JP5854517B2 - 新菌株、該新菌株を用いた根頭がんしゅ病防除剤及び/又は植物種子発芽率向上剤 - Google Patents
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Description
特許文献2において、非病原性アグロバクテリウム・ヴィティス(Agrobacterium vitis)F2/5(pT2TFXK)株を拮抗細菌として用いる方法が記載されている。
そして、非特許文献2において、非病原性リゾビウム・ヴィティス(Rhizobium vitis)VAR03−1株を拮抗細菌として用いる方法が記載されている。
また、非特許文献3には、非病原性アグロバクテリウム・ラジオバクター(Agrobacterium radiobacter)K84株を生物農薬として用いる拮抗的防除方法が開示されている。
これは、これら拮抗微生物による防除手段の多くが、根頭がんしゅ病防除効果が実験室内での実験において確認されたに留まり、農業生産上最も重要な自然環境下における実際の作物生産現場での安定的な防除効果を認めた事例がほとんどないことによると考えられる。
これに対し、非特許文献2において、非病原性リゾビウム・ヴィティス(Rhizobium vitis)VAR03−1株はブドウ根頭がんしゅ病だけでなく、他の植物の根頭がんしゅ病に対しても防除効果を示す事例があるが、実際の生産現場で防除効果が認められたのはブドウのみであることから、現在においてなお、実用性について課題を残している。
即ち、本発明の第1の新規菌株は、リゾビウム・ヴィティス(Rhizobium vitis)ARK−1菌株(FERM BP−11426)である。
そして、本発明の第2の新規菌株は、リゾビウム・ヴィティス(Rhizobium vitis)ARK−2菌株(FERM BP−11427)である。
さらに、本発明の第3の新規菌株は、リゾビウム・ヴィティス(Rhizobium vitis)ARK−3菌株(FERM BP−11428)である。
本発明の根頭がんしゅ病防除剤及び/又は植物種子発芽率向上剤(以下、「本剤」ということもある。)は、ARK−1菌株、ARK−2菌株及びARK−3菌株よりなる群より選ばれる1又は2以上の菌体および/または菌体の培養物を有効成分として含有することを特徴とする。
本発明の根頭がんしゅ病防除方法及び/又は植物種子発芽率向上方法(以下、「本方法」ということもある。)は、本剤を植物あるいは植物種子に接触させるステップを含んでなることを特徴とする。
そして、本剤は、上記ARK−1菌株、ARK−2菌株及びARK−3菌株よりなる群より選ばれる1又は2以上の菌体および/または菌体の培養物を有効成分として含有することを特徴とする根頭がんしゅ病防除剤及び/又は植物種子発芽率向上剤である。
さらに、本方法は、本剤を植物あるいは植物種子に接触させるステップを含んでなる、根頭がんしゅ病防除方法及び/又は植物種子発芽率向上方法である。
(a)形態
(1)細菌の形:桿状
(2)細菌の大きさ:0.7〜0.9×1.2〜1.7μm
(3)多形性:なし
(4)運動性:あり
(5)胞子の有無:なし
(6)グラム染色性:陰性
(b)生育状況
PSA平板培地(後述)での培養:コロニーは円形で大きさは直径1〜2mm、周縁形は全縁、粘性あり、光沢はあるが、培養後7日以上経過すると光沢は消失する。
(c)生理学的性質
(1)3―ケトラクトースの生成:陽性
(2)リトマスミルクでの培養:リトマスを還元してアルカリ性を示す
(3)オキシダーゼ活性:陽性
(4)生長素要求性:陽性
(5)D−1培地:生育
(6)Roy−Sasser培地:生育
(7)2%NaCl培地:生育
(8)エリトリトールの利用:陰性
(9)メレジトースの利用:陰性
(10)エタノールの利用:陰性
(11)酒石酸の利用:陽性
(12)マロン酸の利用:陽性
(13)クエン酸の利用:陽性
(14)アルブチンの分解:陰性
(15)アルギニンの分解:陽性
(16)最適生育pHおよび温度の範囲:pH6〜8、温度25〜30℃
ARK−1菌株、ARK−2菌株、ARK−3菌株、病原性既知のリゾビウム・ヴィティス(Rhizobium vitis)それぞれをPSA平板培地(後述)で27℃、48時間培養し、生じたコロニーに爪楊枝の先端を刺し入れて菌を付着させた。そして、その先端をトマト、バラ、ブドウ、リンゴ、ナシ、モモの茎に突き刺して接種し、25℃〜35℃のビニルハウス内で静置し、発病の有無を確認した。
その結果、病原性既知のリゾビウム・ヴィティス(Rhizobium vitis)は約9割(89.7%)発病が確認されたが、ARK−1菌株、ARK−2菌株、ARK−3菌株のいずれも発病は見られず、ARK−1菌株、ARK−2菌株、ARK−3菌株のいずれも病原性は認められなかった。
本剤は、ARK−1菌株、ARK−2菌株又はARK−3菌株をそれぞれ単独で含有するものであってもよいし、また2種以上の菌株を任意に組み合わせて含有するものであってもよい。本剤に含まれるARK−1菌株、ARK−2菌株又はARK−3菌株の割合(菌濃度)は、本剤が植物を根頭がんしゅ病から防除する効果を発揮する限り、特に制限されないが、例えば、本剤100gあたり上記菌株の菌(総数)を1×109〜1×1011個の範囲で含有するものを例示することができる。
本剤は、植物にがんしゅ形成を促す病原性を有するリゾビウム・ラジオバクター(Rhizobium radiobacter)(異名:アグロバクテリウム・ツメファシエンス(Agrobacterium tumefaciens))、リゾビウム・リゾゲネス(Rhizobium rhizogenes)(異名:アグロバクテリウム・リゾゲネス(Agrobacterium rhizogenes))、リゾビウム・ヴィティス(Rhizobium vitis)(異名:アグロバクテリウム・ヴィティス(Agrobacterium vitis))等の根頭がんしゅ病菌により植物に引き起こされる根頭がんしゅ病の防除に顕著な効果を示す。対象とする植物の種類は特に制限されないが、具体的にはリンゴ、バラ、スモモ、オウトウなどのバラ科植物;キクなどのキク科植物;ブドウなどのブドウ科植物;トマトなどのナス科を例示することができる。本剤のうち、ARK−1菌株を有効成分とする本剤は上記植物のいずれに対しても高い根頭がんしゅ病防除効果を発揮する。ARK−3菌株を有効成分とする本剤もまた、上記植物のいずれに対しても根頭がんしゅ病防除効果を発揮する。ARK−2菌株を有効成分とする本剤は、上記植物のうち、特にバラ、ブドウ及びトマトに対して根頭がんしゅ病防除効果を発揮する。
本剤を液剤として調製して使用する場合、それに含まれるARK−1菌株、ARK−2菌株又はARK−3菌株の菌濃度は、所望の防除結果が得られるものであればよく、何ら限定されるものではないが、あまり菌濃度が少ないと十分な結果が得られず、逆にあまり菌濃度を多くしても菌が無駄になることがあるので、例えば、1.0×107個/mL〜1.0×109個/mLの範囲で適宜調整することができる。
本剤の施用量は適用作物、剤型等によって異なるため、一概には規定できないが、例えば、本剤を土壌に灌注する場合には、ブドウやリンゴなどの果樹類であれば樹木1本あたり50L〜100Lとしてもよく、処理は定植前の定植を予定している位置または定植後の株元が好ましい。また、植物を本剤に浸漬する処理では、特に限定されるものではないが、例えば、定植前の樹木の根を、根が十分に浸かる量の本剤に1時間〜24時間漬け込むようにしてもよく、それよりも小さい草本植物の苗の根であれば、10分間〜1時間漬け込むようにしてもよい。種子の場合は、本剤に10分間〜2時間種子を漬け込むか、種子を土壌に播種した後に種子表面に本剤を散布(土壌灌注処理)する方法でもよい。
ARK−1菌株、ARK−2菌株及びARK−3菌株のそれぞれを、PSA平板培地で3日間培養した後、各菌体を滅菌蒸留水に懸濁して菌濃度1.0×107個/mLの菌液(a)を作成した。また、比較例として、非病原性アグロバテリウム・ラジオバクター(Agrobacterium radiobacter)K84株、及び非病原性リゾビウム・ヴィティスVAR06−32株についてもPSA平板培地で3日間培養した後、各菌体を滅菌蒸留水に懸濁して菌濃度1.0×107個/mLの菌液(a)を作成した。ブドウ根頭がんしゅ病菌である病原性リゾビウム・ヴィティスG−Ag−27株をPSA平板培地で3日間培養した後、菌体を滅菌蒸留水に懸濁して菌濃度1.0×107個/mLの菌液(b)を調製した。
本発明の菌(ARK−1菌株、ARK−2菌株、ARK−3菌株)又は比較例の菌(非病原性アグロバテリウム・ラジオバクターK84株、非病原性リゾビウム・ヴィティスVAR06−32株)を含む菌液(a)と、リゾビウム・ヴィティスG−Ag−27の菌液(b)と、を体積比にて1対1の割合で混合したもの5種を接種源とした。なお、対照として、リゾビウム・ヴィティスG−Ag−27の菌液(b)も接種源として用いた。その接種源(合計6種)に爪楊枝の先端を浸し、一接種源当たり7〜10株のブドウ(品種:ネオ・マスカット、1年生苗木)に該先端を突き刺して接種した。1株のブドウあたり茎の7〜10か所に接種した。接種したブドウ苗木は温室内で3か月静置した後、接種部位のがんしゅ形成の有無を評価した。
評価の結果を、病原性リゾビウム・ヴィティスG−Ag−27株のみを接種した無処理区(対照)、アグロバテリウム・ラジオバクター(Agrobacterium radiobacter)K84株(比較例)、非病原性リゾビウム・ヴィティスVAR06−32株(比較例)の結果とともに、表1に示す。なお、病原性リゾビウム・ヴィティスG−Ag−27株のみを接種した無処理区(対照)のブドウ苗木の写真を図1のAに示し(矢印で示すようにがんしゅ形成が認められた)、ARK−1菌株の菌液を混合したものを接種したブドウ苗木の写真を図1のBに示した。表1は、上記の試験を3回反復して行い、その平均値を算出したものである。表1の防除価は以下の数式により算出した。
防除価=100×(無処理区の発病率−非病原性菌株と混合して接種した区の発病率)/(無処理区の発病率)。
まず、PS(Potato sucrose)培地を調製した。じゃがいも300gの煎汁、Ca(CO3)2・4H2O 0.5g、Na2HPO4・12H2O 2.0g、ペプトン5.0g及びサッカロース20gを蒸留水1000mLに溶解させオートクレーブ滅菌しPS培地(以下、「PS」ともいう。)を調製した。このように調製したPS培地に、ARK−1菌株、ARK−2菌株、及びARK−3菌株を各々別々に接種し(いずれも、前述の凍結保存物を解凍し、その一白金耳量(2mg)を接種した。)、30℃で48時間、100rpmで振とう培養し、各菌株を生きた状態で含有する生菌体含有培養液(本剤)を得た。
上記実施例1で製造した3種類の生菌体含有培養液(本剤)をそれぞれ浸み込ませた直径8mmのペーパーディスクを、シャーレ内部のPSA平板培地の上に置いて27℃で24時間培養した。24時間の培養後、そのシャーレのふたの内側に直径9cmの濾紙を敷き、クロロホルムをその濾紙に1mL滴下してふたを戻して30分間室温で燻蒸した後、濾紙を外して60分間静置しクロロホルムをそのシャーレ内部から完全に蒸発除去した。その後、予め表2に記載する各種根頭がんしゅ病菌株をPSA平板培地で3日間培養した後、滅菌蒸留水に懸濁して作成しておいた菌濃度1.0×108個/mLの各菌液を、上記で作製した各培地に、1枚(シャーレ1個)当たり2mLの割合でスプレーで噴霧して接種し、27℃で48時間培養後、ペーパーディスク周辺の形成される阻止円の大きさを測定した。その結果、表2に示すとおり、ARK−1菌株、ARK−2菌株、ARK−3菌株は供試した全ての根頭がんしゅ病菌株に対して、その増殖を抑制した。
実施例1で製造したARK−1菌株、ARK−2菌株、及びARK−3菌株の各生菌体含有培養液を用いて、岡山県農林水産総合センター農業研究所の敷地内にある野外の圃場において圃場試験を実施した。なお、上記各生菌体含有培養液は水道水で希釈して菌濃度を1.0×109個/mLに調整し、これを本剤として用いた。ブドウ根頭がんしゅ病菌株である病原性リゾビウム・ヴィティスG−Ag−27株、病原性リゾビウム・ヴィティスMAFF211674株、病原性リゾビウム・ヴィティスMAFF211676株、病原性リゾビウム・ヴィティスG−Ag−60株、及び病原性リゾビウム・ヴィティスVAT07−1株をそれぞれPSA平板培地で27℃、24時間前培養した。これらの菌体を全て一つのPS培地に入れて27℃で48時間、100rpmで振とう培養し、各処理区(1.1m2)あたり、上記で得られた培養物20Lを土壌に混和して汚染圃場とした。ブドウ(品種:ピオーネ、2年生苗木)の根を束ねて全長の1/2の位置で切断し、根部を菌濃度1.0×109個/mLの本剤に浸漬して1時間静置した後、1処理区あたり4本を定植した。各処理区6反復で試験し、定植6か月後に全株を掘り起こして、がんしゅが形成されている株数の全株数に対する割合を発病株率として、それから防除価を以下の数式で算出した。なお、無処理区とは、本剤で浸漬処理をしないで定植したブドウを意味する。
防除価=100×(無処理区の発病株率−処理区の発病株率)/(無処理区の発病株率)。
その結果、表3に示すとおり、本剤(ARK−1菌株、ARK−2菌株、ARK−3菌株)で浸漬処理することにより、ブドウ根頭がんしゅ病の発病株率が無処理区と比べて著しく減少し、ブドウ根頭がんしゅ病に対して極めて高い防除効果が得られた。
なお、無処理区(対照)の汚染土壌にブドウ苗木をそのまま定植したものを6か月後に掘り起こしたブドウ苗木の写真を図2のAに示し(矢印で示すようにがんしゅ形成が認められた)、ブドウ苗木の根をあらかじめARK−1の菌液に浸漬した後に汚染土壌に定植したものを6か月後に掘り起こしたブドウ苗木の写真を図2のBに示した(がんしゅ形成が認められない)。
実施例1で製造したARK−1菌株、ARK−2菌株、及びARK−3菌株の各生菌体含有培養液を用いて、岡山県農林水産総合センター農業研究所の敷地内にある温室において試験を実施した。なお、上記各生菌体含有培養液は水道水で希釈して菌濃度を1.0×108個/mLに調整し、これを本剤として用いた。ブドウ根頭がんしゅ病菌株である病原性リゾビウム・ヴィティスG−Ag−27株、病原性リゾビウム・ヴィティスMAFF211674株、病原性リゾビウム・ヴィティスMAFF211676株、病原性リゾビウム・ヴィティスG−Ag−60株、病原性リゾビウム・ヴィティスG−Ag−68株、病原性リゾビウム・ヴィティスG−Ag−80株、病原性リゾビウム・ヴィティスVAT07−1株、及び病原性リゾビウム・ヴィティスAt−90−23株、をそれぞれPSA平板培地で27℃、24時間前培養した。これらの菌体を全て一つのPS培地に入れて27℃で48時間、100rpmで振とう培養し、土壌を300g詰めた直径9cmビニルポット(植木鉢)あたり、上記で調製した培養物100mLを土壌に混和して汚染土とした。ブドウ(品種:ネオ・マスカット、1年生苗木)を1ポットに1本定植した後、本剤を1ポットあたり50mL灌注した。各処理区60ポットで試験し、定植4か月後に全株を掘り起こして、がんしゅが形成されている株数の全株数に対する割合を発病株率として、それから防除価を以下の数式で算出した。
防除価=100×(無処理区の発病株率−処理区の発病株率)/(無処理区の発病株率)。
その結果、表4に示すとおり、本剤(ARK−1菌株、ARK−2菌株、ARK−3菌株)を土壌に灌注することにより、ブドウ根頭がんしゅ病の発病株率が無処理区と比べて著しく減少し、ブドウ根頭がんしゅ病に対して極めて高い防除効果が得られた。
実施例1で製造したARK−1菌株、ARK−2菌株、及びARK−3菌株の各生菌体含有培養液を用いて、岡山県農林水産総合センター農業研究所の敷地内にある野外の圃場において圃場試験を実施した。なお、上記各生菌体含有培養液は水道水で希釈して菌濃度を2.0×108個/mLに調整し、これを本剤として用いた。リンゴ根頭がんしゅ病菌株に属する病原性リゾビウム・ラジオバクター(Rhizobium radiobacter)ARAT001株、病原性リゾビウム・リゾゲネス(Rhizobium rhizogenes)ARAT002株、病原性リゾビウム・リゾゲネスNEAR8株、病原性リゾビウム・リゾゲネスNEAR11株、及び病原性リゾビウム・リゾゲネスNEARNo.9 3/2株をそれぞれPSA平板培地で27℃、24時間前培養した。これらの菌体を全て一つのPS培地に入れて27℃で48時間、100rpmで振とう培養し、各処理区(6.0m2)あたり100Lを土壌に混和して汚染圃場とした。リンゴ(品種:フジ、2年生苗木)の根を束ね、根部を菌濃度2.0×108個/mLの本剤に浸漬して1時間静置した後、1処理区あたり11本を定植した。各処理区3反復で試験し、定植6か月後に全株を掘り起こして、がんしゅが形成されている株数の全株数に対する割合を発病株率として、それから防除価を以下の数式で算出した。
防除価=100×(無処理区の発病株率−処理区の発病株率)/(無処理区の発病株率)。
その結果、表5に示すとおり、本剤(ARK−1菌株、ARK−2菌株、ARK−3菌株)で浸漬処理することにより、リンゴ根頭がんしゅ病の発病株率が無処理区と比べて著しく減少し、リンゴ根頭がんしゅ病に対して極めて高い防除効果が得られた。
実施例1で製造したARK−1菌株、ARK−2菌株、ARK−3菌株の各生菌体含有培養液を用いて、岡山県農林水産総合センター農業研究所の敷地内にある温室において実施した。なお、上記の各生菌体含有培養液は水道水で希釈して菌濃度を5.0×108個/mLに調整し、これを本剤として用いた。リンゴ根頭がんしゅ病菌株である病原性リゾビウム・ラジオバクター(Rhizobium radiobacter)ARAT001株、病原性リゾビウム・リゾゲネス(Rhizobium rhizogenes)ARAT002株、病原性リゾビウム・リゾゲネスNEAR8株、病原性リゾビウム・リゾゲネスNEAR11株、及び病原性リゾビウム・リゾゲネスNEARNo.9 3/2株をそれぞれPSA平板培地で27℃、24時間前培養した(なお、リンゴ根頭がんしゅ病菌はバラにも強い病原性を有するため、ここではリンゴ根頭がんしゅ病菌を供試した。)。これらの菌体を全て一つのPS培地に入れて27℃で48時間、100rpmで振とう培養し、土壌を600g詰めた直径15cmビニルポットあたり、上記培養物200mLを土壌に混和して汚染土とした。バラ(品種:ローテローゼ、1年生苗木)の根を束ねて全長の1/2の位置で切断し、根部を菌濃度5.0×108個/mLの本剤に浸漬して24時間静置した後、1処理区あたり15本を定植した。なお、1本を1ポットに定植し、1処理区を15ポットにて形成した。各処理区3反復で試験し、定植6か月後に全株を掘り起こして、がんしゅが形成されている株数の全株数に対する割合を発病株率として、それから防除価を以下の数式で算出した。
防除価=100×(無処理区の発病株率−処理区の発病株率)/(無処理区の発病株率)。
その結果、表6に示すとおり、本剤で浸漬処理することにより、バラ根頭がんしゅ病の発病株率が無処理区と比べて著しく減少し、バラ根頭がんしゅ病に対して極めて高い防除効果が得られた。
実施例1で製造したARK−1菌株、ARK−2菌株、ARK−3菌株の各生菌体含有培養液を用いて、岡山県農林水産総合センター農業研究所の敷地内にある温室において試験を実施した。なお、各生菌体含有培養液を水道水で希釈して菌濃度を5.0×108個/mLに調整したものを、本剤として用いた。リンゴ根頭がんしゅ病菌株である病原性リゾビウム・ラジオバクター(Rhizobium radiobacter)ARAT001株、病原性リゾビウム・リゾゲネス(Rhizobium rhizogenes)ARAT002株、病原性リゾビウム・リゾゲネスNEAR8株、病原性リゾビウム・リゾゲネスNEAR11株、及び病原性リゾビウム・リゾゲネスNEARNo.9 3/2株をそれぞれPSA平板培地で27℃、24時間前培養した(なお、リンゴ根頭がんしゅ病菌はトマトにも強い病原性を有するため、ここではリンゴ根頭がんしゅ病菌を供試した。)。これらの菌体を全て一つのPS培地に入れて27℃で48時間、100rpmで振とう培養し、土壌を300g詰めた直径9cmビニルポットあたり、上記培養物100mLを土壌に混和して汚染土とした。トマト(品種:桃太郎8、実生、発芽4週間後)の根を束ねて全長の1/2の位置で切断し、根部を菌濃度5.0×108個/mLの本剤に浸漬して10分間静置した後、1処理区あたり40本を定植した。なお、1本を1ポットに定植し、1処理区を40ポットにて形成した。各処理区3反復で試験し、定植3か月後に全株を掘り起こして、がんしゅが形成されている株数の全株数に対する割合を発病株率として、それから防除価を以下の数式で算出した。
防除価=100×(無処理区の発病株率−処理区の発病株率)/(無処理区の発病株率)。
その結果、表7に示すとおり、本剤で浸漬処理することにより、トマト根頭がんしゅ病の発病株率が無処理区と比べて著しく減少し、トマト根頭がんしゅ病に対して極めて高い防除効果が得られた。
実施例1で製造したARK−1菌株、ARK−3菌株の各生菌体含有培養液を用いて、岡山県農林水産総合センター農業研究所の敷地内にある野外の圃場において圃場試験を実施した。なお、上記各生菌体含有培養液は水道水で希釈して菌濃度を2.5×108個/mLに調整し、これを本剤として用いた。モモ根頭がんしゅ病菌株に属する病原性リゾビウム・リゾゲネス(Rhizobium rhizogenes)Pch−Ag−2株をPSA平板培地で27℃、24時間前培養した。この菌体をPS培地に入れて27℃で48時間、100rpmで振とう培養し、各処理区(4.2m2)あたり100Lを土壌に混和して汚染圃場とした。モモ(品種:白鳳、2年生苗木)の根を束ね、根部を菌濃度2.5×108個/mLの本剤に浸漬して1時間静置した後、1処理区あたり13本を定植した。各処理区3反復で試験し、定植6か月後に全株を掘り起こして、がんしゅが形成されている株数の全株数に対する割合を発病株率として、それから防除価を以下の数式で算出した。
防除価=100×(無処理区の発病株率−処理区の発病株率)/(無処理区の発病株率)。
その結果、表8に示すとおり、ARK−1菌株またはARK−3菌株を有効成分とする本剤で浸漬処理することにより、モモ根頭がんしゅ病の発病株率が無処理区と比べて著しく減少し、モモ根頭がんしゅ病に対して高い防除効果が得られた。とりわけARK−1菌株は極めて高い防除効果を示した。
実施例1で製造したARK−1菌株、ARK−2菌株、ARK−3菌株の各生菌体含有培養液を用いて、岡山県農林水産総合センター農業研究所の敷地内にある温室において実施した。なお、上記の各生菌体含有培養液は水道水で希釈して菌濃度を2.5×108個/mLに調整し、これを本剤として用いた。ナシ根頭がんしゅ病菌株である病原性リゾビウム・リゾゲネス(Rhizobium rhizogenes)P−Ag−1株およびP−Ag−6株をそれぞれPSA平板培地で27℃、24時間前培養した。これらの菌体を全て一つのPS培地に入れて27℃で48時間、100rpmで振とう培養し、各処理区(4.2m2)あたり100Lを土壌に混和して汚染圃場とした。ナシ(品種:豊水、2年生苗木)の根を束ね、根部を菌濃度2.5×108個/mLの本剤に浸漬して1時間静置した後、1処理区あたり13本を定植した。各処理区3反復で試験し、定植6か月後に全株を掘り起こして、がんしゅが形成されている株数の全株数に対する割合を発病株率として、それから防除価を以下の数式で算出した。
防除価=100×(無処理区の発病株率−処理区の発病株率)/(無処理区の発病株率)。
その結果、表9に示すとおり、本剤で浸漬処理することにより、ナシ根頭がんしゅ病の発病株率が無処理区と比べて著しく減少し、ナシ根頭がんしゅ病に対して高い防除効果が得られた。とりわけARK−1菌株は極めて高い防除効果を示した。
岡山県内で栽培されていたブドウ(品種:ピオーネ)中から分離したリゾビウム・ヴィティスARK−1菌株、ARK−2菌株およびARK−3菌株をポテト・デキストロース液体培地で27℃、2日間培養し、遠心分離機により培養菌体のみを得た。これを蒸留水にて108個/mLに調整した。
市販されているミツバ、パセリ、ニガウリの種子を前記の手法で調製した菌液に60分間浸漬し、浸漬種子を得た。この種子を育苗培土に播種し、温室内で育苗した。播種2週間後に発芽率を調査した。なお、比較例としては、各種種子を水道水に60分間浸漬したものを用いた(実験例10−1)。
また、市販されているミツバ、パセリ、ニガウリの種子を育苗培土に播種し、覆土する前に培土および種子表面に実施例1で調製した菌液を500mL/m2の割合で土壌灌注処理した。土壌灌注処理後、覆土を行い、温室内で育苗し、播種2週間後に発芽率を調査した。なお、比較例としては、水道水を500mL/m2の割合で土壌灌注処理したものを用いた(実験例10−2)。
何れの試験も、発芽率は子葉が地上部において完全に展開しているものを発芽とみなして、以下の式(1)により算出した。
発芽率(%)=(発芽数/播種数)×100。
その結果、表10に示すとおり、リゾビウム・ヴィティスARK−1菌株、ARK−2菌株およびARK−3菌株を培養して得られた菌体を未発芽の種子に作用させることは、植物種子の発芽率を向上させることが示された。
また、本発明に係わる微生物ARK−1菌株、ARK−2菌株及びARK−3菌株のいずれも冷凍保存でき、使用にあたりその一部を取り出して容易に増殖できるので、取り扱いが簡単である。
また、本発明に係わる微生物ARK−1菌株、ARK−2菌株及びARK−3菌株のいずれも自然界に存在する非病原性リゾビウム・ヴィティスに属するものであり、安全性に優れ、環境への影響が少ない。
以上の通り、本発明に係わる非病原性リゾビウム・ヴィティスARK−1菌株、ARK−2菌株及びARK−3菌株はいずれも根頭がんしゅ病に対して高い防除効果を示すことから、根頭がんしゅ病の防除剤として、農業分野および園芸分野で広く適用できる。
(1)リゾビウム・ヴィティス(Rhizobium vitis)ARK−1菌株(FERM BP−11426)。
(2)リゾビウム・ヴィティス(Rhizobium vitis)ARK−2菌株(FERM BP−11427)。
(3)リゾビウム・ヴィティス(Rhizobium vitis)ARK−3菌株(FERM BP−11428)。
Claims (7)
- リゾビウム・ヴィティス(Rhizobium vitis)ARK−1菌株(FERM BP−11426)。
- リゾビウム・ヴィティス(Rhizobium vitis)ARK−2菌株(FERM BP−11427)。
- リゾビウム・ヴィティス(Rhizobium vitis)ARK−3菌株(FERM BP−11428)。
- 請求項1に記載のARK−1菌株、請求項2に記載のARK−2菌株及び請求項3に記載のARK−3菌株よりなる群より選ばれる1又は2以上の菌体および/または菌体の培養物を有効成分として含有することを特徴とする根頭がんしゅ病防除剤。
- 請求項4に記載の根頭がんしゅ病防除剤を植物に接触させるステップを含んでなる、根頭がんしゅ病防除方法。
- 請求項1に記載のARK−1菌株、請求項2に記載のARK−2菌株及び請求項3に記載のARK−3菌株よりなる群より選ばれる1又は2以上の菌体および/または菌体の培養物を有効成分として含有することを特徴とする植物種子発芽率向上剤。
- 請求項6に記載の植物種子発芽率向上剤を植物種子に接触させるステップを含んでなる、植物種子発芽率向上方法。
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