JP2014510087A5

JP2014510087A5 -

Info

Publication number: JP2014510087A5
Application number: JP2014500218A
Authority: JP
Filing date: 2012-03-23
Publication date: 2015-03-26
Anticipated expiration: 2032-03-23

Claims

植物由来タンパク質または植物由来超構造体タンパク質を回収する方法であって、
ａ．アポプラスト局在性植物由来タンパク質またはアポプラスト局在性植物由来超構造体タンパク質を含む植物または植物質を取得すること、
ｂ．細胞壁が弛緩するように植物または植物質を酵素浸潤または化学的処理によって処理して、弛緩した細胞壁を有する植物または植物質を生産し、それによって、植物由来タンパク質または植物由来超構造体タンパク質を含むアポプラスト画分の放出を可能にすること、および
ｃ．植物由来タンパク質または植物由来超構造体タンパク質を含むアポプラスト画分を回収すること
を含む方法。
処理ステップ（ステップｂ）がソニケーションをさらに含む、請求項１に記載の方法。
化学的処理が、１つまたは２つ以上のキレーター、プロトン供与体、ヒドロキシラジカル、水酸化カリウム、インドール−３−酢酸、イミダゾール、またはそれらの組み合わせによる処理を含む、請求項１に記載の方法。
処理ステップ（ステップｂ）が繰り返される、請求項１に記載の方法。
酵素浸潤が減圧浸潤または加圧浸潤の群から選択される、請求項１に記載の方法。
酵素浸潤が、１つもしくは２つ以上のペクチナーゼ、１つもしくは２つ以上のセルラーゼ、または１つもしくは２つ以上のペクチナーゼと１つもしくは２つ以上のセルラーゼの浸潤を含む、請求項１に記載の方法。
キレーターが、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）またはエチレングリコール四酢酸（ＥＧＴＡ）である、請求項３に記載の方法。
酵素浸潤が、リパーゼ、プロテアーゼまたはペクチナーゼの１つ以上の浸潤を含まない、請求項１に記載の方法。
取得ステップ（ステップａ）において、植物が、ペプチド、タンパク質、タンパク質ロゼット、タンパク質複合体、プロテアソーム、メタボロン、転写複合体、組換え複合体、光合成複合体、膜輸送複合体、核膜孔複合体、タンパク質ナノ粒子、糖タンパク質、抗体、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、一本鎖モノクローナル抗体、ウイルス様粒子、ウイルスエンベロープタンパク質、ウイルス構造タンパク質、ウイルスキャプシドタンパク質、およびウイルスコートタンパク質、キメラタンパク質、キメラタンパク質複合体、キメラタンパク質ナノ粒子、キメラ糖タンパク質、キメラ抗体、キメラモノクローナル抗体、キメラ一本鎖モノクローナル抗体、キメラヘマグルチニン、ウイルスエンベロープタンパク質、ウイルス構造タンパク質、ウイルスキャプシドタンパク質、およびウイルスコートタンパク質の群から選択されるタンパク質または超構造体タンパク質をコードする核酸配列で形質転換され、植物または植物質が収穫される、請求項１に記載の方法。
核酸が一過性に植物に導入される、請求項９に記載の方法。
核酸が植物のゲノム内に安定に組み込まれる、請求項９に記載の方法。
取得ステップ（ステップａ）において、植物を生長させ、植物または植物質が収穫される、請求項１に記載の方法。
核酸がモノクローナル抗体またはインフルエンザヘマグルチニンをコードする、請求項９に記載の方法。
植物由来タンパク質または超構造体タンパク質がノイラミニダーゼもＭタンパク質も含まない、請求項１に記載の方法。
植物質が葉および培養植物細胞の群から選択される、請求項１に記載の方法。
植物質が全葉を含む、請求項１に記載の方法。
ｄ）アポプラスト内容物画分から植物由来タンパク質または超構造体タンパク質を精製するステップをさらに含む、請求項１に記載の方法。
ｄ）精製ステップが、深層濾過を使ってアポプラスト内容物画分を濾過することで、清澄化抽出物を生産し、次にサイズ排除クロマトグラフィー、陽イオン交換樹脂もしくはアフィニティークロマトグラフィー、またはそれらの組み合わせを使って清澄化抽出物のクロマトグラフィーを行うことを含む、請求項１７に記載の方法。
ｄ）アポプラスト内容物画分中のタンパク質または超構造体タンパク質を細胞破片および不溶物から分離するステップをさらに含む、請求項１に記載の方法。
ｄ）分離ステップが、遠心分離、深層濾過、またはそれらの組み合わせによって行われる、請求項１９に記載の方法。
酵素浸潤が中性ｐＨで行われる、請求項１に記載の方法。