JP4897814B2 - ポロキサマーの定量方法 - Google Patents
ポロキサマーの定量方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4897814B2 JP4897814B2 JP2008530539A JP2008530539A JP4897814B2 JP 4897814 B2 JP4897814 B2 JP 4897814B2 JP 2008530539 A JP2008530539 A JP 2008530539A JP 2008530539 A JP2008530539 A JP 2008530539A JP 4897814 B2 JP4897814 B2 JP 4897814B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- poloxamer
- protein
- fsh
- concentration
- sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 title claims abstract description 52
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 67
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 50
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 title claims description 29
- 238000011002 quantification Methods 0.000 title description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 69
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 69
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 35
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 claims description 40
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 claims description 32
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 claims description 14
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 claims description 14
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 claims description 13
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 claims description 13
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 claims description 13
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 10
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 claims description 8
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 claims description 8
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 claims description 8
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 claims description 6
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 6
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 6
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 claims description 5
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 claims description 5
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 5
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims description 4
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 claims description 3
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 3
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 57
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 57
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 57
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 49
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 49
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 description 49
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 32
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 31
- 102000011022 Chorionic Gonadotropin Human genes 0.000 description 30
- 108010062540 Chorionic Gonadotropin Proteins 0.000 description 30
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 28
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 229940015047 chorionic gonadotropin Drugs 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 17
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 102000011923 Thyrotropin Human genes 0.000 description 15
- 108010061174 Thyrotropin Proteins 0.000 description 15
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 15
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 15
- 108010082302 Human Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 11
- 102000003864 Human Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 11
- -1 INF-β Proteins 0.000 description 11
- 229940084986 human chorionic gonadotropin Drugs 0.000 description 11
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 11
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 9
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 8
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 8
- 102100026720 Interferon beta Human genes 0.000 description 8
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 8
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 8
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 7
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N Propylene oxide Chemical compound CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N ethane-1,2-diol;propane-1,2-diol Chemical compound OCCO.CC(O)CO HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 7
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 7
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 7
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 7
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 239000000022 bacteriostatic agent Substances 0.000 description 6
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 6
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 6
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 6
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 description 6
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 102000003977 fibroblast growth factor 18 Human genes 0.000 description 5
- 108090000370 fibroblast growth factor 18 Proteins 0.000 description 5
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-m-cresol Chemical compound CC1=CC(O)=CC=C1Cl CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 4
- 102000004264 Osteopontin Human genes 0.000 description 4
- 108010081689 Osteopontin Proteins 0.000 description 4
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 4
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 4
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 4
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 4
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 4
- QWVGKYWNOKOFNN-UHFFFAOYSA-N o-cresol Chemical compound CC1=CC=CC=C1O QWVGKYWNOKOFNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N p-cresol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1 IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 4
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101800005309 Carboxy-terminal peptide Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 3
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 3
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000007072 Nerve Growth Factors Human genes 0.000 description 3
- 229920002023 Pluronic® F 87 Polymers 0.000 description 3
- 229920002025 Pluronic® F 88 Polymers 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 229940094892 gonadotropins Drugs 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 3
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 3
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 3
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 102000007350 Bone Morphogenetic Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010007726 Bone Morphogenetic Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108010009575 CD55 Antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 2
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 2
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 2
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 2
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 2
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- 108090001117 Insulin-Like Growth Factor II Proteins 0.000 description 2
- 102000048143 Insulin-Like Growth Factor II Human genes 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- 108010038512 Platelet-Derived Growth Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000010780 Platelet-Derived Growth Factor Human genes 0.000 description 2
- 229920002021 Pluronic® F 77 Polymers 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 102000036693 Thrombopoietin Human genes 0.000 description 2
- 108010041111 Thrombopoietin Proteins 0.000 description 2
- 102000003978 Tissue Plasminogen Activator Human genes 0.000 description 2
- 108090000373 Tissue Plasminogen Activator Proteins 0.000 description 2
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 2
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 2
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 2
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 2
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 2
- 229940112869 bone morphogenetic protein Drugs 0.000 description 2
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 229960002242 chlorocresol Drugs 0.000 description 2
- 229940047120 colony stimulating factors Drugs 0.000 description 2
- 108700001680 des-(1-3)- insulin-like growth factor 1 Proteins 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 2
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 108010006578 follitropin alfa Proteins 0.000 description 2
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 2
- 229940057854 gonal f Drugs 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000003900 neurotrophic factor Substances 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 2
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 2
- MGSRCZKZVOBKFT-UHFFFAOYSA-N thymol Chemical compound CC(C)C1=CC=C(C)C=C1O MGSRCZKZVOBKFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000187 tissue plasminogen activator Drugs 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 206010000234 Abortion spontaneous Diseases 0.000 description 1
- 108010059616 Activins Proteins 0.000 description 1
- 102000005606 Activins Human genes 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 101800001288 Atrial natriuretic factor Proteins 0.000 description 1
- 102400001282 Atrial natriuretic peptide Human genes 0.000 description 1
- 101800001890 Atrial natriuretic peptide Proteins 0.000 description 1
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 1
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 1
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 1
- 102100031092 C-C motif chemokine 3 Human genes 0.000 description 1
- 101710155856 C-C motif chemokine 3 Proteins 0.000 description 1
- 102400000113 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 description 1
- 229920005682 EO-PO block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 102400001368 Epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 235000002757 Erythrina edulis Nutrition 0.000 description 1
- 240000008187 Erythrina edulis Species 0.000 description 1
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 1
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 description 1
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 description 1
- 102000018233 Fibroblast Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 108050007372 Fibroblast Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 108090000386 Fibroblast Growth Factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100031706 Fibroblast growth factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100024785 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 1
- UGJMXCAKCUNAIE-UHFFFAOYSA-N Gabapentin Chemical compound OC(=O)CC1(CN)CCCCC1 UGJMXCAKCUNAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102400000321 Glucagon Human genes 0.000 description 1
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 1
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000000095 Growth Hormone-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- 206010056438 Growth hormone deficiency Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 1
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 1
- 101000946843 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 1
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 1
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000009571 Macrophage Inflammatory Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010009474 Macrophage Inflammatory Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102100029268 Neurotrophin-3 Human genes 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 description 1
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 description 1
- 108010001014 Plasminogen Activators Proteins 0.000 description 1
- 102000001938 Plasminogen Activators Human genes 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 108010076181 Proinsulin Proteins 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102400000834 Relaxin A chain Human genes 0.000 description 1
- 101800000074 Relaxin A chain Proteins 0.000 description 1
- 102400000610 Relaxin B chain Human genes 0.000 description 1
- 101710109558 Relaxin B chain Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004288 Sodium dehydroacetate Substances 0.000 description 1
- 102100022831 Somatoliberin Human genes 0.000 description 1
- 101710142969 Somatoliberin Proteins 0.000 description 1
- 206010042573 Superovulation Diseases 0.000 description 1
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 1
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 1
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 1
- 239000005844 Thymol Substances 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 102000046299 Transforming Growth Factor beta1 Human genes 0.000 description 1
- 102000011117 Transforming Growth Factor beta2 Human genes 0.000 description 1
- 102400001320 Transforming growth factor alpha Human genes 0.000 description 1
- 101800004564 Transforming growth factor alpha Proteins 0.000 description 1
- 101800002279 Transforming growth factor beta-1 Proteins 0.000 description 1
- 101800000304 Transforming growth factor beta-2 Proteins 0.000 description 1
- 108090000097 Transforming growth factor beta-3 Proteins 0.000 description 1
- 102000056172 Transforming growth factor beta-3 Human genes 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 1
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000488 activin Substances 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 102000015395 alpha 1-Antitrypsin Human genes 0.000 description 1
- 108010050122 alpha 1-Antitrypsin Proteins 0.000 description 1
- 229940024142 alpha 1-antitrypsin Drugs 0.000 description 1
- 239000000538 analytical sample Substances 0.000 description 1
- 210000004198 anterior pituitary gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940000201 avapro Drugs 0.000 description 1
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001576 beta-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 1
- 239000003130 blood coagulation factor inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 108010006025 bovine growth hormone Proteins 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 1
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 1
- NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N carperitide Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229960004407 chorionic gonadotrophin Drugs 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- INDBQWVYFLTCFF-UHFFFAOYSA-L cobalt(2+);dithiocyanate Chemical compound [Co+2].[S-]C#N.[S-]C#N INDBQWVYFLTCFF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000022811 deglycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000001687 destabilization Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 102000034356 gene-regulatory proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006104 gene-regulatory proteins Proteins 0.000 description 1
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 1
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 1
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 description 1
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 108091008039 hormone receptors Proteins 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 229940051026 immunotoxin Drugs 0.000 description 1
- 230000002637 immunotoxin Effects 0.000 description 1
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000608 immunotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000893 inhibin Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 102000028416 insulin-like growth factor binding Human genes 0.000 description 1
- 108091022911 insulin-like growth factor binding Proteins 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- YOSHYTLCDANDAN-UHFFFAOYSA-N irbesartan Chemical compound O=C1N(CC=2C=CC(=CC=2)C=2C(=CC=CC=2)C=2NN=NN=2)C(CCCC)=NC21CCCC2 YOSHYTLCDANDAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 150000002605 large molecules Chemical class 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000003580 lung surfactant Substances 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 208000015994 miscarriage Diseases 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 229940072228 neurontin Drugs 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 description 1
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- 229940085991 phosphate ion Drugs 0.000 description 1
- 229960004838 phosphoric acid Drugs 0.000 description 1
- 230000006584 pituitary dysfunction Effects 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 229940127126 plasminogen activator Drugs 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010087851 prorelaxin Proteins 0.000 description 1
- 230000004952 protein activity Effects 0.000 description 1
- KWGRBVOPPLSCSI-WCBMZHEXSA-N pseudoephedrine Chemical compound CN[C@@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 KWGRBVOPPLSCSI-WCBMZHEXSA-N 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 229940117012 serostim Drugs 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229940079839 sodium dehydroacetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019259 sodium dehydroacetate Nutrition 0.000 description 1
- DSOWAKKSGYUMTF-GZOLSCHFSA-M sodium;(1e)-1-(6-methyl-2,4-dioxopyran-3-ylidene)ethanolate Chemical compound [Na+].C\C([O-])=C1/C(=O)OC(C)=CC1=O DSOWAKKSGYUMTF-GZOLSCHFSA-M 0.000 description 1
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 1
- 229940089453 sudafed Drugs 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 229960000790 thymol Drugs 0.000 description 1
- 108010042974 transforming growth factor beta4 Proteins 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- 229960005356 urokinase Drugs 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 108010047303 von Willebrand Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100036537 von Willebrand factor Human genes 0.000 description 1
- 229960001134 von willebrand factor Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/34—Size selective separation, e.g. size exclusion chromatography, gel filtration, permeation
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
- B01J20/28002—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their physical properties
- B01J20/28004—Sorbent size or size distribution, e.g. particle size
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
- B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
- B01J20/28078—Pore diameter
- B01J20/28083—Pore diameter being in the range 2-50 nm, i.e. mesopores
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6863—Cytokines, i.e. immune system proteins modifying a biological response such as cell growth proliferation or differentiation, e.g. TNF, CNF, GM-CSF, lymphotoxin, MIF or their receptors
- G01N33/6866—Interferon
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
- G01N33/76—Human chorionic gonadotropin including luteinising hormone, follicle stimulating hormone, thyroid stimulating hormone or their receptors
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Analysing Materials By The Use Of Radiation (AREA)
Description
本発明は、液体タンパク質サンプル中におけるポロキサマー類に属する界面活性剤の分析測定の分野に関する。
ポロキサマーは、エチレンオキシド（ＥＯ）とプロピレンオキシド（ＰＯ）との非イオン性ブロック共重合体である。これらは界面活性剤、乳化剤、安定剤、及び分散剤として医薬製剤に用いられる。
ポロキサマーを特性付ける周知の分析法として、ポロキサマーとチオシアン酸コバルト（II）との錯体形成に起因する３２０及び６２０ｎｍでのＵＶ吸光度を分析する、熱量測定法がある。
Yun Maoら（Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 35 (2004), 1127）は、ＴＨＦを移動相とするカラムを用いたサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）と屈折率（ＲＩ）検出とを使用したポロキサマーの測定法について記載している。この方法は、医薬製剤のアバプロ（Avapro）、ニューロンチン（Neurontin）及びスダフェド（Sudafed）に適用されたが、かかる有効成分は「低分子」である。低分子は、高分子量のポロキサマーから、ＳＥＣにより簡便に分離される。
サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、別名ゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ）は、多孔性粒子を用いて異なるサイズの分子を分離するものである。この方法はポリマー分子の分離、並びにポリマーの分子量及び分子量分布の測定に、一般的に用いられている。孔径よりも小さな分子は、粒子内に進入可能であるために、粒子内に進入不可能な大分子と比べて経路が長くなり、通過時間もよりかかることになる。孔径よりも大きな分子は全て、保持されることなく一緒に溶出してしまう。孔に進入可能な分子の粒子内における平均滞留時間は、分子のサイズ及び形状に依存する。従って、異なる分子であれば、カラムの総通過時間も異なることになる。
ポロキサマーと同程度の分子量を有するタンパク質サンプル中における、ポロキサマーの定量を可能にする方法は、未だ提供されていない。
特に、タンパク質が５〜７０ｋＤａ、好ましくは２０〜７０ｋＤａの分子量を有する場合について、タンパク質サンプル中のポロキサマーの定量法が求められている。
本発明はタンパク質サンプル、特に液体医薬製剤等の液体タンパク質サンプル中における、ポロキサマーの定量を可能にする方法に関する。特に本発明は、タンパク質サンプル中のポロキサマーの定量方法を提供する。即ち、タンパク質製剤の約２年間の保存寿命の間の何れの時点においても、該製剤中のポロキサマー量を測定することが可能となる。
この液体タンパク質サンプル中のポロキサマーの定量方法は、前記サンプルを：
（ａ）サイズ排除クロマトグラフィーカラムを用いて液体タンパク質サンプル中の成分を分離する工程；及び
（ｂ）屈折率を分析することでポロキサマーを検出する工程；
に供する工程を含んでなる。
（ａ）サイズ排除クロマトグラフィーカラムを用いて液体タンパク質サンプル中の成分を分離する工程；及び
（ｂ）屈折率を分析することでポロキサマーを検出する工程；
に供する工程を含んでなる。
好ましくは、本発明は、液体タンパク質サンプル中のポロキサマーの定量方法であって、前記サンプルを：
（ａ）サイズ排除クロマトグラフィーカラムを用いた分離工程；
（ｂ）移動相を用いた溶離工程；及び、
（ｃ）任意による、ポロキサマーの検出工程；
に供する工程を含んでなる方法に関する。
（ａ）サイズ排除クロマトグラフィーカラムを用いた分離工程；
（ｂ）移動相を用いた溶離工程；及び、
（ｃ）任意による、ポロキサマーの検出工程；
に供する工程を含んでなる方法に関する。
即ち、サイズ排除クロマトグラフィーを、移動相を用いた溶離工程と組み合わせることにより、ポロキサマーを他の成分から分離することが可能になる。
ポロキサマーの検出は更なる工程において、例えばＲＩ（屈折率）検出系を用いて溶離相を分析することにより行なわれる。
略語
以下の略語を本発明の説明に使用する。
ＦＳＨ：卵胞刺激ホルモン；
ｒ−ＦＳＨ；ｒ−ＬＨ；ｒ−ｈＣＧ；ｒ−ＧＨ；ｒ−ＩＦＮ−β、ｒ−ＴＳＨ：組み換えＦＳＨ、ＬＨ、ｈＣＧ、ＧＨ、ＩＮＦ−β、ＴＳＨ；
ｈＦＳＨ：ヒトＦＳＨ；
ｒ−ｈＦＳＨ：組み換えヒトＦＳＨ
ＲＩ：屈折率
ＫＤ又はＫｄ又はｋＤａ：キロダルトン
ＳＥＣ：サイズ排除クロマトグラフィー
ＲＴ：室温
ＷＦＩ：注射用蒸留水
ポロキサマー１８８（Poloxamer 188）：ＢＡＳＦ社のプルロニックＦ６８（Pluronic F68）の別名。
以下の略語を本発明の説明に使用する。
ＦＳＨ：卵胞刺激ホルモン；
ｒ−ＦＳＨ；ｒ−ＬＨ；ｒ−ｈＣＧ；ｒ−ＧＨ；ｒ−ＩＦＮ−β、ｒ−ＴＳＨ：組み換えＦＳＨ、ＬＨ、ｈＣＧ、ＧＨ、ＩＮＦ−β、ＴＳＨ；
ｈＦＳＨ：ヒトＦＳＨ；
ｒ−ｈＦＳＨ：組み換えヒトＦＳＨ
ＲＩ：屈折率
ＫＤ又はＫｄ又はｋＤａ：キロダルトン
ＳＥＣ：サイズ排除クロマトグラフィー
ＲＴ：室温
ＷＦＩ：注射用蒸留水
ポロキサマー１８８（Poloxamer 188）：ＢＡＳＦ社のプルロニックＦ６８（Pluronic F68）の別名。
本発明は、タンパク質サンプル中のポロキサマー（界面活性剤である）の定量を可能にする簡便な方法に関する。タンパク質サンプルとしては、液体タンパク質サンプルが好ましい。液体タンパク質サンプルは、如何なる形態の液体製剤であってもよいが、以下に説明する液体医薬製剤であることが好ましい。一実施形態によれば、液体医薬タンパク質サンプルは、単回又は多回投与用バイアルに収められる。
更なる実施形態によれば、分析対象となるタンパク質サンプルは凍結乾燥されてなり、分析の前に適切な水性溶媒に溶解される。
この液体タンパク質サンプル中のポロキサマーの定量方法は、前記サンプルを：
（ａ）サイズ排除クロマトグラフィーカラムを用いて液体タンパク質サンプル中の成分を分離する工程；及び
（ｂ）屈折率を分析することでポロキサマーを検出する工程；
に供する工程を含んでなる。
（ａ）サイズ排除クロマトグラフィーカラムを用いて液体タンパク質サンプル中の成分を分離する工程；及び
（ｂ）屈折率を分析することでポロキサマーを検出する工程；
に供する工程を含んでなる。
好ましくは、本発明は、液体タンパク質サンプル中のポロキサマーの定量方法であって、前記サンプルを：
（ａ）サイズ排除クロマトグラフィーカラムを用いた分離工程；
（ｂ）移動相を用いた溶離工程；及び、
（ｃ）任意による、ポロキサマーの検出工程；
に供する工程を含んでなる方法を提供する。
（ａ）サイズ排除クロマトグラフィーカラムを用いた分離工程；
（ｂ）移動相を用いた溶離工程；及び、
（ｃ）任意による、ポロキサマーの検出工程；
に供する工程を含んでなる方法を提供する。
典型的には、サイズ排除カラムはＳＥ−ＨＰＬＣカラムであろう。
一実施形態によれば、ポロキサマーはポロキサマー１８８（Poloxamer 188）である。
好ましい実施形態によれば、液体タンパク質サンプル中のタンパク質の分子質量は、ポロキサマーの質量と同程度である。
好ましい実施形態によれば、前記液体タンパク質サンプル中のタンパク質は、５〜７０ｋＤａ、より好ましくは２０〜７０ｋＤａの分子質量を有する。
各ポロキサマーの質量に対するタンパク質の質量の比率は１：３〜１０：１、好ましくは１：２〜１：７であることが好ましい。
本発明に係るタンパク質の例としては、哺乳動物タンパク質、例えば、ヒト成長ホルモン及びウシ成長ホルモン等の成長ホルモン；成長ホルモン放出因子；副甲状腺ホルモン；甲状腺刺激ホルモン；リポタンパク質；α−１−抗トリプシン；インスリンＡ鎖；インスリンＢ鎖；プロインスリン；卵胞刺激ホルモン；絨毛性ゴナドトロピン；カルシトニン；黄体形成ホルモン；グルカゴン；因子VIIIＣ、因子IX、組織因子及びフォン・ヴィレブランド因子等の凝固因子；プロテインＣ等の抗凝固因子；心房性ナトリウム利尿因子；肺サーファクタント；ウロキナーゼ又は組織プラスミノゲンアクチベーター（ｔ−ＰＡ）等のプラスミノゲンアクチベーター；ボンバジーン；スロンビン；腫瘍壊死因子−α及び−β；エンケファリナーゼ；ＲＡＮＴＥＳ（regulated on activation normally T-cell expressed and secreted）；ヒトマクロファージ炎症タンパク（ＭＩＰ−１−α）；ヒト血清アルブミン等の血清アルブミン；ミュラー阻害物質；リラキシンＡ鎖；リラキシンＢ鎖；プロリラキシン；マウスゴナドトロピン関連タンパク質；ＤＮａｓｅ；インヒビン；アクチビン；血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）；ホルモン又は増殖因子のレセプター；インテグリン；プロテインＡ又はＤ；リウマチ因子；骨由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、ニューロトロフィン−３、−４、−５、又は−６（ＮＴ−３、ＮＴ−４、ＮＴ−５、又はＮＴ−６）等の神経栄養因子、又はＮＧＦ−Ｐ等の神経成長因子；血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）；ａＦＧＦ及びｂＦＧＦ、特にＦＧＦ−１８等の線維芽細胞増殖因子；上皮成長因子（ＥＧＦ）；ＴＧＦ−α及び、ＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２、ＴＧＦ−β３、ＴＧＦ−β４、又はＴＧＦ−β５を含むＴＧＦ−β等のトランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ）；インスリン様成長因子Ｉ及び−II（ＩＧＦ−Ｉ及びＩＧＦ−II）；デス（１−３）−ＩＧＦ−１（des(1-3)-IGF-1）（脳ＩＧＦ−Ｉ）；インスリン様成長因子結合タンパク質；ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１９及びＣＤ２０等のＣＤタンパク質；エリスロポエチン（ＥＰＯ）；トロンボポエチン（ＴＰＯ）；骨誘導因子；オステオポンチン；免疫毒素；骨形成タンパク質（ＢＭＰ）；インターフェロン−α、−β、及び−γ等のインターフェロン；Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、及びＧ−ＣＳＦ等のコロニー刺激因子（ＣＳＦ）；ＩＬ−１〜ＩＬ−１０等のインターロイキン（ＩＬ）；スーパーオキシドジスムターゼ；Ｔ細胞受容体；表面膜タンパク質；崩壊促進因子（ＤＡＦ）；ＡＩＤＳエンベロープの一部等のウィルス抗原；輸送タンパク質；ホーミング受容体；アドレシン；調節タンパク質；イムノアドヘシン；抗体；並びに、上に列挙する任意のポリペプチドの生物活性断片又は変異体等が挙げられる。
中でも、本発明に係るタンパク質は、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、絨毛性ゴナドトロピン（ＣＧ）、黄体形成ホルモン（ＬＨ）、インターフェロン−β（ＩＦＮ−β）、ＰＥＧ化インターフェロン−β（ＩＦＮ−β）、成長ホルモン（ＧＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、線維芽細胞増殖因子１８（ＦＧＦ−１８）又はオステオポンチンから選択されることが好ましい。
ＦＳＨ、ＣＧ、ＬＨ及びＴＳＨは、ゴナドトロピン類に分類される糖タンパク質である。ゴナドトロピンは、不妊症の治療に用いられる。
ＩＮＦ−βは、インターロイキン類に分類される糖タンパク質である。ＩＦＮ−βは、多発性硬化症の治療に用いられる。
ＰＥＧ−ＩＮＦ−βは、ポリエチレングリコール鎖から誘導されるＩＮＦ−βである。これは安定性を向上させる。
成長ホルモンは、非グリコシル化タンパク質である。子供又は成人の成長ホルモン欠損の治療に用いられる。
ＦＧＦ−１８は、変形性関節症の治療に用いられる。
オステオポンチンは、グリコシル化された１本鎖のポリペプチドである。
好ましい一実施形態によれば、前記タンパク質は、ゴナドトロピン（ＦＳＨ、ＬＨ、ＣＧ、ＴＳＨ及び変異体）等のヘテロ２量体である。更なる実施形態によれば、前記タンパク質は、成長ホルモン（ＧＨ）又はインターフェロン−β（ＩＦＮ−β、又はＰＥＧ化変異体等の変異体）である。別の更なる実施形態によれば、前記タンパク質は、ＦＧＦ−１８又はオステオポンチンである。
好ましい実施形態によれば、液体タンパク質サンプルは、１又は２種類以上の治療用タンパク質を含有する。かかるサンプルは、低分子量化合物等の非タンパク質治療剤を含まないことが好ましい。
本明細書で使用される限り、卵胞刺激ホルモン（即ちＦＳＨ）は、完全長の成熟タンパク質として作製されたＦＳＨを指す。例としてはヒトＦＳＨ（即ち「ｈＦＳＨ」）が挙げられるが、これに限定される訳ではない。これは組み換えによって作製されたか、ヒト由来原料（例えば閉経後の女性の尿等）から単離されたかを問わない。
本方法は天然タンパク質のみならず、組み換えタンパク質にも適用可能である。一実施形態によれば、タンパク質製剤は、ヒト組み換えＦＳＨ、ＬＨ、ＣＧ、ＴＳＨ、ＧＨ又はＩＦＮ−βである。
卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）は、ゴナドトロピン類に分類される糖タンパク質である。ＦＳＨは、女性患者及び男性患者の双方について、不妊症及び繁殖障害の治療（例えば、精子減少症を患う男性における精子産生の誘発等）に用いられる。
黄体形成ホルモン（ＬＨ）は、下垂体前葉から分泌されるゴナドトロピンである。ＬＨは、女性患者において、ＦＳＨとの組み合わせで、ＯＩ（排卵誘発）及びＣＯＨ（過排卵誘起）に用いられ、特に、内因性ＬＨレベルが極めて低い患者や、ＬＨに抵抗性を示す患者、例えば下垂体性機能不全性生殖機能不全（ＨＨ、ＷＨＯグループＩ）を患う女性や、高齢（即ち３５歳以上）の患者、並びに、着床又は早期流産が問題となっている患者等に用いられる。
絨毛性ゴナドトロピン（ＣＧ）は、胎盤から生成されるゴナドトロピンであり、妊婦の尿から得られる。ＣＧは、ＬＨと同じレセプターに作用し、同じ反応を誘発する。ＣＧは、ＬＨよりも循環半減期が長いことから、通常はＬＨ活性の長期作用源として用いられる。ＣＧをＯＩ及びＣＯＨ療法に用いることにより、自然状態のＬＨピークが模倣され、排卵が誘発される。ＦＳＨによる、或いはＦＳＨとＬＨとの混合物による刺激の最後に、ヒト絨毛性ゴナドトロピン（ｈＣＧ）の注射を用いて排卵を誘発する。また、ＯＩ及びＣＯＨのための刺激期間において、ＣＧをＦＳＨと併用することにより、上述のような、ＬＨ活性が所望される患者の刺激時に、ＬＨ活性を付与してもよい。
ＦＳＨ、ＬＨ及びＣＧは、ヘテロ２量体の糖タンパク質ホルモンファミリーのメンバーである。かかるファミリーには甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）も含まれる。このファミリーのメンバーはヘテロ２量体であり、α−サブユニットとβ−サブユニットとを含んでなる。これらのサブユニットは、非共有結合的相互作用によって、相互に支持されている。ヒトＦＳＨ（ｈＦＳＨ）ヘテロ２量体は、（ｉ）他のヒトファミリーのメンバー（即ち、絨毛性ゴナドトロピン（「ＣＧ」）、黄体形成ホルモン（「ＬＨ」）、及び甲状腺刺激ホルモン（「ＴＳＨ」））に共通する、９２個のアミノ酸からなる成熟した糖タンパク質のα−サブユニット；及び（ii）ＦＳＨに特有の、１１１個のアミノ酸からなる成熟したβ−サブユニットから構成される。ヒトＬＨヘテロ２量体は、（ｉ）前述の、９２個のアミノ酸からなる成熟した糖タンパク質のα−サブユニット；及び（ii）ＬＨに特有の、１１２個のアミノ酸からなる成熟したβ−サブユニットから構成される。糖タンパク質のα−サブユニット及びβ−サブユニットは製剤時に、保存剤、界面活性剤及び他の賦形剤との相互作用によって分解され易い傾向がある。サブユニットの分解は、生物学的効力の低下を招く。
ＦＳＨは、筋肉内（ＩＭ）注射用又は皮下（ＳＣ）注射用に製剤される。一実施形態によれば、ＦＳＨは凍結乾燥（固体）形態として、バイアル又はアンプル中、７５ＩＵ／バイアル及び１５０ＩＵ／バイアルで供給され、２〜２５℃での保存時に１年半〜２年間の保存寿命を有する。注射用溶液は、前記凍結乾燥物を注射用蒸留水（ＷＦＩ）に再溶解させて作製する。更に、２２μｇ／０．５ｍｌ、３３μｇ／０７５ｍｌ又は６６μｇ／１．５ｍｌのＦＳＨと、ポロキサマー１８８、ショ糖、緩衝剤、メチオニン及びｍ−クレゾールとを含んでなる液体ＦＳＨ製剤が利用可能である（Gonal-F pen）。
よって、ＦＳＨはバイアル又はアンプル中、単回投与及び多回投与の両形式で、液剤として製剤されてきた。単回投与形式は、使用に先立つ保存の際に、安定性及び効力を維持しなければならない。多回投与形式は、使用に先立つ保存の際に安定性及び効力を維持するのみならず、アンプルの開封後、多回投与計画の全投与期間を通じて、安定性及び効力を維持するとともに、細菌が比較的少ない状態で維持しなければならない。かかる理由から、多回投与形式は通常、ベンジルアルコールやｍ−クレゾール等の静菌剤を含有する。
ＬＨは、筋肉内（ＩＭ）注射用又は皮下（ＳＣ）注射用に製剤される。一実施形態によれば、ＬＨはは凍結乾燥（固体）形態として、バイアル又はアンプル中、７５ＩＵ／バイアルで供給され、２〜２５℃での保存時に１年半〜２年間の保存寿命を有する。注射用溶液は、前記凍結乾燥物を注射用蒸留水（ＷＦＩ）に再溶解させて作製する。Luveris(商標)にはＬＨの他に、賦形剤としてショ糖、緩衝剤、ポリソルベート２０、メチオニンが含まれている。最近、ポロキサマー１８８を含有するＬＨ製剤が報告されている（国際公開公報ＷＯ２００４／０８７２１３）。
ｈＣＧを含有する液体医薬組成物も市販されている。例えば、ｐＨ７のリン酸バッファー中にマンニトール、メチオニン、ポロキサマー１８８を含有する、Ovitrelle(商標)が挙げられる。
「変異体」という表現は、ヒトＦＳＨ、ＬＨ、ＣＧ、ＴＳＨ、ＩＦＮ−β又はＧＨとはアミノ酸配列、グリコシル化のパターン、又はサブユニット間の結合が異なるものの、ＦＳＨ、ＬＨ、ＣＧ、ＴＳＨ、ＩＦＮ−β又はＧＨに相当する生物活性を示す分子を包含する意である。例としては、ＣＴＰ−ＦＳＨが挙げられる。これは、野生型のα−サブユニットと、ｈＣＧのカルボキシ末端ペプチドがＦＳＨのβ−サブユニットのＣ末端に融合した、ハイブリッド型β−サブユニットとからなる、長時間作用型修飾組み換えＦＳＨであって、LaPolt et al.; Endocrinology;1992, 131, 2514-2520、又は、Klein et al.; Development and characterization of a long-acting r-hFSH agonist; Human Reprod. 2003, 18, 50-56 等に記載されている。また、単鎖ＣＴＰ−ＦＳＨも挙げられる。これは以下の配列（Ｎ末端からＣ末端へ）からなる１本鎖分子である。
ここで、Klein ら（Pharmacokinetics and pharmacodynamics of single-chain recombinant human follicle-stimulating hormone containing the human chorionic gonadotrophin carboxyterminal peptide in the rhesus monkey; Fertility & Sterility; 2002, 77, 1248-1255）に記載の通り、βＦＳＨは、ＦＳＨのβ−サブユニットを表わし、βｈＣＧ ＣＴＰ（１１３−１４５）は、ｈＣＧのカルボキシ末端ペプチドを表わし、αＦＳＨは、ＦＳＨのα−サブユニットを表わす。ＦＳＨ変異体の他の例としては、国際公開公報ＷＯ０１／５８４９３（Maxygen）に開示の（特に国際公開公報ＷＯ０１／５８４９３の請求項１０及び１１に開示の）、α−サブユニット及び／又はβ−サブユニット内に更なるグリコシル化部位が組み込まれてなるＦＳＨ分子、並びに、国際公開公報ＷＯ９８／５８９５７に記載の、サブユニット間にＳ−Ｓ結合を有するＦＳＨ分子が挙げられる。
本明細書で言及するＦＳＨ変異体には、完全長の成熟ＦＳＨタンパク質よりも短い、β−サブユニットのカルボキシ末端欠失体も含まれる。ＦＳＨヘテロ２量体又はＦＳＨ変異体ヘテロ２量体は、任意の適切な方法により作製することができる。かかる方法としては、組み換え技術、（適切な場合には）天然材料からの単離又は抽出、又は化学合成、或いはこれらの任意の組合せ等が挙げられる。
「変異体」には、タンパク質のＰＥＧ化型も含まれる。
「組み換え」という語は、組み換えＤＮＡ技術の使用を通じて作製される、ＦＳＨ、ＬＨ、ＣＧ、ＴＳＨ、ＧＨ、ＩＦＮ−β又は変異体の調製を表わすのに用いられる（例えば、国際公開公報ＷＯ８５／０１９５８を参照）。組み換え技術によりＦＳＨ又はＬＨを発現させる方法の一例として、欧州特許ＥＰ ０ ２１１ ８９４及び同ＥＰ ０ ４８７ ５１２に記載のように、ＦＳＨ又はＬＨのα−及びβ−サブユニットをコード化するＤＮＡ配列を、単一のベクターにより、或いは２つのベクターにより（各サブユニットに個別にプロモーターを付与して）、真核細胞にトランスフェクトさせる方法が挙げられる。組み換え技術によってＦＳＨ又はＬＨを作製する別の例としては、欧州特許第ＥＰ ０ ５０５ ５００号（Applied Research Systems ARS Holding NV）に記載されるように、ＦＳＨ又はＬＨのサブユニットをコード化する内在配列と作動式に連結されるように、異種の調節セグメントを相同性組み換えによって挿入する方法が挙げられる。
本発明に従って用いられるＦＳＨ又はＦＳＨ変異体は、組み換え手段により（例えば哺乳動物細胞等から）作製されるのみならず、他の生物源（例えば尿等）から抽出することもできる。好ましい方法としては、Hakola, K. Molecular and Cellular Endocrinology, 127:59-69, 1997、Keene et al., J. Biol. Chem., 264 :4769-4775, 1989、Cerpa-Poljak et al., Endocrinology, 132:351-356, 1993、Dias et al., J. Biol. Chem., 269:25289-25294, 1994、Flack et al., J. Biol. Chem., 269:14015-14020, 1994、Valove et al., Endocrinology, 135:2657-2661, 1994、米国特許第３，１１９，７４０号、及び米国特許第５，７６７，０６７号に記載される方法が挙げられる。
本明細書で用いられる黄体形成ホルモン（又はＬＨ）は、完全長の成熟タンパク質として作製されたＦＳＨを表わす。例えばヒトＬＨが挙げられるが、これに限定される訳ではない。これは組み換えにより作製されたか、ヒト由来材料（例えば閉経後の女性の尿等）から単離されたかを問わない。ヒト糖タンパク質のα−サブユニットのタンパク質配列を配列番号１に示し、ヒトＬＨのβ−サブユニットのタンパク質配列を配列番号６に示す。好ましい実施形態によれば、ＬＨは組み換え体である。
「ＬＨ変異体」という表現は、ヒトＬＨとはアミノ酸配列、グリコシル化のパターン、又はサブユニット間の結合が異なるが、ＬＨ活性を示す分子を包含する意である。
ＬＨヘテロ２量体又はＬＨ変異体ヘテロ２量体は、任意の適切な方法により作製することができる。かかる方法としては、組み換え技術、（適切な場合には）天然材料からの単離又は抽出、又は化学合成、或いはこれらの任意の組合せ等が挙げられる。
本発明の液体タンパク質サンプルには、ＦＳＨ／ＬＨ及び変異体の混合物も含まれ（国際公開公報第ＷＯ２００４／０８７２１３号）、更にはＦＳＨ、及びｈＣＧ、及び変異体（国際公開公報第ＷＯ２００４／１０５７８８号）も含まれる。
「水性希釈剤」という語は、水を含有する液体溶媒を指す。水性溶媒系は、水のみからなるものでも、水と１種又は２種以上の水混和性の溶媒とからなるものでもよい。また、糖、緩衝剤、塩又は他の賦形剤等の溶質が溶解されていてもよい。より一般的に用いられる非水性溶媒は、メタノール、エタノール、プロパノール等の短鎖有機アルコール、アセトン等の短鎖ケトン、及びグリセロール等の多価アルコールである。
「静菌」又は「静菌剤」という語は、製剤に添加され、抗菌剤として作用する化合物又は組成物を指す。ＦＳＨ又はＦＳＨ変異体、又はＦＳＨ及びＬＨを含有する、本発明に係る保存用製剤は、（好ましくはヒト用の）商業的に実現可能な多回使用品として、防腐効果に関する法定又は規制指針に合致することが好ましい。静菌剤の例としては、フェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｏ−クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、アルキルパラベン（メチル、エチル、プロピル、ブチル等）、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、デヒドロ酢酸ナトリウム及びチメロサールが挙げられる。
「緩衝剤」又は「生理学的に許容可能な緩衝剤」という語は、医薬又は獣医薬用途において製剤中安全であることが知られており、製剤に所望されるｐＨの範囲内に製剤のｐＨを維持又は調節する効果を有する化合物の溶液を指す。ｐＨを適度な酸性ｐＨ〜適度な塩基性ｐＨに調節する許容可能な緩衝剤としては、リン酸、酢酸、クエン酸、アルギニン、ＴＲＩＳ、及びヒスチジン等の化合物が挙げられるが、これらに限定されるものではない。「ＴＲＩＳ」は、２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−１，３，−プロパンジオール、及びその薬理学的に許容可能なあらゆる塩を指す。好ましい緩衝剤は、生理食塩水又は許容可能な塩を用いたリン酸緩衝剤である。
「リン酸緩衝剤」という語は、リン酸又はその塩を含有し、所望のｐＨに調整された溶液を指す。リン酸緩衝剤は一般的に、リン酸又はリン酸塩から調製される。リン酸塩としては、これに限定されるものではないが、ナトリウム及びカリウム塩が挙げられる。本技術分野では数種のリン酸塩が公知であり、第一、第二及び第三リン酸のナトリウム塩及びカリウム塩などが挙げられる。また、リン酸塩は、既存の塩の水和物として生じることも知られている。リン酸緩衝剤はある範囲のｐＨをカバーしていてもよい。この範囲は例えば約ｐＨ４〜約ｐＨ１０であるが、好ましい範囲は約ｐＨ５〜約ｐＨ９であり、最も好ましい範囲は約６．０〜約８．０であり、最も好ましくは約ｐＨ７．０である。
「バイアル」は、固体又は液体の状態にあるＦＳＨを、滅菌状態のまま保持するのに適した容器を広く指す語である。本明細書で用いられるバイアルの例としては、アンプル、カートリッジ、ブリスターパッケージ、又は、シリンジ、ポンプ（浸透ポンプを含む）、カテーテル、経皮貼布、肺又は経粘膜スプレーを介してＦＳＨを患者に送達するのに適切なその他の容器が挙げられる。非経口、経肺、経粘膜、又は経皮投与用の製品をパッケージングするのに適したバイアルは、本技術分野では周知であり、認知されている。
「多回投与使用」という表現は、ＦＳＨ製剤又はタンパク質製剤の単一のバイアル、アンプル又はカートリッジを、複数回の注射に、例えば２回、３回、４回、５回、６回又はこれ以上の注射に使用することを含む意である。注射は、好ましくは少なくとも約１２時間、約２４時間等の期間に亘って、好ましくは最長約１２日間の期間に亘って行なう。注射の間には時間間隔として、例えば６、１２、２４、４８又は７２時間等の期間を設けてもよい。
「安定性」という語は、本発明の製剤中における所与のタンパク質の物理的、化学的、及び高次構造的安定性を指す（生物学的効力の維持も含む）。タンパク質製剤の不安定化の原因としては、タンパク質分子の化学分解又は凝集による高次ポリマーの形成、ヘテロ２量体の単量体への分解、脱グリコシル化、グリコシル化修飾、酸化（特にα−サブユニットのヘテロ２量体中の酸化）、或いは、本発明に含まれるポリペプチドの少なくとも１種の生物活性を減退させる、その他の任意の構造修飾が挙げられる。
「安定な」溶液又は製剤とは、その中に含まれるタンパク質の分解、修飾、凝集、生物活性の喪失等の程度が、許容し得る程度に調節されており、且つ、許容し得ない程度にまで経時的に増大しないような溶液又は製剤である。製剤は、表示されたタンパク質活性の少なくとも約８０％を、最長２年の期間に亘って維持することが好ましい。
本発明の根底にある目的は、タンパク質サンプル中のポロキサマー量を測定するための簡便で迅速な方法を提供することにある。ポロキサマーは界面活性剤として使用可能であり、エチレンオキシドとプロピレンオキシドとのブロック共重合体から選択される。好ましくはプルロニック（Pluronic）（登録商標）Ｆ７７、プルロニックＦ８７、プルロニックＦ８８及びプルロニック（登録商標）Ｆ６８であり、特に好ましくはプルロニックＦ６８である（ＢＡＳＦ、プルロニックＦ６８は、ポロキサマー１８８（Poloxamer 188）としても知られている）。
上述したように、医薬製剤は２〜２５℃の保存温度において、最長２年間の保存寿命を有することが求められる。これは、製剤が前記期間に亘って、安定に維持されるとの見込みを示唆するものである。液体製剤が含有する種々の賦形剤は、タンパク質製剤の安定性に直接影響するか、又は分解を介して間接的に影響することから、製剤の安定性を評価する分析ツールが必要となる。
より具体的には、ポロキサマー界面活性剤は、エチレンオキシド（ＥＯ）とプロピレンオキシド（ＰＯ）とのブロック共重合体である。プロピレンオキシドのブロック（ＰＯ）は、２つのエチレンオキシド（ＥＯ）ブロックに挟まれている。
ポロキサマーの合成は：
・プロピレングリコールの２つのヒドロキシル基に、プロピレンオキシドを制御下で付加することにより、所望の分子量の疎水性物質を作製し；
・エチレンオキシドを付加して、前記の疎水性物質を親水性基間に挟み込む
という、二段階のプロセスで行なわれる。
・プロピレングリコールの２つのヒドロキシル基に、プロピレンオキシドを制御下で付加することにより、所望の分子量の疎水性物質を作製し；
・エチレンオキシドを付加して、前記の疎水性物質を親水性基間に挟み込む
という、二段階のプロセスで行なわれる。
ポロキサマー界面活性剤は、プルロニックとしても知られている。
プルロニック（登録商標）Ｆ７７では、ポリオキシエチレン（親水性物質）の割合は７０％であり、疎水性物質（ポリオキシプロピレン）の分子量は約２，３０６Ｄａである。
プルロニックＦ８７では、ポリオキシエチレン（親水性物質）の割合は７０％であり、疎水性物質（ポリオキシプロピレン）の分子量は約２，６４４Ｄａである。
プルロニックＦ８８では、ポリオキシエチレン（親水性物質）の割合は８０％であり、疎水性物質（ポリオキシプロピレン）の分子量は、約２，６４４Ｄａである。
プルロニックＦ６８では、ポリオキシエチレン（親水性物質）の割合は８０％であり、疎水性物質（ポリオキシプロピレン）の分子量は、約１，９６７Ｄａである。
プルロニックＦ７７の代表的な特性を以下に列挙する：
平均分子量：６６００；
融点／流動点：４８℃；
２０℃における物理的形態：固体
粘性（ブルックフィールド）ｃｐｓ：４８０［２５℃で液体、６０℃でペースト、７７℃で固体］；
表面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ；
濃度０．１％：４７．０
濃度０．０１％：４９．３
濃度０．００１％：５２．８
界面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ、対ヌジョール；
濃度０．１％：１７．７
濃度０．０１％：２０．８
濃度０．０１％：２５．５
ドレーヴス・ウェッティング（Draves Wetting）、秒 ２５℃
濃度１．０％：＞３６０
濃度０．１％：＞３６０
泡高
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、５０℃でのｍｍ：１００
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、２６℃でのｍｍ：４７
動的（Dynamic）、０．１％、４００ｍｌ／分でのｍｍ：＞６００
水溶液中での曇り点、℃
濃度１％：＞１００
濃度１０％：＞１００
ＨＬＢ（親水性−油性バランス）：２５
平均分子量：６６００；
融点／流動点：４８℃；
２０℃における物理的形態：固体
粘性（ブルックフィールド）ｃｐｓ：４８０［２５℃で液体、６０℃でペースト、７７℃で固体］；
表面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ；
濃度０．１％：４７．０
濃度０．０１％：４９．３
濃度０．００１％：５２．８
界面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ、対ヌジョール；
濃度０．１％：１７．７
濃度０．０１％：２０．８
濃度０．０１％：２５．５
ドレーヴス・ウェッティング（Draves Wetting）、秒 ２５℃
濃度１．０％：＞３６０
濃度０．１％：＞３６０
泡高
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、５０℃でのｍｍ：１００
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、２６℃でのｍｍ：４７
動的（Dynamic）、０．１％、４００ｍｌ／分でのｍｍ：＞６００
水溶液中での曇り点、℃
濃度１％：＞１００
濃度１０％：＞１００
ＨＬＢ（親水性−油性バランス）：２５
プルロニックＦ８７の代表的な特性を以下に列挙する：
平均分子量：７７００；
融点／流動点：４９℃；
２０℃における物理的形態：固体
粘性（ブルックフィールド）ｃｐｓ：７００［２５℃で液体、６０℃でペースト、７７℃で固体］；
表面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ；
濃度０．１％：４４．０
濃度０．０１％：４７．０
濃度０．００１％：５０．２
界面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ、対ヌジョール；
濃度０．１％：１７．４
濃度０．０１％：２０．３
濃度０．０１％：２３．３
ドレーヴス・ウェッティング（Draves Wetting）、秒 ２５℃
濃度１．０％：＞３６０
濃度０．１％：＞３６０
泡高
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、５０℃でのｍｍ：８０
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、２６℃でのｍｍ：３７
動的（Dynamic）、０．１％、４００ｍｌ／分でのｍｍ：＞６００
水溶液中での曇り点、℃
濃度１％：＞１００
濃度１０％：＞１００
ＨＬＢ（親水性−油性バランス）：２４
平均分子量：７７００；
融点／流動点：４９℃；
２０℃における物理的形態：固体
粘性（ブルックフィールド）ｃｐｓ：７００［２５℃で液体、６０℃でペースト、７７℃で固体］；
表面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ；
濃度０．１％：４４．０
濃度０．０１％：４７．０
濃度０．００１％：５０．２
界面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ、対ヌジョール；
濃度０．１％：１７．４
濃度０．０１％：２０．３
濃度０．０１％：２３．３
ドレーヴス・ウェッティング（Draves Wetting）、秒 ２５℃
濃度１．０％：＞３６０
濃度０．１％：＞３６０
泡高
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、５０℃でのｍｍ：８０
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、２６℃でのｍｍ：３７
動的（Dynamic）、０．１％、４００ｍｌ／分でのｍｍ：＞６００
水溶液中での曇り点、℃
濃度１％：＞１００
濃度１０％：＞１００
ＨＬＢ（親水性−油性バランス）：２４
プルロニックＦ８８の代表的な特性を以下に列挙する：
平均分子量：１１４００；
融点／流動点：５４℃；
２０℃における物理的形態：固体
粘性（ブルックフィールド）ｃｐｓ：２３００［２５℃で液体、６０℃でペースト、７７℃で固体］；
表面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ；
濃度０．１％：４８．５
濃度０．０１％：５２．６
濃度０．００１％：５５．７
界面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ、対ヌジョール；
濃度０．１％：２０．５
濃度０．０１％：２３．３
濃度０．０１％：２７．０
ドレーヴス・ウェッティング（Draves Wetting）、秒 ２５℃
濃度１．０％：＞３６０
濃度０．１％：＞３６０
泡高
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、５０℃でのｍｍ：８０
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、２６℃でのｍｍ：３７
動的（Dynamic）、０．１％、４００ｍｌ／分でのｍｍ：＞６００
水溶液中での曇り点、℃
濃度１％：＞１００
濃度１０％：＞１００
ＨＬＢ（親水性−油性バランス）：２８
平均分子量：１１４００；
融点／流動点：５４℃；
２０℃における物理的形態：固体
粘性（ブルックフィールド）ｃｐｓ：２３００［２５℃で液体、６０℃でペースト、７７℃で固体］；
表面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ；
濃度０．１％：４８．５
濃度０．０１％：５２．６
濃度０．００１％：５５．７
界面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ、対ヌジョール；
濃度０．１％：２０．５
濃度０．０１％：２３．３
濃度０．０１％：２７．０
ドレーヴス・ウェッティング（Draves Wetting）、秒 ２５℃
濃度１．０％：＞３６０
濃度０．１％：＞３６０
泡高
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、５０℃でのｍｍ：８０
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、２６℃でのｍｍ：３７
動的（Dynamic）、０．１％、４００ｍｌ／分でのｍｍ：＞６００
水溶液中での曇り点、℃
濃度１％：＞１００
濃度１０％：＞１００
ＨＬＢ（親水性−油性バランス）：２８
プルロニックＦ６８の代表的な特性を以下に列挙する：
平均分子量：８４００；
融点／流動点：５２℃；
２０℃における物理的形態：固体
粘性（ブルックフィールド）ｃｐｓ：１０００［２５℃で液体、６０℃でペースト、７７℃で固体］；
表面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ；
濃度０．１％：５０．３
濃度０．０１％：５１．２
濃度０．００１％：５３．６
界面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ、対ヌジョール；
濃度０．１％：１９．８
濃度０．０１％：２４．０
濃度０．０１％：２６．０
ドレーヴス・ウェッティング（Draves Wetting）、秒 ２５℃
濃度１．０％：＞３６０
濃度０．１％：＞３６０
泡高
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、５０℃でのｍｍ：３５
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、２６℃でのｍｍ：４０
動的（Dynamic）、０．１％、４００ｍｌ／分でのｍｍ：＞６００
水溶液中での曇り点、℃
濃度１％：＞１００
濃度１０％：＞１００
ＨＬＢ（親水性−油性バランス）：２９
平均分子量：８４００；
融点／流動点：５２℃；
２０℃における物理的形態：固体
粘性（ブルックフィールド）ｃｐｓ：１０００［２５℃で液体、６０℃でペースト、７７℃で固体］；
表面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ；
濃度０．１％：５０．３
濃度０．０１％：５１．２
濃度０．００１％：５３．６
界面張力、２５℃でのｄｙｎｅ／ｃｍ、対ヌジョール；
濃度０．１％：１９．８
濃度０．０１％：２４．０
濃度０．０１％：２６．０
ドレーヴス・ウェッティング（Draves Wetting）、秒 ２５℃
濃度１．０％：＞３６０
濃度０．１％：＞３６０
泡高
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、５０℃でのｍｍ：３５
ロス・マイルス（Ross Miles）、０．１％、２６℃でのｍｍ：４０
動的（Dynamic）、０．１％、４００ｍｌ／分でのｍｍ：＞６００
水溶液中での曇り点、℃
濃度１％：＞１００
濃度１０％：＞１００
ＨＬＢ（親水性−油性バランス）：２９
上に挙げたポロキサマーと同様の特性を持つ他のポロキサマーポリマーも、本発明の製剤に用いることができる。本方法の分析対象となるタンパク質製剤中に存在する好ましいポロキサマー界面活性剤としては、プルロニックＦ６８（＝ポロキサマー１８８（Poloxamer 188））が挙げられる。
液体タンパク質製剤中のプルロニックの濃度、特にプルロニックＦ６８の濃度は、好ましくは約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約１ｍｇ／ｍｌであり、より好ましくは約０．０５ｍｇ／ｍｌ〜約０．５ｍｇ／ｍｌであり、特に好ましくは約０．２ｍｇ／ｍｌ〜約０．４ｍｇ／ｍｌであり、最も好ましくは約０．１ｍｇ／ｍｌである。
本発明の方法に従って分析されるタンパク質製剤のｐＨは、約６．０〜約８．０、より好ましくは約６．８〜約７．８、例えば約ｐＨ７．０、約ｐＨ７．２、及び約７．４である。好ましい緩衝剤としてはリン酸が、好ましい対イオンとしてはナトリウムイオン又はカリウムイオンが挙げられる。リン酸生理食塩緩衝剤は、本技術分野では周知であり、ダルベッコリン酸緩衝食塩水等が挙げられる。全溶液中の緩衝剤濃度は、約５Ｍｍ、約９．５Ｍｍ、約１０Ｍｍ、約５０Ｍｍ、約１００Ｍｍ、約１５０Ｍｍ、約２００Ｍｍ、約２５０Ｍｍ、及び約５００Ｍｍの間で選択し得る。中でも、緩衝剤濃度は約１０Ｍｍである音が好ましい。リン酸イオン１０Ｍｍ、ｐＨ７．０のバッファーが特に好ましい。
本発明の方法に従って分析されるＦＳＨ製剤のｐＨは、好ましくは約６．０〜約８．０、より好ましくは約６．８〜約７．８、例えば約ｐＨ７．０、約ｐＨ７．２、及び約７．４である。好ましい緩衝剤としてはリン酸が、好ましい対イオンとしてはナトリウムイオン又はカリウムイオンが挙げられる。
本発明の方法に従って分析されるＦＳＨ及びＬＨの混合製剤のｐＨは、約６．０〜約９．０、より好ましくは約６．８〜約８．５、例えば約ｐＨ７．０、約ｐＨ８．０、及び約８．２、最も好ましくは約ｐＨ８．０である。
本発明の方法に従って分析されるｈＣＧ製剤のｐＨは、好ましくは約６．０〜約８．０であり、より好ましくは約６．８〜約７．８、例えば約ｐＨ７．０、約ｐＨ７．２、及び約７．４である。
タンパク質サンプルとしては、単回投与用又は多回投与用の液体製剤が好ましい。本発明に係る、多回投与での使用が意図される液体製剤は、フェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｏ−クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、アルキルパラベン（メチル、エチル、プロピル、ブチル等）、チモール、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、デヒドロ酢酸ナトリウム及びチメロサール等の静菌剤を含んでなることが好ましい。特に好ましいものは、フェノール、ベンジルアルコール及びｍ−クレゾールであり、より好ましいものは、フェノール及びｍ−クレゾールであり、最も好ましいものは、ｍ−クレゾールである。これらの静菌剤は、多回投与注射の期間に亘って、製剤を実質的に無菌（注射に適切な）で維持するのに有効な濃度を生じる量で使用される。かかる期間は、例えば、約１２時間又は約２４時間〜約１２日間又は約１４日間、好ましくは約６日間〜約１２日間である。静菌剤の存在量は、好ましくは約０．１％（静菌剤の量／溶媒の量）〜約２．０％、より好ましくは約０．２％〜約１．０％の濃度とする。ベンジルアルコールの場合、特に好ましい濃度は０．９％である。フェノールの場合、特に好ましい濃度は約０．５％である。ｍ−クレゾールの場合、特に好ましい濃度は約０．３％（例えば、ＷＦＩ中に約３ｍｇ／ｍｌ）である。
サイズ排除カラムは当業者に周知であり、サンプル中の各タンパク質及びポロキサマーに応じて選択される。カラムのゲルとしては、ポリマー系マトリックスを用いるべきである。好ましいカラムとしては、トーソーハース（Toso Haas）社のＳＥ−ＨＰＬＣカラム、商品名TSK G3000PWが挙げられる。このマトリックスのビーズは、粒径１０又は１７μｍ、孔経約２００Åである。このカラムは市販されている。
検出工程は、当業者に公知の任意のＲＩ検出系により行なうことができる。
条件をより酸性にすると、タンパク質からのポロキサマーの分離も、一層容易になることが分かっている。
従って、本発明に係る方法において使用される移動相は、水又は緩衝溶液等の水性溶媒である。
特定の実施形態によれば、移動相のｐＨは７未満、好ましくは３未満、より好ましくは約１．６〜２．０の間、最も好ましくは１．９〜２．０の間に調整される。一実施形態によれば、タンパク質はＦＳＨ、ＣＧ、ＬＨ又はＴＳＨ等のヘテロ２量体である。酸性条件下では、ヘテロ２量体タンパク質はサブユニットに分解し、移動が容易となるため、分離及び検出工程（分解能）が改善される。ｐＨの調整に適した酸性剤は、当業者であれば選択可能である。最も好ましい酸は、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）である。
一般的には、評価対象のサンプルを調製し、カラムに注入する。本方法の検出工程で屈折率を考慮することにより、得られるクロマトグラムには、ポロキサマーのピーク面積に加えて、タンパク質及び賦形剤に関する少なくとも１つの更なるピークが含まれる。ピーク面積を評価することにより、分析サンプル中に存在するポロキサマーを定量することができる。定量に必要なポロキサマーの検量線は作成済みである（実施例参照）。
続いて、本発明を実施例により例示する。
実施例１（図１参照）
本実施例の目的は、市販の液体ｈＣＧ製剤、Ovitrelle(商標)のサンプルを室温で１８カ月保存した後、該サンプル中のポロキサマー１８８（Poloxamer 188）濃度を分析することである。即ち、ポロキサマー１８８に関する液体製剤の安定性を評価した。調製時点でのポロキサマー１８８の濃度は約１００μｇ／ｍｌであった。Ovitrelle(商標)中のポロキサマー１８８の定量プロトコルは、以下の通りとした。
本実施例の目的は、市販の液体ｈＣＧ製剤、Ovitrelle(商標)のサンプルを室温で１８カ月保存した後、該サンプル中のポロキサマー１８８（Poloxamer 188）濃度を分析することである。即ち、ポロキサマー１８８に関する液体製剤の安定性を評価した。調製時点でのポロキサマー１８８の濃度は約１００μｇ／ｍｌであった。Ovitrelle(商標)中のポロキサマー１８８の定量プロトコルは、以下の通りとした。
注射用液体Ovitrelle(商標)の含有成分は、絨毛性ゴナドトロピン−α、マンニトール、Ｌ−メチオニン、ポロキサマー１８８、リン酸、ＮａＯＨ及び水であった。
２．方法
２．１ 溶離液Ａ（Ｈ2Ｏ／ＴＦＡ０．５％）
１リットルメスシリンダー中の９５０ｍｌの精製水に、５ｍＬのトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を加え、攪拌しながら１０００ｍｌに調節した。該溶離液のｐＨは１．７〜１．９であった。
２．１ 溶離液Ａ（Ｈ2Ｏ／ＴＦＡ０．５％）
１リットルメスシリンダー中の９５０ｍｌの精製水に、５ｍＬのトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を加え、攪拌しながら１０００ｍｌに調節した。該溶離液のｐＨは１．７〜１．９であった。
２．２ 溶離液Ｂ（２０％エタノール）
１リットルのメスシリンダー中の７５０ｍｌの精製水に、２００ｍＬのエタノールを加え、攪拌しながら１０００ｍｌに調節した。
１リットルのメスシリンダー中の７５０ｍｌの精製水に、２００ｍＬのエタノールを加え、攪拌しながら１０００ｍｌに調節した。
２．３ オートサンプラー用の洗浄溶液（１０％メタノール）
１リットルのメスシリンダー中の８５０ｍｌの精製水に、１００ｍＬのメタノールを加え、攪拌しながら１０００ｍｌに調節した。
１リットルのメスシリンダー中の８５０ｍｌの精製水に、１００ｍＬのメタノールを加え、攪拌しながら１０００ｍｌに調節した。
２．４ 密封洗浄溶媒（５％メタノール）
１リットルのメスシリンダー中の９００ｍｌの精製水に、５０ｍＬのメタノールを加え、攪拌しながら１０００ｍｌに調節した。
１リットルのメスシリンダー中の９００ｍｌの精製水に、５０ｍＬのメタノールを加え、攪拌しながら１０００ｍｌに調節した。
２．５ 検量線用の希釈溶液（ポロキサマー１８８無しの液体製剤）
１リットルのメスシリンダー中の８５０ｍｌの精製水に、５４．６ｇのＤ（−）マンニトール、０．９８ｇのオルト−リン酸８５％、２００μｇのＬ−メチオニンを加えた。５０％の水酸化ナトリウムを滴下により加えて溶液をｐＨ７．０に調整し、体積を１ｍｌに調節した。この溶液を０．４５μｍフィルターにより濾過した。
１リットルのメスシリンダー中の８５０ｍｌの精製水に、５４．６ｇのＤ（−）マンニトール、０．９８ｇのオルト−リン酸８５％、２００μｇのＬ−メチオニンを加えた。５０％の水酸化ナトリウムを滴下により加えて溶液をｐＨ７．０に調整し、体積を１ｍｌに調節した。この溶液を０．４５μｍフィルターにより濾過した。
上記に代わり、検量線用の希釈溶液として水を用いてもよい。
２．６ 検量線用の濃縮溶液
１００ｍｌのメスシリンダー中の８０ｍｌの精製水に、２００ｍｇのポロキサマー１８８を溶解させ、体積を１００ｍｌに調節した。分析対象サンプル中の予想濃度に基づいて検量線を作成した。本実施例では、前記注射用液体のOvitrelle(商標)中の予測ポロキサマー１８８濃度は約１００μｇ／ｍｌであったので、検量線は５０〜１６０μｇ／ｍｌの範囲とした。
１００ｍｌのメスシリンダー中の８０ｍｌの精製水に、２００ｍｇのポロキサマー１８８を溶解させ、体積を１００ｍｌに調節した。分析対象サンプル中の予想濃度に基づいて検量線を作成した。本実施例では、前記注射用液体のOvitrelle(商標)中の予測ポロキサマー１８８濃度は約１００μｇ／ｍｌであったので、検量線は５０〜１６０μｇ／ｍｌの範囲とした。
３ サンプル調製
ブランク
０．０５ｍｌの検量線用希釈溶液を注入した。
ブランク
０．０５ｍｌの検量線用希釈溶液を注入した。
サンプル
何れのサンプルも、何らの前処理を行なうことなく試験に供し、０．０５ｍｌを注入した。
何れのサンプルも、何らの前処理を行なうことなく試験に供し、０．０５ｍｌを注入した。
４． 操作条件
４．１． 機器の設定
以下の溶液をＨＰＬＣの管に接続した。
管Ａ：溶離液Ａ（Ｈ2Ｏ／ＴＦＡ０．５％）
管Ｂ：溶離液Ｂ（２０％エタノール）
４．１． 機器の設定
以下の溶液をＨＰＬＣの管に接続した。
管Ａ：溶離液Ａ（Ｈ2Ｏ／ＴＦＡ０．５％）
管Ｂ：溶離液Ｂ（２０％エタノール）
管Ａ及びＢを充填して装置をパージし、２ｍＬ／分の流速で３分間リンスした。管上に脱気装置がある場合は、スイッチをオンにした。管Ａについては、分析前に、流液のＲＩ検出器の電磁弁を、少なくとも３０分間パージモードに切り替えた。フローセルのパージングを行なって、該セルの基準側面に新鮮な移動相を流し込んだ。
４．２． カラムの平衡
カラムに溶離液Ａを流して、カラムを平衡化させた。平衡化は、ベースラインが安定した時点で完了とした。
カラムに溶離液Ａを流して、カラムを平衡化させた。平衡化は、ベースラインが安定した時点で完了とした。
４．３． 保存カラム
分析の完了後、カラムを少なくとも３０ｍｌの精製水でリンスし、次いで３０ｍｌの２０％エタノールでリンスした。
分析の完了後、カラムを少なくとも３０ｍｌの精製水でリンスし、次いで３０ｍｌの２０％エタノールでリンスした。
４．４． オビトレルサンプル中のポロキサマー１８８濃度の測定
オビトレルサンプル中のポロキサマー１８８濃度の計算には、モデルとして線形回帰法を用いた。
オビトレルサンプル中のポロキサマー１８８濃度の計算には、モデルとして線形回帰法を用いた。
Ｙ＝ａ＋ｂｘ
ここで、
Ｙ＝ ポロキサマー１８８の総面積
ａ＝ 切片
ｂ＝ 傾き
ｘ＝ 注入量１ｍｌ当たりμｇ単位のポロキサマー１８８濃度。
ここで、
Ｙ＝ ポロキサマー１８８の総面積
ａ＝ 切片
ｂ＝ 傾き
ｘ＝ 注入量１ｍｌ当たりμｇ単位のポロキサマー１８８濃度。
図１に示すようにサンプルを積分した。
検量線の切片（ａ）と傾き（ｂ）を計算し、スタットグラフィックスプラス（Statgraphics plus）というソフトウェアで線形回帰を計算した。
下記の式を適用してポロキサマー１８８の濃度を計算した。
検量線の切片（ａ）と傾き（ｂ）を計算し、スタットグラフィックスプラス（Statgraphics plus）というソフトウェアで線形回帰を計算した。
下記の式を適用してポロキサマー１８８の濃度を計算した。
等式１の解は、各オビトレルサンプル中のポロキサマー１８８濃度を表わす。単位はμｇ／ｍｌである。
本実施例のサンプル中のポロキサマー濃度（図１参照）は約９４μｇ／ｍｌであった。
実施例２
本実施例の目的は、市販の液体ｈＦＳＨ製剤、Gonal-F RFF Pen(商標)のサンプルを室温で１８カ月保存した後、該サンプル中のポロキサマー１８８濃度を分析することである。即ち、ポロキサマー１８８に関する液体製剤の安定性を評価した。調製時のポロキサマー１８８濃度は約１００μｇ／ｍｌであった。Gonal-F RFF Pen(商標)中のポロキサマー１８８定量のプロトコルは、カラム流速を０．７５ｍｌ／分とした点を除いて、実施例１でオビトレルについて示したプロトコルと同一とした。
ポロキサマーをｈＦＳＨから首尾よく分離し、個別に定量した。
本実施例の目的は、市販の液体ｈＦＳＨ製剤、Gonal-F RFF Pen(商標)のサンプルを室温で１８カ月保存した後、該サンプル中のポロキサマー１８８濃度を分析することである。即ち、ポロキサマー１８８に関する液体製剤の安定性を評価した。調製時のポロキサマー１８８濃度は約１００μｇ／ｍｌであった。Gonal-F RFF Pen(商標)中のポロキサマー１８８定量のプロトコルは、カラム流速を０．７５ｍｌ／分とした点を除いて、実施例１でオビトレルについて示したプロトコルと同一とした。
ポロキサマーをｈＦＳＨから首尾よく分離し、個別に定量した。
実施例３
本実施例の目的は、市販の液体ｈＧＨ製剤、Serostim(商標)のサンプル中のポロキサマー１８８濃度を分析することである。プロトコルは実施例２と同一とした。
ポロキサマーをｈＧＨから首尾よく分離し、個別に定量した。
本実施例の目的は、市販の液体ｈＧＨ製剤、Serostim(商標)のサンプル中のポロキサマー１８８濃度を分析することである。プロトコルは実施例２と同一とした。
ポロキサマーをｈＧＨから首尾よく分離し、個別に定量した。
実施例４
本実施例の目的は、市販の液体ｈＩＦＮ−β製剤のサンプル中のポロキサマー１８８濃度を分析することである。プロトコルは、実施例２のものと同一であった。
ポロキサマーをｈＩＦＮ−βから首尾よく分離し、個別に定量した。
本実施例の目的は、市販の液体ｈＩＦＮ−β製剤のサンプル中のポロキサマー１８８濃度を分析することである。プロトコルは、実施例２のものと同一であった。
ポロキサマーをｈＩＦＮ−βから首尾よく分離し、個別に定量した。
Claims (14)
- 分子量５〜７０ｋＤａのタンパク質を含む液体サンプル中のポロキサマーの定量方法であって、
前記サンプルを：
（ａ）サイズ排除クロマトグラフィーカラムを用いた分離工程；
（ｂ）酸性ｐＨの移動相を用いた溶離工程；及び、
（ｃ）任意による、ポロキサマーの検出工程；
に供する工程を含んでなる方法。 - 前記ポロキサマーが、ポロキサマー１８８（Poloxamer 188）である、請求項１記載の方法。
- 前記タンパク質が２０〜７０ｋＤａの分子量を有する、請求項１又は２に記載の方法。
- 前記タンパク質が、ヘテロ２量体のタンパク質である、請求項１〜３の何れか一項に記載の方法。
- 前記タンパク質が、ＦＳＨ、ＬＨ、ｈＣＧ、ＴＳＨから選択されるゴナドトロピンである、請求項４記載の方法。
- 分析対象のタンパク質が、インターフェロン−β又は成長ホルモン（ＧＨ）である、請求項１〜３の何れか一項に記載の方法。
- 前記サンプルが、ＦＳＨ、ＬＨ、ｈＣＧ、ＴＳＨ、ＧＨ又はインターフェロン−βを含有する水性医薬組成物である、請求項１〜６の何れか一項に記載の方法。
- 前記移動相が、水性溶媒である、請求項１〜７の何れか一項に記載の方法。
- 前記移動相のｐＨが、３未満に調整されている、請求項８記載の方法。
- 前記移動相のｐＨが、１．９〜２．０に調整されている、請求項９記載の方法。
- 前記ポロキサマーの検出工程が、屈折率を分析することを包含する、請求項１〜１０の何れか一項に記載の方法。
- 前記サイズ排除カラムが、ビーズを含有するポリマー系マトリックスが充填されたＳＥ−ＨＰＬＣカラムである、請求項１〜１１の何れか一項に記載の方法。
- 前記マトリックスのビーズが、１０又は１７μｍの粒径を有する、請求項１２記載の方法。
- 前記マトリックスのビーズが、約２００Åの孔径を有する、請求項１２又は１３に記載の方法。
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP05108439 | 2005-09-14 | ||
| EP05108439.0 | 2005-09-14 | ||
| US71764205P | 2005-09-16 | 2005-09-16 | |
| US60/717,642 | 2005-09-16 | ||
| PCT/EP2006/066383 WO2007031566A1 (en) | 2005-09-14 | 2006-09-14 | Method for the quantitative determination of poloxamers |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2009508132A JP2009508132A (ja) | 2009-02-26 |
| JP4897814B2 true JP4897814B2 (ja) | 2012-03-14 |
Family
ID=35696020
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2008530539A Active JP4897814B2 (ja) | 2005-09-14 | 2006-09-14 | ポロキサマーの定量方法 |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4897814B2 (ja) |
| CN (1) | CN101262918B (ja) |
| AT (1) | ATE547161T1 (ja) |
| BR (1) | BRPI0615837A2 (ja) |
| DK (1) | DK1951395T3 (ja) |
| ES (1) | ES2378686T3 (ja) |
| PT (1) | PT1951395E (ja) |
| SI (1) | SI1951395T1 (ja) |
| UA (1) | UA95461C2 (ja) |
| ZA (1) | ZA200800253B (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014159813A1 (en) | 2013-03-13 | 2014-10-02 | Moderna Therapeutics, Inc. | Long-lived polynucleotide molecules |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101343040B1 (ko) * | 2010-12-28 | 2013-12-18 | 주식회사 삼양바이오팜 | 정제된 폴록사머 및 그의 정제방법 |
| CN107209177A (zh) * | 2015-01-29 | 2017-09-26 | 阿雷斯贸易股份有限公司 | 用于高正电荷蛋白的免疫测定法 |
| WO2020211584A1 (zh) * | 2019-04-19 | 2020-10-22 | 海正生物制药有限公司 | 组合物中泊洛沙姆188的检测方法 |
| CN111289652A (zh) * | 2020-03-16 | 2020-06-16 | 康立泰药业有限公司 | 注射剂中泊洛沙姆188的检测方法 |
| CN111830168B (zh) * | 2020-07-23 | 2022-07-22 | 吉林医药学院 | 一种泊洛沙姆的lc-hr-ms/ms定量分析方法 |
| TW202333787A (zh) | 2021-12-01 | 2023-09-01 | 日商中外製藥股份有限公司 | 含抗體製劑的調製方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004096263A2 (en) * | 2003-05-01 | 2004-11-11 | Ares Trading S.A. | Human serum albumin-free stabilized interferon liquid formulations |
| WO2004104025A1 (en) * | 2003-05-21 | 2004-12-02 | Ares Trading S.A. | Method of chromatographic analysis of a protein solution |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP4402263B2 (ja) * | 1999-06-21 | 2010-01-20 | パナソニック株式会社 | クロマトグラフィー定量測定装置 |
-
2006
- 2006-09-14 ZA ZA200800253A patent/ZA200800253B/xx unknown
- 2006-09-14 PT PT06793534T patent/PT1951395E/pt unknown
- 2006-09-14 JP JP2008530539A patent/JP4897814B2/ja active Active
- 2006-09-14 CN CN2006800330791A patent/CN101262918B/zh active Active
- 2006-09-14 AT AT06793534T patent/ATE547161T1/de active
- 2006-09-14 SI SI200631288T patent/SI1951395T1/sl unknown
- 2006-09-14 BR BRPI0615837-4A patent/BRPI0615837A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2006-09-14 DK DK06793534.6T patent/DK1951395T3/da active
- 2006-09-14 UA UAA200804714A patent/UA95461C2/ru unknown
- 2006-09-14 ES ES06793534T patent/ES2378686T3/es active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004096263A2 (en) * | 2003-05-01 | 2004-11-11 | Ares Trading S.A. | Human serum albumin-free stabilized interferon liquid formulations |
| WO2004104025A1 (en) * | 2003-05-21 | 2004-12-02 | Ares Trading S.A. | Method of chromatographic analysis of a protein solution |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014159813A1 (en) | 2013-03-13 | 2014-10-02 | Moderna Therapeutics, Inc. | Long-lived polynucleotide molecules |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| SI1951395T1 (sl) | 2012-04-30 |
| CN101262918B (zh) | 2011-03-23 |
| ATE547161T1 (de) | 2012-03-15 |
| CN101262918A (zh) | 2008-09-10 |
| DK1951395T3 (da) | 2012-04-02 |
| UA95461C2 (en) | 2011-08-10 |
| ES2378686T3 (es) | 2012-04-17 |
| BRPI0615837A2 (pt) | 2011-05-31 |
| JP2009508132A (ja) | 2009-02-26 |
| PT1951395E (pt) | 2012-03-21 |
| ZA200800253B (en) | 2009-05-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4897814B2 (ja) | ポロキサマーの定量方法 | |
| JP4317010B2 (ja) | ＩｇＧ抗体の安定な凍結乾燥医薬製剤 | |
| JP4878664B2 (ja) | 安定な液体インターフェロン処方物 | |
| JP4988562B2 (ja) | 安定化したインターフェロン液体製剤 | |
| JP2011068675A (ja) | Ｉｇｇ抗体の安定な液体医薬製剤 | |
| CN113398250B (zh) | 液体促性腺激素药物制剂及用途 | |
| EP3639845B1 (en) | Il-15 protein complex pharmaceutical composition and uses thereof | |
| JP4699991B2 (ja) | 非イオン性界面活性剤を一緒に伴うｆｓｈ及びｌｈの液体医薬組成物 | |
| WO2019020777A1 (en) | LIQUID FORMULATION OF A VEGF ANTAGONIST | |
| AU2021205538A1 (en) | Programmed cell death receptor 1 antibody formulation and use thereof | |
| EA009079B1 (ru) | Жидкие составы фактор некроза опухоли-связывающих белков | |
| US7866203B2 (en) | Method for the quantitative determination of poloxamers | |
| IL171913A (en) | Method of chromatographic analysis of a protein solution | |
| JP4949828B2 (ja) | 溶液中での成長ホルモンの安定化 | |
| JP3479082B2 (ja) | トロンボポイエチン組成物 | |
| CN116059342A (zh) | 包含重组全人源抗ifnar1单克隆抗体的液体制剂及其制备方法 | |
| CN117942300A (zh) | 包含抗il-17抗体的液体制剂 | |
| WO2023126411A1 (en) | Vedolizumab formulation |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20090911 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110517 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20110518 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110701 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20111122 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20111222 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4897814 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150106 Year of fee payment: 3 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |