JP3205413B2 - 微粒子計測装置及び微粒子計測方法 - Google Patents
微粒子計測装置及び微粒子計測方法Info
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Description
おけるダスト粒子の計測や、溶液中の特定物質の濃度計
測に用いる微粒子計測装置及び微粒子計測方法に関する
ものである。
微粒子に光を照射し、その反射散乱光を検出する方法は
従来から行われているが、検出効率を向上させるため
に、上記微粒子をできるだけ集中させる手段が検討され
てきた。上記微粒子の集中化を行う方法としてつぎに示
す各例がある。
液流が広がって検出効率を低下させないために、シース
フローで上記試料液流の周囲を囲み、試料液流を細く絞
る。この方法では上記試料液流を細くする効果はあるが
濃縮効果はない。
A)、第5巻、(1955)167〜178頁――超音
波の進行波または定在波によって微粒子をフロー状態で
集中化させる方法で、水槽中の実験により気泡の集中化
が可能であることを示した文献であるが、上記公知例で
は、測定液をサンプリングし、それに含まれる粒子濃度
を測定する装置構成になっていない。
6)、371〜382頁――選炭廃水中における微粉炭
を回収するのに超音波を応用した例を示し、超音波によ
って微粒子間の衝突を促進させ、微粉炭を凝集させて大
きな微粒子としたのち回収する。
・ソサエティ・オブ・アメリカ(Journal of Acousti
cal Society of America)、第89巻、第5号(19
91)2140〜2143頁――超音波によって勾配力
場を発生させ、それにより微粒子を濃縮する方法である
が、上記(2)と同様に、測定液をサンプリングしてそ
れに含まれる粒子濃度を測定する装置構成にはなってい
ない。
の公知例がある。
ド・テクノロジィ(Meas.Sci.Technol.)3(1
992)27〜32頁――微粒子を2波長で光照射し、
上記微粒子からの散乱光を2波長と2方向とで同時に測
定し、微粒子の粒径と屈折率とを1個単位で求める。上
記微粒子の物質弁別は屈折率で行うが、本方法の限界
は、微粒子の粒径が0.2μmより小さくなるとレーリ
散乱領域になり、屈折率の決定およびその違いを用いた
物質弁別が不可能になることである。
出する際には、照射光パワーの密度を高めるために照射
光を絞り込む必要がある。しかしながら、上記照射光を
絞り込むと照射領域が小さくなり、検出効率が低下して
実効的な測定流量が小さくなるという問題がある。
量が増大でき、流体中の微粒子の物質弁別が可能な微粒
子計測装置及び微粒子計測方法を得ることを目的とす
る。
に、本発明の微粒子計測装置は、微粒子を含む溶液を流
す流路と、上記流路に取り付け溶液中の微粒子を濃縮す
る超音波振動子と、濃縮された微粒子に光を照射するた
めの光学手段と、微粒子からの光を検出する光検出器
と、を有することを特徴とする。また、本発明の微粒子
計測装置は、上記超音波振動子は上記流路に対向して取
り付けられ、上記微粒子からの光として微粒子からの散
乱光または蛍光を検出することを特徴とする。また、本
発明の微粒子計測装置は、微粒子を濃縮する第1の手段
と、上記微粒子の特性に応じ流れに対し平行でない方向
に力を作用させる第2の手段と、上記微粒子を検出する
第3の手段とを備えたことを特徴とする。また、本発明
の微粒子計測装置は、上記微粒子を濃縮する第1の手段
は、超音波振動を用い、かつ、上記第3の手段は、微粒
子を分離収集する手段であり、上記力を作用させる第2
の手段として電場を用いることを特徴とする。また、本
発明の微粒子計測装置は、流体中の微粒子を検出測定す
る微粒子計測装置において、特定の物質の濃度測定に際
し、上記特定の物質と特異的に結合する物質で被覆した
粒子を被測定液に混入し、該混入液体を超音波振動する
ことにより、上記粒子を流れに沿って濃縮し、上記特定
の物質を介して微粒子の凝集反応を促進させる手段と、
上記凝集反応で増大した凝集粒子の濃度を光照射により
検出する手段とによって、液体中の特定の物質の濃度を
測定することを特徴とする。また、本発明の微粒子計測
方法は、微粒子を含む溶液を流す工程と、上記溶液の流
路に取り付け溶液中の微粒子を超音波振動子を用いて濃
縮する工程と、濃縮された微粒子に光を照射して微粒子
を検出する工程と、を有することを特徴とする。
に、超音波を用いて微粒子の集中化を行っている。すな
わち、液体流路に超音波の定在波を形成し、その節の位
置に微粒子を集中させるか、複数の超音波の進行波を重
ね合わせて特定位置に微粒子を集合させ、光照射を行っ
て微粒子計測を行う。
つぎに説明する。本発明では、主に輻射圧を利用した定
在波または進行波による凝集機構を用いている。
子におよぼす力Fcsは次式で表される。
/(溶媒の密度)、βは微粒子の弾性率、β0は溶液の
弾性率、ρは溶液の密度、aは微粒子の直径、Usはつ
ぎに定義する量である。Us2=(2I/ρC)×107(c
m2/S2)、ただしIはパワー密度(W/cm2)、Cは
溶媒中の音速、yは超音波進行方向の位置であり、フロ
ーセル中央における定在波の節の位置をy=0とする。
上記微粒子はFcsによって節(y=0)の位置に集中す
る。
粒子におよぼす力Fctは次式で表される。
中での波数)、UtはUsと同様の量である。したがっ
て、微粒子に進行波を反対方向から照射することによっ
て、輻射圧が釣り合う位置に微粒子を集合させることが
できる。
る。図1は本発明による微粒子計測装置の第1実施例を
示す図、図2は本発明の第2実施例を示す図、図3は上
記第2実施例を変形した場合を示す図、図4は本発明の
第3実施例を示す図、図5は上記第3実施例を変形した
場合を示す図、図6は微粒子を濃縮する領域を示す断面
図で、(a)は流路の対向する側面に超音波振動子を用
いた場合を示す図、(b)は流路の四方の側面に超音波
振動子を用いた場合を示す図である。
粒子を集中させる部分と微粒子を検出する部分とからな
っている。上記微粒子を集中させる部分では、フローセ
ル4の外表面に1組の超音波振動子5が対向して貼り付
けてあり、上記超音波振動子5を用いて、フローセル4
内の中央部に節をもつ超音波の定在波を発生させる。純
水中での音速度は水温25度で1500m/sであるか
ら、1mmの幅をもつフローセル4中で1個の節をもつ
定在波を発生するには、上記超音波振動子5を振動数7
50kHzで振動させればよい。1cm2あたりの超音波
強度6.0〜9.0mWの超音波を照射することにより、
上記フローセル4中の微粒子は、超音波の音圧および粒
子相互の衝突に基づく力学的作用によって、それぞれの
微粒子の形状および音響インピーダンスに応じた速度
で、定在波の節の位置に集中させることができる。超音
波の出力値はキャビテーションが発生しない範囲にとど
めるのが望ましい。微粒子をフローセル4の中央に超音
波で十分集中させて濃縮したのち、それらの微粒子群が
通過する領域8に光16を照射し、微粒子が通過したと
きに上記微粒子から発する散乱光をレンズ15で集光
し、スリット14で検出領域を領域8に限定して光電子
増倍管13で検出する。図において矢印9は微粒子の流
れの方向を示す。上記の例は、微粒子からの散乱光を利
用して微粒子を検出する実施例であるが、上記微粒子が
蛍光を発する場合には、上記蛍光を計測して微粒子を検
出することも可能である。
1個ごとに検出することは不可能である。しかし、その
濃度をつぎの方法で測定することは可能である。すなわ
ち、測定対象になる物質の抗体で粒径0.3μmのポリ
スチレン粒子を覆い(本調整方法は特公昭63−103
91、米国特許4,140,662、米国特許3,857,
931に述べられている公知技術である)、上記測定対
象の特定物質を含む被測定液に上記微粒子を混入する。
本実施例の装置構成において超音波を用いることによ
り、上記微粒子を濃縮すると上記微粒子間の衝突が促進
される。衝突による上記微粒子表面を覆った抗体と上記
特定物質との抗原抗体反応により、上記微粒子の凝縮が
効率よくおこる。上記凝縮は特定物質の濃度が高いほど
盛んにおこる。目的とする物質の濃度と凝集粒子濃度と
の検量線を前もって作成しておけば、凝集した上記微粒
子に光照射してその濃度を計測することによって、目的
の物質の濃度を計測することが可能である。
つであるが、必要に応じて複数の節を有する定在波を形
成することも可能である。また本実施例では、流路の側
面に1組の対向する超音波振動子5を用いているが、流
路の四方の側面に対して超音波振動子5を用いてもよ
い。これらの場合の濃縮状態の違いは、図6の(a)お
よび(b)にそれぞれ示すとおりであって、超音波振動
子5を(a)のようにフローセル4の対向する側面に設
けた場合よりも、(b)のようにフローセル4の四方の
側面に設けた場合の方が、微粒子の濃縮率が高くなる。
粒子を集中させる部分と、電場を用いて微粒子を弁別す
る部分、および光照射により微粒子を検出する部分から
なっている。微粒子は一般にその材質と表面状態に応じ
て、固有のゼータ電位(ζ電位)を有する。異なるゼー
タ電位をもつ微粒子1,2,3(1は0、2は負、3は
正)を含む溶液は、まず、超音波によって微粒子を集中
させる部分に送り込まれる。この部分には、フローセル
4の外側面に1組の超音波振動子5がそれぞれ対向して
設置されており、上記フローセル4の中央部に節をもつ
定在波を発生させることができる。超音波振動数および
強度についても、上記第1実施例と同様に設定すればよ
い。微粒子を超音波でフローセル4の中央に十分集中さ
せたのち、上記溶液は電場によって微粒子を弁別する部
分に送り込まれる。この部分には電極6および7が貼り
付けてあり、上記フローセル中における溶液の流れ方向
9に平行な電位分布をもつ一様な電場を作る。微粒子は
各物質に固有なゼータ電位(ポリスチレン:−43m
V、シリコン:−36mV、酸化アルミニウム:+30
mV、気泡:0mVなど)を持つ。電場による微粒子の
泳動速度は上記ゼータ電位に比例し、粒径には依存しな
い。したがって、溶媒条件と外界から与えられる電場が
一定であるとき、微粒子の移動速度は、微粒子のゼータ
電位のみに依存し微粒子の粒径には関係なく、同じ物質
の微粒子は同じ速度で移動する。そのため、溶液が流れ
る方向9と垂直な方向に、電極6および7で電場を加え
ることにより、微粒子が流れと垂直にどれだけ泳動した
かによって、微粒子を識別分離することができる。すな
わち、上記変位量を微粒子1個単位で測定することによ
り微粒子の物質同定を行う。
なるように、同形状のフローセルが少なくとも次式で表
される助走区間の長さdだけつながったのちの、層流と
なる部分に設置するのが望ましい。
れの最大速度、νは溶液の運動粘性率である。
粒子を含んだ溶液は微粒子検出部へと送り出される。上
記検出部には、溶液の流れ方向9とは垂直にアレイ型検
出器の検出領域17を設定し、各検出素子ごとに光照射
して(図示せず)光学的に微粒子を検出する。上記微粒
子の電気泳動による変位量yは、上記アレイ型検出器の
検出位置で測定する。微粒子のゼータ電位ζと微粒子の
変位量yとの関係については、実験的にあらかじめ調べ
ておくことによって、変位量から上記ゼータ電位を求め
ることができる。また、上記アレイ型検出器の各検出素
子ごとに検出した微粒子の散乱光強度の情報を組み合わ
せることによって、上記微粒子の粒径および物質を弁別
することができる。
る領域を超音波による力が作用する領域内に設けて、超
音波による力と電場による力との比率を検討することに
よって、微粒子を弁別することも可能である。
位置および硬さによって決まり、上記のうち大きさと位
置は光学的に検出され、一方、電場による力はゼータ電
位によって決まり、上記ゼータ電位は微粒子の変位量か
ら求められるため、微粒子に対する上記超音波の力と電
場による力との比率により、さらに上記微粒子の硬さの
情報を得ることも可能である。
超音波振動子5を用いているが、流路の四方の側面に対
して超音波振動子5を用いてもよい。これらの場合にお
ける微粒子の濃縮状態の違いは、図6の(a)および
(b)にそれぞれ示すように、上記第1実施例と同様で
あって、四方の側面に超音波振動子5を設けた(b)に
示す場合の方が、微粒子の濃縮率は高くなる。
粒子を集中させる部分と、電場を用いて微粒子を弁別す
る部分と、光照射により微粒子を検出する部分とからな
っている。異なるゼータ電位をもつ微粒子1,2,3を
それぞれ含む溶液は、まず、超音波によって微粒子を集
中させる部分に矢印9のように送り込まれる。上記部分
では、フローセル4の外表面に設置した1組の超音波振
動子5が生じる超音波により、フローセル4の中心部に
ポテンシャルの極小点をもつ力場を発生させる。本実施
例の超音波は定在波でなく、流路中心部に収束させた進
行波である。超音波が進行波であるときに、超音波が微
粒子におよぼす力Fctは数2で表される。1cm2あたり
6.0〜9.0mWの超音波を照射することにより、微粒
子は超音波の音圧および粒子相互の衝突に基づく力学的
作用によって、それぞれの微粒子の形状および音響イン
ピーダンスに応じた速度で、複数の超音波振動子5が発
生する超音波の釣り合いの位置である流路中央に集中す
る。
分集中させたのち、電場によって上記微粒子を弁別する
部分に送り込む。上記微粒子を弁別する部分では、フロ
ーセル4の内面に電極6および7が貼り付けてあり、フ
ローセル中の溶液の流れ方向9に平行な電位分布をもつ
一様な電場を作る。微粒子は上記電場内を泳動して微粒
子を検出する部分に到り、上記第2実施例と同様に、ア
レイ型検出器の検出領域17で電場による変位量別に検
出され、光照射による散乱光強度とゼータ電位とを1個
単位で決定できる。このようにして、上記微粒子の粒径
別および物質別に濃度を計測することが可能である。
領域を超音波による力が作用する領域内に設け、超音波
による力と電場による力との比率によって、微粒子を弁
別することが可能である。
超音波振動子5を用いているが、流路の四方の側面に対
して超音波振動子5を用いてもよい。これらの場合の濃
縮状態の違いは、図6の(a)および(b)にそれぞれ
示すが、(b)のように四方の側面に超音波振動子5を
設けた場合の方が、微粒子の濃縮率は高くなる。
検出感度を低下させることなく、測定流量の増大をはか
って検出効率を高め、また、流れる流体中における微粒
子の物質弁別を行うことができる。
す図である。
す図である。
置を示す図である。
す図である。
置を示す図である。
で、(a)は流路の対向する側面に超音波振動子を用い
た場合を示す図、(b)は流路の四方の側面に超音波振
動子を用いた場合を示す図である。
Claims (6)
- 【請求項1】微粒子を含む溶液を流す流路と、上記流路
に取り付け溶液中の微粒子を濃縮する超音波振動子と、
濃縮された微粒子に光を照射するための光学手段と、微
粒子からの光を検出する光検出器と、を有することを特
徴とする微粒子計測装置。 - 【請求項2】上記超音波振動子は上記流路に対向して取
り付けられ、上記微粒子からの光として微粒子からの散
乱光または蛍光を検出することを特徴とする請求項1記
載の微粒子計測装置。 - 【請求項3】微粒子を濃縮する第1の手段と、上記微粒
子の特性に応じ流れに対し平行でない方向に力を作用さ
せる第2の手段と、上記微粒子を検出する第3の手段と
を備えたことを特徴とする微粒子計測装置。 - 【請求項4】上記微粒子を濃縮する第1の手段は、超音
波振動を用い、かつ、上記第3の手段は、微粒子を分離
収集する手段であり、上記力を作用させる第2の手段と
して電場を用いることを特徴とする請求項3記載の微粒
子計測装置。 - 【請求項5】流体中の微粒子を検出測定する微粒子計測
装置において、特定の物質の濃度測定に際し、上記特定
の物質と特異的に結合する物質で被覆した粒子を被測定
液に混入し、該混入液体を超音波振動することにより、
上記粒子を流れに沿って濃縮し、上記特定の物質を介し
て微粒子の凝集反応を促進させる手段と、上記凝集反応
で増大した凝集粒子の濃度を光照射により検出する手段
とによって、液体中の特定の物質の濃度を測定すること
を特徴とする微粒子計測装置。 - 【請求項6】微粒子を含む溶液を流す工程と、上記溶液
の流路に取り付け溶液中の微粒子を超音波振動子を用い
て濃縮する工程と、濃縮された微粒子に光を照射して微
粒子を検出する工程と、を有することを特徴とする微粒
子計測方法。
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