JP2010528297A - 統合された電気化学的検出および電気的検出のためのシステムおよび方法 - Google Patents
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- G01N27/3277—Sensing specific biomolecules, e.g. nucleic acid strands, based on an electrode surface reaction being a redox reaction, e.g. detection by cyclic voltammetry
Abstract
Description
本出願は、2007年5月23日に出願された「Systems and Methods for Integrated Electrochemical and Electrical Detection」という名称の米国特許仮出願第60/939,738号の優先権を主張するとともに、同仮出願を参照により組み入れるものである。
本発明は、概してセンサに関し、より詳細には、統合された電気化学的検出および電気的検出のためのシステムならびに方法に関する。
電気化学センサは、生物学的検体の濃度を検出するために、様々な化学および医療への応用に用いられている。しかし、本発明者らは、電気化学的検出に問題がないわけではないと認識している。例えば、不十分な濃度の検体が提供された場合、センサの作用電極と対極の間に流れる電流は検出不可能である。検出される検体の量はセンサを流れる電流に正比例するので、わずかな検体濃度では測定不可能となり得る。
本発明ならびに様々な特徴および有利な細部について、添付図面に例示されかつ以下の説明で詳述される非限定的な態様を参照しながらより十分に説明する。周知の出発物質、加工技術、構成要素、および機器の説明は、本発明を細部にわたって不必要に曖昧にしないように省略されている。しかし、詳細な説明および特定の実施例は、本発明の態様を示しながら、例示として与えられるにすぎず、限定するためではないことが理解されるべきである。基礎となる発明概念の精神および/または範囲内にある様々な置換、改変、追加、ならびに/または再配置が、当業者には本開示から明らかになる。
I2、ec=I2-Id 式1
ここで、I2は、図1に描かれているようにWE2からの電流である。
図3Aを参照すると、検体Aが電気化学的に活性でありかつ装置表面に不可逆的に到達したとき、この検体は、導電性または半導体材料(「導電性または半導体ブリッジ」)のコンダクタンスを改変し、WE2上で電気化学的に不可逆的に還元または酸化されて、独立したドレイン電流(Id)および電気化学電流(I2、ec)の変化をもたらすことができる。一例が、アスコルビン酸の検出である。
図3Bを参照すると、検体Aは、導電性もしくは半導体材料中でBに化学的に変換され得るとともに、電気化学的に酸化もしくは還元して別の生成物Cになるか、またはBに戻る(それが電気化学的可逆性種である場合)ことができる。AからBへの化学変換は、導電性もしくは半導体ブリッジの化学修飾によって、または導電性もしくは半導体ブリッジの原材料がAからの酸化還元変化に対して感受性である場合に、誘導され得る。
図3Cを参照すると、検体Aは、電気化学的に酸化または還元されることができ(EC検出)、電気化学生成物Bは、導電性材料上で検出され得る(E検出)。例えば、この反応経路は、導電性もしくは半導体材料ブリッジを酸化または還元させ得る中間還元生成物を生成するニトロ爆発物を検出するために使用され得る。追加として、または別法として、可逆的もしくは準可逆的酸化還元を含み得る検体Aの電気活性化合物の検出は、電気化学的に活性(A')でもあるが、不可逆的に酸化または還元される干渉の存在下において特徴的である。この条件下では、対象となる検体(A)から来る電気化学的活性な生成物(B)だけが、電気的に検出され得る。例えば、低いドーパミン濃度(約数百nM〜約数マイクロモル程度)を、高濃度(mM程度)のアスコルビン酸、尿酸または他の類似の干渉物の存在下で検出することができる。この検出方式は、電気化学的に支援された電気的検出と呼ばれる。
図3Dを参照すると、検体Aは、メディエータM、続いて上述の図3A〜3Cに記載されているように検出されたECおよびEの支援で化学的に変換され得る。化学的メディエータは、支持電解質(SE)中に溶解されてもよく、または電極もしくはチップ表面上に固定されてもよい。ある点では、検体Aは、アセトンであってよく、ヒドロキシルアミンをメディエータとして使用して電気化学に活性なオキシム誘導体を生成することで検出され得る。
図3Eを参照すると、検体Aは、触媒ターゲットであってよい。無機または生体触媒が、触媒の再生のために電子を注入することができる大きい方の電極(例えばWE2)に化学的に接続され得る。触媒生成物の副生成物は、検出の感受性が触媒効果によって増大し得る場合、導電性または半導体材料上で検出され得る。触媒の組合せがこの応用例を拡大できることに留意されたい。例えば、アルデヒドおよびアルコールの検出は、WE2上に固定されたキノ-デヒドロゲナーゼを使用して行うことができる。これらの酵素は、pH感受性導電性材料のコンダクタンスを増大させ得る酸生成物を生成する。
図3Fを参照すると、電極および導電性材料は、電気化学的に活性であり得る検体を選択的に捕捉することができる有機分子、バイオミミック、または生物学的認識素子で修飾され得る。WE2上の活性認識層は、化学的に酸化または還元され得る、検体の予備濃縮器として働く。導電性または半導体材料上での検体の認識は、コンダクタンスの変化として変換され得る、立体構造、電荷、またはpHの変化を誘導することができる。この特定のケースは、例えばペプチドをプローブとして使用する重金属イオンの検出に適用され得る。
図3Gを参照すると、EC-E検出の応用例と組み合わされた免疫アッセイに使用される多くのホルモンおよび腫瘍マーカーの検出のための、市販されている酵素による標識は、検出性能を高めるとともに、計測を簡単にすることができる。ペルオキシダーゼおよびアルカリホスファターゼなどの一般的に使用されている酵素で標識されたプローブが、試料のインキュベーションを含んで、EC-E装置上に固定された抗体から酵素生成物を検出するために使用され得る。洗浄および酵素反応物の添加後、酵素の存在は、酵素生成物の電気化学的検出および導電性または半導体材料の酸化によるコンダクタンスの変化によって現れ得る。標識されていないプローブが、導電性材料上に、特にWE1およびWE2を架橋する領域内に固定される場合には、コンダクタンスの変化は、試料のインキュベーション中に直接検出することができる。後のEC-E検出を続いて行ってもよい。
以下の実施例は、本開示の特定の態様を実証するために含まれる。以下の実施例で開示される技術は、本発明の実施に際して機能するように発明者らによって発見された技術を提示するものであり、したがって本発明の実施のための特定モードを構成すると考えられ得ることが、当業者によって理解されるべきである。しかし、当業者であれば、本開示に照らして、開示される特定の態様において多くの変更がなされ得ることを理解するとともに、本発明の範囲から逸脱することなく、同じまたは類似の結果を依然として得るはずである。
Claims (19)
- 基板上に製作された第1の電極と;
該基板上に製作されかつ該第1の電極から離間された第2の電極と;
前記第1の電極を該第2の電極に結合する架橋材料と;
電解質と;
対極と;
参照電極と
を備える、前記電極の少なくとも1つが、使用中に電気化学的-電気的制御および/または測定をするための電子回路に接続されている、電気化学-電気(EC-E)センサ。 - 第1の電極が、使用中に前記第1の電極に電位摂動を印加するための電子回路に接続されている、請求項1記載のセンサ。
- 電子回路がバイオポテンショスタット(biopotentiostat)である、請求項2記載のセンサ。
- 対極が基板上に製作される、前記請求項のいずれか一項記載のセンサ。
- 参照電極が、基板上に製作される、前記請求項のいずれか一項記載のセンサ。
- 架橋材料が基板上に製作される、前記請求項のいずれか一項記載のセンサ。
- 第1および第2の電極から離れて配置される第3の電極をさらに備える、前記請求項のいずれか一項記載のセンサ。
- 第3の電極が、使用中に電気化学的制御および/または測定をするために利用される、請求項7記載のセンサ。
- 第1および第2の電極が、使用中にコンダクタンスの測定をするために利用される、請求項7または8記載のセンサ。
- 電子回路が、トリポテンショスタットである、請求項7〜9のいずれか一項記載のセンサ。
- 第2の電極と第1の電極との間の表面積比により、前記第2の電極上で起こる電気化学プロセスおよび前記第1と第2の電極間の電気的性質を同時に制御および/または測定することが可能になる、前記請求項のいずれか一項記載のセンサ。
- 架橋材料が、ポリマー、Si、GaAs、金属酸化物、ならびに他の有機および無機半導体、ナノ構造物、分子インプリント材料、ならびにポリマーおよび導電性または半導体材料で作られた複合体を含む、前記請求項のいずれか一項記載のセンサ。
- 架橋材料が、ナノチューブ、ナノワイヤ、ナノ粒子、ナノロッド、およびナノベルトを含む、前記請求項のいずれか一項記載のセンサ。
- 請求項1〜13のいずれか一項記載のEC-Eセンサを提供する段階と;
検体を提供する段階と;
副生成物を検出する段階と;
導電性もしくは半導体材料のコンダクタンスおよび/または電流を決定する段階と;
電気化学信号を決定する段階と;
前記コンダクタンスおよび前記電気化学信号を利用して前記検体を検出する段階と
を含む、方法。 - コンダクタンスおよび/または電流が、第1の電極を使用して測定される、請求項14記載の方法。
- 電気化学信号が、第2の電極を使用して測定される、請求項14または15記載の方法。
- 第2の電極と第1の電極との間の表面積比を調整してEC-Eセンサの性能を最適化する段階をさらに含む、請求項14〜16のいずれか一項記載の方法。
- 検体が気相分子を含む、請求項14〜17のいずれか一項記載の方法。
- 検体が液相分子を含む、請求項14〜18のいずれか一項記載の方法。
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Devlin et al. | Novel pH sensor based on anthraquinone–ferrocene modified free standing gold nanowire array electrode |
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