JP4417936B2 - Discrimination apparatus and method of urinary red blood cells - Google Patents

Discrimination apparatus and method of urinary red blood cells Download PDF

Info

Publication number
JP4417936B2
JP4417936B2 JP2006209385A JP2006209385A JP4417936B2 JP 4417936 B2 JP4417936 B2 JP 4417936B2 JP 2006209385 A JP2006209385 A JP 2006209385A JP 2006209385 A JP2006209385 A JP 2006209385A JP 4417936 B2 JP4417936 B2 JP 4417936B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
red blood
erythrocytes
blood cells
value
urine
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
JP2006209385A
Other languages
Japanese (ja)
Other versions
JP2006330001A (en
Inventor
正和 福田
一之 金井
Original Assignee
シスメックス株式会社
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by シスメックス株式会社 filed Critical シスメックス株式会社
Priority to JP2006209385A priority Critical patent/JP4417936B2/en
Publication of JP2006330001A publication Critical patent/JP2006330001A/en
Application granted granted Critical
Publication of JP4417936B2 publication Critical patent/JP4417936B2/en
Application status is Expired - Lifetime legal-status Critical
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Description

この発明は、尿中に含まれる粒子の分析をする装置および方法に関し、さらに詳しくは、尿中に含まれる赤血球の由来および種類を鑑別する装置および方法に関する。 This invention relates to an apparatus and method for the analysis of the particles contained in urine, and more particularly, to an apparatus and method for differentiating origin and type of erythrocytes contained in the urine.

尿中に赤血球が混じる血尿の原因としては2通りある。 There are two ways as the cause of the red blood cells is mixed hematuria in the urine. それは腎糸球体由来の血尿は腎炎などの内科的疾患によって起こり、非糸球体由来の血尿は膀胱癌、腎癌、尿路結石などの泌尿器科的疾患によって起こる。 It hematuria from renal glomeruli is caused by medical diseases such as nephritis, hematuria from non-glomerular is caused by urological diseases such as bladder cancer, renal cancer, urinary tract stones. 血尿の場合にはその原因を追求しなければならない。 In the case of hematuria must seek the cause. 尿中赤血球を腎糸球体由来(内科的疾患)か非糸球体由来(泌尿器科疾患)かを鑑別する方法として、(a)顕微鏡を用いて赤血球の形態の違いを鑑別するという方法と(b)自動血球計数装置を用いて赤血球の大きさの違いにより鑑別する方法が従来から知られている。 As a method of distinguishing whether the urine erythrocytes from glomerular (medical disorder) or from non-glomerular (urological disease), and a method of differentiating the difference in the form of red blood cells using (a) a microscope (b ) method of distinguishing the difference in size of the erythrocytes by using an automatic blood cell counter has been known.

しかし、(a)の方法には、検査のための作業が煩雑であり時間がかかるという問題や、人間の目視判定に基づくため信頼性を維持することが難しく熟練をようするなどの問題がある。 However, the method (a), work and a problem that it takes is time complicated, there are problems such as requiring a difficult skill to maintain reliability because it is based on human visual judgment for inspection . (b)の方法には、尿試料の電気伝導度を一定にして測定する必要があるため予め遠心分離などの前処理を必要とする問題や、細菌や結晶成分などの赤血球以外のものを赤血球と誤検出し判定精度を低下させるという問題がある。 The method (b), erythrocyte problems and which require pre-treatment such as pre-centrifugation it is necessary to measure in a constant electric conductivity of the urine sample, the ones other than the red blood cells such as bacteria and crystalline component there is a problem of lowering the door erroneous detection and determination accuracy.

上記の課題を解決するために、(c)フローサイトメータから得られる粒子の散乱光や蛍光強度信号の光信号を処理することにより、赤血球、白血球、上皮細胞、円柱および細菌を弁別して、弁別された赤血球の粒度分布の偏り状態に基づいて尿中の赤血球を鑑別する装置が新たに知られている。 In order to solve the above problems, by processing the optical signals of scattered light and the fluorescence intensity signal of the particles obtained from the (c) flow cytometer, and discriminating erythrocytes, leukocytes, epithelial cells, cylinders and bacteria, discrimination It has been based on the bias state of the particle size distribution of red blood cells differentiating erythrocytes in urine devices are known in the new. (特許文献1) (Patent Document 1)
これは、糸球体由来の赤血球が非糸球体由来のものに比べて一般的に粒度が小さいという特徴を利用し、粒度分布が粒度の小さい方に偏ったものを糸球体由来型、大きい方に偏ったものを非糸球体由来型と分類する装置である。 This utilizes a characteristic that red blood cells from glomeruli generally particle size is small compared to those from non-glomerular, what particle size distribution is biased to the smaller particle size glomerular origin type, it large a device for classifying a Hiito spheres derived type what biased.

具体的には赤血球粒度分布において、粒度下限値La,上限値をLz,設定値をL1とL2(La<L1<L2<Lz)とするとき、LaとLzとの間に属する赤血球数Razと、LaとL2との間に属する赤血球数Ra2と、L1とLzとの間に属する赤血球数R1zを算出する。 In Specifically, red blood cell particle distribution, particle size lower limit La, Lz the upper limit, when the set value L1 and L2 and the (La <L1 <L2 <Lz), and red blood cell count Raz belonging between La and Lz , a red blood cell number Ra2 belonging between La and L2, calculating the number of red blood cells R1z belonging between L1 and Lz. そしてRa2/Razが第1所定値より以上であれば赤血球を糸球体由来型と判定し、Ra2/Razが第2所定値以上であれば赤血球を非糸球体由来型と判定する。 And Ra2 / Raz is a red blood if more than the first predetermined value is determined as glomerular origin type, Ra2 / Raz determines erythrocytes and Hiito spheres derived type if the second predetermined value or more. また、いずれでもない場合には両者の混合型と判定し、いずれも満たす場合は非糸球体由来型と判定するとされている。 Further, it is determined that mixed both if not either, if both satisfied is that determined Hiito spheres derived type.

特開平8−240520号公報 JP-8-240520 discloses

従来法(c)の判定は、非糸球体由来の赤血球粒度分布はピークが大きなサイズの方にあり、糸球体由来の赤血球粒度分布はピークが小さいサイズの方にあるが、両者間にはサイズの重なる部分(オーバーラップ)が存在することより考案された方法である。 The determination of the conventional method (c), red blood cell particle distribution from a non glomerulus located towards the peak of large size, but red blood cell particle distribution from glomerulus is towards the size peak is small, between the two sizes overlapped portion (overlapped) are methods devised from the presence of. 即ち、サイズの重なる部分を含めたある大きさ以上の赤血球の比率により非糸球体由来赤血球を捉え、サイズの重なる部分を含めたある大きさ以下の赤血球の比率により糸球体由来赤血球を捉えて、赤血球の由来を判定する方法である。 That is, capturing a non-glomerular origin erythrocytes by the ratio of a certain size or more red blood cells, including the overlapping portion sizes, it captures the glomerular origin erythrocytes by the ratio of a certain size or less of red blood cells, including the overlapping portions of the size, a method for determining the origin of erythrocytes.

しかし、この判定を実際に検査室で用いても鏡検の観察等とあまり合致しないことがしばしば見受けられた。 However, this determination poorly match the observation or the like of the microscopic examination be used actually in the inspection chamber is often seen. その原因としては、この判定が非糸球体由来赤血球は血液中と同じような形態を保持していると仮定し、赤血球の信号が小さなサイズであれば糸球体由来赤血球であると判定していた。 As the reason, this determination is non glomerular origin erythrocytes assume that holds a similar form as in the blood, were determined signal of red blood cells is glomerular origin erythrocytes if small size . しかし、赤血球は尿中でダメージを受けて信号のサイズが小さくなってしまうことがある。 However, the red blood cells sometimes becomes smaller the size of the signal in response to the damage in the urine. このダメージと酸性尿や低張尿などでは、膀胱内滞留中や利尿後尿試料中で起こる赤血球のダメージを指す。 This etc. The damage and aciduria and hypotonic urine, refers to damage of erythrocytes occurring in the bladder retention or diuretic after urine samples during. 尚、糸球体由来型とは変形赤血球の比率が多い尿を指し、変形赤血球とは腎臓の糸球体を通過することによって、特徴的な形態となった赤血球を指し、酸性尿や低張尿などでダメージを受けた赤血球とは形態が異なる。 Note that the glomerular origin type refers to urine ratio of deformation erythrocytes is large, by passing through the glomerulus of the kidney and deformation erythrocytes refers to red blood cells become distinctive forms, acidic urine and hypotonic urine, etc. in form it is different from the red blood cells were damaged. 即ち、従来法で鑑別できるのは赤血球が尿中でダメージを受けていない条件下に限られてしまう。 In other words, it can be differentiated by the conventional method is limited to the conditions in which red blood cells are not damaged in the urine.

この発明は、酸性尿や低張尿でも尿中の赤血球の由来および種類を精度よく判定できる装置および方法を提供するものである。 The present invention provides an apparatus and method can accurately determine the origin and type of erythrocytes in urine in acidic urine and hypotonic urine.

この発明は尿試料をシース液に包んで尿試料流を形成するシースフローセルと、尿試料流に光を照射する光照射手段と、尿試料流中の各粒子が放出する光信号を検出する光検出手段と、検出した光信号に基づいて尿試料流中の粒子から赤血球を同定する同定手段と、同定した赤血球の粒度分布図を作成する粒度分布作成手段と、粒度分布において、小さいほうからの累積赤血球数が総血球数の60〜90パーセントのうちの所定値となるときの赤血球の大きさの値と、赤血球の大きさの設定値とを比較し、赤血球の由来を、前記赤血球の大きさの値が設定値より小さい場合には糸球体由来、設定値以上の場合には非糸球体由来であると判定する判定手段と、判定結果を出力する出力手段を備えてなる尿中赤血球の鑑別装置およびその方法によ Light this invention for detecting a sheath flow cell for forming a urine specimen flow wrapped urine sample to the sheath fluid, a light irradiating means for irradiating light to the urine specimen flow, optical signals each particle of the urine sample stream releases and detecting means, and identifying means for identifying erythrocytes from the particles in the urine specimen flow in on the basis of the optical signal detected, and particle size distribution preparing means for preparing a particle size distribution diagram of the identified erythrocytes in particle size distribution, from smaller and the magnitude of the value of red blood cells when the accumulated red blood cell count becomes the predetermined value of 60-90% of the total number of blood cells, comparing the magnitude of the set value of the red blood cells, the origin of erythrocytes, the size of the red blood cells is derived from glomerulus when the value is smaller than the set value, a determination unit that the origin Hiito spheres when the set value or more, the determination result becomes an output means for outputting the urinary erythrocytes to discrimination apparatus and method thereof て、前記の課題の解決を提供するものである。 Te and provides a solution to the problems.

この発明は、酸性尿や低張尿などで赤血球がダメージを受けることがあっても尿中の赤血球の形態を監視し、赤血球の由来および種類を精度よく判定することができる。 This invention can be red blood cells, etc. aciduria and hypotonic urine even if the damage is monitored in the form of red blood cells in the urine, to accurately determine the origin and type of erythrocytes.

以下、図面に示す実施例に基づいてこの発明を詳述する。 It will hereinafter be described in detail by the present invention with reference to the embodiments shown in the drawings. これによってこの発明が限定されるものではない。 This is not intended that the present invention is not limited.

この発明における尿試料とは、例えば、原尿あるいは尿を希釈液で希釈したのち蛍光染料を加えて染色したものである。 The urine sample in the present invention, for example, is obtained by staining original urine or urine by adding a fluorescent dye After dilution with diluent.

また、尿試料流を形成するシースフローセルとは、尿試料をシース液で包んで流すことにより流体力学効果によって細い試料流を形成させることのできるフローセルであり、これには、従来公知のものを用いることができる。 Further, the sheath flow cell for forming a urine specimen flow, a flow cell capable of forming a narrow specimen flow by hydrodynamic effect by flowing wrapped urine sample with a sheath liquid, this, the conventionally known ones it can be used.

尿試料流に光を照射する光照射手段とは、尿試料流に連続的に光を照射する手段であり、これには、例えば、レーザ、ハロゲンランプ又はタングステンランプのような光源をもちいることができる。 The light irradiating means for irradiating light to the urine specimen flow, a means for applying a continuous light to the urine specimen flow, and include, for example, using laser, a light source such as a halogen lamp or tungsten lamp can.

尿試料流の各粒子とは、尿に含まれる有形成分、つまり、赤血球、白血球、上皮細胞、細菌、酵母様真菌および精子などである。 The respective particles of the urine specimen flow, solid components contained in urine, i.e., is red blood cells, white blood cells, epithelial cells, bacteria, yeast-like fungi and sperms. 粒子が放出する光の強度を検出する光検出手段には、例えば、散乱光の強度を検出する光検出手段として、フォトダイオードやフォトトランジスタを、蛍光の強度を検出する光検出手段として、フォトマルチプライヤを用いることができる。 The light detecting means for detecting the intensity of light particles emitted, for example, as a light detecting means for detecting the intensity of the scattered light, a photodiode or a phototransistor, a light detection means for detecting the intensity of fluorescence, photo- it is possible to use pliers.

また、尿試料流中の粒子から赤血球を同定する同定手段とは、例えば、各粒子から検出された散乱光強度と蛍光強度をパラメータとして2次元スキャッタグラム(分布図)を作成し、所定の分布領域内に分布する粒子を赤血球として判定するものである。 Further, the identification means for identifying erythrocytes from the particles in the urine specimen flow in, for example, to create a two-dimensional scattergram (distribution diagram) of the scattered light intensity and a fluorescent intensity detected from each particle as a parameter, a predetermined distribution it is to determine the particles distributed in the region as erythrocytes.

つまり、尿試料中の粒子は、その散乱光強度と蛍光強度について、表1と図3に示すような特徴を有することが既知であるので、スキャッタグラム上において、散乱光強度40〜140ch、蛍光20〜30chの領域に含まれるものは赤血球であると同定できる。 That is, the particles in the urine sample, for the scattered light intensity and fluorescence intensity, because it is known to have characteristics as shown in Table 1 and Figure 3, on the scattergram, the scattered light intensity 40~140Ch, fluorescent included in the area of ​​20~30ch can be identified as a red blood cell. このchは散乱光強度の相対度数を表わし、100chが赤血球サイズに換算すると約5μmに相当した。 The ch represents the relative frequency of the scattered light intensity, 100 ch is equivalent to about 5μm in terms of red blood cells size. なお、赤血球の同定方法は、これに限定されるものではない。 Incidentally, methods for identifying erythrocytes is not limited thereto.

同定した赤血球の光信号強度に基づいて赤血球の粒度分布を作成する粒度分布作成手段とは、一般に散乱光強度、特に前方散乱光度が粒子の断面積(粒径)に対応する性質を有するため、散乱光強度をパラメータとするヒストグラムを粒度分布図として作成するようにしたものである。 The particle size distribution preparing means for preparing a particle size distribution of red blood cells based on the optical signal intensity of the identified erythrocytes because generally scattered light intensity, especially a forward scattered light intensity has a property corresponding to the cross-sectional area of ​​the particle (particle size), the histogram of the scattered light intensity as a parameter is obtained so as to create a particle size distribution diagram. 側方散乱光強度の場合、赤血球の形状あるいは表面状態の影響を受けやすいが、前方散乱光の代りに用いることも可能である。 For side-scattered light intensity, susceptible to shape or surface state of the red cells, it is also possible to use instead of the forward scattered light.

粒度分布の小さいほうからの累積赤血球数が総赤血球数の可過半数である所定値となる赤血球の大きさの値に基づいて赤血球の由来を判定するとは、赤血球粒度分布の中央値(メディイアン)より大きい方に所定の値に設定された粒度分布位置の赤血球の大きさの値に基づいて、尿中の赤血球の発生源が糸球体由来か非糸球体由来かを判定することである。 And determining the origin of erythrocytes based on the magnitude of the value of the red blood cells accumulated red blood cell count reaches a predetermined value which is variable majority of the total number of red blood cells from the smaller particle size distribution, median erythrocyte size distribution (Medi Ian) based on the magnitude of the value of the red blood cells of the set size distribution position to a predetermined value toward larger, it is that the source of red blood cells in urine to determine from glomerular origin or non-glomerular.

この判定は、尿中の赤血球のダメージは膀胱滞留などで起こるため、赤血球によってダメージを受ける条件は異なり、赤血球の膜抵抗性自体も赤血球によって異なるため、赤血球によってはもとの形態もしくはもとに近い形態を保持しているものが残っていることに注目したものである。 This determination is because the damage of red blood cells in the urine occurs in such bladder retention, conditions damaged by red blood cells is different, because it depends on the film resistance itself erythrocytes red blood cells, to the original form or original by erythrocytes it is obtained by noted that there are still those that retain a close form. つまり、赤血球粒度分布の中央値(メディアン)より大きい方に設定された所定のところの赤血球の大きさの値をみることにより、形態を保持している赤血球が残っていないのかを監視する。 In other words, by observing the value of red blood cell particle distribution median (median) set towards larger magnitude of a given place of red blood cells, to monitor whether there is no remaining erythrocytes holding the forms. これは、この赤血球の大きさの値が所定値より大きければ、形態を保持している赤血球が残ってるので非糸球体由来型であることを判定する。 This determines that the value of the size of the red blood cells is greater than a predetermined value, a Hiito spherical derived type because the remaining red blood cells that hold the form. 逆にこの赤血球の大きさが小さければ、形態を保持している赤血球が残っていないので糸球体由来型であることを判定するものである。 Smaller this size of red blood cells to the contrary, it is intended to determine that it is a glomerular origin type with no remaining erythrocytes holding the forms. またこの赤血球の大きさの設定値を2つ設け、その間であればどちらの型とも判定されない混合型と判定することもできる。 Also the size of the set value of the erythrocyte two provided, it is also possible to determine that mixed is not determined with either type if therebetween.

具体的には、所定値A%(50<A<100)を設定し、赤血球粒度分布の小さいほうからの累積赤血球数が総赤血球数のA%となる個所を演算して、その位置での赤血球の大きさXchを演算する。 Specifically, to set the predetermined value A% (50 <A <100), and calculates the point where the cumulative number of red blood cells from the smaller erythrocytes particle size distribution is A% of the total number of red blood cells, at the position computing the erythrocyte size Xch. そして赤血球の大きさの設定値Qchを設けて、X<Qであれば糸球体由来型と判定し、X≧Qであれば非糸球体由来型と判定して、判定結果を表示する。 And by providing the set value Qch the size of red blood cells, if X <Q determines that glomerular origin type, it is determined that the non-glomerular origin type if X ≧ Q, displays the determination result. さらに第1設定値Q1chと第2設定値Q2chを設定し(Q1<Q2)、X<Q1であれば糸球体由来型と推定し、X≧Q2であれば非糸球体由来型と推定し、Q1≦X<Q2であれば糸球体由来と非糸球体由来のどちらにも推定されない混合型と判定することができる。 Furthermore, the first set the setpoint Q1ch a second set value Q2ch (Q1 <Q2), if X <Q1 estimates that glomerular origin type, estimates that non-glomerular origin type if X ≧ Q2, if Q1 ≦ X <Q2 can be determined that mixed that neither the neither be estimated from glomerular origin and Hiito spheres.

[赤血球鑑別装置の構成] Configuration of red blood cells validator]
図1はこの発明の尿中赤血球鑑別装置であるフローサイトメータの光学系の構成を示す構成図である。 Figure 1 is a block diagram showing a configuration of an optical system of a flow cytometer is a urine erythrocytes validator of the present invention. 図1において、シースフローセル1は、予め蛍光染色処理された尿試料をサンプルノズル2よりシース液に包んで尿試料流を形成する。 In Figure 1, a sheath flow cell 1 forms a urine specimen flow wrapped urine sample pre fluorescent staining treatment in the sheath liquid from the sample nozzle 2. アルゴンレーザ光3が尿試料流の粒子4を照射する。 Argon laser beam 3 irradiates the particles 4 of the urine specimen flow. 尿試料流を直接透過する光はビームストッパ5で遮断され、粒子4が放出する前方散乱光および前方蛍光はコレクターレンズ6で集光され、前方散乱光はダイクロイックフィルター7で反射されてフォトダイオード8により検出される。 Light transmitted through the urine specimen flow directly blocked by the beam stopper 5, the forward scattered light and the forward fluorescent particles 4 release is condensed by the collector lens 6, a photodiode 8 forward scattered light is reflected by the dichroic filter 7 It is detected by. 一方、前方蛍光はダイクロイックフィルター7を通過してフォトマル9により検出される。 On the other hand, the forward fluorescence is detected by the photomultiplier 9 passes through the dichroic filter 7. フォトダイオード8およびフォトマル9の検出信号はそれぞれ信号処理装置10に入力される。 Detection signal from the photodiode 8 and the photomultiplier 9 are input to the signal processor 10, respectively.

このような構成による基本動作を図2のフローチャートを用いて説明する。 The basic operation of this configuration will be described with reference to the flowchart of FIG. まず尿を希釈液で希釈したのち染色液を加えて作成した尿試料をサンプルノズル2より、シース液と共にシースフローセル1に供給し尿試料流を形成する(ステップ1)。 First urine samples prepared by adding a staining solution After dilution with diluent urine from sample nozzle 2 to form a feed raw sewage sample flow in the sheath flow cell 1 together with a sheath liquid (Step 1). それと同時にアルゴンレーザ光3を尿試料流に照射し、各粒子4が発する前方散乱光と前方蛍光をそれぞれフォトダイオード8とフォトマルチプライヤ9で検出し、検出した前方散乱光強度と前方蛍光強度を信号処理装置10に格納する(ステップ2)。 At the same irradiated with argon laser beam 3 to the urine specimen flow simultaneously, the forward scattered light and the forward fluorescent each particle 4 emitted detected by the photodiode 8 and the photomultiplier 9 respectively, the forward scattered light intensity and the forward fluorescent intensity detected stored in the signal processing unit 10 (step 2).

次に、信号処理装置10は、前方蛍光強度と前方散乱光強度とをパラメータとする2次元スキャッタグラムを作成して表示する(ステップ3)。 Then, the signal processing apparatus 10 creates and displays a two-dimensional scattergram using a forward fluorescent intensity and the forward scattered light intensity as a parameter (Step 3). 図3は本装置の「蛍光一散乱光」強度の2次元分布図(スキャッタグラム)の例を示す。 Figure 3 shows an example of a two-dimensional distribution diagram of "fluorescent one scattered light" intensities of the apparatus (scattergram). FSCは前方散乱光強度で細胞の断面積を、FLは蛍光の染色強度を表わす。 FSC is a cross-sectional area of ​​the cell in the forward scattered light intensity, FL represents a stained intensity of the fluorescence. 核染色ではDNA、RNAの量を反映する。 In the nuclear staining to reflect DNA, the amount of RNA. 染色は核染色のみでは結晶と核を持たない物と赤血球を区別できないので膜染色も同時に行っている。 Staining is the only nuclear staining is doing membrane staining at the same time because it can not distinguish between those and the red blood cells that do not have a crystal and nuclear. このようにして粒子の大きさと蛍光強度より赤血球、白血球、上皮細胞、細菌、真菌、円柱、結晶成分を明確に分けることが可能であり、各々の数を測定できる(ステップ4)。 In this way, the red blood cells than the size and fluorescence intensity of the particles, leukocytes, epithelial cells, bacteria, it is possible to separate clearly the fungus, columnar, crystal components, it is possible to measure the number of each (Step 4).

次に同定された赤血球の粒度分布図、ここでは前方散乱光強度をパラメータとするヒストグラムが作成される(ステップ5)。 Then identified the particle size distribution diagram of erythrocytes, histogram of the forward scattered light intensity and parameters are created here (Step 5). 前方散乱光強度について、赤血球の大きさの値に対する第1設定値Q1ch、第2設定値Q2chおよび赤血球の大きさの幅に対する第3設定値Wchを設定する(ステップ6)。 For the forward scattered light intensity, sets first set value for the magnitude of the value of the red blood cells Q1ch, the third set value Wch to the size of the width of the second set value Q2ch and erythrocytes (Step 6). 赤血球粒度分布の大きさが小さい方からの赤血球累積数が赤血球総数のA%(50<A≦100)となるところの赤血球の大きさXchと、粒度分布の中央に赤血球総数のB%となる領域の赤血球の大きさの幅Ychとが、それぞれ算出される(ステップ7)。 Erythrocyte cumulative number becomes the size Xch of A% erythrocytes (50 <A ≦ 100) and comprising at the erythrocyte total, and B% erythrocyte total number in the center of the particle size distribution of from the side size of the red blood cell particle distribution is small the width Ych the size of red blood cells in the region are respectively calculated (step 7).

次に設定値Q1ch、Q2ch、Wchが設定されるとLA<Q1の場合には赤血球は糸球体由来型、Q1≦X<Q2の場合には赤血球は非糸球体由来と糸球体由来の混合型、Q2≦XかつY<Wの場合には赤血球は非糸球体由来型、Q2≦XかつW<Yの場合には赤血球は非糸球体由来と糸球体由来の混合型、と判定され、判定結果が表示される(ステップ8)。 Then set value Q1ch, Q2ch, when Wch is set LA <Q1 erythrocytes glomerular origin type in the case of, Q1 ≦ X <mixed erythrocytes from Hiito sphere from the glomeruli in the case of Q2 , in the case of Q2 ≦ X and Y <W erythrocytes Hiito spheres derived type, Q2 ≦ X and W <erythrocytes mixed from Hiito sphere from the glomeruli in the case of Y, it is determined that the determination result is displayed (step 8).

鑑別の試料としては、病院の検査室にて糸球体由来型、非糸球体由来型および混合型の当日尿66検体を上記の装置にて測定した。 As a sample of the discrimination, glomerular origin type in hospital laboratories, a day urine 66 specimens of non-glomerular origin type and mixed type were measured by the aforementioned device. 鑑別結果の対照としては、レーザ顕微鏡を用い、変形赤血球が70%以上含まれている尿を糸球体由来型、変形赤血球が30%以上70%未満含まれている尿を混合型、変形赤血球が30%未満しか含まれていない尿を非糸球体由来型と分類した。 As a control the discrimination results, a laser microscope, urine glomerular origin type deformation erythrocyte is contained 70% or more, urine mixed deformation erythrocytes contain less than 70% to 30% deformation erythrocytes the urine does not contain less than 30% were classified as Hiito sphere-derived type.

まず、従来法にてこの試料の赤血球鑑別を行なってみた。 First of all, I tried to perform the red blood cell differentiation of this sample by conventional methods. 設定条件としては、実施例にあげられている設定値である、L1を84ch、L2を126chとして、Ra2/Raz≧0.8以上であれば糸球体由来型、Ra1/Raz≧0.8以上であれば非糸球体由来型と判定し、いずれでもない場合は混合型、いずれも満たす場合は非糸球体由来型と判定するようにした結果を表2に示す。 The setting condition is a setting value that is mentioned in the examples, as 126ch and 84Ch, L2 and L1, glomerular origin type as long Ra2 / Raz ≧ 0.8 or more, Ra1 / Raz ≧ 0.8 or higher determines if it a non-glomerular origin type is, if not either mixed, if both satisfying shows the results so as to determine the Hiito spheres derived type in Table 2. 鏡検による非糸球体由来型と判定された34検体のうち、14検体を糸球体由来型と従来法では誤判定してしまう。 Among the determined 34 analyte and non-glomerular origin type by microscopy, thus the 14 specimens were misjudgment in glomerular origin type and the conventional method.

実施例1 Example 1
粒度分布の中心より大きい方に設定された所定の粒度分布値が、大きさの保持された非糸球体由来赤血球の存在を反映するように、赤血球粒度分布の大きさが小さい方からの赤血球累積数が赤血球総数A%となる位置とする。 Predetermined particle size distribution value is set to greater than the center of the particle size distribution, to reflect the presence of non-glomerular origin erythrocytes held size, erythrocytes accumulated from the side size of the red blood cell particle distribution is small the number is the position where the red blood cell total a%. Aの値については、Aが50%に近い値では粒度の中心と同様な値となりダメージを受けた赤血球の影響を受けやすく、100%に近い値では極少数の非糸球体由来赤血球の影響を受けるため精度が出にくく、Aは60〜90%が好ましい。 For values ​​of A, A is susceptible to red blood cells damaged becomes similar values ​​and the center of the particle size is close to 50%, a very small number of non-glomerular origin erythrocytes influences the value close to 100% hardly out precision for receiving, A is preferably 60 to 90%. Aの値を70%と設定して、その粒度分布値の赤血球の大きさXchを表わしたのが図4である。 Set 70% the value of A, the expressed red blood cells in size Xch of the particle size distribution value is 4.

糸球体由来型と判定する第1設定値Q1を80chとし、非糸球体由来型と判定する第2設定値Q2を100chとして、その間を混合型と判定した結果が表3である。 The first set value Q1 is determined that glomerular origin type and 80 ch, the second set value Q2 is determined that the non-glomerular origin type as 100 ch, the result it is determined that mixed therebetween a table 3. 従来法では非糸球体由来型34検体のうち14検体をも糸球体由来型と誤判定していたが、本判定では糸球体由来型と誤判定したものは4検体と大幅な改善がみられた。 In the conventional method it had been erroneously determined glomerular origin type also 14 specimens of Hiito sphere from type 34 specimens, which in this determination was erroneous determination glomerular origin type 4 specimen and a significant improvement is observed It was.

図5は本装置の分析による非糸球体由来型の典型的な粒度分布を示す。 Figure 5 shows a typical particle size distribution of non-glomerular origin type of analysis by the apparatus. この検体は非糸球体由来赤血球が尿中でダメージを受けておらず、その分布の中心が大きなサイズの方にあり、分布幅も狭い粒度分布となる。 The sample is not damaged by Hiito spheres derived red blood cells in the urine, there center of the distribution towards the large size, the distribution width becomes narrow particle size distribution. このような検体は粒度分布が大きいサイズに偏っているので従来法でRa2/Raz=0.07、Ra1/Raz=0.99で非糸球体由来型と正しく判定される。 Such a specimen is biased in the size particle size distribution is large in the conventional method Ra2 / Raz = 0.07, is correctly determined that the non-glomerular origin type in Ra1 / Raz = 0.99. 本法でもX=148chで非糸球体由来型と正しく判定される。 Correctly it is determined that the non-glomerular origin type with X = 148ch in this method.

図6は本装置の分析による糸球体由来型の典型的な粒度分布を示す。 Figure 6 shows a typical particle size distribution of glomerular origin type of analysis by the apparatus. この分布の中心が小さいサイズの方にあり、分布幅が広い粒度分布となる。 The center of the distribution is in it is of small size, distribution width becomes broad particle size distribution. このような検体は粒度分布が小さいサイズに偏っているので従来法でRa2/Raz=0.97、Ra1/Raz=0.14で糸球体由来型と正しく判定される。 Such a specimen is biased in the size particle size distribution is small in the conventional method Ra2 / Raz = 0.97, is correctly determined glomerular origin type in Ra1 / Raz = 0.14. 本法でもX=61chで糸球体由来型と正しく判定される。 Correctly it is determined glomerular origin type with X = 61ch in this method.

図7は本装置の分析による尿中でダメージを受けた非糸球体由来型の粒度分布の例を示す。 Figure 7 shows an example of the particle size distribution of non-glomerular origin type damaged in urine Analysis of the apparatus. この検体は粒度分布分布は全体的に小さいサイズの方にシフトした例である。 This sample is an example of shifted towards the smaller overall size particle size distribution distribution. このような検体は粒度分布は小さいサイズに偏っているため従来法ではRa2/Raz=0.92、Ra1/Raz=0.70で糸球体由来型と誤判定してしまう。 Such analytes particle size distribution is small in the conventional method because the image is too size Ra2 / Raz = 0.92, erroneously determined glomerular origin type in Ra1 / Raz = 0.70. しかしある程度形態を保持した赤血球が残っているので本法ではX=113chで非糸球体由来型と正しく判定される。 However correctly determined that the non-glomerular origin type with X = 113ch with this method because the remaining red blood cells retain some form.

図8は本装置の分析による尿中でダメージを受けた非糸球体由来型の別の粒度分布例を示す。 Figure 8 shows an alternative particle distribution examples of non-glomerular origin type damaged in urine Analysis of the apparatus. この検体はダメージを大きく受けた度合いが赤血球によって異なり2つのピークができた例である。 This sample is an example of the degree in which heavily damaged could have two peaks depends erythrocytes. 従来法ではこのような検体は粒度分布が小さいサイズの方に偏っているためRa2/Raz=0.89、Ra1/Raz=0.44と糸球体由来型赤血球と判定してしまう。 Such analytes in the conventional method would determine that Ra2 / Raz = 0.89, Ra1 / Raz = 0.44 and glomerular origin erythrocytes for biased towards the size particle size distribution is small. しかしある程度形態を保持した赤血球が残っているので本法ではX=103chで糸球体由来型と正しく判定される。 However correctly determined that the non-glomerular origin type with X = 103ch with this method because the remaining red blood cells retain some form.

実施例2 Example 2
赤血球の種類を判定するため、赤血球の粒度分布の幅情報として、粒度分布の中央に赤血球累積数が総赤血球数のB%となる領域を設定し、その領域の赤血球の大きさの分布幅Yを判定に用いた。 To determine the type of erythrocytes, the width information of the particle size distribution of red blood cells, and sets an erythrocyte cumulative number is B% of the total number of red blood cells in the center of the particle size distribution, the size of the distribution width Y of the erythrocyte in the region It was used for the determination. Bの値については、粒度分布全般が反映されるように、50〜90%が好ましい。 The value of B, as the particle size distribution in general is reflected, preferably 50-90%. Bの値を60%と設定して、その粒度分布値の赤血球の分布幅Ychを表わしたのが図10である。 The value of B was set to 60%, it is 10 to representing a distribution width Ych erythrocyte particle size distribution values.

赤血球の種類を判定する設定値Wを40chとして、Y≧40を多彩型、Y<40を単一型と判定した結果が表4である。 The set value W determines the type of erythrocytes as 40 ch, the Y ≧ 40 versatile type, a result of determining the Y <40 and a single type is a table 4. この判定によって、赤血球が糸球体由来もしくは非糸球体由来かの単一型かどちらの由来とも判定されない混合型である多彩型かを判定することができる。 This determination, erythrocytes can determine various types are mixed is not determined with from either glomerular origin or non-glomerular origin or of a single type. 非糸球体由来型の検体で多彩型と判定されているのは、非糸球体由来赤血球であるが、ダメージを受けて形態を保持していない状態にあることを示す。 What it is determined that various types in the sample of non-glomerular origin type is a non-glomerular origin erythrocytes, indicating that the state does not hold a form damaged.

実施例3 Example 3
さらにこの粒度分布の幅Yと大きさXを組み合わせることにより、赤血球の形態を反映した情報により由来および種類をより精度良く判定することができる。 By further combining the width Y and the size X of this particle size distribution, it is possible to more accurately determine the origin and type by information reflecting the morphology of red blood cells. この赤血球の分布幅Ychと実施例1の赤血球の大きさXchとをプロットしたのが図10である。 The plot of the size Xch of the distribution width Ych as in Example 1 erythrocytes red blood cells is 10. 具体的には、赤血球の大きさXchがX≧100chである非糸球体由来型の領域を、赤血球の幅Ychにて、Y<50chであれば単一型である非糸球体由来型、これはダメージをあまり受けず形態が保持されている非糸球体由来赤血球の単一な型と判定し、Y≧50chであれば多彩型である混合型、ダメージをうけた赤血球が含まれる混合型と判定することができる。 Specifically, a region of non-glomerular origin type with a size Xch is X ≧ 100 ch erythrocytes, at red blood cell width Ych, Y <non glomerular origin type is a single type if 50CH, which determining the single type of Hiito spheres from erythrocytes so not undergo form damage is maintained, if Y ≧ 50CH a versatile type mixed, and mixed that contains red blood cells damaged it can be determined. 尚、図8の検体は赤血球の幅Yが68chのため、多彩型である混合型と判定される。 Incidentally, the sample of FIG. 8 is the width Y of the red blood cells for 68Ch, it is determined that mixed a variety type. このようにして判定した結果を表5に示す。 Shown this way the result of the determination in Table 5.

臨床的な運用としては、X≧Q2かつY<Wとなる領域に現れる検体は形態を保持した非糸球体由来型と判定し、それ以外の領域に現れる検体を形態の保持されていない検体として、レーザ顕微鏡で赤血球の形態を調べるようにすれば、効率的かつ精密に検査を行うことができる。 The clinical management, specimens appearing in the region where the X ≧ Q2 and Y <W is determined to non-glomerular origin type holding the form, a specimen appearing in the other regions as a specimen which is not held in the form if to examine the morphology of red blood cells with a laser microscope, efficient and precise inspection can be performed.

実施例4 Example 4
また、この分布幅Yと赤血球の由来との関係に注目してみると、この分布幅Yの値だけでも赤血球の由来を判定することができる。 Also, when attention is paid to the relationship between the origin of the distribution width Y and the red blood cells, it is possible to determine the origin of erythrocytes alone value of the distribution width Y. 単一型と判定された検体をさらに調べてみると非糸球体由来型は糸球体由来型よりもこの分布幅Yの値が小さい。 If we further investigated single type as determined analyte Hiito spheres derived type value of the distribution width Y is smaller than the glomerular origin type. 具体的には赤血球の由来を判定するための設定値として、第1設定値W1を40ch、第2設定値W2を32chとして、Y≧W1を混合型、W1>Y≧W2を糸球体由来型、W2>Yを非糸球体由来型と分類することができる。 As a set value for specifically determining the origin of erythrocytes, the first set value W1 40 ch, the second set value W2 as 32ch, mixed with Y ≧ W1, W1> glomerular origin type and Y ≧ W2 , can be classified W2> Y and Hiito spheres derived type. その結果を表わしたものが表6である。 That represents the result is a table 6.

尚、鏡検での判定基準については現状統一されていなく、由来型を判定する変形赤血球の比率もまちまちである。 Note that the criterion for microscopic examination not be currently unified, the ratio of deformed erythrocytes determines from type also vary. よって、この判定方法も目的とする感度に合わせ判定値を変えて運用してゆくことができる。 Therefore, this determination method can also slide into operation by changing the decision value on the sensitivity of interest.

実施例の装置の光学系を示す構成説明図。 Configuration explanatory view showing an optical system of the apparatus of the embodiment. 実施例の装置の基本動作を示すフローチャート。 Flowchart showing the basic operation of the apparatus of the embodiment. 実施例の装置の「蛍光―散乱光」強度のスキャッタグラムの例。 Examples of scattergrams - "scattered light fluorescence" intensity of the device of Example. 実施例の判定パラメータである赤血球の大きさXの説明図。 Illustration of the size X of erythrocytes is determined parameter embodiment. 実施例の装置による赤血球粒度分布例 Erythrocyte size distribution example by the apparatus of Example 実施例の装置による赤血球粒度分布例 Erythrocyte size distribution example by the apparatus of Example 実施例の装置による赤血球粒度分布例 Erythrocyte size distribution example by the apparatus of Example 実施例の装置による赤血球粒度分布例 Erythrocyte size distribution example by the apparatus of Example 実施例の判定パラメータである赤血球の幅Yの説明図。 Illustration of the width Y of the erythrocyte is the determination parameter embodiment. 実施例の判定パラメータである赤血球の大きさXと赤血球の幅Yをプロットしたグラフ。 Plot of the width Y of the size X and erythrocyte erythrocytes is determined parameter embodiment.

符号の説明 DESCRIPTION OF SYMBOLS

1 シースフローセル2 サンプルノズル3 アルゴンレーザー光4 粒子5 ビームストッパー6 コレクターレンズ7 ダイクロックフィルター8 フォトダイオード9 フォトマル10 信号処理装置11 赤血球出現領域12 細菌出現領域13 酵母様真菌・精子出現領域14 白血球出現領域 1 sheath flow cell 2 sample nozzle 3 argon laser beam 4 particles 5 beam stopper 6 collector lens 7 dichroic filter 8 photodiode 9 photomultiplier 10 signal processing device 11 erythrocyte appearance region 12 bacteria appearance region 13 yeast-like fungus sperm appearance region 14 leukocytes appearance region

Claims (6)

  1. 尿試料をシース液に包んで尿試料流を形成するシースフローセルと、 A sheath flow cell for forming a urine specimen flow wrapped urine sample to the sheath fluid,
    尿試料流に光を照射する光照射手段と、 A light irradiating means for irradiating light to the urine specimen flow,
    尿試料流中の各粒子が放出する光信号を検出する光検出手段と、 Light detecting means for detecting an optical signal each particle of the urine sample stream is discharged,
    検出した光信号に基づいて尿試料流中の粒子から赤血球を同定する同定手段と、 And identification means for identifying erythrocytes from the particles in the urine specimen flow in on the basis of the detected light signals,
    同定した赤血球の粒度分布図を作成する粒度分布作成手段と、 A particle size distribution preparing means for preparing a particle size distribution diagram of the identified erythrocytes,
    粒度分布において、小さいほうからの累積赤血球数が総血球数の60〜90パーセントのうちの所定値となるときの赤血球の大きさの値と、赤血球の大きさの設定値とを比較し、赤血球の由来を、前記赤血球の大きさの値が設定値より小さい場合には糸球体由来、設定値以上の場合には非糸球体由来であると判定する判定手段と、 In the particle size distribution, compared to the magnitude of the values of red blood cells when the cumulative number erythrocytes from smaller becomes the predetermined value of 60-90% of the total number of blood cells, the magnitude of the set value of red blood cells, red blood cells a determination unit that the origin Hiito spheres when derived from, when the value of the magnitude of the red blood cells is less than the set value from glomeruli, the above setting value,
    判定結果を出力する出力手段を備えてなる尿中赤血球の鑑別装置。 Validator of urinary erythrocytes comprising an output means for outputting a determination result.
  2. 前記判定手段は、前記赤血球の大きさの値と、赤血球の大きさの第一設定値および第二設定値とを比較し、赤血球の由来を、前記赤血球の大きさの値が第一設定値より小さい場合には糸球体由来、第二設定値以上の場合には非糸球体由来、第一設定値以上かつ第二設定値より小さい場合には糸球体由来および非糸球体由来の混合であると判定する請求項1記載の尿中赤血球の鑑別装置。 It said determining means, and the magnitude of the value of the red blood cells, comparing the first set value and the second setting value of the magnitude of the red blood cells, the origin of erythrocytes, the value of the magnitude of the red blood cells first set value from glomeruli if smaller, in the case of the above second set value from Hiito sphere, is smaller than the first set value or more and the second set value is a mixture derived from glomerular origin and Hiito spheres and it determines claim 1 urine discriminating apparatus of erythrocytes according.
  3. 前記判定手段は、赤血球粒度分布の中央部領域分布幅の値に基づいて赤血球の種類をさらに判定する請求項1および2に記載の尿中赤血球の鑑別装置。 Said determining means, erythrocyte size distribution urine validator of red blood cells according to further determine claims 1 and 2 types of red blood cells based on the value of the central region distribution width.
  4. 尿試料をシースフローセル内でシース液に包んで尿試料流を形成し、 Urine samples urine specimen flow is formed by wrapping the sheath liquid within the sheath flow cell,
    光照射手段により尿試料に光を照射し、 Light is irradiated to the urine sample by the light irradiation means,
    尿試料流中の各粒子が放出する光信号を光検出手段により検出し、 Optical signals each particle of the urine sample stream is discharged is detected by the light detecting means,
    検出した光信号に基づいて同定手段により尿試料流中の粒子から赤血球を同定し、 The erythrocytes were identified from the particles of the urine specimen flow in the identification means on the basis of the detected light signals,
    粒度分布作成手段により同定された赤血球の粒度分布図を作成し、 Create a particle size distribution diagram of erythrocytes identified by a particle size distribution preparing means,
    粒度分布において、小さいほうからの累積赤血球数が総血球数の60〜90パーセントのうちの所定値となるときの赤血球の大きさの値と、赤血球の大きさの設定値とを比較し、赤血球の由来を、前記赤血球の大きさの値が設定値より小さい場合には糸球体由来、設定値以上の場合には非糸球体由来であると判定する尿中赤血球の鑑別方法。 In the particle size distribution, compared to the magnitude of the values of red blood cells when the cumulative number erythrocytes from smaller becomes the predetermined value of 60-90% of the total number of blood cells, the magnitude of the set value of red blood cells, red blood cells derived from, from glomeruli when the value of the magnitude of the red blood cells is less than the set value, discrimination method of urinary erythrocytes determines that derived Hiito sphere in the case of more than the set value of.
  5. 前記赤血球の大きさの値と、赤血球の大きさの第一設定値および第二設定値とを比較し、赤血球の由来を、前記赤血球の大きさの値が第一設定値より小さい場合には糸球体由来、第二設定値以上の場合には非糸球体由来、第一設定値以上かつ第二設定値より小さい場合には糸球体由来および非糸球体由来の混合であると判定する請求項4に記載の尿中赤血球の鑑別方法。 And the magnitude of the value of the red blood cells, comparing the first set value and the second setting value of the magnitude of the red blood cells, the origin of erythrocytes, when the value of the magnitude of the red blood cells is less than the first set value glomerular origin, in the case of the above second set value from Hiito spheres claim determines that is smaller than the first set value or more and the second set value is a mixture derived from glomerular origin and Hiito spheres urinary discrimination method of red blood cells as described in 4.
  6. 赤血球粒度分布の中央部領域分布幅の値に基づいて赤血球の種類をさらに判定する請求項4および5に記載の尿中赤血球の鑑別方法。 Urinary discrimination method of erythrocytes according to further determine claims 4 and 5 the type of erythrocytes based on the value of the central region the distribution width of red blood cell size distribution.
JP2006209385A 2006-08-01 2006-08-01 Discrimination apparatus and method of urinary red blood cells Expired - Lifetime JP4417936B2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2006209385A JP4417936B2 (en) 2006-08-01 2006-08-01 Discrimination apparatus and method of urinary red blood cells

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2006209385A JP4417936B2 (en) 2006-08-01 2006-08-01 Discrimination apparatus and method of urinary red blood cells

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP10135887 Division

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2006330001A JP2006330001A (en) 2006-12-07
JP4417936B2 true JP4417936B2 (en) 2010-02-17

Family

ID=37551796

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2006209385A Expired - Lifetime JP4417936B2 (en) 2006-08-01 2006-08-01 Discrimination apparatus and method of urinary red blood cells

Country Status (1)

Country Link
JP (1) JP4417936B2 (en)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104122191A (en) 2007-10-29 2014-10-29 希森美康株式会社 Cell analysis apparatus and cell analysis method
JP5351585B2 (en) * 2009-03-31 2013-11-27 シスメックス株式会社 Renal disease diagnostic support apparatus, and computer program
FI20105645A0 (en) * 2010-06-07 2010-06-07 Environics Oy Device and method for the detection of biological material

Also Published As

Publication number Publication date
JP2006330001A (en) 2006-12-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Delanghe et al. The role of automated urine particle flow cytometry in clinical practice
CA2718995C (en) Method and apparatus for determining red blood cell indices of a blood sample utilizing the intrinsic pigmentation of hemoglobin contained within the red blood cells
EP2312311B1 (en) Determination of white blood cell differential and reticulocytes counts
EP0698211B1 (en) Reticulocyte analyzing method and apparatus utilizing light scatter techniques
JP3213334B2 (en) Cell analyzer in the urine
US6133995A (en) Particle measuring apparatus
JP4814912B2 (en) Discrimination optical red and white blood cells
JP4417143B2 (en) Sample analyzer, program and recording medium recording the program
Chien et al. Urine sediment examination: a comparison of automated urinalysis systems and manual microscopy
JP4086468B2 (en) How to do the counting of blood cells
CN102156088B (en) Particle analyzing apparatus and particle imaging method
JP4918281B2 (en) Urinary particle analyzer
US7892841B2 (en) Method and apparatus for measuring hematological sample
CN101236194B (en) The sample analyzer and its control system
US8189177B2 (en) Sample preparation apparatus and sample preparation method, and cell analyzer and cell analysis method
EP2602608A1 (en) Analysis and sorting of biological cells in flow
EP1297334A4 (en) Flow cytometry-based hematology system
KR20040105717A (en) Methods and algorithms for cell enumeration in a low-cost cytometer
CN102027369B (en) And separately detecting and counting method and apparatus polymerization platelet clot
Lamchiagdhase et al. Urine sediment examination: a comparison between the manual method and the iQ200 automated urine microscopy analyzer
US8994930B2 (en) Method and apparatus for analyzing individual cells or particulates using fluorescent quenching and/or bleaching
US7892850B2 (en) Apparatus and method for measuring immature platelets
JP3098273B2 (en) Cell analyzer in the urine
US10060846B2 (en) Hematology systems and methods
EP1746407A2 (en) Blood analyzing method and blood analyzer

Legal Events

Date Code Title Description
A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20090414

A521 Written amendment

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20090605

A02 Decision of refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02

Effective date: 20090707

A521 Written amendment

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20091005

A911 Transfer of reconsideration by examiner before appeal (zenchi)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911

Effective date: 20091013

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20091117

A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20091126

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121204

Year of fee payment: 3

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121204

Year of fee payment: 3

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20151204

Year of fee payment: 6

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

EXPY Cancellation because of completion of term