JP2022542863A - 抗ｍＧｌｕＲ５抗体及びその使用 - Google Patents

抗ｍＧｌｕＲ５抗体及びその使用 Download PDF

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Abstract

本発明は、概して、抗体及び抗原結合抗体断片、好ましくは、ヒト化、キメラ、及びヒト抗体及び抗原結合抗体断片、かかる抗体及び抗原結合抗体断片を含有する組成物又はそれを発現する細胞、例えば、Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、又はＮＫ細胞などの免疫細胞に関し、ここでかかる抗体及び抗原結合抗体断片はｍＧｌｕＲ５に特異的に結合する。本発明はまた、抗体、抗原結合抗体断片、及びその組成物の治療的及び診断的使用にも関する。

Description

関連出願
本願は、２０１９年７月２４日に出願された米国仮特許出願第６２／８７７，８８９号明細書（代理人整理番号１１４３２５７．００８２０１）に対する優先権を主張するものであり、その全体が参照により本明細書に援用される。
配列表の開示
本願には、ＥＦＳ－ＷｅｂからＡＳＣＩＩ形式で提出された配列表が含まれ、この配列表は本明細書によって全体として参照により援用される。２０２０年７月６日に作成された前記ＡＳＣＩＩ複製物は、「１１４３２５７ｏ００８２１３．ｔｘｔ」という名称で、サイズが２１６，１４８バイトである。
本発明は、概して、抗体及びその抗原結合断片、好ましくはヒト化、キメラ、及びヒト抗体及びその抗原結合断片、並びにかかる抗体及びその抗原結合断片を含有する組成物に関し、ここでかかる抗体及びその抗原結合断片は、ｍＧｌｕＲ５に特異的に結合し、好ましくはｍＧｌｕＲ５の効果に拮抗するものである。本発明は更に、抗体、抗原結合断片、及びその組成物についての治療的及び診断的使用に関する。本発明は、加えて、片頭痛、胃食道逆流症、過敏性腸症候群、及び末梢又は中枢神経系におけるｍＧｌｕＲ５活性が関わる他の疾患を治療するための予防法又は治療法としての本抗体及びその抗原結合断片の特別な使用に関する。
代謝型グルタミン酸受容体５（ｍＧｌｕＲ５）は、中枢神経系（ＣＮＳ）と、一次侵害受容求心性ニューロンの末梢終末を含めた末梢との両方の神経に発現するグルタミン酸結合ＧＰＣＲである。これはグルタミン酸に結合し、グルタミン酸は、非必須アミノ酸であり、増殖細胞の生体エネルギー基質であり、並びに生合成、生体エネルギー、及び代謝のシグナル伝達経路に能動的に関与する興奮性神経伝達物質である。ｍＧｌｕＲ５及び共役したＧｑ Ｇタンパク質が活性化すると、ホスホリパーゼＣ、イノシトール、及び１，４，５－三リン酸／ジアシルグリセロールが関わるシグナル伝達カスケードが惹起され、またホスホ－細胞外シグナル関連キナーゼ１／２（ｐ－ＥＲＫ）も産生されるようになる。ｍＧｌｕＲ５の構成には、大型のＮ末端２ローブ型細胞外ドメイン（ＥＣＤ）と、それに続く二量化及び活性化に関与するシステインリッチドメイン、７個のαヘリックス膜貫通ドメイン、及び細胞内細胞質尾部ドメインが関わる（Ｗｉｌｌａｒｄ ＳＳ，Ｋｏｏｃｈｅｋｐｏｕｒ Ｓ．Ｉｎｔ Ｊ Ｂｉｏｌ Ｓｃｉ．２０１３；９（９）：９４８－５９．）。ｍＧｌｕＲ５は、とりわけ、痛覚の伝達、片頭痛、胃食道逆流症（ＧＥＲＤ）、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、過活動膀胱（ＯＡＢ）／尿失禁、脆弱Ｘ症候群（ＦＸＳ）、不安、薬物中毒、及びパーキンソン病を含め、幾つもの病的過程に関係があるとされている。
これらの病的状態の多くを治療するため小分子ｍＧｌｕＲ５阻害薬が開発されているが、その成否は様々である。特にそのうちの一つである２－メチル－６－フェニルエチニルピリジンヒドロクロリド（ＭＰＥＰ）は、数多くの前臨床モデルで使用され、ｍＧｌｕＲ５を阻害する治療可能性を実証している。治療用小分子ｍＧｌｕＲ５阻害薬もまた開発されており、初期段階のヒト臨床試験での試験成績は良好であったが、医薬品承認取得の成功には至っていない。小分子ｍＧｌｕＲ５阻害薬は、多くの場合に許容できない副作用及び毒性に起因して、承認取得には成功していないが、それでもなお、ｍＧｌｕＲ５の阻害が種々の疾患の治療において有効であり得るというエビデンスを提供している。
片頭痛については、小分子ｍＧｌｕＲ５阻害薬ＡＤＸ１００５９（Ａｄｄｅｘ）が、げっ歯類モデルで良好な結果を残し、ｍＧｌｕＲ５を遮断すると、神経性硬膜血管拡張及び三叉神経頸部複合体ニューロン活性化が弱まることを示した。第ＩＩａ相臨床試験では、統計的に有意な割合の患者が、治療２時間後及び２４時間後に無痛を得た。しかしながら、この薬物は７９％の患者に有害作用、主に浮動性めまいを引き起こし、その後の研究では肝毒性が認められた。Ｗａｕｎｇ ＭＷ ｅｔ ａｌ．Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ．２０１６；３（８）：５６０－７１を参照のこと。
ＧＥＲＤとのその関連性について言えば、ｍＧｌｕＲ５は末梢胃迷走神経求心性終末に発現し、拮抗薬は、一過性下部食道括約筋弛緩（ＴＬＥＳＲ）の強力な阻害薬である（Ｆｒｉｓｂｙ ＣＬ ｅｔ ａｌ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．２００５；１２９（３）：９９５－１００４）。ＡＤＸ１００５９は、第ＩＩ相臨床試験で良好な結果を達成した：高用量では、２４時間の食道内酸曝露量が低減され、逆流エピソードの回数及び持続時間が減少した（Ｋｅｙｗｏｏｄ Ｃ ｅｔ ａｌ．Ｇｕｔ．２００９；５８（９）：１１９２－９）。第１／２相臨床試験結果の成功はまた、別のｍＧｌｕＲ５小分子阻害薬であるマボグルラント／ＡＦＱ０５６（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）でも見られた。ＡＺＤ２０６６（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）の臨床試験では、ＴＬＥＳＲ及び逆流エピソードの有意な低減が実証されたが、高い割合の有害事象（例えば浮動性めまい）を伴った（Ｒｏｈｏｆ ＷＯ ｅｔ ａｌ．Ａｌｉｍｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ．２０１２；３５：１２３１－４２）。３つの薬物のいずれも、その後ＧＥＲＤでは中断されている。
ＩＢＳ、ＯＡＢ、尿失禁、及び膀胱内臓痛については、末梢投与した小分子阻害薬で良好な成績の前臨床データが得られている。ｍＧｌｕＲ５阻害薬は、ＭＰＥＰを含め、ラットにおいて結腸直腸拡張に対する反応を低減することが示されている。マボグルラントは結腸直腸拡張モデル及び膀胱拡張モデルで有効であることが示されたが、これはまた内臓運動反応も低減し、膀胱収縮も低減した。例えば、米国特許出願公開第２００７０２０３１６３号明細書及び同第２００８０２０７７４９号明細書並びに米国特許第７，５３１，５２９号明細書を参照のこと。
神経因性疼痛／末梢性ニューロパチー、炎症痛、及び術後痛の治療用に末梢投与される小分子を使用してもまた、何らか良好な成績の臨床及び前臨床結果が得られている。臨床試験ＮＣＴ００９３９０９４；Ｄｏｇｒｕｌ Ａ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ Ｌｅｔｔ．２０００；２９２：１１５－８；Ｂｈａｖｅ Ｇ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００１；４：４１７－２３；Ｗａｌｋｅｒ Ｋ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍ．２００１；４０：１－９；及びＺｈｕ ＣＺ ｅｔ ａｌ．Ｐａｉｎ．２００５；１１４：１９５－２０２を参照のこと。
従って、中枢及び末梢神経系の種々の疾患の治療におけるその前向きな結果にも関わらず、多くの小分子ｍＧｌｕＲ５阻害薬が高レベルの望ましくない副作用（浮動性めまい、精神病）を実証しており、その後は中断されている。
ｍＧｌｕＲ５の病的機能の多くは末梢ｍＧｌｕＲ５受容体の過活性に起因し得るが、遮断抗体はこの受容体に潜在的に到達可能である。従って、片頭痛、ＧＥＲＤ、ＩＢＳ及びＯＡＢなどの、不適切な末梢神経シグナル伝達が関わる疾患は、ｍＧｌｕＲ５遮断抗体で治療し得る。抗体を治療薬として利用するとまた、小分子阻害薬の望ましくない副作用を回避することもでき、これは、特定の理論に限定されるものではないが、オフターゲット効果及び／又はＣＮＳにおけるｍＧｌｕＲ５の阻害が原因であり得る。更に、抗体療法では、小分子阻害薬の化学構造が原因となる肝毒性の可能性が回避される。本発明は、インビトロ及びインビボの両方で活性が確認された、ｍＧｌｕＲ５に対する強力な遮断モノクローナル抗体（ｍＡｂ）、及び種々の疾患の治療におけるその使用に関する。
本発明は、ヒトｍＧｌｕＲ５に結合し、且つヒトｍＧｌｕＲ５に関連する少なくとも１つの生物学的効果（biological effect）に拮抗し（antagonize）、それを阻害し（inhibit）、それを中和し（neutralize）、又はそれを遮断する（block）単離抗体、又は抗原結合抗体断片（antigen-binding antibody fragment）を提供する。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、ヒト、ヒト化、二重特異性、多重特異性又はキメラ抗体又は抗原結合抗体断片である。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、Ｆａｂ；Ｆ（ａｂ’）２；Ｆａｂ’断片；Ｆｖ断片；単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片；Ｆｄ断片；ｄＡｂ断片；ダイアボディ；ナノボディ；二価ナノボディ；サメ可変ＩｇＮＡＲドメイン；ＶＨＨ抗体；ラクダ科動物抗体（camelid antibody）；キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、ＢｉＴＥ（Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｔ ｃｅｌｌ Ｅｎｇａｇｅｒ：二重特異性Ｔ細胞エンゲイジャー）及びミニボディから選択される抗原結合断片である。
一部の実施形態において、本抗体又は抗原結合抗体断片はＮ－グリコシル化されていない。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片はヒトｍＧｌｕＲ５をアロステリックに阻害する。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、任意選択で放射性リガンド結合阻害アッセイで測定したとき、ヒトｍＧｌｕＲ５への結合に関してキスカル酸（quisqualate）と競合しない。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片はヒトｍＧｌｕＲ１に結合しない。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片はラット及び／又はカニクイザルｍＧｌｕＲ５と交差反応する。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、ｐＥＲＫシグナル伝達アッセイで細胞質型ホスホ－ＥＲＫ（ｐＥＲＫ）の産生を阻害し、任意選択で、このｐＥＲＫシグナル伝達アッセイにおける本抗体又は抗原結合抗体断片のＩＣ５０は、１００ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、又は１０ｎＭ未満である。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、片頭痛に関連する症状を阻害する。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、対象に投与したとき、ウンベルロン（umbellulone）誘発性涙液分泌（lacrimation）及び／又はウンベルロン誘発性顔面温度上昇を阻害する。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、任意選択で末梢投与したとき、小分子ｍＧｌｕＲ５拮抗薬に関連する有害副作用、例えば、肝毒性及び／又は協調運動障害（impaired motor coordinatoin）を誘発しない。一部の実施形態において、協調運動障害副作用は浮動性めまい（dizziness）である。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、以下を含む：
（ｉ）配列番号９からなるＣＤＲ１配列；配列番号１１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号１７からなるＣＤＲ１配列；配列番号１９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｉｉ）配列番号２５からなるＣＤＲ１配列；配列番号２７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号３３からなるＣＤＲ１配列；配列番号３５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｉｉｉ）配列番号４１からなるＣＤＲ１配列；配列番号４３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号４９からなるＣＤＲ１配列；配列番号５１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号５３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｉｖ）配列番号５７からなるＣＤＲ１配列；配列番号５９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号６１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号６５からなるＣＤＲ１配列；配列番号６７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号６９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｖ）配列番号７３からなるＣＤＲ１配列；配列番号７５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号７７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号８１からなるＣＤＲ１配列；配列番号８３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号８５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｖｉ）配列番号８９からなるＣＤＲ１配列；配列番号９１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号９３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号９７からなるＣＤＲ１配列；配列番号９９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１０１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｖｉｉ）配列番号１０５からなるＣＤＲ１配列；配列番号１０７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１０９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号１１３からなるＣＤＲ１配列；配列番号１１５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１１７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｖｉｉｉ）配列番号１２１からなるＣＤＲ１配列；配列番号１２３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１２５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号１２９からなるＣＤＲ１配列；配列番号１３１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１３３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｉｘ）配列番号１３７からなるＣＤＲ１配列；配列番号１３９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１４１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号１４５からなるＣＤＲ１配列；配列番号１４７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１４９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘ）配列番号１５３からなるＣＤＲ１配列；配列番号１５５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１５７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号１６１からなるＣＤＲ１配列；配列番号１６３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１６５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｉ）配列番号１６９からなるＣＤＲ１配列；配列番号１７１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１７３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号１７７からなるＣＤＲ１配列；配列番号１７９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１８１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｉｉ）配列番号１８５からなるＣＤＲ１配列；配列番号１８７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１８９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号１９３からなるＣＤＲ１配列；配列番号１９５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１９７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｉｉｉ）配列番号２０１からなるＣＤＲ１配列；配列番号２０３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２０５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号２０９からなるＣＤＲ１配列；配列番号２１１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２１３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｉｖ）配列番号２１７からなるＣＤＲ１配列；配列番号２１９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２２１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号２２５からなるＣＤＲ１配列；配列番号２２７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２２９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｖ）配列番号２３３からなるＣＤＲ１配列；配列番号２３５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２３７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号２４１からなるＣＤＲ１配列；配列番号２４３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２４５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｖｉ）配列番号２４９からなるＣＤＲ１配列；配列番号２５１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２５３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号２５７からなるＣＤＲ１配列；配列番号２５９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２６１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｖｉｉ）配列番号２６５からなるＣＤＲ１配列；配列番号２６７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２６９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号２７３からなるＣＤＲ１配列；配列番号２７５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２７７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｖｉｉｉ）配列番号２８１からなるＣＤＲ１配列；配列番号２８３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２８５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号２８９からなるＣＤＲ１配列；配列番号２９１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２９３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｉｘ）配列番号２９７からなるＣＤＲ１配列；配列番号２９９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３０１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号３０５からなるＣＤＲ１配列；配列番号３０７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３０９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘ）配列番号３１３からなるＣＤＲ１配列；配列番号３１５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３１７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号３２１からなるＣＤＲ１配列；配列番号３２３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３２５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｉ）配列番号３２９からなるＣＤＲ１配列；配列番号３３１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３３３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号３３７からなるＣＤＲ１配列；配列番号３３９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３４１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｉｉ）配列番号３４５からなるＣＤＲ１配列；配列番号３４７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３４９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号３５３からなるＣＤＲ１配列；配列番号３５５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３５７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｉｉｉ）配列番号３６１からなるＣＤＲ１配列；配列番号３６３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３６５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号３６９からなるＣＤＲ１配列；配列番号３７１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３７３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｉｖ）配列番号３７７からなるＣＤＲ１配列；配列番号３７９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３８１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号３８５からなるＣＤＲ１配列；配列番号３８７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３８９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｖ）配列番号３９３からなるＣＤＲ１配列；配列番号３９５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３９７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号４０１からなるＣＤＲ１配列；配列番号４０３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４０５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｖｉ）配列番号４０９からなるＣＤＲ１配列；配列番号４１１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４１３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号４１７からなるＣＤＲ１配列；配列番号４１９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４２１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｖｉｉ）配列番号４２５からなるＣＤＲ１配列；配列番号４２７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４２９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号４３３からなるＣＤＲ１配列；配列番号４３５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４３７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｖｉｉｉ）配列番号４４１からなるＣＤＲ１配列；配列番号４４３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４４５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号４４９からなるＣＤＲ１配列；配列番号４５１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４５３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；又は
（ｘｘｉｘ）配列番号４５７からなるＣＤＲ１配列；配列番号４５９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４６１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号４６５からなるＣＤＲ１配列；配列番号４６７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４６９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、以下を含む：
（ｉ）配列番号７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号１５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｉｉ）配列番号２３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｉｉｉ）配列番号３９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号４７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｉｖ）配列番号５５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号６３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｖ）配列番号７１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号７９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｖｉ）配列番号８７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号９５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｖｉｉ）配列番号１０３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号１１１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｖｉｉｉ）配列番号１１９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号１２７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｉｘ）配列番号１３５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号１４３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘ）配列番号１５１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号１５９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｉ）配列番号１６７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号１７５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｉｉ）配列番号１８３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号１９１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｉｉｉ）配列番号１９９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号２０７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｉｖ）配列番号２１５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号２２３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｖ）配列番号２３１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号２３９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｖｉ）配列番号２４７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号２５５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｖｉｉ）配列番号２６３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号２７１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｖｉｉｉ）配列番号２７９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号２８７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｉｘ）配列番号２９５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３０３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘ）配列番号３１１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３１９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｉ）配列番号３２７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３３５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｉｉ）配列番号３４３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３５１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｉｉｉ）配列番号３５９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３６７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｉｖ）配列番号３７５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３８３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｖ）配列番号３９１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３９９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｖｉ）配列番号４０７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号４１５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｖｉｉ）配列番号４２３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号４３１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
（ｘｘｖｉｉｉ）配列番号４３９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号４４７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；又は
（ｘｘｉｘ）配列番号４５５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号４６３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖。
本発明は、更に、前述の配列特異的実施形態に係る抗体と競合する及び／又はそれと同じ又は重複するエピトープに結合する単離抗体又は抗原結合抗体断片に関する。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、モノクローナル抗体；単一特異性抗体；多特異性抗体；ヒト化抗体；四量体抗体；四価抗体；多重特異性抗体；単鎖抗体；ドメイン特異抗体；シングルドメイン抗体；ドメイン欠失抗体；ｓｃＦｃ融合タンパク質；キメラ抗体；合成抗体；組換え抗体；ハイブリッド抗体；突然変異抗体；ＣＤＲグラフト抗体；抗体断片；Ｆａｂ；Ｆ（ａｂ’）２；Ｆａｂ’断片；Ｆｖ断片；単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片；Ｆｄ断片；ｄＡｂ断片；ダイアボディ；ナノボディ；二価ナノボディ；サメ可変ＩｇＮＡＲドメイン；ＶＨＨ抗体；ラクダ科動物抗体；ＢｉＴＥ（Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｔ ｃｅｌｌ Ｅｎｇａｇｅｒ：二重特異性Ｔ細胞エンゲイジャー）、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）及びミニボディからなる群から選択される。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４ Ｆｃ領域を含む。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、エフェクター機能、半減期、タンパク質分解、又はグリコシル化のうちの少なくとも１つを改変するように修飾されているＦｃ領域を含む。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、エフェクター機能が低下し、Ｎ－グリコシル化が除去され、及び／又はＦｃ受容体結合が低下するように修飾されてもよい。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、ＨＴＲＦ又はＡｌｐｈａＬＩＳＡ蛍光アッセイで測定したとき、１０ｎＭ未満、５ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満のＥＣ５０でヒトｍＧｌｕＲ５の細胞外ドメインに結合する。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、加えて、以下の修飾の１つ以上を有する：
（ｉ）細胞毒性薬剤にコンジュゲートされる；
（ｉｉ）二重特異性抗体に含まれる；
（ｉｉｉ）多重特異性抗原結合タンパク質に含まれる；
（ｉｖ）標識にコンジュゲートされる；及び
（ｖ）別の治療用薬剤にコンジュゲートされる。
一部の実施形態において、標識は、化学発光標識、常磁性標識、ＭＲＩ造影剤、蛍光標識、生物発光標識、又は放射性標識である。
一部の実施形態において、本単離抗体又は抗原結合抗体断片は、片頭痛、胃食道逆流症（ＧＥＲＤ）、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、疼痛、過活動膀胱（ＯＡＢ）／尿失禁、自閉症スペクトラム障害の症状、精神障害、又は神経障害を有する対象を治療するのに好適である。
本発明は、加えて、前出の実施形態のいずれかに係る抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片に対して産生される、任意選択で、それが結合する抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片の１つ以上の生物学的効果を中和する抗イディオタイプ抗体又は抗原結合抗体断片を提供する。
本発明はまた、前記抗イディオタイプ抗体又は抗体断片を使用して、対象の前記抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片のインビボレベルをモニタするか、又は対象の前記抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片のインビボ効果を中和する方法も提供する。
別の態様において、本発明は、前述に係る抗イディオタイプ抗体又は抗原結合抗体断片に対して産生される抗抗イディオタイプ抗体又は抗原結合抗体断片であって、任意選択で、それが結合する抗イディオタイプ抗体又は抗原結合抗体断片を中和する抗抗イディオタイプ抗体又は抗原結合抗体断片を提供する。
本発明はまた、前述の実施形態のいずれかに係る単離抗体又は抗原結合抗体断片、又は前述の実施形態のいずれかに係る抗体又は抗原結合抗体断片を発現する細胞、例えば、Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞又はＮＫ細胞などの免疫細胞の薬学的に有効な量を含む医薬組成物であって、医薬希釈剤、担体、又は賦形剤を更に含む医薬組成物も提供する。
一部の実施形態において、前記抗イディオタイプ抗体又は抗体断片は末梢に投与される。
一部の実施形態において、前記抗イディオタイプ抗体又は抗体断片は中枢に投与される。
一部の実施形態において、前記抗イディオタイプ抗体又は抗体断片は末梢及び中枢に投与される。
本発明はまた、前述の実施形態のいずれかに係る抗体又は抗原結合抗体断片をコードする単離ポリヌクレオチドも提供する。本発明はまた、そのポリヌクレオチドを含む発現ベクターも提供する。本発明はまた、その発現ベクターを含む宿主細胞も提供する。
本発明はまた、単離された抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片を作製する方法であって、抗体又は抗原結合抗体断片の発現を許容する条件下で宿主細胞を培養すること；及び培養培地又は宿主細胞から抗体又は抗原結合抗体断片を回収することを含む方法も提供する。
本発明はまた、末梢又は中枢神経系に関連する障害を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の前述の実施形態のいずれかに係る抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法も提供する。
一部の実施形態において、前記抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物は末梢に投与される。
一部の実施形態において、前記抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物は中枢に投与される。
一部の実施形態において、前記抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物は末梢及び中枢に投与される。
一部の実施形態において、本抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物の投与は、以下の効果の１つ以上を有する：
（ｉ）ｍＧｌｕＲ５シグナル伝達を阻害する；
（ｉｉ）ｍＧｌｕＲ１を阻害しない；
（ｉｉｉ）細胞質型ｐＥＲＫの産生を阻害する；
（ｉｖ）浮動性めまい及び／又は他の運動機能副作用を生じない。
一部の実施形態において、本方法は末梢神経系障害の治療又は予防に使用される。
一部の実施形態において、本方法は中枢神経系障害の治療又は予防に使用される。
一部の実施形態において、本方法は片頭痛の治療又は予防に使用される。
一部の実施形態において、本方法は疼痛の治療又は予防に使用される。
一部の実施形態において、本方法はＧＥＲＤの治療又は予防に使用される。
一部の実施形態において、本方法はＩＢＳの治療又は予防に使用される。
一部の実施形態において、本方法は過活動膀胱（ＯＡＢ）又は尿失禁の治療又は予防に使用される。
一部の実施形態において、本方法は神経又は精神障害の治療又は予防に使用される。
本発明はまた、ｍＧｌｕＲ５活性に関連する病態、疾患、又は障害を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の前述の実施形態のいずれかに係る抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法も提供する。
本発明はまた、片頭痛を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の前述の実施形態のいずれかに係る抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法も提供する。
一部の実施形態において、本方法は、片頭痛の１つ以上の症状、任意選択で、血管運動症状（例えば、ホットフラッシュ、顔面紅潮、発汗、及び寝汗）、羞明、音声恐怖症、嗅覚過敏症、流涙／涙液分泌、回転性めまい、浮動性めまい、悪心、嘔吐、頭痛、及びアウラを治療又は予防し、又はかかる１つ以上の症状の頻度及び／又は重症度を低減する。
一部の実施形態において、月間片頭痛発生率は、抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物の投与後に減少する。
一部の実施形態において、対象は、偶発性片頭痛又は慢性片頭痛を有するか、又はそれと診断される。
一部の実施形態において、対象は、群発性頭痛を有するか、又はそれと診断される。
一部の実施形態において、患者は、過去に片頭痛型頭痛に対する予防療法を受けたことがない。
一部の実施形態において、患者は、少なくとも１つの他の片頭痛型頭痛予防療法、任意選択で、抗てんかん薬、三環系抗鬱薬、又はβ遮断薬が失敗したか、又はそれに対する忍容性がない。
本発明はまた、ＧＥＲＤを治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の前述の実施形態のいずれかに係る抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法も提供する。
一部の実施形態において、胃食道逆流症は、非びらん性逆流症である。
一部の実施形態において、胃食道逆流症は、びらん性食道炎である。
本発明はまた、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の前述の実施形態のいずれかに係る抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法も提供する。
一部の実施形態において、ＩＢＳは、下痢型ＩＢＳ、便秘型ＩＢＳ、又は交代性腸管運動型（alternating bowel movement predominant）ＩＢＳである。
本発明はまた、過活動膀胱（ＯＡＢ）を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の前述の実施形態のいずれかに係る抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法も提供する。
一部の実施形態において、本方法は、尿意切迫感（urgency）、尿意頻数、夜間多尿、又は切迫性尿失禁のうちの１つ以上を治療又は予防する。
本発明はまた、尿失禁を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の前述の実施形態のいずれかに係る抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法も提供する。
一部の実施形態において、本方法は、腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁、溢流性尿失禁、混合型尿失禁、器質性尿失禁（structural incontinence）、機能性尿失禁、夜間尿失禁、一過性尿失禁、くすくす笑い尿失禁（giggle incontinence）、便尿失禁（double incontinence）、排尿後尿滴下、及び性交時尿失禁から選択される尿失禁の治療に使用される。
本発明はまた、自閉症スペクトラム障害を治療し、又はそれに関連する１つ以上の症状を軽減若しくは予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の前述の実施形態のいずれかに係る抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法も提供する。
一部の実施形態において、１つ以上の症状は、社会的及び機能的コミュニケーション障害、不安、不注意、多動、感覚反応性の変化、自傷、攻撃性、認知機能障害、及び日常生活技能の低下から選択される。
本発明はまた、神経又は精神障害を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の前述の実施形態のいずれかに係る抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法も提供する。
一部の実施形態において、神経又は精神障害は、統合失調症、統合失調症様障害、統合失調感情障害、妄想性障害、短期精神病性障害、共有精神病性障害、一般身体疾患による精神病性障害、物質誘発性精神病性障害、特定不能の精神病性障害、認知症に関連する精神病、大鬱病性障害、気分変調性障害、月経前不快気分障害、特定不能の抑鬱障害、双極Ｉ型障害、双極ＩＩ型障害、気分循環性障害、特定不能の双極性障害、一般身体疾患による気分障害、物質誘発性気分障害、特定不能の気分障害、全般性不安障害、強迫性障害、パニック障害、急性ストレス障害、心的外傷後ストレス障害、精神遅滞、広汎性発達障害、注意欠陥障害、注意欠陥／多動性障害、破壊的行動障害、妄想型人格障害、分裂病型人格障害（personality disorder of the schizoid type）、統合失調型人格障害（personality disorder of the schizotypical type）、チック障害、トゥレット症候群、物質依存症、物質乱用、物質離脱症状、抜毛癖、及び認知が損なわれている状態、アルツハイマー病、パーキンソン病、パーキンソン病患者におけるレボドパ誘発性ジスキネジア、ハンチントン病（Ｈｕｎｔｉｎｇｄｏｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、レビー小体認知症、ＨＩＶ疾患による認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病による認知症、健忘障害、軽度認知障害、加齢関連認知低下、食欲不振症及び過食症などの摂食障害、並びに肥満症から選択される。
一部の実施形態において、本方法は、アルコール、ニコチン、コカイン、アンフェタミン、ベンゾジアゼピン、鎮痛薬、オピエート又は他の物質耐性又は依存、神経性過食症、神経性食欲不振症、ギャンブル依存、性依存、又は強迫性障害を含めた行動及び依存障害の治療又は予防に使用される。
一部の実施形態において、本方法は、神経変性、神経毒性、虚血、パーキンソン病、記憶障害、アルツハイマー病、認知症、及び振戦譫妄の群から選択される神経障害の治療又は予防に使用される。
本発明はまた、疼痛を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の前述の実施形態のいずれかに係る抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法も提供する。
一部の実施形態において、疼痛は、神経因性疼痛、中枢性疼痛症候群、術後痛、骨及び関節痛、反復動作による疼痛、歯痛、癌性疼痛、筋筋膜痛、周術期痛、慢性痛、急性痛、月経困難症、アンギナに伴う疼痛、炎症痛、頭痛、片頭痛及び群発性頭痛、一次痛覚過敏、二次痛覚過敏、一次アロディニア、二次アロディニア、又は他の疼痛から選択される。
一部の実施形態において、対象は哺乳類である。
一部の実施形態において、哺乳類はヒトである。
一部の実施形態において、哺乳類は非ヒト霊長類である。
一部の実施形態において、哺乳類はげっ歯類である。
一部の実施形態において、本抗体又は抗原結合抗体断片は、Ｎ－グリコシル化されていない。
一部の実施形態において、本抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物は、単剤療法として投与される。
一部の実施形態において、本抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物は、第２の治療用薬剤と組み合わせて投与される。
一部の実施形態において、本抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物は末梢に投与される。
一部の実施形態において、本抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物は中枢に投与される。
一部の実施形態において、本抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物は末梢及び中枢に投与される。
一部の実施形態において、本抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物は、経腸的に、非経口的に、又は局所的に投与され、好ましくは投与は非経口である。
一部の実施形態において、非経口投与は静脈内である。
一部の実施形態において、投与は髄腔内である。
一部の実施形態において、本抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物の投与は、患者に有害な中枢神経系副作用を実質的に引き起こさない。
一部の実施形態において、本方法は、小分子ｍＧｌｕＲ５拮抗薬に関連する副作用を誘発しない。
一部の実施形態において、本方法は浮動性めまいを引き起こさない。
本発明はまた、ｍＧｌｕＲ５発現の上方制御に関連する病態を診断する方法であって、
（ｉ）病態の媒介に関与する細胞又は組織を単離すること；
（ｉｉ）前述の実施形態のいずれかに係る抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片を前記細胞に接触させること；及び
（ｉｉｉ）前記細胞に結合した抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片のレベルを検出すること
を含む方法も提供する。
例示的ｍＧｌｕＲ５抗体ＡｂＡ、ＡｂＢ、及びＡｂＣの結合分析（ビンの決定）を示す表を含む。ビオチン化ｍＧｌｕＲ５細胞外ドメイン（ＥＣＤ）をＯｃｔｅｔ（商標）ストレプトアビジンセンサーの表面に固定化した。「第１のＡｂ」は、固定化されたｍＧｌｕＲ５－ＥＣＤタンパク質に初めに飽和するまで結合させた抗体を示す。次に「第２のＡｂ」を「第１のＡｂ」：ビオチン化ｍＧｌｕＲ５－ＥＣＤ複合体と相互作用させた。マイナス記号は、二次抗体について結合が観察されなかったことを示す。プラス記号は、二次抗体について結合が観察されたことを示し、これは、「第１のＡｂ」が「第２のＡｂ」によるビオチン化ｍＧｌｕＲ５－ＥＣＤへの結合を妨げなかったことを示している。 例示的抗体ＡｂＡ、ＡｂＢ、及びＡｂＣの結合親和性の決定に用いたフローサイトメトリーによって検出された、ｍＧｌｕＲ５を発現するＢＡ／Ｆ３細胞への漸増濃度の抗体の結合を示す。二次抗体の平均蛍光強度（ｙ軸）を一次抗体濃度（ｘ軸）の関数として記録した。 例示的抗体ＡｂＡ、ＡｂＢ、及びＡｂＣによる３Ｈ標識キスカル酸リガンドの結合競合結果を含む。３つの異なる結合エピトープビンを代表する３つの例示的抗体の各々について、グラフは、ヒトｍＧｌｕＲ５をトランスフェクトしたＣＨＯ細胞からの細胞膜ホモジネート中のｍＧｌｕＲ５に対する３Ｈ－キスカル酸結合のパーセント阻害率を示す。エラーバーは、２つのレプリケート試料の標準誤差を表す。グラフは、２つの別個の実験の代表である。 スプラーグドーリーラットにおける鼻腔内ウンベルロン誘発性涙液分泌のインビボ阻害結果を含む。４本のバーは、左から右に、以下の条件の実験結果を表す：ウンベルロンなし対照、正常な涙液分泌に相当する（白色のバー）；陰性対照抗体の２４時間後にウンベルロンを投与（濃い灰色のバー）；例示的抗体ＡｂＡの２４時間後にウンベルロンを投与（薄い灰色のバー）；例示的抗体ＡｂＢの２４時間後にウンベルロンを投与（中間的な灰色のバー）。エラーバーは、１２匹の動物の結果の標準誤差を表す。＊－陰性対照抗体治療と比較したとき統計的に有意な結果、ｐ＜０．０５。 鼻腔内ウンベルロン誘発性顔面温度上昇のインビボ阻害結果を含む。７本のバーは、左から右に、以下の条件の研究結果を表す：ウンベルロンなし対照；及び陰性対照抗体；例示的抗体ＡｂＡ；例示的抗体ＡｂＢ；例示的抗体ＡｂＣ；小分子媒体；又は小分子ｍＧｌｕＲ５阻害薬の後にウンベルロンを投与。エラーバーは、１２匹の動物の結果の標準誤差を表す。＊－陰性対照抗体又は小分子媒体治療と比較したとき統計的に有意な結果、ｐ＜０．０５。 左から右に：陰性対照抗体；例示的抗体ＡｂＡ；例示的抗体ＡｂＢ；例示的抗体ＡｂＣ；小分子媒体；及び小分子ｍＧｌｕＲ５阻害薬を投与した後の運動協調性の分析結果を含む。エラーバーは、１２匹の動物の結果の標準誤差を表す。＊－小分子媒体治療と比較したとき統計的に有意な結果、ｐ＜０．０５。
発明の詳細な説明
本発明は、代謝型グルタミン酸受容体５（「ｍＧｌｕＲ５」）に結合する抗体及びその抗原結合断片、前記抗体及びその抗原結合断片をコードする核酸、前記抗体及びその抗原結合断片を含む組成物、並びに診断法及び治療法における前記抗体、抗体断片、及び組成物の使用方法に関する。本発明はまた、配列番号６～４６９に開示されるとおりの、特定の抗ｍＧｌｕＲ５抗体（Ａｂ１～Ａｂ２９）及びその配列も提供する。本発明は、更に、Ａｂ１～Ａｂ２９のＣＤＲ配列を有する任意の抗体に関する。
抗体標的：ｍＧｌｕＲ５
代謝型グルタミン酸受容体（ｍＧｌｕＲ）は、中枢及び末梢神経系の神経における多くのシナプスの調節及び活性に関与するＧタンパク質共役受容体である。８つの代謝型グルタミン酸受容体サブタイプが同定されており、それらは配列類似性に基づき更に３つのグループに分けられる。グループＩは、ｍＧｌｕＲ１及びｍＧｌｕＲ５からなる。これらの受容体はホスホリパーゼＣ及び／又はｐ－ＥＲＫ生成を刺激し、神経細胞の興奮性を増加させる。ｍＧｌｕＲ２及びｍＧｌｕＲ３からなるグループＩＩ、並びにｍＧｌｕＲ４、ｍＧｌｕＲ６、ｍＧｌｕＲ７及びｍＧｌｕＲ８からなるグループＩＩＩは、アデニリルシクラーゼ活性の阻害能を有し、シナプス伝達を減少させる。これらの受容体の幾つかはまた、選択的スプライシングによって生じる様々なアイソフォームで存在する（Ｃｈｅｎ，Ｃ－Ｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ（２００２），５３８．３，ｐｐ．７７３－７８６；Ｐｉｎ，Ｊ－Ｐ ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ（１９９９），３７５，ｐｐ．２７７－２９４；Ｂｒａｕｎｅｒ－Ｏｓｂｏｒｎｅ，Ｈ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（２０００），４３，ｐｐ．２６０９－２６４５；Ｓｃｈｏｅｐｐ，Ｄ．Ｄ，Ｊａｎｅ Ｄ．Ｅ．Ｍｏｎｎ Ｊ．Ａ．Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ（１９９９），３８，ｐｐ．１４３１－１４７６）。
主題の出願は、新規抗ｍＧｌｕＲ５抗体、特に、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１～Ａｂ２９と同じＣＤＲを含むものを含めた抗ヒトｍＧｌｕＲ５抗体を提供する。本発明者らが知る限りでは、本発明より前に、ｍＧｌｕＲ５の機能を遮断するモノクローナル抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗体断片は報告されていない。
本発明のとおり抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗体断片がｍＧｌｕＲ５に結合すると、ｍＧｌｕＲ５の機能の少なくとも１つが低減され、抑制され、縮小し、又は他の形で阻害されることになる。阻害は部分的であっても又は完全であってもよい。また、実施例で実証されるとおり、本発明の抗ｍＧｌｕＲ５抗体は、競合的というよりむしろ、アロステリックにｍＧｌｕＲ５を阻害し得る。
ｍＧｌｕＲ５の機能の１つ以上を遮断又は阻害する抗体は、中枢又は末梢神経系の疾患に関連する症状の治療又は軽減に使用されてもよい。詳細には、こうした抗体は、限定はされないが、片頭痛、疼痛、ＧＥＲＤ、ＩＢＳ、ＯＡＢ、尿失禁、自閉症、嗜癖を含めた病気、並びに、限定はされないが、アルツハイマー病、脆弱Ｘ症候群、トゥレット症候群、認知症、不安、及びパーキンソン病を含めた神経及び精神障害の治療に使用されてもよい。
ｍＧｌｕＲ５には、選択的スプライシングによって産生される異なるアイソフォームがある。ｍＧｌｕＲ５ａとｍＧｌｕＲ５ｂとは、細胞内Ｃ末端ドメインの範囲内に含まれるアミノ酸８７７～９０８の有無が異なる。これらのアイソフォームの発現レベルは様々であるが、両方のアイソフォームともホスホリパーゼＣを活性化し、類似した薬理学的プロファイルを有する。Ｍｉｎａｋａｍｉ Ｒ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ．１９９４；１９９（３）：１１３６－４３を参照のこと。本発明は、これらのアイソフォームのいずれか一方又は両方に結合してその活性を阻害する抗ｍＧｌｕＲ５抗体を包含する。
ヒトｍＧｌｕＲ５（長鎖アイソフォーム）は、以下のアミノ酸配列を有する（配列番号１）；ＮＣＢＩ受託番号ＮＰ＿００１１３７３０３．１。
配列番号１
Figure 2022542863000002
ヒトｍＧｌｕＲ５（短鎖アイソフォーム）は、以下のアミノ酸配列を有する（配列番号２）；ＮＣＢＩ受託番号ＮＰ＿０００８３３．１。
配列番号２
Figure 2022542863000003
ラットｍＧｌｕＲ５は、以下の配列を有する（配列番号３）；ＮＣＢＩ受託番号ＮＰ＿０５８７０８．１。
配列番号３
Figure 2022542863000004
カニクイザルｍＧｌｕＲ５は、以下の配列を有する（配列番号４）；ＮＣＢＩ受託番号ＸＰ＿００５５７９３６６．１。
配列番号４
Figure 2022542863000005
ヒトにおける関連する代謝型グルタミン酸受容体１（ｍＧｌｕＲ１）は、以下の配列を有する（配列番号５）；ＮＣＢＩ受託番号ＮＰ＿００１２６４９９３．１。
配列番号５
Figure 2022542863000006
一部の実施形態において、本発明の抗体又は抗原結合抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５に特異的に結合し、ｍＧｌｕＲ１には結合しないものであり得る。一部の実施形態において、本発明の抗体又は抗原結合抗体断片は、ヒト、ラット、及び／又はカニクイザルｍＧｌｕＲ５と交差反応し得る。
ｍＧｌｕＲ５への結合及びｍＧｌｕＲ５機能の阻害
本発明の抗ｍＧｌｕＲ５抗体は、ｍＧｌｕＲ５に対して任意の好適な親和性及び／又はアビディティを有し得る。親和性とは、エピトープ又は抗原決定基に対する抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は他の抗原結合タンパク質の結合強度を指す。典型的には、親和性は、［Ａｂ］×［Ａｇ］／［Ａｂ－Ａｇ］（式中、［Ａｂ－Ａｇ］は抗体－抗原複合体のモル濃度であり、［Ａｂ］は未結合抗体のモル濃度であり、及び［Ａｇ］は未結合抗原のモル濃度である）として定義される平衡解離定数ＫＤの点から測られる。親和定数ＫＡは、１／ＫＤによって定義される。競合阻害、平衡透析などにより結合ポリペプチドの特異性及び親和性を決定する好適な方法については、例えば、Ｈａｒｌｏｗ，ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８８）；Ｃｏｌｌｉｇａｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃ．ａｎｄ Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎ．Ｙ．，（１９９２，１９９３）、及びＭｕｌｌｅｒ，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．９２：５８９－６０１（１９８３）を参照することができる。
親和性は、本明細書の他の部分に記載される方法のいずれか又は当該技術分野におけるそれらの公知の均等方法によって決定することができる。親和性の決定に用いることのできる一つの方法の例が、Ｍｕｎｓｏｎ ＆ Ｐｏｌｌａｒｄ，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１０７：２２０（１９８０）のスキャッチャード分析に提供される。結合親和性はまた、ＫＩＮＥＸＡ（登録商標）、平衡法、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、反応速度解析、Ｂｉａｃｏｒｅ（商標）分析、ＡｌｐｈａＬＩＳＡ（登録商標）分析、又はＯｃｔｅｔ（登録商標）ＲＥＤ９６分析により決定されてもよい。
本発明の更に別の実施形態において、抗ｍＧｌｕＲ５抗体及び抗原結合断片、好ましくはヒト、ヒト化又はキメラ化抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗体断片は、例えば、ＥＬＩＳＡ、バイオレイヤー干渉法（「ＢＬＩ」）（例えば、Ｏｃｔｅｔ（登録商標）ＲＥＤ９６システムを使用する）、ＫＩＮＥＸＡ、表面プラズモン共鳴（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ（商標）又はＰｒｏｔｅＯｎシステムを使用する）、又はフローサイトメトリーによって、任意選択で２５℃又は３７℃で決定したとき、５×１０－５Ｍ、１０－５Ｍ、５×１０－６Ｍ、１０－６Ｍ、５×１０－７Ｍ、１０－７Ｍ、５×１０－８Ｍ、１０－８Ｍ、５×１０－９Ｍ、１０－９Ｍ、５×１０－１０、１０－１０、５×１０－１１、１０－１１Ｍ、５×１０－１２、１０－１２Ｍ、５×１０－１３Ｍ、又は１０－１３Ｍ以下の結合親和性（ＫＤ）でｍＧｌｕＲ５に結合し得る。典型的には、本発明により提供される抗ｍＧｌｕＲ５抗体は、ｍＧｌｕＲ５に対する親和性が約１０－４～約１０－１２Ｍ（例えば、約１０－７～約１０－１０Ｍ）の範囲である。本明細書において免疫反応という用語は、典型的には、抗ｍＧｌｕＲ５抗体がｍＧｌｕＲ５に対し、例えばフローサイトメトリー飽和アッセイによって決定したとき約１０－４Ｍより低い親和性で結合することを指す。
加えて、本発明の抗ｍＧｌｕＲ５抗体及び抗原結合断片、好ましくはヒト、ヒト化又はキメラ化抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗体断片は、５×１０－４ｓ－１、１０－４ｓ－１、５×１０－５ｓ－１、又は１０－５ｓ－１以下のオフ速度（ｋｏｆｆ）でｍＧｌｕＲ５に結合する抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗体断片を含み得る。
アビディティとは、結合タンパク質と抗原との間の相互作用を合計した総合的な強度（例えば、抗ｍＧｌｕＲ５抗体とｍＧｌｕＲ５との間の相互作用の合計強度）を指す。親和性は、抗体又は他の結合ペプチド上の単一の抗原結合部位と単一のエピトープ又は抗原決定基との間の非共有結合性の相互作用を合計した強度である。アビディティは典型的には、３つの主な要因、即ち、結合タンパク質が結合する１つ又は複数のエピトープ又は１つ又は複数の抗原決定基に対するその結合タンパク質の固有の親和性、抗体又は結合タンパク質及び抗原の価数（例えば、特に抗原にエピトープの繰り返しがある場合に、３、４、又はそれより多い価数の抗ｍＧｌｕＲ５抗体は、典型的には、抗原に対して二価抗体よりも高いアビディティレベルを呈することになり、及び二価抗体は、抗原に対して一価抗体よりも高いアビディティを有し得ることになる）、及び／又は相互作用成分の幾何学的配置に左右される。アビディティは典型的には、親和性の評価に用いられるのと同種の技法によって測定される。
抗ｍＧｌｕＲ５抗体は、ｍＧｌｕＲ５に結合するその能力、ひいては１つ以上のｍＧｌｕＲ５の機能を阻害する能力に基づき特徴付けることができる。かかる抗ｍＧｌｕＲ５抗体は、天然の形態で治療用薬剤として直接使用されてもよい。阻害性抗ｍＧｌｕＲ５抗体は、ｍＧｌｕＲ５の様々な機能、例えば、リガンド結合、例えば、作動薬、拮抗薬又はインバース作動薬、例えば、グルタミン酸又はキスカル酸の下流効果；ホスホリパーゼＣ及び／又はｐ－ＥＲＫ生成の刺激；及び神経細胞の興奮性の増加などを部分的又は完全に阻害し得る。詳細な実施形態において、本発明の抗体は、ｍＧｌｕＲ５の媒介によるｐ－ＥＲＫ生成刺激を阻害する。阻害は、任意の好適な方法によって測定することができる。一実施形態において、この方法はＡｌｐｈａＬＩＳＡである。一態様において、阻害は、阻害抗ｍＧｌｕＲ５抗体がｐ－ＥＲＫ生成を阻害し、任意選択で１０ｎＭ未満のＩＣ５０を含むことに反映される。別の態様において、ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体はまた、リガンド結合の阻害のその欠如によっても特徴付けることができる。一態様において、キスカル酸結合の阻害は、放射性リガンド結合アッセイで測定することができる。抗ｍＧｌｕＲ５抗体がリガンド結合に及ぼす効果は、対照との比較により、例えば、媒体単独で処理される細胞（陰性対照）又は過剰量の非標識リガンドで処理される細胞（陽性対照）へのリガンド結合結果との比較で決定することができる。
抗ｍＧｌｕＲ５抗体の作製
本発明に係る抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体（ｍＡｂ）及び抗原結合断片は、従来のモノクローナル抗体方法論、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５の標準的な体細胞ハイブリダイゼーション技法を含め、種々の技法によって作製することができる。体細胞ハイブリダイゼーション手順が好ましいが、原則的に、他のモノクローナル抗体作製技法、例えば、Ｂリンパ球のウイルス形質転換又は発癌性形質転換を用いることもできる。
ハイブリドーマの調製に好ましい動物系は、マウス系である。マウスにおけるハイブリドーマ産生は、極めて十分に確立された手順である。免疫化プロトコル及び融合用の免疫化脾細胞の単離技法は、当該技術分野において公知である。融合パートナー（例えば、マウス骨髄腫細胞）及び融合手順もまた公知である。本発明のキメラ又はヒト化抗体は、上記に記載したとおり調製したマウスモノクローナル抗体の配列に基づき調製することができる。目的のマウスハイブリドーマから、重鎖及び軽鎖免疫グロブリンをコードするＤＮＡを入手して、標準的な分子生物学的技術を用いて非マウス（例えば、ヒト）免疫グロブリン配列を含むように操作することができる。例えば、キメラ抗体を作り出すためには、当該技術分野において公知の方法を用いてマウス可変領域をヒト定常領域に連結することができる（例えば、Ｃａｂｉｌｌｙ ｅｔ ａｌ．に対する米国特許第４，８１６，５６７号明細書を参照のこと）。ヒト化抗体を作り出すためには、当該技術分野において公知の方法を用いてマウスＣＤＲ領域をヒトフレームワークに挿入することができる（例えば、Ｗｉｎｔｅｒに対する米国特許第５，２２５，５３９号明細書及びＱｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．に対する米国特許第５，５３０，１０１号明細書；同第５，５８５，０８９号明細書；同第５，６９３，７６２号明細書及び同第６，１８０，３７０号明細書を参照のこと）。
本発明の少なくとも一部の実施形態によれば、抗体はヒトモノクローナル抗体である。ｍＧｌｕＲ５に対するかかるヒトモノクローナル抗体は、マウス系よりむしろヒト免疫系のパーツを担持するトランスジェニック又はトランスクロモソミックマウス、例えば、ＨｕＭＡｂ Ｍｏｕｓｅ（商標）、ＫＭ Ｍｏｕｓｅ（商標）を用いて生成することができる（例えば、Ｌｏｎｂｅｒｇ，ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｎａｔｕｒｅ ３６８（６４７４）：８５６－８５９を参照のこと）。従って、マウスはマウスＩｇＭ又はＫの発現の低下を呈し、免疫化に応答して、導入されたヒト重鎖及び軽鎖トランス遺伝子がクラススイッチ及び体細胞突然変異を起こすことにより、高親和性ヒトＩｇＧ Ｋモノクローナルが生成される（Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．ｅｔ ａｌ．（１９９４），前掲；Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．（１９９４）Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ １１３：４９－１０１；Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．ａｎｄ Ｈｕｓｚａｒ，Ｄ．（１９９５）Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５－９３、及びＨａｒｄｉｎｇ，Ｆ．ａｎｄ Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．（１９９５）Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．７６４：５３６－５４６にレビューされている）。別の実施形態において、本発明の少なくとも一部の実施形態に係るヒト抗体は、ヒト重鎖トランス遺伝子及びヒト軽鎖トランス染色体を担持するマウスなど、トランス遺伝子及びトランス染色体上にヒト免疫グロブリン配列を担持するマウスを用いて産生することができる。本明細書において「ＫＭ ｍｉｃｅ（商標）」と称されるかかるマウスについて、Ｉｓｈｉｄａ ｅｔ ａｌ．に対する国際公開第０２／４３４７８号パンフレットに詳細に記載されている。
なおも更に、当該技術分野では、ヒト免疫グロブリン遺伝子を発現する代替的なトランスジェニック動物系が利用可能であり、本発明の少なくとも一部の実施形態に係る抗ｍＧｌｕＲ５抗体の産生に使用することができる。例えば、Ｘｅｎｏｍｏｕｓｅ（Ａｂｇｅｎｉｘ，Ｉｎｃ．）と称される代替的なトランスジェニック系を使用することができる；かかるマウスについては、例えば、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉ ｅｔ ａｌ．に対する米国特許第５，９３９，５９８号明細書；同第６，０７５，１８１号明細書；同第６，１１４，５９８号明細書；同第６，１５０，５８４号明細書及び同第６，１６２，９６３号明細書に記載されている。
更に、当該技術分野では、ヒト免疫グロブリン遺伝子を発現する代替的なトランスクロモソミック動物系が利用可能であり、本発明の少なくとも一部の実施形態に係る抗ｍＧｌｕＲ５抗体の産生に使用することができる。例えば、「ＴＣマウス」と称される、ヒト重鎖トランス染色体及びヒト軽鎖トランス染色体の両方を担持するマウスを使用することができる；かかるマウスについては、Ｔｏｍｉｚｕｋａ ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９７：７２２－７２７に記載されている。更に、当該技術分野では、ヒト重鎖及び軽鎖トランス染色体を担持する雌ウシが記載されており（Ｋｕｒｏｉｗａ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２０：８８９－８９４）、本発明の少なくとも一部の実施形態に係る抗ｍＧｌｕＲ５抗体の産生に使用することができる。
本発明の少なくとも一部の実施形態に係るヒトモノクローナル抗体はまた、ヒト免疫グロブリン遺伝子のライブラリをスクリーニングするファージディスプレイ法を用いて調製することもできる。ヒト抗体を単離するためのかかるファージディスプレイ法は、当該技術分野で確立されている。例えば、Ｌａｄｎｅｒ ｅｔ ａｌ．に対する米国特許第５，２２３，４０９号明細書；同第５，４０３，４８４号明細書；及び同第５，５７１，６９８号明細書；Ｄｏｗｅｒ ｅｔ ａｌ．に対する米国特許第５，４２７，９０８号明細書及び同第５，５８０，７１７号明細書；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．に対する米国特許第５，９６９，１０８号明細書及び同第６，１７２，１９７号明細書；並びにＧｒｉｆｆｉｔｈｓ ｅｔ ａｌ．に対する米国特許第５，８８５，７９３号明細書；同第６，５２１，４０４号明細書；同第６，５４４，７３１号明細書；及び同第６，５５５，３１３号明細書；同第６，５８２，９１５号明細書及び同第６，５９３，０８１号明細書を参照のこと。
本発明の少なくとも一部の実施形態に係るヒトモノクローナル抗体はまた、免疫時にヒト抗体応答が生じ得るようにヒト免疫細胞が再構成されているＳＣＩＤマウスを用いて調製することもできる。かかるマウスについては、例えば、Ｗｉｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．に対する米国特許第５，４７６，９９６号明細書及び同第５，６９８，７６７号明細書に記載されている。
一部の実施形態において、Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｎａｔｕｒｅ ３６８（６４７４）：８５６－８５９；Ｆｉｓｈｗｉｌｄ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １４：８４５－８５１；及び国際公開第９８／２４８８４号パンフレット及び同第０１／１４４２４号パンフレットによって記載されるとおり、ヒトＩｇマウスを使用して、例えば、かかるマウスをｍＧｌｕＲ５抗原及び／又は組換えｍＧｌｕＲ５の精製又は濃縮調製物、又はｍＧｌｕＲ５融合タンパク質で免疫することにより、本発明に係るヒト抗ｍＧｌｕＲ５抗体が産生される。好ましくは、マウスは初回注入時に６～１６週齢であり得る。例えば、ｍＧｌｕＲ５抗原の精製又は組換え調製物（．５～５００μｇの範囲の用量）を使用して、ヒトＩｇマウスを腹腔内免疫することができる。
一般に、トランスジェニックマウスは、初回に完全フロイントアジュバント中の抗原で腹腔内（ＩＰ）免疫し、続いて１週間おきに不完全フロイントアジュバント中の抗原でＩＰ免疫（最大で合計６回）したとき応答を示す。しかしながら、フロイント以外のアジュバントもまた有効であることが分かっている。加えて、アジュバントの非存在下での全細胞が、極めて免疫原性が高いことが分かっている。免疫化プロトコルの間、後眼窩採血により血漿試料を入手して免疫応答をモニタすることができる。血漿をＥＬＩＳＡによってスクリーニングすることができ、抗ｍＧｌｕＲ５ヒト免疫グロブリン力価が十分なマウスを融合に使用することができる。抗原で静脈内ブーストした３日後にマウスを犠牲死させ、脾臓を摘出することができる。各免疫化につき２～３回の融合を実施する必要があり得るものと予想される。典型的には、各抗原につき６～２４匹のマウスが免疫される。
特定の実施形態において、本発明に係るヒトモノクローナル抗ｍＧｌｕＲ５抗体を産生するハイブリドーマは、免疫化マウスの脾細胞及び／又はリンパ節細胞を使用して、それを単離し、マウス骨髄腫細胞株などの適切な不死化細胞株と融合することにより生成されてもよい。得られたハイブリドーマは、抗原特異的抗体の産生に関してスクリーニングすることができる。
免疫化したウサギ宿主から抗原特異的Ｂ細胞のクローン集団を入手するための方法に関する例示的教示が、米国特許出願公開第２０１３／０３１６３５３号明細書（この開示は全体として参照により本明細書に援用される）に開示されている。
特定の実施形態において、本発明に係る抗ｍＧｌｕＲ５抗体は、例えば、当該技術分野において周知のとおり組換えＤＮＡ技法と遺伝子トランスフェクション方法との組み合わせを用いて（例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：１２０２）、宿主細胞トランスフェクトーマで作製することができる。例えば、抗体、又はその抗体断片を発現させるため、標準的な分子生物学的技術（例えば、ＰＣＲ増幅又は目的の抗体を発現するハイブリドーマを使用したｃＤＮＡクローニング）によって部分的又は完全長軽鎖及び重鎖をコードするＤＮＡを入手することができ、そのＤＮＡを、遺伝子が転写及び翻訳制御配列に作動可能に連結されるようにして発現ベクターに挿入することができる。これに関連して、用語「作動可能に連結される」は、ベクター内の転写及び翻訳制御配列が抗体遺伝子の転写及び翻訳を調節するというその意図した機能を果たすようにして抗体遺伝子がベクターにライゲートされることを意味するものと意図される。発現ベクター及び発現制御配列は、使用される発現宿主細胞と適合性があるように選択される。抗体軽鎖遺伝子及び抗体重鎖遺伝子は、別々のベクターに挿入されてもよく、又はより典型的には、両方の遺伝子が同じ発現ベクターに挿入される。抗体遺伝子は、標準的な方法（例えば、抗体遺伝子断片及びベクター上の相補的な制限部位のライゲーション、又は制限部位が存在しない場合には、平滑末端ライゲーション）によって発現ベクターに挿入される。本明細書に記載される抗体の軽鎖及び重鎖可変領域を使用すると、既に所望のアイソタイプの重鎖定常及び軽鎖定常領域をコードする発現ベクターへと、ＶＨセグメントがベクター内でＣＨセグメントに作動可能に連結され、且つＶＬセグメントがベクター内でＣＬセグメントに作動可能に連結されるようにしてそれらの可変領域を挿入することにより、任意の抗体アイソタイプの完全長抗体遺伝子を作り出すことができる。それに加えて又は代えて、組換え発現ベクターは、宿主細胞からの抗体鎖の分泌を促進するシグナルペプチドをコードすることができる。抗体鎖遺伝子は、シグナルペプチドがインフレームで抗体鎖遺伝子のアミノ末端に連結されるようにしてベクターにクローニングすることができる。シグナルペプチドは、免疫グロブリンシグナルペプチド又は異種シグナルペプチド（即ち、非免疫グロブリンタンパク質からのシグナルペプチド）であり得る。
抗ｍＧｌｕＲ５抗体の発現
好適な宿主細胞としては、概して、容易に利用可能な技法及び材料を用いて主題の抗ｍＧｌｕＲ５抗体及びその抗原結合断片を組換え産生することができる任意の細胞が含まれる。例えば、本発明の抗ｍＧｌｕＲ５抗体及びその抗原結合断片は、従来技術のとおり、遺伝子操作された宿主細胞で産生させることができる。好適な宿主細胞は、外因性ＤＮＡで形質転換又はトランスフェクトして培養下で成長させることができるような種類の細胞であり、細菌、真菌細胞（例えば、酵母）、及び培養高等真核細胞（多細胞生物の培養細胞を含む）、特に培養哺乳類細胞、例えば、ヒト又は非ヒト哺乳類細胞が挙げられる。例示的実施形態において、こうした抗体はＣＨＯ細胞又はＨＥＫ－２９３細胞で発現させてもよい。クローンＤＮＡ分子を操作し、且つ種々の宿主細胞へと外因性ＤＮＡを導入するための技法については、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ ｅｄ．，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．：Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ（１９８９）、及びＣｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ，ｅｄｉｔｏｒｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｇｒｅｅｎ ａｎｄ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ（１９９３）によって開示されている。
一部の例示的実施形態において、抗体は、培養下で成長させることができる接合コンピテントな酵母、例えば、任意の一倍体、二倍体、又は四倍体酵母で発現させてもよい。発酵発現方法において有用な酵母は、一倍体、二倍体、又は他の倍数体形態で存在し得る。所与の倍数性の細胞は、適切な条件下では、その形態で不特定数の世代にわたって増殖し得る。二倍体細胞はまた、胞子を形成して一倍体細胞にもなり得る。連続的な接合の結果、二倍体株の更なる接合又は融合を通じて四倍体株が生じ得る。本発明は、半数体酵母、並びに、例えば接合又はスフェロプラスト融合によって産生される二倍体又は他の倍数体の酵母細胞の使用を企図する。例として、かかる酵母には、アルクシオジマ属（Ａｒｘｉｏｚｙｍａ）；アスコボトリオジマ属（Ａｓｃｏｂｏｔｒｙｏｚｙｍａ）；シテロミセス属（Ｃｉｔｅｒｏｍｙｃｅｓ）；デバリオミセス属（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ）；デッケラ属（Ｄｅｋｋｅｒａ）；エレモテシウム属（Ｅｒｅｍｏｔｈｅｃｉｕｍ）；イサチェンキア属（Ｉｓｓａｔｃｈｅｎｋｉａ）；カザキスタニア属（Ｋａｚａｃｈｓｔａｎｉａ）；クルイベロミセス属（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ）；コダマエア属（Ｋｏｄａｍａｅａ）；ロデロミセス属（Ｌｏｄｄｅｒｏｍｙｃｅｓ）；パキソレン属（Ｐａｃｈｙｓｏｌｅｎ）；ピキア属（Ｐｉｃｈｉａ）；サッカロミセス属（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）；サターニスポラ属（Ｓａｔｕｒｎｉｓｐｏｒａ）；テトラピシスポラ属（Ｔｅｔｒａｐｉｓｉｓｐｏｒａ）；トルラスポラ属（Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ）；ウィリオプシス属（Ｗｉｌｌｉｏｐｓｉｓ）；及びザイゴサッカロミセス属（Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）が含まれるサッカロミセス科（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｔａｃｅａｅ）のメンバーが含まれ得る。本発明において有用である可能性のある他の種類の酵母には、ヤロウイア属（Ｙａｒｒｏｗｉａ）；ロドスポリジウム属（Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）；カンジダ属（Ｃａｎｄｉｄａ）；ハンゼヌラ属（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）；フィロバシジウム属（Ｆｉｌｏｂａｓｉｕｍ）；スポリジオボラス属（Ｓｐｏｒｉｄｉｏｂｏｌｕｓ）；ブレラ属（Ｂｕｌｌｅｒａ）；ロイコスポリジウム属（Ｌｅｕｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）及びフィロバシジエラ属（Ｆｉｌｏｂａｓｉｄｅｌｌａ）が含まれる。
本発明の好ましい例示的実施形態において、抗体発現のために使用される接合コンピテントな酵母は、ピキア属（Ｐｉｃｈｉａ）のメンバーを含み得る。本発明の更なる好ましい例示的実施形態において、ピキア属（Ｐｉｃｈｉａ）の接合コンピテントな酵母は、以下の種：ピキア・パストリス（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）、ピキア・メタノリカ（Ｐｉｃｈｉａ ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃａ）、及びハンゼヌラ・ポリモルファ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ）（ピキア・アングスタ（Ｐｉｃｈｉａ ａｎｇｕｓｔａ））のものである。
目的のポリペプチドコード配列は、所望の宿主細胞、例えば、酵母又は哺乳類細胞におけるポリペプチドの発現をもたらす転写及び翻訳調節配列に作動可能に連結されている。これらのベクター成分としては、限定はされないが、以下のうちの１つ以上を挙げることができる：エンハンサーエレメント、プロモーター、及び転写終結配列。例えばシグナル配列など、ポリペプチドの分泌用の配列もまた含まれ得る。発現ベクターは多くの場合に宿主細胞ゲノムに組み込まれるため、複製起点、例えば酵母複製起点は任意選択である。本発明の一実施形態において、目的のポリペプチドは、酵母二倍体細胞からのポリペプチドの最適化された分泌をもたらす配列に作動可能に連結されているか、又は融合されている。
プロモーターは、構造遺伝子の開始コドンの上流（５’側に位置する非翻訳配列）（概して約１００～１０００ｂｐ以内）であり、それが作動可能に連結されている特定の核酸配列の転写及び翻訳を制御する。かかるプロモーターは、幾つかのクラス：誘導性プロモーター、構成的プロモーター、及び抑制性プロモーター（リプレッサーが存在しないことに応答して転写レベルを増加させる）に分けられる。誘導性プロモーターは、培養条件の何らかの変化、例えば、栄養素の有無又は温度の変化に応答して、その制御下にあるＤＮＡからの転写レベルの増加を惹起し得る。プロモーター断片はまた、宿主細胞、例えば、酵母細胞のゲノム内の同じ部位への発現ベクターの相同組換え及び組込み部位としても働き得る；或いは、選択可能マーカーが、相同組換え部位として用いられてもよい。ピキア属（Ｐｉｃｈｉａ）形質転換について、Ｃｒｅｇｇ ｅｔ ａｌ，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ，５：３３７６－３３８５（１９８５）に記載されている。種々の真核及び原核細胞における使用に好適なプロモーターは周知であり、市販されている。
目的のポリペプチドは、直接組換え産生されるのみならず、異種ポリペプチド、例えばシグナル配列又はその他の、成熟タンパク質若しくはポリペプチドのＮ末端に特異的切断部位を有し得るポリペプチドとの融合ポリペプチドとして組換え産生されてもよい。一般に、シグナル配列はベクターの一成分であり得るか、又はそれは、ベクターに挿入されるポリペプチドコード配列の一部であり得る。選択される異種シグナル配列は、好ましくは、宿主細胞、例えば、哺乳類細胞、昆虫細胞、又は酵母細胞内で利用可能な標準的な経路のうちの１つを通じて認識され、及びプロセシングされるものである。加えて、こうしたシグナルペプチド配列は、発現系における分泌の亢進をもたらすように操作されてもよい。目的の分泌シグナルにはまた、哺乳類及び酵母シグナル配列も含まれ、これは分泌されるタンパク質にとって異種であってもよく、又は分泌されるタンパク質にとって天然の配列であってもよい。シグナル配列にはプレペプチド配列が含まれ、一部の例では、プロペプチド配列が含まれてもよい。当該技術分野では、多くのかかるシグナル配列が、免疫グロブリン鎖上に見られるシグナル配列、例えば、Ｋ２８プレプロトキシン配列、ＰＨＡ－Ｅ、ＦＡＣＥ、ヒトＭＣＰ－１、ヒト血清アルブミンシグナル配列、ヒトＩｇ重鎖、ヒトＩｇ軽鎖などを含め、公知である。例えば、Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ ｅｔ．ａｌ，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．，１１（２）：７５（１９９８）；及びＫｏｂａｙａｓｈｉ ｅｔ．ａｌ．，Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ａｐｈｅｒｅｓｉｓ，２（４）：２５７（１９９８）を参照のこと。
ベクターに転写活性化因子配列を挿入することにより、転写を増加させてもよい。こうした活性化因子は、通常約１０～３００ｂｐの、ＤＮＡのシス作用エレメントであり、プロモーターに作用してその転写を増加させる。転写エンハンサーは、比較的向き及び位置に非依存的であり、転写単位の５’側及び３’側、イントロンの範囲内、並びにコード配列それ自体の範囲内に見られている。エンハンサーは、発現ベクター中にコード配列の５’側又は３’側の位置でつなぎ合わされてもよいが、好ましくはプロモーターから５’側の部位に位置する。
真核生物宿主細胞に使用される発現ベクターはまた、転写の終結及びｍＲＮＡの安定化に必要な配列も含み得る。かかる配列は、一般に、真核生物又はウイルスＤＮＡ又はｃＤＮＡの非翻訳領域における翻訳終止コドンの３’側から入手可能である。これらの領域は、ｍＲＮＡの非翻訳部分におけるポリアデニル化断片として転写されるヌクレオチドセグメントを含む。
上記に挙げられる成分のうちの１つ以上を含む好適なベクターの構築には、標準的なライゲーション技法又はＰＣＲ／組換え方法が用いられる。単離されたプラスミド又はＤＮＡ断片を切断し、合うように調整し、要求される又は組換え方法によるプラスミドの生成に望ましい形態で再びライゲートする。構築したプラスミドの配列が正しいことを確認するための分析には、ライゲーション混合物を使用して宿主細胞を形質転換し、適切であれば、成功した形質転換体を抗生物質耐性（例えばアンピシリン又はゼオシン）によって選択する。形質転換体からプラスミドを調製し、制限エンドヌクレアーゼ消化によって分析し、及び／又はシーケンシングする。
断片の制限及びライゲーションの代替例として、特異的アタッチメント（「ａｔｔ」）部位及び組換え酵素に基づく組換え方法を用いてＤＮＡ配列をベクターに挿入してもよい。かかる方法については、例えば、Ｌａｎｄｙ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，５８：９１３－９４９（１９８９）によって記載されており；当業者に公知である。かかる方法では、ラムダタンパク質及び大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）にコードされる組換えタンパク質の混合物によって媒介される分子間ＤＮＡ組換えを利用する。相互作用するＤＮＡ分子上のａｔｔ部位の間で組換えが起こる。ａｔｔ部位の説明については、Ｗｅｉｓｂｅｒｇ ａｎｄ Ｌａｎｄｙ，Ｓｉｔｅ－Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｉｎ Ｐｈａｇｅ Ｌａｍｂｄａ，ｉｎ Ｌａｍｂｄａ ＩＩ，ｐ．２１ １－２５０，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ：Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ（１９８３）を参照のこと。組換え部位に隣接するＤＮＡセグメントが入れ替わり、そのため組換え後、ａｔｔ部位は、各親ベクターによって供与される配列で構成されるハイブリッド配列である。この組換えは、任意のトポロジーのＤＮＡ間に起こり得る。
ａｔｔ部位は、目的の配列を適切なベクターにライゲートし；特異的プライマーを用いて、ａｔｔ Ｂ部位を含むＰＣＲ産物を生成し；ａｔｔ部位を含む適切なベクターにクローニングされたｃＤＮＡライブラリを生成するなどによって目的の配列に導入し得る。
折り畳みとは、本明細書で使用されるとき、ポリペプチド及びタンパク質の三次元構造を指し、ここではアミノ酸残基間の相互作用が、構造を安定化させる働きをする。構造を決定するという点では非共有結合性相互作用が重要であるが、通常、目的のタンパク質は、２つのシステイン残基によって形成される分子内及び／又は分子間共有結合性ジスルフィド結合を有することになる。天然に存在するタンパク質及びポリペプチド又はその誘導体及び変異体について、適切な折り畳みは、典型的には、最適な生物学的活性をもたらす配置であり、好都合には、活性、例えばリガンド結合、酵素活性等に関するアッセイによりモニタすることができる。
一部の例では、例えば所望の産物が合成由来である場合、生物学的活性に基づくアッセイは、あまり意味を持たないことになる。かかる分子の適切な折り畳みは、物理的特性、エネルギー的考察、モデリング研究などに基づき決定し得る。
発現宿主は、折り畳み及びジスルフィド結合形成を亢進させる１つ以上の酵素、即ち、フォールダーゼ、シャペロニン等をコードする配列の導入によって更に修飾されてもよい。かかる配列は、当該技術分野において公知のとおり、ベクター、マーカー等を使用して、酵母宿主細胞で構成的又は誘導的に発現させてもよい。好ましくは、配列は、所望の発現パターンに十分な転写調節エレメントを含め、標的化方法論によって酵母ゲノムに安定に組み込まれる。
例えば、真核生物タンパク質ジスルフィドイソメラーゼ（「ＰＤＩ」）は、タンパク質システイン酸化及びジスルフィド結合異性化の効率的な触媒であるのみならず、シャペロン活性も呈する。ＰＤＩを共発現させると、複数のジスルフィド結合を有する活性タンパク質の産生を促進することができる。また、免疫グロブリン重鎖結合タンパク質（「ＢＩＰ」）；シクロフィリンなどの発現も興味深い。本発明の一実施形態では、一倍体親株の各々が個別の折り畳み酵素を発現し、例えば、ある株がＢＩＰを発現してもよく、他の株がＰＤＩを発現してもよく、又はこれらの組み合わせであってもよい。
培養された哺乳類細胞もまた、開示される抗ｍＧｌｕＲ５抗体及びその抗原結合断片の作製に好ましい例示的宿主である。記載されるとおり、抗体の発現にはＣＨＯ細胞が特に好適である。哺乳類細胞におけるモノクローナル抗体の製造については、当該技術分野において多くの手順が公知である（Ｇａｌｆｒｅ，Ｇ．ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｃ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍ．，７３：３－４６，１９８１；Ｂａｓａｌｐ ｅｔ ａｌ．，Ｔｕｒｋ．Ｊ．Ｂｉｏｌ，２４：１８９－１９６，２０００；Ｗｕｒｍ，Ｆ．Ｍ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２２：１３９３－１３９８，２００４；及びＬｉ ｅｔ ａｌ．，ｍＡｂ，２（５）：４６６－４７７，２０１０を参照のこと）。以下で更に詳細に記載するとおり、哺乳類モノクローナル抗体製造スキームに用いられる一般的な宿主細胞株としては、限定はされないが、ヒト胚性網膜芽細胞株ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）（Ｃｒｕｃｅｌｌ Ｎ．Ｖ．、Ｌｅｉｄｅｎ，Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）、ＮＳＯマウス骨髄腫細胞（Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｕｎｃｉｌ、Ｌｏｎｄｏｎ，ＵＫ）、ＣＶ１サル腎細胞株、２９３ヒト胎児腎細胞株、ＢＨＫベビーハムスター腎臓細胞株、ＶＥＲＯアフリカミドリザル腎細胞株、ヒト子宮頸癌細胞株ＨＥＬＡ、ＭＤＣＫイヌ腎細胞、ＢＲＬバッファローラット肝細胞、Ｗ１３８ヒト肺細胞、ＨｅｐＧ２ヒト肝細胞、ＭＭＴマウス乳腺腫瘍細胞、ＴＲＩ細胞、ＭＲＣ５細胞、Ｆｓ４細胞、骨髄腫又はリンパ腫細胞、又はチャイニーズハムスター（モンゴルキヌゲネズミ（Ｃｒｉｃｅｔｕｌｕｓ ｇｒｉｓｅｕｓ））卵巣（ＣＨＯ）細胞などが挙げられる。ＤＰ１２（ＣＨＯ Ｋｌ ｄｈｆｒ－）細胞株など、組換えモノクローナル抗体の産生に有用で、それに最適化された、当該技術分野において公知のＣＨＯ細胞の多くの異なるサブクローン又はサブ細胞株。ＮＳＯ細胞は、ＮＳ－１細胞の非Ｉｇ分泌型の非軽鎖合成サブクローンであり、アザグアニン耐性がある。他のチャイニーズハムスター及びＣＨＯ細胞が、ＣＨＯ－ＤＸＢ１１（ＣＨＯ－ＤＵＫＸ）、ＣＨＯ－ｐｒｏ３、ＣＨＯ－ＤＧ４４、ＣＨＯ１～１５、ＣＨＯ ＤＰ－１２、Ｌｅｃ２、Ｍ１ＷＴ３、Ｌｅｃ８、ｐｇｓＡ－７４５などを含め、（ＡＴＣＣ等から）市販されており、これらは全て、様々なパラメータについて細胞株を最適化するため遺伝的に改変されている。モノクローナル抗体は、一般に流加培養法を用いて製造され、ここでは哺乳類細胞株でモノクローナル抗体鎖が発現し、バイオリアクター内の組織培養培地中に分泌される。組換えタンパク質発現が最大となるように、バイオリアクターに培地（即ちフィード）が連続的に供給される。次に回収された培地から組換えモノクローナル抗体が精製される。状況によっては、ジスルフィド結合の還元等によって抗体を再びアセンブルするために追加的なステップが必要である。かかる作製方法は、単回バッチで１０，０００Ｌ又はそれ以上もの大きさに規模を調整することができる。現在、かかる細胞株及び方法論を用いて２０ｐｇ／細胞／日ほどを入手することがルーチンとなっており、１０ｇ／Ｌ以上もの高い力価がもたらされ、１０ｋＬ～２５ｋＬのバイオリアクターから１５～１００ｋｇの量に達している（Ｌｉ ｅｔ ａｌ，２０１０）。この作製方法論の様々な詳細について、抗体をコードするポリヌクレオチドの発現ベクターへのクローニング、細胞へのそれらの発現ベクターのトランスフェクション、トランスフェクト細胞の選択、並びにそれらの細胞からの組換えモノクローナル抗体の発現及び精製を含めて以下に提供する。
哺乳類細胞における抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合断片の組換え産生について、抗体又はその断片をコードする核酸は、更なるクローニング（ＤＮＡの増幅）のため、又は発現のため、概して複製可能なベクターに挿入される。抗体をコードするＤＮＡは、従来の手順を用いて（例えば、抗体の重鎖及び軽鎖をコードするＤＮＡへの特異的結合能を有するオリゴヌクレオチドプローブを使用することにより）容易に単離又は合成される。ベクター成分としては、限定はされないが、概して、以下の１つ以上が挙げられる：シグナル配列、複製起点、１つ以上のマーカー遺伝子、エンハンサーエレメント、プロモーター、及び転写終結配列。プロモーター、ターミネーター、選択可能マーカー、ベクター、及び他のエレメントの選択は、当該技術分野の通常の技術水準の範囲内にあるルーチン設計に関する問題である。多くのかかるエレメントが当該技術分野において公知であり、供給業者から入手可能である。
本発明の抗体は、組換えで直接作製されるのみならず、異種ポリペプチドとの融合ポリペプチドとして作製されてもよく、好ましくは異種ポリペプチドは、シグナル配列又はその他の、成熟タンパク質若しくはポリペプチドのＮ末端に特異的切断部位を有するポリペプチドである。選択される同種又は異種シグナル配列は好ましくは、宿主細胞によって認識され、プロセシングされるもの（即ち、シグナルペプチダーゼによって切断されるもの）である。哺乳類細胞発現では、哺乳類シグナル配列並びにウイルス分泌リーダー、例えば、単純ヘルペスｇＤシグナルが利用可能である。
かかる発現ベクター及びクローニングベクターは、概して、１つ以上の選択の宿主細胞でベクターが複製することを可能にする核酸配列を含むことになる。典型的には、クローニングベクターでは、この配列は、ベクターが宿主染色体ＤＮＡと独立に複製することを可能にするものであり、複製起点又は自己複製配列を含む。種々の細菌、酵母、及びウイルスについて、かかる配列は周知であり、例えば、ほとんどのグラム陰性菌にはプラスミドｐＢＲ３２２からの複製起点が好適であり、酵母には２μプラスミド起点が好適であり、哺乳類細胞におけるクローニングベクターには、様々なウイルス起点（シミアンウイルス４０（「ＳＶ４０」）、ポリオーマ、アデノウイルス、水疱性口内炎ウイルス（「ＶＳＶ」）、又はウシパピローマウイルス（「ＢＰＶ」）が有用である。概して、複製起点成分は、哺乳類発現ベクターには不要である（典型的には、単にそれが初期プロモーターを備えているという理由でＳＶ４０起点が使用されてもよい）。
これらのベクターはまた、典型的には、選択可能マーカーとも称される選択遺伝子も含むことになる。典型的な選択遺伝子は、例えば、バチルス綱（Ｂａｃｉｌｌｉ）についてのＤ－アラニンラセマーゼをコードする遺伝子など、（ａ）抗生物質又は他の毒素、例えば、アンピシリン、ネオマイシン、メトトレキサート、又はテトラサイクリンに対する耐性を付与するタンパク質、（ｂ）栄養要求性の欠損を補完するタンパク質、又は（ｃ）複合培地から利用可能でない決定的な栄養素を供給するタンパク質をコードする。
選択スキームの一例では、宿主細胞の成長を阻止する薬物が利用される。概して、薬物選択を用いて、外来ＤＮＡが挿入された培養哺乳類細胞が選択される。かかる細胞は、一般に「トランスフェクタント」と称される。選択的薬剤の存在下で培養された、且つ目的の遺伝子をその子孫に受け継ぐ能力のある細胞は、「安定トランスフェクタント」と称される。かかる優性選択の例では、薬物ネオマイシン、ミコフェノール酸、及びハイグロマイシンが使用される。例示的選択可能マーカーは、抗生物質ネオマイシンに対する耐性をコードする遺伝子である。選択は、Ｇ－４１８など、ネオマイシン系薬物の存在下で行われる。異種遺伝子による形質転換に成功する細胞が、薬剤耐性を付与するタンパク質を産生し、ひいては選択レジメンを生き残る。
選択システムはまた、「増幅」と称される過程である、目的の遺伝子の発現レベルを増加させるために使用することもできる。トランスフェクタントの増幅は、典型的には、低レベルの選択的薬剤の存在下で細胞を培養し、次に選択的薬剤の量を増加させて、導入された遺伝子の産物を高度に産生する細胞を選択することにより行われる。哺乳類細胞に好適な例示的選択可能マーカーは、ジヒドロ葉酸レダクターゼ（「ＤＨＦＲ」）、チミジンキナーゼ、メタロチオネイン－Ｉ及び－ＩＩ、好ましくは霊長類メタロチオネイン遺伝子、アデノシンデアミナーゼ、オルニチンデカルボキシラーゼなど、抗体核酸の取込みにコンピテントな細胞の同定を可能にするものである。
例えば、哺乳類細胞用の増幅可能な選択可能マーカーは、ジヒドロ葉酸レダクターゼであり、これはメトトレキサートに対する耐性を付与する。他の薬剤耐性遺伝子（例えばハイグロマイシン耐性、多剤耐性、ピューロマイシンアセチルトランスフェラーゼ）もまた使用することができる。初めに、ＤＨＦＲの競合的拮抗薬であるメトトレキサート（「ＭＴＸ」）を含有する培養培地で全ての形質転換体を培養することにより、ＤＨＦＲ選択遺伝子で形質転換された細胞が同定される。野生型ＤＨＦＲが用いられるときに適切な宿主細胞は、ＤＨＦＲ活性が欠損しているチャイニーズハムスター卵巣（「ＣＨＯ」）細胞株である。
或いは、抗体、野生型ＤＨＦＲタンパク質、及び別の選択可能マーカー、例えばアミノグリコシド３’－ホスホトランスフェラーゼ（「ＡＰＨ」）などをコードするＤＮＡ配列で形質転換又は同時形質転換された宿主細胞（特に内因性ＤＨＦＲを含有する野生型宿主）が、アミノグリコシド系抗生物質、例えば、カナマイシン、ネオマイシン、又はＧ－４１８などの選択可能マーカーについての選択薬剤を含有する培地での細胞成長によって選択されてもよい。米国特許第４，９６５，１９９号明細書を参照のこと。
これらのベクターは、抗体をコードするＤＮＡの転写を促進するエンハンサー配列を含み得る。哺乳類遺伝子からの多くのエンハンサー配列が公知である（例えば、グロビン、エラスターゼ、アルブミン、αフェトプロテイン、及びインスリン）。高頻度で使用されるエンハンサーは、真核細胞ウイルスに由来するものである。その例には、複製起点の後期側（ｂｐ１００～２７０）にあるＳＶ４０エンハンサー、サイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、複製起点の後期側にあるポリオーマエンハンサー、及びアデノウイルスエンハンサーが含まれる（真核生物プロモーターを活性化するための増強因子に関しては、Ｙａｎｉｖ，Ｎａｔｕｒｅ，２９７：１７－１８，１９８２もまた参照のこと）。エンハンサーは、ベクター中に抗体コード配列の５’側又は３’側の位置でつなぎ合わされてもよいが、好ましくはプロモーターから５’側の部位に位置する。
発現及びクローニングベクターはまた、概して、宿主生物によって認識され、且つ抗体核酸に作動可能に連結されているプロモーターも含むことになる。真核生物について、プロモーター配列は公知である。事実上あらゆる真核生物遺伝子が、転写が開始される部位から上流のおよそ２５～３０塩基に位置するＡＴリッチ領域を有する。多くの遺伝子の転写開始点から上流の７０～８０塩基に見られる別の配列は、ＣＮＣＡＡＴ領域（式中、Ｎは、任意のヌクレオチドであり得る）である。ほとんどの真核生物遺伝子の３’末端にはＡＡＴＡＡＡ配列があり、これは、コード配列の３’末端にポリＡ尾部を付加するためのシグナルであり得る。これらの配列は全て、好適には真核細胞発現ベクターに挿入される。
哺乳類宿主細胞におけるベクターからの抗体転写は、例えば、ポリオーマウイルス、鶏痘ウイルス、アデノウイルス（アデノウイルス２型など）、ＢＰＶ、トリ肉腫ウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、及び最も好ましくはＳＶ４０などのウイルスのゲノムから入手されるプロモーターにより、異種哺乳類プロモーター、例えばアクチンプロモーター又は免疫グロブリンプロモーターから、熱ショックプロモーターから制御され、但し、かかるプロモーターは宿主細胞系と適合性があるものとする。
ＳＶ４０ウイルスの初期及び後期プロモーターは、好都合には、ＳＶ４０ウイルス複製起点も含むＳＶ４０制限酵素断片として入手される。ヒトサイトメガロウイルスの前初期プロモーターは、好都合には、ＨｉｎｄＩＩＩ Ｅ制限酵素断片として入手される。ＢＰＶをベクターとして使用して哺乳類宿主でＤＮＡを発現させるシステムが、米国特許第４，４１９，４４６号明細書に開示されている。このシステムの改良例が、米国特許第４，６０１，９７８号明細書に記載されている。単純ヘルペスウイルスからのチミジンキナーゼプロモーターの制御下でのマウス細胞におけるヒトβ－インターフェロンｃＤＮＡの発現に関して、Ｒｅｙｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２９７：５９８－６０１（１９８２）もまた参照のこと。或いは、ラウス肉腫ウイルス長末端反復配列をプロモーターとして使用することができる。
ＳＶ４０、サイトメガロウイルス、又は骨髄増殖性肉腫ウイルスからのプロモーターなど、強力転写プロモーターを使用することができる。例えば、米国特許第４，９５６，２８８号明細書及び米国特許出願公開第２００３０１０３９８６号明細書を参照のこと。他の好適なプロモーターには、メタロチオネイン遺伝子からのもの（米国特許第４，５７９，８２１号明細書及び同第４，６０１，９７８号明細書）及びアデノウイルス主要後期プロモーターが含まれる。哺乳類細胞で用いられる発現ベクターには、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、１０８０１ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｂｌｖｄ．，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ．ＵＳＡに、それぞれ受託番号９８６６９、９８６６８、及びＰＴＡ－５２６６として寄託されているｐＺＰ－１、ｐＺＰ－９、及びｐＺＭＰ２１、並びにこれらのベクターの誘導体が含まれる。
真核生物宿主細胞（酵母、真菌、昆虫、植物、動物、ヒト、又は他の多細胞生物からの有核細胞）において使用される発現ベクターはまた、概して、転写の終結及びｍＲＮＡの安定化に必要な配列も含むことになる。かかる配列は、一般に、真核生物又はウイルスＤＮＡ又はｃＤＮＡの非翻訳領域の５’側から、及び場合によっては３’側から入手可能である。これらの領域は、抗体をコードするｍＲＮＡの非翻訳部分にあるポリアデニル化断片として転写されるヌクレオチドセグメントを含む。一つの有用な転写終結成分は、ウシ成長ホルモンポリアデニル化領域である。国際公開第９４／１１０２６号パンフレット及びそこに開示される発現ベクターを参照のこと。
主題の抗体のクローニング又は発現に好適な宿主細胞には、上記に記載される原核細胞、酵母細胞、又は高等真核細胞が含まれる。しかしながら、脊椎動物細胞の利点が最大となっており、培養下の脊椎動物細胞の増殖が、ルーチンの手順となっている。有用な哺乳類宿主細胞株の例は、ＳＶ４０によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ－１（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ １６５０）；及びＣＯＳ－７、ＡＴＣＣ ＣＲＬ １６５１）；ヒト胎児腎臓株（浮遊培養での成長用にサブクローニングされた２９３又は２９３細胞、（ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ １５７３；Ｇｒａｈａｍ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ，３６：５９－７２（１９７７））；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ １０、ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ １６３２；ＢＨＫ ５７０、ＡＴＣＣ番号ＣＲＬ １０３１４）；ＣＨＯ細胞（ＣＨＯ－Ｋ１、ＡＴＣＣ番号ＣＣＬ ６１；ＣＨＯ－ＤＧ４４、Ｕｒｌａｕｂ ｅｔ ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：４２１６－４２２０（１９８０））；マウスセルトリ細胞（ＴＭ４、Ｍａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．，２３：２４３－２５１（１９８０））；サル腎細胞（ＣＶ１ ＡＴＣＣ ＣＣＬ ７０）；アフリカミドリザル腎細胞（ＶＥＲＯ－７６、ＡＴＣＣ ＣＲＬ－１５８７）；ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ２）；イヌ腎細胞（ＭＤＣＫ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ－３４）；バッファローラット肝細胞（ＢＲＬ ３Ａ、ＡＴＣＣ ＣＲＬ １４４２）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８、ＡＴＣＣ ＣＣＬ－７５）；ヒト肝細胞（Ｈｅｐ Ｇ２、ＨＢ ８０６５）；マウス乳腺腫瘍（ＭＭＴ ０６０５６２、ＡＴＣＣ ＣＣＬ－５１）；ＴＲＩ細胞（Ｍａｔｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎａｌｓ Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，３８３：４４－６８（１９８２））；ＭＲＣ ５細胞；ＦＳ４細胞；及びヒト肝細胞癌株（Ｈｅｐ Ｇ２）である。更なる好適な細胞株が当該技術分野において公知であり、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡなどの公的な寄託物保管者から入手可能である。
宿主細胞は、抗体産生のため、上述の発現又はクローニングベクターで形質転換され、上記で考察されるとおり、プロモーターの誘導、形質転換体の選択、又は所望の配列をコードする遺伝子の増幅のため適宜改良された従来の栄養培地で培養される。
本発明の抗体の産生に使用される哺乳類宿主細胞は、種々の培地で培養されてもよい。ハムＦ１０（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）、最小必須培地（（「ＭＥＭ」）（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）、ロズウェルパーク記念研究所の１６４０培地（「ＲＰＭＩ－１６４０」、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）、及びダルベッコ変法イーグル培地（（「ＤＭＥＭ」）Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）などの市販の培地が、宿主細胞の培養に好適である。加えて、Ｈａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｒａ．，５８：４４（１９７９）；Ｂａｒｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１０２：２５５（１９８０）；米国特許第４，７６７，７０４号明細書；同第４，６５７，８６６号明細書；同第４，９２７，７６２号明細書；同第４，５６０，６５５号明細書；又は同第５，１２２，４６９号明細書；国際公開第９０／０３４３０号パンフレット；国際公開第８７／００１９５号パンフレット；又は米国特許再審査第３０，９８５号明細書に記載される培地のいずれかを、宿主細胞用の培養培地として使用することができる。これらの培地のいずれにも、必要に応じて、ホルモン及び／又は他の成長因子（インスリン、トランスフェリン、又は上皮成長因子など）、塩（塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、及びリン酸塩など）、緩衝液（ＨＥＰＥＳなど）、ヌクレオチド（アデノシン及びチミジンなど）、抗生物質（ゲンタマイシン薬など）、微量元素（通常はマイクロモル濃度範囲の最終濃度で存在する無機化合物として定義される）、及びグルコース又は同等のエネルギー源が補足されてもよい。任意の他の必要なサプリメントもまた、当業者には公知であり得る適切な濃度で含まれ得る。温度、ｐＨなどの培養条件は、発現に選択された宿主細胞でこれまで用いられているものであり、当業者には明らかであろう。培地及び培養条件を開発し、最適化する方法は、当該技術分野において公知である（Ｇｒｏｎｅｍｅｙｅｒ ｅｔ ａｌ，Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，１（４）：１８８－２１２，２０１４を参照のこと）。
培養条件を最適化し、好ましい細胞株クローンを選択した後、それらの細胞は、バイオリアクター（多くのモデルが市販されている）内で、最も典型的には、選ばれた詳細な細胞株に最適化された、且つそのために選択された培地及びフィードを細胞培養物に連続的に供給することが関わる流加培養法で培養（接着細胞又は浮遊培養のいずれか）される（Ｂｕｔｌｅｒ，Ｍ．，Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，６８：２８３－２９１，２００５；及びＫｅｌｌｅｙ，Ｂ．，ｍＡｂ，ｌ（５）：４４３－４５２，２００９を参照のこと）。灌流システムもまた利用可能であり、ここでは培地及びフィードが培養物に連続的に供給されるとともに、バイオリアクターから同じ容積の培地が抜き取られる（Ｗｕｒｍ ＦＭ．Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．２００４；２２（１１）：１３９３）。流加培養下での細胞の成長には、ウシ血清アルブミン等の動物成分を使用することによるなど、外部供給源からの混入可能性を回避して、同様に市販されている合成培地を利用可能である。しかしながら、細胞密度、培養物の生存能力及び産生能力を増進させる助けとなる動物成分不含の加水分解物が市販されている（Ｌｉ Ｈ，Ａｌｕｋｏ ＲＥ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ａｎｄ Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２０１０；５８（２１）：１１４７１－６）。細胞培養培地を最適化しようと、ローラーボトル内で利用可能なヘッドスペースへの細心の注意、成長及び発現段階における酸化還元電位、産生時にジスルフィド結合を維持するための還元剤の存在などを含め、多くの研究が実施されている（例えば、Ｈｕｔｔｅｒｅｒ ｅｔ ａｌ．，ｍＡｂ，５（４）：６０８－６１３，２０１３；及びＭｕｌｌａｎ ｅｔ ａｌ，ＢＭＣ Ｐｒｏｃｅｅｄ．，５（Ｓｕｐｐｌ ８）：Ｐ１１０，２０１１を参照のこと）。組換えモノクローナル抗体産生時に有害な酸化が起こる可能性に対処するため、様々な方法論が開発されている（例えば、米国特許第８，５７４，８６９号明細書を参照のこと）。培養細胞は、栄養素を連続的に供給するか、又は別途投与される量として供給することにより成長させてもよい。多くの場合に、細胞成長中に、細胞濃度、ｐＨ、温度、ＣＯ２、ｄ０２、重量オスモル濃度、代謝産物、例えば、グルコース、乳酸、グルタミン及びグルタミン酸などの量など、様々なプロセスパラメータが、校正済みの分析器に直接接続することによりオンラインで、或いは操作者の介入によりオフラインで、プローブを使用してモニタされる。培養ステップにはまた、典型的には、当該技術分野において公知の任意の細胞選択手段により、培養下で成長する細胞がトランスフェクトされた組換え遺伝子を維持していることを確実にすることも関わる。
発酵後、即ち、細胞成長及び組換えタンパク質発現が最大に達すると、典型的には培養ステップに続いて回収ステップが行われ、ここでは細胞が培地と分離され、それによって回収された細胞培養培地が得られる（Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ，ｍＡｂ，２（５）：４８０－４９９，２０１０を参照のこと）。典型的には、カラムクロマトグラフィーなどが関わる様々な精製ステップが培養に続き、組換えモノクローナル抗体が細胞成分及び細胞培養培地成分と分離される。組換えモノクローナル抗体の産生のこの段階に必要な正確な精製ステップは、タンパク質の発現部位に依存し、即ち、細胞それ自体のサイトゾル中か、それとも細胞培養培地中に排出される一般により好ましいタンパク質経路かに依存する。様々な細胞成分は、分画遠心技法、重力に基づく細胞沈降、及び／又はタンジェンシャルフロー精密ろ過若しくは深層ろ過が含まれ得るサイズ排除クロマトグラフ／ろ過技法など、当該技術分野において公知の技法を用いて分離されてもよい（Ｐｏｌｌｏｃｋ ｅｔ ａｌ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，１１０：２０６－２１９，２０１３を参照のこと）。細胞成分の遠心は、連続ディスクスタック型遠心機の使用と、続くデプス及びメンブランフィルタを使用した清澄化により大規模に実現されてもよい（Ｋｅｌｌｅｙ Ｂ，Ｂｌａｎｋ Ｇ，Ｌｅｅ Ａ．Ｐｒｏｃｅｓｓ ｓｃａｌｅ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．２００９：１－２３を参照のこと）。ほとんどの場合、清澄化の後、組換えタンパク質はプロテインＡクロマトグラフィーによって更に精製され（プロテインＡが抗体のＦｃドメインに対して高親和性を示すため）、これは典型的には、低ｐＨ／酸性化溶出ステップを用いて行われる（典型的には、酸性化ステップは、予備的ウイルス不活化ステップと組み合わされる）。浮遊培養下の動物細胞と可溶性タンパク質の分離には、酸性又はカチオン性高分子電解質を使用したフロキュレーション及び／又は沈殿ステップもまた用いられ得る。最後に、典型的には、陰イオン及び陽イオン交換クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー（「ＨＩＣ」）、疎水性電荷誘導クロマトグラフィー（ＨＣＩＣ）、セラミックハイドロキシアパタイト（Ｃａ５（ＰＯ４）３ＯＨ）２を使用したハイドロキシアパタイトクロマトグラフィー、及びこれらの技法の組み合わせを用いて組換えモノクローナル抗体の溶液が仕上げ精製される。所望のモノクローナル抗体の最終的な配合及び濃度は、超遠心技法を用いることにより実現されてもよい。精製収率は、典型的には７０～８０％である。
抗イディオタイプ抗体
本発明の別の態様は、抗イディオタイプ抗体及び抗抗イディオタイプ抗体に関する。抗イディオタイプ抗体は、別の抗体（標的抗体）の決定基を認識する抗体である。概して、抗イディオタイプ抗体は、標的抗体の抗原結合部位の決定基を認識する。典型的には、標的抗体はモノクローナル抗体である。抗イディオタイプ抗体は、概して、標的モノクローナル抗体の供給源と同じ種及び遺伝子型の動物（特に、マウス）を標的モノクローナル抗体で免疫することにより調製される。免疫化された動物は、標的モノクローナル抗体のイディオタイプ決定基に対する免疫応答を開始し、標的モノクローナル抗体のイディオタイプ決定基に対する抗体を産生する。免疫化動物の脾細胞などの抗体産生細胞が、抗イディオタイプモノクローナル抗体の生成に使用されてもよい。更に、抗イディオタイプ抗体はまた、抗抗イディオタイプ抗体を産生させるための動物の免疫化に使用されてもよい。こうした免疫化動物は、標準的な技法を用いた抗抗イディオタイプモノクローナル抗体の生成に使用され得る。抗抗イディオタイプ抗体は、抗イディオタイプ抗体の調製に使用された元の標的モノクローナル抗体と同じエピトープに結合し得る。抗抗イディオタイプ抗体は、元の標的モノクローナル抗体と同じ抗原特異性を有する他のモノクローナル抗体に相当する。
抗イディオタイプ抗体による標的抗体への結合が標的抗体の関連抗原によって阻害される場合、及び抗イディオタイプ抗体が標的抗体と同じ特異性の抗体応答を誘導する場合、それは標的抗体の抗原を模倣する。かかる抗イディオタイプ抗体は、「インターナルイメージ抗イディオタイプ」であり、あたかも元の抗原であるかのように抗体応答を誘導する能力を有する（Ｂｏｎａ ａｎｄ Ｋｏｈｌｅｒ，Ａｎｔｉ－Ｉｄｉｏｔｙｐｉｃ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ａｎｄ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｉｍａｇｅ，Ｉｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｄ Ａｎｔｉ－Ｉｄｉｏｔｙｐｉｃ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｏｂｅｓ Ｆｏｒ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ａｎｄ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，Ｖｅｎｔｅｒ Ｊ．Ｃ．，Ｆｒａｓｓｅｒ，Ｃ．Ｍ．，Ｌｉｎｄｓｔｒｏｍ，Ｊ．（Ｅｄｓ．），Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｎ．Ｙ．，１９８４．ｐｐ １４１－１４９）。インターナルイメージ抗イディオタイプ抗体を取り入れたワクチンは、ウイルス、細菌、及び寄生虫に対する防御反応を誘導することが示されている（Ｋｅｎｎｅｄｙ ｅｔ ａｌ．（１９８６）２３２：２２０－２２３；ＭｃＮａｍａｒａ ｅｔ ａｌ．（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２６：１３２５－１３２６）。インターナルイメージ抗イディオタイプ抗体はまた、腫瘍関連抗原に対する免疫を誘導することも示されている（Ｒａｙｃｈａｕｈｕｒｉ ｅｌ ａｌ．（１９８６）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３７：１７４３－１７４９；Ｒａｙｃｈａｕｈｕｒｉ ｅｔ ａｌ．（１９８７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３９：３９０２－３９１０；Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｙａ－Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ ｅｔ ａｌ．（１９８７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３９：１３５４－１３６０；Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｙａ－Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４１：１３９８－１４０３；Ｈｅｒｌｙｎ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．（１９８９）Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４：３４７－３５７；Ｃｈｅｎ，Ｚ．－Ｊ ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｃｅｌｌ Ｉｍｍ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．Ｃａｎｃｅｒ ３５１－３５９；Ｈｅｒｌｙｎ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｉｎ Ｖｉｖｏ ５：６１５－６２４；Ｆｕｒｕｙａ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１２：２７－３２；Ｍｉｔｔｅｌｍａｎ Ａ．ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ ８９：４６６－４７０；Ｄｕｒｒａｎｔ，Ｌ．Ｇ．ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５４：４８３７－４８４０；Ｍｉｔｔｅｌｍａｎ，Ａ．ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ５４：４１５－４２１；Ｓｃｈｍｉｔｔ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ １３：３８９－３９６；Ｃｈａｋｒｏｂａｒｔｙ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．１８：９５－１０３；Ｃｈａｋｒｏｂａｒｔｙ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５５：１５２５－１５３０；Ｆｏｏｎ，Ｋ．Ａ．ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１：１２０５－１２９４；Ｈｅｒｌｙｎ，Ｄ，ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ １４：１５９－１６６；Ｓｃｌｅｂｕｓｃｈ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ １４：１６７－１７４；及びＨｅｒｌｙｎ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．４３：６５－７６）。
ｍＧｌｕＲ５の抗イディオタイプ抗体は、例えば、ｍＧｌｕＲ５又はｍＧｌｕＲ５の少なくとも１つの抗原エピトープを含有するその免疫原性部分を含む組成物の免疫原性量でマウスなどの動物を免疫することにより調製されてもよい。この組成物はまた、好適なアジュバント、及び免疫原性を付与するのに必要な任意の担体も含有し得る。ｍＧｌｕＲ５を認識するモノクローナル抗体は、上記に記載したとおり免疫化動物の細胞から調製されてもよい。次に、ｍＧｌｕＲ５のエピトープを認識するモノクローナル抗体が選択され、免疫原性量の抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体を含む組成物の調製に使用される。典型的には、好適なアジュバント中、２５～２００μｇの用量の精製ｍＧｌｕＲ５モノクローナルであれば十分であり得る。
動物は、用量間に１４～３０日の間隔を置いて２～６回免疫化されてもよい。典型的には、動物は、腹腔内、皮下、静脈内、又はこれらの組み合わせなど、任意の好適な投与経路によって免疫化される。免疫化期間を通して、標準的なイムノアッセイ方法を用いて抗イディオタイプ抗体産生がモニタされてもよい。標的モノクローナル抗体との反応性を示す抗体の力価が好適な動物が、免疫原として使用したモノクローナル抗体で再び免疫化されてもよく、３日後に抗体産生細胞を回収し得る。好ましくは、脾細胞が使用されるが、他の抗体産生細胞が選択されてもよい。上記に記載したとおり、抗体産生細胞を回収して骨髄腫細胞と融合することによりハイブリドーマが作製され、好適な抗イディオタイプ抗体産生細胞が選択される。
抗抗イディオタイプ抗体は、別の免疫化及びハイブリドーマ作製ラウンドにより、抗イディオタイプモノクローナル抗体を免疫原として使用することによって作製される。免疫化ウサギ宿主から抗原特異的Ｂ細胞のクローン集団を入手する方法に関する例示的教示が、米国特許出願公開第２０１３／０３１６３５３号明細書（この開示は全体として参照により本明細書に援用される）に開示されている。
競合、エピトープマッピング、及び構造的類似性
本明細書に記載されるモノクローナル抗体と実質的又は本質的に同じエピトープに結合する１つ以上の抗体の同定は、アラニンスキャニングを用いて容易に決定することができる。加えて、抗体競合が評価され得る種々の免疫学的スクリーニングアッセイのいずれか１つ。幾つものかかるアッセイがルーチンで実施されており、当該技術分野において周知である（例えば、１９９７年８月２６日に発行された米国特許第５，６６０，８２７号明細書（これは参照により本明細書に具体的に援用される）を参照のこと）。本明細書に記載される抗体が結合するエピトープを実際に決定する際に、本明細書に記載されるモノクローナル抗体と同じ又は実質的に同じ又は重複するエピトープに結合する抗体を同定する必要は全くないことは理解されるであろう。
例えば、単純競合アッセイが用いられてもよく、ここでは対照抗体（例えば、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１～Ａｂ２９又はその断片若しくは変異体）が供試抗体と混合され、次に、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１～Ａｂ２９が結合することが分かっているｍＧｌｕＲ５を含有する試料に適用される。或いは、ｍＧｌｕＲ５試料にこれらの抗体が順次加えられてもよい。かかる単純な競合研究における使用には、ＥＬＩＳＡ、ＡｌｐｈａＬＩＳＡ、ラジオイムノアッセイ、ウエスタンブロッティング、Ｂｉａｃｏｒｅ（商標）、Ｏｃｔｅｔ（登録商標）、及びＰｒｏｔｅＯｎ（商標）分析に基づくプロトコルが好適である。
特定の実施形態において、本方法は、対照抗体を様々な量の供試抗体と（例えば、約１：１、１：２、１：１０、又は約１：１００の比で）予め混合しておき、ある期間後にｍＧｌｕＲ５抗原試料に適用することを含む。他の実施形態において、対照及び様々な量の供試抗体は別々に加えて、ｍＧｌｕＲ５抗原試料に曝露する間に混合することができる。結合した抗体は遊離抗体と区別することができ（例えば、分離又は洗浄技法を用いて未結合抗体を取り除くことによる）、対照抗体は供試抗体と区別し得る（例えば、種特異的又はアイソタイプ特異的二次抗体を使用することによるか、又は対照抗体を検出可能標識で特異的に標識することによる）。従ってこれらの方法を用いると、供試抗体がｍＧｌｕＲ５抗原との対照抗体の結合を減少させるかどうかを決定することができ、それにより、供試抗体が対照抗体（例えば、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１～Ａｂ２９）と実質的に同じ又は重複するエピトープを認識することが示される。全く無関係の抗体（ｍＧｌｕＲ５と結合しない）の存在下での（標識した）対照抗体の結合が、対照高値として働き得る。対照低値は、標識した対照抗体を、同じだが未標識の対照抗体とインキュベートすることにより入手でき、ここでは競合が起こり、標識抗体の結合が減少し得る。試験アッセイでは、供試抗体の存在下における標識抗体の反応性の有意な減少が、実質的に同じエピトープを認識する供試抗体、即ち、標識対照抗体と競合する供試抗体の指標となる。例えば、約１：１又は１：１０～約１：１００の任意の比率の対照ｍＧｌｕＲ５抗体：供試抗体でｍＧｌｕＲ５へのｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１～Ａｂ２９の結合を少なくとも約５０％、例えば、少なくとも約６０％、又はより好ましくは少なくとも約７０％（例えば、約６５～１００％）だけ減少させる任意の供試抗体が、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１～Ａｂ２９と実質的に同じエピトープ又は決定基に結合する抗体と見なされる。好ましくは、かかる供試抗体は、ｍＧｌｕＲ５へのｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１～Ａｂ２９の結合を、供試抗体の非存在下で観察されるｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１～Ａｂ２９の結合の少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約８０％又は少なくとも約９０％（例えば、約９５％）だけ減少させることになる。これらの方法は、他の対照抗体と競合する抗体の同定及び／又は評価に適合させることができる。
好ましくは、かかる供試抗体は、ｍＧｌｕＲ５抗原への対照抗体の結合を、好ましくは、供試抗体の非存在下で観察される対照抗体の結合の少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約８０％、又は少なくとも約９０％（例えば、約９５％）減少させることになる。
ｍＧｌｕＲ５が固定化されている表面に供試抗体が飽和濃度で適用される単純競合アッセイもまた、有利には用いられてもよい。単純競合アッセイにおける表面は、好ましくは、ＯＣＴＥＴ（登録商標）及び／又はＰＲＯＴＥＯＮ（登録商標）に好適な培地の表面である。ｍＧｌｕＲ５でコートされた表面への対照抗体（例えば、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１～Ａｂ２９）の結合が測定される。対照抗体単独のｍＧｌｕＲ５含有表面へのこの結合は、供試抗体の存在下での対照抗体の結合と競合する。供試抗体の存在下での対照抗体によるｍＧｌｕＲ５含有表面への結合の有意な減少は、供試抗体が対照抗体と実質的に同じエピトープを認識し、つまり供試抗体が対照抗体と「競合」することを示している。ｍＧｌｕＲ５への対照抗体（ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１～Ａｂ２９など）の結合を少なくとも約２０％又はそれ以上、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約７０％、又はそれ以上だけ減少させる任意の供試抗体が、対照抗体（例えば、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１～Ａｂ２９）と実質的に同じエピトープ又は決定基に結合する抗体であると見なすことができる。好ましくは、かかる供試抗体は、ｍＧｌｕＲ５抗原への対照抗体（例えば、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１～Ａｂ２９）の結合を少なくとも約５０％（例えば、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、又はそれ以上）だけ減少させることになる。対照及び供試抗体の順序は逆にしてもよいことが理解されるであろう；即ち、競合アッセイにおいて、初めに対照抗体を表面に結合させることができ、次に供試抗体をその後の表面と接触させる。好ましくは、ｍＧｌｕＲ５に対してより高い親和性を有する抗体を初めにｍＧｌｕＲ５含有表面に結合させ、これは、二次抗体（この抗体は競合していると仮定する）について見られる結合の低下の大きさが増すであろうと予想され得ることに伴う。かかるアッセイの更なる例は、例えば、Ｓａｕｎａｌ ａｎｄ Ｒｅｇｅｎｍｏｒｔｅｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，１８３：３３－４１（１９８９）（この開示は参照により本明細書に援用される）に提供される。
加えて、供試抗体が結合する別の抗体又はエピトープと同じ又は重複するｍＧｌｕＲ５上の１つ又は複数のエピトープに抗体が結合するかどうかは、詳細には、ウエスタンブロットベースのアッセイを用いて決定されてもよい。このアッセイでは、抗体が結合する抗原に対応するペプチドのライブラリ、ｍＧｌｕＲ５タンパク質が作られ、これは、典型的には１０～２５、１０～２０、又は１０～１５アミノ酸長の、タンパク質の重複する部分を含む。ｍＧｌｕＲ５配列を包含するこれらの種々の重複するアミノ酸ペプチドを合成し、ＰＥＰＳＰＯＴＳ（商標）ニトロセルロース膜（ＪＰＴ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｂｅｒｌｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）に共有結合的に結合させる。次に製造者の推奨に従いブロットを調製し、プローブする。
本質的には、次にイムノブロットアッセイで、ライブラリ中のどのペプチドが供試抗体に結合するかを蛍光定量的手段によって検出し、それにより、抗原、即ちｍＧｌｕＲ５上のどの残基が供試抗体と相互作用するかを同定することができる（米国特許第７，９３５，３４０号明細書（参照によって本明細書に援用される）を参照のこと）。
様々なエピトープマッピング技法が当該技術分野において公知である。例として、抗原及び抗体のＸ線共結晶構造解析；ＮＭＲ；ＳＰＲ（例えば、２５℃又は３７℃）；アレイベースのオリゴペプチドスキャニング（又は「ペプスキャン解析」）；部位特異的突然変異誘発（例えば、アラニンスキャニング）；突然変異誘発マッピング；水素重水素交換；ファージディスプレイ；及び制限タンパク質分解は全て、当該技術分野において周知のエピトープマッピング技法である（例えば、Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：Ｓｅｃｏｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｅｄｉｔｏｒｓ Ｍｉｋｅ Ｓｃｈｕｔｋｏｗｓｋｉ ａｎｄ Ｕｌｒｉｃｈ Ｒｅｉｎｅｋｅ，２ｎｄ Ｅｄ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ（２００９）、及びＥｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｅｄｉｔｏｒ Ｇｌｅｎｎ Ｍｏｒｒｉｓ，１ｓｔ Ｅｄ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ：Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ（１９９６）（これらは両方とも、本明細書において全体として参照により援用される）を参照のこと）。
本明細書に記載されるモノクローナル抗体、例えば、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１～Ａｂ２９又はその変異体と実質的又は本質的に同じエピトープに結合する１つ以上の抗体の同定は、抗体競合が評価され得る種々の免疫学的スクリーニングアッセイのいずれか１つを用いて容易に決定することができる。幾つものかかるアッセイがルーチンで実施されており、当該技術分野において周知である（例えば、１９９７年８月２６日に発行された米国特許第５，６６０，８２７号明細書（これは参照により本明細書に援用される）を参照のこと）。本明細書に記載される抗体が結合するエピトープを決定する際に、本明細書に記載されるモノクローナル抗体と同じ又は実質的に同じエピトープに結合する抗体を同定する必要は全くないことは理解されるであろう。
抗体、その抗原結合断片、又は抗体誘導体が、上記に定義されるエピトープ領域のうちの１つの範囲内で結合するかどうかの決定は、当業者に公知の方法で行うことができる。かかるマッピング／特徴付け方法の別の例では、抗ｍＧｌｕＲ５抗体に対するエピトープ領域が、ｍＧｌｕＲ５タンパク質の露出したアミン／カルボキシルの化学修飾を用いるエピトープ「フットプリンティング」により決定されてもよい。かかるフットプリント法の１つの具体的な例は、質量分析法によって検出される水素重水素交換（「ＨＸＭＳ」）を用いるものであり、ここでは受容体及びリガンドタンパク質アミドプロトンの水素／重水素交換、結合、及び逆交換が起こり、ここでタンパク質結合に関与する骨格アミド基は逆交換から保護され、従って重水素化されたまま残ることになる。この時点で、ペプシンタンパク質分解、高速マイクロボア高性能液体クロマトグラフィー分離、及び／又はエレクトロスプレーイオン化質量分析法によって関連性のある領域を同定することができる（例えば、Ｅｈｒｉｎｇ Ｈ．，Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２６７（２）：２５２－２５９（１９９９）及びＥｎｇｅｎ，Ｊ．Ｒ．＆ Ｓｍｉｔｈ，Ｄ．Ｌ．，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，７３：２５６Ａ－２６５Ａ（２００１）を参照のこと）。好適なエピトープ同定技法の別の例は、核磁気共鳴エピトープマッピング（「ＮＭＲ」）であり、ここでは典型的には、遊離抗原及び抗体などの抗原結合ペプチドと複合体化した抗原の二次元ＮＭＲスペクトル中のシグナルの位置が比較される。典型的には抗原は、１５Ｎで選択的に同位体標識され、そのためＮＭＲスペクトル中には、抗原に対応するシグナルのみが見え、抗原結合ペプチドからのシグナルは見えなくなる。抗原結合ペプチドとの相互作用に関与するアミノ酸から生じる抗原シグナルは、典型的には、遊離抗原のスペクトルと比較した複合体のスペクトル中の位置がシフトすることになり、このように結合に関与するアミノ酸を同定することができる。例えば、Ｅｒｎｓｔ Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｒｅｓ．Ｆｏｕｎｄ．Ｗｏｒｋｓｈｏｐ，（４４）：１４９－６７（２００４）；Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ，２８１（ｌ）：６１－６７（１９９８）；及びＳａｉｔｏ ａｎｄ Ｐａｔｔｅｒｓｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ，９（３）：５１６－２４（１９９６）を参照のこと。エピトープマッピング／特徴付けはまた、質量分析（「ＭＳ」）法を用いて実施することもできる（例えば、Ｄｏｗｎａｒｄ，Ｊ．Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｕｍ．，３５（４）：４９３－５０３（２０００）及びＫｉｓｅｌａｒ ａｎｄ Ｄｏｗｎａｒｄ，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，７１（９）：１７９２－８０１（１９９９）を参照のこと）。
エピトープマッピング及び同定の文脈では、プロテアーゼ消化法もまた有用であり得る。プロテアーゼ消化により、例えばトリプシンをｍＧｌｕＲ５と約１：５０の比で３７℃及びｐＨ７～８にて一晩（「ｏ／ｎ」）消化し、続いて質量分析法（「ＭＳ」）による分析でペプチドを同定することを用いて、抗原決定基に関連性のある領域／配列を決定することができる。続いて、トリプシン消化に供した試料と、抗体と共にインキュベートして、次に例えばトリプシンによる消化に供した試料との比較（それによって抗体のフットプリントが明らかになる）により、抗ｍＧｌｕＲ５抗体によってトリプシン切断から保護されたペプチドを同定することができる。同様のエピトープ特徴付け方法では、キモトリプシン又はペプシンのような他の酵素を使用することができる。更に、酵素消化は、ｍＧｌｕＲ５結合ポリペプチドのコンテクストで潜在的な抗原決定基配列がｍＧｌｕＲ５の領域内にあるかどうかを分析する迅速な方法を提供し得る。ポリペプチドが表面露出していない場合、それは免疫原性／抗原性の点で関連性がない可能性が最も高い（同様の技法の考察については、例えば、Ｍａｎｃａ，Ａｎｎ．１ｓｔ．Ｓｕｐｅｒ．Ｓａｎｉｔａ．，２７（１）：１５－９（１９９１）を参照のこと）。
部位特異的突然変異誘発は、結合エピトープの特徴付けに有用な別の技法である。例えば、「アラニン－スキャニング」部位特異的突然変異誘発（例えば、アラニンスキャニング、アラニンスキャニング突然変異誘発、アラニンスキャニング突然変異、コンビナトリアルアラニンスキャニング、又はアラニン点突然変異の作成としても知られる）では、タンパク質セグメントの範囲内にある各残基が、例えば、直接的なペプチド又はタンパク質合成、部位特異的突然変異誘発、ＧＥＮＥＡＲＴ（商標）突然変異誘発サービス（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ Ｕ．Ｓ．Ａ．）又はショットガン突然変異誘発のような方法論を用いてアラニン残基（又は野生型配列にアラニンが存在する場合、バリンなどの別の残基）に置き換えられる。これにより、この技法を用いてその分子の一連の単一点突然変異体が生成される；生成される突然変異体の数は分子内にある残基の数に等しく、各残基が一度に一つずつ単一のアラニン残基に置き換えられる。天然（野生型）残基を置き換えるためには、概してアラニンが使用され、これは、アラニンが、バルキーでない、化学的に不活性なメチル官能基であって、他の多くのアミノ酸が備え得る二次構造の選好性を模倣することができるためである。続いて、天然の残基をアラニンで置き換えることがアラニンスキャニング突然変異体とその結合パートナーとの結合親和性に及ぼす効果について、限定はされないが、ＳＰＲ結合実験のような方法を用いて測定することができる。ある突然変異が結合親和性の有意な減少につながる場合、その突然変異させた残基が結合に関与する可能性が最も高い。構造的エピトープに特異的なモノクローナル抗体（即ち、折り畳まれていないタンパク質には結合しない抗体）を結合親和性実験の陽性対照として使用して、タンパク質のアラニンの置き換えが全体的な三次構造に影響しないことを確かめ得る（タンパク質の折り畳み全体が変化すると、結合が間接的な影響を受け、それによって偽陽性結果が生じ得るため）。例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ａｎｄ Ｗｅｌｌｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２６７：３８３－３８６（１９９５）；Ｗｅｉｓｓ ｅｔ ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９７（１６）：８９５０－８９５４（２０００）；及びＷｅｌｌｓ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９３：１－６（１９９６）を参照のこと。
エピトープ「フットプリンティング」には、電子顕微鏡法もまた用いることができる。例えば、Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５５：２７５－２７８（１９９２）は、クライオ電子顕微鏡法、三次元画像再構成、及びＸ線結晶構造解析の協働的な適用を用いることにより、天然のササゲモザイクウイルスのカプシド表面上にあるＦａｂ断片の物理的フットプリントを決定した。
エピトープ判定のための他の形態の「無標識」アッセイとしては、ＳＰＲ（ＢＩｉａｃｏｒｅ（商標）システムとして市販されている、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｒｌｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ）及び反射率測定干渉分光法（「ＲｉｆＳ」）が挙げられる（例えば、Ｆａｇｅｒｓｔａｍ ｅｔ ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ，３：２０８－１４（１９９０）；Ｎｉｃｅ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，６４６：１５９－１６８（１９９３）；Ｌｅｉｐｅｒｔ ｅｔ ａｌ，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．，３７：３３０８－３３１１（１９９８）；Ｋｒｏｇｅｒ ｅｔ ａｌ，Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒｓ ａｎｄ Ｂｉｏｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ，１７：９３７－９４４（２００２）を参照のこと）。詳細な実施形態において、エピトープ判定は、本明細書の実施例で実証されるとおり、Ｏｃｔｅｔ（登録商標）ＲＥＤ９６システムで、ｍＧｌｕＲ５細胞外ドメインの固定化を用いて行われてもよい。
一部の実施形態において、本発明の抗ｍＧｌｕＲ５抗体は、別の抗ｍＧｌｕＲ５抗体と同じ又は類似した構造を有し得る。構造的類似性は、Ｘ線結晶構造解析、ＮＭＲ、又は他の公知の方法によって達成される三次元タンパク質構造の構造アラインメントで評価し得る。比較されている２つのタンパク質のＣＤＲにあるＣα炭素間の位置の差を分析することにより、類似した構造を決定し得る。概して、ＣＤＲのうちの１つ以上における５Å未満、４Å未満、３Å未満、２Å未満、１Å未満、又は０．５Å未満の平均ＲＭＳＤが、類似したタンパク質構造の指標となる。
抗ｍＧｌｕＲ５抗体の配列
以下は、本発明の特定の非限定的な実施形態である。いずれの場合も、本発明はまた、以下のとおり更に詳細に記載されるとおりの、類似のエピトープに結合し、且つ類似の配列を有する抗体及び抗体断片も含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号９、１１、１３）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１７、１９、２１）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号９、１１、１３）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１７、１９、２１）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１のＶＨ鎖（配列番号７）及びＶＬ鎖（配列番号１５）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号１５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２５、２７、２９）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３３、３５、３７）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２５、２７、２９）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３３、３５、３７）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２のＶＨ鎖（配列番号２３）及びＶＬ鎖（配列番号３１）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ３である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ３のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４１、４３、４５）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ３のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４９、５１、５３）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ３のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４１、４３、４５）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４９、５１、５３）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ３と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ３のＶＨ鎖（配列番号３９）及びＶＬ鎖（配列番号４７）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号４７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ４である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ４のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号５７、５９、６１）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ４のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号６５、６７、６９）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ４のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号５７、５９、６１）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号６５、６７、６９）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ４と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ４のＶＨ鎖（配列番号５５）及びＶＬ鎖（配列番号６３）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号５５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号６３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号５５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号６３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ５である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ５のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号７３、７５、７７）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ５のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号８１、８３、８５）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ５のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号７３、７５、７７）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号８１、８３、８５）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ５と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ５のＶＨ鎖（配列番号７１）及びＶＬ鎖（配列番号７９）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号７１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号７９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号７１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号７９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ６である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ６のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号８９、９１、９３）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ６のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号９７、９９、１０１）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ６のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号８９、９１、９３）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号９７、９９、１０１）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ６と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ６のＶＨ鎖（配列番号８７）及びＶＬ鎖（配列番号９５）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号８７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号９５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号８７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号９５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ７である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ７のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１０５、１０７、１０９）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ７のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１１３、１１５、１１７）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ７のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１０５、１０７、１０９）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１１３、１１５、１１７）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ７と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ７のＶＨ鎖（配列番号１０３）及びＶＬ鎖（配列番号１１１）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１０３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１１１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１０３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号１１１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ８である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ８のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１２１、１２３、１２５）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ８のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１２９、１３１、１３３）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ８のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１２１、１２３、１２５）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１２９、１３１、１３３）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ８と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ８のＶＨ鎖（配列番号１１９）及びＶＬ鎖（配列番号１２７）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１１９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１２７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１１９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号１２７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ９である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ９のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１３７、１３９、１４１）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ９のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１４５、１４７、１４９）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ９のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１３７、１３９、１４１）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１４５、１４７、１４９）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ９と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ９のＶＨ鎖（配列番号１３５）及びＶＬ鎖（配列番号１４３）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１３５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１４３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１３５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号１４３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１０である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１０のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１５３、１５５、１５７）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１０のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１６１、１６３、１６５）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１０のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１５３、１５５、１５７）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１６１、１６３、１６５）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１０と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１０のＶＨ鎖（配列番号１５１）及びＶＬ鎖（配列番号１５９）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１５１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１５９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１５１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号１５９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１１である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１１のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１６９、１７１、１７３）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１１のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１７７、１７９、１８１）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１１のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１６９、１７１、１７３）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１７７、１７９、１８１）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１１と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１１のＶＨ鎖（配列番号１６７）及びＶＬ鎖（配列番号１７５）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１６７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１７５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１６７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号１７５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１２である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１２のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１８５、１８７、１８９）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１２のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１９３、１９５、１９７）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１２のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１８５、１８７、１８９）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１９３、１９５、１９７）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１２と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１２のＶＨ鎖（配列番号１８３）及びＶＬ鎖（配列番号１９１）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１８３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１９１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１８３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号１９１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１３である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１３のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２０１、２０３、２０５）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１３のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２０９、２１１、２１３）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１３のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２０１、２０３、２０５）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２０９、２１１、２１３）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１３と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１３のＶＨ鎖（配列番号１９９）及びＶＬ鎖（配列番号２０７）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１９９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２０７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１９９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号２０７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１４である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１４のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２１７、２１９、２２１）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１４のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２２５、２２７、２２９）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１４のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２１７、２１９、２２１）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２２５、２２７、２２９）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１４と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１４のＶＨ鎖（配列番号２１５）及びＶＬ鎖（配列番号２２３）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２１５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２２３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２１５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号２２３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１５である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１５のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２３３、２３５、２３７）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１５のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２４１、２４３、２４５）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１５のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２３３、２３５、２３７）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２４１、２４３、２４５）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１５と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１５のＶＨ鎖（配列番号２３１）及びＶＬ鎖（配列番号２３９）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２３１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２３９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２３１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号２３９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１６である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１６のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２４９、２５１、２５３）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１６のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２５７、２５９、２６１）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１６のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２４９、２５１、２５３）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２５７、２５９、２６１）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１６と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１６のＶＨ鎖（配列番号２４７）及びＶＬ鎖（配列番号２５５）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２４７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２５５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２４７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号２５５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１７である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１７のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２６５、２６７、２６９）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１７のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２７３、２７５、２７７）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１７のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２６５、２６７、２６９）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２７３、２７５、２７７）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１７と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１７のＶＨ鎖（配列番号２６３）及びＶＬ鎖（配列番号２７１）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２６３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２７１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２６３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号２７１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１８である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１８のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２８１、２８３、２８５）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１８のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２８９、２９１、２９３）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１８のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２８１、２８３、２８５）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２８９、２９１、２９３）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１８と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１８のＶＨ鎖（配列番号２７９）及びＶＬ鎖（配列番号２８７）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２７９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２８７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２７９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号２８７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１９である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１９のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２９７、２９９、３０１）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１９のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３０５、３０７、３０９）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１９のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２９７、２９９、３０１）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３０５、３０７、３０９）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１９と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１９のＶＨ鎖（配列番号２９５）及びＶＬ鎖（配列番号３０３）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２９５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３０３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２９５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３０３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２０である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２０のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３１３、３１５、３１７）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２０のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３２１、３２３、３２５）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２０のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３１３、３１５、３１７）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３２１、３２３、３２５）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２０と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２０のＶＨ鎖（配列番号３１１）及びＶＬ鎖（配列番号３１９）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３１１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３１９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３１１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３１９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２１である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２１のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３２９、３３１、３３３）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２１のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３３７、３３９、３４１）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２１のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３２９、３３１、３３３）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３３７、３３９、３４１）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２１と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２１のＶＨ鎖（配列番号３２７）及びＶＬ鎖（配列番号３３５）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３２７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３３５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３２７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３３５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２２である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２２のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３４５、３４７、３４９）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２２のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３５３、３５５、３５７）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２２のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３４５、３４７、３４９）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３５３、３５５、３５７）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２２と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２２のＶＨ鎖（配列番号３４３）及びＶＬ鎖（配列番号３５１）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３４３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３５１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３４３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３５１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２３である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２３のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３６１、３６３、３６５）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２３のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３６９、３７１、３７３）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２３のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３６１、３６３、３６５）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３６９、３７１、３７３）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２３と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２３のＶＨ鎖（配列番号３５９）及びＶＬ鎖（配列番号３６７）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３５９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３６７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３５９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３６７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２４である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２４のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３７７、３７９、３８１）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２４のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３８５、３８７、３８９）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２４のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３７７、３７９、３８１）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３８５、３８７、３８９）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２４と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２４のＶＨ鎖（配列番号３７５）及びＶＬ鎖（配列番号３８３）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３７５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３８３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３７５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３８３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２５である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２５のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３９３、３９５、３９７）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２５のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４０１、４０３、４０５）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２５のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３９３、３９５、３９７）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４０１、４０３、４０５）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２５と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２５のＶＨ鎖（配列番号３９１）及びＶＬ鎖（配列番号３９９）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３９１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３９９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３９１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３９９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２６である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２６のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４０９、４１１、４１３）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２６のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４１７、４１９、４２１）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２６のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４０９、４１１、４１３）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４１７、４１９、４２１）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２６と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２６のＶＨ鎖（配列番号４０７）及びＶＬ鎖（配列番号４１５）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４０７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４１５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４０７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号４１５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２７である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２７のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４２５、４２７、４２９）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２７のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４３３、４３５、４３７）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２７のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４２５、４２７、４２９）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４３３、４３５、４３７）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２７と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２７のＶＨ鎖（配列番号４２３）及びＶＬ鎖（配列番号４３１）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４２３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４３１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４２３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号４３１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２８である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２８のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４４１、４４３、４４５）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２８のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４４９、４５１、４５３）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２８のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４４１、４４３、４４５）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４４９、４５１、４５３）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２８と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２８のＶＨ鎖（配列番号４３９）及びＶＬ鎖（配列番号４４７）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４３９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４４７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４３９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号４４７のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２９である。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２９のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４５７、４５９、４６１）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２９のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４６５、４６７、４６９）を含む。一実施形態において、抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２９のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４５７、４５９、４６１）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４６５、４６７、４６９）を含む。更なる実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２９と同じエピトープに結合する。別の実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２９のＶＨ鎖（配列番号４５５）及びＶＬ鎖（配列番号４６３）又はそれらと少なくとも９０又は９５％の配列同一性を持つＶＬ鎖及びＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４５５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４６３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４５５のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号４６３のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
抗ｍＧｌｕＲ５抗体をコードするポリヌクレオチド
本発明は更に、抗体及び抗体断片をコードするポリヌクレオチドを包含する。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号８、１０、１２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１６、１８、２０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号８、１０、１２）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１６、１８、２０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１のＶＨ鎖（配列番号６）及びＶＬ鎖（配列番号１４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号１４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号１４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２４、２６、２８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３２、３４、３６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２４、２６、２８）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３２、３４、３６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２のＶＨ鎖（配列番号２２）及びＶＬ鎖（配列番号３０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ３をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ３のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４０、４２、４４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ３のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４８、５０、５２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ３のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４０、４２、４４）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４８、５０、５２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ３と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ３のＶＨ鎖（配列番号３８）及びＶＬ鎖（配列番号４６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号３８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号４６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号４６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ４をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ４のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号５６、５８、６０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ４のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号６４、６６、６８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ４のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号５６、５８、６０）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号６４、６６、６８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ４と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ４のＶＨ鎖（配列番号５４）及びＶＬ鎖（配列番号６２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号５４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号６２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号５４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号６２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ５をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ５のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号７２、７４、７６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ５のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号８０、８２、８４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ５のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号７２、７４、７６）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号８０、８２、８４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ５と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ５のＶＨ鎖（配列番号７０）及びＶＬ鎖（配列番号７８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号７０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号７８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号７０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号７８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ６をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ６のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号８８、９０、９２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ６のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号９６、９８、１００）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ６のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号８８、９０、９２）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号９６、９８、１００）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ６と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ６のＶＨ鎖（配列番号８６）及びＶＬ鎖（配列番号９４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号８６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号９４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号８６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号９４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ７をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ７のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１０４、１０６、１０８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ７のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１１２、１１４、１１６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ７のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１０４、１０６、１０８）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１１２、１１４、１１６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ７と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ７のＶＨ鎖（配列番号１０２）及びＶＬ鎖（配列番号１１０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号１０２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号１１０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１０２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号１１０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ８をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ８のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１２０、１２２、１２４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ８のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１２８、１３０、１３２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ８のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１２０、１２２、１２４）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１２８、１３０、１３２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ８と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ８のＶＨ鎖（配列番号１１８）及びＶＬ鎖（配列番号１２６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号１１８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号１２６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１１８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号１２６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ９をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ９のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１３６、１３８、１４０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ９のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１４４、１４６、１４８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ９のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１３６、１３８、１４０）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１４４、１４６、１４８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ９と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ９のＶＨ鎖（配列番号１３４）及びＶＬ鎖（配列番号１４２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号１３４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号１４２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１３４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号１４２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１０をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１０のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１５２、１５４、１５６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１０のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１６０、１６２、１６４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１０のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１５２、１５４、１５６）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１６０、１６２、１６４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１０と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１０のＶＨ鎖（配列番号１５０）及びＶＬ鎖（配列番号１５８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号１５０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号１５８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１５０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号１５８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１１をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１１のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１６８、１７０、１７２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１１のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１７６、１７８、１８０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１１のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１６８、１７０、１７２）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１７６、１７８、１８０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１１と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１１のＶＨ鎖（配列番号１６６）及びＶＬ鎖（配列番号１７４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号１６６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号１７４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１６６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号１７４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１２をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１２のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１８４、１８６、１８８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１２のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１９２、１９４、１９６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１２のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号１８４、１８６、１８８）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号１９２、１９４、１９６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１２と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１２のＶＨ鎖（配列番号１８２）及びＶＬ鎖（配列番号１９０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号１８２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号１９０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１８２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号１９０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１３をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１３のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２００、２０２、２０４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１３のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２０８、２１０、２１２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１３のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２００、２０２、２０４）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２０８、２１０、２１２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１３と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１３のＶＨ鎖（配列番号１９８）及びＶＬ鎖（配列番号２０６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号１９８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号２０６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号１９８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号２０６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１４をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１４のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２１６、２１８、２２０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１４のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２２４、２２６、２２８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１４のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２１６、２１８、２２０）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２２４、２２６、２２８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１４と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１４のＶＨ鎖（配列番号２１４）及びＶＬ鎖（配列番号２２２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号２１４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号２２２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２１４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号２２２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１５をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１５のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２３２、２３４、２３６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１５のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２４０、２４２、２４４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１５のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２３２、２３４、２３６）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２４０、２４２、２４４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１５と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１５のＶＨ鎖（配列番号２３０）及びＶＬ鎖（配列番号２３８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号２３０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号２３８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２３０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号２３８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１６をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１６のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２４８、２５０、２５２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１６のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２５６、２５８、２６０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１６のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２４８、２５０、２５２）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２５６、２５８、２６０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１６と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１６のＶＨ鎖（配列番号２４６）及びＶＬ鎖（配列番号２５４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号２４６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号２５４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２４６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号２５４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１７をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１７のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２６４、２６６、２６８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１７のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２７２、２７４、２７６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１７のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２６４、２６６、２６８）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２７２、２７４、２７６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１７と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１７のＶＨ鎖（配列番号２６２）及びＶＬ鎖（配列番号２７０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号２６２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号２７０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２６２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号２７０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１８をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１８のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２８０、２８２、２８４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１８のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２８８、２９０、２９２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１８のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２８０、２８２、２８４）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号２８８、２９０、２９２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１８と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１８のＶＨ鎖（配列番号２７８）及びＶＬ鎖（配列番号２８６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号２７８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号２８６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２７８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号２８６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１９をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１９のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２９６、２９８、３００）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１９のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３０４、３０６、３０８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１９のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号２９６、２９８、３００）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３０４、３０６、３０８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１９と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１９のＶＨ鎖（配列番号２９４）及びＶＬ鎖（配列番号３０２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号２９４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号３０２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号２９４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３０２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２０をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２０のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３１２、３１４、３１６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２０のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３２０、３２２、３２４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２０のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３１２、３１４、３１６）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３２０、３２２、３２４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２０と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２０のＶＨ鎖（配列番号３１０）及びＶＬ鎖（配列番号３１８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号３１０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号３１８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３１０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３１８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２１をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２１のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３２８、３３０、３３２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２１のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３３６、３３８、３４０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２１のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３２８、３３０、３３２）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３３６、３３８、３４０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２１と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２１のＶＨ鎖（配列番号３２６）及びＶＬ鎖（配列番号３３４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号３２６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号３３４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３２６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３３４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２２をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２２のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３４４、３４６、３４８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２２のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３５２、３５４、３５６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２２のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３４４、３４６、３４８）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３５２、３５４、３５６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２２と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２２のＶＨ鎖（配列番号３４２）及びＶＬ鎖（配列番号３５０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号３４２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号３５０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３４２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３５０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２３をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２３のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３６０、３６２、３６４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２３のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３６８、３７０、３７２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２３のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３６０、３６２、３６４）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３６８、３７０、３７２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２３と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２３のＶＨ鎖（配列番号３５８）及びＶＬ鎖（配列番号３６６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号３５８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号３６６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３５８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３６６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２４をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２４のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３７６、３７８、３８０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２４のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３８４、３８６、３８８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２４のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３７６、３７８、３８０）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号３８４、３８６、３８８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２４と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２４のＶＨ鎖（配列番号３７４）及びＶＬ鎖（配列番号３８２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号３７４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号３８２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３７４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３８２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２５をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２５のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３９２、３９４、３９６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２５のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４００、４０２、４０４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２５のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号３９２、３９４、３９６）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４００、４０２、４０４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２５と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２５のＶＨ鎖（配列番号３９０）及びＶＬ鎖（配列番号３９８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号３９０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号３９８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号３９０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号３９８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２６をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２６のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４０８、４１０、４１２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２６のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４１６、４１８、４２０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２６のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４０８、４１０、４１２）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４１６、４１８、４２０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２６と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２６のＶＨ鎖（配列番号４０６）及びＶＬ鎖（配列番号４１４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号４０６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号４１４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４０６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号４１４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２７をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２７のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４２４、４２６、４２８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２７のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４３２、４３４、４３６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２７のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４２４、４２６、４２８）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４３２、４３４、４３６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２７と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２７のＶＨ鎖（配列番号４２２）及びＶＬ鎖（配列番号４３０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号４２２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号４３０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４２２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号４３０のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２８をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２８のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４４０、４４２、４４４）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２８のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４４８、４５０、４５２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２８のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４４０、４４２、４４４）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４４８、４５０、４５２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２８と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２８のＶＨ鎖（配列番号４３８）及びＶＬ鎖（配列番号４４６）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号４３８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号４４６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４３８のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号４４６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２９をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２９のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４５６、４５８、４６０）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２９のＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４６４、４６６、４６８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２９のＶＨ鎖ＣＤＲ（配列番号４５６、４５８、４６０）及びＶＬ鎖ＣＤＲ（配列番号４６４、４６６、４６８）を含む抗体又は抗体断片をコードする。更なる実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２９と同じエピトープに結合する抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、ｍＧｌｕＲ５ Ａｂ２９のＶＨ鎖（配列番号４５４）及びＶＬ鎖（配列番号４６２）を含む抗体又は抗体断片をコードする。別の実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号４５４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明のポリヌクレオチドは、配列番号４６２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む抗体又は抗体断片をコードする。一実施形態において、本発明の抗体又は抗体断片は、配列番号４５４のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＨ鎖及び配列番号４６２のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の同一性を有するＶＬ鎖を含む。
更なる修飾
抗体コンジュゲート
一部の実施形態において、本発明は、ペイロード薬物（多くの場合に細胞毒性）に連結した抗体（又は単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）などの抗体断片からなる抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を特徴とする。抗体は、ＡＤＣを標的細胞に結合させる。多くの場合に、次にＡＤＣが細胞によってインターナライズされ、薬物が細胞内に放出される。このターゲティングが理由で、副作用が低下し、治療ウィンドウが広がる。親水性リンカー（例えば、ＰＥＧ４Ｍａｌ）は、ＭＤＲ（多剤耐性）トランスポーターを介して薬物が耐性細胞から汲み出されるのを防ぐ助けとなる。
別の態様において、本発明は、細胞毒、薬物（例えば、免疫抑制薬）又は放射性毒などの治療用薬剤にコンジュゲートした抗ｍＧｌｕＲ５抗体、又はその断片を含むイムノコンジュゲートを特徴とする。かかるコンジュゲートは、本明細書では「イムノコンジュゲート」と称される。１つ以上の細胞毒を含むイムノコンジュゲートは、「イムノトキシン」と称される。細胞毒又は細胞毒性薬剤には、細胞にとって有害な（例えば、それを殺傷する）任意の薬剤が含まれる。例としては、タキソール、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テニポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンＤ、１－デヒドロテストステロン、グルココルチコイド類、及びピューロマイシン並びにこれらの類似体又はホモログが挙げられる。治療用薬剤としてはまた、例えば、代謝拮抗薬（例えば、メトトレキサート、６－メルカプトプリン、６－チオグアニン、シタラビン、５－フルオロウラシル、ダカルバジン（ｄｅｃａｒｂａｚｉｎｅ））、アルキル化剤（例えば、メクロレタミン、チオテパ、クロラムブシル、メルファラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）及びロムスチン（ＣＣＮＵ）、シクロホスファミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣ、及びｃｉｓ－ジクロロジアミン白金（ＩＩ）（ＤＤＰ）シスプラチン）、アントラサイクリン類（例えば、ダウノルビシン（旧称ダウノマイシン）及びドキソルビシン）、抗生物質（例えば、ダクチノマイシン（旧称アクチノマイシン）、ブレオマイシン、ミトラマイシン、及びアントラマイシン（ＡＭＣ））、及び抗有糸分裂剤（例えば、ビンクリスチン及びビンブラスチン）も挙げられる。
本発明の少なくとも一部の実施形態に係る抗体にコンジュゲートし得る治療用細胞毒の他の例としては、デュオカルマイシン類、カリケアマイシン、メイタンシン類及びアウリスタチン類、及びこれらの誘導体が挙げられる。カリケアマイシン抗体コンジュゲートの例は、市販されている（Ｍｙｌｏｔａｒｇ（商標）、Ｗｙｅｔｈ）。
細胞毒は、当該技術分野で利用可能なリンカー技術を用いて、本発明の少なくとも一部の実施形態に係る抗体にコンジュゲートすることができる。細胞毒を抗体にコンジュゲートするために用いられているリンカータイプの例としては、限定はされないが、ヒドラゾン類、チオエーテル類、エステル類、ジスルフィド類及びペプチド含有リンカーが挙げられる。リンカーは、例えば、リソソームコンパートメント内で低ｐＨによる切断を受け易いか、又はカテプシン類（例えば、カテプシンＢ、Ｃ、Ｄ）などの腫瘍組織に優先的に発現するプロテアーゼなど、プロテアーゼによる切断を受け易いリンカーを選択することができる。細胞毒、リンカーのタイプ及び治療用薬剤を抗体にコンジュゲートする方法の更なる考察については、Ｓａｉｔｏ，Ｇ．ｅｔ ａｌ．（２００３）Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．５５：１９９－２１５；Ｔｒａｉｌ，Ｐ．Ａ．ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．５２：３２８－３３７；Ｐａｙｎｅ，Ｇ．（２００３）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ３：２０７－２１２；Ａｌｌｅｎ，Ｔ．Ｍ．（２００２）Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ ２：７５０－７６３；Ｐａｓｔａｎ，Ｉ．ａｎｄ Ｋｒｅｉｔｍａｎ，Ｒ．Ｊ．（２００２）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ ３：１０８９－１０９１；Ｓｅｎｔｅｒ，Ｐ．Ｄ．ａｎｄ Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｃ．Ｊ．（２００１）Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．５３：２４７－２６４もまた参照のこと。
本発明の抗体はまた、放射性同位体にコンジュゲートして、ラジオイムノコンジュゲートとも称される細胞毒性放射性医薬品を生成することもできる。診断又は治療に用いるための抗体にコンジュゲートし得る放射性同位体の例としては、限定はされないが、ヨウ素１３１、インジウム１１１、イットリウム９０及びルテチウム１７７が挙げられる。ラジオイムノコンジュゲートの調製方法は、当該技術分野で確立されている。ラジオイムノコンジュゲートは、Ｚｅｖａｌｉｎ（登録商標）（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ）を含め、市販されており、本発明の少なくとも一部の実施形態に係る抗体を使用したラジオイムノコンジュゲートの調製に、同様の方法を用いることができる。
本発明の少なくとも一部の実施形態に係る抗ヒトｍＧｌｕＲ５抗体及び含有するコンジュゲートは、所与の生物学的反応の修飾に使用することができ、薬物部分が古典的な化学的治療用薬剤に限定されると解釈されてはならない。例えば、薬物部分は、所望の生物学的活性を持つタンパク質又はポリペプチドであり得る。かかるタンパク質には、例えば、アブリン、リシンＡ、シュードモナス外毒素、又はジフテリア毒素などの酵素的に活性な毒素、又はその活性断片；腫瘍壊死因子又はインターフェロン－γなどのタンパク質；又は、例えば、リンホカイン類、インターロイキン－１（「ＩＬ－１」）、インターロイキン－２（「ＩＬ－２」）、インターロイキン－６（「ＩＬ－６」）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（「ＧＭ－ＣＳＦ」）、顆粒球コロニー刺激因子（「Ｇ－ＣＳＦ」）、又は他の成長因子などの生物学的反応修飾物質が含まれ得る。
かかる治療用部分を抗体にコンジュゲートする技法は周知であり、例えば、Ａｒｎｏｎ ｅｔ ａｌ．，“Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ｉｍｍｕｎｏｔａｒｇｅｔｉｎｇ Ｏｆ Ｄｒｕｇｓ Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ”，ｉｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｒｅｉｓｆｅｌｄ ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．），ｐｐ．２４３－５６（Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉ ｎｃ．１９８５）；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ ｅｔ ａｌ．，“Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ”，ｉｎ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ（２ｎｄ Ｅｄ．），Ｒｏｂｉｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．），ｐｐ．６２３－５３（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．１９８７）；Ｔｈｏｒｐｅ，“Ｃａｒｒｉｅｒｓ Ｏｆ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ａｇｅｎｔｓ Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ：Ａ Ｒｅｖｉｅｗ”，ｉｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ’８４：Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｐｉｎｃｈｅｒａ ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．），ｐｐ．４７５－５０６（１９８５）；“Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｒｅｓｕｌｔｓ，Ａｎｄ Ｆｕｔｕｒｅ Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ Ｏｆ Ｔｈｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｕｓｅ Ｏｆ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ”，ｉｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｂａｌｄｗｉｎ ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．），ｐｐ．３０３－１６（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ １９８５）、及びＴｈｏｒｐｅ ｅｔ ａｌ．，“Ｔｈｅ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ Ａｎｄ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ Ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ－Ｔｏｘｉｎ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ”，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．，６２：１１９－５８（１９８２）を参照のこと。
定常領域、Ｆｃドメイン、及び翻訳後修飾の修飾
フレームワーク又はＣＤＲ領域内に作られる修飾に加えて、又はその代替例として、本発明の少なくとも一部の実施形態に係る抗体は、血清半減期、補体結合、Ｆｃ受容体結合、及び／又は抗原依存性細胞毒性など、典型的には抗体の１つ以上の機能特性を改変するため、Ｆｃ領域内に修飾を含むように操作されてもよい。更に、本発明の少なくとも一部の実施形態に係る抗体は、この場合もやはり抗体の１つ以上の機能特性を改変するため、化学的に修飾されてもよく（例えば、抗体に１つ以上の化学的部分を取り付けることができる）、又はそのグリコシル化を改変するように修飾されてもよい。かかる実施形態について、以下に更に記載する。Ｆｃ領域の残基の番号付けは、ＫａｂａｔのＥＵインデックスのものである。
一実施形態において、ＣＨ１のヒンジ領域は、ヒンジ領域内のシステイン残基の数が改変されるように、例えば、増加又は減少するように修飾される。この手法については、Ｂｏｄｍｅｒ ｅｔ ａｌ．による米国特許第５，６７７，４２５号明細書に更に記載されている。ＣＨ１のヒンジ領域内のシステイン残基の数は、例えば、軽鎖及び重鎖のアセンブリが促進されるように改変されるか、又は抗体の安定性が増加若しくは低下するように改変される。
別の実施形態では、抗体の生物学的半減期が減少するように、抗体のＦｃヒンジ領域を突然変異させる。より具体的には、この抗体のブドウ球菌プロテインＡ（ＳｐＡ）結合が天然のＦｃ－ヒンジドメインＳｐＡ結合と比べて損なわれるように、Ｆｃ－ヒンジ断片のＣＨ２－ＣＨ３ドメイン界面領域に１つ以上のアミノ酸突然変異が導入される。この手法については、Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．による米国特許第６，１６５，７４５号明細書に更に詳細に記載されている。
別の実施形態において、抗体は、その生物学的半減期が増加するように修飾される。様々な手法が可能である。例えば、Ｗａｒｄに対する米国特許第６，２７７，３７５号明細書に記載されるとおり、以下の突然変異：Ｔ２５２Ｌ、Ｔ２５４Ｓ、及びＴ２５６Ｆのうちの１つ以上を導入することができる。或いは、生物学的半減期を増加させるため、Ｐｒｅｓｔａ ｅｔ ａｌ．による米国特許第５，８６９，０４６号明細書及び同第６，１２１，０２２号明細書に記載されるとおり、ＩｇＧのＦｃ領域のＣＨ２ドメインの２つのループから取られたサルベージ受容体結合エピトープが含まれるように、ＣＨ１又はＣＬ領域内で抗体を改変することができる。
更に他の実施形態において、抗体のエフェクター機能を改変するため、少なくとも１つアミノ酸残基を異なるアミノ酸残基に置き換えることによりＦｃ領域が改変される。例えば、アミノ酸残基２３４、２３５、２３６、２３７、２９７、３１８、３２０及び３２２から選択される１つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸残基で置き換えることができ、これにより抗体はエフェクターリガンドに対する親和性の改変を呈するが、親抗体の抗原結合能力は保持している。親和性が改変されることになるエフェクターリガンドは、例えば、Ｆｃ受容体又は補体のＣ１成分であり得る。この手法については、両方ともにＷｉｎｔｅｒ ｅｔ ａｌ．による米国特許第５，６２４，８２１号明細書及び同第５，６４８，２６０号明細書に更に詳細に記載されている。
一部の実施形態において、抗体がＣ１ｑ結合の改変及び／又は補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）の低下若しくは消失を呈するように、アミノ酸残基３２９、３３１及び３２２から選択される１つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸残基で置き換えることができる。この手法については、Ｉｄｕｓｏｇｉｅ ｅｔ ａｌ．による米国特許第６，１９４，５５１号明細書に更に詳細に記載されている。
別の実施形態において、アミノ酸位置２３１及び２３９の範囲内にある１つ以上のアミノ酸残基が改変され、それによって抗体の補体固定能が改変される。この手法については、Ｂｏｄｍｅｒ ｅｔ ａｌ．による国際公開第９４／２９３５１号パンフレットに更に記載されている。
更に別の実施形態において、Ｆγ受容体に対する抗体の親和性を低下又は増加させるため、以下の位置：２３８、２３９、２４８、２４９、２５２、２５４、２５５、２５６、２５８、２６５、２６７、２６８、２６９、２７０、２７２、２７６、２７８、２８０、２８３、２８５、２８６、２８９、２９０、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９８、３０１、３０３、３０５、３０７、３０９、３１２、３１５、３２０、３２２、３２４、３２６、３２７、３２９、３３０、３３１、３３３、３３４、３３５、３３７、３３８、３４０、３６０、３７３、３７６、３７８、３８２、３８８、３８９、３９８、４１４、４１６、４１９、４３０、４３４、４３５、４３７、４３８又は４３９にある１つ以上のアミノ酸を修飾することによってＦｃ領域が修飾される。この手法については、Ｐｒｅｓｔａによる国際公開第００／４２０７２号パンフレットに更に記載されている。更に、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、ＦｃγＲＩＩＩ及びＦｃＲｎに対するヒトＩｇＧ１上の結合部位がマッピングされており、結合が向上した変異体が記載されている（Ｓｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１－６６０４を参照のこと）。位置２５６、２９０、２９８、３３３、３３４及び３３９における特定の突然変異は、ＦｃγＲＩＩＩとの結合の向上を示す。加えて、以下の組み合わせの突然変異体が、ＦｃγＲＩＩＩ結合の向上を示す：Ｔ２５６Ａ／Ｓ２９８Ａ、Ｓ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ、Ｓ２９８Ａ／Ｋ２２４Ａ及びＳ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｋ３３４Ａ。更に、Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ又はＭ４２８Ｌ／Ｎ４３４Ｓなどの突然変異により、ＦｃＲｎとの結合が向上し、抗体循環半減期が増加する（Ｃｈａｎ ＣＡ ａｎｄ Ｃａｒｔｅｒ ＰＪ（２０１０）Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １０：３０１－３１６を参照のこと）。
なおも別の実施形態において、抗体は、インビボＦａｂアーム交換が無効となるように修飾することができる。具体的には、このプロセスには、ｌｇＧ４半分子（１つの重鎖＋１つの軽鎖）の他のｌｇＧ４抗体との間での交換により、実際上、機能的には一価である二重特異性抗体が生じることが関わる。ヒンジ領域及び重鎖の定常ドメインに対する突然変異は、この交換を無効にすることができる（Ａａｌｂｅｒｓｅ，ＲＣ，Ｓｃｈｕｕｒｍａｎ Ｊ．，２００２，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １０５：９－１９を参照のこと）。
なおも別の実施形態において、抗体のグリコシル化が修飾される。例えば、非グリコシル化抗体を作ることができる（即ち、抗体はグリコシル化を欠いている）。グリコシル化は、例えば、抗原に対する抗体の親和性を増加させるため、及び／又はＡＤＣＣ及びＣＤＣ活性を低下させるために改変することができる。かかる炭水化物修飾は、例えば、抗体配列内にある１つ以上のグリコシル化部位を改変することにより達成し得る。例えば、１つ以上の可変領域フレームワークグリコシル化部位が消失し、それによって当該部位におけるグリコシル化の消失を生じさせる１つ以上のアミノ酸置換を作ることができる。かかる非グリコシル化により、抗原に対する抗体の親和性が増加し得る。かかる手法については、Ｃｏ ｅｔ ａｌ．による米国特許第５，７１４，３５０号明細書及び同第６，３５０，８６１号明細書に更に詳細に記載されている。
それに加えて又は代えて、フコシル残基量が減少した低フコシル化抗体など、改変されたタイプのグリコシル化を呈する抗体又は二分岐ＧｌｃＮａｃ構造が増加した抗体を作ることができる。グリコシル化パターンの改変は、抗体のＡＤＣＣの能力を増加又は減少させることが実証されている。本発明の好ましい実施形態において、抗体は、エフェクター機能を低下させるため、Ａｓｎ２９７（標準的な命名法）における保存されたＦｃ Ｎ結合型グリコシル化が減少又は消失するように抗体を修飾することにより修飾される。他の実施形態において、炭水化物修飾は、例えば、グリコシル化機構が改変された宿主細胞で抗体を発現させることにより達成し得る。グリコシル化機構が改変された細胞については、当該技術分野において記載されており、本発明の少なくとも一部の実施形態に係る組換え抗体を発現させて、それによりグリコシル化が改変された抗体を産生させるための宿主細胞として使用することができる。例えば、細胞株Ｍｓ７０４、Ｍｓ７０５、及びＭｓ７０９は、フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８（ａ（１，６）フコシルトランスフェラーゼ）を欠いているため、Ｍｓ７０４、Ｍｓ７０５、及びＭｓ７０９細胞株で発現する抗体は、その炭水化物上にフコースを欠くことになる。Ｍｓ７０４、Ｍｓ７０５、及びＭｓ７０９ ＦＵＴ８細胞株は、２つの置換ベクターを使用したＣＨＯ／ＤＧ４４細胞におけるＦＵＴ８遺伝子の標的化した破壊によって作成される（Ｙａｍａｎｅ ｅｔ ａｌ．による米国特許出願公開第２００４０１１０７０４号明細書及びＹａｍａｎｅ－Ｏｈｎｕｋｉ ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｅｎｇ ８７：６１４－２２を参照のこと）。別の例として、Ｈａｎａｉ ｅｔ ａｌ．による欧州特許第１，１７６，１９５号明細書は、フコシルトランスフェラーゼをコードするＦＵＴ８遺伝子が機能上破壊された、そのためかかる細胞株で発現する抗体がａ１，６結合関連酵素の減少又は消失によって低フコシル化を呈することになる細胞株について記載している。Ｈａｎａｉ ｅｔ ａｌ．はまた、抗体のＦｃ領域に結合するＮ－アセチルグルコサミンへのフコース付加に関して低酵素活性であるか、又は酵素活性を有しない細胞株、例えばラット骨髄腫細胞株ＹＢ２／０（ＡＴＣＣ ＣＲＬ １６６２）についても記載している。Ｐｒｅｓｔａによる国際公開第０３／０３５８３５号パンフレットは、Ａｓｎ（２９７）結合炭水化物にフコースを付加する能力が低下した、結果として同様に当該宿主細胞で発現する抗体の低フコシル化を生じさせる変異体ＣＨＯ細胞株、Ｌｅｃｌ３細胞について記載している（Ｓｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７：２６７３３－２６７４０もまた参照のこと）。Ｕｍａｎａ ｅｔ ａｌ．による国際公開第９９／５４３４２号パンフレットは、糖タンパク質修飾用のグリコシルトランスフェラーゼ（例えば、Ｐ（ｌ，４）－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ（ＧｎＴＩＩＩ））を発現するように操作された細胞株であって、そのため操作された細胞株で発現する抗体が二分岐ＧｌｃＮａｃ構造の増加を呈し、結果として抗体のＡＤＣＣ活性の増加を生じさせる細胞株について記載している（Ｕｍａｎａ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１７：１７６－１８０もまた参照のこと）。或いは、抗体のフコース残基は、フコシダーゼ酵素を用いて切断されてもよい。例えば、フコシダーゼ－Ｌ－フコシダーゼは、抗体からフコシル残基を取り除く（Ｔａｒｅｎｔｉｎｏ，Ａ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．（１９７５）Ｂｉｏｃｈｅｍ．１４：５５１６－２３）。
本発明によって企図される本明細書の抗体又は断片の別の修飾は、例えば半減期を亢進させるための、ペグ化又は他の水溶性部分、典型的にはポリマーの付加である。抗体をペグ化すると、例えば、抗体の生物学的（例えば、血清）半減期を増加させることができる。抗体をペグ化するには、典型的には抗体、又はその断片をポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、例えばＰＥＧの反応性エステル又はアルデヒド誘導体などと、１つ以上のＰＥＧ基が抗体又は抗体断片に付加されるようになる条件下で反応させる。好ましくは、ペグ化は、反応性ＰＥＧ分子（又は類似の反応性水溶性ポリマー）とのアシル化反応又はアルキル化反応によって行われる。本明細書で使用されるとき、用語「ポリエチレングリコール」は、モノ（Ｃｉ－Ｃｉｏ）アルコキシ－又はアリールオキシ－ポリエチレングリコール又はポリエチレングリコール－マレイミドなど、他のタンパク質の誘導体化に用いられているＰＥＧの形態のいずれも包含することが意図される。特定の実施形態において、ペグ化されることになる抗体は非グリコシル化抗体である。タンパク質のペグ化方法は当該技術分野において公知であり、本発明の少なくとも一部の実施形態に係る抗体に適用することができる。例えば、Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ ｅｔ ａｌ．による欧州特許第０ １５４ ３１６号明細書及びＩｓｈｉｋａｗａ ｅｔ ａｌ．による欧州特許第０ ４０１ ３８４号明細書を参照のこと。
核酸分子
本発明は更に、本発明に係る抗ｍＧｌｕＲ５抗体、又はその断片若しくはコンジュゲートをコードする核酸を提供する。核酸は、全細胞、細胞ライセート、又は部分的に精製された若しくは実質的に純粋な形態で存在し得る。核酸は、アルカリ／ＳＤＳ処理、ＣｓＣｌバンド法、カラムクロマトグラフィー、アガロースゲル電気泳動及び当該技術分野において周知の他の技法を含めた標準的な技法により、他の細胞成分又は他の混入物、例えば、他の細胞核酸又はタンパク質から精製して離されているとき、「単離されている」、又は「実質的に純粋にされている」。Ａｕｓｕｂｅｌ，ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．を参照のこと。本発明の少なくとも一部の実施形態に係る核酸は、例えば、ＤＮＡ又はＲＮＡであることができ、イントロン配列を含んでも、又は含まなくてもよい。好ましい実施形態において、核酸はｃＤＮＡ分子である。
本発明の少なくとも一部の実施形態に係る核酸は、標準的な分子生物学的技術を用いて入手することができる。ハイブリドーマ（例えば、以下に詳述するとおりの、ヒト免疫グロブリン遺伝子を担持するトランスジェニックマウスから調製されたハイブリドーマ）又はＢ細胞が発現する抗体については、細胞によって作られる抗体の軽鎖及び重鎖をコードするｃＤＮＡは、標準的なＰＣＲ増幅又はｃＤＮＡクローン技術によって入手することができる。免疫グロブリン遺伝子ライブラリから（例えば、ファージディスプレイ技法を用いて）入手される抗体については、抗体をコードする核酸は、ライブラリから回収することができる。
ＶＨ及びＶＬセグメントをコードするＤＮＡ断片が入手されたところで、これらのＤＮＡ断片を標準的な組換えＤＮＡ技法によって更に操作することができ、例えば可変領域遺伝子を完全長抗体鎖遺伝子、Ｆａｂ断片遺伝子又はｓｃＦｖ遺伝子に変換することができる。これらの操作では、ＶＬ又はＶＨコードＤＮＡ断片は、抗体定常領域又は可動性リンカーなど、別のタンパク質をコードする別のＤＮＡ断片に作動可能に連結されている。既に定義したとおり、「作動可能に連結された」とは、２つのＤＮＡ断片によってコードされるアミノ酸配列がインフレームのままとなるようにして２つのＤＮＡ断片がつなぎ合わされていることを意味する。
ＶＨ領域をコードする単離ＤＮＡは、重鎖定常領域（ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３）をコードする別のＤＮＡ分子にＶＨコードＤＮＡを作動可能に連結することにより、完全長重鎖遺伝子に変換することができる。ヒト重鎖定常領域遺伝子の配列は、当該技術分野において公知であり（例えば、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｌ ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９１－３２４２を参照のこと）、これらの領域を包含するＤＮＡ断片は、標準的なＰＣＲ増幅によって入手することができる。重鎖定常領域は、ＩｇＧ１、ｌｇＧ２、ｌｇＧ３、ｌｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭ又はＩｇＤ定常領域であり得るが、最も好ましくは、ＩｇＧ１、ｌｇＧ２又はｌｇＧ４定常領域である。Ｆａｂ断片重鎖遺伝子について、ＶＨコードＤＮＡは、重鎖ＣＨ１定常領域のみをコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に連結することができる。
ＶＬ領域をコードする単離ＤＮＡは、軽鎖定常領域、ＣＬをコードする別のＤＮＡ分子にＶＬコードＤＮＡを作動可能に連結することにより、完全長軽鎖遺伝子（並びにＦａｂ軽鎖遺伝子）に変換することができる。ヒト軽鎖定常領域遺伝子の配列は、当該技術分野において公知であり（例えば、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９１－３２４２を参照のこと）、これらの領域を包含するＤＮＡ断片は、標準的なＰＣＲ増幅によって入手することができる。軽鎖定常領域は、カッパ（κ）又はラムダ（λ）定常領域であり得るが、最も好ましくはκ定常領域である。
ｓｃＦｖ遺伝子を作成するためには、可動性リンカーをコードする別の断片、例えば、アミノ酸配列（Ｇｌｙ４－Ｓｅｒ）３をコードする別の断片にＶＨ及びＶＬコードＤＮＡ断片が作動可能に連結され、そのためＶＨ及びＶＬ配列は、ＶＬ及びＶＨ領域が可動性リンカーによってつなぎ合わされた、連続した単鎖タンパク質として発現することができる（例えば、Ｂｉｒｄ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３－４２６；Ｈｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ ８５：５８７９－５８８３；及びＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．，（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５２－５５４を参照のこと）。
ベクター
本発明はまた、本発明のＤＮＡが挿入されるベクターも提供する。レトロウイルスに由来するベクターは、柔軟性のあるゲノムを有することに加えて、遺伝的安定性及び高発現を可能にするため、長期遺伝子導入を実現するのに好適なツールである。更に、レトロウイルスベクターを用いた臨床経験から、その使用における有効性及び安全性を最適化するための指針が得られる。
手短に言えば、抗体又はその抗原結合断片をコードする天然又は合成核酸の発現は、典型的には、抗体又はその抗原結合断片をコードする核酸、又はその一部分をプロモーターに作動可能に連結し、その構築物を発現ベクターに導入することにより実現する。ベクターは、真核生物における複製及び組込みに好適であり得る。典型的なクローニングベクターは、所望の核酸配列の発現の調節に有用な転写及び翻訳ターミネーター、開始配列、及びプロモーターを含有する。
核酸は、幾つもの種類のベクターにクローニングすることができる。例えば、核酸は、限定はされないが、プラスミド、ファージミド、ファージ誘導体、動物ウイルス、及びコスミドを含めたベクターにクローニングすることができる。特に注目されるベクターとしては、発現ベクター、複製ベクター、プローブ生成ベクター、及びシーケンシングベクターが挙げられる。
更に、発現ベクターは、ウイルスベクターの形態で細胞に提供されてもよい。ウイルスベクター技術は当該技術分野において周知であり、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．（２００１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）、並びに他のウイルス学及び分子生物学の手引き書に記載されている。ベクターとして有用なウイルスとしては、限定はされないが、レトロウイルス、ガンマレトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス、及びレンチウイルスが挙げられる。一般に、好適なベクターは、少なくとも１つの生物で機能性の複製起点、プロモーター配列、好都合な制限エンドヌクレアーゼ部位、及び１つ以上の選択可能マーカーを含有する（例えば、国際公開第０１／９６５８４号パンフレット；国際公開第０１／２９０５８号パンフレット；及び米国特許第６，３２６，１９３号明細書）。
哺乳類細胞への遺伝子導入のため、幾つものウイルスベースのシステムが開発されている。例えば、レトロウイルスは、遺伝子送達システムに好都合なプラットフォームを提供する。当該技術分野において公知の技法を用いて選択の遺伝子をベクターに挿入し、レトロウイルス粒子にパッケージングすることができる。次に組換えウイルスを単離し、インビボ又はエキソビボのいずれかで対象の細胞に送達することができる。幾つものレトロウイルスシステムが当該技術分野において公知である。一部の実施形態において、アデノウイルスベクターが使用される。幾つものアデノウイルスベクターが当該技術分野において公知である。一実施形態において、レトロウイルスベクターが使用される。
追加的なプロモーターエレメント、例えばエンハンサーは、転写開始頻度を調節する。典型的には、これは開始部位の３０～１１０ｂｐ上流の領域に位置し、しかし最近になって、幾つものプロモーターが開始部位の下流にも機能性のエレメントを含有することが示されている。プロモーターエレメント間の間隔は、高頻度で柔軟性があり、そのためエレメントが逆になったり、又は互いに対して移動したりしても、プロモーター機能は維持される。チミジンキナーゼ（ｔｋ）プロモーターでは、プロモーターエレメント間の間隔を５０ｂｐ離れるまで増加させても、活性は下がり始めない。プロモーターに応じて、個々のエレメントが転写を活性化するように協働的にも、或いは独立にも働き得るように見える。
様々なプロモーター配列が、限定はされないが、前初期サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター、伸長成長因子－１α（ＥＦ－１α）、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）初期プロモーター、マウス乳癌ウイルス（ＭＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）長末端反復配列（ＬＴＲ）プロモーター、ＭｏＭｕＬＶプロモーター、トリ白血病ウイルスプロモーター、エプスタイン・バーウイルス前初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーター、並びにヒト遺伝子プロモーター、例えば、限定はされないが、アクチンプロモーター、ミオシンプロモーター、ヘモグロビンプロモーター、及びクレアチンキナーゼプロモーターなどを含め、使用されてもよい。更に、本発明は、構成的プロモーターの使用に限定されてはならない。誘導性プロモーターもまた、本発明の一部として企図される。誘導性プロモーターを使用すると、それが作動可能に連結されているポリヌクレオチド配列の発現を、かかる発現が所望されるときにオンにし、又は発現が所望されないときは発現をオフにする能力を有する分子スイッチが提供される。誘導性プロモーターの例としては、限定はされないが、メタロチオネイン（ｍｅｔａｌｌｏｔｈｉｏｎｉｎｅ）プロモーター、グルココルチコイドプロモーター、プロゲステロンプロモーター、及びテトラサイクリンプロモーターが挙げられる。
抗体、抗体の抗原結合断片、又はその一部分の発現を評価するためには、細胞に導入することになる発現ベクターはまた、ウイルスベクターを介してトランスフェクト又は感染させようとする細胞集団からの発現細胞の同定及び選択を容易にするため、選択可能マーカー遺伝子又はレポーター遺伝子のいずれか一方又は両方も含むことができる。他の態様において、選択可能マーカーは、別個のＤＮＡ片に担持され、コトランスフェクション手順において使用されてもよい。選択可能マーカー及びレポーター遺伝子には、両方とも、宿主細胞での発現を可能にするための適切な調節配列が隣接し得る。有用な選択可能マーカーとしては、例えば、ｎｅｏなどの抗生物質耐性遺伝子が挙げられる。
レポーター遺伝子は、トランスフェクトされた可能性のある細胞の同定及び調節配列の機能性の判定に使用される。一般に、レポーター遺伝子とは、レシピエント生物又は組織に存在しないか、又はそれが発現しない遺伝子であって、その発現が、何らかの容易に検出可能な特性、例えば酵素活性によって明らかになるポリペプチドをコードする遺伝子である。レポーター遺伝子の発現は、ＤＮＡがレシピエント細胞に導入された後好適な時間が経った時点でアッセイされる。好適なレポーター遺伝子には、ルシフェラーゼ、β－ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌型アルカリホスファターゼをコードする遺伝子、又は緑色蛍光タンパク質遺伝子が含まれ得る（例えば、Ｕｉ－Ｔｅｉ ｅｔ ａｌ．，２０００ ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ４７９：７９－８２）。好適な発現系は周知であり、公知の技法を用いて調製し得るか、又は市販品を入手し得る。一般に、最も高いレベルのレポーター遺伝子発現を示す最小５’隣接領域を有する構築物が、プロモーターとして同定される。かかるプロモーター領域がレポーター遺伝子に連結され、プロモーターによってドライブされる転写の調節能力に関する薬剤の判定に使用されてもよい。
トランスフェクション
遺伝子を細胞に導入して発現させる方法は、当該技術分野において公知である。発現ベクターの文脈では、ベクターは、当該技術分野における任意の方法によって宿主細胞、例えば、哺乳類、細菌、酵母、又は昆虫細胞に容易に導入することができる。例えば、発現ベクターは、物理的、化学的、又は生物学的手段によって宿主細胞に移入させることができる。
ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための物理的方法としては、リン酸カルシウム沈殿、リポフェクション、パーティクルボンバードメント、マイクロインジェクション、電気穿孔などが挙げられる。ベクター及び／又は外因性核酸を含む細胞の作製方法は、当該技術分野において周知である。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．（２００１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）を参照のこと。ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための好ましい方法は、リン酸カルシウムトランスフェクションである。
目的のポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための生物学的方法としては、ＤＮＡ及びＲＮＡベクターの使用が挙げられる。ウイルスベクター、特にレトロウイルスベクターが、哺乳類細胞、例えばヒト細胞への遺伝子の挿入に最も広く用いられる方法となっている。他のウイルスベクターは、レンチウイルス、ポックスウイルス、単純ヘルペスウイルスＩ、アデノウイルス及びアデノ随伴ウイルスなどに由来し得る。例えば、米国特許第５，３５０，６７４号明細書及び同第５，５８５，３６２号明細書を参照のこと。
ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための化学的手段としては、巨大分子複合体などのコロイド分散システム、ナノカプセル、マイクロスフェア、ビーズ、及び脂質ベースのシステムであって、水中油型エマルション、ミセル、混合型ミセル、及びリポソームを含むものが挙げられる。インビトロ及びインビボで送達媒体として用いられる例示的コロイドシステムは、リポソーム（例えば、人工膜小胞）である。
非ウイルス送達システムが利用される場合、例示的送達媒体はリポソームである。宿主細胞への核酸の導入（インビトロ、エキソビボ又はインビボ）には、脂質製剤の使用が企図される。別の態様では、核酸を脂質と会合させてもよい。脂質と会合させる核酸は、リポソームの水性内部に封入するか、リポソームの脂質二重層内に散在させるか、リポソーム及びオリゴヌクレオチドの両方と会合する連結分子を介してリポソームに取り付けるか、リポソームに閉じ込めるか、リポソームと複合体化するか、脂質を含有する溶液中に分散させるか、脂質と混合するか、脂質と組み合わせるか、脂質中の懸濁液として含めるか、ミセルに含める、若しくはそれと複合体化するか、又は他の方法で脂質と会合させてもよい。脂質、脂質／ＤＮＡ又は脂質／発現ベクターに関連する組成物は、溶液中にあるいずれか特定の構造に限定されない。例えば、それは、二重層構造で、ミセルとして、又は「つぶれた」構造を伴い存在してもよい。それはまた、単純に溶液中に散在してもよく、場合によってはサイズ又は形状が均一でない凝集物を形成する。脂質は、天然に存在する脂質であっても、又は合成の脂質であってもよい脂肪性の物質である。例えば、脂質には、細胞質に天然に存在する脂肪滴、並びに長鎖脂肪族炭化水素を含む化合物のクラス及びその誘導体、例えば、脂肪酸、アルコール類、アミン類、アミノアルコール類、及びアルデヒド類が含まれる。
使用に好適な脂質は、商業的供給元から入手することができる。例えば、ジミリスチルホスファチジルコリン（「ＤＭＰＣ」）をＳｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．から入手することができ；ジセチルリン酸（「ＤＣＰ」）をＫ ＆ Ｋ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｐｌａｉｎｖｉｅｗ，Ｎ．Ｙ．）から入手することができ；コレステロール（「Ｃｈｏｉ」）をＣａｌｂｉｏｃｈｅｍ－Ｂｅｈｒｉｎｇから入手することができ；ジミリスチルホスファチジルグリセロール（「ＤＭＰＧ」）及び他の脂質をＡｖａｎｔｉ Ｐｏｌａｒ Ｌｉｐｉｄｓ，Ｉｎｃ．（Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，Ａｌａ．）から入手してもよい。クロロホルム又はクロロホルム／メタノール中の脂質のストック溶液は、摂氏約－２０度で保存することができる。クロロホルムはメタノールよりも容易に蒸発するため、クロロホルムが唯一の溶媒として使用される。「リポソーム」は、閉じた脂質二重層又は凝集体の生成によって形成される種々の一枚膜及び多重膜脂質媒体を包含する総称である。リポソームは、リン脂質二重層膜と内部水性媒体とを含む小胞構造を有するものとして特徴付けることができる。多重膜リポソームは、水性媒体によって分離された複数の脂質層を有する。これは、リン脂質を過剰量の水溶液に懸濁すると、自然発生的に形成される。脂質成分は、閉じた構造を形成する前に自己再構成を起こし、水及び溶解した溶質を脂質二重層の間に捕捉する（Ｇｈｏｓｈ ｅｔ ａｌ．，１９９１ Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ ５：５０５－１０）。しかしながら、溶液中に通常の小胞構造と異なる構造を有する組成物もまた包含される。例えば、脂質はミセル構造をとるか、又は単に脂質分子の不均一な凝集体として存在し得る。また、リポフェクタミン－核酸複合体も企図される。
宿主細胞への外因性核酸の導入、又はその他の、本発明の阻害薬への細胞の曝露に用いられる方法に関わらず、宿主細胞に組換えＤＮＡ配列が存在することを確かめるため、種々のアッセイを実施し得る。かかるアッセイとしては、例えば、サザン及びノーザンブロッティング、ＲＴ－ＰＣＲ及びＰＣＲなどの、当業者に周知の「分子生物学的」アッセイ；特定のペプチドの有無を例えば免疫学的手段（ＥＬＩＳＡ及びウエスタンブロット）によるか、又は本明細書に記載されるアッセイにより検出して、本発明の範囲内に入る薬剤を同定するなどの「生化学的」アッセイが挙げられる。
ｍＧｌｕＲ５抗体の治療上の適用
上記の方法によって入手される単離抗ｍＧｌｕＲ５抗体若しくはその抗原結合断片、又はそれを含む組成物は、対象の疾患、障害、又は病態の治療又は予防における医薬品として使用することができる。
対象
本明細書において言及される対象は、任意の生きている対象であってよい。好ましい実施形態において、対象は哺乳類である。本明細書において言及される哺乳類は、任意の哺乳類であり得る。本明細書で使用されるとき、用語「哺乳類」は、限定はされないが、マウス及びハムスターなどの齧歯目（Ｒｏｄｅｎｔｉａ）の哺乳類、及びウサギなどの兎形目（Ｌｏｇｏｍｏｒｐｈａ）の哺乳類を含めた任意の哺乳類を指す。哺乳類は、ネコ科動物（ネコ）及びイヌ科動物（イヌ）を含めた食肉目（Ｃａｒｎｉｖｏｒａ）の哺乳類であってもよい。哺乳類は、ウシ亜科動物（雌ウシ）及びイノシシ科動物（ブタ）を含めた偶蹄目（Ａｒｔｉｏｄａｃｔｙｌａ）の哺乳類、又はウマ科動物（ウマ）を含めた奇蹄目（Ｐｅｒｓｓｏｄａｃｔｙｌａ）の哺乳類であってもよい。哺乳類は、霊長目（Ｐｒｉｍａｔｅｓ）、セボイド（Ｃｅｂｏｉｄｓ）、又はシモイド（Ｓｉｍｏｉｄｓ）（サル）の哺乳類又は類人猿類の目（ｔｈｅ ｏｒｄｅｒ Ａｎｔｈｒｏｐｏｉｄｓ）（ヒト及び類人猿）の哺乳類であってもよい。
一部の実施形態において、抗体、抗体断片、又は組成物を投与する対象は、ヒトなどの霊長類である。一部の実施形態において、霊長類はサル又は類人猿である。対象は雄又は雌であってよく、乳児期、若年期、青年期、成人、及び老齢期対象を含めた任意の好適な年齢であってよい。一部の例において、患者又は対象は、疾患、抗体療法に関して、及び／又は毒性アウトカムの評価に関してバリデートされた動物モデルである。
一部の実施形態において、本方法は、対象、組織、又は細胞への抗ｍＧｌｕＲ５抗体、抗体断片、又は含有する組成物の投与を含む。治療されることになる対象、又は組織若しくは細胞の由来となる対象は、ｍＧｌｕＲ５の発現に関連する疾患、病態又は障害を有するか、そのリスクがあるか、又はそれを有する疑いがある対象であり得る。一部の実施形態において、抗体、抗体断片、又は組成物は、治療されることになる特定の疾患又は病態を有する対象に投与される。一部の実施形態において、抗体、抗体断片、又は組成物は、疾患又は病態を有するか、又はそのリスクがある対象など、その対象に投与される。一部の態様において、従って本方法は、疾患又は病態の１つ以上の症状を、自己免疫障害を媒介する活性化Ｔ細胞又はＢ細胞の比率を下げることによるなどして治療、例えば改善する。
投与様式
本発明の組成物は、所望されるのが局所的治療か、それとも全身的治療かに応じて幾つもの方法で投与され得る。
一般に、投与は局所又は非経口であり得る。一部の好ましい実施形態では、投与様式は末梢であり、投与される抗体は、ｍＧｌｕ５の末梢効果を遮断することになる。一部の他の好ましい実施形態において、投与様式は中枢、例えば、髄腔内投与であり、抗体がｍＧｌｕ５の効果を中枢的に遮断することが可能になる。一部の他の好ましい実施形態において、投与様式は、抗体がｍＧｌｕ５の効果を中枢的にも、末梢的にも、両方で遮断できるようにし、例えば、抗体は髄腔内及び静脈内に投与され得る。
本発明の組成物は、典型的には非経口投与に好適である。本明細書で使用されるとき、医薬組成物の「非経口投与」には、対象の組織の物理的破壊及び組織の破壊口からの医薬組成物の投与を特徴とする、ひいては概して血流中、筋肉内、又は内臓器官内へと直接投与することになる任意の投与経路が含まれる。このように非経口投与には、限定はされないが、組成物の注射、外科的切開による組成物の適用、組織を穿通する非手術創からの組成物の適用などによる医薬組成物の投与が含まれる。詳細には、非経口投与には、限定はされないが、皮下、腹腔内、筋肉内、胸骨内、静脈内、動脈内、髄腔内、脳室内、尿道内、頭蓋内、腫瘍内、滑液嚢内注射又は注入；及び腎臓透析注入法が含まれることが企図される。好ましい実施形態において、本発明の組成物の非経口投与は、静脈内投与を含む。好ましい実施形態において、本発明の組成物の非経口投与は、髄腔内投与を含む。
非経口投与に好適な医薬組成物の製剤は、典型的には、滅菌水又は滅菌等張生理食塩水などの薬学的に許容可能な担体と組み合わされる活性成分を概して含む。かかる製剤は、ボーラス投与又は継続投与に好適な形態で調製、包装、又は販売されてもよい。注射用製剤は、アンプルなどの単位投薬形態で、又は保存剤が入った頻回投与用容器に入れて調製、包装、又は販売されてもよい。非経口投与用の製剤としては、限定はされないが、油性又は水性媒体中の懸濁液、溶液、エマルションなどが挙げられる。かかる製剤は、限定はされないが、懸濁剤、安定化剤、又は分散剤を含め、１つ以上の追加の成分を更に含み得る。非経口投与用の製剤の一実施形態において、活性成分は乾燥した（即ち、粉末状又は顆粒状の）形態で提供され、これは好適な媒体（例えば滅菌パイロジェンフリー水）で再構成してから、その再構成された組成物を非経口投与することになる。非経口製剤にはまた、塩、炭水化物及び緩衝剤（好ましくは３～９のｐＨに）などの賦形剤を含有し得る水溶液も含まれるが、一部の適用については、それは、より好適には、滅菌非水性溶液として、又は滅菌パイロジェンフリー水などの好適な媒体と併せて使用される乾燥形態として製剤化され得る。例示的非経口投与形態としては、滅菌水溶液、例えば、プロピレングリコール又はデキストロース水溶液中の溶液又は懸濁液が挙げられる。かかる投薬形態は、好適には、必要に応じて緩衝することができる。有用である他の非経口投与可能な製剤としては、活性成分を微結晶形態で含むか、又はリポソーム製剤中に含むものが挙げられる。非経口投与用の製剤は、即時放出及び／又は放出調節となるように製剤化されてもよい。放出調節製剤には、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的化放出及びプログラム放出が含まれる。
好ましくは、単離抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗体断片を含む製剤化された組成物は、注射による投与に好適である。
局所投与用の医薬組成物及び製剤としては、経皮パッチ、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、点滴薬、坐薬、噴霧薬、液体、半固体、単相性組成物、多相性組成物（例えば、水中油、油中水）、泡、マイクロスポンジ、リポソーム、ナノエマルション、エアロゾル泡、ポリマー、フラーレン、及び粉末を挙げることができる。従来の医薬担体、水性、粉末又は油性基剤、増粘剤などが必要となり得るか、又は望ましいことになり得る。
非経口、髄腔内、又は脳室内投与用の組成物及び製剤としては、緩衝剤、希釈剤及び他の好適な添加剤、限定はされないが、透過促進剤、ｃａｒｄｅｒ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ及び他の薬学的に許容可能な担体又は賦形剤なども含有し得る滅菌水溶液を挙げることができる。
本発明の医薬組成物には、限定はされないが、溶液、エマルション、及びリポソーム含有製剤が含まれる。これらの組成物は、予め形成された液体、自己乳化型固体及び自己乳化型半固体を含むがこれらに限定されない種々の成分から生成されてもよい。
好都合には単位投薬形態で提供され得る本発明の医薬組成物は、製薬工業で周知の従来技術のとおりに調製されてもよい。かかる技法は、活性成分を１つ又は複数の医薬担体又は１つ又は複数の賦形剤と合わせるステップを含む。一般に、製剤は、活性成分を液体担体又は微粉固体担体又は両方と均一且つ均質に合わせて、次に、必要であれば生成物を付形することにより調製される。
本発明の組成物は、限定はされないが、錠剤、カプセル、液体シロップ、ソフトゲル、坐薬、エアロゾル、及び浣腸など、多くの可能な投薬形態のいずれに製剤化されてもよい。本発明の組成物はまた、水性、非水性又は混合媒体中の懸濁液として製剤化されてもよい。水性懸濁液は、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール及び／又はデキストランを含めた、懸濁液の粘度を増加させる物質を更に含有し得る。懸濁液はまた、安定剤も含有し得る。
本発明の一実施形態において、医薬組成物は、泡として製剤化され、使用されてもよい。医薬泡には、限定はされないが、エマルション、マイクロエマルション、クリーム、ゼリー及びリポソームなどの製剤が含まれる。これらの製剤は、基本的には性質上類似しているものの、最終生成物の成分及び稠性の点でばらつきがある。オリゴヌクレオチドの取込みを細胞レベルで亢進させる薬剤がまた、本発明の医薬組成物及び他の組成物に加えられてもよい。例えば、リポフェクチンなどのカチオン性脂質（米国特許第５，７０５，１８８号明細書）、カチオン性グリセロール誘導体、及びポリリジンなどのポリカチオン性分子（国際公開第９７／３０７３１号パンフレット）もまた、オリゴヌクレオチドの細胞取込みを亢進させる。
本発明の組成物は、加えて、医薬組成物に従来見られる他の補助成分を含有し得る。従って、例えば、本組成物は、例えば、鎮痒薬、収斂薬、局所麻酔薬又は抗炎症剤など、適合性のある追加の薬学的に活性な物質を含有してもよく、又は色素、香味剤、保存剤、抗酸化剤、乳白剤、増粘剤及び安定剤など、様々な投薬形態の本発明の組成物を物理的に製剤化する際に有用な追加の材料を含有してもよい。しかしながら、かかる材料は、加えられる場合に、本発明の組成物の成分の生物学的活性を過度に妨げるものであってはならない。製剤は滅菌されてもよく、必要であれば、製剤の１つ又は複数の核酸と有害な相互作用を起こさない助剤、例えば、滑沢剤、保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を与える塩、緩衝液、着色料、香味料及び／又は芳香物質などと混合されてもよい。
抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその抗原結合断片を含む製剤は、１つ又は複数の薬学的に許容可能な賦形剤を含み得る。製剤に含まれる賦形剤は、例えば抗体及び投与様式に応じて異なる目的を有することになる。一般的に用いられる賦形剤の例としては、限定なしに、生理食塩水、緩衝生理食塩水、デキストロース、注射用水、グリセロール、エタノール、及びこれらの組み合わせ、安定化剤、可溶化剤及び界面活性剤、緩衝液及び保存剤、等張化剤、増量剤、及び潤滑剤が挙げられる。抗ｍＧｌｕＲ５抗体を含む製剤は、典型的には、動物血清（例えば、ウシ血清アルブミン）などの非ヒト成分が全く存在しない中で調製され、培養されたものとなる。
製剤又は組成物はまた、結合分子又は細胞による治療下の特定の適応症、疾患、又は病態に有用な２つ以上の活性成分、好ましくはその結合分子又は細胞を補完する活性を有するものを含有し、ここでそれぞれの活性は互いに対して悪影響を及ぼさないものとする。かかる活性成分は、好適には、意図される目的に有効な量で組み合わせで存在する。従って、一部の実施形態において、本医薬組成物は、化学療法剤、例えば、アスパラギナーゼ、ブスルファン、カルボプラチン、シスプラチン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、メトトレキサート、パクリタキセル、リツキシマブ、ビンブラスチン、ビンクリスチンなど、他の薬学的に活性な薬剤又は薬物を更に含む。
抗体は、他の治療薬と組み合わせてもよく、それらは同じ又は異なる組成物で、同じ又は異なる時点で、及びいずれの順序で投与されてもよい。例えば、本発明の抗体は、別の受容体作動薬又は拮抗薬、例えば、別のｍＧｌｕＲ５作動薬又は拮抗薬の投与を含む治療レジメンで投与されてもよい。
一部の態様において医薬組成物は、治療下の部位の感作前に、且つ感作を生じさせるのに十分な時間をもって組成物の送達が起こるような時限放出、遅延放出、及び持続放出送達システムを用いることができる。多くのタイプの放出送達システムが利用可能であり、公知である。かかるシステムは、組成物の反復投与を回避することができ、従って対象及び医師の利便性が高まり得る。
投与
医薬組成物は、一部の実施形態において、治療有効量又は予防有効量など、疾患又は病態を治療又は予防するのに有効な量の抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗体断片を含有する。治療又は予防有効性は、一部の実施形態において、治療対象の定期的な評価によってモニタされる。数日以上にわたる反復投与については、病態に応じて、疾患症状の所望の抑制が起こるまで治療が繰り返される。しかしながら、他の投薬量レジメンが有用なこともあり、それを決定することができる。所望の投薬量は、組成物の単回ボーラス投与によるか、組成物の複数回ボーラス投与によるか、又は組成物の持続注入投与によって送達することができる。
抗体又は抗体断片は、１つ以上の用量で投与することができる。一部の実施形態において、前記有効量の抗体は、単一用量として投与することができる。一部の実施形態において、前記有効量の抗体は、ある期間にわたって２つ以上の用量として投与することができる。投与のタイミングは、管理する医師の判断の範囲内であり、患者の臨床状態に依存する。個々の必要性は様々であるが、特定の疾患又は病態に対する所与の抗体の最適な有効量範囲の決定は、当該技術分野の技能の範囲内にある。有効量とは、治療的又は予防的利益をもたらす量を意味する。投与される投薬量は、被投与者の年齢、健康及び体重、もしあれば、併用治療の種類、治療頻度及び所望の効果の性質に依存することになる。一部の実施形態において、有効量の抗体又はそうした抗体を含む組成物は、非経口的に投与される。一部の実施形態において、投与は静脈内投与であり得る。一部の実施形態において、投与は、疾患部位内への注射によって直接行われ得る。
本発明の目的上、本発明の抗体の投与される量又は用量は、対象又は動物において妥当なタイムフレームにわたって治療反応又は予防反応を生じさせるのに十分でなければならない。例えば、本発明の抗体の用量は、投与時点から約２時間又はそれ以上、例えば、約１２～約２４時間又はそれ以上の期間内に抗原に結合し、又は疾患を検出、治療若しくは予防するのに十分でなければならない。特定の実施形態において、この期間は更に長くなる可能性がある。用量は、特定の抗体の有効性及び動物（例えば、ヒト）の状態、並びに治療しようとする動物（例えば、ヒト）の体重によって決まることになる。
投薬量レジメンは、最適な所望の反応（例えば、治療反応）がもたらされるように調整される。例えば、単回ボーラスが投与されてもよく、数回に分割した用量が時間をかけて投与されてもよく、又は用量が治療状況の危急度が示すところに比例して減量又は増量されてもよい。特に、投与し易さ及び投薬量の均一性のため、非経口組成物を投薬量単位形態で製剤化することが有利である。投薬量単位形態とは、本明細書で使用されるとき、治療対象に対する単位投薬量として適した物理的に個別の単位を指す；各単位が、所要の医薬担体と合わせたときに所望の治療効果を生じるように計算された所定の分量の活性化合物を含有する。本発明の少なくとも一部の実施形態に係る投薬量単位形態の詳細は、（ａ）活性化合物の独自の特性及び実現しようとする詳細な治療効果、及び（ｂ）個体における過敏の治療用の活性化合物など、化合物配合技術に固有の限界によって左右され、及びそれに直接依存する。
本明細書に開示される抗ｍＧｌｕＲ５抗体、又はその抗原結合断片の投与について、投薬量は、約０．１～１０００ｍｇ、より通例では１００～３００ｍｇの範囲である。例えば投薬量は、０．１ｍｇ、０．５ｍｇ、１ｍｇ、２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇ、８５０ｍｇ、９００ｍｇ、９５０ｍｇ、１０００ｍｇ、又は０．１～５００ｍｇの範囲内であり得る。例示的治療レジームは、１日２回、１日１回、週２回、週１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、月１回、３ヵ月に１回又は３～６ヵ月に１回の投与を伴う。
本明細書に開示される抗ｍＧｌｕＲ５抗体、又はその抗原結合断片の投与について、投薬量は、宿主体重の約０．０００１～１００ｍｇ／ｋｇ、より通例では０．０１～５０ｍｇ／ｋｇの範囲である。例えば投薬量は、０．３ｍｇ／ｋｇ体重、１ｍｇ／ｋｇ体重、３ｍｇ／ｋｇ体重、５ｍｇ／ｋｇ体重、１０ｍｇ／ｋｇ体重、１５ｍｇ／ｋｇ体重、２０ｍｇ／ｋｇ体重、２５ｍｇ／ｋｇ体重、３０ｍｇ／ｋｇ体重、３５ｍｇ／ｋｇ体重、４０ｍｇ／ｋｇ体重、４５ｍｇ／ｋｇ体重、５０ｍｇ／ｋｇ体重、又は１～５０ｍｇ／ｋｇの範囲内であり得る。例示的治療レジームは、１日２回、１日１回、週２回、週１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、月１回、３ヵ月に１回又は３～６ヵ月に１回の投与を伴う。本発明の少なくとも一部の実施形態に係る本明細書に開示される抗体の好ましい投薬量レジメンとしては、静脈内投与による１～５ｍｇ／ｋｇ体重が挙げられる。
一部の方法では、異なる結合特異性を有する２つ以上のモノクローナル抗体が同時に投与され、この場合、本明細書に開示される各抗体の投与される投薬量は、指示される範囲内に含まれる。本明細書に開示される抗体は、通常、複数回にわたって投与される。単一の投薬量間の間隔は、例えば、毎日、毎週、毎月、３ヵ月毎又は毎年であり得る。間隔はまた、患者における標的抗原に対する抗体の血中濃度の測定によって指示されるところに応じて不規則であってもよい。一部の方法では、投薬量は、約１～１０００μｇ／ｍｌ、一部の方法では約２５～３００μｇ／ｍｌの血漿抗体濃度が実現するように調整される。
或いは、治療用薬剤は持続放出製剤として投与することができ、この場合、必要な投与回数が少なくなる。投薬量及び頻度は、患者体内での治療用薬剤の半減期に応じて変わる。一般に、ヒト抗体が最も長い半減期を示し、その後にヒト化抗体、キメラ抗体、及び非ヒト抗体が続く。融合タンパク質の半減期は大きく変わり得る。投薬量及び投与頻度は、治療が予防的か、それとも治療的かに応じて変わり得る。予防的適用では、比較的低い投薬量が比較的低頻度間隔で長期間にわたって投与される。一部の患者は、治療を終生受け続ける。治療的適用では、疾患の進行が減速するか、又は止むまで、好ましくは患者が疾患の症状の部分的又は完全な寛解を示すまで、比較的短い間隔の比較的高い投薬量が必要となることもある。その後、患者には予防的レジメンが投与され得る。
本発明の医薬組成物中の活性成分の実際の投薬量レベルは、特定の患者、組成物、及び投与様式について所望の治療反応を実現するのに有効な、患者にとって毒性のない活性成分の量が達成されるように変えることができる。選択の投薬量レベルは、用いられる本発明の詳細な組成物、又はそのエステル、塩若しくはアミドの活性、投与経路、投与時間、用いられる詳細な化合物の排泄速度、治療継続期間、用いられる詳細な組成物と組み合わせて使用される他の薬物、抗体及び／又は材料、治療下の患者の年齢、性別、体重、状態、全般的な健康及び既往歴、及び医学分野で周知の同様の要因を含め、種々の薬物動態学的要因に依存することになる。
一部の実施形態において、抗体は、併用治療の一部として、別の抗体又は操作された細胞若しくは受容体又は細胞傷害性薬剤若しくは治療用薬剤などの薬剤など、別の治療介入と同時に、又はいかなる順序であれ、それと逐次的に投与される。抗体は、一部の実施形態において、１つ以上の追加的な治療用薬剤と共に、又は別の治療介入と連携して、同時にも、又はいかなる順序であれ逐次的にも共投与される。一部のコンテクストでは、抗体は、抗体が１つ以上の追加的な治療用薬剤の効果を亢進させるか、又はその逆となるように、別の療法と十分に近い時間内に共投与される。一部の実施形態において、抗体は、１つ以上の追加的な治療用薬剤より前に投与される。一部の実施形態において、抗体は、１つ以上の追加的な治療用薬剤の後に投与される。
適応疾患
ｍＧｌｕＲ５は、種々の疾患に関係があるとされている。一部の適応症は、末梢のｍＧｌｕＲ５に関連していることが示されている（片頭痛、ＧＥＲＤ、ＩＢＳ）。他の適応症は、ＣＮＳでのｍＧｌｕＲ５の効果に起因すると推定され（脆弱Ｘ症候群、不安、パーキンソン病、嗜癖等）、従って、髄腔内投与されるｍＧｌｕＲ５抗体による治療に適切な適応症と見なされることになる。
従ってｍＧｌｕＲ５抗体は、数多くの病態、疾患、及び障害を治療するための医薬品の調製に使用することができる。一部の実施形態において、かかる医薬品は、片頭痛の治療に使用することができる。一部の実施形態において、医薬品は、ＧＥＲＤの治療に使用することができる。一部の実施形態において、医薬品は、ＩＢＳの治療に使用することができる。一部の実施形態において、医薬品は、過活動膀胱（ＯＡＢ）／尿失禁の治療に使用することができる。一部の実施形態において、医薬品は、疼痛；例えば、急性痛、神経因性疼痛／末梢性ニューロパチー、炎症痛、術後痛、慢性痛、又は膀胱内臓痛の治療又は予防に使用することができる。一部の実施形態において、医薬品は、パーキンソン病患者のパーキンソン病及び／又はレボドパ誘発性ジスキネジアの治療に使用することができる。一部の実施形態において、医薬品は、嗜癖の治療に使用することができる。一部の実施形態において、医薬品は、ジストニアの治療に使用することができる。
一部の実施形態において、本発明は、双極性障害Ｉ型抑鬱型、軽躁病型、躁病型及び混合型；双極性障害ＩＩ型；単発鬱病エピソード又は再発性大鬱病性障害、軽度抑鬱障害、治療抵抗性鬱病、産後の発症を伴う抑鬱障害、重篤気分調節症、精神病症状を伴う抑鬱障害などの抑鬱障害；気分循環症、気分変調症、気分正常などの持続性気分障害；及び月経前不快気分障害；広場恐怖、特定恐怖症、社会不安障害、慢性不安障害を伴う又は伴わない不安障害、全般性不安障害、パニック障害；強迫性障害；心的外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）など、重度のストレスに対する反応及び適応障害；離人症－現実感喪失症候群などの他の神経症性障害；アスペルガー症候群及びレット症候群を含むがこれらに限定されない広汎性発達障害、自閉性障害、精神遅滞及び常同運動を伴う小児自閉症及び過活動障害、運動機能の特異的発達障害、学力の特異的発達障害；産後（分娩後）及び出生前抑鬱；神経性食欲不振症、神経性過食症、異食症及び気晴らし食い障害を含むがこれらに限定されない摂食障害；パーキンソン病；脳炎後パーキンソニズムなどの第２のパーキンソニズム；他の障害に含まれるパーキンソニズム；レビー小体病；基底核の変性疾患；振戦、本態性振戦及び薬物誘発性振戦、ミオクローヌス、舞踏病及び薬物誘発性舞踏病、薬物誘発性チック及び有機物由来のチック、薬物誘発性急性ジストニア、薬物誘発性遅発性ジスキネジア、Ｌドパ誘発性ジスキネジアを含むがこれらに限定されない他の錐体外路及び運動障害；神経遮断薬悪性症候群（ＮＭＳ）、神経遮断薬誘発性パーキンソニズム、神経遮断薬誘発性早期発症型又は急性ジスキネジア、神経遮断薬誘発性急性ジストニア、神経遮断薬誘発性急性静坐不能、神経遮断薬誘発性遅発性ジスキネジア、神経遮断薬誘発性振戦を含むがこれらに限定されない神経遮断薬誘発性運動障害；下肢静止不能症候群、スティフマン症候群；局所性ジストニア、多局所性又は分節性ジストニア、捻転ジストニア、半球性、全身性及び遅発性ジストニア（精神薬理学的薬物によって誘発される）を含むがこれらに限定されないジストニア；頸部ジストニア（斜頸）、眼瞼痙攣（眼瞼の痙攣）、四肢ジストニア（書痙などの四肢の痙攣）、顎口腔ジストニア及び痙攣性発声障害（声帯の痙攣）を含めた局所性ジストニア；限局性発症の発作を伴う局在関連（焦点性）（部分）特発性てんかん及びてんかん症候群、単純部分発作を伴う局在関連（焦点性）（部分）症候性てんかん及びてんかん症候群、複雑部分発作を伴う局在関連（焦点性）（部分）症候性てんかん及びてんかん症候群、全身性特発性てんかん及びてんかん症候群であって、乳児期ミオクローヌスてんかん、新生児痙攣（家族性）、小児欠神てんかん（ピクノレプシー）、覚醒時大発作を伴うてんかん、欠神てんかん、ミオクローヌスてんかん（衝動性小発作）及び非特異性無緊張、間代性、ミオクローヌス、強直性、強直間代性発作を含むがこれらに限定されないものを含めた、てんかん；ミオクロニー欠神を伴うてんかん、ミオクロニー失立発作、点頭てんかん、レノックス・ガストー症候群、サラーム発作、症候性早期ミオクロニー脳症、ウエスト症候群、小発作及び大発作；てんかん重積症；持続性身体表現性障害；急性、慢性及び慢性難治性疼痛、頭痛；限定はされないが、背痛、歯痛、腹痛、腰痛、関節痛を含めた生理的過程及び身体的障害に関連する急性痛及び慢性痛；限定はされないが、リウマチ、筋肉痛、神経痛及び線維筋痛症を含めた筋骨格系及び結合組織の疾患に関連する急性痛及び慢性痛；三叉神経痛、帯状疱疹後神経痛、疼痛を伴う幻肢症候群、手根管症候群、坐骨神経病変、糖尿病性単ニューロパチーなど、神経、神経根及び神経叢障害に関連する急性痛及び慢性痛；遺伝性及び特発性ニューロパチー、炎症性多発ニューロパチー、薬物、アルコール又は毒物によって誘発される多発ニューロパチー、新生物疾患における多発ニューロパチー、糖尿病性多発ニューロパチーなど、多発ニューロパチー及び末梢神経系の他の障害に関連する急性痛及び慢性痛；及び脳卒中などの頭蓋内脳傷害、びまん性及び局所脳傷害、硬膜外、硬膜下及びくも膜下出血など、急性神経変性、並びにアルツハイマー病、ハンチントン病、多発性硬化症、及びＡＬＳなどの慢性神経変性；くも膜下出血、脳内出血及び他の非外傷性頭蓋内出血、脳梗塞、脳卒中、脳梗塞に至らない前大脳動脈及び大脳動脈の閉塞及び狭窄、脳動脈解離、脳動脈瘤、アテローム性脳動脈硬化症、進行性血管性白質脳症、高血圧性脳症、頭蓋内静脈系の非化膿性血栓症、脳動脈炎、脳アミロイドアンギオパチー及び脳血管疾患後遺症；緑内障及び他のニューロパチー；認知症、血管性認知症、レビー小体認知症、前頭側頭型認知症、及びＨＩＶ認知症；回転性めまい及び眼振；耳鳴り；精神神経全身性エリテマトーデス；重篤気分調節症；統合失調症スペクトラム障害；及び睡眠覚醒障害などの、ｍＧｌｕＲ５活性によって媒介される疾患、障害、又は病態と診断された、又はそれに罹患している対象を本明細書に記載される化合物を使用して治療する方法に関する。具体的な実施形態において、本発明のとおりに治療し得る対象は、大鬱病性障害、治療抵抗性鬱病及び双極性障害と診断されるか、又はそれに罹患している。
片頭痛
片頭痛は、重度の偶発性の頭痛発作及び関連する特徴（これには、悪心、嘔吐、光又は音又は動きに対する過敏が含まれ得る）を特徴とする、よく見られる複合的な神経病態である。一部の患者では、頭痛に先行又は付随して、感覚に関する警告徴候又は症状（即ち、アウラ）が起こる。頭痛は重篤であることもあり、また、ある種の患者では片側性であることもある。片頭痛発作は日常生活を破壊するものであり、欠勤及び作業能力低下による損失は毎年数十億ドルに及ぶ（Ｍｏｄｉ ａｎｄ Ｌｏｗｄｅｒ，Ａｍ．Ｆａｍ．Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ，Ｖｏｌ．７３：７２－７８，２００６）。
片頭痛は、世界中で極めて高頻度に見られる疾患であり、欧州人口の約１５％及び米国人口の１２％が片頭痛発作を抱えている（Ｌｉｐｔｏｎ ｅｔ ａｌ，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．６８：３４３－３４９，２００７）。加えて、片頭痛には、抑鬱及び血管障害など、幾つもの精神医学的及び内科的併存症が付随することが分かっている（Ｂｕｓｅ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，Ｖｏｌ．８１：４２８－４３２，２０１０；及びＢｉｇａｌ ｅｔ ａｌ，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．７２：１８６４－１８７１，２００９）。
片頭痛型頭痛は一般に、第一に鎮痛薬及びトリプタンと呼ばれるクラスの薬物で急性的に治療される（Ｈｕｍｐｈｒｅｙ ｅｔ ａｌ．Ａｎｎ ＮＹ Ａｃａｄ Ｓｃｉ．，Ｖｏｌ．６００：５８７－５９８，１９９０；及びＨｏｕｓｔｏｎ ａｎｄ Ｖａｎｈｏｕｔｔｅ，Ｄｒｕｇｓ，Ｖｏｌ．３１：１４９－１６３ １９８６）。選択的セロトニン５－ＨＴ１Ｂ／１Ｄ作動薬であるトリプタンは、急性片頭痛に有効な薬物であり、概して良好に忍容されるが、冠血管収縮の可能性があるため、心血管疾患の存在下では禁忌となる。加えて、多くの片頭痛患者はトリプタンに好反応を示さない。５３試験のメタ分析では、片頭痛を持つ人全体の最大３分の１、及び片頭痛発作全体の４０％が、トリプタンに反応を示さなかった（Ｆｅｒｒａｒｉ ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ，Ｖｏｌ．３５８：１６６８－１６７５，２００１）。
片頭痛予防は、医療上のニーズが高いにも関わらず、未だ対処されていない領域である。片頭痛患者集団の約４０％が、予防療法から利益を受けるものと見られる（Ｌｉｐｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．６８：３４３－３４９，２００７）。しかしながら、一部には、利用可能な予防療法に関する限られた有効性並びに重大な忍容性及び安全性の問題に起因して、いずれかの予防療法を受けている患者は僅か約１２％に過ぎない。トピラマートは、電位依存性ナトリウムチャネル及びある種のグルタミン酸受容体（ＡＭＰＡ－カイニン酸）を遮断する抗痙攣薬であり、米国で片頭痛予防に最もよく使われる薬物療法である。トピラマートは、無作為化プラセボ対照試験において偶発性片頭痛患者及び慢性片頭痛患者の両方で有効性が実証されている唯一の片頭痛予防剤である（Ｄｉｅｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｐｈａｌａｌｇｉａ，Ｖｏｌ．２７：８１４－８２３，２００７；Ｓｉｌｂｅｒｓｔｅｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｈｅａｄａｃｈｅ，Ｖｏｌ．４７：１７０－１８０，２００７）。しかしながら、患者の約５０％はトピラマートに反応を示さず、そしてこれは忍容性が低い。トピラマート治療に関連してよく見られる有害事象としては、錯感覚、食欲不振症、及び認知有害事象であって、精神運動遅延、傾眠、言語障害、並びに記憶及び集中障害を含むものが挙げられる（Ｂｒａｎｄｅｓ ｅｔ ａｌ，ＪＡＭＡ，Ｖｏｌ．２９１：９６５－９７３，２００４；Ａｄｅｌｍａｎ ｅｔ ａｌ，Ｐａｉｎ Ｍｅｄ．，Ｖｏｌ．９：１７５－１８５ ２００８；Ｓｉｌｂｅｒｓｔｅｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｒｃｈ Ｎｅｕｒｏｌ，Ｖｏｌ．６１：４９０－４９５，２００４）。非盲検可変用量研究では、患者の２０％が、有害作用が原因でトピラマートを中止した（Ｎｅｌｌｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｈｅａｄａｃｈｅ，Ｖｏｌ．４９：１４５４－１４６５，２００９）。既存の片頭痛療法に加えて、現在、４つの製薬会社が、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）又はその受容体に対するモノクローナル抗体を開発している。４つの抗ＣＧＲＰ又はＣＧＲＰ受容体モノクローナル抗体：ガルカネズマブ（ＬＹ２９５１７４２）、エプチネズマブ（ＡＬＤ４０３）、フレマネズマブ（ＴＥＶ－４８２１５）、及びエレヌマブ（ＡＭＧ－３３４）が、現在、開発中である。４つ全ての化合物について第ＩＩ相試験の結果が公開されており、第ＩＩＩ相試験が実施中であるか、又は完了している。現在までのところ、肝臓又は心血管への影響を含め、安全性の問題は生じておらず、これらの抗体は良好に忍容されるように見える。Ｔｓｏ ＡＲ ａｎｄ Ｇｏａｄｓｂｙ ＰＪ．Ｃｕｒｒ Ｔｒｅａｔ Ｏｐｔｉｏｎｓ Ｎｅｕｒｏｌ．２０１７；１９（８）：２７を参照のこと。エレヌマブ（商品名「Ａｉｍｏｖｉｇ」として知られる）は、２０１８年５月１７日、成人における片頭痛の予防的治療としてＦＤＡ承認を取得した。
ヒト患者の片頭痛型頭痛の治療に現在利用可能な療法の多くは、有害副作用に起因してリスク・ベネフィットプロファイルが不良であり、多くの患者が忍容できないか、又は忍容することを拒む。本発明は、一部には、副作用を全くなしに又は最小限に抑えて有効な片頭痛予防を提供する抗ｍＧｌｕＲ５抗体の新規レジメンを提供することにより、この問題に対処する。本明細書に記載される本発明の方法は、偶発性片頭痛並びに慢性片頭痛に罹患している患者の片頭痛型頭痛の頻度、重症度、及び／又は持続時間を有効に減少させることができる。
片頭痛型頭痛は、約４～約７２時間続く反復性の頭痛であり、片側性の、拍動性の、及び／又は中等度から重度の痛み及び／又は身体活動によって悪化する痛みを特徴とする。片頭痛型頭痛は、多くの場合に、悪心、嘔吐、及び／又は光に対する（羞明）、音に対する（音声恐怖症）、又は臭いに対する過敏を伴う。一部の患者では、片頭痛型頭痛の発生に先行してアウラが起こる。アウラは、典型的には、頭痛が間もなく起こることを知らせる視覚、感覚、言語、又は運動の異常である。本明細書に記載される方法は、ヒト患者におけるアウラを伴う及び伴わない片頭痛型頭痛の１つ以上の症状を予防し、治療し、又は改善する。
一実施形態において、本発明は、それを必要としている患者における片頭痛型頭痛の発生を予防し又は低減する方法であって、治療有効量の抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片を含む医薬組成物を患者に投与することを含む方法を提供する。
本明細書で使用されるとき、「片頭痛型頭痛の発生を予防し又は低減する」とは、組成物を投与する前の片頭痛型頭痛の頻度、持続時間、又は重症度と比較したとき又は組成物を投与されていない患者（即ち、対照対象）の片頭痛型頭痛の頻度、持続時間、又は重症度と比較したときの片頭痛型頭痛の頻度、持続時間、又は重症度の減少を指す。従って、特定の実施形態において、本発明は、患者の片頭痛型頭痛を予防的に治療する方法であって、治療有効量の抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその抗原結合断片を含む医薬組成物を患者に投与することを含む方法を提供する。「予防的治療」とは、患者の片頭痛型頭痛の頻度、重症度、及び／又は長さを低減するため片頭痛発作が起こる前に服用されるように設計される治療を指す。一部の実施形態において、予防的治療は、急性片頭痛特異的薬物療法の有効性又はそれに対する患者の反応を増進し得る。
本発明の方法の一部の実施形態において、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片を投与すると、患者が１ヵ月の間に経験する片頭痛型頭痛日数が、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は結合断片の投与前の日数（即ち、治療前ベースライン）と比較して、及び／又は抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は結合断片の投与を受けていない患者が経験する日数と比較して減少する。「片頭痛型頭痛日」は、３０分より長く続くアウラを伴う又は伴わない「片頭痛型頭痛」の発生、継続、又は再発を患者が経験する任意の暦日を含む。「片頭痛型頭痛」は、悪心又は嘔吐又は光若しくは音に対する過敏を伴う頭痛、及び／又は以下の疼痛特徴：片側性疼痛、拍動性疼痛、中等度から重度の疼痛強度、又は身体活動によって悪化する疼痛のうちの少なくとも２つを特徴とする頭痛である。治療前ベースラインは、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は結合断片の投与前の１、２、３、４、５、又は６ヵ月又はそれ以上のうちに関連性のあるパラメータ（例えば片頭痛型頭痛日数）を決定することにより確立し得る。一部の実施形態において、治療前ベースラインは、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は結合断片の投与前の３ヵ月のうちに特定のパラメータの測定に基づき確立される。
特定の実施形態において、患者が経験する月間片頭痛型頭痛日数は、治療前ベースライン及び／又は対照対象（即ち、抗体又は結合断片の投与を受けていない患者）と比較したとき、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は結合断片の投与後に約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％）、約４５％、約５０％、約５５％、又は約６０％減少する。一部の実施形態において、患者が経験する月間片頭痛型頭痛日数は、治療前ベースライン及び／又は対照対象と比較したとき、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は結合断片の投与後に６５％又はそれ以上、例えば、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、又は少なくとも約８０％減少する。一実施形態において、患者が経験する月間片頭痛型頭痛日数は、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は結合断片の投与後に少なくとも５０％減少する。別の実施形態において、患者が経験する月間片頭痛型頭痛日数は、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は結合断片の投与後に少なくとも７５％減少する。
片頭痛型頭痛の発生の減少はまた、治療前ベースライン及び／又は抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は結合断片の投与を受けていない患者が経験する時間数と比較した、患者が１ヵ月の間に経験する片頭痛型頭痛時間数の減少として評価することもできる。「片頭痛型頭痛時間」は、アウラを伴う又は伴わない「片頭痛型頭痛」の発生、継続、又は再発を患者が経験する任意の時間である。特定の実施形態において、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片を投与すると、患者が経験する月間片頭痛型頭痛時間数が、治療前ベースライン及び／又は抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は結合断片の投与を受けていない対照対象の時間数と比較したとき、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、又は少なくとも約７０％減少する。
本明細書に記載される治療レジメンの有効性はまた、患者が片頭痛特異的薬物療法による急性治療を必要とする日数、患者が片頭痛に起因した身体的又は機能的障害を負う日数、又は患者が経験する片頭痛発作回数の点で評価することもできる。例えば、一部の実施形態において、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片を投与すると、患者が１ヵ月の間に急性片頭痛治療の使用を必要とする日数が、治療前ベースライン及び／又は抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は結合断片の投与を受けていない患者が経験する回数と比較して減少する。本明細書で使用されるとき、用語「急性片頭痛特異的薬物療法治療日」又は「急性片頭痛特異的薬物療法使用日」とは、患者が片頭痛に特異的な薬物療法を服用した任意の暦日を指す。急性片頭痛特異的薬物療法としては、限定はされないが、トリプタン（例えば、アルモトリプタン、フロバトリプタン、リザトリプタン、スマトリプタン、ナラトリプタン、エレトリプタン、及びゾルミトリプタン）、エルゴタミン類（例えば、ジヒドロエルゴタミン及びエルゴタミン・カフェイン配合薬）、非ステロイド系抗炎症薬（例えば、アセチルサリチル酸、イブプロフェン、ナプロキセン、インドメタシン、及びジクロフェナク）、及びオピオイド類（例えば、コデイン、モルヒネ、ヒドロコドン、フェンタニル、メペリジン、及びオキシコドン）が挙げられる。月間急性片頭痛特異的薬物療法治療日数は、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片の投与後に、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％）、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、又は少なくとも約８５％減少し得る。特定の実施形態において、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片を投与すると、急性片頭痛特異的薬物療法を使用する必要が全くなくなる。
一部の実施形態において、本明細書に記載される方法のとおりに抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片を投与すると、治療前ベースライン及び／又は抗ｍＧｌｕＲ５抗体の投与を受けていない患者と比較したとき、身体機能障害又は患者が報告するクオリティ・オブ・ライフ影響スコアが減少し得る。片頭痛型頭痛は、多くの場合に患者のクオリティ・オブ・ライフに影響を与え、患者は余暇及び日常の活動を行うことができなくなるとともに、患者の仕事に生産性の損失が生じる。これらの効果は、改訂版片頭痛障害評価質問票（Ｍｉｇｒａｉｎｅ Ｄｉｓａｂｉｌｉｔｙ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ：ＭＩＤＡＳ）、頭痛インパクトテスト６（Ｈｅａｄａｃｈｅ Ｉｍｐａｃｔ Ｔｅｓｔ－６：ＨＩＴ－６）、片頭痛用クオリティ・オブ・ライフ質問票（Ｍｉｇｒａｉｎｅ－Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ：ＭＳＱ）、片頭痛機能的影響質問票（Ｍｉｇｒａｉｎｅ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｉｍｐａｃｔ Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ：ＭＦＩＱ）、及び片頭痛身体機能影響日誌（Ｍｉｇｒａｉｎｅ Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ Ｉｍｐａｃｔ Ｄｉａｒｙ：ＭＰＦＩＤ）などのバリデートされた質問票及び調査票を用いて評価することができる。従って、本発明の方法は、これらの質問票の１つ以上によって評価したときの、患者のクオリティ・オブ・ライフの１つ以上の側面を改善し、及び／又は片頭痛が患者の身体的、社会的、又は情緒的機能の１つ以上の側面に及ぼす影響を低減する。
本発明の方法の特定の実施形態において、患者が経験する片頭痛発作回数は、患者が治療前に経験する片頭痛発作回数又は対照対象が経験する片頭痛発作回数と比較したとき、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片の投与後に減少する。本明細書で使用されるとき、用語「片頭痛発作」とは、本明細書に定義するとおりの任意の片頭痛型頭痛のエピソードを指す。睡眠によって中断されるか又は一時的に寛解した後、４８時間以内に再発する片頭痛発作は、概して１回の発作と見なされる。同様に、急性片頭痛特異的薬物療法による治療が成功するが、４８時間以内に再燃する片頭痛発作もまた、１回の発作と見なされる。一部の実施形態において、片頭痛発作回数は、患者において、治療前の発作回数又は対照対象の発作回数と比較したとき、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片の投与後に少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％）、少なくとも約５０％＞、少なくとも約６０％＞、少なくとも約７０％＞、又は少なくとも約７５％減少する。
一部の実施形態において、本発明の治療レジメンは、それを必要としている患者の片頭痛に関連する１つ以上の症状を改善し、例えば、かかる症状の重症度及び／又は発生率を阻害する。例えば、本明細書に記載される方法のとおり患者に抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片を投与すると、対照対象（即ち、抗ｍＧｌｕＲ５又は結合断片の投与を受けていない対象）と比較したとき、患者において１つ以上の症状の発生頻度が減少し、又はその重症度が減少する。一部の例では、主題の抗体は、かかる症状を抗体投与後長時間、例えば数週間又は数ヵ月間にわたって遮断又は予防し得る。本発明の方法によって改善又は治療し得る症状としては、限定はされないが、血管運動症状（例えば、ホットフラッシュ、顔面紅潮、発汗、及び寝汗）、羞明（光に対する過敏）、音声恐怖症（音に対する過敏）、嗅覚過敏症、流涙／涙液分泌、回転性めまい、浮動性めまい、悪心、嘔吐、アウラ、及び頭痛が挙げられる。
好ましくは、本発明の方法のとおりに抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片を投与しても、患者に有害副作用はほとんど又は全く起こらない。本明細書で使用されるとき、用語「有害副作用」は、その薬物の服用によって引き起こされ得る任意の異常、欠陥、突然変異、病変、変性、有害な又は望ましくない反応、症状、又は傷害を指す。一部の実施形態において、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片を投与しても、他の片頭痛予防治療（例えば、アミトリプチリン、ジバルプロエクス、バルプロ酸、プロプラノロール、チモロール、トピラマート、及びＡ型ボツリヌス毒素）に関連する１つ以上の有害副作用は実質的に起こらない。他の片頭痛予防治療に関連する副作用としては、限定はされないが、疲労、悪心、浮動性めまい、不眠症、抑鬱、運動耐容能の低下、振戦、錯感覚、催奇形性、及び認知的困難が挙げられる。他の実施形態において、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片の投与は、他の片頭痛予防治療に関連する有害副作用の比率又は数と比較したとき、有害副作用の比率又は数が少ないことに関連する。更に他の実施形態において、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片の投与は、他の片頭痛予防治療に関連する有害副作用に起因する中断率と比較したとき、有害副作用に起因する中断率が低いことに関連する。特定の実施形態において、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は結合断片の投与に関連する有害副作用の数及び種類は、プラセボの投与に関連する有害副作用の数及び種類と統計的に差がない。一部の実施形態において、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片の投与は、有害事象共通用語規準（Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ）ｖ４．０（ＣＴＣＡＥ）によって評価したとき、グレード２より高い有害事象に関連しない。他の実施形態において、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片の投与は、ＣＴＣＡＥによって評価したとき、グレード１より高い有害事象に関連しない。
特定の実施形態において、本発明の方法のとおりに治療されることになる患者は、偶発性片頭痛を有するか、それに罹患するか、又はそれと診断される。偶発性片頭痛は、片頭痛歴（例えば、少なくとも５回の片頭痛型頭痛生涯発作頻度）のある患者が、本明細書に定義するとおりの片頭痛型頭痛日を１ヵ月に１４日以下有するときに診断される。一部の実施形態において、偶発性片頭痛を有するか、それに罹患しているか、又はそれと診断された患者は、１ヵ月に平均４日以上１５日未満の片頭痛型頭痛日を有する。関連する実施形態では、偶発性片頭痛を有するか、それに罹患しているか、又はそれと診断された患者は、１ヵ月に平均１５日未満の頭痛日を有する。本明細書で使用されるとき、「頭痛日」は、患者が本明細書に定義するとおりの片頭痛型頭痛、又は３０分より長く続くか、若しくは急性頭痛治療が必要な任意の頭痛を経験する任意の暦日である。一部の実施形態において、患者は、高頻度偶発性片頭痛を有する又はそれに罹患していると分類されてもよい。高頻度偶発性片頭痛は、１ヵ月に８～１４日の片頭痛型頭痛日を特徴とし得る。他の実施形態において、患者は、低頻度偶発性片頭痛を有する又はそれに罹患していると分類されてもよい。低頻度偶発性片頭痛は、１ヵ月に８日未満の片頭痛型頭痛日を特徴とし得る。
一部の実施形態において、本発明の方法のとおりに治療されることになる患者は、慢性片頭痛を有するか、それに罹患するか、又はそれと診断される。慢性片頭痛は、片頭痛患者（即ち、少なくとも５回の片頭痛型頭痛生涯発作頻度を有する患者）が、１ヵ月に１５日以上の頭痛日を有し、且つ頭痛日のうち少なくとも８日が片頭痛型頭痛日であるときに診断される。一部の実施形態において、慢性片頭痛を有するか、それに罹患しているか、又はそれと診断された患者は、１ヵ月に平均１５日以上の片頭痛型頭痛日を有する。本明細書に記載される方法の特定の実施形態において、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片を投与すると、患者の偶発性片頭痛が慢性片頭痛へと進行することが予防され、減少し、又は遅延する。
一部の実施形態において、本発明のｍＧｌｕＲ５抗体は、群発性頭痛の治療又は予防に使用されてもよい。群発性頭痛は、頭部の片側、典型的には眼の周囲における反復性の重度の頭痛を特徴とする神経障害である。一部の実施形態において、群発性頭痛は、罹患した側に流涙、鼻閉、又は眼周囲の腫脹を伴うことを特徴とする。これらの症状は１５分間～３時間続き得る。発作は、多くの場合に群発して起こり、典型的には数週間又は数ヵ月、場合によっては１年より長く続く。一部の実施形態において、本発明の治療レジメンは、それを必要としている患者の群発性頭痛に関連する１つ以上の症状を改善する。例えば、本明細書に記載される方法のとおり患者に抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片を投与すると、対照対象（即ち、抗ｍＧｌｕＲ５又は結合断片の投与を受けていない対象）と比較したとき、患者の１つ以上の症状の発生頻度が減少し、又は治療され得る。本発明の方法によって改善又は治療し得る症状としては、例えば、流涙／涙液分泌、頭痛、腫脹等が挙げられる。本発明の特定の態様では、本発明のｍＧｌｕＲ５抗体は、群発性頭痛の発生を低減又は予防するために使用されてもよい。
本明細書に記載される方法の特定の実施形態において、患者は治療未経験である。一実施形態において、患者が過去に片頭痛型頭痛の治療を受けたことがない場合、患者は治療未経験である。別の実施形態において、患者に片頭痛型頭痛の治療のための治療用薬剤が投与されなかった場合、患者は治療未経験である。一部の実施形態において、患者が過去に片頭痛型頭痛に対する予防療法を受けたことがない場合、患者は治療未経験である。例えば、特定の実施形態において、治療未経験患者は、偶発性片頭痛の予防的治療のための先行療法を受けていないか、又はそのための治療用薬剤を投与されていない。特定の他の実施形態において、治療未経験患者は、慢性片頭痛の予防的治療のための先行療法を受けていないか、又はそのための治療用薬剤を投与されていない。
本明細書に記載される方法の一部の実施形態において、患者は、少なくとも１つの他の片頭痛型頭痛予防療法が失敗したか、又はそれに対する忍容性がない。例えば、詳細な一実施形態において、患者は、少なくとも１つの片頭痛型頭痛予防剤による先行療法に反応を示さなかった。本明細書で使用されるとき、「反応を示さなかった」又は「治療失敗」とは、その薬剤の標準的な治療レジメン後に、患者の片頭痛型頭痛の頻度、持続時間、及び／又は重症度の低減という点で予防剤の有効性が欠如していることを指す。例えば、一実施形態において、片頭痛予防剤による先行治療が失敗した患者とは、その薬剤による治療前の月間片頭痛型頭痛日数と比較したとき、片頭痛予防剤の投与後に、同じ又はより多い月間片頭痛型頭痛日数を経験した患者である。
別の実施形態において、片頭痛予防剤による先行治療が失敗した患者とは、その薬剤による治療前の月間急性片頭痛特異的薬物療法治療日数と比較したとき、片頭痛予防剤の投与後に、同じ又はより多い月間急性片頭痛特異的薬物療法治療日数を経験した患者である。更に別の実施形態において、片頭痛予防剤による先行治療が失敗した患者とは、その薬剤による治療前の片頭痛発作回数と比較したとき、片頭痛予防剤の投与後に、同じ又はより多い片頭痛発作回数を経験した患者である。なおも別の実施形態において、片頭痛予防剤による先行治療が失敗した患者とは、その薬剤による治療前の身体機能障害レベルと比較したとき、片頭痛予防剤の投与後に同じレベル又はより高いレベルのＭＰＦＩＤによって測定されるとおりの身体機能障害（例えば、身体機能障害がある平均月間日数）を経験した患者である。
片頭痛予防剤による先行治療に反応を示さないことにはまた、片頭痛予防剤を忍容できないことも含まれ得る。例えば、一部の実施形態において、片頭痛予防剤による先行治療が失敗した患者とは、その薬剤に関連する副作用を忍容不能な患者である。かかる実施形態において、薬剤に関連する副作用は増悪し得るか、又は患者が有する別の医学的状態と不適合であり得る。実例として、催奇形性の副作用がある片頭痛予防剤であれば、妊娠中の患者には禁忌となり得る。特定の実施形態において、片頭痛予防剤による先行治療が失敗した患者とは、付随する副作用のために片頭痛予防剤による治療を中断する患者である。以上及び他の実施形態において、片頭痛予防剤による先行治療が失敗した患者とは、副作用の影響が片頭痛予防剤の治療利益よりも大きいため、治療中止、治療レジメンの変更、又は別の予防剤への切り替えを選ぶ患者である。
片頭痛予防剤としては、限定はされないが、β遮断薬（例えば、プロプラノロール、チモロール、アテノロール、メトプロロール、及びナドロール）、抗てんかん薬（例えば、ジバルプロエクス、バルプロ酸ナトリウム、バルプロ酸、トピラマート、及びガバペンチン）、三環系抗鬱薬（例えば、アミトリプチリン、ノルトリプチリン、ドキセピン、及びフルオキセチン）、及びＡ型ボツリヌス毒素が挙げられる。従って、特定の実施形態において、本発明の方法のとおりに治療される患者は、これらの片頭痛予防剤の１つ以上が失敗したか、又はそれに対する忍容性がない。一部の実施形態において、患者は、少なくとも２つの片頭痛予防剤による治療が失敗したか、又はそれに対する忍容性がない。他の実施形態において、患者は、少なくとも３つの片頭痛予防剤による治療が失敗したか、又はそれに対する忍容性がない。特定の実施形態において、患者は、プロプラノロール、チモロール、ジバルプロエクス、バルプロ酸、トピラマート、アミトリプチリン、又はＡ型ボツリヌス毒素から選択される１つ以上の薬剤による治療が失敗したか、又はそれに対する忍容性がない。詳細な一実施形態において、患者は、トピラマートによる治療が失敗したか、又はそれに対する忍容性がない。別の詳細な実施形態において、患者は、プロプラノロールによる治療が失敗したか、又はそれに対する忍容性がない。更に別の詳細な実施形態において、患者は、アミトリプチリンによる治療が失敗したか、又はそれに対する忍容性がない。
一部の実施形態において、患者は、２つの異なるクラスの片頭痛予防剤による治療が失敗したか、又はそれに対する忍容性がない。例えば、一実施形態において、患者は、抗てんかん薬（例えばトピラマート）及びβ遮断薬（例えばプロプラノロール）による治療が失敗したか、又はそれに対する忍容性がない者であり得る。別の実施形態において、患者は、抗てんかん薬（例えばトピラマート）及び抗鬱薬（例えばアミトリプチリン）による治療が失敗したか、又はそれに対する忍容性がない者であり得る。なおも別の実施形態において、患者は、β遮断薬（例えばプロプラノロール）及び抗鬱薬（例えばアミトリプチリン）による治療が失敗したか、又はそれに対する忍容性がない者であり得る。特定の実施形態において、患者は、３つの異なるクラスの片頭痛予防剤による治療が失敗したか、又はそれに対する忍容性がない。かかる実施形態において、患者は、抗てんかん薬（例えばトピラマート）、β遮断薬（例えばプロプラノロール）、及び抗鬱薬（例えばアミトリプチリン）による治療が失敗したか、又はそれに対する忍容性がない。
本明細書に記載される方法はまた、緊張型頭痛、群発性頭痛、片麻痺性片頭痛、及び網膜性片頭痛など、他のタイプの頭痛障害に対しても適用可能である。従って、本発明はまた、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその結合断片を本明細書に記載される投薬量レジメンのいずれかでそれを必要としている患者に投与することにより、前述の頭痛障害のいずれかを予防的に治療する方法を含めた、治療する方法、又は予防する方法も提供する。
ＧＥＲＤ
下部食道括約筋（ＬＥＳ）は、間欠的に弛緩し易い。結果として、そのようなときに機械的バリアが一時的に失われるため、胃からの体液が食道に入り込むことがあり、これが本明細書で「逆流」と称されるイベントである。
胃食道逆流症（ＧＥＲＤ）は、最も多く見られる上部消化管疾患である。呑酸としても知られるＧＥＲＤは、胃内容物が食道まで戻って来るために症状又は合併症のいずれかが起こる長期病態である。症状としては、口の奥の酸味、胸焼け、口臭、胸痛、嘔吐、呼吸障害、及び歯の摩耗が挙げられる。合併症には、食道炎、食道狭窄、バレット食道、及び食道癌が含まれる。現行の薬物療法は、胃酸分泌を低減すること、又は食道の酸を中和することを目標とする。逆流の背後にある主な機構は、下部食道括約筋の緊張低下に依存すると考えられている。しかしながら、例えば、Ｈｏｌｌｏｗａｙ ＆ Ｄｅｎｔ（１９９０）Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．Ｃｌｉｎ．Ｎ．Ａｍｅｒ．１９，ｐｐ．５１７－５３５は、ほとんどの逆流エピソードが一過性下部食道括約筋弛緩（ＴＬＥＳＲ）の間に起こり、即ち、弛緩が嚥下によって引き起こされるのではないことを示している。また、ＧＥＲＤ患者で通常、胃酸分泌は正常であることも示されている。
一態様において、本発明の抗体は胃食道逆流症（ＧＥＲＤ）の治療に使用され得る。一態様において、本発明の抗体は吐出の治療に使用され得る。一態様において、本発明の抗体は一過性下部食道括約筋弛緩（ＴＬＥＳＲ）の阻害に使用され、それによって逆流が治療され得る。
ＧＥＲＤにおけるｍＧｌｕＲ５拮抗薬の効果は、中枢というよりむしろ末梢と考えられている。Ｙｏｕｎｇ ＲＬ ｅｔ ａｌ．（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ－Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｎｄ Ｌｉｖｅｒ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ．２００７；２９２（２）：Ｇ５０１－１１．）は、ｍＧｌｕＲ５が胃食道迷走神経求心性終末において顕著な役割を果たし、しかし中枢胃迷走神経経路においては役割が小さいことを示している。従って末梢ｍＧｌｕＲ５は、治療利益のため、末梢からの機械感覚入力を減少させるのに好適な標的である。
従って、一部の実施形態において、本発明の抗体又は抗原結合抗体断片はＧＥＲＤの治療に使用される。一部の実施形態において、抗体は、ＣＮＳよりむしろ末梢のｍＧｌｕＲ５を標的化することによりＧＥＲＤを治療する。一部の実施形態において、治療有効性は、ＧＥＲＤの１つ以上の症状又は合併症の減少によってモニタされる。ＧＥＲＤの兆候である胸焼けが、よく見られる症状である。ＧＥＲＤに関連する他の症状としては、非限定的な例として、嚥下痛、口内に感じる苦味、げっぷ、悪心、嚥下障害、吐出、喉頭炎、咳、嗄声及び喘息が挙げられる。従って、本発明の特定の実施形態は、胃食道逆流症（ＧＥＲＤ）の症状、又はそれに関連する炎症を治療又は軽減する方法を提供する。具体的には、本発明の一部の実施形態は、個体に治療有効量の抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片を投与することによって個体の胃食道逆流症（ＧＥＲＤ）の症状、又はそれに関連する炎症を治療又は軽減する方法を提供する。一部の実施形態において、本発明は、下部食道括約筋の機能を正常化する方法を提供する。具体的な実施形態において、治療される胃食道逆流症は、非びらん性逆流症（ＮＥＲＤ）である。他の具体的な実施形態において、胃食道逆流症は、びらん性食道炎（ＥＥ）である。一部の実施形態において、本発明は、グレードＡ、Ｂ、Ｃ、又はＤのＥＥの１つ以上を治療する方法を提供する。一部の実施形態において、本発明は、グレードＣ及び／又はＤのＥＥの一方又は両方を治療する方法を提供する。一部の実施形態において、本発明は、バレット食道を治療する方法を提供する。
ＩＢＳ
ＩＢＳは、本明細書では、多くの場合に鼓脹及び腹部膨満と共に、腸機能の変化を伴う持続性又は反復性の腹痛並びに腹部不快感を含む特定の症状を伴う慢性的機能障害として定義される。ＩＢＳは、優勢な排便パターンに基づき概して３つの亜型：１）下痢型；２）便秘型；３）交代性腸管運動型に分類される。腹痛又は腹部不快感はＩＢＳの特徴であり、これら３つの亜型に見られる。ＩＢＳの症状は、Ｒｏｍｅ基準及び後に修正されたＲｏｍｅ ＩＩ基準に基づき分類されている。ＩＢＳの症状の記述がこれにどれだけ適合しているかが、ＩＤＳ臨床試験の設計及び評価において意見の一致を得る助けとなっている。
Ｒｏｍｅ ＩＩ診断基準は、以下である。
１）直近１年のうち１２週間以上（連続でなくてもよい）腹痛又は腹部不快感がある；
２）以下の症状のうちの２つ以上：ａ）排便による緩和；ｂ）排便回数の変化を伴う発症；ｃ）便の硬さの変化を伴う発症
過敏性腸症候群（ＩＢＳ）はまた、Ｔｈｏｍｐｓｏｎ Ｗ Ｇ，Ｌｏｎｇｓｔｒｅｔｈ Ｇ Ｆ，Ｄｒｏｓｓｍａｎ Ｄ Ａ，Ｈｅａｔｏｎ Ｋ Ｗ，Ｉｒｖｉｎｅ Ｅ Ｊ，Ｍｕｅｌｌｅｒ－Ｌｉｓｓｎｅｒ Ｓ Ａ．Ｃ．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｂｏｗｅｌ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ａｎｄ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ａｂｄｏｍｉｎａｌ Ｐａｉｎ．Ｉｎ：Ｄｒｏｓｓｍａｎ Ｄ Ａ，Ｔａｌｌｅｙ Ｎ Ｊ，Ｔｈｏｍｐｓｏｎ Ｗ Ｇ，Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ Ｗ Ｅ，Ｃｏｒａｚｉａｒｒｉ Ｅ，ｅｄｓ．Ｒｏｍｅ ＩＩ：Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ：Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．２ ｅｄ．ＭｃＬｅａｎ，Ｖ Ａ：Ｄｅｇｎｏｎ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｉｎｃ．；２０００：３５１－４３２及びＤｒｏｓｓｍａｎ Ｄ Ａ，Ｃｏｒａｚｚｉａｒｉ Ｅ，Ｔａｌｌｅｙ Ｎ Ｊ，Ｔｈｏｍｐｓｏｎ Ｗ Ｇ ａｎｄ Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ Ｗ Ｅ．Ｒｏｍｅ ＩＩ：Ａ ｍｕｌｔｉｎａｔｉｏｎａｌ ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ ｄｏｃｕｍｅｎｔ ｏｎ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ．Ｇｕｔ ４５（Ｓｕｐｐｌ．２），ＩＩ１－ＩＩ８１．９－１－１９９９に従い定義することもできる。
一部の実施形態において、本発明の抗体はＩＢＳの治療に使用され得る。一部の実施形態において、本発明の抗体は、３つの亜型：１）下痢型；２）便秘型；３）交代性腸管運動型のいずれかのＩＢＳの治療に使用され得る。
ＯＡＢ／尿失禁
過活動膀胱（ＯＡＢ）は、人の生活に悪影響を及ぼすほど頻繁に起こる尿意を特徴とする病態である。頻尿は、日中、夜間、又は両方に起こり得る。過活動膀胱は、一群の４症状：尿意切迫感、尿意頻数、夜間多尿、及び切迫性尿失禁を特徴とする。典型的には抗ムスカリン作用型である、ＯＡＢに対する既存の薬物療法は、特に高齢者において、負の副作用が関連する。
尿失禁（不随意の排尿、又は単に失禁としても知られる）は、膀胱コントロールの喪失として定義される。過活動膀胱を有する人の４０％超が尿失禁を有する。尿失禁の約４０％～７０％は過活動膀胱に起因する。尿失禁の治療には、フェソテロジン、トルテロジン及びオキシブチニンを含め、幾つもの薬物療法が存在する。多くは有益性が小さいように見える一方、副作用のリスクが懸念される。尿失禁には、幾つかの異なる種類があり得る：腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁、溢流性尿失禁、混合型尿失禁、器質性尿失禁、機能性尿失禁、夜間尿失禁、一過性尿失禁、くすくす笑い尿失禁、便尿失禁、排尿後尿滴下、及び性交時尿失禁。
一部の実施形態において、本発明の抗体はまた、過活動膀胱（ＯＡＢ）の治療にも使用され得る。一部の実施形態において、本発明の治療方法は、ＯＡＢに関連する１つ以上の症状を予防し、低減し、又は他の方法で改善することになる。一態様において、治療は、尿意切迫感、尿意頻数、夜間多尿、及び切迫性尿失禁のうちの１つ以上を軽減するのを助けることになる。一部の実施形態において、本発明の抗体は尿失禁の治療に使用され得る。尿失禁は、腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁、溢流性尿失禁、混合型尿失禁、器質性尿失禁、機能性尿失禁、夜間尿失禁、一過性尿失禁、くすくす笑い尿失禁、便尿失禁、排尿後尿滴下、及び性交時尿失禁のいずれか１つ以上から選択され得る。
疼痛
本発明の抗体はまた、疼痛の治療又は予防にも使用され得る。疼痛の例としては、持続性身体表現性障害などの心理的要因に関連する疼痛障害；急性、慢性及び慢性難治性疼痛、頭痛；限定はされないが、背痛、歯痛、腹痛、腰痛、関節痛を含めた生理的過程及び身体的障害に関連する急性痛及び慢性痛；限定はされないが、リウマチ、筋肉痛、神経痛及び線維筋痛症を含めた筋骨格系及び結合組織の疾患に関連する急性痛及び慢性痛；三叉神経痛、帯状疱疹後神経痛、疼痛を伴う幻肢症候群、手根管症候群、坐骨神経病変、糖尿病性単ニューロパチーなど、神経、神経根及び神経叢障害に関連する急性痛及び慢性痛；遺伝性及び特発性ニューロパチー、炎症性多発ニューロパチー、薬物、アルコール又は毒物によって誘発される多発ニューロパチー、新生物疾患における多発ニューロパチー、糖尿病性多発ニューロパチーなど、多発ニューロパチー及び末梢神経系の他の障害に関連する急性痛及び慢性痛が挙げられるがこれらに限定されない。本発明の抗体が有用となり得る疼痛障害としては、神経因性疼痛（ヘルペス後神経痛、神経損傷、「～痛の類（ｄｙｎｉａｓ）」、例えば、外陰部痛、幻肢痛、神経根引き抜き損傷、有痛性糖尿病性ニューロパチー、有痛性外傷性単ニューロパチー、有痛性多発ニューロパチーなど）；中枢性疼痛症候群（任意の神経系レベルで事実上任意の病変によって引き起こされる可能性がある）；術後疼痛症候群（例えば、乳房切除後症候群、開胸術後症候群、断端痛）；骨及び関節痛（骨関節炎）、反復動作による疼痛、歯痛、癌性疼痛、筋筋膜痛（筋傷害、線維筋痛症）；周術期痛（一般外科、婦人科）、慢性痛、月経困難症、並びにアンギナに伴う疼痛、及び様々な原因の炎症痛（例えば、骨関節炎、関節リウマチ、リウマチ性疾患、腱鞘炎及び痛風）、頭痛、片頭痛及び群発性頭痛、頭痛、一次痛覚過敏、二次痛覚過敏、一次アロディニア、二次アロディニア、又は中枢性感作によって引き起こされる他の疼痛が挙げられる。
更に、本発明の抗体は、疼痛のオピオイド治療に対する耐性及び／又は依存性を低下させるために使用されてもよく、例えば、アルコール、オピオイド、及びコカインの離脱症候群の治療に使用され得る。
自閉症スペクトラム障害
自閉症スペクトラム障害（ＡＳＤ）は、高度な機能障害を引き起こす発達障害であり、人口有病率は１～３％である。諸研究では、グルタミン酸作動性の、詳細にはｍＧｌｕＲ５受容体を通じたシグナル伝達の機能不全が表現型欠陥の一因であり、薬理的介入に適切な標的であることが示唆されている。ＶＰＡ誘発性自閉症マウスモデルでは、ＭＰＥＰによってＶＰＡ処置マウスの反復行動が有意に減少したが、移所運動活性には効果がなかった（Ｍｅｈｔａ ＭＶ ｅｔ ａｌ．ＰｌｏＳ Ｏｎｅ．２０１１；６（１０）：ｅ２６０７７）。これらの結果は、ｍＧｌｕＲ５拮抗薬に自閉症の中核症状に対する治療有効性があることを示す前臨床データと整合する。加えて、ｍＧｌｕＲ５拮抗薬ＭＰＥＰにより、ＢＴＢＲ自閉症マウスモデルの反復的な自己毛づくろい行動が阻止される（Ｓｉｌｖｅｒｍａｎ ＪＬ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．２０１０；３５（４）：９７６．）。更なるエビデンスは、自閉症マウスモデルでｍＧｌｕＲ５受容体をアロステリックに負に調節すると、反復行動が減少し、社会性欠如がレスキューされることを示している（Ｓｉｌｖｅｒｍａｎ ＪＬ ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．２０１２；４（１３１）：１３１ｒａ５１．）。
最も多く見られる遺伝型の精神遅滞及び自閉症である脆弱Ｘ症候群（ＦＸＳ）の認知及び症候上の複数の特徴は、ｍＧｌｕＲ５を通じたシグナル伝達の過剰によって説明することができる。ＦＸＳは、ＣＧＧトリプレットリピート伸長が伸長するために、脆弱性Ｘ精神遅滞１遺伝子のメチル化及び転写サイレンシング並びに脆弱性Ｘ精神遅滞タンパク質（ＦＭＲＰ）の転写サイレンシングが生じる結果として起こる。ＦＸＳのｍＧｌｕＲ理論によれば、ＦＸＳの複数の側面の根底にあるシナプス病態生理は、ｍＧｌｕＲ５活性化の下流でタンパク質が過度に合成されることが原因である。実際には、ｍＧｌｕＲ５及びＥＲＫ１／２に対する過感受性が、ＦＸＳマウスモデルの海馬における過度のタンパク質合成につながる（Ｏｓｔｅｒｗｅｉｌ ＥＫ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ．２０１０；３０（４６）：１５６１６－２７．）。ｍＧｌｕＲ５シグナル伝達が減少すると、ＦＸＳ表現型が逆転し得るため、数多くの研究が、ＦＸＳ及び関連障害の治療に対するｍＧｌｕＲ５拮抗薬の使用に理論的根拠を与えている（Ｄｏｅｌｅｎ Ｇ，Ｂｅａｒ ＭＦ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ．２００８；５８６（６）：１５０３－８．）。ＦＸＳマウスモデルでは、小分子ｍＧｌｕＲ５拮抗薬ＡＦＱ０５６が、疾患表現型の様々な側面をレスキューする（Ｌｅｖｅｎｇａ Ｊ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｄｉｓｅａｓｅ．２０１１；４２（３）：３１１－７．）。
一部の実施形態において、本発明の抗体は自閉症スペクトラム障害の治療に使用される。更に別の態様において、自閉症スペクトラム障害は、自閉症、古典的自閉症、アスペルガー症候群、特定不能の広汎性発達障害（ＰＤＤ－ＮＯＳ；別名、非定型自閉症）、脆弱Ｘ症候群、レット症候群、及び小児期崩壊性障害から選択される。
神経及び精神障害
本発明のｍＧｌｕＲ５抗体は、幅広い神経及び精神障害の治療に使用され得る。
本発明の方法の好ましい実施形態において、疾患、障害、又は医学的状態は、限定はされないが、（１）気分障害及び気分情動障害；（２）不安障害を含む神経症性、ストレス関連及び身体表現性障害；（３）心理発達障害；（４）生理学的機能異常及び身体的要因に関連する行動症候群；（５）錐体外路及び運動障害；（６）偶発性及び発作性障害、てんかん；（７）疼痛；（８）神経変性形態；（９）脳血管疾患、急性及び慢性；及び任意の脳血管疾患後遺症を含めた、神経及び精神障害から選択される。
本発明のとおりに治療し得る気分障害及び気分情動障害の例としては、限定はされないが、双極性障害Ｉ型抑鬱型、軽躁病型、躁病型及び混合型；双極性障害ＩＩ型；単発鬱病エピソード又は再発性大鬱病性障害、軽度抑鬱障害、治療抵抗性鬱病、産後の発症を伴う抑鬱障害、精神病症状を伴う抑鬱障害などの抑鬱障害；気分循環症、気分変調症、気分正常などの持続性気分障害；及び月経前不快気分障害が挙げられる。具体的な実施形態において、本発明のとおりに治療し得る気分障害及び気分情動障害は、大鬱病性障害、治療抵抗性鬱病及び双極性障害である。
本発明のとおりに治療し得る神経症性、ストレス関連及び身体表現性障害に属する障害の例としては、限定はされないが、広場恐怖、特定恐怖症、社会不安障害、慢性不安障害を伴う又は伴わない不安障害、全般性不安障害、パニック障害；強迫性障害；心的外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）など、重度のストレスに対する反応及び適応障害；離人症－現実感喪失症候群などの他の神経症性障害が挙げられる。
本発明のとおりに治療し得る心理発達障害の例としては、限定はされないが、アスペルガー症候群及びレット症候群を含むがこれらに限定されない広汎性発達障害、自閉性障害、精神遅滞及び常同運動を伴う小児自閉症及び過活動障害、運動機能の特異的発達障害、学力の特異的発達障害が挙げられる。
本発明に係る生理学的機能異常及び身体的要因に関連する行動症候群の例としては、限定はされないが、産後（分娩後）及び出生前抑鬱を含むがこれらに限定されない分娩に関連する精神及び行動障害；神経性食欲不振症、神経性過食症、異食症及び気晴らし食い障害を含むがこれらに限定されない摂食障害が挙げられる。
本発明のとおりに治療し得る錐体外路及び運動障害の例としては、限定はされないが、パーキンソン病；脳炎後パーキンソニズムなどの第２のパーキンソニズム；他の障害に含まれるパーキンソニズム；レビー小体病；基底核の変性疾患；振戦、本態性振戦及び薬物誘発性振戦、ミオクローヌス、舞踏病及び薬物誘発性舞踏病、薬物誘発性チック及び有機物由来のチック、薬物誘発性急性ジストニア、薬物誘発性遅発性ジスキネジア、Ｌドパ誘発性ジスキネジアを含むがこれらに限定されない他の錐体外路及び運動障害；神経遮断薬悪性症候群（ＮＭＳ）、神経遮断薬誘発性パーキンソニズム、神経遮断薬誘発性早期発症型又は急性ジスキネジア、神経遮断薬誘発性急性ジストニア、神経遮断薬誘発性急性静坐不能、神経遮断薬誘発性遅発性ジスキネジア、神経遮断薬誘発性振戦を含むがこれらに限定されない神経遮断薬誘発性運動障害；下肢静止不能症候群、スティフマン症候群が挙げられる。
本発明のとおりに治療し得る基底核の機能不全及び／又は変性による運動障害の更なる例としては、限定はされないが、局所性ジストニア、多局所性又は分節性ジストニア、捻転ジストニア、半球性、全身性及び遅発性ジストニア（精神薬理学的薬物によって誘発される）を含むがこれらに限定されないジストニアが挙げられる。局所性ジストニアとしては、頸部ジストニア（斜頸（ｔｏｒｔｉｃｏｌｌｉ））、眼瞼痙攣（眼瞼の痙攣）、四肢ジストニア（書痙などの四肢の痙攣）、顎口腔ジストニア及び痙攣性発声障害（声帯の痙攣）が挙げられる。
本発明のとおりに治療し得る偶発性及び発作性障害の例としては、限定はされないが、限局性発症の発作を伴う局在関連（焦点性）（部分）特発性てんかん及びてんかん症候群、単純部分発作を伴う局在関連（焦点性）（部分）症候性てんかん及びてんかん症候群、複雑部分発作を伴う局在関連（焦点性）（部分）症候性てんかん及びてんかん症候群、全身性特発性てんかん及びてんかん症候群であって、乳児期ミオクローヌスてんかん、新生児痙攣（家族性）、小児欠神てんかん（ピクノレプシー）、覚醒時大発作を伴うてんかん、欠神てんかん、ミオクローヌスてんかん（衝動性小発作）及び非特異性無緊張、間代性、ミオクローヌス、強直性、強直間代性発作を含むがこれらに限定されないものを含めた、てんかんが挙げられる。
本発明のとおりに治療し得るてんかんの更なる例としては、限定はされないが、ミオクロニー欠神を伴うてんかん、ミオクロニー失立発作、点頭てんかん、レノックス・ガストー症候群、サラーム発作、症候性早期ミオクロニー脳症、ウエスト症候群、小発作及び大発作；てんかん重積症が挙げられる。
神経変性の形態を含む疾患の例としては、限定はされないが、脳卒中などの頭蓋内脳傷害、びまん性及び局所脳傷害、硬膜外、硬膜下及びくも膜下出血など、急性神経変性、並びにアルツハイマー病、ハンチントン病、多発性硬化症及びＡＬＳなどの慢性神経変性が挙げられる。
脳血管疾患の例としては、限定はされないが、くも膜下出血、脳内出血及び他の非外傷性頭蓋内出血、脳梗塞、脳卒中、脳梗塞に至らない前大脳動脈及び大脳動脈の閉塞及び狭窄、脳動脈解離、脳動脈瘤、アテローム性脳動脈硬化症、進行性血管性白質脳症、高血圧性脳症、頭蓋内静脈系の非化膿性血栓症、脳動脈炎、脳アミロイドアンギオパチー及び脳血管疾患後遺症が挙げられる。
一態様において、障害は、グルタミン酸機能不全に関連する神経及び／又は精神障害である。更なる態様において、障害は、嗜癖、情動障害、加齢関連認知低下、アルツハイマー病、健忘障害、筋萎縮性側索硬化症、不安、不安障害、アンジェルマン症候群、アスペルガー症候群、注意欠陥多動性障害、双極性障害、脳浮腫、慢性痛、譫妄、認知症、抑鬱、糖尿病、ダウン症候群、ジストニア、摂食障害、てんかん、線維筋痛症、脆弱Ｘ症候群、ハンチントン関連舞踏病、胃食道逆流症（ＧＥＲＤ）、レボドパ誘発性（ｌｅｖａｄｏｐａ－ｉｎｄｕｃｅｄ）ジスキネジア、躁鬱病、片頭痛、運動障害、多発性硬化症、ナルコレプシー、神経線維腫症１型、神経因性疼痛、肥満症、疼痛、パラノイア、パーキンソン病、帯状疱疹後神経因性疼痛、精神病性障害、ＰＴＥＮ過誤腫症候群、統合失調症、老年性認知症、睡眠障害、物質関連障害、又は単極性鬱病から選択される。
パーキンソン病に関して、パーキンソン病に対する既存の治療であるＬドパは、運動変動及びジスキネジアを引き起こす。代謝型グルタミン酸受容体５型（ｍＧｌｕＲ５）は、抗ジスキネジア療法に提案されている標的である。エビデンスが示すところによれば、後被殻及び淡蒼球におけるｍＧｌｕＲ５特異的結合の亢進が、パーキンソン病におけるＬドパ誘発性ジスキネジアの病因に寄与している（Ｓａｍａｄｉ Ｐ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ａｇｉｎｇ．２００８；２９（７）：１０４０－５１．）。既にヒトで試験されている非競合的ｍＧｌｕＲ５拮抗薬であるフェノバムは、パーキンソン病ラット及びサルにおいてＬドパ誘発性ジスキネジアを改善する（Ｒｙｌａｎｄｅｒ Ｄ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｄｉｓｅａｓｅ．２０１０；３９（３）：３５２－６１．）。パーキンソン病のげっ歯類モデルでは、ＭＰＥＰ投与により異常不随意運動が事実上消失し、慢性Ｌドパ投与に関連するＦｏｓＢ／ΔＦｏｓＢの異常な線条体発現が劇的に減少した（Ｌｅｖａｎｄｉｓ Ｇ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｄｉｓｅａｓｅ．２００８；２９（１）：１６１－８．）。
嗜癖に関して、大量のエビデンスから、嗜癖の強化及び常習性物質探索行動の復活の両方に代謝型グルタミン酸受容体（ｍＧｌｕＲ）が関与していることが示唆される。コカインを例にとると、研究が示すところによれば、ｍＧｌｕＲ５拮抗薬は、コカインプライミング誘発性及び手がかり誘発性のコカイン探索行動復活を弱める（Ｋｕｍａｒｅｓａｎ Ｖ ｅｔ ａｌ．Ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．２００９；２０２（２）：２３８－４４．）。加えて、多量飲酒者の側坐核でｍＧｌｕＲ５シグナル伝達が上方制御されることが示されている；ＭＰＥＰ投与は、アルコールの鎮静効果を増加させる一方、アルコール誘発性離脱症状を低減する（Ｃｏｚｚｏｌｉ ＤＫ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ．２００９；２９（２７）：８６５５－６８；Ｂｌｅｄｎｏｖ ＹＡ，Ａｄｒｏｎ Ｈａｒｒｉｓ Ｒ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．２００８；１１（６）：７７５－９３．）。更に、手がかり誘発性のアルコール探索行動復活は、特定の辺縁系脳領域におけるＥＲＫ１／２リン酸化の増加に関連し、ＭＰＥＰ投与によって遮断される（Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒ ＪＰ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．２００８；５５（４）：５４６－５４．）。メタンフェタミン嗜癖については、３－（（２－メチル－１，３－チアゾール－４－イル）エチニル）ピリジン（ＭＴＥＰ）によるｍＧｌｕＲ５拮抗作用が、ラットにおいてメタンフェタミン強化を弱め、メタンフェタミン探索行動の復活を防ぐ（Ｇａｓｓ ＪＴ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．２００９；３４（４）：８２０．）。
アルツハイマー病に関しては、ｍＧｌｕＲ５がクラスターを形成して細胞内カルシウムが上昇し、シナプスの劣化が起こり、ｍＧｌｕＲ５拮抗薬によって反応が妨げられる（Ｒｅｎｎｅｒ Ｍ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｎ．２０１０；６６（５）：７３９－５４．）。加えて、実験から、ＭＰＥＰなどのグルタミン酸受容体拮抗薬がＡβオリゴマー誘発性シナプス毒性を防ぐことが実証されており、アルツハイマー病に対する改良された対症治療／神経保護治療の開発に向けた標的としてのグルタミン酸作動系が更に裏付けられる（Ｒａｍｍｅｓ Ｇ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．２０１１；６０（６）：９８２－９０）。
変形例
本発明の範囲には、本明細書に記載される本発明の抗体の機能性部分が含まれる。用語「機能性部分」は、抗体に関連して使用されるとき、本発明の抗体の任意の一部又は断片であって、それがその一部である抗体（親抗体）の生物学的活性を保持している一部又は断片を指す。機能性部分は、例えば、標的細胞を認識し、又は疾患を検出、治療、若しくは予防する能力を親抗体と似た程度に、同じ程度に、又はそれより高度に保持している抗体の一部を包含する。親抗体と比べると、機能性部分は、例えば、親抗体の約１０％、２５％、３０％、５０％、６８％、８０％、９０％、９５％、又はそれ以上を含み得る。
機能性部分は、その部分のアミノ末端又はカルボキシ末端に、又は両方の末端に追加のアミノ酸を含んでもよく、この追加のアミノ酸は、親抗体のアミノ酸配列には見られないものである。望ましくは、追加のアミノ酸は、例えば標的細胞の認識、ｍＧｌｕＲ５活性の阻害など、機能性部分の生物学的機能を妨げない。より望ましくは、追加のアミノ酸は、親抗体の生物学的活性と比較したとき生物学的活性を亢進させる。
本発明の範囲には、本明細書に記載される本発明の抗体の機能性変異体が含まれる。用語「機能性変異体」は、本明細書で使用されるとき、親抗体と実質的又は有意な配列同一性又は類似性を有する抗体、ポリペプチド、又はタンパク質を指し、この機能性変異体は、その変異体の元となる抗体の生物学的活性を保持している。機能性変異体は、例えば、標的細胞を認識する能力を親抗体と似た程度に、同じ程度に、又はそれより高度に保持している本明細書に記載される抗体（親抗体）の変異体を包含する。親抗体と比べると、機能性変異体は、例えば、親抗体とアミノ酸配列が少なくとも約３０％、５０％、７５％、８０％、９０％、９８％又はそれ以上同一であり得る。
機能性変異体は、例えば、少なくとも１つの保存的アミノ酸置換を有する親抗体のアミノ酸配列を含み得る。それに代えて又は加えて、機能性変異体は、少なくとも１つの非保存的アミノ酸置換を有する親抗体のアミノ酸配列を含み得る。この場合、非保存的アミノ酸置換が機能性変異体の生物学的活性に干渉しない又はそれを阻害しないことが好ましい。非保存的アミノ酸置換は、親抗体と比較したとき機能性変異体の生物学的活性が増加するように機能性変異体の生物学的活性を亢進させ得る。
本発明の抗体のアミノ酸置換は、好ましくは保存的アミノ酸置換である。保存的アミノ酸置換は当該技術分野において公知であり、特定の物理的及び／又は化学的特性を有する一つのアミノ酸が、同じ又は類似した化学的又は物理的特性を有する別のアミノ酸に交換されるアミノ酸置換が含まれる。例えば、保存的アミノ酸置換は、酸性／負電荷極性アミノ酸が別の酸性／負電荷極性アミノ酸（例えば、Ａｓｐ又はＧｌｕ）に置換されるもの、非極性側鎖を有するアミノ酸が非極性側鎖を有する別のアミノ酸（例えば、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｔｒｐ、Ｃｙｓ、Ｖａｌ等）に置換されるもの、塩基性／正電荷極性アミノ酸が別の塩基性／正電荷極性アミノ酸（例えば、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ等）に置換されるもの、極性側鎖を有する非荷電アミノ酸が極性側鎖を有する別の非荷電アミノ酸（例えば、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ等）に置換されるもの、β分岐側鎖を有するアミノ酸がβ分岐側鎖を有する別のアミノ酸（例えば、Ｉｌｅ、Ｔｈｒ、及びＶａｌ）に置換されるもの、芳香族側鎖を有するアミノ酸が芳香族側鎖を有する別のアミノ酸（例えば、Ｈｉｓ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、及びＴｙｒ）に置換されるもの等であり得る。
また、アミノ酸は、ベクター設計に基づき配列に付加され、又はそこから除去されてもよい。
抗体は、本明細書に記載される指定の１つ又は複数のアミノ酸配列から本質的になってもよく、従って他の成分、例えば他のアミノ酸が機能性変異体の生物学的活性を変化させることは実質的にない。
本発明の実施形態の抗体（機能性部分及び機能性変異体を含む）は任意の長さであってもよく、即ち、任意の数のアミノ酸を含んでもよく、但し、抗体（又はその機能性部分又は機能性変異体）は、その生物学的活性、例えば、抗原に特異的に結合する能力、哺乳類において罹患細胞を検出する能力、又は哺乳類において疾患を治療若しくは予防する能力等を保持しているものとする。例えば、抗体は、５０、７０、７５、１００、１２５、１５０、１７５、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００アミノ酸長又はそれ以上など、約５０～約５０００アミノ酸長であり得る。
本発明の実施形態の抗体（本発明の機能性部分及び機能性変異体を含む）は、１つ以上の天然に存在するアミノ酸の代わりに合成アミノ酸を含むことができる。かかる合成アミノ酸は当該技術分野において公知であり、例えば、アミノシクロヘキサンカルボン酸、ノルロイシン、α－アミノｎ－デカン酸、ホモセリン、Ｓ－アセチルアミノメチル－システイン、ｔｒａｎｓ－３－及びｔｒａｎｓ－４－ヒドロキシプロリン、４－アミノフェニルアラニン、４－ニトロフェニルアラニン、４－クロロフェニルアラニン、４－カルボキシフェニルアラニン、β－フェニルセリン、β－ヒドロキシフェニルアラニン、フェニルグリシン、α－ナフチルアラニン、シクロヘキシルアラニン、シクロヘキシルグリシン、インドリン－２－カルボン酸、１，２，３，４－テトラヒドロイソキノリン－３－カルボン酸、アミノマロン酸、アミノマロン酸モノアミド、Ｎ’－ベンジル－Ｎ’－メチル－リジン、Ｎ’，Ｎ’－ジベンジル－リジン、６－ヒドロキシリジン、オルニチン、α－アミノシクロペンタンカルボン酸、α－アミノシクロヘキサンカルボン酸、α－アミノシクロヘプタンカルボン酸、α－（２－アミノ－２－ノルボルナン）－カルボン酸、α，γ－ジアミノ酪酸、α，β－ジアミノプロピオン酸、ホモフェニルアラニン、及びα－ｔｅｒｔ－ブチルグリシンが挙げられる。
本発明の実施形態の抗体（機能性部分及び機能性変異体を含む）は、グリコシル化されてもよく、アミド化されてもよく、カルボキシル化されてもよく、リン酸化されてもよく、エステル化されてもよく、Ｎ－アシル化されてもよく、例えばジスルフィド架橋を介して環化されてもよく、又は酸付加塩に変換されてもよく、及び／又は任意選択で二量化若しくは重合されてもよく、又はコンジュゲートされてもよい。
本発明の実施形態の抗体（その機能性部分及び機能性変異体を含む）は、当該技術分野において公知の方法によって入手することができる。抗体は、ポリペプチド又はタンパク質を作成する任意の好適な方法によって作成されてもよい。ポリペプチド及びタンパク質をデノボ合成する好適な方法が、Ｃｈａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｆｍｏｃ Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ，２０００；Ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｒｕｇ Ａｎａｌｙｓｉｓ，ｅｄ．Ｒｅｉｄ，Ｒ．，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，２０００；Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ，ｅｄ．Ｗｅｓｔｗｏｏｄ ｅｔ ａｌ．，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ，２００１；及び米国特許第５，４４９，７５２号明細書などの文献に記載されている。また、ポリペプチド及びタンパク質は、本明細書に記載される核酸を使用して、標準的な組換え方法を用いた組換えによって作製することもできる。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ ｅｄ．，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．２００１；及びＡｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ ａｎｄ Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｎ Ｙ，１９９４を参照のこと。更に、本発明の一部の抗体（その機能性部分及び機能性変異体を含む）は、植物、細菌、昆虫、哺乳類、例えば、ラット、ヒトなどの供給源から単離及び／又は精製することができる。単離及び精製方法は、当該技術分野において周知である。或いは、本明細書に記載される抗体（その機能性部分及び機能性変異体を含む）は、企業によって商業的に合成されてもよい。この点で、本発明の抗体は、合成抗体、組換え抗体、単離抗体、及び／又は精製抗体であり得る。
本明細書に開示されるＶＨ及びＶＬ配列を有する抗体を使用して、ＶＨ及び／又はＶＬ配列、又はそれに結合している１つ又は複数の定常領域を修飾することにより新規変異抗体を創出し得る。従って、本発明の変異抗体の構造的特徴を用いると、ｍＧｌｕＲ５に結合するなど、本発明の抗体の少なくとも１つの機能特性を保持している構造的に関連性のある変異抗体が創出される。例えば、本明細書で考察するとおり、１つの抗ｍＧｌｕＲ５変異抗体又はその突然変異体の１つ以上のＣＤＲ領域を既知のフレームワーク領域及び／又は他のＣＤＲと組換えによって組み合わせることにより、組換え操作によって作られた本発明の更なる抗ｍＧｌｕＲ５抗体（例えば、ｍＧｌｕＲ５に結合する抗体）を創出し得る。この操作方法の出発材料は、本明細書に提供されるＶＨ及び／又はＶＬ配列のうちの１つ以上、又はその１つ以上のＣＤＲ領域であり得る。操作された抗体の創出には、本明細書に提供されるＶＨ及び／又はＶＬ配列のうちの１つ以上、又はその１つ以上のＣＤＲ領域を有する抗体を実際に調製する必要はない（即ち、タンパク質として発現させる必要はない）。むしろ、１つ又は複数の配列に含まれる情報を出発材料として用いて、元の１つ又は複数の配列に由来する「第２世代」の１つ又は複数の配列を創出し、次に「第２の世代」の１つ又は複数の配列を調製し、タンパク質として発現させる。改変された抗体配列の調製及び発現には、標準的な分子生物学的技術が用いられ得る。
本発明は、特に、ヒト化ｍＧｌｕＲ５抗体を包含する。ウサギ由来のモノクローナル抗体のヒト化及び抗原結合親和性を維持するための好ましい配列修飾に関する例示的教示が、Ｎｏｖｅｌ Ｒａｂｂｉｔ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｈｕｍａｎｉｚａｔｉｏｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ Ｒａｂｂｉｔ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓと題される２００８年５月２１日に出願された国際公開第２００８／１４４７５７号パンフレット（その開示は全体として参照により本明細書に援用される）に開示されている。ヒト化抗体は、より多くのヒト様免疫グロブリンドメインを含有するように操作され、動物由来の抗体の相補性決定領域をヒト抗体のフレームワーク領域の中に取り込む。これは、モノクローナル抗体の可変領域の超可変ループの配列を慎重に調べ、それをヒト抗体鎖の構造にフィットさせることにより達成される。例えば、米国特許第６，１８７，２８７号明細書（全体が参照により本明細書に援用される）を参照のこと。
１つ又は複数の改変された抗体配列によってコードされる抗体は、本明細書に提供される方法及び配列によって作製される抗ｍＧｌｕＲ５抗体の機能特性の１つ、一部又は全てを保持していてもよく、この機能特性には、特定のＫＤレベル又はそれ未満で変異体ｍＧｌｕＲ５又は変異体ｍＧｌｕＲ５コンジュゲートに結合すること、及び／又は免疫細胞活性を調節すること、及び／又は例えば、活性Ｔ細胞又はＢ細胞など、所望の標的細胞に選択的に結合することが含まれる。改変された抗体の機能特性は、当該技術分野で利用可能な及び／又は本明細書に記載される標準アッセイを用いて評価し得る。
突然変異は、抗ｍＧｌｕＲ５抗体コード配列の全て又は一部に沿って無作為に又は選択的に導入されてもよく、得られた修飾抗ｍＧｌｕＲ５抗体は、結合活性及び／又は他の所望の機能特性に関してスクリーニングされてもよい。
定義
特に定義されない限り、本明細書で使用される全ての科学技術用語は、本発明が属する技術分野の当業者が一般に理解するものと同じ意味を有する。本発明においては、又は本発明を試験するには、本明細書に記載されるものと同様又は同等の方法及び材料を使用し得るが、好適な方法及び材料を本明細書に記載する。材料、方法及び例は例示に過ぎず、限定することを意図するものではない。本明細書に記載される免疫学、抗体設計、並びに医薬及び薬化学に関連して利用される命名法、並びにその実験室手順及び技法は、周知の、当該技術分野で一般的に用いられているものである。抗体合成、抗体分析、医薬調製、製剤化、及び送達、及び患者の治療には、標準的な技法が用いられ得る。
本明細書における記載において、及び以下の特許請求の範囲全体を通じて使用されるとき、「ある（ａ）」、「ある（ａｎ）」、及び「その（ｔｈｅ）」の意味には、文脈上特に明確に指示されない限り、複数形の参照が含まれる。
用語「約」又は「近似的に」は、当業者によって決定されるとおりの特定の値についての許容できる誤差範囲内であることを意味し、その範囲は、一部には、その値がどのように計測又は決定されるか、例えば、測定系の限界に依存することになる。例えば、「約」は、当該技術分野の慣習に従い、１標準偏差又は１標準偏差超の範囲内であることを意味し得る。或いは、「約」は、所与の値の２０％まで、又は１０％まで、又は５％まで、又は１％までの範囲を意味し得る。或いは、特に生物学的系又は過程に関して、この用語は、ある値の１桁分以内、好ましくは５倍以内、及びより好ましくは２倍以内であることを意味し得る。本願及び特許請求の範囲に特定の値が記載される場合、特に明記されない限り、その特定の値についての許容できる誤差範囲の範囲内であることを意味する用語「約」が仮定されなければならない。
「急性痛」は、概して、持続性でない、即ち、６ヵ月未満しか続かない、特異的原因の結果として突然発症し得るとともに、性質が急激であり得る疼痛を指す。概して急性痛は、罹患領域の治療が終われば消える。ある急性痛は一時的で短命である。他の場合は、急性痛は効果がより長く続くこともあり、激痛を引き起こし得る。急性痛の一部の例示的原因としては、頭痛、片頭痛、手術、骨折、セメント充填、美容整形手術、熱傷、切り傷、労働、分娩などが挙げられる。
「情動障害」又は「気分障害」とは、精神疾患の診断と分類の手引き（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ａｎｄ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｍｅｎｔａｌ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ：ＤＳＭ）及び国際疾病分類（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｄｉｓｅａｓｅｓ：ＩＣＤ）において分類されるとおり、人の気分の乱れが主な根底にある特徴であるものである。気分障害は、躁病又は軽躁病など、気分高揚；最も良く知られた、及び最も良く研究されたものが大鬱病性障害（ＭＤＤ）（一般に、臨床的鬱病、単極性鬱病、又は大鬱病と呼ばれている）である抑鬱気分；及び双極性障害（ＢＤ）（旧称、躁鬱病）として知られる、躁病と抑鬱とを周期的に繰り返す気分の基本グループに分けられる。気分変調性障害及び気分循環性障害など、症状の重症度が低いことを特徴とする抑鬱障害の亜型又は精神医学的症候群が幾つかある。気分障害はまた、物質誘発性であってもよく、又は医学的状態に応答して起こり得る。
「アミノ酸」は、本明細書で使用されるとき、広義には、天然に存在するアミノ酸及び合成アミノ酸、並びに天然に存在するアミノ酸と同様に機能するアミノ酸類似体及びアミノ酸模倣物を指す。天然に存在するアミノ酸は、遺伝コードによりコードされるもの、並びに後に修飾されるアミノ酸（例えば、ヒドロキシプロリン、γ－カルボキシグルタメート、及びＯ－ホスホセリン）である。アミノ酸類似体は、天然に存在するアミノ酸と同じ基本化学構造（即ち、水素に結合した炭素、カルボキシル基、アミノ基）、及びＲ基を有する化合物（例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウム）を指す。類似体は、修飾されたＲ基（例えば、ノルロイシン）又は修飾されたペプチド骨格を有し得るが、天然に存在するアミノ酸と同じ基本化学構造を保持している。アミノ酸模倣物とは、アミノ酸の一般的な化学構造と異なる構造を有するが、天然に存在するアミノ酸と同様に機能する化学的化合物を指す。
用語「抗体」は、本明細書で使用されるとき、抗原と特異的に結合する免疫グロブリン分子を指す。一態様において、抗原はｍＧｌｕＲ５である。抗体は、天然の供給源又は組換え供給源に由来するインタクトな免疫グロブリンであってもよく、インタクトな免疫グロブリンの免疫反応性部分であってもよい。この用語は、最も広義に使用され、インタクトな抗体を含めたポリクローナル及びモノクローナル抗体、並びに、断片抗原結合（Ｆａｂ）、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、Ｆｖ断片、組換えＩｇＧ（ｒＩｇＧ）断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含めた単鎖抗体断片、ダイアボディ、及びシングルドメイン抗体（例えば、ｓｄＡｂ、ｓｄＦｖ、ナノボディ）断片を含めた機能性（抗原結合）抗体断片が含まれる。この用語は、イントラボディ、ペプチボディ、キメラ抗体、完全ヒト抗体、ヒト化抗体、及びヘテロコンジュゲート抗体、多重特異性、例えば二重特異性抗体、ダイアボディ、トリアボディ、及びテトラボディ、タンデムジｓｃＦｖ、タンデムトリｓｃＦｖなど、遺伝子操作された及び／又は他の方法で修飾された形態の免疫グロブリンを包含する。特に指定されない限り、用語「抗体」は、その機能性抗体断片を包含するものと理解されなければならない。この用語はまた、ＩｇＧ及びそのサブクラス、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、及びＩｇＤを含め、任意のクラス又はサブクラスの抗体を含めた、インタクトな抗体又は完全長抗体も包含する。
用語「抗原結合断片」又は「抗体断片」は、インタクトな抗体の一部分を指し、インタクトな抗体の抗原決定可変領域を指す。抗体断片の例としては、限定はされないが、断片抗原結合（Ｆａｂ）断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、Ｆｖ断片、組換えＩｇＧ（ｒＩｇＧ）断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含めた単鎖抗体断片、シングルドメイン抗体（例えば、ｓｄＡｂ、ｓｄＦｖ、ナノボディ）断片、ダイアボディ、及び抗体断片で形成される多重特異性抗体が挙げられる。更に、Ｆｖ断片の２つのドメイン、ＶＬ及びＶＨは別個の遺伝子によってコードされるが、組換え方法を用いると、これらを合成リンカーによってつなぎ合わせることができ、ＶＬ及びＶＨ領域が対になって、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られる一価分子を形成する単一のタンパク質鎖として作製することが可能となる。例えば、Ｂｉｒｄ，ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３－４２６；Ｈｕｓｔｏｎ，ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７９－５８８３；及びＯｓｂｏｕｒｎ，ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１６：７７８を参照のこと。単鎖抗体はまた、抗体の「抗原結合部分」という用語の範囲内に包含されることも意図される。完全なＩｇＧ分子又は他のアイソタイプをコードする発現ベクターを作成するため、特定のｓｃＦｖの任意のＶＨ及びＶＬ配列をヒト免疫グロブリン定常領域ｃＤＮＡ又はゲノム配列に連結することができる。ＶＨ及びＶＬはまた、タンパク質化学又は組換えＤＮＡ技術のいずれかを用いた、免疫グロブリンのＦａｂ、Ｆｖ、又は他の断片の作成において使用されてもよい。ダイアボディなど、他の形態の単鎖抗体もまた包含される。ダイアボディは二価の二重特異性抗体であり、ここではＶＨ及びＶＬドメインが単一のポリペプチド鎖上に発現するが、同じ鎖上にあるこれらの２つのドメインが対合するには短か過ぎるリンカーが使用され、従って強制的にそれらのドメインが別の鎖の相補的ドメインと対合し、２つの抗原結合部位を作り出す。例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ，ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：６４４４－６４４８；Ｐｏｌｊａｋ，ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ２：１１２１－１１２３を参照のこと。なおも更に、抗体又はその抗原結合部分（抗原結合断片、抗体断片、抗体部分）は、抗体又は抗体部分が１つ以上の他のタンパク質又はペプチドと共有結合的又は非共有結合的に会合することによって形成される大型免疫接着分子の一部であってもよい。免疫接着分子の例としては、ストレプトアビジンコア領域を使用して四量体ｓｃＦｖ分子を作るもの（Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ，ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｈｕｍ．Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ６：９３－１０１）及びシステイン残基、マーカーペプチド及びＣ末端ポリヒスチジンタグを使用して二価及びビオチン化ｓｃＦｖ分子を作るものが挙げられる。Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖ，ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３１：１０４７－１０５８。Ｆａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片などの抗体部分は、全抗体のそれぞれパパイン又はペプシン消化など、従来技術を用いて全抗体から調製することができる。更に、抗体、抗体部分及び免疫接着分子は、本明細書に記載されるとおりの標準的な組換えＤＮＡ技法を用いて入手することができる。抗体は、ポリクローナル、モノクローナル、異種、同種異系、同系、又はその修飾形態、例えば、ヒト化、キメラ、二重特異性又は多重特異性抗体であってもよい。
「抗体重鎖」は、本明細書で使用されるとき、その天然に存在するコンホメーションをとるあらゆる抗体分子に存在する２種類のポリペプチド鎖のうち大きい方を指す。
「抗体軽鎖」は、本明細書で使用されるとき、その天然に存在するコンホメーションをとるあらゆる抗体分子に存在する２種類のポリペプチド鎖のうち小さい方を指す。カッパ及びラムダ軽鎖が２つの主要な抗体軽鎖アイソタイプを指す。
用語「抗原」又は「Ａｇ」は、免疫応答を引き起こす分子を指す。この免疫応答には、抗体産生、又は特異的免疫適格細胞の活性化のいずれか、又は両方が関わり得る。当業者は、任意の巨大分子が、事実上あらゆるタンパク質又はペプチドを含め、抗原となり得ることを理解するであろう。更に、抗原は組換えＤＮＡ又はゲノムＤＮＡに由来し得る。当業者は、従って免疫応答を生じさせるタンパク質をコードするヌクレオチド配列又は部分的ヌクレオチド配列を含む任意のＤＮＡが、この用語が本明細書において使用されるとおりの「抗原」をコードすることを理解するであろう。更に、当業者は、抗原が、ある遺伝子の完全長ヌクレオチド配列によってのみコードされる必要はないことを理解するであろう。本発明には、限定はされないが、２つ以上の遺伝子の部分的ヌクレオチド配列の使用が含まれること、及びそれらのヌクレオチド配列が所望の免疫応答を生じさせるポリペプチドをコードするように様々な組み合わせで配列されることは容易に明らかである。更に、当業者は、抗原が「遺伝子」によってコードされる必要は全くないことを理解するであろう。抗原は作成され、合成されてもよく、又は生体試料から得られてもよく、又はポリペプチド以外の巨大分子である可能性もあることは容易に明らかである。かかる生体試料には、限定はされないが、組織試料、腫瘍試料、細胞又は体液が他の生物学的成分と共に含まれ得る。一態様において、抗原はｍＧｌｕＲ５である。
用語「結合する」は、分子が互いにごく近接している安定した会合を生じさせる２つの分子間の引力相互作用を指す。分子結合の結果は、時に、成分を一体に保持している引力が概して非共有結合性であり、従って通常は共有結合よりもエネルギー的に弱い分子複合体の形成である。
本明細書における用語「中枢に投与される」又は「中枢投与」は、実体、典型的には抗体が、中枢神経系及び／又は血液脳関門内にあるｍＧｌｕＲ５に到達する条件下で投与されることを意味する。中枢投与を実現する一つの手段は、髄腔内投与である。
「キメラ抗体」は、マウス又はウサギなどの１つの種の抗原結合領域（重鎖及び軽鎖の可変ドメイン、ＶＨ及びＶＬ）を別の種、例えばヒトの定常ドメイン（エフェクター領域）と融合することによって作られる抗体である。キメラ抗体は、元の抗体の抗原特異性及び親和性を保持しているが、同じ免疫原性はない。キメラ抗体は、組換え手段により、１つの種の抗体産生細胞から入手されたＶＬ及びＶＨ領域を別の種の定常軽鎖及び重鎖領域と組み合わせることによって作られてもよい。典型的には、キメラ抗体は、ヒトドメインが優勢な抗体を作製するため、げっ歯類又はウサギ可変領域及びヒト定常領域を利用する。かかるキメラ抗体の作製は当該技術分野において周知であり、標準的な手段（例えば、米国特許第５，６２４，６５９号明細書（全体として参照により本明細書に援用される）に記載されるとおり）によって実現し得る。更に、本発明のキメラ抗体のヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４定常領域から選択されてもよいことが企図される。
「慢性痛」は、長い持続時間、例えば、少なくとも６ヵ月、９ヵ月、１年又はそれより長くにわたって起こる常時の疼痛を指す。慢性痛は重篤であることもあり、生存可能性の低下及び抑鬱に関連し得る。慢性痛に関連する病態としては、例として、癌、心疾患、呼吸器疾患、脊髄及び筋障害、頭痛病態、骨障害、多発性硬化症、関節炎病態、神経障害、神経損傷（ニューロパチー）、線維筋痛症、ライム病、ＩＢＤ、ＩＢＳ、呑酸又は潰瘍、子宮内膜症などが挙げられる。
用語「競合する」は、本明細書で抗体に関連して使用されるとき、第１の抗体、又はその抗原結合断片（又は一部分）が、第２の抗体、又はその抗原結合部分の結合と十分に類似した形でエピトープに結合することを意味し、そのため第１の抗体がそのコグネイトエピトープと結合する結果が、第２の抗体の存在下では、第２の抗体の非存在下における第１の抗体の結合と比較して検出可能な程度に減少することになる。代わりに、第１の抗体の存在下で第２の抗体のそのエピトープへの結合が検出可能な程度に低下する場合もまた、必ずしもというわけではないが、あり得る。即ち、第１の抗体が第２の抗体のそのエピトープへの結合を阻害するが、第２の抗体は第１の抗体のそのそれぞれのエピトープへの結合を阻害しないこともある。しかしながら、各抗体が他方の抗体とそのコグネイトエピトープ又はリガンドとの結合を検出可能な程度に阻害する場合、その阻害程度が同じであろうと、高かろうと、又は低かろうと、抗体は、そのそれぞれの１つ又は複数のエピトープの結合に関して互いに「交差競合する」と言われる。競合抗体及び交差競合抗体は両方とも、本発明に包含される。かかる競合又は交差競合が起こる機構（例えば、立体障害、コンホメーション変化、又は共通のエピトープ、若しくはその一部分への結合）に関わらず、当業者であれば、本明細書に提供される教示に基づき、かかる競合及び／又は交差競合抗体が包含され、及び本明細書に開示される方法に有用であり得ることを理解するであろう。一部の実施形態において、本発明の抗体は、ｍＧｌｕＲ５への結合に関してｍＧｌｕＲ５ Ａｂ１～Ａｂ２９と競合又は交差競合し得る。好ましい実施形態において、本発明の抗体は、ｍＧｌｕＲ５への結合に関して例示的抗体ＡｂＡと競合し得る。好ましい実施形態において、本発明の抗体は、ｍＧｌｕＲ５への結合に関して例示的抗体ＡｂＢと競合し得る。好ましい実施形態において、本発明の抗体は、ｍＧｌｕＲ５への結合に関して例示的抗体ＡｂＣと競合し得る。
「相補性決定領域」、「ＨＶＲ」、「超可変領域」、又は「ＣＤＲ」は、本明細書で使用されるとき、広義には、抗体の軽鎖又は重鎖の可変領域に見られる超可変領域又は相補性決定領域（ＣＤＲ）のうちの１つ以上、抗原特異性及び／又は結合親和性を付与する非隣接アミノ酸配列を指す。Ｋａｂａｔ，ｅｔ ａｌ．（１９８７）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．を参照のこと。これらの表現は、Ｋａｂａｔ，ｅｔ ａｌ．（１９８３）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓによって定義されるとおりの超可変領域又は抗体の三次元構造における超可変ループを含む。Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ（１９８７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７。各鎖のＣＤＲはフレームワーク領域によってごく近接して保たれ、他方の鎖のＣＤＲと共に、抗原結合部位の形成に寄与する。ＣＤＲの中には、抗体－抗原相互作用においてＣＤＲが用いる決定的に重要な接触残基に相当する選択性決定領域（ＳＤＲ）として記載されている選ばれたアミノ酸がある（Ｋａｓｈｍｉｒｉ Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：２５－３４（２００５））。一般に、各重鎖可変領域に３つのＣＤＲがあり（ＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３）、各軽鎖可変領域に３つのＣＤＲ（ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３）がある。
語句「ｍＧｌｕＲ５の発現に関連する疾患」には、例えば、片頭痛、疼痛、ＩＢＳ、ＧＥＲＤ、ＯＡＢ、自閉症スペクトラム障害、尿失禁、神経障害、情動障害、及び精神障害を含め、限定はされないが、ｍＧｌｕＲ５の発現に関連する疾患又はｍＧｌｕＲ５を発現する細胞に関連する病態が含まれる。
用語「ジスキネジア」は、チック又は舞踏病に似た運動及び随意運動の低下を含め、筋肉の不随意運動を特徴とする運動障害のカテゴリーを指す。ジスキネジアは、手の軽い振戦から上半身又は下肢の制御できない運動にまで及ぶあらゆるものであり得る。非協調もまた、特に呼吸筋で内部的に起こることがあり、これは認識されずにいることが多い。ジスキネジアは、パーキンソン病、失調、頸部ジストニア、舞踏病、ジストニア、機能運動障害、ハンチントン病、多系統萎縮症、ミオクローヌス、パーキンソン病、パーキンソニズム、進行性核上性麻痺、下肢静止不能症候群、遅発性ジスキネジア、トゥレット症候群、振戦、ウィルソン病などを含めた、幾つかの医学的障害の一症状である。
用語「ジストニア」は、人の筋肉が制御不能に収縮する運動障害を指す。この収縮が罹患身体部位に不随意のねじれを引き起こすため、反復運動又は姿勢異常が生じる。ジストニアは、１つの筋肉、筋群、又は全身に発症し得る。多くの場合にジストニアには特異的原因がない。後天性ジストニアは、脳外傷、脳卒中、腫瘍、酸素欠乏、感染症、薬物反応、又は鉛若しくは一酸化炭素などによる中毒の結果など、基底核の損傷によって引き起こされ得る。
用語「ＥＣ５０」は、本明細書で使用されるとき、試験化合物、例えば、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその抗原結合断片がアッセイでその最大反応又は効果の５０％を生じさせる用量を指す。
「有効量」又は「治療するのに有効な量」は、個体の疾患、病態、又は障害を予防又は治療するのに適した用量を指す。治療的又は予防的使用に有効な量は、例えば、治療下の疾患又は障害のステージ及び重症度、患者の年齢、体重、及び全般的健康状態、並びに処方医師の判断に依存することになる。用量のサイズはまた、選択された活性分、投与方法、投与のタイミング及び頻度、特定の活性分の投与に伴い起こり得る任意の有害副作用の有無、性質、及び程度、並びに所望の生理的効果によっても決まり得る。当業者によれば、様々な疾患又は障害に、複数回の投与が関わる長期治療が必要となる可能性があり、恐らく各々の又は様々な投与ラウンドで本発明の抗体が使用されることが理解されるであろう。
「エピトープ」又は「結合部位」は、抗原結合ペプチド（抗体など）が特異的に結合する抗原上にある範囲又は領域である。タンパク質エピトープは、結合に直接関与するアミノ酸残基（エピトープの免疫優性成分とも称される）、及び特異的抗原結合ペプチドによって有効に遮断されるアミノ酸残基など（換言すれば、このアミノ酸残基は、特異的抗原結合ペプチドの「フットプリント」の範囲内にある）、結合に直接関与しない他のアミノ酸残基を含み得る。本明細書では、用語のエピトープには、抗ｍＧｌｕＲ５抗体に特異的に結合するｍＧｌｕＲ５の任意の特定の領域における両方のタイプのアミノ酸結合部位が含まれる。ｍＧｌｕＲ５は、幾つもの異なるエピトープを含んでもよく、それらには、限定なしに、（１）線状ペプチド抗原決定基、（２）成熟ｍＧｌｕＲ５コンホメーションにおいて互いに近くに位置する１つ以上の非連続アミノ酸からなる立体抗原決定基；及び（３）全部であれ一部であれ、炭水化物基などのｍＧｌｕＲ５タンパク質に共有結合的に結び付いた分子構造からなる翻訳後抗原決定基が含まれ得る。詳細には、用語「エピトープ」には、タンパク質又はペプチド、例えばｍＧｌｕＲ５中にある、アラニンスキャニング法などの公知の一般に認められている方法によって決定したとき抗体がかかるタンパク質又はペプチドに結合することに関与する特異的残基が含まれる。かかる方法は、本明細書に例示される。
「発現ベクター」は、本明細書では、標的宿主細胞、例えば、細菌、昆虫、酵母、植物、両生類、爬虫類、鳥類、又は哺乳類細胞、最も典型的には酵母又は哺乳類細胞、例えば、ＣＨＯ細胞の中での外来性タンパク質の発現の操作を促進するエレメントを含有するＤＮＡベクターを指す。好都合には、配列の操作及び形質転換用のＤＮＡの作製は、初めに細菌宿主、例えば大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）で実施され、通常はベクターが、細菌性複製起点及び適切な細菌選択マーカーを含め、かかる操作を促進する配列を含んでいることになる。選択マーカーは、選択的培養培地で成長する形質転換宿主細胞の生存又は成長に必要なタンパク質をコードする。選択遺伝子を含有するベクターで形質転換されていない宿主細胞は、その培養培地で生存できないことになる。典型的な選択遺伝子は、（ａ）抗生物質又は他の毒素に対する耐性を付与し、（ｂ）栄養要求性欠乏を補完し、又は（ｃ）複合培地から利用可能でない決定的栄養素を供給するタンパク質をコードする。酵母の形質転換に関する例示的ベクター及び方法については、例えば、Ｂｕｒｋｅ，Ｄ．，Ｄａｗｓｏｎ，Ｄ．，＆ Ｓｔｅａｒｎｓ，Ｔ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｙｅａｓｔ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ：ａ Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｃｏｕｒｓｅ Ｍａｎｕａｌ，Ｐｌａｉｎｖｉｅｗ，ＮＹ：Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ（２０００）に記載されている。本発明の方法に用いられる発現ベクターには、形質転換宿主株を同定するための選択可能な栄養要求又は薬物マーカーを含む、酵母又は哺乳類特異的配列が含まれ得る。薬物マーカーは更に、酵母宿主細胞におけるベクターのコピー数の増幅に用いられ得る。
用語「発現する」及び「産生する」は、本明細書では同義語として使用され、遺伝子産物の生合成を指す。これらの用語は、遺伝子からＲＮＡへの転写を包含する。これらの用語はまた、ＲＮＡから１つ以上のポリペプチドへの翻訳も包含し、更に、あらゆる天然に存在する転写後及び翻訳後修飾を包含する。抗体又は抗原結合断片の発現／産生は、細胞の細胞質内での発現／産生、及び／又は細胞培養物の成長培地など、細胞外環境の中への発現／産生であり得る。
用語「Ｆｃ受容体」及び「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を表す。好ましいＦｃＲは、天然配列ヒトＦｃＲである。更に、好ましいＦｃＲはＩｇＧ抗体に結合するもの（γ受容体）であり、これには、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体が、これらの受容体の対立遺伝子変異体及び選択的スプライシングを受けた形態を含め、含まれる。ＦｃγＲＩＩ受容体には、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）及びＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）が含まれ、これらはアミノ酸配列が類似していて、主な違いはその細胞質ドメインである。ＦｃＲについては、Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，９：４５７－９２（１９９１）；Ｃａｐｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ，４：２５－３４（１９９４）；及びｄｅ Ｈａａｓ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．，１２６：３３０－４１（１９９５）にレビューされている。「ＦｃＲ」にはまた、新生児受容体ＦｃＲも含まれ、これは、母親由来ＩｇＧの胎児への移行に関与するもので（Ｇｕｙｅｒ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１１７：５８７（１９７６）；及びＫｉｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２４：２４９（１９９４））、主に、抗体の循環半減期を調節及び／又は延長する働きをする。開示される抗ｍＧｌｕＲ５抗体が、発現系及び／又は配列の結果として非グリコシル化されている限りにおいて、主題の抗体は、ＦｃＲｎ受容体に結合するが、Ｆｃγ受容体には結合しない（又は最小限しか結合しない）ことが予想される。
用語「Ｆｃ領域」は、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用される。「Ｆｃ領域」は、天然配列Ｆｃ領域であっても、又は変異体Ｆｃ領域であってもよい。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は様々であり得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、通常、位置Ｃｙｓ２２６のアミノ酸残基から、又はＰｒｏ２３０から、そのカルボキシル末端までの一続きと定義される。Ｆｃ領域の残基の番号付けは、ＫａｂａｔにあるとおりのＥＵインデックスのものである。Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ：Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ（１９９１）。免疫グロブリンのＦｃ領域は、概して２つの定常ドメインＣＨ２及びＣＨ３を含む。
表現「フレームワーク領域」又は「ＦＲ」は、抗体の軽鎖及び重鎖の可変領域内にあるフレームワーク領域のうちの１つ以上を指す（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，４ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ：Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ（１９８７）を参照のこと）。こうした表現には、抗体の軽鎖及び重鎖の可変領域内でＣＤＲ間に置かれたアミノ酸配列領域が含まれる。一般には、各完全長重鎖可変領域に４つのＦＲ（ＦＲ－Ｈ１、ＦＲ－Ｈ２、ＦＲ－Ｈ３、及びＦＲ－Ｈ４）があり、及び各完全長軽鎖可変領域に４つのＦＲ（ＦＲ－Ｌ１、ＦＲ－Ｌ２、ＦＲ－Ｌ３、及びＦＲ－Ｌ４）がある。
「機能性Ｆｃ領域」は、天然配列Ｆｃ領域の少なくとも１つのエフェクター機能を持つ。例示的「エフェクター機能」には、Ｃ１ｑ結合；補体依存性細胞傷害（「ＣＤＣ」）；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（「ＡＤＣＣ」）；食作用；細胞表面受容体（例えばＢ細胞受容体（「ＢＣＲ」））の下方調節などが含まれる。かかるエフェクター機能は、概して、Ｆｃ領域が結合ドメイン（例えば抗体可変ドメイン）と組み合わされる必要があり、かかる抗体エフェクター機能を判定するための当該技術分野において公知の様々なアッセイを用いて評価することができる。「天然配列Ｆｃ領域」は、天然に見られるＦｃ領域のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。「変異体Ｆｃ領域」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾により天然配列Ｆｃ領域と異なるアミノ酸配列を含むが、天然配列Ｆｃ領域の少なくとも１つのエフェクター機能は保持している。好ましくは、変異体Ｆｃ領域は、天然配列Ｆｃ領域又は親ポリペプチドのＦｃ領域と比較して、天然配列Ｆｃ領域又は親ポリペプチドのＦｃ領域に少なくとも１つのアミノ酸置換、例えば約１～約１０アミノ酸置換、好ましくは約１～約５アミノ酸置換を有する。本明細書における変異体Ｆｃ領域は、好ましくは天然配列Ｆｃ領域及び／又は親ポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約８０％の配列同一性、最も好ましくはそれと少なくとも約９０％の配列同一性、より好ましくはそれと少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、又は少なくとも約９９％の配列同一性を有することになる。
「宿主細胞」は、本明細書で使用されるとき、広義には、本発明の組換え発現ベクターなど、本発明の核酸分子が導入されている細胞を指す。宿主細胞は、原核細胞（例えば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ））、又は真核細胞、例えば、酵母、昆虫（例えば、ＳＦ９）、両生類、若しくはＣＨＯ、ＨｅＬａ、ＨＥＫ－２９３などの哺乳類細胞など、例えば、培養細胞、外植片、及びインビボ細胞であってもよい。用語「宿主細胞」及び「組換え宿主細胞」は、本明細書では同義的に使用される。かかる用語は、特定の対象細胞を指すのみならず、かかる細胞の子孫又は潜在的な子孫を指すことが理解されなければならない。突然変異又は環境の影響のいずれかに起因して、後続世代で特定の修飾が起こり得るため、子孫は、実際には親細胞と同一でないこともあるが、それでもなお、本明細書で使用されるとおりのこの用語の範囲内に含まれる。
本明細書で使用されるとき、「ヒト抗体」は、ヒトによって産生される抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体、及び／又は当業者に公知の又は本明細書に開示されるヒト抗体の作成技法のいずれかを用いて作成された抗体を意味する。ヒト抗体のこの定義には、少なくとも１つのヒト重鎖ポリペプチド又は少なくとも１つのヒト軽鎖ポリペプチドを含む抗体が含まれる。一つのかかる例は、マウス軽鎖とヒト重鎖ポリペプチドとを含む抗体である。ヒト抗体は、当該技術分野において公知の様々な技法を用いて作製することができる。一実施形態において、ヒト抗体はファージライブラリから選択され、ここでこのファージライブラリはヒト抗体を発現する（Ｖａｕｇｈａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１４：３０９－３１４，１９９６；Ｓｈｅｅｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（ＵＳＡ）９５：６１５７－６１６２，１９９８；Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１，１９９１；及びＭａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１，１９９１）。ヒト抗体はまた、内因性遺伝子座の代わりにヒト免疫グロブリン遺伝子座がトランスジェニックに導入されている動物、例えば、内因性免疫グロブリン遺伝子が部分的に又は完全に不活性化されているマウスの免疫化によって作成することもできる。この手法については、米国特許第５，５４５，８０７号明細書；同第５，５４５，８０６号明細書；同第５，５６９，８２５号明細書；同第５，６２５，１２６号明細書；同第５，６３３，４２５号明細書；及び同第５，６６１，０１６号明細書に記載されている。或いは、ヒト抗体は、標的抗原に対する抗体を産生するヒトＢリンパ球（かかるＢリンパ球は、個体から、又はｃＤＮＡの単一細胞クローニングから回収されてもよく、又はインビトロで免疫化されたものであってもよい）を不死化することにより調製されてもよい。例えば、Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐ．７７，１９８５；Ｂｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７（１）：８６－９５，１９９１；及び米国特許第５，７５０，３７３号明細書を参照のこと。
「ヒトモノクローナル抗体」は、単一の結合特異性を示す抗体であって、フレームワーク領域及びＣＤＲ領域の両方がヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する抗体を指す。一実施形態において、ヒトモノクローナル抗体は、ヒト重鎖トランス遺伝子及び軽鎖トランス遺伝子を含むゲノムを有するトランスジェニック非ヒト動物、例えばトランスジェニックマウスから得られたＢ細胞を不死化細胞と融合したものを含むハイブリドーマによって作製される。これには、完全ヒトモノクローナル抗体並びにそのコンジュゲート及び変異体が含まれ、例えばこれは、治療用又は診断用薬剤など、エフェクター薬剤に結合される。
「ヒト化抗体」は、本明細書で使用されるとき、広義には、ヒト細胞によって作られるであろうものに非常に良く似た抗体となるように改変されている可変及び定常領域を有する非ヒト細胞によって作られる抗体を含む。例えば、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に見られるアミノ酸を取り込むように非ヒト抗体アミノ酸配列を改変することによる。本発明のヒト化抗体は、例えばＣＤＲに、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、インビトロでランダム又は部位特異的突然変異誘発によるか、又はインビボで体細胞突然変異によって導入される突然変異）を含み得る。用語「ヒト化抗体」にはまた、本明細書で使用されるとき、マウスなど、別の哺乳類種の生殖細胞系列に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列にグラフトされた抗体も含まれる。
用語「ＩＣ５０」は、本明細書で使用されるとき、試験化合物、例えば、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその抗原結合断片が生化学アッセイで５０％の阻害を生じさせる用量を指す。
用語「炎症痛」は、炎症反応又は免疫応答の間に起こる侵害刺激の知覚及びそれに対する情動反応から生じる疼痛を指す。炎症痛に関連し得る非限定的な病態としては、例として、癌、心疾患、糖尿病、アルツハイマー病、関節炎病態、例えば、関節リウマチ、乾癬性関節炎及び痛風関節炎など、関節及び筋骨格系の病態、例えば、骨関節炎、線維筋痛症、腰筋痛、及び頸部筋痛など、喘息、慢性消化性潰瘍、結核、歯周炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、副鼻腔炎、活動性肝炎、セリアック病、糸球体腎炎、肝炎、炎症性腸疾患、再灌流傷害、移植片拒絶反応、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、多発性硬化症（ＭＳ）、１型真性糖尿病、ギラン・バレー症候群、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、乾癬、グレーブス病、橋本甲状腺炎、重症筋無力症、脈管炎などを含めた、様々な炎症性及び自己免疫性病態が挙げられる。
用語「阻害薬」は、本明細書で使用されるとき、標的に結合して、それを生物学的に不活性化するか、又は低活性化する化合物を指す。詳細な実施形態において、この化合物は、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又はその抗原結合断片である。一部の実施形態において、この化合物の阻害効果は、ｍＧｌｕＲ５媒介性ｐＥＲＫ産生の阻害によって測定される。
「単離」生物学的成分（単離抗体又は細胞又はベクター又はタンパク質又は核酸など）は、実質的に分離又は精製されていて、天然でその成分が存在する生物の細胞内にあるその環境又は他の生物学的成分、例えば、他の染色体及び染色体外ＤＮＡ及びＲＮＡ、タンパク質、及び細胞小器官から離されている成分を指す。「単離」されている核酸及びタンパク質には、標準的な精製方法によって精製された核酸及びタンパク質が含まれる。この用語はまた、組換え技術並びに化学合成によって調製された核酸及びタンパク質も包含する。単離核酸又はタンパク質は、実質的に精製された形態で存在してもよく、又は例えば宿主細胞など、非天然環境に存在してもよい。
「単離抗体」は、本明細書で使用されるとき、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を指すことが意図される（例えば、ｍＧｌｕＲ５に特異的に結合する単離抗体は、ｍＧｌｕＲ５以外の抗原に特異的に結合する抗体を実質的に含まない）。更に、単離抗体は、他の細胞材料及び／又は化学物質を実質的に含まないものであり得る。
「標識」又は「検出可能な部分」は、本明細書で使用されるとき、広義には、分光学的、光化学的、生化学的、免疫化学的、化学的、又は他の物理的手段によって検出可能な組成物を指す。
「代謝型グルタミン酸受容体１」又は「ｍＧｌｕＲ１」は、Ｇタンパク質共役受容体、即ちＧＰＣＲのグループＣファミリーのメンバーである。あらゆるグルタミン酸受容体と同様に、ｍＧｌｕＲ１は、興奮性神経伝達物質として働くアミノ酸であるグルタミン酸と結合する。ｍＧｌｕＲ１はヒト遺伝子ＧＲＭ１によってコードされる。これは、ＧＰＲＣ１Ａ、ＭＧＬＵ１、ＭＧＬＵＲ１、ＰＰＰ１Ｒ８５、ＳＣＡＲ１３、代謝型グルタミン酸受容体１、及びＳＣＡ４４としても知られる。ヒトｍＧｌｕＲ１についての情報は、ＮＣＢＩ受託番号ＮＰ＿００１２６４９９３．１の参考文献の頁を参照し得る（配列番号５）。
「代謝型グルタミン酸受容体５」又は「ｍＧｌｕＲ５」は、Ｇタンパク質共役受容体、即ちＧＰＣＲのグループＣファミリーのメンバーである。あらゆるグルタミン酸受容体と同様に、ｍＧｌｕＲ５は、興奮性神経伝達物質として働くアミノ酸であるグルタミン酸と結合する。ｍＧｌｕＲ５は、中枢及び末梢神経系で種々の機能を果たし、例えば、学習、記憶、不安、及び疼痛の知覚に関係があるとされている。これは、海馬、小脳、及び大脳皮質のシナプスにおけるシナプス前及びシナプス後ニューロン、並びに脳の他の部分及び末梢組織に見られる。これはホスホリパーゼＣを活性化させることが示されている。他の代謝型受容体と同様に、ｍＧｌｕＲ５は、細胞膜にまたがる７回膜貫通ドメインを有する。イオンチャネル型受容体と異なり、代謝型グルタミン酸受容体はイオンチャネルではない。代わりに、それは生化学的カスケードを活性化するため、例えばイオンチャネルのような、他のタンパク質の修飾につながる。これが、例えば神経伝達のシナプス前阻害によるシナプスの興奮性の変化、又はシナプス後応答の調節及び更には誘導につながり得る。ｍＧｌｕＲ５は、ＧＲＭ５、ＧＰＲＣ１Ｅ、ＭＧＬＵＲ５、ＰＰＰ１Ｒ８６、ｍＧｌｕ５、及び代謝型グルタミン酸受容体５としても知られる。ｍＧｌｕＲ５には複数のアイソフォームがあり、アイソフォーム２又は５ｂが標準的なものである。ｍＧｌｕＲ５ａ及びｍＧｌｕＲ５ｂは、両方ともホスホリパーゼＣを活性化させる。特に指定されない限り、「代謝型グルタミン酸受容体５」又は「ｍＧｌｕＲ５」は、ｍＧｌｕＲ５の公知のアイソフォームのいずれかを指し得る。ｍＧｌｕＲ５配列は、以下のデータベースの参考文献頁を参照し得る：ヒトｍＧｌｕＲ５、ＵｎｉＰｒｏｔ受託番号Ｐ４１５９４；ヒトｍＧｌｕＲ５、ＮＣＢＩ受託番号ＮＰ＿００１１３７３０３．１及びＮＰ＿０００８３３．１（配列番号１及び２）；ラットｍＧｌｕＲ５、ＮＣＢＩ受託番号ＮＰ＿０５８７０８．１（配列番号３）；及びカニクイザルｍＧｌｕＲ５、ＮＣＢＩ受託番号ＸＰ＿００５５７９３６６．１（配列番号４）。
「多重特異性抗体」又は「多重特異性抗原結合タンパク質」は、２つの以上の抗原結合領域を有するポリペプチド又は抗体を指す。これには二重特異性抗体が含まれる。これらの抗原結合領域は、異なる抗原に結合してもよく、又は同じ抗原の異なるエピトープに結合してもよい。
「神経変性疾患」は、ニューロン死を含め、ニューロン構造又は機能の進行性の喪失が関わる疾患である。多くの神経変性疾患は－筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、アルツハイマー病、及びハンチントン病を含め－、神経変性過程の結果として起こる。かかる疾患は不治で、進行性の変性及び／又はニューロン細胞死が生じ、多くの場合に異常なタンパク質集合体並びに誘導性の細胞死を特徴とする。神経変性は、分子から全身に及ぶ範囲の多くの異なる神経回路レベルに見られ得る。本発明の一態様は、神経変性疾患に関連する症状を治療、予防、又は軽減する方法を含み、ここでこの方法は、抗ヒトｍＧｌｕＲ５抗体又は抗体断片の投与を含む。詳細な態様において、抗体は、Ａｂ１～Ａｂ２９から選択される。好ましい態様において、抗体は例示的ＡｂＡである。別の好ましい実施形態において、抗体は例示的ＡｂＢである。更に好ましい実施形態において、抗体は例示的ＡｂＣである。
「神経障害」は、神経系の任意の障害である。脳、脊髄又は他の神経の構造的、生化学的又は電気的異常が原因で、各種の症状が生じ得る。神経学的問題の特異的原因は様々であるが、遺伝的障害、先天性異常又は障害、感染症、栄養失調を含めた生活様式又は環境衛生上の問題、及び脳損傷、脊髄損傷又は神経損傷を挙げることができる。この問題は、神経系と相互作用する別の身体系から始まり得る。これらの障害は、中枢神経系障害と末梢神経系障害とのカテゴリーに分けることができる。一態様において、本発明は、抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片の投与を通じて神経障害を治療するための方法を含む。詳細な態様において、抗体は、Ａｂ１～Ａｂ２９から選択される。好ましい態様において、抗体は例示的ＡｂＡである。別の好ましい実施形態において、抗体は例示的ＡｂＢである。更に好ましい実施形態において、抗体は例示的ＡｂＣである。
「神経因性疼痛」は、概して、神経損傷又は体性感覚神経系に発症する疾患によって引き起こされる疼痛を指す。神経因性疼痛は、ジセステジアと呼ばれる知覚異常又は通常は無痛の刺激による疼痛（アロディニア）に関連し得る。これは持続性成分及び／又は偶発性（発作性）成分を有し得る。後者は刺痛又は電気ショックに似ている。共通の質としては、灼熱感又は冷感、「チクチクする（ｐｉｎｓ ａｎｄ ｎｅｅｄｌｅｓ）」感じ、しびれ感及びそう痒感が挙げられる。神経因性疼痛は、種々の疾患及び病態の症状又は合併症であり得る。神経因性疼痛に関連し得る病態、外傷及び治療の非限定的な例としては、多発性硬化症、多発性骨髄腫、及び他の種類の癌、糖尿病、長期にわたる過度のアルコール摂取、三叉神経痛、化学療法及び放射線照射などの癌治療、組織傷害、筋傷害、又は関節傷害、背中、脚、及び股関節の問題、事故又は脊椎に発症する傷害、椎間板ヘルニア及び脊髄圧迫、帯状疱疹、梅毒感染症、ＨＩＶ、四肢欠損、幻肢症候群、ビタミンＢ欠乏症、手根管症候群、甲状腺に起こる問題、顔面神経に起こる問題、脊椎の関節炎などが挙げられる。
「精神神経」疾患及び／又は障害とは、公知の神経系傷害、発育不全、生化学的、解剖学的、又は電気的機能不全、及び／又は疾患病理に関連する精神医学的特徴を伴うもの、例えば、注意欠陥多動性障害、自閉症、トゥレット症候群及び一部の場合の強迫性障害並びに神経系の変性の神経行動学的関連症状、例えば、パーキンソン病、本態性振戦、ハンチントン病、アルツハイマー病、多発性硬化症及び器質性精神病などである。本発明の一態様は、精神神経疾患又は障害に関連する症状を治療、予防、又は軽減する方法を含み、ここでこの方法は、抗ヒトｍＧｌｕＲ５抗体又は抗体断片の投与を含む。詳細な態様において、抗体は、Ａｂ１～Ａｂ２９から選択される。好ましい態様において、抗体は例示的ＡｂＡである。別の好ましい実施形態において、抗体は例示的ＡｂＢである。更に好ましい実施形態において、抗体は例示的ＡｂＣである。
用語「核酸」及び「ポリヌクレオチド」は、線状又は分枝状、一本鎖又は二本鎖のＲＮＡ又はＤＮＡ、又はそのハイブリッドを指す。この用語はまた、ＲＮＡ／ＤＮＡハイブリッドも包含する。以下は、ポリヌクレオチドの非限定的な例である：遺伝子又は遺伝子断片、エクソン、イントロン、ｍＲＮＡ、ｔＲＮＡ、ｒＲＮＡ、リボザイム、ｃＤＮＡ、組換えポリヌクレオチド、分枝状ポリヌクレオチド、プラスミド、ベクター、任意の配列の単離ＤＮＡ、任意の配列の単離ＲＮＡ、核酸プローブ及びプライマー。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチド及びヌクレオチド類似体などの修飾ヌクレオチド、ウラシル、他の糖及び連結基、例えばフルオロリボース及びチオレート、及び分岐ヌクレオチドなどを含み得る。ヌクレオチドの配列は、重合後にコンジュゲーションによるなどして標識成分で更に修飾されてもよい。この定義に含まれる他の種類の修飾は、キャッピング、天然に存在するヌクレオチドのうちの１つ以上の類似体による置換、及びタンパク質、金属イオン、標識成分、他のポリヌクレオチド又は固体支持体にポリヌクレオチドを取り付ける手段の導入である。ポリヌクレオチドは化学合成によって入手してもよく、又は微生物に由来してもよい。用語「遺伝子」は、生物学的機能に関連するポリヌクレオチドの任意のセグメントを指して広義に使用される。従って、遺伝子は、ゲノム配列のようにイントロン及びエクソンを含むか、又はｃＤＮＡのように単にコード配列だけ及び／又はその発現に必要な調節配列を含む。例えば、遺伝子はまた、ｍＲＮＡ又は機能性ＲＮＡを発現するか、又は特異的タンパク質をコードする、且つ調節配列を含む核酸断片も指す。
「侵害受容性疼痛」は、概して、生体組織の傷害、例えば、打ち身、熱傷、切り傷、骨折、酷使又は関節損傷、スポーツ傷害、歯科手技、美容整形手技、捻挫などによって生じる疼痛を指す。
核酸は、別の核酸配列と機能的関係に置かれているとき、「作動可能に連結されている」。例えば、シグナル配列のＤＮＡは、それがポリペプチドの分泌に関与するプレタンパク質として発現する場合、ポリペプチドのＤＮＡに作動可能に連結されている；プロモーター又はエンハンサーは、それが配列の転写に影響を及ぼす場合、コード配列に作動可能に連結されている。概して、「作動可能に連結されている」は、連結されているＤＮＡ配列が隣接すること、及び分泌リーダーの場合には、隣接し且つリーディングフレーム内にあることを意味する。しかしながら、エンハンサーは隣接している必要はない。連結は、好都合な制限部位におけるライゲーションによるか、又はそれに代えて当業者が精通しているＰＣＲ／組換え方法（ＧＡＴＥＷＡＹ１１技術；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）によって達成される。かかる部位が存在しない場合、従来の実施技法に従い合成オリゴヌクレオチドアダプター又はリンカーが使用される。
用語「末梢に投与される」又は「末梢投与」は、本明細書では、実体、典型的には抗体が、末梢、即ち血液脳関門の外側にあるｍＧｌｕＲ５に到達する条件下で投与されることを意味する。抗体の末梢投与を実現する手段としては、例として、静脈内、皮下、筋肉内及び腹腔内投与が挙げられる。
用語「末梢及び中枢に投与される」又は「末梢及び中枢投与」は、本明細書では、実体、典型的には抗体が、末梢、即ち血液脳関門の外側にあるｍＧｌｕＲ５、及びＣＮＳ、即ちＢＢＢの内側にあるｍＧｌｕＲ５に到達する条件下で投与されることを意味する。これは、例えば、抗体を髄腔内投与し、更に抗体を、それが末梢に到達するように、例えば、静脈内、皮下、筋肉内又は腹腔内投与によって投与することにより実現し得る。
「薬学的に許容可能な担体」又は「賦形剤」は、製剤化時に及び／又は保管を可能にするため医薬組成物中に従来使用される化合物又は材料を指す。賦形剤は、製造を促進し、安定性を亢進させ、放出を制御し、製品特性を亢進させ、バイオアベイラビリティ、薬物吸収若しくは溶解度、又は他の薬物動態学的考慮事項を亢進させ、患者受容性を亢進させる等のために添加され得る。医薬賦形剤としては、例えば、担体、充填剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動促進剤、着色剤、保存剤、懸濁剤、分散剤、塗膜形成剤、緩衝剤、ｐＨ調整剤、保存剤等が挙げられる。適切な賦形剤の選択はまた、投与経路及び投薬形態、並びに活性成分及び他の要因にも依存し、当業者には容易に理解されるであろう。薬学的に許容可能な担体には、医薬品としての投与と適合性のあるあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗細菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤などが含まれることが意図される。薬学的に許容可能な担体には、この分野で一般的に使用される広範囲に及ぶ公知の希釈剤（即ち、溶媒）、充填剤、増量剤、結合剤、懸濁剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、賦形剤、湿潤剤などが含まれる。これらの担体は、医薬調合剤の形態に応じて単独で、又は組み合わせで使用されてもよく、投薬形態の生産時に薬物物質の好都合且つ正確な分注が可能となるように効力のある活性成分を含有する製剤を増量させることが可能な（従って、「増量剤」、「充填剤」、又は「希釈剤」と称されることが多い）、活性成分以外に医薬製剤に添加される任意の他の成分を更に包含し得る。
「ポリペプチド」、「ペプチド」及び「タンパク質」は、同義的に使用され、広義には、修飾（例えば、リン酸化又はグリコシル化）に関わらず、任意の長さのアミノ酸残基のポリマーを指す。これらの用語は、１つ以上のアミノ酸残基が、対応する天然に存在するアミノ酸の類似体又は模倣体であるアミノ酸ポリマー、並びに天然に存在するアミノ酸ポリマーに適用される。これらの用語は、１つ以上のアミノ酸残基が、対応する天然に存在するアミノ酸の人工の化学的模倣体であるアミノ酸ポリマー、並びに天然に存在するアミノ酸ポリマー及び天然に存在しないアミノ酸ポリマーに適用される。ポリペプチドは、例えば炭水化物残基を付加することにより、糖タンパク質が形成されるように修飾することができる。用語「ポリペプチド」、「ペプチド」及び「タンパク質」は、糖タンパク質、並びに非糖タンパク質を明示的に含む。
用語「プロモーター」は、本明細書で使用されるとき、ポリヌクレオチド配列の特異的転写を開始させるのに必要な、細胞の合成機構、又は導入された合成機構によって認識されるＤＮＡ配列として定義される。
「予防有効量」は、本明細書で使用されるとき、広義には、疾患の予防又は疾患の再発の予防のため患者に投与されるとき、かかる疾患又は再発の予防を生じさせるのに十分な化合物の量を指す。予防有効量は、徴候及び／又は症状の発生を予防するのに有効な量であり得る。「予防有効量」は、疾患及びその重症度並びに治療することになる患者の年齢、体重、病歴、病態に罹り易い素因、基礎病態に応じて異なり得る。
「精神病」又は「精神障害」としても知られる「精神障害」は、精神機能の根底にある心理的、生物学的、又は発達的過程の機能不全を反映する個体の認知、感情制御、又は行動の臨床的に有意な乱れを特徴とする症候群である。例えば、精神疾患の診断と分類の手引き（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ａｎｄ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｍｅｎｔａｌ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ）（アメリカ精神医学会（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ））及び国際疾病分類、精神及び行動障害（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ）（世界保健機関（Ｗｏｒｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ））を参照のこと。本発明の一態様は、精神医学的疾患又は障害に関連する症状を治療、予防、又は軽減する方法を含み、ここでこの方法は、抗ヒトｍＧｌｕＲ５抗体又は抗体断片の投与を含む。詳細な態様において、抗体は、Ａｂ１～Ａｂ２９から選択される。好ましい態様において、抗体は例示的ＡｂＡである。別の好ましい実施形態において、抗体は例示的ＡｂＢである。更に好ましい実施形態において、抗体は例示的ＡｂＣである。
「組換え」は、本明細書で使用されるとき、広義には、産物、例えば、細胞、又は核酸、タンパク質、又はベクターを指し、異種核酸若しくはタンパク質の導入又は天然の核酸若しくはタンパク質の改変によって細胞、核酸、タンパク質又はベクターが修飾されていること、又は細胞が、そのように修飾された細胞に由来することを示す。従って、例えば、組換え細胞は、天然（非組換え）形態の細胞の範囲内には見られない遺伝子を発現するか、又は本来は異常に発現する、低発現である、若しくは全く発現しない天然遺伝子を発現する。
用語「組換えヒト抗体」は、本明細書で使用されるとき、（ａ）ヒト免疫グロブリン遺伝子に関してトランスジェニック又はトランスクロモソミックな動物（例えば、マウス）又はそれから調製したハイブリドーマから単離した抗体（以下に更に記載する）、（ｂ）例えばトランスフェクトーマから、ヒト抗体を発現するように形質転換された宿主細胞から単離した抗体、（ｃ）組換えのコンビナトリアルヒト抗体ライブラリから単離した抗体、及び（ｄ）ヒト免疫グロブリン遺伝子配列による他のＤＮＡ配列へのスプライシングが関わる任意の他の手段によって調製し、発現させ、作成し又は単離した抗体など、組換え手段によって調製し、発現させ、作成し又は単離したあらゆるヒト抗体を含む。かかる組換えヒト抗体は、フレームワーク及びＣＤＲ領域がヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する。しかしながら、特定の実施形態では、かかる組換えヒト抗体がインビトロ突然変異誘発（又は、ヒトＩｇ配列に関してトランスジェニックな動物が使用されるとき、インビボ体細胞突然変異誘発）に供されてもよく、ひいては組換え抗体のＶＨ及びＶＬ領域のアミノ酸配列が、ヒト生殖細胞系列ＶＨ及びＶＬ配列に由来し、且つそれと関係があるが、インビボではヒト抗体生殖細胞系列レパートリーの範囲内に天然に存在しないものであり得る配列となる。
「選択可能マーカー」は、本明細書では、例えば形質転換イベントを通じて、その遺伝子の投与を受ける細胞に成長表現型（物理的成長特性）を付与する遺伝子又は遺伝子断片を指す。選択可能マーカーは、その選択可能マーカー遺伝子を受け取っていない細胞が成長できない条件下において細胞が選択的成長培地で生存し及び成長することを可能にする。選択可能マーカー遺伝子は、概して、抗生物質又は他の薬物、温度（２つの温度感受性（「ｔｓ」）突然変異体が交雑されるか、又はｔｓ突然変異体が形質転換されるとき）に対する耐性を細胞に付与する遺伝子などを含めた、ポジティブ選択可能マーカー遺伝子；その生合成遺伝子を有しない全ての細胞が必要とする特定の栄養素を含まない培地で成長する能力を細胞に付与する生合成遺伝子、又は野生型遺伝子を有しない細胞によっては成長できない能力を細胞に付与する突然変異誘発した生合成遺伝子などのネガティブ選択可能マーカー遺伝子を含め、幾つかの種類に分けられる。好適なマーカーとしては、限定はされないが、ＺＥＯ；Ｇ４１８；ＬＹＳ３；ＭＥＴ１；ＭＥＴ３ａ；ＡＤＥ１；ＡＤＥ３；ＵＲＡ３などが挙げられる。
「対象」又は「患者」又は「個体」は、本明細書における療法又は診断の文脈では、任意のヒト又は非ヒト動物を含む。用語「非ヒト動物」には、あらゆる脊椎動物、例えば、哺乳類及び非哺乳類、例えば、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウマ、雌ウシ、ニワトリ、両生類、爬虫類等、即ち、本発明のとおりに治療されるのに好適なあらゆるものが含まれ、限定はされないが、鳥類及び哺乳類対象が挙げられ、及び好ましくは哺乳類である。本発明のとおりに治療されることを必要としている任意の哺乳類対象が好適である。ヒト対象は、男女共に、及びいかなる発育段階にあっても（即ち、新生児、乳児、年少者、青年、及び成人）、本発明のとおりに治療し得る。本発明はまた、獣医学的目的で、並びに薬物スクリーニング及び薬剤開発目的で、動物対象、特に哺乳類対象、例えば、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウシ、ヤギ、ヒツジ、及びウマなどに対して実施されてもよい。「対象」は、「個体」及び「患者」と同義的に使用される。
抗体（例えば、第１の抗体）が「実質的に」又は「少なくとも部分的に」別の抗体（例えば、第２の抗体）と同じエピトープに結合するという語句は、第１の抗体に対するエピトープ結合部位が、第２の抗体のエピトープ結合部位を構成する抗原上にあるアミノ酸残基の少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、又はそれ以上を含むことを意味する。また、第１の抗体が第２の抗体と実質的に又は部分的に同じ又は重複するエピトープに結合するということは、第１及び第２の抗体が、上記に記載したとおり、抗原への結合に関して競合することを意味する。従って、モノクローナル抗体「と実質的に同じエピトープ又は決定基に結合する」という用語は、ある抗体がその抗体と「競合する」ことを意味する。目的の抗体「と同じ又は重複するエピトープ又は決定基に結合する」という語句は、前記目的の抗体が特異的に結合するｍＧｌｕＲ５上の少なくとも１つ（例えば、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ）又は全ての残基に関して、ある抗体が前記目的の抗体と「競合する」ことを意味する。本明細書に記載されるモノクローナル抗体と実質的又は本質的に同じエピトープに結合する１つ以上の抗体の同定は、アラニンスキャニングを用いて容易に決定することができる。加えて、抗体競合を評価し得る様々な免疫学的スクリーニングアッセイのいずれか１つ。幾つものかかるアッセイがルーチンで実施されており、当該技術分野において周知である（例えば、１９９７年８月２６日に発行された米国特許第５，６６０，８２７号明細書（これは参照により本明細書に具体的に援用される）を参照のこと）。本明細書に記載される抗体が結合するエピトープを実際に決定する際に、本明細書に記載されるモノクローナル抗体と同じ又は実質的に同じ又は重複するエピトープに結合する抗体を同定する必要は全くないことは理解されるであろう。
用語「合成抗体」とは、本明細書で使用されるとき、例えば、本明細書に記載されるとおりのバクテリオファージが発現する抗体など、組換えＤＮＡ技術を用いて生成される抗体を意味する。この用語は、抗体をコードするＤＮＡ分子であって、抗体タンパク質を発現するＤＮＡ分子、又は抗体を指定するアミノ酸配列の合成によって生成された抗体を意味すると解釈されなければならず、ここでＤＮＡ又はアミノ酸配列は、当該技術分野において利用可能且つ周知の合成ＤＮＡ又はアミノ酸配列技術を用いて入手されたものである。
用語「トランスフェクトされた」又は「形質転換された」又は「形質導入された」は、外因性核酸を宿主細胞に移入又は導入するプロセスを指す。「トランスフェクトされた」又は「形質転換された」又は「形質導入された」細胞は、外因性核酸によってトランスフェクト、形質転換又は形質導入されているものである。細胞は、初代対象細胞及びその子孫を含む。
「療法」、「治療的」、「治療する」、又は「治療」は、本明細書で使用されるとき、広義には、疾患を治療し、疾患又はその臨床症状の発症を止め、又は低減し、及び／又は疾患を緩和し、疾患又はその臨床症状の退縮を生じさせることを指す。療法は、疾患、徴候、及び／又は疾患の症状の予防、治療、回復、低減、軽減、及び／又は緩和の提供を包含する。療法は、進行中の疾患徴候及び／又は症状（例えば、炎症、疼痛）を有する患者における徴候及び／又は症状の軽減を包含する。療法はまた、「予防」も包含する。療法の目的上、用語「低減した」は、広義には、徴候及び／又は症状の臨床的に有意な低減を指す。療法は、徴候及び／又は症状（例えば、炎症、疼痛）の再燃又は再発を治療することを含む。療法は、限定はされないが、任意の時点での徴候及び／又は症状の出現を防止すること、並びに既存の徴候及び／又は症状を低減すること、及び既存の徴候及び／又は症状を消失させることを包含する。療法は、慢性疾患（「維持」）及び急性疾患を治療することを含む。例えば、治療は、徴候及び／又は症状（例えば、炎症、疼痛）の再燃又は再発を治療又は予防することを含む。
「可変領域」又は「ＶＲ」は、本明細書で使用されるとき、広義には、抗体中の軽鎖と重鎖との各対の範囲内にある、抗体による抗原への結合に直接関与するドメインを指す。各重鎖は一端に可変ドメイン（ＶＨ）を有し、その後に幾つもの定常ドメインが続く。各軽鎖は一端に可変ドメイン（ＶＬ）を有し、その他端に定常ドメインを有する；軽鎖の定常ドメインは重鎖の第１の定常ドメインと整列し、軽鎖可変ドメインは重鎖の可変ドメインと整列している。
「ベクター」は、核酸セグメントの複製又は発現を生じさせるため、そのセグメントを作動可能に挿入し得る、プラスミド、ファージ、コスミド、又はウイルスなどのレプリコンである。ベクターは、限定はされないが、調節配列（例えば、プロモーター、エンハンサー）、選択マーカー、及びポリアデニル化シグナルなど、１つ以上の追加の配列を含有し得る。多種多様な宿主細胞の形質転換用ベクターが当業者に周知である。それらとしては、限定はされないが、プラスミド、ファージミド、コスミド、バキュロウイルス、バクミド、細菌人工染色体（ＢＡＣ）、酵母人工染色体（ＹＡＣ）、並びに他の細菌、酵母及びウイルスベクターが挙げられる。本明細書に記載されるベクターは、宿主ゲノムに組み込まれてもよく、又は細胞若しくは核に独立して維持されてもよい。
使用の実施形態
本発明は更に、以下の実施形態１～２４に係る本発明に係る抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物に関する。
１．片頭痛、ＧＥＲＤ、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、過活動膀胱（ＯＡＢ）、尿失禁、自閉症スペクトラム障害、神経又は精神障害、行動及び依存障害、神経障害、又は疼痛の治療又は予防における使用のための、本発明に係る抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
２．片頭痛に関連する１つ以上の症状、任意選択で、血管運動症状（例えば、ホットフラッシュ、顔面紅潮、発汗、及び寝汗）、羞明、音声恐怖症、嗅覚過敏症、流涙／涙液分泌、回転性めまい、浮動性めまい、悪心、嘔吐、頭痛、及びアウラの治療又は予防における使用のための、又はかかる１つ以上の症状の頻度及び／又は重症度を低減する、実施形態１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
３．片頭痛が、偶発性片頭痛、慢性片頭痛又は群発性頭痛を含む群から選択される、実施形態１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
４．過去に片頭痛型頭痛に対する予防療法を受けたことがない患者の治療における使用のための、実施形態１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
５．非びらん性逆流症又はびらん性食道炎である胃食道逆流症の治療又は予防における使用のための、実施形態１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
６．下痢型ＩＢＳ、便秘型ＩＢＳ、又は交代性腸管運動型ＩＢＳの治療又は予防における使用のための、実施形態１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
７．尿意切迫感、尿意頻数、夜間多尿、又は切迫性尿失禁の治療又は予防における使用のための、実施形態１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
８．腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁、溢流性尿失禁、混合型尿失禁、器質性尿失禁、機能性尿失禁、夜間尿失禁、一過性尿失禁、くすくす笑い尿失禁、便尿失禁、排尿後尿滴下、及び性交時尿失禁の治療又は予防における使用のための、実施形態１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
９．社会的及び機能的コミュニケーション障害、不安、不注意、多動、感覚反応性の変化、自傷、攻撃性、認知機能障害、及び日常生活技能の低下の治療又は予防における使用のための、実施形態１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
１０．統合失調症、統合失調症様障害、統合失調感情障害、妄想性障害、短期精神病性障害、共有精神病性障害、一般身体疾患による精神病性障害、物質誘発性精神病性障害、特定不能の精神病性障害、認知症に関連する精神病、大鬱病性障害、気分変調性障害、月経前不快気分障害、特定不能の抑鬱障害、双極Ｉ型障害、双極ＩＩ型障害、気分循環性障害、特定不能の双極性障害、一般身体疾患による気分障害、物質誘発性気分障害、特定不能の気分障害、全般性不安障害、強迫性障害、パニック障害、急性ストレス障害、心的外傷後ストレス障害、精神遅滞、広汎性発達障害、注意欠陥障害、注意欠陥／多動性障害、破壊的行動障害、妄想型人格障害、分裂病型人格障害、統合失調型人格障害、チック障害、トゥレット症候群、物質依存症、物質乱用、物質離脱症状、抜毛癖、及び認知が損なわれている状態、アルツハイマー病、パーキンソン病、パーキンソン病患者におけるレボドパ誘発性ジスキネジア、ハンチントン病（Ｈｕｎｔｉｎｇｄｏｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、レビー小体認知症、ＨＩＶ疾患による認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病による認知症、健忘障害、軽度認知障害、加齢関連認知低下、食欲不振症及び過食症などの摂食障害、並びに肥満症の治療又は予防における使用のための、実施形態１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
１１．虚血、パーキンソン病、記憶障害、アルツハイマー病、認知症、及び振戦譫妄の治療又は予防における使用のための、実施形態１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
１２．神経因性疼痛、中枢性疼痛症候群、術後痛、骨及び関節痛、反復動作による疼痛、歯痛、癌性疼痛、筋筋膜痛、周術期痛、慢性痛、急性痛、月経困難症、アンギナに伴う疼痛、炎症痛、頭痛、片頭痛及び群発性頭痛、一次痛覚過敏、二次痛覚過敏、一次アロディニア、二次アロディニア、又は他の疼痛の治療又は予防における使用のための、実施形態１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
１３．片頭痛、ＧＥＲＤ、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、過活動膀胱（ＯＡＢ）、尿失禁、自閉症スペクトラム障害、神経又は精神障害、行動及び依存障害、神経障害、又は疼痛の治療又は予防用医薬品の製造のための、本発明に係る抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物の使用。
１４．治療又は予防が、片頭痛に関連する症状、任意選択で、血管運動症状（例えば、ホットフラッシュ、顔面紅潮、発汗、及び寝汗）、羞明、音声恐怖症、嗅覚過敏症、流涙／涙液分泌、回転性めまい、浮動性めまい、悪心、嘔吐、頭痛、及びアウラの治療又は予防であるか、又はかかる１つ以上の症状の頻度及び／又は重症度を低減する、実施形態１３に記載の使用。
１５．片頭痛が、偶発性片頭痛、慢性片頭痛又は群発性頭痛を含む群から選択される、実施形態１３に記載の使用。
１６．過去に片頭痛型頭痛に対する予防療法を受けたことがない患者の治療又は予防のための使用である、実施形態１３に記載の使用。
１７．治療又は予防が、非びらん性逆流症又はびらん性食道炎である胃食道逆流症の治療のための治療又は予防である、実施形態１３に記載の使用。
１８．治療又は予防が、下痢型ＩＢＳ、便秘型ＩＢＳ、又は交代性腸管運動型ＩＢＳの治療又は予防である、実施形態１３に記載の使用。
１９．治療又は予防が、尿意切迫感、尿意頻数、夜間多尿、又は切迫性尿失禁の治療又は予防である、実施形態１３に記載の使用。
２０．治療又は予防が、腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁、溢流性尿失禁、混合型尿失禁、器質性尿失禁、機能性尿失禁、夜間尿失禁、一過性尿失禁、くすくす笑い尿失禁、便尿失禁、排尿後尿滴下、及び性交時尿失禁の治療又は予防である、実施形態１３に記載の使用。
２１．治療又は予防が、社会的及び機能的コミュニケーション障害、不安、不注意、多動、感覚反応性の変化、自傷、攻撃性、認知機能障害、及び日常生活技能の低下の治療又は予防である、実施形態１３に記載の使用。
２２．治療又は予防が、統合失調症、統合失調症様障害、統合失調感情障害、妄想性障害、短期精神病性障害、共有精神病性障害、一般身体疾患による精神病性障害、物質誘発性精神病性障害、特定不能の精神病性障害、認知症に関連する精神病、大鬱病性障害、気分変調性障害、月経前不快気分障害、特定不能の抑鬱障害、双極Ｉ型障害、双極ＩＩ型障害、気分循環性障害、特定不能の双極性障害、一般身体疾患による気分障害、物質誘発性気分障害、特定不能の気分障害、全般性不安障害、強迫性障害、パニック障害、急性ストレス障害、心的外傷後ストレス障害、精神遅滞、広汎性発達障害、注意欠陥障害、注意欠陥／多動性障害、破壊的行動障害、妄想型人格障害、分裂病型人格障害、統合失調型人格障害、チック障害、トゥレット症候群、物質依存症、物質乱用、物質離脱症状、抜毛癖、及び認知が損なわれている状態、アルツハイマー病、パーキンソン病、パーキンソン病患者におけるレボドパ誘発性ジスキネジア、ハンチントン病（Ｈｕｎｔｉｎｇｄｏｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、レビー小体認知症、ＨＩＶ疾患による認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病による認知症、健忘障害、軽度認知障害、加齢関連認知低下、食欲不振症及び過食症などの摂食障害、並びに肥満症の治療又は予防である、実施形態１３に記載の使用。
２３．治療又は予防が、虚血、パーキンソン病、記憶障害、アルツハイマー病、認知症、及び振戦譫妄の治療又は予防である、実施形態１３に記載の使用。
２４．治療又は予防が、神経因性疼痛、中枢性疼痛症候群、術後痛、骨及び関節痛、反復動作による疼痛、歯痛、癌性疼痛、筋筋膜痛、周術期痛、慢性痛、急性痛、月経困難症、アンギナに伴う疼痛、炎症痛、頭痛、片頭痛及び群発性頭痛、一次痛覚過敏、二次痛覚過敏、一次アロディニア、二次アロディニア、又は他の疼痛の治療又は予防である、実施形態１３に記載の使用。
以上に本発明を説明したが、以下の例は、本発明及びその固有の利点を更に実証するために提供される。これらの例は、特許請求される本発明を限定するのでなく、例示するために提供される。
実施例１：抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体の作成、選択、及び発現
材料及び方法
抗ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの作成及び選択。細胞外Ｎ末端ドメインに由来するｍＧｌｕＲ５配列でニュージーランドホワイトウサギを免疫した。目的の抗体を発現する免疫化ウサギの脾臓Ｂ細胞を選別し、クローン的に拡大した。組み合わせＲＴ－ＰＣＲ法を用いてクローナルＢ細胞ウェルから抗体配列を回収した。ウサギ免疫グロブリン配列など、標的免疫グロブリン遺伝子（重鎖及び軽鎖）の保存された定常領域にアニールするように、制限酵素を含有するプライマーを設計し、二段階ネステッドＰＣＲ回収を用いて抗体配列を増幅した。各ウェルからのアンプリコンをシーケンシングし、分析した。得られた配列クラスターからの代表的な抗体を組換えタンパク質発現に関して選択する。ウサギ細胞から増幅した元の重鎖及び軽鎖可変領域を制限酵素消化及びライゲーションを用いて、及びギブソン法を用いてヒト重鎖及び軽鎖定常領域発現ベクターにクローニングする。Ｇｉｂｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，“Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ａｓｓｅｍｂｌｙ ｏｆ ＤＮＡ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｕｐ ｔｏ ｓｅｖｅｒａｌ ｈｕｎｄｒｅｄ ｋｉｌｏｂａｓｅｓ”，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｔｈｏｄｓ ２００９；６（５）：３４３－５を参照のこと。サブクローニングしたＤＮＡ断片を含有するベクターを増幅し、精製した。サブクローニングした重鎖及び軽鎖の配列を確認した後、発現させた。代表的な抗体との配列相同性に基づき、７つの更なる抗体を同定した。
発現。重鎖及び軽鎖プラスミドをコトランスフェクトして、試験用にウサギ／ヒトキメラ抗体を作成した。詳細には、重鎖及び軽鎖キメラプラスミドをＨＥＫ－２９３細胞に一過性にトランスフェクトした。トランスフェクションを５～７日間インキュベートさせておき、回収時、細胞を遠心によってペレット化した。上清をプロテインＡ樹脂で精製した。
結果
上記の選択方法により、ここでヒトｍＧｌｕＲ５に対する２９個の精製キメラ抗体が例示される。これらの抗体はＡｂ１～Ａｂ２９と命名され、可変ドメイン及び相補性決定領域（ＣＤＲ）配列は配列番号６～４６９に含まれる。
実施例２：抗ヒトｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂはインビトロでヒト、ラット、及びサルｍＧｌｕＲ５に結合するが、ヒトｍＧｌｕＲ１には結合しない
材料及び方法
ｍＧｌｕＲ５及びｍＧｌｕＲ１細胞外ドメインタンパク質の設計。合成ｇＢｌｏｃｋ ＤＮＡ（Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ ＤＮＡ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して、Ｃ末端ＦｌａｇタグＤＹＫＤＤＤＤＫと共にＮＣＢＩ受託番号ＮＭ＿０００８４２からのｍＧｌｕＲ５（配列番号１又は２）１の最初の５０５アミノ酸を含有するヒトｍＧｌｕＲ５細胞外ドメイン（ヒトｍＧｌｕＲ５－ＥＣＤ）を発現プラスミドを構築することにより作成した（１ｍＧｌｕＲ５ｂ及びｍＧｌｕＲ５ａアイソフォームについて、これらのアミノ酸は同一である）。グルタミン酸と複合体化したｍＧｌｕＲ５三次元構造（ＥＭＢＬ－ＥＢＩ構造番号３ＬＭＫ）を作るため発現させたｍＧｌｕＲ５－ＥＣＤと同様に、ｍＧｌｕＲ５－ＥＣＤ配列をアミノ酸位置２３８に突然変異Ｃ－＞Ｓが含まれるように修飾した。同様の方法で、ラットｍＧｌｕＲ５（ＮＣＢＩ受託番号ＮＭ＿０１７０１２；配列番号３）、カニクイザルｍＧｌｕＲ５（ＮＣＢＩ受託番号ＸＭ＿００５５７９３０９；配列番号４）、及びヒトｍＧｌｕＲ１（ＮＣＢＩ受託番号ＮＭ＿００１２７８０６４；配列番号５）のＥＣＤの発現コンストラクトを作成した。
ＥＣＤタンパク質の発現及び精製。ＨＥＫ－２９３細胞に発現コンストラクトをトランスフェクトし、５～７日後に上清を回収した。発現したｍＧｌｕＲ５－ＥＣＤタンパク質を抗Ｆｌａｇ樹脂を用いて精製した。
均一時間分解蛍光（ＨＴＲＦ）で測定したｍＧｌｕＲ５／ｍＧｌｕＲ１に対する抗体の結合。ＣｉｓＢｉｏからのＨＴＲＦ試薬を使用して結合アッセイを実施した。１０マイクロリットルの抗体希釈系列（最高最終濃度３０ｎＭ）をＨＴＲＦ緩衝液（５０ｍＭリン酸緩衝液ｐＨ７、０．８Ｍ ＫＦ（フッ化カリウム）、０．２％ＢＳＡ）中１０μｌのｍＧｌｕＲ－ＥＣＤ（１０ｎＭ最終濃度）とインキュベートした。各ウェルに２０マイクロリットルのユウロピウム標識抗ｈｕ－Ｆｃドナー（２ｎＭ最終濃度、ＣｉｓＢｉｏカタログ番号６１ＨＦＣＫＬＢ）及び２０μｌのＸＬ６６５標識抗Ｆｌａｇアクセプター（６０ｎＭ最終濃度、ＣｉｓＢｉｏカタログ番号６１ＦＧ２ＸＬＢ）を加え、室温で１時間インキュベートした。或いは、抗体希釈系列は１０μｌのビオチン化ｍＧｌｕＲ－ＥＣＤ（１０ｎＭ最終濃度）とインキュベートし、各ウェルに２０μｌのユウロピウム標識抗ｈｕ－Ｆｃドナー（２ｎＭ最終濃度）及び２０μｌのｄ２標識ストレプトアビジンアクセプター（６０ｎＭ最終濃度、ＣｉｓＢｉｏカタログ番号６１０ＳＡＤＬＢ）を加えた。３００μ秒の遅延として６２０及び６６５ｎｍで蛍光を測定した。結果は、６２０ｎｍに対する６６５ｎｍのシグナル比として表した。ヒトｍＧｌｕＲ５－ＥＣＤに対するＡｂ１～Ａｂ２３の結合、ラットｍＧｌｕＲ５－ＥＣＤに対するＡｂ１～Ａｂ２１の結合、並びにサルｍＧｌｕＲ５－ＥＣＤ及びヒトｍＧｌｕＲ１－ＥＣＤに対するＡｂ１、Ａｂ２及びＡｂ４～Ａｂ１２の結合について、ＥＣ５０値を計算した（表１）。
ＡｌｐｈａＬＩＳＡで測定したｍＧｌｕＲ５に対するｍＡｂ結合。結合アッセイは、Ｐｅｒｋｉｎ ＥｌｍｅｒのＡｌｐｈａＬＩＳＡ試薬も使用して実施した。２０マイクロリットルの抗体希釈系列（最高最終濃度１μｇ／ｍｌ）をＡｌｐｈａＬＩＳＡ刺激緩衝液（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒカタログ番号ＡＬ０００Ｆ）中２０μｌのビオチン化ヒトｍＧｌｕＲ５－ＥＣＤ（０．２μｇ／ｍｌ最終濃度）とインキュベートした。各ウェルに２０μｌの抗ヒトＩｇＧアクセプタービーズ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒカタログ番号ＡＬ１０３Ｍ）及び２０μｌのストレプトアビジンドナービーズ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒカタログ番号６７６０００２）を各１０μｇ／ｍｌの最終濃度で加えた。室温で９０分間インキュベートした後、蛍光シグナルを測定し、Ａｂ２４～Ａｂ２９について結合のＥＣ５０値を計算した（表１）。
結果
表１にまとめるとおり、抗ｍＧｌｕＲ５抗体Ａｂ１～Ａｂ２９は、各々がｍＧｌｕＲ５に強固且つ特異的に結合する。これらの抗体の各々は、ヒトｍＧｌｕＲ５に２ｎＭ未満のＥＣ５０で結合する。ヒトタンパク質との結合に加えて、抗体Ａｂ１～Ａｂ７、Ａｂ９～Ａｂ１９、及びＡｂ２１はまた、ラットｍＧｌｕＲ５との交差反応も示した。更に、Ａｂ１、Ａｂ２、及びＡｂ４～Ａｂ１２はカニクイザルｍＧｌｕＲ５と交差反応したが、これらの抗体のいずれもヒトｍＧｌｕＲ１には結合しなかった。これらの２９個の抗体の中から、以下に記載するとおりの更なる試験のために例示的抗体ＡｂＡ、ＡｂＢ、及びＡｂＣを選択した。
Figure 2022542863000007
実施例３：例示的抗ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの競合結合分析から３つの結合エピトープビンが明らかになる
材料及び方法
Ｏｃｔｅｔ９６ Ｒｅｄシステム競合結合分析。Ｐａｌｌ ＦｏｒｔｅＢｉｏのＯｃｔｅｔ９６ Ｒｅｄシステムを使用して、ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体がｍＧｌｕＲ５－ＥＣＤ上の異なる領域に結合したかどうかを決定する実験を実施した。ビオチン化ｍＧｌｕＲ５－ＥＣＤ（１μｇ／ｍｌ）をストレプトアビジンセンサー（Ｐａｌｌ ＦｏｒｔｅＢｉｏカタログ番号１８－５０１９）に結合させた。軽い洗浄ステップの後、固定化したｍＧｌｕＲ５－ＥＣＤに抗体（１０μｇ／ｍｌ）を加え、飽和に達して結合シグナルがプラトーになるまでそのままにしておいた。飽和は、洗浄後に同じ抗体を再び加え、それ以上シグナルが見られないことにより確認した。更なる洗浄ステップの後、二次抗体（１０μｇ／ｍｌ）を加えた。二次抗体からの結合シグナルにより、これらの２つの抗体が異なる領域を認識し、互いに独立して標的に結合できたことが示された。
結果
ＡｂＡ、ＡｂＢ、及びＡｂＣは、異なる結合エピトープを有する抗ｍＧｌｕＲ５抗体を代表するＡｂ１～Ａｂ２９から選択された３つの特定の例示的抗体である。これらの実験の結果によれば、例示的ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体ＡｂＡ、ＡｂＢ、及びＡｂＣはｍＧｌｕＲ５－ＥＣＤへの結合に関して互いに競合しなかったことから、３つの異なるビンに相当することが示された（図１）。これらの例示的抗体を以下の実施例で更に用いることにより、これら３つのビンの各々についての代表的な結果を示す。
実施例４：抗ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂは細胞表面上の完全長ヒトｍＧｌｕＲ５に結合する
材料及び方法
ｍＧｌｕＲ５トランスフェクト細胞株の作成。完全長（ＦＬ）ヒトｍＧｌｕＲ５用の発現ベクターをＧｅｎｅｃｏｐｏｅｉａ（カタログ番号ＥＸ－Ｚ５９０４－Ｍ０２）から入手した。これをＢＡ／Ｆ３細胞（ＤＳＭＺ番号ＡＣＣ－３００）にトランスフェクトし、安定クローンを選択した。抗ｍＧｌｕＲ５例示的抗体ＡｂＡを使用したフローサイトメトリーにより、ヒトｍＧｌｕＲ５表面発現を確認した。ＢＡ／Ｆ３－ｍＧｌｕＲ５細胞クローン１０Ｃ９が細胞表面上にｍＧｌｕＲ５を発現すると決定され、これを結合及びシグナル伝達アッセイに使用した。
フローサイトメトリーによる抗体結合。細胞表面上に発現した完全長ｍＧｌｕＲ５標的に対する抗体の結合を確認するため、ＢＡ／Ｆ３－ｍＧｌｕＲ５クローン１０Ｃ９細胞でＡｂ１～Ａｂ２９をフローサイトメトリーにより試験した。細胞（２×１０５）をＦＡＣＳ緩衝液（ＰＢＳ中２％ＦＢＳ）中１０μｇ／ｍｌ抗体と共に氷上で１時間インキュベートした。細胞をＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、次にＦＩＴＣタグ付加抗ｈｕ－Ｆｃ二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈカタログ番号７０９－０９６－０９８、ＦＡＣＳ緩衝液中１：１００希釈）と共に氷上で３０分間インキュベートした。細胞をＦＡＣＳ緩衝液で再び洗浄し、次にＢＤ Ａｃｃｕｒｉ（商標）Ｃ６フローサイトメーターで分析した。結果は、二次抗体単独のＭＦＩシグナルによって定義したバックグラウンドに対する平均蛍光強度（ＭＦＩ）シグナル倍数として表す。
フローサイトメトリー飽和結合アッセイで決定した抗体親和性。ＦＡＣＳ緩衝液（２％ウシ胎仔血清を含有するＰＢＳ）中のＢＡ／Ｆ３－ｍＧｌｕＲ５細胞クローン１０Ｃ９（１試料当たり２×１０５細胞）で抗体の力価を測定し、一定間隔で混合しながら氷上で４時間インキュベートした。試料をＦＡＣＳ緩衝液で２回洗浄し、次にＦＩＴＣ標識抗ｈｕＦｃ二次抗体（１：１００、Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈカタログ番号７０９－０９６－０９８）と氷上で１時間インキュベートした。細胞をＦＡＣＳ緩衝液で更に２回洗浄し、ＢＤ Ａｃｃｕｒｉ（商標）Ｃ６フローサイトメーターを使用してＭＦＩシグナルを決定した。
結果
フローサイトメトリーアッセイの結果を表２にまとめており、試験した抗体全てについて、バックグラウンドの１０～４２倍のシグナルであることが分かる。これらの結果は、抗ｍＧｌｕＲ５抗体Ａｂ１～Ａｂ２９の各々が細胞表面上の完全長ヒトｍＧｌｕＲ５に結合することを示している。
例示的抗体ＡｂＡ、ＡｂＢ、及びＡｂＣについて、結合親和性を決定した結果を図２に示す。これらの抗体について決定されたＥＣ５０値は、それぞれ、０．１４ｎＭ、１．６８ｎＭ、及び１．５４ｎＭであった。
Figure 2022542863000008
実施例５：抗ヒトｍＧｌｕＲ５抗体はインビトロで非競合阻害によってｍＧｌｕＲ５の阻害に成功する
材料及び方法
ｐ－ＥＲＫシグナル伝達アッセイ及びｍＧｌｕＲ５抗体による阻害。ＢＡ／Ｆ３－ｍＧｌｕＲ５クローン１０Ｃ９細胞を使用して、ｍＧｌｕＲ５シグナル伝達アッセイを確立した。ｍＧｌｕＲ５のグルタミン酸様作動薬であるキスカル酸とインキュベートすると、この細胞は細胞質型ホスホ－ＥＲＫ（ｐ－ＥＲＫ）の産生を生じ、これをＰｅｒｋｉｎ ＥｌｍｅｒからのＡｌｐｈａＬＩＳＡ ＳｕｒｅＦｉｒｅ Ｕｌｔｒａ ｐ－ＥＲＫアッセイキット（カタログ番号ＡＬＳＵ－ＰＥＲＫ－Ａ１０Ｋ）を使用して定量化した。ｍＧｌｕＲ５抗体による阻害を測定するため、漸増量の抗体の存在下で細胞をキスカル酸で刺激し、ＩＣ５０値を求めた。簡潔に言えば、Ｖ字底９６ウェルプレートにおいて細胞（２×１０５／ウェル）をペレット化し、次にアッセイ緩衝液（ＲＰＭＩ－１６４０＋１０％透析ＦＢＳ）中の７０μｌ／ウェルの抗体希釈系列に再懸濁し、３７℃で１時間インキュベートした。細胞をペレット化し、刺激緩衝液（ＣｉｓＢｉｏカタログ番号６２ＩＰ１ＦＤＧ）で洗浄し、再びペレット化した。次に細胞を刺激緩衝液中の７０μｌ／ウェルの１０μＭキスカル酸（Ｔｏｃｒｉｓカタログ番号５２８０９－０７－０１）に再懸濁し、３７℃で２０分間インキュベートした時点で細胞を再び洗浄し、ペレット化した。次に５０μｌ／ウェルの溶解緩衝液を加え、約３５０ＲＰＭで振盪しながら１０分間インキュベートさせておいた。３０μｌの各ライセートを新鮮なプレートに移し、そこで１５μｌのアクセプター混合物を加え、暗所下室温で１時間インキュベートし、続いて１５μｌのドナー混合物を加えて暗所下室温で更に１時間インキュベートした。Ａｂ１～Ａｂ２９について蛍光シグナルを測定し、ＩＣ５０値を決定した（表３）。
例示的ｍＧｌｕＲ５抗体はリガンド結合に関して競合しない。ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体による阻害機構を決定する実験を実施した。ｍＧｌｕＲ５結合アッセイを利用して、抗体がリガンド分子の結合を阻害することにより働いたかどうかについて抗体を試験した。２０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ／ＮａＯＨ（ｐＨ７．４）、２ｍＭ ＭｇＣｌ２及び２ｍＭ ＣａＣｌ２を含有するインキュベーション緩衝液中で、ヒトｍＧｌｕＲ５をトランスフェクトしたＣＨＯ細胞からの細胞膜ホモジネート（約５０μｇタンパク質）と共に抗体（３．３３μＭ最終濃度）をプレインキュベートした。次に混合物に［３Ｈ］キスカル酸（４０ｎＭ最終濃度）を加え、試料を２２℃で１２０分間インキュベートした。インキュベーション後、インキュベーション緩衝液に予浸したガラス繊維フィルタ（ＧＦ／Ｂ、Ｐａｃｋａｒｄ）で試料を真空下にて急速ろ過し、９６サンプルセルハーベスター（Ｕｎｉｆｉｌｔｅｒ、Ｐａｃｋａｒｄ）を使用して氷冷５０ｍＭトリス－ＨＣｌで数回リンスした。次にフィルタを乾燥させて、シンチレーションカウンター（Ｔｏｐｃｏｕｎｔ、Ｐａｃｋａｒｄ）でシンチレーションカクテル（Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ ０、Ｐａｃｋａｒｄ）を使用して放射活性をカウントした。例示的抗体ＡｂＡ、ＡｂＢ及びＡｂＣの結果を図３に示し、対照放射性リガンド特異的結合に対するパーセント阻害率として表す。アッセイの陽性対照として、非標識キスカル酸を使用して［３Ｈ］キスカル酸の結合を阻害し、これは４８ｎＭのＩＣ５０で阻害することが分かった。
結果
表３は、Ａｂ１～Ａｂ２９についての細胞ベースのｍＧｌｕＲ５阻害アッセイの結果を示し、各抗体がｍＧｌｕＲ５を０．０６ｎＭ～８．３３ｎＭのＩＣ５０で阻害したことが明らかになっている。フォローアップ研究では、実施例３に記載される３つのエピトープビンを代表する例示的抗体ＡｂＡ、ＡｂＢ、及びＡｂＣを試験して、阻害モードを決定した。図３に示されるとおり、これらのｍＧｌｕＲ５抗体のいずれも、ｍＧｌｕＲ５発現膜調製物への［３Ｈ］キスカル酸の結合を阻害しなかった。
Figure 2022542863000009
実施例６：ｍＧｌｕＲ５抗体はウンベルロン誘起性片頭痛症状のインビボモデルにおいて有効性を示す
材料及び方法
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体によるウンベルロン誘発性涙液分泌の阻害試験。涙液分泌（流涙）は副交感神経系によって調節される。ウンベルロン（「頭痛の木」カリフォルニアゲッケイジュ（Ｕｍｂｅｌｌｕｌａｒｉａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃａ）からの抽出物）などの化学物質を使用したラット顔粘膜の化学的侵害刺激は、三叉神経－副交感神経反射の活性化を通じて顔及び頭蓋内血流、並びに涙液分泌を増加させることが、群発性頭痛及び片頭痛における血管機能不全の実験モデルで示されている（Ｇｏｔｔｓｅｌｉｇ Ｒ，Ｍｅｓｓｌｉｎｇｅｒ Ｋ．Ｃｅｐｈａｌａｌｇｉａ．２００４ Ｍａｒ；２４（３）：２０６－１４；Ｎａｓｓｉｎｉ Ｒ ｅｔ ａｌ．Ｂｒａｉｎ．２０１２；１３５（２）：３７６－９０）。この実験のため、ウンベルロン油（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、ロット番号０８３Ｍ４７１４Ｖ）を琥珀色ガラスバイアル内においてＰＢＳ中０．５％ＤＭＳＯで０．２μｍｏｌ／ｋｇに希釈した。Ｅｎｖｉｇｏ，Ｉｎｃ．、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮから、到着時に約６週齢の雄スプラーグドーリーラット（ｎ＝６４匹）を入手した。研究－１日目、ラットの体重は約２７６～３１０ｇ（平均約２８８ｇ）であった。被験物質投与（ＩＶ投与、２０ｍｇ／ｋｇ）の２４時間後、イソフルラン吸入（ＶｅｔＯｎｅ、カタログ番号５０２０１７）で動物を麻酔し、ウンベルロン（０．２μｍｏｌ／ｋｇ）又は媒体を右鼻孔の中２ｍｍのところに５秒間にわたって鼻腔内（ＩＮ、５０μｌ／ラット）投与した。ＩＮ投与の６０分後、動物を麻酔し、改良シルマー試験紙を右下眼瞼の内側に５分間置いた。５分後、試験紙上に予め印刷されたミリメートル単位の目盛りを用いて涙液産生に関して試験紙を読み取った。例示的ＡｂＡ及びＡｂＢの結果を図４に示す。
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体によるウンベルロン誘発性顔面温度上昇の阻害試験。鼻腔内に投与したウンベルロンなどの侵害化学物質は、ラット顔粘膜を刺激し、三叉神経－副交感神経反射の活性化を通じて顔及び頭蓋内血流を増加させることが示されている。顔血流の増加によって生じる鼻温度上昇は、赤外線（ＩＲ）温度計を使用して測定することができる（Ｇｏｔｔｓｅｌｉｇ Ｒ，Ｍｅｓｓｌｉｎｇｅｒ Ｋ．Ｃｅｐｈａｌａｌｇｉａ．２００４ Ｍａｒ；２４（３）：２０６－１４；Ｎａｓｓｉｎｉ Ｒ ｅｔ ａｌ．Ｂｒａｉｎ．２０１２；１３５（２）：３７６－９０）。この実験では、ウンベルロン油（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、ロット番号０８３Ｍ４７１４Ｖ）を琥珀色ガラスバイアル内においてＰＢＳ中０．５％ＤＭＳＯで０．２μｍｏｌ／ｋｇに希釈した。Ｅｎｖｉｇｏ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮから、雄スプラーグドーリーラットを入手した。ラットの体重は２７６～３３５グラム（平均値３０３ｇ）であった。抗体治療群には、試験の約２４時間前に抗体を投与した（ＩＶ投与、１５ｍｇ／ｋｇ）。試験の１時間前、小分子治療群が被験物質（２０ｍｇ／ｋｇ）又は媒体のＩＶ注射を受けた。ＩＶ注射については、尾を温水に漬けた。ウンベルロン投与のため、動物をイソフルラン吸入（ＶｅｔＯｎｅ、カタログ番号５０２０１７）で軽く麻酔し、次に５０μｌの刺激薬又は媒体を右鼻孔の中２ｍｍのところに５秒間にわたって鼻腔内（ＩＮ）投与した。投与前及びＩＮ投与の５分後に、放射率を０．９７に設定したＴｈｅｒｍｏｗｏｒｋｓ ＴＷ２ ＩＲ温度計で動物の鼻及び右足の温度を計った。読取りの際には、温度計を鼻又は足蹠から約２．５ｃｍ以内に保持した。ｍＧｌｕＲ５小分子阻害薬ＡＤＸ１００５９（Ｔｏｃｒｉｓ）の結果と比較した、例示的ＡｂＡ、ＡｂＢ、及びＡｂＣについての結果を図５に示す。
結果
図４は、例示的ｍＧｌｕＲ５遮断ｍＡｂ ＡｂＡ、ＡｂＢ、及びＡｂＣが、ラットにおいてウンベルロン誘発性涙液分泌を予防したことを実証している。加えて、図５の結果は、ｍＧｌｕＲ５遮断ｍＡｂ ＡｂＡ、ＡｂＢ、及びＡｂＣ、並びに前述の小分子ｍＧｌｕＲ５阻害薬（ＡＤＸ１００５９）が、ラットにおいて頭痛の木の抽出物ウンベルロン誘発性顔面温度上昇を予防したことを示している。
このように、これらの結果は、本明細書に例示されるｍＧｌｕＲ５抗体が、インビボモデルで群発性頭痛及び片頭痛の症状を予防するのに有効であったことを示している。
実施例７：ｍＧｌｕＲ５抗体投与は運動協調性の欠損につながらない
材料及び方法
運動協調性試験。正常な運動効率のげっ歯類は回転するロッド上でその平衡を維持可能であるという仮定に基づき、ロータロッド試験を用いて中枢作用性薬物によって生じる運動機能不全を計算することにより、動物の運動協調性が変化する可能性について決定する。回転するロッドから落下するまでの時間の差を筋弛緩の指標と考える（Ｋｕｄａｇｉ Ｂ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｄｅｎｔ Ｍｅｄ Ｓｃｉ．２０１２；１（４）：４２－７）。脳に透過する小分子阻害薬は、筋協調性を低下させる望ましくない副作用を引き起こし得る一方、脳内への有意な分配がない、同じ標的に対する遮断抗体は、望ましくない筋協調性副作用をほとんど乃至全く有しないものであり得る。ロータロッド試験を用いて小分子と抗体との間の副作用のこうした違いを試験した。Ｅｎｖｉｇｏ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮから、雄スプラーグドーリーラットを入手した。ラットの体重は２７６～３３５グラム（平均値３０３ｇ）であった。研究開始前、動物をロータロッド上で訓練した。研究－１日目、動物を秤量し、ベースラインロータロッド測定値を取った。ロータロッド結果に基づき動物を無作為化した。ロータロッド試験の約２４時間前に、抗体治療群に抗体を投与した（ＩＶ投与、１５ｍｇ／ｋｇ）。ロータロッド試験の１時間前に、小分子治療群が被験物質（２０ｍｇ／ｋｇ）又は媒体のＩＶ注射を受けた。試験イベント毎に、各試行６分のカットオフで、且つ最低でも５分間の試行間間隔を置いて、３試行を実施した。動物をロータロッドに置き、ロッドは４ＲＰＭで回転させ始め、５分の時間をかけて最高４０ＲＰＭまで増加させた。各動物について、ロータロッドからの落下潜時及び最終的なＲＰＭを記録した。動物が１０秒より早く落下した場合、これは試行と見なさず、動物をロータロッド上に置いて再試行した。ｍＧｌｕＲ５小分子阻害薬ＡＤＸ１００５９（Ｔｏｃｒｉｓ）の結果と比較した、例示的ＡｂＡ、ＡｂＢ、及びＡｂＣについての結果を図６に示す。
結果
浮動性めまい（ＡＤＸ１００５９の報告される副作用）の尺度として、ロータロッドの成績を読取りとして使用するラットにおける運動協調性モデルを用いた。図６に示される結果は、ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂが運動協調性を障害しない一方、ＡＤＸ１００５９は運動協調性を有意に障害したことを示している。従って、ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂは、関連性のある群発性頭痛／片頭痛症状インビボモデルにおいて３つ全てのビンのｍＧｌｕＲ５遮断ｍＡｂで有効性を実証する一方、ｍＧｌｕＲ５小分子でヒト臨床試験において観察される運動協調性／浮動性めまいの副作用がないことを示す。
ｍＧｌｕＲ５抗体の有効性に関しては、ｍＧｌｕＲ５の既知の生物学及び他のｍＧｌｕＲ５小分子阻害薬の効果に基づき、様々な適応疾患の種々のモデルで試験し得る。抗体は、静脈内、皮下、又は髄腔内投与を含め、これらのモデルにおいて症状の改善のため種々の経路で、予防的にも、又は治療的にも送達し得る。
実施例８：過敏性腸症候群モデルにおけるｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの有効性
ＴＮＢＳ（２，４，６－トリニトロベンゼンスルホン酸）又は酢酸などの追加の刺激物有り又は無しでの、結腸拡張に応答した結腸痙攣／疼痛読取り値に関してｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂをげっ歯類モデルで試験する。
材料及び方法：
試験抗体又は対照抗体で治療したラットにおいて、Ｔａｒｒｅｒｉａｓ Ａ ｅｔ ａｌ．，Ｐａｉｎ ２００２；１００：９１－９７による方法の修正版に従い段階的結腸直腸拡張を適用することにより、結腸直腸拡張（ＣＲＤ）を実施する。段階的結腸直腸拡張（１０～６０ｍｍＨｇ、１０ｍｍＨｇずつ増加、バロスタットを使用して３分の持続時間で１分減圧）によって誘発された腹部横紋筋収縮が、内臓侵害受容の程度を指示する。一部の実験では、段階的結腸直腸拡張を適用する実験の７日前に、ラットの結腸にトリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ、エタノール中３０ｍｇ／ｋｇ、２５％）を滴下注入して内臓痛覚過敏を誘発する。或いは、結腸直腸拡張の３日前に結腸内酢酸（１．５％）を滴下注入する。
結果：
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体Ａｂ１～Ａｂ２９は筋収縮を用量依存的に低減することが予想される。
実施例９：尿失禁／過活動膀胱モデルにおけるｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの有効性
膀胱拡張に応答した膀胱痙攣／疼痛読取り値に関してｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂをげっ歯類モデルで試験する。
材料及び方法：
試験抗体又は対照抗体で治療した麻酔下のラットにおいて、生理食塩水を充填したＰＥ５０ポリエチレンチューブを使用して膀胱にカテーテルを挿入する。圧力トランスデューサーによって膀胱内圧を測定する。膀胱に生理食塩水を持続注入（０．０６ｍｌ／分）して膀胱収縮を誘発する間に膀胱内圧測定法を実施する（Ｔａｇａｋｉ－Ｍａｔｚｕｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｃｉ ２００４；９５：４５８－４６５）。
結果：
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体Ａｂ１～Ａｂ２９は、膀胱収縮を誘発する閾値容量を用量依存的に増加させることが予想される。
実施例１０：胃食道逆流症モデルにおけるｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの有効性
酸性の食事チャレンジ後の食道のｐＨ変化に関してｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂをげっ歯類モデルで試験する。
材料及び方法：
フェレットでは、酸性の食事後の括約筋上方での食道ｐＨ変化の測定を用いて胃食道逆流症の治療効果が予測される。例えば、Ｆｒｉｓｂｙ ＣＬ ｅｔ ａｌ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．２００５；１２９：９９５－１００４を参照のこと。この実験のため、以前記載されているとおり２％～４％ハロタン麻酔下で若年成体雌フェレット（ムステラ・プトリウス・フロＬ（Ｍｕｓｔｅｌａ ｐｕｔｏｒｉｕｓ ｆｕｒｏ Ｌ））に左側頸部食道瘻を造設する（Ｂｌａｃｋｓｈａｗ ＬＡ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ Ｍｏｔｉｌ．１９９８；１０：４９－５６）。フェレットは、食道瘻造設術後少なくとも１ヵ月間、報酬に基づく訓練を用いて実験機器及び環境セッティングに馴化させる。
カスタム設計のマルチルーメン微圧計アセンブリ（Ｄｅｎｔｓｌｅｅｖｅ、Ｗａｙｖｉｌｌｅ、Ｓｏｕｔｈ Ａｕｓｔｒａｌｉａ）を使用して、食道内圧、ＬＥＳ（下部食道括約筋）圧、及び胃圧を記録する。ＬＥＳ圧は、微圧計アセンブリに組み込まれた３ｃｍ逆灌流スリーブセンサーを使用して測定する。スリーブ中央から１．２５、２．２５、４．７５、及び７．２５ｃｍ近位に位置する４つの側孔を使用して食道内圧を記録し、スリーブ中央から２．２５ｃｍ遠位の５番目の側孔で胃圧をモニタする。アセンブリの中心チャネルを使用して胃負荷を投与する。一定灌流圧力計ポンプ（Ｄｅｎｔｓｌｅｅｖｅ）を使用して、圧力計アセンブリを食道の側孔については０．０２ｍＬ／分及びスリーブ及び胃の側孔については０．０４ｍＬ／分で灌流する。同時発生のｐＨイベントの測定を可能にするため、単一センサー多目的ｐＨカテーテル（Ｆｌｅｘｉｌｏｇ；Ｏａｋｆｉｅｌｄ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｌｔｄ、Ｅｙｎｓｈａｍ、Ｏｘｆｏｒｄｓｈｉｒｅ、Ｅｎｇｌａｎｄ）をＫＣｌ基準電極と共に２ｍｍ幅のパラフィルム（Ｐａｒａｆｉｌｍ）ストリップ（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎ、Ｃｈｉｃａｇｏ、ＩＬ）で微圧計アセンブリに固定し、センサーがスリーブ中央から２ｃｍ近位にあって、それが確実に食道のｐＨをインサイチューで記録するようにする。研究中に圧力計／ｐＨアセンブリが齧られて損傷しないよう保護するため、特定用途向けに作られたネオプレン（Ｎｅｏｐｒｅｎｅ）ハーネス（Ｃｌａｒｋ Ｒｕｂｂｅｒ、Ａｄｅｌａｉｄｅ、Ａｕｓｔｒａｌｉａ）に取り付けたコイルばねにアセンブリを通す。挿管中は動物を手で拘束し、スリーブが胃の範囲内にくるようにアセンブリを多めに導入し、高圧領域が明瞭に記録されるまでそれをゆっくりと引き抜くことにより、ＬＥＳへのスリーブセンサーの位置決めを達成する。ハーネスに縫い付けたマイクロホンを舌骨下に位置決めして、嚥下発生の検出を可能にする。実験期間中、フェレットは、自在に回転する軸受に取り付けられた直径３０ｃｍの円筒形飼育室を自由に動き回ることができる。透明なプラスチック製の小窓があるため、実験期間中のフェレットの姿勢及び動きの目視検査が容易になる。圧力測定及びｐＨの記録は、Ｓｙｎｅｃｔｉｃｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｐｏｌｙｇｒａｆ増幅器（Ｓｔｏｃｋｈｏｌｍ、Ｓｗｅｄｅｎ）を使用して増幅し、ＬａｂｖｉｅｗベースのＴｒａｃｅ！ソフトウェア（バージョン２．１；Ｇ．Ｓ．Ｈｅｂｂａｒｄ博士、Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ、Ｖｉｃｔｏｒｉａ、Ａｕｓｔｒａｌｉａ）で取得する。
実験研究は、一晩の絶食後に実行する。試験抗体又は対照抗体で治療したフェレットに挿管し、次に、順化期間を設けるのと、微圧計／ｐＨモニタリングアセンブリの適切な位置決めを実現するのとの両方のため、実験装置に固定する。データ収集は、胃負荷の２５分前に開始する。ＴＬＥＳＲ（一過性下部食道括約筋弛緩）を引き起こすように設計された胃負荷は、２５ｍＬの１０％酸性化グルコース（ｐＨ３．５）を２分かけて投与し、続いて１０分間の空気注入（１ｍＬ／分）を３回、各回５分の休息期間を空けて行うことからなる。
Ｔｒａｃｅ！ソフトウェアで、このモデルについて既に確立されている圧力計指標を用いて微圧計の記録を分析する（Ｂｌａｃｋｓｈａｗ ＬＡ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ Ｍｏｔｉｌ．１９９８；１０：４９－５６）。ＴＬＥＳＲは、その発生時に付随する嚥下又は食道の蠕動のない、５秒より長く胃圧を２ｍｍＨｇ上回るか又はそれ以下になるＬＥＳ圧の急速な（１ｍｍＨｇ／ｓより速い）低下として特定される。基礎ＬＥＳ圧は、胃への空気注入の間の３回の休息期間中における胃圧を上回るＬＥＳ圧の平均値から決定される。
食道への酸の逆流は、ｐＨプローブの位置が上記のとおりＬＥＳの高圧領域にあることを確認できる間に、食道内ｐＨが５秒より長く少なくともｐＨ４の値に低下した場合、逆流エピソードとしてスコア化する。
結果：
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体Ａｂ１～Ａｂ２９は、ＴＬＥＳＲ、逆流エピソード、及び食道内ｐＨ低下を用量依存的に軽減することが予想される。
実施例１１：神経性硬膜血管拡張片頭痛モデルにおけるｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの有効性
血管近傍を電気刺激した後の硬膜における血管拡張を測定して、ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂをげっ歯類モデルで試験する。
材料及び方法：
ラットでは、神経性硬膜血管拡張モデルを用いて片頭痛治療の効果が予測される。例えば、Ｗａｕｎｇ ＭＷ ｅｔ ａｌ．Ａｎｎａｌｓ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ２０１６；３（８）：５６０－７１を参照のこと。この実験のため、血管が明瞭に見えるまで薄層化した頭頂骨窓を硬膜動脈上に設ける（Ａｋｅｒｍａｎ Ｓ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ ２０１３；３３：１４８６９－７７．）。顕微鏡によって動脈の画像を取得し、時間の経過に伴う血管直径の変化を測定する。試験抗体又は対照抗体で治療した動物の頭蓋窓表面上、目的の血管から２００μｍ以内に双極刺激電極を位置決めする。１０秒トレインの５Ｈｚ刺激を１ミリ秒パルス１０～４０Ｖで投与して、最大限の血管拡張を実現する。実験全体を通して、同じ動物ではこの最大応答電圧を用いる。電気刺激は、試験抗体又は対照抗体の存在下、５～１５分間隔で１時間にわたって繰り返す。電気刺激が硬膜血管直径に及ぼす効果を、刺激前のベースライン直径からの増加率として計算する。
結果：
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体Ａｂ１～Ａｂ２９は、髄膜刺激に応答した神経性硬膜血管拡張を用量依存的に軽減することが予想される。
実施例１２：興奮性ＴＣＣ（三叉神経頸髄複合体）侵害受容刺激片頭痛モデルにおけるｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの有効性
硬膜における自然発症的ＴＣＣ、又は中硬膜動脈近傍の電気刺激後のＴＣＣのいずれかにおけるニューロンからの電気的記録を測定して、ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂをげっ歯類モデルで試験する。
材料及び方法：
ラットでは、ＴＣＣニューロン活性化モデルを用いて片頭痛治療における効果が予測される。例えば、Ｗａｕｎｇ ＭＷ ｅｔ ａｌ．Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ２０１６；３（８）：５６０－７１を参照のこと。この実験のため、頭頂骨に開頭術を実施して、中硬膜動脈（ＭＭＡ）を覆う硬膜を露出させる。頸髄片側椎弓切除術もまた実施し、硬膜を切開して、尾側髄質の位置まで脳幹を露出させる。タングステン導出電極（０．５ＭΩ、先端直径０．５μｍ）を圧電性モーター制御器で脳幹まで下げる。Ｖ１眼皮膚分節における皮膚のブラッシング及びつねりに応答した直接的なニューロン発火により、三叉神経核尾側のＶ１領域への導出電極の配置をガイドする。硬膜上にＭＭＡに隣接して双極刺激電極を置き、０．１～０．３ミリ秒継続時間、１０～２５Ｖの方形波刺激（０．５Ｈｚ）を印加して三叉神経求心性神経を活性化させる。試験抗体又は対照抗体で治療した動物においてＭＭＡ刺激によって活性化したＴＣＣのニューロンから、細胞外記録を行う。比較に３ベースラインの平均を使用するか、又は媒体対照記録と比較する。シグナルは増幅し、フィルタ及び６０Ｈｚノイズ除去器から第二段増幅器に通過させる。このシグナルをゲート式振幅弁別器及びアナログ－デジタル変換器に、及び分析のためマイクロプロセッサベースのコンピュータに送る。
結果：
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体Ａｂ１～Ａｂ２９は、髄膜刺激に応答したＴＣＣニューロン活性化を用量依存的に軽減することが予想される。
実施例１３：不安モデルにおけるｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの有効性
設定時間内にケージの床敷に埋める大理石の個数を測定して、ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂをげっ歯類モデルで試験する。
材料及び方法：
マウスでは、大理石埋めモデルを用いて不安治療における効果が予測される。例えば、Ｓｐｏｏｒｅｎ ＷＰＪＭ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｅｘｐ Ｔｈｅｒ ２０００；２９５：１２６７－１２７５を参照のこと。この実験のため、大理石埋め試験手順を採用し、但し、Ｂｒｏｅｋｋａｍｐ ｅｔ ａｌ．Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ １９８６；１２６：２２３－２２９の元の説明に少し変更を加える。簡潔に言えば、試験抗体又は対照抗体で治療したマウスをケージから取り出し、５ｃｍのおがくずの床敷の上に１０個の大理石が均等に配置された小さいケージ（２２×１６×１４ｃｍ）に個々に入れる。６０分間、マウスをこれらのケージに入れたままにしておく；マウスを取り出した後、目に見える埋められていない（即ち、３分の２未満しかおがくずに覆われていない）大理石の数を数える。
結果：
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体Ａｂ１～Ａｂ２９は、大理石埋め行動を用量依存的に軽減することが予想される。
実施例１４：嗜癖障害モデルにおけるｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの有効性
モルヒネなどの薬物を自己投与するように訓練した後の薬物自己投与を測定して、ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂをげっ歯類モデルで試験する。
材料及び方法：
げっ歯類薬物自己投与試験を用いて、薬物中毒治療を評価する。薬物自己投与試験装置は、標準的な市販のオペラント条件付けチャンバーである。薬物試験の開始前、レバーを押して餌報酬を得るようにラットを訓練する。ラットが安定したレバー押し行動を獲得した後、薬物報酬を得るためのレバー押しの獲得に関してラットを試験する。ラットがモルヒネなどの公知の乱用薬物を自己投与するように訓練する。次にラットに２本のレバー、「アクティブ」レバー及び「非アクティブ」レバーを提示する。アクティブレバーを押すと、定率強化スケジュールで薬物が注入され、続いて２０秒のタイムアウト時間がある。非アクティブレバーを押すと、賦形剤が注入される。訓練は、総モルヒネ注入回数が１回のセッション当たり１０％以内に安定するまで続ける。試験抗体又は対照抗体で治療した訓練済みのラットに、通常どおり薬物を自己投与させる。データは、訓練セッションと比較した各試験セッションの薬物注入回数の変化として分析する。
結果：
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体Ａｂ１～Ａｂ２９は、活性薬物に対する反応率の低下を用量依存的に誘導することが予想される。
実施例１５：レボドパ誘発性ジスキネジアモデルにおけるｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの有効性
ＭＰＴＰ（１－メチル－４－フェニル－１，２，３，６－テトラヒドロピリジン）又は６－ＯＨＤＡ（６－ヒドロキシドパミン）によって誘導される不随意運動を測定して、ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂを動物モデルで試験する。
材料及び方法：
６－ＯＨＤＡで誘導し、レボドパで治療するげっ歯類パーキンソン病モデルを使用して、この病態に関連する不随意運動の治療を試験する。以前記載されているとおり線条体に６－ヒドロキシドパミン（６－ＯＨＤＡ、３μｇ／μＬ；Ｓｉｇｍａ）を片側注射して実験的パーキンソニズムを実現する（Ｌｕｎｄｂｌａｄ Ｍ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ Ｄｉｓ ２００４；１６：１１０－１２３）。６－ＯＨＤＡを０．０２％アスコルビン酸含有生理食塩水に溶解させて、線条体の以下のブレグマからの２座標に片側注射する：前後方向＋０．３ｍｍ、横方向＋２．２ｍｍ、及び硬膜下背腹側－３．０ｍｍに２μＬ、及び前後方向＋１．１ｍｍ、横方向＋１．７ｍｍ、及び背腹側－２．９ｍｍに２μＬ。３週間回復させた後、ＡＩＭ（異常不随意運動）を発症させるため、試験抗体又は対照抗体で治療した動物にＬドパの慢性注射（２０ｍｇ／ｋｇ、ｓ．ｃ．）を１日１回、１４日間受けさせる。４つのＡＩＭカテゴリー（肢、軸、口舌、及び移動）について、盲検化した熟練研究者が２時間にわたって２０分毎に、バリデートされた評価尺度（Ｌｕｎｄｂｌａｄ Ｍ ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ ２００２；１５：１２０－１３２）を用いて１分間点数化する。
結果：
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体Ａｂ１～Ａｂ２９は、ＡＩＭ点数の低下を用量依存的に誘導することが予想される。
実施例１６：ジストニアモデルにおけるｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの有効性
トーシンＡタンパク質の過剰発現に起因する異常興奮性神経及び行動反応を測定して、ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂをげっ歯類モデルで試験する。
材料及び方法：
トーシンＡタンパク質を過剰発現するげっ歯類モデルは、ジストニアに対する治療の同定に用いられる。Ｓｃｉａｍａｎｎａ Ｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍ ２０１４；８５：４４０－５０を参照のこと。以前記載されているとおり（Ｓｈａｒｍａ Ｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ ２００５；２５：５３５１－５）、ヒトトーシンＡトランスジェニックマウス（８～１０週齢）を作成する。頸椎脱臼によってマウスを犠牲にし、次に脳スライスを調製し、レコーディングチャンバーに移し入れる。灌流溶液中の試験抗体又は対照抗体の存在下で、様々な刺激に反応した電流固定記録を実施する。
結果：
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体Ａｂ１～Ａｂ２９は、異常な膜反応を用量依存的に低減することが予想される。
実施例１７：急性痛モデルにおけるｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの有効性
熱に対するテールフリック反応を測定して、ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂをげっ歯類モデルで試験する。
材料及び方法：
げっ歯類における抗侵害受容活性の研究には、テールフリック法が利用される。Ｒｅｚａｅｅ－Ａｓｌ Ｍ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ Ｓｃｈ Ｒｅｓ Ｎｏｔｉｃｅｓ ２０１４；Ａｒｔｉｃｌｅ ＩＤ ６８７６９７：５ ｐａｇｅｓを参照のこと。放射熱自動テールフリック無痛覚計を適用して反応潜時を測定する。尾の先端（最後端１～２ｃｍ）を放射熱源に置くことにより、試験抗体又は対照抗体で治療した動物の放射熱に対する基礎反応時間を記録する。放射温熱からの尾の移動が、エンドポイントと見なされる。熱による尾の損傷を防ぐため、１５秒のカットオフ時間を用いた。
結果：
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体Ａｂ１～Ａｂ２９は、疼痛反応を用量依存的に軽減することが予想される。
実施例１８：慢性痛モデルにおけるｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの有効性
線維筋痛症モデルとして使用されることの多い、腓筋への酸性生理食塩水の数日間にわたる注射後、Ｖｏｎ Ｆｒｅｙフィラメントを使用して疼痛反応を測定して、ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂをげっ歯類モデルで試験する。
材料及び方法：
腓筋への繰り返しの酸注射は、慢性痛モデルとして使用され、鎮痛薬の試験に用いられている。Ｎｉｅｌｓｅｎ ＡＮ ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ ２００４；２８７：９３－１０３を参照のこと。試験抗体又は対照抗体で治療したマウスの腓腹筋に２０μＬのｐＨ４滅菌生理食塩水を２回、５日空けて注射する。これにより両側性の機械的痛覚過敏が生じ、これは４週間にわたって持続し、継続的な一次求心性の入力に依存せず、注射した筋肉に損傷を与えない（Ｓｌｕｋａ ＫＡ ｅｔ ａｌ．，Ｍｕｓｃｌｅ Ｎｅｒｖｅ ２００１；２４：３７－４６）。機械的痛覚過敏は、同側及び対側後足の足底面に０．４ｍＮ ｖｏｎ Ｆｒｅｙフィラメントを５回繰り返し適用したうちの反応した回数として測定される。ｖｏｎ Ｆｒｅｙ刺激に対する反応は、ｖｏｎ Ｆｒｅｙフィラメント適用時における急激な足上げとして定義される。５回のｖｏｎ Ｆｒｅｙ刺激の各試行につき約１／秒で適用する。１０試行を平均して動物１匹当たり１回の反応を求め、１０試行の各々の間は５分間空ける。
結果：
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体Ａｂ１～Ａｂ２９は、疼痛反応を用量依存的に軽減することが予想される。
実施例１９：術後痛モデルにおけるｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの有効性
足切開後の体重支持能力を測定して、ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂをげっ歯類モデルで試験する。
材料及び方法：
術後痛の治療の分析には、げっ歯類における足切開後の体重支持が用いられる。Ｚｈｕ ＣＺ ｅｔ ａｌ．，Ｐａｉｎ ２００５；１１４：１９５－２０２を参照のこと。ハロタン（２～３％）麻酔を用いて足切開を実施し、これは、以前に記載されている手順に従う（Ｂｒｅｎｎａｎ ＴＪ ｅｔ ａｌ．，Ｐａｉｎ １９９６；６４：４９３－５０１）。簡潔に言えば、左後足の足底面を滅菌プラスチックドレープに開けた穴に通す。皮膚及び筋膜に、踵の近位縁から０．５ｃｍを始端として、つま先に向かって延びる１ｃｍ長軸方向の切開を設け、足底筋を持ち上げて長軸方方向に外傷を与え、筋起始及び挿入点はインタクトなまま残す。軽く圧力をかけて止血した後、２本のマットレス縫合（５－０ナイロン）で皮膚を閉じる。各後足に配分された動物の体重を別々に測定する２チャンネル体重計であるＩｎｃａｐａｃｉｔａｎｃｅ Ａｎａｌｇｅｓｉａ Ｍｅｔｅｒ（Ｓｔｏｅｌｔｉｎｇ、Ｗｏｏｄ Ｄａｌｅ、ＩＬ）を使用して、後足体重支持反応を評価する。正常なラットはその体重を２本の後足に均等に配分するが（５０－５０）、負傷した足と負傷していない足との間の体重配分の差が、負傷した足の不快レベルの自然の反映である。各後足が別々のトランスデューサーパッド上に載るように設計されたプラスチックチャンバーに、試験抗体又は対照抗体で治療したラットを置く。トランスデューサーにかかる負荷を５秒間にわたって記録するように平均化器を設定し、表示される２つの数字が、グラム単位（ｇ）での各足にかかるラットの体重の配分に相当する。各ラットにつき、各足から３つの読取り値を取り、次に平均する。左右の体重支持の差を、３試行からの２本の後足間の差（右足の読取り値－左足の読取り値）の絶対値の平均値として計算する。
結果：
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体Ａｂ１～Ａｂ２９は、用量依存的に疼痛反応を軽減し、２本の足の間の体重支持の差を低減することが予想される。
実施例２０：神経因性疼痛モデルにおけるｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの有効性
化学療法剤パクリタキセルによって誘発されるＶｏｎ Ｆｒｅｙフィラメントに対する足過敏症を測定して、ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂをげっ歯類モデルで試験する。
材料及び方法：
パクリタキセル誘発性足過敏症モデルは、有痛性末梢性ニューロパチーの治療の試験に用いられる。Ｘｉｅ Ｊ－Ｄ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２０１６；２９１：１９３６４－１９３７３を参照のこと。末梢性ニューロパチーを誘発するため、試験抗体又は対照抗体で治療したラットにパクリタキセル（２ｍｇ／ｋｇ）を４回隔日で（１、３、５、及び７日目；８ｍｇ／ｋｇの総累積用量）腹腔内注射する。１０日後、ラットを吊り下げ式チャンバー内のメッシュの床に個別に置き、少なくとも３０分間順化させる。その触覚感度を決定するため、本発明者らは、一連の目盛り付きｖｏｎ Ｆｒｅｙフィラメントをフィラメントが屈曲するのに十分な力で両後足の足底面に垂直に６秒間当てる。足をさっと引っ込める又はたじろぐことが、正の反応と見なされる。反応がない場合、本発明者らは、次に大きい力のフィラメントを当てる。反応後、本発明者らは、次に小さい力のフィラメントを当てる。引っ込め反応が起こる可能性が５０％となる触覚刺激を計算する。
結果：
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体Ａｂ１～Ａｂ２９は、用量依存的に疼痛反応を軽減し、及び足の引っ込め閾値を増加させることが予想される。
実施例２１：炎症痛モデルにおけるｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂの有効性
フロイント完全アジュバントの注射によって炎症を誘発した後の足の引っ込めを測定して、ｍＧｌｕＲ５ ｍＡｂをげっ歯類モデルで試験する。
材料及び方法：
フロイント完全アジュバント（ＦＣＡ）炎症痛モデルは、ラットにおける確立された炎症性痛覚過敏に薬物が及ぼす効果の測定に使用される。Ｗａｌｋｅｒ Ｋ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ２００１；４０：１０９を参照のこと。ラット後足のＦＣＡ誘発性炎症は、持続性炎症性機械的痛覚過敏の発症（足の引っ込め閾値、即ちＰＷＴの低下）に関連し、臨床的に有用な鎮痛薬の抗痛覚過敏効果の信頼できる予測を提供する（Ｂａｒｔｈｏ Ｌ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｕｎｙｎ Ｓｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇｓ Ａｒｃｈ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ １９９０；３４２（６）：６６６－７０）。試験抗体又は対照抗体で治療した動物の左後足の足底下に２５μＬのフロイント完全アジュバント（Ｓｉｇｍａ）を注射する。ＦＣＡ処置前にＰＷＴを決定し（処置前）、次にＦＣＡ処置の２４時間後に再び決定する（投与前）。ＰＷＴは足圧力法を用いて測定する（Ｓｔｅｉｎ Ｃ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｅｈａｖ １９８８；３１：４５１－４５５）。無痛覚計（７２００、Ｕｇｏ Ｂａｓｉｌｅ、Ｉｔａｌｙ）で楔形プローブを用いる（面積１．７５ｍｍ２）。カットオフは２５０ｇに設定し、エンドポイントを足の引っ込めと見なす。
結果：
抗ｍＧｌｕＲ５モノクローナル抗体Ａｂ１～Ａｂ２９は、用量依存的に疼痛反応を軽減し、ＰＷＴを増加させることが予想される。
本願において引用される参考文献は全て、全体として参照により援用される。
本発明の様々な例示的実施形態についての上記の説明が網羅的であること、又は本発明を開示される正確な形態に限定することは意図されない。本発明の具体的な実施形態、及びその例は、本明細書に例示を目的として記載されるが、当業者は認識するであろうとおり、様々な均等な変形例が本発明の範囲内で可能である。本発明の本明細書に提供される教示は、上記に記載した例以外の他の目的に適用することができる。
本発明には、上記の詳細な説明を踏まえ、これら及び他の変更を加えることができる。一般に、以下の特許請求の範囲では、用いられる用語が、本明細書及び特許請求の範囲に開示される具体的な実施形態に本発明を限定するものと解釈されてはならない。従って、本発明は本開示に限定されず、代わりに本発明の範囲は、以下の特許請求の範囲によって全体が決定されるべきである。
配列表
ヒトｍＧｌｕＲ５ｂ
配列番号１
Figure 2022542863000010
ヒトｍＧｌｕＲ５ａ
配列番号２
Figure 2022542863000011
ラットｍＧｌｕＲ５
配列番号３
Figure 2022542863000012
カニクイザルｍＧｌｕＲ５
配列番号４
Figure 2022542863000013
ヒトｍＧｌｕＲ１
配列番号５
Figure 2022542863000014
Ａｂ１＿ＶＨ ＶＨ
配列番号６
Figure 2022542863000015
Ａｂ１＿ＶＨ ＶＨ
配列番号７
ＱＱＱＬＥＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＴＬＴＬＴＣＫＶＳＧＩＤＦＳＳＹＹＹＭＣＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＡＣＩＹＡＧＤＧＧＴＹＹＡＳＷＡＫＧＲＦＴＳＳＫＴＳＳＴＴＶＴＬＱＭＴＳＬＴＡＡＤＴＡＴＹＦＣＡＲＧＳＧＶＧＳＹＧＹＳＬＷＧＰＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ１＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号８
ＡＧＣＴＡＣＴＡＣＴＡＣＡＴＧＴＧＣ
Ａｂ１＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号９
ＳＹＹＹＭＣ
Ａｂ１＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号１０
ＴＧＣＡＴＴＴＡＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＧＣＡＣＴＴＡＣＴＡＣＧＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ１＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号１１
ＣＩＹＡＧＤＧＧＴＹＹＡＳＷＡＫＧ
Ａｂ１＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号１２
ＧＧＴＡＧＴＧＧＴＧＴＴＧＧＴＡＧＴＴＡＴＧＧＴＴＡＣＡＧＣＴＴＧ
Ａｂ１＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号１３
ＧＳＧＶＧＳＹＧＹＳＬ
Ａｂ１＿ＶＬ ＶＬ
配列番号１４
Figure 2022542863000016
Ａｂ１＿ＶＬ ＶＬ
配列番号１５
ＡＤＩＶＭＴＱＴＰＡＳＶＥＡＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＥＳＩＹＳＮＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＥＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＤＬＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＧＹＹＡＳＴＴＴＮＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ１＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号１６
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＧＡＧＡＧＣＡＴＴＴＡＴＡＧＣＡＡＴＴＴＡＧＣＣ
Ａｂ１＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号１７
ＱＡＳＥＳＩＹＳＮＬＡ
Ａｂ１＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号１８
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＡＴＣＴＧＧＡＡＴＣＴ
Ａｂ１＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号１９
ＲＡＳＮＬＥＳ
Ａｂ１＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号２０
ＣＡＡＧＧＣＴＡＴＴＡＴＧＣＣＡＧＴＡＣＴＡＣＴＡＣＴＡＡＴＧＣＴ
Ａｂ１＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号２１
ＱＧＹＹＡＳＴＴＴＮＡ
Ａｂ２＿ＶＨ ＶＨ
配列番号２２
Figure 2022542863000017
Ａｂ２＿ＶＨ ＶＨ
配列番号２３
ＱＱＱＬＥＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＴＬＴＬＴＣＫＡＳＧＩＤＦＳＧＹＹＹＭＣＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＡＣＶＹＴＧＤＧＧＴＹＹＡＳＷＡＫＧＲＦＴＩＳＫＴＳＳＴＴＶＴＬＱＭＴＳＬＴＡＡＤＴＡＴＹＦＣＡＲＧＳＧＶＧＳＹＧＹＮＬＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ２＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２４
ＧＧＣＴＡＣＴＡＣＴＡＣＡＴＧＴＧＣ
Ａｂ２＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２５
ＧＹＹＹＭＣ
Ａｂ２＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２６
ＴＧＣＧＴＴＴＡＴＡＣＴＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＧＣＡＣＴＴＡＣＴＡＣＧＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ２＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２７
ＣＶＹＴＧＤＧＧＴＹＹＡＳＷＡＫＧ
Ａｂ２＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号２８
ＧＧＴＡＧＴＧＧＴＧＴＴＧＧＴＡＧＴＴＡＴＧＧＴＴＡＣＡＡＣＴＴＧ
Ａｂ２＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号２９
ＧＳＧＶＧＳＹＧＹＮＬ
Ａｂ２＿ＶＬ ＶＬ
配列番号３０
Figure 2022542863000018
Ａｂ２＿ＶＬ ＶＬ
配列番号３１
ＡＤＩＶＭＴＱＴＰＡＳＶＥＡＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＥＳＩＹＳＮＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＥＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＤＬＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＧＹＹＡＩＴＴＴＮＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ２＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号３２
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＧＡＧＡＧＣＡＴＴＴＡＴＡＧＣＡＡＴＴＴＡＧＣＣ
Ａｂ２＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号３３
ＱＡＳＥＳＩＹＳＮＬＡ
Ａｂ２＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号３４
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＡＴＣＴＧＧＡＡＴＣＴ
Ａｂ２＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号３５
ＲＡＳＮＬＥＳ
Ａｂ２＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号３６
ＣＡＡＧＧＣＴＡＴＴＡＴＧＣＣＡＴＴＡＣＴＡＣＴＡＣＴＡＡＴＧＣＴ
Ａｂ２＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号３７
ＱＧＹＹＡＩＴＴＴＮＡ
Ａｂ３＿ＶＨ ＶＨ
配列番号３８
Figure 2022542863000019
Ａｂ３＿ＶＨ ＶＨ
配列番号３９
ＱＳＬＥＥＳＧＧＲＬＶＴＰＧＴＰＬＴＬＴＣＴＶＳＧＩＤＬＳＳＹＡＶＧＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＩＧＩＩＹＡＳＧＮＴＷＹＡＳＷＶＫＧＲＦＴＩＳＫＴＳＴＴＶＤＬＫＬＡＳＬＴＴＥＤＴＡＴＹＦＣＡＲＧＨＧＡＴＹＤＹＦＮＬＷＧＰＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ３＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号４０
ＡＧＣＴＡＴＧＣＡＧＴＧＧＧＣ
Ａｂ３＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号４１
ＳＹＡＶＧ
Ａｂ３＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号４２
ＡＴＣＡＴＴＴＡＴＧＣＴＡＧＴＧＧＴＡＡＣＡＣＡＴＧＧＴＡＣＧＣＧＡＧＣＴＧＧＧＴＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ３＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号４３
ＩＩＹＡＳＧＮＴＷＹＡＳＷＶＫＧ
Ａｂ３＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号４４
ＧＧＴＣＡＴＧＧＴＧＣＴＡＣＴＴＡＴＧＡＣＴＡＣＴＴＴＡＡＴＴＴＧ
Ａｂ３＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号４５
ＧＨＧＡＴＹＤＹＦＮＬ
Ａｂ３＿ＶＬ ＶＬ
配列番号４６
Figure 2022542863000020
Ａｂ３＿ＶＬ ＶＬ
配列番号４７
ＡＹＤＭＴＱＴＰＡＳＶＥＶＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＱＳＩＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＤＡＳＤＬＡＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＹＴＬＴＩＳＧＶＱＣＤＤＡＡＴＹＹＣＱＱＧＬＡＴＡＮＶＤＮＶＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ３＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号４８
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＣＡＴＴＡＧＴＡＧＣＴＡＣＴＴＡＧＣＣ
Ａｂ３＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号４９
ＱＡＳＱＳＩＳＳＹＬＡ
Ａｂ３＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号５０
ＧＡＴＧＣＡＴＣＣＧＡＴＣＴＧＧＣＡＴＣＴ
Ａｂ３＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号５１
ＤＡＳＤＬＡＳ
Ａｂ３＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号５２
ＣＡＡＣＡＧＧＧＴＣＴＴＧＣＴＡＣＴＧＣＴＡＡＴＧＴＴＧＡＴＡＡＴＧＴＴ
Ａｂ３＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号５３
ＱＱＧＬＡＴＡＮＶＤＮＶ
Ａｂ４＿ＶＨ ＶＨ
配列番号５４
Figure 2022542863000021
Ａｂ４＿ＶＨ ＶＨ
配列番号５５
ＱＱＱＬＥＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＴＬＴＬＴＣＫＧＳＧＩＤＦＮＤＹＱＹＭＣＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＡＣＩＹＮＧＤＧＥＴＹＹＡＨＷＡＫＧＲＦＴＩＳＫＴＳＳＴＴＶＴＬＱＭＴＳＬＴＡＡＤＴＡＴＹＦＣＡＲＧＳＧＶＧＳＹＧＹＮＦＷＧＰＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ４＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号５６
ＧＡＣＴＡＣＣＡＧＴＡＣＡＴＧＴＧＣ
Ａｂ４＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号５７
ＤＹＱＹＭＣ
Ａｂ４＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号５８
ＴＧＣＡＴＴＴＡＴＡＡＴＧＧＧＧＡＴＧＧＴＧＡＧＡＣＴＴＡＣＴＡＣＧＣＧＣＡＣＴＧＧＧＣＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ４＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号５９
ＣＩＹＮＧＤＧＥＴＹＹＡＨＷＡＫＧ
Ａｂ４＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号６０
ＧＧＴＡＧＴＧＧＴＧＴＴＧＧＧＡＧＴＴＡＴＧＧＴＴＡＣＡＡＣＴＴＴ
Ａｂ４＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号６１
ＧＳＧＶＧＳＹＧＹＮＦ
Ａｂ４＿ＶＬ ＶＬ
配列番号６２
Figure 2022542863000022
Ａｂ４＿ＶＬ ＶＬ
配列番号６３
ＡＤＩＶＭＴＱＴＰＡＳＶＥＡＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＥＳＩＹＳＮＬＡＷＹＱＱＫＡＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＡＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＤＬＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＧＹＹＡＳＴＶＴＮＧＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ４＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号６４
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＧＡＧＡＧＣＡＴＴＴＡＣＡＧＣＡＡＴＴＴＡＧＣＣ
Ａｂ４＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号６５
ＱＡＳＥＳＩＹＳＮＬＡ
Ａｂ４＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号６６
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＡＴＣＴＧＧＣＡＴＣＴ
Ａｂ４＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号６７
ＲＡＳＮＬＡＳ
Ａｂ４＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号６８
ＣＡＡＧＧＣＴＡＴＴＡＴＧＣＣＡＧＴＡＣＴＧＴＴＡＣＴＡＡＴＧＧＴ
Ａｂ４＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号６９
ＱＧＹＹＡＳＴＶＴＮＧ
Ａｂ５＿ＶＨ ＶＨ
配列番号７０
Figure 2022542863000023
Ａｂ５＿ＶＨ ＶＨ
配列番号７１
ＱＥＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＥＧＳＬＴＬＴＣＴＡＳＧＩＤＦＳＳＧＹＦＭＣＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＡＣＩＳＰＹＳＤＮＴＷＹＡＮＷＡＫＧＲＦＴＩＳＫＴＳＳＴＴＶＴＬＱＭＴＳＬＴＡＡＤＴＡＡＹＲＣＡＲＴＭＡＩＧＡＹＮＰＦＫＬＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ５＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号７２
ＡＧＣＧＧＣＴＡＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣ
Ａｂ５＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号７３
ＳＧＹＦＭＣ
Ａｂ５＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号７４
ＴＧＣＡＴＴＴＣＧＣＣＴＴＡＴＡＧＴＧＡＴＡＡＴＡＣＡＴＧＧＴＡＣＧＣＧＡＡＣＴＧＧＧＣＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ５＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号７５
ＣＩＳＰＹＳＤＮＴＷＹＡＮＷＡＫＧ
Ａｂ５＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号７６
ＡＣＴＡＴＧＧＣＴＡＴＴＧＧＣＧＣＴＴＡＴＡＡＣＣＣＣＴＴＴＡＡＧＴＴＧ
Ａｂ５＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号７７
ＴＭＡＩＧＡＹＮＰＦＫＬ
Ａｂ５＿ＶＬ ＶＬ
配列番号７８
Figure 2022542863000024
Ａｂ５＿ＶＬ ＶＬ
配列番号７９
ＡＬＶＭＴＱＴＰＳＳＶＳＡＡＶＧＧＴＶＴＩＮＣＱＡＳＱＮＩＹＳＮＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＲＰＫＬＬＩＹＤＡＳＤＬＡＳＧＶＳＳＲＶＫＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＤＬＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＧＹＹＳＧＮＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ５＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号８０
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＡＣＡＴＴＴＡＣＡＧＣＡＡＴＴＴＡＧＣＣ
Ａｂ５＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号８１
ＱＡＳＱＮＩＹＳＮＬＡ
Ａｂ５＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号８２
ＧＡＴＧＣＡＴＣＣＧＡＴＣＴＧＧＣＡＴＣＴ
Ａｂ５＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号８３
ＤＡＳＤＬＡＳ
Ａｂ５＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号８４
ＣＡＡＧＧＣＴＡＴＴＡＴＴＣＴＧＧＴＡＡＴＧＣＴ
Ａｂ５＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号８５
ＱＧＹＹＳＧＮＡ
Ａｂ６＿ＶＨ ＶＨ
配列番号８６
Figure 2022542863000025
Ａｂ６＿ＶＨ ＶＨ
配列番号８７
ＱＳＬＥＥＳＧＧＲＬＶＴＰＧＧＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＩＤＬＳＳＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＧＩＩＹＡＳＧＮＴＷＹＡＮＷＶＫＧＲＦＴＩＳＫＴＳＴＴＶＤＬＫＭＴＳＰＴＴＥＤＴＡＴＹＦＣＡＲＤＳＳＡＴＦＮＹＬＤＬＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ６＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号８８
ＡＧＣＴＡＴＧＣＡＡＴＧＡＧＣ
Ａｂ６＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号８９
ＳＹＡＭＳ
Ａｂ６＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号９０
ＡＴＣＡＴＴＴＡＴＧＣＴＡＧＴＧＧＴＡＡＣＡＣＡＴＧＧＴＡＣＧＣＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ６＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号９１
ＩＩＹＡＳＧＮＴＷＹＡＮＷＶＫＧ
Ａｂ６＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号９２
ＧＡＴＡＧＴＡＧＴＧＣＴＡＣＴＴＴＴＡＡＴＴＡＴＣＴＡＧＡＣＴＴＧ
Ａｂ６＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号９３
ＤＳＳＡＴＦＮＹＬＤＬ
Ａｂ６＿ＶＬ ＶＬ
配列番号９４
Figure 2022542863000026
Ａｂ６＿ＶＬ ＶＬ
配列番号９５
ＡＦＨＭＴＱＴＰＡＳＭＥＶＡＶＧＧＴＶＴＭＫＣＱＡＳＥＳＩＤＴＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＱＡＳＫＬＡＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＧＶＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＱＧＷＳＴＮＤＶＤＮＶＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ６＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号９６
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＧＡＧＡＧＣＡＴＴＧＡＴＡＣＣＴＡＣＴＴＡＡＡＣ
Ａｂ６＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号９７
ＱＡＳＥＳＩＤＴＹＬＮ
Ａｂ６＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号９８
ＣＡＧＧＣＡＴＣＣＡＡＡＣＴＧＧＣＡＴＣＴ
Ａｂ６＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号９９
ＱＡＳＫＬＡＳ
Ａｂ６＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号１００
ＣＡＡＣＡＧＧＧＴＴＧＧＡＧＴＡＣＴＡＡＴＧＡＴＧＴＴＧＡＴＡＡＴＧＴＴ
Ａｂ６＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号１０１
ＱＱＧＷＳＴＮＤＶＤＮＶ
Ａｂ７＿ＶＨ ＶＨ
配列番号１０２
Figure 2022542863000027

Ａｂ７＿ＶＨ ＶＨ
配列番号１０３
ＱＳＶＥＥＳＧＧＲＬＶＴＰＧＴＰＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＳＲＹＡＭＧＷＶＲＨＶＰＧＫＧＬＥＷＩＧＩＩＹＡＳＧＳＴＹＹＡＳＷＡＫＧＲＦＴＩＳＫＴＳＴＴＶＤＬＫＩＴＳＰＴＴＥＤＴＡＴＹＦＣＡＲＳＲＴＡＴＹＤＡＶＤＰＷＧＰＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ７＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号１０４
ＣＧＣＴＡＴＧＣＡＡＴＧＧＧＣ
Ａｂ７＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号１０５
ＲＹＡＭＧ
Ａｂ７＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号１０６
ＡＴＣＡＴＴＴＡＴＧＣＴＡＧＴＧＧＴＡＧＣＡＣＡＴＡＣＴＡＣＧＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＡＧＧＧＣ
Ａｂ７＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号１０７
ＩＩＹＡＳＧＳＴＹＹＡＳＷＡＫＧ
Ａｂ７＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号１０８
ＴＣＧＣＧＴＡＣＴＧＣＴＡＣＴＴＡＴＧＡＴＧＣＴＧＴＴＧＡＴＣＣＣ
Ａｂ７＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号１０９
ＳＲＴＡＴＹＤＡＶＤＰ
Ａｂ７＿ＶＬ ＶＬ
配列番号１１０
Figure 2022542863000028
Ａｂ７＿ＶＬ ＶＬ
配列番号１１１
ＡＹＤＭＴＱＴＰＡＳＶＳＥＰＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＱＳＩＳＳＹＬＳＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＥＡＳＴＬＡＳＧＶＳＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＹＴＬＴＩＳＤＬＥＣＤＤＡＡＡＹＹＣＱＱＤＬＳＧＳＮＬＤＮＳＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ７＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号１１２
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＣＡＴＴＡＧＴＡＧＴＴＡＣＴＴＡＴＣＣ
Ａｂ７＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号１１３
ＱＡＳＱＳＩＳＳＹＬＳ
Ａｂ７＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号１１４
ＧＡＡＧＣＡＴＣＣＡＣＴＣＴＧＧＣＡＴＣＴ
Ａｂ７＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号１１５
ＥＡＳＴＬＡＳ
Ａｂ７＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号１１６
ＣＡＡＣＡＧＧＡＴＣＴＴＡＧＴＧＧＴＡＧＴＡＡＴＣＴＴＧＡＴＡＡＴＴＣＴ
Ａｂ７＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号１１７
ＱＱＤＬＳＧＳＮＬＤＮＳ
Ａｂ８＿ＶＨ ＶＨ
配列番号１１８
Figure 2022542863000029
Ａｂ８＿ＶＨ ＶＨ
配列番号１１９
ＱＳＶＥＥＳＧＧＲＬＶＴＰＧＴＰＬＴＬＴＣＳＶＳＧＩＤＬＳＳＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＧＶＩＹＡＳＧＳＴＹＹＡＳＷＡＫＧＲＦＴＩＳＫＴＳＴＴＶＤＬＫＩＴＳＰＴＴＧＤＴＡＴＹＦＣＶＲＤＴＴＡＴＹＮＹＦＮＬＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ８＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号１２０
ＡＧＣＴＡＴＧＣＡＡＴＧＡＧＣ
Ａｂ８＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号１２１
ＳＹＡＭＳ
Ａｂ８＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号１２２
ＧＴＣＡＴＴＴＡＴＧＣＴＡＧＴＧＧＴＡＧＣＡＣＡＴＡＣＴＡＣＧＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ８＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号１２３
ＶＩＹＡＳＧＳＴＹＹＡＳＷＡＫＧ
Ａｂ８＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号１２４
ＧＡＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＴＡＴＡＡＣＴＡＣＴＴＴＡＡＣＴＴＧ
Ａｂ８＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号１２５
ＤＴＴＡＴＹＮＹＦＮＬ
Ａｂ８＿ＶＬ ＶＬ
配列番号１２６
Figure 2022542863000030
Ａｂ８＿ＶＬ ＶＬ
配列番号１２７
ＡＹＤＭＴＱＴＰＡＳＶＥＶＡＶＧＧＴＡＴＩＫＣＱＡＳＱＳＩＹＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＥＡＳＴＬＡＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＤＬＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＱＳＬＳＰＳＮＶＧＲＲＶＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ８＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号１２８
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＣＡＴＴＴＡＣＡＡＣＴＡＣＴＴＡＧＣＣ
Ａｂ８＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号１２９
ＱＡＳＱＳＩＹＮＹＬＡ
Ａｂ８＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号１３０
ＧＡＡＧＣＡＴＣＣＡＣＴＣＴＧＧＣＣＴＣＣ
Ａｂ８＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号１３１
ＥＡＳＴＬＡＳ
Ａｂ８＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号１３２
ＣＡＡＣＡＧＡＧＴＴＴＧＡＧＴＣＣＴＡＧＴＡＡＴＧＴＴＧＧＴＣＧＡＡＧＧＧＴＴ
Ａｂ８＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号１３３
ＱＱＳＬＳＰＳＮＶＧＲＲＶ
Ａｂ９＿ＶＨ ＶＨ
配列番号１３４
Figure 2022542863000031
Ａｂ９＿ＶＨ ＶＨ
配列番号１３５
ＱＳＶＥＥＳＧＧＲＬＶＴＰＧＴＰＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＮＮＹＡＭＮＷＩＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＧＩＩＹＧＳＧＳＴＹＹＡＳＷＡＫＧＲＦＴＡＳＫＴＳＴＴＶＤＬＫＭＴＳＬＴＴＥＤＴＡＴＹＦＣＡＲＤＥＬＡＡＧＩＮＹＦＴＬＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ９＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号１３６
ＡＡＣＴＡＴＧＣＡＡＴＧＡＡＣ
Ａｂ９＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号１３７
ＮＹＡＭＮ
Ａｂ９＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号１３８
ＡＴＣＡＴＴＴＡＴＧＧＴＡＧＴＧＧＴＡＧＣＡＣＡＴＡＣＴＡＣＧＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ９＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号１３９
ＩＩＹＧＳＧＳＴＹＹＡＳＷＡＫＧ
Ａｂ９＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号１４０
ＧＡＴＧＡＡＣＴＡＧＣＴＧＣＴＧＧＴＡＴＴＡＡＴＴＡＣＴＴＴＡＣＣＴＴＧ
Ａｂ９＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号１４１
ＤＥＬＡＡＧＩＮＹＦＴＬ
Ａｂ９＿ＶＬ ＶＬ
配列番号１４２
Figure 2022542863000032
Ａｂ９＿ＶＬ ＶＬ
配列番号１４３
ＡＬＶＭＴＱＴＰＡＳＶＥＶＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＱＮＩＩＤＷＣＳＷＹＱＱＫＬＧＱＰＰＫＬＬＩＹＥＡＳＫＬＡＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＱＦＴＬＴＩＳＧＶＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＱＧＹＳＰＳＧＶＤＮＶＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ９＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号１４４
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＡＴＡＴＴＡＴＴＧＡＴＴＧＧＴＧＣＴＣＣ
Ａｂ９＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号１４５
ＱＡＳＱＮＩＩＤＷＣＳ
Ａｂ９＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号１４６
ＧＡＡＧＣＡＴＣＴＡＡＡＣＴＧＧＣＡＴＣＴ
Ａｂ９＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号１４７
ＥＡＳＫＬＡＳ
Ａｂ９＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号１４８
ＣＡＡＣＡＧＧＧＴＴＡＴＡＧＴＣＣＴＡＧＴＧＧＴＧＴＴＧＡＴＡＡＴＧＴＴ
Ａｂ９＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号１４９
ＱＱＧＹＳＰＳＧＶＤＮＶ
Ａｂ１０＿ＶＨ ＶＨ
配列番号１５０
Figure 2022542863000033
Ａｂ１０＿ＶＨ ＶＨ
配列番号１５１
ＱＳＬＥＥＳＧＧＲＬＶＴＰＧＴＰＬＴＬＴＣＴＶＳＧＩＤＬＳＳＹＡＶＧＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＹＩＧＩＩＹＡＳＧＮＴＷＹＡＳＷＶＫＧＲＦＴＩＳＫＴＳＴＴＶＤＬＫＭＴＳＬＴＴＥＤＴＡＴＹＦＣＡＲＧＨＧＡＴＹＤＹＦＮＬＷＧＰＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ１０＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号１５２
ＡＧＣＴＡＴＧＣＡＧＴＧＧＧＣ
Ａｂ１０＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号１５３
ＳＹＡＶＧ
Ａｂ１０＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号１５４
ＡＴＣＡＴＴＴＡＴＧＣＴＡＧＴＧＧＴＡＡＣＡＣＡＴＧＧＴＡＣＧＣＧＡＧＣＴＧＧＧＴＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ１０＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号１５５
ＩＩＹＡＳＧＮＴＷＹＡＳＷＶＫＧ
Ａｂ１０＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号１５６
ＧＧＴＣＡＴＧＧＴＧＣＴＡＣＴＴＡＴＧＡＣＴＡＣＴＴＴＡＡＴＴＴＧ
Ａｂ１０＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号１５７
ＧＨＧＡＴＹＤＹＦＮＬ
ＡＢ１０＿ＶＬ ＶＬ
配列番号１５８
Figure 2022542863000034
ＡＢ１０＿ＶＬ ＶＬ
配列番号１５９
ＡＹＤＭＴＱＴＰＡＳＶＥＶＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＱＳＩＳＳＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＤＡＳＤＬＡＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＹＴＬＴＩＳＧＶＱＣＤＤＡＡＴＹＹＣＱＱＧＬＡＴＡＮＶＤＮＶＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
ＡＢ１０＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号１６０
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＣＡＴＴＡＧＣＡＧＴＴＧＧＴＴＡＧＣＣ
ＡＢ１０＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号１６１
ＱＡＳＱＳＩＳＳＷＬＡ
ＡＢ１０＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号１６２
ＧＡＴＧＣＡＴＣＣＧＡＴＣＴＧＧＣＡＴＣＴ
ＡＢ１０＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号１６３
ＤＡＳＤＬＡＳ
ＡＢ１０＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号１６４
ＣＡＡＣＡＧＧＧＴＣＴＴＧＣＴＡＣＴＧＣＴＡＡＴＧＴＴＧＡＴＡＡＴＧＴＴ
ＡＢ１０＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号１６５
ＱＱＧＬＡＴＡＮＶＤＮＶ
Ａｂ１１＿ＶＨ ＶＨ
配列番号１６６
Figure 2022542863000035
Ａｂ１１＿ＶＨ ＶＨ
配列番号１６７
ＱＳＬＥＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＴＬＴＬＴＣＴＡＳＧＦＳＦＳＳＳＹＷＩＣＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＧＣＩＹＧＳＴＤＡＹＮＡＮＷＡＫＧＲＦＡＩＳＱＴＳＳＴＴＶＴＬＱＭＴＳＬＰＡＡＤＴＡＴＹＦＣＡＲＨＤＧＤＩＧＷＴＬＤＬＷＧＰＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ１１＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号１６８
ＡＧＣＡＧＣＴＡＣＴＧＧＡＴＡＴＧＣ
Ａｂ１１＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号１６９
ＳＳＹＷＩＣ
Ａｂ１１＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号１７０
ＴＧＣＡＴＴＴＡＣＧＧＡＡＧＴＡＣＴＧＡＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＧＣＧＡＡＣＴＧＧＧＣＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ１１＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号１７１
ＣＩＹＧＳＴＤＡＹＮＡＮＷＡＫＧ
Ａｂ１１＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号１７２
ＣＡＴＧＡＴＧＧＴＧＡＴＡＴＴＧＧＴＴＧＧＡＣＣＴＴＧＧＡＣＴＴＧ
Ａｂ１１＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号１７３
ＨＤＧＤＩＧＷＴＬＤＬ
Ａｂ１１＿ＶＬ ＶＬ
配列番号１７４
Figure 2022542863000036
Ａｂ１１＿ＶＬ ＶＬ
配列番号１７５
ＡＹＤＭＴＱＴＰＡＳＶＥＶＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＬＴＩＧＴＲＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＫＡＳＴＬＡＳＧＶＳＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＱＦＡＬＴＩＳＤＬＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＱＡＡＹＶＴＤＩＤＮＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ１１＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号１７６
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＣＴＧＡＣＣＡＴＴＧＧＴＡＣＴＣＧＧＴＴＡＧＣＣ
Ａｂ１１＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号１７７
ＱＡＳＬＴＩＧＴＲＬＡ
Ａｂ１１＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号１７８
ＡＡＧＧＣＡＴＣＣＡＣＴＣＴＧＧＣＡＴＣＴ
Ａｂ１１＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号１７９
ＫＡＳＴＬＡＳ
Ａｂ１１＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号１８０
ＣＡＡＣＡＧＧＣＴＧＣＴＴＡＴＧＴＴＡＣＴＧＡＴＡＴＡＧＡＴＡＡＴＧＣＴ
Ａｂ１１＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号１８１
ＱＱＡＡＹＶＴＤＩＤＮＡ
Ａｂ１２＿ＶＨ ＶＨ
配列番号１８２
Figure 2022542863000037
Ａｂ１２＿ＶＨ ＶＨ
配列番号１８３
ＱＳＶＥＥＳＧＧＲＬＶＴＰＧＴＰＬＴＬＴＣＴＶＳＧＩＤＬＳＳＮＡＭＧＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＧＩＩＹＡＳＧＮＡＷＹＡＮＷＶＫＧＲＦＴＩＳＫＴＳＴＴＶＤＬＫＩＴＳＰＴＴＥＤＴＡＴＹＦＣＡＲＤＡＴＡＴＷＤＹＦＮＬＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ１２＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号１８４
ＡＧＣＡＡＴＧＣＡＡＴＧＧＧＣ
Ａｂ１２＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号１８５
ＳＮＡＭＧ
Ａｂ１２＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号１８６
ＡＴＣＡＴＴＴＡＴＧＣＴＡＧＴＧＧＴＡＡＣＧＣＡＴＧＧＴＡＣＧＣＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ１２＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号１８７
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Ａｂ１２＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号１８８
ＧＡＴＧＣＴＡＣＴＧＣＴＡＣＴＴＧＧＧＡＣＴＡＣＴＴＴＡＡＣＴＴＧ
Ａｂ１２＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号１８９
ＤＡＴＡＴＷＤＹＦＮＬ
Ａｂ１２＿ＶＬ ＶＬ
配列番号１９０
Figure 2022542863000038
Ａｂ１２＿ＶＬ ＶＬ
配列番号１９１
ＡＹＤＭＴＱＴＰＳＳＶＳＡＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＱＳＩＳＮＷＬＳＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＴＬＡＳＧＶＳＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＤＬＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＱＧＹＳＶＡＮＶＤＮＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ１２＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号１９２
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＣＡＴＴＡＧＴＡＡＴＴＧＧＴＴＡＴＣＣ
Ａｂ１２＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号１９３
ＱＡＳＱＳＩＳＮＷＬＳ
Ａｂ１２＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号１９４
ＡＧＧＧＣＧＴＣＣＡＣＴＣＴＧＧＣＡＴＣＴ
Ａｂ１２＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号１９５
ＲＡＳＴＬＡＳ
Ａｂ１２＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号１９６
ＣＡＡＣＡＧＧＧＴＴＡＴＡＧＴＧＴＴＧＣＴＡＡＴＧＴＧＧＡＴＡＡＴＧＣＴ
Ａｂ１２＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号１９７
ＱＱＧＹＳＶＡＮＶＤＮＡ
Ａｂ１３＿ＶＨ ＶＨ
配列番号１９８
Figure 2022542863000039
Ａｂ１３＿ＶＨ ＶＨ
配列番号１９９
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Ａｂ１３＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２００
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Ａｂ１３＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２０１
ＳＳＤＹＭＣ
Ａｂ１３＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２０２
ＴＧＣＡＴＴＴＡＴＡＣＴＧＧＴＧＡＴＧＧＴＡＣＣＡＣＡＴＡＣＴＡＣＧＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ１３＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２０３
ＣＩＹＴＧＤＧＴＴＹＹＡＳＷＡＫＧ
Ａｂ１３＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号２０４
ＧＧＧＧＣＴＧＧＴＧＴＴＧＧＴＴＣＴＴＡＴＧＧＴＴＡＴＡＡＴＴＴＧ
Ａｂ１３＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号２０５
ＧＡＧＶＧＳＹＧＹＮＬ
Ａｂ１３＿ＶＬ ＶＬ
配列番号２０６
Figure 2022542863000040
Ａｂ１３＿ＶＬ ＶＬ
配列番号２０７
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Ａｂ１３＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号２０８
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Ａｂ１３＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号２０９
ＱＡＳＱＮＩＹＳＮＬＡ
Ａｂ１３＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号２１０
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＣＴＣＴＧＧＣＡＴＣＴ
Ａｂ１３＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号２１１
ＲＡＳＴＬＡＳ
Ａｂ１３＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号２１２
ＣＡＡＡＧＣＴＡＴＴＡＴＧＣＧＡＧＴＡＧＴＡＴＴＡＧＴＡＡＴＴＡＴ
Ａｂ１３＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号２１３
ＱＳＹＹＡＳＳＩＳＮＹ
Ａｂ１４＿ＶＨ ＶＨ
配列番号２１４
Figure 2022542863000041
Ａｂ１４＿ＶＨ ＶＨ
配列番号２１５
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Ａｂ１４＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２１６
ＧＡＴＴＡＣＴＡＣＴＡＣＡＴＧＴＧＣ
Ａｂ１４＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２１７
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Ａｂ１４＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２１８
ＴＧＣＡＴＴＴＡＴＡＡＴＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＡＧＡＣＴＴＡＣＴＡＣＧＣＧＡＡＣＴＧＧＧＣＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ１４＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２１９
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Ａｂ１４＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号２２０
ＧＧＴＡＧＴＧＧＴＧＴＴＧＧＧＡＧＴＴＡＴＧＧＴＴＡＣＡＡＣＴＴＴ
Ａｂ１４＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号２２１
ＧＳＧＶＧＳＹＧＹＮＦ
Ａｂ１４＿ＶＬ ＶＬ
配列番号２２２
Figure 2022542863000042
Ａｂ１４＿ＶＬ ＶＬ
配列番号２２３
ＡＤＩＶＭＴＱＴＰＡＳＶＥＡＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＥＳＩＹＳＮＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＡＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＤＬＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＧＹＹＡＳＴＶＴＮＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ１４＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号２２４
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＧＡＧＡＧＣＡＴＴＴＡＣＡＧＣＡＡＴＴＴＡＧＣＣ
Ａｂ１４＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号２２５
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Ａｂ１４＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号２２６
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＡＴＣＴＧＧＣＡＴＣＴ
Ａｂ１４＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号２２７
ＲＡＳＮＬＡＳ
Ａｂ１４＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号２２８
ＣＡＡＧＧＣＴＡＴＴＡＴＧＣＣＡＧＴＡＣＴＧＴＴＡＣＴＡＡＴＧＣＴ
Ａｂ１４＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号２２９
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Ａｂ１５＿ＶＨ ＶＨ
配列番号２３０
Figure 2022542863000043
Ａｂ１５＿ＶＨ ＶＨ
配列番号２３１
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Ａｂ１５＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２３２
ＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＡＣＡＴＡＴＧＣ
Ａｂ１５＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２３３
ＤＹＹＹＩＣ
Ａｂ１５＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２３４
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Ａｂ１５＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２３５
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Ａｂ１５＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号２３６
ＧＧＴＡＧＴＧＧＴＧＴＴＧＧＧＡＧＴＴＡＴＧＧＴＴＡＣＡＡＣＴＴＴ
Ａｂ１５＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号２３７
ＧＳＧＶＧＳＹＧＹＮＦ
Ａｂ１５＿ＶＬ ＶＬ
配列番号２３８
Figure 2022542863000044
Ａｂ１５＿ＶＬ ＶＬ
配列番号２３９
ＡＤＩＶＭＴＱＴＰＡＳＶＥＡＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＥＮＩＹＳＮＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＡＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＤＬＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＧＹＹＡＳＴＶＴＮＧＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ１５＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号２４０
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Ａｂ１５＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号２４１
ＱＡＳＥＮＩＹＳＮＬＡ
Ａｂ１５＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号２４２
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＡＴＣＴＧＧＣＡＴＣＴ
Ａｂ１５＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号２４３
ＲＡＳＮＬＡＳ
Ａｂ１５＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号２４４
ＣＡＡＧＧＣＴＡＴＴＡＴＧＣＣＡＧＴＡＣＴＧＴＴＡＣＴＡＡＴＧＧＴ
Ａｂ１５＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号２４５
ＱＧＹＹＡＳＴＶＴＮＧ
Ａｂ１６＿ＶＨ ＶＨ
配列番号２４６
Figure 2022542863000045
Ａｂ１６＿ＶＨ ＶＨ
配列番号２４７
ＱＳＶＥＥＳＧＧＲＬＶＴＰＧＴＰＬＴＬＴＣＴＡＳＧＦＴＩＳＳＹＳＭＩＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＳＩＧＷＩＮＴＧＧＳＡＹＹＡＮＷＡＫＧＲＦＴＩＳＲＴＳＴＴＶＤＬＫＭＴＳＬＴＴＥＤＴＡＴＹＦＣＡＲＤＮＮＷＳＦＮＬＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ１６＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２４８
ＡＧＣＴＡＴＴＣＡＡＴＧＡＴＣ
Ａｂ１６＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２４９
ＳＹＳＭＩ
Ａｂ１６＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２５０
ＴＧＧＡＴＴＡＡＴＡＣＴＧＧＴＧＧＴＡＧＣＧＣＡＴＡＣＴＡＣＧＣＧＡＡＣＴＧＧＧＣＡＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ１６＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２５１
ＷＩＮＴＧＧＳＡＹＹＡＮＷＡＫＧ
Ａｂ１６＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号２５２
ＧＡＣＡＡＴＡＡＣＴＧＧＴＣＴＴＴＴＡＡＣＴＴＧ
Ａｂ１６＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号２５３
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ＡＢ１６＿ＶＬ ＶＬ
配列番号２５４
Figure 2022542863000046
ＡＢ１６＿ＶＬ ＶＬ
配列番号２５５
ＡＤＩＶＭＴＱＴＰＳＳＶＳＡＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＱＳＩＧＴＮＬＡＷＹＱＱＫＳＧＱＰＰＫＲＬＴＹＲＡＳＮＬＥＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＤＬＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＧＧＹＹＲＥＧＮＳＰＴＹＰＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
ＡＢ１６＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号２５６
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＣＡＧＡＧＣＡＴＴＧＧＴＡＣＴＡＡＴＴＴＡＧＣＣ
ＡＢ１６＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号２５７
ＱＡＳＱＳＩＧＴＮＬＡ
ＡＢ１６＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号２５８
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＡＴＣＴＧＧＡＡＴＣＴ
ＡＢ１６＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号２５９
ＲＡＳＮＬＥＳ
ＡＢ１６＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号２６０
ＣＡＡＧＧＣＧＧＴＴＡＴＴＡＴＣＧＴＧＡＧＧＧＴＡＡＴＡＧＴＣＣＣＡＣＴＴＡＴＣＣＴ
ＡＢ１６＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号２６１
ＱＧＧＹＹＲＥＧＮＳＰＴＹＰ
Ａｂ１７＿ＶＨ ＶＨ
配列番号２６２
Figure 2022542863000047
Ａｂ１７＿ＶＨ ＶＨ
配列番号２６３
ＱＲＱＬＥＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＡＬＴＬＴＣＫＡＳＧＩＤＦＳＳＹＹＹＩＣＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＡＣＩＹＡＧＤＧＴＴＹＹＡＴＷＡＥＧＲＦＴＳＳＫＴＳＳＴＴＶＴＬＱＭＴＳＬＴＡＡＤＴＡＴＹＦＣＡＲＧＳＧＶＧＳＹＧＹＮＬＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ１７＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２６４
ＡＧＣＴＡＣＴＡＣＴＡＣＡＴＡＴＧＴ
Ａｂ１７＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２６５
ＳＹＹＹＩＣ
Ａｂ１７＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２６６
ＴＧＣＡＴＴＴＡＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＧＧＴＡＣＣＡＣＴＴＡＣＴＡＣＧＣＧＡＣＣＴＧＧＧＣＧＧＡＡＧＧＣ
Ａｂ１７＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２６７
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配列番号２６９
ＧＳＧＶＧＳＹＧＹＮＬ
Ａｂ１７＿ＶＬ ＶＬ
配列番号２７０
Figure 2022542863000048
Ａｂ１７＿ＶＬ ＶＬ
配列番号２７１
ＡＤＩＶＭＴＱＴＰＡＳＶＥＡＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＥＹＩＹＳＮＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＤＬＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＧＹＦＰＳＩＩＴＮＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ１７＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号２７２
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＧＡＧＴＡＣＡＴＴＴＡＴＡＧＣＡＡＴＴＴＡＧＣＣ
Ａｂ１７＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号２７３
ＱＡＳＥＹＩＹＳＮＬＡ
Ａｂ１７＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号２７４
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＣＴＣＴＧＧＡＡＴＣＴ
Ａｂ１７＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号２７５
ＲＡＳＴＬＥＳ
Ａｂ１７＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号２７６
ＣＡＡＧＧＣＴＡＴＴＴＴＣＣＣＡＧＴＡＴＴＡＴＴＡＣＴＡＡＴＧＣＴ
Ａｂ１７＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号２７７
ＱＧＹＦＰＳＩＩＴＮＡ
Ａｂ１８＿ＶＨ ＶＨ
配列番号２７８
Figure 2022542863000049
Ａｂ１８＿ＶＨ ＶＨ
配列番号２７９
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Ａｂ１８＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２８０
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Ａｂ１８＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２８１
ＮＹＨＹＭＣ
Ａｂ１８＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２８２
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Ａｂ１８＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２８３
ＣＩＹＮＧＤＧＴＴＹＤＡＳＷＡＫＧ
Ａｂ１８＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号２８４
ＧＧＴＡＧＴＧＧＴＧＴＴＧＧＴＡＧＴＴＡＴＧＧＴＴＡＣＡＡＣＴＴＧ
Ａｂ１８＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号２８５
ＧＳＧＶＧＳＹＧＹＮＬ
Ａｂ１８＿ＶＬ ＶＬ
配列番号２８６
Figure 2022542863000050
Ａｂ１８＿ＶＬ ＶＬ
配列番号２８７
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Ａｂ１８＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号２８８
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Ａｂ１８＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号２８９
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Ａｂ１８＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号２９０
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＣＴＣＴＧＧＡＡＴＣＴ
Ａｂ１８＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号２９１
ＲＡＳＴＬＥＳ
Ａｂ１８＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号２９２
ＣＡＡＧＧＣＴＡＴＴＡＴＧＣＣＡＧＴＡＴＴＡＴＴＡＣＴＡＡＴＧＣＴ
Ａｂ１８＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号２９３
ＱＧＹＹＡＳＩＩＴＮＡ
Ａｂ１９＿ＶＨ ＶＨ
配列番号２９４
Figure 2022542863000051
Ａｂ１９＿ＶＨ ＶＨ
配列番号２９５
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Ａｂ１９＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２９６
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Ａｂ１９＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号２９７
ＮＹＹＹＭＣ
Ａｂ１９＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２９８
ＴＧＣＡＴＴＴＡＴＡＣＴＡＧＴＡＧＴＧＧＴＡＧＣＡＣＴＴＡＣＴＡＣＧＣＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＴＧＧＣ
Ａｂ１９＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号２９９
ＣＩＹＴＳＳＧＳＴＹＹＡＮＷＶＮＧ
Ａｂ１９＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号３００
ＴＣＴＴＴＴＧＧＴＧＴＴＧＧＴＧＧＴＴＡＣＴＣＣＴＴＴＡＡＣＴＴＧ
Ａｂ１９＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号３０１
ＳＦＧＶＧＧＹＳＦＮＬ
Ａｂ１９＿ＶＬ ＶＬ
配列番号３０２
Figure 2022542863000052
Ａｂ１９＿ＶＬ ＶＬ
配列番号３０３
ＡＹＤＭＴＱＴＰＡＳＶＥＶＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＱＳＩＳＳＹＬＳＷＹＱＱＫＰＧＱＲＰＫＬＬＩＹＲＡＳＴＬＡＳＧＶＳＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＹＳＬＳＩＳＧＭＥＣＤＤＡＡＴＹＹＣＱＱＧＴＴＩＳＤＶＤＮＶＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
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配列番号３０４
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Ａｂ１９＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号３０５
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配列番号３０６
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＣＴＣＴＧＧＣＡＴＣＴ
Ａｂ１９＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号３０７
ＲＡＳＴＬＡＳ
Ａｂ１９＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号３０８
ＣＡＧＣＡＧＧＧＴＡＣＴＡＣＴＡＴＴＡＧＴＧＡＴＧＴＴＧＡＴＡＡＴＧＴＴ
Ａｂ１９＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号３０９
ＱＱＧＴＴＩＳＤＶＤＮＶ
Ａｂ２０＿ＶＨ ＶＨ
配列番号３１０
Figure 2022542863000053
Ａｂ２０＿ＶＨ ＶＨ
配列番号３１１
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Ａｂ２０＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号３１２
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Ａｂ２０＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号３１３
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配列番号３１４
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Ａｂ２０＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号３１５
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Ａｂ２０＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号３１６
ＧＡＴＡＧＴＴＣＴＧＣＴＡＣＴＴＡＴＧＡＣＴＡＣＴＴＴＡＡＣＴＴＧ
Ａｂ２０＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
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ＤＳＳＡＴＹＤＹＦＮＬ
Ａｂ２０＿ＶＬ ＶＬ
配列番号３１８
Figure 2022542863000054
Ａｂ２０＿ＶＬ ＶＬ
配列番号３１９
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Ａｂ２０＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号３２０
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Ａｂ２０＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号３２１
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Ａｂ２０＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号３２２
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Ａｂ２０＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号３２３
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Ａｂ２０＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号３２４
ＣＡＡＣＡＡＧＣＣＴＴＧＡＧＴＣＣＴＡＧＴＡＡＴＧＴＴＧＡＴＡＡＴＧＣＴ
Ａｂ２０＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号３２５
ＱＱＡＬＳＰＳＮＶＤＮＡ
Ａｂ２１＿ＶＨ ＶＨ
配列番号３２６
Figure 2022542863000055
Ａｂ２１＿ＶＨ ＶＨ
配列番号３２７
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Ａｂ２１＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号３２８
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Ａｂ２１＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号３２９
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Ａｂ２１＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号３３０
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配列番号３３１
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配列番号３３２
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Ａｂ２１＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号３３３
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Ａｂ２１＿ＶＬ ＶＬ
配列番号３３４
Figure 2022542863000056
Ａｂ２１＿ＶＬ ＶＬ
配列番号３３５
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Ａｂ２１＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号３３６
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Ａｂ２１＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号３３７
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配列番号３３８
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Ａｂ２１＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号３３９
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Ａｂ２１＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号３４０
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Ａｂ２１＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号３４１
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Ａｂ２２＿ＶＨ ＶＨ
配列番号３４２
Figure 2022542863000057
Ａｂ２２＿ＶＨ ＶＨ
配列番号３４３
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Ａｂ２２＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号３４４
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配列番号３４５
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配列番号３４６
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配列番号３４７
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Ａｂ２２＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号３４８
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Ａｂ２２＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号３４９
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Ａｂ２２＿ＶＬ ＶＬ
配列番号３５０
Figure 2022542863000058
Ａｂ２２＿ＶＬ ＶＬ
配列番号３５１
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配列番号３５２
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配列番号３５３
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配列番号３５４
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配列番号３５５
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配列番号３５６
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Ａｂ２２＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号３５７
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Ａｂ２３＿ＶＨ ＶＨ
配列番号３５８
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Ａｂ２３＿ＶＨ ＶＨ
配列番号３５９
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配列番号３６０
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配列番号３６１
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配列番号３６２
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配列番号３６３
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配列番号３６４
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配列番号３６５
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配列番号３６６
Figure 2022542863000060
Ａｂ２３＿ＶＬ ＶＬ
配列番号３６７
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配列番号３６８
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配列番号３６９
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配列番号３７１
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配列番号３７２
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配列番号３７３
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配列番号３７４
Figure 2022542863000061
Ａｂ２４＿ＶＨ ＶＨ
配列番号３７５
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配列番号３７７
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配列番号３７８
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配列番号３７９
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配列番号３８０
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Ａｂ２４＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号３８１
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Ａｂ２４＿ＶＬ ＶＬ
配列番号３８２
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Ａｂ２４＿ＶＬ ＶＬ
配列番号３８３
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配列番号３８４
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Ａｂ２４＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号３８５
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配列番号３８６
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＡＴＣＴＧＧＡＡＴＣＴ
Ａｂ２４＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号３８７
ＲＡＳＮＬＥＳ
Ａｂ２４＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号３８８
ＣＡＡＧＧＣＴＡＴＴＡＴＧＣＣＡＧＴＧＴＴＧＴＴＡＣＡＡＡＴＧＧＴ
Ａｂ２４＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号３８９
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Ａｂ２５＿ＶＨ ＶＨ
配列番号３９０
Figure 2022542863000063
Ａｂ２５＿ＶＨ ＶＨ
配列番号３９１
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配列番号３９２
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配列番号３９３
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配列番号３９４
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配列番号３９５
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配列番号３９６
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Ａｂ２５＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号３９７
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Ａｂ２５＿ＶＬ ＶＬ
配列番号３９８
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Ａｂ２５＿ＶＬ ＶＬ
配列番号３９９
ＡＤＩＶＭＴＱＴＰＡＳＶＥＡＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＥＳＩＹＳＮＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＤＬＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＧＹＹＡＳＩＩＴＮＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ２５＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号４００
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＧＡＧＡＧＣＡＴＴＴＡＴＡＧＣＡＡＴＴＴＡＧＣＣ
Ａｂ２５＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号４０１
ＱＡＳＥＳＩＹＳＮＬＡ
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配列番号４０２
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＣＴＣＴＧＧＡＡＴＣＴ
Ａｂ２５＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号４０３
ＲＡＳＴＬＥＳ
Ａｂ２５＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号４０４
ＣＡＡＧＧＣＴＡＴＴＡＴＧＣＣＡＧＴＡＴＴＡＴＴＡＣＴＡＡＴＧＣＴ
Ａｂ２５＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号４０５
ＱＧＹＹＡＳＩＩＴＮＡ
Ａｂ２６＿ＶＨ ＶＨ
配列番号４０６
Figure 2022542863000065
Ａｂ２６＿ＶＨ ＶＨ
配列番号４０７
ＱＳＶＥＥＳＧＧＧＬＶＫＰＥＧＳＬＴＬＴＣＫＡＳＧＦＤＬＳＳＹＹＹＭＣＷＶＲＱＡＰＧＫＧＰＥＷＩＡＣＩＹＡＧＤＧＴＴＹＹＡＳＷＡＫＧＲＦＴＩＳＫＴＳＳＴＴＶＴＬＱＭＴＳＬＴＡＡＤＴＡＴＹＦＣＡＲＧＴＧＶＧＳＹＧＹＮＬＷＧＰＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ２６＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号４０８
ＡＧＣＴＡＣＴＡＣＴＡＣＡＴＧＴＧＣ
Ａｂ２６＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号４０９
ＳＹＹＹＭＣ
Ａｂ２６＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号４１０
ＴＧＣＡＴＴＴＡＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＧＧＣＡＣＣＡＣＡＴＡＣＴＡＣＧＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＡＡＧＧＣ
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ＣＩＹＡＧＤＧＴＴＹＹＡＳＷＡＫＧ
Ａｂ２６＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号４１２
ＧＧＴＡＣＴＧＧＴＧＴＴＧＧＴＡＧＣＴＡＴＧＧＴＴＡＣＡＡＣＴＴＧ
Ａｂ２６＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号４１３
ＧＴＧＶＧＳＹＧＹＮＬ
Ａｂ２６＿ＶＬ ＶＬ
配列番号４１４
Figure 2022542863000066
Ａｂ２６＿ＶＬ ＶＬ
配列番号４１５
ＡＤＩＶＭＴＱＴＰＡＳＶＥＡＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＥＮＩＹＳＮＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＥＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＤＬＥＣＤＤＡＡＴＹＹＣＱＧＹＹＰＳＡＶＴＮＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ２６＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号４１６
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＧＡＧＡＡＣＡＴＴＴＡＣＡＧＣＡＡＴＴＴＡＧＣＣ
Ａｂ２６＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号４１７
ＱＡＳＥＮＩＹＳＮＬＡ
Ａｂ２６＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号４１８
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＡＴＣＴＧＧＡＡＴＣＴ
Ａｂ２６＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号４１９
ＲＡＳＮＬＥＳ
Ａｂ２６＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号４２０
ＣＡＡＧＧＣＴＡＴＴＡＴＣＣＣＡＧＴＧＣＴＧＴＴＡＣＴＡＡＴＧＣＴ
Ａｂ２６＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号４２１
ＱＧＹＹＰＳＡＶＴＮＡ
Ａｂ２７＿ＶＨ ＶＨ
配列番号４２２
Figure 2022542863000067
Ａｂ２７＿ＶＨ ＶＨ
配列番号４２３
ＱＳＶＥＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＴＬＴＬＴＣＫＡＳＧＩＤＦＳＳＹＨＹＭＣＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＡＣＩＹＮＧＤＧＤＴＹＹＡＳＷＡＫＧＲＦＴＩＳＫＴＳＳＴＴＶＴＬＱＭＴＳＬＴＡＡＤＴＡＴＹＦＣＡＲＧＳＧＶＧＳＹＧＹＮＬＷＧＰＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ２７＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号４２４
ＡＧＴＴＡＣＣＡＣＴＡＣＡＴＧＴＧＣ
Ａｂ２７＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号４２５
ＳＹＨＹＭＣ
Ａｂ２７＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号４２６
ＴＧＣＡＴＴＴＡＴＡＡＴＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＡＣＡＣＴＴＡＣＴＡＣＧＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ２７＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号４２７
ＣＩＹＮＧＤＧＤＴＹＹＡＳＷＡＫＧ
Ａｂ２７＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号４２８
ＧＧＴＡＧＴＧＧＴＧＴＴＧＧＴＡＧＴＴＡＴＧＧＴＴＡＣＡＡＴＴＴＧ
Ａｂ２７＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号４２９
ＧＳＧＶＧＳＹＧＹＮＬ
Ａｂ２７＿ＶＬ ＶＬ
配列番号４３０
Figure 2022542863000068
Ａｂ２７＿ＶＬ ＶＬ
配列番号４３１
ＡＤＩＶＭＴＱＴＰＡＳＶＥＡＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＥＳＩＹＳＮＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＥＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＤＬＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＧＹＹＡＳＴＴＴＮＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ２７＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号４３２
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＧＡＧＡＧＣＡＴＴＴＡＣＡＧＣＡＡＴＴＴＡＧＣＣ
Ａｂ２７＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号４３３
ＱＡＳＥＳＩＹＳＮＬＡ
Ａｂ２７＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号４３４
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＡＴＣＴＧＧＡＡＴＣＴ
Ａｂ２７＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号４３５
ＲＡＳＮＬＥＳ
Ａｂ２７＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号４３６
ＣＡＡＧＧＣＴＡＴＴＡＴＧＣＣＡＧＴＡＣＴＡＣＴＡＣＴＡＡＴＧＣＴ
Ａｂ２７＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号４３７
ＱＧＹＹＡＳＴＴＴＮＡ
Ａｂ２８＿ＶＨ ＶＨ
配列番号４３８
Figure 2022542863000069
Ａｂ２８＿ＶＨ ＶＨ
配列番号４３９
ＱＱＱＬＥＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＴＬＴＬＴＣＫＧＳＧＩＤＦＮＤＹＹＹＭＣＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＡＣＩＹＮＧＤＧＥＴＹＹＡＮＷＡＫＧＲＦＴＩＳＫＴＳＳＴＴＶＴＬＱＭＴＳＬＴＡＡＤＴＡＴＹＦＣＡＲＧＳＧＶＧＳＹＧＹＮＦＷＧＰＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ２８＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号４４０
ＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＡＣＡＴＧＴＧＣ
Ａｂ２８＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号４４１
ＤＹＹＹＭＣ
Ａｂ２８＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号４４２
ＴＧＣＡＴＴＴＡＴＡＡＴＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＡＧＡＣＴＴＡＣＴＡＣＧＣＧＡＡＣＴＧＧＧＣＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ２８＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号４４３
ＣＩＹＮＧＤＧＥＴＹＹＡＮＷＡＫＧ
Ａｂ２８＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号４４４
ＧＧＴＡＧＴＧＧＴＧＴＴＧＧＧＡＧＴＴＡＴＧＧＴＴＡＣＡＡＣＴＴＴ
Ａｂ２８＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号４４５
ＧＳＧＶＧＳＹＧＹＮＦ
Ａｂ２８＿ＶＬ ＶＬ
配列番号４４６
Figure 2022542863000070
Ａｂ２８＿ＶＬ ＶＬ
配列番号４４７
ＡＤＩＶＭＴＱＴＰＡＳＶＥＡＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＥＳＩＹＳＮＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＡＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＤＬＥＣＡＤＡＡＴＹＹＣＱＧＹＹＡＳＴＶＴＮＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ２８＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号４４８
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＧＡＧＡＧＣＡＴＴＴＡＣＡＧＣＡＡＴＴＴＡＧＣＣ
Ａｂ２８＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号４４９
ＱＡＳＥＳＩＹＳＮＬＡ
Ａｂ２８＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号４５０
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＡＴＣＴＧＧＣＡＴＣＴ
Ａｂ２８＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号４５１
ＲＡＳＮＬＡＳ
Ａｂ２８＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号４５２
ＣＡＡＧＧＣＴＡＴＴＡＴＧＣＣＡＧＴＡＣＴＧＴＴＡＣＴＡＡＴＧＣＴ
Ａｂ２８＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号４５３
ＱＧＹＹＡＳＴＶＴＮＡ
Ａｂ２９＿ＶＨ ＶＨ
配列番号４５４
Figure 2022542863000071
Ａｂ２９＿ＶＨ ＶＨ
配列番号４５５
ＱＱＱＬＥＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＴＬＴＬＴＣＫＡＳＧＩＤＦＳＳＹＨＹＭＣＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＡＣＩＹＮＧＤＧＤＴＹＹＡＳＷＡＫＧＲＦＴＩＳＫＴＳＳＴＴＶＴＬＱＭＴＳＬＴＡＡＤＴＡＴＹＦＣＡＲＧＳＧＶＧＳＹＧＹＮＬＷＧＰＧＴＬＶＴＶＳＳ
Ａｂ２９＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号４５６
ＡＧＴＴＡＣＣＡＣＴＡＣＡＴＧＴＧＣ
Ａｂ２９＿ＶＨ ＣＤＲＨ１
配列番号４５７
ＳＹＨＹＭＣ
Ａｂ２９＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号４５８
ＴＧＣＡＴＴＴＡＴＡＡＴＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＡＣＡＣＴＴＡＣＴＡＣＧＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＡＡＧＧＣ
Ａｂ２９＿ＶＨ ＣＤＲＨ２
配列番号４５９
ＣＩＹＮＧＤＧＤＴＹＹＡＳＷＡＫＧ
Ａｂ２９＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号４６０
ＧＧＴＡＧＴＧＧＴＧＴＴＧＧＴＡＧＴＴＡＴＧＧＴＴＡＣＡＡＴＴＴＧ
Ａｂ２９＿ＶＨ ＣＤＲＨ３
配列番号４６１
ＧＳＧＶＧＳＹＧＹＮＬ
Ａｂ２９＿ＶＬ ＶＬ
配列番号４６２
Figure 2022542863000072
Ａｂ２９＿ＶＬ ＶＬ
配列番号４６３
ＡＤＩＶＭＴＱＴＰＡＳＶＥＡＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＥＮＩＹＳＮＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＲＡＳＮＬＥＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＤＬＥＣＤＤＡＡＴＹＹＣＱＧＹＹＰＳＡＶＴＮＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲ
Ａｂ２９＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号４６４
ＣＡＧＧＣＣＡＧＴＧＡＧＡＡＣＡＴＴＴＡＣＡＧＣＡＡＴＴＴＡＧＣＣ
Ａｂ２９＿ＶＬ ＣＤＲＬ１
配列番号４６５
ＱＡＳＥＮＩＹＳＮＬＡ
Ａｂ２９＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号４６６
ＡＧＧＧＣＡＴＣＣＡＡＴＣＴＧＧＡＡＴＣＴ
Ａｂ２９＿ＶＬ ＣＤＲＬ２
配列番号４６７
ＲＡＳＮＬＥＳ
Ａｂ２９＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号４６８
ＣＡＡＧＧＣＴＡＴＴＡＴＣＣＣＡＧＴＧＣＴＧＴＴＡＣＴＡＡＴＧＣＴ
Ａｂ２９＿ＶＬ ＣＤＲＬ３
配列番号４６９
ＱＧＹＹＰＳＡＶＴＮＡ

Claims (114)

  1. ヒトｍＧｌｕＲ５に結合し、且つヒトｍＧｌｕＲ５に関連する少なくとも１つの生物学的効果に拮抗し、それを阻害し、それを中和し、又はそれを遮断する単離抗体、又は抗原結合抗体断片。
  2. ヒト、ヒト化、二重特異性、多重特異性、又はキメラ抗体又は抗原結合抗体断片である、請求項１に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  3. Ｆａｂ；Ｆ（ａｂ’）２；Ｆａｂ’断片；Ｆｖ断片；単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片；Ｆｄ断片；ｄＡｂ断片；ダイアボディ；ナノボディ；二価ナノボディ；サメ可変ＩｇＮＡＲドメイン；ＶＨＨ抗体；ラクダ科動物抗体；キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、二重特異性Ｔ細胞エンゲイジャー（Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｔ ｃｅｌｌ Ｅｎｇａｇｅｒ：ＢｉＴＥ）、及びミニボディから選択される抗原結合断片である、請求項１又は２に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  4. 前記抗体又は抗原結合抗体断片が、Ｎ－グリコシル化されていない、請求項１～３のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  5. ヒトｍＧｌｕＲ５をアロステリックに阻害する、請求項１～４のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  6. 任意選択で放射性リガンド結合阻害アッセイで測定したとき、ヒトｍＧｌｕＲ５への結合に関してキスカル酸と競合しない、請求項５に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  7. ヒトｍＧｌｕＲ１に結合しない、請求項１～６のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  8. ラット及び／又はカニクイザルｍＧｌｕＲ５と交差反応する、請求項１～７のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  9. 細胞質型ホスホ－ＥＲＫ（ｐＥＲＫ）シグナル伝達アッセイでｐＥＲＫの産生を阻害する、請求項１～８のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片であって、任意選択で前記ｐＥＲＫシグナル伝達アッセイにおける前記抗体又は抗原結合抗体断片のＩＣ５０が、１００ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、又は１０ｎＭ未満である、単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  10. 片頭痛に関連する１つ以上の症状を阻害する、請求項１～９のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  11. 対象に投与したときウンベルロン誘発性涙液分泌及び／又はウンベルロン誘発性顔面温度上昇を阻害する、請求項１～１０のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  12. 任意選択で末梢投与したとき、小分子ｍＧｌｕＲ５拮抗薬に関連する有害副作用、例えば、肝毒性及び／又は協調運動障害を誘発しない、請求項１～１１のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  13. 前記協調運動障害副作用が浮動性めまいである、請求項１２に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  14. （ｉ）配列番号９からなるＣＤＲ１配列；配列番号１１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号１７からなるＣＤＲ１配列；配列番号１９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｉｉ）配列番号２５からなるＣＤＲ１配列；配列番号２７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号３３からなるＣＤＲ１配列；配列番号３５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｉｉｉ）配列番号４１からなるＣＤＲ１配列；配列番号４３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号４９からなるＣＤＲ１配列；配列番号５１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号５３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｉｖ）配列番号５７からなるＣＤＲ１配列；配列番号５９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号６１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号６５からなるＣＤＲ１配列；配列番号６７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号６９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｖ）配列番号７３からなるＣＤＲ１配列；配列番号７５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号７７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号８１からなるＣＤＲ１配列；配列番号８３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号８５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｖｉ）配列番号８９からなるＣＤＲ１配列；配列番号９１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号９３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号９７からなるＣＤＲ１配列；配列番号９９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１０１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｖｉｉ）配列番号１０５からなるＣＤＲ１配列；配列番号１０７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１０９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号１１３からなるＣＤＲ１配列；配列番号１１５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１１７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｖｉｉｉ）配列番号１２１からなるＣＤＲ１配列；配列番号１２３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１２５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号１２９からなるＣＤＲ１配列；配列番号１３１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１３３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｉｘ）配列番号１３７からなるＣＤＲ１配列；配列番号１３９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１４１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号１４５からなるＣＤＲ１配列；配列番号１４７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１４９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘ）配列番号１５３からなるＣＤＲ１配列；配列番号１５５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１５７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号１６１からなるＣＤＲ１配列；配列番号１６３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１６５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｉ）配列番号１６９からなるＣＤＲ１配列；配列番号１７１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１７３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号１７７からなるＣＤＲ１配列；配列番号１７９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１８１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｉｉ）配列番号１８５からなるＣＤＲ１配列；配列番号１８７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１８９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号１９３からなるＣＤＲ１配列；配列番号１９５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号１９７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｉｉｉ）配列番号２０１からなるＣＤＲ１配列；配列番号２０３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２０５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号２０９からなるＣＤＲ１配列；配列番号２１１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２１３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｉｖ）配列番号２１７からなるＣＤＲ１配列；配列番号２１９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２２１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号２２５からなるＣＤＲ１配列；配列番号２２７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２２９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｖ）配列番号２３３からなるＣＤＲ１配列；配列番号２３５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２３７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号２４１からなるＣＤＲ１配列；配列番号２４３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２４５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｖｉ）配列番号２４９からなるＣＤＲ１配列；配列番号２５１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２５３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号２５７からなるＣＤＲ１配列；配列番号２５９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２６１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｖｉｉ）配列番号２６５からなるＣＤＲ１配列；配列番号２６７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２６９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号２７３からなるＣＤＲ１配列；配列番号２７５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２７７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｖｉｉｉ）配列番号２８１からなるＣＤＲ１配列；配列番号２８３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２８５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号２８９からなるＣＤＲ１配列；配列番号２９１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号２９３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｉｘ）配列番号２９７からなるＣＤＲ１配列；配列番号２９９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３０１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号３０５からなるＣＤＲ１配列；配列番号３０７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３０９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘ）配列番号３１３からなるＣＤＲ１配列；配列番号３１５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３１７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号３２１からなるＣＤＲ１配列；配列番号３２３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３２５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｉ）配列番号３２９からなるＣＤＲ１配列；配列番号３３１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３３３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号３３７からなるＣＤＲ１配列；配列番号３３９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３４１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｉｉ）配列番号３４５からなるＣＤＲ１配列；配列番号３４７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３４９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号３５３からなるＣＤＲ１配列；配列番号３５５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３５７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｉｉｉ）配列番号３６１からなるＣＤＲ１配列；配列番号３６３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３６５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号３６９からなるＣＤＲ１配列；配列番号３７１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３７３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｉｖ）配列番号３７７からなるＣＤＲ１配列；配列番号３７９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３８１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号３８５からなるＣＤＲ１配列；配列番号３８７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３８９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｖ）配列番号３９３からなるＣＤＲ１配列；配列番号３９５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号３９７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号４０１からなるＣＤＲ１配列；配列番号４０３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４０５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｖｉ）配列番号４０９からなるＣＤＲ１配列；配列番号４１１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４１３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号４１７からなるＣＤＲ１配列；配列番号４１９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４２１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｖｉｉ）配列番号４２５からなるＣＤＲ１配列；配列番号４２７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４２９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号４３３からなるＣＤＲ１配列；配列番号４３５からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４３７からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｖｉｉｉ）配列番号４４１からなるＣＤＲ１配列；配列番号４４３からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４４５からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号４４９からなるＣＤＲ１配列；配列番号４５１からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４５３からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖；又は
    （ｘｘｉｘ）配列番号４５７からなるＣＤＲ１配列；配列番号４５９からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４６１からなるＣＤＲ３配列を含むＶＨ鎖；及び／又は配列番号４６５からなるＣＤＲ１配列；配列番号４６７からなるＣＤＲ２配列；及び配列番号４６９からなるＣＤＲ３配列を含むＶＬ鎖
    を含む、請求項１～１３のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  15. （ｉ）配列番号７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号１５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｉｉ）配列番号２３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｉｉｉ）配列番号３９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号４７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｉｖ）配列番号５５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号６３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｖ）配列番号７１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号７９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｖｉ）配列番号８７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号９５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｖｉｉ）配列番号１０３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号１１１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｖｉｉｉ）配列番号１１９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号１２７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｉｘ）配列番号１３５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号１４３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘ）配列番号１５１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号１５９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｉ）配列番号１６７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号１７５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｉｉ）配列番号１８３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号１９１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｉｉｉ）配列番号１９９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号２０７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｉｖ）配列番号２１５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号２２３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｖ）配列番号２３１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号２３９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｖｉ）配列番号２４７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号２５５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｖｉｉ）配列番号２６３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号２７１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｖｉｉｉ）配列番号２７９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号２８７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｉｘ）配列番号２９５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３０３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘ）配列番号３１１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３１９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｉ）配列番号３２７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３３５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｉｉ）配列番号３４３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３５１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｉｉｉ）配列番号３５９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３６７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｉｖ）配列番号３７５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３８３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｖ）配列番号３９１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号３９９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｖｉ）配列番号４０７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号４１５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｖｉｉ）配列番号４２３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号４３１と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；
    （ｘｘｖｉｉｉ）配列番号４３９と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号４４７と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖；又は
    （ｘｘｉｘ）配列番号４５５と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＨ鎖、及び／又は配列番号４６３と少なくとも８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＶＬ鎖
    を含む、請求項１４に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  16. 請求項１４又は１５に記載の抗体と競合する及び／又はそれと同じ又は重複するエピトープに結合する単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  17. モノクローナル抗体；単一特異性抗体；多特異性抗体；ヒト化抗体；四量体抗体；四価抗体；多重特異性抗体；単鎖抗体；ドメイン特異抗体；シングルドメイン抗体；ドメイン欠失抗体；ｓｃＦｃ融合タンパク質；キメラ抗体；合成抗体；組換え抗体；ハイブリッド抗体；突然変異抗体；ＣＤＲグラフト抗体；抗体断片；Ｆａｂ；Ｆ（ａｂ’）２；Ｆａｂ’断片；Ｆｖ断片；単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片；Ｆｄ断片；ｄＡｂ断片；ダイアボディ；ナノボディ；二価ナノボディ；サメ可変ＩｇＮＡＲドメイン；ＶＨＨ抗体；ラクダ科動物抗体；及びミニボディからなる群から選択される、請求項１～１６のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  18. ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４ Ｆｃ領域を含む、請求項１～１７のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  19. エフェクター機能、半減期、タンパク質分解、又はグリコシル化のうちの少なくとも１つを改変するように修飾されているＦｃ領域を含む、請求項１～１８のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体。
  20. エフェクター機能が低下し、Ｎ－グリコシル化が除去され、及び／又はＦｃ受容体結合が低下するように修飾されている、請求項１９に記載の単離抗体又は抗原結合抗体。
  21. ＨＴＲＦ又はＡｌｐｈａＬＩＳＡ蛍光アッセイで測定したとき、１０ｎＭ未満、５ｎＭ未満、又は２ｎＭ未満のＥＣ５０でヒトｍＧｌｕＲ５の細胞外ドメインに結合する、請求項１～２０のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  22. 加えて、以下の修飾の１つ以上を有する：
    （ｉ）細胞毒性薬剤にコンジュゲートされる；
    （ｉｉ）二重特異性抗体に含まれる；
    （ｉｉｉ）多重特異性抗原結合タンパク質に含まれる；
    （ｉｖ）標識にコンジュゲートされる；及び
    （ｖ）別の治療用薬剤にコンジュゲートされる、
    請求項１～２１のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  23. 前記標識が、化学発光標識、常磁性標識、ＭＲＩ造影剤、蛍光標識、生物発光標識、又は放射性標識である、請求項２２に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  24. 片頭痛、胃食道逆流症（ＧＥＲＤ）、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、疼痛、ＯＡＢ／尿失禁、自閉症スペクトラム障害の症状、精神障害、又は神経障害を有する対象の治療に好適な、請求項１～２３のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片。
  25. 先行請求項のいずれか一項に記載の抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片に対して作製される抗イディオタイプ抗体又は抗原結合抗体断片であって、それが結合する前記抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片の１つ以上の生物学的効果を任意選択で中和する、抗イディオタイプ抗体又は抗原結合抗体断片。
  26. 請求項２５に記載の抗イディオタイプ抗体又は抗原結合抗体断片に対して作製される抗抗イディオタイプ抗体又は抗原結合抗体断片であって、任意選択で、それが結合する前記抗イディオタイプ抗体又は抗原結合抗体断片を中和する、抗抗イディオタイプ抗体又は抗原結合抗体断片。
  27. 薬学的に有効な量の請求項１～２６のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合抗体断片、又はかかる抗体又は抗原結合抗体断片を発現する細胞、任意選択で免疫細胞、例えば、Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ細胞、又はＮＫ細胞を含み、医薬希釈剤、担体、又は賦形剤を更に含む、医薬組成物。
  28. 対象の前記抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片のインビボレベルをモニタするため、又は対象における前記抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片のインビボ効果を中和するため、請求項２５に記載の抗イディオタイプ抗体又は抗体断片を使用する方法。
  29. 前記抗イディオタイプ抗体又は抗体断片が末梢に投与される、請求項２８に記載の方法。
  30. 前記抗イディオタイプ抗体又は抗体断片が中枢に投与される、請求項２８に記載の方法。
  31. 前記抗イディオタイプ抗体又は抗体断片が末梢及び中枢に投与される、請求項２８に記載の方法。
  32. 請求項１～２６のいずれか一項に記載の抗体又は抗原結合抗体断片をコードする単離ポリヌクレオチド。
  33. 請求項３２に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
  34. 請求項３３に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
  35. 単離された抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片を作製する方法であって、前記抗体又は抗原結合抗体断片の発現を許容する条件下で請求項３４に記載の宿主細胞を培養すること；及び前記培養培地又は宿主細胞から前記抗体又は抗原結合抗体断片を回収することを含む方法。
  36. 末梢又は中枢神経系に関連する障害を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の請求項１～２７のいずれか一項に記載の抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法。
  37. 前記抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物が末梢に投与される、請求項３６に記載の方法。
  38. 前記抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物が中枢に投与される、請求項３６に記載の方法。
  39. 前記抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物が末梢及び中枢に投与される、請求項３６に記載の方法。
  40. 前記抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物の投与が、以下の効果の１つ以上を有する：
    （ｉ）ｍＧｌｕＲ５シグナル伝達を阻害する；
    （ｉｉ）ｍＧｌｕＲ１を阻害しない；
    （ｉｉｉ）細胞質型ｐＥＲＫの産生を阻害する；
    （ｉｖ）浮動性めまい及び／又は他の運動機能副作用を生じない、
    請求項３６～３９のいずれか一項に記載の方法。
  41. 末梢神経系障害の治療又は予防に使用される、請求項３６～４０のいずれか一項に記載の方法。
  42. 中枢神経系障害の治療又は予防に使用される、請求項３６～４０のいずれか一項に記載の方法。
  43. 片頭痛の治療又は予防に使用される、請求項３６～４２のいずれか一項に記載の方法。
  44. 疼痛の治療又は予防に使用される、請求項３６～４２のいずれか一項に記載の方法。
  45. ＧＥＲＤの治療又は予防に使用される、請求項３６～４２のいずれか一項に記載の方法。
  46. ＩＢＳの治療又は予防に使用される、請求項３６～４２のいずれか一項に記載の方法。
  47. 過活動膀胱（ＯＡＢ）又は尿失禁の治療又は予防に使用される、請求項３６～４２のいずれか一項に記載の方法。
  48. 神経又は精神障害、任意選択でパーキンソン病及び／又はレボドパ誘発性ジスキネジアの治療又は予防に使用される、請求項３６～４２のいずれか一項に記載の方法。
  49. ｍＧｌｕＲ５活性に関連する病態、疾患、又は障害を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の請求項１～２７のいずれか一項に記載の抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法。
  50. 片頭痛を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の請求項１～２７のいずれか一項に記載の抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法。
  51. 片頭痛に関連する１つ以上の症状、任意選択で、血管運動症状（例えば、ホットフラッシュ、顔面紅潮、発汗、及び寝汗）、羞明、音声恐怖症、嗅覚過敏症、流涙／涙液分泌、回転性めまい、浮動性めまい、悪心、嘔吐、頭痛、及びアウラを治療する、又はかかる１つ以上の症状の頻度及び／又は重症度を低減する、請求項５０に記載の方法。
  52. 月間片頭痛発生率が、前記抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物の投与後に減少する、請求項５０又は５１に記載の方法。
  53. 前記対象が、偶発性片頭痛又は慢性片頭痛を有するか、又はそれと診断される、請求項５０～５２のいずれか一項に記載の方法。
  54. 前記対象が、群発性頭痛を有するか、又はそれと診断される、請求項５０～５２のいずれか一項に記載の方法。
  55. 前記患者が、過去に片頭痛型頭痛に対する予防療法を受けたことがない、請求項５０～５４のいずれか一項に記載の方法。
  56. 前記患者が、少なくとも１つの他の片頭痛型頭痛予防療法、任意選択で、抗てんかん薬、三環系抗鬱薬、又はβ遮断薬に失敗したか、又はそれに対する忍容性がない、請求項５０～５５のいずれか一項に記載の方法。
  57. ＧＥＲＤを治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の請求項１～２７のいずれか一項に記載の抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法。
  58. 前記胃食道逆流症が、非びらん性逆流症である、請求項５７に記載の方法。
  59. 前記胃食道逆流症が、びらん性食道炎である、請求項５７に記載の方法。
  60. 過敏性腸症候群（ＩＢＳ）を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の請求項１～２７のいずれか一項に記載の抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法。
  61. 前記ＩＢＳが、下痢型ＩＢＳ、便秘型ＩＢＳ、又は交代性腸管運動型ＩＢＳである、請求項６０に記載の方法。
  62. 過活動膀胱（ＯＡＢ）を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の請求項１～２７のいずれか一項に記載の抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法。
  63. 尿意切迫感、尿意頻数、夜間多尿、又は切迫性尿失禁のうちの１つ以上を治療又は予防する、請求項６２に記載の方法。
  64. 尿失禁を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の請求項１～２７のいずれか一項に記載の抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法。
  65. 前記尿失禁が、腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁、溢流性尿失禁、混合型尿失禁、器質性尿失禁、機能性尿失禁、夜間尿失禁、一過性尿失禁、くすくす笑い尿失禁、便尿失禁、排尿後尿滴下、及び性交時尿失禁から選択される、請求項６４に記載の方法。
  66. 自閉症スペクトラム障害に関連する１つ以上の症状を治療し、又は軽減若しくは予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の請求項１～２７のいずれか一項に記載の抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法。
  67. 前記１つ以上の症状が、社会的及び機能的コミュニケーション障害、不安、不注意、多動、感覚反応性の変化、自傷、攻撃性、認知機能障害、及び日常生活技能の低下から選択される、請求項６６に記載の方法。
  68. 神経又は精神障害を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の請求項１～２７のいずれか一項に記載の抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法。
  69. 前記神経又は精神障害が、統合失調症、統合失調症様障害、統合失調感情障害、妄想性障害、短期精神病性障害、共有精神病性障害、一般身体疾患による精神病性障害、物質誘発性精神病性障害、特定不能の精神病性障害、認知症に関連する精神病、大鬱病性障害、気分変調性障害、月経前不快気分障害、特定不能の抑鬱障害、双極Ｉ型障害、双極ＩＩ型障害、気分循環性障害、特定不能の双極性障害、一般身体疾患による気分障害、物質誘発性気分障害、特定不能の気分障害、全般性不安障害、強迫性障害、パニック障害、急性ストレス障害、心的外傷後ストレス障害、精神遅滞、広汎性発達障害、注意欠陥障害、注意欠陥／多動性障害、破壊的行動障害、妄想型人格障害、分裂病型人格障害、統合失調型人格障害、チック障害、トゥレット症候群、物質依存症、物質乱用、物質離脱症状、抜毛癖、及び認知が損なわれている状態、アルツハイマー病、パーキンソン病、パーキンソン病患者におけるレボドパ誘発性ジスキネジア、ハンチントン病（Ｈｕｎｔｉｎｇｄｏｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、レビー小体認知症、ＨＩＶ疾患による認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病による認知症、健忘障害、軽度認知障害、加齢関連認知低下、食欲不振症及び過食症などの摂食障害、並びに肥満症から選択される、請求項６８に記載の方法。
  70. アルコール、ニコチン、コカイン、アンフェタミン、ベンゾジアゼピン、鎮痛薬、オピエート又は他の物質耐性又は依存、神経性過食症、神経性食欲不振症、ギャンブル依存、性依存、又は強迫性障害を含めた行動及び依存障害の治療又は予防に使用される、請求項６８又は６９に記載の方法。
  71. 神経変性、神経毒性、虚血、パーキンソン病、記憶障害、アルツハイマー病、認知症、及び振戦譫妄の群から選択される神経障害の治療又は予防に使用される、請求項６８又は６９に記載の方法。
  72. 疼痛を治療又は予防する方法であって、それを必要としている対象に、治療又は予防有効量の請求項１～２７のいずれか一項に記載の抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物を投与することを含む方法。
  73. 前記疼痛が急性痛及び／又は慢性痛であり、神経因性疼痛、中枢性疼痛症候群、術後痛、骨及び関節痛、反復動作による疼痛、歯痛、癌性疼痛、筋筋膜痛、周術期痛、慢性痛、急性痛、月経困難症、アンギナに伴う疼痛、炎症痛、頭痛、片頭痛及び群発性頭痛、一次痛覚過敏、二次痛覚過敏、一次アロディニア、二次アロディニア、又は他の疼痛から選択される、請求項７２に記載の方法。
  74. 前記対象が哺乳類である、請求項３６～７３のいずれか一項に記載の方法。
  75. 前記哺乳類がヒトである、請求項７４に記載の方法。
  76. 前記哺乳類が非ヒト霊長類である、請求項７４に記載の方法。
  77. 前記哺乳類がげっ歯類である、請求項７４に記載の方法。
  78. 前記抗体又は抗原結合抗体断片がＮ－グリコシル化されていない、請求項３６～７７のいずれか一項に記載の方法。
  79. 前記抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物が、単剤療法として投与される、請求項３６～７８のいずれか一項に記載の方法。
  80. 前記抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物が、第２の治療用薬剤、任意選択で別の生物学的製剤、更に任意選択で抗ＣＧＲＰ抗体及び／又は抗ＰＡＣＡＰ抗体と組み合わせて投与される、請求項３６～７８のいずれか一項に記載の方法。
  81. 前記抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物が末梢に投与される、請求項３６～８０のいずれか一項に記載の方法。
  82. 前記抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物が中枢に投与される、請求項３６～８０のいずれか一項に記載の方法。
  83. 前記抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物が末梢及び中枢に投与される、請求項３６～８０のいずれか一項に記載の方法。
  84. 前記抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物が、経腸的に、非経口的に、又は局所的に投与され、好ましくは前記投与が非経口である、請求項３６～８０のいずれか一項に記載の方法。
  85. 前記非経口投与が静脈内である、請求項８４に記載の方法。
  86. 前記投与が髄腔内である、請求項８２に記載の方法。
  87. 前記抗体、抗原結合抗体断片、又は医薬組成物の投与が、前記患者に有害な中枢神経系副作用を実質的に引き起こさない、請求項３６～８６のいずれか一項に記載の方法。
  88. 小分子ｍＧｌｕＲ５拮抗薬に関連する副作用を誘発しない、請求項８７に記載の方法。
  89. 浮動性めまいを引き起こさない、請求項８７に記載の方法。
  90. ｍＧｌｕＲ５発現の上方制御に関連する病態を診断する方法であって、
    （ｉ）前記病態の媒介に関与する細胞又は組織を単離すること；
    （ｉｉ）請求項１～２６のいずれか一項に記載の抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片を前記細胞に接触させること；及び
    （ｉｉｉ）前記細胞に結合した抗ｍＧｌｕＲ５抗体又は抗原結合抗体断片のレベルを検出すること
    を含む方法。
  91. 片頭痛、ＧＥＲＤ、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、過活動膀胱（ＯＡＢ）、尿失禁、自閉症スペクトラム障害、神経又は精神障害、行動及び依存障害、神経障害、又は疼痛の治療又は予防における使用のための、請求項１～２７のいずれか一項に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
  92. 片頭痛に関連する１つ以上の症状、任意選択で、血管運動症状（例えば、ホットフラッシュ、顔面紅潮、発汗、及び寝汗）、羞明、音声恐怖症、嗅覚過敏症、流涙／涙液分泌、回転性めまい、浮動性めまい、悪心、嘔吐、頭痛、及びアウラの治療又は予防における使用のための、又はかかる１つ以上の症状の頻度及び／又は重症度を低減する、請求項９１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
  93. 前記片頭痛が、偶発性片頭痛、慢性片頭痛又は群発性頭痛を含む群から選択される、請求項９１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
  94. 過去に片頭痛型頭痛に対する予防療法を受けたことがない患者の治療における使用のための、請求項９１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
  95. 非びらん性逆流症又はびらん性食道炎である胃食道逆流症の治療又は予防における使用のための、請求項９１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
  96. 下痢型ＩＢＳ、便秘型ＩＢＳ、又は交代性腸管運動型ＩＢＳの治療又は予防における使用のための、請求項９１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
  97. 尿意切迫感、尿意頻数、夜間多尿、又は切迫性尿失禁の治療又は予防における使用のための、請求項９１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
  98. 腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁、溢流性尿失禁、混合型尿失禁、器質性尿失禁、機能性尿失禁、夜間尿失禁、一過性尿失禁、くすくす笑い尿失禁、便尿失禁、排尿後尿滴下、及び性交時尿失禁の治療又は予防における使用のための、請求項９１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
  99. 社会的及び機能的コミュニケーション障害、不安、不注意、多動、感覚反応性の変化、自傷、攻撃性、認知機能障害、及び日常生活技能の低下の治療又は予防における使用のための、請求項９１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
  100. 統合失調症、統合失調症様障害、統合失調感情障害、妄想性障害、短期精神病性障害、共有精神病性障害、一般身体疾患による精神病性障害、物質誘発性精神病性障害、特定不能の精神病性障害、認知症に関連する精神病、大鬱病性障害、気分変調性障害、月経前不快気分障害、特定不能の抑鬱障害、双極Ｉ型障害、双極ＩＩ型障害、気分循環性障害、特定不能の双極性障害、一般身体疾患による気分障害、物質誘発性気分障害、特定不能の気分障害、全般性不安障害、強迫性障害、パニック障害、急性ストレス障害、心的外傷後ストレス障害、精神遅滞、広汎性発達障害、注意欠陥障害、注意欠陥／多動性障害、破壊的行動障害、妄想型人格障害、分裂病型人格障害、統合失調型人格障害、チック障害、トゥレット症候群、物質依存症、物質乱用、物質離脱症状、抜毛癖、及び認知が損なわれている状態、アルツハイマー病、パーキンソン病、パーキンソン病患者におけるレボドパ誘発性ジスキネジア、ハンチントン病（Ｈｕｎｔｉｎｇｄｏｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、レビー小体認知症、ＨＩＶ疾患による認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病による認知症、健忘障害、軽度認知障害、加齢関連認知低下、食欲不振症及び過食症などの摂食障害、並びに肥満症の治療又は予防における使用のための、請求項９１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
  101. 虚血、パーキンソン病、記憶障害、アルツハイマー病、認知症、及び振戦譫妄の治療又は予防における使用のための、請求項９１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
  102. 神経因性疼痛、中枢性疼痛症候群、術後痛、骨及び関節痛、反復動作による疼痛、歯痛、癌性疼痛、筋筋膜痛、周術期痛、慢性痛、急性痛、月経困難症、アンギナに伴う疼痛、炎症痛、頭痛、片頭痛及び群発性頭痛、一次痛覚過敏、二次痛覚過敏、一次アロディニア、二次アロディニア、又は他の疼痛の治療又は予防における使用のための、請求項９１に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物。
  103. 片頭痛、ＧＥＲＤ、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、過活動膀胱（ＯＡＢ）、尿失禁、自閉症スペクトラム障害、神経又は精神障害、行動及び依存障害、神経障害、又は疼痛の治療又は予防用医薬品の製造のための、請求項１～２７のいずれか一項に記載の抗体若しくは抗原結合抗体断片、又は医薬組成物の使用。
  104. 前記治療又は予防が、片頭痛に関連する症状、任意選択で、血管運動症状（例えば、ホットフラッシュ、顔面紅潮、発汗、及び寝汗）、羞明、音声恐怖症、嗅覚過敏症、流涙／涙液分泌、回転性めまい、浮動性めまい、悪心、嘔吐、頭痛、及びアウラの治療又は予防であるか、又はかかる１つ以上の症状の頻度及び／又は重症度を低減する、請求項１０３に記載の使用。
  105. 前記片頭痛が、偶発性片頭痛、慢性片頭痛又は群発性頭痛を含む群から選択される、請求項１０３に記載の使用。
  106. 過去に片頭痛型頭痛に対する予防療法を受けたことがない患者の治療又は予防のための使用である、請求項１０３に記載の使用。
  107. 前記治療又は予防が、非びらん性逆流症又はびらん性食道炎である胃食道逆流症の治療のための治療又は予防である、請求項１０３に記載の使用。
  108. 前記治療又は予防が、下痢型ＩＢＳ、便秘型ＩＢＳ、又は交代性腸管運動型ＩＢＳの治療又は予防である、請求項１０３に記載の使用。
  109. 前記治療又は予防が、尿意切迫感、尿意頻数、夜間多尿、又は切迫性尿失禁の治療又は予防である、請求項１０３に記載の使用。
  110. 前記治療又は予防が、腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁、溢流性尿失禁、混合型尿失禁、器質性尿失禁、機能性尿失禁、夜間尿失禁、一過性尿失禁、くすくす笑い尿失禁、便尿失禁、排尿後尿滴下、及び性交時尿失禁の治療又は予防である、請求項１０３に記載の使用。
  111. 前記治療又は予防が、社会的及び機能的コミュニケーション障害、不安、不注意、多動、感覚反応性の変化、自傷、攻撃性、認知機能障害、及び日常生活技能の低下の治療又は予防である、請求項１０３に記載の使用。
  112. 前記治療又は予防が、統合失調症、統合失調症様障害、統合失調感情障害、妄想性障害、短期精神病性障害、共有精神病性障害、一般身体疾患による精神病性障害、物質誘発性精神病性障害、特定不能の精神病性障害、認知症に関連する精神病、大鬱病性障害、気分変調性障害、月経前不快気分障害、特定不能の抑鬱障害、双極Ｉ型障害、双極ＩＩ型障害、気分循環性障害、特定不能の双極性障害、一般身体疾患による気分障害、物質誘発性気分障害、特定不能の気分障害、全般性不安障害、強迫性障害、パニック障害、急性ストレス障害、心的外傷後ストレス障害、精神遅滞、広汎性発達障害、注意欠陥障害、注意欠陥／多動性障害、破壊的行動障害、妄想型人格障害、分裂病型人格障害、統合失調型人格障害、チック障害、トゥレット症候群、物質依存症、物質乱用、物質離脱症状、抜毛癖、及び認知が損なわれている状態、アルツハイマー病、パーキンソン病、パーキンソン病患者におけるレボドパ誘発性ジスキネジア、ハンチントン病（Ｈｕｎｔｉｎｇｄｏｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、レビー小体認知症、ＨＩＶ疾患による認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病による認知症、健忘障害、軽度認知障害、加齢関連認知低下、食欲不振症及び過食症などの摂食障害、並びに肥満症の治療又は予防である、請求項１０３に記載の使用。
  113. 前記治療又は予防が、虚血、パーキンソン病、記憶障害、アルツハイマー病、認知症、及び振戦譫妄の治療又は予防である、請求項１０３に記載の使用。
  114. 前記治療又は予防が、神経因性疼痛、中枢性疼痛症候群、術後痛、骨及び関節痛、反復動作による疼痛、歯痛、癌性疼痛、筋筋膜痛、周術期痛、慢性痛、急性痛、月経困難症、アンギナに伴う疼痛、炎症痛、頭痛、片頭痛及び群発性頭痛、一次痛覚過敏、二次痛覚過敏、一次アロディニア、二次アロディニア、又は他の疼痛の治療又は予防である、請求項１０３に記載の使用。
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