JP2010078559A - Fluorescence analyzer and method - Google Patents

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Inventor
Makoto Katayama
Sadafumi Otsuka
節文 大塚
誠 片山
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Sumitomo Electric Ind Ltd
住友電気工業株式会社
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a fluorescence analyzer and a method such that by modulating exciting light to different modulation modes and by adopting configuration capable of separating fluorescence signal from each sample with modulation modes, the apparatus is made to be capable of lowering cost as well as electrical power consumption, while miniaturizing the analyzer to be portable.
SOLUTION: The fluorescence analyzer analyzing simultaneously a plurality of samples containing fluorescence labels includes an exciting light generating means 1 for generating a plurality of exciting lights with different modulation modes, an irradiating optical system 2 for irradiating a plurality of the exciting lights to each of different samples, a spectral optical system 3 for implementing spectroscopy of the fluorescence generated at each of the samples to each fluorescence wavelength of the fluorescence label, and a light receiving means 4 for receiving light implemented spectroscopy by the spectral optical system 3, and is characterized by implementing demodulation of the signal of the light receiving means 4 corresponding to the modulation modes to isolate fluorescence signals from different samples, because modulation modes of a plurality of the exciting lights is in orthogonality relation each other.
COPYRIGHT: (C)2010,JPO&INPIT

Description

本発明は、蛍光標識を含む複数の試料(特に、ディオキシリボ核酸(DNA)試料)を同時分析する蛍光分析装置および方法に関する。 The present invention, a plurality of samples (in particular, deoxyribonucleic acid (DNA) sample) that contains a fluorescent label relating fluorescence analysis apparatus and method for simultaneously analyzing.

近年、遺伝子診断や創薬などの生化学分野において、大型の蛍光分析装置を用いて、ゲノム解析などにおいて大量解析が行われてきた。 In recent years, in the field of biochemistry, such as gene diagnosis and drug discovery, using a fluorescence analyzer of large, large amount of analysis such as in genome analysis has been carried out. また血液検査やイムノアッセイなどの免疫検査分野においても、大型の蛍光分析装置を用いて、臨床・受託検査などが行われてきた。 Also in immunoassay areas such as blood tests and immunoassays, using a fluorescent analyzer large, such as clinical and contract inspection has been carried out.

特開2007−315772 Patent 2007-315772

しかし、従来の蛍光分析装置は、特許文献1にも記載されているように、励起光源にアルゴンレーザを用い、検出器に光電子像倍管などを用いているため、装置が大型化すると共に高コスト化し、また装置の消費電力が数KWにも達していた。 However, the conventional fluorescent analyzer, as described in Patent Document 1, an argon laser with an excitation light source, due to the use of such a photomultiplier detector, high with device becomes large and costs, also the power consumption of the device has reached to several KW.
本発明は、上記の問題点に鑑み、励起光を異なる変調モードに変調して、各試料からの蛍光信号を変調モードにより分離できる構成を採用することにより、装置を小型化して携帯可能とすると共に低コスト化し、かつ低消費電力化することを可能にした蛍光分析装置および方法を提供することを目的とする。 In view of the above problems, by modulating the excitation light to different modulation modes, by adopting the structure that can be separated by a fluorescence signal modulation mode from each sample, to allow the mobile to reduce the size of the device with low cost and, and an object of the invention to provide a fluorescence analysis apparatus and methods made it possible to lower power consumption.

上記目的を達成するため、本発明は以下の構成を有する。 To achieve the above object, the present invention has the following configuration.
蛍光標識を含む複数の試料を同時分析する蛍光分析装置であって、異なる変調モードを有する複数の励起光を発生する励起光発生手段と、前記複数の励起光をそれぞれ異なる試料に照射する照射光学系と、前記試料のそれぞれで発生した蛍光を蛍光標識の蛍光波長ごとに分光する分光光学系と、前記分光光学系で分光された光を受光する受光手段とを有し、前記複数の励起光の変調モードはそれぞれ直交関係にあり、前記受光手段の信号を前記変調モードで復調することにより、異なる試料からの蛍光信号を分離する、ことを特徴とする、蛍光分析装置。 A fluorescent analyzer for simultaneously analyzing a plurality of samples containing fluorescent labels, and the excitation light generating means for generating a plurality of excitation light having a different modulation modes, illumination optics for irradiating the plurality of excitation light to different samples, respectively It has a system, fluorescence and spectroscopic optical system for splitting each fluorescence wavelength of the fluorescent label generated in each of the sample, and a light receiving means for receiving the light dispersed by the spectroscopic optical system, the plurality of excitation light modulation mode is in an orthogonal relationship, respectively, by demodulating the signal of the light receiving means in the modulation mode, to separate the fluorescence signals from different samples, and wherein the fluorescence analyzer.

この発明の構成によれば、蛍光標識を含む複数の試料(例えば、複数のキャピラリーを通過する試料)からの蛍光を同時に分析することができる。 According to this structure, it is possible to analyze a plurality of samples containing fluorescent labels (e.g., sample passing through a plurality of capillaries) the fluorescence from the same time. 励起光を異なる変調モードで変調し、それぞれの励起光を異なる試料に照射し、受光した蛍光信号をそれぞれの変調モードで復調することにより、異なる試料からの蛍光信号を分離することができる。 Modulates the excitation light with different modulation modes is irradiated with each of the excitation light to different samples, by demodulating received fluorescence signal at each modulation mode, it is possible to separate the fluorescence signals from different samples. 励起光を異なる変調モードで変調して、各試料からの蛍光信号を変調モードにより分離できる構成にしたので、光学系を簡素化することができ、装置を小型化することができる。 By modulating the excitation light in a different modulation mode, since the fluorescence signal can be separated by the modulation mode configuration from each sample, it is possible to simplify the optical system, it is possible to miniaturize the apparatus.

また、好ましい実施態様として、以下のものがある。 As a preferred embodiment, it is as follows.
前記分光光学系によって分光された複数の試料からの光を、前記蛍光標識の蛍光波長ごとに合成する合成光学系をさらに有し、 The light from the plurality of samples that have been dispersed by the spectroscopic optical system, further comprising a combining optical system for combining for each fluorescence wavelength of the fluorescent label,
前記受光手段は、前記合成光学系により合成された前記蛍光標識の蛍光波長ごとの光を受光する。 It said light receiving means receives light for each fluorescence wavelength of the fluorescent-labeled synthesized by the synthesizing optical system.

複数の試料からの光を蛍光標識の蛍光波長ごとに合成することにより、各蛍光波長ごとの光量を大きくすることができ、受光手段におけるS/N比が向上する。 By combining light from a plurality of samples for each fluorescence wavelength of the fluorescent label, it is possible to increase the amount of light for each fluorescence wavelength, thereby improving the S / N ratio in the photodetecting means. 試料が例えばディオキシリボ核酸(DNA)試料の場合、蛍光標識は4種類(ATGC)なので、同時分析する複数の試料中、2つ以上の試料で同じ蛍光波長の蛍光標識が含まれている確率は非常に高い。 If the sample is, for example, deoxyribonucleic acid (DNA) samples, fluorescent labels is 4 types (ATGC), a plurality of samples to be simultaneously analyzed, the probability that fluorescent labels having the same fluorescence wavelength on two or more samples is very high. 違う試料からの蛍光は異なる変調モードを有しているが、これらを合成すれば蛍光の平均光量は大きくなる。 Fluorescence from different samples have different modulation mode, but the average amount of fluorescence increases when combining them. 平均光量が大きくなれば、受光手段において暗雑音の影響を受けにくくなり、S/N比が向上する。 The larger the average amount of light, less susceptible to background noise in the light receiving unit, to improve the S / N ratio. 合成された各蛍光波長ごとの信号は、各試料に照射した励起光の変調モードで復調することにより、各試料ごとの蛍光信号に分離できる。 Signals for each fluorescence wavelength synthesized by demodulating the modulation mode of the excitation light irradiated to each sample, can be separated into the fluorescence signal for each sample.

前記励起光発生手段の励起光源は、レーザーダイオードであり、 Excitation light source of the excitation light generating means is a laser diode,
レーザーダイオードに印加する電流を変調することにより、異なる変調モードを有する励起光を発生させる。 By modulating the current applied to the laser diode, to generate excitation light having a different modulation mode.

励起光発生手段の励起光源に、レーザーダイオードを用いれば、レーザーダイオードに印加する電流を変調することにより励起光を変調することができる。 An excitation light source of the excitation light generating unit, by using the laser diode can be modulated excitation light by modulating the current applied to the laser diode.

前記変調モードは、直交符号系列である。 The modulation mode is an orthogonal code sequence.

変調モードとして直交符号系列を用いれば、デジタル的に変調ができるので、励起光の変調が容易になる。 With the orthogonal code sequence as the modulation mode, since it is digitally modulated it facilitates modulation of the excitation light. また、デジタル系列なので、ビット数を増やすことでそれぞれが直交関係にある符号列の種類を増やすことができる。 Furthermore, since digital-series, respectively by increasing the number of bits can be increased the types of code strings having an orthogonal relationship.
直交符号系列としては、例えば、ウォルシュ系列、M系列などがある。 The orthogonal code sequence include, for example, Walsh sequence, M sequence.

前記複数の試料は、複数のキャピラリーを通過する試料である。 Wherein the plurality of sample is a sample passing through a plurality of capillaries.

DNAシーケンサーとして用いる場合は、前記試料は蛍光標識されたDNA試料であり、キャピラリー中を電気泳動により移動させて、測定点を通過する試料の蛍光を測定する。 When used as a DNA sequencer, the sample is a DNA sample that has been fluorescently labeled, the capillary is moved by electrophoresis, to measure the fluorescence of the sample passing through the measurement point.

前記分光光学系は、少なくとも回折光学素子を有する。 It said spectroscopic optical system includes at least a diffractive optical element. 回折光学素子としては、例えば、回折格子、グリズムやホログラフィック分光素子などがある。 The diffractive optical element, for example, there is such as a diffraction grating, grism or holographic spectral element.

前記受光手段の受光源は、フォトダイオードであり、 Receiving source of the light receiving means is a photodiode,
前記フォトダイオードは、蛍光標識の蛍光波長ごとに1個ずつ設けられている。 The photodiode is provided one for each fluorescence wavelength of the fluorescent label. フォトダイオードとしては、例えばアバランシェフォトダイオード(APD)などがある。 The photodiode, for example, there is such an avalanche photodiode (APD).

前記試料は、蛍光標識されたDNA試料である。 The sample is a fluorescent-labeled DNA sample.

蛍光標識を含む複数の試料を同時分析する蛍光分析方法であって、異なる変調モードを有する複数の励起光を発生する励起光発生ステップと、前記複数の励起光をそれぞれ異なる試料に照射する照射ステップと、前記試料のそれぞれで発生した蛍光を、蛍光標識の蛍光波長ごとに分光して受光する受光ステップとを有し、前記複数の励起光の変調モードはそれぞれ直交関係にあり、前記受光ステップの信号を前記変調モードで復調することにより、異なる試料からの蛍光信号を分離する、ことを特徴とする、蛍光分析方法。 A fluorescence analysis method for simultaneously analyzing a plurality of samples containing fluorescent labels, irradiating step of irradiating an excitation light generation step of generating a plurality of excitation light having a different modulation modes, wherein the plurality of excitation light to different samples, respectively When, the fluorescence generated in each of the sample, and a light receiving step of receiving spectrally each fluorescence wavelength of the fluorescent label, modulation mode of the plurality of excitation light is in orthogonal relationship each of said light receiving step by demodulating the signal in the modulation mode, to separate the fluorescence signals from different samples, characterized in that, fluorescence analysis method.

本発明によれば、装置を小型軽量化して携帯可能とすると共に低コスト化し、低消費電力化することができる。 According to the present invention, it is possible with a portable and compact and lightweight apparatus with low cost and low power consumption.

本発明の一実施形態を図1を用いて説明する。 An embodiment of the present invention will be described with reference to FIG.
図1は、本発明に係る蛍光分析装置の概略構成を示す図である。 Figure 1 is a diagram showing a schematic configuration of a fluorescence analysis apparatus according to the present invention.
同図に示すように、この蛍光分析装置は、主として、異なる変調モードを有する複数の励起光を発生する励起光発生手段1と、前記複数の励起光をそれぞれ異なる試料に照射する照射光学系2と、前記試料のそれぞれで発生した蛍光を蛍光標識の蛍光波長ごとに分光する分光光学系3と、分光光学系3で分光された光を受光する受光手段4と、受光手段2の信号を前記変調モードで復調し、異なる試料からの蛍光信号を分離する信号処理手段5とを備えている。 As shown in the figure, the fluorescence analysis apparatus, primarily, an excitation light generating means 1 for generating a plurality of excitation light having a different modulation modes, the irradiation optical system for irradiating the plurality of excitation light to different samples, respectively 2 When, the spectral optical system 3 which disperses the fluorescence generated in each of the sample for each fluorescent wavelength of the fluorescent label, a light receiving means 4 for receiving the light dispersed by the spectroscopic optical system 3, a signal of the light receiving unit 2 above demodulated by the modulation mode, and a signal processing unit 5 for separating the fluorescence signals from different samples.

励起光発生手段1における励起光源は、レーザーダイオード11であり、レーザーダイオード11に流す電流を変調することにより、レーザーダイオード11から異なる変調モード、例えば、直交符号列を有する励起光を発生させる。 Excitation light source at the excitation light generating means 1, a laser diode 11, by modulating the current applied to the laser diode 11, the modulation mode from the laser diode 11 varies, for example, to generate excitation light having an orthogonal code sequence. 変調された励起光は、ファイバー12によって伝導されて、1次元ファイバーアレイと顕微対物レンズとの結合部13を介して照射光学系2に入射される。 Excitation light modulated is being conducted by the fiber 12, is incident on the illumination optical system 2 via the coupling portion 13 of the one-dimensional fiber array and microscopic objective lens. なお、レーザーダイオード11は、特に青色レーザーダイオードが好ましいが、これに限定されず、試料から蛍光を生じさせる波長域の光を発する光源ならば何でも良い。 Incidentally, the laser diode 11, particularly it is preferred that a blue laser diode, without being limited thereto, any good if a light source which emits light in the wavelength region causing fluorescence from the sample. また、励起光の変調は、光源そのものの明るさを変調させても良いし、光源から発した光をオプティカル・チョッパや光変調素子などを用いて変調しても良い。 The modulation of the excitation light to the brightness of the light source itself may be modulated, or by modulating light emitted from a light source by using an optical chopper and the optical modulation element. また、変調モードは、互いに直交関係にあり信号分離可能な変調モードであれば何でも良く、直交符号系列が好ましいがこれに限定されるものではない。 The modulation mode does not often anything if there signals separable modulation modes orthogonal to each other, orthogonal but code sequence is preferably limited thereto.

照射光学系2に入射された複数の励起光は、ダイクロイックミラー21によって反射されて、顕微対物レンズ22に入射される。 A plurality of excitation light incident on the irradiation optical system 2 is reflected by the dichroic mirror 21, is incident on the microscope objective lens 22. 顕微対物レンズ22から出射した複数の変調された励起光は、キャピラリー23上の蛍光標識を含む複数の試料に同時に照射される。 A plurality of modulated excitation light emitted from the microscope objective lens 22 is irradiated simultaneously to a plurality of samples containing fluorescent label on the capillary 23. 複数の試料は、複数のキャピラリー23を通過する試料が好ましいが、これに限定されず、DNAチップ上の複数の試料などでも良い。 A plurality of sample is a sample which passes through a plurality of capillaries 23 are preferred, the present invention is not limited thereto, may be such as multiple samples of the DNA chip. この場合は、DNAチップを移動させるステージ装置などがあると好ましい。 In this case, preferably the like stage device for moving the DNA chip. 複数の各試料に励起光を照射することにより、各試料から蛍光が放射される。 By irradiating excitation light into a plurality of each sample, the fluorescence is emitted from each sample. 各試料から放射された蛍光は、顕微対物レンズ22、ダイクロイックミラー21を介して、分光光学系3に入射される。 Fluorescence emitted from each sample, microscope objective lens 22, through the dichroic mirror 21, is incident on the spectroscopic optical system 3.

分光光学系3に入射された、それぞれの試料において発生した蛍光は、回折格子31等の分光手段によって、蛍光標識、例えば、試料がDNA試料の場合、ATGCの4種類、の波長ごとに分光され、顕微対物レンズ32を介して受光手段4に出射される。 Incident on the spectroscopic optical system 3, the fluorescence generated in each sample by spectroscopic means such as a diffraction grating 31, a fluorescent label, for example, if the sample is a DNA sample, is dispersed every four, the wavelength of the ATGC , and is emitted to the light receiving means 4 through the microscope objective lens 32. なお、同図における回折格子31と回折格子31、及び顕微対物レンズ32と顕微対物レンズ32は、それぞれ同一のものを指しており、互いに90°ずれた位置から見たものである。 The diffraction grating 31 and the diffraction grating 31 in the same figure and microscopic objective lens 32 and the microscope objective lens 32, is referring to the same thing, respectively, viewed from a position shifted 90 ° from each other.

分光光学系3から出射された分光は、顕微対物レンズと2次元ファイバーアレイとの結合部41を介して受光手段4に入射される。 Spectral emitted from the spectroscopic optical system 3 is incident on the light receiving means 4 through the coupling portion 41 of the microscope objective lens and the two-dimensional fiber array. 4本のファイバー42〜45は、複数の試料からの光を、例えば、ATGCの4種類の蛍光標識の蛍光波長ごとに分岐されたものであり、さらに、各ファイバー42〜45は、ファイバー42に示すように、例えば、合成光学系としての4本のファイバー42a〜42dから構成される。 Four fiber 42 to 45, the light from a plurality of samples, for example, which is branched for each fluorescence wavelength of the four fluorescent labels ATGC, In addition, each fiber 42-45 is a fiber 42 as shown, for example, a four fiber 42a~42d as combining optical system. 1種類の蛍光標識について、複数本のファイバー42a〜42dを設け、各蛍光標識を蛍光波長成分ごとに複数本のファイバー42a〜42dで合成することにより、各蛍光波長ごとの光量を大きくすることができ、後述するフォトダイオード46〜49におけるS/N比を向上させることができる。 For one kind of fluorescent label, provided a plurality of fibers 42 a to 42 d, by combining a plurality of lines of fibers 42 a to 42 d for each respective fluorescent labeling fluorescent wavelength components, is possible to increase the amount of light for each fluorescence wavelength can, it is possible to improve the S / N ratio in the photodiode 46 to 49 to be described later. 4本のファイバー42〜45において、複数の試料からの光を4種類の蛍光標識の蛍光波長ごとに合成された光は、4種類の蛍光標識の蛍光波長に対応する4個の受光源としてのフォトダイオード46〜49に入射され、電気信号に変換される。 In four fiber 42-45, light is synthesized for each fluorescence wavelength of the four fluorescent label with light from a plurality of samples, as four light receiving sources corresponding to the fluorescence wavelength of the four kinds of fluorescent-labeled is incident on the photodiode 46 to 49, is converted into an electric signal.

受光手段4のフォトダイオード46〜49から出力された電気信号は、信号処理手段5に入力される。 Electrical signal output from the photodiode 46 to 49 of the light receiving means 4 is input to the signal processing unit 5. 信号処理手段5おいては、入力された電気信号を前記変調モードに対応した復調を行い、異なる試料からの蛍光信号を分離することにより、所望の信号を取得することができる。 Signal processing means 5 Oite demodulates the electric signal inputted corresponding to the modulation mode, by separating the fluorescence signals from different samples, it is possible to obtain the desired signal.

本発明に係る蛍光分析装置の概略構成を示す図である。 It is a diagram showing a schematic configuration of a fluorescence analysis apparatus according to the present invention.

符号の説明 DESCRIPTION OF SYMBOLS

1 励起光発生手段11 レーザーダイオード12 ファイバー13 1次元ファイバーアレイと顕微対物レンズとの結合部2 照射光学系21 ダイクロイックミラー22 顕微対物レンズ23 キャピラリー3 分光光学系31 回折格子32 顕微対物レンズ4 受光手段41 顕微対物レンズと2次元ファイバーアレイとの結合部42〜45 ファイバー42a〜42d ファイバー46〜49 フォトダイオード5 信号処理手段 First pumping light generating means 11 laser diode 12 fiber 13 1-dimensional fiber array and microscopic objective lens and the coupling portion 2 illumination optical system 21 dichroic mirror 22 microscope objective lens 23 capillary 3 spectroscopic optical system 31 diffraction grating 32 microscope objective lens 4 light receiving means 41 microscopic objective lens and the 42-45 junction of the two-dimensional fiber array fiber 42a~42d fiber 46-49 photodiode 5 signal processing means

Claims (9)

  1. 蛍光標識を含む複数の試料を同時分析する蛍光分析装置であって、 A fluorescent analyzer for simultaneously analyzing a plurality of samples containing fluorescent labels,
    異なる変調モードを有する複数の励起光を発生する励起光発生手段と、 An excitation light generating means for generating a plurality of excitation light having a different modulation modes,
    前記複数の励起光をそれぞれ異なる試料に照射する照射光学系と、 An irradiation optical system for irradiating the plurality of excitation light to different samples, respectively,
    前記試料のそれぞれで発生した蛍光を蛍光標識の蛍光波長ごとに分光する分光光学系と、 Fluorescence and spectroscopic optical system for splitting each fluorescence wavelength of the fluorescent label generated in each of the sample,
    前記分光光学系で分光された光を受光する受光手段と、を有し、 Anda light receiving means for receiving the light dispersed by the spectroscopic optical system,
    前記複数の励起光の変調モードはそれぞれ直交関係にあり、 Modulation mode of the plurality of excitation light is in a perpendicular relationship, respectively,
    前記受光手段の信号を前記変調モードで復調することにより、異なる試料からの蛍光信号を分離する、 By demodulating the signal of the light receiving means in the modulation mode, to separate the fluorescence signals from different samples,
    ことを特徴とする、蛍光分析装置。 And wherein the fluorescence analyzer.
  2. 前記分光光学系によって分光された複数の試料からの光を、前記蛍光標識の蛍光波長ごとに合成する合成光学系をさらに有し、 The light from the plurality of samples that have been dispersed by the spectroscopic optical system, further comprising a combining optical system for combining for each fluorescence wavelength of the fluorescent label,
    前記受光手段は、前記合成光学系により合成された前記蛍光標識の蛍光波長ごとの光を受光する、 It said light receiving means receives light for each fluorescence wavelength of the fluorescent-labeled synthesized by the synthesis optical system,
    ことを特徴とする、請求項1記載の蛍光分析装置。 And wherein the fluorescence analyzer according to claim 1.
  3. 前記励起光発生手段は、少なくともレーザーダイオードを有し、 The excitation light generating means includes at least a laser diode,
    前記レーザーダイオードに流す電流を変調することにより、異なる変調モードを有する励起光を発生させる、 By modulating the current applied to the laser diode, to generate excitation light having a different modulation modes,
    ことを特徴とする、請求項1または2記載の蛍光分析装置。 And wherein the fluorescence analyzer according to claim 1 or 2 wherein.
  4. 前記変調モードは、直交符号系列である、 The modulation mode is an orthogonal code sequence,
    ことを特徴とする、請求項1〜3いずれか記載の蛍光分析装置。 And wherein the fluorescence spectrometer according to any one of claims 1 to 3.
  5. 前記複数の試料は、複数のキャピラリーを通過する試料である、 Wherein the plurality of sample is a sample passing through a plurality of capillaries,
    ことを特徴とする、請求項1〜4いずれか記載の蛍光分析装置。 And wherein the fluorescence spectrometer according to any one of claims 1 to 4.
  6. 前記分光光学系は、少なくとも回折光学素子を有する、 It said spectroscopic optical system includes at least a diffractive optical element,
    ことを特徴とする、請求項1〜5いずれか記載の蛍光分析装置。 And wherein the fluorescence spectrometer according to any one of claims 1 to 5.
  7. 前記受光手段は、少なくともフォトダイオードを有し、 The light receiving means has at least a photodiode,
    前記フォトダイオードは、蛍光標識の蛍光波長ごとに1個ずつ設けられている、 The photodiode is provided one for each fluorescence wavelength of the fluorescent label,
    ことを特徴とする、請求項1〜6いずれか記載の蛍光分析装置。 And wherein the fluorescence spectrometer according to any one of claims 1 to 6.
  8. 前記試料は、蛍光標識されたディオキシリボ核酸試料である、 The sample is a deoxyribonucleic nucleic acid sample that has been fluorescently labeled,
    ことを特徴とする、請求項1〜7いずれか記載の蛍光分析装置。 And wherein the fluorescence spectrometer according to any one of claims 1 to 7.
  9. 蛍光標識を含む複数の試料を同時分析する蛍光分析方法であって、 A plurality of samples containing fluorescence-labeled A fluorescence analysis method for simultaneous analysis,
    異なる変調モードを有する複数の励起光を発生する励起光発生ステップと、 An excitation light generating step of generating a plurality of excitation light having a different modulation modes,
    前記複数の励起光をそれぞれ異なる試料に照射する照射ステップと、 An irradiation step of irradiating said plurality of excitation light to different samples, respectively,
    前記試料のそれぞれで発生した蛍光を、蛍光標識の蛍光波長ごとに分光して受光する受光ステップと、を有し、 The fluorescence generated in each of the sample, comprising a light receiving step for receiving and spectrally for each fluorescence wavelength of the fluorescent label, a,
    前記複数の励起光の変調モードはそれぞれ直交関係にあり、 Modulation mode of the plurality of excitation light is in a perpendicular relationship, respectively,
    前記受光ステップの信号を前記変調モードで復調することにより、異なる試料からの蛍光信号を分離する、 By demodulating the signal of the light receiving step in the modulation mode, to separate the fluorescence signals from different samples,
    ことを特徴とする、蛍光分析方法。 Characterized in that, fluorescence analysis method.
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