JP5636091B2 - 癌治療に用いるためのコンブレタスタチン類似体 - Google Patents

Description

本発明は、コンブレタスタチンの特定の類似体、特に本明細書に定義するような式（Ｉ）の化合物、および該化合物を含む薬学的組成物、ならびにその医学的使用、特に多剤耐性癌を含む癌の治療または防止における医学的使用に関する。

癌の化学療法は、一般的に、固有の、または反復投与に際して獲得される、ある範囲の化学的抗腫瘍剤に対する耐性を示す悪性腫瘍の高い発生率によって限定される。現在、このいわゆる多剤耐性を克服可能であることが臨床的に確立された化学療法剤はない。こうした症例の代替療法もまた、利用可能ではない。

血管毒性である天然存在リード化合物、コンブレタスタチンＡ−４（ＣＡ−４）の水溶性ホスフェート・プロドラッグは、多様な不治の癌疾患に対する臨床ＩＩ期およびＩＩＩ期試験にすでに入っている。

ＣＡ−４およびその類似体は、非常に細胞傷害性であり、そして腫瘍血管系を選択的に破壊するかまたはその新規形成（ｎｅｏｆｏｒｍａｔｉｏｎ）を防止する（それぞれ、いわゆる抗血管または抗血管新生効果）。これらはまた、チューブリンに結合し、そしてその重合を阻害して、こうして細胞増殖を妨害する（抗有糸分裂効果）。組み合わせると、これらの効果は、腫瘍細胞増殖、ならびに固形腫瘍の成長および伝播（浸潤、転移）の阻害を導く。

ＣＡ−４の欠点は、細胞傷害性が不十分であるため、固形腫瘍療法において、カルボプラチンまたはタキソールとの併用措置が必要であることである。ＣＡ−４単独での治療は、しばしば、末梢癌細胞の残存、そしてしたがって腫瘍再発につながった（Ｔｒｏｎら， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００６， ４９， ３０３３−３０４４； Ｌｉｐｐｅｒｔ， Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００７， １５， ６０５−６１５）。関連ＣＡ−１およびそのビスホスホフェート・プロドラッグＯｘｉ４５０３もまた、そのカテコール部分により、特定の腫瘍モデルにおいて、非常に有効であった。カテコールは、キノイド中間体を通じた酸化還元サイクリングを経て、したがって反応性酸素種（ＲＯＳ）の生成および生体求核剤（ｂｉｏｎｕｃｌｅｏｐｈｉｌｅｓ）のアルキル化を仲介することが知られている（Ｈｏｌｗｅｌｌら， Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ２００２， ２２， ３９３３−４０； Ｆｏｌｋｅｓら， Ｃｈｅｍ． Ｒｅｓ． Ｔｏｘｉｃｏｌ． ２００７， ２０， １８８５−１８９４）。

ｉｎ ｖｉｖｏで、ＣＡ−４の細胞傷害性が不十分であるという問題は、癌細胞に直接影響を有するコンブレタスタチンＡ−１二ホスフェートを開発することによって克服された。しかし、ＣＡ−４同様、この化合物は、異性体化し、そしてしたがって不活性化する傾向がある。前臨床研究によって、この異性体化は、オレフィン架橋を五員複素環、例えばオキサゾールまたはイミダゾールによって置換することによって防止可能であることが明らかになった（Ｗａｎｇら， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００２， ４５， １６９７−１７１１）。生じる産物は、水溶性が改善されており、そしてプロドラッグ配合の必要なしにｉｎ ｖｉｖｏで適用可能であることによって特徴付けられる。別の研究において、ＣＡ−４類似３−ハロスチルベンがチューブリンに対して増進されたアフィニティを有し、そしてより選択的な有効性プロファイルを有することが示された（Ｐｅｔｔｉｔら， Ｊ． Ｎａｔ． Ｐｒｏｄ． ２００５， ６８， １４５０−１４５８）。類似の化合物が、さらに： ＷＯ ０１／０９１０３； Ｖａｓｉｌｅｖｓｋｙら， Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ， ２００８， ４４（１０）， １２５７−１２６１； Ｏｒｓｉｎｉら， Ｎａｔｕｒａｌ ｓｔｉｌｂｅｎｅｓ ａｎｄ ａｎａｌｏｇａ ａｓ ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ ａｇｅｎｔｓ， ： Ａｔｔａ−ｕｒ−Ｒａｈｍａｎ， Ｓｔｕｄｉｅｓ ｉｎ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ中， Ｐａｒｔ Ｎ， ２００８， Ｖｏｌｕｍｅ ３４； Ｂｒｏｗｎら， Ｔｏｐ． Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ． Ｃｈｅｍ． ２００６， ２， １−５１； Ｋｉｓｓ ＬＥら， Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ， ２０１０， ５３（８）， ３３９６−４１１；およびＯｈｓｕｍｉ Ｋら， Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ Ｌｅｔｔ， １９９８， ８（２２）， ３１５３−８）に開示される。

ＷａｎｇらまたはＰｅｔｔｉｔらによって調製されるものと似た化合物は、最適な抗腫瘍有効性に必要な条件をすべて満たすのではなく、いくつかしか満たさない。Ｗａｎｇらに記載されるものに暗示される誘導体は、好ましい薬理学的特性を特徴とするが、チューブリン・アフィニティおよび細胞傷害性は減少しており（ＣＡ−４のもののおよそ１／１００）、これは耐性腫瘍を有効に治療するには不十分である。他方、細胞傷害性が増加した化合物は、好ましくない薬理学的特性を示し、そして抗血管有効性および耐性腫瘍に対する活性を欠く。Ｐｅｔｔｉｔらに開示される３−ハロコンブレタスタチン−Ａ誘導体の中に、明確な細胞傷害特性をもつものがいくつかある。しかし、スチルベンの性質を持ち、そして安定化する複素環架橋を欠くため、これらは異性体化して抗癌活性を失う傾向がある。さらに、これらは、リン酸エステルに変換しない限り、水溶性そしてしたがってｉｎ ｖｉｖｏ適用可能性が比較的限定されている。これらは、ｉｎ ｖｉｖｏモデルでの試験に適していなかった。さらに、多剤耐性癌の治療、および特にＣＡ−４不応性癌の治療における、Ｗａｎｇらに、そしてＰｅｔｔｉｔらに記載される化合物の有効性は、調べられてきていない。

ＷＯ ０１／０９１０３

Ｔｒｏｎら， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００６， ４９， ３０３３−３０４４ Ｌｉｐｐｅｒｔ， Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００７， １５， ６０５−６１５ Ｈｏｌｗｅｌｌら， Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ２００２， ２２， ３９３３−４０ Ｆｏｌｋｅｓら， Ｃｈｅｍ． Ｒｅｓ． Ｔｏｘｉｃｏｌ． ２００７， ２０， １８８５−１８９４ Ｗａｎｇら， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００２， ４５， １６９７−１７１１ Ｐｅｔｔｉｔら， Ｊ． Ｎａｔ． Ｐｒｏｄ． ２００５， ６８， １４５０−１４５８ Ｖａｓｉｌｅｖｓｋｙら， Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ， ２００８， ４４（１０）， １２５７−１２６１ Ｏｒｓｉｎｉら， Ｎａｔｕｒａｌ ｓｔｉｌｂｅｎｅｓ ａｎｄ ａｎａｌｏｇａ ａｓ ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ ａｇｅｎｔｓ， ： Ａｔｔａ−ｕｒ−Ｒａｈｍａｎ， Ｓｔｕｄｉｅｓ ｉｎ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ中， Ｐａｒｔ Ｎ， ２００８， Ｖｏｌｕｍｅ ３４ Ｂｒｏｗｎら， Ｔｏｐ． Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ． Ｃｈｅｍ． ２００６， ２， １−５１ Ｋｉｓｓ ＬＥら， Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ， ２０１０， ５３（８）， ３３９６−４１１ Ｏｈｓｕｍｉ Ｋら， Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ Ｌｅｔｔ， １９９８， ８（２２）， ３１５３−８

したがって、癌、特に多剤耐性癌の治療または防止のための改善された方法に対する強い要求がある。

本明細書において以下に定義するような式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物は、癌に対して、特に耐性腫瘍細胞に対して、改善された有効性、および水または血清における十分な溶解性を有する。これらは、一般的に、毒性が低いため、累積用量制限を回避し、そして許容度の改善につながる。さらに、これらは、化学的安定性が改善され、そしてしたがって不活性化傾向が減少している。

本発明はまた、以下の例示的な図によって例示される。付随する図は、以下を示す：
５ｂ（新鮮に調製された溶液対１ヶ月間保存されていた溶液）によるチューブリン重合阻害。化合物５ｂは、チューブリンの重合を有効に阻害する。長期に渡って、活性の喪失は観察されない（試験：チューブリン重合アッセイ）。 ５ｂ（新鮮に調製された溶液対１ヶ月間保存されていた溶液）の細胞傷害活性。有効性の持続は、溶解された際の５ｂの化学的安定性の証明である（試験：ＳＲＢ細胞傷害性アッセイ）。 ５ｂおよびシスプラチン（Ａ）、または５ｂ、６ｂおよびシスプラチン（Ｂ）のｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞傷害性の比較。５ｂまたは６ｂでの処理は、１４１１ＨＰ細胞の多剤耐性の破壊を生じる（試験：ＳＲＢ細胞傷害性アッセイ）。 多剤耐性生殖細胞腫瘍細胞株１４１１ＨＰのマウス異種移植片における化合物５ｂおよび６ｂのｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍活性。試験化合物の単回用量（Ａ）および二重用量（Ｂ）適用後の腫瘍反応、ならびに反復適用（Ｃ）に対する腫瘍反応を示す。矢印は、試験化合物の投与を示す。 多剤耐性生殖細胞腫瘍細胞株１４１１ＨＰのマウス異種移植片における化合物５ｂおよび６ｂのｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍活性。試験化合物の単回用量（Ａ）および二重用量（Ｂ）適用後の腫瘍反応、ならびに反復適用（Ｃ）に対する腫瘍反応を示す。矢印は、試験化合物の投与を示す。 多剤耐性生殖細胞腫瘍細胞株１４１１ＨＰのマウス異種移植片における化合物５ｂおよび６ｂのｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍活性。試験化合物の単回用量（Ａ）および二重用量（Ｂ）適用後の腫瘍反応、ならびに反復適用（Ｃ）に対する腫瘍反応を示す。矢印は、試験化合物の投与を示す。 ５ｂの血管破壊効果。腫瘍血管系に選択的に影響を及ぼす明確な血管破壊効果が、全腫瘍の赤−青から褐色の発色を導く出血から明らかである（Ａ：治療前；Ｂ：治療開始から２４時間後）（試験：ヌードマウスモデルにおける皮下腫瘍異種移植片；画像撮影のため、マウスに麻酔した）。 ヒト５１８Ａ２黒色腫、ＨＬ−６０白血病、ＨＴ−２９結腸腺癌、ＫＢ−Ｖ１／Ｖｂｌ子宮頸癌およびＭＣＦ−７／Ｔｏｐｏ乳腺癌の細胞における（Ａ）、あるいはヒト５１８Ａ２黒色腫、ＨＬ−６０白血病およびＨＴ−２９結腸腺癌の細胞における（Ｂ）、２４〜７２時間（ｘ軸）インキュベーションした際の、多様な濃度（■：１００μＭ；▲：１μＭ；▼：０．０１μＭ；◆：０．００１μＭ）の参照化合物２５ｆ、ならびに本発明記載の化合物５ｂ、６ｂ、８ａおよび８ｅまたは５ｃ、５ｄ、６ｃ、６ｄ、８ｂ、８ｃおよび８ｄによる細胞増殖阻害。ｙ軸は、ＭＴＴアッセイによって解明されるような、未処理対照（１）に比較した生存細胞数を示す。 ヒト５１８Ａ２黒色腫、ＨＬ−６０白血病、ＨＴ−２９結腸腺癌、ＫＢ−Ｖ１／Ｖｂｌ子宮頸癌およびＭＣＦ−７／Ｔｏｐｏ乳腺癌の細胞における（Ａ）、あるいはヒト５１８Ａ２黒色腫、ＨＬ−６０白血病およびＨＴ−２９結腸腺癌の細胞における（Ｂ）、２４〜７２時間（ｘ軸）インキュベーションした際の、多様な濃度（■：１００μＭ；▲：１μＭ；▼：０．０１μＭ；◆：０．００１μＭ）の参照化合物２５ｆ、ならびに本発明記載の化合物５ｂ、６ｂ、８ａおよび８ｅまたは５ｃ、５ｄ、６ｃ、６ｄ、８ｂ、８ｃおよび８ｄによる細胞増殖阻害。ｙ軸は、ＭＴＴアッセイによって解明されるような、未処理対照（１）に比較した生存細胞数を示す。 ヒトＨＴ−２９結腸腺癌の細胞における、２４〜７２時間（ｘ軸）インキュベーションした際の、多様な濃度（■：１００μＭ；▲：１μＭ；●：０．０１μＭ；◆：０．００１μＭ）のコンブレタスタチンＡ−４による細胞増殖阻害。ｙ軸は、ＭＴＴアッセイによって解明されるような、未処理対照に比較した生存細胞数を示す。 １０μＭの化合物５ｂ、６ｂまたは８ａと１６時間インキュベーションした後の、ＴＵＮＥＬアッセイにおいて試験されたＨＬ−６０細胞の顕微鏡画像。明視野写真（左）は、焦点中のすべての細胞を示し、緑色蛍光チャネルの写真（右）は、明るい点として示されるアポトーシス細胞のみを示す。 試験化合物ＣＡ−４または５ｂを添加した直後（左）、１日後（中央）、および３日後（右）のニワトリ胚を、取り巻く血管とともに示す。上列は、陰性対照を示す。写真は、少なくとも２つの独立の実行の代表である。 多剤耐性生殖細胞腫瘍細胞株１４１１ＨＰのマウス異種移植片における化合物６ｂのｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍活性。二重用量適用後の腫瘍反応を示す。矢印は試験化合物の投与を示す。 Ａ２７８０卵巣癌異種移植片腫瘍（Ａ）および１４１１ＨＰ生殖細胞腫瘍異種移植片（Ｂ）における化合物５ｂ、６ｂ、５ｆおよび６ｆの血管破壊効果。腫瘍血管系に選択的に影響を及ぼす明確な血管破壊効果が、全腫瘍の赤−青から褐色の発色を導く出血から明らかである（第０日：治療前；第１日：治療開始から２４時間後）（試験：ヌードマウスモデルにおける皮下腫瘍異種移植片；画像撮影のため、マウスに麻酔した）。 ６ｂの経口投与後の１４１１ＨＰ生殖細胞腫瘍異種移植片における血管破壊効果。腫瘍血管系に選択的に影響を及ぼす明確な血管破壊効果が、全腫瘍の赤−青から褐色の発色を導く出血から明らかである（第０日：治療前；第１日：治療開始から２４時間後）（試験：ヌードマウスモデルにおける皮下腫瘍異種移植片；画像撮影のため、マウスに麻酔した）。 Ｈ１２．１生殖細胞腫瘍（Ａ）、１４１１ＨＰ生殖細胞腫瘍（Ｂ）、Ａ２７８０卵巣癌（Ｃ）、ＨＴ２９結腸癌（Ｄ）、ＤＬＤ１結腸癌（Ｅ）およびＨＣＴ８結腸癌（Ｆ）細胞株における、２５ｆに比較した化合物５ｂ、６ｂ、５ｆおよび６ｆのｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞傷害性の比較（試験：ＳＲＢ細胞傷害性アッセイ）。 Ｈ１２．１生殖細胞腫瘍（Ａ）、１４１１ＨＰ生殖細胞腫瘍（Ｂ）、Ａ２７８０卵巣癌（Ｃ）、ＨＴ２９結腸癌（Ｄ）、ＤＬＤ１結腸癌（Ｅ）およびＨＣＴ８結腸癌（Ｆ）細胞株における、２５ｆに比較した化合物５ｂ、６ｂ、５ｆおよび６ｆのｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞傷害性の比較（試験：ＳＲＢ細胞傷害性アッセイ）。 Ｈ１２．１生殖細胞腫瘍（Ａ）、１４１１ＨＰ生殖細胞腫瘍（Ｂ）、Ａ２７８０卵巣癌（Ｃ）、ＨＴ２９結腸癌（Ｄ）、ＤＬＤ１結腸癌（Ｅ）およびＨＣＴ８結腸癌（Ｆ）細胞株における、２５ｆに比較した化合物５ｂ、６ｂ、５ｆおよび６ｆのｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞傷害性の比較（試験：ＳＲＢ細胞傷害性アッセイ）。 Ｈ１２．１生殖細胞腫瘍（Ａ）、１４１１ＨＰ生殖細胞腫瘍（Ｂ）、Ａ２７８０卵巣癌（Ｃ）、ＨＴ２９結腸癌（Ｄ）、ＤＬＤ１結腸癌（Ｅ）およびＨＣＴ８結腸癌（Ｆ）細胞株における、２５ｆに比較した化合物５ｂ、６ｂ、５ｆおよび６ｆのｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞傷害性の比較（試験：ＳＲＢ細胞傷害性アッセイ）。 Ｈ１２．１生殖細胞腫瘍（Ａ）、１４１１ＨＰ生殖細胞腫瘍（Ｂ）、Ａ２７８０卵巣癌（Ｃ）、ＨＴ２９結腸癌（Ｄ）、ＤＬＤ１結腸癌（Ｅ）およびＨＣＴ８結腸癌（Ｆ）細胞株における、２５ｆに比較した化合物５ｂ、６ｂ、５ｆおよび６ｆのｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞傷害性の比較（試験：ＳＲＢ細胞傷害性アッセイ）。 Ｈ１２．１生殖細胞腫瘍（Ａ）、１４１１ＨＰ生殖細胞腫瘍（Ｂ）、Ａ２７８０卵巣癌（Ｃ）、ＨＴ２９結腸癌（Ｄ）、ＤＬＤ１結腸癌（Ｅ）およびＨＣＴ８結腸癌（Ｆ）細胞株における、２５ｆに比較した化合物５ｂ、６ｂ、５ｆおよび６ｆのｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞傷害性の比較（試験：ＳＲＢ細胞傷害性アッセイ）。 ７．７２ｎｇ／ｍＬの濃度の化合物８ａ（Ａ）、６ｂ（Ｂ）または５ｂ（Ｃ）、あるいは対照（メタノール）（Ｄ）での処理後のＨＵＶＥＣ細胞のチューブ形成アッセイ。 ＰｔＫ−２細胞における化合物６ｂ（「ブリマミン（Ｓｃｈｏｂｅｒｔ）」と示す）および化合物８ａ（「アモキサミン２（Ｓｃｈｏｂｅｒｔ）」と示す）のハイコンテンツ分析。

したがって、本発明は、式（Ｉ）

の化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩、溶媒和物、またはプロドラッグに関する。
Ｘは、Ｏ、Ｓ、Ｎ（Ｈ）、またはＮ（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。好ましくは、Ｘは、ＯまたはＮ（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。より好ましくは、Ｘは、ＯまたはＮ（ＣＨ_３）より選択される。

Ｒ^１は、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−ＮＨ（Ｃ_１−４アルキル）、または−Ｎ（Ｃ_１−４アルキル）（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。好ましくは、Ｒ^１は、ハロゲン（例えば、−Ｆ、−Ｃｌ、または−Ｂｒなど）、または−ＮＨ_２より選択される。より好ましくは、Ｒ^１は、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−ＮＨ_２より選択される。最も好ましくは、Ｒ^１は、−Ｃｌまたは−Ｂｒより選択される。

Ｒ^２は、水素、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＦ_３、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ_１−４アルキル）、−ＮＨ_２、−ＮＨ（Ｃ_１−４アルキル）、または−Ｎ（Ｃ_１−４アルキル）（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。好ましくは、Ｒ^２は、水素、ハロゲン（例えば、−Ｆ、−Ｃｌ、または−Ｂｒなど）、−ＯＨ、または−ＮＨ_２より選択される。より好ましくは、Ｒ^２は、−Ｆ、−ＯＨ、または−ＮＨ_２より選択される。

Ｒ^３は、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ_１−４アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ_１−４アルキル）、−ＮＨ_２、−ＮＨ（Ｃ_１−４アルキル）、または−Ｎ（Ｃ_１−４アルキル）（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。好ましくは、Ｒ^３は、−Ｏ（Ｃ_１−４アルキル）または−Ｎ（Ｃ_１−４アルキル）（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。より好ましくは、Ｒ^３は、−Ｏ−ＣＨ_３、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_３、または−Ｎ（ＣＨ_３）_２より、特に−Ｏ−ＣＨ_３または−Ｎ（ＣＨ_３）_２より選択される。

あるいは、Ｒ^２およびＲ^３は、合同で、基、−Ｃ（ハロゲン）＝ＣＨ−Ｎ（ＣＨ_３）−を形成し、式中、ハロゲンは、好ましくは−Ｆ、−Ｃｌ、または−Ｂｒより選択され、そしてより好ましくはハロゲンは−Ｃｌである。すなわち、Ｒ^２およびＲ^３は、これらが付着する炭素原子と合わせて五員環を形成し、Ｒ^２およびＲ^３は、合わせて、二価基、−Ｃ（ハロゲン）＝ＣＨ−Ｎ（ＣＨ_３）−、または好ましくは、基、−Ｃ（Ｃｌ）＝ＣＨ−Ｎ（ＣＨ_３）−である。

したがって、式（Ｉ）の化合物は、以下の構造：

式中、ハロゲンは、例えば−Ｆ、−Ｃｌ、または−Ｂｒであってもよく、そして好ましくは−Ｃｌであり、そして他の基、ＸおよびＲ^１は上に定義する通りである
を有することも可能である。

好ましい態様において、Ｒ^２は−ＮＨ_２であり、そしてＲ^３は−Ｏ−ＣＨ_３である。さらに好ましい態様において、ＸはＯまたはＮ（ＣＨ_３）であり、Ｒ^１は−ＮＨ_２またはハロゲン（例えば、−Ｆ、−Ｃｌ、または−Ｂｒなど）であり、Ｒ^２は−ＮＨ_２であり、そしてＲ^３は−Ｏ−ＣＨ_３である。したがって、式（Ｉ）の好ましい化合物は、１−メチル−５−（３−アミノ−４−メトキシフェニル）−４−（３−クロロ−４，５−ジメトキシフェニル）−イミダゾール（「５ｂ」または「化合物５ｂ」とも称される）である。式（Ｉ）の別の好ましい化合物は、１−メチル−５−（３−アミノ−４−メトキシフェニル）−４−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシフェニル）−イミダゾール（「６ｂ」または「化合物６ｂ」とも称される）である。

別の好ましい態様において、Ｒ^２は−ＮＨ_２であり、そしてＲ^３は−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_３である。さらに好ましい態様において、ＸはＯまたはＮ（ＣＨ_３）であり、Ｒ^１は−ＮＨ_２またはハロゲン（例えば、−Ｆ、−Ｃｌ、または−Ｂｒなど）であり、Ｒ^２は−ＮＨ_２であり、そしてＲ^３は−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_３である。式（Ｉ）の特に好ましい化合物は、したがって、１−メチル−５−（３−アミノ−４−エトキシフェニル）−４−（３−クロロ−４，５−ジメトキシフェニル）−イミダゾール（すなわち、１−メチル−５−（３”−アミノ−４”−エトキシフェニル）−４−（３’−クロロ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−イミダゾール；「５ｆ」または「化合物５ｆ」とも称される）および１−メチル−５−（３−アミノ−４−エトキシフェニル）−４−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシフェニル）−イミダゾール（すなわち、１−メチル−５−（３”−アミノ−４”−エトキシフェニル）−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−イミダゾール；「６ｆ」または「化合物６ｆ」とも称される）である。

別の好ましい態様において、Ｒ^２は−Ｆであり、そしてＲ^３は−Ｏ−ＣＨ_３または−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_３である。さらに好ましい態様において、ＸはＯまたはＮ（ＣＨ_３）であり、Ｒ^１は−ＮＨ_２またはハロゲン（例えば、−Ｃｌ、または−Ｂｒなど）であり、Ｒ^２は−Ｆであり、そしてＲ^３は−Ｏ−ＣＨ_３または−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_３である。したがって、式（Ｉ）の好ましい化合物は、１−メチル−４−（３−クロロ−４，５−ジメトキシフェニル）−５−（３−フルオロ−４−エトキシフェニル）−イミダゾール（「５ｇ」または「化合物５ｇ」とも称される）および１−メチル−４−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシフェニル）−５−（３−フルオロ−４−エトキシフェニル）−イミダゾール（「６ｇ」または「化合物６ｇ」とも称される）である。

式（Ｉ）のさらに好ましい化合物は、１−メチル−４−（３−アミノ−４，５−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３−クロロインドル−５−イル）−イミダゾール（すなわち、１−メチル−４−（３’−アミノ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３”−クロロインドル−５”−イル）−イミダゾール；「８ｅ」または「化合物８ｅ」とも称される）、１−メチル−４−（３’−クロロ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３”−クロロインドル−５”−イル）−イミダゾール（「５ｉ」または「化合物５ｉ」とも称される）、および１−メチル−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３”−クロロインドル−５”−イル）−イミダゾール（「６ｉ」または「化合物６ｉ」とも称される）である。

本発明はさらに、式（ＩＩ）

の化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩、溶媒和物、またはプロドラッグを提供する。
Ｘ^２は、Ｏ、Ｓ、Ｎ（Ｈ）、またはＮ（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。好ましくは、Ｘ^２は、ＯまたはＮ（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。より好ましくは、Ｘ^２は、ＯまたはＮ（ＣＨ_３）より選択される。

Ｒ^２１は、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−ＮＨ（Ｃ_１−４アルキル）、または−Ｎ（Ｃ_１−４アルキル）（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。好ましくは、Ｒ^２１は、ハロゲン（例えば、−Ｆ、−Ｃｌ、または−Ｂｒなど）、または−ＮＨ_２より選択される。より好ましくは、Ｒ^２１は、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−ＮＨ_２より選択される。最も好ましくは、Ｒ^２１は、−Ｃｌまたは−Ｂｒより選択される。

Ｒ^２２はＣ_１−４アルキルである。好ましくは、Ｒ^２２はＣ_２−４アルキルである。より好ましくは、Ｒ^２２はエチルである。
式（ＩＩ）の化合物に含まれる基「ハロゲン」は、好ましくは、−Ｆ、−Ｃｌ、または−Ｂｒより選択され、そしてより好ましくは「ハロゲン」は−Ｃｌである。

式（ＩＩ）の好ましい化合物は、１−メチル−４−（３−アミノ−４，５−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３−クロロインドル−５イル）−イミダゾール、ｌ−メチル−４−（３’−クロロ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３”−クロロインドル−５”−イル）−イミダゾール、および１−メチル−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３”−クロロインドル−５”−イル）−イミダゾールである。式（ＩＩ）の特に好ましい化合物は、１−メチル−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−エチル−３”−クロロインドル−５”−イル）−イミダゾール（「６ｈ」または「化合物６ｈ」とも称される）である。

本発明はまた、式（ＩＩＩ）

の化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩、溶媒和物、またはプロドラッグも提供する。
Ｘ^３は、Ｏ、Ｓ、Ｎ（Ｈ）、またはＮ（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。好ましくは、Ｘ^３は、ＯまたはＮ（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。より好ましくは、Ｘ^３は、ＯまたはＮ（ＣＨ_３）より選択される。

Ｒ^３１は、ハロゲン（特に、−Ｃｌ、−Ｂｒまたは−Ｉ）、−ＣＮ、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−ＮＨ（Ｃ_１−４アルキル）または−Ｎ（Ｃ_１−４アルキル）（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。好ましくは、Ｒ^３１は、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、または−ＮＨ_２より選択される。より好ましくは、Ｒ^３１は、−Ｂｒ、−Ｉ、または−ＮＨ_２より選択される。最も好ましくは、Ｒ^３１は、−Ｂｒまたは−Ｉより選択される。

Ｒ^３２は、水素、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＦ_３、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ_１−４アルキル）、−ＮＨ_２、−ＮＨ（Ｃ_１−４アルキル）、または−Ｎ（Ｃ_１−４アルキル）（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。好ましくは、Ｒ^３２は、水素、ハロゲン（例えば、−Ｆ、−Ｃｌ、または−Ｂｒなど）、−ＯＨ、または−ＮＨ_２より選択される。より好ましくは、Ｒ^３２は、−Ｆ、−ＯＨ、または−ＮＨ_２より選択される。最も好ましくは、Ｒ^３２は−Ｆである。

Ｒ^３３は、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ_１−４アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ_１−４アルキル）、−ＮＨ_２、−ＮＨ（Ｃ_１−４アルキル）、または−Ｎ（Ｃ_１−４アルキル）（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。好ましくは、Ｒ^３３は、−Ｏ（Ｃ_１−４アルキル）または−Ｎ（Ｃ_１−４アルキル）（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。より好ましくは、Ｒ^３３は、−Ｏ−ＣＨ_３、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_３または−Ｎ（ＣＨ_３）_２より選択される。最も好ましくは、Ｒ^３３は、−Ｏ−ＣＨ_３または−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_３より選択される。

あるいは、Ｒ^３２およびＲ^３３は、合同で、基、−Ｃ（ハロゲン）＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ_１−４アルキル）−を形成する。この基に含まれるＣ_１−４アルキルは、好ましくは、メチルまたはエチルより選択される。この基に含まれるハロゲンは、好ましくは、−Ｆ、−Ｃｌ、または−Ｂｒより選択され、そしてより好ましくは、ハロゲンは−Ｃｌである。すなわち、Ｒ^３２およびＲ^３３は、これらが付着する炭素原子と合わせて五員環を形成し、Ｒ^３２およびＲ^３３は、合わせて、二価基、−Ｃ（ハロゲン）＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ_１−４アルキル）−である。Ｒ^３２およびＲ^３３が、合同で、基、−Ｃ（ハロゲン）＝ＣＨ−Ｎ（ＣＨ_３）−、または基、−Ｃ（ハロゲン）＝ＣＨ−Ｎ（ＣＨ_２ＣＨ_３）−を形成することが特に好ましく、ここで各場合で、ハロゲンは、好ましくは、−Ｆ、−Ｃｌ、または−Ｂｒより選択され、そしてより好ましくは、ハロゲンは−Ｃｌである。

Ｒ^３４は、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ_１−４アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ_１−４アルキル）、ハロゲン（特に、−Ｃｌ、−Ｂｒまたは−Ｉ）、−ＣＮ、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−ＮＨ（Ｃ_１−４アルキル）、または−Ｎ（Ｃ_１−４アルキル）（Ｃ_１−４アルキル）より選択される。好ましくは、Ｒ^３４は、−Ｏ（Ｃ_１−４アルキル）、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、または−ＮＨ_２より選択される。より好ましくは、Ｒ^３４は、−Ｏ−ＣＨ_３、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_３、−Ｂｒ、−Ｉ、または−ＮＨ_２より選択される。最も好ましくは、Ｒ^３４は、−Ｏ−ＣＨ_３、−Ｂｒまたは−Ｉより選択される。

好ましい態様において、Ｒ^３２は−Ｆであり、そしてＲ^３３は−Ｏ−ＣＨ_３である。さらに好ましい態様において、Ｘ^３はＮ（ＣＨ_３）であり、Ｒ^３１は−Ｂｒまたは−Ｉであり、Ｒ^３２は−Ｆであり、Ｒ^３３は−Ｏ−ＣＨ_３であり、そしてＲ^３４は−Ｏ−ＣＨ_３、−Ｂｒまたは−Ｉである。式（ＩＩＩ）の特に好ましい化合物は、以下の化合物９ａ、９ｂおよび９ｃである：

本明細書において、用語「アルキル」は、一価飽和脂肪族（すなわち非芳香族）非環炭化水素基（すなわち炭素原子および水素原子からなる基）であって、直鎖または分枝鎖であってもよく、そしていかなる炭素−炭素二重結合またはいかなる炭素−炭素三重結合も含まない、前記基を指す。したがって、用語「Ｃ_１−４アルキル」は、メチル、エチル、プロピル（例えば、ｎ−プロピルまたはイソプロピル）、またはブチル（例えば、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、またはｓｅｃ−ブチル）を指す。

本明細書において、用語「ハロゲン」は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−Ｉ、そして特に、−Ｆ、−Ｃｌ、または−Ｂｒを指す。
本発明はまた、薬学的に許容されうる賦形剤と組み合わされて、本明細書に定義するような式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩、溶媒和物、またはプロドラッグを含む、薬学的組成物にも関する。したがって、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物は、医薬品として有用である。

本発明はさらに、癌の治療または防止において使用するための、本明細書に定義するような式（Ｉ）、（ＩＩ）もしくは（ＩＩＩ）の化合物、またその薬学的に許容されうる塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグ、あるいは薬学的に許容されうる賦形剤と組み合わされた、前述の実体いずれかを含む薬学的組成物に関する。癌の治療または防止のための医薬品調製のための上記化合物の使用もまた、本発明の範囲内である。

さらに、本発明は、癌の治療または防止の方法であって、本明細書に定義するような式（Ｉ）、（ＩＩ）もしくは（ＩＩＩ）の化合物、またはその薬学的に許容されうる塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグ、あるいは薬学的に許容されうる賦形剤と組み合わされた前述の実体いずれかを含む薬学的組成物の投与を含む、前記方法を含む。

本発明記載の化合物または薬学的組成物で治療されるかまたは防止されるべき癌には、例えば、乳（乳房）癌、尿生殖器癌（例えばホルモン不応性前立腺腫瘍を含む前立腺腫瘍、または生殖細胞癌など）、肺癌（例えば小細胞または非小細胞肺腫瘍など）、胃腸癌（例えば肝細胞癌、結腸直腸腫瘍、結腸癌または胃癌など）、類表皮癌（例えば類表皮頭部および／または頸部腫瘍または口腔腫瘍）、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、神経芽細胞腫、頭部および／または頸部の癌、膀胱癌、腎臓癌、脳癌、白血病（例えばリンパ球性白血病または骨髄性白血病など）、またはリンパ腫が含まれる。

本発明にしたがった化合物または薬学的組成物で治療または防止しようとする癌は、多剤耐性癌であることが特に好ましい。治療しようとする癌は、したがって、上記癌の多剤耐性型であることも可能である。本発明の好ましい態様において、本明細書に提供する化合物または薬学的組成物で治療または防止しようとする癌は、コンブレタスタチンＡ−４および／またはシスプラチンに対して耐性である。したがって、本発明において、コンブレタスタチンＡ−４（ＣＡ−４）不応性癌またはシスプラチン不応性癌の治療または防止が特に想定される。

本発明記載の化合物は、多剤耐性癌、特にＣＡ４不応性癌の医学的介入において驚くほど有効であることが見出されてきており、マウス異種移植片モデルを含めて、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏで証明されてきている（実施例３、ならびに図３、４および５を参照されたい）。

新規化合物が、別個の細胞傷害性抗血管新生／抗血管および抗有糸分裂効果を示すことが立証されてきている。さらに、新規化合物の分子構造におけるイミダゾール／オキサゾール架橋は、アレーン環間のＣ＝Ｃ二重結合の安定シス立体配置を生じさせ、そしてしたがって、高い化学的および薬理学的安定性を生じさせる。抗腫瘍活性の喪失を伴うトランス−スチルベンへの異性体化はもはや不可能である。さらに、この極性置換体は、新規化合物を非常によく水溶性にし、そしてしたがってビヒクルの使用を伴わずに直接適用可能である。これらの化合物を生理学的生理食塩水溶液中で、溶液としての注射によって投与可能である。こうした溶液は、いかなる顕著な活性喪失も伴わずに、周囲条件下で少なくとも１ヶ月間安定であることが示された。多剤耐性腫瘍モデルの動物研究において、新規化合物が抗腫瘍活性であり、腫瘍異種移植片の劇的な退行を引き起こすことが見出された。腫瘍血管系に選択的に影響を及ぼす強い抗血管効果は、腫瘍組織の目に見える出血によって、明確に確認された。新規化合物を有効濃度で適用した際に、望ましくない副作用は観察されなかった。これは、これらの高い腫瘍選択性およびｉｎ ｖｉｖｏでの優れた許容度を強調する。したがって、化合物（Ｉ）、（ＩＩ）および（ＩＩＩ）の化合物に関して記載するような、定義する位での特別な環置換基は、抗腫瘍活性増進、薬理学的特性の改善、ならびにｉｎ ｖｉｖｏでの優れた許容度および腫瘍の化学耐性を克服する潜在能力を生じる。さらに、本発明の化合物は、驚くべきことに、実施例にもまた立証するように、高い細胞傷害性、および腫瘍血管系に選択的に影響を及ぼす、強い抗血管効果の組み合わせから生じる相乗効果を示すことが見出されてきている。

式（Ｉ）におけるＲ^１のハロゲン置換基の性質は、本発明記載の化合物の選択性およびその生物活性の度合いに非常に重要である。クロロ同類物５ｂ（実施例４に示す構造）とは異なり、ブロモ・イミダゾール６ｂは、腫瘍異種移植片において血管破壊性である一方、ニワトリ胚（ＣＡＭアッセイ）において、通常の血管系はそのままにしておく。本発明の化合物はまた、傑出した腫瘍選択的細胞傷害性および癌細胞アポトーシスの強い誘導によって特徴付けられる。

式（Ｉ）の化合物を含む本発明の化合物はさらに、やはり実施例３ならびに図１および２に立証されるように、水溶性および溶液中での化学的安定性に関して、好適な特性を有する。例えば、本発明記載の化合物５ｂ、６ｂおよび８ａの水溶性は、１０ｍｇ／ｍＬの濃度を超えた。したがって、これらの化合物は、コンブレタスタチンＡ−４−ホスフェートのカリウム塩（約５ｍｇ／ｍＬ； Ｂｅｄｆｏｒｄら， Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． １９９６， ６， １５７−１６０）よりもさらにより水溶性である。やはりこのため、式（Ｉ）の化合物を含む本発明の化合物は、癌の治療または防止における医薬品を含めて、医薬品として特に適しており、そして有効である。

したがって、本発明の化合物は、本発明記載の化合物５ｂに関して、付随する実施例に示しているように、細胞傷害性、水溶性、および化学的安定性に関して特に好適である。特に、化合物５ｂは、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏで（同様に、ＣＡ−４およびシスプラチン耐性細胞株において）非常に細胞傷害性であり、ＣＡ−４−ホスフェートと比較して、改善された水溶性を示し、そしてＣＡ−４のように、不活性トランス異性体に異性体化することは不能である。化合物５ｂは、にもかかわらずよく許容され、そしてマウス異種移植片において選択性である。本発明の化合物は、したがって、プロドラッグ型、例えばコンブレタスタチンＡ−４に関して用いられるホスフェート・プロドラッグ型である必要なしに投与可能である。しかし、１つの態様において、望ましい場合、プロドラッグを用いてもよい。

合成化学の分野の当業者には、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物を含む、本発明の化合物の調製のための多様な方法が容易に明らかであろう。例えば、以下の一般的プロトコルにしたがって、式（Ｉ）の化合物を調製してもよい。

まず、それぞれのパラ−トルエンスルホニルメチルイソシアニド（ＴｏｓＭＩＣ誘導体）を調製する（スキーム１）。商業的に入手可能な５−クロロまたは５−ブロモバニリン１ａ／ｂをヨードメタンおよび炭酸カリウムと反応させて、ベラトルムアルデヒド２ａ／ｂを得て、これを、カンファースルホン酸の存在下でパラ−トルエンスルフィン酸およびホルムアミドと反応させることによって、トシルメチルホルムアミド３ａ／ｂに変換した。同じ方法で、酢酸中の発煙硝酸とバニリンの反応によって得られるような５−ニトロバニリン（１ｃ）をメチル化して、ベラトルムアルデヒド２ｃを得て、これをホルムアミド３ｃに変換した。続いて、ホスホロキシクロリドでの処理によって、ホルムアミド３を脱水して、３−置換ＴｏｓＭＩＣ誘導体４にした。

スキーム１：パラ−トルエンスルホニルメチルイソシアニド４の合成。試薬および条件：（ｉ）ＣＨ_３Ｉ、Ｋ_２ＣＯ_３、ＴＢＡＩ、ＤＭＦ、２０℃、２４時間、８０〜９０％； （ｉｉ）ＨＣＯＮＨ_２、カンファースルホン酸、パラ−トルエンスルフィン酸、６０℃、１６時間、５１〜５８％； （ｉｉｉ）ＰＯＣｌ_３、Ｅｔ_３Ｎ、ＤＭＥ、−５℃、３時間、５７〜７４％。

ジメトキシエタン／エタノール混合物においてアリールアルデヒドと反応させることによって、ハロ置換ＴｏｓＭＩＣ誘導体４ａ／ｂを変換して、イミダゾール５／６に変換するか、または後者からイミンを生成した（スキーム２）。Ｚｎ／ＨＣｌでニトロ基を選択的に還元して、それぞれ、所望のアミン５ｂまたは６ｂを得る。イミダゾール５ａ〜ｄおよび６ｂ〜ｄを３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサンで処理して、それぞれの水溶性塩酸塩を得る。

スキーム２：Ｎ−メチルイミダゾール架橋コンブレタスタチンＡ４類似体の合成。試薬および条件：（ｉ）ＡｒＣＨＯ、ＣＨ_３ＮＨ_２（エタノール中、３３％）、ＣＨ_３ＣＯ_２Ｈ、エタノール、還流、２時間；次いで、４ａ／ｂ、Ｋ_２ＣＯ_３、ジメトキシエタン／エタノール、還流、６時間、５２〜９９％； （ｉｉ）Ｚｎ、ＨＣｌ、ＴＨＦ、２０℃、１０分間、４０〜９１％。

ニトロ置換化合物７ａ〜ｅ、ならびに対応するアルデヒドおよびイミンを、ニトロ−ＴｏｓＭＩＣ誘導体４ｃから、イミダゾール５／６と同様に調製する（スキーム３）。アミン８ａ〜ｅは、Ｐｄ触媒移動水素化によって得られる。３−クロロインドール７ｅは、Ｚｎ／ＨＣｌで還元されてアミン８ｅになる。化合物８をさらに水溶性塩酸塩に変換することも可能である。

スキーム３：水溶性アミノ置換オキサゾールおよびＮ−メチルイミダゾール８の合成。試薬および条件：（ｉ）ＡｒＣＨＯ、Ｋ_２ＣＯ_３、ジメトキシエタン／ＣＨ_３ＯＨ、還流、２時間、４２〜８６％（Ｘ＝Ｏの場合）； ＡｒＣＨＯ、ＣＨ_３ＮＨ_２（エタノール中、３３％）、ＣＨ_３ＣＯ_２Ｈ、エタノール、還流、２時間；次いで、４ｃ、Ｋ_２ＣＯ_３、ジメトキシエタン／エタノール、還流、６時間、６４〜７４％（Ｘ＝ＮＣＨ_３の場合）； （ｉｉ）ＨＣＯ_２ＮＨ_４、Ｐｄ／Ｃ（５％）、ＣＨ_３ＯＨ、還流、２時間、６７〜８４％（８ａ〜ｄの場合）； Ｚｎ、ＨＣｌ、ＴＨＦ、２０℃、１０分間、６４％（８ｅの場合）。

化合物５ｅ〜ｇおよび６ｅ〜ｇを以下のように調製する（スキーム４）。４−エトキシ−３−ニトロ／フルオロベンズアルデヒドをＭｅＮＨ_２で処理して、イミン中間体を得て、これを塩基性条件下でＴｏｓＭＩＣ試薬４ａ／ｂと反応させて、Ｎ−メチルイミダゾール５ｅ、ｇおよび６ｅ、ｇを得る。ＴＨＦ中、Ｚｎ／ＨＣｌで５ｅ／６ｅを還元することによって、アミン５ｆおよび６ｆの調製を達成する。例えば３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサンでの処理によって、これらの化合物を塩酸塩に変換することも可能である。

スキーム４：化合物５ｅ〜ｇおよび６ｅ〜ｇの合成。試薬および条件（ｉ）置換ＡｒＣＨＯ、ＭｅＮＨ_２、ＡｃＯＨ、ＥｔＯＨ、還流、２時間、次いで、４ａ／ｂ、Ｋ_２ＣＯ_３、ＥｔＯＨ、還流、３時間； （ｉｉ）Ｚｎ、ＨＣｌ、ＴＨＦ、室温、１５分間、次いで、３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン、ＤＣＭ、室温、１５分間。

さらに、また、式（Ｉ）の化合物を、Ｗａｎｇら， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００２， ４５， １６９７−１７１１に記載される合成経路と同様に調製することも可能である。

式（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物を、上記のおよび／または実施例に記載される合成にしたがって、またはこれらと同様に調製することも可能である。式（ＩＩＩ）の化合物は特に、以下の一般的プロトコルにしたがってもまた調製可能である。

化合物９ａ〜ｃを以下のように調製する（スキーム５）。３−ブロモ−４，５−ジメトキシ−ベンズアルデヒド、３，５−ジブロモ−４−メトキシベンズアルデヒド、および３，５−ジヨード−４−メトキシベンズアルデヒドをそれぞれ、ＭｅＮＨ_２で処理して、イミン中間体を得て、これを塩基性条件下でＴｏｓＭＩＣ試薬４ｄと反応させて、Ｎ−メチルイミダゾール９ａ〜ｃを得る。例えば３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサンで処理することによって、これらの化合物を塩酸塩に変換することも可能である。

スキーム５：化合物９ａ〜ｃの合成。試薬および条件：（ｉ）置換ＡｒＣＨＯ、ＭｅＮＨ_２、ＡｃＯＨ、ＥｔＯＨ、還流、２時間、次いで、４ｄ、Ｋ_２ＣＯ_３、ＥｔＯＨ、還流、３時間。

本発明の範囲は、本発明の化合物、特に、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物のすべての薬学的に許容されうる塩型を含み、これらの塩は、当該技術分野に周知であるように、例えばプロトン化に感受性である孤立電子対を所持する原子、例えばアミノ基の、無機酸または有機酸でのプロトン化によって、あるいは生理学的に許容されうるカチオンとカルボン酸基の塩として、形成されることも可能である。例示的な塩基付加塩は、例えばアルカリ金属塩、例えばナトリウムまたはカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えばカルシウムまたはマグネシウム塩；アンモニウム塩；脂肪族アミン塩、例えばトリメチルアミン、トリエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、プロカイン塩、メグルミン塩、ジエタノールアミン塩またはエチレンジアミン塩；アラルキルアミン塩、例えばＮ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン塩、ベネタミン塩；複素環芳香族アミン塩、例えばピリジン塩、ピコリン塩、キノリン塩またはイソキノリン塩；四級アンモニウム塩、例えばテトラメチルアンモニウム塩、テトラエチルアンモニウム塩、ベンジルトリメチルアンモニウム塩、ベンジルトリエチルアンモニウム塩、ベンジルトリブチルアンモニウム塩、メチルトリオクチルアンモニウム塩またはテトラブチルアンモニウム塩；ならびに塩基性アミノ酸塩、例えばアルギニン塩またはリジン塩を含む。例示的な酸付加塩は、例えば鉱酸塩、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩（例えばリン酸塩、リン酸水素塩、またはリン酸二水素塩）、炭酸塩、炭酸水素酸塩または過塩素酸塩；有機酸塩、例えば酢酸塩、プロピオン酸塩、酪酸塩、ペンタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヘプタン酸塩、オクタン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ウンデカン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、クエン酸塩、ニコチン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、またはアスコルビン酸塩；スルホン酸塩、例えばメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩（トシレート）、２−ナフタレンスルホン酸塩、３−フェニルスルホン酸塩、またはカンファースルホン酸塩；ならびに酸性アミノ酸塩、例えばアスパラギン酸塩またはグルタミン酸塩を含む。

さらに、本発明の範囲は、任意の溶媒和型の式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物の固形型を含み、例えば水との溶媒和物、例えば水和物、あるいは有機溶媒、例えばメタノール、エタノールまたはアセトニトリルとの溶媒和物、すなわち、それぞれメタノール付加物、エタノール付加物またはアセトニトリル付加物としてのもの；あるいは任意の多型のものが含まれる。

さらに、本出願の式は、示す化合物の鏡像異性体およびジアステレオマーを含めて、すべてのありうる立体異性体を含むように意図される。
したがって、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物のすべての立体異性体は、混合して、あるいは純粋なまたは実質的に純粋な型のいずれかで、本発明の一部として意図される。本発明記載の化合物の範囲は、すべてのありうる立体異性体およびその混合物を含む。これは特に、ラセミ型および単離光学異性体を含む。ラセミ型は、物理的方法、例えばジアステレオマー誘導体の分別再結晶、分離または結晶化、あるいはキラルカラムクロマトグラフィーによる分離などによって分離可能である。慣用法、例えば光学活性酸との塩形成、その後、結晶化を用いて、個々の光学異性体をラセミ体から得ることも可能である。

式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物の薬学的に許容されうるプロドラッグは、化学的にまたは代謝的に切断可能な基を有し、そして加溶媒分解によってまたは生理学的条件下で、ｉｎ ｖｉｖｏで薬学的に活性である本発明の化合物になる、誘導体である。式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物のプロドラッグは、慣用的な方式で、化合物の官能基を用いて、例えばアミノまたはヒドロキシル基を用いて形成されうる。プロドラッグ誘導体型は、哺乳動物生物において、しばしば、溶解性、組織適合性、または遅延放出の利点を提供する（Ｂｕｎｄｇａａｒｄ， Ｈ．， Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ， ｐｐ． ７−９， ２１−２４， Ｅｌｓｅｖｉｅｒ， Ａｍｓｔｅｒｄａｍ １９８５）。本発明で使用する化合物がヒドロキシル基を有する場合、適切なアシルハライドまたは適切な酸無水物とヒドロキシル基を反応させることによって調製されるアシルオキシ誘導体が、プロドラッグとして例示される。プロドラッグとして特に好ましいアシルオキシ誘導体は、−ＯＣ（＝Ｏ）−ＣＨ_３、−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｃ_２Ｈ_５、−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｔｅｒｔ−Ｂｕ）、−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｃ_１５Ｈ_３１、−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｍ−ＣＯＯＮａ−Ｐｈ）、−ＯＣ（＝Ｏ）−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＮａ、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＨ_３または−ＯＣ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−Ｎ（ＣＨ_３）_２である。本発明で使用する化合物がアミノ基を有する場合、適切な酸ハライドまたは適切な混合無水物とアミノ基を反応させることによって調製されるアミド誘導体が、プロドラッグとして例示される。プロドラッグとして特に好ましいアミド誘導体は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＨ_３である。したがって、式（Ｉ）の化合物は、プロドラッグとして使用可能であり、ここで、プロドラッグは、存在する場合、１またはそれより多いアミノ基がアミドの形である、例えば−ＮＨＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＨ_３の形であるか、あるいは存在する場合、１またはそれより多いヒドロキシル基がアシルオキシの形である、例えば−ＯＣ（＝Ｏ）−ＣＨ_３、−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｃ_２Ｈ_５、−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｔｅｒｔ−Ｂｕ）、−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｃ_１５Ｈ_３１、−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｍ−ＣＯＯＮａ−Ｐｈ）、−ＯＣ（＝Ｏ）−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＮａ、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＨ_３もしくは−ＯＣ（＝Ｏ）−ＣＨ_２−Ｎ（ＣＨ_３）_２の形、またはホスフェートの形、すなわち−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ⁻）_２の形、もしくはリン酸塩（例えば本明細書上記記載の塩基付加塩など）である、式（Ｉ）の化合物である。したがって、式（Ｉ）の化合物におけるＲ^２および／またはＲ^３が−ＯＨ（すなわちヒドロキシル）である場合、対応するプロドラッグは、Ｒ^２（適用可能である場合）であるヒドロキシル基および／またはＲ^３（適用可能である場合）であるヒドロキシル基が、ホスフェート（すなわち−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ⁻）_２の形）、リン酸塩、またはアシルオキシの形、好ましくはホスフェートまたはリン酸塩（例えば、ナトリウム、カリウム、または本明細書上記の塩基添加塩に関して言及するカチオンいずれかとの塩）の形である、式（Ｉ）の化合物であってもよい。本発明の化合物の好ましいプロドラッグは、Ｒ^２が−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）_２またはその塩（例えば二ナトリウムまたは二カリウム塩）である、式（Ｉ）の化合物である。

本明細書に記載する化合物を化合物自体として投与してもよいし、または医薬品として配合してもよい。医薬品／薬学的組成物は、場合によって、１またはそれより多い薬学的に許容されうる賦形剤、例えばキャリアー、希釈剤、充填剤、崩壊剤、潤滑剤、結合剤、着色剤、色素、安定化剤、保存剤、酸化防止剤、または溶解性増進剤を含んでもよい。

特に、薬学的組成物は、１またはそれより多い溶解性増進剤、例えば約２００〜約５，０００Ｄａの範囲の分子量を有するポリ（エチレングリコール）を含むポリ（エチレングリコール）、エチレングリコール、プロピレングリコール、非イオン性界面活性剤、チロキサポール、ポリソルベート８０、マクロゴール−１５−ヒドロキシステアレート、リン脂質、レシチン、ジミリストイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジステアロイルホスファチジルコリン、シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−γ−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン、ジヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、グルコシル−α−シクロデキストリン、グルコシル−β−シクロデキストリン、ジグルコシル−β−シクロデキストリン、マルトシル−α−シクロデキストリン、マルトシル−β−シクロデキストリン、マルトシル−γ−シクロデキストリン、マルトトリオシル−β−シクロデキストリン、マルトトリオシル−γ−シクロデキストリン、ジマルトシル−β−シクロデキストリン、メチル−β−シクロデキストリン、カルボキシアルキルチオエーテル、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、酢酸ビニルコポリマー、ビニルピロリドン、ラウリル硫酸ナトリウム、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム、またはその組み合わせいずれかを含んでもよい。

薬学的組成物を、当業者に知られる技術、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， 第２０版に公表される技術によって配合してもよい。薬学的組成物を、経口、非経口、例えば筋内、静脈内、腹腔内、皮下、皮内、動脈内、結腸、鼻、局所、エアロゾルまたは膣投与のための投薬型として配合してもよい。経口投与のための投薬型には、コーティングおよび非コーティング錠剤、軟ゼラチンカプセル、硬ゼラチンカプセル、ロゼンジ、トローチ、溶液、エマルジョン、懸濁物、シロップ、エリキシル剤、再構成用の粉末および顆粒、分散性粉末および顆粒、薬用ガム、咀嚼錠剤および発泡錠が含まれる。非経口投与用の投薬型には、溶液、エマルジョン、懸濁物、分散物、ならびに再構成用の粉末および顆粒が含まれる。非経口投与には、エマルジョンが好ましい投薬型である。結腸および膣投与のための投薬型には、座薬および膣座薬が含まれる。鼻投与のための投薬型を、吸入および吹送法によって、例えば計測吸入装置によって、投与してもよい。局所投与のための投薬型には、クリーム、ジェル、軟膏、膏薬、パッチおよび経皮送達系が含まれる。

式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物、あるいは式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物を含む上記の薬学的組成物を、全身性／末梢性のいずれかで、または所望の作用部位で、任意の慣用的な投与経路によって被験体に投与してもよく、限定されるわけではないが：経口（例えば錠剤、カプセルとして、または摂取可能溶液として）、局所（例えば経皮、鼻内、目、頬、および舌下）、非経口（例えば注射技術または注入技術を用いて、そして例えば、注射、例えば皮下、皮内、筋内、静脈内、動脈内、心内、クモ膜下腔内、脊髄内、嚢内、嚢下、眼内、腹腔内、気管内、表皮下、関節内、クモ膜下、または胸骨内によるもの、例えば皮下または筋内へのデポーの移植によるものを含む）、肺（例えば口または鼻を通じた、例えばエアロゾルを用いた吸入または吹送療法による）、胃腸、子宮内、眼内、皮下、目（ガラス体内または前房内を含む）、結腸、および膣投与の１またはそれより多くが含まれる。特に、化合物または薬学的組成物を経口または吸入によって投与してもよい。本発明の化合物を、例えばより詳細に本明細書の以下に記載するように、乾燥粉末配合物の形で、肺投与によって、特に吸入によって、投与する。

化合物または薬学的組成物を非経口投与する場合、こうした投与の例には：化合物または薬学的組成物の静脈内、動脈内、腹腔内、クモ膜下腔内、心室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋内または皮下投与、および／または注入技術を用いることによる投与の１またはそれより多くが含まれる。非経口投与のため、化合物は、溶液を血液と等張にするため、他の物質、例えば十分な塩またはグルコースを含有してもよい無菌水溶液の形で、最適に用いられる。水溶液は、必要であれば、適切に緩衝しなければならない（好ましくは３〜９のｐＨに）。無菌条件下での適切な非経口配合物の調製は、当業者に周知の標準的薬学的技術によって容易に達成される。

また、化合物または薬学的組成物を、フレーバー剤または着色剤を含有してもよい、即時、遅延、修飾、持続、断続または調節放出適用のための、錠剤、カプセル、膣座薬、エリキシル剤、溶液または懸濁物の形で、経口投与してもよい。

錠剤は、賦形剤、例えば微結晶性セルロース、ラクトース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸水素カルシウムおよびグリシン、崩壊剤、例えばデンプン（好ましくはトウモロコシ、ジャガイモまたはタピオカデンプン）、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスカルメロースナトリウムおよび特定の複合ケイ酸、ならびに顆粒化結合剤、例えばポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、スクロース、ゼラチンおよびアカシアを含有してもよい。さらに、潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ベヘン酸グリセリルおよびタルクが含まれてもよい。また、類似のタイプの固形組成物をゼラチンカプセル中の充填剤として用いてもよい。これに関連して好ましい賦形剤には、ラクトース、デンプン、セルロース、乳糖、または高分子量ポリエチレングリコールが含まれる。水性懸濁物および／またはエリキシル剤には、剤を、多様な甘味剤またはフレーバー剤、着色物質または色素と、乳化剤および／または懸濁剤と、そして希釈剤、例えば水、エタノール、プロピレングリコールおよびグリセリン、ならびにその組み合わせと組み合わせてもよい。

あるいは、化合物または薬学的組成物を座薬またはペッサリーの形で投与してもよいし、あるいはジェル、ヒドロゲル、ローション、溶液、クリーム、軟膏または散布剤の形で局所適用してもよい。また、本発明の化合物を、例えば皮膚パッチの使用によって、皮膚または経皮投与することも可能である。

また、化合物または薬学的組成物を、肺経路、直腸経路、または目の経路によって投与することも可能である。目の使用のため、これらを、等張ｐＨ調整無菌生理食塩水中の微粒子化懸濁物として、または好ましくは等張ｐＨ調整無菌生理食塩水中の溶液として、場合によって塩化ベンジルアルコニウムなどの保存剤と組み合わせて配合してもよい。あるいは、これらをワセリンなどの軟膏中に配合してもよい。

肺投与のため、本発明の化合物の乾燥粉末配合物を調製することがさらに想定される。任意の適切な乾燥粉末吸入装置（ＤＰＩ）、すなわち乾燥粉末薬剤を肺に輸送するビヒクルとして、患者の吸気を利用する吸入デバイスを用いて、本発明の化合物の乾燥粉末配合物を送達してもよい。

皮膚への局所適用のため、例えば、１またはそれより多い以下：ミネラルオイル、流動ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、乳化ろうおよび水の混合物中に懸濁または溶解された活性化合物を含有する適切な軟膏として、化合物または薬学的組成物を配合してもよい。あるいは、これらを、例えば、１またはそれより多い以下：ミネラルオイル、モノステアリン酸ソルビタン、ポリエチレングリコール、流動パラフィン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水の混合物中に懸濁または溶解された適切なローションまたはクリームとして配合してもよい。

典型的には、医師が、個々の被験体に最も適しているであろう実際の投薬量を決定するであろう。任意の特定の個々の被験体のための特定の用量レベルおよび投薬頻度は多様である可能性もあり、そして使用する特定の化合物、その化合物の代謝安定性および作用の長さ、年齢、体重、全身の健康状態、性別、食餌、投与様式および時間、排出速度、薬剤の組み合わせ、特定の状態の重症度、ならびに療法を受けている個々の被験体を含む、多様な要因に応じるであろう。

（およそ７０ｋｇ体重の）ヒトに投与するための、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物を含む、提唱される、しかし限定しない用量の本発明の化合物は、単位用量あたり活性成分０．１μｇ〜１０ｇ、好ましくは０．１ｍｇ〜１ｇ、そしてより好ましくは約２００ｍｇまたはそれより多く（例えば２００〜３００ｍｇまたは２００〜５００ｍｇ）であることも可能である。単位用量を、例えば週１〜４回投与してもよい。用量は投与経路に応じるであろう。患者／被験体の年齢および体重、ならびに治療しようとする状態の重症度に応じて、投薬量にルーチンの変動を行うことが必要でありうることが認識されるであろう。正確な用量および投与経路は、最終的に、主治医または獣医師の判断で決定されるであろう。

１つの態様において、本発明記載の化合物を他の療法剤と組み合わせて用いてもよい。化合物を同じ疾患に対して活性である第二の療法剤と組み合わせて用いる場合、各化合物の用量は、その化合物を単独で用いた際とは異なる可能性もある。他の薬剤（単数または複数）と本発明の化合物の組み合わせは、本発明の化合物を含む薬剤（単数または複数）の投与を含む可能性もある。こうした投与は、同時の／相伴う投与を含んでもよい。しかし、連続した／別個の投与もまた想定される。

好ましくは、本発明の化合物と組み合わせて投与しようとする第二の療法剤は、抗癌薬剤である。本発明の化合物と組み合わせて投与すべき抗癌薬剤は：腫瘍血管新生阻害剤（例えばプロテアーゼ阻害剤、上皮増殖因子受容体キナーゼ阻害剤、または血管内皮増殖因子受容体キナーゼ阻害剤）；細胞傷害性薬剤（例えば代謝拮抗剤、例えばプリンおよびピリミジン類似体代謝拮抗剤）；有糸分裂阻害剤（例えば微小管安定化薬剤または抗有糸分裂アルカロイド）；白金配位錯体；抗腫瘍抗生物質；アルキル化剤（例えばナイトロジェンマスタードまたはニトロソ尿素）；内分泌剤（例えば副腎皮質ステロイド、アンドロゲン、抗アンドロゲン、エストロゲン、抗エストロゲン、アロマターゼ阻害剤、ゴナドトロピン放出ホルモンアゴニスト、またはソマトスタチン類似体）；あるいは腫瘍細胞において過剰発現される、および／または誤って制御されている特定の代謝経路に別の方式で関与する、酵素または受容体をターゲットとする化合物（例えばＡＴＰおよびＧＴＰホスホジエステラーゼ阻害剤、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、プロテインキナーゼ阻害剤（例えばセリン、スレオニンおよびチロシンキナーゼ阻害剤（例えばＡｂｅｌｓｏｎプロテインチロシンキナーゼなど））ならびに多様な増殖因子、その受容体およびキナーゼ阻害剤（例えば上皮増殖因子受容体キナーゼ阻害剤、血管内皮増殖因子受容体キナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖因子阻害剤、インスリン様増殖因子受容体阻害剤および血小板由来増殖因子受容体キナーゼ阻害剤））；メチオニン；アミノペプチダーゼ阻害剤；プロテアソーム阻害剤；シクロオキシゲナーゼ阻害剤（例えばシクロオキシゲナーゼ−１またはシクロオキシゲナーゼ−２阻害剤）；またはトポイソメラーゼ阻害剤（例えばトポイソメラーゼＩ阻害剤またはトポイソメラーゼＩＩ阻害剤）であることも可能である。

本発明の化合物と組み合わせて抗癌薬剤として使用可能なアルキル化剤は、例えばナイトロジェンマスタード（例えばシクロホスファミド、メクロレタミン（クロルメチン）、ウラムスチン、メルファラン、クロラムブシル、イホスファミド、ベンダムスチン、またはトロホスファミド）、ニトロソ尿素（例えばカルムスチン、ストレプトゾシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、プレドニムスチン、ラニムスチン、またはセムスチン）、アルキルスルホネート（例えば、ブスルファン、マンノスルファン、またはトレオスルファン）、アジリジン（例えばヘキサメチルメラミン（アルトレタミン）、トリエチレンメラミン、チオテパ（Ｎ，Ｎ’Ｎ’−トリエチレンチオホスホラミド）、カルボクオン、またはトリアジクオン）、ヒドラジン（例えばプロカルバジン）、トリアゼン（例えばダカルバジン）、またはイミダゾテトラジン（例えばテモゾロミド）であってもよい。

本発明の化合物と組み合わせて、抗癌薬剤として使用可能な白金配位錯体は、例えば、シスプラチン、カルボプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、サトラプラチン、または四硝酸トリプラチンであってもよい。

本発明の化合物と組み合わせて抗癌薬剤として使用可能な細胞傷害性薬剤は、例えば、葉酸類似体代謝拮抗剤（例えばアミノプテリン、メトトレキセート、ペメトレキセド、またはラルチトレキセド）、プリン類似体代謝拮抗剤（例えばクラドリビン、クロファラビン、フルダラビン、６−メルカプトプリン（そのプロドラッグ型アザチオプリンを含む）、ペントスタチン、または６−チオグアニン）、およびピリミジン類似体代謝拮抗剤（例えばシタラビン、デシタビン、５−フルオロウラシル（そのプロドラッグ型カペシタビンおよびテガファーを含む）、フロクスウリジン、ゲムシタビン、エノシタビン、またはサパシタビン）を含む、代謝拮抗剤であってもよい。

本発明の化合物と組み合わせて抗癌薬剤として使用可能な有糸分裂阻害剤は、例えば、タキサン（例えばドセタキセル、ラロタキセル、オルタタキセル、パクリタキセル／タキソール、またはテセタキセル）、ビンカアルカロイド（例えばビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンフルニン、ビンデシン、またはビノレルビン）、エポチロン（例えばエポチロンＡ、エポチロンＢ、エポチロンＣ、エポチロンＤ、エポチロンＥ、またはエポチロンＦ）あるいはエポチロンＢ類似体（例えばイキサベピロン／アザエポチロンＢ）であってもよい。

本発明の化合物と組み合わせた抗癌薬剤として使用可能な抗腫瘍抗生物質は、例えばアントラサイクリン（例えばアクラルビシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、アムルビシン、ピラルビシン、バルルビシン、またはゾルビシン）、アントラセンジオン（例えばミトキサントロン、またはピキサントロン）またはストレプトミセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）から単離された抗腫瘍抗生物質（例えばアクチノマイシン（アクチノマイシンＤを含む）、ブレオマイシン、マイトマイシン（マイトマイシンＣを含む）、またはプリカマイシン）であってもよい。

本発明の化合物と組み合わせて抗癌薬剤として使用可能なチロシンキナーゼ阻害剤は、例えば、アキシチニブ、ボスチニブ、セディラニブ、ダサチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ニロチニブ、セマキサニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、またはバンデタニブであってもよい。

本発明の化合物と組み合わせて抗癌薬剤として使用可能なトポイソメラーゼ阻害剤は、例えば、トポイソメラーゼＩ阻害剤（例えばイリノテカン、トポテカン、カンプトテシン、ベロテカン、ルビテカン、またはラメラリンＤ）またはトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えばアムサクリン、エトポシド、リン酸エトポシド、テニポシド、またはドキソルビシン）であってもよい。

さらなる抗癌薬剤を、本発明の化合物と組み合わせて用いてもよい。抗癌薬剤は、ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）、タモキシフェン、アムサクリン、ベキサロテン、エストラムスチン、イロフルベン、トラベクテジン、セツキシマブ、パニツムマブ、トシツモマブ、アレムツズマブ、ベバシズマブ、エドレコロマブ、ゲムツズマブ、アルボシジブ、セリシクリブ、アミノレブリン酸、アミノレブリン酸メチル、エファプロキシラル、ポルフィマーナトリウム、タラポルフィン、テモポルフィン、ベルテポルフィン、アリトレチノイン、トレチノイン、アナグレリド、亜ヒ酸、アトラセンタン、ボルテゾミブ、カルモフール、セレコキシブ、デメコルシン、エレスクロモル、エルサミトルシン、エトグルシド、ロニダミン、ルカントン、マソプロコール、ミトブロニトール、ミトグアゾン、ミトタン、オブリメルセン、オマセタキシン、シチマジーン、セラデノベック、テガファー、テストラクトン、チアゾフリン、チピファルニブ、およびボリノスタットのような生物学的または化学的分子を含んでもよい。

また、増殖性疾患に関与する癌または腫瘍マーカー／因子／サイトカインに対して向けられる、抗体、抗体断片、抗体構築物（例えば一本鎖構築物）、および／または修飾抗体（ＣＤＲ移植抗体、ヒト化抗体、「完全ヒト化」抗体などのようなもの）のような生物学的薬剤を、本発明の化合物との併用療法アプローチで使用してもよい。こうした生物学的分子の例は、抗ＨＥＲ２抗体（例えばトラスツズマブ、ハーセプチン（登録商標））、抗ＣＤ２０抗体（例えばリツキシマブ、リツキサン（登録商標）、マブテラ（登録商標）、レディタクス（登録商標））、抗ＣＤ１９／ＣＤ３構築物（例えばＥＰ−Ａ−１ ０７１ ７５２を参照されたい）および抗ＴＮＦ抗体（例えばＴａｙｌｏｒら， Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ， Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ， ２００３， ３（３）， ３２３−３２８を参照されたい）である。本発明の化合物との併用療法アプローチにおいて使用されるさらなる抗体、抗体断片、抗体構築物および／または修飾抗体は： Ｔａｙｌｏｒら， Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ， Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ， ２００３， ３（３）， ３２３−３２８；またはＲｏｘａｎａら， Ｍａｅｄｉｃａ， ２００６， １（１）， ６３−６５に見出されうる。

上記の組み合わせは、薬学的配合物の形で使用するために好適に提示されうる。こうした組み合わせの個々の構成要素を、連続してまたは同時に／相伴ってのいずれかで、別個のまたは組み合わせた薬学的配合物中で、任意の好適な経路によって、投与してもよい。投与が連続である場合、本発明の化合物または第二の療法剤のいずれが先に投与されてもよい。投与が同時である場合、組み合わせを同じまたは異なる薬学的組成物中のいずれで投与してもよい。同じ配合物中で組み合わせる場合、２つの化合物は安定で、そして互いにおよび配合物中の他の構成要素と適合しなければならないことが認識されるであろう。別個に配合される場合、これらは任意の好適な配合で提供されてもよく、好適には、当該技術分野のこうした化合物に関して知られるのと同じ方式で提供されてもよい。

別の態様において、本発明の化合物を物理的療法、例えば放射線療法と組み合わせて投与する。放射線療法は、化合物投与の前に、その後に、またはそれと同時に開始されてもよい。例えば、放射線療法は、化合物投与の１〜１０分後、１〜１０時間後または２４〜７２時間後に開始されてもよい。なお、これらの時間枠は、限定として解釈されないものとする。被験体は放射線、好ましくはガンマ線に曝露され、それによって放射線は、単回線量、あるいは数時間、数日および／または数週にわたって投与される多数回線量を提供されてもよい。ガンマ線は、標準被曝量および措置を用いた標準放射線療法プロトコルにしたがって、送達されてもよい。理論によって束縛されることなく、本発明の化合物を用いて、細胞、特に癌または腫瘍細胞のような望ましくない増殖性／過剰増殖性細胞を、こうした物理的療法、例えば放射線療法により感受性にすることも可能である。

したがって、本発明は、化合物または薬学的組成物が、抗増殖薬剤、抗癌薬剤、細胞分裂停止薬剤、細胞傷害性薬剤および／または放射線療法と組み合わせて投与される、癌の治療または防止において使用するための、式（Ｉ）、（ＩＩ）もしくは（ＩＩＩ）の化合物またはその薬学的に許容されうる塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ、あるいは薬学的に許容されうる賦形剤と組み合わされた前述の実体いずれかを含む薬学的組成物に関する。

さらに、本明細書上記の特定の多剤耐性癌を含む多剤耐性癌の治療または防止のため、本明細書において上記のように併用療法を使用することが特に想定される。
被験体または患者、例えば治療または防止の必要がある被験体は、動物、脊椎動物、哺乳動物、げっ歯類（例えばモルモット、ハムスター、ラット、マウス）、ネズミ（例えばマウス）、イヌ科動物（ｃａｎｉｎｅ）（例えばイヌ）、ネコ科動物（ｆｅｌｉｎｅ）（例えばネコ）、ウマ（ｅｑｕｉｎｅ）（例えばウマ）、霊長類、サル（ｓｉｍｉａｎ）（例えばサルまたは類人猿）、サル（ｍｏｎｋｅｙ）（例えばマーモセット、ヒヒ）、類人猿（例えばゴリラ、チンパンジー、オランウータン、テナガザル）、またはヒトであってもよい。用語「動物」、「哺乳動物」等は、当該技術分野に周知であり、そして例えばＷｅｈｎｅｒおよびＧｅｈｒｉｎｇ（１９９５；Ｔｈｉｅｍｅ Ｖｅｒｌａｇ）より推測可能である。本発明の関連において、経済的に、農学的に、または科学的に重要である動物が、治療されることが特に想定される。科学的に重要な生物には、限定されるわけではないが、マウス、ラット、ウサギ、キイロショウジョウバエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ）のようなショウジョウバエ、およびエレガンス線虫（Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓ）のような線虫が含まれる。農学的に重要な動物の限定されない例は、ヒツジ、ウシおよびブタであり、一方、例えばネコおよびイヌは、経済的に重要な動物と見なされうる。好ましくは、被験体／患者は哺乳動物である。より好ましくは、被験体／患者はヒトである。

用語「障害または疾患の治療」は、本明細書において、例えば癌の治療の場合、当該技術分野において周知である。「障害または疾患の治療」は、障害または疾患が患者／被験体で診断されていることを暗示する。障害または疾患を患うと推測される患者／被験体は、典型的には、当業者が特定の病的状態に容易に起因させうる（すなわち障害または疾患の診断を行う）、特定の臨床および／または病的症状を示す。

「障害または疾患の治療」は、例えば、障害または疾患の進行の停止（例えば症状の悪化がまったくない）あるいは障害または疾患の進行の遅延（進行の停止が一過性の性質のもののみである場合）を導くことも可能である。「障害または疾患の治療」はまた、障害または疾患を患う被験体／患者の部分的反応（例えば症状の寛解）または完全反応（例えば症状の消失）を導くことも可能である。障害または疾患の「寛解」は、例えば、障害または疾患の進行の停止、あるいは障害または疾患の進行の遅延を導くことも可能である。こうした部分的または完全反応の後には、再発が続くこともありうる。被験体／患者が、治療に対して広い範囲の反応（例えば、本明細書において上述するような、例示的な反応）を経験しうることを理解すべきである。

障害または疾患の治療は、とりわけ、治療処置（好ましくは、完全反応を導き、そして最終的に障害または疾患の治癒を導く）および緩和治療（症状軽減を含む）を含んでもよい。

また、用語「障害または疾患の防止」は、本明細書において、例えば癌の防止の場合、当該技術分野に周知である。例えば、本明細書に定義するような障害または疾患を患う傾向があると推測される患者／被験体は、特に、障害または疾患の防止から利益を受けうる。被験体／患者は、限定されるわけではないが、遺伝的素因を含む、障害または疾患に対する感受性または素因を有する可能性もある。こうした素因は、例えば遺伝子マーカーまたは表現型指標を用いた標準的アッセイによって決定可能である。本発明にしたがって防止しようとする障害または疾患は、患者／被験体において、診断されていないか、あるいは診断不能である（例えば患者／被験体がいかなる臨床的または病的症状も示さない）ことが理解されるものとする。したがって、用語「防止」は、任意の臨床および／または病的症状が診断されるかまたは決定される、あるいは主治医によって診断されるかまたは決定されることが可能であるより前の、本発明の化合物の使用を含む。

本明細書において、特許出願および製造者のマニュアルを含む多くの文書が引用される。これらの文書の開示は、本発明の特許可能性に対して関連するとは見なされないが、その全体が本明細書に援用される。より具体的には、すべての言及される文書は、各個々の文書が具体的にそして個々に、援用されると示されるのと同じ度合いに、援用される。

本発明はここで、以下の実施例によって記載され、この実施例は単に例示であり、そして本発明の範囲を限定するとは見なされないものとする。

一般的な見解
融点をＧＡＬＬＥＮＫＡＭＰ装置上で記録し、そして修正はしていない。ＩＲスペクトルを、ＡＴＲサンプリング装置を備えたＰＥＲＫＩＮ−ＥＬＭＥＲ Ｓｐｅｃｔｒｕｍ Ｏｎｅ ＦＴ−ＩＲ分光光度計上で記録した。核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルを、ＢＲＵＫＥＲ Ａｖａｎｃｅ ３００分光光度計上で、示される通りの条件下で記録した。化学シフトを、^１Ｈおよび^１３Ｃに関する内部標準として、テトラメチルシランから１００万分の１（δ）低磁場で示す。ＶＡＲＩＡＮ ＭＡＴ ３１１Ａ（ＥＩ）を用いて、質量分析を記録した。ＰＥＲＫＩＮＥＬＭＥＲ ２４００ ＣＨＮ元素分析装置を用いて、微量分析を行った。すべての試験化合物は、元素分析によると＞９５％純粋である。クロマトグラフィーには、ＭＥＲＣＫシリカゲル６０（２３０〜４００メッシュ）を用いた。すべての出発化合物をＡＬＤＲＩＣＨから購入し、そしてさらなる精製なしに用いた。

実施例１：１−メチル−５−（３−アミノ−４−メトキシフェニル）−４−（３−クロロ−４，５−ジメトキシフェニル）−イミダゾールビス（ヒドロクロリド）（５ｂｘ２ＨＣｌ）の合成
１）Ｎ−［（トルエン−４−スルホニル）−（３−クロロ−４，５−ジメトキシフェニル）メチル］ホルムアミド３ａ
５−クロロベラトルムアルデヒド（５．７ｇ、２３．４ｍｍｏｌ）、パラ−トルエンスルフィン酸（３．０ｇ、１９．３ｍｍｏｌ）およびカンファースルホン酸（１１０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）をホルムアミド（１０ｍＬ）で処理した。６５℃に加熱した際、反応混合物は溶液に変わり、そして２時間後、産物は沈殿し始めた。１６時間攪拌した後、沈殿物をろ過し、メタノールで洗浄し、そして真空中で乾燥させた。

２）３−クロロ−４，５−ジメトキシフェニル（トシル）メチルイソシアニド４ａ
化合物３ａ（４．５７ｇ、１１．９２ｍｍｏｌ）を、乾燥ジメトキシエタン（１００ｍＬ）中に懸濁し、そして−１０℃に冷却した。ＰＯＣｌ_３（３．４ｍＬ、３６．１ｍｍｏｌ）を添加し、そしてジメトキシエタン（１０ｍＬ）中のトリエチルアミン（８．３ｍＬ、５９．５ｍｍｏｌ）の混合物を反応混合物にゆっくりと滴下した。−５℃で２時間攪拌した後、反応混合物を氷水に注いだ。水性相を酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和水性ＮａＨＣＯ_３および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中で濃縮した。一晩冷蔵すると（４℃）黄色固体が結晶化し、これを収集して、そして真空中で乾燥させた。

３）１−メチル−４−（３−クロロ−４，５−ジメトキシフェニル）−５−（４−メトキシ−３−ニトロフェニル）イミダゾール５ａ。
エタノール（１５ｍＬ）中の４−メトキシ−３−ニトロベンズアルデヒド（７６ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）および３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２６０μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）の混合物を酢酸（１５０μＬ）で処理し、そして２時間還流した。室温に冷却した後、ジメトキシエタン（１０ｍＬ）中に溶解した化合物４ａ（１５３ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物をさらに３時間還流した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって精製した。

４）１−メチル−５−（３−アミノ−４−メトキシフェニル）−４−（３−クロロ−４，５−ジメトキシフェニル−イミダゾールビス（ヒドロクロリド） ５ｂｘ２ＨＣｌ
化合物５ａ（１０９ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（７．５ｍＬ）中に溶解した。Ｚｎ粉末（１０７ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）を添加した後、テトラヒドロフラン（１ｍＬ）中の濃ＨＣｌ（２３０μＬ）の混合物を添加した。室温で１５分間攪拌した後、反応混合物を水中に注ぎ、そして水性ＮａＨＣＯ_３で処理して、ｐＨ ８を採用した。水相を酢酸エチルで抽出し、そして有機相をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中でろ過物を濃縮した。こうして得た残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０、５％メタノール／酢酸エチル、Ｒ_ｆ＝０．６６）によって精製し、未精製５ｂを得た。この未精製産物をジクロロメタン（５ｍＬ）中に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）で処理した。１５分間攪拌した後、揮発性物質を除去し、そしてエタノール／ｎ−ヘキサン混合物から油性残渣を再結晶化させて、５ｂのビス（ヒドロクロリド）塩が残された。

実施例２：本発明にしたがったさらなる化合物の合成
１）Ｎ−［（トルエン−４−スルホニル）−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシフェニル）メチル］ホルムアミド３ｂ
３ａの合成と同様、化合物３ｂ（４．７８ｇ、１０．８１ｍｍｏｌ、５６％）を５−ブロモベラトルムアルデヒド（５．６７ｇ、２３．１４ｍｍｏｌ）、パラ−トルエンスルフィン酸（３ｇ、１９．２９ｍｍｏｌ）、カンファースルホン酸（１１０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）およびホルムアミド（１０ｍＬ）から得た；無色固体。

２）Ｎ−［（トルエン−４−スルホニル）−（３，４−ジメトキシ−５ ニトロフェニル）メチル］ホルムアミド３ｃ
３ａの合成と同様、化合物３ｃ（２．６３ｇ、６．６８ｍｍｏｌ、３５％）を５−ニトロベラトルムアルデヒド（４．８５ｇ、２２．９９ｍｍｏｌ）、パラ−トルエンスルフィン酸（２．９６ｇ、１９．０３ｍｍｏｌ）、カンファースルホン酸（１１０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）およびホルムアミド（１０ｍＬ）から得た；無色固体。

３）３−ブロモ−４，５−ジメトキシフェニル（トシル）メチルイソシアニド４ｂ
化合物３ｂ（４．７５ｇ、１０．７５ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＥ（１００ｍＬ）中に懸濁し、そして−１０℃に冷却した。ＰＯＣｌ_３（３．１ｍＬ、３３．１ｍｏｌ）を添加し、そしてＤＭＥ（１０ｍＬ）中のＥｔ_３Ｎ（７．５ｍＬ、５３．８ｍｍｏｌ）の混合物を反応混合物にゆっくりと滴下した。−５℃で２時間攪拌した後、反応混合物を氷水に注いだ。水相を酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和水性ＮａＨＣＯ_３および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中で濃縮した。一晩冷蔵することによって、残渣から褐色固体が結晶化し、これを収集し、そして真空中で乾燥させた。

４）３，４，−ジメトキシ−５−ニトロフェニル（トシル）メチルイソシアニド４ｃ
化合物３ｃ（２．６３ｇ、６．６８ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＥ（１００ｍＬ）中に懸濁し、そして−１０℃に冷却した。ＰＯＣｌ_３（３．７８ｍＬ、４０．４ｍｏｌ）を添加し、そしてＤＭＥ（１０ｍＬ）中のＥｔ_３Ｎ（７．５ｍＬ、６６．６ｍｍｏｌ）の混合物を反応混合物にゆっくりと滴下した。−５℃で２時間攪拌した後、反応混合物を氷水に注いだ。水相を酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和水性ＮａＨＣＯ_３および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中で濃縮した。一晩冷蔵することによって、残渣から黄色固体が結晶化し、これを収集し、そして真空中で乾燥させた。

５）１−メチル−４−（３’−クロロ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（３”−フルオロ−４”−メトキシフェニル）−イミダゾール５ｃ
化合物５ａの合成と同様、沸騰エタノール（１５ｍＬ）中の３−フルオロ−４−メトキシベンズアルデヒド（６５ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２６０μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）および酢酸（１５０μＬ）からイミン中間体を得て、これをＤＭＥ（１０ｍＬ）中に溶解した化合物４ａ（１５３ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）で処理して、化合物５ｃを調製した。ワークアップ後、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって残渣を精製した。

６）１−メチル−４−（３’−クロロ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（３”−フルオロ−４”−メトキシフェニル）−イミダゾールヒドロクロリド ５ｃｘＨＣｌ
化合物５ｃ（１５０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）で処理した。１５分間攪拌した後、溶媒を除去し、そして油性残渣をＤＣＭ／ｎ−ヘキサン混合物から再結晶化して、５ｃの塩酸塩を得た。

７）１−メチル−４−（３’−クロロ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（４”−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェニル）−イミダゾール５ｄ
化合物５ａの合成と同様、沸騰エタノール（１５ｍＬ）中の４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノベンズアルデヒド（６３ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２６０μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）および酢酸（１５０μＬ）からイミン中間体を得て、これをＤＭＥ（１０ｍＬ）中に溶解した化合物４ａ（１５３ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）で処理して、化合物５ｄを調製した。ワークアップ後、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって残渣を精製した。

８）１−メチル−４−（３’−クロロ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（４”−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェニル）−イミダゾールビス（ヒドロクロリド） ５ｄｘ２ＨＣｌ
化合物５ｄ（１４０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）で処理した。１０分間攪拌した後、溶媒を蒸発させ、そして残渣をエタノール／ｎ−ヘキサンから結晶化させた。

９）１−メチル−４−（３’−クロロ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（４”−エトキシ−３”−ニトロフェニル）−イミダゾール５ｅ
エタノール（１５ｍＬ）中の４−エトキシ−３−ニトロベンズアルデヒド（８２ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）および３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２６０μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）の混合物をＡｃＯＨ（１５０μＬ、２．６３ｍｍｏｌ）で処理し、そして２時間還流した。室温に冷却した後、４ａ（１５３ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物を５時間還流した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０、酢酸エチル／メタノール ９：１）によって精製し、橙色油としての産物を得た。

１０）１−メチル−５−（３”−アミノ−４”−エトキシフェニル）−４−（３’−クロロ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−イミダゾール ５ｆｘ２ＨＣｌ
化合物５ｅ（１４０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（７．５ｍＬ）中に溶解した。Ｚｎ粉末（１１０ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）を添加し、その後、ＴＨＦ（１ｍＬ）中の濃ＨＣｌ（２４３μＬ）の混合物を添加した。室温で１５分間攪拌した後、反応混合物を水上に注ぎ、そして水性ＮａＨＣＯ_３でおよそｐＨ ８に塩基性化した。水相を酢酸エチルで抽出し、そして有機相をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そしてろ過物を真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０、１０％メタノール／酢酸エチル、Ｒ_ｆ＝０．６３）によって精製して、アニリン中間体を得た。この化合物をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）で処理した。１５分間攪拌した後、溶媒を除去し、そして残渣をＤＣＭ／ｎ−ヘキサン混合物から再結晶化させた。

１１）１−メチル−４−（３’−クロロ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（３”−フルオロ−４”−エトキシフェニル）−イミダゾール ５ｇｘＨＣｌ
エタノール（１５ｍＬ）中の３−フルオロ−４−エトキシベンズアルデヒド（１２４ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）および３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（４６０μＬ、３．７６ｍｍｏｌ）の混合物をＡｃＯＨ（２６０μＬ、４．６３ｍｍｏｌ）で処理し、そして２時間還流した。室温に冷却した後、４ａ（２７０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物を５時間還流した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０、酢酸エチル／メタノール９５：５）によって精製して、無色油としてのイミダゾールを得た。この油をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そしてジオキサン（１ｍＬ）中の３Ｍ ＨＣｌで処理した。５分間攪拌した後、溶媒を蒸発させ、そしてＤＣＭ／ｎ−ヘキサンから結晶化させた。

１２）１−メチル−４−（３’−クロロ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３”−クロロインドル−５”−イル）イミダゾール５ｉ
５ａの合成と同様、沸騰エタノール（１５ｍＬ）中のＮ−メチル−３−クロロインドル−５−カルボキサルデヒド（８１ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２６０μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）および酢酸（１５０μＬ）のイミンを４ａ（１５３ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）で処理して、化合物５ｉを得た。

１３）１−メチル−４−（３’−クロロ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３”−クロロインドル−５”−イル）−イミダゾール−ヒドロクロリド ５ｉｘＨＣｌ
化合物５ｉ（１６０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）で処理した。室温で１０分間攪拌した後、溶媒を真空中で蒸発させて、そして残渣をＤＣＭ／ｎ−ヘキサンから再結晶化させた。

１４）１−メチル−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（４”−メトキシ−３”−ニトロフェニル）−イミダゾール６ａ
エタノール（１５ｍＬ）中の４−メトキシ−３−ニトロベンズアルデヒド（７６ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）および３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２６０μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）の混合物をＡｃＯＨ（１５０μＬ）で処理し、そして２時間還流した。室温に冷却した後、ＤＭＥ（１０ｍＬ）中に溶解した化合物４ｂ（１７２ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物を３時間還流した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０；酢酸エチルから５％メタノール／酢酸エチルで溶出）によって精製した。

１５）１−メチル−５−（３”−アミノ−４”−メトキシフェニル）−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−イミダゾール６ｂ
５ｂと同様、化合物６ａ（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（８．５ｍＬ）中でＺｎ粉末（７２ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）および濃ＨＣｌ（１６μＬ）によって還元した。ワークアップ後、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０；酢酸エチル／メタノール９５：５）によって精製した。

１６）１−メチル−５−（３”−アミノ−４”−メトキシフェニル）−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−イミダゾールビス（ヒドロクロリド） ６ｂｘ２ＨＣｌ
化合物６ｂ（６１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ中に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）で処理した。室温で１５分間攪拌した後、溶媒を除去し、そして残渣をエタノール／ｎ−ヘキサン混合物から再結晶化させた。

１７）１−メチル−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（３”−フルオロ−４”−メトキシフェニル）−イミダゾール６ｃ
５ａの合成と同様、沸騰エタノール（１５ｍＬ）中の３−フルオロ−４−メトキシベンズアルデヒド（６５ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２６０μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）および酢酸（１５０μＬ）からイミン中間体を得て、これをＤＭＥ（１０ｍＬ）中に溶解した化合物４ｂ（１７２ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）で処理して、化合物６ｃを調製した。ワークアップ後、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０；酢酸エチルから５％メタノール／酢酸エチルで溶出）によって精製した。

１８）１−メチル−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（３”−フルオロ−４”−メトキシフェニル）−イミダゾールヒドロクロリド ６ｃｘＨＣｌ
化合物６ｃ（１３５ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）で処理した。１５分間攪拌した後、溶媒を除去し、そして油性残渣をＤＣＭ／ｎ−ヘキサン混合物から再結晶化させ、塩酸塩を得た。

１９）１−メチル−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（４”−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェニル）−イミダゾール６ｄ
５ａの合成と同様、沸騰エタノール（１５ｍＬ）中の４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノベンズアルデヒド（６３ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２６０μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）および酢酸（１５０μＬ）からイミン中間体を得て、これをＤＭＥ（１０ｍＬ）中に溶解した化合物４ｂ（１７２ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）で処理して、化合物６ｄを調製した。ワークアップ後、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって精製した。

２０）１−メチル−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（４”−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェニル）−イミダゾールビス（ヒドロクロリド） ６ｄｘ２ＨＣｌ
化合物６ｄ（１４０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）をＤＣＭ中に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）で処理した。室温で１５分間攪拌した後、溶媒を除去し、そして残渣をエタノール／ｎ−ヘキサン混合物から再結晶化させた。

２１）１−メチル−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（４”−エトキシ−３”−ニトロフェニル）−イミダゾール６ｅ
エタノール（１５ｍＬ）中の４−エトキシ−３−ニトロベンズアルデヒド（８２ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）および３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２６０μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）の混合物をＡｃＯＨ（１５０μＬ、２．６３ｍｍｏｌ）で処理して、そして２時間還流した。室温に冷却した後、４ｂ（１７２ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物を５時間還流した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０、酢酸エチル／メタノール９：１）によって精製して、橙色油としての産物を得た。

２２）１−メチル−５−（３”−アミノ−４”−エトキシフェニル）−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−イミダゾール ６ｆｘ２ＨＣｌ
化合物６ｅ（１７０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（７．５ｍＬ）中に溶解した。Ｚｎ粉末（１２０ｍｇ、１．８３ｍｍｏｌ）を添加し、その後、ＴＨＦ（１ｍＬ）中の濃ＨＣｌ（２６４μＬ）の混合物を添加した。室温で１５分間攪拌した後、反応混合物を水上に注ぎ、そして水性ＮａＨＣＯ_３でおよそｐＨ ８に塩基性化した。水相を酢酸エチルで抽出し、そして有機相をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そしてろ過物を真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０、１０％メタノール／酢酸エチル、Ｒ_ｆ＝０．６４）によって精製して、アニリン中間体を得た。この化合物をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）で処理した。１５分間攪拌した後、溶媒を除去し、そして残渣をＤＣＭ／ｎ−ヘキサン混合物から再結晶化させた。

２３）１−メチル−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（３”−フルオロ−４”−エトキシフェニル）−イミダゾール ６ｇｘＨＣｌ
エタノール（１５ｍＬ）中の３−フルオロ−４−エトキシベンズアルデヒド（７１ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）および３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２６０μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）の混合物をＡｃＯＨ（１５０μＬ、２．６３ｍｍｏｌ）で処理し、そして２時間還流した。室温に冷却した後、４ｂ（１７２ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物を５時間還流した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０、酢酸エチル／メタノール９：１）によって精製した。生じた無色油をＤＣＭ（５ｍＬ） 中に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサンで処理した。反応混合物を室温で１０分間攪拌し、そして溶媒を蒸発させた。残渣をＤＣＭ／ｎ−ヘキサンから再結晶化させた。

２４）１−メチル−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３”−クロロインドル−５”−イル）−イミダゾール６ｉ
５ａの合成と同様、沸騰エタノール（１５ｍＬ）中のＮ−メチル−３−クロロインドル−５−カルボクサルデヒド（８１ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２６０μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）および酢酸（１５０μＬ）のイミンを４ｂ（１７０ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）で処理して、化合物６ｉを得た。ワークアップ後、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって精製した。

２５）１−メチル−４−（３’−ブロモ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３”−クロロインドル−５”−イル）−イミダゾール−ヒドロクロリド ６ｉｘＨＣｌ
化合物６ｉ（１３０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）で処理した。室温で１５分間攪拌した後、溶媒を真空中で蒸発させて、そしてエタノール／ｎ−ヘキサンから残渣を再結晶化させた。

２６）４−（３’，４’−ジメトキシ−５’−ニトロフェニル）−５−（４”−メトキシ−３”−ニトロフェニル）−オキサゾール７ａ
化合物４ｃ（１７０ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、４−メトキシ−３−ニトロベンズアルデヒド（８２ｍｇ ０．７４ｍｍｏｌ）および無水Ｋ_２ＣＯ_３（５９０ｍｇ、４．３ｍｍｏｌ）をＤＭＥ／メタノール（１：３、２０ｍＬ）中に溶解し、そして２時間攪拌した。溶液を真空中で濃縮し、酢酸エチル中に取り、水および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そしてろ過物を真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって精製した。

２７）４−（３’，４’−ジメトキシ−５’−ニトロフェニル）−５−（４”−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェニル）−オキサゾール７ｂ
化合物４ｃ（１７０ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノベンズアルデヒド（６７ｍｇ ０．４５ｍｍｏｌ）および無水Ｋ_２ＣＯ_３（５９０ｍｇ、４．３ｍｍｏｌ）をＤＭＥ／メタノール（１：３、２０ｍＬ）中に溶解し、そして２時間攪拌した。溶液を真空中で濃縮し、酢酸エチル中に取り、水および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そしてろ過物を真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって精製した。

２８）１−メチル−５−（３”−ベンジルオキシ−４”−メトキシフェニル）−４−（３’，４’−ジメトキシ−５’−ニトロフェニル）イミダゾール７ｃ
エタノール（１５ｍＬ）中の３−ベンズオキシ−４−メトキシベンズアルデヒド（１０２ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）および３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２６０μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）をＡｃＯＨ（１５０μＬ、２．６３ｍｍｏｌ）で処理し、そして２時間還流した。室温に冷却した後、ＤＭＥ（５ｍＬ）中に溶解した化合物４ｃ（１５８ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物を３時間還流した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって精製した。

２９）１−メチル−４−（３’，４’−ジメトキシ−５’−ニトロフェニル）−５−（３”−フルオロ−４”−メトキシフェニル）−イミダゾール７ｄ
エタノール（１５ｍＬ）中の３−フルオロ−４−メトキシベンズアルデヒド（７７ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）および３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２６０μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）の混合物を、ＡｃＯＨ（１５０μＬ、２．６３ｍｍｏｌ）で処理し、そして２時間還流した。室温に冷却した後、ＤＭＥ（５ｍＬ）中に溶解した化合物４ｃ（１５８ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物を３時間還流した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって精製した。

３０）Ｎ−メチル−３−クロロインドル−５−カルバルデヒド７ｅ’
Ｎ−メチルインドル−５−カルバルデヒド（４００ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を乾燥アセトニトリル（１０ｍＬ）中に溶解し、そしてＮ−クロロスクシンイミド（４００ｍｇ、３．０２ｍｍｏｌ）で処理し、その際、溶液は赤色に変わった。反応混合物を室温で２０時間攪拌した。溶媒を真空中で除去し、そして残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって精製した。

３１）１−メチル−４−（３’，４’−ジメトキシ−５’−ニトロフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３”−クロロインドル−５”−イル）−イミダゾール７ｅ
エタノール（１５ｍＬ）中のＮ−メチル−５−クロロインドル−３−カルバルデヒド（８１ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）および３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２６０μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）をＡｃＯＨ（１５０μＬ、２．６３ｍｍｏｌ）で処理し、そして２時間還流した。室温に冷却した後、化合物４ｃ（１７０ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物を３時間還流した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルで希釈し、水および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって精製した。

３２）４−（３’−アミノ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（３”−アミノ−４”−メトキシフェニル）−オキサゾール８ａ
化合物７ａ（１２０ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）をメタノール（２０ｍＬ）中に懸濁し、そしてギ酸アンモニウム（５９０ｍｇ、９．３７ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（５％、１８０ｍｇ）で処理した。懸濁物を２時間還流し、そして室温に冷却した後、混合物をセライト上でろ過し、ろ過物を真空中で濃縮し、そして残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって精製した。

３３）４−（３’−アミノ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（３”−アミノ−４”−メトキシフェニル）−オキサゾールビス（ヒドロクロリド） ８ａｘ２ＨＣｌ
化合物８ａ（６０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）で処理した。反応混合物を室温で１５分間攪拌し、そして形成された無色沈殿物を収集し、ＤＣＭで洗浄し、そして真空中で乾燥させた。

３４）４−（３’−アミノ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（４”−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェニル）−オキサゾール８ｂ
化合物７ｂ（１００ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）をメタノール（２０ｍＬ）中に懸濁し、そしてギ酸アンモニウム（５９０ｍｇ、９．３７ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（５％、１８０ｍｇ）で処理した。懸濁物を２時間還流し、そして室温に冷却した後、混合物をセライト上でろ過し、ろ過物を真空中で濃縮し、そして残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって精製した。

３５）４−（３’−アミノ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（４”−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェニル）−オキサゾールビス（ヒドロクロリド） ８ｂｘ２ＨＣｌ
化合物８ｂ（５８ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）で処理した。反応混合物を室温で１５分間攪拌し、溶媒を除去し、そして形成された無色固体をＤＣＭ／ｎ−ヘキサンから再結晶化させた。

３６）１−メチル−４−（３’−アミノ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（３”−ヒドロキシ−４−メトキシフェニル）−イミダゾールビス（ヒドロクロリド） ８ｃｘ２ＨＣｌ
化合物７ｃ（１２０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）をメタノール（２０ｍＬ）中に溶解し、そしてギ酸アンモニウム（５９０ｍｇ、９．３７ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（５％、１８０ｍｇ）で処理した。懸濁物を２時間還流し、そして室温に冷却した後、混合物をセライト上でろ過し、ろ過物を真空中で濃縮し、そして残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して８ｃを得た（シリカゲル６０、酢酸エチル／メタノール９５：５、Ｒ_ｆ＝０．２５）。化合物８ｃをＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）で処理した。反応混合物を室温で１５分間攪拌した。溶媒を除去し、そしてＤＣＭを用いた反復共沸蒸留によって、残渣をジオキサンから遊離させた。残った固体をエタノール／ｎ−ヘキサンから再結晶化させた。

３７）１−メチル−４−（３’−アミノ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（３”−フルオロ−４−メトキシフェニル）−イミダゾール８ｄ
化合物７ｄ（１２０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）をメタノール（２０ｍＬ）中に溶解し、そしてギ酸アンモニウム（５９０ｍｇ、９．３７ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（５％、１８０ｍｇ）で処理した。懸濁物を２時間還流し、そして室温に冷却した後、混合物をセライト上でろ過し、ろ過物を真空中で濃縮し、そして残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって精製した。

３８）１−メチル−４−（３’−アミノ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（３”−フルオロ−４−メトキシフェニル）−イミダゾールビス（ヒドロクロリド） ８ｄｘ２ＨＣ１
化合物８ｄ（８０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）で処理した。反応混合物を室温で１５分間攪拌した。溶媒を除去し、そしてＤＣＭを用いた反復共沸蒸留によって、残渣をジオキサンから遊離させた。残った固体をエタノール／ｎ−ヘキサンから再結晶化させた。

３９）１−メチル−４−（３’−アミノ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３”−クロロインドル−５”−イル）−イミダゾール８ｅ
化合物７ｅ（１２０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（７．５ｍＬ）中に溶解し、そしてＴＨＦ（１ｍＬ）中のＺｎ粉末（９０ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）および濃ＨＣｌ（２００μＬ）を添加することによって還元した。ワークアップ後、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって精製した。

４０）１−メチル−４−（３’−アミノ−４’，５’−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３”−クロロインドル−５”−イル）−イミダゾールトリス（ヒドロクロリド） ８ｅｘ２ＨＣｌ
化合物８ｅ（７０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、そして３Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１ｍＬ）で処理した。反応混合物を室温で１５分間攪拌した。溶媒を除去し、そしてＤＣＭを用いた反復共沸蒸留によって、残渣をジオキサンから遊離させた。残った固体をエタノール／ｎ−ヘキサンから再結晶化させた。

４１）（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−（ｐ−トルエンスルホニル）メチルイソシアニド４ｄ
３−フルオロ−４−メトキシベンズアルデヒド（３．９ｇ、２２．９４ｍｍｏｌ）、ｐ−トルエンスルフィン酸（３．０ｇ、１９．２９ｍｍｏｌ）、カンファースルホン酸（１１０ｍｇ）およびホルムアミド（１０ｍＬ）の混合物を６５℃で１６時間攪拌した。氷槽で冷却後、混合物を水で処理し、そして生じた沈殿物を分離し、わずかなメタノールで洗浄し、そして真空中で乾燥させて、Ｎ−置換ホルムアミド（１．９ｇ、５．６４ｍｍｏｌ、３０％）を残した。この化合物を乾燥ＤＭＥ（５０ｍＬ）中に溶解し、−５℃に冷却し、そしてＰＯＣｌ_３（１．７ｍＬ）およびＥｔ_３Ｎ（４．１５ｍＬ）で処理した。反応混合物を−５℃で２時間攪拌した。生じた懸濁物を氷水上に注ぎ、そして酢酸エチルで抽出した。有機相を水性ＮａＨＣＯ_３および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そしてろ過物を真空中で濃縮した。こうして得た残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０）によって精製した。

４２）１−メチル−５−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシフェニル）−４−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）イミダゾールｘＨＣｌ ９ａ
エタノール（１５ｍＬ）中の３−ブロモ−４，５−ジメトキシベンズアルデヒド（８６ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）および３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２２０μＬ、１．７８ｍｍｏｌ）の混合物をＡｃＯＨ（１２５μＬ、２．１９ｍｍｏｌ）で処理し、そして２時間還流した。室温に冷却した後、４ｄ（１１０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物を５時間還流した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０、酢酸エチル、Ｒ_ｆ＝０．３８）によって精製して、無色油としてのイミダゾールを残した。これをＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）に溶解し、そしてジオキサン（１ｍＬ）中の３Ｍ ＨＣｌで処理した。５分間攪拌した後、溶媒を蒸発させ、そして残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２／ヘキサンから結晶化させた。

４３）１−メチル−４−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−５−（３，５−ジブロモ−４−メトキシフェニル）−イミダゾールｘＨＣｌ ９ｂ
エタノール（１５ｍＬ）中の３，５−ジブロモ−４−メトキシベンズアルデヒド（１０３ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）および３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２２０μＬ、１．７８ｍｍｏｌ）の混合物をＡｃＯＨ（１２５μＬ、２．１９ｍｍｏｌ）で処理し、そして２時間還流した。室温に冷却した後、４ｄ（１１０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物を５時間還流した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０、酢酸エチル／メタノール９：１、Ｒ_ｆ＝０．６）によって精製し、無色油としてのイミダゾールを得た。この油をＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）中に溶解し、そしてジオキサン（１ｍＬ）中の３Ｍ ＨＣｌで処理した。５分間攪拌した後、溶媒を蒸発させ、そして残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２／ヘキサンから結晶化させた。

４４）１−メチル−４−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−５−（３，５−ジヨード−４−メトキシフェニル）−イミダゾールｘＨＣｌ ９ｃ
エタノール（１５ｍＬ）中の３，５−ジヨード−４−メトキシベンズアルデヒド（１６０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）および３３％ ＭｅＮＨ_２／エタノール（２６０μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）の混合物をＡｃＯＨ（１５０μＬ、２．６３ｍｍｏｌ）で処理し、そして２時間還流した。室温に冷却した後、４ｄ（１５０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物を５時間還流した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、ろ過し、そして真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０、酢酸エチル、Ｒ_ｆ＝０．４８）によって精製し、無色油としてのイミダゾールを得た。この油をＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）に溶解し、そしてジオキサン（１ｍＬ）中の３Ｍ ＨＣｌで処理した。５分間攪拌した後、溶媒を蒸発させ、そしてＣＨ_２Ｃｌ_２／ヘキサンから残渣を結晶化させた。

実施例３：生物学的アッセイ
本発明の代表的な化合物として、１−メチル−５−（３−アミノ−４−メトキシフェニル）−４−（３−クロロ−４，５−ジメトキシフェニル）−イミダゾール（「５ｂ」）を、以下に記載するような、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏアッセイに供した。

生物学的試験のため、化合物５ｂを生理学的食塩水溶液中に溶解した。１０ｍＭもの高濃度が達成可能であり、したがって、溶解性が優れていることが示された。通例、動物へのｉｎ ｖｉｖｏ適用には、最大３ｍＭの濃度しか必要とされない。５ｂのこうした溶液の化学的安定性をチェックするため、これらを１ヶ月保存し、そして続いて、５ｂの同濃度の新鮮に調製した溶液と一緒にｉｎ ｖｉｔｒｏ試験に用いた。

製造者の指示にしたがって、チューブリン重合アッセイキット（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ、米国）を用いて、チューブリン重合分析を行った。該アッセイは蛍光に基づき、そしてチューブリン重合の後、ＳｐｅｃｔｒａＦｌｕｏｒＰｌｕｓ（Ｔｅｃａｎ、スイス）上、以下のフィルター：励起３６０ｎｍ、発光４６５ｎｍを用いて、ＲＦＵ（相対蛍光単位）を測定した。

異なる実体の多様な腫瘍細胞株に対する標準的比色分析試験（ＳＲＢおよびＭＴＴアッセイ）によって、５ｂの細胞傷害活性を確立した。ＳＲＢ細胞傷害アッセイのため、スルホローダミン−Ｂ（ＳＲＢ）微量培養比色分析アッセイ（Ｐａｐａｚｉｓｉｓら Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｓｕｌｆｏｒｈｏｄａｍｉｎｅ Ｂ ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ ａｓｓａｙ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈｏｄｓ １９９７， ２０８， １５１−１５８）を用いて、０．００１〜１０μＭの薬剤濃度に曝露された精巣生殖細胞腫瘍細胞株の用量反応曲線を確立し、そして： Ｍｕｅｌｌｅｒら Ｆａｉｌｕｒｅ ｏｆ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｓｐａｓｅ−９ ｉｎｄｕｃｅｓ ａ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ ｆｏｒ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ａｎｄ ｃｉｓｐｌａｔｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｃａｎｃｅｒ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ２００３， ６３， ５１３−５２１に記載されるように行った。簡潔には、実験期間中に指数関数的細胞増殖が確実であると先に決定された細胞密度で、第０日、細胞を９６ウェルプレート内に植え付けた。第１日、適切な濃度を生じるように培地中に溶解した薬剤で、示す期間、細胞を処理し、そして未処理対照に比較した生存細胞パーセントを第５日に決定した。

チューブリン重合阻害に関する、および細胞傷害性に関するアッセイによって、図１および２に示すように、５ｂの高く、減弱されない活性および有効性が明らかになった。
シスプラチンと異なり、化合物５ｂは、２つの生殖細胞腫瘍細胞株Ｈ１２．１および１４１１ＨＰに対して、ＩＣ_５０（９６時間）≒３０〜５０ｎＭで、類似のｉｎ ｖｉｔｒｏ活性を示し、すなわち化合物５ｂは１４１１ＨＰ細胞の化学耐性を克服する（図３Ａ）。これによって、化合物５ｂは、多剤耐性腫瘍細胞においてもまた、増殖阻害および細胞死を開始する、異なる作用機構によって働くことが示唆される。例えば本発明記載の化合物６ｂを用いて、匹敵する結果が得られうる（図３Ｂ）。

本発明の化合物５ｂおよび６ｂのｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍活性および許容度を、耐性生殖細胞腫瘍細胞株１４１１ＨＰのヌードマウス異種移植片モデルにおいて、無胸腺ヌードＦｏｘ ｎ１ ｎｕ／ｎｕマウス（Ｈａｒｌａｎ ｕｎｄ Ｗｉｎｋｅｌｍａｎｎ、ドイツ・ホルヒェン）を使用して研究した。

化合物５ｂを試験する前に、毒性プロファイルを確立するため、このタイプの健康な動物を、５ｂの上昇する範囲の用量で処理した。該化合物は、比較的高い濃度であっても、マウスによく許容された。次いで、さらなる試験において１対の生殖細胞腫瘍細胞株、化学耐性細胞株１４１１ＨＰおよび化学感受性細胞株Ｈ１２．１のヌードマウス異種移植片モデルにおいて、適切な投薬量を投与した。これらの細胞株は、異種移植片腫瘍として増殖させた際、シスプラチンに対する個々のｉｎ ｖｉｔｒｏ化学感受性を保持し、そしてしたがって、化学療法に対する耐性の臨床的状況のモデルとして働きうる（Ｍｕｅｌｌｅｒら Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ２００３； Ｍｕｅｌｌｅｒら Ｔｕｍｏｒ Ｂｉｏｌ． ２００）。シスプラチンでのＨ１２．１異種移植片所持マウスの治療は、完全な退行を導くものの、１４１１ＨＰ異種移植片は、一過性の増殖阻害しか受けず、その後、腫瘍進行が再開した。

試験を以下のように行った。マウスを病原体不含条件下に維持し、オートクレーブした標準飼料を供給し、そして滅菌水に自由にアクセスさせた。各５匹のマウスの左脇腹に、１０００万の１４１１ＨＰ細胞の１５０μＬのリン酸緩衝生理食塩水懸濁物を投与し、皮下異種移植片腫瘍を生成した。４週間後、およそ１ｃｍ^３の体積の１４１１ＨＰ異種移植片を所持する２匹のマウスの１群に、ｉ．ｐ．で、それぞれ、３０ｍｇ／ｋｇ体重の５ｂまたは６ｂの単回用量を注射した。およそ２．５ｃｍ^３の体積の異種移植片を持つ第２群の２匹のマウスに、連続２日間、２０ｍｇ／ｋｇ体重の５ｂをｉ．ｐ．注射した。式ａ^２ｘｂｘ０．５を用いて、ノギス測定によって腫瘍体積を計算し、ここで、ａは短軸寸法、そしてｂは長軸寸法であった。体重を週２回、そして療法中は毎日、評価した。

約１ｃｍ^３の体積の１４１１ＨＰ異種移植片を所持する２匹のマウスを、３０ｍｇ／ｋｇ体重の５ｂまたは６ｂの単回用量で治療した後、どちらの場合も、５ｂでの治療に関して図５に示すように、強い腫瘍内出血が、２４時間後であっても赤−青から褐色の発色として可視となった。図４Ａに示すように、腫瘍の一過性腫脹がやはり可視であり、最終的に、退行および緩慢な再増殖となった。どちらのマウスもこの治療を非常によく許容した。２日間連続で２０ｍｇ／ｋｇ体重の５ｂを投与することによって、約２．５ｃｍ^３体積の１４１１ＨＰ異種移植片を所持する２匹のマウスにおいて、長期の腫瘍縮小が達成された。生じた劇的な腫瘍退行は、１つの症例では安定化さえ導き、これを図４Ｂ／Ｃに示す。他の異種移植片は、再増殖し、そして第１６／１７日および第３５／３６日に、さらに５ｂの二重用量を投与した。図４Ｃに示すように、３回の適用各々の後に、退行および長期間の安定化が達成された。顕著なことに、治療の第三のコースであってもよく許容され、そしてマウスはこの時点までに元来の体重を取り戻した。これらのデータによって、耐性腫瘍の効率的な治療のため、化合物５ｂおよび６ｂには大きな潜在能力があることが立証される。

したがって、マウスモデルにおいて、５ｂの抗腫瘍活性は、耐性腫瘍の劇的な退行によって明らかとなった（図４）。腫瘍血管系に選択的に影響を及ぼす強い血管破壊効果は、化合物５ｂの投与２４時間後に生じる明確な腫瘍内出血によって、立証され、そして視覚化された（図５）。さらに、化合物５ｂの単回用量適用は、腫瘍体積を約２週間安定化させるのに十分であった。

さらに、１４１１ＨＰ生殖細胞腫瘍異種移植片における化合物６ｂの二重用量、すなわち２ｘ２０ｍｇ／ｋｇ体重の適用を用いた腫瘍退行試験は、図１０にもまた示すように、化合物５ｂと類似の度合いまでの高い抗腫瘍活性を示した。

これらの知見から、式（Ｉ）の化合物、例えば化合物５ｂまたは６ｂは、多剤耐性腫瘍の治療に適した有効物質種に相当すると結論づけ可能である。その特徴は、真正の機構に基づいた高い癌細胞特異的細胞傷害性、腫瘍選択的血管破壊効果、好ましい薬理学的特性、およびｉｎ ｖｉｖｏでの優れた許容度の相乗的組み合わせである。

１４１１ＨＰ異種移植片モデルにおける血管破壊効果に関して、化合物５ｆ、６ｂおよび６ｆをさらに試験し、そしてＡ２７８０卵巣癌異種移植片の第二の腫瘍モデルにおいて、化合物５ｂ、５ｆ、６ｂおよび６ｆをさらに試験し、どちらのモデルにおいてもすべての化合物の血管破壊活性が示され（図１１）、これによって、よく血管形成された腫瘍における本発明の化合物の一般的な活性が示唆される。

また、化合物５ｂ、６ｂおよび６ｆを経口投与の成否に関しても試験した。マウスには、それぞれ、４０ｍｇ／ｋｇ体重の５ｂ、６ｂまたは６ｆの単回用量を投与した。毒性の徴候はまったく観察されなかった。次いで、退行試験に関して用いたｉ．ｐ．治療スキームにしたがうが、２ｘ４０ｍｇ／ｋｇ体重の２倍より高い用量を用い、連続２日間の二重用量適用として、化合物６ｂまたは６ｆを経口投与した。これはよく許容され、そして６ｂの場合に、一過性のそして最低限の体重喪失のみを誘導したが、６ｆに関しては毒性の徴候はまったく観察されなかった。さらに、６ｆを６０ｍｇ／ｋｇ体重の単回用量で投与し、そしてこれは、再び症状なしに許容された。これによって、経口投与された場合、より高い用量であっても本発明の化合物が優れた毒性プロファイルを持つことが立証される。

腫瘍をターゲットとする細胞傷害活性がまた、本発明の化合物の経口投与後にも達成されるかどうかを証明するため、６０ｍｇ／ｋｇ体重の化合物６ｂを経口投与した２４時間後、血管破壊効果を研究した。毒性の徴候はまったく観察されなかった。血管破壊効果は、図１２にもまた示すように、ｉ．ｐ．適用後に見られるのと同じ度合いに生じた。

実施例４：多様なヒト腫瘍細胞株における細胞増殖阻害アッセイ
本発明記載の化合物５ｂ、６ｂ、８ａ、および８ｅ、そして参照化合物２５ｆ（Ｗａｎｇら， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００２， ４５， １６９７−１７１１）の、以下のヒト腫瘍細胞株の細胞に対する効果を評価した：５１８Ａ２黒色腫、ＨＬ−６０白血病、ＨＴ−２９結腸癌、ＫＢ−Ｖ１／Ｖｂｌ子宮頸癌、およびＭＣＦ−７／Ｔｏｐｏ乳癌。

ＨＬ−６０細胞を、ドイツ生物学的材料コレクション（ＤＳＭＺ）、ドイツ・ブラウンシュバイクから得た；ヒト５１８Ａ２黒色腫細胞ならびに精巣生殖細胞腫瘍細胞株Ｈ１２．１および１４１１ＨＰを、ドイツ・ハレのＭａｒｔｉｎ−Ｌｕｔｈｅｒ大学、医学部、腫瘍学・血液学科で培養した；ＫＢＶ１／ＶｂｌおよびＭＣＦ−７／Ｔｏｐｏ細胞をドイツのＲｅｇｅｎｓｂｕｒｇ大学、薬学研究所から得た；そして結腸ＨＴ−２９細胞をドイツのＥｒｌａｎｇｅｎ大学病院から得た。ＨＬ−６０およびＨＴ−２９細胞を、１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）、１００ＩＵ／ｍＬペニシリンＧ、１００μｇ／ｍＬ硫酸ストレプトマイシン、０．２５μｇ／ｍＬアンホテリシンＢおよび２５０μｇ／ｍＬゲンタマイシン（すべてＧｉｂｃｏ、ドイツ・エゲンスタインより）を補充したＲＰＭＩ−１６４０培地中で増殖させた。５１８Ａ２およびＫＢ−Ｖ１／Ｖｂｌ細胞を、１０％ＦＣＳ、１００ＩＵ／ｍＬペニシリンＧ、１００μｇ／ｍＬ硫酸ストレプトマイシン、０．２５μｇ／ｍＬアンホテリシンＢおよび２５０μｇ／ｍＬゲンタマイシンを含有するダルベッコの修飾イーグル培地（Ｄ−ＭＥＭ、Ｇｉｂｃｏ）中で培養した。ＭＣＦ−７／Ｔｏｐｏ細胞を、２．２ｇ／Ｌ ＮａＨＣＯ３、１１０ｍｇ／Ｌピルビン酸ナトリウムおよび５％ＦＣＳを補ったＥ−ＭＥＭ培地（Ｓｉｇｍａ）中で増殖させた。細胞を湿度飽和大気（５％ＣＯ_２）中、３７℃で、７５ｍＬ培養フラスコ（Ｎｕｎｃ、ドイツ・ヴィースバーデン）中で維持した。０．０５％トリプシン／０．０２％ＥＤＴＡ（ＰＡＡ ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ドイツ・コルベ）によるトリプシン処理後、これらを連続継代した。マイコプラズマ混入をルーチンに監視し、そしてマイコプラズマ不含培養のみを用いた。

ＭＴＴ［３−（４，５−ジメチルチアゾル−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド］（ＡＢＣＲ）を用いて、ＡＢＣＲを紫のホルマザンに還元する生存細胞を同定した（Ｍｏｓｍａｎｎ， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ， Ｍｅｔｈｏｄｓ １９８３， ６５， ５５−６３）。ＨＬ−６０白血病細胞（５ｘ１０^５／ｍＬ）、ならびに５１８Ａ２黒色腫、ＨＴ−２９結腸、ＫＢ−Ｖ１／Ｖｂｌ子宮頸およびＭＣＦ−７／Ｔｏｐｏ乳癌の細胞（５ｘ１０^４／ｍＬ）を９６ウェル組織培養プレート中に植え付け、そして２４時間培養した。試験化合物で処理した後、細胞のインキュベーション（５％ＣＯ_２、９５％湿度、３７℃）を２４、４８または７２時間続けた。ブランクおよび溶媒対照を同一に処理した。リン酸緩衝生理食塩水（５ｍｇ／ｍＬ）中のＭＴＴを最終濃度０．０５％（ＨＬ−６０、５１８Ａ２）または０．１％（ＨＴ−２９、ＫＢ−Ｖ１／Ｖｂｌ、ＭＣＦ−７／Ｔｏｐｏ）まで添加した。２時間後、ＨＬ−６０細胞の場合、０．６％酢酸を含有するＤＭＳＯ中の１０％ドデシル硫酸ナトリウム中にホルマザン沈殿物を溶解した。接着性５１８Ａ２、ＫＢ−Ｖ１／Ｖｂｌ、ＭＣＦ−７／ＴｏｐｏおよびＨＴ−２９細胞に関しては、溶媒混合物を添加する前に、マイクロプレートを迅速に反転させて培地を廃棄した。マイクロプレートを、暗所で３０分間穏やかに振盪し、そして５７０ｎｍおよび６３０ｎｍ（バックグラウンド）の吸光度をＥＬＩＳＡプレート読み取り装置で測定した。すべての実験を四つ組で行い；対照を１００％に設定して、生存細胞の割合を平均±ＳＤとして計算した。

図６Ａに示すように、ハロ−アミノ置換イミダゾール５ｂおよび６ｂは、一桁のナノモル範囲のＩＣ_５０濃度の既知の参照化合物２５ｆより、明確により細胞傷害性であり、コンブレタスタチンＡ−４耐性ＨＴ−２９細胞、およびＰｇｐを過剰発現するＫＢ−Ｖ１細胞においてさえ細胞傷害性であった。ＭＣＦ−７／Ｔｏｐｏ細胞においてのみ、著しくより活性が低かったが、それでも既知のイミダゾール２５ｆよりは優れていた。

対照的に、ジアミノ置換オキサゾール８ａおよびそのイミダゾール対応物８ｅは、より細胞株特異的であり、多剤耐性細胞両方、すなわちＫＢ−Ｖ１／Ｖｂｌ（Ｐｇｐ＋）およびＭＣＦ−７／Ｔｏｐｏ（ＢＣＲＰ＋）に対して、２５ｆおよび５ｂ／６ｂよりも優れた有効性を有した。これは、これらの化合物に異なるまたはさらなる作用様式が潜在的に存在することを匂わせる。

さらに、図７に示すように、コンブレタスタチンＡ−４は、多剤耐性ＨＴ−２９結腸癌細胞において、化合物５ｂおよび６ｂよりもより低い細胞傷害性を示す。したがって、化合物５ｂおよび６ｂは、ｉｎ ｖｉｔｒｏでこれらの癌細胞において薬剤耐性を克服することが可能である。

化合物５ｂ、６ｂ、５ｆおよび６ｆならびに参照化合物２５ｆ（Ｗａｎｇら）を、さらに一団の腫瘍細胞株（Ｈ１２．１生殖細胞腫瘍、１４１１ＨＰ生殖細胞腫瘍、Ａ２７８０卵巣癌、ＨＴ２９結腸癌、ＤＬＤ１結腸癌、ＨＣＴ８結腸癌）において、ＳＲＢ細胞傷害性アッセイに供した。図１３に示すように、化合物５ｂおよび６ｂは、化合物２５Ｆに比較した際、優れた活性を示し、そして化合物５ｆおよび６ｆに関しては、細胞傷害性のさらなる改善が観察された。

本発明記載の式（ＩＩＩ）の例示的化合物である化合物９ａ、９ｂおよび９ｃ、ならびに参照化合物２５ｆを、同様の方式で試験した。表１に示すように、化合物９ａ、９ｂおよび９ｃは、参照化合物２５ｆに比較した際、非悪性細胞（ＰｔＫ−２オポッサム腎臓細胞およびＮＨＤＦ線維芽細胞）に対してよりも、腫瘍細胞（Ｌ９２９線維芽細胞、ＫＢ−３−１子宮頸癌、およびＰＣ−３前立腺癌）に対して、より顕著でそして選択的な細胞傷害効果を示し、ＨＵＶＥＣ細胞に対して改善された効果（ＭＩＣ）を示した。

表１：Ｌ９２９線維芽細胞、ＫＢ−３−１子宮頸癌、ＰＣ−３前立腺癌、ＰｔＫ−２オポッサム腎臓細胞およびＮＨＤＦ線維芽細胞におけるＩＣ５０（ｎＭ）、ならびにＨＵＶＥＣ細胞における最小阻害濃度（ＭＩＣ）（ｎＭ）。

実施例５：反応性酸素種（ＲＯＳ）生成アッセイ
腫瘍細胞における反応性酸素種（ＲＯＳ）の生成は、ＤＮＡ、脂質またはタンパク質などの細胞構成要素に重度の損傷を生じる、細胞ストレスの徴候である。比色ニトロブルー−テトラゾリウム（ＮＢＴ）アッセイ（Ｒｏｏｋら Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈｏｄｓ １９８５， ８２， １６１−１６７）を用いて、参照化合物２５ｆまたは本発明記載の化合物で処理したＨＬ−６０および５１８Ａ２細胞において産生されるＲＯＳの量を評価した。５１８Ａ２およびＨＬ−６０細胞を５０μＭの試験化合物に２４時間曝露した後、未処理対照（１％）に比較した、ホルマザンの吸光度パーセントから、ＲＯＳ生成（％ＮＢＴ減少）を決定した。

ＮＢＴアッセイのため、ＨＬ−６０細胞（０．５ｘ１０^６／ｍＬ）を９６ウェル組織培養プレート中にプレーティングし、そして３７℃で２４時間インキュベーションした後、試験化合物を添加して最終濃度５０μＭを達成した。試験化合物での処理後、細胞のインキュベーション（５％ＣＯ_２、９５％湿度、３７℃）を２４時間続けた。遠心分離によって細胞培地を除去した後、各ウェル中の細胞を１００μＬの０．１％ＮＢＴ中に再懸濁し、そしてプレートをインキュベーターに１時間入れた。還元されたＮＢＴを１００μｌ ２Ｍ ＫＯＨおよび１３０μｌ ＤＭＳＯで３０分間、可溶化した。各ウェルに関して、ＥＬＩＳＡプレート読み取り装置を用いて、６３０および４０５ｎｍ（バックグラウンド）で吸光度を測定した。接着性５１８Ａ２細胞（０．５ｘ１０^４／ｍＬ）を、トリプシン処理後、９６ウェル組織培養プレート中に植え付け、そして３７℃で２４時間インキュベーションして、接着を可能にし、次いで同様に処理するが、ＮＢＴで４時間インキュベーションする前に培地を除去した。すべての実験を四つ組で行った。

以下の結果を得た。示す値は、４回の独立の実験の平均±標準偏差に相当する。

弱い細胞傷害性化合物２５ｆは、低いＲＯＳレベルを導き、一方、例えば非常に細胞傷害性である本発明記載の化合物５ｂは、４．４％のＲＯＳレベルを生じた。
実施例６：ミトコンドリア膜アッセイ
ミトコンドリア膜電位の変化を検出する、蛍光色素ＪＣ−１（Ｄｅｓａｇｅｒら Ｊ． Ｃｅｌｌ． Ｂｉｏｌ． １９９９， １４４， ８９１−９０１）によって、５１８Ａ２およびＨＬ−６０細胞におけるアポトーシス関連ミトコンドリア損傷の度合いを確認した。

未処理対照（１００％）に比較した、５μＭの試験化合物（すなわち本発明記載の化合物または参照化合物２５ｆ）に５１８Ａ２およびＨＬ−６０細胞を７２時間曝露した後の赤対緑の蛍光の比を、ミトコンドリア膜検出キット（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ、米国カリフォルニア州ラホヤ）で決定した。値は、４回の独立の実験の平均±標準偏差に相当する。

製造者の手順にしたがって、ミトコンドリア膜検出キット（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ、米国カリフォルニア州ラホヤ）によって、ミトコンドリア膜電位の変化を決定した。５μＭの試験化合物で７２時間処理した後、細胞試料を４００ｇで５分間遠心分離した。ペレットを５００μＬの希釈したＪＣ−１溶液に再懸濁し、３７℃で１５分間（ＨＬ−６０）インキュベーションし、そして次いで再び４００ｇで５分間遠心分離した。洗浄後、ペレットを１００μＬ ＰＢＳ中に再懸濁し、そして黒い９６ウェルプレートのウェルに移した。赤（λ_ｅｘ＝５８５ｎｍ、λ_ｅｍ＝５９０ｎｍ）および緑（λ_ｅｘ＝５１０ｎｍ、λ_ｅｍ＝５２７ｎｍ）蛍光強度を測定し、そしてその比を計算した。

やはり、試験化合物の影響は、ＨＬ−６０白血病細胞において、より多様であり、そして特異的であった。

ここでは、より細胞傷害性である化合物５ｂとのインキュベーション後、約６５％のミトコンドリアのみが損なわれず、一方、２５ｆでの処理は、より多くのミトコンドリア（７４％）を損なわれないままにした。

実施例７：ＴｄＴ仲介性ｄＵＴＰニック末端標識（ＴＵＮＥＬ）アッセイ
フルオレセイン・タグ化ヌクレオチドでＤＮＡ断片の３’−ＯＨ端を標識することによって、アポトーシスの検出を可能にするＴＵＮＥＬアッセイにおいて、化合物５ｂ、６ｂおよび８ａは、主にアポトーシス方式で、ＨＬ−６０細胞において死を誘導する（１０μＭ薬剤と１６時間インキュベーションした後、約６０％）ことが見出された。ミトコンドリア膜電位の変化を検出する蛍光色素ＪＣ−１（Ｄｅｓａｇｅｒら， Ｊ． Ｃｅｌｌ． Ｂｉｏｌ． １９９９， １４４， ８９１−９０１）によって、ＨＬ−６０細胞におけるアポトーシス関連ミトコンドリア損傷の度合いを確認した。より細胞傷害性である化合物５ｂ〜ｄ、６ｂ〜ｄ、および８ａ／ｅとのインキュベーション後、ミトコンドリアのうち約６０％のみが損なわれず、一方、参照化合物２５ｆでの処理は、７４％のミトコンドリアを損なわれないままにした。化合物５ｂ、６ｂまたは８ａとのインキュベーション後、ＴＵＮＥＬアッセイにおいて試験したＨＬ−６０細胞の顕微鏡画像を図８に示す。

Ｊｏｂｍａｎｎによって記載されたＴｄＴ仲介ｄＵＴＰニック末端標識（ＴＵＮＥＬ； Ｒｏｃｈｅ）アッセイの修飾法を用いた（Ｊｏｂｍａｎｎ， Ｍ． Ａｐｏｐｔｏｓｅ ｂｅｉ ｓｔｒｕｋｔｕｒｅｉｉｅｎ Ｈｅｒｚｍｕｓｋｅｌｅｒｋｒａｎｋｕｎｇｅｎ． Ｐｈ．Ｄ． Ｔｈｅｓｉｓ， Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｍａｒｂｕｒｇ， Ｇｅｒｍａｎｙ ２００２， ３１）。ＨＬ−６０細胞を試験化合物と１６時間インキュベーションし、３ｘ１０^６細胞のアリコットを抜き取り、そして２００μＬ ＰＢＳ中で３回洗浄／遠心分離した。ＰＢＳ中の２％ホルマリンの新鮮に調製した溶液２００μＬ中で懸濁することによって、細胞を室温で１０分間固定した。２ｘ２００μＬ ＰＢＳで洗浄した後、細胞懸濁物１０μＬを顕微鏡スライド上に適用し、そして室温で風乾した。ＰＢＳで５分間覆い、そして氷上で、０．１％クエン酸ナトリウム中の０．１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００の溶液で２分間処理した。ＰＢＳで２回洗浄した後、１μＬ ＴＵＮＥＬ酵素溶液および９μＬ ＴＵＮＥＬ標識溶液からなる、１０μＬの新鮮に調製したＴＵＮＥＬ反応混合物１０μＬを細胞上に滴下し、これを次いで覆い、そして暗所で、３７℃４５分間インキュベーションした（５％ＣＯ_２、９５％湿度）。細胞をＰＢＳで３回洗浄し、そして次いで４５０〜５００ｎｍの励起波長で、蛍光顕微鏡によって分析した。３００細胞に関してアポトーシス性ＴＵＮＥＬ陽性緑色染色細胞の割合を計数し、そして計算し、そして３回の独立の実験の平均±標準偏差として表した。

実施例８：ＣＡＭアッセイ
ＣＡＭアッセイを用いて、本発明の化合物を抗血管形成および血管系破壊特性に関して試験した。この試験において、受精ニワトリ胚の血管系をモデルとして用いる（Ｗｉｌｔｉｎｇら， Ａｎａｔ． Ｅｍｂｒｙｏｌ． １９９１， １８３， ２５９−２７１）。

産卵後の受精ニワトリ卵を近くの農場から直接得て、３６〜３８℃の温度、および６０％の相対湿度でインキュベーションした。成長中、卵を傾斜した位置に保持し、そして殻に付着するのを回避するため、ときどき回転させた。４日後、カップ上部上に薄いプラスチックホイルを固定することによって生成した腔に、各胚を移し、そして覆った。気嚢がある平らな端を開け、そして中身を滑らせて出すことによって、これを行った。そこで、最初の血管が可視になるまで、増殖をさらに２〜４日続けた。次いで、１０ｎｍｏｌの試験しようとする物質（１％ＤＭＦを含む１０μＬのＰＢＳ中）を胚血管上に直接適用した。参照としてＰＢＳを用いた。最後に、インキュベーションをさらに最長３日間続けた（Ｄｕｇａｎら， Ａｎａｔ． Ｒｅｃ． １９９１， ２２９， １２５−１２８； Ｆｉｓｈｅｒ， Ｔｅｓｔｅｄ ｓｔｕｄｉｅｓ ｆｏｒ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｔｅａｃｈｉｎｇ １９９３， ５， １０５−１１５）。

図９において、陰性対照（ＰＢＳ）に比較した胚性血管の発展に対する、化合物ＣＡ−４（参照）および５ｂの影響を示す。ＣＡ−４同様、化合物５ｂは、処置２４時間以内に劇的な血管収縮を、そして３日以内に血管系の完全な崩壊を導いた。

実施例９：チューブ形成アッセイ
本発明記載の化合物の抗血管新生特性をさらに評価するため、マトリジェル上のＨＵＶＥＣ細胞における毛細管チューブ形成に対する、本発明記載の化合物５ｂ、６ｂおよび８ａ、ならびに参照化合物２５ｆ（Ｗａｎｇら， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００２， ４５， １６９７−１７１１）の影響を決定した（使用した化合物の構造を実施例４に示す）。

３５μＬの培地：マトリジェル（１：１）を９６ウェルプレートのウェル内に添加し、そして３７℃で３０分間インキュベーションした。トリプシン処理したＨＵＶＥＣ細胞懸濁物を８００，０００細胞／ｍＬに設定した。別の９６ウェルプレートにおいて、２５μＬの化合物ストックを２５μＬの培地で連続希釈した。２５μＬの化合物希釈および２５μＬの細胞懸濁物を、マトリジェルでコーティングした９６ウェルプレートに添加し、そして細胞を一晩インキュベーションした。陰性対照として、化合物希釈の代わりにメタノールを用いた。

図１４にもまた示すように、化合物６ｂおよび８ａは、非常に低濃度（７．７２ｎｇ／ｍＬ）でＨＵＶＥＣ細胞によるチューブ形成の顕著な阻害を示し、一方、化合物５ｂは、この濃度では対応する強い阻害を生じなかった。化合物６ｂおよび８ａは、はるかにより高い濃度（１３０ｎｇ／ｍＬ）でチューブ形成を阻害する既知の化合物２５ｆよりも、明らかにより活性であった。

実施例１０：ハイコンテンツアッセイ
ＰｔＫ−２細胞における化合物６ｂおよび８ａの顕微鏡に基づく自動化クラスター分析（ハイコンテンツ分析、ＨＣＡ）によって、化合物６ｂに関しては既知のチューブリン結合剤ビンブラスチンと、そして化合物８ａに関しては既知のＰＩ３−キナーゼ阻害剤ＬＹ２９４００２との緊密な関係が明らかになった。結果を図１５に示す。

装置：ＩｍａｇｅＸｐｒｅｓｓ Ｍｉｃｒｏ（ＩＸＭ）高速レーザーオートフォーカス
デジタルＣＣＤカメラ
３００ワットキセノンアークランプ
フィルターセット −ＤＡＰＩ
−ＦＩＴＣ
−ＴＲＩＴＣ
−テキサスレッド
ニコン対物レンズ −４ＸＰｌａｎ Ａｐｏ、ＮＡ ０、２０
−１０ＸＳ Ｆｌｕｏｒ、ＮＡ ０、５０
−２０ＸＳ Ｆｌｕｏｒ、ＮＡ ０、７５
−４０ＸＰｌａｎ Ａｐｏ、ＮＡ ０、９５
−６０ＸＰｌａｎ Ａｐｏ、ＮＡ ０、８５
ソフトウェア −ＭｅｔａＸｐｒｅｓｓ
−ＡｃｕｉｔｙＸｐｒｅｓｓ
パラメータ（色素−／抗体アッセイ）：＞５０、ＤＡＰＩ（Ｗ１）、ＦＩＴＣ（Ｗ２）およびＴＲＩＴＣ（Ｗ３）染色およびフィルターを用いて、モジュール、例えばＭＷＣＳモジュールに構成
ＭＷＣＳモジュールの説明：
画像に基づく分析：総細胞、（％）陽性Ｗ２／Ｗ３、スコアリングプロファイル１−−／１２−／１−３／１２３。波長１および２のみで染色されて見えるが３では染色されていない細胞の絶対数（１２−）。
細胞に基づく分析：総面積（核の面積）、染色面積Ｗ１／Ｗ２／Ｗ３（個々の色素に関する染色面積）、陽性Ｗ２／Ｗ３（各波長での染色細胞の絶対数）；平均／積分強度Ｗ１／Ｗ２／Ｗ３
参照化合物：６２
細胞株：ＰｔＫ２（非悪性）、ＫＢ−３−１子宮頸、Ａ−４９８腎臓癌

Claims (24)

1. 式（Ｉ）
   式中：
   Ｘは、Ｏ、Ｓ、Ｎ（Ｈ）、またはＮ（Ｃ_１−４アルキル）より選択され；
   Ｒ^１は、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＦ_３、−ＮＨ_２、−ＮＨ（Ｃ_１−４アルキル）、または−Ｎ（Ｃ_１−４アルキル）（Ｃ_１−４アルキル）より選択され；
   Ｒ^２は、水素、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＦ_３、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ_１−４アルキル）、−ＮＨ_２、−ＮＨ（Ｃ_１−４アルキル）、または−Ｎ（Ｃ_１−４アルキル）（Ｃ_１−４アルキル）より選択され；
   Ｒ^３は、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ_１−４アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ_１−４アルキル）、−ＮＨ_２、−ＮＨ（Ｃ_１−４アルキル）、または−Ｎ（Ｃ_１−４アルキル）（Ｃ_１−４アルキル）より選択され；
   あるいは、Ｒ^２およびＲ^３は、合同で、基、−Ｃ（ハロゲン）＝ＣＨ−Ｎ（ＣＨ_３）−を形成する
   の化合物；
   あるいはその薬学的に許容されうる塩または溶媒和物。
2. Ｒ^１が−Ｃｌ、−Ｂｒ、または−ＮＨ_２より選択される、請求項１の化合物。
3. Ｒ^２が、水素、ハロゲン、−ＯＨ、または−ＮＨ_２より選択される、請求項１または２の化合物。
4. Ｒ^３が、−Ｏ−ＣＨ_３、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_３、または−Ｎ（ＣＨ_３）_２より選択される、請求項１〜３のいずれかの化合物。
5. Ｒ^３が、−Ｏ−ＣＨ_３または−Ｎ（ＣＨ_３）_２より選択される、請求項１〜４のいずれかの化合物。
6. Ｒ^２およびＲ^３が、合同で、基、−Ｃ（Ｃｌ）＝ＣＨ−Ｎ（ＣＨ_３）−を形成する、請求項１または２の化合物。
7. ＸがＯおよびＮ（ＣＨ_３）より選択される、請求項１〜６のいずれかの化合物。
8. １−メチル−５−（３−アミノ−４−メトキシフェニル）−４−（３−クロロ−４，５−ジメトキシフェニル）−イミダゾール、１−メチル−５−（３−アミノ−４−メトキシフェニル）−４−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシフェニル）−イミダゾール、１−メチル−５−（３−アミノ−４−エトキシフェニル）−４−（３−クロロ−４，５−ジメトキシフェニル）−イミダゾール、１−メチル−５−（３−アミノ−４−エトキシフェニル）−４−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシフェニル）−イミダゾール、１−メチル−４−（３−クロロ−４，５−ジメトキシフェニル）−５−（３−フルオロ−４−エトキシフェニル）−イミダゾール、１−メチル−４−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシフェニル）−５−（３−フルオロ−４−エトキシフェニル）−イミダゾール、１−メチル−４−（３−アミノ−４，５−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３−クロロインドル−５−イル）−イミダゾール、１−メチル−４−（３−クロロ−４，５−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３−クロロインドル−５−イル）−イミダゾールまたは１−メチル−４−（３−ブロモ−４，５−ジメトキシフェニル）−５−（Ｎ−メチル−３−クロロインドル−５−イル）−イミダゾール、あるいはその薬学的に許容されうる塩または溶媒和物より選択される、請求項１の化合物。
9. 請求項１〜８のいずれかの化合物および薬学的に許容されうる賦形剤を含む、薬学的組成物。
10. 癌を治療するかまたは防止する際に使用するための、請求項１〜８のいずれかの化合物。
11. 癌を治療するかまたは防止する際に使用するための、請求項９の薬学的組成物。
12. 癌を治療するかまたは防止する必要がある被験体に、請求項１〜８のいずれかの化合物、あるいはその薬学的に許容されうる塩または溶媒和物を投与する工程を含む、癌を治療するかまたは防止する方法であって、ここで被検体は非ヒト動物である、方法。
13. 癌が、乳癌、尿生殖器癌、肺癌、胃腸癌、類表皮癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、神経芽細胞腫、頭部および／または頸部の癌、膀胱癌、腎臓癌、脳癌、白血病、またはリンパ腫より選択される、請求項１０の化合物。
14. 癌が、乳癌、尿生殖器癌、肺癌、胃腸癌、類表皮癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、神経芽細胞腫、頭部および／または頸部の癌、膀胱癌、腎臓癌、脳癌、白血病、またはリンパ腫より選択される、請求項１１の薬学的組成物。
15. 癌が、乳癌、尿生殖器癌、肺癌、胃腸癌、類表皮癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、神経芽細胞腫、頭部および／または頸部の癌、膀胱癌、腎臓癌、脳癌、白血病、またはリンパ腫より選択される、請求項１２の方法。
16. 癌が多剤耐性癌である、請求項１０または１３の化合物。
17. 癌が多剤耐性癌である、請求項１１または１４の薬学的組成物。
18. 癌が多剤耐性癌である、請求項１２または１５の方法。
19. 癌がコンブレタスタチンＡ−４および／またはシスプラチンに対して耐性である、請求項１０、１３または１６の化合物。
20. 癌がコンブレタスタチンＡ−４および／またはシスプラチンに対して耐性である、請求項１１、１４または１７の薬学的組成物。
21. 癌がコンブレタスタチンＡ−４および／またはシスプラチンに対して耐性である、請求項１２、１５または１８の方法。
22. 化合物または薬学的組成物が、抗増殖薬剤、抗癌薬剤、細胞分裂停止薬剤、細胞傷害性薬剤および／または放射線療法と組み合わされて投与されようとする、請求項１０、１３、１６または１９の化合物。
23. 化合物または薬学的組成物が、抗増殖薬剤、抗癌薬剤、細胞分裂停止薬剤、細胞傷害性薬剤および／または放射線療法と組み合わされて投与されようとする、請求項１１、１４、１７または２０の薬学的組成物。
24. 化合物または薬学的組成物が、抗増殖薬剤、抗癌薬剤、細胞分裂停止薬剤、細胞傷害性薬剤および／または放射線療法と組み合わされて投与されようとする、請求項１２、１５、１８または２１の方法。