JP2020519261A - 可変免疫グロブリンドメインのグリコシル化 - Google Patents
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Abstract
Description
本願は、グリコシル化工学の分野に、より具体的には、免疫グロブリンドメインおよびグリコシル化されたその誘導体に関する。とりわけ、本発明は、改変グリコシル化受容部位をもつ免疫グロブリン可変ドメインを含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を提供する。結果的に、本発明は、選択されたグリカンで修飾された免疫グロブリン可変ドメインタンパク質、およびその特定のグリカン抱合体を提供する。また本明細書に提供されるのには、グリコシル化された免疫グロブリン可変ドメインおよびそのグリカン抱合体の産生のための方法もある。
組み換え抗体技術の分野は、主にこれらのヒトへの治療的な使用に対する関心のため、この20年の間に急速に進展した。特定のヒト抗体の、ディスプレー技術による選択能、ならびに分子進化によるそれらの親和性、安定性、および発現レベルの改善能はさらに、この分野を押し上げた。全抗体は、重鎖および軽鎖からなる複合分子である。単離された抗体の重鎖および軽鎖は抗原結合特異性を保持し得るが、それらの親和性および可溶性はしばしば、低減している。
本願の重要な目的は、免疫グロブリン可変ドメイン(IVD)を含むポリペプチドを提供することであり、ここでIVDは、合理的な設計アプローチを介して同定された特異的選択領域中に存在するグリコシル化受容部位を有する。IVD中の特定の領域でのこれら特定のグリコシル化受容部位の存在は、それらのリガンドとのIVDの結合親和性を妨害せずに、かつIVDの折り畳みに干渉せずに、効率的なグリコシル化を可能にさせる。本明細書にさらに解説されるとおりの様々な成分でさらに修飾され得る特定の位置にて均一な形態のグリカンを含む好適な宿主細胞中組み換えで産生され得る。
他の側面に従うと、該ヌクレオチド配列を含む発現ベクター、および発現ベクターを含む細胞が、提供される。
これらの細胞を使用すると、合理的に選ばれた特定の部位にてグリカンで修飾されたIVDが、産生され得る。糖鎖改変細胞は、具体的に所望されるグリカンおよび/または均一なグリカンで修飾されたIVDの産生に好ましいところ、具体的に有利である。この均一なグリコシル化プロファイルは、その特性が十分な予測可能である産物が得られるところ、非常に望ましい。
− 好適な細胞を提供すること
− 該細胞において、本発明に従うポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む発現ベクターを導入すること
− 好適な条件においてIVDを含むポリペプチドを発現させること;および
− IVDを含むポリペプチドを単離すること
を含む。該方法はさらに、被抱合成分をポリペプチドへ連結することというステップを含み得る。
本発明は、具体的な態様に関し、ある図面を参照して記載されるであろうが、しかし本発明はこれらに限定されず、クレームのみによって限定されるものである。クレーム中のいずれの引用符号(reference signs)も、本範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。記載される図面は、概略図でしかなく、非限定的なものである。図面において、要素のいくつかのサイズは、誇張して見せたものもあり、説明目的のためスケール通りに描画されていないものもある。用語「を含む(comprising)」が、本記載およびクレームにおいて使用される場合、他の要素またはステップを排除しない。不明確または明確な項目が、単数名詞、例として「a」または「an」、「the」を参照するときに使用される場合、これは、他にとくに明記されていない限り、その名詞の複数形を包含する。
本発明に従うもう1つの他の態様において、IVDを含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列が提供されるが、ここで該IVDは、(AHoナンバリング規則に従って)IVDのアミノ酸86およびアミノ酸27に存在するグリコシル化受容部位を有する。
本発明に従うもう1つの他の態様において、IVDを含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列が提供されるが、ここで該IVDは、(AHoナンバリング規則に従って)IVDのアミノ酸27に存在するグリコシル化受容部位を有する。
IVD中、位置83〜88および/または27〜40の次に、グリコシル化される傾向にある追加の位置が選択され得ることは、本明細書に提示される本開示に基づけば当業者にとって明らかなはずである。
もう1つの他の態様において、本発明のIVDは、余剰の末端アミノ(N−)末タグおよび/または余剰のカルボキシ末端(C−)を有するが、それらのタグは、グリコシル化受容部位、具体的にはN−グリカン受容部位を包含する。
より具体的な態様において、本発明に従う細胞は、E. coli、Lactococcus種またはBacillus種などの原核細胞である。
マンノースもしくはマンノース−6−P糖、またはGalNAz、アジド−シアル酸(AzSia)、もしくはGlcNAzなどの化学修飾単糖類を有する。特定の糖をもつグリカンを含むIVDポリペプチドは、in vivoで作られ得る。
具体的な態様において、本発明は、IVD−抱合体を提供する。好ましい態様において、本発明に従うIVDまたはISVDポリペプチドは、該IVDまたはISVDポリペプチド上に存在するグリカン構造を介して、特定の成分(本明細書の前に定義されるとおりの被抱合成分)へカップリングされる。かかるグリカンの特定の成分への特定のカップリングは、当該技術分野において、グリカン特異的抱合として言及される。IVDまたはISVDポリペプチド上に存在する、本明細書の前に記載されるとおりの、特定の末端炭水化物をもつグリカン構造または特定のグリカン構造は、特定の成分とのカップリングのための開始点として使用される。
本発明のIVDまたはISVD中に存在するグリカン構造へのカップリングのために使用され得る被抱合成分は、当該技術分野において多すぎるほど(plethora)存在する。被抱合成分は、例えば、半減期延長成分、治療剤、検出ユニット、標的化成分、または第2の(同じか、もしくは異なる)IVDもしくはISVDポリペプチドでさえも含む。1以上の被抱合成分は、また互いに異なっていてもよいが、本発明のIVDまたはISVDへ連結され得る。1つの被抱合成分でさえ、1より多くの機能を有し得る、すなわち半減期延長成分は同時に、標的化成分としても有用であり得る。
様々な半減期延長成分が本明細書において想定されている。非限定的かつ手短には、半減期延長ストラテジーがKontermann, R.E., Expert Opin Biol Ther. 16(7), 2016またはvan Witteloostuijn, S.B., ChemMedChem. 11(22), 2016に記載されている。とりわけ、共有結合の化学的修飾(covalent chemical modification)に依存する様々な半減期延長技法が開発されている。これらの方法は、PEG化、非構造(unstructured)ポリペプチドをベースとしたPEG模倣物への融合、ポリシアリル化の採用(例として、ポリシアリルトランスフェラーゼ酵素の酵素的な使用(enzymatic use))、ビオチン−カップリング、ポリオキサゾリン−カップリング、大きな多糖類との抱合、脂質化、アルブミンまたはIgGのFcドメインもしくはIgAのFcドメインへの融合、および自己集合へ向かわせる生体直交型(bio-orthogonal)成分との誘導体化を包含する。もう1つの他の半減期延長成分は、血清アルブミンを対象にするIVD(VHHなど)である。
ある態様において、被抱合成分は、すなわち抗炎症剤、抗がん剤、細胞毒性剤、抗感染剤(例として、抗真菌剤、抗細菌剤、抗寄生虫剤、抗ウイルス剤等々)、および麻酔治療剤(anesthetic therapeutic agents)を包含する様々な治療剤を含む。特定の態様において、被抱合成分は、プロドラッグを変換することが可能な酵素であり、前記プロドラッグは毒性薬物へ変換される。毒物(例として、毒素、細胞毒性薬、放射性核種)もまた、治療目的上好適であり得、がん治療において具体的に有用である。ゆえに、IVD−抱合体の特定の例は、抗体−薬物−抱合体(ADC)である。原則として、治療目的上好適であるどの剤も、本明細書において想定されるものである。記載のとおりの治療剤は、典型的には、小分子または生物製剤であるが、しかし治療剤はまた、そもそも、当業者にとって明らかであるはずの別のものでもあり得、かつ本発明はこれらに限定されるべきではない。
ある態様において、被抱合成分は、検出成分を含む。用語「検出成分」または「検出可能な標識」は、検出目的のために使用され得る特性または機能を保有するいずれかのユニット、すなわち発色団ユニット、蛍光ユニット、リン光ユニット、ルミネセンスユニット、光吸収ユニット、放射性ユニット、および遷移金属同位体質量タグ(mass tag)ユニットを含む群から選択されるものを指す。限定せずに、検出成分は、当業者にとって明らかなはずであるとおり、小分子または巨大分子であり得る。
本発明の別の態様において、検出ユニットを含む抱合体は、放射線放出(radiation emission)によっては検出されないが、しかしUV、可視光、またはNIR放射線の吸収によって検出される。好適な光吸収検出成分は、N−アリールローダミン、アゾ染料、およびスチルベンのような有機小分子クエンチャー染料などの、蛍光放射のない光吸収染料である。
本発明の別の態様において、検出ユニットを含む抱合体は、遷移金属同位体の質量分析検出によって検出される。遷移金属同位体質量タグ標識は、共有結合された有機金属錯体またはナノ粒子の構成要素として導入されてもよい。当該技術分野において知られているのは、ランタニドの同位体タグおよび隣接する後期遷移元素である。
ある態様において、被抱合成分は、標的化成分を含む。本明細書に使用されるとき、用語「標的化成分」は、標的分子へ結合する被抱合成分を指す。小分子または生物製剤は両者とも、標的化成分として採用され得る。標的化成分は、限定せずに、タンパク質、ヌクレオチド配列、脂質、他の炭水化物(例として、特定のグリカン)、およびそれらの組み合わせ(例として、糖タンパク質、糖ペプチド(glycopeputides)、および糖脂質)を含み得る。標的へ結合できるいずれの成分も、本発明に従う標的化成分として採用され得る。
ある態様において、IVD−抱合体は、グリカンと標的化成分との間にリンカーを含む。あるリンカーは他のリンカーより有用であり、特定のリンカーの使用は本願に応じるであろう。例えば、オキシムおよびヒドラゾン、とりわけ脂肪族アルデヒドに由来するものは、水中またはより低いpHにて、経時的により低い安定性を示す。芳香族的に(aromatically)安定化された構造体は、グリカンを被抱合成分へ安定して連結するのにより有用であり得る。安定化されたかかるリンカーもまた、具体的に被抱合成分が腫瘍細胞を死滅させることを意図した毒性物質であるとき、被抱合成分の早過ぎる放出に起因する逆効果を制限し得るところ、本願の範囲内にある。
もう1つの他の態様において、本発明は、本発明のIVDまたはISVD抱合体を産生するための方法を提供する。一般に、かかる方法は、えり抜きの(of choice)好適な細胞中に、本発明に従うIVDをコードするヌクレオチド配列を含む発現ベクターを導入すること、これに続き、しばらくの間IVDポリペプチドを発現すること、IVDポリペプチドを精製すること、および特定の被抱合成分を精製されたIVDポリペプチドへ連結することによって始める。カップリング方法自体は一般に、in vitroで実行される。
− 本発明のIVDを含むポリペプチドのグリカンに存在する近接のジオールまたはジオールを酸化させること
− 得られた遊離アルデヒド基を、アミノオキシ含有分子と反応させること
というステップを含む。
− 本発明のIVD上に存在する末端LacNAc N−グリカン中のGal残基のC6ヒドロキシル基を酸化すること
− 遊離アルデヒド基を、アミノオキシ含有分子と反応させること
というステップを含む。
オキシムおよびヒドラゾンの安定性をモジュレートするために、またはこれを具体的に増大させるために、リンカーの使用は、前に記載のとおり、具体的に本明細書において想定されている。
特定の数種の方法は、さらに下の例のセクションにおいて詳細に特定されている。
具体的な態様において、本発明のIVDを含むポリペプチド−抱合体は、循環半減期をモジュレートするため、もしくはIVD安定性を増大させるために、選択的標的化のために、IVD−抱合体の免疫原性をモジュレートするために、または検出目的のために、使用される。
もう1つの他の態様において、本発明のIVD−抱合体は、医薬として使用される。
もう1つの他の態様において、本発明のIVD(いずれに成分とも抱合させていない)は、抗体の事前結合を防止するために使用される。
もう1つの他の態様において、本発明のIVD(いずれに成分とも抱合させていない)は、免疫原性を低減するために使用される。
もう1つの他の態様において、本発明は、本発明のIVD−抱合体を含むキットを提供する。
別の態様において、前に記載のとおりのIVDを含むポリペプチドまたはIVD−抱合体を含む医薬組成物が提供される。
医薬組成物は大抵、コルク付きi.v.溶液瓶などの、滅菌されたアクセスポート(access port)付き容器に充填されている。コルクは、皮下注射針によって貫通され得る。
本例において、我々は、代表的な免疫グロブリン単一可変ドメインポリペプチド(RCSB Protein Data Bankまたは手短に言えば:PDBデータベースから探し出した(isolated from)エントリー3K74からの鎖B;3K74は、2つの鎖、言い換えれば、A鎖(ジヒドロ葉酸レダクターゼ)およびB鎖(ジヒドロ葉酸レダクターゼに結合するナノボディー)を含有する;本明細書において、さらに我々は、ナノボディー(B鎖)のみを特定するために3K74を使用する)の入手可能な結晶学的構造から、人工のN−グリコシル化部位の導入に好適な構造中の領域を特定することを始めた。この3K74 ISVDポリペプチドは、Oyen D. et al (2011) J.Mol.Biol. 407: 138-148によって最初に記載されたナノボディーであり、そのタンパク質2次構造は、図1に図式的に描かれている。
例1において概説された我々の合理的な設計アプローチおよび特定の基準に基づき、我々は、代表的なナノボディー3K74に存在する合計9つの領域を選択した(図1、右パネルを参照、人工のN−グリカン受容部位の導入のために選択された9つの領域は黒色で描かれている)。ベータシート構造要素に存在する領域に加えて、我々は、N−およびC末グリコシル化タグの、配列番号1で表される実際のナノボディーアミノ酸配列への付加を計画した。
配列番号2はCDR1を表し、配列番号3はCDR2を表し、配列番号4はCDR3を表し、配列番号5はFR1を表し、配列番号6はFR2を表し、配列番号7はFR3を表し、および配列番号8はFR4を表す。
QLQESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFNNYWMYWVRRAPGKGLEWVSMINPGGIITKYAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLTSEDTAVYYCAKDWATGLAKKGQGTQVTVSS
配列番号3(CDR2):INPGGIITK
配列番号4(CDR3):AKDWATGLA
配列番号5(FR1):QLQESGGGLVQPGGSLRLSCAAS
配列番号6(FR2):MYWVRRAPGKGLEWVSM
配列番号7(FR3):YAESVKGRFTISRDNAKNTLYLQMNSLTSEDTAVYYC
配列番号8(FR4):KKGQGTQVTVSS
GFP結合ナノボディー(GBPと略され、Kubala, M.H. et al (2010) Protein Sci. 19(12)によって公開された)を、例2において特定され、合理的に設計された10のN−グリコシル化受容部位案の導入のためのベンチマーク(benchmark)ISVDとして選択した。我々は、人工のN末糖鎖タグ付けされたバリアント(QADDANATVQLVESGGA、野生型GBP中QVQLVESGGAの代わり)を包含させた。我々はまた、C末糖鎖(glyco-)HISタグ付けされたバリアント(VSSLQAAAAAANATVAAASGDVWDIHHHHHH、野生型(HISタグ付けされた)GBP中VSSHHHHHHの代わり)も包含させた。GBPバリアントのすべてが、精製および/または検出を容易にするC末ヒスチジンタグ(6×HIS)を備えていた。
配列番号10はCDR1を表し、配列番号11はCDR2を表し、配列番号12はCDR3を表し、配列番号13はFR1を表し、配列番号14はFR2を表し、配列番号15はFR3を表し、および配列番号16はFR4を表す。
QVQLVESGGALVQPGGSLRLSCAASGFPVNRYSMRWYRQAPGKEREWVAGMSSAGDRSSYEDSVKGRFTISRDDARNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCNVNVGFEYWGQGTQVTVSSHHHHHH(121アミノ酸)
配列番号11(CDR2):MSSAGDRSS
配列番号12(CDR3):NVNVGFE
配列番号13(FR1):QVQLVESGGALVQPGGSLRLSCAAS
配列番号14(FR2):MRWYRQAPGKEREWVAG
配列番号15(FR3):YEDSVKGRFTISRDDARNTVYLQMNSLKPEDTAVYYC
配列番号16(FR4):YWGQGTQVTVSS
我々がこれらの知見を他のナノボディーに当てはめられるか評価するため、我々は、数種の他のナノボディーにN連結グリコシル化サインを導入した。ナノボディーNb41(これは、Claes, K. et al (2016) ACS Synth Biol. 5(10)においてNbCA4141と指定される)において、我々は、参照ナノボディー3K74中のK86NおよびGBPナノボディー中のR86Nに対応する部位にてN−グリコシル化シークオンを導入した。Nb41の配列は、配列番号17で表される。配列番号18はCDR1を表し、配列番号19はCDR2を表し、配列番号20はCDR3を表し、配列番号21はFR1を表し、配列番号22はFR2を表し、配列番号23はFR3を表し、および配列番号24はFR4を表す。
QVQLQESGGGLVQPGGSLRLSCVASGSIFSINAMGWYRQAPGKQRELVAAISSGGRTNYADSVKGRFTISRDNAKNTVHLQMNSLKPEDTAVYYCNVGSWGFRSHSYLSGSSWGQGTQVTVSSHHHHHH(129アミノ酸)
3つのCDR領域に下線を付す。
配列番号19(CDR2):ISSGGRTN
配列番号20(CDR3):NVGSWGFRSHSYLSGS
配列番号21(FR1):QVQLQESGGGLVQPGGSLRLSCVAS
配列番号22(FR2):MGWYRQAPGKQRELVAA
配列番号23(FR3):YADSVKGRFTISRDNAKNTVHLQMNSLKPEDTAVYYC
配列番号24(FR4):SWGQGTQVTVSS
QVQLQESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTLDYYYIGWFRQAPGKEREAVSCISGSSGSTYYPDSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCATIRSSSWGGCVHYGMDYWGKGTQVTVSSGSHHHHHHHH(135アミノ酸)
配列番号26(F-VHH-L66):
QVQLQESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTLDYYYIGWFRQAPGKEREGVSCISSSHGSTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCATVAVAHFRGCGVDGMDYWGKGTQVTVSSGSHHHHHHHH(135アミノ酸)
222のVHHコード鎖の配列(PDB検索を、クエリー「VHH」またはナノボディーを用いて実行し、巨大分子名が「ナノボディー」、「nb」、「nab」、「vhh」もしくは「cab」のいずれかを含有する得られたPDB IDにつき1つの鎖を選択した;または供給源の種は、Camelus dromedarius、Lama glama、もしくはVicugna pacosである;または保存されているアミノ酸配列「VQL」が、最初の40アミノ酸残基にある)をRCSB Protein Data Bank(要するにPDB)から抽出し、PyMOL(PyMOL Molecular Graphics System, Version 1.3 Schroedinger, LLC.)を使用してアライメントした。これらのVHHの各々において、アミノ酸83と88(AHo)との間の領域、およびアミノ酸27と40(AHo)との間の領域は、2次構造のベータ鎖を連結するアミノ酸鎖を構成する。
先の例からのデータは、ISVD(ナノボディーによって例示される)が、合理的に選出され保存されている領域(グリカンの存在が抗原認識およびタンパク質の折り畳みに影響を及ぼさない)において効果的にグリコシル化され得ることを、説得力をもって示す。これらのデータは、ISVDのグリカン媒介標的化および部位特異的グリカンをベースとした抱合ストラテジーのための道を開く。以下の例において、我々は、グリカン特異的抱合方法の本願のため、人工的に改変されたN−グリコシル化部位(例3、4および5において概説されたとおり)にて単純かつ均一なN連結型グリカンをもつナノボディーを使用している。
この例において、我々は、位置86(Ahoナンバリング)にて人工的に導入されたN−グリカンをもつナノボディーが、どのようにして、グリカン上にPEG−ビオチンで特異的に修飾され得るかを示す。ナノボディーを先ず、HEK293のGlycoDelete細胞(WO2010015722を参照)、HEK293のGlycoDoubledelete細胞(WO2017005925を参照)、Pichia-GlycoDelete細胞、またはガラクトシルトランスフェラーゼを過剰発現するPichia-GlycoDelete細胞において組み換えで発現させる。使用されるGlycoDelete方法に応じて、GlcNAc、LacNAcおよびシアリル−LacNAcからなる群から選択されるグリカンで修飾されたナノボディーが得られる。
この例においては、代替的抱合ストラテジーを適用する。グリカンの過ヨウ素酸酸化の代わりに、我々は、酵素ガラクトースオキシダーゼ(GAO)を使用して、関心のあるナノボディー上に人工的に導入されたLacNAcグリカン(例7において得られたとおり)中のGal残基のC6ヒドロキシル基を酸化させる。この酵素的酸化はまた、遊離アルデヒド基も創出するが、前記基は、例7に記載されるとおりオキシムライゲーション、ヒドラゾンライゲーション、または還元的アミノ化を介して、関心のある分子へ連結され得る(Park, A. et al., Endocrinology 154、2013)。
Claims (20)
- 免疫グロブリン可変ドメイン(IVD)を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、IVDが、4つのフレームワーク領域(FR)および3つの相補性決定領域(CDR)を、以下の式(1):FR1−CDR1−FR2−CDR2−FR3−CDR3−FR4(1)に従って含むアミノ酸配列を含み、ここで該IVDは、(AHoナンバリング規則に従って)IVDのアミノ酸範囲83〜88から選択されるアミノ酸に、および/または、アミノ酸範囲27〜40から選択されるアミノ酸に存在するグリコシル化受容部位を有する、前記IVDを含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列。
- 該IVDが、免疫グロブリン単一可変ドメイン(ISVD)である、請求項1に記載のIVDを含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列。
- 該IVDのグリコシル化受容部位が、N−グリコシル化され得るアスパラギン残基である、請求項1または2に記載のIVDを含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列。
- IVDが、NXT、NXS、NXCまたはNXVモチーフ(前記モチーフ中Xは、いずれのアミノ酸でもあり得る)を、NXT/NXS/NXC/NXVモチーフのアスパラギン残基が、(AHoナンバリング規則に従って)IVDのアミノ酸範囲83〜88から選択されるアミノ酸におよび/またはアミノ酸範囲27〜40から選択されるアミノ酸に存在するように、含有する、請求項3に記載のIVDを含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列。
- IVDが、IVD中、(AHoナンバリング規則に従って)位置14および/または48などに、追加のグリコシル化受容部位を有する、請求項1〜4のいずれか一項に記載のIVDを含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列。
- 請求項1〜5のいずれか一項に記載のヌクレオチド配列を含む、発現ベクター。
- 請求項6に記載の発現ベクターを含む、細胞。
- 細胞が、哺乳動物の細胞もしくは植物細胞などの高等真核細胞、糸状菌細胞もしくは酵母細胞などの下等真核細胞、または原核細胞である、請求項7に記載の細胞。
- 細胞が、糖鎖改変細胞である、請求項7または8に記載の細胞。
- 請求項1〜5のいずれか一項に記載のヌクレオチド配列にコードされるIVDを含む、ポリペプチド。
- グリコシル化されており、かつ1以上のグリカンを含む、請求項10に記載のIVDを含むポリペプチドであって、前記グリカンが、末端のGlcNAc、GalNAc、ガラクトース、シアル酸、グルコース、グルコサミン、ガラクトサミン、バシロサミン、マンノースもしくはマンノース−6−P糖、またはGalNAz、GlcNAzおよびアジド−シアル酸などの化学修飾単糖類を有する、前記IVDを含むポリペプチド。
- 該ポリペプチドのグリコシル化が、GlcNAc、LacNAc、シアリル−LacNAc、Man5GlcNAc2、Man8GlcNAc2、Man9GlcNAc2、高(hyper-)マンノシル化グリカン、マンノース−6−リン酸グリカン、複合グリカン、ハイブリッドグリカン、およびGlcNAz、GlcNAc−GalNAz、アジド−シアル酸−LacNAcなどの化学修飾グリカンからなる群から選択される1以上のグリカンからなる、請求項10に記載のIVDを含むポリペプチド。
- グリカン特異的抱合のための、請求項10〜12のいずれか一項に記載のポリペプチドの使用。
- 請求項10〜12のいずれか一項に記載のポリペプチド、および被抱合成分を含む、IVD抱合体。
- 該被抱合成分が、N連結型グリカンへ接続されている、請求項14に記載のIVD抱合体。
- 被抱合成分が、半減期延長成分、治療剤、検出ユニットまたは標的化成分を含む、請求項14または15に記載の抱合体。
- 請求項10〜12のいずれか一項に記載のポリペプチドを産生する方法であって、該方法が、請求項6に記載の発現ベクターを好適な細胞に導入すること、該ポリペプチドを発現すること、およびこれを単離することを含む、前記方法。
- 請求項14〜16のいずれか一項に記載のIVD抱合体を産生する方法であって、該方法が、請求項6に記載の発現ベクターを好適な細胞に導入すること、請求項10〜12のいずれか一項に記載のポリペプチドを発現すること、および被抱合成分をポリペプチドへ連結することを含む、前記方法。
- 循環半減期をモジュレートするための、糖タンパク質安定性を増大させるための、選択的標的化のための、免疫原性をモジュレートするための、抗体の事前結合を防止するための、もしくは検出目的のための、請求項10〜12のいずれか一項に記載のIVDを含むポリペプチドの、または請求項14〜16のいずれか一項に記載のIVD抱合体の使用。
- 請求項10〜12のいずれか一項に記載のポリペプチド、または請求項14もしくは16に記載のIVD抱合体を含む、医薬組成物。
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