JP3271394B2 - グリコヘモグロビン分析計 - Google Patents
グリコヘモグロビン分析計Info
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Description
法に係り、特に液体クロマトグラフィをベースにしたヘ
モグロビン亜分画を定量する分析計及び装置に関する。
したグリコヘモグロビン分析計は特開平3−255360 号公
報に記載されるように、分離カラムに陽イオン交換カラ
ムを、溶離液として塩濃度の異なる2ないし3種類の緩
衝液を使用し、ステップワイズあるいはグラジェント溶
出法によりヘモグロビンの亜分画を分離していた。この
方法は分離カラムの平衡化及び分離に時間を要し、1検
体当たりの分析時間が長かった。そのため、未知検体の
分析前に数回コントロールを分析し、分離カラムの平衡
化を十分に確保したあとで連続して分析しなければ効率
が悪かった。
開始する時までに相当数の検体が確保できる施設では有
効であるが、小規模の病院のように外来患者が不定期に
しかも断続的に来るような施設では検体数が集まるまで
分析を遅らせるなどの対策が必要であった。一方、糖尿
病患者の増加に伴い、専門外来の病院が現れた。このよ
うな病院では検体数が多くても一日当たり数十検体であ
り、分析は外注に出されているのが通例であった。しか
し、このような場合には医師による患者への治療あるい
は生活指導は前回(通常約1ヵ月前)来院時の分析デー
タに基づいて行われることになる。グリコヘモグロビン
はその性質上約1〜2ヵ月前の血糖値を反映すると言わ
れているため、これまでのように外注分析をした場合2
〜3ヵ月前の血糖状態に基づいて指導することになり問
題があった。
れたものであり、患者から採血が行われる都度分析が実
行可能なグリコヘモグロビン分析計を提供することを目
的とする。
るために、本発明は溶離液とポンプとを連結する配管を
カラム恒温ユニット内を通して加熱し気泡トラップにて
配管内の気泡がポンプに入らないようにしたものであ
る。
待たずに分析する為に待機の状態から検体分析へ移行
後、即検体を連続して分析し、n回目とn−1回目との
定量値の差の絶対値が指定された一定値以下になった時
点でその検体の分析を終了するようにしたものである。
存在しても許容しうるように、最大の繰返し回数nとn
回目とn−1回目の定量値の差(絶対値)が書き変え可
能としたものである。
離カラムを室温より高めに維持し、溶離液をこのカラム
恒温ユニット内を通過させて飽和状態にある溶存空気を
気泡とし、気泡トラップにて捕集する。これにより、待
機行程の低流量から分析行程の定常流量に移行時に速や
かに安定した流量状態を得ることができる。
移行後連続して同一検体を分析し、n回目とn−1回目
の定量値の差(絶対置)がある一定値以下になった時点
で分析終了とする。液体クロマトグラフをベースとした
グリコヘモグロビン分析計では濃度の異なる2〜3種類
の溶離液を一定時間間隔で送液する。そのため、分離カ
ラムの状態が平衡化されるまで数回のサイクルが必要で
あり、従来は一連の分析の前に平衡化したあと検体分析
に入っていた。本発明では定量値が安定して出力される
まで繰返し分析するので平衡化前の誤った定量値が出力
されることはない。
いて図1により説明する。
ノズルを固定する可動アーム8,可動アーム8を駆動す
るモータ9,全血の検体を希釈・溶血する希釈ポート
7,検体の吸引等に使用するシリンジ10,希釈・溶血
液11,溶血サンプルを注入する注入弁13から構成さ
れるサンプリング機構1,溶離液14a,b間で濃度勾
配を発生させるグラジェントユニット16,送液ポンプ
15から構成される送液機構2,溶血サンプルをヘモグ
ロビンの亜分画に分離する分離カラム17,分離カラム
を室温より高く維持する恒温ユニット18,検知器19
から構成される分離・検出機構3,データ処理機構4よ
り構成される。溶離液が流通する配管20は、グラジェ
ントユニット16に至る途中で恒温ユニット18を通過
する。もし、恒温ユニット18を通過中に溶離液に気泡
が発生した場合は気泡トラップ21で捕集するようにな
っている。
て説明する。
される。
8,カラム圧力,検知器19のランプ強度等が安定した
ことを確認する。検出信号のノイズ,ドリフト,圧力等
がある一定条件を満足するまで動作する。
あるリファレンス(溶血液)を分析し、グリコヘモグロ
ビン(HbA1c),ヘモグロビンF,ヘモグロビン(H
bA0)等の保持時間等を確認する。
が押されるまで待機する。
状態に上がり、可動アーム8が前方にスライドし検体の
一定量を吸引する。次に検体を希釈・溶血液11ととも
に希釈ポート6に吐出する。この溶血サンプルを注入ポ
ート7より注入弁13に送る。このとき注入弁13の流
路は破線に示すようになっている。次に注入弁13を実
線の流路に切り換え、同時に濃度の異なる溶離液14
a,bを混合しグラジェントを発生し、分離カラムへと
溶血サンプルを導いてヘモグロビン亜分画に分離する。
1回目に注入した溶血サンプルの分離が終了したら希釈
ポートに残っている溶血サンプルを注入ポート7により
再度注入し分離を開始する。この分析をn回繰り返す
が、n回目の定量値とn−1回目の定量値の差がある一
定値以下になったらこの検体の分析を終了として待機す
る。繰り返し数nは整数であり任意に設定できる。も
し、設定した繰り返し数nと同じだけ分析してもn回目
とn−1回目の定量値の差が一定値以下にならない場合
にはエラーを表示し、ストップする。
したメタアクリレートポリマーゲルを充填したものを使
用した。カラムサイズは内径4.6mm ,長さは35mmで
ある。溶離液には52.5mmol/lリン酸緩衝液(pH
6.2)と210mmol/lのリン酸緩衝液(pH6.
1)を使用した。分析時の流量は1.2ml/min,待機
時は0.2ml/minとし、カラム温度は40℃とした。
希釈・溶血液には0.1%の界面活性剤(Triton X−1
00)を用い、全血の検体を希釈・溶血液で約200倍
に希釈して溶血サンプルとした。この10μlを注入し
た。ヘモグロビン亜分画の検知には波長415nm可視
光度計を使用した。上記した条件で得られたクロマトグ
ラムを図3に示す。
カラムを用いて分析した結果を表1に示す。検体は糖尿
病患者3人の血液を用いた。カラム1と2は新品を,カ
ラム3は約2000検体分析したものを使用した。新品
のカラムの場合には1回目の定量値が高めに出る傾向が
あるが、これは1回の分析でヘモグロビンA0(HbA0)が
完全に溶出しきれずにカラムに残留しているためと考え
られる。表1に見るように繰り返し数nを3に設定し、
さらに定量値の差の絶対値を0.1 に設定すればカラム
1及び2は3回分析した時点で、カラム3では2回分析
した時点で分析は終了することがわかる。
終了後待機させておき、分析時に同一検体を繰り返し分
析して定量値の差の絶対値がある一定値以下になった時
点で終了し、この時の定量値を打ち出すことにより、断
続的に訪れる外来患者の血液が分析できるという効果が
ある。
を示す図である。
られるクロマトグラムである。
機構、4…データ処理機構、5…検体、8…可動アー
ム、9…駆動モータ、10…シリンジ、13…注入弁、
14…溶離液、15…送液ポンプ、16…グラジェント
ユニット、17…分離カラム、18…恒温ユニット、1
9…検知器。
Claims (4)
- 【請求項1】血液試料を希釈して測定試料とし、その一
定量を注入するサンプリング機構と、複数の溶離液を送
液する送液機構と、前記サンプリング機構により注入さ
れた測定試料を分離する分離カラムと、当該分離カラム
から溶出した測定試料を検出する検知器とを有する分離
・検出機構と、当該分離・検出機構からの信号を処理す
るデータ処理機構からなるグリコヘモグロビン分析計に
おいて、前記測定試料の分析を連続的に行い、分析の結果が前回
の分析結果と比較して、所定の差異以下であるときに分
析を終了する ことを特徴とするグリコヘモグロビン分析
計。 - 【請求項2】請求項1に記載のグリコヘモグロビン分析
計において、前記比較される分析の結果として、定量値を用いる こと
を特徴とするグリコヘモグロビン分析計。 - 【請求項3】請求項1に記載のグリコヘモグロビン分析
計において、前記分離カラムの温度を保つ恒温ユニットを設け、前記
送液機構からの配管が前記恒温ユニット内を通るように
構成する ことを特徴とするグリコヘモグロビン分析計。 - 【請求項4】請求項3に記載のグリコヘモグロビン分析
計において、 前記送液機構からの配管の途中に気泡トラップを設けた
ことを特徴とするグリコヘモグロビン分析計。
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JP26604793A JP3271394B2 (ja) | 1993-10-25 | 1993-10-25 | グリコヘモグロビン分析計 |
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Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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JP26604793A JP3271394B2 (ja) | 1993-10-25 | 1993-10-25 | グリコヘモグロビン分析計 |
Publications (2)
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Family Applications (1)
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JP26604793A Expired - Fee Related JP3271394B2 (ja) | 1993-10-25 | 1993-10-25 | グリコヘモグロビン分析計 |
Country Status (1)
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-
1993
- 1993-10-25 JP JP26604793A patent/JP3271394B2/ja not_active Expired - Fee Related
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