JP5816079B2

JP5816079B2 - ノッチスペアリングガンマセクレターゼ阻害剤としてのシクロブチルスルホン

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Publication number: JP5816079B2
Application number: JP2011506370A
Authority: JP
Inventors: ハイデブレヒト，リチヤード・ダブリユ; リー，チヤオミン; ムニヨス，ベニート; ローズノウ，アンドリユー; スルデイ，ローラ・エム; テンペスト，ポール; ブルベイカー，ジエイソン; シリフアイバン，ピン
Original assignee: Merck Sharp and Dohme LLC
Current assignee: Merck Sharp and Dohme LLC
Priority date: 2008-04-23
Filing date: 2009-04-17
Publication date: 2015-11-17
Anticipated expiration: 2029-04-17
Also published as: EP2273877B1; EP2273877A1; AU2009239555A1; US8759579B2; EP2273877A4; US20110039925A1; JP2011518830A; JP2014210787A; WO2009131906A1; CA2721910A1

Description

本発明は新規類の化合物、その塩、前記化合物等を含有する医薬組成物及び人体の治療におけるその使用に関する。特に、本発明はγセクレターゼによるＡＰＰのプロセシングを阻害し、従って、アルツハイマー病の治療又は予防に有用な新規シクロブチルスルホン誘導体に関する。本発明の化合物はノッチシグナル伝達経路を保持する。従って、本発明の化合物はノッチ阻害による毒性を生じずにアルツハイマー病の進行を停止又は潜在的に回復させると考えられる。

アルツハイマー病（ＡＤ）は認知症の最も一般的な形態である。主に高齢者の疾患であり、罹患率は６５歳以上の人口の１０％に及ぶが、遺伝的素因をもつ相当数の若年患者もＡＤに罹患している。これは神経変性疾患であり、記憶及び認知機能の進行性低下を臨床的特徴とし、患者の皮質及び関連脳領域における細胞外蛋白プラークの沈着を病理的特徴とする。これらのプラークは主にβアミロイドペプチド（Ａβ）のフィブリル凝集物から構成される（ＧｌｅｎｎｅｒＧＧａｎｄＷｏｎｇＣＷ（１９８４）Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓｄｉｓｅａｓｅ：Ｉｎｉｔｉａｌｒｅｐｏｒｔｏｆｔｈｅｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆａｎｏｖｅｌｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃｕｌａｒａｍｙｌｏｉｄｐｒｏｔｅｉｎ．ＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄＢｉｏｐｈｙｓｉｃａｌｒｅｓｅａｒｃｈＣｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ．１２０（３）；８８５−８９０）。アミロイド前駆体蛋白質（ＡＰＰ）のプロセシングによりＡβを形成する過程におけるγセクレターゼの役割を含むセクレターゼの役割については文献に詳細に記載されている。Ａβはβアミロイド切断酵素（ＢＡＣＥ）とγセクレターゼの２種類の酵素によるＡＰＰの蛋白分解プロセシングにより生成される（図１；ＳｅｌｋｏｅＤＪ（２００１）Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓｄｉｓｅａｓｅ：ｇｅｎｅｓ，ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ａｎｄｔｈｅｒａｐｙ．ＰｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌＲｅｖｉｅｗ．８１（２）：７４１−７６６）。γセクレターゼはプレセニリン（プレセニリン１又は２）、ニカストリン、ＡＰＨ−１及びＰＥＮ−２の４種類の蛋白質から構成される複合体である（ＴａｋａｓｕｇｉＮ，ＴｏｍｉｔａＴ，ＨａｙａｓｈｉＩ，ＴｓｕｒｕｏｋａＭ，ＮｉｉｍｕｒａＭ，ＴａｋａｈａｓｈｉＹ，ＴｈｉｎａｋａｒａｎＧ，ＩｗａｔｓｕｂｏＴ（２００３）Ｔｈｅｒｏｌｅｏｆｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｃｏｆａｃｔｏｒｓｉｎｔｈｅｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｃｏｍｐｌｅｘ．Ｎａｔｕｒｅ．４２２（６９３０）：４３８−４４１；ＫｉｍｂｅｒｌｙＷＴ，ＬａＶｏｉｅＭＪ，ＯｓｔａｓｚｅｗｓｋｉＢＬ，ＹｅＷ，ＷｏｌｆｅＭＳ，ＳｅｌｋｏｅＤＪ（２００３）Ｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｉｓａｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎｃｏｍｐｌｅｘｃｏｍｐｒｉｓｅｄｏｆｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ，ｎｉｃａｓｔｒｉｎ，Ａｐｈ−１，ａｎｄＰｅｎ−２．ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ．１００（１１）：６３８２−６３８７；ＥｄｂａｕｅｒＤ，ＷｉｎｋｌｅｒＥ，ＲｅｇｕｌａＪＴ，ＰｅｓｏｌｄＢ，ＳｔｅｉｎｅｒＨ，ＨａａｓｓＣ（２００３）Ｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎｏｆｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ．ＮａｔｕｒｅＣｅｌｌＢｉｏｌｏｇｙ．５（５）：４８６−４８８．）。プレセニリン１及び２は複合体の触媒活性に不可欠であることが分かっている膜貫通アスパラギン酸残基を含む（ＷｏｌｆｅＭＳ，ＸｉａＷ，ＯｓｔａｓｚｅｗｓｋｉＢＬ，ＤｉｅｈｌＴＳ，ＫｉｍｂｅｒｌｙＷＴ，ＳｅｌｋｏｅＤＪ（１９９９）Ｔｗｏｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅａｓｐａｒｔａｔｅｓｉｎｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ−１ｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｅｎｄｏｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓａｎｄｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｎａｔｕｒｅ．１９９９３９８（６７２７）：５１３−５１７）。早発家族性ＡＤ（ＦＡＤ）に関連する突然変異の大半はＰＳ−１又はＰＳ−２に結び付けられる（ＳｃｈｅｕｎｅｒＤ，ＥｃｋｍａｎＣ，ＪｅｎｓｅｎＭ，ＳｏｎｇＸ，ＣｉｔｒｏｎＭ，ＳｕｚｕｋｉＮ，ＢｉｒｄＴＤ，ＨａｒｄｙＪ，ＨｕｔｔｏｎＭ，ＫｕｋｕｌｌＷ，ＬａｒｓｏｎＥ，Ｌｅｖｙ−ＬａｈａｄＥ，ＶｉｉｔａｎｅｎＭ，ＰｅｓｋｉｎｄＥ，ＰｏｏｒｋａｊＰ，ＳｃｈｅｌｌｅｎｂｅｒｇＧ，ＴａｎｚｉＲ，ＷａｓｃｏＷ，ＬａｎｎｆｅｌｔＬ，ＳｅｌｋｏｅＤ，ＹｏｕｎｋｉｎＳ（１９９６）Ｓｅｃｒｅｔｅｄａｍｙｌｏｉｄｂｅｔａ−ｐｒｏｔｅｉｎｓｉｍｉｌａｒｔｏｔｈａｔｉｎｔｈｅｓｅｎｉｌｅｐｌａｑｕｅｓｏｆＡｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓｄｉｓｅａｓｅｉｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｖｉｖｏｂｙｔｈｅｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ１ａｎｄ２ａｎｄＡＰＰｍｕｔａｔｉｏｎｓｌｉｎｋｅｄｔｏｆａｍｉｌｉａｌＡｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓｄｉｓｅａｓｅ．ＮａｔｕｒｅＭｅｄｉｃｉｎｅ．２（８）：８６４−８７０；ＤｕｆｆＫ，ＥｃｋｍａｎＣ，ＺｅｈｒＣ，ＹｕＸ，ＰｒａｄａＣＭ，Ｐｅｒｅｚ−ｔｕｒＪ，ＨｕｔｔｏｎＭ，ＢｕｅｅＬ，ＨａｒｉｇａｙａＹ，ＹａｇｅｒＤ，ＭｏｒｇａｎＤ，ＧｏｒｄｏｎＭＮ，ＨｏｌｃｏｍｂＬ，ＲｅｆｏｌｏＬ，ＺｅｎｋＢ，ＨａｒｄｙＪ，ＹｏｕｎｋｉｎＳ（１９９６）Ｉｎｃｒｅａｓｅｄａｍｙｌｏｉｄ−ｂｅｔａ４２（４３）ｉｎｂｒａｉｎｓｏｆｍｉｃｅｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇｍｕｔａｎｔｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ１．Ｎａｔｕｒｅ．３８３（６６０２）：７１０−７１３；ＬｅｍｅｒｅＣＡ，ＬｏｐｅｒａＦ，ＫｏｓｉｋＫＳ，ＬｅｎｄｏｎＣＬ，ＯｓｓａＪ，ＳａｉｄｏＴＣ，ＹａｍａｇｕｃｈｉＨ，ＲｕｉｚＡ，ＭａｒｔｉｎｅｚＡ，ＭａｄｒｉｇａｌＬ，ＨｉｎｃａｐｉｅＬ，ＡｒａｎｇｏＪＣ，ＡｎｔｈｏｎｙＤＣ，ＫｏｏＥＨ，ＧｏａｔｅＡＭ，ＳｅｌｋｏｅＤＪ，ＡｒａｎｇｏＪＣ（１９９６）ＴｈｅＥ２８０Ａｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ１ＡｌｚｈｅｉｍｅｒｍｕｔａｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｅｓｉｎｃｒｅａｓｅｄＡｂｅｔａ４２ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎａｎｄｓｅｖｅｒｅｃｅｒｅｂｅｌｌａｒｐａｔｈｏｌｏｇｙ．ＮａｔｕｒｅＭｅｄｉｃｉｎｅ．２（１０）：１１４６−１１５０；ＣｉｔｒｏｎＭ，ＷｅｓｔａｗａｙＤ，ＸｉａＷ，ＣａｒｌｓｏｎＧ，ＤｉｅｈｌＴ，ＬｅｖｅｓｑｕｅＧ，Ｊｏｈｎｓｏｎ−ＷｏｏｄＫ，ＬｅｅＭ，ＳｅｕｂｅｒｔＰ，ＤａｖｉｓＡ，ＫｈｏｌｏｄｅｎｋｏＤ，ＭｏｔｔｅｒＲ，ＳｈｅｒｒｉｎｇｔｏｎＲ，ＰｅｒｒｙＢ，ＹａｏＨ，ＳｔｒｏｍｅＲ，ＬｉｅｂｅｒｂｕｒｇＩ，ＲｏｍｍｅｎｓＪ，ＫｉｍＳ，ＳｃｈｅｎｋＤ，ＦｒａｓｅｒＰ，ＳｔＧｅｏｒｇｅＨｙｓｌｏｐＰ，ＳｅｌｋｏｅＤＪ（１９９７）ＭｕｔａｎｔｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｓｏｆＡｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓｄｉｓｅａｓｅｉｎｃｒｅａｓｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆ４２−ｒｅｓｉｄｕｅａｍｙｌｏｉｄｂｅｔａ−ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｂｏｔｈｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄｃｅｌｌｓａｎｄｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｉｃｅ．ＮａｔｕｒｅＭｅｄｉｃｉｎｅ．３（１）：６７−７２）。γセクレターゼは前提条件としてエクトドメインシェディングを受けた多数の他のＩ型膜蛋白質をプロセシングする（ＬｌｅｏＡ（２００８）Ａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｏｎｓｕｂｓｔｒａｔｅｓｏｔｈｅｒｔｈａｎＡＰＰ．ＣｕｒｒｅｎｔＴｏｐｉｃｓｉｎＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ．８（１）：９−１６）。

ＡＰＰのプロセシングに加え、γセクレターゼはノッチファミリー受容体を切断する。ノッチシグナル伝達及び機能にγセクレターゼ活性が不可欠であることは遺伝的に立証されている（ＳｈｅｎＪ，ＢｒｏｎｓｏｎＲＴ，ＣｈｅｎＤＦ，ＸｉａＷ，ＳｅｌｋｏｅＤＪ，ＴｏｎｅｇａｗａＳ（１９９７）ＳｋｅｌｅｔａｌａｎｄＣＮＳｄｅｆｅｃｔｓｉｎＰｒｅｓｅｎｉｌｉｎ−１−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔｍｉｃｅ．Ｃｅｌｌ．８９（４）：６２９−６３９；ＷｏｎｇＰＣ，ＺｈｅｎｇＨ，ＣｈｅｎＨ，ＢｅｃｈｅｒＭＷ，ＳｉｒｉｎａｔｈｓｉｎｇｈｊｉＤＪ，ＴｒｕｍｂａｕｅｒＭＥ，ＣｈｅｎＨＹ，ＰｒｉｃｅＤＬ，ＶａｎｄｅｒＰｌｏｅｇＬＨ，ＳｉｓｏｄｉａＳＳ（１９９７）Ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ１ｉｓｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒＮｏｔｃｈ１ａｎｄＤＩＩ１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｔｈｅｐａｒａｘｉａｌｍｅｓｏｄｅｒｍ．Ｎａｔｕｒｅ．３８７（６６３０）：２８８−２９２）。ノッチは進化的に保存されており、発生中の胚で細胞運命決定の調節に重要な役割を果たす１回貫通型Ｉ型膜貫通受容体で広く発現される（Ａｒｔａｖａｎｉｓ−ＴｓａｋｏｎａｓＳ，ＲａｎｄＭＤ，ＬａｋｅＲＪ（１９９９）Ｎｏｔｃｈｓｉｇｎａｌｉｎｇ：ｃｅｌｌｆａｔｅｃｏｎｔｒｏｌａｎｄｓｉｇｎａｌｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎｉｎｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．Ｓｃｉｅｎｃｅ．２８４（５４１５）：７７０−７７６）。成人におけるノッチの役割はまだ不明であるが、ノッチ蛋白質は各種成人組織で発現され、幹細胞分化に役割を果たすと考えられる。４種類のノッチ遺伝子が哺乳動物で同定されており（ノッチ１〜４）、全４種類のノッチ蛋白質はγセクレターゼにより切断される（ＳａｘｅｎａＭＴ，ＳｃｈｒｏｅｔｅｒＥＨ，ＭｕｍｍＪＳ，ＫｏｐａｎＲ（２００１）Ｍｕｒｉｎｅｎｏｔｃｈｈｏｍｏｌｏｇｓ（Ｎ１−４）ｕｎｄｅｒｇｏｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ．２７６（４３）：４０２６８−４０２７３）。ノッチ活性化はＤｅｌｔａ／Ｓｅｒｒａｔｅ／ＬＡＧ２ファミリーの膜貫通リガンドとのトランス結合により誘導される。ノッチシグナル伝達は（ａ）細胞外ドメインのサイト１の切断；（ｂ）リガンド結合後の細胞外／膜貫通ドメイン境界のちょうどＮ末端のサイト２の切断；及び（ｃ）膜貫通／細胞質ドメイン境界付近の膜貫通ドメイン内のサイト３（Ｓ３）の切断の３つの切断イベントに介在される。サイト３切断はノッチ細胞内ドメイン（ＮＩＣＤ）の遊離に必要であり、γセクレターゼに介在される（ＳｃｈｒｏｅｔｅｒＥＨ，ＫｉｓｓｌｉｎｇｅｒＪＡ，ＫｏｐａｎＲ（１９９８）Ｎｏｔｃｈ−１ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇｒｅｑｕｉｒｅｓｌｉｇａｎｄ−ｉｎｄｕｃｅｄｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｒｅｌｅａｓｅｏｆｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｄｏｍａｉｎ．Ｎａｔｕｒｅ．３９３（６６８３）：３８２−３８６）。ＮＩＣＤは（ＣＳＬ）ＣＢＦ１／Ｓｅｒｒａｔｅ／ＬＡＧ−１ファミリーのＤＮＡ結合蛋白質に介在される転写を活性化し、各種遺伝子の発現を誘導する。ＮＩＣＤに調節される転写はノッチに介在されるシグナル伝達の主要な要素であると考えられる。

ＡＰＰ切断とＡβ生成を阻止するためのγセクレターゼ阻害剤の開発はノッチプロセシングの阻害によるメカニズム関連毒性の可能性により阻まれている。動物にγセクレターゼ阻害剤を亜慢性投与した試験ではノッチ関連毒性が観測されている。３日間以上投与後に常に腸杯細胞化生が認められる（ＳｅａｒｆｏｓｓＧＨ，ＪｏｒｄａｎＷＨ，ＣａｌｌｉｇａｒｏＤＯ，ＧａｌｂｒｅａｔｈＥＪ，ＳｃｈｉｒｔｚｉｎｇｅｒＬＭ，ＢｅｒｒｉｄｇｅＢＲ，ＧａｏＨ，ＨｉｇｇｉｎｓＭＡ，ＭａｙＰＣ，ＲｙａｎＴＰ（２００３）Ａｄｉｐｓｉｎ，ａｂｉｏｍａｒｋｅｒｏｆｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｔｏｘｉｃｉｔｙｍｅｄｉａｔｅｄｂｙａｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ．２７８（４６）：４６１０７−４６１１６；ＷｏｎｇＧＴ，ＭａｎｆｒａＤ，ＰｏｕｌｅｔＦＭ，ＺｈａｎｇＱ，ＪｏｓｉｅｎＨ，ＢａｒａＴ，ＥｎｇｓｔｒｏｍＬ，Ｐｉｎｚｏｎ−ＯｒｔｉｚＭ，ＦｉｎｅＪＳ，ＬｅｅＨＪ，ＺｈａｎｇＬ，ＨｉｇｇｉｎｓＧＡ，ＰａｒｋｅｒＥＭ（２００４）Ｃｈｒｏｎｉｃｔｒｅａｔｍｅｎｔｗｉｔｈｔｈｅｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒＬＹ−４１１，５７５ｉｎｈｉｂｉｔｓｂｅｔａ−ａｍｙｌｏｉｄｐｅｐｔｉｄｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄａｌｔｅｒｓｌｙｍｐｈｏｐｏｉｅｓｉｓａｎｄｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｃｅｌｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ．２７９（１３）：１２８７６−１２８８２；ＭｉｌａｎｏＪ，ＭｃＫａｙＪ，ＤａｇｅｎａｉｓＣ，Ｆｏｓｔｅｒ−ＢｒｏｗｎＬ，ＰｏｇｎａｎＦ，ＧａｄｉｅｎｔＲ，ＪａｃｏｂｓＲＴ，ＺａｃｃｏＡ，ＧｒｅｅｎｂｅｒｇＢ，ＣｉａｃｃｉｏＰＪ（２００４）Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｏｆｎｏｔｃｈｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｂｙｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｃａｕｓｅｓｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｇｏｂｌｅｔｃｅｌｌｍｅｔａｐｌａｓｉａａｎｄｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｇｅｎｅｓｋｎｏｗｎｔｏｓｐｅｃｉｆｙｇｕｔｓｅｃｒｅｔｏｒｙｌｉｎｅａｇｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．ＴｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ．８２（１）：３４１−３５８；ｖａｎＥｓＪＨ，ｖａｎＧｉｊｎＭＥ，ＲｉｃｃｉｏＯ，ｖａｎｄｅｎＢｏｒｎＭ，ＶｏｏｉｊｓＭ，ＢｅｇｔｈｅｌＨ，ＣｏｚｉｊｎｓｅｎＭ，ＲｏｂｉｎｅＳ，ＷｉｎｔｏｎＤＪ，ＲａｄｔｋｅＦ，ＣｌｅｖｅｒｓＨ（２００５）Ｎｏｔｃｈ／ｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｔｕｒｎｓｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｃｅｌｌｓｉｎｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｃｒｙｐｔｓａｎｄａｄｅｎｏｍａｓｉｎｔｏｇｏｂｌｅｔｃｅｌｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ．４３５（７０４４）：９５９−９６３）。更に、ノッチ機能はＴ及びＢリンパ球の適正な分化に不可欠であると思われる（ＨａｄｌａｎｄＢＫ，ＭａｎｌｅｙＮＲ，ＳｕＤ，ＬｏｎｇｍｏｒｅＧＤ，ＭｏｏｒｅＣＬ，ＷｏｌｆｅＭＳ，ＳｃｈｒｏｅｔｅｒＥＨ，ＫｏｐａｎＲ（２００１）Ｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｒｅｐｒｅｓｓｔｈｙｍｏｃｙｔｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ．９８（１３）：７４８７−７４９１；ＤｏｅｒｆｌｅｒＰ，ＳｈｅａｒｍａｎＭＳ，ＰｅｒｌｍｕｔｔｅｒＲＭ（２００１）Ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｍｏｄｕｌａｔｅｓｔｈｙｍｏｃｙｔｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ．９８（１６）：９３１２−９３１７）。従って、γセクレターゼ活性を薬理標的とするには、ノッチに対する活性の阻害を最小限にしながらＡβを選択的に阻止する物質が必要である。

ＧｌｅｎｎｅｒＧＧａｎｄＷｏｎｇＣＷ（１９８４）Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓｄｉｓｅａｓｅ：Ｉｎｉｔｉａｌｒｅｐｏｒｔｏｆｔｈｅｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆａｎｏｖｅｌｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃｕｌａｒａｍｙｌｏｉｄｐｒｏｔｅｉｎ．ＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄＢｉｏｐｈｙｓｉｃａｌｒｅｓｅａｒｃｈＣｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ．１２０（３）；８８５−８９０ＳｅｌｋｏｅＤＪ（２００１）Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓｄｉｓｅａｓｅ：ｇｅｎｅｓ，ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ａｎｄｔｈｅｒａｐｙ．ＰｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌＲｅｖｉｅｗ．８１（２）：７４１−７６６ＴａｋａｓｕｇｉＮ，ＴｏｍｉｔａＴ，ＨａｙａｓｈｉＩ，ＴｓｕｒｕｏｋａＭ，ＮｉｉｍｕｒａＭ，ＴａｋａｈａｓｈｉＹ，ＴｈｉｎａｋａｒａｎＧ，ＩｗａｔｓｕｂｏＴ（２００３）Ｔｈｅｒｏｌｅｏｆｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｃｏｆａｃｔｏｒｓｉｎｔｈｅｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｃｏｍｐｌｅｘ．Ｎａｔｕｒｅ．４２２（６９３０）：４３８−４４１ＫｉｍｂｅｒｌｙＷＴ，ＬａＶｏｉｅＭＪ，ＯｓｔａｓｚｅｗｓｋｉＢＬ，ＹｅＷ，ＷｏｌｆｅＭＳ，ＳｅｌｋｏｅＤＪ（２００３）Ｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｉｓａｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎｃｏｍｐｌｅｘｃｏｍｐｒｉｓｅｄｏｆｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ，ｎｉｃａｓｔｒｉｎ，Ａｐｈ−１，ａｎｄＰｅｎ−２．ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ．１００（１１）：６３８２−６３８７ＥｄｂａｕｅｒＤ，ＷｉｎｋｌｅｒＥ，ＲｅｇｕｌａＪＴ，ＰｅｓｏｌｄＢ，ＳｔｅｉｎｅｒＨ，ＨａａｓｓＣ（２００３）Ｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎｏｆｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ．ＮａｔｕｒｅＣｅｌｌＢｉｏｌｏｇｙ．５（５）：４８６−４８８ＷｏｌｆｅＭＳ，ＸｉａＷ，ＯｓｔａｓｚｅｗｓｋｉＢＬ，ＤｉｅｈｌＴＳ，ＫｉｍｂｅｒｌｙＷＴ，ＳｅｌｋｏｅＤＪ（１９９９）Ｔｗｏｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅａｓｐａｒｔａｔｅｓｉｎｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ−１ｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｅｎｄｏｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓａｎｄｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｎａｔｕｒｅ．１９９９３９８（６７２７）：５１３−５１７ＳｃｈｅｕｎｅｒＤ，ＥｃｋｍａｎＣ，ＪｅｎｓｅｎＭ，ＳｏｎｇＸ，ＣｉｔｒｏｎＭ，ＳｕｚｕｋｉＮ，ＢｉｒｄＴＤ，ＨａｒｄｙＪ，ＨｕｔｔｏｎＭ，ＫｕｋｕｌｌＷ，ＬａｒｓｏｎＥ，Ｌｅｖｙ−ＬａｈａｄＥ，ＶｉｉｔａｎｅｎＭ，ＰｅｓｋｉｎｄＥ，ＰｏｏｒｋａｊＰ，ＳｃｈｅｌｌｅｎｂｅｒｇＧ，ＴａｎｚｉＲ，ＷａｓｃｏＷ，ＬａｎｎｆｅｌｔＬ，ＳｅｌｋｏｅＤ，ＹｏｕｎｋｉｎＳ（１９９６）Ｓｅｃｒｅｔｅｄａｍｙｌｏｉｄｂｅｔａ−ｐｒｏｔｅｉｎｓｉｍｉｌａｒｔｏｔｈａｔｉｎｔｈｅｓｅｎｉｌｅｐｌａｑｕｅｓｏｆＡｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓｄｉｓｅａｓｅｉｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｖｉｖｏｂｙｔｈｅｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ１ａｎｄ２ａｎｄＡＰＰｍｕｔａｔｉｏｎｓｌｉｎｋｅｄｔｏｆａｍｉｌｉａｌＡｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓｄｉｓｅａｓｅ．ＮａｔｕｒｅＭｅｄｉｃｉｎｅ．２（８）：８６４−８７０ＤｕｆｆＫ，ＥｃｋｍａｎＣ，ＺｅｈｒＣ，ＹｕＸ，ＰｒａｄａＣＭ，Ｐｅｒｅｚ−ｔｕｒＪ，ＨｕｔｔｏｎＭ，ＢｕｅｅＬ，ＨａｒｉｇａｙａＹ，ＹａｇｅｒＤ，ＭｏｒｇａｎＤ，ＧｏｒｄｏｎＭＮ，ＨｏｌｃｏｍｂＬ，ＲｅｆｏｌｏＬ，ＺｅｎｋＢ，ＨａｒｄｙＪ，ＹｏｕｎｋｉｎＳ（１９９６）Ｉｎｃｒｅａｓｅｄａｍｙｌｏｉｄ−ｂｅｔａ４２（４３）ｉｎｂｒａｉｎｓｏｆｍｉｃｅｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇｍｕｔａｎｔｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ１．Ｎａｔｕｒｅ．３８３（６６０２）：７１０−７１３ＬｅｍｅｒｅＣＡ，ＬｏｐｅｒａＦ，ＫｏｓｉｋＫＳ，ＬｅｎｄｏｎＣＬ，ＯｓｓａＪ，ＳａｉｄｏＴＣ，ＹａｍａｇｕｃｈｉＨ，ＲｕｉｚＡ，ＭａｒｔｉｎｅｚＡ，ＭａｄｒｉｇａｌＬ，ＨｉｎｃａｐｉｅＬ，ＡｒａｎｇｏＪＣ，ＡｎｔｈｏｎｙＤＣ，ＫｏｏＥＨ，ＧｏａｔｅＡＭ，ＳｅｌｋｏｅＤＪ，ＡｒａｎｇｏＪＣ（１９９６）ＴｈｅＥ２８０Ａｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ１ＡｌｚｈｅｉｍｅｒｍｕｔａｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｅｓｉｎｃｒｅａｓｅｄＡｂｅｔａ４２ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎａｎｄｓｅｖｅｒｅｃｅｒｅｂｅｌｌａｒｐａｔｈｏｌｏｇｙ．ＮａｔｕｒｅＭｅｄｉｃｉｎｅ．２（１０）：１１４６−１１５０ＣｉｔｒｏｎＭ，ＷｅｓｔａｗａｙＤ，ＸｉａＷ，ＣａｒｌｓｏｎＧ，ＤｉｅｈｌＴ，ＬｅｖｅｓｑｕｅＧ，Ｊｏｈｎｓｏｎ−ＷｏｏｄＫ，ＬｅｅＭ，ＳｅｕｂｅｒｔＰ，ＤａｖｉｓＡ，ＫｈｏｌｏｄｅｎｋｏＤ，ＭｏｔｔｅｒＲ，ＳｈｅｒｒｉｎｇｔｏｎＲ，ＰｅｒｒｙＢ，ＹａｏＨ，ＳｔｒｏｍｅＲ，ＬｉｅｂｅｒｂｕｒｇＩ，ＲｏｍｍｅｎｓＪ，ＫｉｍＳ，ＳｃｈｅｎｋＤ，ＦｒａｓｅｒＰ，ＳｔＧｅｏｒｇｅＨｙｓｌｏｐＰ，ＳｅｌｋｏｅＤＪ（１９９７）ＭｕｔａｎｔｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｓｏｆＡｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓｄｉｓｅａｓｅｉｎｃｒｅａｓｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆ４２−ｒｅｓｉｄｕｅａｍｙｌｏｉｄｂｅｔａ−ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｂｏｔｈｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄｃｅｌｌｓａｎｄｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｉｃｅ．ＮａｔｕｒｅＭｅｄｉｃｉｎｅ．３（１）：６７−７２ＬｌｅｏＡ（２００８）Ａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｏｎｓｕｂｓｔｒａｔｅｓｏｔｈｅｒｔｈａｎＡＰＰ．ＣｕｒｒｅｎｔＴｏｐｉｃｓｉｎＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ．８（１）：９−１６ＳｈｅｎＪ，ＢｒｏｎｓｏｎＲＴ，ＣｈｅｎＤＦ，ＸｉａＷ，ＳｅｌｋｏｅＤＪ，ＴｏｎｅｇａｗａＳ（１９９７）ＳｋｅｌｅｔａｌａｎｄＣＮＳｄｅｆｅｃｔｓｉｎＰｒｅｓｅｎｉｌｉｎ−１−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔｍｉｃｅ．Ｃｅｌｌ．８９（４）：６２９−６３９ＷｏｎｇＰＣ，ＺｈｅｎｇＨ，ＣｈｅｎＨ，ＢｅｃｈｅｒＭＷ，ＳｉｒｉｎａｔｈｓｉｎｇｈｊｉＤＪ，ＴｒｕｍｂａｕｅｒＭＥ，ＣｈｅｎＨＹ，ＰｒｉｃｅＤＬ，ＶａｎｄｅｒＰｌｏｅｇＬＨ，ＳｉｓｏｄｉａＳＳ（１９９７）Ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ１ｉｓｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒＮｏｔｃｈ１ａｎｄＤＩＩ１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｔｈｅｐａｒａｘｉａｌｍｅｓｏｄｅｒｍ．Ｎａｔｕｒｅ．３８７（６６３０）：２８８−２９２Ａｒｔａｖａｎｉｓ−ＴｓａｋｏｎａｓＳ，ＲａｎｄＭＤ，ＬａｋｅＲＪ（１９９９）Ｎｏｔｃｈｓｉｇｎａｌｉｎｇ：ｃｅｌｌｆａｔｅｃｏｎｔｒｏｌａｎｄｓｉｇｎａｌｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎｉｎｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．Ｓｃｉｅｎｃｅ．２８４（５４１５）：７７０−７７６ＳａｘｅｎａＭＴ，ＳｃｈｒｏｅｔｅｒＥＨ，ＭｕｍｍＪＳ，ＫｏｐａｎＲ（２００１）Ｍｕｒｉｎｅｎｏｔｃｈｈｏｍｏｌｏｇｓ（Ｎ１−４）ｕｎｄｅｒｇｏｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ．２７６（４３）：４０２６８−４０２７３ＳｃｈｒｏｅｔｅｒＥＨ，ＫｉｓｓｌｉｎｇｅｒＪＡ，ＫｏｐａｎＲ（１９９８）Ｎｏｔｃｈ−１ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇｒｅｑｕｉｒｅｓｌｉｇａｎｄ−ｉｎｄｕｃｅｄｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｒｅｌｅａｓｅｏｆｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｄｏｍａｉｎ．Ｎａｔｕｒｅ．３９３（６６８３）：３８２−３８６ＳｅａｒｆｏｓｓＧＨ，ＪｏｒｄａｎＷＨ，ＣａｌｌｉｇａｒｏＤＯ，ＧａｌｂｒｅａｔｈＥＪ，ＳｃｈｉｒｔｚｉｎｇｅｒＬＭ，ＢｅｒｒｉｄｇｅＢＲ，ＧａｏＨ，ＨｉｇｇｉｎｓＭＡ，ＭａｙＰＣ，ＲｙａｎＴＰ（２００３）Ａｄｉｐｓｉｎ，ａｂｉｏｍａｒｋｅｒｏｆｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｔｏｘｉｃｉｔｙｍｅｄｉａｔｅｄｂｙａｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ．２７８（４６）：４６１０７−４６１１６ＷｏｎｇＧＴ，ＭａｎｆｒａＤ，ＰｏｕｌｅｔＦＭ，ＺｈａｎｇＱ，ＪｏｓｉｅｎＨ，ＢａｒａＴ，ＥｎｇｓｔｒｏｍＬ，Ｐｉｎｚｏｎ−ＯｒｔｉｚＭ，ＦｉｎｅＪＳ，ＬｅｅＨＪ，ＺｈａｎｇＬ，ＨｉｇｇｉｎｓＧＡ，ＰａｒｋｅｒＥＭ（２００４）Ｃｈｒｏｎｉｃｔｒｅａｔｍｅｎｔｗｉｔｈｔｈｅｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒＬＹ−４１１，５７５ｉｎｈｉｂｉｔｓｂｅｔａ−ａｍｙｌｏｉｄｐｅｐｔｉｄｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄａｌｔｅｒｓｌｙｍｐｈｏｐｏｉｅｓｉｓａｎｄｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｃｅｌｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ．２７９（１３）：１２８７６−１２８８２ＭｉｌａｎｏＪ，ＭｃＫａｙＪ，ＤａｇｅｎａｉｓＣ，Ｆｏｓｔｅｒ−ＢｒｏｗｎＬ，ＰｏｇｎａｎＦ，ＧａｄｉｅｎｔＲ，ＪａｃｏｂｓＲＴ，ＺａｃｃｏＡ，ＧｒｅｅｎｂｅｒｇＢ，ＣｉａｃｃｉｏＰＪ（２００４）Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｏｆｎｏｔｃｈｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｂｙｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｃａｕｓｅｓｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｇｏｂｌｅｔｃｅｌｌｍｅｔａｐｌａｓｉａａｎｄｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｇｅｎｅｓｋｎｏｗｎｔｏｓｐｅｃｉｆｙｇｕｔｓｅｃｒｅｔｏｒｙｌｉｎｅａｇｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．ＴｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ．８２（１）：３４１−３５８ｖａｎＥｓＪＨ，ｖａｎＧｉｊｎＭＥ，ＲｉｃｃｉｏＯ，ｖａｎｄｅｎＢｏｒｎＭ，ＶｏｏｉｊｓＭ，ＢｅｇｔｈｅｌＨ，ＣｏｚｉｊｎｓｅｎＭ，ＲｏｂｉｎｅＳ，ＷｉｎｔｏｎＤＪ，ＲａｄｔｋｅＦ，ＣｌｅｖｅｒｓＨ（２００５）Ｎｏｔｃｈ／ｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｔｕｒｎｓｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｃｅｌｌｓｉｎｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｃｒｙｐｔｓａｎｄａｄｅｎｏｍａｓｉｎｔｏｇｏｂｌｅｔｃｅｌｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ．４３５（７０４４）：９５９−９６３ＨａｄｌａｎｄＢＫ，ＭａｎｌｅｙＮＲ，ＳｕＤ，ＬｏｎｇｍｏｒｅＧＤ，ＭｏｏｒｅＣＬ，ＷｏｌｆｅＭＳ，ＳｃｈｒｏｅｔｅｒＥＨ，ＫｏｐａｎＲ（２００１）Ｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｒｅｐｒｅｓｓｔｈｙｍｏｃｙｔｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ．９８（１３）：７４８７−７４９１ＤｏｅｒｆｌｅｒＰ，ＳｈｅａｒｍａｎＭＳ，ＰｅｒｌｍｕｔｔｅｒＲＭ（２００１）Ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｍｏｄｕｌａｔｅｓｔｈｙｍｏｃｙｔｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ．９８（１６）：９３１２−９３１７

本発明はノッチシグナル伝達経路を保持しながら推定γセクレターゼによるＡＰＰのプロセシングを阻害し、従って、ＡＤの治療又は予防に有用である新規類のシクロブチルスルホン誘導体を提供する。

本発明はノッチシグナル伝達経路を保持しながら推定γセクレターゼによるＡＰＰのプロセシングを阻害し、従って、ノッチ阻害による胃腸障害を併発せずにアルツハイマー病の治療又は予防に有用な新規類のシクロブチルスルホン誘導体を包含する。医薬組成物と使用方法も包含する。

γセクレターゼはほぼ膜の中間（γ／Ｓ４切断）と膜のサイトゾル側（ε／Ｓ３切断）の主に２カ所でＡＰＰとノッチを切断する。ε／Ｓ３切断は膜から基質の細胞内ドメイン（ＩＣＤ）である夫々ＡＩＣＤ及びＮＩＣＤを遊離するので、重要なプロセシングイベントである。この段階はＩＣＤ核転座とその後の転写モジュレーターとしての機能の前提条件である。他方、γ／Ｓ４切断は夫々ＡＰＰとノッチからＡβペプチドとＡβ様ペプチド（Ｎβ）の遊離をもたらす。後者の切断はＡＤの疾患原因物質であると考えられるＡβペプチドのＣ末端を生じるので、特に注目されている。他のγセクレターゼ基質の初期切断に与える影響を試験するために本願に記載するトランス活性化アッセイで試験したＭＲＫ−５６０と実施例２の結果を示す。ＵＡＳプロモーターに誘導されるルシフェラーゼ及びβ−ガラクトシダーゼと共にキメラ基質をＨＥＫ細胞に一過的に同時トランスフェクトした後、各化合物１μＭで４８時間処理した。ＭＲＫ−５６０は試験した全基質のＩＣＤ遊離を阻害したが、実施例２はＩＣＤ遊離とその後のＩＣＤ−ＧＶＰ構築物の転座を維持し、レポーター活性化が可能であった。各基質、ノッチ△Ｅ、Ｅ−カドヘリン、ＳＣＮ２ｂ及びＣＤ４３を安定的に過剰発現するＨＥＫ２９３細胞をＴＰＡと共に滴定濃度のＭＲＫ−５６０又は実施例２で処理し、シェディングを誘導した。細胞溶解液の免疫ブロット分析の結果、ＭＲＫ−５６０は従来のγセクレターゼ阻害剤であるＤＡＰＴと同様に、ＮＩＣＤ生成を阻害し、γセクレターゼの直接基質であるＣＴＦの蓄積を生じることが判明した。これに対して、実施例２はＮＩＣＤ生成が可能であり、ＣＴＦ蓄積は全く認められないか又はＭＲＫ−５６０よりも少なかった。本願に記載する化合物結合アッセイで試験したＭＲＫ−５６０と実施例２の結果を示す。各化合物の濃度を増加しながら、トリチウム化ＧＳＩトレーサーＬ−４５８（遷移状態，赤）又はＬ−８８１（非遷移状態，青）を半精製γセクレターゼ複合体と共にインキュベートした。Ａ−ＭＲＫ−５６０は夫々Ｌ−８８１及びＬ−４５８サイトの完全及び部分的置換を示した。Ｂ−実施例２はＬ−８８１を完全に置換することができたが、Ｌ−４５８はできなかった。以上の結果から、実施例２等のノッチスペアリング化合物はＭＲＫ−５６０等の従来の阻害剤に比較して結合部位が移動していることが明らかである。このため、全γ切断部位を潜在的に阻害しながらε／Ｓ３（ＡＩＣＤ／ＮＩＣＤ遊離）を保持するように酵素切断を制御解除する。本願に記載する化合物結合アッセイで試験したＭＲＫ−５６０と実施例２の結果を示す。各化合物の濃度を増加しながら、トリチウム化ＧＳＩトレーサーＬ−４５８（遷移状態，赤）又はＬ−８８１（非遷移状態，青）を半精製γセクレターゼ複合体と共にインキュベートした。Ａ−ＭＲＫ−５６０は夫々Ｌ−８８１及びＬ−４５８サイトの完全及び部分的置換を示した。Ｂ−実施例２はＬ−８８１を完全に置換することができたが、Ｌ−４５８はできなかった。以上の結果から、実施例２等のノッチスペアリング化合物はＭＲＫ−５６０等の従来の阻害剤に比較して結合部位が移動していることが明らかである。このため、全γ切断部位を潜在的に阻害しながらε／Ｓ３（ＡＩＣＤ／ＮＩＣＤ遊離）を保持するように酵素切断を制御解除する。

本発明は式Ｉ：

の属の化合物又はその医薬的に許容可能な塩を包含し、
式中、Ｘ^１はＦ及びＣＮから構成される群から選択され；
Ｘ^２はＦ、Ｃｌ及びＣＮから構成される群から選択され；
Ｘ^３はＦ、Ｂｒ、Ｃｌ、ＣＮ、ＣＦ_３、ＯＣＦ_３、Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ_３及びＳ−ＣＨ_３から構成される群から選択され；
Ｘ^４はＨ、Ｆ及びＣｌから構成される群から選択され；
Ｒ^１は
（ａ）Ｈ、
（ｂ）ＣＨ_３、
（ｃ）−（ＣＨ_２）_ｎ−ＯＲ^３、
（ｄ）−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ^４、及び
（ｅ）−ＳＯ_２−ＣＦ_３
から構成される群から選択され；
式Ｉの化合物がシス配置であるとき、Ｒ^２はＨ又はＣＨ_３であり、それ以外の場合にはＲ^２はＨであり；
Ｒ^３は１個の酸素ヘテロ原子をもつ５又は６員非芳香族複素環であり；
Ｒ^４はＨ又はＣＨ_３であり；
ｎは１〜４である。

この属の範囲内で本発明は式Ｉａ：

の第１の亜属の化合物又はその医薬的に許容可能な塩を包含する。

第１の亜属の範囲内で本発明は、
Ｘ^１がＦであり、
Ｘ^４がＨである
式Ｉａの第１の分類の化合物を包含する。

第１の分類の範囲内で本発明は、
Ｘ^２がＦであり、
Ｘ^３がＣｌである
式Ｉａの亜分類の化合物を包含する。

この亜分類の範囲内で本発明は、Ｒ^２がＨである式Ｉａの群の化合物を包含する。

更にこの群の範囲内で本発明は、Ｒ^１が−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ^４である式Ｉａの第２の亜群の化合物を包含する。

この属の範囲内で本発明は式Ｉｂ：

の第２の亜属の化合物又はその医薬的に許容可能な塩を包含する。

第２の亜属の範囲内で本発明は、
Ｘ^１及びＸ^２がＦであり；
Ｘ^３がＣｌであり；
Ｘ^４がＨである
式Ｉｂの第１の分類の化合物を包含する。

本発明は更に下記実施例のいずれかを包含する。

本発明は更に式Ｉの化合物又はその医薬的に許容可能な塩と、医薬的に許容可能なキャリヤーを含有する医薬組成物を包含する。

本発明は更にβアミロイドの沈着を伴う病態に罹患している対象又は前記病態に罹患し易い対象の治療方法として、有効量の式Ｉの化合物又はその医薬的に許容可能な塩を前記対象に投与する段階を含む方法を包含する。

本発明は更にアルツハイマー病の治療又は予防用医薬の製造における式Ｉの化合物又はその医薬的に許容可能な塩の使用を包含する。

式Ｉ又はその置換基に変項が２回以上出現する場合には、特に指定しない限り、前記変項の個々の出現は相互に独立している。

医薬用として、式Ｉの化合物は医薬的に許容可能な塩の形態でもよい。しかし、他の塩が式Ｉの化合物又はその医薬的に許容可能な塩の製造に有用な場合もある。本発明の化合物の適切な医薬的に許容可能な塩としては、例えば本発明の化合物の溶液を塩酸、硫酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、フマル酸、マレイン酸、琥珀酸、酢酸、安息香酸、蓚酸、クエン酸、酒石酸、炭酸又はリン酸等の医薬的に許容可能な酸の溶液と混合することにより形成することができる酸付加塩が挙げられる。あるいは、本発明の化合物が酸性部分をもつ場合には、前記酸性部分を適切な塩基で中和することにより医薬的に許容可能な塩を形成することができる。こうして形成される医薬的に許容可能な塩の例としては、ナトリウム塩やカリウム塩等のアルカリ金属塩；カルシウム塩やマグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩；及びアミン塩（ピリジニウム塩を含む）や第四級アンモニウム塩等の適切な有機塩基と形成される塩が挙げられる。

なお、本発明は式Ｉの各化合物について、ホモキラル化合物又は任意割合のエナンチオマー混合物としての両者のエナンチオマー形態を包含する。本発明の１態様において、式Ｉの化合物は式Ｉａもしくは式Ｉｂのホモキラル化合物、又はその医薬的に許容可能な塩である。本発明の化合物が２個以上の不斉中心をもつ場合には、更にジアステレオ異性体として存在することもできる。当然のことながら、このような全異性体と任意割合のその混合物が本発明の範囲に含まれる。

同様に当然のことながら、１つの反応から２種類以上の異性体が得られる場合には、得られた異性体の混合物を従来手段により分離することができる。本発明の化合物の製造方法により立体異性体の混合物が得られる場合には、分取クロマトグラフィー等の従来技術によりこれらの異性体を分離することができる。新規化合物をラセミ体として製造することもできるし、エナンチオ特異的合成又は分割により個々のエナンチオマーを製造することもできる。新規化合物を例えば分取ＨＰＬＣ等の標準技術によりその成分エナンチオマーに分割してもよいし、（−）−ジ−ｐ−トルオイル−ｄ−酒石酸及び／又は（＋）−ジ−ｐ−トルオイル−１−酒石酸等の光学活性酸との塩形成によるジアステレオマー対の形成後に分別結晶と遊離塩基の再生を実施してもよい。更に、ジアステレオマーエステル又はアミドの形成後にクロマトグラフィー分離とキラル助剤の除去により新規化合物を分割してもよい。あるいは、該当化合物のラセミ合成前駆体にこのような技術を実施してもよい。

本発明の化合物はγセクレターゼの阻害剤としての活性をもつ。

本発明は更に本発明の１種以上の化合物と医薬的に許容可能なキャリヤーを含有する医薬組成物も提供する。これらの組成物は経口、非経口、鼻孔内、舌下もしくは直腸投与用、又は吸入もしくは吹送投与用として、錠剤、ピル、カプセル剤、散剤、顆粒剤、滅菌非経口溶液剤もしくは懸濁液剤、定量式エアゾールもしくは液体スプレー、滴剤、アンプル剤、経皮パッチ、オートインジェクター装置又は坐剤等の単位剤形が好ましい。一般に主活性成分を医薬キャリヤー（例えばコーンスターチ、ラクトース、スクロース、ソルビトール、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム及びリン酸二カルシウム等の従来の錠剤化成分、ガム類、分散剤、懸濁剤、又はモノオレイン酸ソルビタンやポリエチレングリコール等の界面活性剤）及び他の医薬希釈剤（例えば水）と混合し、本発明の化合物又はその医薬的に許容可能な塩を含有する均質な前製剤組成物を形成する。これらの前製剤組成物について均質と言う場合には、組成物を錠剤、ピル及びカプセル剤等の均等に有効な単位剤形に容易に細分できるように活性成分が組成物全体に均等に分散されていることを意味する。その後、この前製剤組成物を細分し、本発明の活性成分０．１〜約５００ｍｇを含有する上記型の単位剤形とする。典型的な単位剤形は活性成分１〜１００ｍｇ、例えば１、２、５、１０、２５、５０又は１００ｍｇを含有する。長期作用の利点を付与する剤形を提供するように、新規組成物の錠剤又はピルにコーティング又は他の方法で加工してもよい。例えば、錠剤又はピルを内側製剤成分と外側製剤成分から構成し、外側成分が内側成分のエンベロープを構成するようにしてもよい。胃で崩壊しないように機能すると共に内側成分を無傷のまま十二指腸に導入又は放出遅延させる腸溶層により２成分を分離することができる。このような腸溶層又はコーティングには各種材料を使用することができ、このような材料としては、多数のポリマー酸や、ポリマー酸とシェラック、セチルアルコール及び酢酸セルロース等の材料の混合物が挙げられる。

本発明の新規組成物を経口又は注射投与用に配合することができる液体形態としては、水溶液、液体又はゲル充填カプセル剤、適切なフレーバー入りシロップ、水性又は油性懸濁液、及び綿実油、胡麻油又は椰子油等の食用油を添加したフレーバー入りエマルション、並びにエリキシル剤及び同様の医薬ビヒクルが挙げられる。水性懸濁液に適した分散剤又は懸濁剤としては、トラガカントガム、アラビアガム、アルギン酸塩、デキストラン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（ビニルピロリドン）又はゼラチン等の合成及び天然ガムが挙げられる。

本発明は更に人体の治療方法で使用するための本発明の化合物又はその医薬的に許容可能な塩を提供する。βアミロイドの沈着を伴う病態の治療が好ましい。病態としてはアルツハイマー病等のβアミロイドの沈着を伴う神経疾患が好ましい。

本発明は更にアルツハイマー病の治療又は予防用医薬の製造における本発明の化合物又はその医薬的に許容可能な塩の使用も提供する。

アルツハイマー病に罹患している対象又は罹患し易い対象の治療方法として、有効量の本発明の化合物又はその医薬的に許容可能な塩を前記対象に投与する段階を含む方法も開示する。

アルツハイマー病を治療又は予防するために、適切な用量レベルは約０．０１〜２５０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは約０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日、より好ましくは約０．０５〜５０ｍｇ／ｋｇ体重／日であり、最も好ましい化合物では、約０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重／日である。１日１〜４回のレジメンで化合物を投与することができる。しかし、場合によってはこれらの範囲外の用量を使用してもよい。

以下、実施例により本発明を例証する。合成スキームで使用する出発材料及び試薬が市販されていない場合には、従来手段により製造することができる。本発明は以下の実施例から選択される化合物も包含する。

合成シーケンスのいずれかの間に、該当分子のいずれかの感受性又は反応性基を保護することが必要及び／又は望ましい場合がある。これはＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｅｄ．Ｊ．Ｆ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ，ＰｌｅｎｕｍＰｒｅｓｓ，１９７３；及びＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ＆Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，１９９１に記載されているもの等の従来の保護基により実施することができる。保護基は適切な後続段階で当分野で公知の方法を使用して除去することができる。

（実施例）
中間体Ａ

２−［２−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−２−（２，５−ジフルオロフェニル）エチル］オキシラン
ＷＯ０２／０８１４３５（中間体１）に記載されているように４−クロロチオフェノールと臭化２，５−ジフルオロベンジルから２段階で４−クロロフェニル−２，５−ジフルオロベンジルスルホンを製造した。

ＴＨＦ（９９ｍｌ）中の４−クロロフェニル−２，５−ジフルオロベンジルスルホン（１２ｇ，３９．６ｍｍｏｌ）を^ｎＢｕＬｉ（１９ｍｌ，ヘキサン中２．５Ｍ，４７．６ｍｍｏｌ）で０℃にて１０分間処理後、エピクロロヒドリン（３．７３ｍｌ，４７．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温まで１４時間かけてゆっくりと昇温し、水（１００ｍｌ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３００ｍｌ）で希釈した。有機相を分離し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発乾涸し、油状物を得た。ヘキサン中１０−４５％酢酸エチルを溶離液としてこの物質をシリカクロマトグラフィーに付し、目的生成物９．８ｇをオフホワイト固体として得た。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）２種類のジアステレオマー（〜１／１）δ７．５２（ｍ，２Ｈ／２Ｈ），７．３８（ｍ，２Ｈ／２Ｈ），７．３０−７．２２（ｍ，１Ｈ／１Ｈ），６．９９（ｍ，１Ｈ／１Ｈ），６．８６−６．８０（ｍ，１Ｈ／１Ｈ），４．７６−４．７０（ｍ，１Ｈ／１Ｈ），３．０３−２．４８（ｍ，４Ｈ／４Ｈ），２．３７（ｍ，１Ｈ），２．２０（ｍ，１Ｈ）。ＭＳ計算値３５９．０（ＭＨ^＋），実験値３５８．９（ＭＨ^＋）。

中間体Ｂ

シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタノール
ＴＨＦ（２．７ｍｌ）中の２−［２−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−２−（２，５−ジフルオロフェニル）エチル］オキシラン（１００ｍｇ，０．２７９ｍｍｏｌ）にＭｅＭｇＢｒ（２７９μＬ，エーテル中３Ｍ，０．８３６ｍｍｏｌ）を−７８℃で加えた。反応混合物を室温まで１時間かけて昇温後、飽和ＮＨ_４Ｃｌ（３ｍｌ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（１０ｍｌ）で希釈した。有機相をブライン（１０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発乾涸し、目的生成物を得た（１００ｍｇ）、^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）δ７．６６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．９９（ｍ，１Ｈ），６．８２（ｍ，１Ｈ），６．７４（ｍ，１Ｈ），４．２８（ｍ，１Ｈ），３．４７（ｄ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），３．１３（ｍ，４Ｈ）。ＭＳ計算値４２２．０（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ），実験値４２１．９（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ）。

中間体Ｃ

トランス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタノール
ＴＨＦ（１００ｍｌ）中のＰＰｈ_３（８．１９ｇ，３１．２ｍｍｏｌ）にＤＩＡＤ（６．３１ｇ，３１．２ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を室温で０．５時間撹拌した。混合物を−５０℃まで冷却し、ＴＨＦ（１０ｍｌ）中のシス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタノール（８ｇ，２２．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２０分間撹拌後、固体４−ニトロ安息香酸（５．２２ｇ，３１．２ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温まで昇温し、室温で２０時間撹拌した。次に反応混合物を０℃まで冷却し、ＮａＯＭｅ（１３４ｍｌ，ＭｅＯＨ中０．５Ｍ，６６．９ｍｍｏｌ）を加えた。４０分後に反応混合物を飽和ＮＨ_４Ｃｌ（１００ｍｌ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３００ｍｌ）で希釈した。有機相を分離し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発乾涸し、油状物を得た。ヘキサン中エーテルを溶離液としてこの物質をシリカクロマトグラフィーに付し、シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタノール（出発材料）〜１５％を含有する白色固体として標記生成物８ｇを得た。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）主生成物，δ７．３５（ｍ，４Ｈ），６．９６（ｍ，１Ｈ），６．８０−６．７２（ｍ，２Ｈ），４．８４（ｍ，１Ｈ），３．４９（ｍ，２Ｈ），２．５９（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ計算値４２２．０（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ），実験値４２１．９（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ）。

中間体Ｄ

トランス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチルトリフルオロメタンスルホナート
ＤＣＭ（２７．９ｍｌ）中のトランス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタノール（２ｇ，５ｍｍｏｌ）にトリフルオロメタンスルホン酸無水物（１．１３ｍｌ，６．６９ｍｍｏｌ）とピリジン（０．９０２ｍｌ，１１．１５ｍｍｏｌ）を０℃にて加えた。反応混合物を３０分間撹拌し、飽和ＮＨ_４Ｃｌ（３０ｍｌ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）で希釈した。有機相を分離し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発乾涸し、油状物を得た。ヘキサン中０−２５％酢酸エチルを溶離液としてこの物質をシリカクロマトグラフィーに付し、目的生成物２．７ｇを白色固体として得た。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３６（ｍ，４Ｈ），７．０２（ｍ，１Ｈ），６．７９（ｍ，２Ｈ），５．７２（ｍ，１Ｈ），３．６６（ｂｒｏａｄｓ，２Ｈ），３．０２（ｄｄ，Ｊ＝１４．４，６．６Ｈｚ，２Ｈ）。ＭＳ計算値５５４．０（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ），実験値５５３．８（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ）。

中間体Ｅ

シス−３−アジド−１−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル４−クロロフェニルスルホン
トランス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチルトリフルオロメタンスルホナート（３．９ｇ，７．９５ｍｍｏｌ）とナトリウムアジド（５．１７ｇ，７９ｍｍｏｌ）をエタノール（３９．７ｍｌ）と水（３９．７ｍｌ）に加えた混合物を８５℃に２時間加熱した。混合物を室温まで冷却し、水（１００ｍｌ）とＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）で希釈した。有機相を分離し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発乾涸し、油状物を得た。ヘキサン中０−３０％酢酸エチルを溶離液としてこの物質をシリカクロマトグラフィーに付し、目的生成物２．３ｇを白色固体として得た。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３５（ｍ，４Ｈ），７．０２（ｍ，１Ｈ），６．９１（ｍ，１Ｈ），６．８０（ｍ，１Ｈ），３．８１（ｍ，１Ｈ），３．３０（ｍ，２Ｈ），３．０２（ｍ，２Ｈ）。

中間体Ｆ

シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタンアミン
シス−３−アジド−１−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル４−クロロフェニルスルホン（２．０７ｇ，５．３９ｍｍｏｌ）とパラジウム（０．８６１ｇ，炭素担持１０％，０．８０９ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（２７ｍｌ）中でＨ_２バルーン下に４時間撹拌した。粗製混合物をシリカゲルパックで濾過し、５：１ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１００ｍｌ）で洗浄してパラジウム残渣を除去した。溶媒を除去して生成物を得、それ以上精製せずに次の変換でそのまま使用した。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３４（ｍ，４Ｈ），６．９７（ｍ，１Ｈ），６．８４（ｍ，１Ｈ），６．７７（ｍ，１Ｈ），３．４５（ｍ，１Ｈ），３．０５−２．９４（ｍ，４Ｈ）。ＭＳ計算値３５８．０（ＭＨ^＋），実験値３５８．０（ＭＨ^＋）。

方法（ｂ）
シス−３−アジド−１−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル４−クロロフェニルスルホン（９．５ｇ，２４．７５ｍｍｏｌ）のエタノール／ＴＨＦ溶液に室温で撹拌下に亜鉛（３．２４ｇ，４９．５ｍｍｏｌ）を加えた後、ギ酸アンモニウム（３．１２ｇ，４９．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。混合物をセライトで濾過後、溶媒を除去した。得られた残渣に飽和ＮａＨＣＯ_３溶液１００ｍｌを加え、生成物をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍｌ）で抽出した。有機相を合わせてブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、セライトで濾過した。濾液を濃縮し、目的生成物を得た。

中間体Ｇ

シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチルトリフルオロメタンスルホナート
シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタノールを使用した以外はトランス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチルトリフルオロメタンスルホナートと同様に製造した。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３５（ｍ，４Ｈ），７．０４（ｍ，１Ｈ），６．８８（ｍ，１Ｈ），６．８１（ｍ，１Ｈ），５．０８（ｍ，１Ｈ），３．６０（ｍ，２Ｈ），３．２３（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ計算値５５４．０（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ），実験値５５３．８（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ）。

中間体Ｈ

トランス−３−アジド−１−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル４−クロロフェニルスルホン
シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチルトリフルオロメタンスルホナートを使用した以外はシス−３−アジド−１−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル４−クロロフェニルスルホンと同様に製造した。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３５（ｍ，４Ｈ），６．９８（ｍ，１Ｈ），６．７６（ｍ，２Ｈ），４．５６（ｍ，１Ｈ），３．４９（ｍ，２Ｈ），２．６６（ｍ，２Ｈ）。

中間体Ｉ

トランス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタンアミン
トランス−３−アジド−１−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル４−クロロフェニルスルホンを使用した以外はシス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタンアミンと同様に製造した。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤ_３ＯＤ）δ７．４８−７．４１（ｍ，４Ｈ），７．０７（ｍ，１Ｈ），６．８８（ｍ，１Ｈ），６．７９（ｍ，１Ｈ），３．８８（ｍ，１Ｈ），３．４１（ｍ，２Ｈ），２．５０（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ計算値３５８．０（ＭＨ^＋），実験値３５８．０（ＭＨ^＋）。

中間体Ｊ

トランス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタンカルボニトリル
シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチルトリフルオロメタンスルホナート（４ｇ，８．１５ｍｍｏｌ）とシアン化テトラブチルアンモニウム（５．４７ｇ，２０．３７ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（５４ｍｌ）中で８０℃に４５分間加熱した。得られた混合物を室温まで冷却し、水（２００ｍｌ）とＥｔＯＡｃ（２５０ｍｌ）で希釈した。有機相を水、ブラインで洗浄し、分離し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発乾涸し、油状物を得た。ヘキサン中０−５０％酢酸エチルを溶離液としてこの物質をシリカクロマトグラフィーに付し、目的生成物（２．９ｇ）をオフホワイト固体として得た。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３８−７．３３（ｍ，４Ｈ），７．０２（ｍ，１Ｈ），６．８０−６．７４（ｍ，２Ｈ），３．７４（ｍ，１Ｈ），３．５１（ｍ，２Ｈ），３．０２（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ計算値４３１．０（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ），実験値４３１．０（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ）。

中間体Ｋ

シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）−１−メチルシクロブタンカルボニトリル
ＴＨＦ（８ｍＬ）中のトランス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタンカルボニトリル（６００ｍｇ，１．６３ｍｍｏｌ）にＬｉＨＭＤＳ（２．４５ｍｌ，ＴＨＦ中１Ｍ，２．４５ｍｍｏｌ）を−７８℃で加えた。１０分後にＭｅＩ（３０６μｌ，４．８９ｍｍｏｌ）を反応混合物に導入した。温度をゆっくりと０℃まで上げながら反応混合物を２時間撹拌した。次に反応混合物を水でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を分離し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発乾涸し、油状物を得た。ヘキサン中０−５０％酢酸エチルを溶離液としてこの物質をシリカクロマトグラフィーに付し、生成物（２６０ｍｇ）を単一ジアステレオマー生成物として得た。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤ_３ＯＤ）δ７．３６（ｓ，４Ｈ），７．０２（ｍ，１Ｈ），６．８５−６．７８（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，２Ｈ），２．７２（ｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，２Ｈ），１．４４（ｓ，３Ｈ）。ＭＳ計算値７８５．１（２Ｍ＋Ｎａ^＋），実験値７８５．０（２Ｍ＋Ｎａ^＋）。

中間体Ｌ

シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）−１−メチルシクロブタンカルボキサミド
ＤＭＳＯ（６．５ｍｌ）中のシス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）−１−メチルシクロブタンカルボニトリル（５００ｍｇ，１．３１ｍｍｏｌ）とＫ_２ＣＯ_３（３６２ｍｇ，２．６２ｍｍｏｌ）にＨ_２Ｏ_２（１．１５ｍｌ，水中３５％，１３．１ｍｍｏｌ）を滴下し、反応混合物を２時間激しく撹拌した。混合物を水（５０ｍｌ）とＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）で希釈した。有機相を水、ブラインで洗浄し、分離し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発乾涸し、シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）−１−メチルシクロブタンカルボキサミド（５００ｍｇ）をオフホワイト固体として得、それ以上精製せずに次の反応で使用した。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３５（ｍ，４Ｈ），７．０２（ｍ，１Ｈ），６．８７−６．７９（ｍ，２Ｈ），６．５４（ｂｒｏａｄｓ，１Ｈ），６．４０（ｂｒｏａｄｓ，１Ｈ），３．６７（ｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，２Ｈ），２．６２（ｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，２Ｈ），１．２８（ｓ，３Ｈ）。ＭＳ計算値４００．０（ＭＨ^＋），実験値４００．０（ＭＨ^＋）。

中間体Ｍ

シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）−１−メチルシクロブタンアミン
シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）−１−メチルシクロブタンカルボキサミド（４００ｍｇ，１ｍｍｏｌ）とＰＩＦＡ（４７３ｍｇ，１．１ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２．５ｍｌ）と水（２．５ｍｌ）に加え、０℃で撹拌し、混合物を２７時間かけて室温までゆっくりと昇温した。次に反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ_３でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を分離し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発乾涸し、油状物を得た。ＤＣＭ中０−４０％ＭｅＯＨを溶離液としてこの物質をシリカクロマトグラフィーに付し、シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）−１−メチルシクロブタンアミン（３８０ｍｇ）を生成物として得た。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤ_３ＯＤ）δ７．４１−７．３６（ｍ，４Ｈ），７．０２（ｍ，１Ｈ），６．８１（ｍ，１Ｈ），６．７４（ｍ，１Ｈ），３．５８（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，２Ｈ），２．８９（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，２Ｈ），１．５８（ｓ，３Ｈ）。ＭＳ計算値３７２．１（ＭＨ^＋），実験値３７２．０（ＭＨ^＋）。

中間体Ｎ

シス−１−アリル−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタンカルボニトリル
トランス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタンカルボニトリルと臭化アリルを使用した以外はシス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）−１−メチルシクロブタンカルボニトリルと同様に製造した。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３６（ｓ，４Ｈ），７．０３（ｍ，１Ｈ），６．８３−６．７８（ｍ，２Ｈ），５．７０（ｍ，１Ｈ），５．１８（ｄｄ，Ｊ＝１０．２，１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．０７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１６．８，１．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７０（ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，２Ｈ），２．７７（ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，２Ｈ），２．３２（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）。ＭＳ計算値８３７．１（２Ｍ＋Ｎａ^＋），実験値８３７．０（２Ｍ＋Ｎａ^＋）。

中間体Ｏ

４−｛［シス−３−アミノ−１−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］スルホニル｝ベンゾニトリル
シアン化亜鉛（０．２９５ｇ，２．５２ｍｍｏｌ）と、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（０．３８４ｇ，０．４１９ｍｍｏｌ）と、亜鉛（０．０３０ｇ，０．４６１ｍｍｏｌ）と、ＤＰＰＦ（０．４６５ｇ，０．８３８ｍｍｏｌ）と、シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタンアミン（１．５ｇ，４．１９ｍｍｏｌ）をＤＭＡに溶解し、２５ｍＬシュレンク管でアルゴン雰囲気下に１３５℃にて１６時間撹拌した。次に水を加え、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液とブラインで洗浄後、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をシリカカラムクロマトグラフィー（０→８％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製し、標記化合物を得た。ＭＳ：計算値３４９（ＭＨ＋），実験値３４９（ＭＨ＋）。

（実施例１）

Ｎ−［トランス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］−１，１，１−トリフルオロメタンスルホンアミド
ＤＣＭ（２７．９ｍｌ）中のシス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタンアミン（１．５ｇ，４．１９ｍｍｏｌ）にトリエチルアミン（１．１６９ｍｌ，８．３８ｍｍｏｌ）とトリフルオロメタンスルホン酸無水物（０．８５０ｍｌ，５．０３ｍｍｏｌ）を０℃で加え、混合物を２時間撹拌した。

混合物を水（５０ｍｌ）とＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）で希釈した。有機相をブラインで洗浄し、分離し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発乾涸し、油状物を得た。ヘキサン中酢酸エチルを溶離液としてこの物質をシリカクロマトグラフィーに付し、目的生成物（白色固体として１．４５ｇ）を得た。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３９（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．０２（ｍ，１Ｈ），６．７７（ｍ，２Ｈ），４．２２（ｍ，１Ｈ），３．２３（ｍ，４Ｈ）。ＭＳ計算値５５３．０（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ），実験値５５３．０（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ）。

（実施例２）

Ｎ−［シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］−１，１，１−トリフルオロメタンスルホンアミド
トランス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタンアミンを使用した以外は実施例１と同様に製造した。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３３（ｍ，４Ｈ），６．９８（ｍ，１Ｈ），６．７４（ｍ，２Ｈ），５．３５（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ，ＮＨ），４．６７（ｍ，１Ｈ），３．５９（ｍ，２Ｈ），２．６８（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ計算値５５３．０（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ），実験値５５２．８（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ）。

同様の手順により以下の化合物を製造した。

（実施例６）

Ｎ−｛シス−３−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］シクロブチル｝−１，１，１−トリフルオロメタンスルホンアミド：ＭＳ計算値５０６（ＭＮａ＋），実験値５２９；^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．４１〜７．４３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．３４〜７．３６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．２８〜７．３３（ｍ，１Ｈ），６．９８〜７．０１（ｍ，１Ｈ），６．７５〜６．８３（ｍ，２Ｈ），４．２０〜４．２９（ｍ，１Ｈ），３．２０〜３．３２（ｍ，４Ｈ）。

（実施例７）

Ｎ−｛シス−３−（２，５−ジフルオロフェニル）−３−［（４−フルオロフェニル）スルホニル］シクロブチル｝−１，１，１−トリフルオロメタンスルホンアミド：^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ７．４５〜７．４９（ｍ，２Ｈ），７．１２〜７．２９（ｍ，２Ｈ），７．０４〜７．１０（ｍ，１Ｈ），６．８０〜６．８５（ｍ，３Ｈ），４．２４〜４．３０（ｍ，１Ｈ），３．２４〜３．３５（ｍ，４Ｈ）。

（実施例８）

Ｎ−｛シス−３−（２，５−ジフルオロフェニル）−３−［（３，４−ジフルオロフェニル）スルホニル］シクロブチル｝−１，１，１−トリフルオロメタンスルホンアミド：ＭＳ計算値５１４（ＭＨ＋），実験値５１４；^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ７．１５〜７．１９（ｍ，３Ｈ），６．９７〜７．０４（ｍ，１Ｈ），６．７２〜６．８０（ｍ，２Ｈ），６．６３〜６．６５（ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，１Ｈ），４．１３〜４．２３（ｍ，１Ｈ），３．１４〜３．２６（ｍ，４Ｈ）。

（実施例９）

Ｎ−［シス−３−［（４−シアノフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］−１，１，１−トリフルオロメタンスルホンアミド
ＭＳ：計算値５０２（ＭＮａ＋），実験値５０２（ＭＮａ＋）。^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３６００ＭＨｚ）７．６７（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，２Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝４．１，２Ｈ），７．０８（ｂｍ，１Ｈ），６．８４（ｍ，１Ｈ），６．６８（ｍ，１Ｈ），６．６０（ｄ，１Ｈ），４．２４（ｂｍ，１Ｈ），３．４−３．２（ｂｍ，４Ｈ）。

中間体Ｐ

４−｛［３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］［（トリフルオロメチル）スルホニル］アミノ｝ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチル
Ｎ−［シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］−１，１，１−トリフルオロメタンスルホンアミド（１９０ｍｇ，０．３８８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１．１ｍＬ）に加え、炭酸カリウム（５９ｍｇ，０．４２７ｍｍｏｌ）と４−ブロモブタン酸ｔｅｒｔ−ブチル（９５ｍｇ，０．４２７ｍｍｏｌ）で処理した。混合物を８０℃まで加熱し、１６時間撹拌した。反応混合物を周囲温度まで冷却し、酢酸エチルで希釈し、１／２飽和ブライン溶液で２回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過後、減圧濃縮した。残渣をＭＰＬＣ（０−３０％ＥｔＯＡｃ：ヘプタン）により精製し、標記化合物を得た。ＭＳ：計算値６５４（ＭＮａ＋），実験値６５４（ＭＮａ＋）。

（実施例１０）

４−｛［シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］［（トリフルオロメチル）スルホニル］アミノ｝ブタン酸
４−｛［３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］［（トリフルオロメチル）スルホニル］アミノ｝ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１４４ｍｇ，０．２２８ｍｍｏｌ）を１：１ＤＣＭ：ＴＦＡ（１．１ｍＬ）に加え、周囲温度で４０分間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮した。ヘプタンを加えてトリチュレーション後に標記化合物を白色固体として単離した。^１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯＤ_６，６００ＭＨｚ）δ１２．２５（ｓ，１Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．２５−７．３１（ｍ，１Ｈ），７．０７−７．１６（ｍ，２Ｈ），４．１８−４．２８（ｍ，１Ｈ），３．５３（ｓｂｒ，２Ｈ），３．３０−３．４２（ｍ，２Ｈ），３．０８（ｓｂｒ，２Ｈ），２．２６−２．３８（ｍ，２Ｈ），１．８０−１．９０（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ：計算値５９８（ＭＮａ＋），実験値５９８（ＭＮａ＋）。

（実施例１１）

Ｎ−［シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］−１，１，１−トリフルオロ−Ｎ−［２−（テトラヒドロ−２−ピラン−２−イルオキシ）エチル］メタンスルホンアミド
Ｎ−［シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］−１，１，１−トリフルオロメタンスルホンアミド（５０ｍｇ，０．１０２ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（０．３ｍＬ）に溶解し、この溶液に撹拌下に炭酸カリウム（４９ｍｇ，０．３５７ｍｍｏｌ）を加えた後、２−（２−ブロモエトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン（５３ｍｇ，０．２５５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を８０℃で１６時間撹拌した。混合物を周囲温度まで冷却し、水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を再び飽和重炭酸塩水溶液で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。抽出層をＭＰＬＣ（０−４５％ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ）により精製し、標記化合物を得た。４０％ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ中Ｒｆ＝０．７１。^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，６００ＭＨｚ）δ７．３１−７．３８（ｍ，４Ｈ），７．００−７．０７（ｍ，２Ｈ），６．８８−６．９３（ｍ，１Ｈ），６．７８−６．８４（ｍ，１Ｈ），４．６５−４．６８（ｍ，１Ｈ），４．０６−４．０８（ｍ，１Ｈ），３．５０−４．００（ｍ，７Ｈ），２．８０−３．１０（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．９０（ｍ，７Ｈ）。ＭＳ：計算値６４０（ＭＮａ＋），実験値６４０（ＭＮａ＋）。

（実施例１２）

｛［シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］［（トリフルオロメチル））スルホニル］アミノ｝酢酸メチル
無水ＴＨＦ（０．８ｍＬ）をＮ−［シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］−１，１，１−トリフルオロメタンスルホンアミド（２００ｍｇ，０．４０８ｍｍｏｌ）に加えた後、反応混合物を０℃まで冷却した。水素化ナトリウム（４９ｍｇ，１．２２５ｍｍｏｌ）を一度に加え、混合物を０℃で１５分間撹拌した。混合物は発泡し、オフホワイト懸濁液の状態で撹拌した。１５分後にブロモ酢酸メチル（１８７ｍｇ，１．２２５ｍｍｏｌ）を加えると、混合物は黄変しながら再び発泡した。混合物を１６時間撹拌後、飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を再び飽和塩化アンモニウム水溶液で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。抽出層をＭＰＬＣ（０−４５％ＥｔＯＡｃ：ヘプタン）により精製し、標記化合物を得た。４０％ＥｔＯＡｃ：ヘプタン中Ｒｆ＝０．６。^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，６００ＭＨｚ）δ７．３６（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），７．０２−７．０８（ｍ，１Ｈ），６．８６−６．９０（ｍ，１Ｈ），６．７８−６．８４（ｍ，１Ｈ），４．３０−４．６０（ｍ，３Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），３．３８−３．３４（ｍ，２Ｈ），３．０４（ｓｂｒ，２Ｈ）。ＭＳ：計算値５８４（ＭＮａ＋），実験値５８４（ＭＮａ＋）。

同様の手順により以下の化合物を製造した。

（実施例１７）

Ｎ−［シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）−１−メチルシクロブチル］−１，１，１−トリフルオロメタンスルホンアミド
シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）−１−メチルシクロブタンアミンを使用した以外は実施例１と同様に製造した。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３３（ｍ，４Ｈ），７．００（ｍ，１Ｈ），６．９０（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），６．８２−６．７５（ｍ，２Ｈ），３．５４（ｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，２Ｈ），２．８７（ｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，２Ｈ），１．４４（ｓ，３Ｈ）。ＭＳ計算値５２６．０（ＭＮａ^＋），実験値５２５．９（ＭＮａ^＋）。

（実施例１８）

Ｎ−（シス−３−（２，５−ジフルオロフェニル）−１−メチル−３−｛［４−（トリフルオロ）フェニル］スルホニル｝シクロブチル）−１，１，１−トリフルオロメタンスルホンアミド
実施例１７と同様の手順を使用して製造した。計算値（２Ｍ＋Ｎａ）＋：１０９７．０，実測値：１０９６．５。

（実施例１９）

Ｎ−［シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］−１，１，１−トリフルオロ−Ｎ−［（トリフルオロメチル）スルホニル］メタンスルホンアミド
実施例１の合成で副生物として製造した。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３８−７．３３（ｍ，４Ｈ），７．０７（ｍ，１Ｈ），６．９５（ｍ，１Ｈ），６．８４（ｍ，１Ｈ），４．４４（ｍ，１Ｈ），３．８２（ｍ，２Ｈ），３．１５（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ計算値６８４．９（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ），実験値６８４．９（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ）。

（実施例２０）

ナトリウム［シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］［（トリフルオロメチル）スルホニル］アザニド
水素化ナトリウムをヘキサンに懸濁し、０℃まで冷却した。ＴＨＦ（１ｍＬ）中のＮ−［シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］−１，１，１−トリフルオロメタンスルホンアミド（２００ｍｇ，０．４０８ｍｍｏｌ）を水素化ナトリウム懸濁液に滴下した。得られた混合物を０℃で１５分間、次いで周囲温度で３０分間撹拌した。この時点で反応混合物を減圧濃縮した。乾燥白色粉末をフラスコから掻き取り、ガラスフリット付き漏斗に入れ、氷冷ペンタン（４５ｍＬ）で洗浄した。次に粉末を高減圧下に１６時間置いた。^１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯＤ_６，６００ＭＨｚ）δ７．５６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２０−７．２６（ｍ，１Ｈ），７．００−７．１２（ｍ，２Ｈ），３．４２−３．５２（ｍ，１Ｈ），２．６６−２．８０（ｍ，４Ｈ）。

（実施例２１）

カリウム［シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］［（トリフルオロメチル）スルホニル］アザニド
Ｎ−［シス−３−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］−１，１，１−トリフルオロメタンスルホンアミド（１．２ｇ，２．５５ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（２５．５ｍＬ）中で０℃にて撹拌後、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．２９ｇ，２．５５ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を０℃で１５分間撹拌後、周囲温度まで昇温し、更に４５分間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮後、得られた白色粉末を１００℃で撹拌下に最少量の３：１ＩＰＡ：トルエン（４００ｍＬ）から再結晶させた。溶解後、混合物を濾紙で濾過し、４℃で２０時間静置した。ガラスフリットで濾過して結晶を採取し、冷ペンタンで３回洗浄した。残留溶媒を減圧除去した。^１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯＤ_６，６００ＭＨｚ）δ７．５６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２０−７．２６（ｍ，１Ｈ），７．００−７．１２（ｍ，２Ｈ），３．４２−３．５２（ｍ，１Ｈ），２．６６−２．８０（ｍ，４Ｈ）。

（実施例２２）

Ｎ−［シス−３−［（４−トリフルオロメトキシフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブチル］−１，１，１−トリフルオロメタンスルホンアミド
シス−３−［（４−トリフルオロメトキシフェニル）スルホニル］−３−（２，５−ジフルオロフェニル）シクロブタンアミンを使用した以外は実施例２と同様に製造した。^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨＺ，ＣＤＣｌ_３）δ７．５６（ｍ，２Ｈ），７．２７（ｍ，２Ｈ）７．０８８（ｍ，１Ｈ），６．７８（ｍ，２Ｈ），６．６８（ｄ，Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ，ＮＨ），４．３０（ｍ，１Ｈ），３．３１（ｍ，２Ｈ），３．１８（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ計算値６０３．４６（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ），実験値６０３．０（ＭＮａ^＋＋ＣＨ_３ＣＮ）。

生物活性
以下、本発明の化合物の生物活性を測定するためのアッセイについて記載する。

ＡＰＰプロセシング（細胞株から分泌されるＡβ検体を定量するアッセイ）：
アミロイドβ蛋白質を発現するＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞（ＳＰ４ＣＴ細胞）から産生されるＡβ４０及びＡβ４２ペプチドの量に与える化合物の影響をＡｌｐｈａＬｉｓａ（登録商標）アッセイにより判定した。ＥＬＩＳＡアッセイと同様に、このＡｌｐｈａＬｉｓａ（登録商標）アッセイでシグナルを発生するには、Ａβ４０又はＡβ４２ペプチドの特異的抗体認識により「ドナー」ビーズと「アクセプター」ビーズを密接に近接させる必要がある。化合物で処理したＳＰ４ＣＴ細胞から培地を別個のマイクロプレート２枚に移した後に、ビオチン化抗アミロイドβモノクローナル抗体（クローン４Ｇ８）と結合するストレプトアビジンを固定化したドナービーズを加えることによりアッセイを実施した。抗Ａβ４０モノクローナル抗体（Ｇ２１０）を直接固定化したアクセプタービーズを一方のマイクロプレートに加え、抗Ａβ４２モノクローナル抗体（１２Ｆ４）アクセプタービーズを他方に加えた。Ａβ４０とＡβ４の量はレーザー光によるドナービーズの励起後に発生した発光シグナルに正比例した。

ノッチプロセシング：（細胞株へのノッチ細胞内ドメイン遊離量を定量するアッセイ）：
ノッチ蛋白質のγセクレターゼ依存的切断の阻害を定量するために「スプリットルシフェラーゼ」アッセイを使用する。このアッセイでは、ルシフェラーゼのＮ末端フラグメントに融合したその細胞外ドメイン（ノッチ△Ｅ）をもたないノッチ蛋白質をＨｅＬａ細胞に発現させた。同一細胞は免疫グロブリンＪκ組換えシグナル配列結合蛋白質（ＲＢＰ）と融合したルシフェラーゼのＣ末端フラグメントも発現した。ノッチ△Ｅがγセクレターゼにより切断されると、ノッチ細胞内ドメイン（ＮＩＣＤ）−Ｎ末端ルシフェラーゼ蛋白質が生成され、核転座してＲＢＰ−Ｃ末端ルシフェラーゼ融合体と結合し、ルシフェラーゼの独立して非機能的な半分ずつを一緒にして機能的ルシフェラーゼ酵素を形成する。これらの細胞におけるルシフェラーゼ活性はγセクレターゼにより切断されるノッチの量に正比例する。溶解細胞へのルシフェリン添加と総発光量測定の標準技術によりルシフェラーゼ活性を測定する。

ＰＸＲアッセイ解説
ＣＹＰ３Ａ４−ＳＥＡＰトランス活性化アッセイ（ＰＣＳＴＡ）はチトクロームＰ４５０ＣＹＰ３Ａ（ヒトＣＹＰ３Ａ４又はラットＣＹＰ３Ａ１）を誘導する可能性について化合物を有効且つ迅速に評価する。レポーター構築物は分泌型アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）遺伝子のすぐ上流に配置されたＣＹＰ３Ａ４遺伝子に由来する調節配列を含む。メチオニンが野生型配列に存在するロイシンに置換する開始アミノ酸となるように、ヒトＰＸＲ核内受容体の５’末端を修飾した。ＨＥＰＧ２細胞にＰＸＲプラスミド（ヒト又はラット）とレポータープラスミドをトランスフェクトする。ＣＹＰ３Ａ４の誘導の読取りはパラニトロフェニルリン酸（ｐＮＰＰ）を基質とするＳＥＡＰ比色アッセイから構成される。各点がＳＥＡＰによるｐＮＰＰからｐＮＰへの変換率に対応するように５点用量応答曲線を２本ずつ作成する。ヒトＰＣＳＴＡでは、リファンピシンを陽性対照として使用し、１００％誘導は１０μＭリファンピシンにより生じる最大誘導に基づく。

ＩＣＤトランス活性化（細胞株へのγセクレターゼ基質群の細胞内ドメイン遊離量を定量するアッセイ）
ホタルルシフェラーゼによるトランス活性化アッセイを使用してγセクレターゼ基質のε／Ｓ３サイト切断の阻害を測定する。このアッセイは細胞内ドメイン（ＩＣＤ）に融合したＧＡＬ４／ＶＰ１６（ＧＶＰ）トランス活性化ドメインを有するキメラ基質であるＡＰＰ−ＧＶＰ、ノッチ△Ｅ−ＧＶＰ、Ｅ−カドヘリン−ＧＶＰ及びＣＤ４４−ＧＶＰを使用する。ＩＣＤが切断され、遊離されると、ＧＶＰドメインはＵＡＳプロモーターの制御下でルシフェラーゼ遺伝子の発現を誘導する。このアッセイでは、ＵＡＳプロモーターに誘導されるルシフェラーゼ及びβ−ガラクトシダーゼ（トランスフェクション対照）と共にキメラ基質をＨＥＫ細胞に一過的に同時トランスフェクトした。γセクレターゼにより切断されると、遊離されるＩＣＤ−ＧＶＰは核転座し、ＵＡＳ−ルシフェラーゼ遺伝子の発現を誘導する。これらの細胞におけるルシフェラーゼ活性はγセクレターゼにより切断されるＩＣＤの量に正比例する。溶解細胞へのルシフェリン添加と総発光量測定の標準技術によりルシフェラーゼ活性を測定する。更に、トランスフェクション効率の差を考慮するために、吸光度によるβ−ガラクトシダーゼ酵素アッセイを実施し、発光量読取を正規化する。

全長γセクレターゼ基質の評価（γセクレターゼ基質群のプロセシングを定量的に評価するアッセイ）
他の基質に対するγセクレターゼ活性に与える化合物の影響を試験するために、Ｃ末端Ｖ５タグを付けた以下のＩ型膜蛋白質：ＣＤ４３、ＣＤ４４、Ｅ−カドヘリン及びＳＣＮ２ｂのうちの１種を過剰発現する４種類のＨＥＫ２９３安定細胞株を構築した。細胞を撒き、滴定化合物とホルボールエステルＴＰＡで一晩処理する。全蛋白質は初期エクトドメインシェディングイベントとそれに続くγセクレターゼによるＣ末端フラグメント（ＣＴＦ）の膜貫通切断を特徴とする調節下の膜蛋白質分解を受けるので、ＴＰＡはγセクレターゼの基質を生成する初期切断イベントを誘導する。Ｖ５タグを付けたＣＴＦのプロセシングをウェスタンブロット分析により追跡することにより、これらの基質に対するγセクレターゼ活性に与える化合物の影響を測定する。ＣＴＦの蓄積はγセクレターゼ活性の阻害を意味する。

インビトロＡＰＰプロセシング（半精製γセクレターゼと共にインキュベートした組換えＡＰＰＣ１００Ｆｌａｇ基質から生成されるＡβ検体を定量するアッセイ）
半精製γセクレターゼにより外来Ｃ１００Ｆｌａｇ基質から生成されるＡβ４０及びＡβ４２ペプチドの量に与える化合物の影響をＭＥＳＯＳｃａｌｅＥＬＩＳＡにより判定した。このＭＥＳＯＳｃａｌｅアッセイでシグナルを発生するには、ストレプトアビジンを固定化した抗アミロイドモノクローナル抗体（クローン４Ｇ８）がビオチンを被覆したプレートと結合する必要がある。その後、Ａβ４０（Ｇ２１０）又はＡβ４２（１２Ｆ４）に特異的な［Ｒｕ（ｂｐｙ）３］２＋標識モノクローナル抗体は電気化学刺激を受けると電気化学発光シグナルを発生する。化合物と、Ｃ１００Ｆｌａｇ基質と、ＨｅＬａ細胞又はマウス、ラットもしくはイヌの脳に由来するＰ２膜をＣＨＡＰＳＯで可溶化したものをインキュベートすることによりアッセイを実施した。次に反応混合物をＡβ４０又はＡβ４２検出用の別個のビオチン化マイクロプレート２枚に移した。

インビトロノッチプロセシング（半精製γセクレターゼと共にインキュベートした組換えノッチ△Ｅ１００Ｆｌａｇ基質からのノッチ細胞内ドメイン生成を定量的に評価するアッセイ）
同様に、基質をＮ１００Ｆｌａｇに代えることにより、Ｃ１００Ｆｌａｇインビトロアッセイと同一方法を使用してノッチプロセシングをモニターすることができる。ポリクローナルビオチン標識抗ＤＹＫＤＤＤＤＫ抗体を捕捉用抗体として使用し、切断されたノッチ１抗体をポリクローナル［Ｒｕ（ｂｐｙ）３］２＋で標識して使用し、ＮＩＣＤを検出した。

化合物結合：（結合したγセクレターゼ阻害剤トレーサーのインビトロ置換を定量するアッセイ）
組換えγセクレターゼを安定的に過剰発現するＨＥＫ２９３（γＮＲＣＦ８）Ｐ２膜をＣＨＡＰＳＯで可溶化したものを使用して全放射性リガンド結合実験を実施する。放射性リガンド結合には、トリチウム化した阻害剤の存在下で可溶化酵素をインキュベートする。過剰の未標識阻害剤を反応に加えることにより非特異的結合を測定し、トリチウム化したリガンドの系列希釈を使用して飽和結合等温線を得る。ポリエチレンイミンを被覆したガラス繊維フィルタープレートに酵素複合体を吸着させ、セルハーベスターで迅速に濾過後に洗浄することにより、結合したリガンドを遊離リガンから分離する。プレートを乾燥後、シンチラントを加え、マイクロプレートシンチレーションカウンターでプレートを読取る。１ｎＭ ^３Ｈ標識化合物として参考例Ｌ−４５８（遷移状態阻害剤）又は４ｎＭ ^３Ｈ標識化合物として参考例Ｌ−８８１（非遷移状態阻害剤）の存在下で各種阻害剤の系列希釈をインキュベートすることにより結合競合アッセイを実施する。各種阻害剤のアンタゴニスト競合性を判定するために、種々の濃度のこれらの化合物の存在下で夫々の^３Ｈトレーサー用量応答曲線を分析する。

参考例Ｌ−４５８：

参考例Ｌ−８８１：

結果
上記ＡＰＰ及びノッチプロセシング細胞機能アッセイで本明細書の実施例を試験した。試験した化合物は下表に示すようにノッチシグナル伝達経路を保持しながらＡＰＰプロセシングのインビトロ阻害を示した。データは少なくとも＞４回の反復の平均に基づく。

ＷＯ０２／０８１４３５Ａ１（公開日２００２年１０月１７日）はγセクレターゼの活性を調節するスルホン誘導体を開示している。ＷＯ２００４／０３１１３９（公開日２００４年４月１５日）はγセクレターゼ阻害剤としてのシクロヘキシルスルホン誘導体を開示している。ＷＯ２００４／０３１１３９の実施例４７は下記構造をもつ。

上記化合物はＭＲＫ−５６０とも呼ばれ、Ｂｅｓｔｅｔａｌ．，ＪＰｈａｒｍａｃｏｌＥｘｐ，Ｔｈｅｒ．，３１７：７８６−７９０，２００６及びＢｅｓｔｅｔａｌ，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，３２０：５５２−５５８，２００７に開示されている。文献はＭＲＫ−５６０におけるＡＰＰのインビトロ阻害とノッチプロセシング経路の間の分離について殆ど又は全く報告していないが、この化合物はＴｇ２５７６マウスでノッチシグナル伝達経路の変化に関連する毒性の不在下でアミロイドプラーク沈着に有益なインビボ効果を示した。

薬剤毒性を予測する共有蛋白質結合アッセイでＭＲＫ−５６０と実施例２を試験した。該当化合物の放射性標識物を肝ミクロソームと共にインキュベートすることにより、薬剤候補が蛋白質と共有結合を生じる可能性を評価する。次にＢｒａｎｄｅｌＨａｒｖｅｓｔｅｒ技術に基づく半自動法を使用して試験化合物と肝蛋白質の共有結合性付加物の形成を測定する（Ｒｅｆ．Ｄａｙｅｔ．ａｌ，ＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌＭｅｈｔｏｄｓ．５２，２７８−８５，２００５参照）。結果を下表に示す。

薬剤間相互作用を予測するプレグナンＸ受容体（ＰＸＲ）と結合及び／又はこれを活性化する能力についてＭＲＫ−５６０と本明細書に開示した実施例を試験した。結果を下表に示す。

他のγセクレターゼ基質の初期切断に与える影響を試験するために、ＭＲＫ−５６０と実施例２を上記トランス活性化アッセイで試験した。ＭＲＫ−５６０は試験した全基質のＩＣＤ遊離を阻害したが、ＩＣＤ遊離とそれに続くＩＣＤ−ＧＶＰ構築物の転座によりレポーター活性化が可能であったことから明らかなように、実施例２は初期ε／Ｓ３切断を維持した。図２参照。

ＭＲＫ−５６０によるε／Ｓ３及びγ切断の完全な阻害の結果、ＳＣＮ２ｂ−、ＥＣＡＤ−及びＣＤ４３−ＣＴＦ蓄積を生じることが多基質細胞アッセイにより確認された。これに対して、実施例２で処理すると、ＣＴＦ蓄積は低下又はゼロになり、ＮＳ−ＧＳＩはγセクレターゼ基質の初期切断を維持すると判断された。図３参照。

ＭＲＫ−５６０と実施例２を上記化合物結合アッセイでも試験した。各化合物の濃度を増加しながら、トリチウム化ＧＳＩトレーサーＬ−４５８（遷移状態，赤）又はＬ−８８１（非遷移状態，青）を半精製γセクレターゼ複合体と共にインキュベートした。ＭＲＫ−５６０は夫々Ｌ−８８１及びＬ−４５８サイトの完全及び部分的置換を示した。実施例２はＬ−８８１を完全に置換することができたが、Ｌ−４５８はできなかった。以上の結果から、実施例２等のノッチスペアリング化合物はＭＲＫ−５６０等の従来の阻害剤に比較して結合部位が移動していることが明らかである。このため、全γ切断部位を潜在的に阻害しながらε／Ｓ３（ＡＩＣＤ／ＮＩＣＤ遊離）を保持するように酵素切断を制御解除する。図４参照。

Claims

式Ｉ

［式中、Ｘ^１はＦ及びＣＮから構成される群から選択され；
Ｘ^２はＦ、Ｃｌ及びＣＮから構成される群から選択され；
Ｘ^３はＦ、Ｂｒ、Ｃｌ、ＣＮ、ＣＦ_３、ＯＣＦ_３、Ｃ（Ｏ）−ＯＣＨ_３及びＳ−ＣＨ_３から構成される群から選択され；
Ｘ^４はＨ、Ｆ及びＣｌから構成される群から選択され；
Ｒ^１は
（ａ）Ｈ、
（ｂ）ＣＨ_３、
（ｃ）−（ＣＨ_２）_ｎ−ＯＲ^３、
（ｄ）−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ^４、及び
（ｅ）−ＳＯ_２−ＣＦ_３
から構成される群から選択され；
式Ｉの化合物がシス配置であるとき、Ｒ^２はＨ又はＣＨ_３であり、それ以外の場合にはＲ^２はＨであり；
Ｒ^３は１個の酸素ヘテロ原子をもつ５又は６員非芳香族複素環であり；
Ｒ^４はＨ又はＣＨ_３であり；
ｎは１〜４である］の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
式Ｉａ：

の請求項１に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
Ｘ^１がＦであり、Ｘ^４がＨである請求項２に記載の化合物。
Ｘ^２がＦであり、Ｘ^３がＣｌである請求項３に記載の化合物。
Ｒ^２がＨである請求項４に記載の化合物。
Ｒ^１が−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ^４である請求項５に記載の化合物。
式Ｉｂ：

の請求項１に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
Ｘ^１及びＸ^２がＦであり；
Ｘ^３がＣｌであり；
Ｘ^４がＨである請求項７に記載の化合物。
以下の群：

から選択される請求項１に記載の化合物。
である請求項９に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩。
である請求項１０に記載の化合物。
である請求項１０に記載の化合物。
請求項１に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩と、医薬的に許容可能なキャリヤーを含有する医薬組成物。
アルツハイマー病の治療用又は予防用医薬の製造における請求項１に記載の化合物又はその医薬的に許容可能な塩の使用。