JP2021000057A - 嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤及びこれを用いた嫌気性細菌の培養方法 - Google Patents
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Abstract
【課題】二酸化炭素発生量が多い嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤を提供する。【解決手段】（ａ）デヒドロアスコルビン酸、（ｃ）遷移金属触媒、（ｄ）活性炭、（ｅ）アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属水酸化物及びアルカリ土類金属水酸化物からなる群より選ばれる少なくとも１種、並びに（ｆ）水を含む、嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤。【選択図】なし
Description
本発明は、嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤及びこれを用いた嫌気性細菌の培養方法に関する。
生物、生殖又はバイオテクノロジーの研究分野又は産業分野において実施される組織・細胞のような生物試料の培養では大気雰囲気と異なるガス環境が必要とされる。例えば、重炭酸塩緩衝系培養液のｐＨを血液の通常状態と同じｐＨ７．４に保持するための条件として、雰囲気二酸化炭素濃度を５％程度にすることが必要である。また、多くの研究分野で、生体内と同様の低濃度酸素雰囲気下での細胞培養が行われている。
高濃度二酸化炭素雰囲気及び低濃度酸素雰囲気のガス環境を作り出す手段としては、炭酸ガスインキュベーター等が知られているが、設備コストや高圧ガス管理等の負担が大きい。そのため、近年は、アスコルビン酸類の酸化反応を利用したガス濃度調整剤を用いる方法が広く利用されている（特許文献１及び２を参照）。
嫌気性細菌の培養においては、高濃度二酸化炭素雰囲気のガス環境を作り出すことが要求されている。そのため、アスコルビン酸類の酸化反応において、より効率的に二酸化炭素発生量を増加することが望まれる。
本発明が解決しようとする課題は、二酸化炭素発生量が多い嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤を提供することである。
本発明が解決しようとする課題は、二酸化炭素発生量が多い嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤を提供することである。
本発明者は、鋭意検討を重ねた結果、アスコルビン酸類を配合した場合に比べてデヒドロアスコルビン酸を配合した方が、二酸化炭素発生量が増加することを見出した。本発明はこのような知見に基づき完成に至ったものである。
すなわち本発明は、以下に関する。
＜１＞ （ａ）デヒドロアスコルビン酸、（ｃ）遷移金属触媒、（ｄ）活性炭、（ｅ）アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属水酸化物及びアルカリ土類金属水酸化物からなる群より選ばれる少なくとも１種、並びに（ｆ）水を含む、嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤。
＜２＞ （ｂ）アスコルビン酸類を更に含む、上記＜１＞に記載の嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤。
＜３＞ （ｂ）アスコルビン酸類と（ａ）デヒドロアスコルビン酸とのモル比［（ｂ）／（ａ）］が１．５以下である、上記＜２＞に記載の嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤。
＜４＞ 上記＜１＞〜＜３＞のいずれか１つに記載のガス濃度調整剤の存在下で嫌気性細菌を培養する、嫌気性細菌の培養方法。
＜５＞ 上記＜１＞〜＜３＞のいずれか１つに記載のガス濃度調整剤を通気性包装材で小袋状に包装したガス濃度調整剤包装体。
＜１＞ （ａ）デヒドロアスコルビン酸、（ｃ）遷移金属触媒、（ｄ）活性炭、（ｅ）アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属水酸化物及びアルカリ土類金属水酸化物からなる群より選ばれる少なくとも１種、並びに（ｆ）水を含む、嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤。
＜２＞ （ｂ）アスコルビン酸類を更に含む、上記＜１＞に記載の嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤。
＜３＞ （ｂ）アスコルビン酸類と（ａ）デヒドロアスコルビン酸とのモル比［（ｂ）／（ａ）］が１．５以下である、上記＜２＞に記載の嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤。
＜４＞ 上記＜１＞〜＜３＞のいずれか１つに記載のガス濃度調整剤の存在下で嫌気性細菌を培養する、嫌気性細菌の培養方法。
＜５＞ 上記＜１＞〜＜３＞のいずれか１つに記載のガス濃度調整剤を通気性包装材で小袋状に包装したガス濃度調整剤包装体。
本発明の嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤は、二酸化炭素発生量が多く、効率的に高濃度二酸化炭素雰囲気及び低濃度酸素雰囲気のガス環境を作り出すことができる。
以下、本発明の一実施形態について説明する。本発明の内容は以下に説明する実施形態に限定されるものではない。
なお、本明細書において、数値の記載に関する「Ａ〜Ｂ」という用語は、「Ａ以上Ｂ以下」（Ａ＜Ｂの場合）又は「Ａ以下Ｂ以上」（Ａ＞Ｂの場合）を意味する。また、本発明において、好ましい態様の組み合わせは、より好ましい態様である。
なお、本明細書において、数値の記載に関する「Ａ〜Ｂ」という用語は、「Ａ以上Ｂ以下」（Ａ＜Ｂの場合）又は「Ａ以下Ｂ以上」（Ａ＞Ｂの場合）を意味する。また、本発明において、好ましい態様の組み合わせは、より好ましい態様である。
［ガス濃度調整剤］
本発明の嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤は、（ａ）デヒドロアスコルビン酸、（ｃ）遷移金属触媒、（ｄ）活性炭、（ｅ）アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属水酸化物及びアルカリ土類金属水酸化物からなる群より選ばれる少なくとも１種、並びに（ｆ）水を含む。ガス濃度調整剤は（ｂ）アスコルビン酸類を更に含んでもよい。
また、本発明のガス濃度調整剤は、（ａ）デヒドロアスコルビン酸、（ｃ）遷移金属触媒、（ｄ）活性炭、（ｅ）アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属水酸化物及びアルカリ土類金属水酸化物からなる群より選ばれる少なくとも１種、並びに（ｆ）水を含む組成物を通気性包装材で包装した包装体として用いられることが好ましい。該組成物は（ｂ）アスコルビン酸類を更に含んでもよい。
本発明のガス濃度調整剤は、（ａ）〜（ｆ）成分を合計で、好ましくは５０質量％以上、より好ましくは６０質量％以上、更に好ましくは７０質量％以上含む。
本発明の嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤は、（ａ）デヒドロアスコルビン酸、（ｃ）遷移金属触媒、（ｄ）活性炭、（ｅ）アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属水酸化物及びアルカリ土類金属水酸化物からなる群より選ばれる少なくとも１種、並びに（ｆ）水を含む。ガス濃度調整剤は（ｂ）アスコルビン酸類を更に含んでもよい。
また、本発明のガス濃度調整剤は、（ａ）デヒドロアスコルビン酸、（ｃ）遷移金属触媒、（ｄ）活性炭、（ｅ）アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属水酸化物及びアルカリ土類金属水酸化物からなる群より選ばれる少なくとも１種、並びに（ｆ）水を含む組成物を通気性包装材で包装した包装体として用いられることが好ましい。該組成物は（ｂ）アスコルビン酸類を更に含んでもよい。
本発明のガス濃度調整剤は、（ａ）〜（ｆ）成分を合計で、好ましくは５０質量％以上、より好ましくは６０質量％以上、更に好ましくは７０質量％以上含む。
（ａ）デヒドロアスコルビン酸
本発明のガス濃度調整剤は、酸素吸収反応の主剤として酸素吸収能及び炭酸ガス発生能を併せ持つデヒドロアスコルビン酸を含む。
デヒドロアスコルビン酸は、アスコルビン酸が酸化された化合物であり、加水分解によりジケトグロン酸を生成する。そして、適切な触媒及び反応環境を調整することにより、脱炭酸反応と酸化反応を繰り返して、二酸化炭素を発生するとともに酸素を吸収する。デヒドロアスコルビン酸は、アスコルビン酸類を酸化して生成させることもできる。
本発明のガス濃度調整剤は、酸素吸収反応の主剤として酸素吸収能及び炭酸ガス発生能を併せ持つデヒドロアスコルビン酸を含む。
デヒドロアスコルビン酸は、アスコルビン酸が酸化された化合物であり、加水分解によりジケトグロン酸を生成する。そして、適切な触媒及び反応環境を調整することにより、脱炭酸反応と酸化反応を繰り返して、二酸化炭素を発生するとともに酸素を吸収する。デヒドロアスコルビン酸は、アスコルビン酸類を酸化して生成させることもできる。
本発明のガス濃度調整剤において、デヒドロアスコルビン酸は、酸素吸収性能の観点から、水と共に活性炭に含浸していることが好ましい。具体的には、デヒドロアスコルビン酸を水に溶解させたデヒドロアスコルビン酸の水溶液を、多孔性担体である活性炭に含浸させることが好ましい。
ガス濃度調整剤においては、デヒドロアスコルビン酸の酸化反応を利用して雰囲気中の酸素を吸収してその濃度を調整すると共に、発生する二酸化炭素を利用して雰囲気中の二酸化炭素濃度を調整する。なお、当該酸化反応においては、理論上、消費された酸素分子と等モル以上の二酸化炭素が生成する。上記の原理のため、酸素濃度を低減させるとそれに伴って二酸化炭素濃度も増加することとなる。
（ｂ）アスコルビン酸類
本発明のガス濃度調整剤は、アスコルビン酸類を含んでもよい。アスコルビン酸は、デヒドロアスコルビン酸に比べて低価格で入手しやすく、酸素吸収反応の主剤として酸素吸収能及び炭酸ガス発生能を併せ持つ。
アスコルビン酸類とは、Ｌ−アスコルビン酸とその立体異性体並びにその塩及び水和物を意味する。Ｌ−アスコルビン酸塩としては、Ｌ−アスコルビン酸ナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸カリウム、Ｌ−アスコルビン酸カルシウム等が挙げられる。Ｌ−アスコルビン酸の立体異性体としては、エリソルビン酸（Ｄ−イソアスコルビン酸）等が挙げられる。エリソルビン酸塩としては、エリソルビン酸ナトリウム、エリソルビン酸カリウム、エリソルビン酸カルシウム等が挙げられる。アスコルビン酸類は、１種単独であってもよく、２種以上を併用してもよい。
本発明のガス濃度調整剤は、アスコルビン酸類を含んでもよい。アスコルビン酸は、デヒドロアスコルビン酸に比べて低価格で入手しやすく、酸素吸収反応の主剤として酸素吸収能及び炭酸ガス発生能を併せ持つ。
アスコルビン酸類とは、Ｌ−アスコルビン酸とその立体異性体並びにその塩及び水和物を意味する。Ｌ−アスコルビン酸塩としては、Ｌ−アスコルビン酸ナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸カリウム、Ｌ−アスコルビン酸カルシウム等が挙げられる。Ｌ−アスコルビン酸の立体異性体としては、エリソルビン酸（Ｄ−イソアスコルビン酸）等が挙げられる。エリソルビン酸塩としては、エリソルビン酸ナトリウム、エリソルビン酸カリウム、エリソルビン酸カルシウム等が挙げられる。アスコルビン酸類は、１種単独であってもよく、２種以上を併用してもよい。
本発明のガス濃度調整剤において、アスコルビン酸類は、酸素吸収性能の観点から、水と共に活性炭に含浸していることが好ましい。具体的には、アスコルビン酸類を水に溶解させたアスコルビン酸類の水溶液を、多孔性担体である活性炭に含浸させることが好ましい。その際、アスコルビン酸類の水溶液の濃度が高い方が、多孔性担体の使用量を少なくすることができるため、アスコルビン酸類の濃度は、できるだけ飽和溶解度に近い濃度にすることが好ましい。このためアスコルビン酸類としては水に対する溶解度が高い化合物を選択することが好ましい。水に対する溶解度及び入手容易性の観点から、アスコルビン酸類としてはアスコルビン酸又はアスコルビン酸ナトリウムが好ましい。アスコルビン酸又はアスコルビン酸ナトリウムを使用した場合、該水溶液の濃度を４０〜５５質量％とすることが好適である。
本発明のガス濃度調整剤が（ｂ）アスコルビン酸類を含む場合、（ｂ）アスコルビン酸類と（ａ）デヒドロアスコルビン酸とのモル比［（ｂ）／（ａ）］は、好ましくは１．５以下、より好ましくは１．２以下、更に好ましくは１．０以下、更に好ましくは０．７以下、更に好ましくは０．５以下、更に好ましくは０．１以下である。嫌気性細菌の培養の際に、ガスバリア性密閉容器に投入して使用するが、その投入時に上記組成であればよい。
（ｃ）遷移金属触媒
本発明のガス濃度調整剤は、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の酸化反応の進行を促進する遷移金属触媒を含む。
遷移金属触媒は、遷移金属の塩や酸化物等の金属化合物を有する触媒である。遷移金属としては、鉄、マンガン、亜鉛、銅、コバルトが好適である。遷移金属の塩としては、遷移金属のハロゲン化物及び鉱酸塩が含まれ、例えば、遷移金属の塩化物や硫酸塩である。代表例として塩化第一鉄、塩化第二鉄、硫酸第一鉄、硫酸第二鉄、塩化マンガン、硫酸亜鉛、硫酸銅、塩化銅、硫酸コバルトの無水塩又は含水塩等が挙げられ、中でも水への溶解性がよく、配合性が良好な硫酸第一鉄七水和物が好ましい。
本発明のガス濃度調整剤は、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の酸化反応の進行を促進する遷移金属触媒を含む。
遷移金属触媒は、遷移金属の塩や酸化物等の金属化合物を有する触媒である。遷移金属としては、鉄、マンガン、亜鉛、銅、コバルトが好適である。遷移金属の塩としては、遷移金属のハロゲン化物及び鉱酸塩が含まれ、例えば、遷移金属の塩化物や硫酸塩である。代表例として塩化第一鉄、塩化第二鉄、硫酸第一鉄、硫酸第二鉄、塩化マンガン、硫酸亜鉛、硫酸銅、塩化銅、硫酸コバルトの無水塩又は含水塩等が挙げられ、中でも水への溶解性がよく、配合性が良好な硫酸第一鉄七水和物が好ましい。
ガス濃度調整剤中における遷移金属触媒の含有量は、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の酸化反応の進行を促進する観点から、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の合計１００質量部に対して１〜３０質量部が好ましく、５〜２５質量部がより好ましく、１０〜２０質量部が更に好ましい。
（ｄ）活性炭
本発明のガス濃度調整剤は活性炭を含む。活性炭は、デヒドロアスコルビン酸水溶液及びアスコルビン酸類水溶液を含浸させる担体としての機能を有するとともに、その比表面積の大きさから空気との接触面積が大きく、酸化反応の進行を促進する機能を有する。
本発明のガス濃度調整剤は活性炭を含む。活性炭は、デヒドロアスコルビン酸水溶液及びアスコルビン酸類水溶液を含浸させる担体としての機能を有するとともに、その比表面積の大きさから空気との接触面積が大きく、酸化反応の進行を促進する機能を有する。
活性炭としては、例えば、おが粉、石炭、椰子殻等を原料として水蒸気賦活、塩化亜鉛等を用いた薬剤賦活等の各種製法で製造されたものを用いることができる。また、活性炭は、デヒドロアスコルビン酸水溶液及びアスコルビン酸類水溶液等を活性炭に担持させ顆粒状で小袋に充填して用いられるために、粒状活性炭が好ましい。粒状活性炭の粒子径は、酸素吸収性能の観点及び包装体への充填性（流動性）の観点から、好ましくは０．１〜２ｍｍ、より好ましくは０．５〜１ｍｍである。
ガス濃度調整剤中における活性炭の含有量は、酸素吸収性能の観点及び包装体への充填性の観点から、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の合計１００質量部に対して５０〜４００質量部が好ましく、７５〜３００質量部がより好ましい。
（ｅ）アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属水酸化物及びアルカリ土類金属水酸化物
本発明のガス濃度調整剤は、アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属水酸化物及びアルカリ土類金属水酸化物からなる群より選ばれる少なくとも１種を含む。アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属水酸化物及びアルカリ土類金属水酸化物からなる群より選ばれる少なくとも１種は、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の酸化反応を迅速に進行させ、反応場をアルカリ領域に制御する目的で使用される。
本発明のガス濃度調整剤は、アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属水酸化物及びアルカリ土類金属水酸化物からなる群より選ばれる少なくとも１種を含む。アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属水酸化物及びアルカリ土類金属水酸化物からなる群より選ばれる少なくとも１種は、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の酸化反応を迅速に進行させ、反応場をアルカリ領域に制御する目的で使用される。
アルカリ金属炭酸塩としては、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム水和物等の、水溶性のアルカリ金属炭酸塩が好適に用いられ、中でも炭酸ナトリウムが特に好ましい。
アルカリ金属水酸化物としては、水酸化カリウム、水酸化ナトリウムが挙げられ、中でも水酸化ナトリウムが好ましい。
アルカリ土類金属水酸化物としては、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウムが挙げられる。
アルカリ金属水酸化物としては、水酸化カリウム、水酸化ナトリウムが挙げられ、中でも水酸化ナトリウムが好ましい。
アルカリ土類金属水酸化物としては、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウムが挙げられる。
アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属水酸化物及びアルカリ土類金属水酸化物の中でも、アスコルビン酸との塩になったときの水への溶解度の観点から、本発明のガス濃度調整剤は、アルカリ金属炭酸塩及び／又はアルカリ金属水酸化物を含むことが好ましい。
ガス濃度調整剤中におけるアルカリ金属水酸化物の含有量は、加水分解生成物を中和する観点から、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の合計モル量に対して等モル量が好ましい。
ガス濃度調整剤中におけるアルカリ金属炭酸塩の含有量は、二酸化炭素濃度を調整する観点から、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の合計１００質量部に対して１０〜２００質量部が好ましく、５０〜２００質量部がより好ましく、１００〜１５０質量部が更に好ましい。
ガス濃度調整剤中におけるアルカリ金属水酸化物の含有量は、加水分解生成物を中和する観点から、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の合計モル量に対して等モル量が好ましい。
ガス濃度調整剤中におけるアルカリ金属炭酸塩の含有量は、二酸化炭素濃度を調整する観点から、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の合計１００質量部に対して１０〜２００質量部が好ましく、５０〜２００質量部がより好ましく、１００〜１５０質量部が更に好ましい。
（ｆ）水
本発明のガス濃度調整剤は、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の酸化反応の進行に必要な水を含む。
水は、活性炭に含浸させる態様を採ることが、ガス濃度調整剤を流動性のある固形物として得られるという観点から好ましい。本発明のガス濃度調整剤において、水は、酸素吸収性能の観点から、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類と共に活性炭に含浸していることが好ましい。具体的には、デヒドロアスコルビン酸又はアスコルビン酸類を水に溶解させたデヒドロアスコルビン酸水溶液及びアスコルビン酸類水溶液を、多孔性担体である活性炭に含浸させることが好ましい。また、水には、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類以外の可溶性成分を溶解させてもよく、不溶性成分を分散させてもよい。
本発明のガス濃度調整剤は、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の酸化反応の進行に必要な水を含む。
水は、活性炭に含浸させる態様を採ることが、ガス濃度調整剤を流動性のある固形物として得られるという観点から好ましい。本発明のガス濃度調整剤において、水は、酸素吸収性能の観点から、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類と共に活性炭に含浸していることが好ましい。具体的には、デヒドロアスコルビン酸又はアスコルビン酸類を水に溶解させたデヒドロアスコルビン酸水溶液及びアスコルビン酸類水溶液を、多孔性担体である活性炭に含浸させることが好ましい。また、水には、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類以外の可溶性成分を溶解させてもよく、不溶性成分を分散させてもよい。
ガス濃度調整剤中における水の含有量は、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の酸化反応を進行させる観点から、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の合計１００質量部に対して、３０〜５００質量部が好ましく、５０〜３００質量部がより好ましく８０〜２００質量部が更に好ましい。
（ｇ）その他の成分
本発明のガス濃度調整剤は、本発明の効果を阻害しない範囲内で、上述した（ａ）〜（ｆ）成分以外の成分を必要に応じて含んでもよい。
本発明のガス濃度調整剤は、本発明の効果を阻害しない範囲内で、上述した（ａ）〜（ｆ）成分以外の成分を必要に応じて含んでもよい。
（ｇ１）熱可塑性樹脂
本発明のガス濃度調整剤は、酸素吸収反応（デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の酸化反応）の進行に伴う過度の発熱を抑制するために、熱可塑性樹脂を含んでもよい。熱可塑性樹脂の種類に特に制限はないが、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、エチレン−酢酸ビニル共重合体、エラストマー又はこれらの混合物が使用でき、特に分子量１００００以下の低分子量ポリエチレン、ポリプロピレン又はこれらの混合物が軟化点の調整が容易であり、臭気の影響が少ないという観点から好適に用いられる。
本発明のガス濃度調整剤は、酸素吸収反応（デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の酸化反応）の進行に伴う過度の発熱を抑制するために、熱可塑性樹脂を含んでもよい。熱可塑性樹脂の種類に特に制限はないが、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、エチレン−酢酸ビニル共重合体、エラストマー又はこれらの混合物が使用でき、特に分子量１００００以下の低分子量ポリエチレン、ポリプロピレン又はこれらの混合物が軟化点の調整が容易であり、臭気の影響が少ないという観点から好適に用いられる。
熱可塑性樹脂は、他の成分との混合性の観点から、粒子径が１〜５００μｍの粒状体が好ましく、１０〜３００μｍの粒状体がより好ましい。また、熱可塑性樹脂の軟化点は、より効果的に発熱を抑制する観点から、９０〜１２５℃が好ましい。
ガス濃度調整剤中における熱可塑性樹脂の含有量は、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の酸化反応を進行させる観点から、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の合計１００質量部に対して、１００〜１０００質量部が好ましく、３００〜５００質量部がより好ましい。
（ｇ２）アルデヒド除去剤
本発明のガス濃度調整剤は、主にデヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の酸化反応の進行に伴って副生するアルデヒドを除去するために、アルデヒド除去剤を含んでもよい。アルデヒド除去能を有する化合物としてはアミン類等、種々のものが公知であるが、アルデヒド除去能が充分であり、刺激臭の発生も見られず、少量で高い効果を発揮するエチレン尿素、尿素、アルギニン、リジン塩酸塩またはポリアリルアミンを配合することが好ましく、より少量で効果の高いエチレン尿素がより好ましい。
本発明のガス濃度調整剤は、主にデヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の酸化反応の進行に伴って副生するアルデヒドを除去するために、アルデヒド除去剤を含んでもよい。アルデヒド除去能を有する化合物としてはアミン類等、種々のものが公知であるが、アルデヒド除去能が充分であり、刺激臭の発生も見られず、少量で高い効果を発揮するエチレン尿素、尿素、アルギニン、リジン塩酸塩またはポリアリルアミンを配合することが好ましく、より少量で効果の高いエチレン尿素がより好ましい。
本明細書で言うアルデヒドとは、その分子内に１つ以上のホルミル基を有する化合物、すなわち、アルデヒド類を意味する。本発明においては、典型的には、酸素吸収又は細菌培養の過程で副生成分として発生するアルデヒドを意味し、該アルデヒドとしては、細菌培養に悪影響を及ぼす限り化学分野においてアルデヒド類に分類されるものであればいずれのものを包含される。具体的には、例えば、ホルムアルデヒド、アセトアルデヒド等が包含される。
ガス濃度調整剤中におけるアルデヒド除去剤の含有量は、アルデヒドを効率的かつ経済的に除去する観点から、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の合計１００質量部に対して、０．５〜２５質量部が好ましく、１〜１０質量部がより好ましく、１〜５質量部が更に好ましい。
（ｇ３）被覆材
本発明のガス濃度調整剤は、上述した（ａ）〜（ｆ）成分を含む組成物の造粒物の外側に被覆材を有していてもよい。被覆材としては、酸素吸収反応に伴い発生する微量の臭気成分を吸着する観点からは、活性炭、ゼオライト、ケイ酸塩等の多孔質粒子が挙げられる。また、ガス濃度調整剤の流動性を向上し、ガス濃度調整剤を包装材料に充填包装しやすくする観点からは、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム等が挙げられる。これらの助剤は、１種を単独で用いることができ、又は必要に応じて２種以上を併用して用いることもできる。また、これらの助剤は、市販品を容易に入手することもできる。
本発明のガス濃度調整剤は、上述した（ａ）〜（ｆ）成分を含む組成物の造粒物の外側に被覆材を有していてもよい。被覆材としては、酸素吸収反応に伴い発生する微量の臭気成分を吸着する観点からは、活性炭、ゼオライト、ケイ酸塩等の多孔質粒子が挙げられる。また、ガス濃度調整剤の流動性を向上し、ガス濃度調整剤を包装材料に充填包装しやすくする観点からは、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム等が挙げられる。これらの助剤は、１種を単独で用いることができ、又は必要に応じて２種以上を併用して用いることもできる。また、これらの助剤は、市販品を容易に入手することもできる。
（ガス濃度調整剤の製造方法）
本発明のガス濃度調整剤の製造方法は、特に制限はないが、例えば、デヒドロアスコルビン酸、遷移金属触媒、アルカリ金属水酸化物等を溶解したデヒドロアスコルビン酸水溶液を調製し、この溶液を活性炭及びアルカリ金属炭酸塩に混合して活性炭に含浸させる方法が挙げられる。また、アスコルビン酸類、遷移金属触媒、アルカリ金属水酸化物等を溶解したアスコルビン酸類水溶液を調製し、一方、デヒドロアスコルビン酸、遷移金属触媒、アルカリ金属水酸化物等を溶解したデヒドロアスコルビン酸水溶液を調製し、これらの溶液を活性炭及びアルカリ金属炭酸塩に混合して活性炭に含浸させる方法も挙げられる。
本発明のガス濃度調整剤の製造方法は、特に制限はないが、例えば、デヒドロアスコルビン酸、遷移金属触媒、アルカリ金属水酸化物等を溶解したデヒドロアスコルビン酸水溶液を調製し、この溶液を活性炭及びアルカリ金属炭酸塩に混合して活性炭に含浸させる方法が挙げられる。また、アスコルビン酸類、遷移金属触媒、アルカリ金属水酸化物等を溶解したアスコルビン酸類水溶液を調製し、一方、デヒドロアスコルビン酸、遷移金属触媒、アルカリ金属水酸化物等を溶解したデヒドロアスコルビン酸水溶液を調製し、これらの溶液を活性炭及びアルカリ金属炭酸塩に混合して活性炭に含浸させる方法も挙げられる。
［ガス濃度調整剤包装体］
ガス濃度調整剤は、上述した各成分を含む組成物を、通気性包装材を全部又は一部に用いた包装材で包装することによって、ガス濃度調整剤包装体とすることもできる。
ガス濃度調整剤は、上述した各成分を含む組成物を、通気性包装材を全部又は一部に用いた包装材で包装することによって、ガス濃度調整剤包装体とすることもできる。
（包装材）
包装材としては、２枚の通気性包装材を貼り合わせて袋状としたものや、１枚の通気性包装材と１枚の非通気性包装材とを貼り合わせて袋状としたもの、１枚の通気性包装材を折り曲げ、折り曲げ部を除く縁部同士をシールして袋状としたものが挙げられる。
包装材としては、２枚の通気性包装材を貼り合わせて袋状としたものや、１枚の通気性包装材と１枚の非通気性包装材とを貼り合わせて袋状としたもの、１枚の通気性包装材を折り曲げ、折り曲げ部を除く縁部同士をシールして袋状としたものが挙げられる。
ここで、通気性包装材及び非通気性包装材が四角形状である場合には、包装材は、２枚の通気性包装材を重ね合わせ、４辺をヒートシールして袋状としたものや、１枚の通気性包装材と１枚の非通気性包装材とを重ね合わせ、４辺をヒートシールして袋状としたもの、１枚の通気性包装材を折り曲げ、折り曲げ部を除く３辺をヒートシールして袋状としたものが挙げられる。また包装材は、通気性包装材を筒状にしてその筒状体の両端部および胴部をヒートシールして袋状としたものであってもよい。
（通気性包装材）
通気性包装材としては、酸素と二酸化炭素を透過する包装材が選択される。なかでも、ガーレ式試験機法による透気抵抗度が６００秒以下、より好ましくは９０秒以下のものが好適に用いられる。ここで、透気抵抗度とは、ＪＩＳ Ｐ８１１７（１９９８）の方法により測定された値を言うものとする。より具体的には、株式会社東洋精機製作所製のガーレ式デンソメーターを使用して１００ｍＬの空気が通気性包装材を透過するのに要した時間を言う。
通気性包装材としては、酸素と二酸化炭素を透過する包装材が選択される。なかでも、ガーレ式試験機法による透気抵抗度が６００秒以下、より好ましくは９０秒以下のものが好適に用いられる。ここで、透気抵抗度とは、ＪＩＳ Ｐ８１１７（１９９８）の方法により測定された値を言うものとする。より具体的には、株式会社東洋精機製作所製のガーレ式デンソメーターを使用して１００ｍＬの空気が通気性包装材を透過するのに要した時間を言う。
上記通気性包装材としては、紙や不織布の他、プラスチックフィルムに通気性を付与したものが用いられる。プラスチックフィルムとしては、例えば、ポリエチレンテレフタレート、ポリアミド、ポリプロピレン、ポリカーボネート等のフィルムと、シール層としてポリエチレン、アイオノマー、ポリブタジエン、エチレン／アクリル酸コポリマー、エチレン／メタクリル酸コポリマー又はエチレン／酢酸ビニルコポリマー等のフィルムとを積層接着した積層フィルム等が使用できる。また、これらの積層物も通気性包装材として使用することができる。
通気性を付与する方法としては、冷針、熱針による穿孔加工の他、種々の方法が採用可能である。穿孔加工により通気性を付与する場合、通気性は、穿孔する孔の径、数、材質等により自由に調整することができる。
また、積層フィルムの厚さは、５０〜３００μｍであることが好ましく、６０〜２５０μｍであることが特に好ましい。この場合、厚さが上記範囲を外れる場合に比べて、強度を保持しヒートシール性や包装適性に優れた包装材とすることができる。
上記のガス濃度調整剤包装体はその機能を長期間維持するため、使用前はガスバリア性の容器や袋に収納し、使用するにあたりガスバリア性の容器や袋から取り出して用いることが好ましい。また、菌培養の用途にガス濃度調整剤包装体を使用する際は、該包装体に対して予めγ線等を用いた殺菌を施すことが好ましい。
［嫌気性細菌の培養方法］
本発明の嫌気性細菌の培養方法は、ガス濃度調整剤の存在下で嫌気性細菌を培養する方法である。具体的には、嫌気性細菌及び培地を収容した培養容器と共にガス濃度調整剤（好ましくはガス濃度調整剤包装体）を、ガスバリア性密閉容器内に設置後、密封し、該密閉容器を細菌培養に好適な温度下に静置することで実施できる。
本発明の嫌気性細菌の培養方法は、ガス濃度調整剤の存在下で嫌気性細菌を培養する方法である。具体的には、嫌気性細菌及び培地を収容した培養容器と共にガス濃度調整剤（好ましくはガス濃度調整剤包装体）を、ガスバリア性密閉容器内に設置後、密封し、該密閉容器を細菌培養に好適な温度下に静置することで実施できる。
本発明の培養方法に用いられる培地については特に制限はなく、一般的に使用されているものがそのまま適用できるため、培養する菌に適した培地を自由に選択できる。培地中に溶け込むアルデヒド濃度は、好ましくは２ｍｇ／Ｌ以下、より好ましくは１．５ｍｇ／Ｌ以下、更に好ましくは１．０ｍｇ／Ｌ以下とするのが、菌培養条件として好適である。
また、培養温度は２０〜４５℃であることが好ましく、２５〜４０℃であることが特に好ましい。
また、培養温度は２０〜４５℃であることが好ましく、２５〜４０℃であることが特に好ましい。
培養容器は、容器外との通気性が確保されていれば特に制限はなく、容積、形状、材質等いずれも培養に適した任意のものを採用することができる。蓋部を有する培養容器が好ましく用いられるが、この際も、容器外との通気性を確保する必要がある。
本発明の細菌の培養方法は、嫌気性細菌の培養に適用される。本発明の培養方法においては、培養実施前のガスバリア性密閉容器内の雰囲気は特に限定されず空気であってもよいが、嫌気性細菌を培養する観点から、窒素雰囲気であることが好ましい。
細菌培養方法で用いられるガスバリア性密閉容器は、その内外の気体の流通を妨げ、投入したガス濃度調整剤により形成された酸素、二酸化炭素濃度を長期間維持するものである。ガラス、金属、ポリカーボネート等のプラスチック等で構成された容器がよく用いられるが、ガスバリア性フィルム及びその積層物を使用することも可能である。
この際、ガスバリア性密閉容器内で発生したアルデヒドの発生量を測定することや該容器内の湿度の調整等を目的として、該密閉容器内に蒸留水を収容した開放型の容器を設置してもよい。開放型の容器としては培養容器の他、ビーカー、フラスコ等が例示でき、細菌及び培地を収容した培養容器と同種の容器であることが好ましい。
嫌気性細菌を培養する観点から、密閉容器内の酸素濃度は、２４時間以内で０．１容量％以下になることが好ましい。また、密閉容器内の二酸化炭素濃度は、１１．５容量％以上が好ましく、１２容量％以上がより好ましく、１３容量％以上が更に好ましく、１５容量％以上が更に好ましい。
細菌培養においては、短時間で所望の酸素濃度及び二酸化炭素濃度にすることが重要となる。嫌気性細菌を培養する観点から、デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の酸化反応の反応初期（反応開始から３時間後）の酸素濃度は、０．５０容量％以下が好ましく、０．３０容量％以下がより好ましく、０．１５容量％以下がより好ましい。デヒドロアスコルビン酸及びアスコルビン酸類の酸化反応の反応初期（反応開始から３時間後）の二酸化炭素濃度は、１１．５容量％以上が好ましく、１２容量％以上がより好ましく、１３容量％以上が更に好ましく、１５容量％以上が更に好ましい。
本発明の培養方法によれば、ガスボンベ及びガスコントローラーを使用することなく、好適なガス雰囲気下での細菌の顕微鏡観察や輸送を可能にする。
以下、実施例及び比較例を用いて本実施形態を詳しく説明するが、本実施形態は本発明の作用効果を奏する限りにおいて適宜変更することができる。なお、実施例及び比較例中の「部」は、特に明記しない場合は質量部を意味する。
製造例１
（アスコルビン酸水溶液の調製）
窒素雰囲気下、Ｌ−アスコルビン酸３０．６ｇ、１５質量％水酸化ナトリウム水溶液４６．２ｇ、硫酸第一鉄・七水和物４．８ｇを混合し、２．１３ｍｍｏｌ／ｇのアスコルビン酸水溶液を調製した。
（アスコルビン酸水溶液の調製）
窒素雰囲気下、Ｌ−アスコルビン酸３０．６ｇ、１５質量％水酸化ナトリウム水溶液４６．２ｇ、硫酸第一鉄・七水和物４．８ｇを混合し、２．１３ｍｍｏｌ／ｇのアスコルビン酸水溶液を調製した。
製造例２
（デヒドロアスコルビン酸水溶液の調製）
窒素雰囲気下、デヒドロアスコルビン酸４．５ｇ、１５質量％水酸化ナトリウム水溶液６．９ｇ、硫酸第一鉄・七水和物０．７ｇを混合し、２．１３ｍｍｏｌ／ｇのデヒドロアスコルビン酸水溶液を調製した。
（デヒドロアスコルビン酸水溶液の調製）
窒素雰囲気下、デヒドロアスコルビン酸４．５ｇ、１５質量％水酸化ナトリウム水溶液６．９ｇ、硫酸第一鉄・七水和物０．７ｇを混合し、２．１３ｍｍｏｌ／ｇのデヒドロアスコルビン酸水溶液を調製した。
実施例１
窒素雰囲気下、活性炭１０ｇ、ポリエチレン粉末１５ｇ、炭酸ナトリウム４．７ｇを測り取り混合した。この粉体に、アスコルビン酸水溶液１０．１ｇ、デヒドロアスコルビン酸水溶液１０．１ｇを添加して混合し、脱酸素剤組成物を製造した。この脱酸素剤組成物６．９ｇをアルミニウム袋に充填し封止をした。
上記の脱酸素剤を入れたアルミニウム袋をナイロン袋に空気７５０ｍＬとともに封入し、ナイロン袋内でアルミニウム袋を開封して、脱酸素実験を開始した。３時間後の酸素濃度及び二酸化炭素濃度をガスクロマトグラフで測定したところ、酸素濃度が０．２０容量％、二酸化炭素濃度が１３．６容量％であった。また、２４時間後の酸素濃度及び二酸化炭素濃度をガスクロマトグラフで測定したところ、酸素濃度が０．００容量％、二酸化炭素濃度が１３．７容量％であった。
窒素雰囲気下、活性炭１０ｇ、ポリエチレン粉末１５ｇ、炭酸ナトリウム４．７ｇを測り取り混合した。この粉体に、アスコルビン酸水溶液１０．１ｇ、デヒドロアスコルビン酸水溶液１０．１ｇを添加して混合し、脱酸素剤組成物を製造した。この脱酸素剤組成物６．９ｇをアルミニウム袋に充填し封止をした。
上記の脱酸素剤を入れたアルミニウム袋をナイロン袋に空気７５０ｍＬとともに封入し、ナイロン袋内でアルミニウム袋を開封して、脱酸素実験を開始した。３時間後の酸素濃度及び二酸化炭素濃度をガスクロマトグラフで測定したところ、酸素濃度が０．２０容量％、二酸化炭素濃度が１３．６容量％であった。また、２４時間後の酸素濃度及び二酸化炭素濃度をガスクロマトグラフで測定したところ、酸素濃度が０．００容量％、二酸化炭素濃度が１３．７容量％であった。
実施例２
窒素雰囲気下、活性炭１０ｇ、ポリエチレン粉末１５ｇ、炭酸ナトリウム４．７ｇを測り取り混合した。この粉体に、デヒドロアスコルビン酸水溶液２０．３ｇを添加して混合し、脱酸素剤組成物を製造した。この脱酸素剤組成物６．９ｇをアルミニウム袋に充填し封止をした。
上記の脱酸素剤を入れたアルミニウム袋をナイロン袋に空気７５０ｍＬとともに封入し、ナイロン袋内でアルミニウム袋を開封して、脱酸素実験を開始した。３時間後の酸素濃度及び二酸化炭素濃度をガスクロマトグラフで測定したところ、酸素濃度が０．１０容量％、二酸化炭素濃度が１８．５容量％であった。また、２４時間後の酸素濃度及び二酸化炭素濃度をガスクロマトグラフで測定したところ、酸素濃度が０．００容量％、二酸化炭素濃度が１８．６容量％であった。
窒素雰囲気下、活性炭１０ｇ、ポリエチレン粉末１５ｇ、炭酸ナトリウム４．７ｇを測り取り混合した。この粉体に、デヒドロアスコルビン酸水溶液２０．３ｇを添加して混合し、脱酸素剤組成物を製造した。この脱酸素剤組成物６．９ｇをアルミニウム袋に充填し封止をした。
上記の脱酸素剤を入れたアルミニウム袋をナイロン袋に空気７５０ｍＬとともに封入し、ナイロン袋内でアルミニウム袋を開封して、脱酸素実験を開始した。３時間後の酸素濃度及び二酸化炭素濃度をガスクロマトグラフで測定したところ、酸素濃度が０．１０容量％、二酸化炭素濃度が１８．５容量％であった。また、２４時間後の酸素濃度及び二酸化炭素濃度をガスクロマトグラフで測定したところ、酸素濃度が０．００容量％、二酸化炭素濃度が１８．６容量％であった。
比較例１
窒素雰囲気下、活性炭１０ｇ、ポリエチレン粉末１５ｇ、炭酸ナトリウム４．７ｇを測り取り混合した。この粉体に、アスコルビン酸水溶液２０．３ｇを添加して混合し、脱酸素剤組成物を製造した。この脱酸素剤組成物６．９ｇをアルミニウム袋に充填し封止をした。
上記の脱酸素剤を入れたアルミニウム袋をナイロン袋に空気７５０ｍＬとともに封入し、ナイロン袋内でアルミニウム袋を開封して、脱酸素実験を開始した。３時間後の酸素濃度及び二酸化炭素濃度をガスクロマトグラフで測定したところ、酸素濃度が０．５５容量％、二酸化炭素濃度が１０．７容量％であった。また、２４時間後の酸素濃度及び二酸化炭素濃度をガスクロマトグラフで測定したところ、酸素濃度が０．００容量％、二酸化炭素濃度が１１．０容量％であった。
窒素雰囲気下、活性炭１０ｇ、ポリエチレン粉末１５ｇ、炭酸ナトリウム４．７ｇを測り取り混合した。この粉体に、アスコルビン酸水溶液２０．３ｇを添加して混合し、脱酸素剤組成物を製造した。この脱酸素剤組成物６．９ｇをアルミニウム袋に充填し封止をした。
上記の脱酸素剤を入れたアルミニウム袋をナイロン袋に空気７５０ｍＬとともに封入し、ナイロン袋内でアルミニウム袋を開封して、脱酸素実験を開始した。３時間後の酸素濃度及び二酸化炭素濃度をガスクロマトグラフで測定したところ、酸素濃度が０．５５容量％、二酸化炭素濃度が１０．７容量％であった。また、２４時間後の酸素濃度及び二酸化炭素濃度をガスクロマトグラフで測定したところ、酸素濃度が０．００容量％、二酸化炭素濃度が１１．０容量％であった。
Claims (5)
- （ａ）デヒドロアスコルビン酸、（ｃ）遷移金属触媒、（ｄ）活性炭、（ｅ）アルカリ金属炭酸塩、アルカリ金属水酸化物及びアルカリ土類金属水酸化物からなる群より選ばれる少なくとも１種、並びに（ｆ）水を含む、嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤。
- （ｂ）アスコルビン酸類を更に含む、請求項１に記載の嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤。
- （ｂ）アスコルビン酸類と（ａ）デヒドロアスコルビン酸とのモル比［（ｂ）／（ａ）］が１．５以下である、請求項２に記載の嫌気性細菌培養用ガス濃度調整剤。
- 請求項１〜３のいずれか１つに記載のガス濃度調整剤の存在下で嫌気性細菌を培養する、嫌気性細菌の培養方法。
- 請求項１〜３のいずれか１つに記載のガス濃度調整剤を通気性包装材で小袋状に包装したガス濃度調整剤包装体。
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Citations (6)
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|---|---|---|---|---|
| EP0111583A1 (en) * | 1982-12-21 | 1984-06-27 | Toppan Printing Co., Ltd. | Culture of anaerobic bacteria |
| JPH01202281A (ja) * | 1988-02-08 | 1989-08-15 | Toppan Printing Co Ltd | 嫌気性細菌培養用脱酸素剤 |
| JPH10327845A (ja) * | 1997-04-01 | 1998-12-15 | Mitsubishi Gas Chem Co Inc | 雰囲気調整剤及び嫌気性細菌の培養法 |
| KR20060118908A (ko) * | 2005-05-17 | 2006-11-24 | 주식회사종근당 | 탄산가스를 함유하는 비타민 씨의 액상 조성물 |
| JP2012076046A (ja) * | 2010-10-04 | 2012-04-19 | Kyodo Printing Co Ltd | システイン系酸素吸収剤 |
| WO2018101944A1 (en) * | 2016-12-01 | 2018-06-07 | Multisorb Technologies, Inc. | Oxygen absorbing and carbon dioxide emitting composition |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| DE69818893T2 (de) * | 1997-04-01 | 2004-05-19 | Mitsubishi Gas Chemical Co., Inc. | Kulturatmosphäreregulator und Verfahren zum Züchten von anaeroben Bakterien |
| JP5682831B2 (ja) | 2009-11-24 | 2015-03-11 | 三菱瓦斯化学株式会社 | 雰囲気調整剤組成物 |
| US10723992B2 (en) * | 2015-04-29 | 2020-07-28 | 3M Innovative Properties Company | Thin film culture device with carbon dioxide generant |
-
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Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0111583A1 (en) * | 1982-12-21 | 1984-06-27 | Toppan Printing Co., Ltd. | Culture of anaerobic bacteria |
| JPH01202281A (ja) * | 1988-02-08 | 1989-08-15 | Toppan Printing Co Ltd | 嫌気性細菌培養用脱酸素剤 |
| JPH10327845A (ja) * | 1997-04-01 | 1998-12-15 | Mitsubishi Gas Chem Co Inc | 雰囲気調整剤及び嫌気性細菌の培養法 |
| KR20060118908A (ko) * | 2005-05-17 | 2006-11-24 | 주식회사종근당 | 탄산가스를 함유하는 비타민 씨의 액상 조성물 |
| JP2012076046A (ja) * | 2010-10-04 | 2012-04-19 | Kyodo Printing Co Ltd | システイン系酸素吸収剤 |
| WO2018101944A1 (en) * | 2016-12-01 | 2018-06-07 | Multisorb Technologies, Inc. | Oxygen absorbing and carbon dioxide emitting composition |
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