JP2017509349A - ひき肉レプリカ - Google Patents

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Abstract

本文書は、ひき肉レプリカ、より具体的には、繊維性、質感の不均一性、牛肉のような風味、およびひき肉の調理中の赤色から褐色への色の変化を含めた、ひき肉を模倣する植物ベースの製品に関する。例えば、本文書は、これらが、調理中の食肉の挙動および品質、すなわち、引き締まり、シネレシス（水の放出）、噛みごたえ、または食感を再現するためにゲル化するおよび／または変性する、温度に基づいて選択されるタンパク質を含む食肉レプリカを提供する。

Description

本出願は、２０１４年３月３１日出願の米国特許出願第６１／９７３，１８１号明細書、および２０１４年１０月１日出願の米国特許出願第６２／０５８，２３０号明細書の優先権を主張し、その開示はその全体を参照により組み込まれる。
本開示は、ひき肉レプリカなどの食肉レプリカ、より具体的には、繊維性、質感の不均一性、牛肉のような風味、およびひき肉の調理中の赤色から褐色への色の変化などの、質感、外観、ならびにひき肉を調理するおよび食べるという感覚的側面を含めた、ひき肉の質感、外観、および感覚的側面を模倣する植物ベースの製品に関する。本開示はまた、チーズまたは食肉レプリカなどの食品または食品レプリカの風味を変更するための組成物および方法に関する。
食肉代用組成物は、典型的には押出成形されたダイズ／穀物混合物であるが、これは食肉を調理するおよび食べる体験を再現できない。植物ベースの食肉代用製品に共通する欠点としては、相当する食肉製品よりも質感と食感（mouth feel）が均質であることが挙げられる。さらに、これらの製品の大部分が、人工の風味および芳香が予め取り込まれた状態で事前に調理されて販売されるはずなので、これらの製品は、芳香、風味、ならびに調理中または調理済みの食肉に伴う質感および食感などの他の最重要な特徴を再現することができず、さらにこれらに異臭が加わる恐れもある。その結果、これらの製品は、主としてすでに菜食主義に傾倒している限られた消費者層には訴えるものがあるが、肉食が習慣となっているより大型の消費者集団への訴えかけには失敗している。調理中および／または調理後食肉の繊維性、質感、芳香および風味をより良く再現する植物ベースの食肉代用品を改善することは有用であると予想される。
本文書は、繊維性、質感の不均一性、牛肉のようなまたは他の食肉の風味、および異臭のないひき肉の調理中赤色から褐色への色の変化を含めた、ひき肉を模倣することができる植物ベースの製品を製造するための方法および材料に基づいている。例えば、本文書は、これらが、調理中の食肉の挙動および品質、すなわち、引き締まり、シネレシス（水の放出）、噛みごたえ（chew texture）、または食感を再現するためにゲル化するおよび／または変性する、温度に基づいて選択されるタンパク質を含む食肉レプリカを提供する。例えば、食肉レプリカの形態になるよう選択されたタンパク質の変性するおよびゲル化する温度は、食肉中に通常見出されるタンパク質（例えば、アクチンおよびミオシン）の温度に類似し得る。さらに、本明細書で提供される植物ベースの製品は、植物ベースの食肉レプリカが、より自然の風味を持ち、異臭がないように肉のような風味を提供することができる、矯味剤（例えば、調味料、風味付け前駆物質、および／または風味付け化合物）を含むことができる。したがって、本文書はまた、矯味剤などを含有する植物ベースの製品を製造するための方法を提供する。
一態様では、本文書は、肉の生地約５重量％から約８８重量％（例えば、約４０重量％から約８８重量％、約４５重量％から約６０重量％、または約１５重量％から約５５重量％）；炭水化物系ゲル約０重量％から約４０重量％（例えば、約１重量％から約３０重量％、約５重量％から約２５重量％、または約１５重量％から約２５重量％）；脂肪約５重量％から約３５重量％（例えば、約１０重量％から約１５重量％、約１２重量％から約１８重量％、または約２０重量％から約２５重量％）；矯味剤約０．００００１重量％から約１０重量％（例えば、約３重量％から約７重量％、約０．００１重量％から約２重量％、または約０．００００１重量％から約２重量％）；結合剤約０重量％から約１５重量％（例えば、約２重量％から約１５重量％または約２重量％から約１０重量％）；ならびにヘム含有タンパク質および／または鉄塩約０．０１重量％から約４重量％（例えば、約０．０５重量％から約１重量％、または約０．５重量％から約２重量％）を含む食肉レプリカ組成物を特徴とする。肉の生地は、矯味剤を含むことができる。脂肪は、矯味剤を含むことができる。肉の生地は、組成物の約４５重量％から約６０重量％であり得る。炭水化物系ゲルは、組成物の約１０重量％から約２５重量％であり得る。脂肪は、組成物の約１０重量％から約１５重量％であり得る。矯味剤は、組成物の約３重量％から約７重量％または約０．００１重量％から約２重量％であり得る。矯味剤は、１種もしくは複数のフレーバー前駆物質、調味料、または風味付け化合物を含むことができる。矯味剤は、調味料および１種もまたは複数のフレーバー前駆物質の組合せであり得る。結合剤は、組成物の約２重量％から約１０重量％であり得る。結合剤は、それらの組織構造上の特性および／または風味特性を改善する、またはそれらの変性およびゲル化温度を修正するために化学的にまたは酵素的に修飾されている１種または複数のタンパク質を含むことができる。ヘム含有タンパク質は、組成物の約０．０１重量％から約２重量％であり得る。組成物は、ヘム含有タンパク質および鉄塩を含むことができる。肉の生地は、単離された植物タンパク質、食用の繊維状構成成分、任意選択の矯味剤、および任意選択の脂肪を含むことができる。結合剤は、コングリシニンタンパク質であり得る。
別の態様では、本文書は、肉の生地約５重量％から約８０重量％（例えば、約２０重量％から約３０重量％）；脂肪約５重量％から約３５重量％（例えば、約１５重量％から約２５重量％）；食用の繊維状構成成分約１５重量％から約４０重量％（例えば、約１５重量％から約２５重量％）；炭水化物系ゲル約０．１重量％から約１８重量％（例えば、約７重量％から約１８重量％）；矯味剤約０重量％から約１０重量％（例えば、約０重量％から約１０重量％）；結合剤約０．５重量％から約１５重量％（例えば、約５重量％から約１５重量％）；ならびにヘム含有タンパク質および／または鉄塩約０．１重量％から約８重量％（例えば、約２重量％から約８重量％）を含む食肉レプリカ組成物を特徴とする。
別の態様では、本文書は、ひき肉レプリカを製造する方法を特徴とする。方法は、（ａ）生地を１５０°Ｆから２５０°Ｆまでの温度に加熱するステップであって、生地が、単離された植物タンパク質、任意選択の食用の繊維状構成成分、１種または複数の任意選択の矯味剤、および任意選択の脂肪を含む、ステップと；（ｂ）加熱後、生地を脂肪と合わせるステップであって、脂肪が、矯味剤および／または単離された植物タンパク質を任意選択で含有する、ステップと；（ｃ）ステップ（ｂ）からの生地を炭水化物系ゲル、任意選択の食用の繊維状構成成分、任意選択の結合剤、鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または鉄塩、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤を合わせて、ひき肉レプリカを製造するステップとを含むことができる。方法は、炭水化物系ゲル、任意選択の食用の繊維状構成成分、任意選択の結合剤、鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または鉄塩、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせる前に、ステップ（ｂ）からの生地を粉砕するステップをさらに含むことができる。
別の態様では、本文書は、肉の生地に風味付けする方法を特徴とする。方法は、（ａ）第１の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または第１の鉄塩を１種もしくは複数のフレーバー前駆物質および任意選択の脂肪と合わせるステップと；（ｂ）混合物を加熱して、１種または複数のフレーバー化合物を形成するステップと；（ｃ）単離された植物タンパク質、任意選択の食用の繊維状構成成分、およびステップ（ｂ）からの混合物を含む生地を作製するステップとを含むことができる。方法は、（ｄ）加熱後、生地を脂肪と合わせるステップであって、脂肪が、任意選択で、矯味剤および／または単離された植物タンパク質を含有する、ステップと；（ｅ）ステップ（ｄ）の生地を、炭水化物系ゲル、任意選択の結合剤、第２の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または第２の鉄塩、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせて、ひき肉レプリカを製造するステップとをさらに含むことができる。方法は、炭水化物系ゲル、任意選択の結合剤、第２の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または第２の鉄塩、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせる前に、ステップ（ｄ）からの生地を粉砕するステップをさらに含むことができる。
別の態様では、本文書は、肉の生地に風味付けする方法であって、（ａ）単離された植物タンパク質、任意選択の食用の繊維状構成成分、１種または複数の任意選択の矯味剤、および任意選択の脂肪を含む生地を作製するステップと；（ｂ）脂肪を鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または第１の鉄塩、および１種もしくは複数のフレーバー前駆物質と合わせ、混合物を加熱することにより風味を付けた脂肪を作製するステップと；（ｃ）加熱後、生地を、風味を付けた脂肪と合わせるステップとを含む方法を特徴とする。方法は、ステップ（ｃ）の生地を炭水化物系ゲル、任意選択の結合剤、第２の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または第２の鉄塩、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせて、ひき肉レプリカを製造するステップをさらに含むことができる。方法は、炭水化物系ゲル、任意選択の結合剤、第２の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または第２の鉄塩、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせる前に、ステップ（ｃ）の生地を砕くステップをさらに含むことができる。
本文書はまた、ひき肉レプリカを製造する方法であって、（ａ）鉄塩を１種または複数のフレーバー前駆物質および任意選択の脂肪と合わせるステップと；（ｂ）混合物を加熱して、１種または複数のフレーバー化合物を形成するステップと；（ｃ）単離された植物タンパク質、任意選択の食用の繊維状構成成分、およびステップ（ｂ）からの混合物を含む生地を作製するステップと；（ｄ）加熱後、生地を脂肪と合わせるステップであり、脂肪が、矯味剤および／または単離された植物タンパク質を任意選択で含有する、ステップと；（ｅ）ステップ（ｄ）の生地を炭水化物系ゲル、任意選択の結合剤、任意選択の鉄塩、鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせて、ひき肉レプリカを製造するステップとを含む方法を特徴とする。方法は、炭水化物系ゲル、任意選択の結合剤、鉄塩、任意選択の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせる前に、ステップ（ｄ）からの生地を粉砕するステップをさらに含むことができる。いくつかの実施形態では、鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環は、混合物を加熱する前に、鉄塩、１種または複数のフレーバー前駆物質、および脂肪と合わせることができる。
さらに別の態様では、本文書は、ひき肉レプリカを製造する方法を特徴とする。方法は、（ａ）単離された植物タンパク質、任意選択の食用の繊維状構成成分、１種または複数の任意選択の矯味剤、および任意選択の脂肪を含む生地を作製するステップと；（ｂ）脂肪を鉄塩および１種または複数のフレーバー前駆物質と合わせ、混合物を加熱することにより風味を付けた脂肪を作製するステップと；（ｃ）加熱後、生地を風味を付けた脂肪と合わせるステップと；（ｄ）ステップ（ｃ）の生地を炭水化物系ゲル、任意選択の結合剤、鉄塩、任意選択の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環、および１種または複数の任意選択の矯味剤と合わせて、ひき肉レプリカを製造するステップとを含むことができる。方法は、炭水化物系ゲル、任意選択の結合剤、鉄塩、任意選択の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環、および１種または複数の任意選択の矯味剤と合わせる前に、ステップ（ｃ）からの生地を砕くステップをさらに含むことができる。いくつかの実施形態では、鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環は、混合物を加熱する前に、脂肪、鉄塩、および１種または複数のフレーバー前駆物質と合わせることができる。
本明細書に記載される方法または組成物のいずれかにおいて、鉄塩は、グルコン酸鉄、塩化鉄、シュウ酸鉄、硝酸鉄、クエン酸鉄、アスコルビン酸鉄（iron ascorbate）、硫酸第一鉄、ピロリン酸第二鉄、または任意の他の水溶性の塩であり得る。
本明細書に記載される方法または組成物のいずれかにおいて、ヘム含有タンパク質は、植物由来のヘム含有タンパク質（例えば、レグヘモグロビン）などの非動物ヘム含有タンパク質であり得る。さらに、いくつかの実施形態では、ヘム含有タンパク質は、単離するまたは単離および精製することができる。
本明細書に記載される方法または組成物のいずれかにおいて、１種または複数のフレーバー前駆物質は、糖、糖アルコール、糖酸、糖誘導体、油、遊離脂肪酸、アミノ酸もしくはその誘導体、ヌクレオシド、ヌクレオチド、ビタミン、酸、ペプチド、リン脂質、タンパク質加水分解物、酵母抽出物、またはそれらの混合物であり得る。例えば、フレーバー前駆物質は、グルコース、フルクトース、リボース、アラビノース、グルコース−６−リン酸、フルクトース６−リン酸、フルクトース１，６−二リン酸、イノシトール、マルトース、スクロース、マルトデキストリン、グリコーゲン、ヌクレオチドに結合された糖、糖蜜、リン脂質、レシチン、イノシン、イノシン一リン酸（ＩＭＰ）、グアノシン一リン酸（ＧＭＰ）、ピラジン、アデノシン一リン酸（ＡＭＰ）、乳酸、コハク酸、グリコール酸、チアミン、クレアチン、ピロリン酸塩、植物油、藻類油、ヒマワリ油、トウモロコシ油、ダイズ油、ヤシの実の油、パーム核油、ベニバナ油、アマニ油、米糠油、綿実油、オリーブ油、ヒマワリ油、カノーラ油、アマニ油、ヤシ油、マンゴー油、遊離脂肪酸、システイン、メチオニン、イソロイシン、ロイシン、リシン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、バリン、アルギニン、ヒスチジン、アラニン、アスパラギン、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩、グルタミン、グリシン、プロリン、セリン、チロシン、グルタチオン、アミノ酸誘導体、尿素、パントテン酸、オルニチン、ナイアシン、グリセロール、シトルリン、タウリン、ビオチン、ルリジサ油、真菌油（fungal oil）、クロスグリ油、ベタイン、βカロテン、Ｂ−ビタミン、Ｎ−アセチルＬ−システイン、グルタミン酸鉄およびペプトン、またはそれらの混合物からなる群から選択することができる。
本明細書に記載される方法または組成物のいずれかにおいて、生地中の単離された植物タンパク質は、コムギグルテン、デヒドリンタンパク質、アルブミン、グロブリン、もしくはゼイン、またはそれらの混合物を含むことができる。
本明細書に記載される方法または組成物のいずれかにおいて、任意選択の食用の繊維状構成成分は、ニンジン、タケ、エンドウマメ、ブロッコリー、ジャガイモ、サツマイモ、トウモロコシ、全粒粉、アルファルファ、ケール、セロリ、セロリの根、パセリ、キャベツ、ズッキーニ、グリーンビーンズ、インゲンマメ、クロマメ、アズキ、白インゲン、ビート、カリフラワー、ナッツ、リンゴの皮、カラスムギ、コムギ、もしくはオオバコ、またはそれらの混合物由来の植物繊維を含むことができる。
本明細書に記載される方法または組成物のいずれかにおいて、食用の繊維状構成成分は、単離された植物タンパク質の押出成形された混合物を含むことができる。押出成形された混合物は、コムギグルテンおよびダイズタンパク質単離物を含有することができ、場合によっては、矯味剤（例えば、酵母抽出物、タンパク質加水分解物、もしくは油などの調味料；フレーバー化合物；またはフレーバー前駆物質）をさらに含有することができる。いくつかの実施形態では、食用の繊維状構成成分は、溶液紡糸タンパク質繊維（例えば、トウモロコシゼイン、エンドウマメプロラミン、カフェリン（kafirin）、セカリン、ホルデイン、アベニン、またはそれらの混合物などのプロラミンを含有する溶液紡糸タンパク質繊維）であり得る。
本明細書に記載される方法または組成物のいずれかにおいて、脂肪は、非動物脂肪、動物脂肪、または非動物および動物脂肪の混合物であり得る。脂肪は、藻類油、真菌油、トウモロコシ油、オリーブ油、ダイズ油、ラッカセイ油、クルミ油、扁桃油、ゴマ油、綿実油、ナタネ油、カノーラ油、ベニバナ油、ヒマワリ油、アマニ油、パーム油、パーム核油、ヤシ油、ババス油、シアバター、マンゴーバター、カカオバター、コムギ胚芽油、ルリジサ油、クロスグリ油、シーバックソーン油、マカダミア油、ノコギリヤシ油、共役リノール酸油、アラキドン酸強化油、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）強化油、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）強化油、パームステアリン酸、シーバックソーンベリー油、マカダミア油、ノコギリヤシ油、もしくは米糠油；またはマーガリンもしくは他の水素化された脂肪であり得る。いくつかの実施形態では、例えば、脂肪は、藻類油である。脂肪は、矯味剤および／または単離された植物タンパク質（例えば、コングリシニンタンパク質）を含有することができる。
本明細書に記載される方法または組成物のいずれかにおいて、生地は、矯味剤を含むことができる。方法または組成物のいずれかにおいて、生地中の非動物脂肪は、矯味剤を含むことができる。矯味剤は、野菜抽出物、果実抽出物、酸、酸化防止剤、カロテノイド、ラクトン、およびそれらの組合せからなる群から選択することができる。酸化防止剤は、没食子酸エピガロカテキンであり得る。カロテノイドは、ルテイン、β−カロテン、ゼアキサンチン、ｔｒａｎｓ−β−アポ−８’−カロテナル、リコペン、またはカンタキサンチンであり得る。野菜抽出物は、キュウリまたはトマト由来であり得る。果実抽出物は、メロンまたはパイナップル由来であり得る。
本明細書に記載される方法または組成物のいずれかにおいて、炭水化物系ゲルは、融解温度が約４５℃から約８５℃の間であり得る。炭水化物系ゲルは、寒天、ペクチン、カラギーナン、コンニャク、アルギン酸塩、化学的に修飾されたアガロース、またはそれらの混合物を含むことができる。
本明細書に記載される方法または組成物のいずれかにおいて、ひき肉レプリカは、結合剤を含有することができる。結合剤は、単離された植物タンパク質（例えば、ＲｕＢｉｓＣＯ、アルブミン、グルテン、コングリシニン、またはそれらの混合物）であり得る。結合剤の変性温度は、約４０℃から約８０℃の間であり得る。結合剤は、調理後１４０°Ｆから１９０°Ｆまでで固くなる炭水化物系ゲルであり得る。炭水化物系ゲルは、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、グアーガム、イナゴマメガム、キサンタンガム、またはそれらの混合物を含有することができる。結合剤は、卵アルブミンまたはコラーゲンであり得る。
本明細書に記載される方法または組成物のいずれかにおいて、鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環は、ヘム部分、またはポルフィリン、ポルフィリノーゲン、コリン、コリノイド、クロリン、バクテリオクロロフィル、コルフィン（corphin）、クロロフィリン、バクテリオクロリン、または鉄イオンと錯化されたイソバクテリオクロリン部分であり得る。ヘム部分は、ヘム含有タンパク質（例えば、非共生ヘモグロビン、ヘルズゲート（Hell's gate）グロビンＩ、フラボヘムタンパク質（flavohemoprotein）、レグヘモグロビン、ヘム依存性ペルオキシダーゼ、チトクロムｃペルオキシダーゼ、または哺乳動物のミオグロビン）であり得る。いくつかの実施形態では、ヘム含有タンパク質は、レグヘモグロビンであり得る。レグヘモグロビンは、ダイズ、エンドウマメ、またはササゲ由来であり得る。
別の態様では、本文書は、食肉の風味を増すまたは食品中の植物材料からの異臭をマスキングする方法を特徴とする。方法は、食品の１０−３から１０−１１の濃度で１種または複数のラクトンを食品に加えるステップであって、ラクトンが、テトラヒドロ−６−メチル−２Ｈ−ピラン−２−オン、δ−オクタラクトン、５−エチルジヒドロ−２（３Ｈ）−フラノン、ブチロラクトン、ジヒドロ−５−ペンチル−２（３Ｈ）−フラノン、ジヒドロ−３−メチレン−２，５−フランジオン、ｌ−ペントイルラクトン、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン、６−ヘプチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン、γ−オクタラクトン、５−ヒドロキシメチルジヒドロフラン−２−オン、５−エチル−２（５Ｈ）−フラノン、５−アセチルジヒドロ−２（３Ｈ）−フラノン、ｔｒａｎｓ−３−メチル−４−オクタノリド２（５Ｈ）−フラノン、３−（１，１−ジメチルエチル）−２，５−ウランジオン、３，４−ジヒドロキシ−５−メチル−ジヒドロフラン−２−オン、５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノン、δ−テトラデカラクトン、およびジヒドロ−４−ヒドロキシ−２（３Ｈ）−フラノンからなる群から選択される、ステップを含む。いくつかの実施形態では、ラクトンは、５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノン、ブチロラクトン、γ−オクタラクトン、およびδ−テトラデカラクトンであり得る。食品は、食肉レプリカであり得る。食肉レプリカは、動物性生成物を含まないこともある。
本文書はまた、食肉の風味を増すまたは食品中の植物材料からの異臭をマスキングする方法であって、食品の０．００００１％から０．１％の間の濃度で１種または複数のカロテノイドを食品に加えるステップであり、カロテノイドが、β−カロテン、ゼアキサンチン、ルテイン、ｔｒａｎｓ−β−アポ−８’−カロテナル、リコペン、カンタキサンチン、およびそれらの組合せからなる群から選択される、ステップ含む方法を特徴とする。食品は、食肉レプリカであり得る。食肉レプリカは、動物性生成物を含まないこともある。
別の実施形態では、本文書は、食肉レプリカの食肉の風味を増す方法を特徴とする。方法は、食肉レプリカに、食肉レプリカの０．０００１％から１０％までの濃度で野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物を、食肉レプリカに加えるステップを含むことができる。野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物は、ウリ属（Cucumis）液汁、ピューレ、または抽出物（例えば、キュウリもしくはメロン由来の液汁、ピューレ、または抽出物）であり得る。方法の野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物は、調理することができ、食肉レプリカに加える前に別の方法で処理してタンパク質を変性させることもできる。食肉レプリカは、動物性生成物を含まないこともある。
別の態様では、本文書は、食品の１０−３から１０−１１の濃度でヘム含有タンパク質および１種もしくは複数のラクトンを含有する食品または食品レプリカ生成物であって、１種または複数のラクトンが、テトラヒドロ−６−メチル−２Ｈ−ピラン−２−オン、δ−オクタラクトン、５−エチルジヒドロ−２（３Ｈ）−フラノン、ブチロラクトン、ジヒドロ−５−ペンチル−２（３Ｈ）−フラノン、ジヒドロ−３−メチレン−２，５−フランジオン、ｌ−ペントイルラクトン、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン、６−ヘプチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン、γ−オクタラクトン、５−ヒドロキシメチルジヒドロフラン−２−オン、５−エチル−２（５Ｈ）−フラノン、５−アセチルジヒドロ−２（３Ｈ）−フラノン、ｔｒａｎｓ−３−メチル−４−オクタノリド２（５Ｈ）−フラノン、３−（１，１−ジメチルエチル）−２，５−ウランジオン、３，４−ジヒドロキシ−５−メチル−ジヒドロフラン−２−オン、５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノン、δ−テトラデカラクトン、およびジヒドロ−４−ヒドロキシ−２（３Ｈ）−フラノンからなる群から選択される、食品または食品レプリカ生成物を特徴とする。例えば、１種または複数のラクトンは、５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノン、ブチロラクトン、γ−オクタラクトン、およびδ−テトラデカラクトンであり得る。食品または食品レプリカ生成物は、食肉レプリカであり得る。食肉レプリカは、動物性生成物を含まないこともある。
本文書はまた、食品の０．００００１％から０．１％の間の濃度でヘム含有タンパク質および１種もしくは複数のカロテノイドを含有する食品または食品レプリカ生成物であって、１種または複数のカロテノイドが、β−カロテン、ゼアキサンチン、ルテイン、ｔｒａｎｓ−β−アポ−８’−カロテナル、リコペン、カンタキサンチン、およびそれらの組合せからなる群から選択される、食品または食品レプリカ生成物を特徴とする。食品または食品レプリカ生成物は、食肉レプリカであり得る。食肉レプリカは、動物性生成物を含まないこともある。
別の態様では、本文書は、食品の０．０００１％から１０％の濃度で、（ａ）ヘム含有タンパク質、および（ｂ）野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物を含有する食品または食品レプリカ生成物を特徴とする。野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物は、ウリ属（Cucumis）液汁、ピューレ、または抽出物であり得る。ウリ属（Cucumis）液汁、ピューレ、または抽出物は、キュウリまたはメロン由来であり得る。野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、もしくは果実抽出物は、調理されていてもよく、または食品レプリカ生成物に加えられる前に別の方法で処理してタンパク質を変性させていてもよい。例えば、野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物は、食品レプリカ生成物に加えられる前に約６０℃から約１００℃の温度に加熱されていてもよい。食品は、動物性生成物を含まないこともある。
別の態様では、本文書は、食品の１０−３から１０−１１の濃度で１種または複数のラクトンを含有する食品レプリカ生成物であって、１種または複数のラクトンが、テトラヒドロ−６−メチル−２Ｈ−ピラン−２−オン、δ−オクタラクトン、５−エチルジヒドロ−２（３Ｈ）−フラノン、ブチロラクトン、ジヒドロ−５−ペンチル−２（３Ｈ）−フラノン、ジヒドロ−３−メチレン−２，５−フランジオン、ｌ−ペントイルラクトン、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン、６−ヘプチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン、γ−オクタラクトン、５−ヒドロキシメチルジヒドロフラン−２−オン、５−エチル−２（５Ｈ）−フラノン、５−アセチルジヒドロ−２（３Ｈ）−フラノン、ｔｒａｎｓ−３−メチル−４−オクタノリド２（５Ｈ）−フラノン、３−（１，１−ジメチルエチル）−２，５−ウランジオン、３，４−ジヒドロキシ−５−メチル−ジヒドロフラン−２−オン、５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノン、δ−テトラデカラクトン、およびジヒドロ−４−ヒドロキシ−２（３Ｈ）−フラノンからなる群から選択される、食品レプリカ生成物を特徴とする。１種または複数のラクトンは、５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノン、ブチロラクトン、γ−オクタラクトン、およびδ−テトラデカラクトンであり得る。
さらに別の態様では、本文書は、食品の０．００００１％から０．１％の間の濃度で１種または複数のカロテノイドを含有する食品レプリカ生成物であって、１種または複数のカロテノイドが、β−カロテン、ゼアキサンチン、ルテイン、ｔｒａｎｓ−β−アポ−８’−カロテナル、リコペン、カンタキサンチン、およびそれらの組合せからなる群から選択される、食品レプリカ生成物を特徴とする。
本文書はまた、食品の０．０００１％から１０％の濃度で野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物を含有する食品レプリカ生成物を特徴とする。野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物は、ウリ属（Cucumis）液汁、ピューレ、または抽出物（例えば、ウリ属（Cucumis）液汁、ピューレ、またはキュウリもしくはメロン由来の抽出物）であり得る。野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物は、調理されていてもよく、食品レプリカ生成物に加えられる前に別の方法で処理してタンパク質を変性させていてもよい。例えば、野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物は、食品レプリカ生成物に加えられる前に約６０℃から約１００℃の温度に加熱されていてもよい。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される食品レプリカ生成物は、動物性生成物、コムギグルテン、ダイズタンパク質、および／または豆腐を含まないこともある。
本明細書で提供される食品レプリカ生成物のいずれかは、肉の生地、炭水化物系ゲル、非動物脂肪、および結合剤のうち１種または複数を含有することができる。
本明細書で提供される食品レプリカ生成物のいずれかは、食肉レプリカであり得る。食肉レプリカを製造するためのさらなる材料および方法は、例えば、米国特許出願公開第２０１４／０１９３５４７号明細書、およびＰＣＴ特許公報国際公開第２０１４／１１０５３２号パンフレットおよび国際公開第２０１４／１１０５３９号パンフレットにおいて見出すことができ、そのそれぞれは、その全体を参照により本明細書に組み込まれる。
本明細書で提供される食品レプリカ生成物のいずれかは、チーズレプリカであり得る。チーズレプリカは、ナッツミルク（nut milk）、架橋結合酵素、またはチーズ培養物を含有することができる。チーズレプリカを製造するためのさらなる材料および方法は、例えば、米国特許出願公開第２０１４／０１２７３５８号明細書、およびＰＣＴ特許公報国際公開第２０１４／１１０５４０号パンフレットにおいて見出すことができ、その両方は、その全体を参照により本明細書に組み込まれる。
さらに別の態様では、本文書は、（ａ）単離された植物タンパク質、任意選択の食用の繊維状構成成分、１種または複数の任意選択の矯味剤、および任意選択の脂肪を含有する生地；（ｂ）脂肪、矯味剤を任意選択で含有する脂肪および／または単離された植物タンパク質；ならびに（ｃ）炭水化物系ゲル、結合剤、鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または鉄塩、任意選択の食用の繊維状構成成分、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤を含有するひき肉レプリカを特徴とする。結合剤は、単離された植物タンパク質（例えば、ＲｕＢｉｓＣＯ、アルブミン、グルテン、コングリシニン、またはそれらの混合物）であり得る。結合剤の変性温度は、約４０℃から約８０℃の間であり得る。
別段定義されない限り、本明細書に用いられるすべての技術用語および科学用語は、本発明に関係する当業者によって普通に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に記載したものと類似のまたはそれに相当する方法および材料を、本発明を実行するために用いることができるが、適当な方法および材料は、後述される。本明細書で言及されたすべての刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は、その全体を参照により組み込まれる。矛盾が生じる場合には、定義を含めて本明細書に従うものとする。さらに、材料、方法、および例は、例示的なものにすぎず、限定するものではない。
本発明の１つまたは複数の実施形態の詳細は、以下の添付図面および説明に記載される。本発明の他の特徴、目的、および利点は、説明および図面から、ならびに特許請求の範囲から明らかである。特許請求の範囲における用語「含む（comprising）」は、特許法のおける標準的な慣行に従って「本質的にからなる」によってまたは「からなる」で置き換えることができる。
一般に、本文書は、ひき肉レプリカ（例えば、牛のひき肉、鶏のひき肉、七面鳥のひき肉、子羊のひき肉、または豚のひき肉）、ならびに肉および魚の切り身のレプリカを含めた食肉レプリカを生成するための方法および材料を提供する。概して、本文書は、任意選択の食用の繊維状構成成分を含む食肉レプリカ生地（本明細書において「肉の生地」と称する）を調製するステップと、肉の生地を矯味剤および／または単離された植物タンパク質を任意選択で含むことができる脂肪（動物系脂肪が用いられ得ることに留意するべきであるが、通常、非動物系脂肪）と合わせるステップと、炭水化物系ゲル、任意選択の食用の繊維状構成成分、結合剤、鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または鉄塩、および１種もしくは複数の矯味剤を加えてレプリカを製造するステップとを含むひき肉レプリカを製造するための方法を提供する。肉の生地を脂肪と合わせた後、混合物は、さらなる成分を加える前により細かく砕くことができる。
肉の生地は、食用の繊維状構成成分を取り込んで、ひき肉（例えば、牛のひき肉）の不均一性および質感に類似している食肉レプリカにおいて組織構造上の不均一性および繊維性を達成するのに役立てることができる。矯味剤を食肉レプリカの複数の構成成分（例えば、肉の生地、食用の繊維状構成成分、非動物系脂肪、または組み合わせて作られたレプリカ（assembled replica）のうちの２つ以上）に取り込むことにより、ひき肉の感覚的な特性を模倣するのに役立つ。いくつかの実施形態では、矯味剤は、食肉レプリカの３種の構成成分に取り込まれる。いくつかの実施形態では、矯味剤は、食肉レプリカの４種の構成成分に取り込まれる。
本明細書に記載した通り、矯味剤は、フレーバー前駆物質、フレーバー前駆物質を鉄と反応させることにより生成されたフレーバー化合物、または抽出物（例えば、麦芽抽出物、酵母抽出物、キュウリ抽出物もしくはメロン抽出物などの野菜または果実抽出物、またはペプトン）などの調味料または植物性タンパク質加水分解物、ダイズタンパク質加水分解物、酵母タンパク質加水分解物、藻類タンパク質加水分解物、もしくは食肉タンパク質加水分解物などのタンパク質加水分解物または天然もしくは合成のフレーバー化合物であり得る。フレーバー前駆物質は、例えば、鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環または鉄塩中の鉄と、互いに反応させてもよく、加熱後、調味料と反応させてもよい。したがって、本明細書に記載した食肉レプリカにおいて、予め調理された、すなわち、反応させた、風味構成成分、レプリカの調理中（例えば、鉄塩および／もしくは鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環とまたは互いに）反応させることができる調理されていないフレーバー前駆物質、または調味料もしくは反応を必要とせずに風味を導入するフレーバー化合物の組合せは、食肉レプリカに取り込まれて、調理するおよび調理済みのひき肉を食べる感覚的な体験を再現することができる。ひき肉生成物の風味および／または芳香プロファイルは、他の因子の中でもとりわけ、フレーバー前駆物質のタイプおよび濃度、反応のｐＨ、調理の長さ、鉄複合体のタイプおよび量（例えば、ヘム含有タンパク質、または非ペプチド性ポリマーもしくは巨大分子に結合したヘムなどのヘム−補因子）、反応の温度、ならびに生成物中の水分活性の量によって調節することができる。
鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環は、鉄複合体と本明細書で称される。かかる鉄複合体には、ヘム部分または鉄イオンと錯化された他の高度に共役した複素環式環が含まれる。「ヘム」とは、ポルフィリン環の中心で鉄（Ｆｅ２＋またはＦｅ３＋）に結合される補欠分子族を意味する。したがって、鉄複合体は、ヘム部分、またはポルフィリン、ポルフィリノーゲン、コリン、コリノイド、クロリン、バクテリオクロロフィル、コルフィン（corphin）、クロロフィリン、バクテリオクロリン、または鉄イオンと錯化されたイソバクテリオクロリン部分であり得る。ヘム部分は、ヘム含有タンパク質などのヘム補因子；非ペプチド性ポリマーまたはリポソーム、ポリエチレングリコール、炭水化物、多糖類、もしくはシクロデキストリンなどの他の巨大分子に結合されるヘム部分であり得る。
いくつかの実施形態では、鉄複合体は、単離され精製されるヘム含有タンパク質である。本明細書で使用される場合、タンパク質またはタンパク質画分に関する用語「単離され精製された」は、タンパク質またはタンパク質画分が、原料物質の他の構成成分の乾燥重量により少なくとも５０％（例えば、少なくとも５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％）を含まないように、タンパク質またはタンパク質画分が、原料物質（例えば、他の動物、植物、真菌、藻類、または細菌タンパク質）の他の構成成分から分離されていることを示す。
本明細書で使用される場合、「濃縮された」タンパク質またはタンパク質画分組成物は、原料物質に対してそのタンパク質またはタンパク質画分中で少なくとも２倍（例えば、少なくとも３倍、４倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、または１００倍）濃縮される。
用語「ヘム含有タンパク質」は、「ヘム含有ポリペプチド」または「ヘムタンパク質」または「ヘムポリペプチド」と同義的に用いることができ、ヘム部分に共有結合または非共有結合することができる任意のポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ヘム含有ポリペプチドは、グロビンであり、グロビンフォールドを含むことができ、これは一連の７個から９個のαヘリックスを含む。グロビンタイプタンパク質は、任意のクラス（例えば、クラスＩ、クラスＩＩ、またはクラスＩＩＩ）のものであり得、いくつかの実施形態では、酸素を輸送または貯蔵することができる。例えば、ヘム含有タンパク質は、ヘモグロビンまたはレグヘモグロビンの非共生タイプであり得る。ヘム含有ポリペプチドは、モノマー、すなわち、単一のポリペプチド鎖であってもよく、二量体、三量体、四量体、および／または高次のオリゴマーであってもよい。ヘム含有タンパク質の酸化したＦｅ２＋状態の寿命は、ミオグロビンの寿命と類似してもよく、ヘムタンパク質含有消耗品が製造される、貯蔵される、取り扱われるまたは消費のために調製される条件下で、それを１０％、２０％、３０％、５０％、１００％またはそれ以上まで超えてもよい。ヘム含有タンパク質の酸化されないＦｅ２＋状態の寿命は、ミオグロビンの寿命と類似してもよく、ヘムタンパク質含有消耗品が、製造される、貯蔵される、取り扱われるまたは消費のために調製される条件下で、それを１０％、２０％、３０％、５０％、１００％またはそれ以上まで超えてもよい。
ヘム含有ポリペプチドの非限定的な例には、アンドログロビン、サイトグロビン、グロビンＥ、グロビンＸ、グロビンＹ、ヘモグロビン、ミオグロビン、エリトロクルオリン、βヘモグロビン、αヘモグロビン、プロトグロビン、シアノグロビン、サイトグロビン、ヒストグロビン、ニューログロビン、クロロクルオリン、切断型ヘモグロビン（例えば、ＨｂＮまたはＨｂＯ）、切断型２／２グロビン、ヘモグロビン３（例えば、Ｇｌｂ３）、チトクロム、またはペルオキシダーゼを含むことができる。
本明細書に記載したひき肉レプリカにおいて用いることができるヘム含有タンパク質は、哺乳動物（例えば、雌ウシ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、雄ウシ、またはウサギなどの家畜）、鳥類、植物、藻類、真菌類（例えば、酵母または糸状菌）、繊毛虫類、または細菌由来であり得る。例えば、ヘム含有タンパク質は、家畜（例えば、雌ウシ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、魚、雄ウシ、またはウサギ）などの哺乳動物または七面鳥もしくはニワトリなどの鳥類由来であり得る。ヘム含有タンパク質は、ニコチアナ・タバクム（Nicotiana tabacum）またはニコチアナ・シルベストリス（Nicotiana sylvestris）（タバコ）；ゼア・マユス（Zea mays）（トウモロコシ）、シロイヌナズナ（Arabidopsis thaliana）、グリシン・マックス（Glycine max）（ダイズ）、ヒヨコマメ（cicer arietinum）（ガルバンゾまたはヒヨコマメ）、エンドウ（garden pea）もしくはスナップエンドウなどのピスム・サティヴム（Pisum sativum）（エンドウマメ）品種などのマメ科植物、グリーンビーンズ、クロマメ、白インゲンマメ、ノーザンビーンズ（northern beans）、もしくはピントビーン（pinto bean）などのインゲンマメのファセオルス・ブルガリス（Phaseolus vulgaris）品種、ヴィグナ・ウングイクラタ（Vigna unguiculata）品種（ササゲ）、ヴィグナ・ラジアタ（Vigna radiata）（リョクトウ）、ルピナス・アルブス（Lupinus albus）（ルピナス）、またはメジカゴ・サチヴァ（Medicago sativa）（アルファルファ）；ブラシカ・ナパス（Brassica napus）（カノーラ）；トリチカム（Triticum）種（コムギ粒、およびスペルトコムギを含めたコムギ）；ゴシピウム・ヒルスツム（Gossypium hirsutum）（ワタ）；オリザ・サティヴァ（Oryza sativa）（イネ）；ジザニア（Zizania）種（ワイルドライス）；ヘリアンサス・アンヌウス（Helianthus annuus）（ヒマワリ）；ベータ・ブルガリス（Beta vulgaris）（サトウダイコン）；ペニセツム・グラウクム（Pennisetum glaucum）（パールミレット）；ケノポジウム（Chenopodium）種（キノア）；セサマム（Sesamum）種（ゴマ）；リナム・ウシタチシマム（Linum usitatissimum）（フラックス）；あるいはホルデウム・ウルガレ（Hordeum vulgare）（オオムギ）などの植物由来であり得る。ヘム含有タンパク質は、酵母（Saccharomyces cerevisiae）、ピキア・パストリス（Pichia pastoris）、マグナポルテ・オリザエ（Magnaporthe oryzae）、フサリウム・グラミネアルム（Fusarium graminearum）、コウジカビ（Aspergillus oryzae）、トリコデルマ・リーゼイ（Trichoderma reesei）、ミセリオプテラ・テルモフィル（Myceliopthera thermophile）、クルイベラミセス・ラクチス（Kluyveramyces lactis）、またはフサリウム・オキシスポラム（Fusarium oxysporum）などの真菌類から単離することができる。ヘム含有タンパク質は、細菌、例えば、大腸菌（Escherichia coli）、枯草菌（Bacillus subtilis）、バチルス・リケニフォルミス（Bacillus licheniformis）、巨大菌（Bacillus megaterium）、シネコシスティス（Synechocistis）種、アクイフェクス・エオリクス（Aquifex aeolicus）、メチルアシジフィルム・インフェルノラム（Methylacidiphilum infernorum）、またはテルモフィラス（Thermophilus）種などの好熱性細菌から単離することができる。多数のヘム含有タンパク質の配列および構造は、公知である。例えば、Reedy, et al., Nucleic Acids Research, 2008, Vol. 36, Database issue D307-D313およびワールドワイドウェブ（http://hemeprotein.info/heme.php）で利用可能なヘムタンパク質データベースを参照のこと。
いくつかの実施形態では、非共生ヘモグロビンは、任意の植物由来であり得る。いくつかの実施形態では、非共生ヘモグロビンは、ダイズ、発芽ダイズ、アルファルファ、ゴールデンフラックス（golden flax）、クロマメ、ブラックアイドピー（black eyed pea）、ノーザンビーン、タバコ、エンドウマメ、ガルバンゾ、リョクトウ、ササゲ、ピントビーン、サヤエンドウ、キノア、ゴマ、ヒマワリ、コムギ粒、スペルト、オオムギ、ワイルドライス、およびイネからなる群から選択される植物由来であり得る。
いくつかの実施形態では、レグヘモグロビンは、ダイズ、エンドウマメ、またはササゲレグヘモグロビンであり得る。
いくつかの実施形態では、単離された植物タンパク質が用いられる。本明細書で使用される場合、タンパク質またはタンパク質画分（例えば、７Ｓ画分）に関する用語「単離された」は、タンパク質またはタンパク質画分が、原料物質の他の構成成分の乾燥重量により少なくとも２％（例えば、少なくとも５％、１０％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％）を含まないように、タンパク質またはタンパク質画分が、原料物質（例えば、他の動物、植物、真菌、藻類、または細菌タンパク質）の他の構成成分から分離されていることを示す。したがって、いくつかの実施形態では、鉄複合体は、単離されるヘム含有タンパク質（例えば、植物ヘム含有タンパク質）であり得る。タンパク質は、これらの分子量に基づき、例えば、サイズ排除クロマトグラフィー、膜による限外ろ過、または密度遠心分離により分離することができる。いくつかの実施形態では、タンパク質は、これらの表面電荷に基づき、例えば、等電沈澱、陰イオン交換クロマトグラフィー、または陽イオン交換クロマトグラフィーにより分離することができる。タンパク質はまた、これらの溶解性に基づき、例えば、硫酸アンモニウム沈澱、等電沈澱、界面活性剤、洗剤または溶媒抽出により分離することができる。タンパク質はまた、例えば、疎水性相互作用クロマトグラフィー、反応染料、またはヒドロキシアパタイトを用いて、別の分子へのそれらの親和性により、分離することができる。アフィニティークロマトグラフィーはまた、ヘム含有タンパク質に対する特異的結合親和性を有する抗体、Ｈｉｓ−タグ付き組換えタンパク質のためのニッケルニトリロ酢酸（ＮＴＡ）、糖タンパク質において糖部分に結合するためのレクチン、またはタンパク質を特異的に結合させる他の分子を用いることを含むことができる。
実施例２は、植物（例えば、ホウレンソウまたはアルファルファ）からＲｕＢｉｓＣＯを単離するための方法を記載している。抽出プロセスは、メタ重亜硫酸塩（約２％ｗ／ｖまたはそれ以上の溶液）などの還元剤を初回の抽出緩衝液に加え、プロセスを通して嫌気条件を維持することにより、および／またはＳｕｐｅｒｆｌｏｃ ７８１Ｇ，Ｍａｇｎａｆｌｏｃ ＬＴ ７９８９（ＢＡＳＦ）、またはＴｒａｍｆｌｏｃ ８６３Ａなどの０．０５〜１％ｖ／ｖ陽イオン性凝集剤を、抽出緩衝液に加えることにより、さらに改善することができる。ｐＨ７．０の精密ろ過後、かかる方法からの再懸濁させたタンパク質ペレットは、それでもなお機能し、同じ色を呈し、同じ変性特性を有する。
実施例４は、ダイズなどの植物からコングリシニン（７Ｓ画分と称することもできる）を単離するための方法を記載している。７Ｓの他の供給源には、それだけには限らないが、エンドウマメ、ヒヨコマメ、リョクトウ、インゲンマメ、ソラマメ、ササゲ、松の実、イネ、トウモロコシ、およびゴマなどの種子が含まれる。可溶性タンパク質は、脱脂ダイズ粉から抽出し、次いで、混合物を、（例えば、ｐＨ４．５まで）酸性にしてタンパク質を沈殿させることができる。コングリシニンは、再溶解させ、例えば、限外ろ過を用いて濃縮することができる。
いくつかの実施形態では、単離されたタンパク質は、脱色される。例えば、ＲｕＢｉｓＣＯ濃縮物は、活性炭で充てんされたカラムに通すことにより脱色することができる（ｐＨ７〜９）。着色料はカラムに結合することができ、一方、ＲｕＢｉｓＣＯは、ろ液中で単離することができる。あるいは、ＲｕＢｉｓＣＯ濃縮物は、カラムまたはバッチモードに充てんされたＦＰＸ６６（Ｄｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）樹脂で溶液をインキュベートすることにより脱色することができる。スラリーは、３０分間インキュベートされ、次いで、液体は、樹脂から分離される。着色料は、樹脂に結合することができ、ＲｕＢｉｓＣＯは、カラム通過画分中で収集することができる。
いくつかの実施形態では、単離されたタンパク質は、実施例３に記載されている通り精製し、脱色することができる。２０１４年１０月１日出願の米国特許出願第６２／０５８，２１１号「Methods for Extracting and Purifying Native Proteins」も参照のこと。
いくつかの実施形態では、脱色された単離された植物タンパク質は、脱色せずに単離された植物タンパク質を含む、対応する食肉レプリカと比較して、食肉レプリカの赤色に対する有効期間の安定性を高めることができる。いくつかの実施形態では、脱色されたタンパク質は、対応する脱色せずに単離された植物タンパク質を含む食肉レプリカにおいて観察されたものと比較して、食肉レプリカの風味プロファイルを改善させる。
ヘム含有または他のタンパク質はまた、ポリペプチド発現技法（例えば、細菌細胞、昆虫細胞、酵母などの真菌細胞、タバコ、ダイズ、もしくはアラビドプシス（Arabidopsis）などの植物細胞、または哺乳動物細胞を用いた異種の発現技法）を用いて組み換えによって生成することができる。例えば、レグヘモグロビンは、実施例１に記載されている通り大腸菌（E.coli）またはピキア・パストリス（Pichia pastoris）において組み換えによって生成することができる。場合によっては、標準的なポリペプチド合成技法（例えば、液相ポリペプチド合成技法または固相ポリペプチド合成技法）を用いて、ヘム含有タンパク質を合成により生成することができる。場合によっては、ｉｎ ｖｉｔｒｏ転写−翻訳技法を用いて、ヘム含有タンパク質を生成することができる。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される食肉レプリカは、非動物供給源、例えば、植物、真菌、または微生物ベースの供給源に由来する成分から実質的にまたは完全に構成される。いくつかの実施形態では、食肉レプリカは、１種または複数の動物ベースの生成物を含むことができる。例えば、食肉レプリカは、植物ベースおよび動物ベースの供給源の組合せから製造することができる。
食肉レプリカの製造
肉の生地は、単離された植物タンパク質および任意選択の食用の繊維状構成成分、任意選択の矯味剤、および任意選択の非動物脂肪を混合し、水またはブロスなどの水性構成成分を、混合物に加え、手動でもしくは機械的に練り合わせてまたは別の方法で混合し、生地を形成することにより調製することができる。植物タンパク質および繊維状構成成分の混合物に加える前に、水性構成成分は加熱することができる。肉の生地が形成された後、肉の生地を、１５０°Ｆから２５０°Ｆ（例えば、１６０°Ｆから２４０°Ｆ、１７０°Ｆから２３０°Ｆ、１８０°Ｆから２２０°Ｆ、または１９０°Ｆから２１２°Ｆ）までの温度に加熱する（例えば、蒸すまたはゆでる）。例えば、肉の生地は、炊飯器、スチームキャビネット、またはトンネルスチーマーに置くことにより蒸すことができる。肉の生地は、乾熱を加える、例えば、パン焼き器もしくはオーブンに置くことにより、または熱湯もしくはブロスに浸漬することにより加熱することができる。ブロスでゆでると、有益な風味および異臭マスキング剤を生地に吸収させることができるため、肉の生地の風味を向上することができる。質感特性はまた、調理方法の選択により調節することもできる。
本明細書で使用される場合、用語「単離された植物タンパク質」は、タンパク質またはタンパク質画分が、原料物質の他の構成成分の乾燥重量により少なくとも２％（例えば、少なくとも５％、１０％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％）を含まないように、植物タンパク質（例えば、ヘム含有タンパク質、コムギグルテン、デヒドリンタンパク質、アルブミン、グロブリン、コングリシニン、グリシニン、もしくはゼイン、またはそれらの混合物）または植物タンパク質画分（例えば、７Ｓ画分）は、原料物質（例えば、他の動物、植物、真菌、藻類、または細菌タンパク質）の他の構成成分から分離されていることを示す。例えば、コムギグルテンは、単独でまたは１種もしくは複数の他のタンパク質（例えば、デヒドリン）と組み合わせて用いることができる。デヒドリンは、ひき肉レプリカにおいて多汁性および質感を高めるために特に有用であり得る。いくつかの実施形態では、食肉レプリカは、グルテンを含まないように配合することができ、例えば、トウモロコシデンプン、タピオカ粉、米粉、およびグアーガムのブレンドは、肉の生地中のコムギグルテンと置換することができる。
食用の繊維状構成成分は、植物繊維、単離された植物タンパク質（例えば、コムギグルテンまたは他の単離された植物タンパク質、例えば、グルテリン、アルブミン、レグミン、ビシリン（vicillin）、コンビシリン、グリシニンおよびダイズ、エンドウマメ、レンズマメなどを含めた任意の種子またはマメ由来などのタンパク質分離物など）の押出成形された混合物、または溶液紡糸タンパク質繊維であり得る。いくつかの実施形態では、溶液紡糸タンパク質繊維は、プロラミン溶液紡糸タンパク質繊維である。プロラミンは、任意の植物供給源（例えば、トウモロコシまたはエンドウマメ）由来であり得、ゼイン、プロラミン、カフェリン（kafirin）、セカリン、ホルデイン、またはアベニンを含むことができる。ひき肉生成物（例えば、肉のパテ）の質感は、繊維性および引張強さなどの食用の繊維状構成成分の特性に依存する。本明細書に記載した通り、単離された植物タンパク質または溶液紡糸タンパク質繊維の押出成形された混合物は、結合組織レプリカと称することができ、結合組織レプリカの繊維性および引張強さは、温度、処理量、およびダイ寸法などの押出パラメーターの共変動により制御することができる。例えば、より低い押出温度、中間／低処理量およびより小型のダイの組合せは、引張強さが低い繊維性のより高い組織の生成に好都合に働き、より高い押出温度、より高い処理量およびより大型のダイは、引張強さが非常に高い繊維性の低い組織レプリカの生成に好都合に働く。
結合組織レプリカの繊維性および引張強さはまた、押出混合物の組成を変化させることにより調節することもできる。例えば、単離された植物タンパク質（例えば、コングリシニンなどのダイズタンパク質）とコムギグルテンとの比を３：１ｗ／ｗに上げ、同時に押出混合物の含水量を５０％まで減らすことにより、繊維よりが薄く引張強さがより大きい結合組織レプリカを製造することができる。
肉の生地の質感はまた、酒石酸水素カリウムを調製に加えることにより改変することもできる。例えば、酒石酸水素カリウムを含有する肉の生地調製は、成形しやすいように、牛のひき肉と類似する挽いた後の形状因子により、より粘着力があってもよい。酒石酸水素カリウムは、０．０５％から２．５％の間（例えば、０．５％）で加えることができる。
ひき肉レプリカの外観は、食用の繊維状構成成分を、所望のサイズおよび形状の断片に細長く切ることにより調節することができる。いくつかの実施形態では、食用の繊維状構成成分は、市販のシュレッダー、例えば、艶消し刃が付属したＣｕｉｓｉｎｅａｒｔチョッパー／グラインダー、ＵＭ１２、Ｃｏｍｉｔｒｏｌシュレッダー（Ｕｒｓｃｈｅｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｉｎｄｉａｎａ）または類似のシュレッダーを用いて細長く切ることができる。繊維のサイズは、シュレッダーのタイプ、刃の選択、およびスクリーンのタイプによりならびに細長く切る時間を調整することにより、肉の繊維の外観を模倣するために調整することができる。
他の実施形態では、食用の繊維状構成成分は、携帯型のカーダー（carder）または梳綿機、例えば、Ｐａｔ Ｇｒｅｅｎカーダーを用いて梳くことにより繊維に分離することができる。サイズを変えるおよびカーディングドラムのピンの間隔を開けることにより、繊維のサイズを調整して、肉の繊維の外観を模倣することができる。
他の実施形態では、食用の繊維状構成成分は、ローラー（例えば、ＫＩＴＣＨＥＮＡＩＤ（登録商標）パスタアタッチメント）に通してそれを押し、その後、ＵＭ１２マシンで、例えば、艶消し刃を用いて、静かに細長く切ることにより繊維に分離することができる。ローラーの番号およびローラー間の間隔を変えることにより、繊維のサイズを調整して、肉の繊維の外観を模倣することができる。
結合組織レプリカの繊維性、引張強さ、および外観は、目的に合わせて、特定のひき肉生成物（例えば、牛のひき肉または挽くことができる牛肉の異なる切り身）を模倣して作ることができる。
いくつかの実施形態では、食用の繊維状構成成分には、可溶性または不溶性植物繊維が含まれる。例えば、ニンジン、タケ、エンドウマメ、ブロッコリー、ジャガイモ、サツマイモ、トウモロコシ、全粒粉、アルファルファ、ケール、セロリ、セロリの根、パセリ、キャベツ、ズッキーニ、グリーンビーンズ、インゲンマメ、クロマメ、アズキ、白インゲン、ビート、カリフラワー、ナッツ、リンゴの皮、カラスムギ、コムギ、もしくはオオバコ、またはそれらの混合物由来の植物繊維は、食用の繊維状構成成分として用いることができる。
いくつかの実施形態では、食用の繊維状構成成分には、押出プロセス中に異臭の発生を防止する化合物が含まれ得る。押出混合物が押出プロセス中に曝露される温度が高く水分が少ない条件により、穀物のような（grainy）、木のような、ナッツのような、ゴムのようなおよび他の異臭を伴う化合物を形成する。酸化防止剤またはカロテノイドなどのある特定のクラスの化合物を含むことによって、異臭化合物の形成を低下させるのに役立てることができる。例えば、押出成形された混合物は、穀物のような異臭の発生を防止するためにカンタキサンチンを含むことができる。カロテノイドは、食用の繊維状構成成分の約０重量％から約１重量％であり得る。
いくつかの実施形態では、肉の生地は、単離された植物タンパク質と食用の繊維状構成成分のおおよそ等しい割合を用いて形成される。比は、最終生成物の特性を目的に合わせて作るのに望ましいように変えることができることが理解されよう。
いくつかの実施形態では、ブロス、例えば、風味を付けたブロスは、肉の生地に用いることができる。例えば、肉の生地は、単離された植物タンパク質とブロスのおおよそ等しい割合を用いて形成することができる。
いくつかの実施形態では、風味ブロスには、肉の生地に加える前にフレーバー前駆物質を予備反応させる（調理する）ことにより創出された風味混合物が含まれる。フレーバー前駆物質分子または組成物は、精製された形態で予備反応混合物に加えられてもよいし、および／または例えばヤシ油、システイン、グルコース、リボース、チアミン、藻類油、乳酸および／または酵母抽出物などの特定のフレーバー前駆物質または組成物のうち１種または複数を含有するかおよび／またはそれらが富化された未調理の肉の生地中の成分に由来するものでもよい。得られた風味および／または芳香プロファイルは、他の因子の中でもとりわけ、フレーバー前駆物質のタイプおよび濃度、反応のｐＨ、調理の長さ、調理の温度、鉄複合体（例えば、タンパク質を含有する鉄、ヘム含有タンパク質などのヘム補因子、または鉄クロロフィリン）または鉄塩（グルコン酸鉄）のタイプおよび量、反応の温度、ならびに生成物中の水分活性の量により調節することができる。風味ブロスは、非動物性生成物（例えば、植物）を含有してもよく、風味ブロスは、動物および非動物ベースの前駆物質（例えば、ラード）の組合せであってもよい。風味ブロスは、牛肉、ベーコン、豚肉、仔ヒツジの肉、ヤギ肉、七面鳥の肉、鴨肉、鹿肉、ヤクの肉、バイソンの肉、鶏肉の味およびにおいまたは望ましい食肉の風味になる消費できる食品に風味をもたらし得る。
いくつかの実施形態では、風味を付けたブロスは、鉄複合体（例えば、単離されたヘム含有タンパク質）および／または鉄塩（例えば、グルコン酸鉄、塩化鉄、シュウ酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、硫酸第一鉄、ピロリン酸第二鉄、または任意の他の水溶性の塩）を、１種もしくは複数のフレーバー前駆物質および脂肪（例えば、非動物系脂肪）と組み合わせることにより、ならびに混合物を加熱して、１種または複数のフレーバー化合物を含有する風味を付けたブロスを得ることにより作製することができる。適当なフレーバー前駆物質には、糖、糖アルコール、糖誘導体、遊離脂肪酸、トリグリセリド、α−ヒドロキシ酸、ジカルボン酸、アミノ酸およびその誘導体、ヌクレオシド、ヌクレオチド、ビタミン、ペプチド、リン脂質、レシチン、ピラジン、クレアチン、ピロリン酸塩および有機分子が含まれる。例えば、糖、糖アルコール、糖酸、および糖誘導体は、グルコース、フルクトース、リボース、スクロース、アラビノース、グルコース−６−リン酸、フルクトース−６−リン酸、フルクトース１，６−二リン酸、イノシトール、マルトース、マンノース、グリセロール、糖蜜、マルトデキストリン、グリコーゲン、ガラクトース、ラクトース、リビトール、グルコン酸、グルクロン酸、アミロース、アミロペクチン、またはキシロースを含むことができる。遊離脂肪酸は、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、αリノレン酸、γリノレン酸、アラキジン酸、アラキドン酸、ベヘン酸、エイコサペンタエン酸、ペトロセリン酸またはエルカ酸を含むことができる。トリグリセリドは、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、αリノレン酸、γリノレン酸、アラキジン酸、アラキドン酸、ベヘン酸、エイコサペンタエン酸、ペトロセリン酸またはエルカ酸の脂肪酸エステルを含むことができる。アミノ酸およびその誘導体は、システイン、シスチン、システインスルホキシド、アリシン、セレノシステイン、メチオニン、イソロイシン、ロイシン、リシン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、５−ヒドロキシトリプトファン、バリン、アルギニン、ヒスチジン、アラニン、アスパラギン、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩、グルタミン、グリシン、プロリン、セリン、チロシン、オルニチン、カルノシン、シトルリン、カルニチン、オルニチン、テアニン、およびタウリンを含むことができる。リン脂質は、脂肪酸、グリセロールおよび極性基を含む、複数の両親媒性分子を含むことができる。脂肪酸は、オレイン酸、パルミトレイン酸、パルミチン酸、ミリスチン酸、ラウリン酸、ミリストレイン酸、カプロン酸、カプリン酸、カプリル酸、ペラルゴン酸、ウンデカン酸、リノール酸、２０：１エイコサン酸、アラキドン酸、エイコサペンタン酸、ドコサヘキサン酸、１８：２共役リノール酸、共役オレイン酸、またはオレイン酸、パルミトレイン酸、パルミチン酸、ミリスチン酸、ラウリン酸、ミリストレイン酸、カプロン酸、カプリン酸、カプリル酸、ペラルゴン酸、ウンデカン酸、リノール酸、２０：１エイコサン酸、アラキドン酸、エイコサペンタン酸、ドコサヘキサン酸、１８：２共役リノール酸もしくは共役オレイン酸のエステル、またはオレイン酸、パルミトレイン酸、パルミチン酸、ミリスチン酸、ラウリン酸、ミリストレイン酸、カプロン酸、カプリン酸、カプリル酸、ペラルゴン酸、ウンデカン酸、リノール酸、２０：１エイコサン酸、アラキドン酸、エイコサペンタン酸、ドコサヘキサン酸、１８：２共役リノール酸もしくは共役オレイン酸のグリセロールエステル、またはオレイン酸、パルミトレイン酸、パルミチン酸、ミリスチン酸、ラウリン酸、ミリストレイン酸、カプロン酸、カプリン酸、カプリル酸、ペラルゴン酸、ウンデカン酸、リノール酸、２０：１エイコサン酸、アラキドン酸、エイコサペンタン酸、ドコサヘキサン酸、１８：２共役リノール酸、もしくは共役オレイン酸のトリグリセリド誘導体からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、極性基は、コリン、エタノールアミン、セリン、リン酸塩、グリセロール−３−リン酸、イノシトールおよびイノシトールリン酸からなる群から選択される。
ヌクレオシドおよびヌクレオチドは、イノシン、イノシン一リン酸（ＩＭＰ）、グアノシン、グアノシン一リン酸（ＧＭＰ）、アデノシン、またはアデノシン一リン酸（ＡＭＰ）を含むことができる。ビタミンは、チアミン、ビタミンＢ２、ビタミンＢ９、ビタミンＣ、４−アミノ安息香酸、コリン、ナイアシン、ビタミンＢ８、ビタミンＢ１２、ビオチン、ベタイン、ビタミンＡ、βカロテン、ビタミンＤ、ビタミンＢ６、またはビタミンＥを含むことができる。酸、例えば、酢酸、コーヒー酸、グリコール酸、アスパラギン酸、パントテン酸、乳酸もしくはグリコール酸などのαヒドロキシ酸、クエン酸などのトリカルボン酸、またはコハク酸もしくは酒石酸などのジカルボン酸。ペプチドおよびタンパク質加水分解物は、グルタチオン、植物性タンパク質加水分解物、ダイズタンパク質加水分解物、コムギタンパク質加水分解物、トウモロコシタンパク質加水分解物、酵母タンパク質加水分解物、藻類タンパク質加水分解物、および食肉タンパク質加水分解物を含むことができる。抽出物は、麦芽抽出物、酵母抽出物、またはペプトンを含むことができる。
例えば、いくつかの実施形態では、ブロスは、鉄複合体（例えば、レグヘモグロビンなどの単離され精製されたヘム含有タンパク質）および／または鉄塩（例えば、グルコン酸鉄、塩化鉄、シュウ酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、硫酸第一鉄、ピロリン酸第二鉄、または任意の他の水溶性の塩）を１種または複数のフレーバー前駆物質（例えば、表２または表１３に示される前駆物質のミックス）および脂肪（例えば、非動物系脂肪）と合わせることにより、ならびに混合物を加熱して１種または複数のフレーバー化合物を含有する風味を付けたブロスを得ることにより作製することができる。非動物脂肪は、植物由来油、藻類油、または細菌もしくは真菌類由来の油を含むことができる。適当な植物由来油には、ヤシ油、マンゴー油、ヒマワリ油、綿実油、ベニバナ油、米糠油、カカオバター、パーム核油、ヤシの実の油、パーム油、ダイズ油、ナタネ油、カノーラ油、トウモロコシ油、ゴマ油、クルミ油、扁桃油、アマニ油、ホホバ油、ヒマシ油、グレープシード油、ラッカセイ油、オリーブ油、ルリジサ油、藻類油、真菌油、クロスグリ油、ババス油、シアバター、マンゴーバター、コムギ胚芽油、クロスグリ油、シーバックソーン油、マカダミア油、ノコギリヤシ油、共役リノール酸油、アラキドン酸強化油、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）強化油、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）強化油、またはマーガリンが含まれる。油は、水素化されていても（例えば、水素化された植物油）、水素化されていなくてもよい。ステアリン（例えば、パームステアリン）またはオレインなどの油画分を用いることもできる。例えば、非動物脂肪は、ヤシ油でも、ヤシ油およびステアリンの組合せでもよい。いくつかの実施形態では、脂肪は、非動物（例えば、植物）生成物を含有してもよく、脂肪は、動物および非動物ベースの前駆物質（例えば、ラード）の組合せ、またはもっぱら動物系脂肪でもよい。
いくつかの実施形態では、風味を付けたブロスは、水、ヤシ油などの非動物系脂肪、および酸（例えば、乳酸）などの矯味剤、カロテノイド（例えば、ルテイン）、または酸化防止剤を合わせることにより、ならびに混合物を加熱してブロスを作製することにより作製することができる。
前述した肉の生地を加熱後、矯味剤を任意選択で含有する非動物脂肪は、肉の生地と合わせることができる。通常、肉の生地は、肉の生地を非動物脂肪と合わせる前に（例えば、室温まで）放冷する。非動物脂肪は、非動物脂肪を、鉄複合体または鉄塩および（前述の）１種もしくは複数のフレーバー前駆物質と合わせることによりならびに混合物を加熱してフレーバー化合物を生成することにより風味付けすることができる。非動物系脂肪が固化することができるように加熱された混合物は、冷却することができる。１種または複数の追加の非動物脂肪（例えば、藻類油）、１種もしくは複数のマスキング剤（例えば、ラクトン、例えばブチロラクトン、δ−トリデカラクトン、γデカラクトン、δ−ドデカラクトン、γ−オクタラクトン、ジヒドロ−５−メチル２（３Ｈ）−フラノン、４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノン、５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノン、δ−テトラデカラクトン、またはそれらの組合せ）、または１種もしくは複数の風味付け化合物（例えば、アセトイン、カロテノイド、酸化防止剤、野菜ジュースもしくは果汁、ピューレ、または抽出物）は、混合物が固化する前に加えて非動物脂肪の風味を改善することができる。いくつかの実施形態では、５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノン、ブチロラクトン、γ−オクタラクトン、および／またはδ−テトラデカラクトンの組合せは、マスキング剤として用いることができる。（例えば、１０−３から１０−１０の濃度で）１種または複数のラクトンを加えると、その結果、穀物、卵、苦味、厚紙、肝臓、またはマッシュルームのように感じる異臭が減り、クリームのような、バターのような、カラメルになった、脂っこい、新鮮な、およびフルーツのようななどの所望の風味を増すことができる。例えば、２種、３種、または４種のラクトンの組合せを用いて、苦味などの特性をマスキングすることができる。さらに、ラクトンはまた、１０−３から１０−１１の間の濃度で用いて、クリームのような、バターのような、カラメルになった、脂っこい、新鮮な、フルーツのような、獣脂および肉のような香気などの所望の風味を、食肉レプリカに与えることができる。したがって、ラクトンは、マスキング剤または矯味剤として用いることができる。ラクトンは、それだけには限らないが、牛乳、チーズ、およびヨーグルトなどの乳製品のレプリカ、またはプロテインバーおよびタンパク質粉末などのタンパク質サプリメントを含めた、他の製品においてマスキング剤として作用することができる。ラクトンの組合せは、食肉レプリカなどの食品において肉の風味（例えば、脂っこい獣脂および甘い芳香）を創出するまたは非牛肉食品に牛肉の風味を与える上で重要な独特な風味プロファイルを提供することができる。食肉レプリカは、ラクトンが生成物に加えられる場合、全体的な嗜好および肉のような特質（meatiness）の評価を改善する。いくつかの実施形態では、例えば、ブチロラクトン、δ−テトラデカラクトン、および５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノンの組合せは、肉のような風味を提供するために用いることができる。ラクトンは、植物油に加えて、より動物脂肪に近い脂肪の味を作り、口全体に広がる感じ（perception of mouth coating）を増すことができる。ラクトンはまた、糖含有量を変えずに生成物の甘味を増すために加えることもできる。ラクトンおよびカロテノイドなどの作用物質が、食肉またはチーズレプリカを含めた、食品レプリカ（例えば、植物ベースの食品レプリカ）に風味を付けるために用いることができ、食肉およびチーズなどの食品の風味を変更するために（例えば、食肉またはチーズ風味を増すために）用いることもできることに留意するべきである。
いくつかの実施形態では、β−カロテン、ゼアキサンチン、ルテイン、ｔｒａｎｓ−β−アポ−８’−カロテナル、リコペン、およびカンタキサンチンなどのカロテノイドを用いて、所望の風味の創出を制御し、植物ベースの食品（例えば、本明細書に記載した食肉レプリカ）などの食品を創出することによって望まれない風味を防止することができる。カロテノイドは、乳製品のレプリカを含めた、他の食品における植物の異臭を減らすために用いることができる。カロテノイドの各タイプは、所望の風味を創出するおよび異臭を制御する異なる特性を有することが判明した。実施例１８および２６を参照のこと。カロテノイドは、０．００００１％から０．１％の間で加えられる場合、食肉レプリカを改善する甘いおよび脂のような香気を増すことができる。
カロテノイドは、風味エマルションまたは風味ブロスにカロテノイドを加えることにより食肉レプリカに加えることができる。カロテノイドは、調理前後に加えることができる。カロテノイドは、０．００００１％から０．１％の間で加えることができる。カロテノイドを調理前に加える場合、カロテノイドは、食肉レプリカに加える前に風味を創出する反応風味混合物において基質として作用することができる。カロテノイドはまた、酸化防止剤として作用することによって生成される他の風味についての経路を変える。カロテノイドを加えると、風味エマルションは、風味の質を改善することができ；（ろうのような、魚のような、絵の具のような）質の悪い酸化臭が減少し、（土のような、マッシュルーム、穀物のような、豆のような）他の質の悪い香気が減少し、甘い、脂っこい、肉のような、および新鮮な風味が増す。各カロテノイドは、得られた異なる風味プロファイルを有する。例えば、調理前に風味エマルションにリコペンを加えると、淡泊な風味になり、一方、β−カロテンは、非常に味が良く、対照と比べて脂っこいおよび肉のような香気が加わる。調理前にカロテノイドを加える風味プロファイルは、風味プロファイルに大きな効果を有する。調理後にカロテノイドを加える場合、特に貯蔵で生じる異臭を減じることに関して、さらに有益な効果であり得る。風味エマルションまたは風味ブロス中の他のフレーバー前駆物質分子は、カロテノイドの効果に影響を与える。得られた風味および／または芳香プロファイルは、他の因子の中でもとりわけ、フレーバー前駆物質のタイプおよび濃度、反応のｐＨ、調理の長さ、調理の温度、鉄複合体（例えば、ヘム含有タンパク質などのヘム補因子、または鉄クロロフィリン）または鉄塩（グルコン酸鉄）のタイプおよび量、反応の温度、ならびに生成物中の水分活性の量により調節することができ、そのすべては、カロテノイドがどのように風味プロファイルを変えるかによって変わる。特定の例には、特に油供給源中に金属がある場合、カロテノイドがどのように植物油において生成されるフレーバー化合物の創出を減らすまたは防止することができるかが含まれる。リノール酸、γリノール酸、ＤＨＡ、およびＥＰＡのようなポリ不飽和脂肪酸を有する脂肪および油を含む風味エマルションに加える場合、カロテノイドは、腐った魚のような、絵の具のような、および野菜風味の香気を抑制し、肉のような特質と甘い香気の生成を促進することができる。
特にカロテノイドは、穀物のような、木のような、土のような、マッシュルーム、植物臭および酸化臭を減らすことができる。カロテノイドは、植物ベースの製品の異なるパートに加えて、異なる影響を与えることができる。カロテノイドは、コムギグルテンを含めた小麦粉において生成された異臭化合物の創出を減らすまたは防止することができる。例えば、ルテインは、生肉の生地に加え、全体的な風味の強度を低下させ、調理された肉の生地および最終生成物において穀物のような、木のような香気、および酸化臭を減らすことができる。風味の特徴のこれらの変化は、いくつかの場合においてＳＰＭＥガスクロマトグラフィー−質量分析（ＧＣ−ＭＳ）によって示されている通り、特定のフレーバー化合物の減少によって裏付けられ、他の場合では、フレーバー化合物の変化はないが、穀物の特徴の減少が観察され、起こっている化学反応を変化させることによりおよび特定の風味をマスキングすることによりカロテノイドが作用することが示唆されている。さらに、肉の生地に加えられたカロテノイドによって、試料がカロテノイドを含まない対照よりも脂っこく甘くなったいうことが記載されている。ルテインによって減少した主な化合物には、（Ｚ）−２−ノネナール、（Ｅ，Ｅ）−２，４−ノナジエナール、および１−ペンテン−３−オールを含めたアルコールおよびアルデヒドのような酸化したフレーバー化合物が含まれ；さらに、硫黄化合物は、メタンチオール、２−アセチルチアゾール、および硫化ジメチルを含めたルテインで減少し；これらの化合物の多くはまた、ガスクロマトグラフィー−嗅覚検査（ＧＣＯ）により訓練を受けたフレーバーサイエンティストにより穀物のような香気および酸化臭と記載された。
没食子酸エピガロカテキン（ＥＧＣＧ）などの酸化防止剤はまた、植物ベースの製品（例えば、食肉レプリカ）などの食品の異臭を減らすために用いることができる。緑茶抽出物において見出される（および緑茶抽出物から精製することができる）、ＥＧＣＧなどの酸化防止剤は、０．０００１％から０．１％で加えることができる。ＥＧＣＧを含めた酸化防止剤はまた、肉の生地に加え、調理された肉の生地および生地から創出された消費者製品の両方の風味プロファイルを変化させることができる。ＥＧＣＧは、生地の風味全体を低下させ、特に、訓練を受けたフレーバーサイエンティストによって記載され、ＧＣＭＳを用いて確認された通り、穀物のような、および酸化した風味のような異臭を減少させる。
野菜または果物（液汁、ピューレ、または抽出物）は、食肉レプリカに加えて、知覚される食肉の風味（例えば、肉のような特質）および生成物の好ましさを高める、ならびに知覚される脂肪質および口全体に広がる脂肪を増すことができる。さらに、これらにより、食肉レプリカの知覚される多汁性を増やして、製品を食べる場合、食味検査員は、唾液分泌が多くなり得る。野菜または果物が増強する食肉の風味のタイプは、タイプおよび加工に依存している。例には、調理で強化されるキュウリおよびメロンに由来する追加の獣脂の脂のような香気；ハネデューに由来する追加の甘い芳香、黒こげの肉（char meat）および香ばしい香気；パイナップルに由来する追加の甘い芳香および新鮮さならびにトマトに由来する追加の香ばしい、きつね色に焼けた食肉の風味が含まれる。
野菜または果物は、加圧、搾汁、流動留出物、加圧蒸留、溶媒によって補助された風味抽出、または他の方法から創出された、液汁、ピューレ、抽出物の形態で食肉の再現物に加えることができる。野菜または果物は、調理されていなくても処理されていなくてもよい、または調理されていてもよく、別の方法で処理して（例えば、低温殺菌によってまたは酵素不活性化によって）、タンパク質（例えば、リポキシゲナーゼ）を変性されていてもよい。風味プロファイル、すなわち、果物または野菜の青っぽいもしくは野菜のような香気を含めた、肉のような特質および腐った香気の量の両方は、調理または他の処理に応じて、ならびに調理または他の処理の量およびプロセスに応じて変化し得る。果物および野菜の抽出物、ピューレ、および液汁の風味の多くは、酵素によって創出される。これらの酵素は、望まれるもしくは望まれない風味を創出することができ、所望の風味は、抽出物および液汁の適用に依存している。果物または野菜の適切なタイプの選択および処理によって、食肉レプリカについて適切な風味の創出が可能になる。さらに、加工中、異臭を引き起こす恐れがある酵素を非活性化することが望ましいこともある。食肉の再現のために加えられる場合、抽出物中で異臭を生成し得る特定の酵素は、リポキシゲナーゼであり、リポキシゲナーゼは、果物および野菜の皮に特に活性がある。皮の破損によって、リポキシゲナーゼ活性を高めることができる。したがって、果物または野菜の皮を切る前の酵素不活性化は、異臭を減らすのに役立ち得る。果物および野菜抽出物、ピューレ、または液汁の生成において、酵素は、６０℃を超える加熱、高圧低温殺菌、または酵素阻害により非活性化することができる。いくつかの実施形態では、例えば、リポキシゲナーゼは、没食子酸エピガロカテキン（ＥＧＣＧ）などの阻害物質の添加により、または他の酸化還元活性のある酵素の添加により阻害することができる。いくつかの実施形態では、丸ごとの果物または野菜は、皮を貫通させる前に調理しても処理してもよく、調理は、生成物を切った後行ってもよい。調理または他の処理は、短時間（分）でも長時間（時間）でもよい。調理が用いられる場合、温度は、室温から圧力下１２０℃を超えるまでわずかに上昇させることができる。例えば、果物または野菜は、６０〜１００℃（例えば、７０〜８０℃、８０〜９０℃、または９０〜１００℃）の温度で調理することができる。プロセスは、ブレンディング、伸長、およびまたは加圧を含むことができる。種子は、場合によっては除去することができるまたは種子は残すことができる。
例えば、食肉レプリカに加えられたキュウリピューレは、追加の脂っこい獣脂の風味を提供することができるが、青野菜の香気をもたらす恐れがある。果物が最初に調理される場合、青っぽい、および強いキュウリの香気の原因である２−ノネナールおよび２，６−ノナジエナールを含むがそれだけに限らない数種の化合物が減少する。さらに、バターのような、脂っこい、および獣脂の風味が増し、これらは、ＳＰＭＥ ＧＣ−ＭＳによって示されている通りラクトンの濃度の増加から起こり得る。トマトを調理することによっても、青っぽいおよびトマト風味を低減しながら、肉のような香気を強める。
果物または野菜風味の液体は、生成物の異なる構成成分に加えることができ、例えば、調理前に肉の生地に加える、調理後または調理前に脂肪エマルションに加える、ゲル状の基質に加える、完全に組み合わせて作られた生成物に加える、または未反応の風味ブロスに加えることができる。抽出物は、抽出物の場合の０．０００１％からピューレおよび液汁の場合の最大１０％まで加えることができる。
乳酸などの酸は、肉の生地に加えて、ｐＨを低下させ、調理および加工で起こる風味反応を変化させることができる。牛肉は、ｐＨがおよそ５．５であり；ｐＨ５．５の肉の生地を達成させるために、追加の酸性度が必要とされる。乳酸は、牛肉において示されるものように望ましい新鮮な、酸味をもたらす。
他の実施形態では、非動物脂肪は、単離された植物タンパク質を含むことができる。例えば、エマルションは、植物由来の油、藻類油、または細菌もしくは真菌類由来の油および任意選択のフレーバー剤を、単離された植物タンパク質（例えば、ダイズ由来のコングリシニン）の水溶液と合わせること、次いで、例えば、高速ホモジナイザーを用いて混合物をホモジナイズすることおよび短期間、例えば、９０℃で５分間これを加熱することにより作製することができる。融解温度、硬度、脆性、色などのエマルションの物理的特性は、異なるタイプの単離されたタンパク質を用いること、タンパク質濃度、油対水の比、ホモジナイゼーションの速度、加熱温度および加熱時間を変化させることにより調節することができる。例えば、油対水の比が高くタンパク質濃度が低いエマルションは、より壊れやすく、融解し易いが、油対水の比がより低くタンパク質濃度がより高いエマルションは、より軟らかく、壊れにくく、より粘着性があり、より高い温度で融解する。
いくつかの実施形態では、エマルションは、植物由来の油、藻類油、または細菌もしくは真菌類由来の油および任意選択の矯味剤を、ｐＨ＞１０（例えば、ｐＨ１２）を有する単離されたタンパク質（例えば、ダイズコングリシニン）の例えば、水酸化ナトリウムを含む水溶液と合わせることにより作製することができる。本混合物を振とう、撹拌またはホモジナイゼーションによって、エマルションが形成される。エマルションが形成された後、ｐＨは、例えば、塩酸または乳酸を加えることにより中性または酸性ｐＨに調整することができる。これらのエマルションの物理的特性は、タンパク質タイプ、タンパク質濃度、ホモジナイゼーション時のｐＨレベル、ホモジナイゼーションの速度および油対水の比を変化させることにより制御することができる。
他の実施形態では、エマルションは、植物由来の油、藻類油、または細菌もしくは真菌類由来の油、塩および矯味剤（例えば、フレーバー前駆物質）の水溶液、ならびに乳化剤を混合することにより作製することができる。例えば、モノ／ジグリセリド、レシチン、リン脂質、Ｔｗｅｅｎ界面活性剤、ステアロイル乳酸ナトリウム、またはＤＡＴＥＭ（モノグリセリドのジアセチル酒石酸エステル）は、乳化剤として用いることができる。これらのエマルションの物理的特性は、乳化剤タイプおよび濃度、ホモジナイゼーションの速度および油対水の比を変化させることにより制御することができる。
固化された、任意選択で風味を注入したおよび／またはタンパク質を含有する脂肪は、肉の生地と合わせることができ、肉の生地および非動物脂肪の混合物は、例えば、みじん切りにする、挽く、切断する、ミンチにする、剪断する、または引きちぎることにより、より細かく砕くことができる。いくつかの実施形態では、剪断は、加熱しながら生地に適用することができ、その結果、生地が固まり、最終的に、調理プロセス中粉砕される。したがって、粉砕するための別のステップは必要ないはずである。
炭水化物系ゲルおよび任意選択の結合剤は、生地−脂肪混合物に加えることができる。炭水化物系ゲルはまた、食肉レプリカの質感を生じるおよびべとべとせずに最終生成物に多汁性をもたらすために有用である。通常、融解温度が約４５℃から約８５℃の間である炭水化物系ゲルが用いられる。適当な炭水化物系ゲルの非限定的な例には、寒天、ペクチン、カラギーナン、（グルコマンナンとしても公知の）コンニャク、アルギン酸塩、化学修飾されたアガロース、またはそれらの混合物が含まれる。
結合剤は、単離された植物タンパク質でも炭水化物系ゲルでもよい。適当な植物タンパク質の非限定的な例には、ＲｕＢｉｓＣＯ、アルブミン、グルテン、グリシニン、コングリシニン、レグミン、グロブリン、ビシリン、コンアルブミン、グリアジン、グルテリン、グルテニン、ホルデイン、プロラミン、ファゼオリン、プロテイノプラスト、セカリン、コムギ連（triticeae）グルテン、ゼイン、オレオシン、カロレオシン（caloleosin）、ステロレオシン（steroleosin）、またはそれらの混合物（例えば、アルブミン画分）が含まれる。植物タンパク質は、ダイズ、エンドウマメまたはレンズマメを含めた、任意の供給源から得ることができる。いくつかの実施形態では、有用な結合剤は、非植物ベースの供給源から得ることができる。例えば、卵アルブミンまたはコラーゲンは、いくつかの実施形態において結合剤として用いることができる。
結合剤がタンパク質である場合、タンパク質の変性温度が炭水化物系ゲルの融解温度より低いため有用である。例えば、適当なタンパク質結合剤（例えば、ＲｕＢｉｓＣＯ、アルブミン、ダイズコングリシニン、もしくはグルテン、またはそれらの混合物）の変性温度は、約４０℃から約８０℃の間であり得る。これによって、タンパク質結合剤が変性した後に炭水化物系ゲルが融解することが可能になり、一緒になって食肉レプリカが結合され、より良い質感がもたらされ、食肉レプリカが形成される。
いくつかの実施形態では、結合剤として用いられるタンパク質は、化学的にまたは酵素的に修飾されて、これらの組織構造上の特性および／または風味特性を改善することができる。例えば、タンパク質を、パパインなどの食品用酵素を用いて部分的にタンパク分解して、ゲル化および調理中に、より優れた水放出プロファイルをもたらすことができる。いくつかの実施形態では、結合剤として用いられるタンパク質は、化学的にまたは酵素的に修飾されてタンパク質の変性およびゲル化温度を変更し、例えば、特定のゲル化温度（例えば、ミオシンを模倣するためには５２℃またはアクチンを模倣するためには６８℃）に達してもよい。いくつかの例では、プロテアーゼなどのタンパク質は、精製されたタンパク質画分に存在し得る苦味を減らすために用いることができる。
いくつかの実施形態では、結合剤は、炭水化物系ゲルである。例えば、１４０°Ｆから１９０°Ｆ（例えば、１５０°Ｆから１８０°Ｆ）まで調理後固くなる炭水化物系ゲル。炭水化物系ゲルの非限定的な例には、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなどの改質されたデンプン、グアーガム、イナゴマメガム、キサンタンガム、またはそれらの混合物が含まれる。
さらに、鉄−複合体および／または鉄塩および矯味剤は、食肉レプリカに加えることができる。鉄−複合体および／または鉄塩は、肉の生地、結合組織レプリカ、または非動物系脂肪に風味を付けるために用いられる鉄−複合体および／または鉄塩と同一でも異なっていてもよい。調理後、食肉レプリカ、鉄−複合体および／または鉄塩ならびにフレーバー前駆物質が反応し、フレーバー化合物を生成することができるように、矯味剤は、フレーバー前駆物質または（前述の通り）フレーバー前駆物質の混合物であり得る。矯味剤はまた、酵母抽出物、加水分解されたタンパク質、またはフレーバー化合物などの調味料であり得る。フレーバー化合物には、例えば、フェニル酢酸、（Ｅ，Ｅ）−２，４−ノナジエナール、水溶性樹脂タマネギ、油溶性タマネギ、ｐ−クレゾール、酢酸アセトニル、４−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３（２Ｈ）−フラノン、（Ｅ，Ｅ）−２，４−オクタジエナール、２−メチル−１−ブタンチオール、２−メチル−３−フリルテトラスルフィド、２−メルカプトプロピオン酸エチル、２−メルカプト−３−ブタノール（異性体の混合物）、ｎ−デカン−ｄ２２、油溶性ニンニク、スルフロール、酢酸スルフリル、メルカプト−３−ブタノール、スピロミート（spiromeat）、１−ペンテン−３−オン、２−メチル−３−フランチオール、２−メチル−３−テトラヒドロフランチオール、オレイン酸、ジプロピルトリスルフィド、ジフルフリルジスルフィド、メチルシクロペンテノロン、３−メチルチオヘキサナール、酪酸、ブチロラクトン、５−メチル−２（３Ｈ）−フラノン、フラネオール、１−（１Ｈ−ピロール−２−イル）−エタノン、ヘキサン酸、およびそれらの組合せを含むことができる。追加のフレーバー化合物は、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）、Ｐｅｎｔａ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ Ｃｏ．（Ｆａｉｒｆｉｅｌｄ、ＮＪ）、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｂｉｏｔｅｃｈ（Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ）、Ｆｉｒｍｅｎｉｃｈ（Ｍｅｙｒｉｎ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、Ｇｉｖａｕｄａｎ（Ｖｅｒｎｉｅｒ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｌａｖｏｒｓ ａｎｄ Ｆｒａｇｒａｎｃｅｓ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ）、およびＷｉｌｄ Ｆｌａｖｏｒｓ（Ｅｒｌａｎｇｅｒ、ＫＹ）などの会社から市販品として購入することができる。
いくつかの実施形態では、シーズニング剤、例えば、食用塩（例えば、塩化ナトリウムまたは塩化カリウム）、ニンニク、またはハーブ（例えば、ローズマリー、タイム、バジル、セージ、またはミント）、乳化剤（例えば、レシチン）、追加の繊維（例えば、ゼインまたはイヌリン）、鉱物（例えば、ヨウ素、亜鉛、および／またはカルシウム）、肉の保存期間延長剤（meat shelf life extender）（例えば、一酸化炭素、亜硝酸塩、メタ重亜硫酸ナトリウム、ボンバル（Bombal）、ビタミンＥ、ローズマリー抽出物、緑茶抽出物、カテキンおよび他の酸化防止剤）は、食肉レプリカに取り込むことができる。
本明細書に記載した食肉レプリカはまた、ウコンもしくはビート液汁などの天然着色剤、またはアゾ染料、トリフェニルメタン、キサンテン、キニン、インジゴイド、二酸化チタン、赤色３号、赤色４０号、青色１号、もしくは黄色５号などの人工着色剤、または天然および／もしくは人工着色剤の任意の組合せを含むこともできる。
本明細書に記載したレプリカのいずれかは、所望の使用に成形する、例えば、パテ、ローフ、チャブ（chubs）、ミートボール、またはナゲットに形成する、ひき肉が用いられる食品の任意のタイプにおいて、例えば、タコスの具（taco filling）として、またはキャセロール、ソース、トッピング、スープ、シチュー、ミートボール、またはミートローフにおいて用いることができる。いくつかの実施形態では、食肉レプリカは、例えば、ミートボールまたはナゲットに形成し、次いで、利便性をよくするためにパン粉、コメ、または小麦粉（例えば、カラスムギ粉もしくはココナッツ粉）でコーティングすることができる。
食肉レプリカ
本明細書に記載した食肉レプリカは、食肉レプリカ生地約５重量％から約８８重量％（例えば、約１０重量％から約４０重量％、約２５重量％から約３５重量％、約４０重量％から約８８重量％、または４５重量％から約６０重量％）；炭水化物系ゲル約０重量％から約４０重量％（例えば、約１５重量％から約２５重量％）；非動物脂肪約３重量％から約３５重量％（例えば、約１０重量％から約１５重量％）；矯味剤約０．００００１重量％から約１０重量％；結合剤約０重量％から約１５重量％（例えば、約２重量％から約１５重量％または約２重量％から約１０重量％）；ならびにヘム含有タンパク質および／または鉄塩などの鉄複合体約０．０１重量％から約４重量％（例えば、約０．０５重量％から約１重量％、または約０．２重量％から約２重量％）を含むことができる。矯味剤の量は、矯味剤のタイプに応じて変わり得る。いくつかの実施形態では、矯味剤は、食肉レプリカの約０．５％から約７％であり得る。例えば、フレーバー前駆物質の混合物などの矯味剤は、食肉レプリカの約０．５％から約７％（例えば、約１％から約３％；約３％から約６％；約４％から約７％）であり得る。いくつかの実施形態では、風味付け化合物などの矯味剤は、食肉レプリカの約０．００００１％から約２％であり得る。
本明細書に記載した通り、構成成分の１種もしくは複数、２種以上、３種以上、または４種以上は、矯味剤を含むことができる。例えば、肉の生地は、矯味剤（例えば、鉄複合体または鉄塩を１種もしくは複数のフレーバー前駆物質と合わせ加熱することにより生成された風味付け化合物）を含むことができる、または食用の繊維状構成成分中の酵母抽出物などの調味料を含むことができる。非動物脂肪はまた、矯味剤（例えば、鉄複合体または鉄塩を１種もしくは複数のフレーバー前駆物質と合わせ加熱することにより生成された風味付け化合物）を含むことができる。レプリカはまた、レプリカを調理する際に反応して、レプリカを調理する感覚的な体験を強化することができる、鉄複合体または鉄塩および１種もしくは複数のフレーバー前駆物質を含むことができる。さらに、レプリカは、調味料または風味付け化合物を含むことができる。
いくつかの実施形態では、構成成分を、所望の粒度で生成させ、次いで、５分間から２４時間（例えば、１０分間から２時間、１から４時間、４から８時間、６から１２時間、または１２から２４時間）一緒に圧縮して、構成成分を食肉レプリカに付着させる。次いで、食肉レプリカを挽いて、ひき肉の特質を再現することができる。食肉レプリカを、任意の所望の形態に圧縮して、例えば、ステーキ、テンダーロイン、チョップ、またはヒレ肉の形状および密度を再現することができる。食肉レプリカはまた、ソーセージなどの加工肉にさらに加工することができる。
本発明は、以下の実施例にさらに記載されており、これは、特許請求の範囲に記載されている本発明の範囲を限定しない。
[実施例]
レグヘモグロビンの単離および精製
ダイズ（Glycine max）レグヘモグロビンＣ２（Ｕｎｉｐｒｏｔ ＫＢ Ｐ０２２３６）をＮ−末端Ｈｉｓ６エピトープタグおよびＴＥＶ切断部位でコードする核酸を、ｐＪｅｘｐｒｅｓｓ４０１ベクター（ＤＮＡ２．０）にクローン化し、大腸菌（E.coli）ＢＬ２１に形質転換した。形質転換細胞を、カナマイシン、０．１ｍＭ塩化第二鉄および５−アミノレブリン酸１０μｇ／ｍｌを補充した流加発酵（fed-batch fermentation）により増殖させた。０．３ｍＭイソプロピルβ−Ｄ−１−チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）によって発現を誘導し、細胞を３０℃で２４時間増殖させた。細胞を遠心分離によって濃縮し、２０ｍＭリン酸カリウム（ｐＨ７．８）、１００ｍＭ ＮａＣｌに再懸濁させた。高圧ホモジナイゼーションによって細胞を溶解させ、遠心分離および精密ろ過によって澄ませた。レグヘモグロビンを、亜鉛によって荷電された（zinc-charged）ＩＭＡＣセファロース高速流動樹脂（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いて可溶性ライセートから精製した。結合されたレグヘモグロビンは、５００ｍＭリン酸二水素カリウム、１００ｍＭ ＮａＣｌで樹脂を溶出させた。精製されたレグヘモグロビンを、中和させ、限外ろ過を用いて濃縮した。濃縮されたレグヘモグロビンを２０ｍＭ亜ジチオン酸Ｎａで還元した。亜ジチオン酸Ｎａを、ダイアフィルトレーションにより除去した。レグヘモグロビン濃度を、ソーレーピーク（soret peak）吸収度によって決定し、６０〜７０ｍｇ／ｍｌに調整した。最終レグヘモグロビン生成物を、液体窒素で凍結し、凍結乾燥し、−２０℃で貯蔵した。レグヘモグロビンの純度（部分存在量）を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分析し、約８０％と決定した。ＵＶ−ＶＩＳスペクトル（２５０〜７００ｎｍ）の分析によって、ヘムを負荷したレグヘモグロビンと整合したスペクトルの痕跡が明らかになった。
（表１に列挙される）ダイズ（Glycine max）レグヘモグロビンＣ２および８つのピキア・パストリス（Pichia pastoris）ヘム生合成遺伝子を、ｐＡＯＸ１メタノール誘導プロモーターの制御下で、ピキア・パストリス（Pichia pastoris）発現ベクターｐＪＡ（ＢｉｏＧｒａｍｍａｔｉｃｓ Ｉｎｃ．；Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）にクローン化した。ピキア・パストリス（Pichia pastoris）株Ｂｇ１１（ＢｉｏＧｒａｍｍａｔｉｃｓ、Ｉｎｃ．）を、線形化されたプラスミドで形質転換し、安定した成分を、抗生物質抵抗性によって選択した。
形質転換されたピキア（Pichia）細胞を、流加発酵によって増殖させ、レグヘモグロビン発現を、メタノールで３０℃で１２０時間誘導した。細胞を遠心分離によって濃縮し、水に再懸濁させ、高圧ホモジナイゼーションにより溶解させた。固体を、Ｔｒａｍｆｌｏｃ ８６３Ａによる処理、遠心分離、および０．２μｍ精密ろ過（Ｋｏｃｈ Ｍｅｍｂｒａｎｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ）により除去した。可溶性ライセートを濃縮し、３ｋＤａ限外ろ過（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を用いて水で透析ろ過した。配合されたライセートを、ＨＰＡ２５Ｌ陰イオン交換樹脂（Ｍｉｔｓｕｂｉｓｈｉ）を用いて、最終純度約４０％まで部分的に精製した。部分的に精製されたレグヘモグロビン溶液を、濃縮および３ｋＤａ限外ろ過（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を用いた水ダイアフィルトレーションによって再配合し、Ｑ高速流動陰イオン交換樹脂（ＧＥ Ｌｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いてさらに精製した。最終レグヘモグロビン生成物を、３ｋＤ限外ろ過を用いて濃縮し、−２０℃で凍結した。最終生成物は、純度約８０％であり、８０ｇ／Ｌのレグヘモグロビンを含有した。
ＲｕＢｉｓＣＯの単離
新鮮なホウレンソウの葉１ｋｇを、０．１Ｍ ＮａＣｌを含有するリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．４）で１：１の比で Ｖｉｔａ−ｐｒｅｐ ３ ｂｌｅｎｄｅｒ（Ｖｉｔａｍｉｘ Ｃｏｒｐ、Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ、ＯＨ）に浸軟した。抽出を、最高設定（３ＨＰモーター）で１０分間行った。温度を３０℃未満で維持した。１０Ｍ ＮａＯＨ溶液を用いて挽いた後、ｐＨを７．４に調整した。ホモジネートを３５００ｇで５分間遠心分離し、スケールで（供給量約１ｇｐｍでＧＥＡ Ｗｅｓｔｆａｌｉａ ｄｅｃａｎｔｅｒ ＧＣＥ−３４５を用いて）条件をシミュレートした。ペレットを捨てた。次いで、遠心分離液（liquid centrate）（約１．６Ｌ）を、中空糸形式（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｉｎｃ． Ｒａｎｃｈｏ Ｄｏｍｉｎｇｕｅｚ、ＣＡのＫｒｏｓＦｌｏ Ｋ０２Ｅ２０Ｕ−０５Ｎ）の０．２μｍ改変されたポリエーテルスルホン（ｍＰＥＳ）膜を用いてマイクロフィルターにかけた。残余分（約０．２５Ｌ）を、抽出緩衝液約１．５Ｌを用いて透析ろ過した。このろ過ステップからの透過物（約３Ｌ）を、１０ｋＤａ ｍＰＥＳ膜（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｉｎｃ． Ｒａｎｃｈｏ Ｄｏｍｉｎｇｕｅｚ、ＣＡのＭｉｎｉＫｒｏｓ Ｎ０２Ｅ０１０−０５Ｎ）を用いて約０．１Ｌまで濃縮した。タンパク質濃縮物は、ｐＨ約７．４であった。６Ｍ塩酸などの濃酸溶液を、濃縮物にゆっくりと加えて、ｐＨを５まで下げた。混合物を、マグネチックスタープレートまたはホモジナイザーを用いて３０分間激しく撹拌し、次いで、３５００ｇで５分間遠心分離して、オフホワイトのペレットおよび褐色の遠心分離液を得た。遠心分離液を捨て、タンパク質ペレットを脱イオン水で洗浄した。ペレットを０．０５〜０．１ＬのＤＩ水に再懸濁させた。溶液を、一様のスラリーに激しく混合し、１０Ｍ水酸化ナトリウムなどの濃縮された基礎液を用いて、ｐＨを１１までゆっくりと上げた。得られた溶液は、清澄な黄色であった。次いで、ｐＨを９まで下げて、清澄な混合物を維持した。生成物を、噴霧乾燥機を用いて乾燥させた、または凍結乾燥器を用いて凍結し乾燥させた。この材料を、ＡＡＯＣ法（ＡＯＡＣ、２０００）によりＬｅｃｏ ＦＰ−５２８ Ｎｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｍｂｕｓｔｉｏｎ Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｌｅｃｏ、Ｓｔ．Ｊｏｓｅｐｈ、ＭＩ）を用いて分析した。タンパク質を、％窒素×６．２５として算出し、タンパク質８６％と算出した。得られた生成物は、わずかに脱色し、低温変性特性を保持した。
ＲｕＢｉｓＣＯの単離および脱色
新鮮なホウレンソウの葉１ｋｇを、８％（ｗ／ｖ）ＰＥＧ（Ｃａｒｂｏｗａｘ Ｓｅｎｔｒｙ ＰＥＧ ８０００；Ｄｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｍｉｄｌａｎｄ、ＭＩ）および０．１％（ｗ／ｖ）陽イオン性凝集剤（８６３Ａ；Ｔｒａｍｆｌｏｃ、Ｉｎｃ．、Ｈｏｕｓｔｏｎ、ＴＸ）を含有するリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．４）で１：１（ｗ／ｗ）の比でＶｉｔａ−ｐｒｅｐ ３ ｂｅｎｄｅｒ（Ｖｉｔａｍｉｘ Ｃｏｒｐ．、Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ、ＯＨ）で浸軟した。抽出を、すべての時間で３０℃未満の温度を維持しながら最高設定（３ＨＰモーター）で３分間行った。挽いた後１０Ｍ ＮａＯＨ溶液を用いてｐＨを７．４まで調整した。ホモジネートを、ベンチトップ遠心分離機（Ａｌｌｅｇｒａ Ｘ１５Ｒ、ＳＸ４７５０ローター；Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ、Ｉｎｃ．、Ｐａｓａｄｅｎａ、ＣＡ）を用いて、３５００ｇで５分間遠心分離した。ペレットを捨て、上澄み（約１．６Ｌ）を別々に収集した。硫酸マグネシウム七水和物の塩（Ｋ＋Ｓ ＫＡＬＩ ＧｍｂＨ、Ｋａｓｓｅｌ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を上澄みに加えて、１Ｍ濃度にした。溶液を完全に混合し、ベンチトップ遠心分離機（Ａｌｌｅｇｒａ Ｘ１５Ｒ、ＳＸ４７５０ローター；Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ、Ｉｎｃ．）を用いて、５４５１ｇで３分間遠心分離した。３つの層が遠心分離ボトル中に形成され、残りの緑色の固体を、ペレット（約０．１Ｌ）として分離した。ＰＥＧ層（約０．３Ｌ）を分離し、最上層を形成し、着色化合物および臭気化合物を選択的に分画した。次いで、中間層に残存する清澄な生成物を、中空糸形式（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｉｎｃ．）で０．２μｍ改変されたポリエーテルスルホン（ｍＰＥＳ）膜を用いてマイクロフィルターにかけた。残余分（約０．２５Ｌ）を、１Ｍ硫酸マグネシウム溶液約０．７５Ｌを用いて透析ろ過した。このろ過ステップからの透過物（約３Ｌ）を、７０ｋＤａ ｍＰＥＳ膜（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｉｎｃ．）を用いて約０．１Ｌに濃縮した。これを、５つのステップで約０．５ＬのＤＩ水でさらに透析ろ過した。タンパク質濃縮物は、ｐＨ約７であり、導電率は、５ｍＳ／ｃｍ未満であった。得られたタンパク質濃縮物は、清澄な淡黄色であった。生成物を、噴霧乾燥機を用いて乾燥させた、または凍結乾燥器を用いて凍結し乾燥させた。この材料を、標準の６６０ｎｍ Ｐｉｅｒｃｅタンパク質アッセイおよびＳＤＳゲルデンシトメトリーを用いて分析した。乾燥固形物を、ＩＲ湿度計を用いて分析した。最終生成物中の凝集剤およびＰＥＧ濃度を、滴定法を用いて分析した。タンパク質濃度は、約９１％（ｗ／ｗ）であり、全固形分は、約９５％（ｗ／ｗ）であった。ＰＥＧおよび凝集剤濃度を、０．２％（ｗ／ｗ）未満で分析した。生成物は、純度９０％を超え、プロセスを通じて９０％を超える回収であった。得られた生成物は、脱色し、低温変性特性を保持した。
可溶性ダイズコングリシニンの単離
ダイズタンパク質の可溶性コングリシニン画分（７Ｓ画分）を、以下の方法を用いて得た。脱脂ダイズ粉（ＣＨＳ ＨＯＮＥＹＳＯＹ（登録商標）ＰＤＩ ９０）１ｋｇを、オーバーヘッドミキサーを取り付けた容器で１０Ｌの脱イオン水で混合した。ダイズ粉の凝集塊が分散した後、スラリーのｐＨを、２Ｎ ＮａＯＨを用いて８まで調整した。混合物を、４℃で１時間撹拌して、すべての可溶性タンパク質を抽出した。次いで、混合物のｐＨを２Ｎ Ｈ２ＳＯ４を用いて５．８まで調整し、４℃でさらに１時間混合した。次いで、混合物を、ＪＬＡ ８．１ローター（ＪＨＣ遠心分離機、Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｉｎｃ．）において１００００ｇで１０分間遠心分離して、不溶性炭水化物およびタンパク質（グリシニン）を除去した。可溶性の上澄みを、２Ｎ Ｈ２ＳＯ４を用いてｐＨ４．５までさらに酸性にし、４℃で１時間混合した。次いで、酸性化混合物を１００００ｇで１０分間遠心分離して、沈殿したタンパク質を収集し、リポキシゲナーゼ、ダイズレシチンおよびトリプシン阻害物質を含有する上澄みを捨てた。４体積の水（およそ２Ｌ）にペレットを再懸濁することにより、ｐＨ４．５の沈殿したタンパク質画分中のコングリシニンを溶解化し、２Ｎ ＮａＯＨを用いてｐＨ８まで調整した。混合物を、４℃で１時間撹拌した。混合物のｐＨを２Ｎ Ｈ２ＳＯ４を用いて再度５．８まで下げて、汚染物タンパク質の同時精製を最小限にした。混合物を１５０００ｇで２０分間遠心分離して、上澄み中の可溶性コングリシニンを収集した。コングリシニン画分を、限外ろ過（７０ｋＤａ ｍＰＥＳ限外ろ過膜、２６００ｓｑ． ｃｍ、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｉｎｃ．）を用いて濃縮した。得られたタンパク質溶液（１０％タンパク質濃度でおよそ０．５Ｌ）は、６５℃で５５〜６５％純コングリシニンおよびゲルを含む。次いで、タンパク質を、凍結乾燥し、食肉レプリカの製造に用いられるまで室温で貯蔵した。
肉の生地を予め風味付けするための生地ブロスの調製
生地ブロスを、１×前駆物質のミックス１（表２を参照のこと）、０．５％レグヘモグロビン（ＬｅｇＨ、実施例１に記載されている通り単離され精製された）、および１８％純化、漂白、脱臭された（ＲＢＤ：Ｒｅｆｉｎｅｄ、Ｂｌｅａｃｈｅｄ、ａｎｄ Ｄｅｏｄｏｒｉｚｅｄ）ヤシ油（Ｓｈａｙ ａｎｄ ｃｏｍｐａｎｙ、Ｍｉｌｗａｕｋｉｅ、ＯＲ）を混合し、溶液が沸騰するまで加熱しながら撹拌し、次いで、ぐつぐつと（at a low boil）１０分間煮立たせることにより創出した。この溶液を、「生地ブロス」と称し、実施例１０の肉の生地を創出するために用いた。ヤシ油をＬｅｇＨおよび前駆物質の混合でインキュベートすることにより、カラメルになった、脂っこい、牛肉のような、ナッツのような、硫黄、金属に似た、バターのような、甘い、香ばしい、およびうま味を含めて、ブロス中の香ばしいまたは肉のような風味が生成される。
風味を注入された脂肪レプリカの調製
風味を付けた脂肪レプリカを、０．５％の（実施例１からの）ＬｅｇＨ、１×前駆物質のミックス１（表１）、および３０％ＲＢＤヤシ油（Ｓｈａｙ ａｎｄ ｃｏｍｐａｎｙ、Ｍｉｌｗａｕｋｉｅ、ＯＲ）の溶液を混合し、沸騰するまで加熱しながら撹拌し、次いで、１０分間ぐつぐつと煮立たせることにより創出した。溶液を冷却して油を固化させた。油が固化した後、これを水層から分離し、実施例１１に記載のハンバーガーを調製するのに用いた。ヤシ油をＬｅｇＨおよび前駆物質のミックスでインキュベートすることにより、香ばしい、肉のような、牛肉の脂肪、わずかに甘いおよび硫黄を含めて、油中に風味の香気が注入される。
「軟らかい結合」組織レプリカの調製
軟らかい結合組織レプリカを、ダイズタンパク質単離物（ＳＵＰＲＯ（登録商標）ＥＸ３８（Ｓｏｌａｅ））、Ｖｉｔａｌコムギグルテン（１３１１００、Ｇｕｉｓｔｏ’ｓ Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ Ｆｏｏｄｓ、Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、ＣＡ）、および水を用いて調製した。Ｎａｎｏ１６押出機（（Ｌｅｉｓｔｒｉｔｚ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｃｏｒｐ．、Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ、ＮＪ）を、特注の冷却ダイ（円形、ＩＤ ６．５ｍｍ、長さ３００ｍｍ）、冷却水サーキュレーター、および高圧水ポンプ（Ｏｐｔｏｓ、Ｅｌｄｅｘ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｉｎｃ．）と共に用いた。
ダイズタンパク質単離物５０ｇおよびコムギグルテン粉末５０ｇを、５分間手動混合および混転で完全に混合し、次いで、押出機の原料投入機（batch feeder）の装填管（loading tube）に添加した。乾燥混合物を２．４ｇ／分の速度で押出機に送った。３．６ｍｌ／分の速度で押出機のバレルの第２のゾーンにポンプにより水を送った。押出機のスクリュー速度を、１２０ＲＰＭで維持した。温度勾配を、押出機バレルに沿って次の通り設定した。供給ゾーン−２５℃、ゾーン１−３０℃、ゾーン２−６０℃、ゾーン３−１１０℃、ゾーン４−１１０℃。ダイプレートは、能動的に加熱も冷却もされなかった。冷却ダイを、２４℃でダイを維持する冷却水サーキュレーターにより冷却した。
本方法によって生成された軟らかい結合レプリカは、色がオフホワイトであり、繊維性の高い／糸状であり、味および風味がはっきりしなかった。この材料の引張強さは低く、柔らかい牛肉のローストの引張強さに匹敵した。
「硬い繊維性の結合」組織レプリカの調製
硬い繊維性の結合組織レプリカを調製するために、ダイズタンパク質単離物５０ｇおよびコムギグルテン粉末５０ｇを、５分間手動混合および混転で完全に混合し、押出機の原料投入機の装填管に添加した。乾燥混合物を、３．６ｇ／分の速度で押出機に送った。５．４ｍｌ／分の速度で押出機のバレルの第２のゾーンにポンプにより水を送った。押出機のスクリュー速度を１２０ＲＰＭで維持した。温度勾配を押出機バレルに沿って次の通り設定した。供給ゾーン−２５℃、ゾーン１−３７℃、ゾーン２−６１℃、ゾーン３−１３５℃、ゾーン４−１３５℃。ダイプレートを、能動的に加熱も冷却もしなかった。冷却ダイを、２６℃でダイを維持する冷却水サーキュレーターにより冷却した。
本方法によって生成された硬い繊維性の結合レプリカは、薄褐色であり、はっきりしない味および風味を有する繊維状／層状材料であった。この材料の引張強さは、高く、調理された牛肉の腱の引張強さに匹敵した。
予め風味付けされた「軟らかい結合」組織の調製
風味を付けた軟らかい結合組織レプリカを調製するために、ダイズタンパク質単離物５０ｇ、コムギグルテン粉末５０ｇ、酵母抽出物番号９（Ｆｌａｖｏｒ ｈｏｕｓｅ Ｉｎｃ．、Ｘ１１０２０）１ｇ、および酵母抽出物番号２１（Ｂｉｏｓｐｒｉｎｇｅｒ １４０５／４０ ＭＧｌ）を、５分間手動混合および混転で完全に混合し、押出機の原料投入機の装填管に添加し、実施例７に記載されている通り押出成形した。予め風味付けされた軟らかい結合組織は、香ばしい味がし、実施例７で生成された軟らかい結合組織に比べて、風味の複雑性が増し、腐った香気が減った。
「肉の生地」の調製
牛のひき肉−レプリカのための「肉の生地」を、以下の成分を用いて調製した。
ａ．Ｖｉｔａｌコムギグルテン（番号１３１１００、Ｇｕｉｓｔｏ’ｓ Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ Ｆｏｏｄｓ、Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、ＣＡ）
ｂ．軟らかい結合組織レプリカ（実施例７を参照のこと、実施例９の予め風味付けされた軟らかい結合組織もまた用いられ得る）
ｃ．生地ブロス（実施例５を参照のこと）
肉の生地の一部１００ｇを以下の通り調製した。第一に、軟らかい結合組織レプリカ２５ｇを、１本の長さおよそ１インチに、縦方向に手で細かくちぎった（hand shredded）。細かくちぎられた軟らかい結合レプリカを、ミキシングボウルにおいて乾燥コムギグルテン２５ｇと合わせ、手で静かに軽く混ぜて、均等に混合した。別々の容器において、生地ブロス５０ｍＬを沸騰させ、１０分間弱火で煮立てた。熱い生地ブロスを、乾燥グルテン−結合組織レプリカミックスに加え、スタンドミキサー（例えば、生地を混合する付属品が付いたＫＩＴＣＨＥＮＡＩＤ（登録商標）Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ ６００ Ｓｅｒｉｅｓ ６ Ｑｕａｒｔ Ｂｏｗｌ−Ｌｉｆｔ Ｓｔａｎｄ Ｍｉｘｅｒ ｍｏｄｅｌ ＫＰ２６Ｍ１ＸＥＲ、速度２に設定）で３０秒間練って、肉の生地を形成した。
練った後、肉の生地を平板に形成し、蒸すために別の容器に移した。肉の生地を、（Ａｒｏｍａ Ｒｉｃｅ ｃｏｏｋｅｒ Ｍｏｄｅｌ Ｎｏ．ＡＲＣ−１０３０ＳＢ中で）で内部温度が、およそ２００°Ｆになるまで蒸し、さらに２０分間その温度で保持した。蒸した後、生地を、氷上の容器に移して、室温まで冷却した。蒸した肉の生地はまた、この時点で４℃で最大１週間まで貯蔵することができる。牛肉パテのレプリカを形成する前に、蒸した肉の生地を、手でおよそ１インチ角に細かく裂いた。混合物は、牛肉パテのレプリカ（実施例１１および１２に記載されている）の形成において、すぐに用いることができる状態である。
ハンバーガーの組み立ておよび調理
表３の成分を含有するレプリカハンバーガーを調製した。１％寒天調製物を、ガラスビーカー中で水９９ｍｌに寒天粉末（品目６４１０、Ｎｏｗ Ｆｏｏｄｓ Ｂｌｏｏｍｉｎｇｄａｌｅ、ＩＬ）１ｇを加えることにより作製した。混合物を撹拌しながら１００℃まで加熱することにより寒天を完全に可溶化し、次いで、堅固なゲルが固まるまで氷浴で２０〜３０分間冷却した。次いで、ゲルをコーヒーグラインダー（Ｃｕｉｓｉｎａｒｔ（登録商標）Ｍｏｄｅｌ番号ＣＵＩ ＤＣＧ−２０Ｎ）に移し、２０秒間挽いて、混合するために細かく砕いた。
肉の生地（実施例１０）および風味を付けたヤシ油（実施例６）をボウル中で手で混合した。典型的なバッチサイズは、１００ｇから２０００ｇであった。次いで、混合物を、食品グラインダー付属品を取り付けたスタンドミキサー（ＫＩＴＣＨＥＮＡＩＤ（登録商標）Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ ６００ Ｓｅｒｉｅｓ ６ Ｑｕａｒｔ Ｂｏｗｌ−Ｌｉｆｔ Ｓｔａｎｄ Ｍｉｘｅｒ ｍｏｄｅｌ ＫＰ２６Ｍ１ＸＥＲおよびＫＩＴＣＨＥＮＡＩＤ（登録商標）Ｆｏｏｄ Ｇｒｉｎｄｅｒ ｍｏｄｅｌ ＦＧＡ、Ｓｔ．Ｊｏｓｅｐｈ、ＭＩ）を用いて、速度設定１で挽いた。混合物を、固定孔プレートの前に据え付けられた回転ナイフを通り過ぎてスクリューコンベヤーにより送った。挽いた組織をボウルに収集した。
次いで、以下の成分を、表３に示される比：１％寒天調製物、ＲｕＢｉｓＣＯ（およそ５０重量％ ＲｕＢｉｓＣＯ）、１６×前駆物質のミックス２、およびＬｅｇＨ（３５０〜６５０ｍｇ／ｇ）で加えた。成分を、ここに列挙された順序で加え、それぞれ加えた後、材料を静かに混合した。次いで、挽いた組織の部分３０ｇまたは９０ｇを、手で円形のパテ形に形成した。パテ３０ｇの典型的な寸法は、５０ｍｍ×１２ｍｍであった。パテ９０ｇの典型的な寸法は、７０ｍｍ×１８ｍｍであった。組み立て、挽くおよび形成する間、すべての材料を、低温（４〜１５℃）に保った。パテを調理するまで冷蔵した。パテを、予熱した（３２５〜３４５°Ｆ）焦げ付かないフライパン（non-stick skillet）で調理し、２分ごとにひっくり返しながら、内部温度１６０°Ｆまで加熱した。典型的な調理時間は、１２から１５分に及んだ。調理されたパテは、訓練を受けた官能試験調査員によって判断される通り、外観、質感、および風味が、牛のひき肉に類似した。パテ形式で調理するほかに、未形成の材料はまた、タコスの具、キャセロール、ソース、トッピング、スープ、シチュー、またはローフなど様々な料理に用いることもできる。
フレーバー分子のハンバーガーへの添加
表４の成分を含有するレプリカハンバーガーを調製した。
味が付いていない肉の生地（コムギグルテン、味が付いていない軟らかい結合組織、および水）およびヤシ油を、ボウル中で手で混合し、実施例１１に記載されている通り挽いた。次いで、以下の成分を、表４の比：１％寒天調製物、ＲｕＢｉｓＣＯ（およそ５０重量％）、１６×前駆物質のミックス２、およびＬｅｇＨ（３５０〜６５０ｍｇ／ｇ）で加えた。フレーバー化合物およびニンニク油を１×１０−２まで希釈し、次いで、表４に列挙された濃度で加えた。成分を、ここに列挙された順序で加え、それぞれ加えた後、材料を静かに混合した。次いで、挽いた組織の部分１００ｇを手で円形のパテ形に形成した。組み立て、挽くおよび形成する間、すべての材料を、低温（４〜１５℃）に保った。パテを、予熱した（３２５〜３４５°Ｆ）焦げ付かないフライパンで調理し、２分ごとにひっくり返しながら、内部温度１６０°Ｆまで加熱した。パテは、通常、１２から１５分で調理した。調理されたパテは、外観、質感、および風味が牛のひき肉に類似にした。これらのパテは、予め風味付けされた生地および脂肪で創出されたハンバーガーと同じくらいの風味の深みがなかったが、これらのハンバーガーは、訓練を受けた官能試験調査員によって判定された通り、牛肉に伴う追加の風味の香気を有した。
結合組織レプリカについての溶液紡糸ゼイン繊維の調製
溶液紡糸ゼイン繊維を、ゼイン粉末（Ｐｒａｉｒｉｅ Ｇｏｌｄ Ｉｎｃ．、Ｂｌｏｏｍｉｎｇｔｏｎ、ＩＬ）、エタノール（Ｌｕｘｃｏによる１９０ ｐｒｏｏｆ Ｅｖｅｒｃｌｅａｒ）、水酸化ナトリウム（Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、グリセロール、（Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、および水を用いて生成した。ゼイン粉末５０ｇ、グリセロール１０ｇ、エタノール３６ｇ、および水４ｇを、ホモジナイザーを用いて５分間ガラス製広口びん中で混合した。溶液のｐＨを、水酸化ナトリウムのエタノール１Ｍ溶液で７．０まで調整した。溶液を、３０ゲージ針を有する１ｍｌ注射器に装填した。注射器をシリンジポンプ（Ｎｅｗ Ｅｒａ Ｓｙｒｉｎｇｅ Ｐｕｍｐｓ、Ｉｎｃ．）に取り付け、Ｄｅｌｒｉｎスプールを有する特注のファイバースプーラーに対して、針を下に向け、これを垂直に据え付けた。スプーリングロッドを３ＲＰＭで回転するように設定した。
シリンジポンプを、０．１２ｍｌ／ｈに設定して作動させた。溶液の液滴が針の先端で形成された場合、これをへらですくい取り、繊維に広げた。繊維の端を、付着するまでスプーリングロッドに接触させた。次いで、繊維アタッチメントの位置でスプーリングロッドに面している加熱ファンにスイッチを入れ、繊維乾燥を容易にした。繊維を、注射器が空になるまでスプールに巻き、その後、注射器に再装填し、上記の手順を繰り返した。スプールに巻いた後、繊維を１１０℃のオーブンで１時間早期硬化させ、次いで、１７５℃で５分間焼くことにより完了した。
本プロセスによって得られたゼイン繊維は、光学顕微鏡により測定された通り、６０〜８０マイクロメータ厚のやや清澄な、薄黄色に着色された繊維であった。これらは、空気および水に非常に柔軟性があり、数時間の水浸後でも、動物の結合組織（１０〜１５ＭＰａ）に類似の高い引張強さを維持した。
予め風味付けしている肉の生地についてのグルコン酸鉄による生地ブロスの調製
生地ブロスを、１×前駆物質のミックス１（表２を参照のこと）、１ｍＭグルコン酸鉄、および１８％純化、漂白、脱臭された（ＲＢＤ）ヤシ油（Ｓｈａｙ ａｎｄ ｃｏｍｐａｎｙ）を混合し、溶液を沸騰するまで加熱しながら撹拌し、次いで、ぐつぐつと３０分間煮立たせることにより創出した。この溶液を、「グルコン酸鉄生地ブロス」と称し、実施例１０の肉の生地において用いられる「生地ブロス」の代わりに用いることができる。ヤシ油をグルコン酸鉄および前駆物質のミックスでインキュベートすることにより、ブロス中の豚肉、牛肉のような、硫黄、金属に似た、甘い、香ばしい、およびうま味を含めて、ブロス中の香ばしいおよびまたは肉のような風味が生成される。
風味を注入された脂肪レプリカのグルコン酸鉄による調製
グルコン酸鉄を含有する風味を付けた脂肪レプリカを、０．２５％のＬｅｇＨの溶液、１ｍＭグルコン酸鉄、１×前駆物質のミックス１（表１）、および３０％ＲＢＤヤシ油（Ｓｈａｙ ａｎｄ ｃｏｍｐａｎｙ）を混合し、沸騰するまで加熱しながら混合物を撹拌し、次いで、ぐつぐつと１０分間煮立たせることにより創出した。溶液を４℃まで冷却して、油を固化させた。油が固化した後、これを水層から分離し、実施例１３に記載されているハンバーガーを調製する際に風味を付けた脂肪レプリカの代わりに用いた。ヤシ油をＬｅｇＨ、グルコン酸鉄、および前駆物質のミックスでインキュベートすることにより、香ばしい、肉のような、牛肉の脂肪の香気、甘い、金属に似た、および硫黄の香気を含めて、油において風味の香気を注入する。
酒石酸水素カリウムを含有する肉の生地の調製
肉の生地を、表５に示される成分を用いて以下の通り調製した。
第１に、水、ヤシ油、１Ｍ乳酸溶液、および加水分解された植物性タンパク質を、混合し、６０℃まで加熱してブロスを作製した。融解させ、ヤシ油を分布させるのを助けるために加熱を行った。グルテン粉（ｖｉｔａｌコムギグルテン番号１３１１００、Ｇｕｉｓｔｏ’ｓ Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ Ｆｏｏｄｓ、Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、ＣＡ）および酒石酸水素カリウムを、別々の容器において混合した。次いで、温かいブロスを、乾燥混合物に加えて、スタンドミキサー（例えば、生地を混合する付属品が付いた、ＫＩＴＣＨＥＮＡＩＤ（登録商標）Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ ６００ Ｓｅｒｉｅｓ ６ Ｑｕａｒｔ Ｂｏｗｌ−Ｌｉｆｔ Ｓｔａｎｄ Ｍｉｘｅｒ ｍｏｄｅｌ ＫＰ２６Ｍ１ＸＥＲ、速度２に設定）で３０秒間練って、肉の生地を形成した。練った後、肉の生地を平板に形成し、蒸すために別の容器に移した。内部温度がおよそ８８℃になるまで、肉の生地を、（例えば、Ａｒｏｍａ Ｒｉｃｅ ｃｏｏｋｅｒ Ｍｏｄｅｌ Ｎｏ．ＡＲＣ−１０３０ＳＢ）で蒸した。蒸した後、生地を氷上の容器に移して４℃まで冷却した。酒石酸水素カリウムは、有利な方法で生地の質感を改質した。実施例１０の肉の生地と比較した場合、本実施例の肉の生地は、より粘着性であり、挽いた後、牛のひき肉により類似した形状因子であり、成形しやすくパテを形成しやすかったため、未加工の取扱い特性を改善した。
ルテインを含有する肉の生地の調製
肉の生地を表６に示される成分を用いて以下の通り調製した。
第１に、水、ヤシ油（Ｓｈａｙ ａｎｄ ｃｏｍｐａｎｙ、Ｍｉｌｗａｕｋｉｅ、ＯＲ）、およびルテイン（ＦｌｏｒａＧＬＯ Ｌｕｔｅｉｎ ２０％ＳＡＦ、ＤＳＭ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｏｖｅｒｌａｎｄ Ｐａｒｋ、ＫＳ）を混合し、２５℃を超えるまで加熱してブロスを作製した。融解させ、ヤシ油およびルテインを分布させるのを助けるために加熱を行った。次いで、温かいブロスを、グルテン粉（ｖｉｔａｌコムギグルテン ＰＲＯＬＩＧＨＴ（登録商標）ＬＦ、ＡＤＭ、Ｃｈｉｃａｇｏ、ＩＬ）に加え、速度「２」で設定したスタンドミキサー（例えば、生地を混合する付属品が付いたＫＩＴＣＨＥＮＡＩＤ（登録商標）Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ ６００ Ｓｅｒｉｅｓ ６ Ｑｕａｒｔ Ｂｏｗｌ−Ｌｉｆｔ Ｓｔａｎｄ Ｍｉｘｅｒ ｍｏｄｅｌ ＫＰ２６Ｍ１ＸＥＲ）で３０秒間練って、肉の生地を形成させた。練った後、肉の生地を平板に形成し、実施例１６と同様に、蒸すために別の容器に移し、次いで、氷上の容器に移して４℃まで冷却した。肉の生地の対照バッチを、ルテインを加えなかったことを除いて前述した通り作製した。ルテインを含有する肉の生地は、穀物のような風味が少なく、対照の肉の生地よりも牛肉に近いと記載された。
カロテノイドの添加による穀物の風味および異臭の低減
肉の生地を表７に示される成分を用いて以下の通り調製した。
第１に、融解したヤシ油（５０℃）をカロテノイドで混合し、次いで、これを水に混合した。ブロスを、激しく撹拌し、次いで、速やかにコムギグルテン粉をブロスに加え、スプーンでよく混合した。形成した生肉の生地を、実施例１６に記載されている通り、蒸すために金属製ラミキンまたはガラスビーカーに移し、次いで、氷上の容器に移して４℃まで冷却した。
カロテノイドを加えて、有利な方法で生地の風味が改質され；カロテノイドを含まない肉の生地（実施例１０）と比較した場合、５名の訓練を受けたフレーバーサイエンティストは、カロテノイドを含む肉の生地が、４品の試食では穀物の風味が少なく、酸化臭が弱く、全体的な異臭が少ないと記載した。表８は、穀物の風味に関して５名の訓練を受けたフレーバーサイエンティストによって評価された、異なるカロテノイドを含む試料のパネルにより得られたまとめられた感覚についての結果を示す。訓練を受けたフレーバーサイエンティストは、穀物の風味に対して試料を１から５で評価し、１は穀物の風味が最も低く、５は最も高かった。ルテインを含む肉の生地中の異臭の減少は、ＳＰＭＥガスクロマトグラフィー−質量分析（ＧＣ−ＭＳ）データによって裏付けられた。さらに、カロテノイド（リコペン、β−カロテン、ゼアキサンチン、カンタキサンチン、およびルテイン）を肉の生地に加えると、試料が、より脂っこいおよびより甘いということが記載された。
肉の生地にルテインを加えることによって、大部分のフレーバー化合物は、ルテインの濃度に応じて低下した。表９を参照のこと；ルテイン濃度は、なし、０．０００５％、および０．００５％であった。カロテノイドにより低下した主な化合物には、（Ｚ）−２−ノネナール、（Ｅ，Ｅ）−２，４−ノナジエナール、および１−ペンテン−３−オールを含めた、アルコールおよびアルデヒドのような、酸化したフレーバー化合物が含まれ；さらに、メタンチオール、２−アセチルチアゾール、および硫化ジメチルを含めた、硫黄化合物も低下し；これらの化合物の多くはまた、ガスクロマトグラフィー−嗅覚検査（ＧＣＯ）による訓練を受けたフレーバーサイエンティストによって、穀物のような香気および酸化臭と記載された。
酸化防止剤の添加による穀物の風味および異臭の低減
肉の生地を、表１０に示される成分を用いて以下の通り調製した。
ＥＧＣＧ（没食子酸エピガロカテキン）を、水に可溶化し、次いで、融解したヤシ油（５０℃）を、水に混合した。ブロスを激しく撹拌し、次いで、速やかにコムギグルテン粉をブロスに加え、スプーンでよく混合した。形成した生肉の生地を、実施例１６に記載されている通り、蒸すため金属製ラミキンまたはガラスビーカーに移し、次いで、氷上の容器に移して４℃まで冷却した。
訓練を受けたフレーバーサイエンティストにより記載された、ＥＧＣＧを添加した肉の生地中の異臭の減少は、ＳＰＭＥ ＧＣ−ＭＳデータによって裏付けられる。ＧＣＭＳデータでは、ＧＣＯによって穀物のような香気および酸化臭であると記載された、化合物２−ペンチル−フラン、６−メチル−５−ヘプテン−２−オン、１−ペンテン−３−オール、２−ペンテン−１−オール、メチル−ピラジン、ブタナール、５−エチル−２（５Ｈ）−フラノン、５−エチルジヒドロ−２（３Ｈ）−フラノン、２−ノネナール、フェニルアセトアルデヒド、および３，５−オクタジエン−２−オンを含めて、もはや検出不可能であるまたは少なくとも２倍減少した複数のフレーバー化合物が示された。
コムギグルテンを洗浄することによる穀物の風味を低減した肉の生地の調製
肉の生地を、表１１に示される成分を用いて以下の通り調製した。
コムギグルテン粉（ＡＤＭ ＰＲＯＬＩＴＥ（登録商標）Ｌｏｗ Ｆｌａｖｏｒ Ｖｉｔａｌ Ｗｈｅａｔ Ｇｌｕｔｅｎ）を、１０×洗浄溶液（５０ｍＭ ＮａＣｌ）を含有する溶液中へゆっくりと撹拌し、次いで、十分に混合して凝集塊を形成するのを防いだ。溶液を５分間氷上に置き、その間、コムギグルテンは底に沈んだ。第２の洗浄ステップ後、第１の洗浄溶液を除去し、１０×新鮮な洗浄溶液中に撹拌した。第２の溶液を捨て、続いて、水道水で最後の洗浄を行った。水洗浄溶液を捨て、次いで、洗浄したコムギグルテンを測定して、水の正確な量が取り込まれたことを判定した。コムギグルテン生地の重さが、量り分けた最初のコムギグルテン粉の量および理論水量に等しくなるように、水を加えたまたは圧搾した。融解したヤシ油を加え、生地を３０秒間手練りして、油を取り込んだ。形成した生肉の生地を、実施例１６と同様に蒸すために金属製ラミキンまたはガラスビーカーに移し、次いで、氷上の容器に移して４℃まで冷却した。
洗浄ステップによって、有利な方法で生地の風味が改質され；洗浄していない肉の生地と比較した場合、５名の訓練を受けたフレーバーサイエンティストは、洗浄した肉の生地が、４品の試食では穀物の風味が少なく、酸化臭が弱く、全体的な異臭が少ないと記載した。洗浄した肉の生地の異臭の減少は、洗浄していない肉の生地を、洗浄した肉の生地と比較したＧＣＯと一緒に、ＳＰＭＥ ＧＣ−ＭＳによって裏付けられる。洗浄した肉の生地において、フレーバー化合物は、アルコールおよびアルデヒドなどの酸化したフレーバー化合物、ならびに１−（２−フラニル）−エタノン、メチル−ピラジン、ペンタン酸、３−メチル−１−ブタノール、２，３−ブタンジオン、ベンジルアルコール、（Ｅ，Ｅ）３，５−オクタジエン−２−オン、（Ｅ）−２−ノネナール、（Ｅ，Ｅ）−２，４−デカジエナール、および１−オクテン−３−オンを含めた特定の化合物を含めて減少し、ＧＣＯにより臭気活性化合物と決定され、これらの化合物の検出は、洗浄した肉の生地において減少したまたは検出されなかった。
血液寒天の調製
血液寒天を、表１２に示される成分を用いて調製した。
寒天粉末（Ｎｏｗ Ｆｏｏｄｓ、Ｂｌｏｏｍｉｎｇｄａｌｅ、ＩＬ）を、撹拌ビーカー中で１００℃まで加熱することにより、乳酸および風味ブロスの混合物（表１３からの１０％ヤシ油およびマジックミックス１を用いたことを除いて、実施例５と同様に作製した）に溶解した。溶液を、氷浴に浸漬することにより６５℃まで冷却した。次いで、１７×液体マジックミックス（表１３からのマジックミックス２）およびレグヘモグロビンをどちらも４℃で加え、混合物の温度を５０℃まで下げた。レグヘモグロビンを変性させないようにするために、レグヘモグロビンを加える前に、混合物を冷却することが重要である。次いで、乾燥ＲｕＢｉｓＣＯを加え、混合物を、手で激しく撹拌した。ＲｕＢｉｓＣＯを加える場合、４０℃から６０℃の間の温度であることが重要である。温度が非常に高い場合、ＲｕＢｉｓＣＯは、変性する恐れがあり、最終生成物の調理中、固化剤（firming agent）として機能しない。温度が非常に低い場合、寒天は、固化し、均質な混合物の生成を妨げる。
血液寒天の調製
血液寒天を、表１４に示される成分を用いて調製した。
寒天粉末（Ａｇａｒ１００、ＴＩＣ Ｇｕｍｓ、Ｗｈｉｔｅ Ｍａｒｓｈ、ＭＤ）を、撹拌ビーカー中で少なくとも９１℃まで加熱することにより、水および乳酸の混合物に溶解した。加熱を行って、寒天を完全に可溶化した。次いで、溶液を５０〜７０℃まで冷却し、レグヘモグロビン（発現したピキア（Pichia）、実施例１）および１７×液体マジックミックス（表１２）の予備混合物を加えた。温度が非常に高い場合、レグヘモグロビンは、変性する恐れがあり、風味反応化学を目的としたとき機能しない。温度が非常に低い場合、寒天は、固化し、均質な混合物の生成を妨げる。次いで、混合物を撹拌し、さらに、４〜２５℃まで冷却した。完成された生成物は、外観および質感がケチャップのようである。
溶融性、接着性および食感特性を改善した脂質レプリカエマルションの調製
脂質レプリカ１００ｇを調製するため、乾燥前駆物質の混合１（表１２）１ｇを、水１８．８ｍｌに溶解し、ｐＨを濃縮ＮａＯＨ溶液で６まで調整した。レグヘモグロビン（５．５％）の凍結した溶液を前駆物質溶液に加え、回転速度２５０ＲＰＭで、１６０℃で維持した撹拌ホットプレートに入れた。
別々の容器において、ヤシ油（Ｓｈａｙ ａｎｄ ｃｏｍｐａｎｙ、Ｍｉｌｗａｕｋｉｅ、ＯＲ）３５ｇおよびパームステアリン３５ｇを、６０℃の水浴で一緒に融解した。融解した油混合物を、撹拌速度を４５０ＲＰＭまで上げながら、ゆっくりと（約１２ｍｌ／分）前駆物質およびレグヘモグロビンの溶液に加えた。
油を加えた後、得られた高濃度のエマルションを、同じ温度および撹拌速度で２３分間維持した。次いで、エマルションを６００ｍｌビーカーに移し、急冷のために氷上に置き、冷蔵庫に入れた。エマルションが２５℃に達した場合、藻類植物油０．３５ｇおよびアセトイン０．３５ｇを、エマルションに加え、へらで急速に混合した。（実施例３１に記載されている通り）風味を改善し、異臭をマスキングするためのラクトンを、以下の量で加えた。５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノンを、最終濃度２．５＊１０−５％まで加え、ブチロラクトンを、最終濃度２．５＊１０−８％まで加え、δ−テトラデカラクトンを、最終濃度５＊１０−９％まで加えた。エマルションを、設定６で携帯型ホモジナイザーを用いて、２．５分間ホモジナイズした。エマルションを、完全に固形化するまで、４℃でインキュベートした。
凝固した後、脂質レプリカエマルションは、オフホワイトからわずかに褐色であり、室温でろう状の固形物であり、風味は、香ばしい、肉のような、血液のような、および鶏脂様と特徴付けられた。牛のひき肉レプリカに取り込まれる場合、レプリカの取り扱われるおよび成形される能力と同様にレプリカの粘着性は高まった。
ダイズコングリシニンタンパク質によって安定化された脂質レプリカエマルションの調製
脂質レプリカ１００ｇを調製するため、実施例４からの単離されたダイズコングリシニン粉末１．５ｇを水２８．５ｍｌに溶解し、熱撹拌プレート（hot stir plate）に置いた。別々の容器において、ヤシ油（Ｓｈａｙ ａｎｄ ｃｏｍｐａｎｙ）７０ｇを ６０℃の水浴で融解した。融解した油混合物を、一定の撹拌で、精製されたタンパク質の溶液にゆっくりと（約１２ｍｌ／分）加えた。得られたエマルションを最高９０℃の温度まで加熱し、この温度で５分間維持した。次いで、エマルションを、６００ｍｌビーカーに移し、急冷のために氷上に置き、冷蔵庫に入れた。エマルションが２５℃に達した場合、藻類植物油０．３５ｇをエマルションに加え、へらで急速に混合した。（実施例３１に記載されている通り）風味を改善し、異臭をマスキングするためのラクトンを、以下の量で加えた。５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノンを、最終濃度２．５＊１０−５％まで加え、ブチロラクトンを、最終濃度２．５＊１０−８％まで加え、δ−テトラデカラクトンを最終濃度５＊１０−９％まで加えた。エマルションを、設定６で携帯型ホモジナイザーを用いて２．５分間ホモジナイズし、完全に固形化するまで、４℃の冷蔵庫でインキュベートした。凝固した後、脂質レプリカエマルションは、白色からわずかにオフホワイト色であり、室温で固体であり、刺激の少ない、非常にはっきりしない風味であり、質感は、与えられた牛肉の脂肪と類似するものと特徴付けられた。
ｐＨ逸脱方法によるダイズコングリシニンタンパク質によって安定化された脂肪レプリカエマルションの調製
脂肪レプリカ１００ｇを調製するために、実施例４からの単離されたダイズグリシニンタンパク質粉末０．５ｇをビーカー中の水２９．５ｍｌに溶解した。水酸化ナトリウム２Ｍ溶液を用いて、タンパク質溶液のｐＨを１２に調整した。別々の容器において、ヤシ油（Ｓｈａｙ ａｎｄ ｃｏｍｐａｎｙ）７０ｇを６０℃の水浴で融解した。融解した油混合物を、一定の撹拌で、精製されたタンパク質の溶液にゆっくりと（約１２ｍｌ／分）加えた。藻類植物油０．３５ｇを、エマルションに加え、へらで急速に混合した。水酸化ナトリウム２Ｍ溶液を用いて、タンパク質溶液のｐＨを１２に調整し、エマルションを、設定６で携帯型ホモジナイザーを用いて３０ｓ（３０秒）間ホモジナイズし、完全に固形化するまで４℃でインキュベートした。凝固した後、脂質レプリカエマルションは、白色からわずかにオフホワイト色であり、室温で固体であり、刺激の少ない、非常にはっきりしない風味であり、カッテージチーズ様の質感であった。
風味エマルション中にカロテノイドを加えて肉のような風味を高める
各カロテノイド（カンタキサンチン、β−カロテン、ルテイン、またはリコペン）（Ｓｈａｙ ａｎｄ ｃｏｍｐａｎｙ、Ｍｉｌｗａｕｋｉｅ、ＯＲ）を、溶解性に応じて、１０％でヤシ油または水に個別に溶解した。０．５％のＬｅｇＨの溶液、１×前駆物質のミックス１（表１）、３０％ＲＢＤヤシ油、および個別の１０％カロテノイド溶液（エマルション中の最終カロテノイド濃度は、０．０２５％であった）を混合し、沸騰するまで加熱しながら混合物を撹拌し、次いで、１０分間ぐつぐつと煮立たせることにより、カロテノイドを調理前に風味エマルションに加えた。０．７％の追加の藻類植物油を、実施例３２に記載されている通り、風味の創出のための追加の前駆物質について加えた。（実施例３１に記載されている通り）風味を改善し、異臭をマスキングするためのラクトンを、以下の量で加えた。５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノンを最終濃度２．５＊１０−５％まで加え、ブチロラクトンを最終濃度２．５＊１０−８％まで加え、δ−テトラデカラクトンを最終濃度５＊１０−９％まで加えた。エマルションを、設定６で携帯型ホモジナイザーを用いて２．５分間ホモジナイズし、次いで、完全に固形化するまで４℃でインキュベートした。次いで、エマルションを、実施例３０に記載されている通り調製したタコスミートに加えた。次いで、試料を、カロテノイドを加えない対照と異なるカロテノイドと比較した。試料は、少なくとも５名の訓練を受けたフレーバーサイエンティストによって評価された。結果を表１５にまとめた。
ハンバーガーの組み立ておよび調理
表１６の成分を含有するレプリカハンバーガーを調製した。
冷却した肉の生地を、食品グラインダー付属品（ＫＩＴＣＨＥＮＡＩＤ（登録商標）Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ ６００ Ｓｅｒｉｅｓ ６ Ｑｕａｒｔ Ｂｏｗｌ−Ｌｉｆｔ Ｓｔａｎｄ Ｍｉｘｅｒ ｍｏｄｅｌ ＫＰ２６Ｍ１ＸＥＲおよびＫＩＴＣＨＥＮＡＩＤ（登録商標）Ｆｏｏｄ Ｇｒｉｎｄｅｒ ｍｏｄｅｌ ＦＧＡ、Ｓｔ． Ｊｏｓｅｐｈ、ＭＩ）を取り付けたスタンドミキサーを用いて、速度設定１で挽いた。本装置において、材料を、固定孔プレートの前に据え付けられた回転ナイフを通り過ぎてスクリューコンベヤーにより送った。軟らかい結合組織を、鈍い刃を取り付け、低速で２０〜３０秒間運転したＵｎｉｖｅｒｓａｌ Ｍａｃｈｉｎｅ（ＵＭ−１２、Ｓｔｅｐｈｅｎ Ｍａｃｈｉｎｅｒｙ ＧｍｂＨ、Ｓｃｈｗａｒｚｅｎｂｅｃｋ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて細長く切った。風味を付けたエマルションを、−２０℃まで冷却し、次いで、一段階プロセスにおいて、ミニチョッパー（Ｍｉｎｉ−Ｐｒｅｐ（登録商標）Ｐｌｕｓ Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ ｍｏｄｅｌ ＤＬＣ−２Ｌ Ｃｕｉｓｉｎａｒｔ、Ｓｔａｍｆｏｒｄ、ＣＴ）で刻んだ。エマルションおよそ４００ｇを、ミニチョッパーに入れ、細断設定で６０秒間処理して、長さ１〜３ｍｍの切片を得た。
次いで、ひき肉生地、細長く切られた軟らかい結合組織、および風味を付けたエマルション片を混合した。混合中、混合物を−５から４℃で維持して、脂肪を溶融しないようにした。次いで、血液寒天を加え、完全に取り込まれるまで混合した。合計バッチサイズは、１ｋｇであった。次いで、挽いた組織の部分５０ｇまたは１５０ｇを、手で円形のパテ形に形成した。パテ５０ｇの典型的な寸法は、５５ｍｍ×１５ｍｍであった。パテ１５０ｇの典型的な寸法は、１００ｍｍ×２２ｍｍであった。パテを調理するまで冷蔵した。パテを、予熱した（３２５〜３４５°Ｆ）焦げ付かないフライパンで調理し、２分ごとにひっくり返しながら、内部温度１６０°Ｆまで加熱した。調理されたパテは、牛のひき肉と類似の外観、質感、および風味であった。パテ形式で調理するほかに、未形成の材料はまた、タコスの具、キャセロール、ソース、トッピング、スープ、シチュー、またはローフなど様々な料理に用いることができる。
ハンバーガーの組み立ておよび調理
表１７の成分を含有するレプリカハンバーガーを調製した。
冷却した肉の生地を、食品グラインダー付属品（ＫＩＴＣＨＥＮＡＩＤ（登録商標）Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ ６００ Ｓｅｒｉｅｓ ６ Ｑｕａｒｔ Ｂｏｗｌ−Ｌｉｆｔ Ｓｔａｎｄ Ｍｉｘｅｒ ｍｏｄｅｌ ＫＰ２６Ｍ１ＸＥＲおよびＫＩＴＣＨＥＮＡＩＤ（登録商標）Ｆｏｏｄ Ｇｒｉｎｄｅｒ ｍｏｄｅｌ ＦＧＡ、Ｓｔ．Ｊｏｓｅｐｈ、ＭＩ）を取り付けたスタンドミキサーを用いて、速度設定１で挽いた。軟らかい結合組織を、鈍い刃を取り付け、低速で２０〜３０秒間運転したＵｎｉｖｅｒｓａｌ Ｍａｃｈｉｎｅ（ＵＭ−１２、Ｓｔｅｐｈｅｎ Ｍａｃｈｉｎｅｒｙ ＧｍｂＨ、Ｓｃｈｗａｒｚｅｎｂｅｃｋ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて細長く切った。風味を付けたエマルションを、−２０℃まで冷却し、次いで、ＳＡＬＡＤＳＨＯＯＴＥＲ（登録商標）Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｐｒｅｓｔｏ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ、Ｉｎｃ． Ｅａｕ Ｃｌａｉｒｅ、ＷＩ）で刻んで、長さ１〜３ｍｍの切片を得た。次いで、ひき肉生地、細長く切られた軟らかい結合組織、風味を付けたエマルション片、および乾燥ダイズコングリシニンを混合した。混合中、混合物を−５から４℃で維持して、脂肪を溶融しないようにした。次いで、水和液体（実施例２２に記載されている通りレグヘモグロビンおよび１７×液体マジックミックスが１：１の混合物）を加え、混合物を最低１５分間４℃で保持して、乾燥ダイズコングリシニンを水和させた。最後に、血液寒天を加え、完全に取り込まれるまで混合した。合計バッチサイズは、２００ｇであった。次いで、挽いた組織の部分５０ｇを、手で円形のパテ形に形成した。パテ５０ｇの典型的な寸法は、５５ｍｍ×１５ｍｍであった。パテは、調理するまで冷蔵した。パテを、予熱した（３２５〜３４５°Ｆ）焦げ付かないフライパンで調理し、毎分ひっくり返しながら、内部温度１７０°Ｆまで加熱した。調理されたパテは、牛のひき肉と類似の外観、質感、および風味であった。パテ形式で調理するほかに、未形成の材料はまた、タコスの具、キャセロール、ソース、トッピング、スープ、シチュー、またはローフなど様々な料理に用いることができる。
１０％の肉の生地を有するハンバーガーの組み立ておよび調理
表１８の成分を含有するレプリカハンバーガーを調製した。
冷却した肉の生地を、食品グラインダー付属品（ＫＩＴＣＨＥＮＡＩＤ（登録商標）Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ ６００ Ｓｅｒｉｅｓ ６ Ｑｕａｒｔ Ｂｏｗｌ−Ｌｉｆｔ Ｓｔａｎｄ Ｍｉｘｅｒ ｍｏｄｅｌ ＫＰ２６Ｍ１ＸＥＲおよびＫＩＴＣＨＥＮＡＩＤ（登録商標）Ｆｏｏｄ Ｇｒｉｎｄｅｒ ｍｏｄｅｌ ＦＧＡ、Ｓｔ．Ｊｏｓｅｐｈ、ＭＩ）を取り付けたスタンドミキサーを用いて、速度設定１で挽いた。軟らかい結合組織を、鈍い刃を取り付け、低速で２０〜３０秒間運転したＵｎｉｖｅｒｓａｌ Ｍａｃｈｉｎｅ（ＵＭ−１２、Ｓｔｅｐｈｅｎ Ｍａｃｈｉｎｅｒｙ ＧｍｂＨ、Ｓｃｈｗａｒｚｅｎｂｅｃｋ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて細長く切った。風味を付けたエマルションを、−２０℃まで冷却し、次いで、ＳＡＬＡＤＳＨＯＯＴＥＲ（登録商標）Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｐｒｅｓｔｏ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ、Ｉｎｃ． Ｅａｕ Ｃｌａｉｒｅ、ＷＩ）で刻んで、長さ１〜３ｍｍの切片を得た。次いで、ひき肉生地、細長く切られた軟らかい結合組織、風味を付けたエマルション片、および乾燥ダイズコングリシニンを混合した。混合中、混合物を−５から４℃で維持して、脂肪を溶融しないようにした。次いで、水和液体（実施例２２に記載されている通りレグヘモグロビンおよび１７×液体マジックミックスが１：１の混合物）を加え、混合物を最低１５分間４℃で保持して、乾燥ダイズコングリシニンを水和させた。最後に、血液寒天を加え、完全に取り込まれるまで混合した。合計バッチサイズは、２００ｇであった。次いで、挽いた組織の部分５０ｇを、手で円形のパテ形に形成した。パテ５０ｇの典型的な寸法は、５５ｍｍ×１５ｍｍであった。パテを調理するまで冷蔵した。パテを予熱した（３２５〜３４５°Ｆ）焦げ付かないフライパンで調理し、毎分ひっくり返しながら内部温度１７０°Ｆまで加熱した。調理されたパテは、牛のひき肉と類似の外観、質感、および風味であった。パテ形式で調理するほかに、未形成の材料はまた、タコスの具、キャセロール、ソース、トッピング、スープ、シチュー、またはローフなど様々な料理に用いることができる。
「タコスミート」の組み立ておよび調理
表１９の成分を含有する「タコスミート」レプリカを調製した。
冷却した肉の生地を挽き、軟らかい結合組織を細長く切り、風味を付けたエマルションを実施例２８に記載されている通り刻んだ。次いで、ひき肉生地、細長く切られた軟らかい結合組織、および風味を付けたエマルション片を混合した。混合中、混合物を−５から４℃で維持して、脂肪を溶融しないようにした。次いで、水和液体（実施例２２に記載されている通りレグヘモグロビンおよび１７×液体マジックミックスが１：１の混合物）および血液寒天を加え、混合した。合計バッチサイズは、２０ｇであった。次いで、混合した組織を、予熱した（３２５〜３４５°Ｆ）焦げ付かないフライパンで１６０°Ｆまでで調理した。調理された組織は、牛のひき肉と類似の外観、質感、および風味であった。この物質は、外観がタコスミートに似ており；７Ｓタンパク質を含まなくても、この肉は、共に等しく硬くならず固着しなかった。
マスキング剤としてのラクトンの使用
ラクトンを、溶解性に応じて水または油に希釈した。次いで、希釈したラクトンを、表２０に示される通り、風味を付けたエマルション（実施例２３）に加え、ホモジナイズした。ラクトンの最終濃度を、表２０に示す。風味を付けたエマルションを、ひき肉（例えば、タコスミート）（食肉レプリカのすべての構成成分は、ＲｕＢｉｓＣＯを含まない）の最終の２０％のために加えた。風味を付けたエマルションを、例１７に示した通りであるがＲｕＢｉｓＣＯを含まず、肉の生地、結合組織、マジックミックスおよびヘムと混合した。次いで、ひき肉は、全体的な味、異臭の任意の減少、および全体的な改善について、５名の訓練を受けたフレーバーサイエンティストによって試験された。まとめた結果を、表２０に示す。特定のラクトンおよびラクトンの組合せを加えると、穀物、卵のような、苦味、肝臓のような、およびマッシュルームを含めた、異臭が低減された。苦味のような特定のマスキング特性のために独自の組合せを必要とした。ラクトンはまた、クリームのような、バターのような、カラメルになった、脂っこい、新鮮な、およびフルーツのような所望の風味を増した。
肉のような脂肪風味の創出のための多価不飽和脂肪の添加
藻類植物油（ＤＳＭ ｌｉｆｅ’ｓ ｏｍｅｇａ ４５ ０２４１２−０１００）を、食肉レプリカ中の最終濃度０．０７％について、風味を付けたエマルション（実施例２３）に加え、次いで、ホモジナイズした。風味エマルションを、実施例２７に記載されている通り、レプリカに加えた。藻類植物油を加えると、訓練を受けたフレーバーサイエンティストによって記載された通り、獣脂の味、脂肪質、および全体的な肉のような特質が増したレプリカになった。
藻類油を添加すると、脂っこいフレーバー分子の創出のために必要であるエイコサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸を含めた、前駆物質が増加した。ＳＰＭＥガスクロマトグラフィー−質量分析（ＧＣ−ＭＳ）によって検出された通り、藻類油を含まない対照と比較して、藻類油を前駆物質のミックスおよびヘモグロビンに添加することにより、ノナン、（Ｅ，Ｅ）−３，５−オクタジエン−２−オン、１−ヘプテン−３−オール、１−ペンテン−３−オン、２−プロピルフラン、ｎ−カプロン酸ビニルエステル、３−エチル−２−メチル−１，３−ヘキサジエン、１−エチル−５−メチルシクロペンテン、ｔｒａｎｓ−２−（２−ペンテニル）フラン、１−ペンテン−３−オール、４，７−ジメチル−ウンデカン、１−オクタノール、３−エチル−ピリジン、３−エチルシクロペンタノン、（Ｚ）−２−オクテン−１−オール、２−ｎ−ヘプチルフラン、（Ｚ）−２−デセナール、ヘキサン酸、（Ｅ，Ｅ）−２，４−ノナジエナール、６−メチル−２−ヘプタノン、（Ｚ）−２−ヘプテナール、（Ｅ，Ｅ）−２，４−ヘプタジエナール、１−ヘキサノール、（Ｅ，Ｅ）−２，４−デカジエナール、（Ｅ，Ｚ）−２，６−ノナジエナール、および１−オクテン−３−オールを含めた風味を創出した。
食肉レプリカのためのウリ属（Cucumis）スラリーの創出
ゆでたキュウリスラリーを創出するため、（皮を剥かずに、または別の方法でばらばらにして）浸透させなかった新鮮な種類のキュウリを丸ごと用いた。水浴は、８０〜９０℃まで加熱し、キュウリを丸ごと水浴に入れ、キュウリの内部温度が水浴の温度と平衡するまで、本実施例の場合およそ３０分間調理した。次いで、水浴からキュウリを引き上げ、キュウリの皮を身から完全に取り除いた。キュウリの身を種子とブレンドし、次いで、ふるいにかけて、より大きい微粒子物のいずれかを分離した。次いで、ブレンドしたキュウリの身をスラリーとして用い、食肉レプリカに加えた。ハネデューメロンおよびカンタロープを含めたウリ属（Cucumis）の他の品種でこの同じ方法を用いた。
溶媒によって補助された風味抽出を用いたウリ属（Cucumis）抽出物の創出
抽出物を、溶媒によって補助された風味抽出（ＳＡＦＥ：solvent assisted flavor extraction）、および溶媒として水を用いて創出した。ＳＡＦＥは、圧力を加え、温度をわずかに上昇させた材料の外にフレーバー化合物を引き出すことにより行われる。
抽出物を、新鮮な種類のキュウリの皮をすべて取り除き、キュウリを細断することにより創出し、次いで、特効薬とブレンドした。次いで、キュウリスラリーを、Ｅｄｗａｒｄｓ １２床用電気掃除機（floor vacuum）を用いて圧力下にある、ＳＡＦＥガラス製品の試料の注入口に注ぎ入れ、温度を、水ポンプおよび試料丸底フラスコのための温水浴で４０℃に設定した。少量（試料２〜４ｍＬ）のキュウリスラリーを、試料丸底フラスコに入れた。試料丸底フラスコに移動させたとき、スラリーは、直ちに沸騰するようにみえた。目に見えて沸騰が停止したとき、より多く試料体積を試料丸底フラスコに加えた。試料全体がＳＡＦＥガラス製品装置に入るまで、これを続けた。試料全体がなくなったら、水浴が４０℃に達するにつれて試料を抽出し続け、次いで、さらに２０分間抽出した。抽出が行われるとき、収集丸底フラスコを、液体窒素に沈め、コールドフィンガー注入口を、液体窒素で満たした。次いで、抽出物を、収集丸底フラスコから収集した。
ゲル状の基質に加えることにより肉のような特質および脂肪質を増加させるためのウリ属（Cucumis）液体の食肉レプリカへの添加
実施例２２で概説した血液寒天を、ＤＩ水の代わりにウリ属（Cucumis）液体を加えることを除いて記載された通り、作製した。ウリ属（Cucumis）液体は以下のうち１つであった。（ｉ）ＤＩ水２％で加えた、カンタロープメロン由来の市販の水抽出物、（ｉｉ）〜（ｖ）実施例３３に記載されている通り、ハネデューメロン（６．２５％）またはキュウリ（３．２％）の調理済みもしくは調理されていないスラリー、または（ｖｉ）実施例３４に記載されている通り、キュウリ（加圧蒸留物）の溶媒によって補助されたフレーバー抽出物。これらのキュウリおよびメロン抽出物を加えることにより、肉のような風味プロファイルのある特定の要素が、レプリカの全体的な嗜好および肉のような特質を増強した。ＳＰＭＥ ＧＣ−ＭＳによって実証され、訓練を受けたフレーバーサイエンティストによりＧＣＯを用いて臭気活性化合物と確認された通り、化合物の多くは、アルデヒド、ラクトンであり、それらの多くは、牛肉において見られる。牛肉とウリ属（Cucumis）との間で類似する化合物には、それだけには限らないが、ノナナール、２−デセナール、２−ノネナール、２−ヘプテナール、２，６−ノナジエナール、２，４−デカジエナール、２−ウンデセナール、２−オクテナール、２−ノネナール、ドデカナール、２，４−ヘプタジエナール、２，６−ノナジエナール、２，４−ノナジエナール、２，４−オクタジエナール、デカナール、５−（メチレンシクロプロピル）−ペンタナール、６−ノネナール、３，７−ジメチル１，６−オクタジエン−３−オール、２−ノネン−１−オール、３−ノネン−１−オール、３，５−オクタジエン−２−オン、２，３−ブタンジオン、２−メチル−シクロペンタノン、２−ブタノン、ａ−イオノン、６−オクテン−２−オン、ジヒドロ−５−ペンチル−２（３Ｈ）−フラノン、ｌ−メントン、ｎ−カプロン酸ビニルエステル、４−メチルオクタン酸、および酢酸エテニルエステルが含まれる。
抽出物を含む血液寒天が、実施例３０に記載されている通り、食肉レプリカに加えられる場合、甘い芳香、脂肪質、いくつかの場合において、獣脂および牛肉のような風味が高まった。５名の訓練を受けたフレーバーサイエンティストによる、対照および盲検の対照において示されなかった追加の風味の香気の十分な説明について、表２１を参照のこと。さらに、これらのメロンおよびキュウリ抽出物の添加によって、穀物のような、土のような、木のような、および渋みのある臭いを含めた異臭の認識も減ったことが観察された。
これらの抽出物のうちの３つを、８名の訓練を受けたパネリストを含む正式な記述的パネルで試験し、対照、８０：２０牛肉、およびウリ属（Cucumis）液体を含む３種の追加の試料（調理済みのキュウリスラリーは最終タコスミートの０．３７％で試験され、調理済みのハネデュースラリーは最終タコスミートの０．７３％で試験され、カンタロープ抽出物（ＴＲＥＡＴＴ製）は最終タコスミートの０．２４％で試験された）とは表示されない盲検対照として表示された１つの対照レプリカと比較した。結果では、３つすべての試料は、脂肪質および甘い芳香が高く、土のような、穀物のような、渋みのある、および青っぽい腐った香気が減ったと評価されたことが示された。カンタロープ抽出物は、牛肉において味わわれるものと違って甘いメロン風味の対照からの追加の腐った香気を有した。他の２つの試料である、実施例３３に記載されている通り作製された、調理済みのハネデュースラリーおよびキュウリスラリーは共に、両方の対照よりも肉のような特質および脂肪質が高く、記載された追加の腐った香気を有さなかったと評価された。
他の実施形態
本発明は、その詳細な説明と併せて記載されており、前述の説明は、例証であり、本発明の範囲を制限するものではなく、添付した特許請求の範囲の範囲によって定義されるものと理解されるべきである。他の態様、利点、および修正は、以下の特許請求の範囲内である。

Claims (113)

  1. （ａ）肉の生地約５重量％から約８８重量％；
    （ｂ）炭水化物系ゲル約０重量％から約４０重量％；
    （ｃ）非動物脂肪約５重量％から約３５重量％；
    （ｄ）矯味剤約０．００００１重量％から約１０重量％；
    （ｅ）結合剤約０重量％から約１５重量％；ならびに
    （ｆ）ヘム含有タンパク質および／または鉄塩約０．０１重量％から約４重量％
    を含む、食肉レプリカ組成物。
  2. 前記肉の生地が、矯味剤を含む、請求項１に記載の組成物。
  3. 前記非動物脂肪が、矯味剤を含む、請求項１または２に記載の組成物。
  4. 前記肉の生地が、前記組成物の約４５重量％から約６０重量％である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
  5. 前記炭水化物系ゲルが、前記組成物の約１０重量％から約２５重量％である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
  6. 前記非動物脂肪が、前記組成物の約１０重量％から約１５重量％である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
  7. 前記矯味剤が、前記組成物の約３重量％から約７重量％である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
  8. 前記矯味剤が、１種または複数のフレーバー前駆物質を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
  9. 前記矯味剤が、前記組成物の約０．００１重量％から約２重量％である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
  10. 前記矯味剤が、調味料または風味付け化合物を含む、請求項９に記載の組成物。
  11. 前記矯味剤が、調味料および１種または複数のフレーバー前駆物質の組合せである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
  12. 前記結合剤が、前記組成物の約２重量％から約１０重量％である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
  13. 前記結合剤が、これらの組織構造上の特性および／もしくは風味特性を改善するために、または１種もしくは複数のタンパク質の変性およびゲル化温度を改変するために、化学的または酵素的に修飾されている１種または複数のタンパク質を含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
  14. 前記ヘム含有タンパク質が、前記組成物の約０．０１重量％から約２重量％である、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
  15. 前記ヘム含有タンパク質および前記鉄塩を含む、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の組成物。
  16. 前記肉の生地が、単離された植物タンパク質、食用の繊維状構成成分、任意選択の矯味剤、および任意選択の非動物脂肪を含む、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の組成物。
  17. 前記結合剤が、コングリシニンタンパク質である、請求項１２に記載の組成物。
  18. （ａ）肉の生地約５重量％から約８０重量％；
    （ｂ）非動物脂肪約５重量％から約３５重量％；
    （ｃ）食用の繊維状構成成分約１５重量％から約４０重量％；
    （ｄ）炭水化物系ゲル約０．１重量％から約１８重量％；
    （ｅ）矯味剤約０重量％から約１０重量％；
    （ｆ）結合剤約０．５重量％から約１５重量％；ならびに
    （ｇ）ヘム含有タンパク質および／または鉄塩約０．１重量％から約８重量％
    を含む、食肉レプリカ組成物。
  19. （ａ）肉の生地約２０重量％から約３０重量％；
    （ｂ）非動物脂肪約１５重量％から約２５重量％；
    （ｃ）食用の繊維状構成成分約１５重量％から約２５重量％；
    （ｄ）炭水化物系ゲル約７重量％から約１８重量％；
    （ｅ）矯味剤約０重量％から約１０重量％；
    （ｆ）結合剤約５重量％から約１５重量％；ならびに
    （ｇ）ヘム含有タンパク質および／または鉄塩約２重量％から約８重量％
    を含む、請求項１８に記載の食肉レプリカ組成物。
  20. ひき肉レプリカを製造する方法であって、
    （ａ）１５０°Ｆから２５０°Ｆまでの温度まで生地を加熱するステップであり、前記生地が、単離された植物タンパク質、任意選択の食用の繊維状構成成分、１種または複数の任意選択の矯味剤、および任意選択の非動物脂肪を含む、ステップと；
    （ｂ）前記生地を、加熱後、非動物脂肪と合わせるステップであり、前記非動物脂肪が、矯味剤および／または単離された植物タンパク質を任意選択で含有する、ステップと；
    （ｃ）ステップ（ｂ）からの生地を、炭水化物系ゲル、任意選択の食用の繊維状構成成分、任意選択の結合剤、鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または鉄塩、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせて、前記ひき肉レプリカを製造するステップと
    を含む、方法。
  21. 前記炭水化物系ゲル、前記任意選択の食用の繊維状構成成分、前記任意選択の結合剤、前記鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または前記鉄塩、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせる前に、ステップ（ｂ）からの生地を粉砕するステップをさらに含む、請求項２０に記載の方法。
  22. 肉の生地に風味付けする方法であって、
    （ａ）第１の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または第１の鉄塩を、１種または複数のフレーバー前駆物質および任意選択の非動物脂肪と合わせるステップと；
    （ｂ）混合物を加熱して、１種または複数のフレーバー化合物を形成するステップと；
    （ｃ）単離された植物タンパク質、任意選択の食用の繊維状構成成分、およびステップ（ｂ）からの混合物を含む生地を作製するステップと
    を含む、方法。
  23. （ｄ）前記生地を、加熱後、非動物脂肪と合わせるステップであって、前記非動物脂肪が、矯味剤および／または単離された植物タンパク質を任意選択で含有する、ステップと；
    （ｅ）ステップ（ｄ）の生地を、炭水化物系ゲル、任意選択の結合剤、第２の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または第２の鉄塩、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせて、ひき肉レプリカを製造するステップとをさらに含む、請求項２２に記載の方法。
  24. 前記炭水化物系ゲル、前記任意選択の結合剤、前記第２の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または前記第２の鉄塩、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせる前に、ステップ（ｄ）からの生地を粉砕するステップをさらに含む、請求項２３に記載の方法。
  25. 肉の生地に風味付けする方法であって、
    （ａ）単離された植物タンパク質、任意選択の食用の繊維状構成成分、１種または複数の任意選択の矯味剤、および任意選択の非動物脂肪を含む生地を作製するステップと；
    （ｂ）非動物脂肪を、鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または第１の鉄塩、および１種もしくは複数のフレーバー前駆物質と合わせ、混合物を加熱することにより風味を付けた非動物脂肪を作製するステップと；
    （ｃ）前記生地を、加熱後、前記風味を付けた非動物脂肪と合わせるステップと
    を含む、方法。
  26. ステップ（ｃ）の生地を、炭水化物系ゲル、任意選択の結合剤、第２の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または第２の鉄塩、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせて、ひき肉レプリカを製造するステップをさらに含む、請求項２５に記載の方法。
  27. 前記炭水化物系ゲル、前記任意選択の結合剤、前記第２の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または前記第２の鉄塩、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせる前に、ステップ（ｃ）の生地を砕くステップをさらに含む、請求項２６に記載の方法。
  28. ひき肉レプリカを製造する方法であって、
    （ａ）鉄塩を、１種または複数のフレーバー前駆物質および任意選択の非動物脂肪と合わせるステップと；
    （ｂ）混合物を加熱して、１種または複数のフレーバー化合物を形成するステップと；
    （ｃ）単離された植物タンパク質、任意選択の食用の繊維状構成成分、およびステップ（ｂ）からの混合物を含む生地を作製するステップと；
    （ｄ）前記生地を、加熱後、非動物脂肪と合わせるステップであり、前記非動物脂肪が、矯味剤および／または単離された植物タンパク質を任意選択で含有する、ステップと；
    （ｅ）ステップ（ｄ）の生地を、炭水化物系ゲル、任意選択の結合剤、任意選択の鉄塩、鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせて、前記ひき肉レプリカを製造するステップと
    を含む、方法。
  29. 前記炭水化物系ゲル、前記任意選択の結合剤、前記鉄塩、前記任意選択の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環、および１種または複数の任意選択の矯味剤と合わせる前に、ステップ（ｄ）からの生地を粉砕するステップをさらに含む、請求項２８に記載の方法。
  30. ひき肉レプリカを製造する方法であって、
    （ａ）単離された植物タンパク質、任意選択の食用の繊維状構成成分、１種または複数の任意選択の矯味剤、および任意選択の非動物脂肪を含む生地を作製するステップと；
    （ｂ）非動物脂肪を、鉄塩および１種または複数のフレーバー前駆物質と合わせ、混合物を加熱することにより、風味を付けた非動物脂肪を作製するステップと；
    （ｃ）前記生地を、加熱後、前記風味を付けた非動物脂肪と合わせるステップと；
    （ｄ）ステップ（ｃ）の生地を、炭水化物系ゲル、任意選択の結合剤、鉄塩、任意選択の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせて、前記ひき肉レプリカを製造するステップと
    を含む、方法。
  31. 前記炭水化物系ゲル、前記任意選択の結合剤、前記鉄塩、前記任意選択の鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤と合わせる前に、ステップ（ｃ）からの生地を砕くステップをさらに含む、請求項３０に記載の方法。
  32. 前記鉄塩が、グルコン酸鉄、塩化鉄、シュウ酸鉄、硝酸鉄、クエン酸鉄、アスコルビン酸鉄（iron ascorbate）、硫酸第一鉄、ピロリン酸第二鉄、または任意の他の水溶性の塩である、請求項２０〜３１のいずれか一項に記載の方法。
  33. 前記混合物を加熱する前に、鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環を、前記鉄塩、前記１種または複数のフレーバー前駆物質、および前記非動物脂肪と合わせる、請求項２８に記載の方法。
  34. 鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環を、前記混合物を加熱する前に、前記非動物脂肪、前記鉄塩、および前記１種または複数のフレーバー前駆物質と合わせる、請求項３０に記載の方法。
  35. 前記１種または複数のフレーバー前駆物質が、糖、糖アルコール、糖酸、糖誘導体、油、遊離脂肪酸、アミノ酸もしくはその誘導体、ヌクレオシド、ヌクレオチド、ビタミン、酸、ペプチド、リン脂質、タンパク質加水分解物、酵母抽出物、またはそれらの混合物である、請求項２２〜３１のいずれか一項に記載の方法。
  36. 前記フレーバー前駆物質が、グルコース、フルクトース、リボース、アラビノース、グルコース−６−リン酸、フルクトース６−リン酸、フルクトース１，６−二リン酸、イノシトール、マルトース、スクロース、マルトデキストリン、グリコーゲン、ヌクレオチドに結合された糖、糖蜜、リン脂質、レシチン、イノシン、イノシン一リン酸（ＩＭＰ）、グアノシン一リン酸（ＧＭＰ）、ピラジン、アデノシン一リン酸（ＡＭＰ）、乳酸、コハク酸、グリコール酸、チアミン、クレアチン、ピロリン酸塩、植物油、藻類油、ヒマワリ油、トウモロコシ油、ダイズ油、ヤシの実の油、パーム核油、ベニバナ油、アマニ油、米糠油、綿実油、オリーブ油、ヒマワリ油、カノーラ油、アマニ油、ヤシ油、マンゴー油、遊離脂肪酸、システイン、メチオニン、イソロイシン、ロイシン、リシン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファン、バリン、アルギニン、ヒスチジン、アラニン、アスパラギン、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩、グルタミン、グリシン、プロリン、セリン、チロシン、グルタチオン、アミノ酸誘導体、尿素、パントテン酸、オルニチン、ナイアシン、グリセロール、シトルリン、タウリン、ビオチン、ルリジサ油、真菌油、クロスグリ油、ベタイン、βカロテン、Ｂ−ビタミン、Ｎ−アセチルＬ−システイン、グルタミン酸鉄およびペプトン、またはそれらの混合物からなる群から選択される、請求項３５に記載の方法。
  37. 前記生地中の前記単離された植物タンパク質が、コムギグルテンを含む、請求項２０〜３６のいずれか一項に記載の方法。
  38. 前記生地中の前記単離された植物タンパク質が、コムギグルテン、デヒドリンタンパク質、アルブミン、グロブリン、もしくはゼイン、またはそれらの混合物を含む、請求項２０〜３６のいずれか一項に記載の方法。
  39. 前記ひき肉レプリカが、前記任意選択の食用の繊維状構成成分を含む、請求項２０〜３８のいずれか一項に記載の方法。
  40. 前記任意選択の食用の繊維状構成成分が、ニンジン、タケ、エンドウマメ、ブロッコリー、ジャガイモ、サツマイモ、トウモロコシ、全粒粉、アルファルファ、ケール、セロリ、セロリの根、パセリ、キャベツ、ズッキーニ、グリーンビーンズ、インゲンマメ、クロマメ、アズキ、白インゲン、ビート、カリフラワー、ナッツ、リンゴの皮、カラスムギ、コムギ、もしくはオオバコ、またはそれらの混合物由来の植物繊維を含む、請求項３９に記載の方法。
  41. 前記任意選択の食用の繊維状構成成分が、単離された植物タンパク質の押出成形された混合物を含む、請求項３９に記載の方法。
  42. 前記押出成形された混合物が、コムギグルテンおよびダイズタンパク質単離物を含む、請求項４１に記載の方法。
  43. 前記押出成形された混合物が、矯味剤をさらに含む、請求項４１または請求項４２に記載の方法。
  44. 前記矯味剤が、調味料、フレーバー化合物、またはフレーバー前駆物質である、請求項４３に記載の方法。
  45. 前記調味料が、酵母抽出物、タンパク質加水分解物、または油である、請求項４４に記載の方法。
  46. 前記食用の繊維状構成成分が、溶液紡糸タンパク質繊維である、請求項３９に記載の方法。
  47. 前記溶液紡糸タンパク質繊維が、プロラミンを含む、請求項４６に記載の方法。
  48. 前記プロラミンが、トウモロコシゼイン、エンドウマメプロラミン、カフェリン（kafirin）、セカリン、ホルデイン、アベニン、またはそれらの混合物である、請求項４７に記載の方法。
  49. 前記非動物脂肪が、藻類油、真菌油、トウモロコシ油、オリーブ油、ダイズ油、ラッカセイ油、クルミ油、扁桃油、ゴマ油、綿実油、ナタネ油、カノーラ油、ベニバナ油、ヒマワリ油、アマニ油、パーム油、パーム核油、ヤシ油、ババス油、シアバター、マンゴーバター、カカオバター、コムギ胚芽油、ルリジサ油、クロスグリ油、シーバックソーン油、マカダミア油、ノコギリヤシ油、共役リノール酸油、アラキドン酸強化油、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）強化油、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）強化油、パームステアリン酸、シーバックソーンベリー油、マカダミア油、ノコギリヤシ油、もしくは米糠油；あるいはマーガリンまたは他の水素化された脂肪である、請求項２０〜４８のいずれか一項に記載の方法。
  50. 前記非動物脂肪が、藻類油である、請求項２０〜４８のいずれか一項に記載の方法。
  51. 前記非動物脂肪が、前記任意選択の矯味剤を含む、請求項４９または請求項５０に記載の方法。
  52. 前記非動物脂肪が、前記任意選択の単離された植物タンパク質を含む、請求項４９〜５１のいずれか一項に記載の方法。
  53. 前記任意選択の単離された植物タンパク質が、コングリシニンタンパク質である、請求項５２に記載の方法。
  54. 前記生地が、前記矯味剤を含む、請求項２０、２１、または２３〜５３のいずれか一項に記載の方法。
  55. 前記生地中の前記非動物脂肪が、矯味剤を含む、請求項２０〜５２のいずれか一項に記載の方法。
  56. 前記矯味剤が、野菜抽出物、果実抽出物、酸、酸化防止剤、カロテノイド、ラクトン、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項５４または請求項５５に記載の方法。
  57. 前記酸化防止剤が、没食子酸エピガロカテキンである、請求項５６に記載の方法。
  58. 前記カロテノイドが、ルテイン、β−カロテン、ゼアキサンチン、ｔｒａｎｓ−β−アポ−８’−カロテナル、リコペン、またはカンタキサンチンである、請求項５６に記載の方法。
  59. 前記野菜抽出物が、キュウリまたはトマト由来である、請求項５６に記載の方法。
  60. 前記果実抽出物が、メロンまたはパイナップル由来である、請求項５６に記載の方法。
  61. 前記炭水化物系ゲルが、約４５℃から約８５℃の間の融解温度を有する、請求項２０〜６０のいずれか一項に記載の方法。
  62. 前記炭水化物系ゲルが、寒天、ペクチン、カラギーナン、コンニャク、アルギン酸塩、化学的に修飾されたアガロース、またはそれらの混合物を含む、請求項６１に記載の方法。
  63. 前記ひき肉レプリカが、前記任意選択の結合剤を含む、請求項２０〜６２のいずれか一項に記載の方法。
  64. 前記任意選択の結合剤が、単離された植物タンパク質である、請求項６３に記載の方法。
  65. 前記結合剤の変性温度が、約４０℃から約８０℃の間である、請求項６４に記載の方法。
  66. 前記単離された植物タンパク質が、ＲｕＢｉｓＣＯ、アルブミン、グルテン、コングリシニン、またはそれらの混合物である、請求項６４に記載の方法。
  67. 前記結合剤が、調理後、１４０°Ｆから１９０°Ｆまでで固まる炭水化物系ゲルである、請求項６３に記載の方法。
  68. 前記炭水化物系ゲルが、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、グアーガム、イナゴマメガム、キサンタンガム、またはそれらの混合物を含む、請求項６７に記載の方法。
  69. 前記結合剤が、卵アルブミンまたはコラーゲンである、請求項６３に記載の方法。
  70. 前記鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環が、ヘム部分、またはポルフィリン、ポルフィリノーゲン、コリン、コリノイド、クロリン、バクテリオクロロフィル（bacteriochorophyll）、コルフィン（corphin）、クロロフィリン、バクテリオクロリン、または鉄イオンと錯化されたイソバクテリオクロリン部分である、請求項２０〜６９のいずれか一項に記載の方法。
  71. 前記ヘム部分が、ヘム含有タンパク質である、請求項７０に記載の方法。
  72. 前記ヘム含有タンパク質が、非共生ヘモグロビン、ヘルズゲートグロビンＩ、フラボヘムタンパク質、レグヘモグロビン、ヘム依存性ペルオキシダーゼ、チトクロムｃペルオキシダーゼ、または哺乳動物のミオグロビンである、請求項７１に記載の方法。
  73. 前記ヘム含有タンパク質が、レグヘモグロビンである、請求項７１に記載の方法。
  74. 前記レグヘモグロビンが、ダイズ、エンドウマメ、またはササゲ由来である、請求項７３に記載の方法。
  75. 食肉の風味を増すまたは食品中の植物材料からの異臭をマスキングする方法であって、前記食品の１０−３から１０−１１までの濃度で、前記食品に１種または複数のラクトンを加えるステップであり、前記ラクトンが、テトラヒドロ−６−メチル−２Ｈ−ピラン−２−オン、δ−オクタラクトン、５−エチルジヒドロ−２（３Ｈ）−フラノン、ブチロラクトン、ジヒドロ−５−ペンチル−２（３Ｈ）−フラノン、ジヒドロ−３−メチレン−２，５−フランジオン、ｌ−ペントイルラクトン、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン、６−ヘプチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン、γ−オクタラクトン、５−ヒドロキシメチルジヒドロフラン−２−オン、５−エチル−２（５Ｈ）−フラノン、５−アセチルジヒドロ−２（３Ｈ）−フラノン、ｔｒａｎｓ−３−メチル−４−オクタノリド２（５Ｈ）−フラノン、３−（１，１−ジメチルエチル）−２，５−ウランジオン、３，４−ジヒドロキシ−５−メチル−ジヒドロフラン−２−オン、５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノン、δ−テトラデカラクトン、およびジヒドロ−４−ヒドロキシ−２（３Ｈ）−フラノンからなる群から選択される、ステップを含む方法。
  76. 前記ラクトンが、５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノン、ブチロラクトン、γ−オクタラクトン、およびδ−テトラデカラクトンである、請求項７５に記載の方法。
  77. 食肉の風味を増すまたは食品中の植物材料からの異臭をマスキングする方法であって、前記食品の０．００００１％から０．１％の間の濃度で、前記食品に１種または複数のカロテノイドを加えるステップであり、前記カロテノイドが、β−カロテン、ゼアキサンチン、ルテイン、ｔｒａｎｓ−β−アポ−８’−カロテナル、リコペン、カンタキサンチン、およびそれらの組合せからなる群から選択される、ステップを含む方法。
  78. 前記食品が、食肉レプリカである、請求項７５〜７７のいずれか一項に記載の方法。
  79. 前記食肉レプリカが、動物性生成物を含まない、請求項７８に記載の方法。
  80. 食肉レプリカの食肉の風味を増す方法であって、前記食肉レプリカに、野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物を、前記食肉レプリカの０．０００１％から１０％までの濃度で前記食肉レプリカに加えるステップを含む方法。
  81. 前記野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物が、ウリ属（Cucumis）液汁、ピューレ、または抽出物である、請求項８０に記載の方法。
  82. 前記ウリ属（Cucumis）液汁、ピューレ、または抽出物が、キュウリまたはメロン由来である、請求項８１に記載の方法。
  83. 前記野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、もしくは果実抽出物を調理し、または前記食肉レプリカに加える前に別の方法で処理して、タンパク質を変性させる、請求項８０〜８２のいずれか一項に記載の方法。
  84. 前記食肉レプリカが、動物性生成物を含まない、請求項８０〜８３のいずれか一項に記載の方法。
  85. 食品の１０−３から１０−１１の濃度でヘム含有タンパク質および１種または複数のラクトンを含む食品または食品レプリカ生成物であって、前記１種または複数のラクトンが、テトラヒドロ−６−メチル−２Ｈ−ピラン−２−オン、δ−オクタラクトン、５−エチルジヒドロ−２（３Ｈ）−フラノン、ブチロラクトン、ジヒドロ−５−ペンチル−２（３Ｈ）−フラノン、ジヒドロ−３−メチレン−２，５−フランジオン、ｌ−ペントイルラクトン、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン、６−ヘプチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン、γ−オクタラクトン、５−ヒドロキシメチルジヒドロフラン−２−オン、５−エチル−２（５Ｈ）−フラノン、５−アセチルジヒドロ−２（３Ｈ）−フラノン、ｔｒａｎｓ−３−メチル−４−オクタノリド２（５Ｈ）−フラノン、３−（１，１−ジメチルエチル）−２，５−ウランジオン、３，４−ジヒドロキシ−５−メチル−ジヒドロフラン−２−オン、５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノン、δ−テトラデカラクトン、およびジヒドロ−４−ヒドロキシ−２（３Ｈ）−フラノンからなる群から選択される、食品または食品レプリカ生成物。
  86. 前記１種または複数のラクトンが、５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノン、ブチロラクトン、γ−オクタラクトン、およびδ−テトラデカラクトンである、請求項８５に記載の食品または食品レプリカ生成物。
  87. 食品の０．００００１％から０．１％の間の濃度でヘム含有タンパク質および１種または複数のカロテノイドを含む食品または食品レプリカ生成物であって、前記１種または複数のカロテノイドが、β−カロテン、ゼアキサンチン、ルテイン、ｔｒａｎｓ−β−アポ−８’−カロテナル、リコペン、カンタキサンチン、およびそれらの組合せからなる群から選択される、食品または食品レプリカ生成物。
  88. 前記食品レプリカ生成物が、食肉レプリカである、請求項８５〜８７のいずれか一項に記載の食品または食品レプリカ生成物。
  89. 前記食肉レプリカが、動物性生成物を含まない、請求項８８に記載の食品または食品レプリカ生成物。
  90. 食品の０．０００１％から１０％までの濃度で（ａ）ヘム含有タンパク質、および（ｂ）野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物を含む、食品または食品レプリカ生成物。
  91. 前記野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物が、ウリ属（Cucumis）液汁、ピューレ、または抽出物である、請求項９０に記載の食品または食品レプリカ生成物。
  92. 前記ウリ属（Cucumis）液汁、ピューレ、または抽出物が、キュウリまたはメロン由来である、請求項９１に記載の食品または食品レプリカ生成物。
  93. 前記野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物を調理し、または前記食品レプリカ生成物に加える前に別の方法で処理してタンパク質を変性させる、請求項９０〜９２のいずれか一項に記載の食品または食品レプリカ生成物。
  94. 前記野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物を、前記食品レプリカ生成物に加える前に約６０℃から約１００℃の温度に加熱した、請求項９３に記載の食品または食品レプリカ生成物。
  95. 前記食品が、動物性生成物を含まない、請求項９０から９４のいずれか一項に記載の食品または食品レプリカ生成物。
  96. 肉の生地、炭水化物系ゲル、非動物脂肪、および結合剤のうちの１種または複数をさらに含む、請求項８５から９５のいずれか一項に記載の食品または食品レプリカ生成物。
  97. 食品の１０−３から１０−１１の濃度で１種または複数のラクトンを含む食品レプリカ生成物であって、前記１種または複数のラクトンが、テトラヒドロ−６−メチル−２Ｈ−ピラン−２−オン、δ−オクタラクトン、５−エチルジヒドロ−２（３Ｈ）−フラノン、ブチロラクトン、ジヒドロ−５−ペンチル−２（３Ｈ）−フラノン、ジヒドロ−３−メチレン−２，５−フランジオン、ｌ−ペントイルラクトン、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン、６−ヘプチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オン、γ−オクタラクトン、５−ヒドロキシメチルジヒドロフラン−２−オン、５−エチル−２（５Ｈ）−フラノン、５−アセチルジヒドロ−２（３Ｈ）−フラノン、ｔｒａｎｓ−３−メチル−４−オクタノリド２（５Ｈ）−フラノン、３−（１，１−ジメチルエチル）−２，５−ウランジオン、３，４−ジヒドロキシ−５−メチル−ジヒドロフラン−２−オン、５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノン、δ−テトラデカラクトン、およびジヒドロ−４−ヒドロキシ−２（３Ｈ）−フラノンからなる群から選択される、食品レプリカ生成物。
  98. 前記１種または複数のラクトンが、５−エチル−４−ヒドロキシ−２−メチル−３（２Ｈ）−フラノン、ブチロラクトン、γ−オクタラクトン、およびδ−テトラデカラクトンである、請求項９７に記載の食品レプリカ生成物。
  99. 食品の０．００００１％から０．１％の間の濃度で１種または複数のカロテノイドを含む食品レプリカ生成物であって、前記１種または複数のカロテノイドが、β−カロテン、ゼアキサンチン、ルテイン、ｔｒａｎｓ−β−アポ−８’−カロテナル、リコペン、カンタキサンチン、およびそれらの組合せからなる群から選択される、食品レプリカ生成物。
  100. 食品の０．０００１％から１０％までの濃度で野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物を含む、食品レプリカ生成物。
  101. 前記野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物が、ウリ属（Cucumis）液汁、ピューレ、または抽出物である、請求項１００に記載の食品レプリカ生成物。
  102. 前記ウリ属（Cucumis）液汁、ピューレ、または抽出物が、キュウリまたはメロン由来である、請求項１０１に記載の食品レプリカ生成物。
  103. 前記野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物を調理し、または前記食品レプリカ生成物に加える前に別の方法で処理してタンパク質を変性させる、請求項１００から１０２のいずれか一項に記載の食品レプリカ生成物。
  104. 前記野菜ジュース、野菜ピューレ、野菜抽出物、果汁、果実ピューレ、または果実抽出物を、前記食品レプリカ生成物に加える前に約６０℃から約１００℃の温度に加熱した、請求項１０３に記載の食品レプリカ生成物。
  105. 前記食品が、動物性生成物を含まない、請求項９７から１０４のいずれか一項に記載の食品レプリカ生成物。
  106. 肉の生地、炭水化物系ゲル、非動物脂肪、および結合剤のうちの１種または複数をさらに含む、請求項９７から１０５のいずれか一項に記載の食品レプリカ生成物。
  107. 食肉レプリカである、請求項９７から１０５のいずれか一項に記載の食品レプリカ生成物。
  108. チーズレプリカである、請求項９７から１０５のいずれか一項に記載の食品レプリカ生成物。
  109. 前記チーズレプリカが、ナッツミルク、架橋結合酵素、またはチーズ培養物を含む、請求項１０８に記載の食品レプリカ生成物。
  110. （ａ）単離された植物タンパク質、任意選択の食用の繊維状構成成分、１種または複数の任意選択の矯味剤、および任意選択の非動物脂肪を含む生地；
    （ｂ）任意選択で矯味剤および／または単離された植物タンパク質を含有する非動物脂肪）；ならびに
    （ｃ）炭水化物系ゲル、結合剤、鉄イオンと錯化された高度に共役した複素環式環および／または鉄塩、任意選択の食用の繊維状構成成分、および１種もしくは複数の任意選択の矯味剤
    を含む、ひき肉レプリカ。
  111. 前記結合剤が、単離された植物タンパク質である、請求項１１０に記載のひき肉レプリカ。
  112. 前記単離された植物タンパク質が、ＲｕＢｉｓＣＯ、アルブミン、グルテン、コングリシニン、またはそれらの混合物である、請求項１１０に記載のひき肉レプリカ。
  113. 前記結合剤の変性温度が、約４０℃から約８０℃の間である、請求項１１０に記載のひき肉レプリカ。
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