JP3107726B2 - Water-swellable polymer gel - Google Patents

Water-swellable polymer gel

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JP3107726B2
JP3107726B2 JP12583895A JP12583895A JP3107726B2 JP 3107726 B2 JP3107726 B2 JP 3107726B2 JP 12583895 A JP12583895 A JP 12583895A JP 12583895 A JP12583895 A JP 12583895A JP 3107726 B2 JP3107726 B2 JP 3107726B2
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gel
polymer gel
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swellable polymer
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久雄 木下
正夫 谷原
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株式会社クラレ
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Description

【発明の詳細な説明】 DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【0001】 [0001]

【産業上の利用分野】本発明は医療用高分子ゲルに関する。 The present invention relates to a medical polymer gel. 詳しくは、本発明は新規な薬剤放出特性を有する、 Specifically, the present invention has a novel drug release characteristics,
医療用高分子ゲルに関する。 On the medical polymer gel. 本発明の医療用高分子ゲルは、創傷被覆材、生体組織接着剤、癒着防止材、骨補強材、薬剤放出基材の構成成分として有用である。 Medical polymer gel of the present invention, a wound dressing, a biological tissue adhesive, antiadhesive material, a bone reinforcing material, is useful as a component of drug release substrate. 本発明は透明性と耐熱性、生体親和性、安定性に優れた多糖類の新規な水膨潤性高分子ゲルに関する。 The present invention is transparency and heat resistance, biocompatibility, about excellent polysaccharide novel water-swellable polymer gel stability. 本発明により提供される水膨潤性高分子ゲルは、上記の医療用高分子ゲルの構成成分として有用であると共にそれ自体で耐熱性と生体親和性に優れているので創傷被覆材、癒着防止材、生体組織接着剤等の医療用材料の構成成分として有用である。 Water-swellable polymer gel provided by the present invention is excellent in heat resistance and biocompatibility itself with useful as a component of a medical polymer gel of the wound dressing, adhesion barrier useful as a component of a medical material such as a biological tissue adhesive. さらに透明性に優れているので創傷被覆材、 Wound dressings because further excellent in transparency,
癒着防止材の構成成分として特に有用である。 It is particularly useful as a component of the adhesion barrier.

【0002】 [0002]

【従来の技術および発明が解決しようとする課題】本明細書において水膨潤性高分子ゲルとは、血液、血漿、細胞間液等の体液または生理食塩水等の体液類似液に膨潤するものであって、生体親和性を有するものを意味する。 The water-swellable polymer gel herein BACKGROUND OF INVENTION Problems to be Solved], intended to swell blood, plasma, body fluids similar liquid body fluids or physiological saline intercellular fluid and the like there are, but having biocompatibility. 多糖類からなる水膨潤性高分子ゲルとしては、寒天、アガロース、カラゲニンからなるゲルが知られている。 The water-swellable polymer gel comprising a polysaccharide, agar, agarose, a gel consisting of carrageenan are known. 化学的に架橋したデキストランやセルロースのゲル、カルシウムイオンで架橋されたアルギン酸ゲル、キチンまたはキトサンからなるゲルも知られている。 Chemically crosslinked dextran or cellulose gel, alginate gel crosslinked with calcium ions, is also known a gel consisting of chitin or chitosan.

【0003】水膨潤性高分子ゲルが医療用途へ応用されている例としては、創傷被覆材、コンタクトレンズ、眼内レンズ、生体組織接着剤、癒着防止材、血液浄化用吸着剤、人工膵臓や人工肝臓等のハイブリッド人工臓器、 [0003] Examples of water-swellable polymer gel is applied to medical applications, wound dressings, contact lenses, intraocular lenses, biological tissue adhesives, adhesion prevention materials, adsorbents for blood purification, Ya artificial pancreas hybrid artificial organs such as an artificial liver,
人工軟骨、薬剤徐放性基材等がある。 Artificial cartilage, there is a drug sustained-release base material, or the like. 水膨潤性高分子ゲルはその組成と力学的性質が生体組織に近いので、今後ますます広く応用されると考えられる。 Because the water-swellable polymer gel is mechanical properties and its composition close to the living tissue is considered the future be more widely applied.

【0004】従来、外傷や熱傷、潰瘍、褥瘡等の創傷の治療にはガーゼや軟膏類が用いられてきた。 Conventionally, trauma or burns, ulcers, gauze and ointment such for the treatment of wounds, such as decubitus have been used. これらは滲出液を吸収し、かつ外部からの細菌等の侵入を防ぐ効果がある。 These are effective in preventing the penetration of bacteria and the like from absorbing the exudate, and external. 近年、創部の滲出液中に治癒を促進する種々の増殖因子(bFGF、TGFβ等)が存在することが明らかになり(Howell, JM,Current and Future Trends Recently, revealed that various growth factors that promote healing exudate in the wound (bFGF, TGF [beta etc.) are present (Howell, JM, Current and Future Trends
in Wound Healing, Emerg. Med.Clin.North Amer., 1 in Wound Healing, Emerg. Med.Clin.North Amer., 1
0, 655-663 (1992). )、これらの増殖因子を創部に保持して創治癒促進効果を示す閉鎖性被覆材が注目されるようになった(Eaglstein, WE, Experience with bio 0, 655-663 (1992).), Occlusive dressings which retain these growth factors in the wound shows the wound healing effect was to be noted (Eaglstein, WE, Experience with bio
synthetic dressings. J. Am. Acad. Dermatol., 12, 4 synthetic dressings. J. Am. Acad. Dermatol., 12, 4
34-440 (1985).)。 34-440 (1985).).

【0005】閉鎖性被覆材としてはポリウレタンフィルム、ハイドロコロイド、アルギン酸塩繊維からなる不織布、ポリビニルアルコールスポンジ、ポリエチレングリコールやポリアクリルアミドの水膨潤性高分子ゲル等が用いられている。 [0005] Polyurethane films as occlusive dressings, hydrocolloid, nonwoven fabric comprising alginate fibers, polyvinyl alcohol sponge, water-swellable polymer gel such as polyethylene glycol and polyacrylamide are used. 生体組織接着剤としてはシアノアクリレート系の重合性接着剤、フィブリン糊が使用されている。 The biological tissue adhesive polymerizable adhesive cyanoacrylate, fibrin glue is used. 癒着防止材としてはオキシセルロースメッシュからなるものが知られている。 The adhesion barrier is known which consists of oxycellulose mesh.

【0006】これらの水膨潤性高分子ゲルの製造方法としては、コハク酸またはグルタル酸で架橋したアミロース、デキストランまたはプルラン等の固形物の製造方法が知られている(特開昭51−34978号公報)。 [0006] As a method for producing these water-swellable polymer gel, amylose crosslinked with succinic or glutaric acid, method for producing a solid, such as dextran or pullulan has been known (JP-A-51-34978 Publication). これらは止血剤として好適である。 These are suitable as a hemostatic agent. また、キトサンとN− In addition, the chitosan N-
ヒドロキシコハク酸イミドエステルとを反応させて得られる架橋キトサンが知られている(特開平2−1809 Crosslinked chitosan obtained by reacting a hydroxy succinimide ester are known (JP-A-2-1809
03号公報)。 03 JP). これは人工皮膚等の医薬関連分野に有用である。 This is useful in the pharmaceutical-related fields such as artificial skin. さらに、キチン誘導体を硫酸、アスパラギン酸、グルタミン酸等で一時的にイオン架橋した粘弾性流体も製造されており、癒着予防に使用されている(特開平3−167201号公報)。 Further, sulfuric chitin derivative, aspartic acid, temporarily ionically cross-linked viscoelastic fluid glutamic acid has also been manufactured and used in adhesion prevention (JP-A-3-167201).

【0007】しかしながら、上記のような医療用材料には医療用途としての有用性のほかに生体親和性が必須の性質として要求される。 However, in addition to biocompatibility of the usefulness as medical applications in medical material as described above it is required as an essential property. これまで多くの医療用材料が開発されてきたが、生体親和性をもつ一種の材料で各種の医療用途の全てを満足させるものはまだ知られていない。 So far, many medical materials have been developed, but not yet known what to satisfy all of one material in a variety of medical applications with biocompatibility. 組成と力学的性質が生体に近い多糖類水膨潤性高分子ゲルも医療用途へ応用が試みられているが、一般に安定性と強度が低いので以下に示すような湿熱蒸気滅菌に耐えるものが少なく、医療用具としては問題がある。 Although mechanical properties and composition are polysaccharides water-swellable polymer gel is also applied to medical applications is tried close to a living body, generally less able to withstand the wet heat steam sterilization as described below since stability and strength is low , as the medical devices there is a problem. 医療用具の製造上不可欠な滅菌は、ホルマリン滅菌、エチレンオキシドガス滅菌、湿熱蒸気滅菌または放射線滅菌などにより行われる。 Manufacturing essential sterilization of medical devices, formalin sterilization, ethylene oxide gas sterilization is performed by such moist heat steam sterilization or radiation sterilization. ホルマリン滅菌、エチレンオキシドガス滅菌は、水膨潤性高分子ゲルの場合特に残留薬物を完全に除去することが困難であり、残留毒性の心配があった。 Formalin sterilization, ethylene oxide gas sterilization, when the water-swellable polymer gel is particularly difficult to completely remove residual drug, there was a concern of residual toxicity. 湿熱蒸気滅菌は装置が安価で残留物がなく、安全性の高い滅菌方法であるが、121℃、20分間という苛酷な条件に耐えられる水膨潤性高分子ゲルはほとんどなかった。 Moist heat vapor sterilization no inexpensive residues device, is a highly safe sterilization method, 121 ° C., water-swellable polymer gel to withstand harsh conditions of 20 minutes was little. 放射線滅菌は残留物がなく安全性の高い方法であるが、照射装置が高価であること、放射線により水から生じるラジカルが化学結合を切断したり架橋反応を起こしたりして、水膨潤性高分子ゲルの性質が変化するなどの問題があった。 Although radiation sterilization is the residue without highly secure manner, it irradiation apparatus is expensive, radicals generated from water by or causing cleaves chemical bonds or crosslinking reaction by radiation, water-swellable polymer the nature of the gel there was a problem of such changes.

【0008】また、寒天、アガロース、カラゲニン等からなるゲルは、機械的強度が弱く、また加熱すると溶解するので医療用具の構成材料としては適していない。 Further, agar, agarose, a gel consisting of carrageenan or the like, mechanical strength is weak, also not suitable as a constituent material of the medical device so dissolves upon heating. 化学的に架橋したデキストランやセルロースのゲルは加熱により溶解することはないが、架橋処理により硬くなり、含水率も低下して生体親和性が悪くなる。 Although never chemically crosslinked dextran or cellulose gel dissolved by heating, hardens by crosslinking treatment, biocompatibility becomes worse the water content decreases. また、架橋処理により着色したり不透明となる。 Further, the opaque or colored cross-linking treatment. カルシウムイオンで架橋されたアルギン酸ゲルは架橋度が高いと半透明となり、また体液や生理的塩類溶液中でイオン交換により徐々に溶解するという問題点がある。 Alginate gels cross-linked with calcium ions becomes higher degree of crosslinking and translucent, also there is a problem that gradually dissolved by ion exchange with body fluids or physiological saline solution. また、機械的強度が弱く、破砕され易い。 Further, the mechanical strength is weak, easily crushed. キチンやキトサンは体液や細菌感染により溶解するという問題がある。 Chitin and chitosan there is a problem that is dissolved by body fluids and bacteria infection.

【0009】創傷被覆材として用いられるポリウレタンフィルムは透明性と閉鎖性は高いものの水吸収性が無いので滲出液が多い創傷には使用できない。 [0009] Polyurethane films used as a wound dressing can not be used for wound exudate is large since there is no water-absorbing high closing transparency and. ハイドロコロイド、アルギン酸塩繊維からなる不織布およびポリビニルアルコールスポンジ等は、いずれも滲出液貯溜性はあるが不透明なので創部の観察ができない。 Hydrocolloids, nonwoven and polyvinyl alcohol sponge made of alginate fibers are both is not possible wounds observations so opaque exudate reservoir properties. さらにハイドロコロイド系被覆では、生体分解性がないためその主要成分が組織中に長期間残存して、慢性炎症を引き起こすという問題もある(Young,S.R.et a In addition hydrocolloid based dressing, its main component since there is no biological degradability remains long time in the tissue, there is also a problem that causes chronic inflammation (Young, S.R.et a
l. l. ,J. , J. Invest. Invest. Comparison o Comparison o
f the effect of semi−occl f the effect of semi-occl
usive polyurethanedressin usive polyurethanedressin
gs and hydrocolloid dress gs and hydrocolloid dress
ingson dermal repair:1. ingson dermal repair: 1. Ce Ce
llular changes. llular changes. Dermatol. Dermatol. ,
97,586−592(1991))。 97,586-592 (1991)). ポリエチレングリコールやポリアクリルアミドの水膨潤性高分子ゲルは透明性が良好なものもあるが、やはり合成高分子なので生体分解性がなく、ハイドロコロイド系被覆の場合と同様に創部に残存して慢性炎症反応を生じるという心配がある。 Polyethylene glycol and polyacrylamide water-swellable polymer gel and some is good transparency, but no biodegradable so also synthetic polymers, chronic inflammation remained in the wound as in the hydrocolloid based dressing reaction there is a concern that cause. さらに両者の原料のモノマーは毒性が強く、モノマーの残存や分解成分による毒性発現の心配がある。 Further monomers of both raw materials are highly toxic, there is a fear of toxicity due to the residual and cracking components of the monomers.

【0010】また、ポリウレタンフィルムやハイドロコロイドなどの閉鎖性被覆材は、治癒促進効果に優れているものの、一度細菌感染を起こすと湿潤環境が細菌にとっても好適な培地となるため、急激に増殖して重度の感染をひきおこす危険性がある。 Moreover, it occlusive dressing such as polyurethane film or hydrocolloid, although excellent in promoting healing effect, once to cause bacterial infection if wet environment is suitable medium also for bacteria, rapidly growing there is a risk of causing severe infection. これに対しては抗菌剤の全身投与や、局所投与が行われるが、細菌感染創は一般に血行が悪く全身投与では有効量の抗菌剤が創部に到達せず、また局所投与では抗菌剤の細胞毒性による副作用のおそれもある。 Systemic administration or antimicrobial agents, on the other hand, although topical administration is made, bacterial infected wounds generally not reach the wound an effective amount of antimicrobial agent in the blood circulation is poor systemic administration, also antimicrobial agents in topical cell side effects of you it is also due to toxicity.

【0011】生体組織接着剤として用いられているシアノアクリレート系の重合性接着剤はモノマーの細胞毒性が強いこと、フィブリン糊は生体由来であるので安定な供給と性能の維持が難しいことおよびウイルス感染の心配があることなどの問題がある。 [0011] It biological tissue adhesive as polymerizable adhesive cyanoacrylate being used has a strong cytotoxic monomer, fibrin glue is difficult to maintain a stable supply and performance because it is derived from a living organism and virus infection there is a problem such as that there is a worry of. 癒着防止材として用いられているオキシセルロースメッシュは布状であるので操作性が悪く、また生体親和性も良くないので、慢性炎症反応を引き起こすなどの問題がある。 Oxycellulose mesh used as antiadhesive material has poor operability because a cloth, and since biocompatibility not good, there are problems such as causing chronic inflammatory reaction. 特開昭51−3 JP-A-51-3
4978号公報に開示されている製造方法により製造される、止血剤として好適なコハク酸またはグルタル酸で架橋したアミロース、デキストランまたはプルランは、 Produced by the process disclosed in 4978 JP, amylose cross-linked with a suitable succinic acid or glutaric acid as a hemostatic agent, dextran or pullulan,
固形物であって柔軟性がないので、該明細書に示されるごとく粉砕した粉末、あるいはスポンジとせざるを得ない。 Since there is no flexibility in a solid powder was milled as shown in 該明 Saisho, or forced sponge. 従って創傷被覆材や癒着防止材に要求されるような透明性と閉鎖性を満足させることはできない。 Therefore it is not possible to satisfy the closure property and transparency as required in the wound dressing or adhesion barrier. さらに、 further,
架橋に用いられているエステル結合は水溶液中あるいは体液中で容易に加水分解され、水膨潤性ゲルとしての性質が時間とともに損なわれる。 Ester bonds used in the crosslinking is easily hydrolyzed in aqueous solution or bodily fluids, impaired with time nature of an water-swellable gel. また、溶出物が多くなり、安全性の点でも問題がある。 Further, the number eluate also has a problem in terms of safety. 実際に、これらは止血材として短時間の使用を目的としたもので数日から数ヵ月の連続使用に耐えうるものではない。 In fact, they are not capable of withstanding continuous use of a few months from several days intended use of short as hemostatic material.

【0012】キトサンとN−ヒドロキシコハク酸イミドエステル化合物とを反応させて得られる架橋キトサンが知られており(特開平2−180903号公報)、人工皮膚などの医薬関連分野に有用であると期待される。 [0012] It is known chitosan and crosslinked chitosan obtained by reacting an N- hydroxysuccinimide ester compound (JP-A-2-180903), and are useful in the pharmaceutical-related fields such as artificial skin expected It is. 該架橋キトサンは実施例によれば、破断伸び率が30%以下と硬く脆いものであり、創傷被覆材や癒着防止材に要求される伸縮性や柔軟性を満足することは困難である。 According to the crosslinked chitosan embodiment is intended elongation at break hard and brittle and less than 30%, it is difficult to satisfy the stretchability and flexibility required in the wound dressing or adhesion barrier.
また、これらも架橋剤中にエステル結合が存在するので、水溶液中あるいは体液中で加水分解を受け、溶出物を生じるとともに、水膨潤性高分子ゲルの性質が劣化する。 Moreover, since these also ester bonds are present in the crosslinking agent, undergo hydrolysis in aqueous solution or bodily fluids, with resulting eluate, the nature of the water-swellable polymer gel is deteriorated. また、キチン誘導体を硫酸またはアスパラギン酸、 Further, sulfuric acid or aspartic acid chitin derivatives,
グルタミン酸で一時的にイオン架橋した粘弾性流体を用いる組織の癒着予防法が知られている(特開平3−16 Adhesion prevention of tissue using a temporary ionically cross-linked viscoelastic fluid with glutamic acid has been known (JP-A-3-16
7201号公報)が、これらは可逆的なイオン結合なので、体液等の高濃度の塩を含む溶液と接触すること等により、水膨潤性高分子ゲルの性質が劣化する。 7201 JP) is, because these are reversible ionic binding, such as by contact with a solution containing a high concentration of salts such as body fluid, the nature of the water-swellable polymer gel is deteriorated. このように、従来知られている水膨潤性高分子ゲルの中には、各種の医療用途に必要な性質を全て具備し、しかも生体親和性を有するものは見当たらないのが現状である。 Thus, in the water-swellable polymer gel conventionally known, comprising all the necessary properties for various medical applications, yet at present, I do not see those having biocompatibility.

【0013】一方、高分子ゲルは医療分野において上記のような各種用途に用いられているばかりでなく、近年では、高分子ゲルに薬剤を含有させたドラッグデリバリーシステム(DDS)や薬物を含有させた創傷被覆等が提案されている。 Meanwhile, the polymer gel is not only used for various applications, such as described above in the medical field, in recent years, is contained drug delivery system (DDS) or drug which contains the agent to the polymer gel wound dressings and the like have been proposed a. 例えば、薬剤を封入した脂質微粒子をOHラジカルにより分解する架橋ヒアルロン酸ゲルに含有させたもの(由井他、Polymer Prepr For example, the lipid microparticles encapsulating agent that is contained in the decomposed crosslinked hyaluronic acid gel by OH radicals (Yui other, Polymer Prepr
ints,Japan(1993)42(8),p. ints, Japan (1993) 42 (8), p. 3
186−3188参照)や、セルロース粉末に−Phe 186-3188 see) and, -Phe cellulose powder
−、−Tyr−、−Ile−Tyr−、−Gly−Il -, - Tyr -, - Ile-Tyr -, - Gly-Il
e−Tyr−を介してpholcodineを結合させたもの(F.Lapicque & E.Dellac Those obtained by binding pholcodine via e-Tyr- (F.Lapicque & E.Dellac
herie,J Controlled Releas herie, J Controlled Releas
e(1986)4,p. e (1986) 4, p. 39−45参照)等がその例として挙げられる。 39-45 reference) and the like as an example. また、薬物を含有させた創傷被覆材としては、傷手当て具を構成している不溶性アルギン酸塩と可溶性アルギン酸塩との混合アルギン酸塩からなる傷接触パッドに、抗微生物剤や局部麻酔剤等の薬剤を含有させたものが知られている(特表平4−501067号公報)。 As the wound dressing which contains a drug, a wound-contacting pad of mixed alginate insoluble alginate salt and a soluble alginate constituting the wound dressing tool, agents such as antimicrobial agents and local anesthetics It is known in which is contained (Japanese Patent Kohyo 4-501067). また、少なくとも表面に創傷治癒を促進するペプチドを共有結合し、かつ殺菌剤を含有させたヒドロゲルを構成材料とする創傷用被覆物も記載されている(特表平6−500028号公報)。 Also described at least the surface to covalently bond the peptide to promote wound healing, and also wound coatings and hydrogel structure material containing a bactericidal agent (JP Kohyo 6-500028).

【0014】しかし、薬剤を封入した脂質微粒子をOH [0014] However, the lipid particles encapsulating the drug OH
ラジカルにより分解される架橋ヒアルロン酸ゲルに含有させたドラッグデリバリーシステムでは、OHラジカルの発生する部位でヒアルロン酸ゲルが分解され、薬剤を封入した脂質微粒子が放出されるが、OHラジカルが多量に発生するのは、炎症の一時期および炎症部位のごく一部に限定されるため、適用対象疾患がかなり限定される。 The drug delivery system which contains the crosslinked hyaluronic acid gel that is decomposed by radicals, is hyaluronic acid gel is decomposed at the site of occurrence of OH radicals, but drugs encapsulated lipid microparticles are released, OH radicals large amount generated for, since is limited to a small portion of one point and inflammatory sites of inflammation, application target disease is very limited. また、脂溶性が高くない薬剤は脂質微粒子に封入されないので、使用できる薬剤もかなり限定される。 Moreover, the drug lipophilic not high because it is not encapsulated in a lipid particle, drugs that can be used is also very limited. さらに、脂質微粒子に封入された薬剤は、脂質微粒子から外部の水相に徐々に放出されるので、病巣部位以外においても薬剤が徐々に放出されてしまい、副作用のおそれがある。 Furthermore, drugs that are encapsulated in lipid microparticles, since it is slowly released from the lipid particles to an external aqueous phase, in addition lesion site will be drug gradually release, have side effects of concern. さらに、セルロース粉末に-Phe- 、-Tyr- 、-Ile Furthermore, -Phe- cellulose powder, -Tyr-, -Ile
-Tyr- 、-Gly-Ile-Tyr- を介してpholcodineを結合させたドラッグデリバリーシステムでは、酵素の存在により、セルロース粉末に固定化された薬剤は一応放出されはするが、薬剤の放出量は固定化量の1/1000〜1 -Tyr-, the drug delivery system bound with pholcodine via -Gly-Ile-Tyr-, the presence of an enzyme, immobilized drug cellulose powder is tentatively released is but, release of drug of the immobilized amount of 1 / 1,000 to
/20000と非常に少なく、実用的でない。 / 20000 the very least, it is not practical.

【0015】特表平4−501067号公報に記載されている創傷被覆材では、抗微生物剤や局部麻酔剤等の薬剤をゲルのパッドに含有させ得ることが記載されているが、この薬剤はゲルに固定化されていないので、常に放出されており、副作用のおそれがある。 [0015] In the wound dressing disclosed in JP Hei 4-501067, it is described that may drugs such as antimicrobial agents and local anesthetic is contained in the gel pad, the drug is since not immobilized gel, always been released, there is a side effect of fear. 特表平6−50 Hei 6-50
0028号公報の創傷用被覆物では、表面に創傷治癒促進ペプチドが化学結合されており、この結合は切断されないので、創傷用被覆物に接触している部位でしか効果が発現しない。 In 0028 No. wound coating publications, wound healing promoting peptides are chemically coupled to the surface, since this bond is not cleaved, the effect appears only in a portion in contact with the wound coating. また、殺菌剤を構成成分のヒドロゲルに含有させた場合には、殺菌剤が常に放出されるため、副作用が発現するおそれがある。 Further, when it is contained in the hydrogel constituents of fungicides, because fungicide is always released, there is a possibility that adverse reactions. このように、従来知られている医療用高分子ゲルでは、目的の病巣部位においてのみ、治療に有効な量の薬剤が放出されるようなものは得られておらず、より安全な治療システムが求められている。 Thus, in the medical polymer gels conventionally known, only at the lesion site of interest, such as has not been obtained as an effective amount of the drug is released in the treatment, a more safe treatment system It has been demanded.

【0016】そこで、本発明の第1の目的は、酵素が産生される病巣部位においてのみ、治療に有効な量の薬剤を放出させることが可能な医療用高分子ゲルを提供することにある。 [0016] Therefore, a first object of the present invention is to provide an enzyme only in the focal site produced, the medical polymer gel thereby releasing a therapeutically effective amount of the drug. さらに、本発明の第2の目的は、透明性が高く、生体親和性と耐熱性、安定性に優れており、創傷被覆材、生体組織接着剤、癒着防止材等の各種の医療用材料の構成成分として有用な水膨潤性高分子ゲルを提供することにある。 Further, a second object of the present invention has high transparency, biocompatibility and heat resistance, has excellent stability, wound dressings, biological tissue adhesives, various medical materials such as antiadhesive material It is to provide useful water-swellable polymer gel as a component.

【0017】 [0017]

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課題を解決すべく鋭意研究を続け、第1の目的に対しては、酵素反応で主鎖が切断され得る分解性基およびスペーサーを介して、薬剤が水膨潤性高分子ゲルに固定化された医療用高分子ゲルを提供することにより達成されることを発見した。 The present inventors have SUMMARY OF THE INVENTION continues intensive studies to solve the above problems, for the first object, decomposable group and the spacer main chain can be cleaved by the enzymatic reaction through the drug was found to be achieved by providing an immobilized medical polymer gel water-swellable polymer gel. さらに、第2の目的に対しては、分子内にカルボキシル基を有する多糖類を、ジアミノアルカンまたはその誘導体で共有結合架橋して得られる水膨潤性高分子ゲルを提供することによって達成されることを発見した。 Further, with respect to the second object, the polysaccharide having a carboxyl group in the molecule, be achieved by providing a covalent cross-linked water-swellable polymer gel obtained in diaminoalkane or a derivative thereof It was discovered. 本発明は、これらの発見に基づきさらに研究を進めて完成するに至ったものである。 The present invention has been led to completion on the further conducting research based on these findings.

【0018】即ち、本発明の要旨は (1) 子内にカルボキシル基を有する多糖類を、下記の一般式(II) R 1 HN−(CH 2 ) n −NHR 2 (II) (式中、nは2から18の整数を表し、R 1およびR 2 [0018] That is, the gist of the present invention is a polysaccharide having a carboxyl group in (1) minute child, the general formula (II) R 1 HN- (CH 2) n -NHR 2 (II) ( wherein , n represents an integer of from 2 to 18, R 1 and R 2
はそれぞれ水素原子または−COCH(NH 2 )−(C Each a hydrogen atom or -COCH is (NH 2) - (C
24 −NH 2で表される基を示す。 H 2) a group represented by 4 -NH 2. )で表される架橋性試薬の塩で共有結合架橋して得られる水膨潤性高分子ゲルに関する。 ) Was covalently crosslinked represented by crosslinking reagent salt at about the water-swellable polymer gel obtained.

【0019】以下に本発明について詳細に説明する。 [0019] The present invention will be described in detail below. 本発明の医療用高分子ゲルは、一般式(I)、A−B−C Medical polymer gel of the present invention have the general formula (I), A-B-C
−Dにより表される結合形態により、薬剤が、酵素反応で主鎖が切断され得る分解性基およびスペーサーを介して、水膨潤性高分子ゲルに固定化されたものである。 The bonding mode represented by -D, drugs, via a degradable group and the spacer main chain can be cleaved by an enzyme reaction, which has been immobilized on the water-swellable polymer gel. 式中、Aは水膨潤性高分子ゲルを表し、Bはスペーサーを表し、Cは酵素反応で主鎖が切断され得る分解性基を表し、Dは薬剤を表す。 In the formula, A represents a water-swellable polymer gel, B represents a spacer, C is represent decomposable group the main chain can be cleaved by an enzymatic reaction, D is representative of the drug. Aの水膨潤性高分子ゲルは、血液、血漿、細胞間液等の体液、または生理食塩水等の体液類似液に膨潤するものであって、生体親和性を有するものであれば特に限定されない。 Water-swellable polymer gel of A, blood, plasma, be one which swells fluid similar liquid body fluids or physiological saline, and the like of the intercellular fluid and the like, not particularly limited as long as it has biocompatibility . 該高分子ゲルを構成する高分子素材としては、例えば、アルギン酸、キチン、 As the polymer material constituting the polymer gel, for example, alginate, chitin,
キトサン、ヒアルロン酸、セルロースおよびこれらの誘導体等の多糖類、ゼラチン、コラーゲン、カゼイン、アルブミン等の蛋白質類、ポリアスパラギン酸、ポリグルタミン酸、ポリリジン等のポリペプチド類、ポリビニルアルコール(PVA)、エチレンビニルアルコール共重合体類、ポリビニルピロリドン(PVP)、ポリアクリル酸およびこれらの誘導体等の合成高分子類を挙げることができる。 Chitosan, proteins such as polysaccharides, gelatin, collagen, casein, albumin, such as hyaluronic acid, cellulose and derivatives thereof, polyaspartic acid, polyglutamic acid, polypeptides such as polylysine, polyvinyl alcohol (PVA), ethylene vinyl alcohol copolymers, polyvinyl pyrrolidone (PVP), polyacrylic acid and synthetic polymers such as these derivatives. これらの高分子素材の化合物単独または2 These compounds of the polymeric material alone or 2
種類以上の混合物を、共有結合、疎水結合、水素結合、 The kinds or more thereof, covalent, hydrophobic bond, hydrogen bond,
静電結合等で架橋することにより、水膨潤性高分子ゲルが得られる。 By crosslinking by electrostatic coupling or the like, water-swellable polymer gel is obtained. 例えば、アルギン酸、ポリアクリル酸、ポリアスパラギン酸、ポリグルタミン酸、およびこれらの誘導体等のカルボキシル基を有する高分子素材では、C For example, alginic acid, polyacrylic acid, polyaspartic acid, polyglutamic acid, and the polymer material having a carboxyl group such as a derivative thereof, C
++イオン等の多価金属イオンを添加することにより、 by adding a polyvalent metal ion such as a ++ ions,
静電結合架橋ゲルが得られる。 Electrostatic coupling crosslinked gel is obtained. 同様に、これらのカルボキシル基を有する高分子素材と、キトサン、ポリリジン等のアミノ基を有する高分子素材を混合することによっても、静電結合架橋ゲルが得られる。 Similarly, a polymer material having these carboxyl groups, chitosan, by mixing the polymer material having an amino group of polylysine, capacitive coupling crosslinked gel is obtained. ゼラチン、PVA Gelatin, PVA
およびこれらの誘導体等の高分子素材では、これらの水溶液またはこれらの有機溶媒の溶液を冷却することにより、水素結合架橋ゲルが得られる。 And in the case of a polymer material such as derivatives thereof, by cooling these aqueous solutions or solutions of these organic solvents, a hydrogen bond crosslinked gel is obtained. エチレンビニルアルコール共重合体、ポリアクリル酸およびこれらの誘導体等の、水混和性有機溶媒に溶解する高分子素材の場合は、水混和性有機溶媒に溶解して得られた溶液を水中に投入することにより水素結合・疎水結合架橋ゲルが得られる。 Ethylene-vinyl alcohol copolymer, such as polyacrylic acid and derivatives thereof, in the case of a polymer material which dissolves in a water-miscible organic solvent, introducing a solution obtained by dissolving in a water-miscible organic solvent in water hydrogen bonding, hydrophobic bond crosslinked gel is obtained by. アルギン酸、ヒアルロン酸、キトサン、蛋白質、 Alginic acid, hyaluronic acid, chitosan, protein,
ポリリジン、ポリアスパラギン酸、ポリグルタミン酸、 Polylysine, poly-aspartic acid, poly-glutamic acid,
ポリアクリル酸、PVAおよびこれらの誘導体等の反応性基を有する高分子素材では、リジンのオリゴマー、エチレンジアミン、ジアミノアルカン誘導体、グリセリン、コハク酸、シュウ酸等の多官能性化合物と共有結合を形成させることにより、共有結合架橋ゲルが得られる。 Polyacrylic acid, a polymer material having PVA and reactive groups such as these derivatives, oligomers of lysine, ethylenediamine, diamino alkane derivatives, glycerol, succinic acid, to form a covalent bond with a polyfunctional compound such as oxalic acid it makes covalently crosslinked gel is obtained. さらに、これらの高分子素材では、アルキル化オリゴペプチド、脂肪酸、脂肪族アミン、脂肪族アルコール、およびこれらの誘導体等の疎水性化合物を結合することにより、疎水結合架橋ゲルが得られる。 In addition, these polymeric materials, alkylated oligopeptide, fatty acids, fatty amines, fatty alcohols, and by binding a hydrophobic compound such as a derivative thereof, hydrophobic bond crosslinked gel is obtained. ポリアクリル酸、PVA、PVP、およびこれらの誘導体等の合成高分子素材では、これらの重合の際に、ビスアクリルアミド、エチレングリコールビスメタクリレート等の多官能性モノマーを共重合させることにより、共有結合架橋ゲルが得られる。 Polyacrylic acid, PVA, PVP, and a synthetic polymer material such as derivatives thereof, during the polymerization, bisacrylamide, by copolymerizing a polyfunctional monomer such as ethylene glycol bis methacrylate, covalent cross-linking gel is obtained. なかでも、アルギン酸などの多糖類を高分子素材とした疎水結合架橋ゲル、静電結合架橋ゲル、共有結合架橋ゲル、PVAを高分子素材とした水素結合架橋ゲル、疎水結合架橋ゲルが好ましい。 Among them, hydrophobic bond crosslinked gel the polysaccharide was a polymer material such as alginic acid, an electrostatic bond crosslinked gel, covalently crosslinked gel, hydrogen bond crosslinked gel of PVA was polymer material, hydrophobic bond crosslinked gel is preferred. 特に、分子内にカルボキシル基を有する多糖類を、下記の一般式(II) R 1 HN−(CH 2 ) n −NHR 2 (II) (式中、nは2から18の整数を表し、R 1およびR 2 In particular, the polysaccharide having a carboxyl group in the molecule represented by the following general formula (II) R 1 HN- (CH 2) n -NHR 2 (II) ( wherein, n represents an integer of from 2 to 18, R 1 and R 2
はそれぞれ水素原子または−COCH(NH 2 )−(C Each a hydrogen atom or -COCH is (NH 2) - (C
24 −NH 2で表される基を示す。 H 2) a group represented by 4 -NH 2. )で表される架橋性試薬またはその塩で共有結合架橋して得られる水膨潤性高分子ゲル(以下、これを水膨潤性高分子ゲル(I ) Represented by crosslinking reagents or covalent cross-linking to the resulting water-swellable polymer gel in a salt thereof (hereinafter, this water-swellable polymer gel (I
I)と略記することがある。 There may be abbreviated as I). )が好ましい。 ) Is preferable. この水膨潤性高分子ゲル(II)は、後記するように共有結合架橋ゲルが主体であり、機械的強度が強く、安定性、耐熱水性に優れているため滅菌処理等が容易であるばかりでなく、含水性にも優れているため生体親和性が特によく、 The water-swellable polymer gel (II) is a principal covalently crosslinked gel as described later, strongly mechanical strength, stability, only it is easy sterilization or the like because it is excellent in hot water resistance without biocompatibility because it is excellent in water resistance is particularly good,
また透明性にも優れているため創傷部位の観察が可能である等のかずかずのメリットを有するからである。 And because having numerous benefits etc. can be observed in the wound site because of excellent transparency.

【0020】高分子ゲルの構成素材としてPVAを用いる場合には、平均重合度1500以上、ケン化度60〜 [0020] When using the PVA as a constituent material of the polymer gel has an average polymerization degree of 1500 or more and a saponification degree 60
100%のものが好ましい。 Preferably from 100%. 得られるゲルの強度の面から、平均重合度が4000以上のものが好ましく、平均重合度が10000以上のものがさらに好ましい。 In view of the strength of the resulting gel, preferably it has a more than 4000 average polymerization degree, average polymerization degree of not less than 10000 more preferred. 得られるゲルの強度の面から、ダイアッド表示によるシンジオタクティシティーが50%以上のものが好ましく、5 In view of the strength of the resulting gel, syndiotacticity by diad display thereof is preferably 50% or more, 5
3%以上のものがより好ましい。 3% or more is more preferable.

【0021】細胞や組織の表面は、親水性の糖鎖の存在により多量の水を含んだゲル様の構造を持つ。 [0021] surface of a cell or tissue with a gel-like structure that contains a large amount of water due to the presence of hydrophilic carbohydrate. 一方水膨潤性高分子ゲルも多量の水を含み、生体と類似した構造を持つので優れた生体親和性を示す。 On the other hand water-swellable polymer gel also contains a large amount of water, it shows excellent biocompatibility since they have a similar structure and biological. しかし、水膨潤率が高すぎるとゲルの物理的な強度が低下する。 However, the water swelling ratio is too high physical strength of the gel is reduced. 従って、 Therefore,
Aの水膨潤性高分子ゲルの膨潤率は、ゲルを構成する高分子素材の乾燥重量1に対して、平衡膨潤後の吸水重量として1〜1000の範囲が好ましく、10〜200の範囲がより好ましい。 Swelling of the water swellable polymer gel of A, relative to the dry weight 1 of the polymer material constituting the gel is preferably in the range of 1 to 1000 as water weight after equilibrium swelling, and more in the range of 10 to 200 preferable.

【0022】Cの酵素反応で主鎖が切断され得る分解性基としては、病巣部位に存在する酵素、例えば、エラスターゼ、カテプシンG、カテプシンE、カテプシンB、 Examples of the decomposable group backbone at C the enzymatic reaction can be cut, an enzyme present in the lesion site, for example, elastase, cathepsin G, cathepsin E, cathepsin B,
カテプシンH、カテプシンL、トリプシン、ペプシン、 Cathepsin H, cathepsin L, trypsin, pepsin,
キモトリプシン、γ- グルタミルトランスフェラーゼ(γ−GTP)等のペプチド加水分解酵素、ホスホリラーゼ、ノイラミニダーゼ、デキストラナーゼ、アミラーゼ、リゾチーム、オリゴサッカラーゼ等の糖鎖加水分解酵素、アルカリホスファターゼ、エンドリボヌクレアーゼ、エンドデオキシリボヌクレアーゼ等のオリゴヌクレオチド加水分解酵素等、またはこれら以外の病巣部位に存在する酵素によって特異的に主鎖が切断されるものであれば、特に限定されるものではない。 Chymotrypsin, .gamma. Guru Tamil transferase (γ-GTP) peptide hydrolases such as phosphorylase, neuraminidase, dextranase, amylase, lysozyme, carbohydrate hydrolyzing enzymes such oligosaccharase hydrolases, alkaline phosphatase, endoribonuclease, endodeoxyribonuclease oligonucleotide hydrolases such as equal, or as long as it specifically backbone by enzymes present in lesion sites other than these are cut, is not particularly limited. 該分解性基としては、例えば、-Arg- 、-Ala- 、-Ala(D)-、-Val- 、-L Examples of the decomposable group, for example, -Arg-, -Ala-, -Ala (D) -, - Val-, -L
eu- 、-Lys- 、-Pro- 、-Phe- 、-Tyr- 、-Glu- 等のアミノ酸残基、または-Ile-Glu-Gly-Arg- 、-Ala-Gly-Pro eu-, -Lys-, -Pro-, -Phe-, -Tyr-, amino acid residues such -Glu- or -Ile-Glu-Gly-Arg-,, -Ala-Gly-Pro
-Arg- 、-Arg-Val-(Arg) 2 -、-Val-Pro-Arg- 、-Gln-Ala -Arg-, -Arg-Val- (Arg) 2 -, - Val-Pro-Arg-, -Gln-Ala
-Arg- 、-Gln-Gly-Arg- 、-Asp-Pro-Arg- 、-Gln-(Arg) -Arg-, -Gln-Gly-Arg-, -Asp-Pro-Arg-, -Gln- (Arg)
2 -、-Phe-Arg- 、 -(Ala) 3 - 、-(Ala) 2 -、-Ala-Ala(D) 2 -, - Phe-Arg-, - (Ala) 3 -, - (Ala) 2 -, - Ala-Ala (D)
-、-(Ala) 2 -Pro-Val-、-(Val) 2 -、-(Ala) 2 -Leu-、-Gly- -, - (Ala) 2 -Pro -Val -, - (Val) 2 -, - (Ala) 2 -Leu -, - Gly-
Leu- 、-Phe-Leu- 、-Val-Leu-Lys- 、-Gly-Pro-Leu-Gl Leu-, -Phe-Leu-, -Val-Leu-Lys-, -Gly-Pro-Leu-Gl
y-Pro- 、-(Ala) 2 -Phe-、-(Ala) 2 -Tyr-、-(Ala) 2 -His y-Pro-, - (Ala) 2 -Phe -, - (Ala) 2 -Tyr -, - (Ala) 2 -His
-、-(Ala) 2 -Pro-Phe-、-Ala-Gly-Phe- 、-Asp-Glu- 、- -, - (Ala) 2 -Pro -Phe -, - Ala-Gly-Phe-, -Asp-Glu-, -
(Glu) 2 -、-Ala-Glu- 、-Ile-Glu- 、-Gly-Phe-Leu-Gly- (Glu) 2 -, - Ala -Glu-, -Ile-Glu-, -Gly-Phe-Leu-Gly-
、-(Arg) 2 -等の2〜6量体のオリゴペプチド類、D− , - (Arg) 2 - oligopeptides of 2-6 mers such as, D-
グルコース、N−アセチルガラクトサミン、N−アセチルノイラミン酸、N−アセチルグルコサミン、N−アセチルマンノサミンまたはこれらのオリゴ糖類、オリゴデオキシアデニン、オリゴデオキシグアニン、オリゴデオキシシトシン、オリゴデオキシチミジンのオリゴデオキシリボ核酸類、オリゴアデニン、オリゴグアニン、オリゴシトシン、オリゴウリジン等のオリゴリボ核酸類等を挙げることができる。 Glucose, N- acetylgalactosamine, N- acetylneuraminic acid, N- acetylglucosamine, N- acetylmannosamine or these oligosaccharides, oligo deoxyadenine, oligodeoxynucleotides guanine, oligodeoxynucleotides cytosine, oligodeoxyribonucleic acids of oligodeoxythymidine kind, oligo-adenine, mention may be made of oligo-guanine, cytosine oligo, the Origoribo nucleic acids such as oligo-uridine, and the like. なかでも、酵素による切断のされ易さや、体内に入った場合の安全性等の観点から、アミノ酸または2〜6量体のオリゴペプチドを用いるのが好ましく、-Val-Pro-Arg- 、-(Ala) 2 -Pro-Val-、-Ala-Gly Among them, it is or ease of cleavage by enzymes, from the viewpoint of safety and the like in the case of entry into the body, it is preferable to use oligopeptide amino acid or 2 to 6 mer, -Val-Pro-Arg-, - ( Ala) 2 -Pro-Val -, - Ala-Gly
-Phe- 、-(Ala) 3 -、-Asp-Glu- 、-(Ala) 2 -Phe-、-(Ala) -Phe-, - (Ala) 3 - , - Asp-Glu-, - (Ala) 2 -Phe -, - (Ala)
2 -Pro-Phe-、-Gly-Phe-Leu-Gly- 、-(Arg) 2 -、-Phe-Arg 2 -Pro-Phe -, - Gly -Phe-Leu-Gly-, - (Arg) 2 -, - Phe-Arg
- のオリゴペプチドを用いるのがより好ましい。 - it is more preferable to use the oligopeptide.

【0023】Bのスペーサーは、酵素と前記の分解性基との反応性を制御するものであり、本質的にスペーサー自体は酵素によって分解されない。 The spacer B is for controlling the reactivity of the decomposable group of the enzyme, essentially the spacer itself is not degraded by the enzyme. 病巣部位に存在する酵素が分解性基と適切に反応し得るように作用するものであれば、特にスペーサーの構造は限定されないが、スペーサーの長さは分解性基と酵素との反応性に直接的な影響を与えるので重要である。 As long as the enzyme present in the lesion site acts so as to properly react with the degradable group, in particular although the structure of the spacer is not limited, the length of the spacer is directly reactive with decomposable group and the enzyme it is important because it gives the effect. スペーサーを使用しない場合には、分解性基の分解反応性が著しく低下し、治療に有効な量の薬剤が本発明の医療用高分子ゲルから放出され難くなる。 When not using a spacer, the decomposition reactivity significantly reduced degradable group, a therapeutically effective amount of the drug is not easily released from the medical polymer gel of the present invention. 即ち、炭素原子、窒素原子および酸素原子のうち主鎖に含有されている原子の数の合計が少ない分子鎖をスペーサーとして用いる場合には、水膨潤性高分子ゲルの立体障害のため、酵素と分解性基との反応性が低下し、薬剤の放出量が減少する。 That is, in the case of using a carbon atom, a nitrogen atom and the sum is small molecular chains of number of atoms contained in the main chain of an oxygen atom as a spacer, due to steric hindrance of the water-swellable polymer gel, and the enzyme reactivity with the decomposable group is lowered, released amount of the drug is reduced. 該原子の数の合計が3個以下では、治療に有効な量の薬剤の放出は期待できない。 The total number of the atoms is 3 or less, the release of a therapeutically effective amount of the drug can not be expected. 該原子の数の合計が増大すると、酵素と分解性基との反応性が増大するが、該原子の数の合計が20個を越える場合には、スペーサーがターン構造やα- ヘリックス等の高次構造をとる場合もあり、このような高次構造をとった場合には酵素と分解性基との反応性が低下することがある。 When total number of the atoms is increased, the reaction with the enzyme-decomposable group is increased, if the total number of the atoms exceeds 20, the spacers such as turn structure or α- helix high sometimes it takes the following structure, in the case of taking such a conformation may decrease the reactivity with the decomposable group to an enzyme. さらに、該原子の数の合計が20個を越えると、スペーサー内あるいはスペーサー間の疎水性相互作用などによりスペーサーが凝集し、酵素と分解性基との反応性が低下することがある。 Furthermore, when the total number of the atoms exceeds 20, the spacer are agglomerated due hydrophobic interactions between the spacers in or spacer reactive with decomposable group and the enzyme may be reduced. また、酵素と分解性基との反応性が増大し過ぎて、不必要な量の薬剤が放出されることもある。 Moreover, excessively increasing the reactivity with the enzyme-decomposable group, sometimes unnecessary amount of drug is released. したがって、スペーサーが、炭素原子、窒素原子および酸素原子のうち主鎖に含有されている原子の数の合計が4個以上の分子鎖であるのが好ましく、4〜20個の分子鎖であるのがより好ましく、6 Accordingly, the spacer is, the it is preferred total number of atoms contained in the main chain of carbon atoms, nitrogen atoms and oxygen atoms is 4 or more molecular chain, 4 to 20 pieces of the molecular chain and still more preferably, 6
〜16個の分子鎖であるのがさらに好ましい。 Even more preferably to 16 or of the molecular chain. スペーサーとして水酸基等の極性基を有するものは、酵素と分解性基との反応性を高め、薬剤放出量を増大させる。 Those having a polar group such as a hydroxyl group as a spacer to increase the reactivity of the enzyme-degradable groups, increases the drug release amount. スペーサーが連続したメチレン鎖やエチレンオキシド鎖の場合には、酵素と分解性基との反応性が増大する。 When the methylene chain and the ethylene oxide chain spacer successive increases reactivity with the decomposable group to an enzyme. 一方、 on the other hand,
アミド基や環状基が多く含まれると、スペーサーが特定の構造に固定されるため、酵素と分解性基との反応性が減少する傾向がある。 When the amide group or a cyclic group contains a large, since the spacer is fixed to a specific structure, it tends to decrease the reactivity of the enzyme-decomposable group.

【0024】スペーサーとしては、例えば、置換基を有していてもよいメチレン鎖、エーテル結合、ペプチド結合、イミノ結合、C=C二重結合等を有していてもよい線状分子鎖を挙げることができる。 [0024] As spacer, include, for example, may methylene chain optionally having a substituent, an ether bond, a peptide bond, an imino bond, C = C double bonds such as good linear molecule chains have a be able to. 具体例としては、-C Specific examples, -C
O-(CH 2 ) 2 -CO-、-CH 2 -CO-NH-(CH 2 ) 2 -NH-CO-(CH 2 ) 2 -CO-、 O- (CH 2) 2 -CO - , - CH 2 -CO-NH- (CH 2) 2 -NH-CO- (CH 2) 2 -CO-,
-CH 2 -CH(OH)-CH 2 -NH-CO-(CH 2 ) 2 CO- 、-CH 2 -CH(OH)-CH 2 - -CH 2 -CH (OH) -CH 2 -NH-CO- (CH 2) 2 CO-, -CH 2 -CH (OH) -CH 2 -
NH-(CH 2 ) 2 -NH-CO-(CH 2 ) 2 CO- 、-NH-(CH 2 ) 2 -NH-CO-CH 2 -N NH- (CH 2) 2 -NH- CO- (CH 2) 2 CO-, -NH- (CH 2) 2 -NH-CO-CH 2 -N
H-CO-(CH 2 ) 2 -CO- 、-CO-(CH 2 ) 2 -NH-CO-CH 2 -NH-CO-(CH 2 ) H-CO- (CH 2) 2 -CO-, -CO- (CH 2) 2 -NH-CO-CH 2 -NH-CO- (CH 2)
2 -CO- 、-NH-(CH 2 ) 2 -NH-CO-CH 2 -NH-CO-(CH 2 ) 3 -CO- 、-N 2 -CO-, -NH- (CH 2) 2 -NH-CO-CH 2 -NH-CO- (CH 2) 3 -CO-, -N
H-(CH 2 ) 2 -NH-CO-(CH 2 ) 2 -NH-CO-(CH 2 ) 2 -CO-、-NH-(CH 2 ) 2 H- (CH 2) 2 -NH- CO- (CH 2) 2 -NH-CO- (CH 2) 2 -CO -, - NH- (CH 2) 2
-NH-CO-CH(CH 3 )-NH-CO-(CH 2 ) 2 -CO- 、-NH-(CH) 2 -NH-CO- -NH-CO-CH (CH 3 ) -NH-CO- (CH 2) 2 -CO-, -NH- (CH) 2 -NH-CO-
CH(CH 2 OH)-NH-CO-(CH 2 )-CO- 等を挙げることができる。 CH (CH 2 OH) -NH- CO- (CH 2) -CO- , and the like.
なかでも、-NH-(CH 2 ) 2 -NH-CO-CH 2 -NH-CO-(CH 2 ) 2 -CO- 、 Among them, -NH- (CH 2) 2 -NH -CO-CH 2 -NH-CO- (CH 2) 2 -CO-,
-CH 2 -CH(OH)-CH 2 -NH-CO-(CH 2 ) 2 CO- が好ましい。 -CH 2 -CH (OH) -CH 2 -NH-CO- (CH 2) 2 CO- is preferred.

【0025】スペーサーおよび酵素反応で主鎖が切断され得る分解性基は、通常の有機合成によって調製される。 The decomposable group backbone by a spacer and enzymatic reactions can be cleaved is prepared by conventional organic synthesis. オリゴペプチドは、ペプチドの合成において通常用いられる方法、例えば、固相合成法または液相合成法によって調製される〔例えば、日本生化学会編「続生化学実験講座2 タンパク質の化学(下)」(昭和62年5 Oligopeptides methods generally used in the synthesis of peptides, for example, be prepared by solid phase synthesis or liquid phase synthesis [e.g., Japanese Biochemical Society ed., "Continued Biochemical Experimental Course 2 protein chemistry (lower)" ( 1987 5
月20日、株式会社東京化学同人発行)第641〜69 Month 20 days, Tokyo Kagaku Dojin Co., Ltd.) No. 641-69
4頁参照〕。 See page 4]. オリゴ糖は糖鎖の合成ないし抽出において通常用いられる方法によって調製される〔例えば、日本生化学会編「新生化学実験講座3 糖質I」(1990 Oligosaccharides are prepared by methods generally used in the synthesis or extraction of a sugar chain [for example, Japanese Biochemical Society ed., "Shin Seikagaku Jikken Lecture 3 carbohydrate I" (1990
年、株式会社東京化学同人発行)第95〜140頁および第421〜438頁参照〕。 Year, Tokyo Kagaku Dojin Co., Ltd.) pp pp. 95-140 and the 421-438]. オリゴ核酸は核酸の合成ないし抽出において通常用いられる方法によって調製される〔例えば、日本生化学会編「新生化学実験講座2 Oligo nucleic acid is prepared by methods commonly used in the synthesis or extraction of nucleic acids [e.g., Japanese Biochemical Society ed., "Shin Biochemistry Experimental Course 2
核酸III 」(1992年、株式会社東京化学同人発行) Nucleic Acids III "(1992, Tokyo Kagaku Dojin Co., Ltd.)
第254〜269頁;日本生化学会編「新生化学実験講座2核酸I」(1991年、株式会社東京化学同人発行)第147〜168頁参照〕。 Pp. 254-269; Japanese Biochemical Society "New Biochemical Experiment Course 2 Nucleic Acids I" (1991, Tokyo Kagaku Dojin Co., Ltd.), pp. 147-168].

【0026】本発明に用いられるDの薬剤は、用途によって適宜選択できる。 The agent D used in the present invention can be appropriately selected depending on the application. 創傷被覆材、生体組織接着剤、癒着防止材として用いる場合には、例えば、消毒剤、抗生剤等の抗菌剤、アクトシン、プロスタグランジンE1 Wound dressings, biological tissue adhesives, when used as an adhesion inhibitory material, for example, disinfectants, antibacterial agents such as antibiotics, Akutoshin, prostaglandin E1
(PGE1 )等の血行改善薬、ステロイド、インドメタシン等の消炎鎮痛剤、形質転換成長因子(transforming (PGE1) blood circulation improving agent, such as, steroids, anti-inflammatory agents such as indomethacin, transforming growth factor (Transforming
growth factor β:TGFβ)、血小板由来成長因子(platelet-derived growth factor:PDGF)、繊維芽細胞成長因子(fibroblast growth factor:FGF) growth factor β: TGFβ), platelet-derived growth factor (platelet-derived growth factor: PDGF), fibroblast growth factor (fibroblast growth factor: FGF)
等の成長因子、ウリナスタチン、tissue inhibitor of Growth factors and the like, ulinastatin, tissue inhibitor of
metalloproteinase (TIMP)等の酵素阻害剤等が用いられる。 metalloproteinase (TIMP) inhibitors such as and the like are used. 骨補強材として用いる場合には、例えば、骨誘導因子(bone morphogenetic protein:BMP)、T When used as a bone reinforcing material, for example, osteoinductive factor (bone morphogenetic protein: BMP), T
GFβ、副甲状腺ホルモン(parathyroid hormone :P GFβ, parathyroid hormone (parathyroid hormone: P
TH)等の骨細胞成長因子、インターロイキン1(IL TH) bone cell growth factors such as interleukin 1 (IL
−1)阻害剤、ビスホスホネート、カルシトニン等の骨吸収抑制因子等が用いられる。 -1) inhibitors, bisphosphonates, bone resorption suppressors such as calcitonin can be used. 薬剤放出基材として用いる場合には、例えば、ネオカルチノスタチン、アドリアマイシン等の抗癌剤、ステロイド、非ステロイド性抗炎症剤等の抗炎症剤等が挙げられる。 When used as drug release substrate, for example, neocarzinostatin, anticancer agents adriamycin etc., steroids, anti-inflammatory agents such as nonsteroidal anti-inflammatory agents.

【0027】本発明の医療用高分子ゲルからは、病巣部位において産生される酵素の量に応じて薬剤が放出されるため、薬剤の固定化量を厳密に制御する必要はないが、病巣部位において治療効果が発現されるのに最低限必要な量以上が固定化されている必要がある。 [0027] From the medical polymer gel of the present invention, since the agent according to the amount of enzyme produced in the lesion site is released, it is not necessary to strictly control the amount of immobilized drug, lesion site above the minimum required amount of therapeutic effect is expressed in the need to be immobilized. 薬剤固定化量は水膨潤性高分子ゲルへのスペーサー導入率で制御されうる。 Drug immobilization amount can be controlled by a spacer introduction rate to the water-swellable polymer gel. スペーサー導入率が低すぎると有効な量の薬剤を固定化できないので好ましくない。 Undesirably spacer introduction rate can not immobilize an effective amount of the drug is too low. 一方、スペーサー導入率が高すぎると水膨潤性高分子ゲルの性質が変化するため好ましくない。 Meanwhile, it is not preferable because the spacer introduction rate is too high, the properties of the water-swellable polymer gel changes. したがって、水膨潤性高分子ゲルへのスペーサー導入率は、水膨潤性高分子ゲル1ml Accordingly, the spacer introduction rate to the water-swellable polymer gel, water-swellable polymer gel 1ml
あたり0. 05μmol以上であることが好ましく、 It is preferably per 0. 05μmol more,
0. 2μmol以上50μmol以下であることがさらに好ましい。 It is further preferred 0. 2 [mu] mol or more 50μmol or less. 水膨潤性高分子ゲルへのスペーサー導入率は、例えば中間生成物のアミノ基の量をニンヒドリン法(Sarin, VKet al., Anal. Biochem., 117, 147-157 Spacer rate of introduction of water-swellable polymer gel, for example, the amount of amino groups of the intermediate product ninhydrin method (Sarin, VKet al., Anal. Biochem., 117, 147-157
(1981)参照)で定量することによって測定しうる。 It may be measured by quantifying at (1981)).

【0028】薬剤を、酵素反応で主鎖が切断され得る分解性基およびスペーサーを介して、水膨潤性高分子ゲルに固定化させる方法としては、共有結合による方法が好ましく、固定化酵素、アフィニティクロマトグラフィー等で通常用いられている公知の活性化方法および反応方法を用いることができる。 [0028] The drug, through a decomposable group and the spacer backbone in the enzymatic reaction can be cut, as a method for immobilizing a water-swellable polymer gel is preferably a method by covalent, immobilized enzymes, affinity It may be any known method of activation and reaction methods commonly used in chromatography. 例えば、1−エチル−3− For example, 1-ethyl-3-
(3−ジメチルアミノプロピル)−カルボジイミド塩酸塩、ジシクロヘキシルカルボジイミド等の縮合剤を用いた脱水縮合反応、アルカリ触媒を用いた脱炭酸反応、エポキシ基のアンモノリシス反応、酸無水物のアンモノリシス反応、エステル交換反応等を挙げることができる。 (3-dimethylaminopropyl) - carbodiimide hydrochloride, condensing agent dehydration condensation reaction using such dicyclohexylcarbodiimide, decarboxylation reaction using an alkali catalyst, ammonolysis reaction of epoxy groups, ammonolysis reaction of the acid anhydride, ester exchange reaction and the like can be given.
酵素で主鎖が切断され得る分解性基と薬剤とが、エステル結合、エーテル結合またはペプチド結合により結合されている場合には、酵素によりこの結合部位が特異的に切断されて、本来の化学構造を有する薬剤が放出されるので好ましい。 And decomposable group and drug backbone with an enzyme can be cut, an ester bond, and which are linked by an ether bond or a peptide bond, the binding site is specifically cleaved by an enzyme, the original chemical structure preferable because the drug is released with.

【0029】本発明の医療用高分子ゲルの適用形態は、 [0029] The application of the medical polymer gel of the present invention,
シート、フィルム、繊維、織布、不織布、液状、粉末状、スポンジ状等の使用目的に適した形態をとりうる。 Sheet can take films, fibers, woven, nonwoven, liquid, powder, a form suitable for the intended use of sponge or the like.
本発明の医療用高分子ゲルを、例えば平板状、微粒子状などの形態に成形することにより創傷被覆材が得られる。 The medical polymer gel of the present invention, for example flat, wound dressings can be obtained by shaping into the form of such fine particles. また、上記のように成形した後、ポリウレタン樹脂やシリコン樹脂製のフィルムと貼り合わせ、粘着剤を添加または塗布することによっても創傷被覆材が得られる。 Further, after forming as described above, bonded to a polyurethane resin or a silicone resin film, the wound dressing can be obtained by adding or applying an adhesive. 本発明の医療用高分子ゲルから得られる創傷被覆材は、含水率が高く柔軟であるので、創部に対する物理的刺激が少なく患者に与える苦痛が少ない。 Wound dressing obtained from the medical polymer gel of the present invention, since the water content of a high flexibility, less painful to the patient less physical irritation to the wound. さらに保水性が良好なので、被覆材の交換回数が少なくなり、貼り替えによる患者の苦痛、看護の手間、創のダメージが軽減できること、滲出液中の治癒促進因子を良好に保持しその作用を妨げないこと等の利点がある。 Furthermore, because a good water retention, hinder exchange number of the dressing is reduced, the patients with bonding re pain, nursing labor, the damage of wounds can be reduced, a good retention and its effect healing promoting factor in the exudate there are advantages such as absence. また、添加物として、Ca ++イオン等の金属イオン、グリセリン、ポリエチレングリコール(PEG)等のゲルの柔軟剤・安定化剤等通常の薬理学的に許容されるものを目的に応じて使用できる。 Further, as additives, can be used if Ca ++ ions of the metal ions, glycerin, what is the softener, stabilizer, etc. usually pharmacological acceptable gels, such as polyethylene glycol (PEG) to the object . 本発明の医療用高分子ゲルは、あらかじめ5%ブドウ糖液や生理食塩水等の生理学的に許容し得る溶液で適宜膨潤させて用いてもよい。 Medical polymer gel of the present invention may be used by appropriately swollen with a solution physiologically acceptable, such as previously 5% glucose solution or physiological saline. なお、該溶液は薬理学的に許容される種々の添加剤を含んでいてもよい。 Incidentally, the solution may contain various additives which are pharmacologically acceptable.
また、体液等の滲出液の量が多い場合には、乾燥状態で適用してもよい。 Further, when the large amount of exudate such as body fluid can be applied in a dry state.

【0030】投与方法としては、例えば、創面に被覆材として、または接着剤、癒着防止剤として外用できる。 [0030] Methods of administration include, for example, as coatings on the wound, or adhesives, topical as anti-adhesion barrier.
骨補強剤として用いる場合は骨腔内投与、骨折部位断面に対する投与、薬剤徐放基材としては、皮下投与、腹腔投与、関節内投与、経皮投与、経口投与、脈管内投与等が挙げられる。 Bone intraluminal administration when used as a bone reinforcing agent, administration to fracture site section, as a drug sustained release base material, subcutaneous, intraperitoneal administration, intraarticular administration, transdermal administration, oral administration include intravascular administration such as .

【0031】本発明の特徴は、前記の一般式(I)により表される結合形態により、薬剤を、酵素反応で主鎖が切断され得る分解性基およびスペーサーを介して、水膨潤性高分子ゲルに固定化することにあり、酵素反応で主鎖が切断され得る分解性基またはスペーサーのいずれか一方のみでは満足な性能を発揮しない。 The features of the present invention, the bonding mode represented by the above formula (I), a drug, through a decomposable group and the spacer backbone in the enzymatic reaction can be cut, water-swellable polymer located immobilizing gel, it does not exhibit satisfactory performance only either one of the decomposable group or spacer main chain in the enzymatic reaction can be disconnected. 即ち、酵素反応で主鎖が切断され得る分解性基のみを用いて薬剤を固定化した場合には、酵素による分解性基の分解反応速度が著しく低く、治療に有効な量の薬剤が放出されない。 That is, when the immobilized drug using only decomposable group the main chain can be cleaved by the enzyme reaction, decomposition reaction rate of the decomposition group by the enzyme is remarkably low, a therapeutically effective amount of the drug is not released . また、スペーサーのみを用いた場合には、酵素が存在する部位での薬剤の放出は達成されない。 In the case of using only the spacer, release of drug at the site where the enzyme is present is not achieved.

【0032】好中球が産生する酵素(エラスターゼ、カテプシンG)で切断される分解性基(例えば、-(Ala) The decomposable group neutrophils is cleaved by an enzyme (elastase, cathepsin G) produced (e.g., - (Ala)
3 -、-(Ala) 2 -Pro-Val-、-(Ala) 2 -Phe-等のオリゴペプチド)を介して、薬剤(例えば、抗炎症剤、抗菌剤等)を固定化した本発明の医療用高分子ゲルを用いれば、好中球が浸潤し、活性化されている炎症部位でのみ、そこに存在する酵素量に対応した薬剤が放出され、抗炎症作用または抗菌作用が発現する。 3 -, - (Ala) 2 -Pro-Val -, - (Ala) through an oligopeptide) of 2 -Phe- such as drugs (e.g., anti-inflammatory agent, of the present invention immobilized antibacterial agent) the use of medical polymer gel, neutrophils infiltrate, only at sites of inflammation being activated, the agent corresponding to the amount of enzyme present therein are released, anti-inflammatory or antibacterial effects are expressed. 炎症部位以外では該薬剤は放出されないので、該薬剤による副作用が発現する可能性は著しく低い。 Since non-inflammatory sites is not the agent release potential side effects due to drug is expressed significantly lower. また、細菌が産生する酵素(Staphylo In addition, enzymes produced by bacteria (Staphylo
coccal serin proteinase 、Staphylococcal cysteine coccal serin proteinase, Staphylococcal cysteine
proteinase)で切断される分解性基(例えば、-Asp-Glu Decomposable group is cleaved by proteinase) (e.g., -Asp-Glu
- 、-Ala-Gly-Phe- 等)を介して、抗菌剤を結合した本発明の医療用高分子ゲルを用いれば、細菌感染発生時に感染部位でのみ抗菌剤が放出され、抗菌作用が発現する。 -, -Ala-Gly-Phe-, etc.) through, by using the medical polymer gel of the present invention bound antimicrobial agents, only antimicrobial agent at the site of infection at the time of bacterial infection occurs is released, antibacterial effect expression to. 酸性条件下で活性化される酵素(カテプシンE、ペプシン)で切断される分解性基(例えば、-(Ala) 2 -Phe Decomposable group is cleaved with an enzyme that is activated under acidic conditions (cathepsin E, pepsin) (e.g., - (Ala) 2 -Phe
-、-(Ala) 2 -Pro-Phe-、-Ala-Gly-Phe- 、-Phe- 、-Tyr- -, - (Ala) 2 -Pro -Phe -, - Ala-Gly-Phe-, -Phe-, -Tyr-
等)を介して、アクトシン、PGE1 等の血行改善剤を結合した本発明の医療用高分子ゲルを用いれば、血行不良部位でのみ該薬剤が放出され、血行が改善する。 Through etc.), Akutoshin, by using the medical polymer gel of the present invention bound blood circulation improving agents such as PGE1, agent only poor circulation site is released, blood circulation is improved. 癌細胞が産生する酵素(アルカリホスファターゼ、γ- グルタミルトランスフェラーゼ(γ−GTP)、カテプシンB、カテプシンH、カテプシンL)で切断される分解性基(例えば、-Gly-Phe-Leu-Gly- 、-(Arg) 2 -、-Phe-A Enzyme cancer cells produced (alkaline phosphatase, .gamma. Guru Tamil transferase (γ-GTP), cathepsin B, cathepsin H, cathepsin L) decomposable groups which are cleaved (e.g., -Gly-Phe-Leu-Gly-, - (Arg) 2 -, - Phe -A
rg- 、リン酸ジエステル結合等)を介して抗癌剤を結合した本発明の医療用高分子ゲルを用いれば、癌細胞近辺でのみ抗癌剤が放出され、抗癌作用が発現する。 RG-, by using the medical polymer gel of the present invention that combines the anticancer via phosphodiester bonds, etc.), anticancer drugs only near the cancer cells are released, the anti-cancer effect is exhibited. いずれの場合にも、それぞれ引き金となる酵素が産生されていない正常部位、および産生されていない時期には、固定化された薬剤は放出されないため、該薬剤の毒性に基づく副作用を最小限に抑制することが可能である。 In either case, the normal sites enzymes each trigger is not produced, and the timing that has not been produced, because the immobilized drug is not released, Minimize based side effects toxicity of the drug it is possible to.

【0033】本発明の医療用高分子ゲルは、毒性試験において低毒性であることが確認されている。 The medical polymer gel of the present invention, it in toxicity testing low toxicity has been confirmed. また、保存状態での安定性が高いことも確認されている。 Further, stability in storage conditions have also confirmed high. 本発明の医療用高分子ゲルは、創傷被覆材、生体組織接着剤、癒着防止材、骨補強材、薬剤放出基材の構成成分として有用であり、擦過創、切創、挫創等の一般創傷、採皮創、 Medical polymer gel of the present invention, a wound dressing, a biological tissue adhesive, antiadhesive material, a bone reinforcing material is useful as a component of drug release substrate, abrasion wounds, incised wounds, general wound such acne , TokawaSo,
削皮創等の人為的な皮膚欠損創、切開創等の手術創、熱傷、潰瘍、褥瘡等の創傷部位における炎症の治療と治癒促進、手術後の創面や臓器の接着、手術後の創面と他組織の癒着防止、骨粗鬆症や骨折における骨の補強、悪性新生物等の治療等に適用可能である。 Artificial skin defects wounds such Kezukawa wounds, surgical wounds incision such as burns, ulcers, inflammation and treatment healing at the wound site, such as bedsores, adhesion of wound surface and organs after surgery, and the wound surface after surgery adhesion prevention of other tissues, reinforcing the bone in osteoporosis and fractures, is applicable to the treatment or the like of malignant neoplasms, or the like. なお、前記の水膨潤性高分子ゲル(II)は、共有結合架橋ゲルが主体であり、機械的強度が強く、安定性、耐熱水性に優れているため滅菌処理等が容易であるばかりでなく、含水性にも優れているため生体親和性が特によく、また透明性にも優れているため創傷部位の観察が可能である等のかずかずのメリットを有するため創傷被覆材として有用である。 Incidentally, the water-swellable polymer gel (II) is a principal covalently crosslinked gel, high mechanical strength, stability, not only it is easy sterilization or the like because it is excellent in hot water resistance useful as wound dressings because they have a number of advantages etc. can be observed in the wound site because of its excellent in particularly well, also transparency biocompatibility because it is excellent in water resistance. また、湿熱蒸気滅菌(121℃、20分間)条件下でも溶出物が少ないので安全性が高い。 Moreover, moist heat vapor sterilization (121 ° C., 20 minutes) is highly safe since even eluate is small under the conditions. また、透明性に優れているので、創傷被覆材として用いた場合、創部に貼り付けたままで創の状態、即ち細菌感染の有無、真皮または上皮細胞の増殖の様子等が観察可能であるため、 Moreover, since the excellent transparency, when used as a wound dressing for wounds remain stuck to the wound state, that the presence of bacterial infection, state etc. of dermal or epidermal cell proliferation can be observed,
擦過創、切創、挫創等の一般創傷、採皮創、削皮創等の手術創、熱傷、潰瘍、褥瘡等の創傷の治療と治癒促進に有用である。 Abraded wounds, incised wounds, general wound like acne, TokawaSo, surgical wounds of Kezukawa sweeping, burns, ulcers, useful for the treatment and promotion of healing of wounds, such as decubitus. さらに、生体親和性がよく細胞毒性が少ないので、生体組織接着剤や癒着防止材として、手術後の創面の接着や創面と組織の癒着防止に用いた場合、損傷組織の回復が促進され大変有用である。 Furthermore, since biocompatibility is good cytotoxicity is small, as a biological tissue adhesive or antiadhesive material, when used in adhesion prevention of wound surface of the adhesive and the wound and tissue after surgery, very useful is promoted restoration of damaged tissue it is. 安定性も高いので組織の接着や修復に必要な期間にわたって十分に目的の機能を発揮することができる。 Since stability is high it can be sufficiently exhibited the desired function over a period necessary to bond or repair of tissue.

【0034】本発明において使用される多糖類は、分子内にカルボキシル基を有し、かつ架橋反応を阻害する官能基を有さない水溶性の多糖類であればよいが、アルギン酸、ヒアルロン酸等の分子内にカルボキシル基を有する酸性多糖類の水溶性塩が好ましく用いられる。 The polysaccharide used in the present invention has a carboxyl group in the molecule, and a crosslinking reaction may be any polysaccharide soluble without a functional group that inhibits but, alginic acid, hyaluronic acid, etc. acidic polysaccharides soluble salts having a carboxyl group in the molecule is preferably used. 特にアルギン酸ナトリウム塩が、得られるゲルの性質が医療用材料の構成成分として優れているので最も好ましい。 Especially sodium alginate salt, the properties of the resulting gel is most preferred because it is excellent as a component of a medical material. これらの多糖類は市販品から入手することができる。 These polysaccharides can be obtained from commercial sources. 分子内にカルボキシル基を有する多糖類の好ましい分子量は、多糖類の性質により一概に決めることはできないが、一般に10万〜1000万の範囲内である。 The preferred molecular weight of the polysaccharide having a carboxyl group in the molecule, can not be determined indiscriminately by the nature of the polysaccharide, it is generally in the range of from 100 thousand to 10 million. 多糖類としてヒアルロン酸ナトリウムを用いる場合、その分子量の下限は、得られるゲルの強度の観点から、100万以上であるのが好ましく、200万以上であるのがより好ましい。 When using sodium hyaluronate as polysaccharides, the lower limit of the molecular weight, from the viewpoint of the strength of the resulting gel is preferably 1,000,000 or more, more preferably 2,000,000 or more. 一方ヒアルロン酸ナトリウムの分子量の上限は、製造上の操作性の観点から1000万以下であるのが好ましい。 On the other hand, the upper limit of the molecular weight of sodium hyaluronate is preferably from the viewpoint of the operability of the production of 1,000 10,000 or less. また、アルギン酸の場合は、その分子量を決定する方法に確立されたものはなく、一般にアルギン酸ナトリウムの1重量%水溶液の20℃における粘度で規定されている。 In the case of alginate, rather than those established in the method for determining the molecular weight, as specified in viscosity at generally 20 ° C. of 1 wt% aqueous solution of sodium alginate. したがって、本発明における多糖類としてアルギン酸ナトリウムを用いる場合、その1重量% Therefore, when using sodium alginate as a polysaccharide in the present invention, the 1 wt%
水溶液の20℃における粘度は、100cp(センチポアズ)以上であるのが好ましく、得られるゲルの強度の観点から、300cp以上であるのがより好ましい。 Viscosity at 20 ° C. of an aqueous solution is preferably at 100 cp (centipoises) or more, from the viewpoint of the strength of the resulting gel, and more preferably at least 300 cp. しかし、粘度が高すぎると溶解に時間を要するなど、製造上の操作性が悪くなるので、アルギン酸ナトリウムの1 However, such takes time to dissolve and the viscosity is too high, since the operation of the manufacturing is deteriorated, sodium alginate 1
重量%水溶液の粘度は、1200cp以下であるのが好ましい。 The viscosity of the weight% aqueous solution is preferably not more than 1200 cp.

【0035】一般式(II)で表される架橋性試薬において、nはメチレン鎖の数を表し、メチレン鎖の数が少ないと分子間の架橋反応が有効に行われない。 [0035] In crosslinking reagent represented by the general formula (II), n represents the number of methylene chains, crosslinking reaction between molecules to the number of methylene chains is small is not performed effectively. 一方多すぎると架橋性試薬自身または架橋性試薬間等で疎水性相互作用による凝集が生じ、架橋反応が阻害される。 On the other hand too much and cause aggregation by hydrophobic interaction or the like between the crosslinking reagent itself or crosslinking reagent, the crosslinking reaction is inhibited. 従って、nは2から18であることが好ましく、2から12 Thus, n is preferably 2 to 18, 2 to 12
であることがさらに好ましい。 And more preferably. 一般式(II)で表される架橋性試薬は、架橋反応促進作用と水溶性の向上、アミノ基への安定性の付与などのためカルボン酸塩以外の水溶性塩を形成していることが望ましい。 Crosslinking reagent represented by the general formula (II), the improvement of the crosslinking reaction promoting effect and water-soluble, it forms a water soluble salt other than the carboxylic acid salts, such as for stability of the application to the amino group desirable. カルボン酸塩は架橋反応を阻害するので好ましくない。 Carboxylate undesirably inhibit the crosslinking reaction. 特に、N- ヒドロキシコハク酸イミド塩が架橋反応促進作用が優れており最も好ましい。 Particularly, most preferred N- hydroxysuccinimide salt has excellent crosslinking reaction promoting effect. 1およびR 2はそれぞれ水素原子または−COCH(NH 2 )−(CH 24 −NH 2で表される基を示し、架橋性試薬の架橋に関与する反応性基の数が選択される。 R 1 and R 2 are each a hydrogen atom or -COCH (NH 2) - (CH 2) a group represented by 4 -NH 2, the number of reactive groups involved in crosslinking of the crosslinkable reagent is selected . 1およびR 2がともに水素原子である場合には架橋に関与する反応性基の数は2となり、 The number of reactive groups R 1 and R 2 are both hydrogen atoms involved in the crosslinking becomes 2,
1 、R 2のいずれかが水素原子で、他方が−COCH In R 1, one of R 2 is a hydrogen atom and the other is -COCH
(NH 2 )−(CH 24 −NH 2である場合には架橋に関与する反応性基の数は3となり、R 1およびR 2がともに−COCH(NH 2 )−(CH 24 −NH 2である場合には架橋に関与する反応性基の数は4となる。 (NH 2) - (CH 2 ) 4 number of reactive groups involved in crosslinking in the case of -NH 2 is 3 becomes, R 1 and R 2 are both -COCH (NH 2) - (CH 2) 4 the number of reactive groups involved in crosslinking in the case of -NH 2 is 4.
架橋に関与する反応性基の数は2以上が必須であり、一般には数が多いほど架橋は有効に行われるが、5以上になると架橋に関与しない反応性基の割合が無視できなくなるとともに、酸性多糖類とイオン結合による凝集沈殿を生じ易くなるので2〜4の範囲内が好ましい。 The number of reactive groups involved in crosslinking is required is 2 or more, with generally but crosslinking The more often are effectively carried out, the proportion of reactive groups not involved in the crosslinking to become 5 or more can not be neglected, because tends to occur aggregation precipitation with acid polysaccharides and ionic bonds within 2-4 are preferred.

【0036】一般式(II)で表される架橋性試薬の塩としては、具体的にはジアミノエタン、ジアミノプロパン、ジアミノブタン、ジアミノペンタン、ジアミノヘキサン、ジアミノヘプタン、ジアミノオクタン、ジアミノノナン、ジアミノデカン、ジアミノドデカン、ジアミノオクタデカン等のジアミノアルカン類の塩、N−(リジル)−ジアミノエタン、N, N'−ジ(リジル)−ジアミノエタン、N−(リジル)−ジアミノヘキサン、N, [0036] The salt of the general formula (II) represented by the crosslinking reagent, specifically diaminoethane, diaminopropane, diaminobutane, diaminopentane, diaminohexane, diaminoheptane, diamino-octane, diaminononane, diaminodecane, diamino dodecane, salts of diamino alkanes such as di-aminooctadecane, N- (lysyl) - diaminoethane, N, N'-di (lysyl) - diaminoethane, N- (lysyl) - diaminohexane, N,
N'−ジ(リジル)−ジアミノヘキサン等のモノまたはジ(リジル)ジアミノアルカン類の塩が例示される。 N'- di (lysyl) - salts of mono- or di (lysyl) diaminoalkanes, such as diaminohexane and the like. なかでも、ジアミノエタンの2N−ヒドロキシコハク酸イミド塩、ジアミノヘキサンの2N−ヒドロキシコハク酸イミド塩、N, N'−ジ(リジル)−ジアミノエタンの4N−ヒドロキシコハク酸イミド塩、N−(リジル)− Among them, 2N-hydroxysuccinimide salt of diaminoethane, 2N-hydroxysuccinimide salt of diaminohexane, N, N'-di (lysyl) - 4N- hydroxysuccinimide salt of diaminoethane, N- (lysyl ) -
ジアミノヘキサンの3N−ヒドロキシコハク酸イミド塩などが好ましく用いられる。 Such 3N- hydroxysuccinimide salt of diaminohexane are preferred.

【0037】一般式(II)で表される架橋性試薬のうちジアミノアルカン類は市販品として容易に入手できる。 [0037] diaminoalkanes of crosslinking reagent represented by the general formula (II) are readily available as commercial products.
モノまたはジリジルジアミノアルカン類は通常の有機合成法により合成できる。 Mono- or Jiri Gilles diaminoalkanes can be synthesized by conventional organic synthesis methods. 例えば、α−アミノ基とε−アミノ基を保護したリジンのカルボキシル基とジアミノアルカン類のアミノ基とをカルボジイミド等の脱水縮合剤を用いて結合し、その後α−アミノ基とε−アミノ基の保護基を除去する方法、α−アミノ基とε−アミノ基を保護したリジンをN−ヒドロキシコハク酸イミドなどとの活性エステルとした後、ジアミノアルカン類と反応させ、その後α−アミノ基とε−アミノ基の保護基を除去する方法等が挙げられる。 For example, by combining the amino group of the carboxyl group and diaminoalkanes lysine with a protected α- amino group and ε- amino group using a dehydration condensation agent such as carbodiimide, subsequent α- amino group and ε- amino group method for removing the protecting group, after the active ester and the like α- amino group and ε- amino group lysine N- hydroxy succinimide protected is reacted with diamino alkanes, followed α- amino group ε - a method in which removal of the protecting group of the amino group. α−アミノ基とε−アミノ基の保護基の除去は、例えば保護基がt−ブチルオキシカルボニル基の場合には、トリフルオロ酢酸や4規定の塩化水素を溶解したジオキサンで処理することにより行われる。 Removal of the protecting group of the α- amino group and ε- amino group, for example in the case of the protecting group is t- butyloxycarbonyl groups, row by treatment with dioxane was dissolved trifluoroacetic acid or 4N hydrogen chloride divide. 保護基がフルオレニルメチルオキシカルボニル基の場合には20%ピペリジンのジメチルホルムアミド溶液で処理することで除去できる。 If the protecting group is a-fluorenylmethyloxycarbonyl group can be removed by treatment with dimethylformamide a solution of 20% piperidine. α−アミノ基とε−アミノ基を保護したリジンとジアミノアルカン類のモル比を1:1で反応を行えばモノリジルジアミノアルカンが、2:1で反応すればジリジルジアミノアルカンが、 The molar ratio of lysine and diaminoalkanes with a protected α- amino group and ε- amino groups of 1: 1 monolinoleate Gilles diaminoalkanes be performed reaction is 2: 1 Jiri Gilles diaminoalkane If reaction is,
それぞれ得られる。 Respectively obtained. これらは遊離のアミノ基の形で得られる場合には、酢酸エチルなどに溶解し、アミノ基と当量のN−ヒドロキシコハク酸イミドを加えることで塩が得られる。 These if obtained in the form of free amino groups is dissolved like ethyl acetate, salt is obtained by adding an amino group equivalent of N- hydroxysuccinimide. 塩酸塩やトリフルオロ酢酸塩などの形で得られる場合には、水溶液をN−ヒドロキシコハク酸イミドで平衡化した陰イオン交換樹脂カラムに通じることによってN−ヒドロキシコハク酸イミド塩が得られる。 When it obtained in the form such as hydrochloric acid salt or trifluoroacetic acid salt, by passing the anion exchange resin column equilibrated with an aqueous solution with N- hydroxy succinimide N- hydroxysuccinimide salt obtained.

【0038】一般式(II)で表される架橋性試薬による、分子内にカルボキシル基を有する多糖類の架橋反応は、水溶性カルボジイミド等の脱水縮合剤を用いて行うことができる。 [0038] by crosslinking reagent represented by the formula (II), polysaccharides crosslinking reaction with a carboxyl group in the molecule can be accomplished by using a dehydration condensation agent such as water soluble carbodiimide. 架橋性試薬は、アミノ基が塩を形成していないときは架橋反応が遅い。 Crosslinking reagent, the slow cross-linking reaction when the amino group is not in the form of a salt. N−ヒドロキシコハク酸イミドの塩は架橋反応が速やかで、水膨潤性高分子ゲル(II)が速く得られるので本発明に特に好適である。 Salts of N- hydroxysuccinimide was rapid crosslinking reaction, is particularly suitable for the present invention since the water-swellable polymer gel (II) is obtained faster. 塩酸塩を用いると水膨潤性高分子ゲル(II)は得られるが架橋反応によるゲル化が遅くなる。 With hydrochloride water-swellable polymer gel (II) but is obtained gel is slow due to the crosslinking reaction. 架橋率は、用いる架橋性試薬の多糖類に対するモル比で制御できる。 Crosslinking rate can be controlled by the molar ratio polysaccharide crosslinking reagent used. 架橋率を低くすると柔軟で含水率の高いゲルが得られる。 A lower crosslinking rate flexible, water content gel was obtained. 架橋率を高くすると強固で含水率の低いゲルが得られる。 Robust and low water content gel is obtained when a higher degree of crosslinking. 架橋率は、得られる水膨潤性高分子ゲル(II)の用途により適宜選択されうる。 Crosslinking ratio may be appropriately selected depending on the use of the resulting water-swellable polymer gel (II). 架橋率が低すぎると、実用的な機械的強度・安定性を有するゲルが得られず好ましくない。 When the crosslinking is too low, practical mechanical strength and stability gel undesirably not be obtained with. また、多すぎると架橋性試薬のアミノ基が未反応のままゲル中に存在することになり好ましくない。 Further, the amino group of too much cross-linking reagent is unfavorably be present in gel remain unreacted. 従って一般式(II)で表される架橋性試薬の多糖類に対する反応率は、多糖類の有するカルボキシル基に対して1から50モル%の割合であることが好ましく、10から40 Thus the reaction rate for the polysaccharide crosslinking reagent represented by the general formula (II) is preferably a proportion of from 1 to 50 mol% based on the carboxyl groups of the polysaccharide, from 10 to 40
モル%の範囲にあることがさらに好ましい。 More preferably within a range of mole%. 架橋率は、 Crosslinking rate,
用いる架橋性試薬の多糖類に対するモル比で制御可能であるが、元素分析法、NMR法等によって実測しうる。 Is a controllable molar ratio polysaccharide crosslinking reagents used, elemental analysis, may be measured by NMR method.
例えばアルギン酸塩やヒアルロン酸塩などの窒素原子を含まない多糖類を用いる場合には得られたゲル中の窒素原子の元素分析により求められる。 For example determined by elemental analysis of the nitrogen atoms in the resulting gel in the case of using a polysaccharide containing no nitrogen atoms such as alginate or hyaluronate. また、得られたゲルのプロトンNMRにおける、多糖類のメチンプロトンと架橋性試薬のメチレンプロトンのシグナル強度比からも求められる。 Further, in the proton NMR of the resulting gel is also obtained from the signal intensity ratio of the methylene protons of the polysaccharide methine and crosslinking reagent. 本発明の水膨潤性高分子ゲル(II)はそれ自身でも実用的な強度と安定性を示すが、用途によりさらにイオン結合架橋、疎水結合架橋などの他のゲル化方法と併用してもよい。 Water-swellable polymer gel of the present invention (II) is shown a practical strength and stability by itself, further ionic cross-linking by application may be used in combination with other gelling methods, such as hydrophobic bond bridge .

【0039】本発明の水膨潤性高分子ゲル(II)は、含水率が高いこと、多糖類からなるので免疫原性が低いこと、架橋性試薬の原料は生体に投与可能な化合物であるので仮に生体内に残存した場合でも吸収と排泄が容易に行われること、などから、生体親和性と安全性に優れている。 The water-swellable polymer gel of the present invention (II) is a high water content, since a polysaccharide is poorly immunogenic, because the raw material of the crosslinking reagent is a compound which can be administered to a living body If excretion and absorption even when the remaining readily carried out that in vivo, etc., is excellent in biocompatibility and safety.

【0040】本発明の水膨潤性高分子ゲル(II)に、含水率のコントロールや粘着性の付与などの目的で、Na The water-swellable polymer gel (II) of the present invention, the purpose of the water content of the control and sticky imparting, Na
+ 、Ca ++ 、Mg ++等の無機イオン類、エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン、PEG等の多価アルコール類、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸等の高分子化合物等、薬理学的に許容される添加剤を添加することもできる。 +, Ca ++, inorganic ions such as Mg ++, ethylene glycol, propylene glycol, glycerin, polyhydric alcohols such as PEG, polyvinyl alcohol, polymer compounds such as polyacrylic acid, pharmacologically tolerated it is also possible to add an additive that. また、消毒剤、抗生剤、抗菌剤、アクトシン、PGE1などの血行改善薬、TGF β、PDG Further, disinfectants, antibiotics, antimicrobials, Akutoshin, blood circulation improving drug such as PGE1, TGF beta, PDG
F、FGF 等の増殖因子、ウリナスタチン、TIMP等の酵素阻害剤、ステロイド、非ステロイド性抗炎症剤等の抗炎症剤、フィブリン、コラーゲンなどの構造蛋白質、などの薬剤や生理活性物質等を添加することもできる。 F, growth factors FGF, etc., ulinastatin, enzyme inhibitors such as TIMP, added steroids, anti-inflammatory agents such as nonsteroidal anti-inflammatory agents, fibrin, structural proteins such as collagen, drugs and biologically active substances, such as it is also possible.

【0041】本発明の水膨潤性高分子ゲル(II)は、創傷被覆材、生体組織接着剤、癒着防止材等の医療用材料の構成成分として有用である。 The water-swellable polymer gel of the present invention (II) is, wound dressings, biological tissue adhesives are useful as a component of a medical material such as adhesion barrier. 本発明の水膨潤性高分子ゲル(II)を、例えば平板状、微粒子状などの形態に成形することにより創傷被覆材が得られる。 The water-swellable polymer gel (II) of the present invention, for example flat, wound dressings can be obtained by shaping into the form of such fine particles. また、上記のように成形した後、ポリウレタン樹脂やシリコン樹脂製のフィルムと貼り合わせ、粘着剤を添加または塗布することによっても創傷被覆材が得られる。 Further, after forming as described above, bonded to a polyurethane resin or a silicone resin film, the wound dressing can be obtained by adding or applying an adhesive. 本発明の水膨潤性高分子ゲル(II)から得られる創傷被覆材は、透明性が高いので創部の観察に好都合である。 Wound dressing obtained from the water-swellable polymer gel of the present invention (II) is advantageous in wound observation because of their high transparency. また含水率が高く柔軟であるので、創部に対する物理的刺激が少なく患者に与える苦痛が少ない。 Since also the water content is high flexibility, less painful to the patient less physical irritation to the wound. さらに保水性が良好でかつ体液等により溶解しないので、被覆材の交換回数が少なくなり、貼り替えによる患者の苦痛、看護の手間、創のダメージが軽減できること、滲出液中の治癒促進因子を良好に保持しその作用を妨げないこと等の利点がある。 Further, since water retention is not dissolved by good and body fluids such as, frequency of replacement of the dressing is reduced, the pain of the patient by bonding replacement, nursing labor, the damage of wounds can be reduced, improving the healing promoting factor in exudate is held advantages such that does not interfere with its effect on the. 湿熱蒸気滅菌ができるので安全性も高い。 Highly safe because it is wet heat steam sterilization.

【0042】本発明の水膨潤性高分子ゲル(II)を、例えば平板状、織布状、不織布状、微粒子状、スポンジ状等の形態に成形することにより癒着防止材が得られる。 [0042] The water-swellable polymer gel (II) of the present invention, for example flat, woven form, nonwoven fabric, particulate, antiadhesive material is obtained by molding in the form of a sponge or the like.
また、上記のように成形した後、グリセリン、PEG等と混合するか、またはこれらを分散することによっても癒着防止材が得られる。 Further, after forming as described above, glycerin, be mixed with a PEG such, or antiadhesive material can be obtained by dispersing them.

【0043】本発明の水膨潤性高分子ゲル(II)を、例えば平板状、織布状、不織布状、微粒子状、スポンジ状等の形態に成形することにより生体組織接着剤が得られる。 [0043] The water-swellable polymer gel (II) of the present invention, for example flat, woven form, nonwoven fabric, particulate, biological tissue adhesives can be obtained by shaping into the form of a sponge or the like. また、上記のように成形した後、デキストラン、プルラン、フィブリン、コラーゲンなどと混合するかまたはこれらを分散することによっても生体組織接着剤が得られる。 Further, after forming as described above, dextran, pullulan, fibrin, biological tissue adhesives can be obtained by dispersing or they are mixed, such as with collagen.

【0044】本発明の水膨潤性高分子ゲル(II)は耐熱水性に優れているので溶出物が少ないこと、毒性試験において低毒性であることが確認されている。 The water-swellable polymer gel of the present invention (II), it is less eluates since has excellent hot water resistance, it has been confirmed that the toxicity tests low toxicity.

【0045】 [0045]

【実施例】以下、実施例、参考例、比較例および試験例により本発明を具体的に説明する。 EXAMPLES The following examples, reference examples, the present invention will be described specifically by comparative examples and test examples. なお、本発明はこれらの実施例等により限定されるものではない。 The present invention is not limited by such these examples.

【0046】実施例1 2. 3g(20mmol)のN−ヒドロキシコハク酸イミド(HOSu、(株)ペプチド研究所)を酢酸エチル150mlに溶解し、10mlの酢酸エチルに溶解した0. 6g(10mmol)のエチレンジアミン(ED [0046] Example 1 2. 3 g of (20 mmol) N-hydroxysuccinimide (HOSu, (Ltd.) Peptide Institute) was dissolved in ethyl acetate 150 ml, 0. 6 g was dissolved in ethyl acetate 10 ml (10 mmol) of ethylene diamine (ED
A、和光純薬工業株式会社)を室温で撹拌しながら滴下した。 A, was added dropwise with stirring at room temperature Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). 滴下終了後さらに1時間撹拌を続けた。 After completion of the dropwise addition, stirring was continued for 1 hour. 析出した結晶を濾取し、減圧下に乾燥して2. 9g(収率約10 The precipitated crystals were collected by filtration, 2. 9 g (yield of about 10 and dried under reduced pressure
0%)のエチレンジアミン2N−ヒドロキシコハク酸イミド塩(EDA・2HOSu)を得た。 0%) of ethylenediamine 2N- hydroxysuccinimide salt (EDA · 2HOSu) was obtained. アルギン酸ナトリウム(和光純薬工業株式会社、500〜600cp) Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500~600cp)
の1重量%水溶液30ml(カルボキシル基:1. 5m 1 wt% aqueous solution of 30 ml (carboxyl group:. 1 5 m
mol)に、0. 20g(0.7mmol)のEDA・ In mol), EDA · of 0. 20g (0.7mmol)
2HOSuと0. 96g(5mmol)の1−エチル− 2HOSu and 0. 96g of (5mmol) 1- ethyl -
3−(3−ジメチルアミノプロピル)−カルボジイミド塩酸塩(EDC・HCl、(株)ペプチド研究所)を溶解して、12cm×8cmのポリスチレン製トレイに流延し室温で静置した。 3- (3-dimethylaminopropyl) - carbodiimide hydrochloride (EDC · HCl, (Ltd.) Peptide Institute) was dissolved and allowed to stand at cast rt flow into polystyrene trays 12cm × 8 cm. およそ15時間後に水膨潤性高分子ゲルが得られた。 Water-swellable polymer gel was obtained approximately 15 hours.

【0047】実施例2 アルギン酸ナトリウム(和光純薬工業株式会社、500 [0047] Example 2 Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500
〜600cp)の1重量%水溶液30ml(カルボキシル基:1. 5mmol)に、0. 05g(0.175m 1 wt% aqueous solution of 30 ml (carboxyl group ~600cp):.. 1 to 5mmol), 0 05g (0.175m
mol)のEDA・2HOSuと0. 96g(5mmo EDA · 2HOSu and 0. 96g of mol) (5mmo
l)のEDC・HClを溶解して、12cm×8cmのポリスチレン製トレイに流延し室温で静置した。 By dissolving EDC · HCl in l), allowed to stand at cast rt flow into polystyrene trays 12cm × 8 cm. およそ15時間後に水膨潤性高分子ゲルが得られた。 Water-swellable polymer gel was obtained approximately 15 hours.

【0048】実施例3 アルギン酸ナトリウム(和光純薬工業株式会社、500 [0048] EXAMPLE 3 Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500
〜600cp)の1重量%水溶液30ml(カルボキシル基:1. 5mmol)に、0. 80g(2.8mmo 1 wt% aqueous solution of 30 ml (carboxyl group ~600cp):.. 1 to 5mmol), 0 80g (2.8mmo
l)のEDA・2HOSuと0. 96g(5mmol) EDA · 2HOSu of l) and 0. 96g (5mmol)
のEDC・HClを溶解して、12cm×8cmのポリスチレン製トレイに流延し室温で静置した。 Was dissolved in EDC · HCl, and allowed to stand at cast rt flow into polystyrene trays 12cm × 8 cm. およそ15 About 15
時間後に水膨潤性高分子ゲルが得られた。 Water-swellable polymer gel was obtained after hours.

【0049】実施例4 2. 3g(20mmol)のHOSuを酢酸エチル15 [0049] Example 4 2. HOSu ethyl acetate 3 g (20 mmol) 15
0mlに溶解し、10mlの酢酸エチルに溶解した1. Was dissolved in 0 ml, it was dissolved in ethyl acetate 10 ml 1.
2g(10mmol)のヘキサメチレンジアミン(HD Hexamethylene diamine of 2g (10mmol) (HD
A、和光純薬工業株式会社)を室温で撹拌しながら滴下した。 A, was added dropwise with stirring at room temperature Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). 滴下終了後さらに1時間撹拌を続けた。 After completion of the dropwise addition, stirring was continued for 1 hour. 析出した結晶を濾取し、減圧下に乾燥して3. 3g(収率約96 The precipitated crystals were collected by filtration and dried under reduced pressure to 3. 3 g (yield: about 96
%)のヘキサメチレンジアミン2N−ヒドロキシコハク酸イミド塩(HDA・2HOSu)を得た。 %) Was obtained hexamethylenediamine 2N- hydroxysuccinimide salt (HDA · 2HOSu). アルギン酸ナトリウム(和光純薬工業株式会社、500〜600c Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500~600c
p)の1重量%水溶液30ml(カルボキシル基:1. 1 wt% aqueous solution of 30 ml (carboxyl group of p): 1.
5mmol)に、0. 24g(0.7mmol)のHD To 5mmol), 0. HD of 24g (0.7mmol)
A・2HOSuと0. 96g(5mmol)のEDC・ EDC of A · 2HOSu and 0. 96g (5mmol) ·
HClを溶解して、12cm×8cmのポリスチレン製トレイに流延し室温で静置した。 It was dissolved HCl, and allowed to stand at cast rt flow into polystyrene trays 12cm × 8 cm. およそ15時間後に水膨潤性高分子ゲルが得られた。 Water-swellable polymer gel was obtained approximately 15 hours.

【0050】実施例5 アルギン酸ナトリウム(和光純薬工業株式会社、500 [0050] Example 5 sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500
〜600cp)の1重量%水溶液30ml(カルボキシル基:1. 5mmol)に、93mg(0. 7mmo 1 wt% aqueous solution of 30 ml (carboxyl group ~600cp):.. 1 to 5mmol), 93mg (0 7mmo
l)のEDA・2HCl(和光純薬工業株式会社)と0. 96g(5mmol)のEDC・HClを溶解して、12cm×8cmのポリスチレン製トレイに流延し室温で静置した。 By dissolving EDC · HCl of EDA · 2HCl (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) and 0. 96 g (5 mmol) of l), allowed to stand at cast rt flow into polystyrene trays 12cm × 8 cm. およそ4日後に水膨潤性高分子ゲルが得られた。 About 4 days after the water swelling polymer gel was obtained.

【0051】実施例6 4. 7g(0. 01mol)のNα−フルオレニルメトキシカルボニル−Nε−t−ブチルオキシカルボニル− [0051] Example 6 4. 7g (. 0 01mol) of Nα--fluorenylmethoxycarbonyl -Nε-t- butyloxycarbonyl -
L−リジン(Fmoc−Lys(Boc)、(株)ペプチド研究所)と1. 15g(0. 01mol)のHOS L- lysine (Fmoc-Lys (Boc), (Ltd.) Peptide Institute) HOS with 1. 15g (0. 01mol)
uを酢酸エチル50mlに溶解し、氷冷下に撹拌しながら1. 7g(0. 011mol)のジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC、(株)ペプチド研究所)を加え、氷冷下1時間、その後室温で一晩撹拌した。 The u was dissolved in ethyl acetate 50 ml, with stirring under ice cooling 1. 7g (0. 011mol) of dicyclohexylcarbodiimide (DCC, (Ltd.) Peptide Institute) was added, under ice-cooling for 1 hour, then one room and the mixture was stirred evening. 不溶物を濾過して除き、濾液を減圧濃縮して得られた結晶をイソプロピルアルコール−酢酸エチルから再結晶した。 The insoluble was filtered, the crystals obtained by the filtrate was concentrated under reduced pressure isopropyl alcohol - was recrystallized from ethyl acetate. 結晶を減圧乾燥して4. 7g(収率80%)のNα−フルオレニルメトキシカルボニル−Nε−t−ブチルオキシカルボニル−L−リジル−N −ヒドロキシコハク酸イミドエステル(Fmoc−Lys(Boc)−OSu)を得た。 The crystals were dried under reduced pressure 4. 7 g N @ .alpha-fluorenylmethoxycarbonyl -Nε-t- butyloxycarbonyl -L- lysyl -N (80% yield) - hydroxysuccinimide ester (Fmoc-Lys (Boc) -OSu) was obtained. 2. 82g(5mmol)のFmoc−Lys 2. Fmoc-Lys of 82g (5mmol)
(Boc)−OSuを酢酸エチル50mlに溶解して室温で撹拌しながら、0. 15g(2. 5mmol)のエチレンジアミンを溶解した酢酸エチル溶液10mlを滴下した。 While the (Boc) -OSu was stirred at room temperature and dissolved in ethyl acetate 50 ml, 0. 15 g was added dropwise an ethyl acetate solution 10ml of ethylene diamine were dissolved in (2. 5mmol). 滴下終了後さらに一晩撹拌を続けた。 After completion of the dropwise addition stirring was continued overnight. 析出した結晶を濾取し、減圧下に乾燥して2. 4g(収率100 The precipitated crystals were collected by filtration and dried under reduced pressure 2. 4g (yield: 100
%)のN、N'−(Nα−フルオレニルメトキシカルボニル−Nε−t−ブチルオキシカルボニル−L−リジル)−エチレンジアミン((Fmoc−Lys(Bo %) Of N, N '- (Nα--fluorenylmethoxycarbonyl -Nε-t- butyloxycarbonyl -L- lysyl) - ethylenediamine ((Fmoc-Lys (Bo
c)) 2 −EDA)を得た。 c)) 2 -EDA) was obtained.

【0052】得られた(Fmoc−Lys(Boc)) [0052] obtained (Fmoc-Lys (Boc))
2 −EDAの全量を200mlのジオキサンに懸濁し、 The total amount of 2-EDA was suspended in dioxane 200 ml,
40mlのピペリジン(和光純薬工業株式会社)を加え室温で1時間撹拌した。 40ml of piperidine (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was added and stirred for 1 hour at room temperature. 減圧濃縮して得られる結晶をジエチルエーテルで洗浄した後、減圧下に乾燥してN、 After the crystals obtained by concentration under reduced pressure was washed with diethyl ether, N and dried under reduced pressure,
N'−ジ(Nε−t−ブチルオキシカルボニル−L−リジル)−エチレンジアミン((Lys(Boc)) 2 N'- di (Nε-t- butyloxycarbonyl -L- lysyl) - ethylenediamine ((Lys (Boc)) 2 -
EDA)を得た。 Was obtained EDA). 得られた((Lys(Boc)) 2 The resulting ((Lys (Boc)) 2 -
EDA)の全量を10mlのトリフルオロ酢酸(TF Trifluoroacetic acid to the total amount of EDA) 10 ml (TF
A、(株)ペプチド研究所)に溶解し、室温で2時間撹拌した。 A, was dissolved in Corporation Peptide Institute) was stirred at room temperature for 2 hours. 減圧濃縮して得られる結晶をジエチルエーテルで洗浄した後、減圧下に乾燥してN、N'−ジ(L−リジル)−エチレンジアミントリフルオロ酢酸塩((Ly After the crystals obtained by concentration under reduced pressure was washed with diethyl ether, N and dried under reduced pressure, N'- di (L- lysyl) - ethylenediamine trifluoroacetate ((Ly
s) 2 −EDA・4TFA)を得た。 s) 2 -EDA · 4TFA) was obtained. 得られた全量の(Lys) 2 −EDA・4TFAを50mlの精製水に溶解し、1MのHOSu水溶液で平衡化した20gのジエチルアミノエチルセルロース(DE52、ワットマン)を充填したカラムに通じ、通過液を減圧濃縮してN、N'−ジ(L−リジル)−エチレンジアミンN −ヒドロキシコハク酸イミド塩((Lys) 2 −EDA・4 The obtained total amount of (Lys) 2 -EDA · 4TFA was dissolved in purified water 50 ml, diethylaminoethyl cellulose of 20g equilibrated with HOSu aqueous 1M (DE52, Whatman) through a column packed with, reduced pressure effluent concentrated to N, N'-di (L- lysyl) - ethylenediamine N - hydroxysuccinimide salt ((Lys) 2 -EDA · 4
HOSu)0. 78g(収率40%)を得た。 HOSu) 0. Was obtained 78 g (40% yield). アルギン酸ナトリウム(和光純薬工業株式会社、500〜600 Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500 to 600
cp)の1重量%水溶液30ml(カルボキシル基: 1 wt% aqueous solution of 30 ml (carboxyl group cp):
1. 5mmol)に、0. 29g(0.375mmo To 1. 5mmol), 0. 29g (0.375mmo
l)の(Lys) 2 −EDA・4HOSuおよび0. 9 l) of (Lys) 2 -EDA · 4HOSu and 0.9
6g(5mmol)のEDC・HClを溶解して、12 By dissolving EDC · HCl of 6g (5mmol), 12
cm×8cmのポリスチレン製トレイに流延し室温で静置した。 And allowed to stand at cast rt flow into polystyrene trays cm × 8 cm. およそ15時間後に水膨潤性高分子ゲルが得られた。 Water-swellable polymer gel was obtained approximately 15 hours.

【0053】実施例7 ヒアルロン酸ナトリウムの1重量%水溶液(生化学工業株式会社)60mlに、0. 29g(0. 375mmo [0053] 1% by weight aqueous solution of Example 7 Sodium hyaluronate (Seikagaku Corporation) 60ml, 0. 29g (0. 375mmo
l)の(Lys) 2 −EDA・4HOSuおよび0. 9 l) of (Lys) 2 -EDA · 4HOSu and 0.9
6g(5mmol)のEDC・HClを溶解して、12 By dissolving EDC · HCl of 6g (5mmol), 12
cm×8cmのポリスチレン製トレイに流延し4℃で静置した。 And allowed to stand at cast 4 ° C. flow into polystyrene trays cm × 8 cm. およそ48時間後に水膨潤性高分子ゲルが得られた。 Water-swellable polymer gel was obtained at approximately 48 hours.

【0054】参考例1 実施例1〜4、6で得られた水膨潤性高分子ゲルを、細胞間質液と同じ濃度(Caイオン:5meq、Naイオン:143meq)になるようにCaCl 2とNaCl [0054] The water-swellable polymer gel obtained in Reference Example 1 Example 1~4,6, cellular interstitial fluid and the same concentration (Ca ion: 5 meq, Na ions: 143meq) to become as the CaCl 2 NaCl
を溶解した水溶液(ECF)で十分に洗浄した後、50 After extensive washing with aqueous solution of (ECF), 50
%グリセリン-生食液を含浸して湿熱蒸気滅菌(121 % Glycerin - moist heat vapor sterilization was impregnated saline (121
℃、20分間)を施し透明なシート状創傷被覆材とした。 ° C., and a transparent sheet-like wound dressing subjected to 20 min).

【0055】参考例2 実施例1〜4、6で得られた水膨潤性高分子ゲルを、E [0055] The water-swellable polymer gel obtained in Reference Example 2 Example 1~4,6, E
CFで十分に洗浄した後、ポリメタクリル酸エステル系の粘着剤が塗布されたポリウレタンシートとはり合わせ、湿熱蒸気滅菌(121℃、20分間)を施し、透明なシート状創傷被覆材とした。 After extensive washing with CF, laminated with polyurethane sheet adhesive is applied polymethacrylic acid ester, moist heat vapor sterilization (121 ° C., 20 minutes) and subjected, to a clear sheet wound dressing.

【0056】参考例3 実施例1〜4、6で得られた水膨潤性高分子ゲルを、E [0056] Reference Example 3 Example of water-swellable polymer gel obtained in 1~4,6, E
CFで十分に洗浄した後、湿熱蒸気滅菌(121℃、2 After extensive washing with CF, moist heat vapor sterilization (121 ° C., 2
0分間)を施した。 0 minutes) was subjected to. 該ゲルを濾過滅菌したゲンタマイシンの1mg/ml水溶液に浸漬して、ゲンタマイシンを含有する創傷被覆材とした。 By immersing the gel in 1mg / ml aqueous solution of filtered sterile gentamicin, it was wound dressing containing gentamicin.

【0057】参考例4 実施例7で得られた水膨潤性高分子ゲルを純水で十分に洗浄後、凍結乾燥してスポンジ状のシートを得た。 [0057] After thoroughly washing the water-swellable polymer gel obtained in Reference Example 4 Example 7 with pure water to obtain a sponge-like sheets and lyophilized. γ線滅菌を施し癒着防止材とした。 Was the anti-adhesion material subjected to γ-ray sterilization.

【0058】参考例5 実施例7で得られた水膨潤性高分子ゲルを生理食塩液で洗浄後、凍結乾燥してスポンジ状とし、γ線滅菌を施した。 [0058] After washing the water-swellable polymer gel obtained in Reference Example 5 Example 7 with physiological saline, and sponge-like lyophilized, and subjected to γ-ray sterilization. 等量の滅菌された0. 5重量%コラーゲン酸性水溶液(株式会社高研)とともに、ミキサーで無菌的に氷冷下粉砕し、スラリー状の透明な生体組織接着剤とした。 With an equal volume of sterile 0.5% by weight of collagen acidic solution (manufactured Koken), aseptically crushed under ice-cooling in a mixer to obtain a slurry-like transparent biological tissue adhesives.

【0059】比較例1 アルギン酸ナトリウム(和光純薬工業株式会社、500 [0059] Comparative Example 1 sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500
〜600cp)の1重量%水溶液30ml(カルボキシル基:1. 5mmol)に、42mg(0. 7mmo 1 wt% aqueous solution of 30 ml (carboxyl group ~600cp):.. 1 to 5mmol), 42mg (0 7mmo
l)のEDA(和光純薬工業株式会社)と0. 96g EDA of l) (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) and 0. 96g
(5mmol)のEDC・HClを溶解して、12cm By dissolving EDC · HCl of (5 mmol), 12cm
×8cmのポリスチレン製トレイに流延し室温で静置したが8日後にも水膨潤性高分子ゲルは得られなかった。 × 8 cm polystyrene tray to flow cast at room temperature on standing were but 8 days after the water-swellable polymer gel also show was not obtained.

【0060】比較例2 アルギン酸ナトリウム(和光純薬工業株式会社、500 [0060] Comparative Example 2 Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500
〜600cp)の1重量%水溶液30mlを12cm× 12cm × 1 wt% aqueous solution 30ml of ~600Cp)
8cmのポリスチレン製トレイに流延し、1%塩化カルシウム水溶液を重層後、1日静置して半透明のシート状水膨潤性高分子ゲルを得た。 Cast polystyrene tray 8 cm, after overlaid with 1% calcium chloride aqueous solution, and allowed to stand one day to give a semi-transparent sheet water-swellable polymer gel.

【0061】比較例3 1重量%のキトサン500(和光純薬工業株式会社)の0. 01N塩酸水溶液30mlに47mg(0. 3mm [0061] in 0. 01N aqueous hydrochloric acid 30ml of Comparative Example 3 1 wt% of chitosan 500 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) 47 mg (0. 3 mm
ol)のHOSuを溶解した後、74mg(0. 3mm After dissolving the HOSu of ol), 74mg (0. 3mm
ol)のt- ブチルオキシカルボニル- L- グルタミン酸((株)ペプチド研究所)と0. 96g(5mmo ol) of t- butyloxycarbonyl - L-glutamate (Ltd. Peptide Institute) and 0. 96g (5mmo
l)のEDC・HClを加えて、12cm×8cmのポリスチレン製トレイに流延し室温で静置した。 It added EDC · HCl in l), allowed to stand at cast rt flow into polystyrene trays 12cm × 8 cm. およそ2 Approximately 2
4時間後に水膨潤性高分子ゲルが得られた。 Water-swellable polymer gel was obtained after 4 hours.

【0062】比較例4 10重量%デキストラン(和光純薬工業株式会社、分子量10万〜20万)の水溶液30mlに、氷冷撹拌下3 [0062] Comparative Example 4 in aqueous solution 30ml of 10 wt% dextran (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., molecular weight 100,000 to 200,000), stirring and cooling with ice under 3
gの無水コハク酸(和光純薬工業株式会社)を、5NN g of succinic anhydride (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), 5NN
aOH水溶液でpHを8〜9に保ちながら加えて反応させた。 It was reacted by adding, while maintaining the pH at 8-9 with aOH solution. およそ6mlの5NNaOH水溶液が消費された後、氷酢酸でpHを4に調整し、4℃で水に対して2日間透析した。 After being approximately consumed 5NNaOH aqueous 6 ml, with glacial acetic acid to adjust the pH to 4, and dialyzed for 2 days against water at 4 ° C.. 50℃以下の温度で20mlまで濃縮した後、8cm×8cmのガラス板に流延し、60℃で2時間、その後120℃で1時間加熱してフィルム状のコハク酸架橋デキストランを得た。 After concentration to 20ml at 50 ° C. below the temperature, cast on a glass plate of 8 cm × 8 cm, 2 hours at 60 ° C., followed for one hour to obtain a heated and film-like succinic acid cross-linked dextran at 120 ° C.. ECFに浸漬して水膨潤性高分子ゲルを得たが、膨潤時に数センチ以下の大きさに細片化した。 Was immersed in ECF give the water-swellable polymer gel, but broken into small pieces in a few centimeters or less in size at the time of swelling. また得られたゲルは着色が認められ、また脆弱でありピンセットなどでつかむとさらに細片化した。 The resulting gel coloration was observed, also was further minced grab a and tweezers vulnerable.

【0063】試験例1 実施例2および比較例2〜4で得られた水膨潤性高分子ゲルをECFで十分に洗浄した後、以下の各試験を行った。 [0063] After extensive washing with ECF The resulting water-swellable polymer gel in Test Example 1 Example 2 and Comparative Examples 2-4 were subjected to the following tests. 結果はまとめて表1に示す。 The results are shown in Table 1 together. (取り扱い性)各水膨潤性高分子ゲルを約2cm平方の大きさに切断し、歯科用ピンセットで取り扱うことができるかどうかを調べた。 (Handleability) was cut to a size of about 2cm square each water-swellable polymer gel was investigated whether it is possible to handle in dental forceps. (柔軟性)各水膨潤性高分子ゲルを約2cm平方の大きさに切断し、歯科用ピンセットあるいはスパーテルで一方の端を持ち上げて他方の端と接触するまで曲げることができるかどうかを調べた。 (Flexibility) was cut to a size of about 2cm square each water-swellable polymer gel was investigated whether it is possible to bend until it contacts the other end lifting the one end a dental forceps or spatula . (耐熱性)各水膨潤性高分子ゲルを約2cm平方の大きさに切断し、生理食塩液中で湿熱蒸気滅菌(121℃、 (Heat resistance) was cut to a size of about 2cm square each water-swellable polymer gel, moist heat vapor sterilization (121 ° C. in physiological saline,
20分間)を施した。 Was subjected to 20 minutes). 前後の外観および取り扱い性の変化を調べた。 Examined the change before and after the appearance and handling properties. (圧縮挙動)各水膨潤性高分子ゲルを約3cm平方で厚さ0. 3cmの大きさに切断してステンレス製の台にのせ、下端が直径約1cmの平坦面を持つポリプロピレン製の治具で上部から徐々に圧縮した。 (Compression behavior) was cut into a size having a thickness of 0. 3cm in about 3cm square each water-swellable polymer gel placed on a stainless steel platform, a polypropylene jig bottom has a flat surface with a diameter of about 1cm in was gradually compressed from the top. ゲルが破砕するまでの歪と応力の測定値から、初期応力/歪の値と破壊強度を求めた。 From the measured value of the distortion and stress until the gel is crushed to obtain the value as the fracture strength of the initial stress / strain. また両者が破壊点まで直線関係を保つ場合を弾性体、非線形となるものを粘弾性体とした。 The elasticity when both maintain a linear relationship up to the breaking point member, what becomes nonlinear and the viscoelastic body.

【0064】(透明度)各水膨潤性高分子ゲルを光路長1cmの吸光度測定用セルに隙間なく充填し、ベックマン社製DU- 65型分光光度計で400nmの透過度を測定した。 [0064] (Transparency) filled without gaps each water-swellable polymer gel to the absorbance measuring cell having an optical path length of 1 cm, was measured permeability of 400nm in Beckman DU 65 spectrophotometer. (吸水率)各水膨潤性高分子ゲルのECF中の吸水率を吸水重量と乾燥重量の比として求めた。 Was determined water absorption in ECF of (water absorption) Each water-swellable polymer gel as the ratio of the water weight dry weight. (溶解性)各水膨潤性高分子ゲル1gに10mlの注射用水を加え、37℃で15時間静置した。 (Solubility) of water for injection 10ml added to each water-swellable polymer gel 1g, was allowed to stand for 15 hours at 37 ° C.. 各水膨潤性高分子ゲルの溶解の程度を、上清液の0. 22μmの細孔径を持つフィルター(ミリポア社製、マイレクスGV) The degree of dissolution of the water-swellable polymer gel, the filter having a pore diameter of 0. 22 .mu.m of supernatant (Millipore, Millex GV)
の通過性から調べた。 They were examined from the permeable. (耐久性)各水膨潤性高分子ゲルを約2cm平方の大きさに切断し、PBS(0.15MのNaClを含む10 (Durability) was cut to a size of about 2cm square each water-swellable polymer gel, comprising a PBS (0.15 M of NaCl 10
mMリン酸塩緩衝液、pH 7.4)中で、37℃に加温し、毎分160回、24時間振盪して、振盪前後の外観および強度の変化を調べた。 mM phosphate buffer, pH 7.4) medium, warmed to 37 ° C., min 160 times, and shaken for 24 hours to examine changes in the appearance and intensity before and after shaking.

【0065】(細胞毒性試験)各水膨潤性高分子ゲル1 [0065] (Cytotoxicity test) Each water-swellable polymer gel 1
gに10mlの注射用水を加え、37℃で15時間静置した。 Water for injection 10ml added to g, and allowed to stand for 15 hours at 37 ° C.. 上清を濾過滅菌(ミリポア社製、マイレクスG The supernatant was sterile filtered (Millipore, Millex G
V)したもの5mlに1mlの牛胎児血清と4mlの2. 25倍濃縮イーグルMEM培地(日水製薬株式会社)を加えて、これにL929細胞株(ATCC CC 2. fetal calf serum and 4ml of 1ml to 5ml those V) by addition of 25 fold concentrated Eagle's MEM medium (Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.), which in L929 cell line (ATCC CC
L1、NCTC clone929)を30000個/ L1, NCTC clone929) to 30000 /
mlになるように分散し、100μl/ウエルづつヌンク社製96穴U底プレートに分注した。 Dispersed so as to ml, and dispensed into 100 [mu] l / well one by Nunc 96-well U-bottom plate. プレートを5% Plate 5%
CO 2存在下、37℃で3日間培養した後、各ウエルの生細胞数をヨウ化プロピジウムを用いる蛍光法(Brunin The presence of CO 2, the fluorescence method using 37 After culturing for 3 days at ° C., propidium iodide live cell number in each well (Brunin
g, JW, Automated reading of HLA-A,B,C typing and g, JW, Automated reading of HLA-A, B, C typing and
screening. The propidium iodide method. Hum Immun screening. The propidium iodide method. Hum Immun
ol, 5, 225-231 (1982) 参照)で測定して、水膨潤性高分子ゲルを加えない注射用水を用いたコントロールと比較した。 ol, 5, as measured by 225-231 (1982)), were compared with controls with water for injection without the addition of water-swellable polymer gel.

【0066】 [0066]

【表1】 [Table 1]

【0067】(結果)表1より明らかなように、実施例2で得られた水膨潤性高分子ゲルは、医療用材料の構成成分としての水膨潤性高分子ゲルに必要とされる全ての条件を満足し、本目的に適していることが示された。 [0067] (Results) Table 1 As is clear, water-swellable polymer gel obtained in Example 2, all that is required for water-swellable polymer gel as a component of a medical material satisfy the condition, it was shown to be suitable for this purpose.

【0068】試験例2 実施例2、比較例2および比較例3で得られた水膨潤性高分子ゲルを参考例2に示した方法と同様にしてシート状創傷被覆材を得た。 [0068] Test Example 2 Example 2 to obtain a sheet-form wound dressing a water-swellable polymer gel obtained in Comparative Example 2 and Comparative Example 3 In the same manner as described in Reference Example 2. ブタの背部に5cm×5cmの分創欠損創を計8個作製し、実施例2から得られたシート状創傷被覆材と比較例2または比較例3から得られたシート状創傷被覆材を、それぞれ隣接する創部に7日間貼付する、いわゆるハーフサイド試験を各2組づつ行った。 Minute wound defect wounds 5 cm × 5 cm on the back of the pig total of eight produced, the sheet-like wound dressings obtained from Comparative Example 2 or Comparative Example 3 and the sheet-like wound dressing obtained from example 2, respectively affixed adjacent wound to 7 days, was performed the two pairs at a time the so-called half-side test.

【0069】(結果)実施例2から得られたシート状創傷被覆材と比較例2から得られたシート状創傷被覆材の比較において、試験期間中実施例2から得られたシート状創傷被覆材の方が2例とも透明性において優れていた。 [0069] (Results) Example Comparative of the sheet-like wound dressings 2 and the sheet-like wound dressing from Comparative Example 2, a sheet-like wound dressings obtained from the test period in Example 2 who was excellent in transparency both cases. 7日目の治癒傾向も実施例2から得られたシート状創傷被覆材の方が優れていた。 Healing tendency of 7 days was also superior to the sheet-like wound dressings obtained from Example 2. さらに比較例2から得られたシート状創傷被覆材は創部に貼付中に溶解する傾向があった。 Sheet wound dressing further obtained from Comparative Example 2 had a tendency to dissolve during application to the wound. 実施例2から得られたシート状創傷被覆材と比較例3から得られたシート状創傷被覆材の比較においては、7日目の治癒傾向と透明性において有意な差を認めなかったが、比較例3から得られたシート状創傷被覆材は創部で貼付後数分間で液状化することがわかった。 In comparison of the sheet-like wound dressing obtained from Comparative Example 3 and the sheet-like wound dressing obtained from example 2, although no significant differences in the healing tendency and transparency of 7 days, compared sheet wound dressings obtained from example 3 was found to be liquefied in a few minutes after application at the wound.
創傷被覆材が液状化することは以下の点で致命的な欠点である。 The wound dressing to liquefaction is fatal disadvantage in the following point. 即ち、漏れから細菌感染を生じる可能性が大変高く、一旦感染すると細菌の培地となり大変危険であること、衣服やベッドを汚染して周囲に細菌感染を拡げる可能性が高いことである。 In other words, is very likely to produce a bacterial infection from a leak, it is a once when the danger very become the medium of a bacterial infection, is that it is more likely to spread the bacterial infection to the environment contaminated clothing and bed. これは臨床上大きな問題となっている。 This has become a clinically significant problem. これを回避するためには頻繁に被覆材交換が必要であるが、貼り替えによる患者の苦痛、看護の手間の増大とともに、創にダメージが生じる。 Although in order to avoid this it is necessary frequently dressing changes, pain of patients with paste replacement, with increasing nursing labor, damage to the wound occurs. さらに保持されていた滲出液中の治癒促進因子が交換の度に失われるので、閉鎖性被覆材の最大の利点が発揮できなくなる。 Furthermore, since the healing promoting factor of exudate that has been held is lost every time the exchange, the biggest advantage of the occlusive dressing can not be exhibited.
実施例2から得られたシート状創傷被覆材はいずれの試験においても対照に劣らない治癒率と、透明性を示し、 A cure rate not inferior to the control in both tests the sheet-like wound dressing from Example 2, shows a transparency,
液状化する傾向は全くなかった。 Prone to liquefaction was no.

【0070】実施例8 水膨潤性高分子ゲルとしてアルギン酸ゲル、スペーサーとして-NH-(CH 2 ) 2 -NH-CO-CH 2 -NH-CO-(CH 2 ) 2 -CO- 、分解性基として-(Ala) 2 -Pro-Val-、および薬剤としてマフェニド(Mafenide)からなる医療用高分子ゲル〔次式(II [0070] Alginate gels as Example 8 water-swellable polymer gel, -NH- as a spacer (CH 2) 2 -NH-CO -CH 2 -NH-CO- (CH 2) 2 -CO-, decomposable group as - (Ala) 2 -Pro-Val- , and medical polymer gel [equation consisting mafenide (mafenide) as a medicine (II
I )参照〕を、下記に示す方法で製造した。 The I)], the produced by the method shown below.

【0071】 [0071]

【化1】 [Formula 1]

【0072】2. 3g(20mmol)のN−ヒドロキシコハク酸イミド(HOSu、(株)ペプチド研究所) [0072] 2. 3 g (20 mmol) of N- hydroxysuccinimide (HOSu, (Ltd.) Peptide Institute)
を酢酸エチル150mlに溶解し、10mlの酢酸エチルに溶解した0. 6g(10mmol)のエチレンジアミン(EDA、和光純薬工業株式会社)を室温で撹拌しながら滴下した。 Was dissolved in ethyl acetate 150 ml, was ethylenediamine 0. 6 g was dissolved in ethyl acetate 10ml (10mmol) (EDA, produced by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was added dropwise with stirring at room temperature. 滴下終了後さらに1時間撹拌を続けた。 After completion of the dropwise addition, stirring was continued for 1 hour. 析出した結晶を濾取し、減圧下に乾燥して2. 9g The precipitated crystals were collected by filtration, 2. 9 g and dried under reduced pressure
(収率約100%)のエチレンジアミン2N−ヒドロキシコハク酸イミド塩(EDA・2HOSu)を得た。 To give ethylenediamine 2N- hydroxysuccinimide salt (yield about 100%) (EDA · 2HOSu). アルギン酸ナトリウム(和光純薬工業株式会社、100〜 Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 100
150cp)の1重量%水溶液100mlに、0. 11 1 wt% aqueous solution 100ml of 150cp), 0. 11
g(0. 33mmol)のN- (t- ブチルオキシカルボニルグリシル)エチレンジアミンのHOSu塩(Bo g (0. 33 mmol) of N-(t-butyloxycarbonyl-glycyl) ethylenediamine HOSu salt (Bo
c−Gly−EDA・HOSu、(株)ペプチド研究所)と0. 19g(1mmol)の1−エチル−3− c-Gly-EDA · HOSu, the Corporation Peptide Institute) and 0. 19 g (1 mmol) 1-ethyl-3-
(3−ジメチルアミノプロピル)−カルボジイミド塩酸塩(EDC・HCl、(株)ペプチド研究所)を加え、 (3-dimethylaminopropyl) - carbodiimide hydrochloride (EDC · HCl, (Ltd.) Peptide Institute) was added,
4℃で終夜撹拌した。 And the mixture was stirred overnight at 4 ℃. 得られた水溶液をトリフルオロ酢酸(TFA、(株)ペプチド研究所)200ml中に滴下し、室温で1時間撹拌した。 The resulting aqueous solution of trifluoroacetic acid (TFA, (Ltd.) Peptide Institute) was added dropwise to 200 ml, and stirred at room temperature for 1 hour. 生じた沈殿物をメタノールでよく洗浄し、減圧乾燥してAlgin−EDA−G The resulting precipitate was washed well with methanol, Algin-EDA-G and dried under reduced pressure
lyを得た。 It was obtained ly. ニンヒドリン法で求めたアミノ基の導入量は20μmol/g(1重量%のゲル換算で、0. 2μ The introduction of amino groups determined by the ninhydrin method at 20 [mu] mol / g (1% by weight of the gel terms, 0. 2.mu.
mol/ml)であった。 It was mol / ml). また、得られたAlgin− In addition, the resulting Algin-
EDA−Glyの0. 05M NaHCO 3水溶液の2 2 of 0. 05M NaHCO 3 aqueous EDA-Gly
20nm〜400nmの紫外吸収スペクトルを、光路長1cmの吸光度測定用セルを用いてベックマン社製DU The ultraviolet absorption spectrum of 20Nm~400nm, Beckman using absorbance measuring cell of optical path length 1 cm DU
- 65型分光光度計で測定した結果を第1図に示す。 - shows the results of measurement with 65 spectrophotometer in Figure 1.

【0073】液相合成法により得られた46mg(0. [0073] 46mg obtained by the liquid phase synthesis method (0.
1mmol)のBoc-(Ala) 2 -Pro-Valと22mg(0. 1 1mmol) of Boc- (Ala) 2 -Pro-Val and 22mg (0. 1
mmol)のマフェニド塩酸塩(Sigma)をジメチルホルムアミド(DMF)に溶解し、14mg(0. 1 mmol) mafenide hydrochloride (Sigma) was dissolved in dimethylformamide (DMF), 14mg (0. 1
mmol)のヒドロキシベンズトリアゾ−ル(HOB Hydroxybenztriazole azo mmol) - Le (HOB
t、(株)ペプチド研究所)と95mg(0. 5mmo t, (Ltd.) Peptide Institute) and 95mg (0. 5mmo
l)のEDC・HClと14μl(0. 1mmol)のトリエチルアミンを加えて氷冷下1時間、その後室温で一晩撹拌した。 EDC · HCl and 14 .mu.l (0. 1 mmol) of triethylamine was added under ice cooling for 1 hour in l), it was then stirred at room temperature overnight. 水を加えて析出する不溶物を濾取し、水洗後減圧下に乾燥して35mg(収率50%)のBoc-(A The insoluble matter is collected by filtration precipitated by adding water, and dried under reduced pressure after washing 35mg (50% yield) Boc-(A
la) 2 -Pro-Val-Mafenide を得た。 la) to obtain a 2 -Pro-Val-Mafenide. 得られたBoc-(Ala) 2 -P The resulting Boc- (Ala) 2 -P
ro-Val-Mafenide の全量を5%の水を含むTFA10m ro-Val-Mafenide of the total amount TFA10m containing 5% of water
lに溶解して室温で1時間静置し、その後ジエチルエ− It was dissolved in l and allowed to stand at room temperature for 1 hour, then diethyl -
テルで沈殿させて(Ala) 2 -Pro-Val-Mafenide を得た。 By precipitation with ether (Ala) to give a 2 -Pro-Val-Mafenide. 得られた(Ala) 2 -Pro-Val-Mafenide の全量をDMFに溶解し、15mg(0. 15mmol)の無水コハク酸を加えて、室温で終夜撹拌することにより約20mgのSuc- The resulting (Ala) the total amount of 2 -Pro-Val-Mafenide was dissolved in DMF, 15 mg was added succinic anhydride (0. 15mmol), about 20mg by stirring at room temperature overnight Suc-
(Ala) 2 -Pro-Val-Mafenide を得た。 (Ala) to give a 2 -Pro-Val-Mafenide. 1重量%のAlgi 1% by weight of Algi
n−EDA−Glyの 0.05M NaHCO 3水溶液5mlに、7mg(10μmol)のSuc-(Ala) 2 -Pro in 0.05 M NaHCO 3 aqueous solution 5ml of n-EDA-Gly, 7mg of (10μmol) Suc- (Ala) 2 -Pro
-Val-Mafenide と95mg(0. 5mmol)のEDC -Val-Mafenide and 95mg (0. 5mmol) of EDC
・HClを加えて4℃で終夜撹拌した。 - it was stirred overnight at added 4 ° C. HCl. さらに、11m In addition, 11m
g(38μmol)のEDA・2HOSuと0. 19g g (38μmol) EDA · 2HOSu and 0. 19g of
(1mmol)のEDC・HClを加えて溶解した後、 It was added and dissolved into the EDC · HCl of (1 mmol),
直径3cmのシャーレに流延し、室温で1日静置してゲル化させた。 It was cast into a Petri dish with a diameter of 3 cm, and allowed to gel on standing at room temperature for 1 day. 得られたゲルを純水中でよく洗浄し、エタノールに置換後、無菌的に減圧乾燥して乾燥シート状の医療用高分子ゲルを得た。 The resulting gel was washed well with pure water, after the replacement of ethanol was aseptically dried under reduced pressure to obtain a dry sheet-like medical polymer gel.

【0074】実施例9 水膨潤性高分子ゲルとしてPVAゲル、スペーサーとして-CH 2 -CH(OH)-CH 2 -NH-CO-(CH 2 ) 2 CO- 、分解性基として [0074] PVA gel as Example 9 water-swellable polymer gel, -CH 2 -CH as a spacer (OH) -CH 2 -NH-CO- (CH 2) 2 CO-, as decomposable group
-Ala-Gly-Phe- 、および薬剤としてアクリノール(AC -Ala-Gly-Phe-, and the drug as Acrinol (AC
R)からなる医療用高分子ゲル〔次式(IV)参照〕を、 Medical polymer gel consisting of R) [the following formula (IV) see] a,
下記に示す方法で製造した。 It was prepared by the following method.

【0075】 [0075]

【化2】 ## STR2 ##

【0076】2重量%のPVA(平均重合度1790 [0076] 2 wt% of PVA (average polymerization degree 1790
0、ケン化度99.9%、ダイアッド表示によるシンジオタクティシティー53%)水溶液を、−70℃に冷却したn−ヘキサン中に撹拌しながら滴下した後、室温融解と−70℃凍結を2回繰り返してPVAゲルビーズを得た。 0, saponification degree of 99.9%, after a syndiotacticity of 53%) aqueous solution by dyads display, was added dropwise with stirring in n- hexane was cooled to -70 ° C., at room temperature melting and -70 ° C. Frozen 2 to obtain a PVA gel beads repeated times. 得られたPVAゲルビーズをアセトンでよく洗浄して減圧乾燥した。 The resulting PVA gel beads were dried under reduced pressure and washed well with acetone. 乾燥PVAゲルビーズ20gを0. The dry PVA gel beads 20g 0.
5N NaOH水溶液50mlとジオキサン50mlの混合液に懸濁し、エピクロルヒドリン10mlと約40 Were suspended in a mixture of 5N NaOH aqueous solution 50ml of dioxane 50ml, epichlorohydrin 10ml about 40
℃で2時間反応させて、エポキシ化PVAゲルビーズを得た。 2 hours and reacted at ° C., to obtain an epoxy-PVA gel beads. 水洗後、100mlのアンモニア水に懸濁し、約40℃で2時間反応させてアミノ化PVAゲルビーズを得た。 After washing with water, it was suspended in aqueous ammonia 100 ml, to give an aminated PVA gel beads by 2 hours at about 40 ° C.. 得られたアミノ化PVAゲルビーズをアセトンでよく洗浄して減圧乾燥した。 The resulting aminated PVA gel beads were dried under reduced pressure and washed well with acetone. ニンヒドリン法で求めたアミノ基の導入量は50μmol/g(2重量%のゲル換算で、1μmol/ml)であった。 The introduction of amino groups determined by the ninhydrin method (2% by weight of the gel in terms, 1μmol / ml) 50μmol / g was. 実施例8における、Boc-(Ala) 2 -Pro-Valの代わりにBoc-Ala-Gly-Phe In Example 8, Boc- (Ala) 2 -Pro -Val Boc-Ala-Gly-Phe instead of
を、マフェニドの代わりにアクリノール(和光純薬工業株式会社)を用いる以外は同様の方法によりSuc-Ala-Gl The, except using Acrinol (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) in place of mafenide similar manner by Suc-Ala-Gl
y-Phe-ACR を得た。 To obtain a y-Phe-ACR. アミノ化PVAゲルビーズ100m Amino-PVA-gel beads 100m
gを0.05M NaHCO 3水溶液10mlに懸濁し、6mg(10μmol)のSuc-Ala-Gly-Phe-ACR と96mg(0. 5mmol)のEDC・HClを加えて4℃で終夜撹拌した。 The g was suspended in 0.05 M NaHCO 3 aqueous solution 10 ml, and stirred overnight at 4 ° C. by the addition of EDC · HCl of 6mg Suc-Ala-Gly-Phe -ACR and 96mg of (10μmol) (0. 5mmol) . よく水洗した後、エタノールに置換し、無菌的に減圧乾燥することにより、ビーズ状の医療用高分子ゲルを得た。 After thorough washing with water, replaced with ethanol, by aseptically drying under reduced pressure, to give a bead-like medical polymer gel.

【0077】実施例10 水膨潤性高分子ゲルとしてPVAゲル、スペーサーとして-CH 2 -CH(OH)-CH 2 -NH-CO-(CH 2 ) 2 CO- 、分解性基として [0077] PVA gel as Example 10 water-swellable polymer gel, -CH 2 -CH (OH) -CH 2 -NH-CO- as a spacer (CH 2) 2 CO-, as decomposable group
-Ala-Ala-Phe- 、および薬剤としてゲンタマイシン(G -Ala-Ala-Phe-, and the drug as gentamycin (G
M)からなる医療用高分子ゲル〔次式(V)参照〕を、 Medical polymer gel consisting of M) [the following formula (V) refer] to,
下記に示す方法で製造した。 It was prepared by the following method.

【0078】 [0078]

【化3】 [Formula 3]

【0079】実施例9と同様の2重量%PVA水溶液3 [0079] Example 9 the same 2 wt% PVA aqueous solution 3
0mlを10cm×10cmのガラス板上に流延し、− Cast on a glass plate of 10cm × 10cm 0ml, -
20℃に一晩静置して凍結した。 And frozen and allowed to stand overnight at 20 ℃. さらに、室温での融解と−20℃の凍結を2回繰り返してPVAゲルシートを得た。 Furthermore, to obtain a PVA gel sheet by repeating 2 cycles of freezing and melting and -20 ° C. at room temperature. 実施例9と同様の方法でPVAゲルシートにアミノ基を導入した。 An amino group was introduced to the PVA gel sheet in the same manner as in Example 9. 水膨潤状態でニンヒドリン法により測定したアミノ基導入量は20μmol/mlであった。 Amino group introduced amount measured by the ninhydrin method at water-swollen state was 20 [mu] mol / ml.
アミノ化されたPVAゲルシートを100mlのジオキサン中で1gの無水コハク酸と一晩振盪し、その後水洗してカルボキシル基の導入されたPVAゲルシートを得た。 The aminated PVA gel sheet was shaken overnight and succinic anhydride 1g in dioxane 100 ml, to give the introduced PVA gel sheet of the carboxyl group and thereafter washed with water. ニンヒドリン法ではアミノ基が検出されず、カルボキシル基の導入量は20μmol/mlと計算された。 Not detected amino groups by ninhydrin method, the introduced amount of carboxyl groups was calculated to be 20 [mu] mol / ml.
さらにジオキサン100ml中でカルボキシル基の導入されたPVAゲルシートと0. 23g(2mmol)のHOSuと0. 4g(2mmol)のDCCとを室温で一晩振盪した。 Further the DCC of HOSu and 0. 4g (2 mmol) of the introduced PVA gel sheet with 0. 23 g of a carboxyl group in dioxane 100 ml (2 mmol) was shaken overnight at room temperature. メタノールで良く洗浄した後、固相法で合成した74mg(0. 2mmol)の-Ala-Ala-Phe- After washing well with methanol, -Ala-Ala-Phe- of 74mg synthesized in the solid phase method (0. 2 mmol)
を溶解した10mMリン酸塩緩衝液(PB、pH7. 10mM phosphate buffer (PB, pH 7 was dissolved.
4)10mlを加え、4℃で一晩振盪した。 4) 10 ml was added and shaken overnight at 4 ° C.. よく水洗した後、ゲンタマイシン硫酸塩(GM、シグマ)0. 37 After thorough washing with water, gentamycin sulfate (GM, Sigma) 0.37
g(0. 5mmol)と0. 38g(2mmol)のE g (0. 5mmol) and 0. E of 38g (2mmol)
DC・HClを加えて4℃で終夜撹拌した。 Was stirred overnight at 4 ° C. was added a DC · HCl. よく水洗してシート状の医療用高分子ゲルを得た。 To obtain a sheet-like medical polymer gel washed thoroughly with water to.

【0080】実施例11 水膨潤性高分子ゲルとしてアルギン酸ゲル、スペーサーとして-NH-(CH 2 ) 2 -NH-CO-CH 2 -NH-CO-(CH 2 ) 2 -CO- 、分解性基として-Ala-Ala-Phe- 、および薬剤としてノルフロキサシン(NFLX)からなる医療用高分子ゲル〔次式(VI)参照〕を、下記に示す方法で製造した。 [0080] Example 11 The water-swellable polymer gel as alginic acid gel, -NH- as a spacer (CH 2) 2 -NH-CO -CH 2 -NH-CO- (CH 2) 2 -CO-, decomposable group as -Ala-Ala-Phe-, and medical polymer gel [equation (VI) see FIGS consisting norfloxacin (NFLX) as drug were prepared by the following method.

【0081】 [0081]

【化4】 [Of 4]

【0082】アルギン酸ナトリウム(和光純薬工業株式会社、500〜600cp)の1重量%水溶液100m [0082] Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500~600cp) of 1 wt% aqueous solution of 100m
lに、0. 11g(0. 33mmol)のBoc−Gl To l, 0. Boc-Gl of 11g (0. 33mmol)
y−EDA・HOSuと0. 96g(5mmol)のE y-EDA · HOSu and 0. 96g of (5mmol) E
DC・HClを加え、4℃で終夜撹拌した。 DC · HCl and the mixture was stirred overnight at 4 ° C.. 得られた水溶液をTFA200ml中に滴下し、室温で1時間撹拌した。 The resulting aqueous solution was dropped into TFA200ml, and stirred at room temperature for 1 hour. 不溶物をメタノールでよく洗浄し、減圧乾燥してAlgin−EDA−Glyを得た。 The insolubles were washed well with methanol to obtain Algin-EDA-Gly and dried under reduced pressure. ニンヒドリン法で求めたアミノ基の導入量は55μmol/g(1重量% The introduction of amino groups determined by the ninhydrin method 55μmol / g (1 wt%
のゲル換算で、0. 55μmol/ml)であった。 In the gel terms was 0. 55μmol / ml). また、得られたAlgin−EDA−Glyの0. 05M In addition, the resulting Algin-EDA-Gly 0. 05M
NaHCO 3水溶液の220nm〜400nmの紫外吸収スペクトルは第1図とほぼ同等であった。 Ultraviolet absorption spectrum of 220nm~400nm aqueous NaHCO 3 was almost the same as Figure 1. 得られたAlgin−EDA−Glyを1重量%となるように0. 05MNaHCO 3水溶液に溶解した溶液10ml The resulting Algin-EDA-Gly was dissolved in 0. 05MNaHCO 3 aqueous solution so that 1 wt% solution 10ml
に、氷冷撹拌下5mg(50μmol)の無水コハク酸を加え、5規定のNaOH水溶液を滴下することによりpHを7前後に保った。 To, succinic anhydride with stirring under ice-cooling 5 mg (50 [mu] mol) was added, pH of 7 was maintained before and after the dropwise addition of 5N aqueous NaOH solution. およそ2時間でpHが低下しなくなった。 pH no longer decreased approximately 2 hours. 反応液を4℃で純水に対して2日間透析して、Algin−EDA−Gly−Sucを得た。 It was dialyzed for 2 days against deionized water and the reaction mixture at 4 ° C., to obtain a Algin-EDA-Gly-Suc. ニンヒドリン法で求めた残存アミノ基量は4μmol/gであり、カルボキシル基の導入率は1重量%のゲル換算で、0. 51μmol/mlと計算された。 Residual amino group content was determined by the ninhydrin method is 4μmol / g, rate of introduction of carboxyl groups is 1% by weight of the gel in terms was calculated to 0. 51μmol / ml.

【0083】10mlの1重量%のAlgin−EDA [0083] 1% by weight of Algin-EDA of 10ml
−Gly−Suc水溶液に、5mg(40μmol)のHOSuと40mg(200μmol)のEDC・HC To -Gly-Suc aqueous solution, EDC · HC of 5mg HOSu of (40μmol) and 40mg (200μmol)
lを加え、4℃で終夜撹拌しAlgin−EDA−Gl l was added, stirred overnight and Algin-EDA-Gl at 4 ° C.
y−Suc−OSuを得た。 To obtain a y-Suc-OSu. この反応液に、固相合成法で得られた13mg(40μmol)のAla-Ala-PheをPB1mlに溶解したものを加え、4℃で終夜撹拌した。 To this reaction mixture was added a solution obtained by dissolving Ala-Ala-Phe in 13 mg (40 [mu] mol) obtained in the solid-phase synthesis method PB1ml, and stirred overnight at 4 ° C.. 反応液を純水に対して2日間透析して、Algin The reaction solution was dialyzed for two days against pure water, Algin
−EDA−Gly−Suc−Ala-Ala-Phe を得た。 It was obtained -EDA-Gly-Suc-Ala-Ala-Phe. 得られたAlgin−EDA−Gly−Suc−Ala-Ala-Ph The resulting Algin-EDA-Gly-Suc-Ala-Ala-Ph
e を純水で10倍希釈して測定した紫外吸収スペクトルを第2図に示す。 The ultraviolet absorption spectrum measured by diluting 10-fold the e with pure water is shown in Figure 2. 258nmにフェニルアラニン(Phe 258nm to phenylalanine (Phe
)のフェニル基に由来する吸収が認められた。 Absorption derived from a phenyl group) were observed. 得られたAlgin−EDA−Gly−Suc−Ala-Ala-Phe The resulting Algin-EDA-Gly-Suc-Ala-Ala-Phe
の全量に、5mg(40μmol)のHOSuと40m To the total amount, HOSu of 5mg (40μmol) and 40m
g(200μmol)のEDC・HClを加え、4℃で終夜撹拌した。 Added EDC · HCl of g (200 [mu] mol), and stirred overnight at 4 ° C.. さらに、1mlのジメチルスルフォキシド(DMSO)に溶解した13mg(36μmol)のノルフロキサシン(NFLX、Sigma)を加えて4 Further, norfloxacin (NFLX, Sigma) of 13mg was dissolved in dimethyl sulfoxide 1ml (DMSO) (36μmol) was added to 4
℃で終夜撹拌した。 And the mixture was stirred overnight at ℃. その後、22mg(76μmol) Then, 22mg (76μmol)
のEDA・2HOSuと155mg(1mmol)のE Of EDA · 2HOSu and 155mg E of (1mmol)
DCを加えて溶解した後、直径8cmのシャーレに流延し、室温で1日静置してゲル化させた。 Were added and dissolved into the DC, allowed to gel on standing 1 day petri dish with a diameter of 8cm was cast at room temperature. 得られたゲルを生理食塩液で良く洗浄してシート状の医療用高分子ゲルを得た。 The resulting gel was washed well with physiological saline to obtain a sheet-like medical polymer gel. 得られたゲルの紫外吸収スペクトルを第3図に示す。 The ultraviolet absorption spectrum of the resulting gel is shown in Figure 3. 280nmと330nmにノルフロキサシンに由来する吸収が認められた。 Absorption derived from norfloxacin was observed in the 280nm and 330nm.

【0084】実施例12 水膨潤性高分子ゲルとしてアルギン酸ゲル、スペーサーとして-NH-(CH 2 ) 2 -NH-CO-CH 2 -NH-CO-(CH 2 ) 2 -CO- 、分解性基として-Ala-Ala-Phe- 、および薬剤としてゲンタマイシン(GM)からなる医療用高分子ゲル〔次式(VII) [0084] Example 12 The water-swellable polymer gel as alginic acid gel, -NH- as a spacer (CH 2) 2 -NH-CO -CH 2 -NH-CO- (CH 2) 2 -CO-, decomposable group as -Ala-Ala-Phe-, and the drug consisting of gentamicin (GM) as a medical polymer gel [equation (VII)
参照〕を、下記に示す方法で製造した。 Reference] was prepared by the following method.

【0085】 [0085]

【化5】 [Of 5]

【0086】4. 7g(0. 01mol)のNα−フルオレニルメトキシカルボニル−Nε−t−ブチルオキシカルボニル−L−リジン(Fmoc−Lys(Bo [0086] 4. 7g (0. 01mol) of Nα--fluorenylmethoxycarbonyl -Nε-t- butyloxycarbonyl -L- lysine (Fmoc-Lys (Bo
c)、(株)ペプチド研究所)と1. 15g(0. 01 c), (Ltd.) Peptide Institute) and 1. 15g (0. 01
mol)のHOSuを酢酸エチル50mlに溶解し、氷冷下に撹拌しながら1. 7g(0. 011mol)のD The HOSu of mol) was dissolved in ethyl acetate 50 ml, D with stirring under ice cooling 1. 7g (0. 011mol)
CCを加え、氷冷下1時間、その後室温で一晩撹拌した。 CC was added, under ice-cooling for 1 hour, followed by stirring at room temperature overnight. 不溶物を濾過して除き、濾液を減圧濃縮して得られる結晶をイソプロピルアルコール−酢酸エチルから再結晶した。 The insoluble was filtered, the crystals obtained filtrate was concentrated under reduced pressure isopropyl alcohol - was recrystallized from ethyl acetate. 結晶を減圧乾燥して4. 7g(収率80%)のNα−フルオレニルメトキシカルボニル−Nε−t−ブチルオキシカルボニル−L−リジル−N −ヒドロキシ無水コハク酸イミドエステル(Fmoc−Lys(Bo The crystals were dried under reduced pressure 4. 7 g (80% yield) of Nα--fluorenylmethoxycarbonyl -Nε-t- butyloxycarbonyl -L- lysyl -N - hydroxy succinic anhydride ester (Fmoc-Lys (Bo
c)−OSu)を得た。 c) -OSu) was obtained. 2. 82g(5mmol)のF 2. F of 82g (5mmol)
moc−Lys(Boc)−OSuを酢酸エチル50m moc-Lys (Boc) -OSu ethyl acetate 50m
lに溶解して室温で撹拌しながら、0. 15g(2. 5 While stirring at room temperature was dissolved in l, 0. 15g (2. 5
mmol)のエチレンジアミンを溶解した酢酸エチル溶液10mlを滴下した。 The ethyl acetate solution 10ml of ethylene diamine were dissolved in mmol) was added dropwise. 滴下終了後さらに一晩撹拌を続けた。 After completion of the dropwise addition stirring was continued overnight. 析出する結晶を濾取して、減圧下に乾燥して2. And filtered crystals precipitated, 2 and dried under reduced pressure.
4g(収率100%)のN、N'−ジ(Nα−フルオレニルメトキシカルボニル−Nε−t−ブチルオキシカルボニル−L−リジル)−エチレンジアミン((Fmoc 4g N (100% yield), N'-di (-L-N @ .alpha-fluorenylmethoxycarbonyl -Nε-t- butyloxycarbonyl-lysyl) - ethylenediamine ((Fmoc
−Lys(Boc)) 2 −EDA)を得た。 Was obtained -Lys the (Boc)) 2 -EDA).

【0087】得られた(Fmoc−Lys(Boc)) [0087] obtained (Fmoc-Lys (Boc))
2 −EDAの全量を200mlのジオキサンに懸濁し、 The total amount of 2-EDA was suspended in dioxane 200 ml,
40mlのピペリジン(和光純薬工業株式会社)を加え室温で1時間撹拌した。 40ml of piperidine (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was added and stirred for 1 hour at room temperature. 減圧濃縮して得られる結晶をジエチルエーテルで洗浄した後、減圧下に乾燥してN、 After the crystals obtained by concentration under reduced pressure was washed with diethyl ether, N and dried under reduced pressure,
N'−ジ(Nε−t−ブチルオキシカルボニル−L−リジル)−エチレンジアミン((Lys(Boc)) 2 N'- di (Nε-t- butyloxycarbonyl -L- lysyl) - ethylenediamine ((Lys (Boc)) 2 -
EDA)を得た。 Was obtained EDA). 得られた((Lys(Boc)) 2 The resulting ((Lys (Boc)) 2 -
EDA)の全量を10mlのTFAに溶解し、室温で2 The total amount of EDA) was dissolved in TFA for 10 ml, 2 at room temperature
時間撹拌した。 And the mixture was stirred time. 減圧濃縮して得られる結晶をジエチルエーテルで洗浄した後、減圧下に乾燥してN、N'−ジ(L−リジル)−エチレンジアミントリフルオロ酢酸塩((Lys) 2 −EDA・4TFA)を得た。 After the crystals obtained by concentration under reduced pressure was washed with diethyl ether, N and dried under reduced pressure, N'- di (L- lysyl) - give ethylenediamine trifluoroacetate ((Lys) 2 -EDA · 4TFA ) It was. 得られた全量の(Lys) 2 −EDA・4TFAを50mlの精製水に溶解し、1MのHOSu水溶液で平衡化した20 The obtained total amount of (Lys) 2 -EDA · 4TFA was dissolved in purified water 50 ml, it was equilibrated with HOSu aqueous 1M 20
gのジエチルアミノエチルセルロース(DE52、ワットマン)を充填したカラムに通じ、通過液を減圧濃縮してN、N'−ジ(L−リジル)−エチレンジアミンN − g of diethylaminoethyl cellulose (DE52, Whatman) through a column packed with, N the effluent was concentrated under reduced pressure, N'- di (L- lysyl) - ethylenediamine N -
ヒドロキシコハク酸イミド塩((Lys) 2 −EDA・ Hydroxysuccinimide salt ((Lys) 2 -EDA ·
4HOSu)0. 78g(収率40%)を得た。 4HOSu) 0. Was obtained 78 g (40% yield). アルギン酸ナトリウム(和光純薬工業株式会社、500〜60 Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500-60
0cp)の1重量%水溶液30mlに、0. 29g 1 wt% aqueous solution 30ml of 0cp), 0. 29g
(0. 375mmol)の(Lys) 2 −EDA・4H (0. 375mmol) of the (Lys) 2 -EDA · 4H
OSuおよび0. 96g(5mmol)のEDC・HC EDC · HC of OSu and 0. 96g (5mmol)
lを溶解して、12cm×8cmのポリスチレン製トレイに流延し室温で静置した。 By dissolving l, allowed to stand at cast rt flow into polystyrene trays 12cm × 8 cm. およそ15時間後にゲルが得られた。 Gel was obtained approximately 15 hours.

【0088】得られたゲルをよく水洗した後、33mg [0088] After the resulting gel was thoroughly washed with water, 33mg
(0. 1mmol)のBoc−Gly−EDA・HOS Boc-Gly-EDA · HOS of (0. 1mmol)
uと0. 38g(2mmol)のEDC・HClを加え、4℃で終夜振盪した。 It added EDC · HCl of u and 0. 38g (2mmol), and shaken overnight at 4 ° C.. さらに、ポリプロピレン製のトレイ中で100mlのTFAと、室温で2時間振盪した。 Furthermore, a TFA of 100ml in polypropylene trays, and shaken at room temperature for 2 hours. ニンヒドリン法で求めた、ゲル1mlあたりのアミノ基量は0. 34μmolであった。 Was determined by the ninhydrin method, amino groups per gel 1ml was 0. 34μmol. 得られたゲルに2 2 To the resulting gel
0mg(0. 1mmol)の無水コハク酸を加え、振盪しながら5規定のNaOH水溶液を滴下してpHを7前後に保った。 0 mg (0. 1 mmol) of succinic anhydride was added, keeping the pH 7 before and after dropwise 5N NaOH aqueous solution with shaking. およそ5時間でpHが低下しなくなった。 pH no longer decreased approximately 5 hours.
純水でよく洗浄した後のゲル中の残存アミノ基量はほとんど検出されず、カルボキシル基の導入率は、0. 34 Residual amino group content in the gel after washing with pure water was hardly detected, the introduction rate of the carboxyl group is 0.34
μmol/mlと計算された。 It was calculated to [mu] mol / ml. さらに、20mg(0. In addition, 20mg (0.
16mmol)のHOSuと160mg(0. 8mmo HOSu and 160mg (0 of 16mmol). 8mmo
l)のEDC・HClを加え、4℃で終夜振盪した。 Added EDC · HCl in l), it was shaken overnight at 4 ° C.. これに、固相合成法で得られた13mg(40μmol) To this was obtained by solid-phase synthesis method 13 mg (40 [mu] mol)
の-Ala-Ala-Phe- をPB1mlに溶解したものを加え、 -Ala-Ala-Phe- was added a solution obtained by dissolving the PB1ml of
4℃で終夜撹拌した。 And the mixture was stirred overnight at 4 ℃. 得られたゲルをよく水洗した後、 The resulting gel was well washed with water,
20mg(0.16mmol)のHOSuと160mg HOSu and 160mg of 20mg (0.16mmol)
(0. 8mmol)のEDC・HClを加え、4℃で終夜振盪した。 The EDC · HCl of (0. 8 mmol) was added and shaken overnight at 4 ° C.. これに、20mlの0.05M NaHC To this, 0.05M of 20ml NaHC
3水溶液に溶解した30mg(40μmol)のGM O 3 GM of 30mg was dissolved in an aqueous solution (40 [mu] mol)
と38mg(0. 2mmol)のEDC・HClを加えて、4℃で終夜振盪した。 And 38mg added EDC · HCl of (0. 2mmol), and shaken overnight at 4 ° C.. 得られたゲルを生理食塩液で良く洗浄して透明なシート状の医療用高分子ゲルを得た。 The resulting gel was washed well with physiological saline to give a transparent sheet-like medical polymer gel.

【0089】実施例13 水膨潤性高分子ゲルとしてアルギン酸ゲル、スペーサーとして-NH-(CH 2 ) 2 -NH-CO-CH 2 -NH-CO-(CH 2 ) 2 -CO- 、分解性基として-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro- 、および薬剤として形質転換成長因子β(TGF- β)からなる医療用高分子ゲル〔次式(VIII)参照〕を、下記に示す方法で製造した。 [0089] Example 13 The water-swellable polymer gel as alginic acid gel, -NH- as a spacer (CH 2) 2 -NH-CO -CH 2 -NH-CO- (CH 2) 2 -CO-, decomposable group as -Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-, and medical polymer gel [equation (VIII) refer to Fig consisting transforming growth factor beta (TGF-beta) as a drug were prepared by the following method .

【0090】 [0090]

【化6】 [Omitted]

【0091】アルギン酸ナトリウム(和光純薬工業株式会社、500〜600cp)の1重量%水溶液30ml [0091] 1 wt% aqueous solution 30ml of sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500~600cp)
に、33mg(0. 1mmol)のBoc−Gly−E To, 33mg (0. 1mmol) of Boc-Gly-E
DA・HOSuと0. 29g(0. 375mmol)の(Lys) 2 −EDA・4HOSuおよび0. 96g DA · HOSu and 0. 29g (0. 375mmol) of (Lys) 2 -EDA · 4HOSu and 0. 96g
(5mmol)のEDC・HClを溶解して、12cm By dissolving EDC · HCl of (5 mmol), 12cm
×8cmのポリスチレン製トレイに流延し、4℃で1 × cast polystyrene tray 8 cm, 1 at 4 ° C.
日、その後室温で1日間静置してゲル化させた。 Day, was followed at room temperature to gel on standing for one day. 実施例12と同様の方法でTFA処理を行った。 Were TFA treatment in the same manner as in Example 12. よく水洗した後、水膨潤状態でニンヒドリン法により測定したところアミノ基導入量は30μmol/mlであった。 After thorough washing with water, an amino group introduction amount was measured by the ninhydrin method at water-swollen state was 30 [mu] mol / ml. さらに、実施例12と同様の方法で無水コハク酸と反応させてカルボキシル基を導入した。 Furthermore, to introduce a carboxyl group is reacted with succinic anhydride in the same manner as in Example 12. 得られたゲルをよく水洗した後、20mg(0. 16mmol)のHOSuと1 The resulting gel was well washed with water, and HOSu of 20mg (0. 16mmol) 1
60mg(0. 8mmol)のEDC・HClを加え、 60mg (0. 8mmol) EDC · HCl was added,
4℃で終夜振盪した。 It was shaken overnight at 4 ℃. これに、固相法で合成した22m To this, 22m, which was synthesized by the solid phase method
g(50μmol)のGly-Pro-Leu-Gly-Pro を溶解したPB10mlを加え、4℃で一晩振盪した。 g The PB10ml were dissolved Gly-Pro-Leu-Gly-Pro of (50 [mu] mol) was added and shaken overnight at 4 ° C.. 得られたゲルをよく水洗した後、20mg(0. 16mmol)のHOSuと160mg(0. 8mmol)のEDC・H After thorough washing the resulting gel, 20mg (0. 16mmol) HOSu and 160mg of (0. 8 mmol) of EDC · H
Clを加え、4℃で終夜振盪した。 Cl and the mixture was shaken overnight at 4 ° C.. さらに、PB10m In addition, PB10m
lに溶解したTGF- β(ヒト、コラボレイティブ社) Was dissolved in l TGF- β (human, Collaborative, Inc.)
1μgを加え、4℃で終夜振盪した。 1μg and the mixture was shaken overnight at 4 ° C.. 得られたゲルを生理食塩液で良く洗浄して透明なシート状の医療用高分子ゲルを得た。 The resulting gel was washed well with physiological saline to give a transparent sheet-like medical polymer gel.

【0092】比較例5 水膨潤性高分子ゲルとしてアルギン酸ゲル、分解性基として-(Ala) 2 -Pro-Val-、および薬剤としてマフェニドからなる医療用高分子ゲル〔次式(IX)参照〕を、下記に示す方法で製造した。 [0092] Alginate gels as a comparative example 5 water-swellable polymer gel, as decomposable group - (Ala) 2 -Pro-Val- , and medical polymer gel consisting of mafenide as a medicament [equation (IX) see] It was prepared by the following method.

【0093】 [0093]

【化7】 [Omitted]

【0094】実施例8と同様の1重量% アルギン酸ナトリウムの0. 05M NaHCO 3水溶液5mlに、 [0094] in 0. 05M NaHCO 3 aqueous solution 5ml of 1% by weight sodium alginate as in Example 8,
6mg(10μmol)の(Ala) 2 -Pro-Val-Mafenide と96mg(0. 5mmol)のEDC・HClを加えて4℃で終夜撹拌した。 Was stirred overnight at 4 ° C. by the addition of EDC · HCl of 6mg of (10μmol) (Ala) 2 -Pro -Val-Mafenide and 96mg (0. 5mmol). さらに、11mg(38μmo In addition, 11mg (38μmo
l)のBoc−Gly−EDA・HOSuと0. 19g And Boc-Gly-EDA · HOSu of l) 0. 19g
(1mmol)のEDC・HClを加えて溶解した後、 It was added and dissolved into the EDC · HCl of (1 mmol),
直径3cmのシャーレに流延し、室温で1日静置してゲル化させた。 It was cast into a Petri dish with a diameter of 3 cm, and allowed to gel on standing at room temperature for 1 day. 得られたゲルを純水中でよく洗浄し、エタノールに置換後、無菌的に減圧乾燥して、乾燥シート状の医療用高分子ゲルを得た。 The resulting gel was washed well with pure water, after the replacement of ethanol, were aseptically dried under reduced pressure to obtain a dry sheet-like medical polymer gel.

【0095】比較例6 水膨潤性高分子ゲルとしてPVAゲル、スペーサーとして-CH 2 -CH(OH)-CH 2 -NH-CO-(CH 2 ) 2 CO- 、および薬剤としてアクリノールからなる医療用高分子ゲル〔次式(X) [0095] PVA gel Comparative Example 6 water-swellable polymer gel, -CH 2 -CH (OH) -CH 2 -NH-CO- as a spacer (CH 2) 2 CO-, and medical consisting Acrinol as a medicament polymer gel [the following formula (X)
参照〕を、下記に示す方法で製造した。 Reference] was prepared by the following method.

【0096】 [0096]

【化8】 [Of 8]

【0097】アクリノール361mg(1mmol)とトリエチルアミン101mg(1mmol)をDMF5 [0097] Acrinol 361mg and (1mmol) triethylamine 101mg a (1mmol) DMF5
0mlに溶解し、300mg(3mmol)の無水コハク酸を加えて、室温で終夜撹拌し、その後ジエチルエーテルで沈殿させ、減圧下に乾燥してSuc-ACR 250mg Was dissolved in 0 ml, the addition of succinic anhydride 300 mg (3 mmol), and stirred overnight at room temperature, it precipitated with then diethyl ether, Suc-ACR 250 mg and dried under reduced pressure
(収率70%)を得た。 Was obtained (70% yield). 実施例9で得られたアミノ化P Amination P obtained in Example 9
VAゲルビーズ100mgを、0. 05M NaHCO The VA gel beads 100mg, 0. 05M NaHCO
3水溶液10mlに懸濁し、4mg(10μmol)の 3 were suspended in an aqueous solution 10 ml, 4 mg of (10 .mu.mol)
Suc-ACR と96mg(0. 5mmol)のEDC・HC Suc-ACR and 96mg (0. 5mmol) of EDC · HC
lを加えて4℃で終夜撹拌した。 It was stirred overnight at 4 ° C. by the addition of l. よく水洗した後、エタノールに置換し、無菌的に減圧乾燥して、ビーズ状の医療用高分子ゲルを得た。 After thorough washing with water, replaced with ethanol and aseptically dried under reduced pressure to obtain a bead-like medical polymer gel.

【0098】比較例7 結晶性セルロース粉末を担体として用い、スペーサーとして-CH 2 -CH(OH)-CH 2 -、分解性基として-Ala-Ala-Phe- [0098] Comparative Example 7 Crystalline cellulose powder used as a carrier, -CH 2 -CH as a spacer (OH) -CH 2 -, -Ala -Ala-Phe- as decomposable group
、および薬剤としてゲンタマイシン(GM)からなる、薬剤が固定化された結晶性セルロース粉末〔次式(XI)参照〕を、下記に示す方法で製造した。 , And a gentamycin (GM) as a drug, the drug immobilized cellulose powder [equation (XI) refer] were prepared by the following method.

【0099】 [0099]

【化9】 [Omitted]

【0100】結晶性セルロース粉末(CF- 1、Wha [0100] Crystalline cellulose powder (CF- 1, Wha
tman)5gを1NNaOH水溶液50mlとジオキサン50mlの混合液に分散し、エピクロルヒドリン1 Dispersed tman) 5 g in a mixture of 1NNaOH solution 50ml of dioxane 50ml, epichlorohydrin 1
0mlを加えて40℃で3時間撹拌した。 Added 0ml was stirred for 3 hours at 40 ° C.. よく水洗した後、固相合成法で得られた31mg(0. 1mmol) After thorough washing with water, was obtained by solid-phase synthesis method 31mg (0. 1mmol)
のAla-Ala-Phe を溶解した0. 05MNaHCO 3水溶液を加え、室温で終夜撹拌した。 Ala-Ala-Phe to 0. 05MNaHCO 3 aqueous solution prepared by dissolving were added and stirred at room temperature overnight. よく水洗した後水分をジオキサンに置換し、115mg(1mmol)のHO Water was thoroughly rinsed and replaced with dioxane, HO of 115 mg (1 mmol)
Suと210mg(1mmol)のDCCを加え室温で終夜撹拌した。 Was stirred overnight at room temperature was added a DCC of Su and 210 mg (1 mmol). メタノールでよく洗浄した後、PB10 After washing well with methanol, PB10
mlに溶解した75mg(0. 1mmol)のGMを加えて4℃で終夜撹拌した。 Was stirred overnight at 4 ° C. by the addition of GM of it was dissolved in ml 75mg (0. 1mmol). 生理食塩液で良く洗浄して、 And washed well with physiological saline,
薬剤が固定化された結晶性セルロース粉末を得た。 Agent to obtain a cellulose powder immobilized.

【0101】試験例3 エラスターゼによる薬剤放出試験 実施例8または比較例5で得られた乾燥シート(直径3 [0102] Test Example 3 Elastase by dry sheet obtained in the drug release test in Example 8 or Comparative Example 5 (diameter 3
cmの円盤状)を、50mlのPBS(0.15M N cm disk-shaped) of, 50 ml of PBS (0.15 M N
aClを含む20mM リン酸塩緩衝液、pH7.4) 20mM phosphate buffer containing NaCl, pH 7.4)
に浸漬し、室温でときどき撹拌しながら、所定時間後に上清を少量ずつサンプリングした。 Immersed in, with occasional stirring at room temperature and sampled portionwise supernatant after a predetermined time. さらに、エラスターゼ(pig pancreas、biozyme Lab. Ltd製)を最終濃度が10,1,0.1U/mlになるように該PBS溶液に添加し、所定時間後に上清を少量ずつサンプリングした。 Furthermore, elastase (pig pancreas, biozyme Lab. Ltd. Ltd) to a final concentration was added to the PBS solution to a 10,1,0.1U / ml, it was sampled portionwise supernatant after a predetermined time. サンプリング液中のマフェニドの量はHPLCを用いて定量した。 The amount of mafenide sampling solution was determined using HPLC. エラスターゼ添加前後の上清中のマフェニドの量を求めた。 Determine the amount of mafenide in the supernatant before and after the addition of elastase. 実施例8で得られた乾燥シートでは、エラスターゼ添加前にはマフェニドの放出は全く認められなかったが、エラスターゼ添加後にはエラスターゼ濃度に応じた速やかなマフェニドの放出が認められた。 In the dry sheet obtained in Example 8, prior to addition elastase was not observed at all release of mafenide, after addition of elastase release of rapid mafenide according to the elastase concentration was observed. これに対して比較例5で得られた乾燥シートでは、 In the dry sheet obtained in Comparative Example 5 In contrast,
エラスターゼを添加してもわずかなマフェニドの放出が認められたのみであった。 With the addition of elastase was only the release of small mafenide it was also observed.

【0102】試験例4 緑膿菌培養液による薬剤放出試験 緑膿菌を乾燥ブイヨン培地(日水製薬株式会社)で終夜培養し、遠心(12,000rpm,15min)して上清を得た。 [0102] The drug release study Pseudomonas aeruginosa according to Test Example 4 P. aeruginosa culture was cultured overnight in dry bouillon medium (Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.), centrifugation (12,000 rpm, 15min) and to obtain a supernatant. この上清5mlと、実施例9または比較例6で得られたビーズ100mgとを室温で2時間インキュベートした。 And the supernatant 5 ml, and a bead 100mg obtained in Example 9 and Comparative Examples 6 and incubated for 2 hours at room temperature. 上清中に放出されるアクリノールの濃度を410nmの吸光度で定量した。 The concentration of acrinol released into the supernatant was quantified by absorbance at 410 nm. 実施例9で得られたビーズではアクリノールの放出量は5μmolであったが、比較例6で得られたビーズではアクリノールの放出は認められなかった。 Although the beads obtained in Example 9 emissions acrinol was 5 [mu] mol, in beads obtained in Comparative Example 6 Release of acrinol were observed.

【0103】試験例5 酵素液による薬剤放出試験 実施例10〜12で得られた医療用高分子ゲルおよび比較例7で得られた薬剤が固定化された結晶性セルロース粉末の各0. 5g(水膨潤状態)に、0. 15MのNa [0103] Test Example 5 enzyme solution agent obtained in medical polymer gels and Comparative Example 7 obtained in the drug release test examples 10 to 12 is immobilized by the respective 0. 5 g of crystalline cellulose powder ( the water-swollen state), 0. 15M of Na
Clを含む10mMリン酸塩緩衝液(PBS、pH7. 10mM phosphate buffer (PBS, pH 7 containing Cl.
4)500μlと1%トリプシン(DIFCO、1:2 4) 500 [mu] l 1% trypsin (DIFCO, 1: 2
50)PBS溶液100μlを加えて37℃で3時間インキュベートした。 50) was added to PBS solution 100μl was incubated for 3 hours at 37 ° C.. その後遠心して上清を採取し試験液とした。 Then was centrifuged to the supernatant was collected test solution. (黄色ブドウ球菌増殖阻止円形成試験)ブレイン- ハート- インフュージョンブイヨン培地(日水製薬株式会社)で終夜培養した黄色ブドウ球菌を、5×10 5個ずつブレイン- ハート- インフュージョン寒天培地プレート(直径10cm)に均一に塗布した。 (Staphylococcus aureus growth inhibition circle formation test) Brain - Heart - Staphylococcus aureus was cultured overnight at infusion broth medium (Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.), 5 × 10 5 cells one by brain - heart - infusion agar plate ( was uniformly applied to the diameter 10 cm). 上記試験液を7 The test solution 7
5μlずつ含浸させた直径8mmの薬効検定用濾紙ディスクを、黄色ブドウ球菌を塗布したプレートにのせて3 The filter paper disc for efficacy assay impregnated 8mm diameter by 5 [mu] l, placed on a plate coated with Staphylococcus aureus 3
7℃で終夜培養した。 And cultured overnight at 7 ℃. 試験液を含浸させた濾紙ディスクの周囲に生じた黄色ブドウ球菌増殖阻止円の直径を測定したところ、実施例10、11および12で得られた医療用高分子ゲルの試験液ではそれぞれ9mm、16mm The diameter of Staphylococcus aureus growth inhibition zones caused the test liquid around the filter paper disc impregnated was measured, respectively in the test liquid medical polymer gel obtained in Example 10, 11 and 12 9 mm, 16 mm
および10mmであった。 And was 10mm. 比較例7で得られた結晶性セルロース粉末の場合および実施例10〜12で得られた医療用高分子ゲルを用い、1%トリプシン- PBS溶液100μlのかわりにPBS100μlを加えたコントロールの場合は増殖阻止円は観測されなかった。 Used medical polymer gel obtained in the case of cellulose powder obtained in Comparative Example 7 and Examples 10-12, 1% trypsin - For control plus PBS100μl instead of PBS solution 100μl growth inhibition circle was not observed.

【0104】試験例6 2cm×2cmの大きさのラット背部全層欠損創に10 [0104] Rats back of magnitude of Test Example 6 2 cm × 2 cm full-thickness defect wounds on 10
7個の緑膿菌、あるいは10 9個の黄色ブドウ球菌をそれぞれコラーゲンスポンジ(株式会社高研)とともに植え付けた。 Seven of Pseudomonas aeruginosa, or 10 nine Staphylococcus aureus were each planted with collagen sponge (Co., Ltd. Koken). 緑膿菌は24時間後、黄色ブドウ球菌は48 Pseudomonas aeruginosa after 24 hours, Staphylococcus aureus 48
時間後にコラーゲンスポンジを除去し、創部を生食液で洗浄した。 The collagen sponge was removed after a time, washing the wounds with saline. 緑膿菌を植え付けた創には実施例11で得られた医療用高分子ゲルを、黄色ブドウ球菌を植え付けた創には実施例10で得られた医療用高分子ゲルをそれぞれ貼り付けた。 The medical polymer gel obtained in the wounds were inoculated with P. aeruginosa in Example 11, the wounds were inoculated with Staphylococcus aureus was attached a medical polymer gel obtained in Example 10, respectively. 24時間後に採取した創部の組織をホモジェナイズして、その一部を一定割合で希釈したPBS And homogenized wound tissues taken after 24 hours, was diluted a part at a fixed rate PBS
溶液をブレイン- ハート- インフュージョン寒天培地プレート(直径10cm)に均一に塗布した。 The solution Brain - Heart - was uniformly applied to the infusion agar plates (diameter 10 cm). 37℃で終夜培養して生じるコロニーの数から組織中の細菌数を計算した。 It was calculated number of bacteria in the tissue from the number of colonies arising in cultures overnight at 37 ° C.. 実施例11で得られた医療用高分子ゲルを貼付した創部の細菌数が6. 7×10 4 ±8. 9×10 4個/g組織であり、貼付前の組織中の細菌数(1. 1×1 Example 11 The number of bacteria wound obtained was attached medical polymer gel in the 6. 7 × 10 4 ± 8. 9 × a 10 4 / g tissue, the number of bacteria in the tissue prior to application (1 . 1 × 1
8 ±2. 0×10 7個/g組織)と比較して明らかな細菌数の減少が認められた。 0 8 ± 2. 0 × 10 7 cells / g tissue) and decreased apparent bacterial numbers compared were observed. 実施例10で得られた医療用高分子ゲルを貼付した創部の細菌数が1. 2×10 6 The number of bacteria wound which was attached a medical polymer gel obtained in Example 10 is 1. 2 × 10 6
±1. 1×10 6個/g組織であり、貼付前の組織中の細菌数(2. 2×10 7 ±4. 9×10 6個/g組織) ± 1. 1 × a 10 6 / g tissue, the number of bacteria in the tissue prior to application (2. 2 × 10 7 ± 4 . 9 × 10 6 cells / g tissue)
と比較して明らかな細菌数の減少が認められた。 Reduction of the apparent number of bacteria in comparison with was observed.

【0105】上記試験例より、本発明の医療用高分子ゲルが、存在する酵素の量に応じた薬剤放出特性を示し、 [0105] From the above test examples, medical polymer gel of the present invention, shows the drug release characteristics according to the amount of enzyme present,
動物の細菌感染創で明らかな細菌数減少効果を発揮することが示された。 It has been shown to exhibit distinct bacterial count reducing effect in animal bacterial infections wounds.

【0106】本明細書に用いられた各種アミノ酸残基の略号は下記のとおりである。 [0106] Abbreviations of various amino acid residues used herein are as follows. Ala :L−アラニン残基 Arg :L−アルギニン残基 Asn :L−アスパラギン残基 Asp :L−アスパラギン酸残基 Cys :L−システイン残基 Gln :L−グルタミン残基 Glu :L−グルタミン酸残基 Gly :グリシン残基 His :L−ヒスチジン残基 Ile :L−イソロイシン残基 Leu :L−ロイシン残基 Lys :L−リシン残基 Phe :L−フェニルアラニン残基 Pro :L−プロリン残基 Ser :L−セリン残基 Thr :L−トレオニン残基 Trp :L−トリプトファン残基 Tyr :L−チロシン残基 Val :L−バリン残基 Nle :L−ノルロイシン残基 また、本明細書においては、常法に従ってペプチドのアミノ酸配列を、そのN末端のアミノ酸残基が左側に位置し、C末端のアミノ酸残基が右側に位置するように記述した。 Ala: L- alanine residue Arg: L- arginine residue Asn: L- asparagine residues Asp: L- aspartic acid residue Cys: L- cysteine ​​residues Gln: L- glutamine residues Glu: L- glutamic acid residue Gly: glycine residue His: L- histidine residue Ile: L- isoleucine residue Leu: L- leucine residues Lys: L- lysine residues Phe: L- phenylalanine residue Pro: L- proline residue Ser: L - serine residue Thr: L-threonine residue Trp: L-tryptophan residue Tyr: L-tyrosine residue Val: L-valine residue Nle: L-norleucine residue in the present specification, according to a conventional method the amino acid sequence of the peptide, the amino acid residues of the N-terminal is located on the left side, the C-terminal amino acid residue has been described as located on the right side. また、D体のアミノ酸の場合には略号の後に(D)を付記して記述した。 In the case of D-amino acids is described by appended an (D) after the abbreviation.

【0107】 [0107]

【発明の効果】本発明の医療用高分子ゲルは、酵素の量に応じた薬剤放出特性を示すため、酵素が産生される病巣においてのみ、治療に有効な量の薬剤を放出することが可能である。 Medical polymer gel of the present invention according to the present invention, in order to show a drug release characteristics according to the amount of enzyme can be an enzyme only in the lesions produced, releasing a therapeutically effective amount of the drug it is. 本発明の医療用高分子ゲルは、創傷被覆材、生体組織接着剤、癒着防止材、骨補強材、薬剤放出基材の構成成分として有用であり、擦過創、切創、挫創等の一般創傷、採皮創、削皮創等の人為的な皮膚欠損創、切開創等の手術創、熱傷、潰瘍、褥瘡等の創傷における炎症の治療と治癒促進、手術後の創面や臓器の接着、手術後の創面と他組織の癒着防止、骨粗骨症や骨折における骨の補強、悪性新生物等の治療に適用可能である。 Medical polymer gel of the present invention, a wound dressing, a biological tissue adhesive, antiadhesive material, a bone reinforcing material is useful as a component of drug release substrate, abrasion wounds, incised wounds, general wound such acne , TokawaSo, artificial skin defects wounds such Kezukawa wounds, incised surgical wounds, such as wounds, burns, ulcers, inflammation and treatment promoting healing of wounds such as pressure sores, adhesion of wound surface and organs after surgery, surgery anti-adhesion of the wound and other tissues after reinforcing the bone in bone crude osteopathy or fractures, is applicable to the treatment of malignant neoplasms, or the like. 本発明により提供される水膨潤性高分子ゲル(I Water-swellable polymer gel provided by this invention (I
I)を構成材料とする創傷被覆材は、創傷、熱傷、褥瘡などの患者に適用されることにより該患者の創の治癒を促進することができる。 Wound dressing according to the material to I) can promote wound, burn, the healing of wounds of the patient by being applied to a patient, such as decubitus. また適用期間中、被覆をはがすことなく創の状態を観察することができるので、創の管理に大変有用であり、被覆材交換の回数を減少させることができる。 Also during application, it is possible to observe the state of the wound without peeling the coating material, are very useful in the management of wounds, it is possible to reduce the number of dressing changes.

【図面の簡単な説明】 BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS

【図1】図1は、実施例8で得られたAlgin−ED FIG. 1 is, Algin-ED obtained in Example 8
A−Glyの0. 05M NaHCO 3水溶液の220 220 of 0. 05M NaHCO 3 aqueous solution A-Gly
nm〜400nmの紫外吸収スペクトルを、光路長1c The ultraviolet absorption spectrum of Nm~400nm, optical path length 1c
mの吸光度測定用セルを用いてベックマン社製DU- 6 Beckman using the absorbance measurement cell of m DU- 6
5型分光光度計で測定した結果を示す図である。 5 spectrophotometer is a diagram showing the results of measurement.

【図2】図2は、実施例11で得られたAlgin−E Figure 2, Algin-E obtained in Example 11
DA−Gly−Suc−Ala−Ala−Pheを純水で10倍希釈して測定した紫外吸収スペクトルである。 The DA-Gly-Suc-Ala-Ala-Phe is ultraviolet absorption spectrum was measured by 10-fold dilution with pure water.

【図3】図3は、実施例11で得られた医療用高分子ゲルの紫外吸収スペクトルである。 Figure 3 is a UV absorption spectrum of medical polymer gel obtained in Example 11.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl. 7識別記号 FI A61L 27/00 A61L 25/00 A (56)参考文献 特開 昭61−244369(JP,A) 特開 平2−180903(JP,A) 特開 平1−248057(JP,A) 特開 昭61−243026(JP,A) 特表 昭61−502729(JP,A) 国際公開93/13804(WO,A1) (58)調査した分野(Int.Cl. 7 ,DB名) A61K 9/ A61K 47/ A61L 15/ A61L 24/ A61L 27/ ────────────────────────────────────────────────── ─── front page continued (51) Int.Cl. 7 identifications FI A61L 27/00 A61L 25/00 a (56 ) reference JP Akira 61-244369 (JP, a) Patent Rights 2-180903 ( JP, A) JP flat 1-248057 (JP, A) JP Akira 61-243026 (JP, A) PCT National Akira 61-502729 (JP, A) WO 93/13804 (WO, A1) (58) survey the field (Int.Cl. 7, DB name) A61K 9 / A61K 47 / A61L 15 / A61L 24 / A61L 27 /

Claims (4)

    (57)【特許請求の範囲】 (57) [the claims]
  1. 【請求項1】 分子内にカルボキシル基を有する多糖類を、下記の一般式(II) R 1 HN−(CH 2 ) n −NHR 2 (II) (式中、nは2から18の整数を表し、R 1およびR 2 The method according to claim 1 polysaccharide having a carboxyl group in the molecule represented by the following general formula (II) R 1 HN- (CH 2) n -NHR 2 (II) ( wherein, n an integer of from 2 to 18 represents, R 1 and R 2
    はそれぞれ水素原子または−COCH(NH 2 )−(C Each a hydrogen atom or -COCH is (NH 2) - (C
    24 −NH 2で表される基を示す。 H 2) a group represented by 4 -NH 2. )で表される架橋性試薬の塩で共有結合架橋して得られる水膨潤性高分子ゲル。 ) With a cross-linkable reagent salt covalently crosslinked to the resulting water-swellable polymer gel of the represented.
  2. 【請求項2】 分子内にカルボキシル基を有する多糖類がアルギン酸塩またはヒアルロン酸塩である請求項記載の水膨潤性高分子ゲル。 2. A polysaccharide according to claim 1, wherein the water-swellable polymer gel is alginate or hyaluronic acid salts having a carboxyl group in the molecule.
  3. 【請求項3】 架橋性試薬の塩が、N−ヒドロキシコハク酸イミド塩である請求項または請求項記載の水膨潤性高分子ゲル。 3. A salt of the crosslinking reagent, claim 1 or claim 2 wherein the water-swellable polymer gel is N- hydroxysuccinimide salt.
  4. 【請求項4】 架橋性試薬のN−ヒドロキシコハク酸イミド塩が、ジアミノエタンの2N−ヒドロキシコハク酸イミド塩、ジアミノヘキサンの2N−ヒドロキシコハク酸イミド塩、N,N'−ジ(リジル)−ジアミノエタンの4N−ヒドロキシコハク酸イミド塩およびN−(リジル)−ジアミノヘキサンの3N−ヒドロキシコハク酸イミド塩よりなる群から選択されるものである請求項記載の水膨潤性高分子ゲル。 4. N- hydroxysuccinimide salt of the crosslinking reagent, 2N- hydroxysuccinimide salt of diaminoethane, diamino hexane 2N- hydroxysuccinimide salt, N, N'-di (lysyl) - of diaminoethane 4N- hydroxysuccinimide salt and N- (lysyl) - claim 3, wherein the water-swellable polymer gel is selected from the group consisting of 3N- hydroxysuccinimide salt of diaminohexane.
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