JP5344417B2

JP5344417B2 - Method for producing drug-silica inclusion body using water-oil interface

Info

Publication number: JP5344417B2
Application number: JP2007108375A
Authority: JP
Inventors: 浩之奥; 恵治神野; 健司茂木
Original assignee: Gunma University NUC
Current assignee: Gunma University NUC
Priority date: 2007-04-17
Filing date: 2007-04-17
Publication date: 2013-11-20
Anticipated expiration: 2027-04-17
Also published as: JP2008266157A

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a method for efficiently producing a silica inclusion body of a medicament in a mild condition, and to provide a pharmaceutical composition containing the silica inclusion body of the medicament. <P>SOLUTION: The method for producing the silica inclusion body of the medicament includes preparing a two-layer separated liquid comprising a layer of an aqueous solution of the medicament and a liquid layer of an alkoxysilane to form the silica inclusion body of the medicament at the interface of the two-layer separated liquid. The pharmaceutical composition is obtained by mixing the silica inclusion body with a supporting material allowable to a living body or wrapping the silica inclusion body with the supporting material in a capsule shape. The medicament is at least one selected from the group consisting of antibiotic materials and the like in various kinds of action forms such as cell wall synthesis inhibition, cell membrane inhibition and nucleic acid synthesis inhibition, and is useful for treating or preventing osteomyelitis, or as a bone cavity supplementation agent or a bone adhesive. <P>COPYRIGHT: (C)2009,JPO&INPIT

Description

本発明は、薬物の水性溶液の層とアルコキシシランの液層からなる二層分離液を調製することによって、界面においてアルコキシシランを加水分解し、薬物−シリカ封入体を生成させる方法に関する。本発明はまた、前記方法によって得られた薬物−シリカ封入体を生体に許容される支持材と混合するか、または該支持材にカプセル状に包み込むことを特徴とする、医薬組成物の製造方法に関する。 The present invention relates to a method of hydrolyzing alkoxysilane at an interface to produce a drug-silica inclusion body by preparing a two-layer separation liquid comprising an aqueous drug solution layer and an alkoxysilane liquid layer. The present invention also provides a method for producing a pharmaceutical composition, wherein the drug-silica inclusion body obtained by the above method is mixed with a biologically acceptable support material or encapsulated in the support material. About.

（１）整形外科領域に於ける骨髄炎治療の現況：
骨髄炎は、骨組織の感染を治療するのが極めて困難である。通常、この治療は感染された骨範囲の壊死組織切除法によって行われる。切除した空洞部には、生体吸収性の無いSeptopal（登録商標）チェーンまたはゲンタマイシンを含有するコラーゲンフリースを充填することによる、複数の抗生物質での局所的治療が有効である。この場合、ゲンタマイシンは細菌による病原菌を殺す高い用量で局部的に放出される。その他に骨髄炎の炎症を抑えるために抗生物質を取り込ませたカルシウム塩の骨代用材料が知られている（特許文献１）。 (1) Current status of osteomyelitis treatment in the orthopedic field:
Osteomyelitis is extremely difficult to treat infection of bone tissue. This treatment is usually performed by debridement of the infected bone area. Local treatment with multiple antibiotics by filling the excised cavity with a Sephatal® chain that is not bioabsorbable or a collagen fleece containing gentamicin is effective. In this case, gentamicin is released locally at high doses that kill bacterial pathogens. In addition, a bone substitute material of calcium salt in which an antibiotic is incorporated to suppress inflammation of osteomyelitis is known (Patent Document 1).

骨折後に生じた骨髄炎の治療に於いては感染の鎮静化と骨癒合の両方が必要であり、特に起因菌がMRSA（メチシリン耐性黄色ブドウ球菌）である場合には困難を伴うことが多い。これに対応する目的で、生体吸収性のないポリメタクリル酸メチルを主成分とする骨セメント80ｇに、抗生物質であるバンコマイシン２ｇとパニマイシン200 mgを混入したセメントビーズを作成し、治療に成功した事例が知られている（非特許文献１）。ただしセメントビーズは生体分解性がないために、感染の治まった術後７週目に抜去のために再手術を行う必要があった。 Treatment of osteomyelitis that occurs after a fracture requires both sedation of the infection and bone fusion, especially when the causative organism is MRSA (methicillin-resistant Staphylococcus aureus). For this purpose, we succeeded in treating cement beads by mixing 2g antibiotic vancomycin and 200mg panimycin with 80g bone cement mainly composed of polymethyl methacrylate which is not bioabsorbable. Is known (Non-Patent Document 1). However, since cement beads are not biodegradable, it was necessary to perform a reoperation for removal at 7 weeks after the operation.

一般に骨髄炎を治療するための医薬品組成物は、抗生物質を局所的に放出することができ、場所を保持する機能を有する材料（インプラント）であることが望まれている。しかしながら従来の方法である、生体親和性の無い材料による場合には細菌を殺すことはできても、材料の異物としての強い炎症反応が、生じる。また、生体吸収性問題の無い材料による場合には抗生物質の放出後に、再手術により材料の摘出を要することが、それぞれ問題点になっている。 In general, a pharmaceutical composition for treating osteomyelitis is desired to be a material (implant) capable of locally releasing antibiotics and having a function of holding a place. However, in the case of a conventional method, which is a material having no biocompatibility, even if bacteria can be killed, a strong inflammatory reaction as a foreign material of the material occurs. Further, in the case of using a material that does not have a bioabsorbable problem, it is a problem that the material must be removed by re-operation after the antibiotic is released.

（２）口腔外科領域に於ける慢性骨髄炎治療の現況（顎骨手術に於ける問題点）：
下顎骨や上顎骨には、(a)う蝕、歯周疾患に継発する歯性の慢性骨髄炎、(b) 悪性腫瘍の放射線治療後の慢性骨髄炎である放射線骨髄炎、(c)バイフォスフォネート投与による慢性骨髄炎が多く、しかも治療が困難なために問題となっている。また、顎口腔外科領域に頻発する嚢胞摘出後の感染を防止しつつ骨腔を補填できる材料や、抗生物質を含有し生体吸収性もある骨接合材料の開発が課題となっている。
慢性骨髄炎の治療は、(a)原因歯の抜去、(b)感染骨髄の外科的除去、(c)全身的、局所的抗生物質療法からなる。特に(c)抗生物質療法は、術後早期から開始され、かなりの長期間にわたる場合が多い。しかし、骨内への抗生物質の移行は不十分で、従って完全治癒の可能性は低く、患者には大きな負担となっている。 (2) Current status of chronic osteomyelitis treatment in oral surgery (problems in jaw surgery):
The mandible and maxilla include (a) dental osteomyelitis secondary to caries and periodontal disease, (b) radiation osteomyelitis, which is chronic osteomyelitis after radiation therapy for malignant tumors, (c) There are many chronic osteomyelitis caused by phosphonate administration, and it is difficult to treat. In addition, the development of a material capable of filling the bone cavity while preventing infection after cystectomy that frequently occurs in the field of maxillofacial surgery, and an osteosynthesis material containing an antibiotic and having bioresorbability have been an issue.
Treatment of chronic osteomyelitis consists of (a) removal of the causative tooth, (b) surgical removal of the infected bone marrow, and (c) systemic, topical antibiotic therapy. In particular, (c) antibiotic therapy is started at an early stage after the operation, and often extends over a considerably long period. However, the transfer of antibiotics into the bone is inadequate, and therefore the possibility of complete healing is low, placing a heavy burden on the patient.

従来の抗生物質である、トシル酸スルタミシリン製剤では（ファイザー社、ユナシン）、１日750-1125ｍｇを２〜３回に分けて分服する。このように抗生物質を頻回に長期間にわたって服用する必要があった。これは薬剤の病巣や組織内移行が悪かったためである。最近はこれらの問題を解決するために、３日間の服用（毎日２錠（500ｍｇ））で７日間
効果の持続するアジスロマイシン製剤（ファイザー社、ジスロマック）が開発されている。しかし服用回数や組織移行性が改善されたのみであり、長期の服用を必要とする点で未だに問題が未解決のまま残っている。 A conventional antibiotic, sultamicillin tosylate preparation (Pfizer, Unacin), 750-1125 mg daily is divided into 2 to 3 doses. Thus, it was necessary to take antibiotics frequently over a long period of time. This is because the lesion of the drug and the transfer into the tissue were bad. Recently, in order to solve these problems, an azithromycin preparation (Pfizer, Zithromac), which lasts for 7 days after taking 3 days (2 tablets (500 mg) daily), has been developed. However, the number of doses and tissue transfer are only improved, and the problem still remains unsolved in that it requires long-term use.

動物ではあるが、長期服用の改善を目的とした研究例がある（非特許文献２）。ここでは抗生物質としてゲンタマイシンやクリンダマイシンを含んだポリメタクリル酸メチルのビーズを炎症モデル動物（ワラビー）の下顎骨に埋め込んだ事例が報告されている。しかしながら、整形外科領域での骨髄炎治療の場合と同様な問題点、基材による炎症や再手術の必要性は依然として残っている。 Although it is an animal, there is an example of research aimed at improving long-term administration (Non-patent Document 2). Here, a case has been reported in which beads of polymethyl methacrylate containing gentamicin or clindamycin as antibiotics are embedded in the mandible of an inflammation model animal (Wallaby). However, the same problems as in the treatment of osteomyelitis in the orthopedic field, the need for inflammation and re-operation due to the substrate remain.

（３）口腔外科や整形外科に用いられる生体材料の現況：
近年の生体材料学の急速な進展によって、多くの生体内で吸収されて組織置換される材料が開発されている（非特許文献３）。用いられる材料には、リン酸カルシウム系のセラミックス材料、ポリ乳酸やポリグリコール酸やポリ乳酸グリコール酸共重合体のような合成高分子材料、コラーゲンやゼラチンなどの天然高分子材料、腸線などの生物由来材料に分類される。一般的な用途として、外科手術時の組織の縫合、固定、被覆、ステントなどの形態保持、補強や骨欠損の補填、組織誘導の足場、薬剤を徐放するコーティング材としての利用が挙げられる。このうち、口腔外科領域や整形外科領域に於いては、主に組織置換される材料として手術用縫合糸、骨接合剤、骨欠損補填剤が臨床応用されている。近年の開発例としては、ポリ乳酸とヒドロキシアパタイトを圧縮成型した吸収性骨接合剤（非特許文献４）が知られている。 (3) Current status of biomaterials used in oral and orthopedic surgery:
Due to rapid progress in biomaterials in recent years, materials that can be absorbed and replaced in many living bodies have been developed (Non-patent Document 3). Materials used include calcium phosphate ceramic materials, synthetic polymer materials such as polylactic acid, polyglycolic acid and polylactic acid glycolic acid copolymers, natural polymer materials such as collagen and gelatin, and biological materials such as intestinal wires are categorized. Common applications include tissue suturing, fixation, coating, and stent retention during surgery, reinforcement and bone defect filling, tissue-guided scaffolds, and use as a coating material for sustained drug release. Among these, in the surgical field and orthopedic field, surgical sutures, osteosynthesis agents, and bone defect filling agents are clinically applied mainly as materials for tissue replacement. As an example of recent development, an absorptive bone cement (non-patent document 4) in which polylactic acid and hydroxyapatite are compression-molded is known.

（４）天然物や生理活性物質を用いた、シリカ作成法の現況：
生体材料に限らず、一般的な無機質素材であるシリカ合成には、ゾル-ゲル法が多く用いられる。これは、アルコキシシラン（例えば、テトラエトキシシラン Si(OEt)₄）を酸性条件下（例えばpH 1.5〜3.0）での水―メタノール（例えば１：１）混合溶媒中で、加水分解と脱水縮合によりSiO₂固体を生成する方法である。同様に塩基性条件下でもSiO₂固体を生成することができる。通常は均一系で反応を進行させている。 (4) Current status of silica preparation methods using natural products and physiologically active substances:
The sol-gel method is often used for synthesizing silica, which is a general inorganic material, not limited to biomaterials. This is due to hydrolysis and dehydration condensation of an alkoxysilane (eg, tetraethoxysilane Si (OEt) ₄ ) in a water-methanol (eg, 1: 1) mixed solvent under acidic conditions (eg, pH 1.5 to 3.0). This is a method for producing a SiO ₂ solid. Similarly, SiO ₂ solids can be produced under basic conditions. Usually, the reaction proceeds in a homogeneous system.

ゾル-ゲル法は生体材料の作成に多用されているが、最適なpHが生理的pHの範囲外にある点で問題となっている。医薬品や蛋白質をシリカへ封入するにはリン酸緩衝液の緩衝範囲内（pH 6.2-8.2）でシリカ形成を行うことが望まれている。 The sol-gel method is widely used for producing biomaterials, but it is problematic in that the optimum pH is outside the range of physiological pH. In order to encapsulate drugs and proteins in silica, it is desired to form silica within the buffer range of phosphate buffer (pH 6.2-8.2).

天然物や高分子化合物を用いてシリカを作成した例として、天然物や高分子化合物のアルコキシシランから誘導されるシリカの作成例がある。例えば、糖、糖酸、糖アルコール、ならびにグリセロール、ソルビトール、マンノース、およびデキストランを含む多糖類由来アルコキシシラン（特許文献２）やポリオール由来のテトラアルコキシシラン（特許文献３）を用いている。これらの方法の特徴は、一般に用いられるシリカ出発原料、テトラエトキシシランではなく、天然物や高分子化合物から合成・単離されたアルコキシシランを出発原料として用いる点にある。 As an example of producing silica using a natural product or a polymer compound, there is an example of producing silica derived from an alkoxysilane of a natural product or a polymer compound. For example, sugar-derived sugar acid, sugar alcohol, and polysaccharide-derived alkoxysilane (Patent Document 2) and polyol-derived tetraalkoxysilane (Patent Document 3) containing glycerol, sorbitol, mannose, and dextran are used. A feature of these methods is that an alkoxysilane synthesized and isolated from a natural product or a polymer compound is used as a starting material instead of a commonly used silica starting material, tetraethoxysilane.

（５）シリカを用いたインプラントの現況：
シリカをインプラントとして臨床応用した例には、リン酸カルシウム系ガラスが多い。特にバイオガラスと呼ばれるNa₂O-CaO-SiO₂-P₂O₅系ガラスは、骨と直接結合する最初の例として知られている（非特許文献５）。ここに於いてシリカの成分SiO₂が用いられているのは、生体適合性の期待されるリン酸カルシウムそのものでは強度が不足して脆い材料になりやすかったこと、ゾル-ゲル法により材料を作成できること、の２点の理由が考えられる。 (5) Current status of implants using silica:
Examples of clinical application of silica as an implant include calcium phosphate glass. In particular, Na ₂ O—CaO—SiO ₂ —P ₂ O ₅ glass called bioglass is known as the first example of direct bonding with bone (Non-patent Document 5). The silica component SiO ₂ is used here because the calcium phosphate itself, which is expected to be biocompatible, was not strong enough to be brittle, the material can be made by the sol-gel method, There are two possible reasons.

そのほかのインプラントとして、予め作成したシリカ繊維を用いた、繊維強化型医療用
インプラント（特許文献４）。ゾル-ゲル法により作成したシリカを用いる、ケイ酸カルシウム組成物（特許文献５）などがある。 As another implant, a fiber-reinforced medical implant using a silica fiber prepared in advance (Patent Document 4). There is a calcium silicate composition (Patent Document 5) using silica prepared by a sol-gel method.

一般にはシリカそのものでは、強度はあるものの、生体適合性が低いと考えられている。そこで、シリカの生体適合性を改善する方法として、ゾル-ゲル誘導シリカ系生物学的活性ガラス上にカルシウム−ホスフェート皮膜を生成させて生体適合性を付与した事例も報告されている（特許文献６）。 In general, silica itself is considered to be low in biocompatibility although it has strength. Thus, as a method for improving the biocompatibility of silica, a case in which a biocompatibility is imparted by forming a calcium phosphate film on a sol-gel derived silica-based biologically active glass has been reported (Patent Document 6). ).

（６）シリカを用いた薬物放出体の現況：
組織置換を目的とするインプラントには、組織形成を促進する分子を放出する機能を持つものが知られている。例えば骨形成を目的として、酸性メタノール水溶液（水5.4mL、テトラメトキシシラン5.4mL、メタノール5.0mL、1N HClaq.10μLの混合物）を用いたゾル-ゲル法によってサイトカインであるTGF-β1を取り込ませた生理活性ガラスが作成されている（特許文献７）。 (6) Current status of drug emitters using silica:
Known implants for tissue replacement have a function of releasing molecules that promote tissue formation. For example, for the purpose of bone formation, TGF-β1, which is a cytokine, was incorporated by a sol-gel method using an acidic methanol aqueous solution (a mixture of water 5.4 mL, tetramethoxysilane 5.4 mL, methanol 5.0 mL, 1N HClaq.10 μL). Bioactive glass has been created (Patent Document 7).

その他に、生理活性蛋白の安定な封入を目的として、少量の酸を添加（水600μLに0.1N
HClaq. 0.5μL）したジグリセリルシラン（0.2ｇ）水溶液に、微量の血液凝固第Xa因子（0.011μg）を封入した、ゾル-ゲル法による実施例が開示されている（特許文献２）。これらは何れも酸の添加によるゾル-ゲル反応の進行や、多量のアルコールを用いた均一系水溶液でのシリカ形成を行っている点に問題がある。 In addition, a small amount of acid is added for the purpose of stable encapsulation of bioactive proteins (0.1N in 600μL of water).
An example by the sol-gel method in which a trace amount of blood coagulation factor Xa (0.011 μg) is encapsulated in an aqueous solution of diglycerylsilane (0.2 g) (HClaq. 0.5 μL) is disclosed (Patent Document 2). All of these have problems in that the sol-gel reaction is progressed by the addition of acid, and silica is formed in a homogeneous aqueous solution using a large amount of alcohol.

（７）口腔外科学の視点から見た新材料の必要性：
近年，ポリ乳酸を代表とする生体吸収性材料の研究開発が進み，一部分は既に日常臨床に使われている．歯科口腔外科臨床における生体吸収性材料の適用は，顎骨骨折の場合の骨接合プレートなどから，薬剤の局所的持続的投与、手術後の骨腔の補填材などへの応用などが幅広く考えられる。一般にポリ乳酸に加えて多く検討される材料にはリン酸カルシウム、ヒドロキシアパタイトやこれらの複合材料があるが、分解の遅いことや、血流中への移行による塞栓が強く懸念されるために、口腔外科学分野においてほとんど使用されていない。そこでリン酸カルシウム、ヒドロキシアパタイトを使わずに、抗生物質を局所投与できる新規な生体吸収性材料が求められている。
特開２００６−１６７４６９号公報特表２００５−５２８４４５号公報特表２００５−５３６６２５号公報特表２００１−５１４０４９号公報特表２００３−５０６３９１号公報特表２０００−５１３７１４号公報特表平１０−５０３２１０号公報河野稔文ら、東日本整災会誌、14巻、539-543ページ、2002年 M. P. HartleyとS. Sanderson. Austaralian Veterinary Journal, 81巻, 742-744ページ, 2003年根岸靖雄ら、生体材料、１９巻、２７〜３５ページ、２００１年松末吉隆、骨・関節・靱帯、１７巻、１２４３〜１２５１ページ、2004年 Larry L. Hench、Journal of Materials Science: Materials in Medicine、17巻、967-978ページ、2006年 (7) Need for new materials from the viewpoint of oral surgery:
In recent years, research and development of bioabsorbable materials such as polylactic acid has progressed, and some of them have already been used in daily clinical practice. The application of bioabsorbable materials in dental and oral surgery clinics can be widely applied from osteosynthesis plates in the case of fractures of the jawbone, to local and continuous administration of drugs, and to bone cavity filling materials after surgery. In general, there are calcium phosphate, hydroxyapatite, and composite materials of these materials that are often studied in addition to polylactic acid. However, since there is a strong concern for slow degradation and embolization due to migration into the bloodstream, It is rarely used in the scientific field. Therefore, a new bioabsorbable material that can administer antibiotics locally without using calcium phosphate or hydroxyapatite is required.
JP 2006-167469 A JP 2005-528445 Gazette JP 2005-536625 A JP-T-2001-514049 Special table 2003-506391 gazette Special Table 2000-513714 Japanese National Patent Publication No. 10-503210 Kawano, Y. et al., East Japan Disaster Reduction Journal, 14, 539-543, 2002 MP Hartley and S. Sanderson. Austaralian Veterinary Journal, 81, 742-744, 2003 Negishi Ikuo et al., Biomaterials, 19, 27-35, 2001 Yoshitaka Matsusue, Bone / Joint / Ligament, 17 volumes, 1243-1251, 2004 Larry L. Hench, Journal of Materials Science: Materials in Medicine, 17, 967-978, 2006

本発明の課題は、慢性骨髄炎などの疾患の予防や治療に際して、抗生物質等の薬物の長
期間作用と局所的投与を行うことのできる新規な材料を提供することにある。 An object of the present invention is to provide a novel material capable of performing long-term action and local administration of drugs such as antibiotics in the prevention and treatment of diseases such as chronic osteomyelitis.

本発明者らは、上記目的を達成するために新たなシリカ生成法に着目した。ケイ素は生体の必須微量元素であり、ヒヨコやネズミの骨格形成へ重要な関わりを持つことがわかっている。イネやアサガオの植物体やケイソウ類の外骨格には二酸化ケイ素（バイオシリカ）が構造形成材料として用いられている。近年、バイオシリカの形成には、特殊なタンパク質やアミン類が鋳型や酵素として関与していることが最近明らかになってきた。 In order to achieve the above object, the present inventors have paid attention to a new silica production method. Silicon is an essential trace element in living organisms and has been found to have an important role in the skeleton formation of chicks and mice. Silicon dioxide (biosilica) is used as a structure-forming material for the exoskeletons of rice and morning glory plants and diatoms. In recent years, it has recently become clear that special proteins and amines are involved as templates and enzymes in the formation of biosilica.

バイオシリカ形成には２つの過程が知られている。ひとつは海綿動物の骨組織としてのシリカを生成する加水分解酵素、シリカテインα（ Y. Zhou, K., Shimizu, J. N. Cha, G. D. Stucky, and D. E. Morse. Angew Chem. Int. Ed. 1999, 38, 780-782. および A. R. Bassindale, K. F. Brandstadt, T. H. Lane, P. G. Taylor. J. Inorg. Biochem.
2003, 96, 401-406.）による。もう一つはケイ藻類の外骨格を形成するポリアミン化合物（N. Kroger, R. Deutzmann, C. Bergsdorf, M. Sumper. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2000, 97, 14133-14138.）による。これらに於けるシリカ生成の特徴として何れも生理的pHの範囲内でSiO₂固体が生成している点にある。これは従来の酸、アルカリ、多量のアルコールを用いたゾルゲル法のシリカ生成と大きく異なっている。 Two processes are known for biosilica formation. One is a hydrolase that produces silica as a bone tissue of sponges, silicatein α (Y. Zhou, K., Shimizu, JN Cha, GD Stucky, and DE Morse. Angew Chem. Int. Ed. 1999, 38, 780-782. And AR Bassindale, KF Brandstadt, TH Lane, PG Taylor. J. Inorg. Biochem.
2003, 96, 401-406.). The other is a polyamine compound (N. Kroger, R. Deutzmann, C. Bergsdorf, M. Sumper. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2000, 97, 14133-14138.) That forms the exoskeleton of diatoms. . A feature of silica formation in these is that SiO ₂ solids are formed within a physiological pH range. This is very different from the conventional silica formation of sol-gel method using acid, alkali and a large amount of alcohol.

本発明者らは、水性溶液中の薬物が触媒的にアルコキシシランを加水分解させることができれば、穏和な条件でシリカを形成させることができると考えた。そして、薬物の例として、慢性骨髄炎の治療に用いられるアジスロマイシンを用いてシリカ生成の反応条件を精査した。
アジスロマイシンについて、３種類の濃度（0、5、10 mg）のリン酸緩衝水溶液 (200μL, 60 mM, pH 6.5)を調製した。調製した水溶液に対し界面を乱さないように、静かにテトラエトキシシラン (200μL)を上層に加え、４℃にて静置した。 The present inventors thought that silica can be formed under mild conditions if the drug in the aqueous solution can hydrolyze alkoxysilane catalytically. Then, as an example of a drug, azithromycin used for the treatment of chronic osteomyelitis was used to examine the reaction conditions for silica formation.
For azithromycin, three types of phosphate buffer aqueous solutions (200 μL, 60 mM, pH 6.5) with different concentrations (0, 5, 10 mg) were prepared. Tetraethoxysilane (200 μL) was gently added to the upper layer so as not to disturb the interface with the prepared aqueous solution, and the mixture was allowed to stand at 4 ° C.

１９時間後に界面を観察し、シリカ形成の有無を実体顕微鏡により観察したところ、明瞭なシリカ形成が油水界面に確認された。シリカ形成が抗生物質（アジスロマイシン）に由来することは、その溶液濃度が増えるに従いシリカ形成の多くなることから明らかとなった。このように、薬物の水性溶液とアルコキシシランの水油界面を用いると、系中に酸、塩基、熱を加えなくても、薬物が触媒的にアルコキシシランを加水分解して、SiO₂固体を生成することを明らかにできた。 When the interface was observed after 19 hours and the presence or absence of silica formation was observed with a stereomicroscope, clear silica formation was confirmed at the oil-water interface. The fact that silica formation is derived from antibiotics (azithromycin) became clear from the fact that silica formation increased as the solution concentration increased. In this way, when the aqueous solution of the drug and the water / oil interface of the alkoxysilane are used, the drug can hydrolyze the alkoxysilane catalytically without adding acid, base, or heat to the system, and the SiO ₂ solid can be obtained. It was clear that it was generated.

上記方法で生成する薬物−シリカ封入体をポリ乳酸-グリコール酸共重合体と粉砕混合した製剤は、任意の形に成型することが可能であった。更にこの製剤をラット皮下への埋入空隙に於いて吸収性と炎症性を検討し、シリカの有無に於いて同程度の吸収性と低い炎症性であることが明らかとなった。以上より、本発明を完成するに至った。 A preparation obtained by pulverizing and mixing a drug-silica inclusion body produced by the above method with a polylactic acid-glycolic acid copolymer could be molded into an arbitrary shape. Furthermore, the absorbability and inflammatory properties of this preparation were examined in the rat's subcutaneous space, and it was revealed that the same absorbability and low inflammatory properties were obtained with and without silica. From the above, the present invention has been completed.

すなわち、本発明は以下のとおりである。
（１）薬物のシリカ封入体の製造方法であって、薬物の水性溶液の層とアルコキシシランの液層からなる二層分離液を調製して、該二層分離液の界面において薬物のシリカ封入体を生成させることを特徴とする方法。
（２）前記水性溶液のｐＨが６．２〜８．２であることを特徴とする、（１）の方法。
（３）前記水性溶液のｐＨが６．５〜７．５であることを特徴とする、（１）の方法。
（４）薬物の水性溶液が、薬物がリン酸緩衝液に溶解した水性溶液であることを特徴とする、（１）〜（３）のいずれかの方法。
（５）薬物が、細胞壁合成阻害作用型抗生物質、細胞膜阻害作用型抗生物質、核酸合成阻害作用型抗生物質、蛋白合成阻害作用型抗生物質、葉酸代謝経路阻害型抗生物質、βラクタマーゼ阻害薬、サルファ薬、抗感染症薬、および防腐剤からなる群より選択される少な
くとも一つの薬物である、（１）〜（４）のいずれかの方法。
（６）薬物が、アンピシリン、バカンピシリン、アモキシシリン、ピブメシリナム、アモキシシリン、スルタミシリン、ピペラシリン、アスポキシリン、ベンジルペニシリン、クロキサシリン、オキサシリン、カルベニシリン、セファロクル、セフロキサジン、セファドロキシル、セフィキシム、セフテラムピボキシル、セフロキシムアキセチル、セフポドキシムプロキセチル、セフォチアムヘキセチル、セフジニル、セフチブテン、セフジトレンピボキシル、セフカペンピボキシル、セファゾリン、セフォゾプラン、セフメタゾール、セフォチアム、セフスロジン、セフォペラゾン、セフォタキシム、セフメノキシム、セフトリアキソン、セフタジシム、セフォジシム、セフピロム、セフェピム、ファロペネム、イミペネム、パニペネム、メロペネム、ビアペネム、ドリペネム、アズトレオナム、バンコマイシン、テイコプラニン、ホスミシン、硫酸ポリミキシンB、硫酸コリスチン、グラミシジンS、アンホテリシンB、レボフロキサシン、オフロキサシン、ノルフロキサシン、エノキサシン、シプロフロキサシン、ロメフロキサシン、トスフロキサシン、スパルフロキサシン、ガチフロキサシン、プルリフロキサシン、モキシフロキサシン、パズフロキサン、リファンピシン、ジベカシン、トブラマイシン、アミカシン、イセパマイシン、ミクロノマイシン、ストレプトマイシン、カナマイシン、ゲンタマイシン、エリスロマイシン、ロキタマイシン、ジョサマイシン、ロキスロマイシン、クラリスロマイシン、アジスロマイシン、テリスロマイシン、ドキシサイクリン、ミノサイクリン、クロラムフェニコール、リンコマイシン、クリンダマイシン、トリメトプリム、クラブラン酸、スルバクタム、タゾバクタム、サルファメトキサゾール、サラゾピリン、イソニアジド、リファンピシン、ピラジナミド、エタンブトール、グリセオフルビン、アムホテリシンB、５−フルオロシトシン、フルコナゾール、ミコナゾール、イトラコナゾール、アシクロビル、ガンシクロビル、ホスカビル、イドクスウリジン、アマンタジン、インターフェロンγ、リバピリン、ラミプジン、メトロニダゾール、チニダゾール、フルコナゾール、メベンダゾール、パモ酸ピランテル、ジエチルカルバマジン、プラジカンテル、アルベンダゾール、イベルメクチン、キヌプリスチン、ダルホプリスチン、リネゾリド（linezolid）、スペクチノマイシン、ネチルマイシン、シソマイシン（sisomycin）、リンコサミン（lincosamin）、ラモプラニン（ramoplanin）、テリスロマイシン（telithromycin）、ナイスタチン、フシジン酸（fusidic acid）、クロルヘキシジン、およびポリヘキサニド（polyhexanid）からなる群より選択される薬物である、（１）〜（４）のいずれかの方法。
（７）（１）〜（６）のいずれかの方法によって薬物のシリカ封入体を製造し、得られたシリカ封入体を、生体に許容される支持材と混合するか、または該支持材にカプセル状に包み込むことを特徴とする、医薬組成物の製造方法。
（８）生体に許容される支持材が生体内分解性ポリマーである、（７）の方法。
（９）生体内分解性ポリマーが、ポリ乳酸、ポリ乳酸グリコール酸共重合体、ポリヒドロキシカルボン酸、ポリデプシペプチド、およびポリアミノ酸からなる群から選択される少なくとも一つ以上のポリマーである、（８）の医薬組成物。
（１０）医薬組成物が、骨髄炎の治療用または予防用である、（７）〜（９）のいずれかの方法。
（１１）医薬組成物が、骨腔補填剤または骨接合剤である、（７）〜（１０）のいずれかの方法。
（１２）（１）〜（６）のいずれかの方法によって製造された、薬物のシリカ封入体。
（１３）（１２）の薬物のシリカ封入体を、生体に許容される支持材に混合するか、または該支持材にカプセル状に包み込んでなる、医薬組成物。
That is, the present invention is as follows.
(1) A method for producing a silica inclusion body of a drug, comprising preparing a two-layer separation liquid comprising an aqueous drug solution layer and an alkoxysilane liquid layer, and encapsulating the drug silica at the interface of the two-layer separation liquid A method characterized by generating a body.
(2) The method according to (1), wherein the pH of the aqueous solution is 6.2 to 8.2.
(3) The method according to (1), wherein the pH of the aqueous solution is 6.5 to 7.5.
(4) The method according to any one of (1) to (3), wherein the aqueous solution of the drug is an aqueous solution in which the drug is dissolved in a phosphate buffer.
(5) The drug is a cell wall synthesis inhibitory antibiotic, a cell membrane inhibitory antibiotic, a nucleic acid synthesis inhibitory antibiotic, a protein synthesis inhibitory antibiotic, a folate metabolic pathway inhibitory antibiotic, a β-lactamase inhibitor, The method of any one of (1) to (4), which is at least one drug selected from the group consisting of sulfa drugs, anti-infective drugs, and preservatives.
(6) The drug is ampicillin, bacampicillin, amoxicillin, pibmesilinum, amoxicillin, sultamicillin, piperacillin, aspoxillin, benzylpenicillin, cloxacillin, oxacillin, carbenicillin, cephalocl, cefloxazine, cefixoxime, cefoxime cepoxime, cepoxime Doximproxetyl, cefotiam hexetyl, cefdinir, ceftibutene, cefditoren pivoxil, cefcapene pivoxil, cefazolin, cefozopran, cefmetazole, cefotiam, cefrosin, cefoperazone, cefotaxime, cefefem cefifem , Faropenem, imipenem, panipenem, Lopenem, biapenem, doripenem, aztreonam, vancomycin, teicoplanin, fosmicin, polymyxin sulfate B, colistin sulfate, gramicidin S, amphotericin B, levofloxacin, ofloxacin, norfloxacin, enoxacin, ciprofloxacin, lofloxacin, tosfloxacin, tosfloxacin Xacin, pullrifloxacin, moxifloxacin, pazufloxane, rifampicin, dibekacin, tobramycin, amikacin, isepamicin, micronomycin, streptomycin, kanamycin, gentamicin, erythromycin, rokitamicin, josamycin, roxromycin, clarithromycin, azithromycin , Terithromycin, Doxycycline, Minosa Clin, chloramphenicol, lincomycin, clindamycin, trimethoprim, clavulanic acid, sulbactam, tazobactam, sulfamethoxazole, salazopyrine, isoniazid, rifampicin, pyrazinamide, ethambutol, griseofulvin, amphotericin B, 5-fluorocytosine, fluconazole , Miconazole, itraconazole, acyclovir, ganciclovir, foscavir, idoxuridine, amantadine, interferon gamma, rivapirin, ramipudine, metronidazole, tinidazole, fluconazole, mebendazole, pyrantel pamoate, diethylcarbamazine, praziquantel, ivelmethol , Linezolid, specchinomy A drug selected from the group consisting of syn, netilmycin, sisomycin, lincosamin, ramoplanin, telithromycin, nystatin, fusidic acid, chlorhexidine, and polyhexanid The method according to any one of (1) to (4).
(7) A silica inclusion body of a drug is produced by any one of the methods (1) to (6), and the obtained silica inclusion body is mixed with a support material acceptable to a living body, or the support material is used. A method for producing a pharmaceutical composition, comprising encapsulating a capsule.
(8) The method according to (7), wherein the biologically acceptable support material is a biodegradable polymer.
(9) The biodegradable polymer is at least one polymer selected from the group consisting of polylactic acid, polylactic acid glycolic acid copolymer, polyhydroxycarboxylic acid, polydepsipeptide, and polyamino acid. ) Pharmaceutical composition.
(10) The method according to any one of (7) to (9), wherein the pharmaceutical composition is for treatment or prevention of osteomyelitis.
(11) The method according to any one of (7) to (10), wherein the pharmaceutical composition is a bone cavity filling agent or an osteosynthesis agent.
(12) A silica inclusion body for a drug produced by the method according to any one of (1) to (6).
(13) A pharmaceutical composition, wherein the silica inclusion body of the drug of (12) is mixed with a support material acceptable to a living body or is encapsulated in the support material.

本発明の方法によれば、穏和な条件で効率よく薬物のシリカ封入体を得ることができる。本発明によって得られる医薬組成物は、例えば、従来の方法では十分な治療成績の上がらない抗生物質の投与による炎症の予防や治療、特に口腔外科領域、整形外科領域に於け
る慢性骨髄炎の予防や治療に対して、抗生物質の長期間作用と局所的投与を行う新規な材料として有用であり、手術後の骨腔への補填剤などとしての応用も期待される。 According to the method of the present invention, a silica inclusion body of a drug can be efficiently obtained under mild conditions. The pharmaceutical composition obtained by the present invention can be used for the prevention and treatment of inflammation, for example, prevention of chronic osteomyelitis in the oral and orthopedic fields, for example, by administration of antibiotics that do not achieve satisfactory therapeutic results by conventional methods. It is useful as a novel material for long-term action and local administration of antibiotics for treatment and treatment, and is expected to be applied as a bone filling agent after surgery.

本発明の方法は、薬物のシリカ封入体の製造方法であって、薬物の水性溶液の層とアルコキシシランの液層からなる二層分離液を調製して、該二層分離液の界面において薬物のシリカ封入体を生成させることを特徴とする方法である。 The method of the present invention is a method for producing a silica inclusion body of a drug, wherein a two-layer separation liquid comprising an aqueous drug solution layer and an alkoxysilane liquid layer is prepared, and the drug is formed at the interface of the two-layer separation liquid. The silica inclusion body is produced.

本発明に用いられるアルコキシシランとしては、下記一般式 (I) で表される化合物が挙げられる。
式（I）中、R₁〜R₄は任意のアルキル基を示す。アルキル基は直鎖アルキル基でも分岐アルキル基でもよい。また、このアルキル基には、R₁〜R₄の任意の２〜４つが共有結合によって環を形成したアルキル基も含まれる。またアルキル基の一部の水素がアルコール、アミン、カルボン酸、アミド、エステル、芳香環、複素環によって置換されたアルキル基も含まれる。
R₁〜R₄に示されるアルキル基の種類は、製剤目的にあわせて任意に選択でき、特に制限されないが、R₁〜R₄がC_nH_2n+1-で表される短鎖のアルキル基の場合、炭素数ｎが１〜３のものが好ましい。 Examples of the alkoxysilane used in the present invention include compounds represented by the following general formula (I).
In formula (I), R < ₁ > -R < ₄ > shows arbitrary alkyl groups. The alkyl group may be a linear alkyl group or a branched alkyl group. The alkyl group also includes an alkyl group in which any two to _four of R _{1 to} R ₄ form a ring by a covalent bond. Further, an alkyl group in which a part of hydrogen of the alkyl group is substituted with alcohol, amine, carboxylic acid, amide, ester, aromatic ring or heterocyclic ring is also included.
Kind of the alkyl group represented by R ₁ to R ₄ may optionally be selected in accordance with the purposes of formulation is not particularly limited, R ₁ to R ₄ are C _n H _{2n + 1} - alkyl short chain represented by In the case of a group, those having 1 to 3 carbon atoms are preferred.

アルコキシシランの液層は、使用するアルコキシシランが液体である場合はアルコキシシランをそのまま用いることができ、アルコキシシランが固体である場合は有機溶媒に溶解した液を使用することができる。有機溶媒としては、例えば、酢酸エチルやメチレンクロリドなどが挙げられる。
なお、薬物の水性溶液の層とアルコキシシランの液層からなる二層分離液においては、薬物の水性溶液の層とアルコキシシランの液層のいずれが上であってもよく、いずれが上になるかは各層の液体の比重による。
例えば、R₁〜R₄がC₂H₅-で表される、テトラエトキシシランは常温で液体であり、通常、薬物の水性溶液より比重が軽いために、二層分離液では上層に配分される。 As the liquid layer of the alkoxysilane, when the alkoxysilane to be used is a liquid, the alkoxysilane can be used as it is, and when the alkoxysilane is a solid, a liquid dissolved in an organic solvent can be used. Examples of the organic solvent include ethyl acetate and methylene chloride.
In the two-layer separation liquid composed of an aqueous drug solution layer and an alkoxysilane liquid layer, either the aqueous drug solution layer or the alkoxysilane liquid layer may be on the top, either of which is on top. This depends on the specific gravity of the liquid in each layer.
For example, tetraethoxysilane, in which R _{1 to} R ₄ are represented by C ₂ H _5- , is a liquid at room temperature and usually has a lower specific gravity than an aqueous solution of a drug. The

薬物の種類としては、薬理活性を有し、アルコキシシランと反応してシリカを生成させることができるものであればよいが、分子内に水酸基を有するものが好ましい。
具体的には、細胞壁合成阻害作用型抗生物質（ペニシリン系、セフェム・オキサセフェム系、ペネム・カルバペネム系、モノバクタム系、ペプチド系、ホスホマイシン系）、細胞膜阻害作用型抗生物質（ポリペプチド系、ポリエン系）、核酸合成阻害作用型抗生物質（キノロン系、リファンピシン系、インターフェロン系）、蛋白合成阻害作用型抗生物質（アミノグリコシド系、マクロライド・ケトリド系、テトラサイクリン系、クロラムフェニコール系、リンコマイシン系）、葉酸代謝経路阻害型抗生物質（トリメトプリム系）、βラクタマーゼ阻害薬、サルファ薬、抗感染症薬（抗細菌薬、抗結核薬、抗真菌薬、抗ウイルス薬、寄生虫用薬、原虫用薬）、および防腐剤などが挙げられる。
より具体的には、アンピシリン、バカンピシリン、アモキシシリン、ピブメシリナム、アモキシシリン、スルタミシリン、ピペラシリン、アスポキシリン、ベンジルペニシリン、クロキサシリン、オキサシリン、カルベニシリン、セファロクル、セフロキサジン、セ
ファドロキシル、セフィキシム、セフテラムピボキシル、セフロキシムアキセチル、セフポドキシムプロキセチル、セフォチアムヘキセチル、セフジニル、セフチブテン、セフジトレンピボキシル、セフカペンピボキシル、セファゾリン、セフォゾプラン、セフメタゾール、セフォチアム、セフスロジン、セフォペラゾン、セフォタキシム、セフメノキシム、セフトリアキソン、セフタジシム、セフォジシム、セフピロム、セフェピム、ファロペネム、イミペネム、パニペネム、メロペネム、ビアペネム、ドリペネム、アズトレオナム、バンコマイシン、テイコプラニン、ホスミシン、硫酸ポリミキシンB、硫酸コリスチン、グラミシジンS、アンホテリシンB、レボフロキサシン、オフロキサシン、ノルフロキサシン、エノキサシン、シプロフロキサシン、ロメフロキサシン、トスフロキサシン、スパルフロキサシン、ガチフロキサシン、プルリフロキサシン、モキシフロキサシン、パズフロキサン、リファンピシン、ジベカシン、トブラマイシン、アミカシン、イセパマイシン、ミクロノマイシン、ストレプトマイシン、カナマイシン、ゲンタマイシン、エリスロマイシン、ロキタマイシン、ジョサマイシン、ロキスロマイシン、クラリスロマイシン、アジスロマイシン、テリスロマイシン、ドキシサイクリン、ミノサイクリン、クロラムフェニコール、リンコマイシン、クリンダマイシン、トリメトプリム、クラブラン酸、スルバクタム、タゾバクタム、サルファメトキサゾール、サラゾピリン、イソニアジド、リファンピシン、ピラジナミド、エタンブトール、グリセオフルビン、アムホテリシンB、５−フルオロシトシン、フルコナゾール、ミコナゾール、イトラコナゾール、アシクロビル、ガンシクロビル、ホスカビル、イドクスウリジン、アマンタジン、インターフェロンγ、リバピリン、ラミプジン、メトロニダゾール、チニダゾール、フルコナゾール、メベンダゾール、パモ酸ピランテル、ジエチルカルバマジン、プラジカンテル、アルベンダゾール、イベルメクチン、キヌプリスチン、ダルホプリスチン、リネゾリド（linezolid）、スペクチノマイシン、ネチルマイシン、シソマイシン（sisomycin）、リンコサミン（lincosamin）、ラモプラニン（ramoplanin）、テリスロマイシン（telithromycin）、ナイスタチン、フシジン酸（fusidic acid）、クロルヘキシジン、ポリヘキサニド（polyhexanid）などが挙げられる。 Any drug may be used as long as it has pharmacological activity and can react with alkoxysilane to form silica, but preferably has a hydroxyl group in the molecule.
Specifically, cell wall synthesis inhibitory antibiotics (penicillin, cephem / oxacephem, penem / carbapenem, monobactam, peptide, fosfomycin), cell membrane inhibitory antibiotics (polypeptide, polyene) ), Nucleic acid synthesis inhibitory antibiotics (quinolone, rifampicin, interferon), protein synthesis inhibitory antibiotics (aminoglycoside, macrolide / ketolide, tetracycline, chloramphenicol, lincomycin) , Folic acid metabolic pathway-inhibiting antibiotics (trimethoprim), β-lactamase inhibitors, sulfa drugs, anti-infective drugs (antibacterial drugs, antituberculosis drugs, antifungal drugs, antiviral drugs, parasitic drugs, protozoan drugs ), And preservatives.
More specifically, ampicillin, bacampicillin, amoxicillin, pibmesililin, amoxicillin, sultamicillin, piperacillin, aspoxillin, benzylpenicillin, cloxacillin, oxacillin, carbenicillin, cephalocl, cefloxazine, cefadoxime, cefofoxime ceftefram Doximproxetyl, cefotiam hexetyl, cefdinir, ceftibutene, cefditoren pivoxil, cefcapene pivoxil, cefazolin, cefozopran, cefmetazole, cefotiam, cefrosin, cefoperazone, cefotaxime, cefefem cefifem , Faropenem, imipenem, panipenem Meropenem, biapenem, doripenem, aztreonam, vancomycin, teicoplanin, fosmicin, polymyxin sulfate B, colistin sulfate, gramicidin S, amphotericin B, levofloxacin, ofloxacin, norfloxacin, enoxacin, ciprofloxacin, romefloxacin, tosfloxacin, tosfloxacin Xacin, pullrifloxacin, moxifloxacin, pazufloxane, rifampicin, dibekacin, tobramycin, amikacin, isepamicin, micronomycin, streptomycin, kanamycin, gentamicin, erythromycin, rokitamicin, josamycin, roxromycin, clarithromycin, azithromycin , Terithromycin, Doxycycline, Mino Iclin, chloramphenicol, lincomycin, clindamycin, trimethoprim, clavulanic acid, sulbactam, tazobactam, sulfamethoxazole, salazopyrine, isoniazid, rifampicin, pyrazinamide, ethambutol, griseofulvin, amphotericin B, 5-fluorocytosine, fluconazole , Miconazole, itraconazole, acyclovir, ganciclovir, foscavir, idoxuridine, amantadine, interferon gamma, rivapirin, ramipudine, metronidazole, tinidazole, fluconazole, mebendazole, pyrantel pamoate, diethylcarbamazine, praziquantel, ivelmethol , Linezolid, spectinoma Examples include isine, netilmycin, sisomycin, lincosamin, ramoplanin, telithromycin, nystatin, fusidic acid, chlorhexidine, polyhexanid and the like.

薬物の水性溶液としては、上記のような薬物を水または水性の緩衝液に溶解させて得られる水性溶液が挙げられるが、薬物をリン酸緩衝液に溶解して得られる水性溶液が好ましい。
リン酸緩衝液は薬理学的に許容されるものであればよく、含まれるリン酸塩の種類は特に限定されない。例えばH₂PO₄ ^-とHPO₄ ^2-の場合、Na⁺, K⁺, Rb⁺, Cs⁺, Mg²⁺, Ca²⁺, Sr²⁺,
Ba²⁺, Zn²⁺, Cu²⁺, Co²⁺, Al³⁺, Ga³⁺, In³⁺, La³⁺, Ce³⁺, Pr³⁺, Nd³⁺, Pm³⁺, Sm³⁺, Eu³⁺, Gd³⁺, Tb³⁺, Dy³⁺, Ho³⁺, Er³⁺, Tm³⁺, Yb³⁺ および Lu³⁺から選ばれる少なくとも１種の陽イオンとの塩が挙げられる。 Examples of the aqueous solution of the drug include an aqueous solution obtained by dissolving the drug as described above in water or an aqueous buffer solution, and an aqueous solution obtained by dissolving the drug in a phosphate buffer solution is preferable.
The phosphate buffer may be any pharmacologically acceptable, and the type of phosphate contained is not particularly limited. For example, in the case of H ₂ PO ₄ ^- and HPO ₄ ^2- , Na ⁺ , K ⁺ , Rb ⁺ , Cs ⁺ , Mg ²⁺ , Ca ²⁺ , Sr ²⁺ ,
Ba ²⁺ , Zn ²⁺ , Cu ²⁺ , Co ²⁺ , Al ³⁺ , Ga ³⁺ , In ³⁺ , La ³⁺ , Ce ³⁺ , Pr ³⁺ , Nd ³⁺ , Pm ³⁺ , Sm ³ A salt with at least one cation selected from ⁺ , Eu ³⁺ , Gd ³⁺ , Tb ³⁺ , Dy ³⁺ , Ho ³⁺ , Er ³⁺ , Tm ³⁺ , Yb ³⁺ and Lu ³⁺ Can be mentioned.

また、インプラントとして埋め込まれた生理環境との浸透圧を調節する目的や薬物の溶解度や放出量を調節するために、リン酸緩衝液には、その他の適量のイオン性化合物を含ませることもできる。このイオン性化合物としては、Na⁺, K⁺, Rb⁺, Cs⁺, Mg²⁺, Ca²⁺, Sr²⁺, Ba²⁺, Zn²⁺, Cu²⁺, Co²⁺, Al³⁺, Ga³⁺, In³⁺, La³⁺, Ce³⁺, Pr³⁺, Nd³⁺, Pm³⁺, Sm³⁺, Eu³⁺, Gd³⁺, Tb³⁺, Dy³⁺, Ho³⁺, Er³⁺, Tm³⁺, Yb³⁺ および Lu³⁺から選ばれる少なくとも１種の陽イオンとハロゲン化物イオンからなるイオン性化合物が挙げられる。 In addition, in order to adjust the osmotic pressure with the physiological environment embedded as an implant and to adjust the solubility and release amount of the drug, the phosphate buffer solution may contain other appropriate amount of ionic compound. . These ionic compounds include Na ⁺ , K ⁺ , Rb ⁺ , Cs ⁺ , Mg ²⁺ , Ca ²⁺ , Sr ²⁺ , Ba ²⁺ , Zn ²⁺ , Cu ²⁺ , Co ²⁺ , Al ³⁺ , Ga ³⁺ , In ³⁺ , La ³⁺ , Ce ³⁺ , Pr ³⁺ , Nd ³⁺ , Pm ³⁺ , Sm ³⁺ , Eu ³⁺ , Gd ³⁺ , Tb ³⁺ , Dy ³⁺ , Ho Examples thereof include an ionic compound composed of at least one cation selected from ³⁺ , Er ³⁺ , Tm ³⁺ , Yb ³⁺ and Lu ³⁺ and a halide ion.

また、薬物をリン酸緩衝液へ溶解させる目的で、まず、薬物を少量の有機溶媒に溶解させ、それをリン酸緩衝液に加えることによって薬物の水性溶液を調製することもできる。有機溶媒の種類と量は、製剤工程や薬理学的に許容される物質と容量であれば良く特に限定されないが、例えば、薬物を溶解させる最小量か同程度の、エタノール、メタノール、イソプロパノール、酢酸エチル、ジメチルスルホキシドの使用が挙げられる。 For the purpose of dissolving a drug in a phosphate buffer, an aqueous solution of the drug can be prepared by first dissolving the drug in a small amount of an organic solvent and adding it to the phosphate buffer. The type and amount of the organic solvent are not particularly limited as long as it is a volume and a substance acceptable in the formulation process or pharmacologically. Examples include use of ethyl and dimethyl sulfoxide.

薬物の水性溶液における、薬物の濃度は薬物の種類、溶解度、安定性、治療目的によっ
て決めることが好ましい。具体的には、０．０１〜５０００mg/mlが好ましく、０．１〜２０００mg/mLがより好ましい。
水性溶液のｐＨは薬物の活性に影響を与えないｐＨが好ましく、中性ｐＨが好ましい。具体的には、ｐＨ６．２〜８．２が好ましく、ｐＨ６．５〜７．５がより好ましい。 The concentration of the drug in the aqueous drug solution is preferably determined according to the type of drug, solubility, stability, and therapeutic purpose. Specifically, 0.01 to 5000 mg / ml is preferable, and 0.1 to 2000 mg / mL is more preferable.
The pH of the aqueous solution is preferably a pH that does not affect the activity of the drug, and is preferably a neutral pH. Specifically, pH 6.2 to 8.2 is preferable, and pH 6.5 to 7.5 is more preferable.

本発明の方法においては、薬物の水性溶液の層とアルコキシシランの液層からなる二層分離液を調製することで、該二層分離液の界面において、アルコキシシランがシリカに加水分解され、薬物のシリカ封入体が生成する。このアルコキシシランからシリカへの変換反応においては、薬物が触媒作用を担っていることが考えられる。
反応温度は特に制限されないが、薬物の安定性を考慮すると、０℃〜５０℃が好ましく、４℃〜常温がより好ましい。
また、反応は、従来のゾル−ゲル法とは異なり、反応系に酸や塩基を加えないで行うことが好ましい。これによって、薬物の活性に影響を与えることなく、穏和な条件で薬物のシリカ封入体を作製することができる。
生成した薬物のシリカ封入体は、凍結乾燥などの方法によって反応液から回収することができる。 In the method of the present invention, by preparing a two-layer separation liquid comprising an aqueous drug solution layer and an alkoxysilane liquid layer, the alkoxysilane is hydrolyzed to silica at the interface of the two-layer separation liquid, and the drug Of silica inclusions. In this conversion reaction from alkoxysilane to silica, it is considered that the drug has a catalytic action.
The reaction temperature is not particularly limited, but 0 ° C. to 50 ° C. is preferable and 4 ° C. to normal temperature is more preferable in consideration of drug stability.
In addition, unlike the conventional sol-gel method, the reaction is preferably performed without adding acid or base to the reaction system. Thereby, the silica inclusion body of the drug can be produced under mild conditions without affecting the activity of the drug.
The produced silica inclusion body of the drug can be recovered from the reaction solution by a method such as lyophilization.

上記のようにして得られる薬物のシリカ封入体は、従来のゾル−ゲル法によって得られた封入体とは異なる性質を有している。すなわち、ゾル−ゲル法によって得られたシリカ封入体は酸などを反応に使用するため、硬くて成型しにくいが、本発明の方法によって得られるシリカ封入体は穏和な条件で得られるため、硬すぎず、成型がしやすいというような利点を有している。 The silica inclusion body of the drug obtained as described above has properties different from those of the inclusion body obtained by the conventional sol-gel method. That is, the silica inclusion body obtained by the sol-gel method is hard and difficult to mold because it uses an acid or the like for the reaction, but the silica inclusion body obtained by the method of the present invention is obtained under mild conditions. However, it has an advantage that it is easy to mold.

上記のようにして得られる薬物のシリカ封入体を、生体に用いることが許容される支持材と均一に混合するか、または該支持材にカプセル状に包み込むことによって医薬組成物を得ることができる。 The pharmaceutical composition can be obtained by uniformly mixing the silica inclusion body of the drug obtained as described above with a support material that is allowed to be used in a living body, or encapsulating the support material in a capsule shape. .

生体に用いることが許容される支持材としては、例えば、水に難溶または不溶の生体内分解型のポリマーを用いることができる。水に難溶または不溶とは、水に対する溶解度が０〜約２００ｍｇ／ｍｌであるもの、さらに好ましくは、０〜約５０ｍｇ／ｍｌであるものが好ましい。 As a support material allowed to be used in a living body, for example, a biodegradable polymer that is hardly soluble or insoluble in water can be used. Slightly soluble or insoluble in water is preferably one having a solubility in water of 0 to about 200 mg / ml, more preferably 0 to about 50 mg / ml.

生体に用いることが許容される支持材の具体例としては、脂肪酸ポリヒドロキシカルボン酸〔例、α−ヒドロキシカルボン酸類（例、乳酸，グリコール酸，２−ヒドロキシ酪酸、２−ヒドロキシ吉草酸、２−ヒドロキシ−３−メチル酪酸、２−ヒドロキシカプロン酸、２−ヒドロキシイソカプロン酸、２−ヒドロキシカプリル酸等），ヒドロキシジカルボン酸類（例、リンゴ酸等），ヒドロキシトリカルボン酸類（例、リンゴ酸等），乳酸カプロラクトン，バレロラクトン等の１種以上の重合体、共重合体、あるいはこれらの混合物〕，およびその誘導体（例、ポリ乳酸，ポリグリコール酸及びポリエチレングリコールのブロック重合体等），ポリ−α−シアノアクリル酸エステル，ポリ−β−ヒドロキシ酪酸，ポリアルキレンオキサレート類（例、ポリトリメチレンオキサレート，ポリテトラメチレンオキサレート等），ポリオルソエステル，ポリオルソカーボネート，ポリカーボネート類（例、ポリエチレンカーボネート，ポリエチレンプロピレンカーボネート等），ポリアミノ酸類（例、αアミノ酸の共重合体、ポリ−ε−ベンジルオキシメチル−Ｌ−リジン、ポリ−γ−ベンジル−Ｌ−グルタミン酸，ポリ−Ｌ−アラニン，ポリ−γ−メチル−Ｌ−グルタミン酸等），ポリデプシペプチド類（例、アミノ酸とヒドロキシカルボン酸の共重合体等）、ヒアルロン酸エステル類，ポリスチレン，ポリメタアクリル酸，アクリル酸とメタアクリル酸との共重合体，エチルセルロース，アセチルセルロース，ニトロセルロース，無水マレイン酸系共重合体，エチレンビニールアセテート系共重合体，ポリビニールアセテート，ポリアクリルアミド、コラーゲン、ゼラチン、フィブリン等が挙げられる
。 Specific examples of the support material that can be used in living bodies include fatty acid polyhydroxycarboxylic acids [eg, α-hydroxycarboxylic acids (eg, lactic acid, glycolic acid, 2-hydroxybutyric acid, 2-hydroxyvaleric acid, 2-hydroxyvaleric acid, Hydroxy-3-methylbutyric acid, 2-hydroxycaproic acid, 2-hydroxyisocaproic acid, 2-hydroxycaprylic acid, etc.), hydroxydicarboxylic acids (eg, malic acid, etc.), hydroxytricarboxylic acids (eg, malic acid, etc.), One or more polymers, copolymers, or mixtures thereof such as lactic caprolactone and valerolactone], and derivatives thereof (eg, block polymers of polylactic acid, polyglycolic acid and polyethylene glycol, etc.), poly-α- Cyanoacrylic acid esters, poly-β-hydroxybutyric acid, polyalkylene oxalates Examples, polytrimethylene oxalate, polytetramethylene oxalate, etc.), polyorthoesters, polyorthocarbonates, polycarbonates (eg, polyethylene carbonate, polyethylene propylene carbonate, etc.), polyamino acids (eg, α-amino acid copolymer) Poly-ε-benzyloxymethyl-L-lysine, poly-γ-benzyl-L-glutamic acid, poly-L-alanine, poly-γ-methyl-L-glutamic acid, etc.), polydepsipeptides (eg, amino acids and hydroxy Carboxylic acid copolymers), hyaluronic acid esters, polystyrene, polymethacrylic acid, copolymers of acrylic acid and methacrylic acid, ethylcellulose, acetylcellulose, nitrocellulose, maleic anhydride copolymer, ethylene Vinyl acetate system Examples include copolymers, polyvinyl acetate, polyacrylamide, collagen, gelatin, and fibrin.

これらの生体内分解ポリマーは１種でもよく、また２種以上の共重合体、あるいは単なる混合物でもよい。重合の形式はランダム、ブロック、グラフトの何れでもよい。
生体内分解性ポリマーの好ましい例は、脂肪族ポリヒドロキシカルボン酸やポリデプシペプチドが挙げられる。特に、例えばαアミノ酸類とα−ヒドロキシカルボン酸類の１種以上から合成された重合体、共重合体が生体内分解性および生体適合性の観点から好ましく、さらに好ましくは、αアミノ酸（ロイシン、イソロイシン、バリン、アラニン、フェニルアラニン、プロリン、グリシン、γ−ベンジル−グルタミン酸、ε−ベンジルオキシメチル−Ｌ−リジン）やヒドロキシカルボン酸（乳酸，グリコール酸，２−ヒドロキシ酪酸、２−ヒドロキシ吉草酸等）の１種以上から合成された共重合体、またはこれらの混合物が挙げられる。 These biodegradable polymers may be one kind, two or more kinds of copolymers, or a simple mixture. The type of polymerization may be random, block or graft.
Preferable examples of the biodegradable polymer include aliphatic polyhydroxycarboxylic acid and polydepsipeptide. In particular, for example, polymers and copolymers synthesized from one or more of α-amino acids and α-hydroxycarboxylic acids are preferable from the viewpoint of biodegradability and biocompatibility, and more preferably α-amino acids (leucine, isoleucine). , Valine, alanine, phenylalanine, proline, glycine, γ-benzyl-glutamic acid, ε-benzyloxymethyl-L-lysine) and hydroxycarboxylic acids (lactic acid, glycolic acid, 2-hydroxybutyric acid, 2-hydroxyvaleric acid, etc.) Examples thereof include copolymers synthesized from one or more kinds, or a mixture thereof.

本発明に使用されるこれらの生体内分解性ポリマーの平均分子量の下限は約３,０００が好ましく、さらに好ましくは約５,０００である。本発明に使用されるこれらの生体内分解性ポリマーの平均分子量の上限は、約１,０００,０００が好ましく、さらに好ましくは約８００,０００であり、より好ましくは約２００,０００である。これらの分子量は、ゲルパーミエーションクロマトグラフィー（ＧＰＣ）、MALDI-TOF型質量分析計、高分解能NMR、光散乱法、超遠心法、浸透圧法、粘度法等によって測定することができる。 The lower limit of the average molecular weight of these biodegradable polymers used in the present invention is preferably about 3,000, more preferably about 5,000. The upper limit of the average molecular weight of these biodegradable polymers used in the present invention is preferably about 1,000,000, more preferably about 800,000, and more preferably about 200,000. These molecular weights can be measured by gel permeation chromatography (GPC), MALDI-TOF mass spectrometer, high resolution NMR, light scattering method, ultracentrifugation method, osmotic pressure method, viscosity method and the like.

本発明で用いるポリヒドロキシカルボン酸は、公知の方法、例えば、特開昭６１−２８５２１に記載の方法またはそれに準じた方法により製造される。前記α−ヒドロキシカルボン酸類はＤ−体、Ｌ−体、およびＤ、Ｌ−体のいずれでもよい。分解速度の速いものにはＤ、Ｌ−体が好ましい、遅いものにはＬ−体が好ましい。前記α−ヒドロキシカルボン酸類の単一重合体の例としては乳酸、グリコール酸、２−ヒドロキシ酪酸等の単一重合体が挙げられる。α−ヒドロキシカルボン酸類の共重合体の例としては乳酸、グリコール酸、２−ヒドロキシ酪酸等との共重合体が挙げられる。具体的には、例えば乳酸−グリコール酸共重合体や２−ヒドロキシ酪酸−グリコール酸共重合体等が用いられる。 The polyhydroxycarboxylic acid used in the present invention is produced by a known method, for example, a method described in JP-A-61-28521 or a method analogous thereto. The α-hydroxycarboxylic acids may be D-form, L-form, and D or L-form. D and L-forms are preferred for those having a high decomposition rate, and L-forms are preferred for those having a slow decomposition rate. Examples of the single polymer of α-hydroxycarboxylic acids include single polymers such as lactic acid, glycolic acid, and 2-hydroxybutyric acid. Examples of copolymers of α-hydroxycarboxylic acids include copolymers with lactic acid, glycolic acid, 2-hydroxybutyric acid and the like. Specifically, for example, a lactic acid-glycolic acid copolymer or a 2-hydroxybutyric acid-glycolic acid copolymer is used.

ポリ乳酸は、公知の製造方法、例えば、特開昭６１−２８５２１に記載の方法に従って合成することができる。乳酸もしくは乳酸−グリコール酸共重合体において、乳酸とグリコール酸とのモノマー比は約１００／０〜約５０／５０％が好ましい。乳酸−グリコール酸共重合体は、公知の製造方法、例えば特許公開昭６１−２８５２１に記載の方法に従って合成できる。医薬品組成物として使用するためには、これらの単独重合体や共重合体がスズなどの残留物を伴わない、無触媒脱水重縮合で合成されていることが好ましい。 Polylactic acid can be synthesized according to a known production method, for example, the method described in JP-A No. 61-28521. In the lactic acid or lactic acid-glycolic acid copolymer, the monomer ratio of lactic acid to glycolic acid is preferably about 100/0 to about 50/50%. The lactic acid-glycolic acid copolymer can be synthesized according to a known production method, for example, a method described in Japanese Patent Publication No. 61-28521. For use as a pharmaceutical composition, these homopolymers and copolymers are preferably synthesized by non-catalytic dehydration polycondensation without a residue such as tin.

本発明で用いるポリデプシペプチドは、アミノ酸とヒドロキシカルボン酸の共重合体であり、公知の方法、例えば浅野雅春ら、生体材料（Journal of Japanese Society for Biomaterials）、3巻、85〜94ページ、1985年、WO2006/043644A1、特許出願2006-228281 に記載の方法またはそれに準じた方法により製造される。ここで用いるアミノ酸類とヒドロキシカルボン酸類は、Ｄ−体、Ｌ−体、およびＤ、Ｌ−体のいずれでもよい。分解速度の速いものにはＤ、Ｌ−体が好ましい、遅いものにはＬ−体が好ましい。ポリマーに用いるαヒドロキシカルボン酸類の例としては乳酸（Lac）、グリコール酸（Hea）、２−ヒドロキシ酪酸等が挙げられる。ポリマーに用いるαアミノ酸類の例としてはロイシン（Leu）、イソロイシン（Ile）、バリン（Val）、アラニン（Ala）、フェニルアラニン（Phe）、プロリン（Pro）、グリシン（Gly）、γ−エチル−グルタミン酸（Glu(OEt)）、ε−ベンジルオキシメチル−Ｌ−リジン（Lys(Z)）等が挙げられる。
ポリデプシペプチド配列の具体例には、poly(Ala-Ala-Glu(OEt)-Lac)、poly(Ala-Leu-Glu(OEt)-Lac)、poly(Ala-Ile-Gly-Lac-Pro)等の単独重合体や共重合体が挙げられる。医薬品組成物として使用するためには、これらの単独重合体や共重合体がペンタクロロフェ
ノールなどの残留物を伴わない、ヒドロキシスクシンイミド等の薬理学的に許容な重縮合法で合成されていることがより好ましい。 The polydepsipeptide used in the present invention is a copolymer of an amino acid and a hydroxycarboxylic acid, and is a known method such as Masaharu Asano, Journal of Japanese Society for Biomaterials, Vol. 3, pp. 85-94, 1985. , WO2006 / 043644A1, Patent application 2006-228281, or a method analogous thereto. The amino acids and hydroxycarboxylic acids used here may be any of D-form, L-form, D, and L-form. D and L-forms are preferred for those having a high decomposition rate, and L-forms are preferred for those having a slow decomposition rate. Examples of α-hydroxycarboxylic acids used in the polymer include lactic acid (Lac), glycolic acid (Hea), 2-hydroxybutyric acid and the like. Examples of α-amino acids used in the polymer are leucine (Leu), isoleucine (Ile), valine (Val), alanine (Ala), phenylalanine (Phe), proline (Pro), glycine (Gly), γ-ethyl-glutamic acid (Glu (OEt)), ε-benzyloxymethyl-L-lysine (Lys (Z)) and the like.
Specific examples of polydepsipeptide sequences include poly (Ala-Ala-Glu (OEt) -Lac), poly (Ala-Leu-Glu (OEt) -Lac), poly (Ala-Ile-Gly-Lac-Pro), etc. These homopolymers and copolymers can be mentioned. In order to be used as a pharmaceutical composition, these homopolymers and copolymers must be synthesized by a pharmacologically acceptable polycondensation method such as hydroxysuccinimide without any residue such as pentachlorophenol. Is more preferable.

薬物のシリカ封入体と上記のような支持材を適当な混合比で混合し、目的に応じて、さらに、混練、粉砕、粒化などの操作を加えることによって医薬組成物を得ることができる。これらの操作は公知の製剤技術にしたがって行うことができる。
また、薬物のシリカ封入体を支持材にカプセル化する操作も公知の製剤技術にしたがって行うことができる。 A pharmaceutical composition can be obtained by mixing the silica inclusion body of the drug and the above-mentioned support material at an appropriate mixing ratio and further performing operations such as kneading, pulverization and granulation according to the purpose. These operations can be performed according to a known preparation technique.
The operation of encapsulating the silica inclusion body of the drug in the support material can also be performed according to a known preparation technique.

このようにして得られた医薬組成物は、例えば、生体内インプラント用の医薬として使用される。
薬剤として抗生物質を用いる場合、抗炎症の治療薬、好ましくは、口腔外科領域などに於ける慢性骨髄炎の治療薬として好適に使用することができる。
その他にも、顎骨嚢胞などを摘出した後などに使用される、骨腔補填剤または骨接合剤としても使用できる。
The pharmaceutical composition thus obtained is used, for example, as a medicament for in vivo implants.
When an antibiotic is used as a drug, it can be suitably used as an anti-inflammatory therapeutic agent, preferably a chronic osteomyelitis therapeutic agent in the field of oral surgery or the like.
In addition, it can also be used as a bone cavity filling agent or an osteosynthesis agent used after excision of a jaw bone cyst or the like.

以下、本発明の実施態様である、医薬品であるアジスロマイシンを用いて、水油界面で生成するバイオミメティックシリカによる薬物封入体の作製法、これをポリ乳酸-グリコール酸共重合体と粉砕混合した製剤の作製法、更にこの製剤をラット皮下に於いて吸収性と炎症性を検討した結果について詳細をそれぞれ実施例１〜３に示す。しかし以下の具体例は本発明を限定するものではなく、例えば、薬物を他のものと置換することなど、適宜変更できることは勿論である。 Hereinafter, a method for producing a drug inclusion body using biomimetic silica produced at a water-oil interface using azithromycin, which is a pharmaceutical product, which is an embodiment of the present invention, and a preparation obtained by pulverizing and mixing this with a polylactic acid-glycolic acid copolymer The details of the preparation method and the results of examining the absorption and inflammatory properties of this preparation subcutaneously in rats are shown in Examples 1 to 3, respectively. However, the following specific examples do not limit the present invention, and it is needless to say that the drug can be appropriately changed, for example, by replacing a drug with another.

なお、以下の実施例では次のような略号を使用した。
PLGA：ポリ乳酸-グリコール酸共重合体
AZM：アジスロマイシン
PEG：ポリエチレングリコール In the following examples, the following abbreviations were used.
PLGA: Polylactic acid-glycolic acid copolymer
AZM: Azithromycin
PEG: Polyethylene glycol

[実施例１]
（シリカによる薬物封入体の作製）
バイオシリカの特徴は穏和な生理条件でシリカが形成され、触媒として働く物質が穏和な条件で内包される点にある。そこで、水性溶液中の薬物が触媒となってバイオシリカのように、反応系に酸、塩基、熱を加えない穏和な条件でアルコキシシランを加水分解することを確かめることにした。この方法で生成するシリカをバイオミメティックシリカと名付けた。 [Example 1]
(Production of drug inclusions with silica)
Biosilica is characterized in that silica is formed under mild physiological conditions, and a substance acting as a catalyst is included under mild conditions. Therefore, it was decided to hydrolyze the alkoxysilane under mild conditions where the drug in the aqueous solution was used as a catalyst and no acid, base, or heat was applied to the reaction system like biosilica. The silica produced by this method was named biomimetic silica.

（シリカ-AZM組成物の作成）
慢性骨髄炎の治療に用いられる抗生物質、アジスロマイシンについて、３種類の濃度（0,5,10 mg）のリン酸緩衝水溶液 (200μL, 60 mM, pH 6.5)を作製した。作製した溶液をそれぞれ２mLバイアルに入れた。これらの水溶液に対し界面を乱さないように、静かにテトラエトキシシラン (200μL)を上層に加え、４℃にて静置した。シリカ形成反応の模式図を図１に示す。 (Creation of silica-AZM composition)
For azithromycin, an antibiotic used for the treatment of chronic osteomyelitis, phosphate buffer aqueous solutions (200 μL, 60 mM, pH 6.5) with three concentrations (0, 5, 10 mg) were prepared. Each of the prepared solutions was placed in a 2 mL vial. To avoid disturbing the interface with these aqueous solutions, tetraethoxysilane (200 μL) was gently added to the upper layer and allowed to stand at 4 ° C. A schematic diagram of the silica forming reaction is shown in FIG.

１９時間後に界面を観察し、シリカ形成の有無を観察した。シリカ形成の様子を図２に示す。抗生物質の量が増えるに従いシリカ形成の多くなることがわかった。また、この反応系を更に７日間４℃にて静置した後に、凍結乾燥を行って顆粒状の生成物を得た。
顆粒状生成物の走査電子顕微鏡写真を図３に示す。特性Ｘ線の解析より、シリカが主成分の物質であるとわかった。 The interface was observed after 19 hours, and the presence or absence of silica formation was observed. The state of silica formation is shown in FIG. It was found that silica formation increases as the amount of antibiotic increases. The reaction system was further allowed to stand at 4 ° C. for 7 days and then freeze-dried to obtain a granular product.
A scanning electron micrograph of the granular product is shown in FIG. From the analysis of characteristic X-rays, it was found that silica was the main component.

[実施例２]
（シリカ−AZM組成物とPLGAによるインプラントの作製）
実施例１で得られた、シリカ−AZM組成物の1〜3mmの無色顆粒をメノウ乳鉢にて細かく粉砕した。ここへPLGA（和光純薬より購入。商品名PLGA7520、平均分子量２万、ポリ乳酸とグリコール酸のモノマー比が75：25）を更に加えて粉砕混合を行った。 [Example 2]
(Preparation of implants using silica-AZM composition and PLGA)
The colorless granules of 1 to 3 mm of the silica-AZM composition obtained in Example 1 were finely pulverized in an agate mortar. PLGA (purchased from Wako Pure Chemical Industries, Ltd., trade name PLGA7520, average molecular weight 20,000, polylactic acid / glycolic acid monomer ratio 75:25) was further added thereto, and pulverized and mixed.

得られた粉末を直径2 mm、長さ20 cmの大きさにドライヤーを用いて圧縮成型した。ロッド状の成型物を切断し，総重量5〜6mg (AZMは0.5〜0.6mg含む)のインプラントを作製し、埋入実験に用いた。
圧縮成型物の走査電子顕微鏡写真を図４に示す。特性Ｘ線の解析より、明るい粒子像はシリカ-AZM微粒子、まわりのやや暗い領域はPLGAであることがわかった。 The obtained powder was compression molded to a size of 2 mm in diameter and 20 cm in length using a dryer. The rod-shaped molding was cut to prepare an implant with a total weight of 5-6 mg (AZM contains 0.5-0.6 mg) and used for the implantation experiment.
A scanning electron micrograph of the compression molded product is shown in FIG. From the characteristic X-ray analysis, it was found that the bright particle image is silica-AZM fine particles and the slightly dark area around is PLGA.

同様にしてシリカの有無による、生体分解性や炎症性を比較するために、比較のインプラントも作製した。即ち、下記のI〜IV群について評価を行った。なお、これらの各インプラントの各重量あたりのAZMの含有量は同じとした。
I群：コントロール群、PLGAのみ（比較例１）
II群：PLGAにAZMを混入した製剤（比較例２）
III群：PLGAにシリカ-AZMを混入した製剤（実施例）
IV群：PLGAにPEGとAZMを混入した製剤（比較例３） Similarly, in order to compare biodegradability and inflammatory properties with and without silica, comparative implants were also produced. That is, the following groups I to IV were evaluated. The content of AZM per weight of each of these implants was the same.
Group I: Control group, PLGA only (Comparative Example 1)
Group II: Formulation in which AZM is mixed in PLGA (Comparative Example 2)
Group III: Formulation in which silica-AZM is mixed in PLGA (Example)
Group IV: Preparation in which PEG and AZM are mixed in PLGA (Comparative Example 3)

[実施例３]
(インプラントのラット皮下への埋入)
実験動物は8〜9週齢雌Wister系ラットとし，背部皮下組織に2mmの切り込みを４カ所入れて、I−IVの製剤を各一個ずつ埋入した。I−IV群は各3匹とした。各群の動物は1,2,3,4,8週後に屠殺し，各インプラントを摘出した。摘出物につき肉眼的観察，重量測定，インプラント周囲組織の病理組織学的観察を行った。更にこれらの埋入実験は3回実施した（第１〜３クール）。図5に実験の模式図を示した。 [Example 3]
(Implant implantation in the rat)
The experimental animals were 8-9 week old female Wister rats, and 4 mm 2 mm incisions were made in the dorsal subcutaneous tissue, and each of the I-IV preparations was implanted one by one. There were three I-IV groups each. The animals in each group were sacrificed after 1, 2, 3, 4 and 8 weeks and each implant was removed. Macroscopic observation, weight measurement, and histopathological observation of the tissue surrounding the implant were performed on the extract. Furthermore, these embedding experiments were performed three times (first to third courses). FIG. 5 shows a schematic diagram of the experiment.

(埋入したインプラントのラット皮下からの摘出)
実験動物15匹中，実験期間途中で死亡したものは全くみられなかった。 (Removal of the implanted implant from the rat's skin)
None of the 15 experimental animals died during the experimental period.

(a) 試料の肉眼的観察
I−IV群すべてにおいて，経日的に球形,扁平化がみられI群は4週後，II群4週後，III群4週後，IV群8週後に消失した。硬度は特に観察しなかったが，1週の時点で軟化が顕著に認められた。（第１〜３クールを通じてほぼ同様。）
III群（PLGA＋AZM-SiO₂）の皮下に於ける形態の経時変化（第１クールの摘出物）を図６に示した。その結果、III群は最も形態をよく保持していた。 (a) Macroscopic observation of the sample
In all groups I-IV, spheres and flattening were observed over time, and group I disappeared 4 weeks later, 4 weeks after group II, 4 weeks after group III, and 8 weeks after group IV. Hardness was not particularly observed, but softening was noticeable at 1 week. (The same is true throughout the first to third courses.)
FIG. 6 shows time-dependent changes in the morphology of the group III (PLGA + AZM-SiO ₂ ) under the skin (first course extract). As a result, Group III retained the best form.

(b) 重量変化
I−IV群はすべて，時間の経過と共に，試料の減少がみられた（図７）。何れも4週では約0〜40%残存していたが，8週では全て消失した。（第１〜３クールを通じてほぼ同様。ここでは第１クールのデータを示した。） (b) Weight change
In all I-IV groups, the sample decreased over time (Figure 7). All remained at about 0-40% at 4 weeks, but disappeared at 8 weeks. (It is almost the same throughout the first to third courses. Here, the data for the first course is shown.)

(c) 試料周囲の組織反応
I−IV群の製剤を用いた、ラット埋入部の組織の病理所見（炎症所見）を表1に示した。
その結果、I，II，III, IV群において，各期間を通じて，特に分解初期に軽度の炎症反応がみられた。この炎症反応はPLGAの分解に由来すると考えられる。従って、シリカを用いたインプラント、III群にはシリカに由来する炎症反応は認められなかった。むしろ他の3種のインプラントと比較して、炎症がやや弱いと考えられた。
第１〜３クールを通じて、シリカを用いたIII群（PLGA＋AZM-SiO₂）は炎症を起こすことが埋入初期を除いてほとんど無いことがわかる。 (c) Tissue reaction around the sample
Table 1 shows the pathological findings (inflammation findings) of the tissues in the rat implantation site using the preparations of the groups I-IV.
As a result, in groups I, II, III, and IV, a mild inflammatory reaction was observed throughout each period, particularly at the early stage of degradation. This inflammatory response is thought to result from the degradation of PLGA. Therefore, no inflammatory reaction derived from silica was observed in the implant using silica, group III. Rather, the inflammation was considered slightly weaker than the other three implants.
Through the first to third courses, it can be seen that group III (PLGA + AZM-SiO ₂ ) using silica hardly causes inflammation except in the initial stage of implantation.

本発明の方法によるバイオミメティックシリカの生成例。The example of the production | generation of the biomimetic silica by the method of this invention. アジスロマイシン（AZM）によるバイオミメティックシリカの生成の様子。AZMの濃度が高くなるに従ってシリカの生成量が多くなることがわかる。AZM 0 mgの条件では油水界面にシリカの生成はまったく見られない。下段の写真に写っているのは、油水界面の場所がわかりにくいために、焦点合わせに用いたほこりである。Generation of biomimetic silica with azithromycin (AZM). It can be seen that the amount of silica produced increases as the concentration of AZM increases. Under the condition of 0 mg AZM, no silica is formed at the oil / water interface. The bottom photo shows the dust used for focusing because the location of the oil / water interface is difficult to understand. ポリ乳酸-グリコール酸共重合体（PLGA）とシリカ−アジスロマイシン（AZM）組成物の走査顕微鏡写真。Scanning micrograph of polylactic acid-glycolic acid copolymer (PLGA) and silica-azithromycin (AZM) composition. ポリ乳酸-グリコール酸共重合体（PLGA）とシリカ−アジスロマイシン（AZM）組成物の微粉末を混合後に圧縮成型した、インプラント材料の走査顕微鏡写真。Scanning photomicrograph of an implant material compression-molded after mixing a fine powder of a polylactic acid-glycolic acid copolymer (PLGA) and a silica-azithromycin (AZM) composition. インプラントのラット皮下への埋入方法と摘出方法の模式図。The schematic diagram of the implantation method to the rat subcutaneous of an implant, and the extraction method. シリカを用いた医薬組成物、 III群（PLGA＋AZM-SiO₂）の皮下に於ける形態変化（写真）（第１クールの摘出物）。基材をマウス皮下に埋め込み、1週毎に摘出した。III群は最も形態をよく保持していた。Pharmaceutical composition using silica, group III (PLGA + AZM-SiO ₂ ) subcutaneous morphological change (photo) (first cool extract). The substrate was embedded in the mouse subcutaneously and removed every week. Group III had the best morphology. 皮下に於けるアジスロマイシン（AZM）製剤（I〜IV群）の重量変化（第１クールの摘出物）。第１〜３クールを通じて、重量から見た生体吸収速度は比較的類似している。すなわち約4週で皮下から消失することがわかった。Change in weight of azithromycin (AZM) preparation (groups I to IV) subcutaneously (first course extract). Through the first to third courses, the bioabsorption rate viewed from the weight is relatively similar. In other words, it was found that the skin disappeared subcutaneously in about 4 weeks.

Claims

A method for producing a silica inclusion body of a drug, wherein a two-layer separation liquid comprising an aqueous solution layer of a drug having a group capable of reacting with alkoxysilane to form silica and an alkoxysilane liquid layer is obtained. Prepare by adding an alkoxysilane liquid layer to the upper layer of the aqueous solution layer or adding an aqueous solution layer of the drug to the upper layer of the alkoxysilane liquid layer and letting it stand, at the interface of the two-layer separation liquid A method comprising producing a silica inclusion body of a drug.

The method according to claim 1, wherein the pH of the aqueous solution is 6.2 to 8.2.

The method according to claim 1, wherein the pH of the aqueous solution is 6.5 to 7.5.

The method according to any one of claims 1 to 3, wherein the aqueous solution of the drug is an aqueous solution in which the drug is dissolved in a phosphate buffer.

Drugs are cell wall synthesis inhibitory antibiotics, cell membrane inhibitory antibiotics, nucleic acid synthesis inhibitory antibiotics, protein synthesis inhibitory antibiotics, folate metabolic pathway inhibitory antibiotics, β-lactamase inhibitors, sulfa drugs, The method according to any one of claims 1 to 4, which is at least one drug selected from the group consisting of an anti-infective drug and a preservative.

The drug is ampicillin, bacampicillin, amoxicillin, pibmesilinum, amoxicillin, sultamicillin, piperacillin, aspoxillin, benzylpenicillin, cloxacillin, oxacillin, carbenicillin, cephalocl, cefloxazine, cefaxifoxime, cepoximec Cetyl, cefotiam hexetyl, cefdinir, ceftibutene, cefditoren pivoxil, cefcapene pivoxil, cefazolin, cefozopran, cefmetazole, cefothiam, cefthrosin, cefoperazone, cefotaxim, cefmenoxime, ceftrioxime, cefofiroxone, ceftodixone Imipenem, Panipenem, Merope , Biapenem, doripenem, aztreonam, vancomycin, teicoplanin, fosmicin, polymyxin B sulfate, colistin sulfate, gramicidin S, amphotericin B, levofloxacin, ofloxacin, norfloxacin, enoxacin, ciprofloxacin, romefloxacin, tosfloxacin, sparfloxacin, sparfloxacin Xacin, pullrifloxacin, moxifloxacin, pazufloxane, rifampicin, dibekacin, tobramycin, amikacin, isepamicin, micronomycin, streptomycin, kanamycin, gentamicin, erythromycin, rokitamicin, josamycin, roxromycin, clarithromycin, azithromycin , Telithromycin, doxycycline, minocycline , Chloramphenicol, lincomycin, clindamycin, trimethoprim, clavulanic acid, sulbactam, tazobactam, sulfamethoxazole, salazopyrine, isoniazid, rifampicin, pyrazinamide, ethambutol, griseofulvin, amphotericin B, 5-fluorocytosine, fluconazole, Miconazole, itraconazole, acyclovir, ganciclovir, foscavir, idoxuridine, amantadine, interferon gamma, ribavirin, ramipudine, metronidazole, tinidazole, fluconazole, mebendazole, pyrantel pamoate, diethylcarbamazine, praziquantel, arbindazole, chinpripristine, chinpripristine Linezolid, spectinomycin, A drug selected from the group consisting of netilmycin, sisomycin, lincosamin, ramoplanin, telithromycin, nystatin, fusidic acid, chlorhexidine, and polyhexanid The method as described in any one of Claims 1-4.

A silica inclusion body of a drug is produced by the method according to any one of claims 1 to 6, and the obtained silica inclusion body is mixed with a support material that is acceptable to a living body, or is encapsulated in the support material. A method for producing a pharmaceutical composition, characterized by being wrapped in a shape.

The method according to claim 7, wherein the biologically acceptable support material is a biodegradable polymer.

The biodegradable polymer is at least one polymer selected from the group consisting of polylactic acid, polylactic glycolic acid copolymer, polyhydroxycarboxylic acid, polydepsipeptide, and polyamino acid. the method of.

The method according to any one of claims 7 to 9, wherein the pharmaceutical composition is for treatment or prevention of osteomyelitis.

The method according to any one of claims 7 to 10, wherein the pharmaceutical composition is a bone cavity filling agent or an osteosynthesis agent.