JP2023546567A - 組成物 - Google Patents
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Abstract
本発明は、大型藻類、微細藻類、光合成細菌、および/または植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、およびそれらの組み合わせから得られるかまたは取得可能な、極性脂質に富む抽出物、ならびにそれらの乳化剤としての使用に関する。
Description
発明の分野
本発明は、天然乳化系およびその使用に関する。
本発明は、天然乳化系およびその使用に関する。
発明の背景
エマルションは、食品技術において、例えば食品製品の栄養プロファイルを改善する手段として、脂肪含有量の削減および/または水溶性栄養素およびルフレーバーの組み込みを可能にすることにより広く使用されている。エマルションは通常、乳化剤、タンパク質、両親媒性ポリマー(安定剤とも呼ばれる)などの様々な分子乳化作用剤を使用して得られる。これらの成分は、安定した商業的に許容されるエマルションベースの製品の製造に不可欠である。効率的な安定剤および乳化剤系はすでに存在するが、これらは多くの場合、化学的に改変された成分に基づいている。乳化剤および安定剤は、一般に多くの国の健康規制の下で、それぞれのE番号を製品ラベルに表示しなければならない添加剤と見なされ、一部は「合成」成分と見なされ、すなわち化学的処理によって得られる。消費者からの、人工添加物またはいわゆる「E番号」を含まない製品に対する需要は高まりつつある。
エマルションは、食品技術において、例えば食品製品の栄養プロファイルを改善する手段として、脂肪含有量の削減および/または水溶性栄養素およびルフレーバーの組み込みを可能にすることにより広く使用されている。エマルションは通常、乳化剤、タンパク質、両親媒性ポリマー(安定剤とも呼ばれる)などの様々な分子乳化作用剤を使用して得られる。これらの成分は、安定した商業的に許容されるエマルションベースの製品の製造に不可欠である。効率的な安定剤および乳化剤系はすでに存在するが、これらは多くの場合、化学的に改変された成分に基づいている。乳化剤および安定剤は、一般に多くの国の健康規制の下で、それぞれのE番号を製品ラベルに表示しなければならない添加剤と見なされ、一部は「合成」成分と見なされ、すなわち化学的処理によって得られる。消費者からの、人工添加物またはいわゆる「E番号」を含まない製品に対する需要は高まりつつある。
したがって、合成または人工の乳化剤を、製品の品質を損なうことなく必要な張力活性特性(tensioactive properties)を提供できる天然の乳化剤系に、置き換える必要がある。
乳化特性を有する天然成分は知られているが、それらは通常、合成乳化剤ほど効率的ではなく、および/または他の欠点を示す。
例えば、キラヤはその乳化特性で知られている。しかしこの植物は、人間にとって一定濃度で有毒なサポニンを含有する。
乳化特性を有する天然成分は知られているが、それらは通常、合成乳化剤ほど効率的ではなく、および/または他の欠点を示す。
例えば、キラヤはその乳化特性で知られている。しかしこの植物は、人間にとって一定濃度で有毒なサポニンを含有する。
オートムギ油も乳化剤として使用されるが、その脂質組成はパルミチン酸およびリノール(オメガ-6)酸が主であり、一方消費者は、食品にアルファ-リノレン酸などのオメガ-3脂質をより多く求めている。さらに、オートムギはグルテンを含まないが、多くのセリアック病の人々はこれを食べることを避けており、その理由は、製造プロセス中および/または輸送中に、漂遊小麦、ライ麦、大麦などのグルテンを含有する他の穀物で汚染されることが多いためである。
大豆レシチンの乳化剤としての使用は食品分野でも拡大されているが、これらの機能分子には多くの欠点があり、それらのうちでも、大豆の栽培に必要な森林伐採による持続可能性への悪影響は、おそらく最も重要である。ほとんどの大豆がGMOであるという事実は別の問題であり、この材料のアレルギー誘発性の可能性およびヒトにおけるホルモン破壊の可能性も同様である。
したがって、天然の乳化剤系に対するこの重要な要求に応えつつ、優れた栄養プロファイルを提供する効率的な解決策を提供する必要性が、継続的に存在している。
本発明の目的は、食品および化粧品用途において合成乳化剤を置き換えることができる、天然の乳化剤系を提供することである。
大豆レシチンの乳化剤としての使用は食品分野でも拡大されているが、これらの機能分子には多くの欠点があり、それらのうちでも、大豆の栽培に必要な森林伐採による持続可能性への悪影響は、おそらく最も重要である。ほとんどの大豆がGMOであるという事実は別の問題であり、この材料のアレルギー誘発性の可能性およびヒトにおけるホルモン破壊の可能性も同様である。
したがって、天然の乳化剤系に対するこの重要な要求に応えつつ、優れた栄養プロファイルを提供する効率的な解決策を提供する必要性が、継続的に存在している。
本発明の目的は、食品および化粧品用途において合成乳化剤を置き換えることができる、天然の乳化剤系を提供することである。
発明の概要
驚くべきことに、本発明者らは、植物または大型藻類の光合成部分(光合成器官または組織など)、微細藻類および光合成細菌に由来する、極性脂質に富む天然抽出物を、従来の乳化剤を置き換えるために使用して、エマルションを効果的に安定させ得ることを見出した。
第1の側面において、本発明は、大型藻類、微細藻類、光合成細菌、および/または植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、およびそれらの組み合わせから得られるかまたは取得可能な、極性脂質を含む抽出物または「本発明の抽出物」(例えば極性脂質に富む抽出物)を提供する。
特定の態様において、本発明の抽出物は、極性脂質を含む粗抽出物または精製抽出物(例えば極性脂質に富む粗抽出物または精製抽出物)であり得る。
驚くべきことに、本発明者らは、植物または大型藻類の光合成部分(光合成器官または組織など)、微細藻類および光合成細菌に由来する、極性脂質に富む天然抽出物を、従来の乳化剤を置き換えるために使用して、エマルションを効果的に安定させ得ることを見出した。
第1の側面において、本発明は、大型藻類、微細藻類、光合成細菌、および/または植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、およびそれらの組み合わせから得られるかまたは取得可能な、極性脂質を含む抽出物または「本発明の抽出物」(例えば極性脂質に富む抽出物)を提供する。
特定の態様において、本発明の抽出物は、極性脂質を含む粗抽出物または精製抽出物(例えば極性脂質に富む粗抽出物または精製抽出物)であり得る。
別の側面において、本発明は、乳化剤として使用するための、本発明の抽出物(例えば本発明の粗抽出物および/または本発明の精製抽出物)を提供する。
別の側面において、本発明は、エマルションを安定化するための、本発明の抽出物(例えば本発明の粗抽出物および/または本発明の精製抽出物)の使用を提供する。
別の側面において、本発明は、少なくとも1つの本発明の抽出物(例えば本発明の粗抽出物および/または本発明の精製抽出物)を乳化作用剤として含む、エマルション(本発明のエマルション)を提供する。
別の側面において、本発明は、エマルションを安定化するための、本発明の抽出物(例えば本発明の粗抽出物および/または本発明の精製抽出物)の使用を提供する。
別の側面において、本発明は、少なくとも1つの本発明の抽出物(例えば本発明の粗抽出物および/または本発明の精製抽出物)を乳化作用剤として含む、エマルション(本発明のエマルション)を提供する。
別の側面において、本発明は、以下を含む、エマルションの調製方法を提供する:
a)水相の成分を混合すること;
b)脂質相の成分を混合すること;
c)本発明の1つ以上の抽出物(例えば本発明の粗抽出物および/または本発明の精製抽出物)を、水相または脂質相の一方または両方に分散させること;および
d)2つの相を均質化してエマルションを形成すること。
有利なことに、本発明の安定化されたエマルションは、任意の他の乳化剤の添加を必要としない。
さらなる側面において、本発明は、本発明のエマルションを含む、ヒトまたは動物用の食品または飲料製品、栄養補助食品、ニュートラシューティカル製剤、フレグランスまたはフレーバー剤、医薬または獣医学用製剤、ワイン醸造学または化粧品製剤に関する。
a)水相の成分を混合すること;
b)脂質相の成分を混合すること;
c)本発明の1つ以上の抽出物(例えば本発明の粗抽出物および/または本発明の精製抽出物)を、水相または脂質相の一方または両方に分散させること;および
d)2つの相を均質化してエマルションを形成すること。
有利なことに、本発明の安定化されたエマルションは、任意の他の乳化剤の添加を必要としない。
さらなる側面において、本発明は、本発明のエマルションを含む、ヒトまたは動物用の食品または飲料製品、栄養補助食品、ニュートラシューティカル製剤、フレグランスまたはフレーバー剤、医薬または獣医学用製剤、ワイン醸造学または化粧品製剤に関する。
さらなる側面において、本発明は、少なくとも1つの本発明の抽出物(例えば本発明の粗抽出物および/または本発明の精製抽出物)を乳化作用剤として含む、ヒトまたは動物用の食品または飲料製品、栄養補助食品、ニュートラシューティカル製剤、フレグランスまたはフレーバー剤、医薬または獣医学用製剤、ワイン醸造学または化粧品製剤に関する。
本発明の記載された側面のいずれか1つ以上に関して提供される詳細、実施例、および優先事項は、本明細書においてさらに説明され、本発明のすべての側面に等しく適用される。以下に記載される態様、実施例、および優先事項の任意の組み合わせのすべての可能なバリエーションは、本明細書に別段の指示がない限り、または文脈により明らかに矛盾しない限り、本発明に包含される。
本発明の記載された側面のいずれか1つ以上に関して提供される詳細、実施例、および優先事項は、本明細書においてさらに説明され、本発明のすべての側面に等しく適用される。以下に記載される態様、実施例、および優先事項の任意の組み合わせのすべての可能なバリエーションは、本明細書に別段の指示がない限り、または文脈により明らかに矛盾しない限り、本発明に包含される。
発明の詳細な説明
前述の一般的な説明および以下の詳細な説明の両方が、例示的かつ説明的なものにすぎず、特許請求される態様を限定するものではないことを理解されたい。本明細書において、単数形の使用は、特に別段の記載がない限り複数形を含む。本明細書で使用される場合、「または」の使用は、別段の記載がない限り、「および/または」を意味する。さらに、用語「含むこと」ならびに、「含む」および「含まれる」などの他の形態の使用は、限定的ではない。
以下の文章は、本開示の多数の異なる態様の広範な説明を記載している。すべての可能な態様を説明することは不可能ではないにしても非現実的であるため、説明は単なる例示として解釈されるべきであり、すべての可能な態様を説明するものではない。本明細書に記載の任意の特徴、特性、構成成分、組成物、成分、製品、ステップ、または方法論は、全体または一部を削除し、本明細書に記載の任意の他の特徴、特性、構成成分、組成物、成分、製品、ステップまたは方法論と組み合わせ、またはこれを置換することができることが、理解されるであろう。多数の代替態様を、現在の技術またはこの特許の出願日以降に開発された技術のいずれかを使用して実行することができ、それらは依然として本特許請求の範囲内にある。
前述の一般的な説明および以下の詳細な説明の両方が、例示的かつ説明的なものにすぎず、特許請求される態様を限定するものではないことを理解されたい。本明細書において、単数形の使用は、特に別段の記載がない限り複数形を含む。本明細書で使用される場合、「または」の使用は、別段の記載がない限り、「および/または」を意味する。さらに、用語「含むこと」ならびに、「含む」および「含まれる」などの他の形態の使用は、限定的ではない。
以下の文章は、本開示の多数の異なる態様の広範な説明を記載している。すべての可能な態様を説明することは不可能ではないにしても非現実的であるため、説明は単なる例示として解釈されるべきであり、すべての可能な態様を説明するものではない。本明細書に記載の任意の特徴、特性、構成成分、組成物、成分、製品、ステップ、または方法論は、全体または一部を削除し、本明細書に記載の任意の他の特徴、特性、構成成分、組成物、成分、製品、ステップまたは方法論と組み合わせ、またはこれを置換することができることが、理解されるであろう。多数の代替態様を、現在の技術またはこの特許の出願日以降に開発された技術のいずれかを使用して実行することができ、それらは依然として本特許請求の範囲内にある。
本明細書で使用されるセクションの見出しは構成上の目的のためであり、記載されている主題を限定するものとして解釈されるべきではない。特許、特許出願、記事、本などを含むがこれらに限定されない、本出願で引用されるすべての文書または文書の一部は、本明細書で論じられる文書の一部について、およびそれらの全体が、参照により本明細書に明示的に組み込まれる。
本発明は、極性脂質に富む、大型藻類、微細藻類、植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、および/または細菌から得られるかまたは取得可能な抽出物(本発明の抽出物)の、油中水型または水中油型エマルションの安定化のための乳化剤系としての、使用に関する。「乳化剤」または「乳化剤系」とは、張力活性特性を有する少なくとも1つの成分であると理解されるべきである。
本発明は、極性脂質に富む、大型藻類、微細藻類、植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、および/または細菌から得られるかまたは取得可能な抽出物(本発明の抽出物)の、油中水型または水中油型エマルションの安定化のための乳化剤系としての、使用に関する。「乳化剤」または「乳化剤系」とは、張力活性特性を有する少なくとも1つの成分であると理解されるべきである。
本発明の抽出物(大型藻類、微細藻類、植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、および/または細菌から得られるかまたは取得可能なもの)は、極性脂質を含む粗抽出物(本発明の粗抽出物)、または極性脂質を含む精製抽出物(または本発明の精製抽出物)であってよい。ある態様において、本発明の粗抽出物または本発明の精製抽出物は、極性脂質に富む。
大型藻類、微細藻類、植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、および/または光合成細菌からの、極性脂質に富む本発明の粗抽出物、ならびに極性脂質に富む本発明の精製抽出物は、合着(coalescence)に抗して著しくエマルションを安定化することが見出された。さらに驚くべきことに、光合成植物、大型藻類、微細藻類および/または細菌からの、極性脂質を含む本発明の抽出物(例えば、極性脂質に富む、本発明の粗抽出物および/または本発明の精製抽出物)は、非常に広いpH範囲で安定なエマルションを生成することが見出されている。
大型藻類、微細藻類、植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、および/または光合成細菌からの、極性脂質に富む本発明の粗抽出物、ならびに極性脂質に富む本発明の精製抽出物は、合着(coalescence)に抗して著しくエマルションを安定化することが見出された。さらに驚くべきことに、光合成植物、大型藻類、微細藻類および/または細菌からの、極性脂質を含む本発明の抽出物(例えば、極性脂質に富む、本発明の粗抽出物および/または本発明の精製抽出物)は、非常に広いpH範囲で安定なエマルションを生成することが見出されている。
本発明の抽出物
本発明によれば、大型藻類、微細藻類、植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、および/または光合成細菌またはそれらの混合物から得られるかまたは取得可能な、極性脂質を含む抽出物が提供される。ある態様において、本発明の抽出物は極性脂質に富む。本発明において、「本発明の抽出物」はまた、それらの乳化剤特性により、「本発明の乳化剤抽出物」としても定義され得る。
当業者に理解されるように、本明細書で使用される「から取得可能(obtainable from)」という用語は、抽出物が、微細藻類、大型藻類、植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、および/または光合成細菌から得ることができること、または微細藻類、大型藻類、植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、および/または光合成細菌から単離することができること、または代替供給源から、例えば化学的合成または酵素的生成によって得ることができることを意味する。一方、本明細書で使用される「得られる(obtained)」という用語は、抽出物が直接的に、微細藻類、大型藻類、植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、および/または光合成細菌の供給源に由来することを意味する。
本発明によれば、大型藻類、微細藻類、植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、および/または光合成細菌またはそれらの混合物から得られるかまたは取得可能な、極性脂質を含む抽出物が提供される。ある態様において、本発明の抽出物は極性脂質に富む。本発明において、「本発明の抽出物」はまた、それらの乳化剤特性により、「本発明の乳化剤抽出物」としても定義され得る。
当業者に理解されるように、本明細書で使用される「から取得可能(obtainable from)」という用語は、抽出物が、微細藻類、大型藻類、植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、および/または光合成細菌から得ることができること、または微細藻類、大型藻類、植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、および/または光合成細菌から単離することができること、または代替供給源から、例えば化学的合成または酵素的生成によって得ることができることを意味する。一方、本明細書で使用される「得られる(obtained)」という用語は、抽出物が直接的に、微細藻類、大型藻類、植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、および/または光合成細菌の供給源に由来することを意味する。
本発明の抽出物は、粗抽出物(または本発明の粗抽出物)または精製抽出物(本発明の精製抽出物)であり得る。
好ましい態様において、植物、大型藻類、微細藻類および細菌は、光合成生物である。一態様において、本発明の抽出物(例えば粗抽出物または精製抽出物)は、植物の光合成部分または大型藻類から、例えば光合成器官(単数または複数)または組織(単数または複数)(これは限定することなく葉または茎を含む)から、得られるかまたは取得可能である。好ましい態様において、植物、微細藻類、大型藻類および/または光合成細菌は、食品等級として認められているか、またはGRAS(一般に安全と認められる)として認められている。本発明の抽出物(例えば粗抽出物または精製抽出物)は、1つの単一供給源または異なる複数供給源(例えば1つ以上の植物からの1つ以上の光合成器官または組織、1つ以上の微細藻類、1つ以上の大型藻類、または1つ以上の光合成細菌、またはそれらの混合物)から、取得可能であるか、または得ることができる。
好ましい態様において、植物、大型藻類、微細藻類および細菌は、光合成生物である。一態様において、本発明の抽出物(例えば粗抽出物または精製抽出物)は、植物の光合成部分または大型藻類から、例えば光合成器官(単数または複数)または組織(単数または複数)(これは限定することなく葉または茎を含む)から、得られるかまたは取得可能である。好ましい態様において、植物、微細藻類、大型藻類および/または光合成細菌は、食品等級として認められているか、またはGRAS(一般に安全と認められる)として認められている。本発明の抽出物(例えば粗抽出物または精製抽出物)は、1つの単一供給源または異なる複数供給源(例えば1つ以上の植物からの1つ以上の光合成器官または組織、1つ以上の微細藻類、1つ以上の大型藻類、または1つ以上の光合成細菌、またはそれらの混合物)から、取得可能であるか、または得ることができる。
本発明の抽出物は、当技術分野で知られている任意の方法を使用して抽出することができる。ある態様において、材料(例えば植物の光合成部分、大型藻類、微細藻類、および/または光合成細菌)は、抽出前に加工することができ、例えば、洗浄、乾燥、切断、製粉、または粉砕することができる。さらに、酵素加工を使用して、セルロース壁を破壊することができる。例えば材料は、セルラーゼ、β-グルカナーゼまたはβ-グルコシダーゼ活性を有する酵素調製物と接触させることができて、酵素調製物が材料の細胞壁を分解することを可能にする。
本発明者らはまた驚くべきことに、使用される出発原料が、本発明の乳化剤抽出物の乳化特性を改変することなく、新鮮な(湿った材料)または乾燥材料であり得ることも見出した(例33~36を参照)。
本発明者らはまた驚くべきことに、使用される出発原料が、本発明の乳化剤抽出物の乳化特性を改変することなく、新鮮な(湿った材料)または乾燥材料であり得ることも見出した(例33~36を参照)。
したがってある態様において、出発原料(例えば植物の光合成部分、大型材料類、微細藻類、および/または光合成細菌)は、新鮮(または湿った材料)であってよい。ある態様において、出発原料(例えば植物の光合成部分、大型藻類、微細藻類、および/または光合成細菌)は、乾燥または部分的に乾燥した材料であってよい。乾燥材料は、少なくとも90%の水分が蒸発した材料として理解される。部分的乾燥材料は、本明細書において、少なくとも30%の水分が蒸発した材料、例えば少なくとも50%の水分が蒸発した材料として理解される。
ある態様において、例えば材料に水分が非常に多い場合、材料(例えばホウレンソウ)からのジュースを濾過し、残り(濾過ケーキ)を抽出に使用することができる(例32を参照)。
出発原料(例えば植物の光合成部分、大型藻類、微細藻類および/または光合成細菌)は、「原材料」または「使用済み材料」であり得る。
本明細書で使用される「原材料」という用語は、他の抽出プロセスで以前に使用されていない、上記の材料の1つ以上を指す(例えば、スピルリナの細胞に天然に存在するすべての成分を含む、全スピルリナ)。
ある態様において、例えば材料に水分が非常に多い場合、材料(例えばホウレンソウ)からのジュースを濾過し、残り(濾過ケーキ)を抽出に使用することができる(例32を参照)。
出発原料(例えば植物の光合成部分、大型藻類、微細藻類および/または光合成細菌)は、「原材料」または「使用済み材料」であり得る。
本明細書で使用される「原材料」という用語は、他の抽出プロセスで以前に使用されていない、上記の材料の1つ以上を指す(例えば、スピルリナの細胞に天然に存在するすべての成分を含む、全スピルリナ)。
本明細書で使用される「使用済み材料」という用語は、別の生成物の抽出にすでに使用されており、本発明の乳化剤抽出物(例えば極性脂質に富む粗抽出物または精製抽出物)を抽出するために回収されて再度加工される、上記の材料の1つ以上を指す。前記使用済み材料には毒性がなく、元の材料に天然に存在する成分のほとんどを含み、少なくとも出発原料(例えばスピルリナ、大型藻類、微細藻類など)に元から存在する極性脂質のほとんどを含む。例えば、本発明の乳化剤抽出物(例えば極性脂質に富む粗抽出物または精製抽出物)は、他の物質(例えば色など)の抽出に使用されたスピルリナケーキ、他の物質の抽出に使用されたホウレンソウケーキなどから得ることができる。かかるケーキは、例えば、元の原材料を溶媒で処理して極性脂質とは異なる他の生成物(単数または複数)を抽出し、次いで前記溶媒から分離し、最終的に乾燥させた後に得られる材料であり得る。一態様において、材料は、以下からの使用済み材料である:スピルリナ等の光合成細菌;次のような微細藻類:クロレラ(Chlorella)(例えばChlorella sorokiniana、Chlorella vulgaris、Chlorella zofingensis)、Chysophyceae、Xantophyceae、Baccilariophyceae、Dinophyceae、Rodophyceae、Phaeophyceae、Chlorophyceae、Prasinophyceae、Cryptophyceae、Crypthecodinium、Cylindrothec、Botrycoccus、ドナリエラ(Dunaliella)(例えばDunaliella salina)、Euglena gracilis、イソクリシス(Isochrysis)、テトラセルミス(Tetraselmis)、ナンノクロロプシス(Nannochloropsis)、ネオクロリス(Neochloris)、Nitzschia Scenedesmus、クロロボトリス(Chlorobotrys)、Eustigmatos、Phaeodactylum、Porphyridium、Pseudostaurastrum、Schizochytrium、テトラセルミス(Tetraselmis)、Vischeria、Monodopsis、Ellipsoidion、Pseudocharaciopsis;Ulva spp等の大型藻類;またはホウレンソウの葉や茎などの植物の光合成部分。
粗抽出物を得るための抽出方法の例は、以下を含む:
a)材料(例えば植物の光合成部分、大型藻類、微細藻類、および/または光合成細菌)を溶媒と混合すること
b)溶媒を残留物質から、当技術分野で知られている任意の適切な分離技術により分離すること
c)溶媒を抽出物から、部分的または完全に分離すること
d)任意に、粗抽出物を乾燥すること。
抽出プロセスで使用し得る特定の溶媒としては、以下が挙げられる:水、アルコール(例えばメタノール、エタノール、イソプロパノール)、アセトン、酢酸エチル、ヘキサン、ジクロロメタン、2-メチルテトラヒドロフラン、クロロホルム(例えば>98%、0.6%エタノールで安定化)および任意の混合物、例えばアルコール:水混合物(例えばメタノールと水、またはエタノールと水、またはイソプロパノールと水の混合物)、またはアセトン:水混合物。例えば、抽出溶媒は、水:アルコール混合物(水中約50%~約99%のアルコール。例えば水中約60%~約90%のアルコール、または水中約70%~約80%のアルコール)、または純粋なアルコールであることができる。挙げることができる特定のアルコールとしては、エタノール(EtOH)、メタノール(MeOH)、およびイソプロパノール(iPrOH)が含まれる。
a)材料(例えば植物の光合成部分、大型藻類、微細藻類、および/または光合成細菌)を溶媒と混合すること
b)溶媒を残留物質から、当技術分野で知られている任意の適切な分離技術により分離すること
c)溶媒を抽出物から、部分的または完全に分離すること
d)任意に、粗抽出物を乾燥すること。
抽出プロセスで使用し得る特定の溶媒としては、以下が挙げられる:水、アルコール(例えばメタノール、エタノール、イソプロパノール)、アセトン、酢酸エチル、ヘキサン、ジクロロメタン、2-メチルテトラヒドロフラン、クロロホルム(例えば>98%、0.6%エタノールで安定化)および任意の混合物、例えばアルコール:水混合物(例えばメタノールと水、またはエタノールと水、またはイソプロパノールと水の混合物)、またはアセトン:水混合物。例えば、抽出溶媒は、水:アルコール混合物(水中約50%~約99%のアルコール。例えば水中約60%~約90%のアルコール、または水中約70%~約80%のアルコール)、または純粋なアルコールであることができる。挙げることができる特定のアルコールとしては、エタノール(EtOH)、メタノール(MeOH)、およびイソプロパノール(iPrOH)が含まれる。
特定の態様において、抽出溶媒はメタノール:水混合物であり得、例えば水中約50%~約99%のメタノール、または水中約60%~約90%のメタノールであり得る。例えば、水中約70%~約80%のメタノールである。
本明細書で使用される用語「アセトン粗抽出物」は、材料(例えばホウレンソウの葉、イエルバ・マテ、Agarophyton chilensis、Ulva sp.、スピルリナ、Nannochloropsis sp.、Chlorella sp.、Dunaliella salinaなど)からの抽出が、アセトンを唯一の溶媒として用いるか、アセトンと水の混合物(例えば、水中約60%~約90%のアセトン、例えば70:30、80:20または90:10のアセトン:水)を用いて行われた場合に、前述の任意の材料(例えば植物の光合成部分、大型藻類、微細藻類、および/または光合成細菌)から得られる抽出物を指す。本明細書で使用される「ヒドロアセトン粗抽出物」という用語は、生物材料からの抽出が、水とアセトンの混合物を用いて行われた場合に、前述の任意の材料(例えばホウレンソウの葉、イエルバ・マテ、Agarophyton chilensis、Ulva sp、スピルリナ、Nannochloropsis sp.、Chlorella sp.、ドナリエラなど)から得られる粗抽出物を指す。例えば、水中約1%~約99%のアセトンであり、かかる粗抽出物は、ヒドロアセトン粗抽出物と呼ばれる。
本明細書で使用される用語「アセトン粗抽出物」は、材料(例えばホウレンソウの葉、イエルバ・マテ、Agarophyton chilensis、Ulva sp.、スピルリナ、Nannochloropsis sp.、Chlorella sp.、Dunaliella salinaなど)からの抽出が、アセトンを唯一の溶媒として用いるか、アセトンと水の混合物(例えば、水中約60%~約90%のアセトン、例えば70:30、80:20または90:10のアセトン:水)を用いて行われた場合に、前述の任意の材料(例えば植物の光合成部分、大型藻類、微細藻類、および/または光合成細菌)から得られる抽出物を指す。本明細書で使用される「ヒドロアセトン粗抽出物」という用語は、生物材料からの抽出が、水とアセトンの混合物を用いて行われた場合に、前述の任意の材料(例えばホウレンソウの葉、イエルバ・マテ、Agarophyton chilensis、Ulva sp、スピルリナ、Nannochloropsis sp.、Chlorella sp.、ドナリエラなど)から得られる粗抽出物を指す。例えば、水中約1%~約99%のアセトンであり、かかる粗抽出物は、ヒドロアセトン粗抽出物と呼ばれる。
本明細書で使用される「アルコール粗抽出物(alcohol crude extract)」または「アルコール粗抽出物(alcoholic crude extract)」という用語は、抽出がアルコールを唯一の溶媒として用いて行われた場合に、前述の任意の材料(例えば植物の光合成部分、大型藻類、微細藻類および/または光合成細菌)から得られる粗抽出物を指す。例えば、100%メタノールおよび/または100%エタノール(無水エタノール)である。本明細書で使用される「ヒドロアルコール粗抽出物」という用語は、生物材料からの抽出が、水とアルコールの混合物を用いて行われた場合に、前述の任意の材料(例えばホウレンソウの葉、イエルバ・マテ、Agarophyton chilensis、Ulva sp、スピルリナ、Nannochloropsis sp.、Chlorella sp.、ドナリエラなど)から得られる粗抽出物を指す。例えば、水中約1%~約99%のアルコール(例えば、エタノール、メタノール、イソプロパノール)であり、かかる粗抽出物は、ヒドロエタノール粗抽出物と呼ばれる。
本明細書で使用される「ヘキサン(hexane)粗抽出物」または「ヘキサン(hexanic)粗抽出物」という用語は、抽出がヘキサンを唯一の溶媒として用いて行われた場合に、前述の任意の生物材料から得られる粗抽出物を指す。
本明細書で使用される「酢酸エチル粗抽出物」という用語は、抽出が酢酸エチルを唯一の溶媒として用いて行われた場合に、前述の任意の生物材料から得られる粗抽出物を指す。
本明細書で使用される「メチルテトラヒドロフラン粗抽出物」という用語は、抽出がメチルテトラヒドロフランを唯一の溶媒として用いて行われた場合に、前述の任意の生物材料から得られる粗抽出物を指す。
上述の溶媒の1つ以上の混合物を用いる抽出を、使用することができる(例えば、クロロホルム/メタノール混合物など)。
本明細書で使用される「酢酸エチル粗抽出物」という用語は、抽出が酢酸エチルを唯一の溶媒として用いて行われた場合に、前述の任意の生物材料から得られる粗抽出物を指す。
本明細書で使用される「メチルテトラヒドロフラン粗抽出物」という用語は、抽出がメチルテトラヒドロフランを唯一の溶媒として用いて行われた場合に、前述の任意の生物材料から得られる粗抽出物を指す。
上述の溶媒の1つ以上の混合物を用いる抽出を、使用することができる(例えば、クロロホルム/メタノール混合物など)。
一態様において、抽出温度は、約20℃~約100℃の範囲である。特定の態様において、抽出温度は約50℃~約70℃の範囲である。典型的には、抽出プロセスで使用される生物材料と溶媒混合物の比率は、グラム対ミリリットルベースで約1:1~約1:74まで、例えば約1:10~約1:20まで変化する。インキュベーション期間(すなわち、生物材料が溶媒と接触している期間)は、典型的には約1時間~約24時間である。
機械的エネルギーを、抽出プロセス中に加えることができる。機械的エネルギーの適用は、混合物を均質化すること、出発生物材料の物理的構造を変化させること、および極性脂質の抽出収率を向上させることを支援する。この方法で適用される機械的エネルギーの量は、適用されるステップ、材料の種類、混合物中で使用される出発材料の量、混合物のpH、および混合物の温度に依存する。機械的エネルギーの量はまた、抽出を完了するのに必要な時間に影響を与える可能性がある。
機械的エネルギーを、抽出プロセス中に加えることができる。機械的エネルギーの適用は、混合物を均質化すること、出発生物材料の物理的構造を変化させること、および極性脂質の抽出収率を向上させることを支援する。この方法で適用される機械的エネルギーの量は、適用されるステップ、材料の種類、混合物中で使用される出発材料の量、混合物のpH、および混合物の温度に依存する。機械的エネルギーの量はまた、抽出を完了するのに必要な時間に影響を与える可能性がある。
例えば、材料(例えば植物および/または微細藻類の光合成部分)および抽出溶液(例えばアセトンまたはエタノール)は、当技術分野で知られている技術を使用して混合することができ、例えば、撹拌、剪断、浸軟、浸出または注入、例えば磁気または機械撹拌である。撹拌は、任意の適切な毎分回転数(rpm)で行うことができ、例えば撹拌は、約1rpm~約10rpm、または約50rpm~約500rpmで行うことができる。機械的撹拌の場合、これは典型的には約1rpm~500rpmで、例えば約10rpm~約200rpmで行うことができる。
機械的エネルギーを適用するための装置は、ポンプ、リファイナー、ローターステーター、ホモジナイザー、押出機、ローブポンプ、および/または遠心ポンプであり得る。混合物は閉ループシステムで循環させることができ、該システムは、圧力容器(加熱された溶媒混合物を含むことができる)、還流容器、シェルアンドチューブ熱交換器などの熱交換器、および加熱された混合物を容器に戻す再循環用のポンプを含み、混合物がシステム内でポンプを複数回通過することを可能にする。ある態様において、還流を使用することができる。
機械的エネルギーを適用するための装置は、ポンプ、リファイナー、ローターステーター、ホモジナイザー、押出機、ローブポンプ、および/または遠心ポンプであり得る。混合物は閉ループシステムで循環させることができ、該システムは、圧力容器(加熱された溶媒混合物を含むことができる)、還流容器、シェルアンドチューブ熱交換器などの熱交換器、および加熱された混合物を容器に戻す再循環用のポンプを含み、混合物がシステム内でポンプを複数回通過することを可能にする。ある態様において、還流を使用することができる。
光合成物質(例えばホウレンソウの葉、スピルリナなど)と溶媒をインキュベートした後、溶媒を残留物質から、当技術分野で知られている任意の適切な分離技術(例えば、AF06またはAF31Hフィルタープレート等の濾過など)によって分離する。
さらなる濾過ステップを使用して、得られた粗抽出物に、生物材料由来の潜在的な固体粒子がまったくないことを確実にする。
溶媒は、当技術分野で知られている任意の方法、例えば大気圧または減圧での蒸発、蒸留、および溶媒の蒸発または蒸留を可能にする任意の装置、または溶媒を置換する液体-液体法などによって、抽出物から部分的または完全に分離することができる。
低温殺菌または滅菌方法は、抽出のいずれのステップにおいても適用可能である。
さらなる濾過ステップを使用して、得られた粗抽出物に、生物材料由来の潜在的な固体粒子がまったくないことを確実にする。
溶媒は、当技術分野で知られている任意の方法、例えば大気圧または減圧での蒸発、蒸留、および溶媒の蒸発または蒸留を可能にする任意の装置、または溶媒を置換する液体-液体法などによって、抽出物から部分的または完全に分離することができる。
低温殺菌または滅菌方法は、抽出のいずれのステップにおいても適用可能である。
一態様において、本発明の極性脂質を含む粗抽出物は、極性脂質に富む。
本発明において、および粗抽出物の特定の文脈において、「極性脂質が豊富」または「極性脂質に富む」とは、本発明の粗抽出物が、全抽出物に対して少なくとも5wt%、少なくとも10wt%、少なくとも11wt%、少なくとも12wt%、少なくとも13wt%、少なくとも14wt%、少なくとも15wt%、少なくとも16wt%、少なくとも17wt%、少なくとも18wt%、少なくとも19wt%、少なくとも20wt%、少なくとも25wt%、少なくとも30wt%、少なくとも35wt%、少なくとも40wt%、少なくとも45wt%、少なくとも50wt%の極性脂質を含むことを意味する。
本発明の粗抽出物はさらに、糖、タンパク質、ペプチド、クロロフィルまたはワックスなどの他の天然物質を含有することができる。
本発明において、および粗抽出物の特定の文脈において、「極性脂質が豊富」または「極性脂質に富む」とは、本発明の粗抽出物が、全抽出物に対して少なくとも5wt%、少なくとも10wt%、少なくとも11wt%、少なくとも12wt%、少なくとも13wt%、少なくとも14wt%、少なくとも15wt%、少なくとも16wt%、少なくとも17wt%、少なくとも18wt%、少なくとも19wt%、少なくとも20wt%、少なくとも25wt%、少なくとも30wt%、少なくとも35wt%、少なくとも40wt%、少なくとも45wt%、少なくとも50wt%の極性脂質を含むことを意味する。
本発明の粗抽出物はさらに、糖、タンパク質、ペプチド、クロロフィルまたはワックスなどの他の天然物質を含有することができる。
特定の態様において、本発明の粗抽出物は:
他の生物材料を実質的に含まない(例えば、植物セルロースの細片を含まない);
植物、藻類または細菌細胞を実質的に含まない;および/または
植物、藻類または細菌の細胞物質を実質的に含まない、
有毒成分、例えば農薬、キントゼン、アフラトキシン、オクラトキシンA、カドミウム、ヒ素、鉛または水銀などを実質的に含まない、および/または
残留溶媒を実質的に含まない。
本明細書で使用される場合、抽出物が別の生物材料の細片または望ましくない天然物質を「実質的に含まない」との言及は、1重量%未満(例:0.1重量%未満、例えば0.01重量%未満または0.001重量%未満)のその物質からなる抽出物を指す場合がある。
他の生物材料を実質的に含まない(例えば、植物セルロースの細片を含まない);
植物、藻類または細菌細胞を実質的に含まない;および/または
植物、藻類または細菌の細胞物質を実質的に含まない、
有毒成分、例えば農薬、キントゼン、アフラトキシン、オクラトキシンA、カドミウム、ヒ素、鉛または水銀などを実質的に含まない、および/または
残留溶媒を実質的に含まない。
本明細書で使用される場合、抽出物が別の生物材料の細片または望ましくない天然物質を「実質的に含まない」との言及は、1重量%未満(例:0.1重量%未満、例えば0.01重量%未満または0.001重量%未満)のその物質からなる抽出物を指す場合がある。
本発明の粗抽出物をさらに精製して、極性脂質がより豊富な抽出物および/または望ましくない物質が枯渇した抽出物を得ることができ、こうして「精製抽出物」(または本発明の精製抽出物)を得る。ある態様において、本発明の精製抽出物は、極性脂質に富む。抽出物の極性脂質画分のさらなる濃縮を可能にする、および/または、非乳化作用剤の、または本発明の乳化剤抽出物の乳化特性および/または前記抽出物の官能特性に影響を与える可能性のある他の物質の、部分的または完全な枯渇を可能にする、当技術分野で知られている任意の方法を、本発明で使用することができる。
例えば、粗抽出物の生成中、ステップb)(溶媒の残留溶媒からの分離)の前に第2の液体/液体抽出を行い、その後、平衡化ならびに極性脂質およびその他の乳化作用剤を含有する相の回収を行ってもよい。
さらに、本発明の粗抽出物は、糖、タンパク質、ペプチド、クロロフィル、ワックスなどの、抽出物の乳化特性を妨害し得る物質が枯渇した精製抽出物を得るように、加工することもできる。
例えば、粗抽出物の生成中、ステップb)(溶媒の残留溶媒からの分離)の前に第2の液体/液体抽出を行い、その後、平衡化ならびに極性脂質およびその他の乳化作用剤を含有する相の回収を行ってもよい。
さらに、本発明の粗抽出物は、糖、タンパク質、ペプチド、クロロフィル、ワックスなどの、抽出物の乳化特性を妨害し得る物質が枯渇した精製抽出物を得るように、加工することもできる。
本発明の精製抽出物は、当技術分野で知られているさらなる精製方法を使用して得ることができ、これには、限定はされないが次のうちの1つ以上が含まれる:木炭(粉末活性炭または炭素フィルタープレートなど)の使用、固相への吸収、クロマトグラフィー法、樹脂、膜分離、膜精製、極性または非極性溶媒を使用した固体/液体抽出、極性または非極性溶媒を使用した液体/液体分離、さらなる遠心分離ステップ、蒸留、分別蒸留、分子蒸留、水によるストライピング(striping)など。
ある態様において、精製は活性炭フィルターを使用して行われ、これは濾過ステップ後および/または濾過ステップ中に使用され得る。
ある態様において、抽出物を精製するために活性炭が使用される。例えば、活性炭を濾液に添加することができる。次いで混合物を約50℃に加熱し、新たな濾過を通常のフィルター(AF31Hフィルタープレートなど)を用いて行うことができる。
ある態様において、精製は活性炭フィルターを使用して行われ、これは濾過ステップ後および/または濾過ステップ中に使用され得る。
ある態様において、抽出物を精製するために活性炭が使用される。例えば、活性炭を濾液に添加することができる。次いで混合物を約50℃に加熱し、新たな濾過を通常のフィルター(AF31Hフィルタープレートなど)を用いて行うことができる。
好ましい態様において、本発明の精製抽出物は、10%未満の糖、タンパク質、ペプチド、クロロフィルおよび/またはワックスを、または好ましくは5%未満のそれらを、またはより好ましくは1%未満のそれらを、例えば0.01%未満のそれらを含有する。
一態様において、極性脂質に富む精製抽出物(本発明の極性脂質に富む精製抽出物)は、全抽出物成分に対して、少なくとも5wt%、例えば少なくとも10wt%、少なくとも15wt%、少なくとも20wt%、少なくとも30wt%、少なくとも35wt%、少なくとも40wt%、少なくとも45wt%、少なくとも50wt%、少なくとも55wt%、少なくとも60wt%、少なくとも65wt%、少なくとも70wt%、少なくとも75wt%、少なくとも80wt%、少なくとも85wt%、少なくとも90wt%、少なくとも95wt%、少なくとも99wt%の極性脂質を含む。
好ましい態様において、本発明の精製抽出物は、10%未満の糖、タンパク質、ペプチド、クロロフィルおよび/またはワックスを、または好ましくは5%未満のそれらを、またはより好ましくは1%未満のそれらを、例えば0.01%未満のそれらを含有し、および、抽出物の総重量に対して、少なくとも15wt%、少なくとも20wt%、少なくとも30wt%、少なくとも35wt%、少なくとも40wt%、少なくとも45wt%、少なくとも50wt%、少なくとも55wt%、少なくとも60wt%、少なくとも65wt%、少なくとも70wt%、少なくとも75wt%、少なくとも80wt%、少なくとも85wt%、少なくとも90wt%、少なくとも95wt%、少なくとも99wt%の極性脂質を含む。
一態様において、極性脂質に富む精製抽出物(本発明の極性脂質に富む精製抽出物)は、全抽出物成分に対して、少なくとも5wt%、例えば少なくとも10wt%、少なくとも15wt%、少なくとも20wt%、少なくとも30wt%、少なくとも35wt%、少なくとも40wt%、少なくとも45wt%、少なくとも50wt%、少なくとも55wt%、少なくとも60wt%、少なくとも65wt%、少なくとも70wt%、少なくとも75wt%、少なくとも80wt%、少なくとも85wt%、少なくとも90wt%、少なくとも95wt%、少なくとも99wt%の極性脂質を含む。
好ましい態様において、本発明の精製抽出物は、10%未満の糖、タンパク質、ペプチド、クロロフィルおよび/またはワックスを、または好ましくは5%未満のそれらを、またはより好ましくは1%未満のそれらを、例えば0.01%未満のそれらを含有し、および、抽出物の総重量に対して、少なくとも15wt%、少なくとも20wt%、少なくとも30wt%、少なくとも35wt%、少なくとも40wt%、少なくとも45wt%、少なくとも50wt%、少なくとも55wt%、少なくとも60wt%、少なくとも65wt%、少なくとも70wt%、少なくとも75wt%、少なくとも80wt%、少なくとも85wt%、少なくとも90wt%、少なくとも95wt%、少なくとも99wt%の極性脂質を含む。
ある態様において、本発明の精製抽出物は、以下であってよい:
他の生物材料を実質的に含まない(例えば、植物セルロースの細片を含まない);
植物、藻類または細菌細胞を実質的に含まない;および/または
植物、藻類または細菌の細胞物質を実質的に含まない、
有毒成分、例えば殺虫剤、キントゼン、アフラトキシン、オクラトキシンA、カドミウム、ヒ素、鉛、または水銀などを実質的に含まない、
残留溶媒を実質的に含まない、
クロロフィルを実質的に含まない、および/または
糖、タンパク質、ペプチド、および/またはワックスを実質的に含まない、
オフノートが実質的にない、
緑色、茶色または灰色が実質的にない。
他の生物材料を実質的に含まない(例えば、植物セルロースの細片を含まない);
植物、藻類または細菌細胞を実質的に含まない;および/または
植物、藻類または細菌の細胞物質を実質的に含まない、
有毒成分、例えば殺虫剤、キントゼン、アフラトキシン、オクラトキシンA、カドミウム、ヒ素、鉛、または水銀などを実質的に含まない、
残留溶媒を実質的に含まない、
クロロフィルを実質的に含まない、および/または
糖、タンパク質、ペプチド、および/またはワックスを実質的に含まない、
オフノートが実質的にない、
緑色、茶色または灰色が実質的にない。
特定の態様において、本発明の精製抽出物は、粗抽出物と比較した場合、改善された官能特性を有する。本発明において「改善された官能特性」とは、本発明の精製抽出物が、最終用途での本発明の乳化剤抽出物の外観および性能に影響を与える可能性のある、ネガティブな臭気を有さず、暗色(緑色または茶色など)を有さず、および/またはオフテイストを有しないことを意味する。
ある態様において、精製抽出物は脱色される。本発明における「脱色」とは、より明るい色(透明、白色または淡黄色)を有する精製抽出物を得るために、暗色(緑色、黒色または茶色など)が除去された抽出物として理解される。
ある態様において、精製抽出物は、透明、白色もしくは淡黄色に対応する、または透明、白色もしくは淡黄色に近い、L1 *、a1 *、およびb1 *を有する。
したがって本発明はまた、植物(ホウレンソウおよび/またはアルファルファの葉もしくは茎など)の光合成部分、大型藻類、光合成細菌またはそれらの混合物から得られるかまたは取得可能な、極性脂質に富む精製抽出物に関する。
本発明の抽出物は、植物全体から、または植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)から、得ることができるかまたは取得可能である。
ある態様において、精製抽出物は脱色される。本発明における「脱色」とは、より明るい色(透明、白色または淡黄色)を有する精製抽出物を得るために、暗色(緑色、黒色または茶色など)が除去された抽出物として理解される。
ある態様において、精製抽出物は、透明、白色もしくは淡黄色に対応する、または透明、白色もしくは淡黄色に近い、L1 *、a1 *、およびb1 *を有する。
したがって本発明はまた、植物(ホウレンソウおよび/またはアルファルファの葉もしくは茎など)の光合成部分、大型藻類、光合成細菌またはそれらの混合物から得られるかまたは取得可能な、極性脂質に富む精製抽出物に関する。
本発明の抽出物は、植物全体から、または植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)から、得ることができるかまたは取得可能である。
本発明で使用できる植物の例としては、限定はされないが、以下からの植物が挙げられる:ミカン科(Rutaceae)(オレンジ、ライムまたはレモンなどの柑橘類を含むがこれらに限定されない)、アオイ科(Malvaceae)(カカオおよびマシュマロを含むがこれらに限定されない)、アカネ科(Rubiaceae)(コーヒーを含むがこれに限定されない)、アマランサス科(Amaranthaceae)(ビートの根およびホウレンソウを含むがこれらに限定されない)、イネ科(Poaceae)(タケおよびオートムギを含むがこれらに限定されない)、ショウガ科(Zingiberaceae)(ウコンを含むがこれに限定されない)、イチョウ科(Ginkgoaceae)(イチョウを含むがこれに限定されない)、ウコギ科(Araliaceae)(朝鮮人参を含むがこれに限定されない)、ツバキ科(Theaceae)(抹茶を含むがこれに限定されない)、キク科(Asteraceae)(オオアザミを含むがこれに限定されない)、モクセイ科(Oleaceae)(オリーブの木を含むがこれに限定されない)、ワサビノキ科(Moringaceae)(モリンガを含むがこれに限定されない)、パイナップル科(Bromeliaceae)(パイナップルを含むがこれに限定されない)、アブラナ科(Brassicaceae)(ブロッコリーラーブ、ブロッコリー、レッドラディッシュを含むがこれに限定されない)、バラ科(Rosaceae)(ローズヒップを含むがこれに限定されない)、ムクロジ科(Sapindaceae)(ガラナを含むがこれに限定されない)、およびシソ科(Lamiacea)(ローズマリー、セージ、タイム、ミント、バジル、エゴマ(Perilla frutescens)およびオレガノを含むがこれらに限定されない)、セリ科(Apiaceae)(アジョワン、アンゼリカ、アニス、アサフェティダ、キャラウェイ、ニンジン、セロリ、チャービル、コリアンダー、クミン、ディル、フェンネル、ラベージ、シャク(cow parsley)、パセリ、パースニップおよびシーホリー(sea holly)、ならびにシルフィウム(silphium)を含むがこれらに限定されない)、キク科(Asteraceae)(レタスを含むがこれに限定されない)、マメ科(Fabaceae)(アルファルファ、およびインゲンマメ属(Phaseolus)、ひよこ豆、Cicer arietinum、フェヌグリーク(Trigonella foenumgraecum)、レンズマメ(Lens culinaris)、ルピナス(Lupinus属)、エンドウマメ(Pisum sativum)などを含むがこれに限定されない)、イエルバ・マテ(Ilex paraguariensis)、キクニガナ属(Cichorium)(エンダイブを含むがこれらに限定されない)イラクサ(Urtica dioica)、ヒガンバナ科(Amaryllidaceae)(ニンニク、ワケギ、ニラネギ、チャイブ、ラッキョウ、タマネギ、グリーンオニオンを含むがこれらに限定されない)、およびそれらの混合物。
ある態様において、本発明の乳化剤抽出物(例えば極性脂質を含む粗抽出物または精製抽出物)は、植物全体から得られるかまたは取得可能である。ある態様において、本発明の乳化剤抽出物(例えば極性脂質を含む粗抽出物または精製抽出物)は、前記植物の光合成器官または葉、茎などの組織(本明細書においては「グリーン部分(greens)」としても定義される)から得られるかまたは取得可能である。ある好ましい態様において、植物のグリーン部分から得られるかまたは取得可能な本発明の抽出物(本発明のグリーン部分植物抽出物)としては、限定はされないが以下からのグリーン部分:ブロッコリーラーブ、ブロッコリー、レッドラディッシュ、ガラナ、ローズマリー、セージ、タイム、ミント、バジル、エゴマ、アジョワン、アンゼリカ、アニス、アサフェティダ、キャラウェイ、ニンジン、セロリ、チャービル、コリアンダー、クミン、ディル、フェンネル、ラベージ、シャク、パセリ、パースニップ、シーホリー(sea holly)、シルフィウム(silphium oregano)、レタス、アルファルファフェヌグリーク(Trigonella foenum-graecum)、レンズマメ(Lens culinaris)、ルピナス(Lupinus属)、エンドウマメ(Pisum sativum)、ニンニク、ワケギ、ニラネギ、チャイブ、ラッキョウ、タマネギ、グリーンオニオン、ビートの根、ホウレンソウ、パセリ、イエルバ・マテ、茶、エンダイブ、クレソン、イラクサ、ニンジン、サツマイモ(Ipomoea batatas)の葉、パクチョイ(Brassica rapa subsp. chinensis)、クウシンサイ(Ipomoea aquatica)、およびそれらの混合物が挙げられ、および任意に、溶媒は、アルコールまたはアルコールと水の混合物から、例えばエタノール100%またはエタノール:水(70:30、80:20または90:10)から選択され、および任意に脂質含有としては、少なくとも5%、例えば少なくとも10%の極性脂質である。
ある態様において、抽出物(粗抽出物または精製抽出物)は、スプリングオニオンのグリーン部分から得られるかまたは取得可能な抽出物であり、100%エタノールを用いて抽出される。
ある態様において、抽出物(粗抽出物または精製抽出物)は、アルファルファから、エタノール-水(例えば80:20または90:10のエタノール:水)を溶媒として用いて得られるかまたは取得可能な抽出物である。ある態様において、アルファルファ抽出物はサポニンも含む。
本発明者らは驚くべきことに、ブロッコリーラーブのグリーン部分、グリーンピースのさや、ローズマリー、セロリ、ニンジン、パセリ、ラディッシュの葉、および/または紅茶の葉が、低いpHにおいても非常に高い乳化特性を有することを見出した(例30、31および32を参照)。
ある態様において、抽出物(粗抽出物または精製抽出物)は、ブロッコリーラーブのグリーン部分、グリーンピースのさや、ローズマリー、セロリ、ニンジン、パセリ、ラディッシュの葉、および/または紅茶の葉から得られるかまたは取得可能な抽出物であり、エタノール100%またはエタノール-水(例えば80:20または90:10)を溶媒として用いて抽出される。
ある態様において、抽出物(粗抽出物または精製抽出物)は、アルファルファから、エタノール-水(例えば80:20または90:10のエタノール:水)を溶媒として用いて得られるかまたは取得可能な抽出物である。ある態様において、アルファルファ抽出物はサポニンも含む。
本発明者らは驚くべきことに、ブロッコリーラーブのグリーン部分、グリーンピースのさや、ローズマリー、セロリ、ニンジン、パセリ、ラディッシュの葉、および/または紅茶の葉が、低いpHにおいても非常に高い乳化特性を有することを見出した(例30、31および32を参照)。
ある態様において、抽出物(粗抽出物または精製抽出物)は、ブロッコリーラーブのグリーン部分、グリーンピースのさや、ローズマリー、セロリ、ニンジン、パセリ、ラディッシュの葉、および/または紅茶の葉から得られるかまたは取得可能な抽出物であり、エタノール100%またはエタノール-水(例えば80:20または90:10)を溶媒として用いて抽出される。
本発明者らは驚くべきことに、ホウレンソウ粗抽出物またはホウレンソウ精製抽出物が、低pHおよび低濃度においても非常に高い乳化特性を有し、また高い極性脂質含有を有することを見出した(例1~6、36、41を参照)。
一態様において、抽出物は、エタノールまたはヒドロエタノールを溶媒として(例えば50:50~90:10のエタノール:水)用いて得られる、ホウレンソウ抽出物である。ある態様において、抽出温度は周囲温度である。他の態様において、抽出温度は約40℃~約100℃である。
ある態様において、ホウレンソウ抽出物はヒドロエタノール抽出物(90:10のEtOH:水)であり、極性脂質含有は少なくとも20%、例えば少なくとも30%である。ある態様において、抽出物はヒドロエタノール抽出物(90:10のEtOH:水)であり、抽出は、少なくとも40℃、例えば60℃の温度で行われ、任意に、極性脂質含有は少なくとも40%、例えば少なくとも45%である。
ある態様において、ホウレンソウ抽出物はエタノール抽出物(100%EtOH)であり、任意に、極性脂質含有は少なくとも30%、例えば少なくとも34%である。
ある態様において、ホウレンソウ抽出物はヒドロアセトン抽出物(90:10のアセトン:水)であり、任意に、極性脂質含有は少なくとも20%、例えば少なくとも40%、例えば少なくとも65%、例えば69%である。
一態様において、抽出物は、エタノールまたはヒドロエタノールを溶媒として(例えば50:50~90:10のエタノール:水)用いて得られる、ホウレンソウ抽出物である。ある態様において、抽出温度は周囲温度である。他の態様において、抽出温度は約40℃~約100℃である。
ある態様において、ホウレンソウ抽出物はヒドロエタノール抽出物(90:10のEtOH:水)であり、極性脂質含有は少なくとも20%、例えば少なくとも30%である。ある態様において、抽出物はヒドロエタノール抽出物(90:10のEtOH:水)であり、抽出は、少なくとも40℃、例えば60℃の温度で行われ、任意に、極性脂質含有は少なくとも40%、例えば少なくとも45%である。
ある態様において、ホウレンソウ抽出物はエタノール抽出物(100%EtOH)であり、任意に、極性脂質含有は少なくとも30%、例えば少なくとも34%である。
ある態様において、ホウレンソウ抽出物はヒドロアセトン抽出物(90:10のアセトン:水)であり、任意に、極性脂質含有は少なくとも20%、例えば少なくとも40%、例えば少なくとも65%、例えば69%である。
ある態様において、ホウレンソウ抽出物はアセタートを溶媒として用いて得られ、任意に、極性脂質含有は少なくとも50%、例えば少なくとも70%である。
ある態様において、ホウレンソウ抽出物はイソプロパノールを溶媒として用いて得られ、任意に、極性脂質含有は少なくとも20%、例えば少なくとも30%である。
ある態様において、ホウレンソウ抽出物はMeTHFを溶媒として用いて得られ、任意に、極性脂質含有は少なくとも20%、例えば少なくとも30%である。
ある態様において、ホウレンソウは新鮮でもよいし、抽出プロセスの前に乾燥させてもよい。本明細書で言及されるホウレンソウ抽出物は、粗製であってもよく、前に定義したように精製された抽出物であってもよい。本明細書で言及されるホウレンソウ抽出物は、新鮮な材料または乾燥材料から得ることができる。
本発明者らは、本発明に記載のホウレンソウ抽出物が極性脂質を含むことを見出した。ただし、極性脂質の割合が低い一部の抽出物も、非常に優れた乳化特性を有する;したがってある態様において、本発明のホウレンソウ抽出物は、極性脂質、および任意にサポニン、ラムノ脂質、DAGなどの他の乳化作用剤を含む。
ある態様において、ホウレンソウ抽出物はイソプロパノールを溶媒として用いて得られ、任意に、極性脂質含有は少なくとも20%、例えば少なくとも30%である。
ある態様において、ホウレンソウ抽出物はMeTHFを溶媒として用いて得られ、任意に、極性脂質含有は少なくとも20%、例えば少なくとも30%である。
ある態様において、ホウレンソウは新鮮でもよいし、抽出プロセスの前に乾燥させてもよい。本明細書で言及されるホウレンソウ抽出物は、粗製であってもよく、前に定義したように精製された抽出物であってもよい。本明細書で言及されるホウレンソウ抽出物は、新鮮な材料または乾燥材料から得ることができる。
本発明者らは、本発明に記載のホウレンソウ抽出物が極性脂質を含むことを見出した。ただし、極性脂質の割合が低い一部の抽出物も、非常に優れた乳化特性を有する;したがってある態様において、本発明のホウレンソウ抽出物は、極性脂質、および任意にサポニン、ラムノ脂質、DAGなどの他の乳化作用剤を含む。
藻類は、複数の異なるクレード(clade)からの種を含む光合成真核生物であり、クロレラおよび珪藻などの単細胞微細藻類から海藻および淡水藻類などの多細胞大型藻類までの範囲の生物が含まれる。
本発明で使用され得る大型藻類の例は、Ascophyllum nodosum;Fucus serratus、F. vesiculosus、Himanthalia elongate、Undaria pinnatifida、Laminaria digitata、L. saccharina、L. japonica、Alaria esculenta、Palmaria palmata(ダルス)、Porphyra umbilicalis;P. tenera、P. yezoensis、P. dioica、P. purpurea、P. laciniata、P. leucostica、Chondrus crispus;Gracilaria verrucosa、Lithothamnium calcareum、Enteromorpha spp.およびUlva spp.である。
微細藻類は、数マイクロメートルから数百マイクロメートルまでのサイズの真核単細胞生物である。「微細藻類」という用語には、緑藻、珪藻、渦鞭毛藻、およびコッコリソフォアなどの非常に多様な群が含まれ、数万または数十万と推定される未知の数の種から構成されている。
本発明で使用され得る大型藻類の例は、Ascophyllum nodosum;Fucus serratus、F. vesiculosus、Himanthalia elongate、Undaria pinnatifida、Laminaria digitata、L. saccharina、L. japonica、Alaria esculenta、Palmaria palmata(ダルス)、Porphyra umbilicalis;P. tenera、P. yezoensis、P. dioica、P. purpurea、P. laciniata、P. leucostica、Chondrus crispus;Gracilaria verrucosa、Lithothamnium calcareum、Enteromorpha spp.およびUlva spp.である。
微細藻類は、数マイクロメートルから数百マイクロメートルまでのサイズの真核単細胞生物である。「微細藻類」という用語には、緑藻、珪藻、渦鞭毛藻、およびコッコリソフォアなどの非常に多様な群が含まれ、数万または数十万と推定される未知の数の種から構成されている。
本発明者らは驚くべきことに、本発明に記載の微細藻類抽出物が、低濃度であっても、エマルションを低pH(pH3.5)および高pH(pH7)で安定化できることを見出した。本発明の発明者らは驚くべきことに、本発明に記載の微細藻類抽出物が、高い極性脂質含有を有することを見出した(表6、7、8、9および10を参照)。
したがってある態様において、本発明の乳化剤抽出物は、微細藻類から得られるかまたは取得可能である(「本発明の微細藻類抽出物」)。
ある態様において、微細藻類は緑色微細藻類である。ある態様において、本発明の乳化剤微細藻類抽出物(例えば極性脂質を含む粗抽出物または精製抽出物、または例えば極性脂質に富む粗抽出物または精製抽出物)は、以下を含むがこれに限定されない微細藻類から、得られるかまたは取得可能である:クロレラ(例えばChlorella vulgaris、Chlorella sorokiniana、Chlorella zofingensis)、Chysophyceae、Xantophyceae、Baccilariophyceae、Dinophyceae、Rodophyceae、Phaeophyceae、Chlorophyceae、Prasinophyceae、Cryptophyceae、Crypthecodinium、Cylindrothec、Botrycoccus、ドナリエラ(例えばDunaliella salina)、Euglena gracilis、イソクリシス、ナンノクロロプシス、ネオクロリス、Nitzschia Scenedesmus、クロロボトリス、Eustigmatos、Phaeodactylum、Porphyridium、Pseudostaurastrum、Schizochytrium、テトラセルミス、Vischeria、Monodopsis、Ellipsoidion、Pseudocharaciopsisおよびそれらの組み合わせ。
ある態様において、本発明の微細藻類抽出物は、酢酸エチル、イソプロパノール、アセトン、クロロホルム:メタノール(2:1など)、メタノール、MeTHF、エタノールおよび/またはヒドロエタノールから選択される溶媒を使用して、抽出される。
したがってある態様において、本発明の乳化剤抽出物は、微細藻類から得られるかまたは取得可能である(「本発明の微細藻類抽出物」)。
ある態様において、微細藻類は緑色微細藻類である。ある態様において、本発明の乳化剤微細藻類抽出物(例えば極性脂質を含む粗抽出物または精製抽出物、または例えば極性脂質に富む粗抽出物または精製抽出物)は、以下を含むがこれに限定されない微細藻類から、得られるかまたは取得可能である:クロレラ(例えばChlorella vulgaris、Chlorella sorokiniana、Chlorella zofingensis)、Chysophyceae、Xantophyceae、Baccilariophyceae、Dinophyceae、Rodophyceae、Phaeophyceae、Chlorophyceae、Prasinophyceae、Cryptophyceae、Crypthecodinium、Cylindrothec、Botrycoccus、ドナリエラ(例えばDunaliella salina)、Euglena gracilis、イソクリシス、ナンノクロロプシス、ネオクロリス、Nitzschia Scenedesmus、クロロボトリス、Eustigmatos、Phaeodactylum、Porphyridium、Pseudostaurastrum、Schizochytrium、テトラセルミス、Vischeria、Monodopsis、Ellipsoidion、Pseudocharaciopsisおよびそれらの組み合わせ。
ある態様において、本発明の微細藻類抽出物は、酢酸エチル、イソプロパノール、アセトン、クロロホルム:メタノール(2:1など)、メタノール、MeTHF、エタノールおよび/またはヒドロエタノールから選択される溶媒を使用して、抽出される。
ある態様において、本発明の微細藻類抽出物(例えばテトラセルミス抽出物、ナンノクロロプシス、クロレラ、ドナリエラ、イソクリシス抽出物)は、極性脂質に富む粗抽出物または精製抽出物であってよく、任意に、他の乳化作用剤(サポニンなど)を含む。好ましい態様において、微細藻類抽出物(粗抽出物または精製抽出物)は、乾燥抽出物の総重量に基づき、少なくとも10%の極性脂質、少なくとも20%の極性脂質、少なくとも25%wtの極性脂質、少なくとも50%の極性脂質、例えば少なくとも70%、例えば少なくとも90%の極性脂質を有する。
ある態様において、テトラセルミス抽出物(粗製または精製)は、イソプロパノール、酢酸エチル、および/またはアセトンを溶媒として用いて得られ、任意に、極性脂質含有として少なくとも50%、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、例えば少なくとも80%、例えば少なくとも90%、例えば98%を有する。
ある態様において、テトラセルミス抽出物(粗製または精製)は、溶媒としてエタノールまたはエタノールと水(例えば100%エタノール、または90:10のEtOH:水)を用いて得られ、任意に、極性脂質含有として少なくとも50%、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、例えば少なくとも80%、例えば少なくとも90%、例えば69%を有する。
ある態様において、テトラセルミス抽出物(粗製または精製)は、イソプロパノール、酢酸エチル、および/またはアセトンを溶媒として用いて得られ、任意に、極性脂質含有として少なくとも50%、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、例えば少なくとも80%、例えば少なくとも90%、例えば98%を有する。
ある態様において、テトラセルミス抽出物(粗製または精製)は、溶媒としてエタノールまたはエタノールと水(例えば100%エタノール、または90:10のEtOH:水)を用いて得られ、任意に、極性脂質含有として少なくとも50%、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、例えば少なくとも80%、例えば少なくとも90%、例えば69%を有する。
ある態様において、ナンノクロロプシス抽出物(粗製または精製)は、溶媒としてエタノールまたはエタノールと水(例えば100%エタノール、90:10、80:20または70:30のEtOH:水)を用いて得られ、任意に、極性脂質含有として少なくとも20%、少なくとも50%、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、少なくとも80%または少なくとも90%を有する。
ある態様において、ナンノクロロプシス抽出物(粗製または精製)は、溶媒としてイソプロパノール、アセトンおよび/または酢酸エチルを用いて得られ、任意に、極性脂質含有として少なくとも30%、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、例えば少なくとも80%を有する。
ある態様において、クロレラ抽出物(粗製または精製)は、Chlorella vulgaris、Chlorella zofingensisおよび/またはChlorella sorokinianaに由来し、エタノールまたはエタノールと水(例えば100%エタノール、90:10、80:20または70:30のEtOH:水)を溶媒として用いて得られ、任意に、極性脂質含有として少なくとも40%、例えば少なくとも50%、例えば少なくとも70%、少なくとも80%または少なくとも90%を有する。
ある態様において、ナンノクロロプシス抽出物(粗製または精製)は、溶媒としてイソプロパノール、アセトンおよび/または酢酸エチルを用いて得られ、任意に、極性脂質含有として少なくとも30%、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、例えば少なくとも80%を有する。
ある態様において、クロレラ抽出物(粗製または精製)は、Chlorella vulgaris、Chlorella zofingensisおよび/またはChlorella sorokinianaに由来し、エタノールまたはエタノールと水(例えば100%エタノール、90:10、80:20または70:30のEtOH:水)を溶媒として用いて得られ、任意に、極性脂質含有として少なくとも40%、例えば少なくとも50%、例えば少なくとも70%、少なくとも80%または少なくとも90%を有する。
ある態様において、クロレラ抽出物(粗製または精製)は、Chlorella vulgaris、Chlorella zofingensisおよび/またはChlorella sorokinianaに由来し、イソプロパノール、アセトンおよび/または酢酸エチルを溶媒として用いて得られ、任意に、極性脂質含有は少なくとも30%、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、例えば少なくとも80%である。
ある態様において、イソクリシス抽出物(粗製または精製)は、エタノールまたはエタノールと水(例えば100%エタノール、90:10、80:20または70:30のEtOH:水)を溶媒として用いて得られ、任意に、極性脂質含有は少なくとも20%、例えば少なくとも50%、例えば少なくとも70%、少なくとも80%または少なくとも90%である。
ある態様において、イソクリシス抽出物(粗製または精製)は、イソプロパノール、アセタートおよび/またはアセトンを溶媒として用いて得られ、任意に、極性脂質含有は少なくとも20%、例えば少なくとも50%、例えば少なくとも70%、少なくとも80%または少なくとも90%である。
本明細書に記載の微細藻類抽出物は、ある態様において、他の乳化作用剤(例えばサポニンなど)をさらに含む。
ある態様において、微細藻類(例えばクロレラ)は、光独立栄養(光合成)、混合栄養および従属栄養の下で成長し得る。
ある態様において、イソクリシス抽出物(粗製または精製)は、エタノールまたはエタノールと水(例えば100%エタノール、90:10、80:20または70:30のEtOH:水)を溶媒として用いて得られ、任意に、極性脂質含有は少なくとも20%、例えば少なくとも50%、例えば少なくとも70%、少なくとも80%または少なくとも90%である。
ある態様において、イソクリシス抽出物(粗製または精製)は、イソプロパノール、アセタートおよび/またはアセトンを溶媒として用いて得られ、任意に、極性脂質含有は少なくとも20%、例えば少なくとも50%、例えば少なくとも70%、少なくとも80%または少なくとも90%である。
本明細書に記載の微細藻類抽出物は、ある態様において、他の乳化作用剤(例えばサポニンなど)をさらに含む。
ある態様において、微細藻類(例えばクロレラ)は、光独立栄養(光合成)、混合栄養および従属栄養の下で成長し得る。
ある態様において、本発明の乳化剤抽出物(例えば極性脂質を含む粗抽出物または精製抽出物)は、光合成細菌から得られるかまたは取得可能であり、これには限定することなく、シアノバクテリア、例えばスピルリナ(Spirulina platensis、Spirulina maxima、Arthrospira platensis、Arthrospira maxima)、Limnospira platensis、クラマス(Klamath)藻類(Aphanizomenon flosaquae)、およびそれらの組み合わせが含まれる。
一態様において、本発明の乳化剤抽出物は、光合成細菌から得られるかまたは取得可能である。ある態様において、光合成細菌は、シアノバクテリア、例えばスピルリナ(例えばSpirulina platensis、Spirulina maxima、これはArthrospira platensisまたはArthrospira maximaとも呼ばれる)、Limnospira(Limnospira platensis)、Synechocystis、Nostoc、Cyanotheceおよび/またはAphanizomenon(Aphanizomenon flosaquaeなど)、および/またはクラマス藻類(Aphanizomenon flosaquae)であり、溶媒は、酢酸エチル、イソプロパノール、アセトン、クロロホルム:メタノール(2:1など)、メタノール、MeTHF、エタノールおよび/またはヒドロエタノールから選択される。ある態様において、本発明の光合成細菌抽出物(例えばスピルリナ抽出物)は、極性脂質に富む。
一態様において、本発明の乳化剤抽出物は、光合成細菌から得られるかまたは取得可能である。ある態様において、光合成細菌は、シアノバクテリア、例えばスピルリナ(例えばSpirulina platensis、Spirulina maxima、これはArthrospira platensisまたはArthrospira maximaとも呼ばれる)、Limnospira(Limnospira platensis)、Synechocystis、Nostoc、Cyanotheceおよび/またはAphanizomenon(Aphanizomenon flosaquaeなど)、および/またはクラマス藻類(Aphanizomenon flosaquae)であり、溶媒は、酢酸エチル、イソプロパノール、アセトン、クロロホルム:メタノール(2:1など)、メタノール、MeTHF、エタノールおよび/またはヒドロエタノールから選択される。ある態様において、本発明の光合成細菌抽出物(例えばスピルリナ抽出物)は、極性脂質に富む。
好ましい態様において、本発明の光合成細菌抽出物(粗抽出物または精製抽出物)は、乾燥抽出物の総重量に基づき、少なくとも5%、少なくとも10%の極性脂質、少なくとも20%の極性脂質、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも60%の極性脂質を有する。好ましい態様において、光合成細菌はSpirulina spp.であり(としても知られており)、溶媒は、メチルテトラヒドロフラン、ヘキサン、イソプロパノール、エタノールまたはヒドロエタノール(例えば50:50、60:40、70:30、80:20または90:10のエタノールと水)またはその混合物から選択される。
本発明の発明者らは驚くべきことに、極性溶媒を用いて得られたスピルリナ抽出物(例えば粗抽出物または精製抽出物)が、広範囲のpH(例えば3~7のpH)で非常に高い乳化特性を有することを見出した(例9、10、11、12、および13を参照)。
ある態様において、スピルリナ抽出物(粗製または精製)は、溶媒としてエタノールまたはエタノールと水(例えば100%エタノール、90:10、80:20、70:30のEtOH:水)を用いて得られ、任意に、極性脂質含有は、少なくとも15%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも70%、少なくとも80%、または少なくとも90%である。
本発明の発明者らは驚くべきことに、極性溶媒を用いて得られたスピルリナ抽出物(例えば粗抽出物または精製抽出物)が、広範囲のpH(例えば3~7のpH)で非常に高い乳化特性を有することを見出した(例9、10、11、12、および13を参照)。
ある態様において、スピルリナ抽出物(粗製または精製)は、溶媒としてエタノールまたはエタノールと水(例えば100%エタノール、90:10、80:20、70:30のEtOH:水)を用いて得られ、任意に、極性脂質含有は、少なくとも15%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも70%、少なくとも80%、または少なくとも90%である。
ある態様において、スピルリナ抽出物(粗製または精製)は、溶媒としてヘキサン、アセトンおよび/またはMeTHFを用いて得られ、任意に、極性脂質含有は、少なくとも15%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも70%、少なくとも80%、または少なくとも90%である。
ある態様において、スピルリナ抽出物(粗製または精製)は、溶媒としてイソプロパノールを用いて得られ、任意に、極性脂質含有は、少なくとも15%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも70%、少なくとも80%、または少なくとも90%である。
いくつかの態様において、スピルリナ抽出物は、溶媒としてエタノールと水を、30:70~70:30のEtOH:水の比率で用いて得られる。
ある態様において、スピルリナ抽出物(粗製または精製)は、溶媒としてイソプロパノールを用いて得られ、任意に、極性脂質含有は、少なくとも15%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも70%、少なくとも80%、または少なくとも90%である。
いくつかの態様において、スピルリナ抽出物は、溶媒としてエタノールと水を、30:70~70:30のEtOH:水の比率で用いて得られる。
一態様において、生物材料は、大型藻類(例えば、Ascophyllum nodosum、Fucus serratus、F. vesiculosus、Himanthalia elongata、Undaria pinnatifida、Laminaria digitata、L. saccharina、L. japonica、Alaria esculenta、Palmaria palmata(ダルス)、Porphyra umbilicalis、P. tenera、P. yezoensis、P. dioica、P. purpurea、P. laciniata、P. leucostica、Chondrus crispus、Gracilaria verrucosa、Lithothamnium calcareum、Enteromorpha spp.、Ulva spp.またはそれらの混合物)から選択され、および溶媒は、酢酸エチル、イソプロパノール、アセトンおよび/またはヒドロアセトン、クロロホルム:メタノール(2:1など)、メタノール、MeTHF、エタノールおよび/またはヒドロエタノールから選択される。
一態様において、本発明の大型藻類乳化剤抽出物(粗抽出物または精製抽出物)(例えばUlva sppおよび/またはAgarophyton chilensis抽出物)は、極性脂質および任意に他の乳化剤を含む。ある態様において、本発明の大型藻類乳化剤抽出物(粗抽出物または精製抽出物)は、極性脂質に富む。
一態様において、本発明の大型藻類乳化剤抽出物(粗抽出物または精製抽出物)(例えばUlva sppおよび/またはAgarophyton chilensis抽出物)は、極性脂質および任意に他の乳化剤を含む。ある態様において、本発明の大型藻類乳化剤抽出物(粗抽出物または精製抽出物)は、極性脂質に富む。
好ましい態様において、本発明の大型藻類乳化剤抽出物は、乾燥抽出物の総重量に基づき、少なくとも5%の極性脂質、例えば少なくとも10%、少なくとも20%の極性脂質、または少なくとも25%の極性脂質、例えば少なくとも45%の極性脂質を有する。好ましい態様において、大型藻類はUlva sppおよび/またはAgarophyton chilensisであり、抽出物は、ヒドロエタノール抽出物(例えば90:10のエタノール:水)、アセトンまたはヒドロアセトン粗抽出物、またはそれらの混合物から選択される。好ましい態様において、抽出物はUlva spから90:10のEtOH:水を用いて得られ、任意に、極性脂質濃度は30%超、例えば40%超である。
極性脂質としては、以下が挙げられる:ガラクトシルアシルグリセロール(例えばジガラクトシルジアシルグリセロール(DGDG)、モノガラクトシルジアシルグリセロール(MGDG)、ジガラクトシルモノアシルグリセロール(DGMG)、またはモノガラクトシルモノアシルグリセロール(MGMG))、リン脂質(例えばホスファチジルコリン(PC)、ホスファチジルエタノールアミン(PE)またはホスファチジルグリセロール(PG))、リゾリン脂質(例えばPC、PE、またはPGのモノアシル型)、硫黄脂質(例えばスルホキノボシルジアシルグリセロール(SQDG))、ベタイン脂質、フランベースの脂質、またはそれらの酸化生成物、例えば、エポキシド基、ペルオキシド基、ケトン基もしくはヒドロキシル基などの少なくとも1つの酸化された基を含有する上述のすべての極性脂質。
極性脂質としては、以下が挙げられる:ガラクトシルアシルグリセロール(例えばジガラクトシルジアシルグリセロール(DGDG)、モノガラクトシルジアシルグリセロール(MGDG)、ジガラクトシルモノアシルグリセロール(DGMG)、またはモノガラクトシルモノアシルグリセロール(MGMG))、リン脂質(例えばホスファチジルコリン(PC)、ホスファチジルエタノールアミン(PE)またはホスファチジルグリセロール(PG))、リゾリン脂質(例えばPC、PE、またはPGのモノアシル型)、硫黄脂質(例えばスルホキノボシルジアシルグリセロール(SQDG))、ベタイン脂質、フランベースの脂質、またはそれらの酸化生成物、例えば、エポキシド基、ペルオキシド基、ケトン基もしくはヒドロキシル基などの少なくとも1つの酸化された基を含有する上述のすべての極性脂質。
特定の態様において、本発明の乳化剤抽出物(粗抽出物または精製抽出物)は、以下の1つ以上を含む:ガラクトシルアシルグリセロール(例えばジガラクトシルジアシルグリセロール(DGDG)、モノガラクトシルジアシルグリセロール(MGDG)、ジガラクトシルモノアシルグリセロール(DGMG)、またはモノガラクトシルモノアシルグリセロール(MGMG))、リン脂質(例えばホスファチジルコリン(PC)、ホスファチジルエタノールアミン(PE)またはホスファチジルグリセロール(PG))、リゾリン脂質(例えばPC、PE、またはPGのモノアシル型)、硫黄脂質(例えばスルホキノボシルジアシルグリセロール(SQDG))、ベタイン脂質、フランベースの脂質、またはそれらの酸化生成物、例えば、エポキシド基、ペルオキシド基、ケトン基もしくはヒドロキシル基などの少なくとも1つの酸化された基を含有する上述のすべての極性脂質。
本発明の乳化剤抽出物は、極性脂質ではない他の油または脂質を含んでもよい。極性脂質および非極性脂質は、ここでは「油画分」と呼ぶ。
本発明の乳化剤抽出物は、極性脂質ではない他の油または脂質を含んでもよい。極性脂質および非極性脂質は、ここでは「油画分」と呼ぶ。
上述の本発明の乳化剤抽出物(粗抽出物または精製抽出物)の特定の態様において、極性脂質相は、油画分の総重量に基づき、少なくとも5wt%のガラクトシルアシルグリセロールを、別の態様では少なくとも8wt%、例えば少なくとも10wt%、少なくとも11wt%、少なくとも12wt%、少なくとも20%、または少なくとも30%のガラクトシルアシルグリセロールを含む。
上述の本発明の乳化剤抽出物(粗抽出物または精製抽出物)の特定の態様において、極性脂質相は、極性脂質画分の総重量に基づき、少なくとも5wt%のガラクトシルアシルグリセロールを、別の態様では少なくとも8wt%、例えば少なくとも10wt%、少なくとも11wt%、少なくとも12wt%、少なくとも20%、または少なくとも30%のガラクトシルアシルグリセロールを含む。
上述の本発明の乳化剤抽出物(粗抽出物または精製抽出物)の特定の態様において、極性脂質相は、極性脂質画分の総重量に基づき、少なくとも5wt%のガラクトシルアシルグリセロールを、別の態様では少なくとも8wt%、例えば少なくとも10wt%、少なくとも11wt%、少なくとも12wt%、少なくとも20%、または少なくとも30%のガラクトシルアシルグリセロールを含む。
上述の本発明の乳化剤抽出物(粗抽出物または精製抽出物)の特定の態様において、極性脂質相は、油画分の総重量に基づき、少なくとも5wt%の硫黄脂質(例えばスルホキノボシルジアシルグリセロール(SQDG))を、別の態様では少なくとも8wt%、例えば少なくとも10wt%、少なくとも11wt%、少なくとも12wt%、少なくとも20%、または少なくとも30%の硫黄脂質(例えばスルホキノボシルジアシルグリセロール(SQDG))を含む。
上述の本発明の乳化剤抽出物(粗抽出物または精製抽出物)の特定の態様において、極性脂質相は、極性脂質画分の総重量に基づき、少なくとも5wt%の硫黄脂質(例えばスルホキノボシルジアシルグリセロール(SQDG))を、別の態様では少なくとも少なくとも8wt%、例えば少なくとも10wt%、少なくとも11wt%、少なくとも12wt%、少なくとも20%、または少なくとも30%の硫黄脂質(例えばスルホキノボシルジアシルグリセロール(SQDG))を含む。
上述の本発明の乳化剤抽出物(粗抽出物または精製抽出物)の特定の態様において、極性脂質相は、極性脂質画分の総重量に基づき、少なくとも5wt%の硫黄脂質(例えばスルホキノボシルジアシルグリセロール(SQDG))を、別の態様では少なくとも少なくとも8wt%、例えば少なくとも10wt%、少なくとも11wt%、少なくとも12wt%、少なくとも20%、または少なくとも30%の硫黄脂質(例えばスルホキノボシルジアシルグリセロール(SQDG))を含む。
上述の本発明の乳化剤抽出物(粗抽出物または精製抽出物)の特定の態様において、極性脂質相は、油画分の総重量に基づき、少なくとも5wt%のリン脂質(例えばホスファチジルコリン(PC)、ホスファチジルエタノールアミン(PE)またはホスファチジルグリセロール(PG))および/またはリゾリン脂質(PC、PE、またはPGのモノアシル型)を、例えば少なくとも8wt%、少なくとも10wt%、少なくとも11wt%、少なくとも12wt%、少なくとも20%、または少なくとも30%のリン脂質(例えばホスファチジルコリン(PC)、ホスファチジルエタノールアミン(PE)またはホスファチジルグリセロール(PG))および/またはリゾリン脂質(PC、PE、またはPGのモノアシル型)を含む。
特定の態様において、極性脂質画分に含まれるガラクトシルアシルグリセロールとしては、以下の少なくとも1つが挙げられる:モノガラクトシルジアシルグリセロールおよび/またはジアシルガラクトシルジアシルグリセロールおよび/またはジガラクトシルモノアシルグリセロールおよび/またはモノガラクトシルモノアシルグリセロール。
特定の態様において、極性脂質画分に含まれるガラクトシルアシルグリセロールとしては、以下の少なくとも1つが挙げられる:モノガラクトシルジアシルグリセロールおよび/またはジアシルガラクトシルジアシルグリセロールおよび/またはジガラクトシルモノアシルグリセロールおよび/またはモノガラクトシルモノアシルグリセロール。
すでに前述したように、本発明者らは驚くべきことに、高い乳化特性を有する抽出物を、非常に多様な範囲の微細および大型藻類、光合成細菌、または植物の光合成器官および組織から、特定の溶媒を使用して得ることができることを見出した。
本発明者らは驚くべきことに、本発明の抽出物が、非常に高い乳化特性を、例えば最先端の標準的な天然乳化剤(オートムギ油または極性脂質に富むオートムギ抽出物)よりも2倍または3倍優れた乳化特性を有することを見出した。
したがって本発明はまた、本発明の少なくとも1つの抽出物(本発明の粗抽出物および/または本発明の極性脂質に富む精製抽出物)の、乳化剤としての使用にも関する。
本発明者らは驚くべきことに、本発明の抽出物が、非常に高い乳化特性を、例えば最先端の標準的な天然乳化剤(オートムギ油または極性脂質に富むオートムギ抽出物)よりも2倍または3倍優れた乳化特性を有することを見出した。
したがって本発明はまた、本発明の少なくとも1つの抽出物(本発明の粗抽出物および/または本発明の極性脂質に富む精製抽出物)の、乳化剤としての使用にも関する。
本発明は、本明細書に記載の、植物の光合成部分(葉または茎など)から得られるかまたは取得可能な1つ以上の抽出物および/または植物の光合成部分(葉または茎など)から得られるかまたは取得可能な極性脂質に富む1つ以上の精製抽出物の、乳化剤としての使用に関する。
一態様において、前記植物の光合成部分は、葉および/または茎であり得る。
本発明は、限定することなく以下を含む植物のグリーン部分から得られるかまたは取得可能な、本発明の1つ以上の植物のグリーン部分の使用にも関する:ブロッコリーラーブ、ブロッコリー、レッドラディッシュ、ガラナ、ローズマリー、セージ、タイム、ミント、バジル、エゴマ、アジョワン、アンゼリカ、アニス、アサフェティダ、キャラウェイ、ニンジン、セロリ、チャービル、コリアンダー、クミン、ディル、フェンネル、ラベージ、シャク、パセリ、パースニップ、シーホリー(sea holly)、シルフィウム(silphium oregano)、レタス、アルファルファフェヌグリーク(Trigonella foenum-graecum)、レンズマメ(Lens culinaris)、ルピナス(Lupinus属)、エンドウマメ(Pisum sativum)、ニンニク、ワケギ、ニラネギ、チャイブ、ラッキョウ、タマネギ、グリーンオニオン、ビートの根、ホウレンソウ、パセリ、イエルバ・マテ、茶、エンダイブ、クレソン、イラクサ、ニンジン、およびそれらの混合物が挙げられ、および任意に溶媒は、アルコールまたはアルコールと水の混合物から、例えばエタノール100%またはエタノール:水(70:30、80:20または90:10)から選択され、および任意に脂質含有としては、少なくとも5%、例えば少なくとも10%の極性脂質である。
一態様において、前記植物の光合成部分は、葉および/または茎であり得る。
本発明は、限定することなく以下を含む植物のグリーン部分から得られるかまたは取得可能な、本発明の1つ以上の植物のグリーン部分の使用にも関する:ブロッコリーラーブ、ブロッコリー、レッドラディッシュ、ガラナ、ローズマリー、セージ、タイム、ミント、バジル、エゴマ、アジョワン、アンゼリカ、アニス、アサフェティダ、キャラウェイ、ニンジン、セロリ、チャービル、コリアンダー、クミン、ディル、フェンネル、ラベージ、シャク、パセリ、パースニップ、シーホリー(sea holly)、シルフィウム(silphium oregano)、レタス、アルファルファフェヌグリーク(Trigonella foenum-graecum)、レンズマメ(Lens culinaris)、ルピナス(Lupinus属)、エンドウマメ(Pisum sativum)、ニンニク、ワケギ、ニラネギ、チャイブ、ラッキョウ、タマネギ、グリーンオニオン、ビートの根、ホウレンソウ、パセリ、イエルバ・マテ、茶、エンダイブ、クレソン、イラクサ、ニンジン、およびそれらの混合物が挙げられ、および任意に溶媒は、アルコールまたはアルコールと水の混合物から、例えばエタノール100%またはエタノール:水(70:30、80:20または90:10)から選択され、および任意に脂質含有としては、少なくとも5%、例えば少なくとも10%の極性脂質である。
ある態様において、抽出物は、スプリングオニオンのグリーン部分から得られるかまたは取得可能な抽出物であり、100%エタノールを用いて抽出される。
ある態様において、抽出物は、アルファルファから、溶媒としてエタノール:水(例えば80:20または90:10のエタノール:水)を用いて得られるかまたは取得可能な抽出物である。ある態様において、アルファルファ抽出物はサポニンも含む。ある態様において、アルファルファ抽出物は、少なくとも10%の極性脂質、例えば少なくとも15%w/w、例えば18%を含み、任意に、少なくとも15%w/wのサポニン、例えば少なくとも20%のサポニンを含む。
本発明はまた、スプリングオニオンのグリーン部分から得られるかまたは取得可能な抽出物(例えば粗抽出物および/または精製抽出物)の、乳化剤としての使用に関し、任意にこれは100%エタノールを用いて抽出される。
ある態様において、抽出物は、アルファルファから、溶媒としてエタノール:水(例えば80:20または90:10のエタノール:水)を用いて得られるかまたは取得可能な抽出物である。ある態様において、アルファルファ抽出物はサポニンも含む。ある態様において、アルファルファ抽出物は、少なくとも10%の極性脂質、例えば少なくとも15%w/w、例えば18%を含み、任意に、少なくとも15%w/wのサポニン、例えば少なくとも20%のサポニンを含む。
本発明はまた、スプリングオニオンのグリーン部分から得られるかまたは取得可能な抽出物(例えば粗抽出物および/または精製抽出物)の、乳化剤としての使用に関し、任意にこれは100%エタノールを用いて抽出される。
本発明は、アルファルファから、任意にエタノール100%またはエタノール-水(例えば80:20または90:10のエタノール:水)を溶媒として用いて得られるかまたは取得可能な抽出物(例えば粗抽出物および/または精製抽出物)の、乳化剤としての使用にも関する。ある態様において、アルファルファ抽出物はサポニンも含む。
本発明はまた、ブロッコリーラーブのグリーン部分、グリーンピースのさや、ローズマリー、セロリ、ニンジン、パセリ、ラディッシュの葉、および/または紅茶の葉から得られるかまたは取得可能な抽出物の、乳化剤としての使用にも関し、任意にこれは、エタノール100%またはエタノール-水(例えば90:10または80:20)を溶媒として用いて抽出される。
本発明は、ホウレンソウから得られるかまたは取得可能な抽出物(例えばホウレンソウ粗抽出物および/またはホウレンソウ精製抽出物)の、乳化剤としての使用に関する。ある態様において、ホウレンソウ抽出物(粗抽出物または精製抽出物)は、葉および/または茎から、酢酸エチル、イソプロパノール、アセトンまたはヒドロアセトン、クロロホルム:メタノール(2:1など)、メタノール、および/またはエタノールまたはヒドロエタノールまたはそれらの混合物を抽出溶媒として用いて、得られるかまたは取得可能である。ある態様において、本発明のホウレンソウ抽出物(粗製または精製)は、極性脂質に富む。
本発明はまた、ブロッコリーラーブのグリーン部分、グリーンピースのさや、ローズマリー、セロリ、ニンジン、パセリ、ラディッシュの葉、および/または紅茶の葉から得られるかまたは取得可能な抽出物の、乳化剤としての使用にも関し、任意にこれは、エタノール100%またはエタノール-水(例えば90:10または80:20)を溶媒として用いて抽出される。
本発明は、ホウレンソウから得られるかまたは取得可能な抽出物(例えばホウレンソウ粗抽出物および/またはホウレンソウ精製抽出物)の、乳化剤としての使用に関する。ある態様において、ホウレンソウ抽出物(粗抽出物または精製抽出物)は、葉および/または茎から、酢酸エチル、イソプロパノール、アセトンまたはヒドロアセトン、クロロホルム:メタノール(2:1など)、メタノール、および/またはエタノールまたはヒドロエタノールまたはそれらの混合物を抽出溶媒として用いて、得られるかまたは取得可能である。ある態様において、本発明のホウレンソウ抽出物(粗製または精製)は、極性脂質に富む。
本発明はまた、極性脂質に富む、1つ以上の微細藻類粗抽出物および/または1つ以上の微細藻類精製抽出物の、乳化剤としての使用にも関する。
一態様において、微細藻類抽出物は、限定することなく以下を含む微細藻類から得られるかまたは取得可能である:クロレラ(例えばChlorella vulgaris、Chlorella sorokiniana、Chlorella zofingensis)、Chysophyceae、Xantophyceae、Baccilariophyceae、Dinophyceae、Rodophyceae、Phaeophyceae、Chlorophyceae、Prasinophyceae、Cryptophyceae、Crypthecodinium、Cylindrothec、Botrycoccus、ドナリエラ(例えばDunaliella salina)、Euglena gracilis、イソクリシス、テトラセルミス、ナンノクロロプシス、ネオクロリス、Nitzschia Scenedesmus、クロロボトリス、Eustigmatos、Phaeodactylum、Porphyridium、Pseudostaurastrum、Schizochytrium、テトラセルミス、Vischeria、Monodopsis、Ellipsoidion、Pseudocharaciopsisおよびそれらの組み合わせ。
一態様において、微細藻類抽出物は、限定することなく以下を含む微細藻類から得られるかまたは取得可能である:クロレラ(例えばChlorella vulgaris、Chlorella sorokiniana、Chlorella zofingensis)、Chysophyceae、Xantophyceae、Baccilariophyceae、Dinophyceae、Rodophyceae、Phaeophyceae、Chlorophyceae、Prasinophyceae、Cryptophyceae、Crypthecodinium、Cylindrothec、Botrycoccus、ドナリエラ(例えばDunaliella salina)、Euglena gracilis、イソクリシス、テトラセルミス、ナンノクロロプシス、ネオクロリス、Nitzschia Scenedesmus、クロロボトリス、Eustigmatos、Phaeodactylum、Porphyridium、Pseudostaurastrum、Schizochytrium、テトラセルミス、Vischeria、Monodopsis、Ellipsoidion、Pseudocharaciopsisおよびそれらの組み合わせ。
好ましい態様において、乳化剤は、極性脂質に富むクロレラ精製抽出物および/またはクロレラ粗抽出物である。一態様において、極性脂質に富むクロレラ精製抽出物および/または粗抽出物は、メチルテトラヒドロフラン、イソプロパノール、アセトンまたはヒドロアセトン、水、エタノールまたはヒドロエタノール(例えば90:10のエタノール:水)またはそれらの混合物を抽出溶媒として用いて、得られるかまたは取得可能である。本発明で使用し得るクロレラには、Chlorella vulgaris、Chlorella sorokinianaおよびChlorella zofingensisが含まれるが、これらに限定されない。
本発明は、クロレラから得られるかまたは取得可能な抽出物(例えばクロレラ粗抽出物および/またはクロレラ精製抽出物)の、乳化剤としての使用に関する。ある態様において、クロレラ抽出物(粗抽出物または精製抽出物)は、メチルテトラヒドロフラン、イソプロパノール、アセトンまたはヒドロアセトン、水、エタノールまたはヒドロエタノール(例えば90:10のエタノール:水)またはそれらの混合物を、抽出溶媒として用いて得られる。
本発明は、クロレラから得られるかまたは取得可能な抽出物(例えばクロレラ粗抽出物および/またはクロレラ精製抽出物)の、乳化剤としての使用に関する。ある態様において、クロレラ抽出物(粗抽出物または精製抽出物)は、メチルテトラヒドロフラン、イソプロパノール、アセトンまたはヒドロアセトン、水、エタノールまたはヒドロエタノール(例えば90:10のエタノール:水)またはそれらの混合物を、抽出溶媒として用いて得られる。
さらに記載されるのは、Chlorella vulgaris、Chlorella zofingensisおよび/またはChlorella sorokinianaからのクロレラ抽出物であって、エタノールまたはエタノールと水(例えば100%エタノール、90:10、80:20または70:30のEtOH:水)を溶媒として用いて得られるかまたは取得可能であり、任意に、極性脂質含有として少なくとも40%、例えば少なくとも50%、例えば少なくとも70%、少なくとも80%または少なくとも90%を有する前記抽出物の、乳化剤としての使用である。
さらに記載されるのは、テトラセルミス抽出物(粗製または精製)であって、エタノールまたはエタノールと水(例えば100%エタノール、80:10または90:10のEtOH:水)を溶媒として用いて得られるかまたは取得可能であり、任意に、極性脂質含有として少なくとも50%、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、例えば少なくとも80%、例えば少なくとも90%、例えば69%を有する前記抽出物の、乳化剤としての使用である。
さらに記載されるのは、ナンノクロロプシス抽出物(粗製または精製)であって、エタノールまたはエタノールと水(例えば100%エタノール、90:10、80:20または70:30のEtOH:水)を溶媒として用いて得られるかまたは取得可能であり、任意に、極性脂質含有として少なくとも20%、少なくとも50%、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、少なくとも80%または少なくとも90%を有する前記抽出物の、乳化剤としての使用である。
さらに記載されるのは、テトラセルミス抽出物(粗製または精製)であって、エタノールまたはエタノールと水(例えば100%エタノール、80:10または90:10のEtOH:水)を溶媒として用いて得られるかまたは取得可能であり、任意に、極性脂質含有として少なくとも50%、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、例えば少なくとも80%、例えば少なくとも90%、例えば69%を有する前記抽出物の、乳化剤としての使用である。
さらに記載されるのは、ナンノクロロプシス抽出物(粗製または精製)であって、エタノールまたはエタノールと水(例えば100%エタノール、90:10、80:20または70:30のEtOH:水)を溶媒として用いて得られるかまたは取得可能であり、任意に、極性脂質含有として少なくとも20%、少なくとも50%、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、少なくとも80%または少なくとも90%を有する前記抽出物の、乳化剤としての使用である。
さらに記載されるのは、ナンノクロロプシス抽出物(粗製または精製)であって、イソプロパノール、アセトンおよび/または酢酸エチルを溶媒として用いて得られるかまたは取得可能であり、任意に、極性脂質含有として少なくとも30%、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、例えば少なくとも80%を有する前記抽出物の、乳化剤としての使用である。
さらに記載されるのは、エタノール、エタノールと水(例えば100%エタノール、90:10、80:20または70:30のEtOH:水)、イソプロパノール、アセトン、MTHF、水および/または酢酸エチルを溶媒として用いて得られるかまたは取得可能であり、任意に、極性脂質含有として少なくとも20%、例えば少なくとも50%、例えば少なくとも70%、少なくとも80%または少なくとも90%を有するDunaliella salinaの、乳化剤としての使用である。
さらに記載されるのは、例えばChlorella vulgaris、Chlorella zofingensisおよび/またはChlorella sorokinianaからのクロレラ抽出物(粗製または精製)であって、イソプロパノール、アセトンおよび/または酢酸エチルを溶媒として用いて得られるかまたは取得可能であり、任意に、極性脂質含有として少なくとも30%、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、例えば少なくとも80%を有する前記抽出物の、乳化剤としての使用である。
さらに記載されるのは、エタノール、エタノールと水(例えば100%エタノール、90:10、80:20または70:30のEtOH:水)、イソプロパノール、アセトン、MTHF、水および/または酢酸エチルを溶媒として用いて得られるかまたは取得可能であり、任意に、極性脂質含有として少なくとも20%、例えば少なくとも50%、例えば少なくとも70%、少なくとも80%または少なくとも90%を有するDunaliella salinaの、乳化剤としての使用である。
さらに記載されるのは、例えばChlorella vulgaris、Chlorella zofingensisおよび/またはChlorella sorokinianaからのクロレラ抽出物(粗製または精製)であって、イソプロパノール、アセトンおよび/または酢酸エチルを溶媒として用いて得られるかまたは取得可能であり、任意に、極性脂質含有として少なくとも30%、例えば少なくとも60%、例えば少なくとも70%、例えば少なくとも80%を有する前記抽出物の、乳化剤としての使用である。
さらに記載されるのは、イソクリシス抽出物(粗製または精製)であって、エタノールまたはエタノールと水(例えば100%エタノール、90:10、80:20または70:30のEtOH:水)を溶媒として用いて得られるかまたは取得可能であり、任意に、極性脂質含有として少なくとも20%、例えば少なくとも50%、例えば少なくとも70%、少なくとも80%または少なくとも90%を有する前記抽出物の、乳化剤としての使用である。
さらに記載されるのは、イソクリシス抽出物(粗製または精製)であって、イソプロパノール、アセタートおよび/またはアセトンを溶媒として用いて得られるかまたは取得可能であり、任意に、極性脂質含有として少なくとも20%、例えば少なくとも50%、例えば少なくとも70%、少なくとも80%、または少なくとも90%を有する前記抽出物の、乳化剤としての使用である。
さらに記載されるのは、イソクリシス抽出物(粗製または精製)であって、イソプロパノール、アセタートおよび/またはアセトンを溶媒として用いて得られるかまたは取得可能であり、任意に、極性脂質含有として少なくとも20%、例えば少なくとも50%、例えば少なくとも70%、少なくとも80%、または少なくとも90%を有する前記抽出物の、乳化剤としての使用である。
本発明はまた、本発明の1つ以上の大型藻類粗抽出物および/または本発明の極性脂質に富む1つ以上の大型藻類精製抽出物の、乳化剤としての使用にも関する。一態様において、大型藻類は以下から選択される:Ascophyllum nodosum、Fucus serratu、F. vesiculosus、Himanthalia elongata、Undaria pinnatifida、Laminaria digitata、L. saccharina、L. japonica、Alaria esculenta、Palmaria palmata(ダルス)、Porphyra umbilicalis、P. tenera、P. yezoensis、P. dioica、P. purpurea、P. laciniata、P. leucostica、Chondrus crispus、Gracilaria verrucosa、Lithothamnium calcareum、Enteromorpha spp.、またはUlva spp.。好ましい態様において、乳化剤は、本発明のUlva sppおよび/またはAgarophyton chilensisの粗抽出物(単数または複数)、および/または極性脂質に富むUlva sppおよび/またはAgarophyton chilensisの精製抽出物(単数または複数)である。
さらに記載されるのは、メチルテトラヒドロフラン、イソプロパノール、エタノールまたはヒドロエタノール(例えば90:10エタノール:水)またはその混合物を抽出溶媒として用いて得られるかまたは取得可能な、Ulva sppおよび/またはAgarophyton chilensisの極性脂質に富む粗抽出物(単数または複数)または精製抽出物(単数または複数)の、乳化剤としての使用である。
さらに記載されるのは、メチルテトラヒドロフラン、イソプロパノール、エタノールまたはヒドロエタノール(例えば90:10エタノール:水)またはその混合物を抽出溶媒として用いて得られるかまたは取得可能な、Ulva sppおよび/またはAgarophyton chilensisの極性脂質に富む粗抽出物(単数または複数)または精製抽出物(単数または複数)の、乳化剤としての使用である。
本発明はまた、本明細書に記載の、極性脂質に富む、1つ以上の光合成細菌粗抽出物(または本発明の光合成細菌粗抽出物)および/または1つ以上の光合成細菌精製抽出物(または本発明の光合成細菌精製抽出物)の、乳化剤としての使用にも関する。光合成細菌は、スピルリナおよび/またはAphanizomenon flosaquaeであり得る。
好ましい態様において、乳化剤は、スピルリナの極性脂質に富む粗抽出物および/または精製抽出物である。一態様において、極性脂質に富むスピルリナ抽出物またはスピルリナ精製抽出物は、メチルテトラヒドロフラン、イソプロパノール、エタノールまたはヒドロエタノール(例えば90:10のエタノールと水)またはそれらの混合物を、抽出溶媒として用いて得られる。
さらに記載されるのは、極性脂質に富むスピルリナ粗抽出物および/またはスピルリナ精製抽出物の乳化剤としての使用であり、該抽出物は、メチルテトラヒドロフラン、アセトン、ヘキサン、イソプロパノール、エタノール100%および/またはヒドロエタノール(例えば60:40、70:30、80:20、90:10のエタノール-水)を抽出溶媒として用いて得られるかまたは取得可能であり、および任意に、少なくとも5%の極性脂質、例えば少なくとも10%、少なくとも20%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも60%、少なくとも70%、例えば少なくとも90%の極性脂質を有する。
好ましい態様において、乳化剤は、スピルリナの極性脂質に富む粗抽出物および/または精製抽出物である。一態様において、極性脂質に富むスピルリナ抽出物またはスピルリナ精製抽出物は、メチルテトラヒドロフラン、イソプロパノール、エタノールまたはヒドロエタノール(例えば90:10のエタノールと水)またはそれらの混合物を、抽出溶媒として用いて得られる。
さらに記載されるのは、極性脂質に富むスピルリナ粗抽出物および/またはスピルリナ精製抽出物の乳化剤としての使用であり、該抽出物は、メチルテトラヒドロフラン、アセトン、ヘキサン、イソプロパノール、エタノール100%および/またはヒドロエタノール(例えば60:40、70:30、80:20、90:10のエタノール-水)を抽出溶媒として用いて得られるかまたは取得可能であり、および任意に、少なくとも5%の極性脂質、例えば少なくとも10%、少なくとも20%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも60%、少なくとも70%、例えば少なくとも90%の極性脂質を有する。
上述の本発明の精製抽出物の特定の態様において、極性脂質相は、抽出物の総重量に基づき、ガラクトシルアシルグリセロールを少なくとも5wt%、別の態様においては少なくとも8wt%、例えば少なくとも10wt%、少なくとも11wt%、少なくとも12wt%、少なくとも15wt%、少なくとも20wt%、少なくとも25wt%、少なくとも30wt%、少なくとも40wt%、少なくとも50wt%、少なくとも60wt%、少なくとも70wt%、または少なくとも80wt%含む。
特定の態様において、極性油画分に含まれるガラクトシルアシルグリセロールとしては、以下の少なくとも1つが挙げられる:モノガラクトシルジアシルグリセロールおよび/またはジアシルガラクトシルジアシルグリセロールおよび/またはジガラクトシルモノアシルグリセロールおよび/またはモノガラクトシルモノアシルグリセロール。
従来の乳化剤としては、例えば、とりわけ糖エステル、ポリグリセロール脂肪酸エステル、ポリグリセロールポリリシノレート(PGPR)、ポリソルベート(ポリオキシエチレンソルビタンエステル)、モノグリセリド/ジグリセリドおよびそれらの誘導体、ステアロイル乳酸ナトリウム(SSL)、リン脂質、グリセロールモノオレアートなどが挙げられる。
特定の態様において、極性油画分に含まれるガラクトシルアシルグリセロールとしては、以下の少なくとも1つが挙げられる:モノガラクトシルジアシルグリセロールおよび/またはジアシルガラクトシルジアシルグリセロールおよび/またはジガラクトシルモノアシルグリセロールおよび/またはモノガラクトシルモノアシルグリセロール。
従来の乳化剤としては、例えば、とりわけ糖エステル、ポリグリセロール脂肪酸エステル、ポリグリセロールポリリシノレート(PGPR)、ポリソルベート(ポリオキシエチレンソルビタンエステル)、モノグリセリド/ジグリセリドおよびそれらの誘導体、ステアロイル乳酸ナトリウム(SSL)、リン脂質、グリセロールモノオレアートなどが挙げられる。
有利には、本発明は、前述のような植物の光合成部分(例えばホウレンソウの葉または茎)、大型藻類、微細藻類および/または光合成細菌から得られるかまたは取得可能な本発明の1つ以上の粗抽出物(例えば極性脂質に富む粗抽出物)および/または本発明の1つ以上の精製抽出物(例えば極性脂質に富む精製抽出物)を使用して、エマルションを安定化させる。例えば、本発明のアルファルファ精製抽出物を本発明のホウレンソウ精製抽出物と組み合わせて、エマルションを安定化させることができる。
したがって本発明は、前述したような植物の光合成部分(例えば本発明のホウレンソウまたはアルファルファの葉または茎の抽出物)、大型藻類(例えば本発明のUlva spp抽出物)、微細藻類(例えば本発明のナンノクロロプシス、テトラセルミス、イソクリシス、Chlorella sorokiniana、Chlorella vulgarisおよび/またはDunaliella salinaの抽出物)、および/または光合成細菌(例えばスピルリナ)から得られるかまたは取得可能な、本発明の1つ以上の粗抽出物(極性脂質に富む粗抽出物など)および/または本発明の1つ以上の精製抽出物(極性脂質に富む精製抽出物など)を含む、本発明の「乳化系」または乳化系に関する。
したがって本発明は、「本発明の乳化系」の、エマルションを安定化するための使用に関する。
したがって本発明は、前述したような植物の光合成部分(例えば本発明のホウレンソウまたはアルファルファの葉または茎の抽出物)、大型藻類(例えば本発明のUlva spp抽出物)、微細藻類(例えば本発明のナンノクロロプシス、テトラセルミス、イソクリシス、Chlorella sorokiniana、Chlorella vulgarisおよび/またはDunaliella salinaの抽出物)、および/または光合成細菌(例えばスピルリナ)から得られるかまたは取得可能な、本発明の1つ以上の粗抽出物(極性脂質に富む粗抽出物など)および/または本発明の1つ以上の精製抽出物(極性脂質に富む精製抽出物など)を含む、本発明の「乳化系」または乳化系に関する。
したがって本発明は、「本発明の乳化系」の、エマルションを安定化するための使用に関する。
ある側面において、本発明は、本明細書に記載の「本発明の乳化系」を含むエマルションに関する。
本発明はまた、ヒトまたは動物用の食品または飲料製品、栄養補助食品、ニュートラシューティカル製剤、フレグランスまたはフレーバー剤、医薬または獣医学用製剤、ワイン醸造学または化粧品製剤において乳化剤として使用するための、「本発明の乳化系」も提供する。
ある側面において、本発明は、前述の粗抽出物または精製抽出物などの本発明の少なくとも1つの抽出物を含む、エマルションに関する。
好ましい態様において、エマルションは、かかる従来の乳化剤または安定剤の添加を必要としない。
好ましい態様において、エマルションを安定化するために使用される本発明の抽出物(粗製または精製)は、極性脂質を含む。より好ましい態様において、本発明の抽出物は極性脂質が豊富である。
本発明はまた、ヒトまたは動物用の食品または飲料製品、栄養補助食品、ニュートラシューティカル製剤、フレグランスまたはフレーバー剤、医薬または獣医学用製剤、ワイン醸造学または化粧品製剤において乳化剤として使用するための、「本発明の乳化系」も提供する。
ある側面において、本発明は、前述の粗抽出物または精製抽出物などの本発明の少なくとも1つの抽出物を含む、エマルションに関する。
好ましい態様において、エマルションは、かかる従来の乳化剤または安定剤の添加を必要としない。
好ましい態様において、エマルションを安定化するために使用される本発明の抽出物(粗製または精製)は、極性脂質を含む。より好ましい態様において、本発明の抽出物は極性脂質が豊富である。
本発明の抽出物に関連して前述したすべての異なる態様および変形は、本発明のエマルションにも適用される。
さらに記載されるのは、前述のような、植物の光合成部分(例えばホウレンソウおよび/またはアルファルファの葉または茎)、大型藻類、微細藻類および/または光合成細菌から得られるかまたは取得可能な本発明の少なくとも1つの抽出物を含む、本発明のエマルションである。
好ましい態様において、本発明のエマルションは、約2~10、例えば3~9、3~8、3~7、3~6、3~5、4~6、4~7、または5~10などのpHで、安定である。
ある態様において、本発明のエマルションは、約2~10、例えば3~9、3~8、3~7、3~6、3~5、4~6、4~7、または5~10などのpHで、安定である。
さらに記載されるのは、前述のような、植物の光合成部分(例えばホウレンソウおよび/またはアルファルファの葉または茎)、大型藻類、微細藻類および/または光合成細菌から得られるかまたは取得可能な本発明の少なくとも1つの抽出物を含む、本発明のエマルションである。
好ましい態様において、本発明のエマルションは、約2~10、例えば3~9、3~8、3~7、3~6、3~5、4~6、4~7、または5~10などのpHで、安定である。
ある態様において、本発明のエマルションは、約2~10、例えば3~9、3~8、3~7、3~6、3~5、4~6、4~7、または5~10などのpHで、安定である。
ある態様において、本発明の少なくとも1つの抽出物または「本発明の乳化系」で安定化されたエマルションは、油中水型エマルションまたは水中油型エマルションである。
本明細書において、用語「脂質相」とは、油もしくは脂肪と混和するか、または油もしくは脂肪に溶解する能力を有する、任意の固体および/または液体成分が含まれると理解され、「水相」とは、水に溶けるかもしくは混和するか、または水に溶解する能力を有する、任意の固体および/または液体成分が含まれると理解される。
本発明の粗抽出物および/または本発明による極性脂質に富む精製抽出物で安定化されたエマルションは、エマルションの調製のための従来の方法に従って、調製することができる。
本明細書において、用語「脂質相」とは、油もしくは脂肪と混和するか、または油もしくは脂肪に溶解する能力を有する、任意の固体および/または液体成分が含まれると理解され、「水相」とは、水に溶けるかもしくは混和するか、または水に溶解する能力を有する、任意の固体および/または液体成分が含まれると理解される。
本発明の粗抽出物および/または本発明による極性脂質に富む精製抽出物で安定化されたエマルションは、エマルションの調製のための従来の方法に従って、調製することができる。
例示的な方法によれば、本発明のエマルションは、以下を含むプロセスによって調製され得る:
(a)水相の成分を混合すること;
(b)脂質相の成分を混合すること;
(c)本発明の1つ以上の抽出物(例えば本発明の1つ以上の粗抽出物および/または本発明による極性脂質に富む1つ以上の精製抽出物)を、水相または脂質相の一方または両方に分散させること;
(d)2つの相を均質化してエマルションを形成すること。
(a)水相の成分を混合すること;
(b)脂質相の成分を混合すること;
(c)本発明の1つ以上の抽出物(例えば本発明の1つ以上の粗抽出物および/または本発明による極性脂質に富む1つ以上の精製抽出物)を、水相または脂質相の一方または両方に分散させること;
(d)2つの相を均質化してエマルションを形成すること。
例示的な方法によれば、いくつかの態様において、エマルションまたはエマルションの形態の食品製品を調製するプロセスは、以下のステップを含む:
(a)水相の成分を混合すること;
(b)脂質相の成分を混合すること;
(c)本発明の1つ以上の抽出物(例えば本発明の1つ以上の粗抽出物および/または本発明による極性脂質に富む1つ以上の精製抽出物)を、水相または脂質相の一方または両方に分散させること;
(d)2つの相を均質化してエマルションを形成すること。
(a)水相の成分を混合すること;
(b)脂質相の成分を混合すること;
(c)本発明の1つ以上の抽出物(例えば本発明の1つ以上の粗抽出物および/または本発明による極性脂質に富む1つ以上の精製抽出物)を、水相または脂質相の一方または両方に分散させること;
(d)2つの相を均質化してエマルションを形成すること。
別の態様において、本発明は、以下を含むプロセスによって調製されるエマルションに関する:
(a)水相の成分を混合すること;
(b)脂質相の成分を混合すること;
(c)本発明の1つ以上の抽出物(例えば本発明の1つ以上の粗抽出物および/または本発明による極性脂質に富む1つ以上の精製抽出物)を、水相または脂質相の一方または両方に分散させること;および
(d)2つの相を均質化してエマルションを形成すること。
(a)水相の成分を混合すること;
(b)脂質相の成分を混合すること;
(c)本発明の1つ以上の抽出物(例えば本発明の1つ以上の粗抽出物および/または本発明による極性脂質に富む1つ以上の精製抽出物)を、水相または脂質相の一方または両方に分散させること;および
(d)2つの相を均質化してエマルションを形成すること。
ある態様において、水中油型エマルションの調製のために、本発明の粗抽出物および/または本発明による極性脂質を含む精製抽出物(例えば極性脂質に富む精製抽出物)を水相に分散させ、油/脂肪相を水相に加え、かきまぜて(agitation)エマルションを形成する。他の態様において、油中水型エマルションの調製のために、本発明の粗抽出物および/または本発明による極性脂質を含む精製抽出物(例えば極性脂質に富む精製抽出物)を油/脂肪相に分散させ、水相を油/脂肪相に加え、かきまぜてエマルションを形成する。
均質化は、エマルション形成のためのかきまぜを提供するために、便利に使用される;しかしながら他の従来の技術も企図され、例えば高せん断、ビーズまたはボールミルなどのコロイドミル、高圧均質化、混合容器装置、超音波、限外濾過または精密濾過等の膜などである。
均質化は、エマルション形成のためのかきまぜを提供するために、便利に使用される;しかしながら他の従来の技術も企図され、例えば高せん断、ビーズまたはボールミルなどのコロイドミル、高圧均質化、混合容器装置、超音波、限外濾過または精密濾過等の膜などである。
本発明者らは驚くべきことに、粗抽出物および/または本発明による極性脂質に富む精製抽出物(単数または複数)を用いて得られる本発明のエマルションが、非常に広い範囲のpH条件で非常に安定であることを見出した。したがって、さらなる態様において、本発明の粗抽出物および/または本発明による極性脂質に富む精製抽出物は、約2~10の、例えば3~9、3~8、3~7、3~6、3~5、4~6、4~7、または5~10のpHで、乳化剤または乳化系として使用することができる。
ある態様において、本発明のエマルションは、約2~10、例えば3~9、3~8、3~7、3~6、3~5、4~6、4~7または5~10のpHを有する。
本発明者らは驚くべきことに、本発明の粗抽出物および/または本発明による極性脂質に富む精製抽出物を用いて得られる本発明のエマルションが、経時的に非常に安定であり、非常に小さい液滴サイズを有することを見出した。液滴サイズは、本出願の実施例に記載のように、または当技術分野で知られている任意の他の方法を使用して、測定することができる。
ある態様において、本発明のエマルションは、約2~10、例えば3~9、3~8、3~7、3~6、3~5、4~6、4~7または5~10のpHを有する。
本発明者らは驚くべきことに、本発明の粗抽出物および/または本発明による極性脂質に富む精製抽出物を用いて得られる本発明のエマルションが、経時的に非常に安定であり、非常に小さい液滴サイズを有することを見出した。液滴サイズは、本出願の実施例に記載のように、または当技術分野で知られている任意の他の方法を使用して、測定することができる。
ある態様において、エマルションの液滴サイズ(DV98)は、好ましくは0.05~50μmの間、より好ましくは0.5~10μmの間、さらにより好ましくは0.5~2μmの間に含まれる。液滴サイズは安定のままであり、すなわち、周囲温度(25℃)での少なくとも1日の保存について、かかる範囲内に留まる。別の態様において、液滴サイズは、周囲温度での少なくとも4日、少なくとも5、少なくとも6、少なくとも7、少なくとも8、9、10、15、または少なくとも20日間の保存について、前記範囲内に留まる。
一態様において、乳化剤または乳化系は、酢酸エチル、イソプロパノール、エタノール:水(90:10など)、エタノール、アセトン、メタノール、アセトン:水(90:10など)、および/またはアセトン:水(80:20など)を用いて得られるかまたは取得可能な、本発明の1つ以上のホウレンソウ抽出物(例えば極性脂質に富む粗抽出物(単数または複数)またはホウレンソウ精製抽出物)を含むか、またはそれらからなる。好ましい態様において、エマルションの液滴サイズは、好ましくは0.05~50μmの間、例えば0.5~2μmの間に含まれる。一態様において、得られるエマルションのpHは2~10、例えば3~5、例えば3.5である。
一態様において、乳化剤または乳化系は、酢酸エチル、イソプロパノール、エタノール:水(90:10など)、エタノール、アセトン、メタノール、アセトン:水(90:10など)、および/またはアセトン:水(80:20など)を用いて得られるかまたは取得可能な、本発明の1つ以上のホウレンソウ抽出物(例えば極性脂質に富む粗抽出物(単数または複数)またはホウレンソウ精製抽出物)を含むか、またはそれらからなる。好ましい態様において、エマルションの液滴サイズは、好ましくは0.05~50μmの間、例えば0.5~2μmの間に含まれる。一態様において、得られるエマルションのpHは2~10、例えば3~5、例えば3.5である。
一態様において、乳化剤または乳化系は、エタノール:水(60:40など)、メチルテトラヒドロフラン、エタノール、酢酸エチル、ヘキサン、イソプロパノール、メタノール、アセトン:水(80:20など)、アセトン、エタノール:水(90:10など)、アセトン:水(90:10など)、および/またはエタノールを用いて得られるかまたは取得可能な、1つ以上の、極性脂質に富むホウレンソウ粗抽出物および/またはホウレンソウ精製抽出物を、含むか、またはそれらからなる。好ましい態様において、得られるエマルションの液滴サイズは、好ましくは0.05~50μmの間、例えば0.5~2μmの間に含まれる。一態様において、エマルションのpHは2~10、例えば5~8、例えば7である。
一態様において、乳化剤または乳化系は、メチルテトラヒドロフラン、エタノール、エタノール:水(90:10など)および/またはイソプロパノールを用いて得られるかまたは取得可能な、1つ以上の、極性脂質に富むスピルリナ粗抽出物および/またはスピルリナ精製抽出物を、含むか、またはそれらからなる。好ましい態様において、得られるエマルションの液滴サイズは、好ましくは0.05~50μmの間、例えば0.5~3.5μmの間に含まれ、例えば1.5μmである。一態様において、エマルションのpHは2~10、例えば3~5、例えば3.5である。
一態様において、乳化剤または乳化系は、メチルテトラヒドロフラン、エタノール:水(90:10など)、エタノールおよび/またはイソプロパノールを用いて得られるかまたは取得可能な、1つ以上の、極性脂質に富むスピルリナ粗抽出物および/またはスピルリナ精製抽出物を、含むか、またはそれらからなる。好ましい態様において、得られるエマルションの液滴サイズは、好ましくは0.05~50μmの間、例えば1~3.5μmの間に含まれる。一態様において、エマルションのpHは2~10、例えば5~8、例えば7である。
一態様において、乳化剤または乳化系は、メチルテトラヒドロフラン、エタノール:水(90:10など)、エタノールおよび/またはイソプロパノールを用いて得られるかまたは取得可能な、1つ以上の、極性脂質に富むスピルリナ粗抽出物および/またはスピルリナ精製抽出物を、含むか、またはそれらからなる。好ましい態様において、得られるエマルションの液滴サイズは、好ましくは0.05~50μmの間、例えば1~3.5μmの間に含まれる。一態様において、エマルションのpHは2~10、例えば5~8、例えば7である。
一態様において、本発明の乳化剤、乳化剤系またはエマルションは、以下の1つ以上を含むかまたはそれらからなり:ホウレンソウ抽出物(例えば粗抽出物および/または精製抽出物)、アルファルファ抽出物(例えば粗抽出物および/または精製抽出物)、スプリングオニオンのグリーン部分の抽出物(例えば粗抽出物および/または精製抽出物)、Dunaliella salina抽出物(例えば粗抽出物および/または精製抽出物)、Chlorella vulgaris抽出物(例えば粗抽出物および/または精製抽出物)、Chlorella zofingensis抽出物(例えば粗抽出物および/または精製抽出物)、Chlorella sorokiniana(例えば粗抽出物および/または精製抽出物)、イソクリシス抽出物(例えば粗抽出物および/または精製抽出物)、ナンノクロロプシス抽出物(例えば粗抽出物および/または精製抽出物)、テトラセルミス抽出物(例えば粗抽出物および/または精製抽出物)、Ulva spp抽出物(例えば粗抽出物および/または精製抽出物);これらは任意に極性脂質に富み、100%エタノールおよび/またはエタノール:水(例えば90:10、80:20、70:30のEtOHと水)を用いて得られるかまたは取得可能である。好ましい態様において、得られるエマルションの液滴サイズは、好ましくは0.05~50μmの間、例えば0.5~3.5μmの間に含まれる。一態様において、エマルションのpHは2~10、例えば5~8、または例えば3~5である。
本発明の好ましい側面において、本発明の極性脂質に富む粗抽出物および/または精製抽出物または乳化系は、エマルションの全重量に対して、0.05%~20重量%で、例えば0.1~10重量%、より好ましくは0.3~5重量%、1~3重量%で使用される。
本発明はまた、ヒトまたは動物用の食品または飲料製品、栄養補助食品、ニュートラシューティカル製剤、フレグランスまたはフレーバー剤、医薬または獣医学用製剤、ワイン醸造学または化粧品製剤における乳化剤として使用するための、本発明の1つ以上の粗抽出物および/または本発明による極性脂質に富む1つ以上の精製抽出物も提供する。
本発明はまた、ヒトまたは動物用の食品または飲料製品、栄養補助食品、ニュートラシューティカル製剤、フレグランスまたはフレーバー剤、医薬または獣医学用製剤、ワイン醸造学または化粧品製剤における乳化剤として使用するための、本発明の1つ以上の粗抽出物および/または本発明による極性脂質に富む1つ以上の精製抽出物も提供する。
食品には、食品医薬品局(FDA)によって定義されている、次の一般的な食品カテゴリーが含まれる:オーブンで焼いた食品およびベーキングミックス類、これは、すべてのすぐ食べられる製品およびすぐ焼ける製品、小麦粉、およびサービング前に準備が必要なミックスを含む;アルコール飲料類、これは麦芽飲料、ワイン、蒸留酒、およびカクテルミックスを含む;ノンアルコールの飲料および飲料ベース類、これは次のもののみを含む:スペシャルティーまたはスパイスティー、ソフトドリンク、コーヒー代替品、ならびにフルーツおよび野菜フレーバーのゼラチンドリンク;朝食用シリアル類、これはすぐ食べられる、ならびにインスタントおよび通常のホットシリアルを含む;チーズ類、これはカードおよびホエーチーズ、クリームチーズ、ナチュラルチーズ、おろしチーズ、プロセスチーズ、チーズスプレッド、チーズディップ、その他のチーズを含む;すべての形態を含むチューインガム;コーヒーおよび茶、これはレギュラー、カフェイン抜き、インスタントタイプを含む;調味料および薬味類(relishes)、これはプレーンな味付け用ソースおよびスプレッド、オリーブ、ピクルス、および薬味類を含むが、スパイスまたはハーブは含まない;菓子およびフロスティング、これはキャンディーおよびフレーバー付きフロスティング、マシュマロ、ベーキングチョコレート、黒砂糖、角砂糖、氷砂糖、メープルシュガー、粉砂糖、粗糖を含む;乳製品類似物、これは非乳製品ミルク、冷凍または液体クリーマー、コーヒーホワイトナー、トッピング、およびその他の非乳製品を含む;卵製品、これは液体卵、冷凍卵、または乾燥卵、およびこれらから作られた卵料理、すなわち、春巻、芙蓉蛋、卵サラダ、および冷凍の卵コース料理を含むが、新鮮な卵は含まない;油脂、これはマーガリン、サラダ用ドレッシング、バター、サラダ油、ショートニング、および食用油を含む;
魚製品、これは、全ての調理済みメインディッシュ、サラダ、前菜、冷凍コース料理、並びに魚、甲殻類、およびその他の水生動物を含有するスプレッドを含むが、鮮魚は含まない;新鮮な卵、これは調理済み卵、および新鮮な殻付き卵のみで作られた卵料理を含む;
魚製品、これは、全ての調理済みメインディッシュ、サラダ、前菜、冷凍コース料理、並びに魚、甲殻類、およびその他の水生動物を含有するスプレッドを含むが、鮮魚は含まない;新鮮な卵、これは調理済み卵、および新鮮な殻付き卵のみで作られた卵料理を含む;
鮮魚、これは新鮮なおよび冷凍された魚、甲殻類、およびその他の水生動物のみを含む;新鮮な果実およびフルーツジュース、これは生の果実、柑橘類、メロン、ベリー類、およびそれらから作られた家庭で調理された「エードジュース」およびパンチのみを含む;新鮮な肉、これは新鮮なまたは家庭で冷凍された牛肉または仔牛肉、豚肉、子羊肉または羊肉、およびそれらから作られた、家庭で調理された新鮮な肉を含有する料理、サラダ、前菜、またはサンドイッチスプレッドのみを含む;新鮮な鳥肉、これは新鮮なまたは家庭で冷凍された鳥肉および猟鳥、およびそれらから作られた、家庭で調理された新鮮な鳥肉を含有する料理、サラダ、前菜、またはサンドイッチスプレッドのみを含む;新鮮な野菜、トマト、およびジャガイモ、これは新鮮な家庭で調理された野菜のみを含む;冷凍乳製品デザートおよびミックス類、これはアイスクリーム、アイスミルク、シャーベット、およびその他の冷凍乳製品デザートおよび特殊品を含む;果実アイスおよび水氷類、これはすべての冷凍果実および水氷を含む;ゼラチン、プリン、およびフィリング類、これはフレーバーゼラチンデザート、プリン、カスタード、パフェ、パイのフィリング、およびゼラチンベースのサラダを含む;穀物製品およびパスタ類、これは肉や野菜なしのマカロニおよび麺製品、米料理、冷凍コース料理を含む;グレイビーソースおよびソース類、これはすべてのミートソースおよびグレイビーソース、ならびにトマトソース、ミルクソース、バターソース、および特製ソースを含む;ハードキャンディーおよび咳止めドロップ、これはすべてのハードタイプキャンディーを含む;ハーブ、種子、香辛料、調味料、ブレンド、抽出物、およびフレーバー剤、これはすべての天然および人工の香辛料、ブレンド、フレーバーを含む;家庭で調理されたジャムおよびゼリー類、これは家庭で調理されたジャム、ゼリー、フルーツバター、プリザーブ、およびスイートスプレッドのみを含む;商業用ジャムおよびゼリー類、これは商業的に加工されたジャム、ゼリー、フルーツバター、プリザーブ、およびスイートスプレッドのみを含む;肉製品、これはすべての肉および肉を含有する料理、サラダ、前菜、冷凍のコース肉料理、および、商業的に加工されたかまたは商業的に加工された肉を用いて自家調理した、サンドイッチの材料を含む;
全乳および脱脂乳類、これは全乳、低脂肪乳、液体脱脂乳のみを含む;乳製品、これはフレーバーミルクおよびミルクドリンク、ドライミルク、トッピング、スナックディップ、スプレッド、体重管理乳飲料、その他の乳由来製品を含む;ナッツおよびナッツ製品、これは丸ごとまたは殻付き木の実、ピーナッツ、ココナッツ、ならびにナッツおよびピーナッツのスプレッドを含む;植物性タンパク質製品、これは全米科学アカデミー/全米研究評議会の「再構成植物性タンパク質」カテゴリー、および植物性タンパク質から作られた肉、鳥肉、および魚の代替品、類似物、および増量製品(extender product)を含む;鳥肉製品、これはすべての鳥肉および鳥肉を含有する料理、サラダ、前菜、冷凍のコース鳥肉料理、および、商業的に加工されたか、または商業的に加工された鳥肉を用いて自家調理したサンドイッチの材料を含む;加工された果実およびフルーツジュース類、これは商業的に加工されたすべての果実、柑橘類、ベリー類、および混合物を含む;サラダ、ジュースおよびジュースパンチ、濃縮物、希釈物、「エード」、およびそれらから作られた飲料代用品;加工野菜および野菜ジュース類、これはすべての商業的に加工された野菜、野菜料理、冷凍のコース野菜料理、ならびに野菜ジュースおよびブレンドを含む;スナック食品類、これはチップス、プレッツェル、およびその他の新しいスナックを含む;ソフトキャンディー類、これはキャンディーバー、チョコレート、ファッジ、ミント、およびその他の歯ごたえのあるまたはヌガーキャンディーを含む;家庭で調理されたスープ類、これは家庭で調理された肉、魚、鳥肉、野菜、および混合スープを含む;スープおよびスープミックス類、これは商業的に調理された肉、魚、鳥肉、野菜、および混合スープおよびスープミックスを含む;白砂糖、グラニュー糖、これは白グラニュー糖のみを含む;砂糖代用品、これはグラニュー糖、液糖、およびテーブルシュガーの代用品を含む;および、甘いソース、トッピング、およびシロップ類、これはチョコレート、ベリー、フルーツ、コーンシロップ、メープルの甘いソースおよびトッピングを含む。
好ましい態様において、本発明のエマルションの適用は、ソース、マヨネーズ、スナック、アイスクリームおよびデザート、乳製品(植物性ミルクなど)、飲料、ソーセージおよび調味料、加工製品(肉)、肉類似物、コーヒークリーマー、焼き菓子、スプレッドまたはマーガリンなどに対するものである。
疑義を避けるために、本発明の所与の側面、特徴またはパラメータについて示される選好、選択肢、特定の特徴などは、文脈が別段の指示をしない限り、本発明の同一または別の側面、特徴、およびパラメータについて示される任意のおよび他のすべての選好、選択肢、特定の特徴などと組み合わせて開示されていると、見なされるべきである。
疑義を避けるために、本発明の所与の側面、特徴またはパラメータについて示される選好、選択肢、特定の特徴などは、文脈が別段の指示をしない限り、本発明の同一または別の側面、特徴、およびパラメータについて示される任意のおよび他のすべての選好、選択肢、特定の特徴などと組み合わせて開示されていると、見なされるべきである。
用語「含むこと」または「含む」を使用する場合、記載されている抽出物または組成物は、列挙された成分(単数または複数)を含有しなければならないが、任意に追加の成分も含有してよいことを意味する。用語「から本質的になること」または「から本質的になる」を使用する場合、記載されている抽出物または組成物は、列挙された成分(単数または複数)を含有しなければならず、さらに少量(例えば5重量%まで、または1重量%または0.1重量%まで)の追加の成分も、これらが抽出物または組成物の本質的な特性に影響を与えないことを条件として、含有してよいことを意味する。用語「からなること」または「からなる」を使用する場合、記載されている抽出物または組成物は、列挙された成分(単数または複数)のみを含有しなければならないことを意味する。本明細書において使用される用語「約」とは、例えば、測定可能な値(例えば反応混合物中の特定の成分の量または重量など)に言及する場合、指定された量の±20%、±10%、±5%、±1%、±0.5%、または特に±0.1%の変動を指す。
例
材料および方法
1.生物材料
乾燥ホウレンソウ葉およびアルファルファ草はHungarian Food Ingredients Ltd.から購入し、スピルリナの抽出ケーキはC.B.N Spirulina Bio-engineering Co., Ltd.から購入したスピルリナから得て、水性溶媒で抽出した。ローズマリーの葉はNaturexから入手した。乾燥パセリの葉はVNK B.V. Biddinghuizenから購入し、乾燥紅茶の葉(Lipton yellow)およびグリーンピース、セロリ、ニンジン、ブロッコリーラーブ、スプリングオニオン、ラディッシュ等の新鮮な植物材料は地元のスーパーマーケットから購入し、グリーン部分(葉、鞘など)を手で分類して、グリーン部分の試料を提供した。
Agarophyton ChilensisおよびUlva sp.はKaiso Spaから入手した。Nannochloropsis sp.はNectonおよびMonzon Biotechから入手し、Chlorella sorokiniana、イソクリシスおよびテトラセルミスはNectonから購入した。Dunaliella salinaはMonzonから購入した。
材料および方法
1.生物材料
乾燥ホウレンソウ葉およびアルファルファ草はHungarian Food Ingredients Ltd.から購入し、スピルリナの抽出ケーキはC.B.N Spirulina Bio-engineering Co., Ltd.から購入したスピルリナから得て、水性溶媒で抽出した。ローズマリーの葉はNaturexから入手した。乾燥パセリの葉はVNK B.V. Biddinghuizenから購入し、乾燥紅茶の葉(Lipton yellow)およびグリーンピース、セロリ、ニンジン、ブロッコリーラーブ、スプリングオニオン、ラディッシュ等の新鮮な植物材料は地元のスーパーマーケットから購入し、グリーン部分(葉、鞘など)を手で分類して、グリーン部分の試料を提供した。
Agarophyton ChilensisおよびUlva sp.はKaiso Spaから入手した。Nannochloropsis sp.はNectonおよびMonzon Biotechから入手し、Chlorella sorokiniana、イソクリシスおよびテトラセルミスはNectonから購入した。Dunaliella salinaはMonzonから購入した。
2.化学薬品
抽出のために、99.9%純度のエタノール(「EtOH」とも呼ばれる)をChristalcoから、ヘキサン(C6アルカン>98%;n-ヘキサン>45%)をAzelisから、アセトン(99.5%)をUnivarから、メタノール(99.9%)をHoneyweelから、イソプロパノール(>98%)、酢酸エチル(>99%)、およびクロロホルム(>98%、0.6%エタノールで安定化)をVWRから、2-メチルテトラヒドロフラン(>99.5%、150~400ppmのBHTで安定化)をSigma-Aldrichから購入した。
精製目的で、粉末状の超臨界水活性炭(SCW)をChemviron(フランス)から購入し、一方CarbofilCAおよびR55S活性炭フィルタープレートは、それぞれFiltrox(スイス)および3M(米国)から提供を受けた。
抽出のために、99.9%純度のエタノール(「EtOH」とも呼ばれる)をChristalcoから、ヘキサン(C6アルカン>98%;n-ヘキサン>45%)をAzelisから、アセトン(99.5%)をUnivarから、メタノール(99.9%)をHoneyweelから、イソプロパノール(>98%)、酢酸エチル(>99%)、およびクロロホルム(>98%、0.6%エタノールで安定化)をVWRから、2-メチルテトラヒドロフラン(>99.5%、150~400ppmのBHTで安定化)をSigma-Aldrichから購入した。
精製目的で、粉末状の超臨界水活性炭(SCW)をChemviron(フランス)から購入し、一方CarbofilCAおよびR55S活性炭フィルタープレートは、それぞれFiltrox(スイス)および3M(米国)から提供を受けた。
分析のために、ジガラクトシルジアシルグリセロール(DGDG、植物)をAvanti Polar Lipids Inc.(Alabaster, AL, US)から購入した。アセトニトリル(ACN)、メタノール(MeOH)、および酢酸(AA)はSigma-Aldrich(Saint-Quentin Fallavier, France)から入手した。テトラヒドロフラン(THF)はBiosolve Chime (Dieuze, France)から入手した。超純水は、Milli-Q精製システム(Millipore, Billerica, MA, US)から入手した。
エマルションの調製のために、MCT(中鎖トリグリセリド、Mygliol 812, ex Oleo)はOleon MV(ベルギー)から購入し、脱イオン水はAdesco(スペイン)から入手した。
エマルションの調製のために、MCT(中鎖トリグリセリド、Mygliol 812, ex Oleo)はOleon MV(ベルギー)から購入し、脱イオン水はAdesco(スペイン)から入手した。
3.粗抽出物を得るための乾燥生物材料の固体/液体抽出
200グラムの乾燥生物材料を、2Lの溶媒(ホウレンソウの葉についてのみ3L)と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。したがって固体/液体の重量比は、オートムギ粉、スピルリナ抽出ケーキ、Agarophyton chilensis、Ulva spp.、ナンノクロロプシス、イソクリシス、テトラセルミス、Chlorella vulgaris、Chlorella sorokinianaおよびChlorella zofingensisでは1/10、ホウレンソウでは1/15であった。ホモジネートを、ブフナー器具上のAF06フィルタープレート(保持率:15~35μm)でわずかに吸引しながら濾過した。濾過は通常は非常に迅速であり、残留物が乾燥すると溶液を約1時間冷却させる。室温に達したら、場合によっては新しい濾過を、同じシステム上でAF31Hフィルタープレート(保持率:5~12μm)を用いて行い、得られる抽出物に、生物材料由来の、または温度が25℃に達した後に形成される沈殿物からの任意の潜在的固体粒子が含まれないことを確実にする。ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から除去する。次いで固体抽出物を凍結乾燥して、典型的には乾燥物質>90%とする。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れる。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップを繰り返した。
200グラムの乾燥生物材料を、2Lの溶媒(ホウレンソウの葉についてのみ3L)と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。したがって固体/液体の重量比は、オートムギ粉、スピルリナ抽出ケーキ、Agarophyton chilensis、Ulva spp.、ナンノクロロプシス、イソクリシス、テトラセルミス、Chlorella vulgaris、Chlorella sorokinianaおよびChlorella zofingensisでは1/10、ホウレンソウでは1/15であった。ホモジネートを、ブフナー器具上のAF06フィルタープレート(保持率:15~35μm)でわずかに吸引しながら濾過した。濾過は通常は非常に迅速であり、残留物が乾燥すると溶液を約1時間冷却させる。室温に達したら、場合によっては新しい濾過を、同じシステム上でAF31Hフィルタープレート(保持率:5~12μm)を用いて行い、得られる抽出物に、生物材料由来の、または温度が25℃に達した後に形成される沈殿物からの任意の潜在的固体粒子が含まれないことを確実にする。ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から除去する。次いで固体抽出物を凍結乾燥して、典型的には乾燥物質>90%とする。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れる。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップを繰り返した。
4.粗抽出物を得るための、新鮮な生物材料の直接的固体/液体抽出
1リットルのエタノールを首付き三角フラスコに入れ、70℃に加熱した。100グラムの新鮮な生物材料を秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に添加し、450rpmで2時間、還流しながら磁気撹拌した。したがって、野菜の固体/液体重量比は、新鮮重量に基づき1/10であった。プロセスの残りの部分は、セクション3に上記したものと基本的に同じである。濾過ケーキをドラフト下に16時間放置する。回収された溶媒のアルコール度の推定は、メスシリンダー内の500mLに浸漬した比重計で実施した。乾燥物質のパーセンテージは、抽出前の新鮮な生物材料および濾過ケーキで決定し、放出された水の割合を計算した。
1リットルのエタノールを首付き三角フラスコに入れ、70℃に加熱した。100グラムの新鮮な生物材料を秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に添加し、450rpmで2時間、還流しながら磁気撹拌した。したがって、野菜の固体/液体重量比は、新鮮重量に基づき1/10であった。プロセスの残りの部分は、セクション3に上記したものと基本的に同じである。濾過ケーキをドラフト下に16時間放置する。回収された溶媒のアルコール度の推定は、メスシリンダー内の500mLに浸漬した比重計で実施した。乾燥物質のパーセンテージは、抽出前の新鮮な生物材料および濾過ケーキで決定し、放出された水の割合を計算した。
5.粗抽出物を得るための、新鮮な生物材料の間接的固体/液体抽出
1リットルのエタノールを首付き三角フラスコに入れ、70℃に加熱した。250グラムの新鮮な生物材料を、調理用ジュース抽出器(Philips, Netherlands)を使用して室温で5分間搾汁した。残留物を回収し、高温の溶媒に加えて抽出へと進めたが、ブフナー器具のAF31H濾過によりジュースを清澄化した1回の試み(抽出物Z69、新鮮なホウレンソウの葉)を除き、得られた濾過ケーキはジュース抽出器から回収した残留物と共にプールし、1μmのバッグ(Filtration Group, The Netherlands)を通して油圧プレス(SAM Outillage, France)で15bar(1分間で10barで安定化)で一緒に圧縮して、残留ジュースをできるだけ取り除いた。次いで乾燥ケーキを、残りの混合プロセスに従って抽出した。乾燥物質のパーセンテージを、ジュース抽出の前後の新鮮な生物材料、および抽出後の濾過ケーキでも決定して、水分の損失およびその放出率の両方を決定した。
1リットルのエタノールを首付き三角フラスコに入れ、70℃に加熱した。250グラムの新鮮な生物材料を、調理用ジュース抽出器(Philips, Netherlands)を使用して室温で5分間搾汁した。残留物を回収し、高温の溶媒に加えて抽出へと進めたが、ブフナー器具のAF31H濾過によりジュースを清澄化した1回の試み(抽出物Z69、新鮮なホウレンソウの葉)を除き、得られた濾過ケーキはジュース抽出器から回収した残留物と共にプールし、1μmのバッグ(Filtration Group, The Netherlands)を通して油圧プレス(SAM Outillage, France)で15bar(1分間で10barで安定化)で一緒に圧縮して、残留ジュースをできるだけ取り除いた。次いで乾燥ケーキを、残りの混合プロセスに従って抽出した。乾燥物質のパーセンテージを、ジュース抽出の前後の新鮮な生物材料、および抽出後の濾過ケーキでも決定して、水分の損失およびその放出率の両方を決定した。
6.総脂質測定のためのソックスレー抽出
10グラムの生物材料を450mLの溶媒と混合し、ソックスレー装置で8時間抽出した。ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から除去する。次に固体抽出物を凍結乾燥し、典型的には乾燥物質>90%とする。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れる。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップを繰り返した。
10グラムの生物材料を450mLの溶媒と混合し、ソックスレー装置で8時間抽出した。ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から除去する。次に固体抽出物を凍結乾燥し、典型的には乾燥物質>90%とする。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れる。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップを繰り返した。
7.精製抽出物を得るための粉末活性炭による精製
セクション3(粗抽出物を得るための固体/液体抽出)に上記した濾過ステップの直後に、出発生物材料の量に対して10%の活性炭を濾液に加えた。混合物を、300rpmで磁気撹拌しつつ50℃で30分間加熱した。新たな濾過を、ブフナー器具上のAF31Hフィルタープレートでわずかに吸引しながら実施した。プロセスの残りの部分は、セクション3に上記したものと基本的に同じである。
セクション3(粗抽出物を得るための固体/液体抽出)に上記した濾過ステップの直後に、出発生物材料の量に対して10%の活性炭を濾液に加えた。混合物を、300rpmで磁気撹拌しつつ50℃で30分間加熱した。新たな濾過を、ブフナー器具上のAF31Hフィルタープレートでわずかに吸引しながら実施した。プロセスの残りの部分は、セクション3に上記したものと基本的に同じである。
8.精製された抽出物を得るための活性炭フィルタープレートによる精製
セクション3(粗抽出物を得るための固体/液体抽出)に上記した濾過ステップにおいて、従来のセルロースフィルタープレートを、活性炭プレート:CarbofilCAプレート(Filtrox, Switzerland)またはR55Sプレート(3M, United States)のいずれかに置き換えた。濾過は通常どおり実施し、プロセスの残りの部分はセクション3に記載したものと基本的に同じである。
セクション3(粗抽出物を得るための固体/液体抽出)に上記した濾過ステップにおいて、従来のセルロースフィルタープレートを、活性炭プレート:CarbofilCAプレート(Filtrox, Switzerland)またはR55Sプレート(3M, United States)のいずれかに置き換えた。濾過は通常どおり実施し、プロセスの残りの部分はセクション3に記載したものと基本的に同じである。
9.極性脂質含有量を測定するためのHPLC-ELSD法
極性脂質の定量化は、逆相高速液体クロマトグラフィー(RP-HPLC)(Agilent Technologies instrument, 1260 Infinity Series)により、機器に接続された380-ELSD(Agilent Technologies)を用いて実施した。Agilent Infinity Lab Poroshell 120 EC-C8カラム4μm、内径3mmおよび長さ150mm(Agilent Technologies)を固定相として使用した。脂質の分離は、表1に示す溶出勾配分析を使用して、流速0.8mL/分で実施した。移動相Aはメタノール-水-酢酸(750:250:4;v/v/v)の混合物で構成され、移動相Bはアセトニトリル-メタノール-THF-酢酸(500:375:125:4;v/v/v/v)の混合物で構成された。注射前に、DGDGの標準脂質溶液を、クロロホルム:メタノール(1.5:1;v/v)に溶解した。HPLC-ELSD設定は次のように一定に保った:注入量4μL、カラム温度は40℃に維持し、ELSDエバポレーターとネブライザーの温度は40℃に設定した。窒素をキャリアガスとして使用し、ガス流量は1.2SLMであった。データレートは80Hz、LED強度は90%、スムージングは3.0秒、PMTゲインは8.0であった。クロマトグラムは、Agilent OpenLab Rev. C.01.06ソフトウェアで分析した。
極性脂質の定量化は、逆相高速液体クロマトグラフィー(RP-HPLC)(Agilent Technologies instrument, 1260 Infinity Series)により、機器に接続された380-ELSD(Agilent Technologies)を用いて実施した。Agilent Infinity Lab Poroshell 120 EC-C8カラム4μm、内径3mmおよび長さ150mm(Agilent Technologies)を固定相として使用した。脂質の分離は、表1に示す溶出勾配分析を使用して、流速0.8mL/分で実施した。移動相Aはメタノール-水-酢酸(750:250:4;v/v/v)の混合物で構成され、移動相Bはアセトニトリル-メタノール-THF-酢酸(500:375:125:4;v/v/v/v)の混合物で構成された。注射前に、DGDGの標準脂質溶液を、クロロホルム:メタノール(1.5:1;v/v)に溶解した。HPLC-ELSD設定は次のように一定に保った:注入量4μL、カラム温度は40℃に維持し、ELSDエバポレーターとネブライザーの温度は40℃に設定した。窒素をキャリアガスとして使用し、ガス流量は1.2SLMであった。データレートは80Hz、LED強度は90%、スムージングは3.0秒、PMTゲインは8.0であった。クロマトグラムは、Agilent OpenLab Rev. C.01.06ソフトウェアで分析した。
表1.極性脂質の定量分析のためのグラジエント溶出法
標準溶液を各測定前にHPLCシステムに注入して、検量線を、10~1000ppmの範囲のDGDGの5つのレベルから二次モードで確立した。定量化のために、すべての化合物をDGDGとして定量化した。
Agarophyton chilensis、オートムギ、ホウレンソウ、スピルリナ、およびアオサ属からの抽出物を、クロロホルム:メタノール(1.5:1v/v)に溶解し、注入前に0.45μmPTFEフィルターで濾過した。試料の濃度は、Agarophytonとオートムギについて20mg/mL、ホウレンソウについて10mg/mL、スピルリナとアオサ属について5mg/mLであった。
Agarophyton chilensis、オートムギ、ホウレンソウ、スピルリナ、およびアオサ属からの抽出物を、クロロホルム:メタノール(1.5:1v/v)に溶解し、注入前に0.45μmPTFEフィルターで濾過した。試料の濃度は、Agarophytonとオートムギについて20mg/mL、ホウレンソウについて10mg/mL、スピルリナとアオサ属について5mg/mLであった。
10.水中油型エマルションの調製およびその液滴サイズの測定
本発明によれば、粗抽出物または精製抽出物の油および水への溶解度は、1%の抽出物をそれぞれ水または植物油(中鎖トリグリセリド(MCT)油画分、Mygliol 812)に添加することにより決定した。抽出物がよりよく溶ける試料に応じて、粗抽出物または精製抽出物は「油溶性」または「水溶性」に分類した。
油溶性の粗抽出物または精製抽出物について、本発明による一連の水中油型エマルションを、それらの各々につき以下のステップを実施することにより得た:
(i)既知量のMCTを既知量の油溶性抽出物と、ガラス容器内で混合すること(表2を参照)。(タイプ5のエマルションの場合、油相を過剰に調製して、植物抽出物の正確な計量を確実にした。抽出物が完全に溶けず沈殿物が生じた場合は、上澄みのみを次のステップで使用した。);
(ii)既知量の脱イオン水またはクエン酸でpH3.5に調整した脱イオン水(表2を参照)を添加して、水相を得ること;
(iii)油相と水相を、Branson Digital Sonifier 450, 102cで6.3mmチップを使用して乳化すること。チップを混合物に浸して混合物の上部3分の1に配置し、これを次に80%の振幅で3分間乳化した。乳化時間は、10秒のパルスと10秒の一時停止を交互に行う5:50分に分割した。ガラス容器を冷水(10℃)に浸して、エマルションを冷却した。
本発明によれば、粗抽出物または精製抽出物の油および水への溶解度は、1%の抽出物をそれぞれ水または植物油(中鎖トリグリセリド(MCT)油画分、Mygliol 812)に添加することにより決定した。抽出物がよりよく溶ける試料に応じて、粗抽出物または精製抽出物は「油溶性」または「水溶性」に分類した。
油溶性の粗抽出物または精製抽出物について、本発明による一連の水中油型エマルションを、それらの各々につき以下のステップを実施することにより得た:
(i)既知量のMCTを既知量の油溶性抽出物と、ガラス容器内で混合すること(表2を参照)。(タイプ5のエマルションの場合、油相を過剰に調製して、植物抽出物の正確な計量を確実にした。抽出物が完全に溶けず沈殿物が生じた場合は、上澄みのみを次のステップで使用した。);
(ii)既知量の脱イオン水またはクエン酸でpH3.5に調整した脱イオン水(表2を参照)を添加して、水相を得ること;
(iii)油相と水相を、Branson Digital Sonifier 450, 102cで6.3mmチップを使用して乳化すること。チップを混合物に浸して混合物の上部3分の1に配置し、これを次に80%の振幅で3分間乳化した。乳化時間は、10秒のパルスと10秒の一時停止を交互に行う5:50分に分割した。ガラス容器を冷水(10℃)に浸して、エマルションを冷却した。
水溶性の粗抽出物または精製抽出物について、本発明による一連の水中油型エマルションを、それらの各々につき以下のステップを実施することにより得た:
(i)既知量の脱イオン水またはクエン酸でpH3.5に調整した脱イオン水を既知量の水溶性抽出物とガラス容器内で混合して(表2を参照)、水相を得ること。(タイプ5のエマルションの場合、水相を過剰に調製して、植物抽出物の正確な計量を確実にした。抽出物が完全に溶けず沈殿物が生じた場合は、既知量のMCTを追加して、上澄みのみを次のステップで使用した(表2を参照)。
(ii)油相および水相を、Branson Digital Sonifier 450, 102c(アルファルファの場合、SONICS 500 Watt Ultrasonic Processors - VCXを使用)で、6.3mmチップを使用して乳化すること。チップを混合物に浸して混合物の上部3分の1に配置し、これを次に80%の振幅(アルファルファの場合は75%)で3分間乳化した。乳化時間は、10秒のパルスと10秒の一時停止を交互に行う5:50分に分割した。ガラス容器を冷水(10℃)に浸して、エマルションを冷却した。
表2に示す処方に従うすべてのエマルションは、水中油型であった。
(i)既知量の脱イオン水またはクエン酸でpH3.5に調整した脱イオン水を既知量の水溶性抽出物とガラス容器内で混合して(表2を参照)、水相を得ること。(タイプ5のエマルションの場合、水相を過剰に調製して、植物抽出物の正確な計量を確実にした。抽出物が完全に溶けず沈殿物が生じた場合は、既知量のMCTを追加して、上澄みのみを次のステップで使用した(表2を参照)。
(ii)油相および水相を、Branson Digital Sonifier 450, 102c(アルファルファの場合、SONICS 500 Watt Ultrasonic Processors - VCXを使用)で、6.3mmチップを使用して乳化すること。チップを混合物に浸して混合物の上部3分の1に配置し、これを次に80%の振幅(アルファルファの場合は75%)で3分間乳化した。乳化時間は、10秒のパルスと10秒の一時停止を交互に行う5:50分に分割した。ガラス容器を冷水(10℃)に浸して、エマルションを冷却した。
表2に示す処方に従うすべてのエマルションは、水中油型であった。
表2.水中油型エマルションの処方。バッチサイズは、20gのアルファルファを除き、すべての植物抽出物で7gであった。
油滴の液滴サイズ分布は、Malvern Mastersizer 3000を用いた静的光散乱により、レーザー回折粒子サイズ分析およびミー散乱理論を使用して測定した。連続相には水の屈折率を、分散相にはMCTオイルの屈折率をそれぞれ用いた。
測定セルに、脱気した脱イオン水を満たした。エマルションを、装置内のオブスキュレーション測定に続いて測定セルに滴下することにより、希釈した。次に液滴サイズ分布のDv98を、測定機器に実装されたソフトウェアを使用して計算した。Dv98は、母集団の98%(体積)がこの値を下回るところの直径として定義される。すべての測定は室温で行った。
すべてのエマルションを5℃で7日間保存し、液滴サイズ分布を1日後と7日後に測定して、試料の安定性をチェックした。
測定セルに、脱気した脱イオン水を満たした。エマルションを、装置内のオブスキュレーション測定に続いて測定セルに滴下することにより、希釈した。次に液滴サイズ分布のDv98を、測定機器に実装されたソフトウェアを使用して計算した。Dv98は、母集団の98%(体積)がこの値を下回るところの直径として定義される。すべての測定は室温で行った。
すべてのエマルションを5℃で7日間保存し、液滴サイズ分布を1日後と7日後に測定して、試料の安定性をチェックした。
11.油中水型エマルションの調製およびその液滴サイズの測定
油溶性精製抽出物について、本発明による一連の油中水型エマルションを、それらの各々につき以下のステップを実施することにより得た:
(i)既知量のMCTを既知量の油溶性抽出物と、ガラス容器内で混合すること(表3)。
(ii)既知量の脱イオン水またはクエン酸でpH3.5に調整した脱イオン水(表3を参照)を加えて、水相を得ること;
(iii)油相と水相を、Branson Digital Sonifier 450, 102cにより6.3mmチップを使用して乳化すること。チップを試料に浸してその上部3分の1に配置した。混合物を振幅80%で3分間乳化した。乳化時間は、10秒のパルスと10秒の一時停止を交互に行う5:50分に分割した。ガラス容器を冷水(10℃)に浸して、エマルションを冷却した。
油溶性精製抽出物について、本発明による一連の油中水型エマルションを、それらの各々につき以下のステップを実施することにより得た:
(i)既知量のMCTを既知量の油溶性抽出物と、ガラス容器内で混合すること(表3)。
(ii)既知量の脱イオン水またはクエン酸でpH3.5に調整した脱イオン水(表3を参照)を加えて、水相を得ること;
(iii)油相と水相を、Branson Digital Sonifier 450, 102cにより6.3mmチップを使用して乳化すること。チップを試料に浸してその上部3分の1に配置した。混合物を振幅80%で3分間乳化した。乳化時間は、10秒のパルスと10秒の一時停止を交互に行う5:50分に分割した。ガラス容器を冷水(10℃)に浸して、エマルションを冷却した。
水溶性精製抽出物について、本発明による一連の油中水型エマルションを、それらの各々につき以下のステップを実施することにより得た:
(i)既知量の脱イオン水またはクエン酸でpH3.5に調整した脱イオン水を既知量の水溶性植物抽出物と、ガラス容器内で混合して(表3を参照)、極性相を得ること;
(ii)既知量のMCTを添加すること(表3を参照)。
(iii)油相と水相を、Branson Digital Sonifier 450, 102cにより6.3mmチップを使用して乳化すること。チップを試料に浸してその上部3分の1に配置した。混合物を80%の振幅で3分間乳化した。乳化時間は、10秒のパルスと10秒の一時停止を交互に行う5:50分に分割した。ガラス容器を冷水(10℃)に浸して、エマルションを冷却した。
表3に示す処方に従うすべてのエマルションは、油中水型であった。
(i)既知量の脱イオン水またはクエン酸でpH3.5に調整した脱イオン水を既知量の水溶性植物抽出物と、ガラス容器内で混合して(表3を参照)、極性相を得ること;
(ii)既知量のMCTを添加すること(表3を参照)。
(iii)油相と水相を、Branson Digital Sonifier 450, 102cにより6.3mmチップを使用して乳化すること。チップを試料に浸してその上部3分の1に配置した。混合物を80%の振幅で3分間乳化した。乳化時間は、10秒のパルスと10秒の一時停止を交互に行う5:50分に分割した。ガラス容器を冷水(10℃)に浸して、エマルションを冷却した。
表3に示す処方に従うすべてのエマルションは、油中水型であった。
表3.油中水型エマルションの処方。バッチサイズは30gであった。
水滴の液滴サイズ分布は、Malvern Mastersizer 3000を用いた静的光散乱により、レーザー回折粒子サイズ分析およびミー散乱理論を使用して測定した。連続相にはMCTの屈折率を、分散相には水の屈折率をそれぞれ用いた。
クロロフィル濃度の高い未精製の試料を使用した場合、緑色が連続相の吸着指数を変化させて測定値を歪めるため、信頼できる測定値を得ることは不可能であった。これは測定パラメータによって調整できなかったため、油中水型エマルションには精製抽出物のみを使用した。
測定セルにMCTオイルを充填した。エマルションを、装置内のオブスキュレーション測定に続いて測定セルに滴下することにより、希釈した。次に液滴サイズ分布のDv98を、測定機器に実装されたソフトウェアを使用して計算した。Dv98は、母集団の98%(体積)がこの値を下回るところの直径として定義される。すべての測定は室温で行い、すべてのエマルションは5℃で1日保存した後、液滴サイズ分布を再度測定して、試料の安定性を確認した。
クロロフィル濃度の高い未精製の試料を使用した場合、緑色が連続相の吸着指数を変化させて測定値を歪めるため、信頼できる測定値を得ることは不可能であった。これは測定パラメータによって調整できなかったため、油中水型エマルションには精製抽出物のみを使用した。
測定セルにMCTオイルを充填した。エマルションを、装置内のオブスキュレーション測定に続いて測定セルに滴下することにより、希釈した。次に液滴サイズ分布のDv98を、測定機器に実装されたソフトウェアを使用して計算した。Dv98は、母集団の98%(体積)がこの値を下回るところの直径として定義される。すべての測定は室温で行い、すべてのエマルションは5℃で1日保存した後、液滴サイズ分布を再度測定して、試料の安定性を確認した。
12.乳化スコア(ES)の計算
液滴サイズとエマルションの安定性を、「乳化スコア」またはESと呼ばれる単一の指標で捉えた。
まず、各データセット(液滴サイズ0日目、1日目、7日目)に対し、表4に記載された規則に従って「安定指数」(SI)を割り当てた。
液滴サイズとエマルションの安定性を、「乳化スコア」またはESと呼ばれる単一の指標で捉えた。
まず、各データセット(液滴サイズ0日目、1日目、7日目)に対し、表4に記載された規則に従って「安定指数」(SI)を割り当てた。
表4.安定指数(SI)の計算に使用するアルゴリズム規則
ESは、次の式に従って計算する:
ES=10*log(SI3*D(98))
DV98はμmで表される。ESが低いほど、乳化剤は優れている。負のESも得ることができる。
ES=10*log(SI3*D(98))
DV98はμmで表される。ESが低いほど、乳化剤は優れている。負のESも得ることができる。
例1.乾燥ホウレンソウ葉からのS/L抽出による粗抽出物の生成
ホウレンソウ葉の乾燥フレーク200グラムを、3Lの溶媒(エタノール;エタノール:水、90:10;エタノール:水、80:20;エタノール:水、70:30;エタノール:水、60:40;エタノール:水、50:50;アセトン;アセトン:水、90:10;アセトン:水、80:20;アセトン:水、70:30;ヘキサン、酢酸エチル、イソプロパノール、メチルテトラヒドロフラン、およびメタノール)と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。したがって固体/液体重量比は1/15であった。次に抽出媒体を、ブフナー器具上のAF06フィルタープレート(保持率:15~35μm)でわずかに吸引しながら濾過し、植物残留物を除去した。ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から減圧下での蒸発により除去した。次に固体抽出物を凍結乾燥し、乾燥物質は典型的には>90%に達した。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れた。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップをこのしきい値を超えるまで繰り返した。
図1は、エタノール:水、80:20(21.2%)、メタノール(18.1%)、およびエタノール:水、90:10(17.0%)の最大値を使用して、様々な試験溶媒で得られた質量収率を示す。最小収率は、非極性溶媒ヘキサンを用いた場合に得られた(1.4%)。
ホウレンソウ葉の乾燥フレーク200グラムを、3Lの溶媒(エタノール;エタノール:水、90:10;エタノール:水、80:20;エタノール:水、70:30;エタノール:水、60:40;エタノール:水、50:50;アセトン;アセトン:水、90:10;アセトン:水、80:20;アセトン:水、70:30;ヘキサン、酢酸エチル、イソプロパノール、メチルテトラヒドロフラン、およびメタノール)と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。したがって固体/液体重量比は1/15であった。次に抽出媒体を、ブフナー器具上のAF06フィルタープレート(保持率:15~35μm)でわずかに吸引しながら濾過し、植物残留物を除去した。ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から減圧下での蒸発により除去した。次に固体抽出物を凍結乾燥し、乾燥物質は典型的には>90%に達した。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れた。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップをこのしきい値を超えるまで繰り返した。
図1は、エタノール:水、80:20(21.2%)、メタノール(18.1%)、およびエタノール:水、90:10(17.0%)の最大値を使用して、様々な試験溶媒で得られた質量収率を示す。最小収率は、非極性溶媒ヘキサンを用いた場合に得られた(1.4%)。
例2.抽出溶媒としてクロロホルム:メタノール混合物を使用するソックスレー抽出による、乾燥ホウレンソウ葉からの粗抽出物の生成
ホウレンソウ葉の乾燥フレーク約6~7グラムを450mLの溶媒と混合し、抽出溶媒としてクロロホルム:メタノール混合物を様々な体積比(2:1、1:1、または1:2)で使用したソックスレー装置で、8時間抽出した。したがって固体/液体の重量比は、ホウレンソウの初期量に応じて、1/74~1/65の範囲であった。次に抽出媒体を、ブフナー器具上のAF06フィルタープレート(保持率:15~35μm)でわずかに吸引しながら濾過し、植物残留物を除去した。ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から減圧下での蒸発により除去した。次に固体抽出物を凍結乾燥し、乾燥物質は典型的には>90%に達した。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れた。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップをこのしきい値を超えるまで繰り返した。
図2は、クロロホルム:メタノールの2:1(19.2%)の最大値を使用して、様々な試験溶媒で得られた質量収率を示す。
ホウレンソウ葉の乾燥フレーク約6~7グラムを450mLの溶媒と混合し、抽出溶媒としてクロロホルム:メタノール混合物を様々な体積比(2:1、1:1、または1:2)で使用したソックスレー装置で、8時間抽出した。したがって固体/液体の重量比は、ホウレンソウの初期量に応じて、1/74~1/65の範囲であった。次に抽出媒体を、ブフナー器具上のAF06フィルタープレート(保持率:15~35μm)でわずかに吸引しながら濾過し、植物残留物を除去した。ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から減圧下での蒸発により除去した。次に固体抽出物を凍結乾燥し、乾燥物質は典型的には>90%に達した。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れた。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップをこのしきい値を超えるまで繰り返した。
図2は、クロロホルム:メタノールの2:1(19.2%)の最大値を使用して、様々な試験溶媒で得られた質量収率を示す。
例3.典型的S/L抽出手順またはソックスレー手順(クロロホルム:メタノール混合物についてのみ)によって得られた、ホウレンソウ葉の粗抽出物の極性脂質の特性評価
極性脂質の定量化は、セクション9(極性脂質含有量を測定するためのHPLC-ELSD法)で上述したように、逆相HPLCにより実施した。結果は、最高の極性脂質含有量(>50%)に達したのは、抽出溶媒として酢酸エチル、アセトン、クロロホルム:メタノール2:1(ソックスレー手順)、およびエタノールを使用して得たホウレンソウ粗抽出物であることを示す(図3)。対照的に、少なくとも40%の水を有するエタノール:水混合物を使用して得た粗抽出物は、少量の極性脂質(<10%)をもたらした。
極性脂質の定量化は、セクション9(極性脂質含有量を測定するためのHPLC-ELSD法)で上述したように、逆相HPLCにより実施した。結果は、最高の極性脂質含有量(>50%)に達したのは、抽出溶媒として酢酸エチル、アセトン、クロロホルム:メタノール2:1(ソックスレー手順)、およびエタノールを使用して得たホウレンソウ粗抽出物であることを示す(図3)。対照的に、少なくとも40%の水を有するエタノール:水混合物を使用して得た粗抽出物は、少量の極性脂質(<10%)をもたらした。
例4.1%のホウレンソウ葉粗抽出物の、連続相を有するpH3.5の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての使用
1%の様々なホウレンソウ葉粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH3.5で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図4)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も、いくつかの選択した抽出物について測定した。液滴サイズの値のほとんどは、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(ホウレンソウ粗抽出物)の乳化活性およびそれらが形成するエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれと、さらに比較した。本発明の抽出物および参照抽出物は、同じ抽出条件を使用して得られ、それらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。興味深いことに、多くのホウレンソウ抽出物は、参照オートムギ抽出物で得られたものよりも小さい液滴サイズのエマルションを形成するという、有意な能力を示した(図4)。これは、以下を使用して得たホウレンソウの粗抽出物の場合である:酢酸エチル(DV98新鮮=2.8μm)、イソプロパノール(2.6μm)、エタノール:水90:10(2.5および1.6μm;X14およびX65と呼ばれる2つの独立した抽出物)、エタノール(2.4および2.3μm;2つの独立した抽出物)、アセトン(2.3μm)、メタノール(1.9μm)、アセトン:水90:10(1.5μm)、およびアセトン:水80:20(1.4μm)。
1%の様々なホウレンソウ葉粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH3.5で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図4)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も、いくつかの選択した抽出物について測定した。液滴サイズの値のほとんどは、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(ホウレンソウ粗抽出物)の乳化活性およびそれらが形成するエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれと、さらに比較した。本発明の抽出物および参照抽出物は、同じ抽出条件を使用して得られ、それらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。興味深いことに、多くのホウレンソウ抽出物は、参照オートムギ抽出物で得られたものよりも小さい液滴サイズのエマルションを形成するという、有意な能力を示した(図4)。これは、以下を使用して得たホウレンソウの粗抽出物の場合である:酢酸エチル(DV98新鮮=2.8μm)、イソプロパノール(2.6μm)、エタノール:水90:10(2.5および1.6μm;X14およびX65と呼ばれる2つの独立した抽出物)、エタノール(2.4および2.3μm;2つの独立した抽出物)、アセトン(2.3μm)、メタノール(1.9μm)、アセトン:水90:10(1.5μm)、およびアセトン:水80:20(1.4μm)。
例5.1%のホウレンソウ葉粗抽出物の、連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての使用
1%の様々なホウレンソウ葉粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図5)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も、いくつかの選択した抽出物について測定した。液滴サイズの値のほとんどは、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(ホウレンソウ粗抽出物)の乳化活性およびそれらが形成するエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれとさらに比較した。本発明の抽出物と参照抽出物は、同じ抽出条件を使用して得られ、それらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。興味深いことに、多くのホウレンソウ抽出物は、参照オートムギ抽出物で得られたものよりも小さい液滴サイズのエマルションを形成する、有意な能力を示した(図5)。これは、以下を使用して得たホウレンソウ粗抽出物の場合である:エタノール:水60:40(DV98新鮮=3.3μm)、メチルテトラヒドロフラン(2.6μm)、エタノール(1.8および2.5μm、X15およびX64と呼ばれる2つの独立した抽出物)、酢酸エチル(2.5μm)、ヘキサン(2.2μm)、イソプロパノール(2.2μm)、メタノール(2.2μm)、アセトン:水80:20(2.1μm)、アセトン(1.9μm)、エタノール:水90:10(1.9μm)、アセトン:水、90:10(1.8μm)、およびエタノール(1.8μm)。その中で、エタノール:水60:40およびメチルテトラヒドロフランを使用して得たホウレンソウ粗抽出物の安定性は、それぞれ1日および7日後に満足できるものではなかった。
1%の様々なホウレンソウ葉粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図5)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も、いくつかの選択した抽出物について測定した。液滴サイズの値のほとんどは、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(ホウレンソウ粗抽出物)の乳化活性およびそれらが形成するエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれとさらに比較した。本発明の抽出物と参照抽出物は、同じ抽出条件を使用して得られ、それらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。興味深いことに、多くのホウレンソウ抽出物は、参照オートムギ抽出物で得られたものよりも小さい液滴サイズのエマルションを形成する、有意な能力を示した(図5)。これは、以下を使用して得たホウレンソウ粗抽出物の場合である:エタノール:水60:40(DV98新鮮=3.3μm)、メチルテトラヒドロフラン(2.6μm)、エタノール(1.8および2.5μm、X15およびX64と呼ばれる2つの独立した抽出物)、酢酸エチル(2.5μm)、ヘキサン(2.2μm)、イソプロパノール(2.2μm)、メタノール(2.2μm)、アセトン:水80:20(2.1μm)、アセトン(1.9μm)、エタノール:水90:10(1.9μm)、アセトン:水、90:10(1.8μm)、およびエタノール(1.8μm)。その中で、エタノール:水60:40およびメチルテトラヒドロフランを使用して得たホウレンソウ粗抽出物の安定性は、それぞれ1日および7日後に満足できるものではなかった。
例6.5%のホウレンソウ葉粗抽出物の、連続相を有するpH3.5または7の油中水型エマルションにおける乳化剤としての使用
エタノール:水90:10、アセトン:水90:10、およびメタノールを使用して得た5%のホウレンソウ葉粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた油中水型エマルションをpH3.5および7で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図6)。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(ホウレンソウ粗抽出物)の乳化活性およびそれらが形成するエマルションの安定性を測定した。興味深いことに、試験したホウレンソウ抽出物は、このタイプのエマルションに対して比較的小さな液滴サイズの逆エマルション(reverse emulsion)を形成する顕著な能力を示した(図6)。エタノール:水(90:10)を使用して得た抽出物で得られたDV98値は、新鮮なエマルションおよび1日保存後にそれぞれ、9.2対8.6μmであった。それらは、メタノールを使用して得た抽出物では6.2対2.5μm、アセトン:水90:10を使用して得た抽出物では0.2対0.4μmであった。
エタノール:水90:10、アセトン:水90:10、およびメタノールを使用して得た5%のホウレンソウ葉粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた油中水型エマルションをpH3.5および7で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図6)。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(ホウレンソウ粗抽出物)の乳化活性およびそれらが形成するエマルションの安定性を測定した。興味深いことに、試験したホウレンソウ抽出物は、このタイプのエマルションに対して比較的小さな液滴サイズの逆エマルション(reverse emulsion)を形成する顕著な能力を示した(図6)。エタノール:水(90:10)を使用して得た抽出物で得られたDV98値は、新鮮なエマルションおよび1日保存後にそれぞれ、9.2対8.6μmであった。それらは、メタノールを使用して得た抽出物では6.2対2.5μm、アセトン:水90:10を使用して得た抽出物では0.2対0.4μmであった。
例7.乾燥スピルリナ抽出ケーキからのS/L抽出による粗抽出物の生成
200グラムの乾燥スピルリナ(シアノバクテリア)抽出ケーキを、2Lの溶媒(エタノール;エタノール:水、90:10;エタノール:水、80:20;エタノール:水、70:30;エタノール:水、60:40;エタノール:水、50:50;アセトン;ヘキサン、イソプロパノール、およびメチルテトラヒドロフラン)と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。したがって固体/液体の重量比は1/10であった。次に抽出媒体を、ブフナー器具上のAF06フィルタープレート(保持率:15~35μm)でわずかに吸引しながら濾過し、植物残留物を除去した。濾過は通常は非常に迅速であり、残留物が乾燥すると溶液を約1時間冷却させる。室温に達したら、2回目の濾過を、同じシステム上でAF31H濾紙(保持率:5~12μm)を用いて行い、得られた抽出物に生物材料由来の任意の潜在的固体粒子が含まれていないことを確実にした。次いでロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から減圧下での蒸発により除去した。固体抽出物を凍結乾燥し、乾燥物質は典型的には>90%に達した。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れた。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップをこのしきい値を超えるまで繰り返した。
図7は、エタノール:水70:30(13.7%)、エタノール:水80:20(13.2%)、およびエタノール:水90:10(13.0%)の最大値を使用して、様々な試験溶媒で得られた質量収率を示す。最小収率は、非極性溶媒ヘキサンを用いた場合に得られた(1.4%)。
200グラムの乾燥スピルリナ(シアノバクテリア)抽出ケーキを、2Lの溶媒(エタノール;エタノール:水、90:10;エタノール:水、80:20;エタノール:水、70:30;エタノール:水、60:40;エタノール:水、50:50;アセトン;ヘキサン、イソプロパノール、およびメチルテトラヒドロフラン)と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。したがって固体/液体の重量比は1/10であった。次に抽出媒体を、ブフナー器具上のAF06フィルタープレート(保持率:15~35μm)でわずかに吸引しながら濾過し、植物残留物を除去した。濾過は通常は非常に迅速であり、残留物が乾燥すると溶液を約1時間冷却させる。室温に達したら、2回目の濾過を、同じシステム上でAF31H濾紙(保持率:5~12μm)を用いて行い、得られた抽出物に生物材料由来の任意の潜在的固体粒子が含まれていないことを確実にした。次いでロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から減圧下での蒸発により除去した。固体抽出物を凍結乾燥し、乾燥物質は典型的には>90%に達した。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れた。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップをこのしきい値を超えるまで繰り返した。
図7は、エタノール:水70:30(13.7%)、エタノール:水80:20(13.2%)、およびエタノール:水90:10(13.0%)の最大値を使用して、様々な試験溶媒で得られた質量収率を示す。最小収率は、非極性溶媒ヘキサンを用いた場合に得られた(1.4%)。
例8.抽出溶媒としてクロロホルム:メタノール混合物を使用するソックスレー抽出による、乾燥スピルリナ抽出ケーキからの粗抽出物の生成
約12~13グラムのスピルリナ(シアノバクテリア)抽出ケーキの乾燥粉末を、450mLの溶媒と混合し、ソックスレー装置で8時間、抽出溶媒としてクロロホルム:メタノール混合物を異なる体積比率(2:1、1:1、または1:2)で用いて抽出した。したがって固体/液体の重量比は、スピルリナの初期量に応じて1/35~1/38の範囲であった。次に抽出媒体を、ブフナー器具上のAF06フィルタープレート(保持率:15~35μm)でわずかに吸引しながら濾過し、シアノバクテリアの残留物を除去した。濾過は通常は非常に迅速であり、残留物が乾燥すると溶液を約1時間冷却させる。室温に達したら、2回目の濾過を、同じシステム上でAF31H濾紙(保持率:5~12μm)を用いて行い、得られた抽出物に生物材料由来の任意の潜在的固体粒子が含まれていないことを確実にした。ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から減圧下での蒸発により除去した。次に固体抽出物を凍結乾燥し、乾燥物質は典型的には>90%に達した。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れた。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップをこのしきい値を超えるまで繰り返した。
図8は、クロロホルム:メタノール2:1(6.4%)の最大値を使用して、様々な試験溶媒で得られた質量収率を示す。
約12~13グラムのスピルリナ(シアノバクテリア)抽出ケーキの乾燥粉末を、450mLの溶媒と混合し、ソックスレー装置で8時間、抽出溶媒としてクロロホルム:メタノール混合物を異なる体積比率(2:1、1:1、または1:2)で用いて抽出した。したがって固体/液体の重量比は、スピルリナの初期量に応じて1/35~1/38の範囲であった。次に抽出媒体を、ブフナー器具上のAF06フィルタープレート(保持率:15~35μm)でわずかに吸引しながら濾過し、シアノバクテリアの残留物を除去した。濾過は通常は非常に迅速であり、残留物が乾燥すると溶液を約1時間冷却させる。室温に達したら、2回目の濾過を、同じシステム上でAF31H濾紙(保持率:5~12μm)を用いて行い、得られた抽出物に生物材料由来の任意の潜在的固体粒子が含まれていないことを確実にした。ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から減圧下での蒸発により除去した。次に固体抽出物を凍結乾燥し、乾燥物質は典型的には>90%に達した。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れた。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップをこのしきい値を超えるまで繰り返した。
図8は、クロロホルム:メタノール2:1(6.4%)の最大値を使用して、様々な試験溶媒で得られた質量収率を示す。
例9.典型的S/L抽出手順またはソックスレー手順(クロロホルム:メタノール混合物についてのみ)によって得られたスピルリナ抽出ケーキの粗抽出物の、極性脂質の特性評価
極性脂質の定量化は、セクション9(極性脂質含有量を測定するためのHPLC-ELSD法)で上述したように、逆相HPLCにより実施した。結果は、最高の極性脂質含有量(>50%)に達したのは、抽出溶媒としてヘキサン、アセトン、メチルテトラヒドロフラン(MeTHF)、およびイソプロパノール(iPrOH)を使用して得た粗スピルリナ抽出ケーキ抽出物であったことを示す(図9)。対照的に、50%の水を含むエタノール:水混合物を使用して得た粗抽出物は、少量の極性脂質(<10%)をもたらした。
極性脂質の定量化は、セクション9(極性脂質含有量を測定するためのHPLC-ELSD法)で上述したように、逆相HPLCにより実施した。結果は、最高の極性脂質含有量(>50%)に達したのは、抽出溶媒としてヘキサン、アセトン、メチルテトラヒドロフラン(MeTHF)、およびイソプロパノール(iPrOH)を使用して得た粗スピルリナ抽出ケーキ抽出物であったことを示す(図9)。対照的に、50%の水を含むエタノール:水混合物を使用して得た粗抽出物は、少量の極性脂質(<10%)をもたらした。
例10.スピルリナ抽出ケーキの1%の粗抽出物の、連続相を有するpH3.5の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての使用
1%の様々なスピルリナ粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH3.5で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図10)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も、選択した抽出物について測定した。液滴サイズの値のほとんどは、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(スピルリナ粗抽出物)の乳化活性およびそれらが形成するエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれとさらに比較した。本発明の抽出物および参照抽出物は、同じ抽出条件を使用して得られ、それらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。興味深いことに、2つのスピルリナ抽出物は、参照オートムギ抽出物で得られたものよりも小さい液滴サイズのエマルションを形成する有意な能力を示した(図10)。これは、エタノール(DV98新鮮=1.8μm)およびエタノール:水90:10(1.7μm)を使用して得たスピルリナ粗抽出物の場合である。両方の抽出物は、7日間十分に安定なエマルションを形成した。
1%の様々なスピルリナ粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH3.5で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図10)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も、選択した抽出物について測定した。液滴サイズの値のほとんどは、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(スピルリナ粗抽出物)の乳化活性およびそれらが形成するエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれとさらに比較した。本発明の抽出物および参照抽出物は、同じ抽出条件を使用して得られ、それらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。興味深いことに、2つのスピルリナ抽出物は、参照オートムギ抽出物で得られたものよりも小さい液滴サイズのエマルションを形成する有意な能力を示した(図10)。これは、エタノール(DV98新鮮=1.8μm)およびエタノール:水90:10(1.7μm)を使用して得たスピルリナ粗抽出物の場合である。両方の抽出物は、7日間十分に安定なエマルションを形成した。
例11.スピルリナ抽出ケーキの1%の粗抽出物の、連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての使用
スピルリナ抽出ケーキの1%の様々な粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図11)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も、選択した抽出物について測定した。液滴サイズの値のほとんどは、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(スピルリナ粗抽出物)の乳化活性およびそれらが形成するエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれとさらに比較した。本発明の抽出物および参照抽出物は、同じ抽出条件を使用して得られ、それらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。興味深いことに、いくつかのスピルリナ抽出物は、参照オートムギ抽出物で得られたものよりも小さい液滴サイズのエマルションを形成する有意な能力を示した(図11)。これは、メチルテトラヒドロフラン(DV98新鮮=2.2μm)、エタノール:水90:10(1.6μm)、エタノール(1.2μm)、およびイソプロパノール(1.1μm)を使用して得たスピルリナ粗抽出物の場合である。
スピルリナ抽出ケーキの1%の様々な粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図11)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も、選択した抽出物について測定した。液滴サイズの値のほとんどは、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(スピルリナ粗抽出物)の乳化活性およびそれらが形成するエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれとさらに比較した。本発明の抽出物および参照抽出物は、同じ抽出条件を使用して得られ、それらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。興味深いことに、いくつかのスピルリナ抽出物は、参照オートムギ抽出物で得られたものよりも小さい液滴サイズのエマルションを形成する有意な能力を示した(図11)。これは、メチルテトラヒドロフラン(DV98新鮮=2.2μm)、エタノール:水90:10(1.6μm)、エタノール(1.2μm)、およびイソプロパノール(1.1μm)を使用して得たスピルリナ粗抽出物の場合である。
例12.スピルリナ抽出ケーキの5%の粗抽出物の、連続相を有するpH3.5の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての使用
スピルリナ抽出ケーキの5%の様々な粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH3.5で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図12)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も、選択した抽出物について測定した。液滴サイズの値のほとんどは、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(スピルリナ粗抽出物)の乳化活性およびそれらが形成するエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれとさらに比較した。本発明の抽出物および参照抽出物は、同じ抽出条件を使用して得られ、それらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。興味深いことに、いくつかのスピルリナ抽出物は、参照オートムギ抽出物で得られたものよりも小さい液滴サイズのエマルションを形成する有意な能力を示した(図12)。これは、メチルテトラヒドロフラン(DV98新鮮=1.7μm)、エタノール:水90:10(1.6μm)、エタノール(1.0μm)、およびイソプロパノール(0.7μm)を使用して得たスピルリナ粗抽出物の場合である。それらのすべてが、7日間十分に安定なエマルションを形成した。
スピルリナ抽出ケーキの5%の様々な粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH3.5で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図12)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も、選択した抽出物について測定した。液滴サイズの値のほとんどは、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(スピルリナ粗抽出物)の乳化活性およびそれらが形成するエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれとさらに比較した。本発明の抽出物および参照抽出物は、同じ抽出条件を使用して得られ、それらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。興味深いことに、いくつかのスピルリナ抽出物は、参照オートムギ抽出物で得られたものよりも小さい液滴サイズのエマルションを形成する有意な能力を示した(図12)。これは、メチルテトラヒドロフラン(DV98新鮮=1.7μm)、エタノール:水90:10(1.6μm)、エタノール(1.0μm)、およびイソプロパノール(0.7μm)を使用して得たスピルリナ粗抽出物の場合である。それらのすべてが、7日間十分に安定なエマルションを形成した。
例13.スピルリナ抽出ケーキの5%の粗抽出物の、連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての使用。
スピルリナ抽出ケーキの5%の様々な粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図13)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も、選択した抽出物について測定した。液滴サイズの値のほとんどは、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(スピルリナ粗抽出物)の乳化活性およびそれらが形成するエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれとさらに比較した。本発明の抽出物および参照抽出物は、同じ抽出条件を使用して得られ、それらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。興味深いことに、いくつかのスピルリナ抽出物は、参照オートムギ抽出物で得られたものよりも小さい液滴サイズのエマルションを形成する有意な能力を示した(図13)。これは、メチルテトラヒドロフラン(DV98新鮮=1.9μm)、イソプロパノール(0.7μm)、およびエタノール(0.7μm)を使用して得たスピルリナ粗抽出物の場合である。それらのすべてが、7日間十分に安定なエマルションを形成した。
スピルリナ抽出ケーキの5%の様々な粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図13)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も、選択した抽出物について測定した。液滴サイズの値のほとんどは、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(スピルリナ粗抽出物)の乳化活性およびそれらが形成するエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれとさらに比較した。本発明の抽出物および参照抽出物は、同じ抽出条件を使用して得られ、それらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。興味深いことに、いくつかのスピルリナ抽出物は、参照オートムギ抽出物で得られたものよりも小さい液滴サイズのエマルションを形成する有意な能力を示した(図13)。これは、メチルテトラヒドロフラン(DV98新鮮=1.9μm)、イソプロパノール(0.7μm)、およびエタノール(0.7μm)を使用して得たスピルリナ粗抽出物の場合である。それらのすべてが、7日間十分に安定なエマルションを形成した。
例14.乾燥Ulva spp.海藻(大型藻類)からのS/L抽出による粗抽出物の生成
200グラムの乾燥Ulva spp.(アオサ(sea lettuce))を、2Lの溶媒(エタノール、エタノール:水、90:10;イソプロパノール、アセトン、およびメチルテトラヒドロフラン)と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。したがって固体/液体の重量比は1/10であった。次いで抽出媒体を、ブフナー器具上のAF06フィルタープレート(保持率:15~35μm)でわずかに吸引しながら濾過し、海藻残留物を除去した。残留物が乾燥すると、溶液を約1時間冷却させた。室温に達したら、2回目の濾過を、同じシステムでAF31H濾紙(保持率:5~12μm)を用いて行い、得られた抽出物に生物材料由来の任意の潜在的固体粒子が含まれていないことを確実にした。次いで、ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から減圧下での蒸発により除去した。固体抽出物を凍結乾燥し、乾燥物質は典型的には>90%に達した。乾燥物質の測定のために、抽出物を25℃のオーブンに入れた。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップをこのしきい値を超えるまで繰り返した。
図14は、エタノール:水、90:10(3.0%)の最大値を使用して、様々な試験溶媒で得られた質量収率を示す。最小収率は、アセトン(0.3%)およびエタノール(0.4%)で得られた。
200グラムの乾燥Ulva spp.(アオサ(sea lettuce))を、2Lの溶媒(エタノール、エタノール:水、90:10;イソプロパノール、アセトン、およびメチルテトラヒドロフラン)と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。したがって固体/液体の重量比は1/10であった。次いで抽出媒体を、ブフナー器具上のAF06フィルタープレート(保持率:15~35μm)でわずかに吸引しながら濾過し、海藻残留物を除去した。残留物が乾燥すると、溶液を約1時間冷却させた。室温に達したら、2回目の濾過を、同じシステムでAF31H濾紙(保持率:5~12μm)を用いて行い、得られた抽出物に生物材料由来の任意の潜在的固体粒子が含まれていないことを確実にした。次いで、ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から減圧下での蒸発により除去した。固体抽出物を凍結乾燥し、乾燥物質は典型的には>90%に達した。乾燥物質の測定のために、抽出物を25℃のオーブンに入れた。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップをこのしきい値を超えるまで繰り返した。
図14は、エタノール:水、90:10(3.0%)の最大値を使用して、様々な試験溶媒で得られた質量収率を示す。最小収率は、アセトン(0.3%)およびエタノール(0.4%)で得られた。
例15.Ulva spp.海藻(大型藻類)の粗抽出物の極性脂質の特性評価
極性脂質の定量化は、セクション9(極性脂質含有量を測定するためのHPLC-ELSD法)で上述したように、逆相HPLCにより実施した。33.9%および45.5%の極性脂質含有量は、メチルテトラヒドロフランおよびエタノール:水、90:10を(それぞれ)抽出溶媒として使用して得たUlva sp.の粗抽出物で達成された。
極性脂質の定量化は、セクション9(極性脂質含有量を測定するためのHPLC-ELSD法)で上述したように、逆相HPLCにより実施した。33.9%および45.5%の極性脂質含有量は、メチルテトラヒドロフランおよびエタノール:水、90:10を(それぞれ)抽出溶媒として使用して得たUlva sp.の粗抽出物で達成された。
例16.Ulva spp.海藻(大型藻類)の1%の粗抽出物の、連続相を有するpH3.5の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての使用
Ulva spp.(アオサ)の1%の粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH3.5で安定化させた。この抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図15)。Ulva spp.抽出物の液滴サイズの値は、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。さらに、液滴サイズの経時的な増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(Ulva spp.)の乳化活性およびそれらが形成したエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれとさらに比較した。本発明の抽出物および参照抽出物は、同じ溶媒(エタノール:水、90:10)を使用して得られ、抽出条件およびそれらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。興味深いことに、Ulva spp.抽出物は、参照オートムギ抽出物(5.0μm)で得られたものよりも小さい液滴サイズ(DV98新鮮=2.6μm)のエマルションを形成する、有意な能力を示した(図15)。さらに、アオサ属抽出物で安定化されたエマルションは、室温で1日保存した後も物理的に安定であった(2.6対2.8μm)。
Ulva spp.(アオサ)の1%の粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH3.5で安定化させた。この抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図15)。Ulva spp.抽出物の液滴サイズの値は、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。さらに、液滴サイズの経時的な増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(Ulva spp.)の乳化活性およびそれらが形成したエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれとさらに比較した。本発明の抽出物および参照抽出物は、同じ溶媒(エタノール:水、90:10)を使用して得られ、抽出条件およびそれらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。興味深いことに、Ulva spp.抽出物は、参照オートムギ抽出物(5.0μm)で得られたものよりも小さい液滴サイズ(DV98新鮮=2.6μm)のエマルションを形成する、有意な能力を示した(図15)。さらに、アオサ属抽出物で安定化されたエマルションは、室温で1日保存した後も物理的に安定であった(2.6対2.8μm)。
例17.Ulva spp.海藻(大型藻類)の1%の粗抽出物の、連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての使用。
Ulva spp.(アオサ)の1%の粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。この抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図16)。Ulva spp.抽出物の液滴サイズの値は、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。さらに、液滴サイズの経時的な増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(Ulva spp.)の乳化活性およびそれらが形成したエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれとさらに比較した。本発明の抽出物および参照抽出物は、同じ溶媒(エタノール:水、90:10)を使用して得られ、抽出条件およびそれらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。Ulva spp.抽出物は、参照オートムギ抽出物(2.7μm)で得られたものよりも小さい液滴サイズ(DV98新鮮=2.5μm)のエマルションを形成する有意な能力を示したが(図16)、ただし、1日保存後のエマルションの安定性は、本発明の抽出物とオートムギ参照の間で同等であった(それぞれ2.8対2.7μm)。
Ulva spp.(アオサ)の1%の粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。この抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(図16)。Ulva spp.抽出物の液滴サイズの値は、2つの独立した反復の平均±標準偏差として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。さらに、液滴サイズの経時的な増加が大きいほど、安定性は低くなる。
本発明の抽出物(Ulva spp.)の乳化活性およびそれらが形成したエマルションの安定性を、乳化剤の既知の供給源である外皮除去したオートムギ穀粒から得た参照抽出物のそれとさらに比較した。本発明の抽出物および参照抽出物は、同じ溶媒(エタノール:水、90:10)を使用して得られ、抽出条件およびそれらの乳化活性は完全に同一のプロトコルで測定した。Ulva spp.抽出物は、参照オートムギ抽出物(2.7μm)で得られたものよりも小さい液滴サイズ(DV98新鮮=2.5μm)のエマルションを形成する有意な能力を示したが(図16)、ただし、1日保存後のエマルションの安定性は、本発明の抽出物とオートムギ参照の間で同等であった(それぞれ2.8対2.7μm)。
例18.乾燥Agarophyton chilensisからのS/L抽出による粗抽出物の生成
200グラムの乾燥Agarophyton chilensis海藻を、2Lの溶媒(エタノール;エタノール:水、90:10;エタノール:水、80:20;エタノール:水、70:30;エタノール:水、60:40;およびアセトン)と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。したがって固体/液体の重量比は1/10であった。次いで抽出媒体を、ブフナー器具上のAF06フィルタープレート(保持率:15~35μm)でわずかに吸引しながら濾過し、海藻残留物を除去した。残留物が乾燥すると、溶液を約1時間冷却させた。室温に達したら、2回目の濾過を、同じシステムでAF31H濾紙(保持率:5~12μm)を用いて行い、得られた抽出物に生物材料由来の任意の潜在的固体粒子が含まれていないことを確実にした。次いで、ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から減圧下での蒸発により除去した。固体抽出物を凍結乾燥し、乾燥物質は典型的には>90%に達した。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れた。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップをこのしきい値を超えるまで繰り返した。
図17は、エタノール:水、60:40(10.2%)、エタノール:水、80:20(9.7%)、およびエタノール:水、70:30(9.3%)の最大値を使用して、様々な試験溶媒で得られた質量収率を示す。最小収率はアセトン(0.1%)で得られた。
200グラムの乾燥Agarophyton chilensis海藻を、2Lの溶媒(エタノール;エタノール:水、90:10;エタノール:水、80:20;エタノール:水、70:30;エタノール:水、60:40;およびアセトン)と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。したがって固体/液体の重量比は1/10であった。次いで抽出媒体を、ブフナー器具上のAF06フィルタープレート(保持率:15~35μm)でわずかに吸引しながら濾過し、海藻残留物を除去した。残留物が乾燥すると、溶液を約1時間冷却させた。室温に達したら、2回目の濾過を、同じシステムでAF31H濾紙(保持率:5~12μm)を用いて行い、得られた抽出物に生物材料由来の任意の潜在的固体粒子が含まれていないことを確実にした。次いで、ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から減圧下での蒸発により除去した。固体抽出物を凍結乾燥し、乾燥物質は典型的には>90%に達した。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れた。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップをこのしきい値を超えるまで繰り返した。
図17は、エタノール:水、60:40(10.2%)、エタノール:水、80:20(9.7%)、およびエタノール:水、70:30(9.3%)の最大値を使用して、様々な試験溶媒で得られた質量収率を示す。最小収率はアセトン(0.1%)で得られた。
例19.Agarophyton chilensisの粗抽出物の極性脂質の特性評価
極性脂質の定量化は、セクション9(極性脂質含有量を測定するためのHPLC-ELSD法)で上述したように、逆相HPLCにより実施した。結果は、抽出溶媒としてエタノールを使用して得たAgarophyton chilensisの粗抽出物について、最高の極性脂質含有量(>50%)に達したことを示す(図18)。対照的に、少なくとも10%の水を有するエタノール:水混合物を使用して得た粗抽出物は、少量の極性脂質(<10%)をもたらした。
極性脂質の定量化は、セクション9(極性脂質含有量を測定するためのHPLC-ELSD法)で上述したように、逆相HPLCにより実施した。結果は、抽出溶媒としてエタノールを使用して得たAgarophyton chilensisの粗抽出物について、最高の極性脂質含有量(>50%)に達したことを示す(図18)。対照的に、少なくとも10%の水を有するエタノール:水混合物を使用して得た粗抽出物は、少量の極性脂質(<10%)をもたらした。
例20.Agarophyton chilensisの5%のエタノール:水(80:20)粗抽出物の、連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての使用
抽出溶媒としてエタノール:水(80:20)混合物を使用して例18で得たAgarophyton chilensisの5%の粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。このエマルションの液滴サイズ(DV98)は、乳化直後ならびに1日および7日保存後に、それぞれ3.4、3.6、および3.6μmであった。材料および方法のセクション12の記載のように計算した対応する乳化スコア(ES)は5.4であり、これは、ESが20以下の抽出物は乳化作用剤と見なされるため、非常に良好な乳化活性を示している。
抽出溶媒としてエタノール:水(80:20)混合物を使用して例18で得たAgarophyton chilensisの5%の粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。このエマルションの液滴サイズ(DV98)は、乳化直後ならびに1日および7日保存後に、それぞれ3.4、3.6、および3.6μmであった。材料および方法のセクション12の記載のように計算した対応する乳化スコア(ES)は5.4であり、これは、ESが20以下の抽出物は乳化作用剤と見なされるため、非常に良好な乳化活性を示している。
例21.エタノール:水(80:20)粗抽出物の、S/L抽出による乾燥アルファルファ(Medicago sativa)からの生成、ならびにpH3.5および7での10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての、その5%の使用
乾燥アルファルファを、フードマシーンで粗挽きにした。200または150gの各乾燥植物を秤量し、ビーカー内の1200~1800mlの溶媒で抽出した。エタノールと水の混合物(80:20vol:vol)を、抽出溶媒として使用した。抽出は、500rpmで動作する撹拌機を備えたガラスビーカーで、60℃で3時間実施した。濾過(Spectum EBEP-25-3-UK)後、抽出物を再度、WhatmanTM濾紙(CAT N 1003-110)を用いて濾過し、ロータリーエバポレーターで濃縮した。最後に抽出物を、使用するまで冷蔵庫で4℃にて保存した。各測定および乳化のために、抽出物を固形分20%に調整した。11.8%の質量収率が得られた。
表5は、エタノール:水(80:20)アルファルファ粗抽出物の、アルファルファ安定化エマルション中の液滴サイズの値を示す。pH3.5および7で少なくとも7日間安定なエマルションを得ることができた。この抽出物の極性脂質含有量は18%であった。この抽出物のサポニン含有量は23.6%であった。
乾燥アルファルファを、フードマシーンで粗挽きにした。200または150gの各乾燥植物を秤量し、ビーカー内の1200~1800mlの溶媒で抽出した。エタノールと水の混合物(80:20vol:vol)を、抽出溶媒として使用した。抽出は、500rpmで動作する撹拌機を備えたガラスビーカーで、60℃で3時間実施した。濾過(Spectum EBEP-25-3-UK)後、抽出物を再度、WhatmanTM濾紙(CAT N 1003-110)を用いて濾過し、ロータリーエバポレーターで濃縮した。最後に抽出物を、使用するまで冷蔵庫で4℃にて保存した。各測定および乳化のために、抽出物を固形分20%に調整した。11.8%の質量収率が得られた。
表5は、エタノール:水(80:20)アルファルファ粗抽出物の、アルファルファ安定化エマルション中の液滴サイズの値を示す。pH3.5および7で少なくとも7日間安定なエマルションを得ることができた。この抽出物の極性脂質含有量は18%であった。この抽出物のサポニン含有量は23.6%であった。
表5.pH3.5(エマルションタイプ3)および7(エマルションタイプ4)で調製されたエマルションで得られた液滴サイズであり、5%のエタノール:水(80:20)アルファルファ抽出物を、固形分20%に調整したエマルションに使用、新鮮な試料および7日後。
例22.エタノール:水(90:10)粗抽出物の、乾燥アルファルファ(Medicago sativa)からのS/L抽出による生成、および連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての、その5%の使用。
200グラムの乾燥アルファルファを、2Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出は、材料および方法のセクション3で上述したように実施した。次に、1%の得られた抽出物(C04)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。デュプリケートで測定したこのエマルションのDV98は、乳化直後は(それぞれ)2.3と2.2であり、1日保存後は2.1と2.2μmであった。これらの結果は、粗抽出物が安定なエマルションを形成する能力を有したことを示す。
200グラムの乾燥アルファルファを、2Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出は、材料および方法のセクション3で上述したように実施した。次に、1%の得られた抽出物(C04)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。デュプリケートで測定したこのエマルションのDV98は、乳化直後は(それぞれ)2.3と2.2であり、1日保存後は2.1と2.2μmであった。これらの結果は、粗抽出物が安定なエマルションを形成する能力を有したことを示す。
例23.乾燥微細藻類バイオマスからのS/L抽出による、粗抽出物の生成
200グラムの乾燥微細藻類バイオマス(イソクリシス、ナンノクロロプシス、テトラセルミス、Chlorella sorokiniana、Chlorella vulgaris、およびChlorella zofingensis)を、2Lの溶媒(エタノール;エタノール:水、90:10;エタノール:水、80:20;アセトン;酢酸エチル、イソプロパノール)と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。したがって固体/液体の重量比は1/10であった。次に抽出媒体を、ブフナー器具上でわずかに吸引しながら濾過し、植物残留物を除去した。いくつかの特定のケースでは、抽出物を冷却させたときに濾液に沈殿物が観察された。これらの場合、2回目の濾過を行った。すべての抽出物について、ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から減圧下での蒸発により除去した。次に固体抽出物を凍結乾燥し、乾燥物質は典型的には>90%に達した。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れた。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップをこのしきい値を超えるまで繰り返した。
200グラムの乾燥微細藻類バイオマス(イソクリシス、ナンノクロロプシス、テトラセルミス、Chlorella sorokiniana、Chlorella vulgaris、およびChlorella zofingensis)を、2Lの溶媒(エタノール;エタノール:水、90:10;エタノール:水、80:20;アセトン;酢酸エチル、イソプロパノール)と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。したがって固体/液体の重量比は1/10であった。次に抽出媒体を、ブフナー器具上でわずかに吸引しながら濾過し、植物残留物を除去した。いくつかの特定のケースでは、抽出物を冷却させたときに濾液に沈殿物が観察された。これらの場合、2回目の濾過を行った。すべての抽出物について、ロータリーエバポレーターを使用して、溶媒を抽出物から減圧下での蒸発により除去した。次に固体抽出物を凍結乾燥し、乾燥物質は典型的には>90%に達した。乾燥物質の測定のために、抽出物を125℃のオーブンに入れた。乾燥物質が<90%と判明した場合は常に、凍結乾燥ステップをこのしきい値を超えるまで繰り返した。
例24.微細藻類からの0.1%の粗抽出物の、連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての使用
例23で得られた微細藻類からの0.1%の異なる粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)ならびに、1日および7日保存後のその変動により推定した(表6)。ほとんどの抽出物について、液滴サイズの値は、2つの独立した反復の平均として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。さらに、液滴サイズの経時的な増加が大きいほど、安定性は低くなる。表6はまた、材料および方法のセクション12で上述したように計算した乳化スコア(ES)を示す。ESが20以下の粗抽出物は乳化作用剤と見なされ、以下の表6に示されている。抽出溶媒は、すべての抽出物について表6に記載されている。Chlorella vulgaris(Z54、Z55、Z56およびZ57)およびChlorella sorokiniana(Z25およびZ26)から得られた抽出物は別にして、すべての粗抽出物は、光独立栄養的に成長した微細藻類から得られた。
例23で得られた微細藻類からの0.1%の異なる粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)ならびに、1日および7日保存後のその変動により推定した(表6)。ほとんどの抽出物について、液滴サイズの値は、2つの独立した反復の平均として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。さらに、液滴サイズの経時的な増加が大きいほど、安定性は低くなる。表6はまた、材料および方法のセクション12で上述したように計算した乳化スコア(ES)を示す。ESが20以下の粗抽出物は乳化作用剤と見なされ、以下の表6に示されている。抽出溶媒は、すべての抽出物について表6に記載されている。Chlorella vulgaris(Z54、Z55、Z56およびZ57)およびChlorella sorokiniana(Z25およびZ26)から得られた抽出物は別にして、すべての粗抽出物は、光独立栄養的に成長した微細藻類から得られた。
表6.液滴サイズ(DV98)およびESによって測定された、pH7の水中油型エマルションにおける微細藻類粗抽出物(0.1%)の乳化活性。データはESの降順に並べ替えられている。いくつかのケースにおいて、極性脂質含有量(材料および方法のセクション9に記載のように決定)は、乾燥物質の%で示される。
例25.微細藻類からの1%の粗抽出物の、連続相を有するpH3.5の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての使用
例23で得られた微細藻類からの1%の異なる粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH3.5で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(表7)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も測定した。ほとんどの液滴サイズの値は、2つの独立した反復の平均として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。表7はまた、材料および方法のセクション12で上述したように計算した乳化スコア(ES)を示す。ESが20以下の粗抽出物は乳化作用剤と見なされ、以下の表7に示されている。抽出溶媒は、すべての抽出物について表7に記載されている。Chlorella vulgaris(Z54、Z55、Z56およびZ57)、Chlorella sorokiniana(Z24、Z25およびZ26)、およびChlorella zofingensis(Z27)から得られた抽出物は別として、すべての粗抽出物は、光独立栄養的に成長した微細藻類から得られた。
例23で得られた微細藻類からの1%の異なる粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH3.5で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(表7)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も測定した。ほとんどの液滴サイズの値は、2つの独立した反復の平均として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。表7はまた、材料および方法のセクション12で上述したように計算した乳化スコア(ES)を示す。ESが20以下の粗抽出物は乳化作用剤と見なされ、以下の表7に示されている。抽出溶媒は、すべての抽出物について表7に記載されている。Chlorella vulgaris(Z54、Z55、Z56およびZ57)、Chlorella sorokiniana(Z24、Z25およびZ26)、およびChlorella zofingensis(Z27)から得られた抽出物は別として、すべての粗抽出物は、光独立栄養的に成長した微細藻類から得られた。
表7.液滴サイズ(DV98)およびESによって測定された、pH3.5の水中油型エマルションにおける微細藻類粗抽出物(1%)の乳化活性。データはESの降順に並べ替えられている。いくつかのケースにおいて、極性脂質含有量(材料および方法のセクション9に記載のように決定)は、乾燥物質の%で示される。
例26.微細藻類からの1%の粗抽出物の、連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての使用
例23で得られた微細藻類からの1%の異なる粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(表8)。選択した抽出物について、より長い保存期間(7日間)にわたる変動も測定した。ほとんどの液滴サイズの値は、2つの独立した反復の平均として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。表8はまた、材料および方法のセクション12で上述したように計算した乳化スコア(ES)を示す。ESが20以下の粗抽出物は乳化作用剤と見なされ、以下の表8に示されている。抽出溶媒は、すべての抽出物について表8に記載されている。Chlorella vulgaris(Z19、Z21、Z55、Z56およびZ57)、Chlorella sorokiniana(Z25およびZ26)、およびChlorella zofingensis(Z27)から得られた抽出物は別として、すべての粗抽出物は、光独立栄養的に成長した微細藻類から得られた。
例23で得られた微細藻類からの1%の異なる粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(表8)。選択した抽出物について、より長い保存期間(7日間)にわたる変動も測定した。ほとんどの液滴サイズの値は、2つの独立した反復の平均として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。表8はまた、材料および方法のセクション12で上述したように計算した乳化スコア(ES)を示す。ESが20以下の粗抽出物は乳化作用剤と見なされ、以下の表8に示されている。抽出溶媒は、すべての抽出物について表8に記載されている。Chlorella vulgaris(Z19、Z21、Z55、Z56およびZ57)、Chlorella sorokiniana(Z25およびZ26)、およびChlorella zofingensis(Z27)から得られた抽出物は別として、すべての粗抽出物は、光独立栄養的に成長した微細藻類から得られた。
表8.液滴サイズ(DV98)およびESによって測定された、pH7の水中油型エマルションにおける微細藻類粗抽出物(1%)の乳化活性。データはESの降順に並べ替えられている。いくつかのケースにおいて、極性脂質含有量(材料および方法のセクション9に記載のように決定)は、乾燥物質の%で示される。
例27.微細藻類からの5%の粗抽出物の、連続相を有するpH3.5の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての使用
例23で得られた微細藻類からの5%の異なる粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH3.5で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(表9)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も測定した。ほとんどの液滴サイズの値は、2つの独立した反復の平均として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。表9はまた、材料および方法のセクション12で上述したように計算した乳化スコア(ES)を示す。ESが20以下の粗抽出物は乳化作用剤と見なされ、以下の表9に示されている。抽出溶媒は、すべての抽出物について表9に記載されている。Chlorella vulgaris(Z55、Z56およびZ57)、およびChlorella sorokiniana(Z24およびZ25)から得られた抽出物は別として、すべての粗抽出物は、光独立栄養的に成長した微細藻類から得られた。
例23で得られた微細藻類からの5%の異なる粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH3.5で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(表9)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も測定した。ほとんどの液滴サイズの値は、2つの独立した反復の平均として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。表9はまた、材料および方法のセクション12で上述したように計算した乳化スコア(ES)を示す。ESが20以下の粗抽出物は乳化作用剤と見なされ、以下の表9に示されている。抽出溶媒は、すべての抽出物について表9に記載されている。Chlorella vulgaris(Z55、Z56およびZ57)、およびChlorella sorokiniana(Z24およびZ25)から得られた抽出物は別として、すべての粗抽出物は、光独立栄養的に成長した微細藻類から得られた。
表9.液滴サイズ(DV98)およびESによって測定された、pH3.5の水中油型エマルションにおける微細藻類粗抽出物(5%)の乳化活性。データはESの降順に並べ替えられている。いくつかのケースにおいて、極性脂質含有量(材料および方法のセクション9に記載のように決定)は、乾燥物質の%で示される。
例28.微細藻類からの5%の粗抽出物の、連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての使用
例23で得られた微細藻類からの5%の異なる粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(表10)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も測定した。ほとんどの液滴サイズの値は、2つの独立した反復の平均として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。表10はまた、材料および方法のセクション12で上述したように計算した乳化スコア(ES)を示す。ESが20以下の粗抽出物は乳化作用剤と見なされ、以下の表10に示されている。抽出溶媒は、すべての抽出物について表10に記載されている。Chlorella vulgaris(Z54、Z55、Z56およびZ57)、およびChlorella sorokiniana(Z24およびZ25)から得られた抽出物は別として、すべての粗抽出物は、光独立栄養的に成長した微細藻類から得られた。
例23で得られた微細藻類からの5%の異なる粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。これらの抽出物の乳化活性は、新鮮なエマルションの液滴サイズ(DV98)および1日の保存におけるその変動により推定した(表10)。より長い保存期間(7日間)にわたる変動も測定した。ほとんどの液滴サイズの値は、2つの独立した反復の平均として表される。液滴サイズが小さいほど、乳化活性は高くなる。時間の経過に伴う液滴サイズの増加が大きいほど、安定性は低くなる。表10はまた、材料および方法のセクション12で上述したように計算した乳化スコア(ES)を示す。ESが20以下の粗抽出物は乳化作用剤と見なされ、以下の表10に示されている。抽出溶媒は、すべての抽出物について表10に記載されている。Chlorella vulgaris(Z54、Z55、Z56およびZ57)、およびChlorella sorokiniana(Z24およびZ25)から得られた抽出物は別として、すべての粗抽出物は、光独立栄養的に成長した微細藻類から得られた。
表10.液滴サイズ(DV98)およびESによって測定された、pH7の水中油型エマルションにおける微細藻類粗抽出物(5%)の乳化活性。データはESの降順に並べ替えられている。いくつかのケースにおいて、極性脂質含有量(材料および方法のセクション9に記載のように決定)は、乾燥物質の%で示される。
例29.乾燥Dunaliella salina微細藻類からのS/L抽出による粗抽出物の生成、および連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての、その1%および5%の使用
200グラムの乾燥Dunaliella salinaを、2Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出は、材料および方法のセクション3で上述したように実施した。次に、1%の得られた抽出物(C03)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。このエマルションのDV98をデュプリケートで測定したところ、乳化直後に2.4および2.4μmであり、1日保存した後も2.4および2.4μmであり、粗抽出物が安定なエマルションを形成する能力を有していたことを示す。
200グラムの乾燥Dunaliella salinaを、2Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出は、材料および方法のセクション3で上述したように実施した。次に、1%の得られた抽出物(C03)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。このエマルションのDV98をデュプリケートで測定したところ、乳化直後に2.4および2.4μmであり、1日保存した後も2.4および2.4μmであり、粗抽出物が安定なエマルションを形成する能力を有していたことを示す。
例30.乾燥した紅茶葉(Camellia sinensis)からのS/L抽出による粗抽出物の生成、および連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての、その1%の使用
200グラムの乾燥紅茶葉を、2Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出は、材料および方法のセクション3で上述したように実施した。次に、1%の得られた抽出物(Z58)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は、乳化直後に11.4μmであり、粗抽出物がエマルションを形成する能力を有していたことを示す。極性脂質含有量の定量化は、セクション9に記載したように抽出物で達成され、6.9%の値が得られた。
200グラムの乾燥紅茶葉を、2Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出は、材料および方法のセクション3で上述したように実施した。次に、1%の得られた抽出物(Z58)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は、乳化直後に11.4μmであり、粗抽出物がエマルションを形成する能力を有していたことを示す。極性脂質含有量の定量化は、セクション9に記載したように抽出物で達成され、6.9%の値が得られた。
例31.乾燥ローズマリー葉(Rosmarinus officinalis)からのS/L抽出による粗抽出物の生成、および連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての、その5%の使用
200グラムの乾燥ローズマリー葉を、2Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出は、材料および方法のセクション3で上述したように実施した。次に、5%の得られた抽出物(C02)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は、乳化直後および1日保存後にそれぞれ5.11と3.9μmであり、粗抽出物が安定なエマルションを形成する能力を有していたことを示す。
200グラムの乾燥ローズマリー葉を、2Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出は、材料および方法のセクション3で上述したように実施した。次に、5%の得られた抽出物(C02)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は、乳化直後および1日保存後にそれぞれ5.11と3.9μmであり、粗抽出物が安定なエマルションを形成する能力を有していたことを示す。
例32.乾燥グリーンピース鞘(Pisum sativum)からのS/L抽出による粗抽出物の生成、および連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての、その1%の使用
200グラムの乾燥グリーンピース鞘を、2Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出は、材料および方法のセクション3で上述したように実施した。次に、1%の得られた抽出物(Z67)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は、乳化直後に5.7μmであり、粗抽出物がエマルションを形成する能力を有していたことを示す。
200グラムの乾燥グリーンピース鞘を、2Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出は、材料および方法のセクション3で上述したように実施した。次に、1%の得られた抽出物(Z67)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は、乳化直後に5.7μmであり、粗抽出物がエマルションを形成する能力を有していたことを示す。
例33.新鮮なスプリングオニオン(Allium fistulosum)バイオマスからの直接S/L抽出による粗抽出物の生成、および連続相を有するpH3.5の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての、その1%の使用
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。100グラムの新鮮なスプリングオニオンを秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に加え、抽出を、セクション4(新鮮な材料の直接S/L抽出)で上記したように実施した。
次に、1%の得られた抽出物(Z42グリーン)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH3.5の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は、乳化直後ならびに1日および7日保存後に、それぞれ3.5、3.1および164.9μmであった。材料および方法のセクション12の記載のように計算した対応するESは14.5であり、これは、ESが20以下の抽出物は乳化作用剤と見なされるため、少なくとも1日の保存後での顕著な乳化活性を実証する。7日保存後の液滴サイズの増加は、エマルションの粘度の単純な増加により解決されるであろう。
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。100グラムの新鮮なスプリングオニオンを秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に加え、抽出を、セクション4(新鮮な材料の直接S/L抽出)で上記したように実施した。
次に、1%の得られた抽出物(Z42グリーン)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH3.5の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は、乳化直後ならびに1日および7日保存後に、それぞれ3.5、3.1および164.9μmであった。材料および方法のセクション12の記載のように計算した対応するESは14.5であり、これは、ESが20以下の抽出物は乳化作用剤と見なされるため、少なくとも1日の保存後での顕著な乳化活性を実証する。7日保存後の液滴サイズの増加は、エマルションの粘度の単純な増加により解決されるであろう。
例34.新鮮なブロッコリーラーブ(Brassica ruvo)バイオマスからの間接S/L抽出による粗抽出物の生成、および連続相を有するpH3.5の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての、その1%の使用
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。100グラムの新鮮なブロッコリーラーブを秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に加え、抽出を、セクション5(新鮮な材料の間接S/L抽出)で上記したように実施した。
次に、1%の得られた抽出物(Z49)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH3.5の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は乳化直後に3.6μmであり、抽出物がエマルションを形成できたことを実証する。
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。100グラムの新鮮なブロッコリーラーブを秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に加え、抽出を、セクション5(新鮮な材料の間接S/L抽出)で上記したように実施した。
次に、1%の得られた抽出物(Z49)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH3.5の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は乳化直後に3.6μmであり、抽出物がエマルションを形成できたことを実証する。
例35.新鮮なニンジン葉(Daucus carota)バイオマスからの間接S/L抽出による粗抽出物の生成、および連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての、その1%の使用
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。100グラムの新鮮なニンジン葉を秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に加え、抽出を、セクション5(新鮮な材料の間接S/L抽出)で上記したように実施した。
次に、1%の得られた抽出物(Z51)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は乳化直後に5.2μmであり、抽出物がエマルションを形成できたことを実証する。
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。100グラムの新鮮なニンジン葉を秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に加え、抽出を、セクション5(新鮮な材料の間接S/L抽出)で上記したように実施した。
次に、1%の得られた抽出物(Z51)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は乳化直後に5.2μmであり、抽出物がエマルションを形成できたことを実証する。
例36.新鮮なホウレンソウ葉からの間接S/L抽出による粗抽出物の生成、および連続相を有するpH3.5の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての、その1%の使用
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。残留物を回収し、高温の溶媒に加えて、上記のセクション5(新鮮な材料の間接S/L抽出)で記載したように抽出へと進めた。得られた粗抽出物を、さらに抽出物Z48と呼ぶ。
別の抽出では、250gの同じ新鮮なホウレンソウ葉を、調理用ジュース抽出器を使用して室温で5分間搾汁し、次いでジュースを濾過によって清澄化し、得られた濾過ケーキをジュース抽出器から回収した残留物と共にプールし、油圧プレスを使用して15barで圧搾して、できるだけ多くの残留ジュースを取り除いた。次に乾燥ケーキを、セクション5(新鮮な材料の間接S/L抽出)で記載したように抽出した。得られた粗抽出物を、さらに抽出物Z69と呼ぶ。
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。残留物を回収し、高温の溶媒に加えて、上記のセクション5(新鮮な材料の間接S/L抽出)で記載したように抽出へと進めた。得られた粗抽出物を、さらに抽出物Z48と呼ぶ。
別の抽出では、250gの同じ新鮮なホウレンソウ葉を、調理用ジュース抽出器を使用して室温で5分間搾汁し、次いでジュースを濾過によって清澄化し、得られた濾過ケーキをジュース抽出器から回収した残留物と共にプールし、油圧プレスを使用して15barで圧搾して、できるだけ多くの残留ジュースを取り除いた。次に乾燥ケーキを、セクション5(新鮮な材料の間接S/L抽出)で記載したように抽出した。得られた粗抽出物を、さらに抽出物Z69と呼ぶ。
次に、1%の両方の粗抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH3.5の水中油型エマルションを安定化させた。
抽出物Z48については、このエマルションのDV98は、乳化直後ならびに1日および7日保存後にそれぞれ4.6、5.6および40.2μmであった。材料および方法のセクション12で上記したように計算した対応するESは14.5であり、これは、ESが20以下の抽出物は乳化作用剤と見なされるため、少なくとも1日の保存後における顕著な乳化活性を実証する。
抽出物Z69については、乳化直後ならびに1日および7日保存後のエマルションのDV98は、それぞれ3.6、3.4および21μmであり、乳化性能はわずかに優れていた。対応するESは14.6であった。
どちらの場合も、7日保存後の液滴サイズの増加は、エマルションの粘度の単純な増加によって解決されるであろう。
抽出物Z48については、このエマルションのDV98は、乳化直後ならびに1日および7日保存後にそれぞれ4.6、5.6および40.2μmであった。材料および方法のセクション12で上記したように計算した対応するESは14.5であり、これは、ESが20以下の抽出物は乳化作用剤と見なされるため、少なくとも1日の保存後における顕著な乳化活性を実証する。
抽出物Z69については、乳化直後ならびに1日および7日保存後のエマルションのDV98は、それぞれ3.6、3.4および21μmであり、乳化性能はわずかに優れていた。対応するESは14.6であった。
どちらの場合も、7日保存後の液滴サイズの増加は、エマルションの粘度の単純な増加によって解決されるであろう。
例37.新鮮なスプリングオニオン(Allium fistulosum)バイオマスからの直接S/L抽出による粗抽出物の生成、および連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての、その1%の使用
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。100グラムの新鮮なスプリングオニオンを秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に加え、抽出を、セクション4(新鮮な材料の直接S/L抽出)で上記したように実施した。
次に、1%の得られた抽出物(Z42グリーン)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は、乳化直後ならびに1日および7日保存後に、それぞれ3.3、3.2および3.0μmであった。材料および方法のセクション12で上記したように計算した対応するESは5.1であり、これは、ESが20以下の抽出物は乳化作用剤と見なされるため、非常に良好な乳化活性を実証する。
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。100グラムの新鮮なスプリングオニオンを秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に加え、抽出を、セクション4(新鮮な材料の直接S/L抽出)で上記したように実施した。
次に、1%の得られた抽出物(Z42グリーン)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は、乳化直後ならびに1日および7日保存後に、それぞれ3.3、3.2および3.0μmであった。材料および方法のセクション12で上記したように計算した対応するESは5.1であり、これは、ESが20以下の抽出物は乳化作用剤と見なされるため、非常に良好な乳化活性を実証する。
例38.新鮮なセロリ葉(Apium graveolens)バイオマスからの直接S/L抽出による粗抽出物の生成、および連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての、その1%の使用
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。100グラムの新鮮なセロリ葉を秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に加え、抽出を、セクション4(新鮮な材料の直接S/L抽出)で上記したように実施した。
次に、1%の得られた抽出物(Z52)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は乳化直後に10.5μmであり、抽出物がエマルションを形成可能であったことを示す。
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。100グラムの新鮮なセロリ葉を秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に加え、抽出を、セクション4(新鮮な材料の直接S/L抽出)で上記したように実施した。
次に、1%の得られた抽出物(Z52)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は乳化直後に10.5μmであり、抽出物がエマルションを形成可能であったことを示す。
例39.新鮮なブロッコリーラーブ(Brassica ruvo)バイオマスからの直接S/L抽出による粗抽出物の生成、および連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての、その1%の使用
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。100グラムの新鮮なブロッコリーラーブを秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に加え、抽出を、セクション4(新鮮な材料の直接S/L抽出)で上記したように実施した。
次に、1%の得られた抽出物(Z44)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は乳化直後に4.5μmであり、抽出物がエマルションを形成可能であったことを示す。
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。100グラムの新鮮なブロッコリーラーブを秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に加え、抽出を、セクション4(新鮮な材料の直接S/L抽出)で上記したように実施した。
次に、1%の得られた抽出物(Z44)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は乳化直後に4.5μmであり、抽出物がエマルションを形成可能であったことを示す。
例40.新鮮なラディッシュ葉(Raphanus sativus)バイオマスからの直接S/L抽出による粗抽出物の生成、および連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての、その1%の使用
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。100グラムの新鮮なラディッシュ葉を秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に加え、抽出を、セクション4(新鮮な材料の直接S/L抽出)で上記したように実施した。
次に、1%の得られた抽出物(Z47)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は乳化直後に3.7μmであり、抽出物がエマルションを形成可能であったことを示す。
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。100グラムの新鮮なラディッシュ葉を秤量し、典型的調理用ブレンダー(Moulinex, France)で数分間適切に混合した。次に植物を高温の溶媒に加え、抽出を、セクション4(新鮮な材料の直接S/L抽出)で上記したように実施した。
次に、1%の得られた抽出物(Z47)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は乳化直後に3.7μmであり、抽出物がエマルションを形成可能であったことを示す。
例41.新鮮なホウレンソウ葉からの間接S/L抽出による粗抽出物の生成、および連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける乳化剤としての、その1%の使用
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。250グラムの新鮮なホウレンソウ葉を、調理用ジュース抽出器を使用して室温で5分間搾汁した。ジュースを濾過によって清澄化し、得られた濾過ケーキをジュース抽出器から回収した残留物と一緒にプールし、油圧プレスを使用して15barで圧縮して、残留ジュースを可能な限り除去した。次に乾燥ケーキを、セクション5(新鮮な材料での間接S/L抽出)で上記したように抽出した。得られた粗抽出物は、さらに抽出物Z69と呼ぶ。
次に、1%のこの抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は、乳化直後ならびに1日および7日保存後に、それぞれ4.0、4.3および6.1μmであった。材料および方法のセクション12で上記したように計算した対応するESは11.3であり、これは、ESが20以下の抽出物は乳化作用剤と見なされるため、顕著な乳化活性を実証する。
1リットルのエタノールを70℃に加熱した。250グラムの新鮮なホウレンソウ葉を、調理用ジュース抽出器を使用して室温で5分間搾汁した。ジュースを濾過によって清澄化し、得られた濾過ケーキをジュース抽出器から回収した残留物と一緒にプールし、油圧プレスを使用して15barで圧縮して、残留ジュースを可能な限り除去した。次に乾燥ケーキを、セクション5(新鮮な材料での間接S/L抽出)で上記したように抽出した。得られた粗抽出物は、さらに抽出物Z69と呼ぶ。
次に、1%のこの抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH7の水中油型エマルションを安定化させた。このエマルションのDV98は、乳化直後ならびに1日および7日保存後に、それぞれ4.0、4.3および6.1μmであった。材料および方法のセクション12で上記したように計算した対応するESは11.3であり、これは、ESが20以下の抽出物は乳化作用剤と見なされるため、顕著な乳化活性を実証する。
例42.乾燥ホウレンソウからのS/L抽出によるエタノール:水(90:10)粗抽出物の生成、粉末活性炭または木炭でコーティングされたフィルタープレートによるその脱色、および連続相を有するpH3.5または7の10%水中油型エマルションにおける、その1%または5%の使用
Y06については、200gの乾燥ホウレンソウを、3Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出は、材料および方法のセクション3で上記したように実施した(S/L比:1:15)。次に、1%および5%の得られた抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH3.5および7の水中油型エマルションを安定化させた。
Y13については同じプロセスを適用したが、ただし、最初の溶媒パスの濾液を乾燥する前に、新しいエタノール:水(90:10)混合物を用いた2回目のパスを、最初のパスと同じ条件(還流および175rpmでの機械的撹拌の下で2時間、S/L比:1:15)で行った。次に、1%および5%の得られた抽出物を使用して、上記のエマルションをpH3.5および7で安定化させた。
Y10およびY15については、Y06について前述したものと同じ1パス抽出プロトコルを適用したが、ただし、材料と方法のセクション7に記載のように、粉末状の木炭を使用した脱色ステップを最後に実施した。
Y06については、200gの乾燥ホウレンソウを、3Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出は、材料および方法のセクション3で上記したように実施した(S/L比:1:15)。次に、1%および5%の得られた抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られたpH3.5および7の水中油型エマルションを安定化させた。
Y13については同じプロセスを適用したが、ただし、最初の溶媒パスの濾液を乾燥する前に、新しいエタノール:水(90:10)混合物を用いた2回目のパスを、最初のパスと同じ条件(還流および175rpmでの機械的撹拌の下で2時間、S/L比:1:15)で行った。次に、1%および5%の得られた抽出物を使用して、上記のエマルションをpH3.5および7で安定化させた。
Y10およびY15については、Y06について前述したものと同じ1パス抽出プロトコルを適用したが、ただし、材料と方法のセクション7に記載のように、粉末状の木炭を使用した脱色ステップを最後に実施した。
Y09については、Y13について前述したものと同じ2パス抽出プロトコルを適用したが、ただし、材料と方法のセクション7に記載のように、粉末状の木炭を使用した脱色ステップを最後に実施した。
Y37については、Y06について前述したものと同じ1パス抽出プロトコルを適用したが、ただし、材料と方法のセクション8に記載のように、木炭でコーティングしたR55Sフィルタープレートを使用した脱色ステップを最後に実施した。
Y41については、Y06について前述したものと同じ1パス抽出プロトコルを適用したが、ただし、材料と方法のセクション8に記載のように、木炭でコーティングしたFiltroxフィルタープレートを使用した脱色ステップを最後に実施した。極性脂質の定量化(材料および方法のセクション9に記載の方法)も、精製抽出物Y41で達成され、27.6%の含有量が見出された。
Y37については、Y06について前述したものと同じ1パス抽出プロトコルを適用したが、ただし、材料と方法のセクション8に記載のように、木炭でコーティングしたR55Sフィルタープレートを使用した脱色ステップを最後に実施した。
Y41については、Y06について前述したものと同じ1パス抽出プロトコルを適用したが、ただし、材料と方法のセクション8に記載のように、木炭でコーティングしたFiltroxフィルタープレートを使用した脱色ステップを最後に実施した。極性脂質の定量化(材料および方法のセクション9に記載の方法)も、精製抽出物Y41で達成され、27.6%の含有量が見出された。
1%エマルションの色は、ホウケイ酸チューブセル内のCIELAB色空間における反射により、分光光度計(Konica Minolta CM-5)で測定した。エマルションは、測定セルに高さ10mmまで入れた。
すべてのホウレンソウ抽出物は、植物の光合成活性部分(すなわち葉)から得たため、緑色である。この色は、1%抽出物で調製されたエマルションでも見ることができた。Sweoat PL40を参照(オートムギ油)として調製したエマルションは、緑色を示さなかった。したがって、色差ΔE*を式1に従って計算した:ここでL1 *、a1 *、およびb1 *は、オートムギ油を含むエマルションにおいて測定され、L2 *、a2 *、およびb2 *は、エタノール:水(90:10)ホウレンソウで安定化されたエマルションにおいて測定された。
式1:ΔEab *=√(L2 *-L1 *)2+(a2 *-a1 *)2+(b2 *-b1 *)2
すべてのホウレンソウ抽出物は、植物の光合成活性部分(すなわち葉)から得たため、緑色である。この色は、1%抽出物で調製されたエマルションでも見ることができた。Sweoat PL40を参照(オートムギ油)として調製したエマルションは、緑色を示さなかった。したがって、色差ΔE*を式1に従って計算した:ここでL1 *、a1 *、およびb1 *は、オートムギ油を含むエマルションにおいて測定され、L2 *、a2 *、およびb2 *は、エタノール:水(90:10)ホウレンソウで安定化されたエマルションにおいて測定された。
式1:ΔEab *=√(L2 *-L1 *)2+(a2 *-a1 *)2+(b2 *-b1 *)2
図19は、ΔEの減少を、適用された脱色(精製)プロトコルの関数として示す。ΔEが、増加量の木炭の添加およびR55Sフィルタープレートの使用と共に減少するという事実は、得られるエマルションが白っぽいオートムギ油参照に近づくことを意味する。活性炭フィルターシートR55Sで精製した後でも、エマルション間に目に見える違いはまだ存在するが、色は緑色から黄色に変化し、L値は明らかに増加し(67から87へ)、試料がより白いことを実証する。
図20では、乳化性能が、実験の再現性の範囲内で、精製により悪影響を受けていないことがわかる。これは、乳化分子がまったく、または少量のみしか、活性炭に吸着されていないこと、および適切な選択性のフィルター材料が選択されたことを意味する。
図20では、乳化性能が、実験の再現性の範囲内で、精製により悪影響を受けていないことがわかる。これは、乳化分子がまったく、または少量のみしか、活性炭に吸着されていないこと、および適切な選択性のフィルター材料が選択されたことを意味する。
例43.乾燥スピルリナからのS/L抽出によるエタノール:水(90:10)粗抽出物の生成、粉末活性炭によるその脱色、および、連続相を有するpH3.5または7の10%水中油型エマルションにおける、その5%の使用
Y16については、200gの乾燥スピルリナを、2Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出は、材料および方法のセクション3で上記したように実施した。次に、5%の得られた抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH3.5および7で安定化させた。
Y18については、同じプロセスを適用したが、ただし、最初の溶媒パスの濾液を乾燥する前に、新しいエタノール:水(90:10)混合物を用いた2回目のパスを最初のパスと同じ条件(還流および175rpmでの機械的撹拌の下で2時間)で実施した。次に、5%の得られた抽出物を使用して、上記のエマルションをpH3.5および7で安定化させた。
Y17およびY19については、それぞれY16およびY18について前述したものと同じプロトコルを適用したが、ただし、脱色ステップは、材料および方法のセクション7に記載のように実施した。
これらのスピルリナ抽出物のうち、Y16およびY17の極性脂質含有量は、材料および方法のセクション9に記載のように測定し、それぞれ26.4および27.6%の値が得られた。
図21は、液滴サイズが精製によってわずかに増加することを示す。ただし、精製された抽出物で達成される液滴サイズはまだ非常に小さく(約1.5μm)、エマルションは時間が経過しても非常に安定である。したがって、精製された抽出物は非常に優れた乳化剤である。
Y16については、200gの乾燥スピルリナを、2Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出は、材料および方法のセクション3で上記したように実施した。次に、5%の得られた抽出物を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH3.5および7で安定化させた。
Y18については、同じプロセスを適用したが、ただし、最初の溶媒パスの濾液を乾燥する前に、新しいエタノール:水(90:10)混合物を用いた2回目のパスを最初のパスと同じ条件(還流および175rpmでの機械的撹拌の下で2時間)で実施した。次に、5%の得られた抽出物を使用して、上記のエマルションをpH3.5および7で安定化させた。
Y17およびY19については、それぞれY16およびY18について前述したものと同じプロトコルを適用したが、ただし、脱色ステップは、材料および方法のセクション7に記載のように実施した。
これらのスピルリナ抽出物のうち、Y16およびY17の極性脂質含有量は、材料および方法のセクション9に記載のように測定し、それぞれ26.4および27.6%の値が得られた。
図21は、液滴サイズが精製によってわずかに増加することを示す。ただし、精製された抽出物で達成される液滴サイズはまだ非常に小さく(約1.5μm)、エマルションは時間が経過しても非常に安定である。したがって、精製された抽出物は非常に優れた乳化剤である。
表11.精製プロトコルの、スピルリナ抽出物の比色特性に対する影響。ΔEは、オートムギ油で調製した参照エマルションと比較して計算する。
表11は、スピルリナ抽出物に精製法を適用した場合に、どのようにL*が増加してΔE値が減少するかを示し、これは、得られたエマルションが白っぽいオートムギ油参照に近づくことを意味する。オートムギ油エマルションと10%の木炭で抽出物を精製した後のエマルションの間には、まだ目に見える違いがあるが、目による色の知覚は緑色から黄色へと変化し、L値は明らかに増加し(約54から約83へ)、これは試料がより白くなることを意味する。
例44.乾燥パセリ葉(Petroselinum crispum)からのS/L抽出によるエタノール:水(90:10)粗抽出物の生成、活性炭でコーティングされたフィルタープレートによるその脱色、および連続相を有するpH7の10%水中油型エマルションにおける、その1%の使用
200グラムの乾燥パセリ葉(Petroselinum crispum)を、2Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出および脱色は、材料および方法のセクション8で上記したように行った。次に、1%の得られた抽出物(Y45)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。このエマルションのDV98は乳化直後に15.8μmであり、粗抽出物がエマルションを形成する能力を有していたことを示す。極性脂質含有量の定量化は、セクション9で記載したように抽出物で達成され、5.6%の値が得られた。
次に、脱色したパセリ抽出物の比色特性を、乾燥の前に、Spectramagic NXからの装置を透過モードで用いて測定した。
200グラムの乾燥パセリ葉(Petroselinum crispum)を、2Lのエタノール:水(90:10)混合物と、還流および機械的撹拌(175rpm)の下で2時間混合した。抽出および脱色は、材料および方法のセクション8で上記したように行った。次に、1%の得られた抽出物(Y45)を使用して、中鎖トリグリセリドを油相として作られた水中油型エマルションをpH7で安定化させた。このエマルションのDV98は乳化直後に15.8μmであり、粗抽出物がエマルションを形成する能力を有していたことを示す。極性脂質含有量の定量化は、セクション9で記載したように抽出物で達成され、5.6%の値が得られた。
次に、脱色したパセリ抽出物の比色特性を、乾燥の前に、Spectramagic NXからの装置を透過モードで用いて測定した。
表12は、L値が11から93まで明確に増加することを示し、これは、試料がより暗色ではなくなることを意味する。b値も19から53に変化し、試料がより黄色くなっていることを示す。a値が一定であることは驚くべきことのように思えるかもしれないが、Lおよびbの大きな変化は、試料における緑色の知覚の減少も説明可能である。
表12.パセリの粗抽出物vs脱色抽出物の比色特性
表12.パセリの粗抽出物vs脱色抽出物の比色特性
例45.ホウレンソウからの1%の粗抽出物の、水相を有するpH7の10%油中水型エマルションにおける、乳化剤としての使用
図22では、市販の大豆レシチン(Topcithin, Cargill)で調製したエマルションのDV98を、ホウレンソウからの3つの植物精製抽出物と比較して示す。驚くべきことに、ホウレンソウ抽出物(90%エタノールで抽出)は、水中油型乳化剤としてだけでなく、油中水型乳化剤としても優れた性能を発揮している。炭シートFiltroxで精製されたホウレンソウ抽出物の初期の液滴サイズは、大豆レシチンの場合よりも明らかに小さい。すべての精製抽出物について、1日後の液滴サイズは、大豆レシチンと同等かそれよりも小さい。油中水型および水中油型エマルションを安定化できる多能な乳化剤は、様々なエマルションの種類、分散相含有量、または異なる極性の油等、様々な用途に柔軟に使用できるため、非常に有利である。
図22では、市販の大豆レシチン(Topcithin, Cargill)で調製したエマルションのDV98を、ホウレンソウからの3つの植物精製抽出物と比較して示す。驚くべきことに、ホウレンソウ抽出物(90%エタノールで抽出)は、水中油型乳化剤としてだけでなく、油中水型乳化剤としても優れた性能を発揮している。炭シートFiltroxで精製されたホウレンソウ抽出物の初期の液滴サイズは、大豆レシチンの場合よりも明らかに小さい。すべての精製抽出物について、1日後の液滴サイズは、大豆レシチンと同等かそれよりも小さい。油中水型および水中油型エマルションを安定化できる多能な乳化剤は、様々なエマルションの種類、分散相含有量、または異なる極性の油等、様々な用途に柔軟に使用できるため、非常に有利である。
例46.1%のホウレンソウ精製抽出物を使用したコーヒークリーマーの調製
本発明による一連のクリーマーエマルションは、以下のステップを実施することにより調製した:
1.既知量(表13)のココナッツオイル(Kristal, AAK)と、例37aにおける極性脂質を含有する既知量のホウレンソウ抽出物を、300rpmおよび50℃で動作する磁気撹拌機ホットプレート(IKA, RET Laboratory)を備えた容器内で混合して、油相を調製すること;
2.既知量のエンドウマメタンパク質(Pisane c9, Cosucra)を既知量の水に、オーバーヘッドスターラーで300rpmで撹拌しつつ、40℃で30分間溶解して、水相を調製すること。
3.既知量のオートムギシロップ(Natu-Oat 35, Meurens)と既知量のオートムギ粉(Sweoat P19, Swedish Oat Fiber)を水相に加え、オーバーヘッドスターラー(Heidolph, Hei-Torque)で300rpmで撹拌しつつ、室温でさらに30分間水和する。
本発明による一連のクリーマーエマルションは、以下のステップを実施することにより調製した:
1.既知量(表13)のココナッツオイル(Kristal, AAK)と、例37aにおける極性脂質を含有する既知量のホウレンソウ抽出物を、300rpmおよび50℃で動作する磁気撹拌機ホットプレート(IKA, RET Laboratory)を備えた容器内で混合して、油相を調製すること;
2.既知量のエンドウマメタンパク質(Pisane c9, Cosucra)を既知量の水に、オーバーヘッドスターラーで300rpmで撹拌しつつ、40℃で30分間溶解して、水相を調製すること。
3.既知量のオートムギシロップ(Natu-Oat 35, Meurens)と既知量のオートムギ粉(Sweoat P19, Swedish Oat Fiber)を水相に加え、オーバーヘッドスターラー(Heidolph, Hei-Torque)で300rpmで撹拌しつつ、室温でさらに30分間水和する。
4.既知量のジェランガム(Kelcogel CG-HA, CP Kelco)を、既知量のグアーガム(Keystone(登録商標)7555 Guar Gum, Main Street Ingredients)および既知量の氷砂糖(Magyar Cukor)と組み合わせ、この混合物を水相に、室温でオーバーヘッドスターラーで300rpmで撹拌しつつ、混合する。
5.水相を60℃に加熱し、8,000rpmで90秒間作動するローター/ステーターミキサー(Kinematica, PT-DA 3030-6060)を使用しつつ油相を添加して、プレエマルションを得る。
6.プレエマルションの乳化を、350barの第1段階バルブ圧力および50barの第2段階バルブ圧力で作動する2段階高圧ホモジナイザー(GEA, Lab Homogenizer Panda Plus 2000)を1回通過させることにより実施し、最終的なエマルションを得ること。
7.最終エマルションを、95℃で12分間作動するウォーターバスで低温殺菌すること。
全ての例において、ステップ5は水中油型エマルションをもたらした。
5.水相を60℃に加熱し、8,000rpmで90秒間作動するローター/ステーターミキサー(Kinematica, PT-DA 3030-6060)を使用しつつ油相を添加して、プレエマルションを得る。
6.プレエマルションの乳化を、350barの第1段階バルブ圧力および50barの第2段階バルブ圧力で作動する2段階高圧ホモジナイザー(GEA, Lab Homogenizer Panda Plus 2000)を1回通過させることにより実施し、最終的なエマルションを得ること。
7.最終エマルションを、95℃で12分間作動するウォーターバスで低温殺菌すること。
全ての例において、ステップ5は水中油型エマルションをもたらした。
表13.クリーマーエマルションの組成
表14.コーヒークリーマーの液滴サイズ。次いで液滴サイズ分布の体積加重平均直径D[4,3]およびDv90を、測定機器に実装されたソフトウェアを用いて計算した。Dv90は、母集団(体積)の90%がこの値を下回るところの直径として定義される。
表14では、ホウレンソウ精製抽出物の添加により、コーヒークリーマーの液滴サイズが減少したことがわかる。これは、より長い貯蔵寿命および、コーヒーのホワイトニング効果が向上するという利点がある。
Claims (34)
- 大型藻類、微細藻類、光合成細菌、および/または植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、およびそれらの組み合わせから得られるかまたは取得可能な、極性脂質に富む抽出物。
- 植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、大型藻類、微細藻類および/または光合成細菌が、食品等級として認められているか、またはGRAS(一般に安全と認められる)として認められている、請求項1に記載の抽出物。
- 光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)が、以下の1または2以上の植物からである、請求項1また2に記載の抽出物:アルファルファ、ホウレンソウ、ブロッコリーラーブ、ブロッコリー、レッドラディッシュ、ガラナ、ローズマリー、セージ、タイム、ミント、バジル、エゴマ、アジョワン、アンゼリカ、アニス、アサフェティダ、キャラウェイ、ニンジン、セロリ、チャービル、コリアンダー、クミン、ディル、フェンネル、ラベージ、シャク(cow parsley)、パセリ、パースニップ、シーホリー(sea holly)、シルフィウム(silphium oregano)、レタス、フェヌグリーク、レンズマメ、ルピナス、エンドウマメ、ニンニク、ワケギ、ニラネギ、チャイブ、およびラッキョウ、タマネギ、グリーンオニオン、ビートの根、パセリ、イエルバ・マテ、エンダイブ、クレソン、イラクサ、ニンジン、サツマイモ、チンゲンサイ、クウシンサイ。
- 微細藻類が以下の1つ以上から選択される、請求項1または2に記載の抽出物:クロレラ、Chysophyceae、Xantophyceae、Baccilariophyceae、Dinophyceae、Rodophyceae、Phaeophyceae、Chlorophyceae、Prasinophyceae、Cryptophyceae、Crypthecodinium、Cylindrothec、Botrycoccus、ドナリエラ(例えばDunaliella salina)、Euglena gracilis、イソクリシス、ナンノクロロプシス、ネオクロリス、Nitzschia Scenedesmus、クロロボトリス、Eustigmatos、Phaeodactylum、Porphyridium、Pseudostaurastrum、Schizochytrium、テトラセルミス、Vischeria、Monodopsis、Ellipsoidion、Pseudocharaciopsis。
- 光合成細菌が、以下の属の1つ以上から選択される、請求項1または2に記載の抽出物:スピルリナ(Arthrospira、例えばArthrospira platensis、Arthrospira maxima)、Limnospira(Limnospira platensis)、Synechocystis、Nostoc、Cyanothece、Aphanizomenon(例えばAphanizomenon flosaquae)。
- 大型藻類が、以下の種の1つ以上から選択される、請求項1または2に記載の抽出物:Ascophyllum nodosum、Fucus serratu、F. vesiculosus、Himanthalia elongata、Undaria pinnatifida、Laminaria digitata、L. saccharina、L. japonica、Alaria esculenta、Palmaria palmata(ダルス)、Porphyra umbilicalis、P. tenera、P. yezoensis、P. dioica、P. purpurea、P. laciniata、P. leucostica、Chondrus crispus、Gracilaria verrucosa、Lithothamnium calcareum、Enteromorpha spp.、およびUlva spp.。
- 抽出物が、メチルテトラヒドロフラン抽出物またはヒドロメチルテトラヒドロフラン抽出物、アセタート抽出物またはヒドロアセタート抽出物、イソプロパノールまたはヒドロイソプロパノール抽出物、アセトンまたはヒドロアセトン抽出物、クロロホルム抽出物、メタノールまたはヒドロメタノール抽出物、エタノールまたはヒドロエタノール抽出物、またはそれらの混合物から選択される、請求項1~6のいずれかに記載の抽出物。
- 植物の光合成器官(単数または複数)および/または組織(単数または複数)、大型藻類、微細藻類および/または光合成細菌が、原材料および/または使用済み材料である、請求項1~7のいずれかに記載の抽出物。
- 抽出物が、極性脂質に富む粗抽出物または極性脂質に富む精製抽出物から選択される、請求項1~8のいずれかに記載の抽出物。
- 抽出物が、抽出物の総重量に基づき、少なくとも5%、少なくとも10%の極性脂質、少なくとも20%の極性脂質、少なくとも25wt%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、例えば少なくとも60%の極性脂質を含む、請求項9に記載の粗抽出物。
- 精製抽出物が、精製抽出物の総重量に基づき、少なくとも10%の極性脂質、少なくとも15wt%、少なくとも20wt%、少なくとも30wt%、少なくとも35wt%、少なくとも40wt%、少なくとも45wt%、少なくとも50wt%、少なくとも55wt%、少なくとも60wt%、少なくとも65wt%、少なくとも70wt%、少なくとも75wt%、少なくとも80wt%、少なくとも85wt%、少なくとも90wt%、少なくとも95wt%、または少なくとも99wt%の極性脂質を含む、請求項9のいずれかに記載の極性脂質に富む精製抽出物。
- 精製抽出物が、活性炭および/または炭素フィルタープレートを使用して得られた、請求項9~11のいずれかに記載の極性脂質に富む精製抽出物。
- 改善された官能特性、例えば中性臭、淡い色および/またはオフテイストがないなどを有する、請求項9~12のいずれかに記載の極性脂質に富む精製抽出物。
- 白色に相当するかまたは白色に近いL1*、a1*、およびb1*を有する、請求項9~13のいずれかに記載の極性脂質に富む精製抽出物。
- 極性脂質相が以下を含む、請求項1~14のいずれかに記載の抽出物:ガラクトシルアシルグリセロール(例えばジガラクトシルジアシルグリセロール(DGDG)、モノガラクトシルジアシルグリセロール(MGDG)、ジガラクトシルモノアシルグリセロール(DGMG)、またはモノガラクトシルモノアシルグリセロール(MGMG))、リン脂質(例えばホスファチジルコリン(PC)、ホスファチジルエタノールアミン(PE)またはホスファチジルグリセロール(PG))、リゾリン脂質(例えばPC、PE、またはPGのモノアシル型)、硫黄脂質(例えばスルホキノボシルジアシルグリセロール(SQDG))、ベタイン脂質および/またはフランベースの脂質、またはそれらの酸化生成物、例えば、エポキシド基、ペルオキシド基、ケトン基もしくはヒドロキシル基などの少なくとも1つの酸化された基を含有する上述のすべての極性脂質。
- 極性脂質相が、極性脂質相の総重量に基づき、少なくとも5wt%、少なくとも8wt%、少なくとも10wt%、少なくとも11wt%、少なくとも12wt%、少なくとも20wt%、または少なくとも30wt%のガラクトシルアシルグリセロールを含む、請求項1~15のいずれかに記載の抽出物。
- 極性脂質相が、極性脂質画分の総重量に基づき、少なくとも5wt%の硫黄脂質(例えばスルホキノボシルジアシルグリセロール(SQDG))を、別の態様においては少なくとも8wt%、例えば少なくとも10wt%、少なくとも11wt%、少なくとも12wt%、少なくとも20%、または少なくとも30%の硫黄脂質(例えばスルホキノボシルジアシルグリセロール(SQDG))を含む、請求項1~16のいずれかに記載の抽出物。
- 精製抽出物が、10%未満の糖、タンパク質、ペプチド、クロロフィルおよび/またはワックス、または好ましくは5%未満のそれらを、またはより好ましくは1%未満のそれらを、例えば0.01%未満のそれらを含有する、請求項9~17のいずれかに記載の極性脂質に富む精製抽出物。
- 乳化剤として使用するための、請求項1~18のいずれかに記載の抽出物。
- エマルションを安定化するための、請求項1~19のいずれかに記載の抽出物の使用。
- 請求項1~19のいずれかに記載の少なくとも1つの抽出物を乳化作用剤として含み、任意に他の乳化作用剤を含まない、エマルション。
- 抽出物が、約0.1~約10wt%の濃度で使用される、請求項19に記載の抽出物または請求項20に記載の使用。
- 乳化作用剤が、0.1~10wt%で使用される、請求項21に記載のエマルション。
- エマルションが、油中水型エマルションおよび水中油型エマルションからなる群から選択される、請求項21または23のいずれかに記載のエマルション。
- 以下を含む、エマルションの調製方法:
a)水相の成分を混合すること;
b)脂質相の成分を混合すること;
c)請求項1~19のいずれかに記載の1つ以上の抽出物を、水相または脂質相の一方または両方に分散させること;および
d)2つの相を均質化してエマルションを形成すること。 - 請求項25に記載の方法に従って得られる、エマルション。
- エマルションが、油中水型エマルションおよび水中油型エマルションからなる群から選択される、請求項26に記載のエマルション。
- エマルションが、合成または人工の乳化剤および/または構造化剤を含まない、請求項21、22、23、25または27のいずれかに記載のエマルション。
- エマルションが、pHとして約2~10、例えば約3~7を有する、請求項21、22、23、25、27または28のいずれかに記載のエマルション。
- 液滴サイズが、0.05~50マイクロメートルの間、より好ましくは0.1~10マイクロメートルの間、さらにより好ましくは1~5マイクロメートルの間に含まれている、請求項21、22、23、25、27、28または29のいずれかに記載のエマルション。
- 液滴サイズが、周囲温度(25℃)での少なくとも1日または少なくとも7日の保存の間、安定したままである、請求項21、22、23、25、27、28、29または30のいずれかに記載のエマルション。
- 請求項21、22、23、25、27、28、29、30または31のいずれかに記載のエマルションを含む、ヒトまたは動物用の食品または飲料製品、栄養補助食品、ニュートラシューティカル製剤、フレグランスまたはフレーバー剤、医薬または獣医学用製剤、ワイン醸造学または化粧品製剤。
- 少なくとも1つの、請求項1~19のいずれかに記載の乳化剤抽出物を含む、ヒトまたは動物用の食品または飲料製品、栄養補助食品、ニュートラシューティカル製剤、フレグランスまたはフレーバー剤、医薬または獣医学用製剤、ワイン醸造学または化粧品製剤。
- ソース、マヨネーズ、スナック、アイスクリームおよびデザート、乳製品(植物性ミルクなど)、飲料、ソーセージおよび調味料、加工製品(肉)、肉類似物、コーヒークリーマー、焼き菓子、スプレッドまたはマーガリンから選択される、請求項32または33に記載の食品または飲料。
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