ炭化水素系微粒子の表面にπ共役化合物を含まない着色粒子と比較して、より濃色化され視認性に優れた着色粒子が得られることがわかる。 According to the evaluation in Table 1, as compared to the hydrocarbon-based polymer containing a π-conjugated compound to the surface of the microparticles by causing coated, colored particles containing no π-conjugated compounds on the surface of the same hydrocarbon fine particles, and more it can be seen that darkening is excellent colored particles visibility can be obtained.

本発明によれば、粒子表面を形成する組成自身が着色性を示すことで、ラテックス粒子の表面組成を維持し、濃い色調を示すことができるイムノクロマト用着色粒子が得られることから、従来より濃色化が図れる視認性の優れたイムノクロマト用着色粒子、及び該粒子を用いたイムノクロマト試薬を提供できる。 According to the present invention, since the composition itself to form a particle surface exhibits a coloring property, maintaining the surface composition of the latex particles, since the immunochromatographic coloring particles obtained can show an intense color, dark conventionally visibility superior immunochromatography colored particles for the coloring can be achieved, and can provide immunochromatographic reagents with particles.

Claims (7)

  1. 炭化水素系微粒子の表面にπ共役化合物を含む高分子を被覆させたイムノクロマト用着色粒子であって、 A immunochromatographic coloring particles obtained by coating a polymer containing a π-conjugated compound to the surface of the hydrocarbon particles,
    前記炭化水素系微粒子が、 The hydrocarbon-based fine particles,
    ・フェニル基を有する重合性単量体・メタクリロイル基を有する重合性単量体・アクリロイル基を有する重合性単量体からなる群から選ばれる一種類以上と、 And one or more selected from-the group consisting of polymerizable monomer having a polymerizable monomer-acryloyl group having a polymerizable monomer-methacryloyl group having a phenyl group,
    ・フェニル基及びスルホン酸塩を有する重合性単量体 を共重合させたものであることを特徴とするイムノクロマト用着色粒子。 · Immunochromatographic coloring particles characterized in that the polymerizable monomer is obtained by copolymerizing with a phenyl group and a sulfonate.
  2. 前記着色粒子の平均粒径が50〜1000nmであることを特徴とする請求項1に記載のイムノクロマト用着色粒子。 Immunochromatographic coloring particles according to claim 1 having an average particle diameter of the colored particles, characterized in that it is 50-1000 nm.
  3. π共役化合物を含む高分子が、ポリアセチレン、ポリアニリン、ポリフラン、ポリピロール、ポリチオフェンからなる群から選ばれる少なくとも一種類以上であることを特徴とする請求項1または2に記載のイムノクロマト用着色粒子。 Polymers containing π-conjugated compounds, polyacetylene, polyaniline, polyfuran, polypyrrole, immunochromatography coloring particles according to claim 1 or 2, characterized in that at least one or more selected from the group consisting of polythiophene.
  4. 炭化水素系微粒子の表面にπ共役化合物を含む高分子を被覆させる際に、スルホン酸塩を有する重合性単量体を存在させることを特徴とする請求項1〜3のいずれか1項に記載のイムノクロマト用着色粒子。 When to be surface coated with a polymer containing a π-conjugated compounds of the hydrocarbon-based fine particles, according to any one of claims 1 to 3, characterized in that the presence of a polymerizable monomer having a sulfonic acid salt immunochromato for the colored particles.
  5. 前記着色粒子が黒色粒子であることを特徴とする請求項1〜4のいずれか1項に記載のイムノクロマト用着色粒子。 Immunochromatographic coloring particles according to claim 1, wherein the colored particles are black particles.
  6. 請求項1〜5のいずれか1項に記載のイムノクロマト用着色粒子を用いたことを特徴とする診断用イムノクロマト試薬。 Diagnostic immunochromatographic reagents characterized by using an immunochromatography coloring particles according to any one of claims 1 to 5.
  7. 請求項6に記載のイムノクロマト試薬を用いたことを特徴とするイムノクロマト測定方法。 Immunochromatographic measurement method characterized by using the immunochromatographic reagent according to claim 6.
    以 上 that's all

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