JP5883205B2 - ApoBのRNAi調節およびその使用 - Google Patents
ApoBのRNAi調節およびその使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5883205B2 JP5883205B2 JP2007533724A JP2007533724A JP5883205B2 JP 5883205 B2 JP5883205 B2 JP 5883205B2 JP 2007533724 A JP2007533724 A JP 2007533724A JP 2007533724 A JP2007533724 A JP 2007533724A JP 5883205 B2 JP5883205 B2 JP 5883205B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- irna agent
- apob
- seq
- dup
- irna
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 108010027006 Apolipoproteins B Proteins 0.000 title claims description 8
- 102000018616 Apolipoproteins B Human genes 0.000 title claims description 8
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 title description 15
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 title description 12
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 title description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 447
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims description 230
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical group C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 229
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 179
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 151
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 141
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims description 111
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 104
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims description 99
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 94
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 93
- 108091081021 Sense strand Proteins 0.000 claims description 91
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 claims description 87
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 80
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 73
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 69
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 66
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 54
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 49
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 47
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims description 34
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 claims description 34
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 31
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 28
- -1 Aminopropyl Chemical group 0.000 claims description 27
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 25
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 25
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 20
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 20
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 19
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 19
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 17
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 11
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 claims description 11
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 claims description 10
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 claims description 10
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 7
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 claims description 6
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 claims description 6
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 claims description 5
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 claims description 4
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-dimethylaminopyridine Substances CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 claims description 3
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 claims description 2
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 claims description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 206010003211 Arteriosclerosis coronary artery Diseases 0.000 claims 1
- 206010011091 Coronary artery thrombosis Diseases 0.000 claims 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims 1
- 208000026758 coronary atherosclerosis Diseases 0.000 claims 1
- 208000002528 coronary thrombosis Diseases 0.000 claims 1
- 101710095342 Apolipoprotein B Proteins 0.000 description 342
- 102100040202 Apolipoprotein B-100 Human genes 0.000 description 342
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 211
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 170
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 156
- 210000001630 jejunum Anatomy 0.000 description 90
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 77
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 70
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 69
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 68
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 64
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 62
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 59
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 42
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 40
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 39
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 38
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 37
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 36
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 36
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 35
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 34
- 101150102415 Apob gene Proteins 0.000 description 31
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 31
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 30
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 28
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 28
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 28
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 28
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 27
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 27
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 26
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 26
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 26
- 239000000047 product Substances 0.000 description 26
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 24
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 24
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 24
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 23
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 23
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 21
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 20
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 20
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 18
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 18
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 101100491390 Mus musculus Apob gene Proteins 0.000 description 17
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 17
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 17
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 16
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 16
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 16
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 15
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 15
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 108060002716 Exonuclease Proteins 0.000 description 15
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 102000013165 exonuclease Human genes 0.000 description 15
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 15
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 15
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 15
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 14
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 14
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 14
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 14
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 14
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 14
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 13
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 12
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 12
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 12
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 12
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 12
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 11
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 11
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 11
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 11
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 11
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 11
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 11
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 10
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 10
- 101000574648 Homo sapiens Retinoid-inducible serine carboxypeptidase Proteins 0.000 description 9
- 102100025483 Retinoid-inducible serine carboxypeptidase Human genes 0.000 description 9
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Chemical class Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 9
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 9
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 9
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 9
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 8
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 8
- IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N Arg-Gly-Asp Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 8
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 8
- 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 description 8
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 8
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 8
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 8
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 8
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 8
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 8
- 230000010468 interferon response Effects 0.000 description 8
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 8
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 8
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 7
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 7
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 7
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 7
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 7
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 7
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 7
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 7
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 7
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 7
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 7
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 7
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 7
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 7
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 7
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 7
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 7
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 7
- 108010008150 Apolipoprotein B-100 Proteins 0.000 description 6
- 102000006991 Apolipoprotein B-100 Human genes 0.000 description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 6
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 6
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 6
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 6
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 6
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 6
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 6
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 6
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 6
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 description 6
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 6
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 6
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 6
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 6
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 6
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 6
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 6
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 5
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 5
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 5
- 108010072041 arginyl-glycyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 229940124447 delivery agent Drugs 0.000 description 5
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 5
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 5
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 5
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 5
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 5
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 5
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 5
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 5
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- IQFYYKKMVGJFEH-CSMHCCOUSA-N telbivudine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 5
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 5
- HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate Chemical compound CCCCC(CC)COC(=O)CC(S(O)(=O)=O)C(=O)OCC(CC)CCCC HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 4
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 201000001376 Familial Combined Hyperlipidemia Diseases 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 4
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 4
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 4
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 4
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 4
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 4
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 4
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 description 4
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 239000012124 Opti-MEM Substances 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 4
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 4
- RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N Pyridoxal Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(C=O)=C1O RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 4
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 4
- PPQRONHOSHZGFQ-LMVFSUKVSA-N aldehydo-D-ribose 5-phosphate Chemical compound OP(=O)(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PPQRONHOSHZGFQ-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 4
- 125000003282 alkyl amino group Chemical group 0.000 description 4
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 4
- 125000001769 aryl amino group Chemical group 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 4
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 4
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 4
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 125000004986 diarylamino group Chemical group 0.000 description 4
- 125000005240 diheteroarylamino group Chemical group 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 4
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 4
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 125000005241 heteroarylamino group Chemical group 0.000 description 4
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 4
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 4
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 4
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- QTNLALDFXILRQO-UHFFFAOYSA-N nonadecane-1,2,3-triol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)CO QTNLALDFXILRQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 4
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 4
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 4
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 4
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 4
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N tetrahydropyrrole Natural products C1CCNC1 RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 2-deoxy-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)CC=O ASJSAQIRZKANQN-CRCLSJGQSA-N 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 3
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 3
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 3
- 108020003215 DNA Probes Proteins 0.000 description 3
- 239000003298 DNA probe Substances 0.000 description 3
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 description 3
- SMEROWZSTRWXGI-UHFFFAOYSA-N Lithocholsaeure Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 SMEROWZSTRWXGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000012228 RNA interference-mediated gene silencing Methods 0.000 description 3
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 3
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 3
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 3
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 3
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 3
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 3
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 238000013461 design Methods 0.000 description 3
- 125000004663 dialkyl amino group Chemical group 0.000 description 3
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 3
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 3
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 3
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 3
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 3
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 3
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 3
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 3
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 3
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 3
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 3
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 3
- SMEROWZSTRWXGI-HVATVPOCSA-N lithocholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 SMEROWZSTRWXGI-HVATVPOCSA-N 0.000 description 3
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000009437 off-target effect Effects 0.000 description 3
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 3
- 125000002811 oleoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C([H])\C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 3
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 3
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 3
- 125000000714 pyrimidinyl group Chemical group 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 3
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 3
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NOOLISFMXDJSKH-UTLUCORTSA-N (+)-Neomenthol Chemical group CC(C)[C@@H]1CC[C@@H](C)C[C@@H]1O NOOLISFMXDJSKH-UTLUCORTSA-N 0.000 description 2
- DTGKSKDOIYIVQL-WEDXCCLWSA-N (+)-borneol Chemical group C1C[C@@]2(C)[C@@H](O)C[C@@H]1C2(C)C DTGKSKDOIYIVQL-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 2
- DNIAPMSPPWPWGF-VKHMYHEASA-N (+)-propylene glycol Chemical group C[C@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- REPVLJRCJUVQFA-UHFFFAOYSA-N (-)-isopinocampheol Chemical group C1C(O)C(C)C2C(C)(C)C1C2 REPVLJRCJUVQFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 2
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SCYULBFZEHDVBN-UHFFFAOYSA-N 1,1-Dichloroethane Chemical compound CC(Cl)Cl SCYULBFZEHDVBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YPFDHNVEDLHUCE-UHFFFAOYSA-N 1,3-propanediol Chemical group OCCCO YPFDHNVEDLHUCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940035437 1,3-propanediol Drugs 0.000 description 2
- MZMNEDXVUJLQAF-UHFFFAOYSA-N 1-o-tert-butyl 2-o-methyl 4-hydroxypyrrolidine-1,2-dicarboxylate Chemical compound COC(=O)C1CC(O)CN1C(=O)OC(C)(C)C MZMNEDXVUJLQAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TZMSYXZUNZXBOL-UHFFFAOYSA-N 10H-phenoxazine Chemical compound C1=CC=C2NC3=CC=CC=C3OC2=C1 TZMSYXZUNZXBOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 17-β-hydroxy-5-α-Androstan-3-one Chemical compound C1C(=O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 0.000 description 2
- JVVRCYWZTJLJSG-UHFFFAOYSA-N 4-dimethylaminophenol Chemical compound CN(C)C1=CC=C(O)C=C1 JVVRCYWZTJLJSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000035657 Abasia Diseases 0.000 description 2
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 description 2
- 102000007592 Apolipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108010071619 Apolipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 206010003497 Asphyxia Diseases 0.000 description 2
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000013392 Carboxylesterase Human genes 0.000 description 2
- 108010051152 Carboxylesterase Proteins 0.000 description 2
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 description 2
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- NBSCHQHZLSJFNQ-QTVWNMPRSA-N D-Mannose-6-phosphate Chemical compound OC1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O NBSCHQHZLSJFNQ-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NOOLISFMXDJSKH-UHFFFAOYSA-N DL-menthol Chemical group CC(C)C1CCC(C)CC1O NOOLISFMXDJSKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 108010046315 IDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 2
- 108010001831 LDL receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000000853 LDL receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010015340 Low Density Lipoprotein Receptor-Related Protein-1 Proteins 0.000 description 2
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 2
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- 108091007780 MiR-122 Proteins 0.000 description 2
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 2
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 2
- CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N Naproxen Natural products C1=C(C(C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 2
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 2
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 2
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 2
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 2
- KPKZJLCSROULON-QKGLWVMZSA-N Phalloidin Chemical compound N1C(=O)[C@@H]([C@@H](O)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C[C@@](C)(O)CO)NC(=O)[C@H](C2)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](O)CN3C(=O)[C@@H]1CSC1=C2C2=CC=CC=C2N1 KPKZJLCSROULON-QKGLWVMZSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010021757 Polynucleotide 5'-Hydroxyl-Kinase Proteins 0.000 description 2
- 102000008422 Polynucleotide 5'-hydroxyl-kinase Human genes 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- 102100021923 Prolow-density lipoprotein receptor-related protein 1 Human genes 0.000 description 2
- 229910004856 P—O—P Inorganic materials 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 2
- 208000017442 Retinal disease Diseases 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 2
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 2
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 2
- 108091027568 Single-stranded nucleotide Proteins 0.000 description 2
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010062497 VLDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N acridine Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229960003473 androstanolone Drugs 0.000 description 2
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 2
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RIIWUGSYXOBDMC-UHFFFAOYSA-N benzene-1,2-diamine;hydron;dichloride Chemical compound Cl.Cl.NC1=CC=CC=C1N RIIWUGSYXOBDMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- CKDOCTFBFTVPSN-UHFFFAOYSA-N borneol Chemical group C1CC2(C)C(C)CC1C2(C)C CKDOCTFBFTVPSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940116229 borneol Drugs 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 2
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000013599 cloning vector Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000003936 denaturing gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- DTGKSKDOIYIVQL-UHFFFAOYSA-N dl-isoborneol Chemical group C1CC2(C)C(O)CC1C2(C)C DTGKSKDOIYIVQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002222 downregulating effect Effects 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 2
- GEIQNJBWHDTVAY-UHFFFAOYSA-N ethyl 3-[(2-ethoxy-2-oxoethyl)-[6-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)hexanoyl]amino]propanoate Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)NCCCCCC(=O)N(CC(=O)OCC)CCC(=O)OCC)C3=CC=CC=C3C2=C1 GEIQNJBWHDTVAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZFYSKDXJHZWRX-UHFFFAOYSA-N ethyl 3-[6-aminohexanoyl-(2-ethoxy-2-oxoethyl)amino]propanoate Chemical compound CCOC(=O)CCN(CC(=O)OCC)C(=O)CCCCCN KZFYSKDXJHZWRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 2
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 2
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 2
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 2
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 2
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 2
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N isoamylol Chemical compound CC(C)CCO PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010050905 lactosylated LDL Proteins 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 238000009115 maintenance therapy Methods 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 125000002960 margaryl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 229940041616 menthol Drugs 0.000 description 2
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 2
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 2
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 2
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 2
- 229960002009 naproxen Drugs 0.000 description 2
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical compound C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 230000001293 nucleolytic effect Effects 0.000 description 2
- OGIAAULPRXAQEV-UHFFFAOYSA-N odn 2216 Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=O)OC2C(OC(C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(O)=O)C(OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=O)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)O)C1 OGIAAULPRXAQEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 150000008300 phosphoramidites Chemical class 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 2
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 229920000166 polytrimethylene carbonate Chemical group 0.000 description 2
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 2
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N psoralen Chemical compound C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OC=C2 ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003581 pyridoxal Drugs 0.000 description 2
- 235000008164 pyridoxal Nutrition 0.000 description 2
- 239000011674 pyridoxal Substances 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 239000003161 ribonuclease inhibitor Substances 0.000 description 2
- 125000000548 ribosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 2
- 102000014452 scavenger receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010078070 scavenger receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M sodium bromide Chemical compound [Na+].[Br-] JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 2
- ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N spermidine Chemical compound NCCCCNCCCN ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PFNFFQXMRSDOHW-UHFFFAOYSA-N spermine Chemical compound NCCCNCCCCNCCCN PFNFFQXMRSDOHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC[14C](O)=O TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N 0.000 description 2
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 2
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 2
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 2
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 2
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 2
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- NLIVDORGVGAOOJ-MAHBNPEESA-M xylene cyanol Chemical compound [Na+].C1=C(C)C(NCC)=CC=C1C(\C=1C(=CC(OS([O-])=O)=CC=1)OS([O-])=O)=C\1C=C(C)\C(=[NH+]/CC)\C=C/1 NLIVDORGVGAOOJ-MAHBNPEESA-M 0.000 description 2
- LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N (2s,3r)-2-[[(2r)-1-[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N 0.000 description 1
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 description 1
- IVWWFWFVSWOTLP-YVZVNANGSA-N (3'as,4r,7'as)-2,2,2',2'-tetramethylspiro[1,3-dioxolane-4,6'-4,7a-dihydro-3ah-[1,3]dioxolo[4,5-c]pyran]-7'-one Chemical compound C([C@@H]1OC(O[C@@H]1C1=O)(C)C)O[C@]21COC(C)(C)O2 IVWWFWFVSWOTLP-YVZVNANGSA-N 0.000 description 1
- JUDOLRSMWHVKGX-UHFFFAOYSA-N 1,1-dioxo-1$l^{6},2-benzodithiol-3-one Chemical compound C1=CC=C2C(=O)SS(=O)(=O)C2=C1 JUDOLRSMWHVKGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZIZMDHZLHJBNSQ-UHFFFAOYSA-N 1,2-dihydrophenazine Chemical compound C1=CC=C2N=C(C=CCC3)C3=NC2=C1 ZIZMDHZLHJBNSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JBWYRBLDOOOJEU-UHFFFAOYSA-N 1-[chloro-(4-methoxyphenyl)-phenylmethyl]-4-methoxybenzene Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(Cl)(C=1C=CC(OC)=CC=1)C1=CC=CC=C1 JBWYRBLDOOOJEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEPOHXYIFQMVHW-XOZOLZJESA-N 2,3-dihydroxybutanedioic acid (2S,3S)-3,4-dimethyl-2-phenylmorpholine Chemical compound OC(C(O)C(O)=O)C(O)=O.C[C@H]1[C@@H](OCCN1C)c1ccccc1 VEPOHXYIFQMVHW-XOZOLZJESA-N 0.000 description 1
- AOTQGWFNFTVXNQ-UHFFFAOYSA-N 2-(1-adamantyl)acetic acid Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(CC(=O)O)C3 AOTQGWFNFTVXNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AZUHIVLOSAPWDM-UHFFFAOYSA-N 2-(1h-imidazol-2-yl)-1h-imidazole Chemical compound C1=CNC(C=2NC=CN=2)=N1 AZUHIVLOSAPWDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound ClCC1=NC=CC=C1C#N FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZDCMKVLEYCGQX-UDPGNSCCSA-N 2-(diethylamino)ethyl 4-aminobenzoate;(2s,5r,6r)-3,3-dimethyl-7-oxo-6-[(2-phenylacetyl)amino]-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid;hydrate Chemical compound O.CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1.N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 KZDCMKVLEYCGQX-UDPGNSCCSA-N 0.000 description 1
- GIUTUZDGHNZVIA-UHFFFAOYSA-N 2-(ethylamino)acetic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.CCNCC(O)=O GIUTUZDGHNZVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSBLTNPMIGYQGY-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid;boric acid Chemical compound OB(O)O.OCC(N)(CO)CO.OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O OSBLTNPMIGYQGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WROUWQQRXUBECT-UHFFFAOYSA-N 2-ethylacrylic acid Chemical compound CCC(=C)C(O)=O WROUWQQRXUBECT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PYSRRFNXTXNWCD-UHFFFAOYSA-N 3-(2-phenylethenyl)furan-2,5-dione Chemical compound O=C1OC(=O)C(C=CC=2C=CC=CC=2)=C1 PYSRRFNXTXNWCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 4',5'-Dihydropsoralen Natural products C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OCC2 VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 4-[[(3ar,5ar,5br,7ar,9s,11ar,11br,13as)-5a,5b,8,8,11a-pentamethyl-3a-[(5-methylpyridine-3-carbonyl)amino]-2-oxo-1-propan-2-yl-4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a-dodecahydro-3h-cyclopenta[a]chrysen-9-yl]oxy]-2,2-dimethyl-4-oxobutanoic acid Chemical compound N([C@@]12CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@H]5C(C)(C)[C@@H](OC(=O)CC(C)(C)C(O)=O)CC[C@]5(C)[C@H]4CC[C@@H]3C1=C(C(C2)=O)C(C)C)C(=O)C1=CN=CC(C)=C1 QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 0.000 description 1
- CNPURSDMOWDNOQ-UHFFFAOYSA-N 4-methoxy-7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-2-amine Chemical compound COC1=NC(N)=NC2=C1C=CN2 CNPURSDMOWDNOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004172 4-methoxyphenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(OC([H])([H])[H])=C([H])C([H])=C1* 0.000 description 1
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ROUFCTKIILEETD-UHFFFAOYSA-N 5-nitro-2-[(5-nitropyridin-2-yl)disulfanyl]pyridine Chemical compound N1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1SSC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=N1 ROUFCTKIILEETD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPCPONSZWYDXRD-UHFFFAOYSA-N 6-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)hexanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)NCCCCCC(=O)O)C3=CC=CC=C3C2=C1 FPCPONSZWYDXRD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000931526 Acer campestre Species 0.000 description 1
- 241001316595 Acris Species 0.000 description 1
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- 108700031308 Antennapedia Homeodomain Proteins 0.000 description 1
- 101800001976 Apolipoprotein B-48 Proteins 0.000 description 1
- 102400000352 Apolipoprotein B-48 Human genes 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 200000000007 Arterial disease Diseases 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- 229940122361 Bisphosphonate Drugs 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 1
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 241000255581 Drosophila <fruit fly, genus> Species 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 241000283074 Equus asinus Species 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- JIGUQPWFLRLWPJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acrylate Chemical compound CCOC(=O)C=C JIGUQPWFLRLWPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- 108020005004 Guide RNA Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 101001066129 Homo sapiens Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 101000587313 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase Srms Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N L-(-)-Sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 241000254158 Lampyridae Species 0.000 description 1
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 1
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 1
- 108010007013 Melanocyte-Stimulating Hormones Proteins 0.000 description 1
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 1
- 102000029749 Microtubule Human genes 0.000 description 1
- 108091022875 Microtubule Proteins 0.000 description 1
- 102000015728 Mucins Human genes 0.000 description 1
- 108010063954 Mucins Proteins 0.000 description 1
- 101000819572 Mus musculus Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 1
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 1
- KYRVNWMVYQXFEU-UHFFFAOYSA-N Nocodazole Chemical compound C1=C2NC(NC(=O)OC)=NC2=CC=C1C(=O)C1=CC=CS1 KYRVNWMVYQXFEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 208000018262 Peripheral vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 108010009711 Phalloidine Proteins 0.000 description 1
- PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N Phenazine Natural products C1=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3N=C21 PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000254064 Photinus pyralis Species 0.000 description 1
- 102000037602 Platelet Endothelial Cell Adhesion Molecule-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010069381 Platelet Endothelial Cell Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 1
- 229920000805 Polyaspartic acid Polymers 0.000 description 1
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 1
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 description 1
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 1
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 description 1
- 101000781681 Protobothrops flavoviridis Disintegrin triflavin Proteins 0.000 description 1
- 239000004373 Pullulan Substances 0.000 description 1
- 229920001218 Pullulan Polymers 0.000 description 1
- 102000007615 Pulmonary Surfactant-Associated Protein A Human genes 0.000 description 1
- 108010007100 Pulmonary Surfactant-Associated Protein A Proteins 0.000 description 1
- 239000013614 RNA sample Substances 0.000 description 1
- 230000007022 RNA scission Effects 0.000 description 1
- 230000006819 RNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 206010038923 Retinopathy Diseases 0.000 description 1
- 102000003661 Ribonuclease III Human genes 0.000 description 1
- 108010057163 Ribonuclease III Proteins 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 description 1
- 229920000147 Styrene maleic anhydride Polymers 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710137500 T7 RNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 239000008051 TBE buffer Substances 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 108010061174 Thyrotropin Proteins 0.000 description 1
- 102000011923 Thyrotropin Human genes 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- DWCSNWXARWMZTG-UHFFFAOYSA-N Trigonegenin A Natural products CC1C(C2(CCC3C4(C)CCC(O)C=C4CCC3C2C2)C)C2OC11CCC(C)CO1 DWCSNWXARWMZTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007984 Tris EDTA buffer Substances 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 102000044209 Tumor Suppressor Genes Human genes 0.000 description 1
- 108700025716 Tumor Suppressor Genes Proteins 0.000 description 1
- 102100029654 Tyrosine-protein kinase Srms Human genes 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 229930003779 Vitamin B12 Natural products 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNEPTKZEXBPDLF-JDTILAPWSA-N [(3s,8s,9s,10r,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl] carbonochloridate Chemical compound C1C=C2C[C@@H](OC(Cl)=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 QNEPTKZEXBPDLF-JDTILAPWSA-N 0.000 description 1
- YUBGNDHVPXOQEM-UHFFFAOYSA-N [6-[3-[bis(4-methoxyphenyl)-phenylmethoxymethyl]-4-hydroxypyrrolidin-1-yl]-6-oxohexyl]carbamic acid Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(C=1C=CC(OC)=CC=1)(C1C(CN(C1)C(=O)CCCCCNC(O)=O)O)OCC1=CC=CC=C1 YUBGNDHVPXOQEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KBMUPXLPCMFFOM-UHFFFAOYSA-N [6-[3-hydroxy-4-(hydroxymethyl)pyrrolidin-1-yl]-6-oxohexyl]carbamic acid Chemical compound OCC1CN(C(=O)CCCCCNC(O)=O)CC1O KBMUPXLPCMFFOM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QOKMIHKIMQNRES-UHFFFAOYSA-L [Cl-].[Cl-].[Cr++]Cc1ccccc1 Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Cr++]Cc1ccccc1 QOKMIHKIMQNRES-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- XVIYCJDWYLJQBG-UHFFFAOYSA-N acetic acid;adamantane Chemical compound CC(O)=O.C1C(C2)CC3CC1CC2C3 XVIYCJDWYLJQBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000009056 active transport Effects 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000005054 agglomeration Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 150000005215 alkyl ethers Chemical group 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- 150000001409 amidines Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002431 aminoalkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004103 aminoalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004873 anchoring Methods 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 1
- 125000004104 aryloxy group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000037429 base substitution Effects 0.000 description 1
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 150000004663 bisphosphonates Chemical class 0.000 description 1
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 1
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002449 bone cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- MPBRYMWMMKKRGC-UHFFFAOYSA-M carbocyanin DBTC Chemical compound [Br-].C1=CC=CC2=C([N+](=C(C=C(C)C=C3N(C4=C5C=CC=CC5=CC=C4S3)CC)S3)CC)C3=CC=C21 MPBRYMWMMKKRGC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000012754 cardiac puncture Methods 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000005859 cell recognition Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000012059 conventional drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- JVHIPYJQMFNCEK-UHFFFAOYSA-N cytochalasin Natural products N1C(=O)C2(C(C=CC(C)CC(C)CC=C3)OC(C)=O)C3C(O)C(=C)C(C)C2C1CC1=CC=CC=C1 JVHIPYJQMFNCEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZMAODHOXRBLOQO-UHFFFAOYSA-N cytochalasin-A Natural products N1C(=O)C23OC(=O)C=CC(=O)CCCC(C)CC=CC3C(O)C(=C)C(C)C2C1CC1=CC=CC=C1 ZMAODHOXRBLOQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 description 1
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 1
- 150000005690 diesters Chemical class 0.000 description 1
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 description 1
- WQLVFSAGQJTQCK-VKROHFNGSA-N diosgenin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)CC[C@H](O)CC4=CC[C@H]3[C@@H]2C1)C)[C@@H]1C)[C@]11CC[C@@H](C)CO1 WQLVFSAGQJTQCK-VKROHFNGSA-N 0.000 description 1
- WQLVFSAGQJTQCK-UHFFFAOYSA-N diosgenin Natural products CC1C(C2(CCC3C4(C)CCC(O)CC4=CCC3C2C2)C)C2OC11CCC(C)CO1 WQLVFSAGQJTQCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 1
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 208000028659 discharge Diseases 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012154 double-distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 102000010982 eIF-2 Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010037623 eIF-2 Kinase Proteins 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 108010048367 enhanced green fluorescent protein Proteins 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- 125000005745 ethoxymethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])OC([H])([H])* 0.000 description 1
- JHFQLFGNGSHVGQ-UHFFFAOYSA-N ethyl 3-[(2-ethoxy-2-oxoethyl)amino]propanoate Chemical compound CCOC(=O)CCNCC(=O)OCC JHFQLFGNGSHVGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JRFPHUDKKRHKHX-UHFFFAOYSA-N ethyl 4-(ethoxycarbonylamino)butanoate Chemical compound CCOC(=O)CCCNC(=O)OCC JRFPHUDKKRHKHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000001036 exonucleolytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000744 eyelid Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000010579 first pass effect Methods 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 239000012520 frozen sample Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001476 gene delivery Methods 0.000 description 1
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- FLYFLESWJKLOMD-UHFFFAOYSA-N henicosane-1,2,3-triol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)CO FLYFLESWJKLOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010224 hepatic metabolism Effects 0.000 description 1
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 1
- GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N hexamethylphosphoric triamide Chemical compound CN(C)P(=O)(N(C)C)N(C)C GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 108091008039 hormone receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000047486 human GAPDH Human genes 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000005462 in vivo assay Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000000138 intercalating agent Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 210000003963 intermediate filament Anatomy 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 1
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 1
- 125000002346 iodo group Chemical group I* 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 150000002597 lactoses Chemical class 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 150000002634 lipophilic molecules Chemical class 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 230000008604 lipoprotein metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 150000002678 macrocyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 125000004184 methoxymethyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 1
- 210000003632 microfilament Anatomy 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 210000004688 microtubule Anatomy 0.000 description 1
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 1
- 239000003595 mist Substances 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 150000004712 monophosphates Chemical class 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=N1 PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNILTEGFHQSKFF-UHFFFAOYSA-N n-propan-2-ylprop-2-enamide Chemical compound CC(C)NC(=O)C=C QNILTEGFHQSKFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 231100000989 no adverse effect Toxicity 0.000 description 1
- 229950006344 nocodazole Drugs 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 1
- 125000001117 oleyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C([H])\C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 102000002574 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010068338 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 239000005022 packaging material Substances 0.000 description 1
- 210000004738 parenchymal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000009057 passive transport Effects 0.000 description 1
- PNJWIWWMYCMZRO-UHFFFAOYSA-N pent‐4‐en‐2‐one Natural products CC(=O)CC=C PNJWIWWMYCMZRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000863 peptide conjugate Substances 0.000 description 1
- 125000001151 peptidyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 125000004437 phosphorous atom Chemical group 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N phosphoryl Chemical class [P]=O LFGREXWGYUGZLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 230000008884 pinocytosis Effects 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920002627 poly(phosphazenes) Polymers 0.000 description 1
- 108010064470 polyaspartate Proteins 0.000 description 1
- 125000005575 polycyclic aromatic hydrocarbon group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 1
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 1
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000032697 positive regulation of interferon-alpha production Effects 0.000 description 1
- LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N potassium tert-butoxide Chemical compound [K+].CC(C)(C)[O-] LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000001581 pretranslational effect Effects 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 235000019423 pullulan Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000013102 re-test Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 125000006853 reporter group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 125000000946 retinyl group Chemical group [H]C([*])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])=C([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])=C([H])/C1=C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C1(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 1
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 1
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 1
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 1
- 150000003290 ribose derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 210000001991 scapula Anatomy 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 1
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M sodium ascorbate Substances [Na+].OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M 0.000 description 1
- 235000010378 sodium ascorbate Nutrition 0.000 description 1
- 229960005055 sodium ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M sodium-L-ascorbate Chemical compound [Na+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940063673 spermidine Drugs 0.000 description 1
- 229940063675 spermine Drugs 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 1
- 238000012430 stability testing Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 229940014800 succinic anhydride Drugs 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- PXQLVRUNWNTZOS-UHFFFAOYSA-N sulfanyl Chemical class [SH] PXQLVRUNWNTZOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 125000005309 thioalkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 229960000874 thyrotropin Drugs 0.000 description 1
- 230000001748 thyrotropin Effects 0.000 description 1
- 231100000820 toxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 230000007723 transport mechanism Effects 0.000 description 1
- ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N trappsol cyclo Chemical compound CC(O)COC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)COCC(O)C)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1COCC(C)O ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N 0.000 description 1
- 238000011277 treatment modality Methods 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 235000019163 vitamin B12 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 235000019168 vitamin K Nutrition 0.000 description 1
- 239000011712 vitamin K Substances 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
- SFVVQRJOGUKCEG-OPQSFPLASA-N β-MSH Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H]2C(COC(=O)[C@@](O)([C@@H](C)O)C(C)C)=CCN21 SFVVQRJOGUKCEG-OPQSFPLASA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/7105—Natural ribonucleic acids, i.e. containing only riboses attached to adenine, guanine, cytosine or uracil and having 3'-5' phosphodiester links
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/716—Glucans
- A61K31/718—Starch or degraded starch, e.g. amylose, amylopectin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
- C12N2310/315—Phosphorothioates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/321—2'-O-R Modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/351—Conjugate
- C12N2310/3515—Lipophilic moiety, e.g. cholesterol
Description
でなるか、あるいは同剤に由来するものでよい。これらの好ましいiRNA剤は、対象中の全ての非ApoB遺伝子配列に対し4ヌクレオチド以上のミスマッチを含む。
つ驚くべき能力を有する(表8参照)。
1実施形態では、本明細書で記載するように、疎水性部分、例えばコレステロール含有部分を、好ましくはiRNA剤のセンス鎖、およびより好ましくはiRNA剤のセンス鎖の3’端と結合させることによって、iRNA剤を修飾することが好ましい。
(2’−O−AP)、2’−O−ジメチルアミノエチル(2’−O−DMAOE)、2’−O−ジメチルアミノプロピル(2’−O−DMAP)、2’−O−ジメチルアミノエチルオキシエチル(2’−O−DMAEOE)、または2’−O−N−メチルアセトアミド(2’−O−NMA)置換基の導入である。
は脂質代謝の調節障害によって特徴付けられる障害の危険があるかあるいは該障害に罹患している対象に投与することが可能である。iRNA剤は、該障害を有すると診断されているかまたは該障害を有する個体、あるいは該障害の危険がある個体に投与して、障害または障害の症状の発症を遅らせることが可能である。これらの障害には、HDL/LDLコレステロール平衡異常;脂質代謝異常、例えば家族性複合型高脂血症(FCHL)、後天性高脂血症;高コレステロール血症;スタチン耐性高コレステロール血症;冠状動脈疾患(CAD)、冠状動脈心疾患(CHD);血栓症;およびアテローム性動脈硬化症がある。1実施形態では、ApoBを標的とするiRNA剤を、スタチン耐性高コレステロール血症に罹患している対象に投与する。
a.iRNA剤を提供する工程であって、第1鎖がApoBのmRNAのヌクレオチド配列と充分相補的であり、第2鎖が第1鎖とハイブリダイズするのに充分な第1鎖との相補性を有することを特徴とする工程と、
b.ApoB遺伝子を含む細胞とiRNA剤を接触させる工程と、
c.細胞とiRNA剤を接触させる前、または接触させていない対照細胞のApoB遺伝子の発現と、細胞とiRNA剤を接触させた後のApoB遺伝子の発現とを比較する工程と、
d.iRNA剤がApoB遺伝子の発現を阻害するのに有用であるかどうかを判定する工程であって、細胞中に存在するApoBのRNAまたは細胞によって分泌されるタンパ
ク質の量が、細胞とiRNA剤を接触させる前の量より少ない場合、iRNAが有用であることを特徴とする工程と
を含む方法。
ば1本鎖iRNA剤はヘアピン構造またはパンハンドル構造であってもよいし、あるいは該構造を含んでいてもよい。1本鎖iRNA剤は、標的分子に関してアンチセンスであることが好ましい。
ds iRNA剤およびsiRNA剤を含めた本明細書に記載する単離iRNA剤は、例えばRNAの分解によってApoB遺伝子の発現抑制を仲介し得る。便宜上、このようなRNAを本明細書では発現抑制しようとするRNAとも呼ぶ。このような遺伝子を標的遺伝子とも呼ぶ。発現抑制しようとするRNAは、内在性ApoB遺伝子の遺伝子産物であることが好ましい。
vitroアッセイの場合は該アッセイを実施する条件下において、オリゴマー化合物と非標的配列との非特異的結合を回避するのに充分な程度の相補性が必要である。非標的配列は一般に、少なくとも4ヌクレオチド異なっている。
標的ApoBのmRNA)と「充分に相補的」である。iRNA剤は、(SRMS含有サブユニットは除いて)標的RNAと「正確に相補的」であってもよく、例えば標的RNAとiRNA剤がアニーリングして、正確に相補的な領域中のワトソン−クリック塩基対のみで構成されるハイブリッドを形成することが好ましい。「充分に相補的な」iRNA剤は、標的のApoB RNAと正確に相補的な(例えば少なくとも10ヌクレオチドの)内部領域を含み得る。さらに、幾つかの実施形態では、iRNA剤は1ヌクレオチドの違いを特異的に区別する。この場合、1ヌクレオチドの違いがある(例えば7ヌクレオチド以内の)領域に正確な相補性が見られる場合にのみiRNA剤はRNAiを仲介する。好ましいiRNA剤は、表1に提示するセンス配列およびアンチセンス配列に基づくものであるか、あるいは同配列のみで構成されるか、あるいは同配列を含むことになる。
ApoBを標的とするiRNA剤、例えば本明細書に記載するiRNA剤を使用して、対象、例えば異常なApoB遺伝子発現または望ましくないApoB遺伝子発現、例えばApoBの過剰発現と関連のある疾患または障害を有するか、あるいは該疾患または障害を発症する危険があるヒトを治療することが可能である。
療を受けている対象でもよいし、過去にスタチン治療を受けた対象でもよいし、スタチン治療には適さない対象であってもよい。
本明細書の以下の実施例2は、配列予測に基づく遺伝子歩行法を使用して、ヒトおよびマウスApoBのmRNAを標的とする81個のiRNA剤候補を評価したことを示す。与えられた結果に基づいて、表1にApoBを標的とする活性iRNA剤を提示する。活性配列の少なくとも一部分がiRNA剤中に含まれるように、本明細書で提示された活性配列の1つに基づく、該配列を含む、あるいは該配列のみで構成される他のiRNA剤を、容易に設計および作製することが可能である。
て配列特異的な発現抑制を誘導し得るように、対応性は充分でなければならない。
、例えば共有結合している実施形態も含まれる。必要とされる2本鎖領域と、好ましくは3’突出部分とを与えるヘアピンまたは他の1本鎖構造も、本発明の範疇にある。
候補iRNA剤を、標的遺伝子の発現を下方制御する同剤の能力に関して評価することが可能である。例えば、候補iRNA剤を提供し、該iRNA剤を、内因的に標的遺伝子、例えばApoB遺伝子を発現している細胞、あるいはApoBを発現させることが可能な構築物でトランスフェクトされている細胞、例えばHepG2細胞に接触させることが可能である。候補iRNA剤との接触前後の標的遺伝子の発現レベルを、例えばmRNAまたはタンパク質レベルで比較することが可能である。標的遺伝子から発現されるRNAまたはタンパク質の量が、iRNA剤との接触後では低いと判定される場合、該iRNA剤が標的遺伝子の発現を下方制御すると結論付けることが可能である。細胞中の標的のApoB RNAまたはApoBタンパク質のレベルは、任意の望ましい方法によって測定することが可能である。例えば標的RNAのレベルは、ノーザンブロット分析、ポリメラーゼ連鎖反応と組み合わせた逆転写(RT−PCR)、またはRNAseプロテクションアッセイによって測定することが可能である。タンパク質のレベルは、例えばウエスタンブロット分析によって測定することが可能である。
候補iRNA剤を、安定性に関して、例えばiRNA剤が対象の体内に導入されたときのエンドヌクレアーゼまたはエクソヌクレアーゼによる切断の受けやすさに関して評価することが可能である。幾つかの方法を使用して、修飾、特に切断、例えば対象の体内に見られる成分による切断を受けやすい部位を同定することが可能である。
ApoB遺伝子の発現を阻害することが可能であるとして同定されたiRNA剤を、動物モデルにおいて(例えばマウスまたはラットなどの哺乳動物において)in vivoでの機能に関して試験することが可能である。例えば、iRNA剤を動物に投与することが可能であり、該iRNA剤の生体内分布、安定性、およびApoB遺伝子の発現を阻害する同剤の能力に関して評価することが可能である。
iRNA剤を、その細胞内分布に関して評価することも可能である。該評価は、iRNA剤が細胞中に取り込まれたかどうか決定することを含み得る。該評価は、iRNA剤の安定性(例えば半減期)を決定することも含み得る。in vivoでのiRNA剤の評価は、追跡可能なマーカー(例えば、フルオレセインなどの蛍光マーカー;35S、32
P、33P、または3Hなどの放射活性標識;金粒子;または免疫組織化学用の抗原粒子)と結合したiRNA剤の使用によって容易にすることが可能である。
本明細書に記載するのは、RNAiを仲介してApoBの発現を阻害する単離iRNA剤、例えばRNA分子(2本鎖;1本鎖)である。
いOの修飾である。幾つかの場合については、修飾は核酸中の対象部位の全てに存在するが、多くの場合、実際ほとんどの場合はそうではない。例えば、修飾は3’または5’末端部位のみに存在してもよいし、末端領域、例えば鎖の末端ヌクレオチド上あるいは鎖の最後の2、3、4、5、または10ヌクレオチド中の部位にのみ存在していてもよい。修飾は2本鎖領域内、1本鎖領域内、あるいは両方に存在しうる。例えば、結合に関与していないOの位置におけるホスホロチオエート修飾が、鎖の一端または両端のみに存在していてもよいし、末端領域、例えば鎖の末端ヌクレオチド上あるいは鎖の最後の2、3、4、5、または10ヌクレオチド中の部位にのみ存在していてもよいし、あるいは2本鎖領域および1本鎖領域中、特に末端に存在していてもよい。同様に修飾は、センス鎖、アンチセンス鎖、あるいは両方に存在しうる。幾つかの場合、センス鎖とアンチセンス鎖は同じ修飾または同じ種類の修飾を有することになるが、他の場合、センス鎖とアンチセンス鎖は異なる修飾を有することになり、例えば幾つかの場合、1つの鎖、例えばセンス鎖だけを修飾することが望ましい場合がある。
iRNA剤は、両親媒性部分とともに複合体を形成する可能性がある。iRNA剤と共に使用するための例示的な両親媒性部分は、2004年3月8日に出願された共願のPCT出願第PCT/US2004/07070に記載されている。
ク質、脂質またはタンパク質、例えば特定の種類の細胞と結合する抗体;のうち1または複数(好ましくは2以上、より好ましくは3つ全て)と結合した担体物質を含み得る。送達物質と複合体形成したiRNA剤は、2004年3月8日に出願された共願のPCT出願第PCT/US2004/07070に記載されている。
iRNA剤、例えばApoBを標的とするiRNA剤は、増強されたヌクレアーゼ耐性を有していてもよい。耐性を増大させるための1つの方法は、切断部位を同定し、その部位を修飾して切断を阻害することである。例えばジヌクレオチド5’−UA−3’、5’−UG−3’、5’−CA−3’、5’−UU−3’、または5’−CC−3’は、共願かつ同時係属の米国特許出願第60/574,744号およびPCT/US2005/018931に記載されているように、切断部位として働き得る。
A剤は高いヌクレアーゼ耐性を有し得る。好ましい実施形態では、該ヌクレオチド突出部分は1〜4、好ましくは2〜3の非対合ヌクレオチドを含む。好ましい実施形態では、1本鎖ヌクレオチド突出部分の非対合ヌクレオチドであって一番端のヌクレオチド対と直接隣接するヌクレオチドはプリン塩基を含み、前記一番端のヌクレオチド対はG−C対であるか、あるいは端の4つの相補的ヌクレオチド対のうち少なくとも2個がG−C対である。他の実施形態では、ヌクレオチド突出部分は1個または2個の非対合ヌクレオチドを有してもよく、例示的な実施形態ではヌクレオチド突出部分は5’−GC−3’である。好ましい実施形態では、ヌクレオチド突出部分はアンチセンス鎖の3’端上に存在する。1実施形態では、iRNA剤は、2ヌクレオチドの突出部分5’−GC−3’が形成されるように、アンチセンス鎖の3’端上にモチーフ5’−CGC−3’を含む。
末端は、末端に−OHまたはリン酸基を有する必要があるので、前記のNRMは、アンチセンス配列の5’末端では使用されないことが好ましい。このカチオン基は、水素結合形成およびハイブリッド形成への干渉を最少化する塩基上の位置、例えばもう一方の鎖の相補的塩基と相互作用する面から離れた位置(例えばピリミジンの5’位またはプリンの7位)に結合しなければならない。これらについては以下により詳細に述べる。
(v)L−RNA、2’−5’結合、逆向きの結合、α−ヌクレオシド。したがって、他の好ましいNRMに含まれるものは、LヌクレオシドおよびL−ヌクレオシド由来のヌクレオチド二量体;2’−5’リン酸結合、非リン酸結合および修飾リン酸結合、例えばチオリン酸、ホスホルアミデートおよびホウ素化リン酸;逆向きの結合、例えば3’−3’または5’−5’結合を有する二量体;糖の1’位にα結合を有するモノマー、例えば本明細書に記載のα結合を有する構造が挙げられる。
好ましい。iRNA剤の2配列間の充分なハイブリダイゼーションが保たれるという条件で、修飾はセンス配列中の任意の場所において使用することが可能である。幾つかの実施形態では、対象の配列または遺伝子を標的としない配列の切断部位または切断領域中にNRMを置くことが望ましい。というのは、オフターゲットの発現抑制を最少にする可能性があるからである。
iRNA剤の薬理学的性質を含めたiRNA剤の性質は、例えば、リガンド、例えば係留リガンドを導入することによって影響され調節され得る。
ヌクレアーゼ(例えばEDTA)、親油性分子、例えばコレステロール、コール酸、アダマンタン酢酸、1−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、グリセロール(例えばそのエステルおよびエーテル、例えばC10、C11、C12、C13、C14、C15、C16、C17、C18、C19、またはC20アルキル;例えば1,3−ビス−O(ヘキサデシル)グリセロール、1,3−ビス−O(オクタデシル)グリセロール)、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メンソール、1,3−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、O3−(オレオイル)リトコール酸、O3−(オレオイル)コレイン酸、ジメトキシトリチル、またはフェノキサジン)およびペプチド複合体(例えばアンテナペディアペプチド、Tatペプチド)、アルキル化剤、リン酸、アミノ、メルカプト、PEG(例えばPEG−40K)、MPEG、[MPEG]2、ポリアミノ、アルキル、置換アルキル、放射標識マーカー、酵素、ハプテン(例えばビオチン)、輸送/吸収促進物質(例えばアスピリン、ビタミンE、葉酸)、合成リボヌクレアーゼ(例えばイミダゾール、ビスイミダゾール、ヒスタミン、イミダゾールクラスター化合物、アクリジン−イミダゾール複合体、テトラアザマクロサイクルのEu3+錯体)、ジニトロフェニル、HRP、またはAPがある。
とあまり強く結合しない脂質または脂質系リガンドを使用して、複合体を腎臓に向けることが可能である。
iRNA剤は、第2の物質と結合、例えば共有結合させることが可能である。例えば、脂質障害などの特定の障害を治療するために使用されるiRNA剤は、例えばiRNA剤以外の薬剤などの第2の治療剤と結合させることが可能である。第2の治療剤は、同じ障害の治療を対象とする薬剤であってよい。
好ましい実施形態では、iRNA剤は5’リン酸化されているか、5’プライム末端にホスホリル類似体を含む。アンチセンス鎖の5’−リン酸修飾には、RISC仲介性の遺伝子発現抑制と適合性がある修飾が挙げられる。適切な修飾には、5’−1リン酸((HO)2(O)P−O−5’);5’−2リン酸((HO)2(O)P−O−P(HO)(O)−O−5’);5’−3リン酸((HO)2(O)P−O−(HO)(O)P−O−P(HO)(O)−O−5’);5’−グアノシンキャップ(7−メチル化体または非メチル化体)(7m−G−O−5’−(HO)(O)P−O−(HO)(O)P−O−P(HO)(O)−O−5’);5’−アデノシンキャップ(Appp)、および任意の修飾または非修飾ヌクレオチドキャップ構造(N−O−5’−(HO)(O)P−O−(HO)(O)P−O−P(HO)(O)−O−5’);5’−モノチオホスフェート(ホスホロチオエート;(HO)2(S)P−O−5’);5’−モノジチオホスフェート(ホスホロジチオエート;(HO)(HS)(S)P−O−5’)、5’−ホスホロチオレート((HO)2(O)P−S−5’);酸素/イオウで置換された1リン酸、2リン酸および3リン酸の任意の他の組合せ(例えば5’−α−チオトリホスフェート、5’−γ−チオトリホスフェートなど)、5’−ホスホロアミデート((HO)2(O)P−NH−5’、(HO)(NH2)(O)P−O−5’)、5’−アルキルホスホネート(R=アルキル=メチル、エチル、イソプロピル、プロピルなど、例えばRP(OH)(O)−O−5’−、(OH)2(O)P−5’−CH2−)、5’−アルキルエーテルホスホネート(R=アルキルエーテル=メトキシメチル(MeOCH2−)、エトキシメチルなど、例えばRP(OH)(O)−O−5’−)がある。
肝臓に対する標的化
ApoBを標的とするiRNA剤は、例えば会合によって、例えばiRNA剤と親油性成分、例えば脂質、オレイル、レチニル、またはコレステリル残基との結合によって、肝臓に向けることが可能である。コレステロールとの結合が好ましい。iRNA剤と会合、例えば結合させることが可能な他の親油性成分には、コール酸、アダマンタン酢酸、1−ピレン酪酸、ジヒドロテストステロン、1,3−ビス−O(ヘキサデシル)グリセロール、ゲラニルオキシヘキシル基、ヘキサデシルグリセロール、ボルネオール、メンソール、1,3−プロパンジオール、ヘプタデシル基、パルミチン酸、ミリスチン酸、O3−(オレオイル)リトコール酸、O3−(オレオイル)コレイン酸、ジメトキシトリチル、またはフェノキサジンがある。別例として、iRNA剤は、該iRNA剤と低密度リポタンパ
ク質(LDL)、例えばラクトシル化LDLとの会合(例えば結合)によって肝臓に向けることが可能であり、あるいはiRNA剤は、糖残基を有するポリマー担体複合体とiRNA剤の会合、例えば結合によって肝臓に向けることが可能である。
如何なる理論によって縛られることも望まないが、コレステロール結合iRNA剤と、リポタンパク質を構成する幾つかの要素(例えばコレステロール、コレステリルエステル、リン脂質)との間の化学的類似性は、iRNA剤と血中リポタンパク質(例えばLDL、HDL)との会合、および/またはiRNA剤とコレステロールに対する親和性を有する細胞内成分、例えばコレステロール輸送経路の成分との相互作用をもたらす可能性がある。リポタンパク質およびその構成要素は、さまざまな能動的および受動的輸送機構、例えば(限定するものではないが)LDL−受容体に結合したLDLのエンドサイトーシス、スカベンジャー受容体Aとの相互作用による酸化LDLあるいは修飾LDLのエンドサイトーシス、肝臓中のスカベンジャー受容体B1仲介型のHDLコレステロールの取り込
み、ピノサイトーシス、あるいはABC(ATP−結合カセット)輸送タンパク質、例えばABC−A1、ABC−G1またはABC−G4による膜を介したコレステロール輸送によって、細胞によって取り込まれ処理される。したがって、コレステロール結合iRNA剤は、このような輸送機構を有する細胞、例えば肝臓の細胞による容易な取り込みを享受するであろうと思われる。このように本発明は、iRNA剤の標的を、ある種の細胞表面要素、例えば受容体を発現している細胞に設定することに関する証拠および一般的方法を提供する。この方法は、前記細胞表面要素の天然リガンド(例えばコレステロール)をiRNA剤に結合させることによって、あるいは前記要素の天然リガンド(例えばLDL、HDL)と会合または結合する化学基部分(例えばコレステロール)をiRNA剤に結合させることによって行われる。
RNA、例えばiRNA剤は、例えば細胞に送達された外来DNAの鋳型から、細胞中in vivoで生成されうる。例えば、該DNA鋳型をベクター中に挿入して遺伝子療法用ベクターとして使用することが可能である。遺伝子療法用ベクターは、例えば静脈内注射、局所投与(米国特許第5,328,470号明細書)によって、あるいは定位注射(例えば、チェンら(Chen et al.)、Proc.Natl.Acad.Sci.USA91:3054〜3057、1994を参照)によって、対象に送達することが可能である。遺伝子療法用ベクターの医薬調製物は、許容可能な希釈剤中に遺伝子療法用ベクターを含んでいてもよいし、あるいは遺伝子送達用媒体が埋め込まれた徐放性マトリクスを含んでなるものでもよい。例えば、DNAの鋳型が2つの転写単位を含み、転写単位の一方がiRNA剤の上部鎖を含む転写産物を生成し、一方がiRNA剤の底部鎖を含む転写産物を生成するものであってもよい。鋳型が転写されると、iRNA剤が生成され、遺伝子発現抑制を仲介するsiRNA剤の断片へとプロセシングされる。
本明細書に記載するiRNA剤は、iRNA剤とヒトおよび非ヒト動物の配列との相補性によって、治療毒性の決定が容易になされるように設計することが可能である。これらの方法によって、iRNA剤は、ヒト由来の核酸配列ならびに少なくとも1種の非ヒト動物、例えばげっ歯類、反芻動物または霊長類などの非ヒト哺乳動物由来の核酸配列と完全に相補的な配列で構成されうる。例えば、非ヒト哺乳動物はマウス、ラット、イヌ、ブタ、ヤギ、ヒツジ、ウシ、サル、ボノボ(Pan paniscus)、チンパンジー(Pan troglodytes)、アカゲザル(Macaca mulatto)、またはカニクイザル(Cynomolgus monkey)であってよい。iRNA剤の配列は、非ヒト哺乳動物およびヒトの相同遺伝子、例えばがん遺伝子または腫瘍抑制遺伝子内の配列と相補的であることも考えられる。非ヒト哺乳動物におけるiRNA剤の毒性を測定することによって、ヒトにおける該iRNA剤の毒性を推定することが可能である。より困難な毒性試験用に、iRNA剤は、ヒトならびに2種以上、例えば2種または3種あるいはそれ以上の非ヒト動物と相補的であってよい。
さまざまな方法によって、iRNAを例えば大量に生産することが可能である。例示的な方法には、有機合成およびRNA切断、例えばin vitro切断がある。
大型のバイオリアクタ、例えばファルマシアバイオテックAB(Pharmacia Biotec AB)[スウェーデン国ウプサラ(Uppsala)所在]のOligoPilot(商標)IIを使用して、所与のiRNAのための大量の特定のRNA鎖を生産することが可能である。OligoPilot(商標)IIリアクタは、わずか1.5モル濃度過剰のホスホロアミダイトヌクレオチドを使用して、ヌクレオチドを効率良く結合させることが可能である。RNA鎖を作製するために、リボヌクレオチドアミダイトを使用する。モノマー付加の標準サイクルを使用して、iRNA用のオリゴヌクレオチド鎖を合成することが可能である。典型的には、2本の相補鎖を別々に生産した後、例えば、固相担体からの切り離しおよび脱保護の後にアニーリングさせる。
例えば、iRNA調製物を純粋な再蒸留水中に沈殿および再溶解させ、凍結乾燥させることが可能である。次いで乾燥iRNAを、目的とする配合工程に適した溶液中に再懸濁
させることが可能である。
配合
本明細書に記載するiRNA剤は、対象に投与するために配合することが可能である。
幾つかの実施形態では、iRNA剤、例えば2本鎖iRNA剤、またはsiRNA剤(例えば前駆体、例えばsiRNA剤にプロセシングすることが可能である大きなiRNA剤、または、iRNA剤、例えば2本鎖iRNA剤もしくはsiRNA剤またはそれらの前駆体をコードするDNA)を、特定の細胞を標的とするように配合する。例えば、iRNAを含むリポソームまたは粒子または他の構造体も、標的細胞上の特定分子を認識する標的化部分を含み得る。標的化部分は、標的細胞に対する特異的親和性を有する分子であってよい。標的化部分は、標的細胞の表面上に見られるタンパク質を対象とする抗体、あるいは標的細胞の表面上に見られる分子のリガンドまたはリガンドの受容体結合部分を含み得る。
,427号明細書には、タンパク質またはペプチドを使用してリポソームを標的化するための方法が記載されている。他の例では、リポソームのカチオン性脂質成分を、標的化部分を用いて誘導体化する。例えば国際公開公報第96/37194号パンフレットには、N−グルタリルジオレイルホスファチジルエタノールアミンのN−ヒドロキシスクシンイミド活性化エステルへの転換が記載されている。該生成物は次いでRGDペプチドと結合された。他の標的化法は、本明細書の他の箇所に記載する。
iRNA剤、例えばApoBを標的とするiRNA剤を含む組成物は、さまざまな経路によって対象に送達することが可能である。例示的な経路には、クモ膜下、実質、静脈内、鼻腔、口腔、および眼内への送達がある。iRNA剤は、投与に適した医薬組成物に組み込むことが可能である。例えば組成物は、1種または複数種のiRNA剤および医薬として許容可能な担体を含み得る。本明細書で使用する用語「医薬として許容可能な担体」は、医薬の投与と適合性がある、任意の全ての溶媒、分散媒、コーティング剤、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などを含むものとする。医薬活性物質用のためのこのような媒体および物質の使用は、当技術分野でよく知られている。任意の従来の媒体または物質が本発明の活性化合物と不適合でない限り、本組成物における使用が企図される。補助活性化合物を組成物中に組み込むことも可能である。
一般にiRNA剤は、任意の適切な方法によって投与することが可能である。本明細書で使用するように、局所送達とは、眼、粘膜、体腔表面を含めた身体の任意の表面、あるいは任意の内部表面へのiRNA剤の直接的施用を意味しうる。局所投与用の配合物は、経皮パッチ、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、滴剤、スプレー、および液体を含み得る。従来の医薬担体、水性ベース、粉末ベースまたは油状ベース、増粘剤などが必要であるか、あるいは望ましい可能性がある。対象の表皮または真皮、またはその特定層、または下層組織にiRNA剤を選択的に送達するための手段として、局所投与を使用することも可能である。
非経口投与用の配合物は滅菌水溶液を含むことが可能であり、滅菌水溶液は緩衝剤、希釈剤および他の適切な添加剤も含み得る。例えばリザーバと連結させた心室内カテーテルによって、心室内注射を容易にすることが可能である。静脈内で使用するためには、溶質の総濃度を調節して調製物を等張にしなければならない。
乾燥粉末分散装置を用いて送達を実施することが可能である。定量装置が好ましい。噴霧装置または吸入器を使用する利点の1つは、装置内蔵式なので汚染の可能性が最少になることである。例えば乾燥粉末分散装置は、簡単に乾燥粉末として配合可能な薬剤を送達する。単独あるいは適切な粉末担体と組み合わせた凍結乾燥または噴霧乾燥粉末として、iRNA組成物を安定して保存することが可能である。吸入用組成物の送達は、タイマー、容量測定器、計時デバイス、もしくは時間表示器を含み得る計量計時要素であって、装置に組み込むとエアロゾル薬剤投与中の投与量追跡、コンプライアンス調査、および/または患者への投与誘導が可能な計量計時要素によって仲介することが可能である。
用語「治療有効量」は、治療を受ける対象において望ましい薬物レベルをもたらして期待の生理学的応答を得るために必要とされる組成物中に存在する量である。
用語「医薬として許容可能な担体」は、該担体が、肺に対する顕著で有害な毒性作用を伴わずに、肺に取り込まれうることを意味する。
緩衝剤;塩化ナトリウムなどの塩がある。これらの担体は結晶形でも無定形でもよいし、あるいはこの2つの混合物であってよい。
1実施形態では、1日1回より少ない頻度、例えば2、4、8または30日毎よりも少ない頻度で、単位用量を投与する。他の実施形態では、単位用量は一定頻度では投与しない(例えば、規則的な頻度で投与しない)。例えば、単位用量を1回で投与することが可能である。
1実施形態では、初回量、および1または複数の維持量のiRNA剤、例えば2本鎖iRNA剤、またはsiRNA剤(例えば前駆体、例えばsiRNA剤へとプロセシングさ
れうる大きなiRNA剤、またはiRNA剤、例えば2本鎖iRNA剤もしくはsiRNA剤またはその前駆体をコードするDNA)を対象に投与する。1または複数の維持量は一般に初回量より低く、例えば初回量の半分である。維持治療法は1日に体重1kgあたり0.01μg〜75mgの範囲、例えば1日に体重1kgあたり70、60、50、40、30、20、10、5、2、1、0.5、0.1、0.05、0.01、0.005、0.001、または0.0005mgの1または複数の用量で対象を治療することを含み得る。維持用量は5、10、または30日毎に1回を超えずに投与することが好ましい。さらに、該治療法は一定期間続けることが可能であり、該期間は個々の疾患の性質、重篤度、および患者の全体的な状態に応じて変わると思われる。好ましい実施形態では、1日当たり1回を超えずに、例えば、24時間、36時間、48時間、あるいはさらに長い時間当たり1回を超えずに、例えば、5日または8日毎に1回を超えずに前記用量を送達することが可能である。治療後、患者の状態の変化に関して、および疾患状態の症状の緩和に関して、患者を調べることが可能である。化合物の用量は、患者が現行の用量レベルには有意に応答しない場合増大させてもよいし、あるいは疾患状態の症状の緩和が観察された場合、疾患状態が消散している場合、または望ましくない副作用が観察される場合は用量を減らすことも可能である。
ある。例えば、iRNA剤組成物の投与後に対象を調査することが可能である。該調査からの情報に基づいて、さらなる量のiRNA剤組成物を投与することが可能である。
〔実施例〕
試薬供給元
試薬供給元を本明細書に具体的に記載していない場合、かかる試薬は、分子生物学に適用するための標準的な品質/純度として、任意の分子生物学用試薬の供給元から入手可能である。
Expedite(商標)8909合成機(アプライドバイオシステムズ、アプレラドイツ社(Applied Biosystems,Applera Deutshland GmbH)、ドイツ国ダルムシュタット(Darmstadt)所在)および固体担体として微細孔性ガラス(controlled pore glass)(CPG、500Å、グレンリサーチ社(Glen Research)、米国バージニア州スターリング(Sterling)所在)を用いて、1μmolスケールで固相合成により1本鎖RNAを作製した。RNAおよび2’−O−メチルヌクレオチドを含むRNAを、それぞれ対応するホスホロアミダイトおよび2’−O−メチルホスホロアミダイト(プロリゴバイオケミー社(Proligo Biochemie GmbH)、ドイツ国ハンブルク(Hamburg)所在)を用いて固相合成により作製した。これらのホスホロアミダイトを、例えば、「Current protocol in nucleic acid
chemistry」、ボーケージ、エス.エル.(Beaucage,S.L.)ら編、(ジョンワイリーアンドサンズ社(John Wiley&Sons,Inc.)、米国ニューヨーク州ニューヨーク所在)に記載されている標準的なヌクレオシドホスホロアミダイト化学反応を用いて、オリゴリボヌクレオチド鎖の配列内の選択された位置に組み込んだ。ヨード酸化剤溶液をBeaucage試薬(クルアケム社(Chruachem Ltd.)、英国グラスゴー(Glasgow)所在)のアセトニトリル(1%)溶液で置き換えることにより、ホスホロチオエート結合を導入した。さらに補助試薬はマリンクロットベーカー社(Mallinckrodt Baker)(ドイツ国グリースハイム(Griesheim)所在)より得た。
マンコールター社(Beckman Coulter GmbH)、ドイツ国ウンターシュレイフハイム(Unterschleissheim)所在)を用いて260nmの波長での各RNA溶液のUV吸収により決定した。アニーリング緩衝液(20mMリン酸ナトリウム、pH6.8、100mM塩化ナトリウム)中で相補鎖の等モル溶液を混合し、水浴中85〜90℃で3分間加熱し、3〜4時間かけて室温に冷却することにより、2本鎖RNAを生成させた。精製したRNA溶液を使用まで−20℃で貯蔵した。
C/ヘキサン)により精製すると、ABが11.87g(88%)得られた。
キサノイル}−4−オキソ−ピロリジン−3−カルボン酸エチルエステル AE
冷却後、1NのHCl(12.5mL)を加え、混合物を酢酸エチル(3×40mL)で抽出した。合わせた酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウムで脱水し、真空下に濃縮すると生成物が得られ、これをカラムクロマトグラフィー(10%MeOH/CHCl3)により精製した(89%)。
実施例2.siRNAをヒトおよびマウスApoB遺伝子中の標的領域に対して設計した
核酸配列を、標準命名法と、特に表2の略語を用いて以下に示す。
有することが見出された領域である。表3に示したアンチセンス鎖は、23ヌクレオチドのセンス鎖領域のヌクレオチド1〜23に相補的である。マウスApoBのORFにおける対応する23ヌクレオチドの領域の最も5’−側のヌクレオチドの位置も提示されている。
上記のsiRNAの活性を、HepG2細胞中で試験した。
アーゲー、ドイツ国ベルリン所在、カタログ番号K0238)を含むように添加されたDMEM(バイオクロム アーゲー、ドイツ国ベルリン所在、カタログ番号F0435)
中で、加湿インキュベータ(ヘレウス ヘラセル(Heraeus HERAcell)、ケンドロラボラトリープロダクツ社(Kendro Laboratory Products)、ドイツ国ランゲンゼルボルト(Langenselbold)所在)で5%CO2を含む雰囲気下37℃で培養した。
AL−DUP HCVのセンス鎖は、C型肝炎ウイルス(受託番号:D89815)の3’−非翻訳領域の9472位〜9493位に対応する。
センス鎖のヌクレオチド1〜21は、増強緑色蛍光タンパク質(GenBank受託番号:U57607)を有するクローニングベクターpEGFP−C3中の843位〜864位に対応する。
Polystyrene High Bind Microplates)(コーニングビーブイ ライフサイエンス社(Corning B.V.Life Sciences)、オランダ国スキポールライク(Schiphol−Rijk)所在、カタログ番号9018)をアッセイに使用した。抗ヒトアポリポタンパク質Bヤギポリクローナル抗体(ケミコンインターナショナル社(Chemicon International GmbH)、ドイツ国ホーフハイム(Hofheim)所在、カタログ番号AB742)を、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)(Ca2+、Mg2+を含まないPBSダルベッコ(Dulbecco)、バイオクロム アーゲー(Biochrom AG)、ドイツ国ベルリン所在、カタログ番号L182−05)中で1:1000に希釈し、この希釈物100μlにて96ウェルプレートを4℃で終夜コーティングした。PBS中1%のウシ血清アルブミン(BSA)(Carl Roth GmbH&Co KG、ドイツ国カールスルーエ(Karlsruhe)所在、カタログ番号8076.2)300μlでブロッキングした後、プレートをPBSで3回洗浄した。
GmbH&Co KG、ドイツ国カールスルーエ(Karlsruhe)所在、カタログ番号9127.1)および0.1%BSAを含むPBSで1:1に希釈した。この希釈液100μlをそれぞれのウェルに加えた。室温で2時間インキュベーションした後、プレートを0.1%トゥイーン20含有PBSで5回洗浄し、続いてPBSで3回洗浄した。0.1%トゥイーン20および3%BSAを含むPBSで1:1000に希釈したホースラディッシュペルオキシダーゼ結合抗ヒトアポリポタンパク質B−100ヤギポリクローナル抗体(アカデミィバイオメディカル社(Academy Bio−Medical
Company)、米国テキサス州ヒューストン所在、カタログ番号20H−G1−b)100μlを、それぞれのウェルに加えた。プレートを室温で2時間インキュベートした。0.1%トゥイーン20を含むPBSで5回、PBSで3回プレートを洗浄した後、0.03%過酸化水素(メルクバイオサイエンスゲーエムベーハー(Merck Biosciences GmbH)、ドイツ国バートゾーデン(Bad Soden)所在、カタログ番号386790)を含む24mmol/Lのクエン酸緩衝液(シグマ−アルドリッチ社、ドイツ国タウフキルヒェン(Taufkirchen)所在、カタログ番号C1909−1KG)(pH5.0)中0.9mg/mlのOPD(o−フェニレンジアミン2塩酸塩、メルクバイオサイエンスゲーエムベーハー、カタログ番号523121)とともにウェルをインキュベートした。0.5mol/LのH2SO4(メルクKgaA社、ドイツ国ダルムシュタット(Darmstadt)所在、カタログ番号100731)を加えることにより酵素反応を停止し、490nmでの吸光度を分光光度計(パーキンエルマーワラックビクトル3(Perkin Elmer Wallac Victor3)1420マルチラベルリーダー、パーキンエルマー エルエーエス ゲーエムベーハー(PerkinElmer LAS GmbH)、ドイツ国ロドゴウ(Rodgau)所在)で測定した。どのマウス遺伝子とも関連のないsiRNA2重鎖を対照として使用し、所与のApoB特異的siRNA2重鎖の活性を、処理した細胞の上清中のApoBタンパク質濃度の、対照siRNA2重鎖で処理した細胞の上清中のApoBタンパク質濃度に対する百分率として表現した。siRNA2重鎖のセンス鎖へのコレステロール部分の結合は、培養HepG2細胞中でのApoB分泌誘発効果を高めた。従って、1つのsiRNA2重鎖対照には、結合コレステロール部分を含めた(AL−DUP 5129)。
書に従いApoBおよびGAPDH mRNAを定量した。捕捉伸長プローブ(CE)、標識伸長プローブ(LE)およびブロッキングプローブ(BL)のための核酸配列は、QuantiGene(登録商標)ProbeDesigner(商標)ソフトウェア2.0(ゲノスペクトラ社(Genospectra)、米国カリフォルニア州フレモント(Fremont)所在、カタログ番号QG−002−02)の助けを借りてApoBおよびGAPDHの核酸配列から選択した。マウスおよびヒトのApoBの定量に使用したプローブヌクレオチド配列をそれぞれ表4および表5に示す。マウスおよびヒトのGAPDHの定量に使用したプローブヌクレオチド配列をそれぞれ表6および表7に示す。
5000、AL−DUP 5002、AL−DUP 5013、AL−DUP 5022、AL−DUP 5024、AL−DUP 5028、AL−DUP 5029、AL−DUP 5030、AL−DUP 5035、AL−DUP 5036、AL−DUP
5038、AL−DUP 5046、AL−DUP 5047、AL−DUP 5048、AL−DUP 5049、AL−DUP 5060、AL−DUP 5083、AL−DUP 5084、AL−DUP 5087、AL−DUP 5088、AL−DUP
5089、AL−DUP 5093、AL−DUP 5094、AL−DUP 5097、AL−DUP 5098、AL−DUP 5100、AL−DUP 5101であった。
により算出した。以下のパラメータを用いる線形フィッティングから得られたパラメータ化された式を用いて、IC50値を算定した:用量反応1サイト(Dose Response One Site)、4パラメータロジスティックモデル、fit=(A+((B−A)/(1+(((10^C)/x)^D))))、inv=((10^C)/((((B−A)/(y−A))−1)^(1/D)))、res=(y−fit) (例として、図2参照)。
実施例6.siRNA2重鎖を修飾すると、ヌクレアーゼ耐性の改善を示した
例えば血清および細胞内媒質などの生体液中に存在するヌクレアーゼによる分解に対しオリゴヌクレオチド鎖の耐性を高めるために、siRNA2重鎖AL−DUP 5024およびAL−DUP 5048を種々の化学修飾で変化させた。具体的には、ホスホロチオエート結合を、アンチセンス鎖の21位と22位の間および22位と23位の間に、および/またはセンス鎖の20位と21位の間に導入(表10参照)することにより、エクソヌクレアーゼ分解に対するsiRNAの安定性を増大させた。
AL−DUP 5163は、アンチセンス鎖の21位と22位に2’−O−Me基を、
ならびに21位と22位、および22位と23位の間にホスホロチオエート結合を有し、かつセンス鎖の3’−末端にコレステロール部分が結合している。
AL−DUP 5167は、アンチセンス鎖の21位と22位に2’−O−Me基を、ならびに21位と22位、および22位と23位の間にホスホロチオエート結合を有し、かつセンス鎖の3’−末端にコレステロール部分が結合している。
び18位、ならびにそのアンチセンス鎖の21位および22位に2’−O−Me修飾を有し、アンチセンス鎖の21位と22位、および22位と23位の間にホスホロチオエート結合を有し、かつセンス鎖の3’−末端にコレステロール部分が結合している。
Gel(登録商標)チューブ(エッペンドルフ社(Eppendorf)、ドイツ国ハンブルク所在、カタログ番号0032005.152)に移液し、500μlの50%フェノール、48%クロロホルム、2%イソアミルアルコール(カールロス ゲーエムベーハー ウント コー カーゲー(Carl Roth GmbH&Co KG)、ドイツ国カールスルーエ(Karlsruhe)所在、カタログ番号A156.2)と混合し、さらにクロロホルム300μlを加えた。チューブを30秒間激しくボルテックスし、続いて4℃で16,200rcfにて15分間遠心分離した。水性上清を新しいチューブに移液し、3MのNa−アセテートpH5.2(40μl)、GlycoBlue(商標)1μl(アンビオン社(Ambion)、米国テキサス州所在、カタログ番号9516)および95%エタノール1mlと混合した。RNAを−20℃で終夜沈殿させた。
27G針を用いて、尾静脈注射によりマウスにsiRNAをボーラス投与した。siRNAをPBSに溶解して、体重1g当たり8μlの目的用量を送達可能な濃度とした。注射しやすいように、マウスを投薬前におよそ3分間赤外線ランプ下に置いた。
に使用したプローブヌクレオチド配列を表4に示す。GAPDHの定量に使用したプローブヌクレオチド配列を表6に示す。
マウス血清中のApoB100タンパク質量を定量するために、ELISAアッセイを行った。アッセイを行うために、96ウェルプレートをマウスApoB100特異的モノクローナル抗体LF3(25μg/ml;ズロット シーエッチら(Zlot,C.H.et.al.)、J.Lipid Res.1999年、第40巻、76〜84ページ)100μlでコーティングし、同プレートを37℃で2時間インキュベートした。プレートをリン酸緩衝食塩水(PBS)(Ca2+、Mg2+を含まないPSダルベッコ(Dulbecco)、バイオクロム アーゲー(Biochrom AG)、ドイツ国ベルリン所在、カタログ番号L182−05)で3回洗浄し、次いでそれぞれのウェルに3%ウシ血清アルブミン(BSA)(カールロス ゲーエムベーハー ウント コー カーゲー(Carl Roth GmbH&Co KG)、ドイツ国カールスルーエ(Karlsruhe)所在、カタログ番号8076.2)を含むPBS(300μl)を加えることにより、残った結合部位をブロッキングした。プレートを室温で1時間インキュベートした。次いでプレートをPBSで5回洗浄した。0.1%トゥイーン(Tween)(カールロス ゲーエムベーハー ウント コー カーゲー、ドイツ国カールスルーエ(Karlsruhe)所在、カタログ番号9127.1)および3%BSAを含むPBS(100μl)で希釈したマウス血清0.2μlをそれぞれのウェルに加えた。37℃で2時間インキュベーションした後、プレートをPBSで5回洗浄した。抗マウスアポリポタンパク質B48/100ウサギポリクローナル抗体(アクリスアンチボディーズ ゲーエムベーハー(Acris Antibodies GmbH)、ドイツ国ヒデンハイム(Hiddenheim)所在、カタログ番号BP2050)の1:500希釈液100μlをウェルに加え、37℃で2時間インキュベートした。プレートをPBSで5回洗浄した後、ホースラディッシュペルオキシダーゼと結合した抗ウサギIgGロバ抗体(サンタクルーズバイオテクノロジー社(Santa Cruz Biotechnology)、米国カリフォルニア州サンタクルーズ所在、カタログ番号sc2004)100μlを加え、37℃で1時間インキュベートした。プレートをPBSで5回洗浄し、0.03%過酸化水素(メルクバイオサイエンスゲーエムベーハー(Merck Biosciences GmbH)、ドイツ国バートゾーデン(Bad Soden)所在、カタログ番号386790)を含む24mmol/Lのクエン酸緩衝液(シグマ−アルドリッチ社、ドイツ国タウフキルヒェン(Taufkirchen)所在、カタログ番号C1909−1KG)pH5.0中0.9mg/mlのOPD(o−フェニレンジアミン2塩酸塩、メルクバイオサイエンスゲーエムベーハー(Merck Biosciences GmbH)、ドイツ国バートゾーデン(Bad Soden)所在、カタログ番号523121)とともにウェルをインキュベートした。0.5mol/LのH2SO4(メルクKgaA社、ドイツ国ダルムシュタット(Darmstadt)所在、カタログ番号100731)を加えることにより酵素反応を停止し、490nmでの吸光度を分光光度計(パーキンエルマーワラックビクトル3(Perkin Elmer Wallac Victor3)1420マルチラベルリーダー、パーキンエルマーLASゲーエムベーハー(PerkinElmer LAS GmbH)、ドイツ国ロドゴウ(Rodgau)所在)で測定した。
ーシュレイフハイム(Unterschleissheim)所在)で測定を行った。
GmbH&Co KG)、ドイツ国カールスルーエ(Karlsruhe)所在、カタログ番号0038.1)と混合した。該チューブを、Vortex Genie(登録商標)2(サイエンティフィックインダストリーズ社(Scientific Industries,Inc.)、米国ニューヨーク州ボヘミア(Bohemia)所在、カタログ番号SI−0256)で30秒間最大速度にて激しく混合し、続いて4℃で16,200rcfにて10分間遠心分離した。約310μlの水性上清を注意深く吸引して新しい反応チューブに移液し、50μgの大腸菌tRNA(ロシュダイアグノスティックス社(Roche Diagnostics)、ドイツ国ペンツバーグ(Penzberg)所在、カタログ番号109 541)および95%エタノール900μlと混合した。−20℃で終夜、RNAを沈殿させた。
リダイゼーションを続けた。
(European Convention for the Protection of Vertebrate Animals used for Experimental and other Scientific Purpose)の規制に準拠して行った。オスのC57Bl/6マウスはチャールスリバーラボラトリーズ社(Charles River Laboratories)(ドイツ国ズルツフェルト(Sulzfeld)所在)から入手し、使用する前の少なくとも5日間環境に馴化させた。動物を22±2℃および55±10%相対湿度で飼育した。昼/夜リズムは、6:00am(点灯)および6:00pm(消灯)で切り換える12時間とした。以下に別途特記しない限り、動物にはSsniff(登録商標)R/M−H飼料(スニフ スペツィアルディアーテン ゲーエムベーハー(Ssniff Spezialdiaeten GmbH)、ドイツ国ゾースト(Soest)所在、カタログ番号V1531)を自由摂取として与えた。
A)それぞれ3.5月齢の7匹の動物からなる3群に、AL−DUP 5163、AL−DUP 5166(配列は表10参照)を3日間連続で1日あたり50mg/kg用量として、または等量の担体を与え、4日目に屠殺した。血清総コレステロール、血清中ApoB100濃度、ならびに肝臓および空腸のApoB mRNAレベルを決定した。
5163と比較して、血清中での分解に関して高い安定性を有していた(図3参照)。この実験は、マウスApoBに特異的なsiRNAについて、マウスの肝臓および空腸におけるApoB遺伝子の発現を下方制御し、血清中のApoBタンパク質レベルおよびコレステロールレベルを低下させる能力について試験するために設計された。この実験はまた、センス鎖に生体血清中での安定性を増加させる2’−O−Me修飾を有するsiRNAが、センス鎖の2’OMe修飾を行っていないsiRNAよりも、ApoB発現を下方制御する能力が高いかどうかをも試験した。
19位の4箇所にG/Cスイッチを作製した、マウスApoB mRNAミスマッチsiRNAを表す。このsiRNAは、AL−DUP 5167と比較するための陰性対照とした。
給されるように設定し、動物1匹あたり1日に体重1kgあたりおよそ4mgの1日用量となるようにした。この群の動物は8日目に屠殺した。血清総コレステロール、血清中ApoB100濃度、ならびに肝臓および空腸のApoB mRNAレベルを決定した。
この実験は、対照として担体、ミスマッチsiRNA(AL−DUP 5311)、および関連のないsiRNA(AL−DUP 3001)を用いて、AL−DUP 5167で得られた初期の結果を確かめ、かつ3日間連続の体重1kgあたり2または10mgのボーラス静脈注射投与が、または1日目に体重1kgあたり50mgの単回投与が、上記(C)および(D)において3日間連続で体重1kgあたり50mgを静脈内投与する際に見られた効果を導き出すに充分であるかどうかをさらに決定することを意図したものである。さらにこの実験は、上記投薬計画を、浸透圧ポンプから7日間にわたって1日当たり体重1kgにつき4mgの低用量を連続的に送達する場合と比較するように設定された。
見出された。
この実験は、肝臓および空腸におけるApoBのmRNAレベル、ならびに血清中のApoBおよびコレステロール濃度に対する、AL−DUP 5167の影響の経時変化を得るために設計した。
タンパク質濃度は、担体対照レベルの92±52%であると測定された。
5167の活性とコレステロール非結合型であるがその他は同一のAL−DUP 5385の活性とをさらに比較し、かつAL−DUP 3001に関して見られたApoB mRNA発現阻害活性の欠如が、処理群マウス血清中のAL−DUP 3001の急速な分解によるものではなかったことを確認するために設計した。
ウス血清中の血清コレステロール濃度は、担体対照レベルの94±10%でほぼ不変であった。S1ヌクレアーゼ保護アッセイによって、組織1g当たり約50〜150ngのAL−DUP 5163が肝臓および空腸組織試料中で検出された。
AL−DUP 5167に関する用量反応を評価するために、この実験を実施した。
体重1kgあたり100mgの投与量では、AL−DUP 5167は、分岐DNAアッセイにより測定されたとおり、処理群マウスの肝臓組織試料中に存在するApoBのmRNAのレベルを、担体のみを与えた動物の肝臓組織に存在するmRNAレベルの48±13%に低下させたことが見出され、空腸中のApoBのmRNAのレベルは、対照動物中のレベルの37±3%に低下した。マウス血清中の血清ApoBタンパク質濃度は、担体対照レベルの57±14%に低下した。血清コレステロールは、担体対照レベルの71±14%に低下した。
ルの47±7%相当が肝臓において見出され、240時間の担体対照群の空腸組織中に存在するApoBのmRNAレベルの43±8%相当が空腸において見出された。マウス血清中の血清ApoBタンパク質濃度は、担体対照レベルのXX±X%に低下した。
実験A)〜I)からの結論:siRNAを用いた遺伝子発現の阻害について重視すべきことは、観察された作用が特異的であるか、in vitroでのsiRNAおよび他のオリゴヌクレオチド系手法に関して報告された「オフターゲット」効果および起こりうるインターフェロン応答によるものではないかということである。我々の実験では、ApoB特異的なコレステロール結合型siRNAの作用は、ApoB mRNAの個別の配列領域を標的とする幾つかの別個のsiRNAに関して見られた。さらに、非特異的siRNAもミスマッチな対照siRNAも、ApoBのmRNA、血漿ApoBタンパク質レベル、または総コレステロールの有意な低下を仲介しなかったように、ApoBのin vivoでの発現抑制は特異的であった。コレステロール結合型ApoB特異的siRNAは生物学的活性を示し、非結合型ApoB特異的siRNAは示さなかったことから、全身性のin vivo活性を達成するためのコレステロール結合の重要な役割が実証され、化学的結合戦略による全身投与に基づいて活性をさらに最適化する可能性が示唆された。
in vivoで内在標的遺伝子を発現抑制する合成siRNAの可能性を調べる際に、本発明者らは、化学的に安定化されたコレステロール結合型siRNAが、in vitroおよびin vivoで著しく改善された薬理学的性質を有することを見出した。センス鎖およびアンチセンス鎖上に部分的ホスホロチオエート骨格および2’−O−メチル修飾を有する、化学的に安定化されたsiRNAは、血清および組織ホモジェネート中でのエクソヌクレアーゼおよびエンドヌクレアーゼによる分解に対して有意に高い耐性を示した。ピロリジンリンカーによるsiRNAセンス鎖の3’端でのコレステロールの結合(それによってコレステロール結合型siRNAが生じる)が、細胞培養物中の遺伝子発現抑制活性の有意な消失をもたらすことはなかった。トランスフェクトしたプラスミドからルシフェラーゼを一時的に発現するHeLa細胞において、かつトランスフェクション試薬またはエレクトロポレーションの不在下において、コレステロール結合型siRNAのみがルシフェラーゼ発現を阻害し(IC50200nM)、非結合型siRNAは不活性であった。コレステロール結合型siRNAとヒト血清アルブミン(HSA)の結合は表面プラズモン共鳴測定によって測定されたが、非結合型siRNAはHSAとの測定可能な結合を示さず、コレステロール結合型siRNAは推定KD=1μMでHSAと結合することが分かった。血清タンパク質との高い結合性により、IV注射によりラットに投与されたコレステロール結合型siRNAは、非結合型siRNAと比較して改善されたin vivo薬物動態を示した。50mg/kgでラットにIV注射すると、放射活性標識コレステロール結合型siRNAは血漿中でt1/2=95±13分を有し、一方非結合型siRNAは血漿中でt1/2=6.2±0.6分を有していた。これらの値は、2コンパートメントモデル、一次排出速度と仮定し、WinNonLin(登録商標)4.1(ファルサイトコーポレーション(Pharsight Corporation)、米国カリフォルニア州マウンテンビュー(Mountain View)所在)を使用してカーブフィッティングシミュレーションにより測定した。RNase保護アッセイにより測定されたように、コレステロール結合型siRNAはマウスへの50mg/kgの単回IVボーラス注射後24時間で広範囲の組織生体内分布を示した。非結合型siRNAは組織試料中で検出可能な量が観察されず、コレステロール結合型siRNAは組織1gあたり約200ngの有意なレベルで肝臓、心臓、腎臓、および肺試料中で検出した。全体として、これらの試験から、コレステロールの結合によりsiRNAのin vivo薬物動態が有意に改善されることが実証された。
この実験手順はAlnylam Institutional Animal Care and Use Committeeにより承認されたものであり、マサチューセッツ州ケンブリッジ市の動物福祉に関する規制に従って実施した。
間隔24時間)。第2群には、投与用量を体重1グラムあたり10μlとして体重1キログラムあたり50mgのsiRNA AL−DUP5167を、1日1回として3回尾部静脈内注射した(投与間隔24時間)。第3群には、投与用量を体重1グラムあたり10μlとして体重1キログラムあたり50mgのsiRNA AL−DUP 5311を、1日1回として3回尾部静脈内注射した(投与間隔24時間)。siRNA2重鎖はリン酸緩衝生理食塩水中に配合した。
プライマーはオペロンバイオテクノロジーインコーポレイティド(Operon Biotechnologies,Inc.)(米国カリフォルニア州アラメダ(Alameda)所在)から購入した。
PCR反応1:GR5’−XbaI(順方向)+5167ApoB Rev2−SalI(逆方向)
PCR反応2:GS5’NestF−XbaI(順方向)+5167ApoB Rev3−SalI(逆方向)
を用いた逐次PCR反応により増幅させた。
5167を与えた動物の肝臓中および空腸中、ならびに程度は少ないがAL−DUP 5385を与えた動物の空腸中で見られた(図7参照)。
PCR反応3:iApoB5167−XbaI(順方向)+5167ApoB Rev3−SalI(逆方向)
を用いて増幅させた。
実施例11.修飾siRNAに関するその他の試験
他の修飾siRNAの設計
AL−DUP 5002、AL−DUP 5035、AL−DUP 5048、AL−DUP 5089、AL−DUP 5097、およびAL−DUP 5098の修飾型に相当する他のsiRNAについて、ApoB発現の阻害に向けて安定性および活性に関して試験した。ピロリジンリンカーを介してセンス鎖の3’端にコレステロール部分が結合した、AL−DUP 5048の修飾型を合成した。非修飾型iRNA剤であるAL−DUP 5002、AL−DUP 5035、AL−DUP 5089、AL−DUP 5097、およびAL−DUP 5098のそれぞれについて、21ヌクレオチドのセンス鎖と、23ヌクレオチドのアンチセンス鎖とを有し、2ヌクレオチドの3’突出部分が形成され、センス鎖の3’端にはホスホロチオエート含有リンカーを介してコレステロール部分が結合しており、アンチセンス鎖の21位および22位に2’−O−メチルヌクレオチドを有し、かつアンチセンス鎖の21位と22位、および22位と23位の間にホスホロチオエート結合を有する、1つのiRNA剤を合成した。この構造はAL−DUP 5167において既に使用した修飾パターンに相当するものであり、エクソヌクレアーゼの分解活性からiRNA剤が保護されることを意味する。
び5’−UG−3’の5’側のピリミジンの位置に2’−O−メチル修飾ヌクレオチドを有し、かつアンチセンス鎖の21位と22位、および22位と23位の間にホスホロチオエート結合を有する、第2のiRNA剤を合成した。これらの追加の修飾を施して、エンドヌクレアーゼの分解活性からこれらのsiRNA剤を保護した。対応する配列を表11中に列挙する。
上記siRNA(配列を表11に示す)について、ヒト血清(シグマ‐アルドリッチケミー ゲーエムベーハー(Sigma−Aldrich Chemie GmbH)、ドイツ国タウフキルヒェン(Taufkirchen)所在、カタログ番号H1513)中でインキュベーションした後にHPLCで分離断片を単離することによって、安定性に関して試験した。各siRNAをリン酸緩衝生理食塩水(PBS、シグマ‐アルドリッチケミー ゲーエムベーハー、ドイツ国タウフキルヒェン所在)に溶かした50μM溶液を、血清と共に、血清:siRNA溶液の比を10:1として30分、1、2、4、8、16および24時間インキュベートし、試料を以下に記載したように分析した。
プロテイナーゼK(20mg/ml)をpeQLab(ドイツ国エルランゲン(Erlangen)所在、カタログ番号04−1075)から入手し、脱イオン水(18、2mΩ)で1:1に希釈して、終濃度10mg/mlのプロテイナーゼKとした。プロテイナーゼKバッファー(4.0mlのTRIS−HCl 1M pH7.5、1.0mlのEDTA 0.5M、1.2mlのNaCl 5M、4.0mlのSDS 10%)を新たに調製し、使用するまで50℃に保ち沈殿を回避した。
インライン脱気装置、オートサンプラー、カラムオーブンおよび固定波長のUV検出器を備えたDionex BioLC HPLCシステム(ダイオネクス ゲーエムベーハー(Dionex GmbH)、ドイツ国イドシュタイン(Idstein)所在)を、変性条件下で使用した。標準実施パラメータは:
カラム:Dionex DNA−Pac100;4×250mm
温度:75℃
溶出液A:10mMのNaClO4、20mMのTRIS−HCl、1mMのEDTA;10%アセトニトリル、pH=8.0
溶出液B:800mMのNaClO4、20mMのTRIS−HCl、1mMのEDTA;10%アセトニトリル、pH=8.0
検出:260nm
勾配:0〜1分:10%B
1〜11分:10%→35%B
11〜12分:35%B→100%B
12〜14分:100%B→10%B
14〜16分:カラムの再平衡化のために10%B
注入体積:20μl
とした。
ソフトウェアを使用して、UV検出器のシグナルを積分することにより完全長の鎖のピーク面積を得た。
センス鎖、アンチセンス鎖、および内部標準の積分したピーク面積を、全ての試料および標準化対照に関して得た。
CF=ピーク面積内部標準(理論上)/ピーク面積内部標準(試料)
として得られる。
NPAセンスまたはアンチセンス、t=(ピーク面積センスまたはアンチセンス、t)×CF
を得る。
siRNAをアニーリングバッファーのみとインキュベートした対照試料から得た値は、方法の精度の対照値として役立てることができる。いずれの鎖の%FLPも、インキュベーション時間とは無関係に誤差範囲内で100%付近になるはずである。
t1/2=ln(0,5)/傾き
として、各鎖に関して計算することが可能である。
表11に示す配列によって表されるsiRNAの完全長産物の分解半減期を、表12に示す。AL−DUP 5546のアンチセンス鎖の半減期が、そのセンス鎖またはAL−DUP 5167のアンチセンス鎖の半減期と比較して異なることから明らかなように、3’の最後から2番目のヌクレオチドの2’−O−メチル基およびホスホロチオエート結合による鎖の3’端の保護は、分解半減期の約6〜7倍の増大をもたらす。さらに、エン
ドヌクレアーゼ分解を特に受けやすい部位で2’−O−メチル修飾ヌクレオチド置換を行うことによって、AL−DUP 5543以外は半減期が約3〜4倍さらに改善し、平均して20倍改善した。
表11のsiRNAのin vitro活性を、本明細書中で実施例3において上述したようにして試験した。結果は表13中に示す。
よび22位と23位の間にホスホロチオエート結合を、かつアンチセンス鎖の21位および22位の2’−O−メチル基を導入することにより、このsiRNAの活性に悪影響を与えることはなかった。さらに、AL−DUP 5536とAL−DUP 5537、AL−DUP 5538とAL−DUP 5539、AL−DUP 5540とAL−DUP 5541、AL−DUP 5542とAL−DUP 5543、ならびにAL−DUP 5544とAL−DUP 5545のIC50の比較からわかるように、存在する全ての配列モチーフ5’−UA−3’、5’−CA−3’、5’−UU−3’、および5’−UG−3’の5’側のピリミジンの位置への2’−O−メチル修飾ヌクレオチドの導入は、多くの場合これらのいずれの分子の活性に対しても悪影響はなかった。
以下の実験は、上記実施例7に記載したのと同様の通常作業および手順を使用して実施した。
ルは、担体対照レベルの132±10%に上昇した。3匹の動物の平均iRNA濃度はおよそ、肝臓で1ng/g、空腸では検出不能、血清では検出不能であることがわかった。
わかった。
実施例12.
近年、siRNA剤は潜在的に有害な免疫応答を誘導する可能性があると主張する、幾つかの報告が発表されてきている(例えば、ホルヌングら(Hornung et al.)、Nature Med 2005、11:263〜270を参照のこと)。例えば、siRNAによって引き起こされる可能性のあるヒトでの一時的なインターフェロンα(IFN−α)の増大の、生物学的影響については、ほとんど知られていない。不必要な、危険な副作用を回避するために、検出可能な免疫賦活活性がほとんどあるいは全くない強力な抗ウイルスsiRNAを有することが望ましい。しかしながら、ヒトでの正確なプロセスを忠実にシミュレーションするのは不可能なので、本発明者らは、記載した実験が、オリゴヌクレオチドおよびsiRNAによる免疫賦活を予想するのに適していると考える。
チャン、エイチ、エス(Chang、H.S.)およびサック、ディー、エー(Sack、D.A.)、Clin.Diag.Lab.Immunology 2001、8:482〜488に記載の通りFicoll(登録商標)勾配遠心分離によってPBMCを単離した。ただし、ドイツ国ズール(Suhl)所在のInstitute for Transfusion Medicine gGmbH、から入手した1人のドナー由来の無濾過で赤血球を含まない白血球濃縮物(Buffy Coat)を、PBSで1:1に希釈して、出発材料として使用し、RPMI完全培地(RPMI1640完全培地;10%FCS;1%L−Glu)中の最終懸濁液を細胞106個/mlに調節した。
erMed Systems)、オーストリア国ウィーン所在、カタログ番号BMS216INST)を用いたIFN−α測定用に使用した。表14はその結果を要約したものである。
a)幾つかの特に分解を受けやすい部位に修飾ヌクレオチドを有するオリゴヌクレオチドは、生物媒体中in vitroでの半減期の点で利点を有し、一方in vitroおよびin vivoでの遺伝子発現阻害活性は大部分が影響を受けない。
c)AL−DUP 5536、AL−DUP 5540およびAL−DUP 5542は、apoB発現を阻害するためのiRNA剤として、したがってapoBの異常発現と関係がある障害の治療剤として、特に有望な候補である。
本発明の幾つかの実施形態について記載してきた。しかしながら、本発明の思想および範囲から逸脱せずにさまざまな変更形態を作製しうることは理解されよう。
Claims (19)
- 配列番号153、155、147、49、137、97、71または5のヌクレオチド配列からなるセンス鎖と、配列番号154、156、148、50、138、98、72または6のヌクレオチド配列からなるアンチセンス鎖とを含むiRNA剤であって、該センス鎖と該アンチセンス鎖の組み合わせが、配列番号153および配列番号154、配列番号155および配列番号156、配列番号147および配列番号148、配列番号49および配列番号50、配列番号137および配列番号138、配列番号97および配列番号98、配列番号71および配列番号72、または配列番号5および配列番号6である、iRNA剤。
- センス鎖とアンチセンス鎖とを含むiRNA剤であって、該センス鎖と該アンチセンス鎖の組み合わせが、配列番号241および配列番号242、配列番号243および配列番号244、配列番号245および配列番号246、配列番号247および配列番号248、配列番号257および配列番号258、配列番号259および配列番号260、配列番号249および配列番号250、配列番号251および配列番号252、配列番号261および配列番号262、配列番号287および配列番号288、または配列番号303および配列番号304である、iRNA剤。
- 前記iRNA剤が、該iRNA剤とのインキュベーション後に培養ヒトHepG2細胞中に存在するApoBのmRNAの量を、同剤とともにインキュベーションしなかった細胞と比較して50%超減少させる、および/または培養ヒトHepG2細胞によって細胞培養上清中に分泌されるApoBタンパク質の量を50%超減少させる、および/または、体重1kgあたり50mgまたは100mgの投与後にC57Bl/6マウスの肝臓細胞中に存在するapo−BのmRNAの量を、インビボで少なくとも20%減少させる、請求項1に記載のiRNA剤。
- 前記iRNA剤が肝臓を起源とするマウス培養細胞中に存在するApoBのmRNAの量をさらに減少させる、請求項1〜3のいずれか一項に記載のiRNA剤。
- 前記iRNA剤に生物試料中での高い安定性を付与する修飾を含む、請求項1、3または4に記載のiRNA剤。
- ホスホロチオエートまたは2’−修飾ヌクレオチドを含む、請求項1、3または4に記載のiRNA剤。
- ウリジンが2’−修飾ヌクレオチドである少なくとも1個の5’−ウリジン−アデニン−3’(5’−UA−3’)ジヌクレオチド;5’−ウリジンが2’−修飾ヌクレオチドである少なくとも1個の5’−ウリジン−グアニン−3’(5’−UG−3’)ジヌクレオチド;5’−シチジンが2’−修飾ヌクレオチドである少なくとも1個の5’−シチジン−アデニン−3’(5’−CA−3’)ジヌクレオチド;または5’−ウリジンが2’−修飾ヌクレオチドである少なくとも1個の5’−ウリジン−ウリジン−3’(5’−UU−3’)ジヌクレオチドを含む、請求項6に記載のiRNA剤。
- 存在する全ての配列モチーフ5’−UA−3’、5’−CA−3’、5’−UU−3’、および5’−UG−3’の5’−ピリミジンが2’−修飾ヌクレオチドであるか、あるいは、センス鎖中の全ピリミジンが2’−修飾ヌクレオチドであり、かつ存在する全ての配列モチーフ5’−UA−3’および5’−CA−3’の5’−ピリミジンが2’−修飾ヌクレオチドであるか、あるいはセンス鎖中の全ピリミジンが2’−修飾ヌクレオチドであり、かつアンチセンス鎖中の存在する全ての配列モチーフ5’−UA−3’、5’−CA−3’、5’−UU−3’、および5’−UG−3’の5’−ピリミジンが2’−修飾ヌクレオチドである、請求項7に記載のiRNA剤。
- 前記2’−修飾が、2’−デオキシ、2’−デオキシ−2’−フルオロ、2’−O−メチル、2’−O−メトキシエチル(2’−O−MOE)、2’−O−アミノプロピル(2’−O−AP)、2’−O−ジメチルアミノエチル(2’−O−DMAOE)、2’−O−ジメチルアミノプロピル(2’−O−DMAP)、2’−O−ジメチルアミノエチルオキシエチル(2’−O−DMAEOE)、および2’−O−N−メチルアセトアミド(2’−O−NMA)からなる群から選択される、請求項6〜8のいずれか一項に記載のiRNA剤。
- コレステロール部分を含む、請求項1、または3〜9のいずれか一項に記載のiRNA剤。
- 前記コレステロール部分がiRNA剤のセンス鎖の3’端に結合している、請求項10に記載のiRNA剤。
- 前記iRNA剤が肝臓の細胞により取り込まれるように標的化されている、請求項1、または3〜11のいずれか一項に記載のiRNA剤。
- 前記iRNA剤が消化管の細胞により取り込まれるように標的化されている、請求項1、または3〜11のいずれか一項に記載のiRNA剤。
- 脂質障害を有するかあるいは発症する危険があるヒト対象を治療するための、請求項1、または3〜13のいずれか一項に記載のiRNA剤を含む医薬組成物であって、前記iRNA剤が、前記対象の細胞または組織中のApoBの発現を低下させるのに充分な量が投与されるように製剤化されている医薬組成物。
- 前記脂質障害が高コレステロール血症、高脂血症、冠状動脈疾患、冠状動脈心疾患、血栓症、またはアテローム性動脈硬化症である、請求項14に記載の医薬組成物。
- a.請求項1〜13のいずれか1項に記載のiRNA剤、および
b.医薬として許容可能な担体
を含む医薬組成物。 - 請求項1〜13のいずれか1項に記載のiRNA剤と、医薬として許容可能な担体を配合することを含む、医薬組成物を調製する方法。
- 請求項1〜13のいずれか1項に記載のiRNA剤と、細胞をインビトロで接触させることを含む、細胞中のApoB RNAの量を減少させる方法。
- 請求項1〜13のいずれかに記載のiRNA剤を製造する方法であって、前記iRNA剤を合成することを含み、センス鎖およびアンチセンス鎖が、核酸分解に対してiRNA剤を安定化する修飾を少なくとも1個含むことを特徴とする方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US61314104P | 2004-09-24 | 2004-09-24 | |
US60/613,141 | 2004-09-24 | ||
PCT/US2005/034492 WO2006036916A2 (en) | 2004-09-24 | 2005-09-26 | Rnai modulation of apob and uses thereof |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012275867A Division JP2013075903A (ja) | 2004-09-24 | 2012-12-18 | ApoBのRNAi調節およびその使用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2008514632A JP2008514632A (ja) | 2008-05-08 |
JP5883205B2 true JP5883205B2 (ja) | 2016-03-09 |
Family
ID=36119510
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007533724A Active JP5883205B2 (ja) | 2004-09-24 | 2005-09-26 | ApoBのRNAi調節およびその使用 |
JP2012275867A Pending JP2013075903A (ja) | 2004-09-24 | 2012-12-18 | ApoBのRNAi調節およびその使用 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012275867A Pending JP2013075903A (ja) | 2004-09-24 | 2012-12-18 | ApoBのRNAi調節およびその使用 |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US7528118B2 (ja) |
EP (4) | EP2377873B1 (ja) |
JP (2) | JP5883205B2 (ja) |
CN (2) | CN102628044A (ja) |
AU (1) | AU2005289588B2 (ja) |
CA (2) | CA2848573A1 (ja) |
HK (1) | HK1109406A1 (ja) |
NZ (4) | NZ554214A (ja) |
WO (1) | WO2006036916A2 (ja) |
Families Citing this family (58)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003064621A2 (en) | 2002-02-01 | 2003-08-07 | Ambion, Inc. | HIGH POTENCY siRNAS FOR REDUCING THE EXPRESSION OF TARGET GENES |
EP1478656B1 (en) | 2002-02-01 | 2009-09-16 | Life Technologies Corporation | Oligonucleotide compositions with enhanced efficiency |
US20060009409A1 (en) | 2002-02-01 | 2006-01-12 | Woolf Tod M | Double-stranded oligonucleotides |
JP4796062B2 (ja) * | 2004-06-07 | 2011-10-19 | プロチバ バイオセラピューティクス インコーポレイティッド | 脂質封入干渉rna |
WO2005120152A2 (en) * | 2004-06-07 | 2005-12-22 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Cationic lipids and methods of use |
CA2572439A1 (en) * | 2004-07-02 | 2006-01-12 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Immunostimulatory sirna molecules and uses therefor |
CA2587411A1 (en) * | 2004-11-17 | 2006-05-26 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Sirna silencing of apolipoprotein b |
US20070054873A1 (en) * | 2005-08-26 | 2007-03-08 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Glucocorticoid modulation of nucleic acid-mediated immune stimulation |
WO2007031081A2 (en) * | 2005-09-15 | 2007-03-22 | Santaris Pharma A/S | RNA ANTAGONIST COMPOUNDS FOR THE INHIBITION OF APO-Bl00 EXPRESSION |
EP2395012B8 (en) | 2005-11-02 | 2018-06-06 | Arbutus Biopharma Corporation | Modified siRNA molecules and uses thereof |
EA201100811A1 (ru) | 2006-04-03 | 2012-06-29 | Сантарис Фарма А/С | Фармацевтическая композиция |
JP5814505B2 (ja) | 2006-04-03 | 2015-11-17 | ロシュ・イノベーション・センター・コペンハーゲン・アクティーゼルスカブRoche Innovation Center Copenhagen A/S | antimiRNAアンチセンスオリゴヌクレオチドを含む医薬組成物 |
US7915399B2 (en) * | 2006-06-09 | 2011-03-29 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Modified siRNA molecules and uses thereof |
JP2008220366A (ja) * | 2007-02-16 | 2008-09-25 | National Institute Of Advanced Industrial & Technology | 修飾型pna/rna複合体 |
US8470791B2 (en) | 2007-03-22 | 2013-06-25 | Santaris Pharma A/S | RNA antagonist compounds for the inhibition of Apo-B100 expression |
WO2008113832A2 (en) | 2007-03-22 | 2008-09-25 | Santaris Pharma A/S | SHORT RNA ANTAGONIST COMPOUNDS FOR THE MODULATION OF TARGET mRNA |
WO2009002944A1 (en) * | 2007-06-22 | 2008-12-31 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Double strand compositions comprising differentially modified strands for use in gene modulation |
EP2623598B1 (en) | 2007-10-04 | 2018-08-01 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | Micromirs |
CA2717792A1 (en) | 2008-03-07 | 2009-09-11 | Santaris Pharma A/S | Pharmaceutical compositions for treatment of microrna related diseases |
EP2315832B1 (en) | 2008-08-01 | 2015-04-08 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | Micro-rna mediated modulation of colony stimulating factors |
EP2350043B9 (en) | 2008-10-09 | 2014-08-20 | TEKMIRA Pharmaceuticals Corporation | Improved amino lipids and methods for the delivery of nucleic acids |
EP2184054A1 (en) | 2008-11-08 | 2010-05-12 | Lipoxen Technologies Limited | Small Interfering RNA Delivery |
CN102317458B (zh) | 2008-12-04 | 2018-01-02 | 库尔纳公司 | 通过红细胞生成素(epo)天然反义转录物的抑制对epo相关疾病的治疗 |
US9132147B2 (en) | 2008-12-31 | 2015-09-15 | Roche Innovation Center Copenhagen | Use of LNA ApoB antisense oligomers for the treatment of acute coronary syndromes |
BRPI1009324A2 (pt) * | 2009-03-20 | 2015-11-24 | Alios Biopharma Inc | compostos e/ou farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, composição farmacêutica e respectivos usos |
EP2421970B1 (en) | 2009-04-24 | 2016-09-07 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | Pharmaceutical compositions for treatment of hcv patients that are non-responders to interferon |
EP2438168B1 (en) * | 2009-06-01 | 2020-02-12 | Halo-Bio Rnai Therapeutics, Inc. | Polynucleotides for multivalent rna interference, compositions and methods of use thereof |
CA2767127A1 (en) | 2009-07-01 | 2011-01-06 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Novel lipid formulations for delivery of therapeutic agents to solid tumors |
US9018187B2 (en) | 2009-07-01 | 2015-04-28 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Cationic lipids and methods for the delivery of therapeutic agents |
US8569256B2 (en) | 2009-07-01 | 2013-10-29 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Cationic lipids and methods for the delivery of therapeutic agents |
US8236943B2 (en) * | 2009-07-01 | 2012-08-07 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Compositions and methods for silencing apolipoprotein B |
US8563528B2 (en) | 2009-07-21 | 2013-10-22 | Santaris Pharma A/S | Antisense oligomers targeting PCSK9 |
AU2010306940A1 (en) | 2009-10-12 | 2012-06-07 | Smith, Larry | Methods and compositions for modulating gene expression using oligonucleotide based drugs administered in vivo or in vitro |
JP2011155914A (ja) * | 2010-02-01 | 2011-08-18 | Osaka Univ | 脂質異常症治療薬剤としての化学修飾siRNA |
US8349308B2 (en) | 2010-03-26 | 2013-01-08 | Mersana Therapeutics, Inc. | Modified polymers for delivery of polynucleotides, method of manufacture, and methods of use thereof |
US8865675B2 (en) | 2010-05-12 | 2014-10-21 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Compositions and methods for silencing apolipoprotein B |
EP2619216A4 (en) | 2010-09-22 | 2014-04-02 | Alios Biopharma Inc | SUBSTITUTED NUCLEOTIDE ANALOG |
EP2631291B1 (en) | 2010-10-22 | 2019-05-15 | OliX Pharmaceuticals, Inc. | Nucleic acid molecules inducing rna interference, and uses thereof |
EP2658973A4 (en) * | 2010-12-30 | 2014-05-14 | Samyang Biopharmaceuticals | SIRNA FOR INHIBITING HIF1A EXPRESSION AND ANTIBODIES THEREWITH |
CN104271740A (zh) | 2011-04-20 | 2015-01-07 | L·J·史密斯 | 利用在细胞中自组装和产生RNAi活性的成分来调节基因表达的方法和组合物 |
IL303831A (en) * | 2011-11-18 | 2023-08-01 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Adapted RNAI factors |
WO2013096680A1 (en) | 2011-12-22 | 2013-06-27 | Alios Biopharma, Inc. | Substituted phosphorothioate nucleotide analogs |
RS58077B1 (sr) | 2012-02-24 | 2019-02-28 | Arbutus Biopharma Corp | Trialkil katjonski lipidi i postupci njihove primene |
NZ631601A (en) | 2012-03-21 | 2016-06-24 | Alios Biopharma Inc | Solid forms of a thiophosphoramidate nucleotide prodrug |
NZ630805A (en) | 2012-03-22 | 2016-01-29 | Alios Biopharma Inc | Pharmaceutical combinations comprising a thionucleotide analog |
ES2716818T3 (es) | 2012-05-22 | 2019-06-17 | Olix Pharmaceuticals Inc | Molécula de ácido nucleico inductora de interferencias de arn capaz de penetrar en las células y uso de la misma |
SG10201804331TA (en) | 2012-11-15 | 2018-07-30 | Roche Innovation Ct Copenhagen As | Oligonucleotide conjugates |
US9879265B2 (en) | 2013-06-27 | 2018-01-30 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | Oligonucleotide conjugates |
CN115322991A (zh) * | 2015-05-06 | 2022-11-11 | 阿尔尼拉姆医药品有限公司 | 因子XII、激肽释放酶B、血浆夫列契因子1和激肽原1 iRNA组合物及其使用方法 |
CN108366966A (zh) | 2015-08-24 | 2018-08-03 | 光环生物干扰疗法公司 | 用于调节基因表达的多核苷酸纳米颗粒及其用途 |
WO2017085550A1 (en) | 2015-11-16 | 2017-05-26 | Olix Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of age-related macular degeneration using rna complexes that target myd88 or tlr3 |
EP3411480A4 (en) | 2016-02-02 | 2020-01-22 | Olix Pharmaceuticals, Inc. | TREATMENT OF ATOPIC DERMATITIS AND ASTHMA USING RNA COMPLEXES THAT TARGETE IL4R, TRPA1, OR F2RL1 |
JP7003044B2 (ja) | 2016-02-02 | 2022-01-20 | オリックス ファーマシューティカルズ,インコーポレーテッド | Angpt2およびpdgfbを標的化するrna複合体を用いる血管新生関連疾患の処置 |
KR101916652B1 (ko) | 2016-06-29 | 2018-11-08 | 올릭스 주식회사 | 작은 간섭 rna의 rna 간섭효과 증진용 화합물 및 이의 용도 |
EP3570892A4 (en) | 2017-01-18 | 2020-11-25 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | ENDOSOMAL SPLITABLE LINKS |
EP3580339A4 (en) | 2017-02-10 | 2020-12-23 | Research & Business Foundation Sungkyunkwan University | LONG DOUBLE STRAND RNA FOR RNA INTERFERENCE |
CN110115770B (zh) * | 2019-04-09 | 2023-05-26 | 广州艾迪基因科技有限责任公司 | 一种防治丙型病毒性肝炎的新靶点及其CRISPR-Cas9靶向系统与应用 |
CA3143404C (en) * | 2019-07-02 | 2024-03-05 | Argonaute RNA Limited | Apolipoprotein b antagonist |
Family Cites Families (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5328470A (en) | 1989-03-31 | 1994-07-12 | The Regents Of The University Of Michigan | Treatment of diseases by site-specific instillation of cells or site-specific transformation of cells and kits therefor |
IT1274573B (it) | 1995-05-25 | 1997-07-17 | Sits Soc It Telecom Siemens | Processo di fabbricazione di moduli circuitali ibridi includenti dispositivi elettronici in chip |
CA2220950A1 (en) | 1995-05-26 | 1996-11-28 | Somatix Therapy Corporation | Delivery vehicles comprising stable lipid/nucleic acid complexes |
US5898031A (en) | 1996-06-06 | 1999-04-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligoribonucleotides for cleaving RNA |
US6245427B1 (en) | 1998-07-06 | 2001-06-12 | DüZGüNES NEJAT | Non-ligand polypeptide and liposome complexes as intracellular delivery vehicles |
WO2001020037A2 (en) * | 1999-09-17 | 2001-03-22 | Complexe Hospitalier De La Sagamie | Peroxisome proliferator-activated receptor alpha and disorders of lipid metabolism |
US20070026394A1 (en) | 2000-02-11 | 2007-02-01 | Lawrence Blatt | Modulation of gene expression associated with inflammation proliferation and neurite outgrowth using nucleic acid based technologies |
ES2728168T3 (es) | 2000-12-01 | 2019-10-22 | Max Planck Gesellschaft | Moléculas pequeñas de ARN que median en la interferencia de ARN |
US20030170891A1 (en) | 2001-06-06 | 2003-09-11 | Mcswiggen James A. | RNA interference mediated inhibition of epidermal growth factor receptor gene expression using short interfering nucleic acid (siNA) |
US7407943B2 (en) * | 2001-08-01 | 2008-08-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense modulation of apolipoprotein B expression |
US7956176B2 (en) | 2002-09-05 | 2011-06-07 | Sirna Therapeutics, Inc. | RNA interference mediated inhibition of gene expression using chemically modified short interfering nucleic acid (siNA) |
AU2003291682A1 (en) * | 2002-11-05 | 2004-06-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-methoxy substituted oligomeric compounds and compositions for use in gene modulations |
AU2003294281B2 (en) | 2002-11-13 | 2010-05-20 | Kastle Therapeutics, Llc | Antisense modulation of apolipoprotein B expression |
PT2284266E (pt) | 2002-11-14 | 2013-12-17 | Thermo Fisher Scient Biosciences Inc | Siarn contra tp53 |
WO2004064737A2 (en) | 2003-01-17 | 2004-08-05 | Alnylam Pharmaceuticals | Therapeutics compositions |
ATE479752T1 (de) * | 2003-03-07 | 2010-09-15 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Therapeutische zusammensetzungen |
AU2004227414A1 (en) | 2003-04-03 | 2004-10-21 | Alnylam Pharmaceuticals | iRNA conjugates |
WO2004091515A2 (en) * | 2003-04-09 | 2004-10-28 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | iRNA CONJUGATES |
AU2004232964B2 (en) | 2003-04-17 | 2011-09-22 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Protected monomers |
EP2660322A3 (en) | 2003-04-17 | 2013-11-13 | Alnylam Pharmaceuticals Inc. | Modified iRNA agents |
US7004629B2 (en) | 2003-07-26 | 2006-02-28 | Arthur Joseph Shrader | Method and apparatus for hanging a resealable bag |
US20050267300A1 (en) * | 2004-04-05 | 2005-12-01 | Muthiah Manoharan | Processes and reagents for oligonucleotide synthesis and purification |
US7928217B2 (en) * | 2004-05-27 | 2011-04-19 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Nuclease resistant double-stranded ribonucleic acid |
EP1791567B1 (en) * | 2004-08-10 | 2015-07-29 | Alnylam Pharmaceuticals Inc. | Chemically modified oligonucleotides |
ATE541928T1 (de) | 2005-03-31 | 2012-02-15 | Calando Pharmaceuticals Inc | Inhibitoren der untereinheit 2 der ribonukleotidreduktase und ihre verwendungen |
SG170780A1 (en) | 2006-03-31 | 2011-05-30 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Compositions and methods for inhibiting expression of eg5 gene |
US8598333B2 (en) | 2006-05-26 | 2013-12-03 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | SiRNA silencing of genes expressed in cancer |
US9051567B2 (en) | 2009-06-15 | 2015-06-09 | Tekmira Pharmaceuticals Corporation | Methods for increasing efficacy of lipid formulated siRNA |
-
2005
- 2005-09-26 CN CN2012100807933A patent/CN102628044A/zh active Pending
- 2005-09-26 NZ NZ554214A patent/NZ554214A/en active IP Right Revival
- 2005-09-26 EP EP11004573.9A patent/EP2377873B1/en active Active
- 2005-09-26 EP EP05802154A patent/EP1802644B1/en active Active
- 2005-09-26 NZ NZ583290A patent/NZ583290A/en unknown
- 2005-09-26 JP JP2007533724A patent/JP5883205B2/ja active Active
- 2005-09-26 CA CA2848573A patent/CA2848573A1/en not_active Abandoned
- 2005-09-26 AU AU2005289588A patent/AU2005289588B2/en active Active
- 2005-09-26 US US11/235,385 patent/US7528118B2/en active Active
- 2005-09-26 NZ NZ586217A patent/NZ586217A/en unknown
- 2005-09-26 CN CN2005800402969A patent/CN101133074B/zh active Active
- 2005-09-26 CA CA2580707A patent/CA2580707C/en active Active
- 2005-09-26 WO PCT/US2005/034492 patent/WO2006036916A2/en active Application Filing
- 2005-09-26 NZ NZ572403A patent/NZ572403A/en unknown
- 2005-09-26 EP EP20110004574 patent/EP2380897B1/en active Active
- 2005-09-26 EP EP15166978.5A patent/EP2982754A1/en not_active Withdrawn
-
2008
- 2008-01-04 HK HK08100094.7A patent/HK1109406A1/xx unknown
-
2009
- 2009-03-09 US US12/400,744 patent/US7723317B2/en active Active
-
2010
- 2010-03-19 US US12/728,139 patent/US8188061B2/en active Active
-
2012
- 2012-04-19 US US13/450,886 patent/US8592571B2/en active Active
- 2012-12-18 JP JP2012275867A patent/JP2013075903A/ja active Pending
-
2013
- 2013-10-21 US US14/058,679 patent/US9187747B2/en active Active
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5883205B2 (ja) | ApoBのRNAi調節およびその使用 | |
JP6034316B2 (ja) | Pcsk9遺伝子の発現を阻害するための組成物および方法 | |
US7772200B2 (en) | iRNA agents targeted to the Rho-A gene | |
EP1841464B1 (en) | Rnai modulation of the nogo-l or nogo-r gene and uses thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20080806 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20081222 |
|
RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20081222 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20081222 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110607 |
|
RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20110805 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20110809 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20110907 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20110914 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20111006 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20111014 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20111107 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20111114 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20111205 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20120619 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20120918 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20120925 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20121018 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20121025 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20121116 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20121126 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20121218 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20130813 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20150721 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20151023 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20160205 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5883205 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |