JP2016514957A5 - - Google Patents
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- キラーエクスプレッションプロテアーゼ(Kex2p)またはその断片および/もしくは変異体をコードする少なくとも1つの異種核酸配列と、小胞体オキシドレダクチン(Ero1)またはその断片および/もしくは変異体をコードする少なくとも1つの異種核酸配列と、タンパク質ジスルフィドイソメラーゼ(Pdi1)またはその断片および/もしくは変異体をコードする少なくとも1つの異種核酸配列とを含んでなる宿主細胞。
- 前記宿主細胞が培養系で増殖される際に、前記宿主細胞がKex2p、Pdi1およびEro1から選択されるタンパク質またはその断片および/もしくは変異体をコードする前記少なくとも1つの異種核酸配列の少なくとも1つの遺伝子産物を発現または過剰発現する、請求項1に記載の宿主細胞。
- 前記宿主細胞が酵母細胞である、請求項1または2に記載の宿主細胞。
- 前記酵母細胞の属がサッカロミセス、クルイベロミセス、カンジダ、ピキア、シゾサッカロミセス、ハンセヌラ、クロエケラ、シュワンニオミセス、およびヤロウイアからなる群から選択される、請求項3に記載の宿主細胞。
- 前記宿主細胞がS.セレビシエである、請求項1〜4のいずれか一項に記載の宿主細胞。
- 前記宿主細胞が下記遺伝子改変:pep4プロテアーゼノックアウト、野生型宿主細胞に比べて低いubc4および/またはubc5活性、yps1ノックアウト、hsp150ノックアウト、ならびにpmt1ノックアウトのうち少なくとも1つをさらに含んでなる、請求項1〜5のいずれか一項に記載の宿主細胞。
- 組換えポリペプチドをコードする少なくとも1つの核酸を含んでなる、請求項1〜6のいずれか一項に記載の宿主細胞。
- 前記組換えポリペプチドが少なくとも1つのジスルフィド結合を有する、請求項7に記載の宿主細胞。
- 前記組換えポリペプチドがアルブミン融合タンパク質である、請求項7または8に記載の宿主細胞。
- 前記組換えポリペプチドが、アルブミンに遺伝子学的に融合された、GLP−1活性を有する少なくとも1つの治療用ポリペプチドを含んでなる、請求項7〜9のいずれか一項に記載の宿主細胞。
- 前記組換えポリペプチドが、配列番号1に示されるアミノ酸配列と少なくとも95%の配列同一性を有するポリペプチドを有する、請求項7〜10のいずれか一項に記載の宿主細胞。
- 前記組換えポリペプチドが、配列番号1に示されるアミノ酸配列を含んでなる、請求項7〜11のいずれか一項に記載の宿主細胞。
- 前記組換えポリペプチドがリーダー配列を含んでなる、請求項7〜12のいずれか一項に記載の宿主細胞。
- 請求項7〜13のいずれか一項に記載の宿主細胞を培養すること、および、培養培地から前記組換えポリペプチドを回収することを含んでなる、組換えポリペプチドを生産する方法。
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