JP2020162434A - 小腸での代謝又は修飾産物を生体外で生産する方法 - Google Patents
小腸での代謝又は修飾産物を生体外で生産する方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2020162434A JP2020162434A JP2019063993A JP2019063993A JP2020162434A JP 2020162434 A JP2020162434 A JP 2020162434A JP 2019063993 A JP2019063993 A JP 2019063993A JP 2019063993 A JP2019063993 A JP 2019063993A JP 2020162434 A JP2020162434 A JP 2020162434A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cell structure
- cells
- cell
- product
- substance
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 title claims abstract description 44
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title abstract description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 81
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 45
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 287
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 80
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 50
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 50
- 210000002490 intestinal epithelial cell Anatomy 0.000 claims description 34
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 claims description 31
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 29
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 28
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 27
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 25
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims description 22
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 22
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 11
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 claims description 11
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 10
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 claims description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 5
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 abstract 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 79
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 67
- 210000002220 organoid Anatomy 0.000 description 62
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 60
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 59
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 50
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 46
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 39
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 37
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 35
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 34
- 108010081668 Cytochrome P-450 CYP3A Proteins 0.000 description 32
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 30
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 29
- 102100039205 Cytochrome P450 3A4 Human genes 0.000 description 26
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 24
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 23
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 18
- 239000000463 material Substances 0.000 description 16
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 16
- 230000006870 function Effects 0.000 description 15
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 14
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 14
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 12
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 12
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 12
- 230000036267 drug metabolism Effects 0.000 description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 10
- 230000008672 reprogramming Effects 0.000 description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 9
- 101000938676 Homo sapiens Liver carboxylesterase 1 Proteins 0.000 description 9
- 102100030817 Liver carboxylesterase 1 Human genes 0.000 description 9
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 9
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 8
- 210000001900 endoderm Anatomy 0.000 description 8
- 210000004039 endoderm cell Anatomy 0.000 description 8
- UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N irinotecan Chemical compound C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N 0.000 description 8
- 229960004768 irinotecan Drugs 0.000 description 8
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 8
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 8
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 8
- 101000898006 Homo sapiens Cocaine esterase Proteins 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 7
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 210000001705 ectoderm cell Anatomy 0.000 description 7
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 7
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 7
- 210000003716 mesoderm Anatomy 0.000 description 7
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 6
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 6
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 6
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 6
- 239000012790 adhesive layer Substances 0.000 description 6
- 239000002771 cell marker Substances 0.000 description 6
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- 210000003981 ectoderm Anatomy 0.000 description 6
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 6
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 6
- 210000001704 mesoblast Anatomy 0.000 description 6
- 230000002572 peristaltic effect Effects 0.000 description 6
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 6
- QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N vitamin D3 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N 0.000 description 6
- 239000011647 vitamin D3 Substances 0.000 description 6
- 235000005282 vitamin D3 Nutrition 0.000 description 6
- 229940021056 vitamin d3 Drugs 0.000 description 6
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 210000003890 endocrine cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 5
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 5
- 230000007102 metabolic function Effects 0.000 description 5
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 5
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 5
- 108010083123 CDX2 Transcription Factor Proteins 0.000 description 4
- 102000006277 CDX2 Transcription Factor Human genes 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108050008554 Multidrug resistance protein MdtK Proteins 0.000 description 4
- 102100035140 Vitronectin Human genes 0.000 description 4
- 108010031318 Vitronectin Proteins 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 4
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 4
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 4
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000001842 enterocyte Anatomy 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 210000002175 goblet cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000011419 induction treatment Methods 0.000 description 4
- 210000003134 paneth cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 4
- -1 polypropylene Polymers 0.000 description 4
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 4
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 4
- 108010001237 Cytochrome P-450 CYP2D6 Proteins 0.000 description 3
- 102100021704 Cytochrome P450 2D6 Human genes 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 101000819074 Homo sapiens Transcription factor GATA-4 Proteins 0.000 description 3
- 101000819088 Homo sapiens Transcription factor GATA-6 Proteins 0.000 description 3
- 101710183548 Pyridoxal 5'-phosphate synthase subunit PdxS Proteins 0.000 description 3
- 102100021380 Transcription factor GATA-4 Human genes 0.000 description 3
- 102100021382 Transcription factor GATA-6 Human genes 0.000 description 3
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 3
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 3
- GMRQFYUYWCNGIN-NKMMMXOESA-N calcitriol Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@@H](CCCC(C)(C)O)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)C[C@H](O)C1=C GMRQFYUYWCNGIN-NKMMMXOESA-N 0.000 description 3
- 239000011612 calcitriol Substances 0.000 description 3
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 3
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 3
- 210000004966 intestinal stem cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 238000006241 metabolic reaction Methods 0.000 description 3
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 3
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 3
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 3
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 3
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 3
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000003708 urethra Anatomy 0.000 description 3
- 102100029361 Aromatase Human genes 0.000 description 2
- 102100031650 C-X-C chemokine receptor type 4 Human genes 0.000 description 2
- OXJGJKIURHREKH-UHFFFAOYSA-O CC(=C)C(=O)OCCP(=O)=C(O)C[N+](C)(C)C Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCP(=O)=C(O)C[N+](C)(C)C OXJGJKIURHREKH-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 102100036808 Carboxylesterase 3 Human genes 0.000 description 2
- 108010009911 Cytochrome P-450 CYP11B2 Proteins 0.000 description 2
- 108010074918 Cytochrome P-450 CYP1A1 Proteins 0.000 description 2
- 108010020070 Cytochrome P-450 CYP2B6 Proteins 0.000 description 2
- 108010026925 Cytochrome P-450 CYP2C19 Proteins 0.000 description 2
- 108010000561 Cytochrome P-450 CYP2C8 Proteins 0.000 description 2
- 108010000543 Cytochrome P-450 CYP2C9 Proteins 0.000 description 2
- 108010001202 Cytochrome P-450 CYP2E1 Proteins 0.000 description 2
- 102100024329 Cytochrome P450 11B2, mitochondrial Human genes 0.000 description 2
- 102100031476 Cytochrome P450 1A1 Human genes 0.000 description 2
- 102100038739 Cytochrome P450 2B6 Human genes 0.000 description 2
- 102100029363 Cytochrome P450 2C19 Human genes 0.000 description 2
- 102100029359 Cytochrome P450 2C8 Human genes 0.000 description 2
- 102100029358 Cytochrome P450 2C9 Human genes 0.000 description 2
- 102100024889 Cytochrome P450 2E1 Human genes 0.000 description 2
- 102100033053 Glutathione peroxidase 3 Human genes 0.000 description 2
- 102100029284 Hepatocyte nuclear factor 3-beta Human genes 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000919395 Homo sapiens Aromatase Proteins 0.000 description 2
- 101000922348 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 description 2
- 101000851624 Homo sapiens Carboxylesterase 3 Proteins 0.000 description 2
- 101000871067 Homo sapiens Glutathione peroxidase 3 Proteins 0.000 description 2
- 101001062347 Homo sapiens Hepatocyte nuclear factor 3-beta Proteins 0.000 description 2
- 101000829725 Homo sapiens Phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 101000896517 Homo sapiens Steroid 17-alpha-hydroxylase/17,20 lyase Proteins 0.000 description 2
- 101000652332 Homo sapiens Transcription factor SOX-1 Proteins 0.000 description 2
- 101000652324 Homo sapiens Transcription factor SOX-17 Proteins 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 102100023410 Phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase Human genes 0.000 description 2
- 229920002845 Poly(methacrylic acid) Polymers 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 102100021719 Steroid 17-alpha-hydroxylase/17,20 lyase Human genes 0.000 description 2
- 102100030248 Transcription factor SOX-1 Human genes 0.000 description 2
- 102100030243 Transcription factor SOX-17 Human genes 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 230000004956 cell adhesive effect Effects 0.000 description 2
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 2
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 2
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 210000001654 germ layer Anatomy 0.000 description 2
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 description 2
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 2
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 2
- 210000002570 interstitial cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 2
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 2
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 2
- 210000004738 parenchymal cell Anatomy 0.000 description 2
- CPJSUEIXXCENMM-UHFFFAOYSA-N phenacetin Chemical compound CCOC1=CC=C(NC(C)=O)C=C1 CPJSUEIXXCENMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 2
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 108090000195 villin Proteins 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100037426 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100022586 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100022585 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 3 Human genes 0.000 description 1
- JMMZCWZIJXAGKW-UHFFFAOYSA-N 2-methylpent-2-ene Chemical compound CCC=C(C)C JMMZCWZIJXAGKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100034254 3-oxo-5-alpha-steroid 4-dehydrogenase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100033875 3-oxo-5-alpha-steroid 4-dehydrogenase 2 Human genes 0.000 description 1
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UZOVYGYOLBIAJR-UHFFFAOYSA-N 4-isocyanato-4'-methyldiphenylmethane Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CC1=CC=C(N=C=O)C=C1 UZOVYGYOLBIAJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000010553 ALAD Human genes 0.000 description 1
- 101150082527 ALAD gene Proteins 0.000 description 1
- 101150037123 APOE gene Proteins 0.000 description 1
- 102100033350 ATP-dependent translocase ABCB1 Human genes 0.000 description 1
- 102100035972 ATPase GET3 Human genes 0.000 description 1
- 229920000178 Acrylic resin Polymers 0.000 description 1
- 239000004925 Acrylic resin Substances 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 102100027211 Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102100034042 Alcohol dehydrogenase 1C Human genes 0.000 description 1
- 102100031794 Alcohol dehydrogenase 6 Human genes 0.000 description 1
- 102100039702 Alcohol dehydrogenase class-3 Human genes 0.000 description 1
- 102100034044 All-trans-retinol dehydrogenase [NAD(+)] ADH1B Human genes 0.000 description 1
- 102100031795 All-trans-retinol dehydrogenase [NAD(+)] ADH4 Human genes 0.000 description 1
- 102100022712 Alpha-1-antitrypsin Human genes 0.000 description 1
- 101710085003 Alpha-tubulin N-acetyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 101710085461 Alpha-tubulin N-acetyltransferase 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100039160 Amiloride-sensitive amine oxidase [copper-containing] Human genes 0.000 description 1
- 102100029470 Apolipoprotein E Human genes 0.000 description 1
- 102100030907 Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator Human genes 0.000 description 1
- 229930003347 Atropine Natural products 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 102100022595 Broad substrate specificity ATP-binding cassette transporter ABCG2 Human genes 0.000 description 1
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 description 1
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 description 1
- 101000690445 Caenorhabditis elegans Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator homolog Proteins 0.000 description 1
- 102100038782 Carbohydrate sulfotransferase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100040999 Catechol O-methyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 108020002739 Catechol O-methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102100030499 Chorion-specific transcription factor GCMa Human genes 0.000 description 1
- 102100029136 Collagen alpha-1(II) chain Human genes 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010024682 Core Binding Factor Alpha 1 Subunit Proteins 0.000 description 1
- 102000015775 Core Binding Factor Alpha 1 Subunit Human genes 0.000 description 1
- 241000938605 Crocodylia Species 0.000 description 1
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 102000004328 Cytochrome P-450 CYP3A Human genes 0.000 description 1
- 102100032640 Cytochrome P450 2F1 Human genes 0.000 description 1
- 102100031461 Cytochrome P450 2J2 Human genes 0.000 description 1
- 102100039208 Cytochrome P450 3A5 Human genes 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- 101100239628 Danio rerio myca gene Proteins 0.000 description 1
- 102100029790 Defensin-6 Human genes 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100036912 Desmin Human genes 0.000 description 1
- 108010044052 Desmin Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100030751 Eomesodermin homolog Human genes 0.000 description 1
- 102100025403 Epoxide hydrolase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100027297 Fatty acid 2-hydroxylase Human genes 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091092584 GDNA Proteins 0.000 description 1
- 102400001370 Galanin Human genes 0.000 description 1
- 101800002068 Galanin Proteins 0.000 description 1
- 102100039289 Glial fibrillary acidic protein Human genes 0.000 description 1
- 101710193519 Glial fibrillary acidic protein Proteins 0.000 description 1
- 101710174134 Globin CTT-Z Proteins 0.000 description 1
- 102100031132 Glucose-6-phosphate isomerase Human genes 0.000 description 1
- 108010070600 Glucose-6-phosphate isomerase Proteins 0.000 description 1
- 102100035902 Glutamate decarboxylase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100035857 Glutamate decarboxylase 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100036533 Glutathione S-transferase Mu 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100036528 Glutathione S-transferase Mu 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100023524 Glutathione S-transferase Mu 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100030943 Glutathione S-transferase P Human genes 0.000 description 1
- 102100038055 Glutathione S-transferase theta-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100033039 Glutathione peroxidase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100033044 Glutathione peroxidase 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 101710094895 HTLV-1 basic zipper factor Proteins 0.000 description 1
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 1
- 102100030387 Hemoglobin subunit zeta Human genes 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100021866 Hepatocyte growth factor Human genes 0.000 description 1
- 102100022054 Hepatocyte nuclear factor 4-alpha Human genes 0.000 description 1
- 102000003834 Histamine H1 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000110 Histamine H1 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000806242 Homo sapiens 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001045223 Homo sapiens 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001045211 Homo sapiens 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000640855 Homo sapiens 3-oxo-5-alpha-steroid 4-dehydrogenase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000640851 Homo sapiens 3-oxo-5-alpha-steroid 4-dehydrogenase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001074983 Homo sapiens ATPase GET3 Proteins 0.000 description 1
- 101000780463 Homo sapiens Alcohol dehydrogenase 1C Proteins 0.000 description 1
- 101000775460 Homo sapiens Alcohol dehydrogenase 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000959452 Homo sapiens Alcohol dehydrogenase class-3 Proteins 0.000 description 1
- 101000780453 Homo sapiens All-trans-retinol dehydrogenase [NAD(+)] ADH1B Proteins 0.000 description 1
- 101000775437 Homo sapiens All-trans-retinol dehydrogenase [NAD(+)] ADH4 Proteins 0.000 description 1
- 101000823116 Homo sapiens Alpha-1-antitrypsin Proteins 0.000 description 1
- 101000889548 Homo sapiens Amiloride-sensitive amine oxidase [copper-containing] Proteins 0.000 description 1
- 101000793115 Homo sapiens Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator Proteins 0.000 description 1
- 101000884385 Homo sapiens Arylamine N-acetyltransferase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000884399 Homo sapiens Arylamine N-acetyltransferase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000883008 Homo sapiens Carbohydrate sulfotransferase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000862639 Homo sapiens Chorion-specific transcription factor GCMa Proteins 0.000 description 1
- 101000771163 Homo sapiens Collagen alpha-1(II) chain Proteins 0.000 description 1
- 101000941738 Homo sapiens Cytochrome P450 2F1 Proteins 0.000 description 1
- 101000941723 Homo sapiens Cytochrome P450 2J2 Proteins 0.000 description 1
- 101000865479 Homo sapiens Defensin-6 Proteins 0.000 description 1
- 101001064167 Homo sapiens Eomesodermin homolog Proteins 0.000 description 1
- 101001077852 Homo sapiens Epoxide hydrolase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001034811 Homo sapiens Eukaryotic translation initiation factor 4 gamma 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000937693 Homo sapiens Fatty acid 2-hydroxylase Proteins 0.000 description 1
- 101000918494 Homo sapiens Fatty-acid amide hydrolase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000893424 Homo sapiens Glucokinase regulatory protein Proteins 0.000 description 1
- 101000873546 Homo sapiens Glutamate decarboxylase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000873786 Homo sapiens Glutamate decarboxylase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001071691 Homo sapiens Glutathione S-transferase Mu 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001071716 Homo sapiens Glutathione S-transferase Mu 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000906394 Homo sapiens Glutathione S-transferase Mu 5 Proteins 0.000 description 1
- 101001010139 Homo sapiens Glutathione S-transferase P Proteins 0.000 description 1
- 101001032462 Homo sapiens Glutathione S-transferase theta-1 Proteins 0.000 description 1
- 101001014936 Homo sapiens Glutathione peroxidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000871129 Homo sapiens Glutathione peroxidase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 1
- 101000898034 Homo sapiens Hepatocyte growth factor Proteins 0.000 description 1
- 101001045740 Homo sapiens Hepatocyte nuclear factor 4-alpha Proteins 0.000 description 1
- 101000840551 Homo sapiens Hexokinase-2 Proteins 0.000 description 1
- 101001053263 Homo sapiens Insulin gene enhancer protein ISL-1 Proteins 0.000 description 1
- 101001076408 Homo sapiens Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 101001050577 Homo sapiens Kinesin-like protein KIF2A Proteins 0.000 description 1
- 101001063456 Homo sapiens Leucine-rich repeat-containing G-protein coupled receptor 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000956314 Homo sapiens Maleylacetoacetate isomerase Proteins 0.000 description 1
- 101001014059 Homo sapiens Metallothionein-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000628796 Homo sapiens Microsomal glutathione S-transferase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000628785 Homo sapiens Microsomal glutathione S-transferase 3 Proteins 0.000 description 1
- 101001059982 Homo sapiens Mitogen-activated protein kinase kinase kinase kinase 5 Proteins 0.000 description 1
- 101001133081 Homo sapiens Mucin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000969812 Homo sapiens Multidrug resistance-associated protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001023043 Homo sapiens Myoblast determination protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000958865 Homo sapiens Myogenic factor 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000973778 Homo sapiens NAD(P)H dehydrogenase [quinone] 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001128156 Homo sapiens Nanos homolog 3 Proteins 0.000 description 1
- 101001124309 Homo sapiens Nitric oxide synthase, endothelial Proteins 0.000 description 1
- 101000613495 Homo sapiens Paired box protein Pax-4 Proteins 0.000 description 1
- 101000612089 Homo sapiens Pancreas/duodenum homeobox protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001116302 Homo sapiens Platelet endothelial cell adhesion molecule Proteins 0.000 description 1
- 101000620009 Homo sapiens Polyunsaturated fatty acid 5-lipoxygenase Proteins 0.000 description 1
- 101001064864 Homo sapiens Polyunsaturated fatty acid lipoxygenase ALOX12 Proteins 0.000 description 1
- 101001064853 Homo sapiens Polyunsaturated fatty acid lipoxygenase ALOX15 Proteins 0.000 description 1
- 101001026214 Homo sapiens Potassium voltage-gated channel subfamily A member 5 Proteins 0.000 description 1
- 101001048456 Homo sapiens Protein Hook homolog 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001091536 Homo sapiens Pyruvate kinase PKLR Proteins 0.000 description 1
- 101001091538 Homo sapiens Pyruvate kinase PKM Proteins 0.000 description 1
- 101001094647 Homo sapiens Serum paraoxonase/arylesterase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000621061 Homo sapiens Serum paraoxonase/arylesterase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000621057 Homo sapiens Serum paraoxonase/lactonase 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000713305 Homo sapiens Sodium-coupled neutral amino acid transporter 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000639975 Homo sapiens Sodium-dependent noradrenaline transporter Proteins 0.000 description 1
- 101000868152 Homo sapiens Son of sevenless homolog 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000633119 Homo sapiens Stannin Proteins 0.000 description 1
- 101000851018 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor receptor 1 Proteins 0.000 description 1
- RKUNBYITZUJHSG-UHFFFAOYSA-N Hyosciamin-hydrochlorid Natural products CN1C(C2)CCC1CC2OC(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 RKUNBYITZUJHSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100024392 Insulin gene enhancer protein ISL-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 102000036770 Islet Amyloid Polypeptide Human genes 0.000 description 1
- 108010041872 Islet Amyloid Polypeptide Proteins 0.000 description 1
- 102100023426 Kinesin-like protein KIF2A Human genes 0.000 description 1
- MIJPAVRNWPDMOR-ZAFYKAAXSA-N L-ascorbic acid 2-phosphate Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(OP(O)(O)=O)=C1O MIJPAVRNWPDMOR-ZAFYKAAXSA-N 0.000 description 1
- 102100031036 Leucine-rich repeat-containing G-protein coupled receptor 5 Human genes 0.000 description 1
- 102000004058 Leukemia inhibitory factor Human genes 0.000 description 1
- 108090000581 Leukemia inhibitory factor Proteins 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150039798 MYC gene Proteins 0.000 description 1
- 102100038560 Maleylacetoacetate isomerase Human genes 0.000 description 1
- 239000004640 Melamine resin Substances 0.000 description 1
- 229920000877 Melamine resin Polymers 0.000 description 1
- 108010047230 Member 1 Subfamily B ATP Binding Cassette Transporter Proteins 0.000 description 1
- 108010090306 Member 2 Subfamily G ATP Binding Cassette Transporter Proteins 0.000 description 1
- 101001066400 Mesocricetus auratus Homeodomain-interacting protein kinase 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100031347 Metallothionein-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100026741 Microsomal glutathione S-transferase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100026723 Microsomal glutathione S-transferase 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100026722 Microsomal glutathione S-transferase 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100028195 Mitogen-activated protein kinase kinase kinase kinase 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100034263 Mucin-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100021339 Multidrug resistance-associated protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 108091057508 Myc family Proteins 0.000 description 1
- 102100035077 Myoblast determination protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100038380 Myogenic factor 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100022365 NAD(P)H dehydrogenase [quinone] 1 Human genes 0.000 description 1
- ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N NADPH Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 101150012532 NANOG gene Proteins 0.000 description 1
- 101150079937 NEUROD1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100031893 Nanos homolog 3 Human genes 0.000 description 1
- 102000008730 Nestin Human genes 0.000 description 1
- 108010088225 Nestin Proteins 0.000 description 1
- 108700020297 NeuroD Proteins 0.000 description 1
- 102100032063 Neurogenic differentiation factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000017279 Oligopeptide transporters Human genes 0.000 description 1
- 108050005204 Oligopeptide transporters Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 101100168374 Oryctolagus cuniculus CYP2C1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150111723 PDX1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100040909 Paired box protein Pax-4 Human genes 0.000 description 1
- 102100041030 Pancreas/duodenum homeobox protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 102100024616 Platelet endothelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 1
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100022364 Polyunsaturated fatty acid 5-lipoxygenase Human genes 0.000 description 1
- 102100031949 Polyunsaturated fatty acid lipoxygenase ALOX12 Human genes 0.000 description 1
- 102100031950 Polyunsaturated fatty acid lipoxygenase ALOX15 Human genes 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 238000009009 Protein Assay Kit II Methods 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100034909 Pyruvate kinase PKLR Human genes 0.000 description 1
- 102100034911 Pyruvate kinase PKM Human genes 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 108091006594 SLC15A1 Proteins 0.000 description 1
- 102100035476 Serum paraoxonase/arylesterase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100022824 Serum paraoxonase/arylesterase 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100022833 Serum paraoxonase/lactonase 3 Human genes 0.000 description 1
- 206010040844 Skin exfoliation Diseases 0.000 description 1
- 102100036916 Sodium-coupled neutral amino acid transporter 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100033929 Sodium-dependent noradrenaline transporter Human genes 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- 102100021491 Solute carrier family 15 member 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100029603 Stannin Human genes 0.000 description 1
- 206010043276 Teratoma Diseases 0.000 description 1
- 239000007984 Tris EDTA buffer Substances 0.000 description 1
- 102100021869 Tyrosine aminotransferase Human genes 0.000 description 1
- 101710175714 Tyrosine aminotransferase Proteins 0.000 description 1
- 102100025038 Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase isozyme L1 Human genes 0.000 description 1
- 101710186825 Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase isozyme L1 Proteins 0.000 description 1
- 108010053099 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2 Proteins 0.000 description 1
- 102100033178 Vascular endothelial growth factor receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100033177 Vascular endothelial growth factor receptor 2 Human genes 0.000 description 1
- BZHJMEDXRYGGRV-UHFFFAOYSA-N Vinyl chloride Chemical compound ClC=C BZHJMEDXRYGGRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100459258 Xenopus laevis myc-a gene Proteins 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000122 acrylonitrile butadiene styrene Polymers 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000002821 alveolar epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- PLOPBXQQPZYQFA-AXPWDRQUSA-N amlintide Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)CSSC1)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 PLOPBXQQPZYQFA-AXPWDRQUSA-N 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 238000013528 artificial neural network Methods 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- RKUNBYITZUJHSG-SPUOUPEWSA-N atropine Chemical compound O([C@H]1C[C@H]2CC[C@@H](C1)N2C)C(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 RKUNBYITZUJHSG-SPUOUPEWSA-N 0.000 description 1
- 229960000396 atropine Drugs 0.000 description 1
- 239000003809 bile pigment Substances 0.000 description 1
- 210000002459 blastocyst Anatomy 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000004568 cement Substances 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 description 1
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 210000005045 desmin Anatomy 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 210000000613 ear canal Anatomy 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000000806 elastomer Substances 0.000 description 1
- 210000005168 endometrial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003989 endothelium vascular Anatomy 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009088 enzymatic function Effects 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 239000003822 epoxy resin Substances 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000005046 glial fibrillary acidic protein Anatomy 0.000 description 1
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 101150055960 hemB gene Proteins 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011147 inorganic material Substances 0.000 description 1
- 230000003871 intestinal function Effects 0.000 description 1
- 229920000831 ionic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 210000000867 larynx Anatomy 0.000 description 1
- 101150111214 lin-28 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000010841 mRNA extraction Methods 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 210000002752 melanocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010074917 microsomal glutathione S-transferase-I Proteins 0.000 description 1
- DDLIGBOFAVUZHB-UHFFFAOYSA-N midazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NC=C2CN=C1C1=CC=CC=C1F DDLIGBOFAVUZHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003793 midazolam Drugs 0.000 description 1
- SLZIZIJTGAYEKK-CIJSCKBQSA-N molport-023-220-247 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CN)[C@@H](C)O)C1=CNC=N1 SLZIZIJTGAYEKK-CIJSCKBQSA-N 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 1
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- 210000005055 nestin Anatomy 0.000 description 1
- 210000005155 neural progenitor cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000276 neural tube Anatomy 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- 210000001331 nose Anatomy 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000011368 organic material Substances 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000003239 periodontal effect Effects 0.000 description 1
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000008855 peristalsis Effects 0.000 description 1
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 1
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000003800 pharynx Anatomy 0.000 description 1
- 229960003893 phenacetin Drugs 0.000 description 1
- 239000005011 phenolic resin Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000001699 photocatalysis Effects 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 229920001992 poloxamer 407 Polymers 0.000 description 1
- 229920003213 poly(N-isopropyl acrylamide) Polymers 0.000 description 1
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 description 1
- 229920005668 polycarbonate resin Polymers 0.000 description 1
- 239000004431 polycarbonate resin Substances 0.000 description 1
- 229920000647 polyepoxide Polymers 0.000 description 1
- 239000004645 polyester resin Substances 0.000 description 1
- 229920001225 polyester resin Polymers 0.000 description 1
- 229920013716 polyethylene resin Polymers 0.000 description 1
- 229920002338 polyhydroxyethylmethacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920005990 polystyrene resin Polymers 0.000 description 1
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 1
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 239000011435 rock Substances 0.000 description 1
- 210000003079 salivary gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 210000000697 sensory organ Anatomy 0.000 description 1
- 229940076279 serotonin Drugs 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000002363 skeletal muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 210000000106 sweat gland Anatomy 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 1
- 210000000626 ureter Anatomy 0.000 description 1
- 210000001635 urinary tract Anatomy 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
(1)物質が代謝及び/又は修飾されて生じる産物を生産する方法であって、
外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物と、前記物質を含む液とを、前記絨毛層に前記液が接するように配置すること、及び、
前記細胞構造物の内部に、前記産物を蓄積させること
を含む方法。
(2)前記細胞構造物に蓄積された前記産物を回収すること、又は、前記産物を蓄積した前記細胞構造物を回収することを更に含む、(1)に記載の方法。
(3)前記細胞構造物の長軸方向の長さが5mm以上である、(1)又は(2)に記載の方法。
(4)前記細胞構造物が小腸の性質を有する、(1)〜(3)のいずれかに記載の方法。
(5)前記細胞構造物が、多能性幹細胞から分化誘導されて形成された細胞構造物である(1)〜(4)のいずれかに記載の方法。
(6)物質が代謝及び/又は修飾されて生じる産物を活性成分として含む医薬を製造する方法であって、
外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物と、前記物質を含む液とを、前記絨毛層に前記液が接するように配置すること、
前記細胞構造物の内部に、前記産物を蓄積させること、
前記細胞構造物に蓄積された前記産物を回収すること、及び、
回収された前記産物を医薬として許容される製剤に製剤化すること
を含む方法。
(7)物質が代謝及び/又は修飾されて生じる産物を活性成分として含む医薬を製造する方法であって、
外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物と、前記物質を含む液とを、前記絨毛層に前記液が接するように配置すること、
前記細胞構造物の内部に、前記産物を蓄積させること、
前記産物を蓄積した前記細胞構造物を回収すること、及び、
回収された前記細胞構造物を医薬として許容される製剤に製剤化すること
を含む方法。
(8)被験物質の小腸での挙動を評価する方法であって、
外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物と、前記被験物質を含む液とを、前記絨毛層に前記液が接するように配置すること、
前記細胞構造物を培養すること、及び、
培養後の前記細胞構造物の内部に蓄積された成分の組成を分析すること
を含む方法。
(9)被験物質の小腸での挙動を評価するためのキットであって、
外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物、及び、
前記細胞構造物を培養するための培地
を含むキット。
(10)前記細胞構造物の内部に蓄積された成分を取り出すための器具を更に含む、(9)に記載のキット。
本発明の一実施形態に係る、医薬の製造方法によれば、物質が代謝及び/又は修飾されて生じる産物を活性成分とする医薬を、効率的に製造することができる。
本発明で用いることのできる細胞構造物は、外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物である。
絨毛層は、villinが発現していることを指標に確認することができる。また細胞構造物の外表面を顕微鏡観察して絨毛層の存在を確認することができる。
細胞構造物の外表面上に更に陰窩が発達していることが好ましい。
本発明に用いることのできる細胞構造物は好ましくは、内胚葉系細胞、外胚葉系細胞及び中胚葉系細胞を含む。
細胞構造物は、更に好ましくは腸幹細胞を更に含む。腸幹細胞の存在は、腸幹細胞マーカーLGR5が陽性であることを指標として判断できる。
細胞構造物は更に、セロトニン陽性の腸管内分泌細胞を含むことが好ましい。
細胞構造物は更にヒスタミンH1受容体陽性細胞を含むことが好ましい。
以上の特徴を有する細胞構造物としては、特許文献4及び非特許文献3に記載の腸オルガノイドが特に好ましい。
本発明で用いることのできる細胞構造物は、幹細胞を培養し分化誘導して製造することができる。ここで幹細胞としては、小腸上皮細胞への分化能を有する幹細胞であればよいが、好ましくは、内胚葉系細胞(小腸上皮細胞等)、外胚葉系細胞及び中胚葉系細胞への分化能を有する幹細胞であり、より好ましくは、多能性幹細胞である。多能性幹細胞としては特に、胚性幹細胞(ES細胞)又は人工多能性幹細胞(iPS細胞)が好適である。
(i)Oct遺伝子、Klf遺伝子、Sox遺伝子、Myc遺伝子
(ii)Oct遺伝子、Sox遺伝子、NANOG遺伝子、LIN28遺伝子
(iii)Oct遺伝子、Klf遺伝子、Sox遺伝子、Myc遺伝子、hTERT遺伝子、SV40 largeT遺伝子
(iv)Oct遺伝子、Klf遺伝子、Sox遺伝子
上記で挙げたような幹細胞を、下記の細胞培養基材上に播種する工程1、及び、
播種された幹細胞を培養して分化誘導する工程2
を含む方法により製造することができる。
ポリアクリルアミドとしては具体的にはポリ(N−イソプロピルアクリルアミド)が例示できる。
ポリメタクリル酸としては具体的にはポリ(2−ヒドロキシエチルメタクリレート)が例示できる。
多糖類としては具体的にはデキストラン、ヘパリン等が例示できる。
工程2における培養温度は、通常37℃である。CO2細胞培養装置などを利用して、5%程度のCO2濃度雰囲気下で培養するのが好ましい。
工程1及び工程2を含む細胞構造物の製造方法のより具体的な例は、特許文献4及び非特許文献3に記載されている。
本発明の第一の実施形態は、
物質が代謝及び/又は修飾されて生じる産物を生産する方法であって、
外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物と、前記物質を含む液とを、前記絨毛層に前記液が接するように配置すること、及び、
前記細胞構造物の内部に、前記産物を蓄積させること
を含む方法に関する。
この方法によれば、物質が小腸により代謝及び/又は修飾されて生じる産物を、生体外で生産することが可能である。
薬物トランスポーター遺伝子:MT2A、MT3、ABCB1、ABCC1、GPI
他の薬物代謝遺伝子:AHR、ARNT、GCKR、SNN
本発明は第二に、物質が代謝及び/又は修飾されて生じる産物を活性成分として含む医薬を製造する方法であって、
外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物と、前記物質を含む液とを、前記絨毛層に前記液が接するように配置すること、
前記細胞構造物の内部に、前記産物を蓄積させること、
前記細胞構造物に蓄積された前記産物を回収すること、及び、
回収された前記産物を医薬として許容される製剤に製剤化すること
を含む方法に関する。
本発明は第三に、物質が代謝及び/又は修飾されて生じる産物を活性成分として含む医薬を製造する方法であって、
外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物と、前記物質を含む液とを、前記絨毛層に前記液が接するように配置すること、
前記細胞構造物の内部に、前記産物を蓄積させること、
前記産物を蓄積した前記細胞構造物を回収すること、及び、
回収された前記細胞構造物を医薬として許容される製剤に製剤化すること
を含む方法に関する。
本発明の第二の方法では、回収された代謝修飾産物を、医薬として許容される担体等と組み合わせて医薬として製剤化することがきできる。
本発明は第四に、被験物質の小腸での挙動を評価する方法であって、
外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物と、前記被験物質を含む液とを、前記絨毛層に前記液が接するように配置すること、
前記細胞構造物を培養すること、及び、
培養後の前記細胞構造物の内部に蓄積された成分の組成を分析すること
を含む方法に関する。
本発明は第五に、
被験物質の小腸での挙動を評価するためのキットであって、
外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物、及び、
前記細胞構造物を培養するための培地
を含むキットに関する。このキットは本発明の第四の方法の実施に用いることができる。
袋状の細胞構造物及び細胞構造物を培養するための培地については既述の通りである。
以下、具体的な実験結果を参照して本発明を説明するが、本発明の範囲は実験結果の範囲には限定されない。
腸様オルガノイド形成過程における代謝酵素の発現パターンを評価するため経時的なサンプリングと定量PCR解析を実施した。以下それらの方法を記載する。
未分化細胞、及び、7日、14日、21日の各日数基板上で培養した細胞を、それぞれサンプリングした。
回収したサンプルに900μlのQiaZol溶液(Qiagen社)を加え、ホモジナイゼーションにより細胞を破砕し、5分間静置した。
含有mRNAのOD値はNanodrop装置(Thermo Fisher社)を用いて定量した。
各対象遺伝子の発現量の数値は相対的評価としており、各遺伝子のCtをインターナルコントロールGAPDHのCtで補正を行いΔΔCT法により算出した。
以下の実験では、上記の方法で製造したEdom iPS細胞又はES細胞由来の腸様オルガノイドを使用した。
腸様オルガノイドがCYP3A4発現と多薬剤排出トランスポーターp−gpの発現を示すか確認するため免疫染色を実施した。以下それらの方法を記載する。
パラフィン切片は、パラフィン包埋された検体ブロックをミクロトームでスライスしスライドガラスへと貼り付け作製した。
コントロールとして生体の小腸、及び、大腸がん細胞株Caco−2にも同様の処理を行い観察した。
腸様オルガノイドが、小腸組織と類似したCYP3A4発現とその誘導経路を有しているかを確認するため定量PCR解析を実施した。定量PCR解析の手順は<実施例1>と同方法である。発現誘導処理は下記に示す。
コントロールとして大腸がん細胞Caco−2に対して同様な処理を行い、定量PCR解析を実施した。
iPS細胞由来腸様オルガノイドのCYP3A4発現とその誘導経路がES細胞由来腸様オルガノイドと類似し細胞株の由来に影響しないことを確認するため定量PCR解析と免疫染色を実施した。定量PCR解析は<実施例1>、免疫染色は<実施例2>と同様の方法により行った。発現誘導処理について下記に説明する。
培養62日後のiPS細胞由来腸様オルガノイドのパラフィン切片作製、免疫染色を<実施例2>と同条件で実施した。
袋構造を有する腸様オルガノイドを用いた代謝酵素活性評価(CYP3A4活性)において、腸様オルガノイドの内部液を吸い出して分析し評価することが有効かを確認するため、P450−GloTM CYP3A4 Assay(Promega社)とそれに用いる内部液のサンプリングを実施した。以下それらの方法を記載する。
手順の概要を図5Aに模式的に示す。
袋構造を有する腸様オルガノイドの代謝酵素活性(CYP3A4活性とCES活性)を評価するため、CYP3A4基質のミタゾラムとCES基質のイリノテカンに対する代謝活性を評価した。ミタゾラム及びイリノテカンのそれぞれの代謝産物をLC/MS/MSで分析した(鎌倉テクノサイエンス社)。以下それらの方法を記載する。
代謝活性を算出するために、調整した各懸濁液中のタンパク質を、DCプロテインアッセイキットII(バイオラッド社)を用いて定量化した。
腸様オルガノイドにおける他の代謝関連遺伝子の発現を評価するためRT2 Profiler PCR Array(Qiagen社)を用いて網羅的解析を実施した。以下それらの方法を記載する。
含有mRNAのOD値はNanodrop装置(Thermo Fisher社)を用いて定量した。
Claims (10)
- 物質が代謝及び/又は修飾されて生じる産物を生産する方法であって、
外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物と、前記物質を含む液とを、前記絨毛層に前記液が接するように配置すること、及び、
前記細胞構造物の内部に、前記産物を蓄積させること
を含む方法。 - 前記細胞構造物に蓄積された前記産物を回収すること、又は、前記産物を蓄積した前記細胞構造物を回収することを更に含む、請求項1に記載の方法。
- 前記細胞構造物の長軸方向の長さが5mm以上である、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記細胞構造物が小腸の性質を有する、請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法。
- 前記細胞構造物が、多能性幹細胞から分化誘導されて形成された細胞構造物である請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 物質が代謝及び/又は修飾されて生じる産物を活性成分として含む医薬を製造する方法であって、
外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物と、前記物質を含む液とを、前記絨毛層に前記液が接するように配置すること、
前記細胞構造物の内部に、前記産物を蓄積させること、
前記細胞構造物に蓄積された前記産物を回収すること、及び、
回収された前記産物を医薬として許容される製剤に製剤化すること
を含む方法。 - 物質が代謝及び/又は修飾されて生じる産物を活性成分として含む医薬を製造する方法であって、
外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物と、前記物質を含む液とを、前記絨毛層に前記液が接するように配置すること、
前記細胞構造物の内部に、前記産物を蓄積させること、
前記産物を蓄積した前記細胞構造物を回収すること、及び、
回収された前記細胞構造物を医薬として許容される製剤に製剤化すること
を含む方法。 - 被験物質の小腸での挙動を評価する方法であって、
外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物と、前記被験物質を含む液とを、前記絨毛層に前記液が接するように配置すること、
前記細胞構造物を培養すること、及び、
培養後の前記細胞構造物の内部に蓄積された成分の組成を分析すること
を含む方法。 - 被験物質の小腸での挙動を評価するためのキットであって、
外表面上に絨毛層を有する、小腸上皮細胞を含む袋状の細胞構造物、及び、
前記細胞構造物を培養するための培地
を含むキット。 - 前記細胞構造物の内部に蓄積された成分を取り出すための器具を更に含む、請求項9に記載のキット。
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2019063993A JP2020162434A (ja) | 2019-03-28 | 2019-03-28 | 小腸での代謝又は修飾産物を生体外で生産する方法 |
JP2023182513A JP2023182825A (ja) | 2019-03-28 | 2023-10-24 | 小腸での代謝又は修飾産物を生体外で生産する方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2019063993A JP2020162434A (ja) | 2019-03-28 | 2019-03-28 | 小腸での代謝又は修飾産物を生体外で生産する方法 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023182513A Division JP2023182825A (ja) | 2019-03-28 | 2023-10-24 | 小腸での代謝又は修飾産物を生体外で生産する方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020162434A true JP2020162434A (ja) | 2020-10-08 |
Family
ID=72714047
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019063993A Pending JP2020162434A (ja) | 2019-03-28 | 2019-03-28 | 小腸での代謝又は修飾産物を生体外で生産する方法 |
JP2023182513A Pending JP2023182825A (ja) | 2019-03-28 | 2023-10-24 | 小腸での代謝又は修飾産物を生体外で生産する方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023182513A Pending JP2023182825A (ja) | 2019-03-28 | 2023-10-24 | 小腸での代謝又は修飾産物を生体外で生産する方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (2) | JP2020162434A (ja) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2018089743A1 (en) * | 2016-11-10 | 2018-05-17 | Organovo, Inc. | Engineered intestinal tissue and uses thereof |
WO2018207714A1 (ja) * | 2017-05-09 | 2018-11-15 | 公立大学法人名古屋市立大学 | 多能性幹細胞由来腸管オルガノイドの作製法 |
WO2018230102A1 (ja) * | 2017-06-13 | 2018-12-20 | 大日本印刷株式会社 | 腸オルガノイド及びその作製方法 |
WO2019021990A1 (ja) * | 2017-07-28 | 2019-01-31 | 国立大学法人大阪大学 | 小腸上皮様細胞 |
-
2019
- 2019-03-28 JP JP2019063993A patent/JP2020162434A/ja active Pending
-
2023
- 2023-10-24 JP JP2023182513A patent/JP2023182825A/ja active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2018089743A1 (en) * | 2016-11-10 | 2018-05-17 | Organovo, Inc. | Engineered intestinal tissue and uses thereof |
WO2018207714A1 (ja) * | 2017-05-09 | 2018-11-15 | 公立大学法人名古屋市立大学 | 多能性幹細胞由来腸管オルガノイドの作製法 |
WO2018230102A1 (ja) * | 2017-06-13 | 2018-12-20 | 大日本印刷株式会社 | 腸オルガノイド及びその作製方法 |
WO2019021990A1 (ja) * | 2017-07-28 | 2019-01-31 | 国立大学法人大阪大学 | 小腸上皮様細胞 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
STEM CELL REPORTS, vol. vol.10, p.314-328, JPN6023008203, 2018, ISSN: 0005005513 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2023182825A (ja) | 2023-12-26 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5875517B2 (ja) | 膵ホルモン産生細胞の製造法 | |
Singh et al. | Unbiased analysis of the impact of micropatterned biomaterials on macrophage behavior provides insights beyond predefined polarization states | |
WO2018230102A1 (ja) | 腸オルガノイド及びその作製方法 | |
AU2014279568B2 (en) | Tissue structure and manufacturing method therefor | |
Shariati et al. | Organoid technology: Current standing and future perspectives | |
Chen et al. | Naked liquid marbles: a robust three-dimensional low-volume cell-culturing system | |
Zhao et al. | Microfluidic control of tumor and stromal cell spheroids pairing and merging for three-dimensional metastasis study | |
JP5261920B2 (ja) | 細胞を用いた試験法および試験用キット | |
Chao et al. | SpheroidChip: patterned agarose microwell compartments harboring HepG2 spheroids are compatible with genotoxicity testing | |
Ogoke et al. | The science and engineering of stem cell‐derived organoids‐examples from hepatic, biliary, and pancreatic tissues | |
Kandasamy et al. | Polysulfone membranes coated with polymerized 3, 4-dihydroxy-l-phenylalanine are a versatile and cost-effective synthetic substrate for defined long-term cultures of human pluripotent stem cells | |
Kosobrodova et al. | Improved multiprotein microcontact printing on plasma immersion ion implanted polystyrene | |
Li et al. | Three-dimensional hepatocyte culture system for the study of Echinococcus multilocularis larval development | |
JP6151097B2 (ja) | 腸構造体を分化誘導する方法 | |
Onbas et al. | Fabrication of tunable 3D cellular structures in high volume using magnetic levitation guided assembly | |
Jeong et al. | Organoid‐Based Human Stomach Micro‐Physiological System to Recapitulate the Dynamic Mucosal Defense Mechanism | |
KR20160034540A (ko) | 3차원 세포배양 시스템 및 이를 이용한 세포 배양 방법 | |
JPWO2018025975A1 (ja) | インビトロで多能性幹細胞を分化誘導する方法 | |
JP2020162434A (ja) | 小腸での代謝又は修飾産物を生体外で生産する方法 | |
Xu et al. | Histone modification of osteogenesis related genes triggered by substrate topography promotes human mesenchymal stem cell differentiation | |
JP6363401B2 (ja) | 人工多能性幹細胞の分化誘導方法 | |
JP2021185810A (ja) | 細胞構造物及びその製造方法 | |
JP6876287B2 (ja) | 小腸上皮細胞を含む細胞構造物、その製造のための方法、及び、それを保持する基材 | |
JP6870783B2 (ja) | 細胞培養基材 | |
Shin et al. | ECM architecture-mediated regulation of β-cell differentiation from hESCs via Hippo-independent YAP activation |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220324 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20230228 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230307 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230427 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20230725 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20231024 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20231024 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20231110 |
|
A912 | Re-examination (zenchi) completed and case transferred to appeal board |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A912 Effective date: 20240105 |