JP6261904B2 - 細胞シート移送のための方法および器具 - Google Patents
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Description
(1)細胞シートを移送する方法であって、
(a)細胞シートを載せ置くためのシート状の保持部を備え、該保持部が分断部分で分断可能に構成されている器具の保持部に、分断部分を跨ぐように細胞シートを載せ置くステップ、
(b)保持部に載せ置いた細胞シートを、器具とともに移動させるステップ、
(c)標的部位の上部で保持部を分断して引き抜くことにより、細胞シートを標的部位上に移すステップ、
を含む、前記方法。
(2)保持部の分断部分に切断線を有することにより、分断可能に構成されており、工程(a)において、切断線を跨ぐように細胞シートを載せる、(1)記載の方法。
(3)保持部が可撓性を有するフィルムからなり、細胞シートを載せ置く側の表面が親水性である、(2)記載の方法。
(4)細胞シートを移送するための器具であって、細胞シートを載せ置くためのシート状の保持部を備え、該保持部が分断部分で分断可能であり、分断部分を跨ぐように細胞シートを載せ置くことが可能なように構成されている、前記器具。
(5)細胞シート移植用製品であって、(4)記載の器具と、器具の保持部に分断部分を跨ぐように載せ置かれた細胞シートとを備えた前記製品。
(a)細胞シート1を載せ置くためのシート状の保持部2を備え、該保持部が分断部分3で分断可能に構成されている器具4の保持部に、分断部分を跨ぐように細胞シート1を載せ置くステップ、
(b)保持部に載せ置いた細胞シート1を、器具4とともに移動させるステップ、
(c)標的部位5の上部で保持部を分断して引き抜くことにより、細胞シート1を標的部位上に移すステップ、
を含む。
50μm厚のOPSフィルム(旭化成ケミカルズ社)に、炭酸ガスレーザーカッター装置(レーザーワークス社VLS2.30)を用いて切断線を付与した。出力は10Wとした。切断線が中央部になるように四角形状に切り出し、35mmφのペトリディッシュ底面に配置した。
市販の温度応答性培養皿を用いてマウス骨格筋芽細胞を5.0×106cells/cm2播種し、一週間37℃、5%CO2で培養した。培養液は5%血清を含むDMEM(インビトロジェン)を用いた。1週間後、低温インキュベータで30分インキュベートし細胞シートを剥離した。得られた細胞シートを細胞培養液とともにディスポーザブルピペットで回収し、上記の方法で作製した移送フィルムの入ったペトリディッシュに移し変え、細胞シートが切断線上に配置されるように慎重に培養液のみを除去した。このようにして、移送フィルムの切断線上に細胞シートを配置した(図7)。
8W齢のラットに吸入麻酔処理を実施し、皮下部を露出させ、上記の方法で作製した細胞シートを載せた移送フィルムをピンセットで持ち上げ移植先まで搬送した。皮下の直上で移送フィルムの切断線から左右反対方向にピンセット越しに力をかけ切断線を分離しながら、移植先の皮下部に細胞シートを中心部から落とすように移送した。細胞シートは中央部から皮下に接触し、切断線が裂かれると同時に細胞シートが皮下にしわなく移送されていることを目視で確認した。
2:保持部
3:分断部分
4:器具
5:標的部位
6:ハンドル部
Claims (5)
- 細胞シートを移送する方法であって、
(a)細胞シートを載せ置くためのシート状の保持部を備え、該保持部が分断部分で分断可能に構成されている器具の保持部に、分断部分を跨ぐように細胞シートを載せ置くステップ、
(b)保持部に載せ置いた細胞シートを、器具とともに移動させるステップ、
(c)標的部位の上部で保持部を分断して引き抜くことにより、細胞シートを標的部位上に移すステップ、
を含む、前記方法(ただし前記標的部位が、ヒトの生体内の標的部位である場合を除く)。 - 保持部が分断部分に切断線を有することにより、分断可能に構成されており、工程(a)において、切断線を跨ぐように細胞シートを載せる、請求項1記載の方法。
- 保持部が可撓性を有するフィルムからなり、細胞シートを載せ置く側の表面が親水性である、請求項2記載の方法。
- 細胞シートを移送するための器具であって、細胞シートを載せ置くためのシート状の保持部を備え、該保持部が分断部分で分断可能であり、分断部分を跨ぐように細胞シートを載せ置くことが可能なように構成されている、前記器具。
- 細胞シート移植用製品であって、
請求項4記載の器具と、器具の保持部に分断部分を跨ぐように載せ置かれた細胞シートとを備えた前記製品。
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