JP2009269927A

JP2009269927A - 治療剤

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Publication number: JP2009269927A
Application number: JP2009187837A
Authority: JP
Inventors: Hiroshi Onoki; 宏大野木; Masahiro Shiraga; 正宏白髪; Eiji Kobayashi; 英二小林; Kaori Nishimura; 香織西村; Tuo-Ping Li; ▲たく▼平李; Hiroaki Sagawa; 裕章佐川; Ikunoshin Kato; 郁之進加藤
Original assignee: Takara Bio Inc
Current assignee: Takara Bio Inc
Priority date: 2000-04-10
Filing date: 2009-08-13
Publication date: 2009-11-19
Also published as: CN1422159A; US20040002423A1; WO2001076614A1; KR100842693B1; EP1666051A2; EP1277473A1; KR20080014928A; TW200817024A; EP1666051A3; AU2001246876A1; KR100858860B1; EP1277473A4; US20060147558A1; TWI313605B; CN100457124C; KR20030013382A

Abstract

【課題】植物の果実、種子、種皮、花、葉、茎、根及び／又は根茎由来の成長因子産生増強物質を有効成分として含有する成長因子産生増強用組成物、及び成長因子産生増強物質の生理作用を利用した医薬、食品、飲料又は飼料を提供すること。
【解決手段】アシタバ、キク、ベニバナ、タマネギ、イネ、バラ、大豆、モロヘイヤ及びガジュツからなる群より選択される１以上の植物由来の神経成長因子産生増強物質を有効成分として含有してなる神経成長因子産生増強用組成物、当該組成物を含有してなる疾患の治療剤または予防剤、並びにヨモギ由来の成長因子産生増強物質を有効成分として含有してなる、腎障害、胃腸障害、血管障害、慢性腎炎、肺炎、創傷、糖尿病及びがんからなる群より選択される疾患の治療剤または予防剤。
【選択図】なし

Description

本発明は、植物由来の成長因子産生増強物質を含有する成長因子産生増強用組成物、該組成物を含有する、成長因子産生増強を必要とする疾患の治療剤または予防剤、成長因子産生増強用の食品、飲料又は飼料に関する。また、本発明は、健康増強に優れた機能性食品、飲料又は飼料に関する。

セリ科に属する植物、例えばアシタバのもつ薬理作用としては高血圧予防効果、抗菌作用、抗潰瘍作用、胃酸分泌抑制作用、抗癌効果、癌予防効果等が知られている。

キク科に属する植物、例えばベニバナのもつ薬理作用としては抗炎症活性、抗浮腫効果、抗菌活性等が知られている。

ユリ科に属する植物、例えばタマネギのもつ薬理作用としてはコレステロール低下作用、抗菌作用、抗真菌作用、血糖降下作用、抗ぜん息作用、抗炎症作用、アルドースレダクターゼ阻害作用等が知られている。

イチョウ科に属する植物、例えばイチョウのもつ薬理作用としては脳の血液循環促進作用、あざの消失効果、血小板凝集抑制作用、血清コレステロール低下作用等が知られている。

イネ科に属する植物、例えばタケのもつ薬理作用としては抗菌作用、抗真菌作用、血圧降下作用、抗酸化活性等が知られている。また米ぬかにはコレステロール低下作用が知られている。

バラ科に属する植物、例えばバラのもつ薬理作用としては抗炎症作用、抗アレルギー作用、がん細胞増殖抑制作用、抗菌作用等が知られている。またプラムにはコレステロール低下作用、糖尿病予防作用が知られている。

クワ科に属する植物、例えばホップのもつ薬理活性としては抗菌作用、抗腫瘍作用、鎮静作用等が知られている。

ショウガ科に属する植物、例えばガジュツ（紫ウコン）のもつ薬理活性としては抗菌作用、胆汁分泌作用、抗潰瘍活性、抗腫瘍活性等が知られている。

マメ科に属する植物、例えば大豆のもつ薬理作用としてはコレステロール低下作用、抗酸化作用等が知られている。

シナノキ科に属する植物、例えばモロヘイヤのもつ薬理作用としては血圧降下作用、免疫賦活作用等が知られている。

アブラナ科に属する植物、例えばブロッコリーのもつ薬理作用としては抗がん作用が知られている。

しかし、これらの植物成分の成長因子産生増強作用、特に肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）産生増強作用、神経成長因子（ＮＧＦ）産生増強作用については知られていない。

ところで、部分肝切除を受けた肝臓は、速やかに再生し、もとのサイズになる。この肝再生因子の本体は、長年不明であったが、劇症肝炎患者の血漿中に肝細胞増殖因子(Hepatocyte growth factor: HGF)が見出され、その患者血漿から、単離、精製された(Gohda, E. et al.: J. Clin. Invest., 88 414-419, 1988)。さらに、ヒトＨＧＦのcDNAもクローニングされ、ＨＧＦの1次構造も明らかにされた(Miyakawa, K. et al.: Biochem. Biophys. Res. Commun., 163 967-973, 1989)。また、細胞の運動性を亢進させるscatter factor(SF)および、腫瘍細胞障害因子であるtumor cytotoxic factor(TCF)とＨＧＦが同一物質であることも明らかになった(Weidner, K. M. et al.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88 7001-7005, 1991, Shima, N. et al.: Biochem. Biophys. Res. Commun., 180 1151-1158, 1991)。ＨＧＦは肝細胞だけでなく胆管上皮細胞、腎尿細管上皮細胞、胃粘膜細胞など多くの上皮細胞の増殖を促進させる。また、上皮細胞の運動性の亢進や血管新生、上皮細胞の管腔形成で見られるような形態形成を誘導し、ＨＧＦは極めて多彩な生理活性を示す多機能活性物質である。つまり、様々な臓器において、その臓器の障害を修復する際の上皮細胞の増殖を促進、運動性の亢進や血管新生などの形態形成の誘導等を行う。

ＨＧＦは肝細胞増殖作用、タンパク質合成促進作用、胆汁うっ滞改善作用、さらには薬剤による腎障害の予防作用などを示す。ＨＧＦのｍＲＮＡは脳、腎臓、肺等でも合成されている。ＨＧＦは、胆管上皮細胞、腎尿細管上皮細胞、胃粘膜細胞など多くの上皮細胞の増殖を促進させる中胚葉性細胞成長因子であり、障害を修復する際の上皮細胞の増殖促進や、運動性の亢進、血管新生などの形態形成の誘導など極めて多彩な生理活性を示す多機能活性物質である。さらに、ＨＧＦは神経細胞の保護、増殖促進、障害修復作用なども持ち合わせている。従って、ＨＧＦの産生を誘導することにより、肝炎、重症肝炎、劇症肝炎、肝硬変、肝内胆汁うっ滞等の肝障害、薬剤等による腎障害、胃腸障害、血管障害、慢性腎炎、肺炎、創傷、糖尿病、がん等の治療又は予防を行うことができると期待されている。

ＨＧＦは前記各種作用を示すことから、ＨＧＦ自身が、肝炎、重症肝炎、劇症肝炎、肝硬変、肝内胆汁うっ滞等の肝障害、薬剤等による腎障害、胃腸障害、血管障害、慢性腎炎、肺炎、創傷、糖尿病、がん等の治療薬として期待されているが、ＨＧＦそのものを治療薬として実用化するには至っていない。さらに、遺伝子治療でＨＧＦの遺伝子を導入する方法も試みられているが、不必要な時期、場所で作用することによる副作用により、これも実用化には遠い。このように、ＨＧＦを外から投与するのではなく、任意に増強できるのであれば、ＨＧＦ産生増強を必要とする疾患の治療及び予防に有効であると考えられているが、未だ実用化には至っていない。

ヒトの知的機能、記憶、感情、行動などの精神活動の維持には神経細胞が主要な役割を担っている。これら精神活動の基になっている神経細胞の分化、生存、機能発現には、それぞれの神経細胞に特異的な神経栄養因子が必要であると考えられている。神経栄養因子のうち最初にその存在および機能が明らかにされたのが神経成長因子（Nerve Growth Factor、以下ＮＧＦと略する）であり、現在では脳由来神経栄養因子(Brain-derived-neurotrophic Factor)、ニューロトロフィン(Neurotrophin)−３、ニューロトロフィン−４／５などが見出されている。

ＮＧＦは前脳基底部の大細胞性コリン作動性神経細胞の神経栄養因子であることから、アルツハイマー型痴呆症との関連が注目されている〔ファルマシア、Ｖｏｌ．２２、Ｎｏ．２、１４７〜１５１（１９８６）、老年精神医学、Ｖｏｌ．３、Ｎｏ．６、７５１〜７５８（１９８６）〕。アルツハイマー型痴呆症とは発育障害、巣症状、下肢の強直拘攣、てんかん様発作などの臨床を伴い、老人性プラーク、アルツハイマー原線維変化などの病理学的所見を見る疾患であり、老人性痴呆の一病型である。近年の高齢化社会で増加の傾向が見られ、重大な社会的関心が払われているが、これといった症状の改善法、治療法が見つかっていない。

アルツハイマー型痴呆症患者脳には、マイネルト基底核を中心とする前脳基底部に顕著な変性、コリンアセチル基転位酵素（ＣＡＴ）活性の著しい低下が認められている〔Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，Ｖｏｌ．３，７７（１９８０）〕。１９８５年にラット脳を用いた研究で、ＮＧＦが脳のこの部位での神経栄養因子であることが明らかにされ〔ＥＭＢＯＪ．，Ｖｏｌ．４，１３８９（１９８５）〕、ＮＧＦと本疾患との関連が注目された。またハンチントン舞踏疾患者の脳の線条体では、ＧＡＢＡ作動性神経細胞の脱落と共にコリン作動性神経細胞の脱落が著しく、ＮＧＦが線条体の内在性コリン作動性神経細胞にも作用することが明らかにされ〔Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．２３４，１３４１（１９８６）〕、本疾患がＮＧＦと関連している可能性が指摘されている。各種の神経疾患のモデルとなり得るラットなどの動物でＮＧＦの効果が研究され、ラットでは神経細胞の変性が顕著になる以前にＮＧＦを脳内投与すれば、変性を食い止めることができ、ＣＡＴ活性の低下も防げることが報告されている〔Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，Ｖｏｌ．６，２１５５（１９８６）、ＢｒａｉｎＲｅｓ．，Ｖｏｌ．２９３，３０５（１９８５）、Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．２３５，２１４（１９８６）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，Ｖｏｌ．８３，９２３１（１９８６）〕。末梢の交感神経支配組織および脳でＮＧＦが生合成されていること、このＮＧＦの生合成に末梢組織あるいは脳組織の間質細胞である線維芽細胞あるいはアストログリア細胞が各々重要な役割を担っていることも証明されている〔Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．２５９，１２５９（１９８４）、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，Ｖｏｌ．１３６，５７（１９８６）〕。また、この線維芽細胞やアストログリア細胞の産生するＮＧＦの抗原性、分子量、等電点、生物活性は、従来よく研究されていた顎下腺ＮＧＦと同一であることが明らかにされるとともに、線維芽細胞（Ｌ−Ｍ細胞）およびアストログリア細胞の培養液に種々の神経伝達物質を加える実験によって、カテコールアミン類（ノルエピネフリン、エピネフリン、ドーパミン）がＮＧＦ産生増強作用を示すことが見出されている〔Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．２０１，６０３９（１９８６）〕。

ＮＧＦは、ＮＧＦが神経栄養因子として作用する部位が変性する神経疾患において、変性を食い止める治療薬として用いることができるのではないかと期待される。また、脳血管障害、脳腫瘍、脳尖、頭部外傷変性疾患、麻酔薬物中毒など脳神経細胞が一旦変性に陥れば、生涯回復することがなく、その結果、知的機能低下、記憶障害のみならず、感情障害、行動異常など様々な障害を引き起こすが、神経線維には可塑性があり、損傷を受けると、その付近の健常な線維から発芽が起こり、障害されたシナプスに変わって新しいシナプスが形成されるので、この時ＮＧＦが神経機能の修復再生を促す治療剤として用いることができるのではないかと期待される。

しかしながら、ＮＧＦを各種神経疾患の治療に応用しようとした場合、ＮＧＦはＮＧＦを必要とする神経細胞の極く近傍に達していなければならないし、中枢神経疾患の場合も脳細胞の患部にＮＧＦを送り届けなければならないが、血管系を通してＮＧＦを脳内に送り込むことはできない。なぜならば、脳内の血管内皮細胞は、互いに密着結合で結合しており（脳血液関門という）、水、ガス、脂溶性物質以外の物質の血液から脳組織への移行は制限を受けているからであり、高分子物質であるタンパク質（ＮＧＦも含む）はまったく脳血管関門を通ることが出来ないからである。このＮＧＦを直接脳内に外科的手法を用いて投入することは、現在の技術をもってしても危険が大き過ぎる。

一方、直接、ＮＧＦを投与するのではなく、ＮＧＦの産生を増強する物質の開発も行われているが、その多くは、強い毒性を有するか、毒性が出る濃度と有効な濃度が非常に接近した物質、または神経興奮作用など神経系に対して重大な副作用を生じる物質であるなど、多くの問題点を抱えており、いまだ実用化には至っていない。

このように、成長因子を増強することで当該成長因子に関連する種々の疾患の治療または予防が可能になると考えられるが、毒性や副作用を示さず、所望により適切に成長因子の産生増強を行い得る物質、手段等は未だ知られていない。

本発明は、植物、例えばセリ科、キク科、ユリ科、イチョウ科、イネ科、バラ科、クワ科、マメ科、シナノキ科、アブラナ科またはショウガ科に属する植物の果実、種子、種皮、花、葉、茎、根及び／又は根茎由来の成長因子産生増強物質を有効成分として含有する成長因子産生増強用組成物、及び成長因子産生増強物質の生理作用を利用した医薬、食品、飲料又は飼料を提供することを目的とするものである。

本発明を概説すれば、本発明の第１の発明は、植物由来の成長因子産生増強物質を有効成分として含有することを特徴とする成長因子産生増強用組成物に関する。本発明の第１の発明において、植物としては、セリ科、キク科、ユリ科、イチョウ科、イネ科、バラ科、クワ科、マメ科、シナノキ科、アブラナ科及びショウガ科に属する植物からなる群より選択される１以上の植物が好適である。また、植物由来の成長因子産生増強物質としては、クロロゲン酸(chlorogenic acid)、ジカフェオイルキナ酸(dicaffeoyl-quinic acid)、カフェオイルキナ酸(caffeoyl-quinic acid)、イソオリエンチン（isoorientin）、サフロミンＡ(safflomin A)、グアイアノライド(guaianolide)、キサントアンゲロール(xanthoangelol)、３’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノイルケラクトン(3'-O-β-D-glucopyranoyl khellactone)、７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−８−プレニルクマリン(7-O-β-D-glucopyranosyloxy-8-prenylcoumarin)、コーヒー酸メチルエステル(caffeic acid methyl ester)、コーヒー酸エチルエステル(caffeic acid ethyl ester)、８−カルボキシル−３−ヒドロキシ−５−メトキシル−２−ジメチルクロマン(8-carboxyl-3-hydroxy-5-methoxyl-2-dimethylchroman)、７−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−６−プレニルクマリン(7-β-D-glucopyranosyloxy-6-prenylcoumarin)、４’−Ｏ−アンゲロイル−３’−Ｏ−[６−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル]−ケラクトン(4'-O-angeloyl-3'-O-[6-O-(β-D-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranosyl]-khellactone)、イソキサントフモール(isoxanthohumol)、キサントフモールＢ(xanthohumol B)、キサントフモールＤ(xanthohumol D)及びキサントフモール(xanthohumol)からなる群より選択される１以上の化合物が好適である。さらに、当該組成物としては植物由来の抽出物、もしくは該植物抽出物から得られる画分を含有する組成物も包含される。また、特に好ましくは当該組成物は植物由来の成長因子産生増強物質を高濃度及び／又は高純度に含有することができる。また、成長因子としては、好適には肝細胞増殖因子または神経成長因子である。

本発明の第２の発明は、本発明の第１の発明の組成物を含有することを特徴とする、成長因子産生増強を必要とする疾患の治療剤または予防剤に関する。

本発明の第３の発明は、本発明の第１の発明の成長因子増強用組成物を含有することを特徴とする成長因子産生増強用の食品、飲料又は飼料に関する。

本発明の第４の発明は、植物由来の成長因子産生増強物質を高濃度及び／又は高純度に含有することを特徴とする食品、飲料又は飼料に関する。

植物由来の成長因子産生増強物質としては、クロロゲン酸、ジカフェオイルキナ酸、カフェオイルキナ酸、イソオリエンチン、サフロミンＡ、グアイアノライド、キサントアンゲロール、３’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノイルケラクトン、７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−８−プレニルクマリン、コーヒー酸メチルエステル、コーヒー酸エチルエステル、８−カルボキシル−３−ヒドロキシ−５−メトキシル−２−ジメチルクロマン、７−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−６−プレニルクマリン，４’−Ｏ−アンゲロイル−３’−Ｏ−[６−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル]−ケラクトン、イソキサントフモール、キサントフモールＢ、キサントフモールＤおよびキサントフモールからなる群より選択される１以上の化合物が好適である。

本発明の第５の発明は、本発明の第１の発明の組成物を高濃度及び／又は高純度に含有することを特徴とする食品、飲料又は飼料に関する。

植物由来の成長因子産生増強用組成物としては、クロロゲン酸、ジカフェオイルキナ酸、カフェオイルキナ酸、イソオリエンチン、サフロミンＡ、グアイアノライド、キサントアンゲロール、３’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノイルケラクトン、７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−８−プレニルクマリン、コーヒー酸メチルエステル、コーヒー酸エチルエステル、８−カルボキシル−３−ヒドロキシ−５−メトキシル−２−ジメチルクロマン、７−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−６−プレニルクマリン，４’−Ｏ−アンゲロイル−３’−Ｏ−[６−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル]−ケラクトン、イソキサントフモール、キサントフモールＢ、キサントフモールＤおよびキサントフモールからなる群より選択される１以上の化合物を含有する組成物が好適である。

本発明の第６の発明は、キサントフモールを０．００００７重量％以上含む神経成長因子産生増強用の食品、飲料又は飼料に関する。

本発明の第７の発明は、成長因子産生増強物質を含有する食品、飲料、飼料又はそれらの処理物を含有する成長因子産生増強用の食品、飲料又は飼料に関する。その態様としては、ビール類を含有する成長因子産生増強用の食品、飲料又は飼料が好適であり、ビール類には、ビール、発泡酒、ノンアルコールビール飲料、これらの濃縮物、これらの希釈物、ホップ抽出物含有飲料が包含される。

本発明の第８の発明は、ホップ抽出物を含有する成長因子産生増強用の食品、飲料又は飼料に関する。ホップ抽出物は食品、飲料又は飼料中、０．０００１重量％以上含有されるのが好適である。

本発明の第９〜１１の発明は、それぞれグアイアノライドを有効成分として含有することを特徴とする成長因子産生増強用組成物、成長因子産生増強を必要とする疾患の治療剤または予防剤、または成長因子産生増強用の食品、飲料又は飼料に関する。

第１図は、化合物（１）の¹H-NMRスペクトルを示す図（上）およびクロロゲン酸標品の¹H-NMRスペクトルを示す図（下）である。第２図は、アシタバ由来の抽出画分1〜3に含まれるクロロゲン酸濃度と各画分のＨＧＦ産生増強活性の相関関係を示す図である。第３図は、クロロゲン酸標品濃度とＨＧＦ産生増強活性の相関関係を示す図である。第４図は、化合物（２）の¹H-NMRスペクトルを示す図である。第５図は、国産菊花クロロホルム抽出画分A-a-2のMSスペクトルを示す図である。第６図は、国産菊花クロロホルム抽出画分A-a-2の¹H-NMRスペクトルを示す図である。第７図は、国産菊花クロロホルム抽出画分A-b-1のMSスペクトルを示す図である。第８図は、国産菊花クロロホルム抽出画分A-b-1のIRスペクトルを示す図である。第９図は、国産菊花クロロホルム抽出画分A-b-1の¹H-NMRスペクトルを示す図である。第１０図は、国産菊花クロロホルム抽出画分A-b-1の¹³C-NMRスペクトルを示す図である。第１１図は、アシタバ抽出画分の7.82分のピークを含むフラクションの質量スペクトルを示す図である。第１２図は、アシタバ抽出画分の7.82分のピークを含むフラクションのIRスペクトルを示す図である。第１３図は、アシタバ抽出画分の7.82分のピークを含むフラクションの¹H-NMRスペクトルを示す図である。第１４図は、アシタバ抽出画分の7.82分のピークを含むフラクションの¹³C-NMRスペクトルを示す図である。第１５図は、アシタバ抽出画分の11.09分のピークを含むフラクションの質量スペクトルを示す図である。第１６図は、アシタバ抽出画分の11.09分のピークを含むフラクションのIRスペクトルを示す図である。第１７図は、アシタバ抽出画分の11.09分のピークを含むフラクションの¹H-NMRスペクトルを示す図である。第１８図は、アシタバ抽出画分の11.09分のピークを含むフラクションの¹³C-NMRスペクトルを示す図である。第１９図は、アシタバ根部由来フラクション１０のＦＡＢ−ＭＳスペクトルを示す図である。第２０図は、アシタバ根部由来フラクション１０の¹H-NMRスペクトルを示す図である。第２１図は、アシタバ根部由来フラクション１３−２のFAB-MSスペクトルを示す図である。第２２図は、アシタバ根部由来フラクション１３−２の¹H-NMRスペクトルを示す図である。第２３図は、アシタバ根部由来フラクション１３−２の¹³C-NMRスペクトルを示す図である。第２４図は、アシタバ根部由来フラクション１８−３のFAB-MSスペクトルを示す図である。第２５図は、アシタバ根部由来フラクション１８−３の¹H-NMRスペクトルを示す図である。第２６図は、アシタバ根部由来フラクション１８−４のFAB-MSスペクトルを示す図である。第２７図は、アシタバ根部由来フラクション１８−４の¹H-NMRスペクトルを示す図である。第２８図は、アシタバ根部由来フラクション１８−４の¹³C-NMRスペクトルを示す図である。第２９図は、アシタバ根部由来フラクション１９、２０−５のFAB-MSスペクトルを示す図である。第３０図は、アシタバ根部由来フラクション１９、２０−５の¹H-NMRスペクトルを示す図である。第３１図は、アシタバ根部由来フラクション１９、２０−５の¹³C-NMRスペクトルを示す図である。第３２図は、アシタバ根部由来フラクション１９、２０−６のFAB-MSスペクトルを示す図である。第３３図は、アシタバ根部由来フラクション１９、２０−６の¹H-NMRスペクトルを示す図である。第３４図は、アシタバ根部由来フラクション１９、２０−６の¹³C-NMRスペクトルを示す図である。第３５図は、アシタバ根部由来フラクション２８のFAB-MSスペクトルを示す図である。第３６図は、アシタバ根部由来フラクション２８の¹H-NMRスペクトルを示す図である。第３７図は、キサントフモールフラクション由来のフラクションＡ−５のFAB-MSスペクトルを示す図である。第３８図は、キサントフモールフラクション由来のフラクションＡ−５の¹H-NMRスペクトルを示す図である。第３９図は、ホップ由来キサントフモールフラクションの¹H-NMRスペクトルを示す図である。

本発明において、植物由来の成長因子産生増強物質を有効成分として含有することを特徴とする成長因子産生増強用組成物が提供される。植物における成長因子産生増強作用を示す物質の存在は、本発明において初めて見出されたものである。なお、本明細書において、有効成分として挙げるいずれの物質も単独でもしくは２種以上混合して本発明において用いることができる。

本発明に係る植物由来の成長因子産生増強物質としては、後述する当該物質の調製方法により得られ得るものであれば特に限定されるものではない。中でも、セリ科、キク科、ユリ科、イチョウ科、イネ科、バラ科、クワ科、マメ科、シナノキ科、アブラナ科及びショウガ科に属する植物からなる群より選択される１以上の植物に由来する成長因子産生増強作用を有する物質が好適である。

セリ科に属する植物としては、例えばアシタバ、シシウド、ニンジン、セリ、ミツバ、セロリ等が例示される。キク科に属する植物としては、例えばキク、タンポポ、ヒマワリ、アザミ、春菊、食用の菊花、ゴボウ、フキ、ヨモギ等が例示され、例えばヨモギとしてはサザバルヨモギが好適に使用される。ユリ科に属する植物としては、例えばタマネギ、ネギ、ニンニク、チューリップ、ユリ等が例示される。イチョウ科に属する植物としてはイチョウが例示される。イネ科に属する植物としては、例えばモウソウチク、マダケ、ハチク、ホウライチク、ササ、イネ、ムギ、ヨシ、シバ、キビ等が例示され、穀物やその処理物、例えば米ぬか、ふすま等も使用することができる。バラ科に属する植物としては、例えばヤマザクラ、ソメイヨシノ、ウメ、モモ、プラム、アーモンド、リンゴ、バラ、キイチゴ、ビワ、ハマナス、ベンケイソウ等が例示される。クワ科に属する植物としては、例えばクワ、イチジク、ホップ、コウゾ、ハリグワ、パンノキ、ゴムノキ等が例示される。ショウガ科に属する植物としては、例えばショウガ、ウコン、ミョウガ、ハナショウガ等が例示され、ウコンとしては、特に好適にはガジュツ（紫ウコン）が例示される。シナノキ科に属する植物としては例えばモロヘイヤが例示される。マメ科に属する植物としては、例えば大豆、アズキ、インゲン豆、リョクトウ等が例示される。アブラナ科に属する植物としては、キャベツ、ブロッコリー、カリフラワー、白菜、菜の花等が例示される。

また、本発明に使用される植物は、特に限定はないが、果実、種子、種皮、花、葉、茎、根及び／又は根茎、それらの処理物、例えば米ぬか、ふすま、大豆胚芽、大豆種皮、ソヤミール等もしくは植物体そのままを、表皮を剥いて表皮のみ、表皮を除去したそれ以外の部分、もしくはそのままを使用することができる。

また、本発明において植物由来の成長因子産生増強物質としては、成長因子を増強する活性を有する植物由来の物質であれば特に限定はなく、本発明の所望の効果の発現の観点から、好ましくはクロロゲン酸、ジカフェオイルキナ酸、カフォイルキナ酸、イソオリエンチン、サフロミンＡ、グアイアノライド、キサントアンゲロール、３’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノイルケラクトン、７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−８−プレニルクマリン、コーヒー酸メチルエステル、コーヒー酸エチルエステル、８−カルボキシル−３−ヒドロキシ−５−メトキシル−２−ジメチルクロマン、７−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−６−プレニルクマリン，４’−Ｏ−アンゲロイル−３’−Ｏ−[６−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル]−ケラクトン、イソキサントフモール、キサントフモールＢ、キサントフモールＤ及びキサントフモールからなる群より選択される１以上の化合物が例示される。また、本発明で使用する有効成分としての物質の成長因子産生増強作用の発現は、たとえば、本発明に開示の方法（たとえば、実施例４−（１）および実施例１３に記載の方法）により評価することができる。当該物質は、植物由来の成長因子産生増強作用を示す物質であれば限定はなく、前記例示する有効成分として好適な化合物以外のものも当然包含される。本発明においてカフェオイルキナ酸としては、好適には５−カフェオイルキナ酸(5-caffeoyl-quinic acid)、４−カフェオイルキナ酸(4-caffeoyl-quinic acid)が例示される。また、本発明においてグアイアノライドとしては、好適には２−オキソ−８−アンゲロイルオキシ−グアイア−３（４），１１（１３）−ジエン−１２，６−オライド(2-Oxo-8-angeloyloxy-guaia-3(4),11(13)-dien-12,6-olide)または３，４−エポキシ−８−アンゲロイルオキシ−グアイア−１（１０），１１（１３）−ジエン−１２，６−オライド(3,4-Epoxy-8-angeloyloxy-guaia-1(10),11(13)-dien-12,6-olide)が例示される。なお本発明において、植物由来とは植物原料より得られることを意味する。

また、本発明の成長因子産生増強用組成物は、その一態様として、成長因子産生増強物質を含む、植物由来の抽出物もしくは該植物抽出物から得られる画分を含む組成物が例示される。当該組成物は、前記抽出物もしくは画分そのものであってもよい。植物からの抽出精製は、次のような公知の方法で行うことができる。例えば原料である植物の果実、種子、種皮、花、葉、茎、根及び／又は根茎等を、適当な時期に採取した後に、そのままか、通常空気乾燥等の乾燥工程を行った後、所望により粉砕し、抽出原料とする。また種々の条件で原料の熟成を行い、熟成後の原料を使用しても良い。また植物の処理物、例えば米ぬか、ふすま、大豆胚芽、大豆種皮、ソヤミール等を使用してもよい。原料が植物の搾汁液や樹液の場合はそのまま抽出原料として用いることもできる。なお、本発明において植物由来の抽出物とは、植物から抽出溶媒を用いて抽出操作を行う工程を経て得られる物質のことをいう。

植物体からの成長因子産生増強物質の調製は、公知の抽出方法により以下のように行うことができる。例えば原料を粉砕もしくは細切した後、溶媒を用いてバッチ式もしくは連続式で行うことができる。抽出溶媒としては、水、クロロホルム、エタノール、メタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール類、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類、酢酸メチル、酢酸エチル等の親水性もしくは親油性の溶媒を挙げることができ、所望により単独で、もしくは適宜混合液として用いることができる。通常、好適には水やエタノール含有水、エタノールを使用することにより行うことができる。抽出溶媒の量は適宜決定すればよいが、通常、原料に対し、好ましくは１〜１００倍量の抽出溶媒を使用すればよい。抽出温度も適宜、目的に応じて決定すればよいが、水抽出の場合は通常、好ましくは４〜１３０℃、より好ましくは２５〜１００℃である。また、溶媒中にエタノールが含まれる場合は４〜６０℃の範囲が好適である。抽出時間も、抽出効率を考慮し決定すればよいが、通常、好ましくは数分〜数日、より好ましくは５分〜３時間の範囲となるように、原料、抽出溶媒、抽出温度を設定するのが好適である。抽出操作は、たとえば、攪拌しながら又は静置して行えばよく、また、必要に応じて数回繰り返してもよい。以上の操作により、成長因子産生増強物質は、当該物質を含む抽出物として得られる。抽出物は必要に応じ、ろ過、遠心分離、濃縮、限外ろ過、分子ふるい等の処理を行い、目的の成長因子産生増強物質が濃縮された抽出物を調製することができる。抽出物や濃縮抽出物の成長因子産生増強活性は、後述の実施例４−（１）や実施例１３記載の方法により簡便に測定することができる。

また、本発明において、植物抽出物から得られる画分とは、植物由来の抽出物を公知の方法で分画することによって得られる画分や、分画操作を複数回繰り返すことにより得られる単一の物質を含有する画分のことをいい、成長因子産生増強作用を有していれば本発明に包含される。上記の分画手段としては、抽出、分別沈殿、カラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー等が挙げられる。得られた画分の精製を、成長因子産生増強活性を指標として、さらに進めることにより、成長因子産生増強物質を単離することもできる。

また、植物を公知の方法で茶葉状にし、これを用いた抽出物または該植物抽出物から得られる画分も、成長因子産生増強作用を有していれば、本発明の抽出物または該植物抽出物から得られる画分として使用することができる。また、これらの抽出物または該植物抽出物から得られる画分を２種以上含有して使用することもできる。なお、本発明では同じ植物から異なった抽出法で得られた抽出物または該植物抽出物から得られる画分を２種以上含有して使用することもできる。

また、植物由来の抽出物および該植物抽出物から得られる画分以外の成長因子産生増強用組成物の製造方法としては、例えば植物を乾燥させ、粉砕することで粉状の当該組成物を得ることができる。

なお、本発明における植物由来の成長因子産生増強用組成物は、植物体そのものと比較して成長因子産生増強物質を高濃度及び／又は高純度に含有するものが特に好ましい。ここで高濃度とは、原料である植物体の単位重量あたりの成長因子産生増強物質重量よりも組成物の単位重量あたりの成長因子産生増強物質重量の方が多いことを意味する。また、高純度とは、原料である植物と比較して当該組成物の成長因子産生増強物質の含有率が高いことを意味する。

また、本発明は成長因子産生増強物質を高濃度及び／又は高純度に含有する食品、飲料又は飼料を提供するが、これは従来の食品、飲料又は飼料と比べて、本発明の食品、飲料又は飼料中には成長因子産生増強物質が高濃度及び／又は高純度に含有されていることを意味する。

なお、当該組成物を有効成分として含有する成長因子産生増強剤も本発明に包含される。

本発明において、植物由来の成長因子産生増強用組成物の形状としては、植物由来の成長因子産生増強物質が含有されていれば特に限定はないが、粉状、固形状、液状のいずれの形状であってもよい。また、当該組成物を公知の方法で造粒して粒状の固形物として、本発明の成長因子産生増強用組成物として使用することができる。造粒方法としては、特に限定はないが、転動造粒、攪拌造粒、流動層造粒、気流造粒、押出し造粒、圧縮成型造粒、解砕造粒、噴射造粒又は噴霧造粒等が例示される。粉状の当該組成物を液体、例えば水やアルコール等に溶解して液状とし、本発明の成長因子産生増強用組成物として使用することもできる。

本発明に係る有効成分には、後述するように特に毒性は認められない。また、副作用の発生の心配もない。それゆえ、安全かつ適切に成長因子の産生増強を行うことができる。従って、当該有効成分を含んでなる本発明の治療剤、予防剤、食品、飲料または飼料は、成長因子産生増強を必要とする疾患の治療または予防に有効である。

本発明において成長因子とは細胞の成長を促進する活性を有していれば特に限定はないが、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、神経栄養性因子、上皮成長因子、ミルク由来成長因子、線維芽細胞成長因子、脳由来線維芽細胞成長因子、酸性線維芽細胞成長因子、血小板由来成長因子、血小板塩基性タンパク、結合組織活性化ペプチド、インスリン様増殖因子、コロニー形成刺激因子、エリスロポエチン、スロンボポエチン、Ｔ細胞成長因子、インターロイキン類（例えばインターロイキン２、３、４、５、７、９、１１、１５）、Ｂ細胞成長因子、軟骨由来因子、軟骨由来成長因子、骨由来成長因子、骨格成長因子、内皮細胞成長因子、内皮細胞由来成長因子、眼由来成長因子、精巣由来成長因子、セルトリ細胞由来成長因子、乳腺刺激因子、脊髄由来成長因子、マクロファージ由来成長因子、リサイクル間葉成長因子、形質転換増殖因子−α、形質転換増殖因子−β、ヘパリン結合性ＥＧＦ様増殖因子、アンフィレグリン、ＳＤＧＦ、ベーターセルリン、エピレグリン、ニューレグリン１，２，３、血管内皮増殖因子、ニューロトロフィン、ＢＤＮＦ、ＮＴ−３、ＮＴ−４、ＮＴ−５、ＮＴ−６、ＮＴ−７、グリア細胞株由来神経栄養性因子、幹細胞因子、ミッドカイン、プレイオトロフィン、Ｅｐｈｒｉｎ、Ａｎｇｉｏｐｏｉｅｔｉｎ、アクチビン、腫瘍壊死因子、インターフェロン類等が例示される。本発明によれば、特に神経成長因子（ＮＧＦ）または肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）を好適に産生増強することができる。

ＨＧＦは肝細胞の再生因子であり、さらに細胞の運動を亢進させる因子、および腫瘍細胞障害因子でもある。ＨＧＦは肝細胞だけでなく胆管上皮細胞、腎尿細管上皮細胞、胃粘膜細胞等、多くの上皮細胞の増殖を促進させる。また、ＨＧＦは、上皮細胞の運動性亢進や血管新生、上皮細胞の管腔形成で見られるような形態形成を誘導する等、極めて多彩な生理活性を示す。従って、ＨＧＦの産生を増強することにより、たとえば、肝炎、重症肝炎、劇症肝炎、肝硬変、肝内胆汁うっ滞等の肝障害、薬剤等による腎障害、胃腸障害、血管障害、慢性腎炎、肺炎、創傷、糖尿病、がん等の治療または予防を行うことができる。

一方、ＮＧＦは神経細胞の生存や機能を維持したり、ＮＧＦの濃度勾配に従って神経細胞を伸長させたりする内因性の成長因子であり、ＮＧＦの産生を増強することにより、アルツハイマー病等の老人痴呆症や末梢神経障害、脳血管障害、脳腫瘍、脳尖、頭部外傷変性疾患、麻酔薬物中毒等による神経機能の修復・再生を要する疾患の治療または予防を行うことができる。また、筋萎縮性側索硬化症、薬剤障害性末梢神経障害、糖尿病性末梢神経障害、パーキンソン病、感覚神経障害、色素性網膜症、黄斑変性症等の治療または予防にも有用である。

本発明における成長因子産生増強を必要する疾患としては、本発明の治療剤、予防剤等を投与することにより治療または予防されるものであれば特に限定はないが、肝炎、重症肝炎、劇症肝炎、肝硬変、肝内胆汁うっ滞等の肝障害、薬剤等による腎障害、胃腸障害、血管障害、慢性腎炎、肺炎、創傷、糖尿病、がん、痴呆症、神経障害、末梢神経病、脳虚血、糖尿病性ニューロパシー等が例示される。

本発明で使用する植物由来の成長因子産生増強用組成物を含有することを特徴とする、成長因子産生増強を必要とする疾患の治療剤または予防剤は、植物由来の成長因子産生増強用組成物を用いて適宜製造することができる。

本発明の治療剤又は予防剤は、本発明で使用する植物由来の成長因子産生増強用組成物と公知の医薬用担体とを組合せ製剤化すれば良い。また、成長因子産生増強物質と公知の医薬用担体とを組合せて製剤化することにより製造することもできる。

当該製剤の製造は、一般的には本発明で使用する植物由来の成長因子産生増強用組成物を薬学的に許容できる液状又は固体状の担体と配合し、所望により溶剤、分散剤、乳化剤、緩衝剤、安定剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等を加えて、錠剤、顆粒剤、散剤、粉末剤、カプセル剤等の固形剤、通常液剤、懸濁剤、乳剤等の液剤とすることができる。また、使用前に適当な担体の添加によって液状となし得る乾燥品や、その他、外用剤とすることもできる。

医薬用担体は、治療剤または予防剤の投与形態及び剤型に応じて選択することができる。経口剤の場合は、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩等が利用される。また経口剤の調製に当っては、更に結合剤、崩壊剤、界面活性剤、潤沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着色剤、香料等を配合することもできる。

一方、非経口剤の場合は、常法に従い、本発明の有効成分である植物由来の成長因子産生増強用組成物を希釈剤としての注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射用植物油、ゴマ油、ラッカセイ油、ダイズ油、トウモロコシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等に溶解ないし懸濁させ、必要に応じ、殺菌剤、安定剤、等張化剤、無痛化剤等を加えることにより調製することができる。

本発明の治療剤または予防剤は、製剤形態に応じた適当な投与経路で投与される。投与方法も特に限定はなく、内用、外用及び注射によることができる。注射剤は、例えば静脈内、筋肉内、皮下、皮内等に投与し得、外用剤には座剤等も包含される。

本発明の治療剤または予防剤としての投与量は、その製剤形態、投与方法、使用目的及びこれに適用される患者の年齢、体重、症状によって適宜設定され、一定ではないが一般には製剤中に含有される本発明で使用される植物由来の成長因子産生増強用組成物の量として、成人１日当り好ましくは０．００１〜２０００ｍｇ／ｋｇ体重であり、より好ましくは０．０１〜２００ｍｇ／ｋｇ体重である。また、当該製剤中に含有される植物由来の成長因子産生増強物質の量として、成人１日当り好ましくは０．０００１〜２０００ｍｇ／ｋｇ体重であり、より好ましくは０．００１〜２００ｍｇ／ｋｇ体重であり、更に好ましくは０．０１〜２０ｍｇ／ｋｇ体重である。

もちろん投与量は、種々の条件によって変動するので、上記投与量より少ない量で十分な場合もあるし、あるいは範囲を超えて必要な場合もある。本発明の薬剤はそのまま経口投与するほか、任意の飲食品に添加して日常的に摂取させることもできる。また本発明で使用される植物由来の成長因子産生増強用組成物を成長因子産生増強用の飲食品の原料として用いても良い。

また、本発明の別の態様として、本発明に係る有効成分としての成長因子産生増強物質を含む成長因子産生増強剤を提供することもできる。当該増強剤としては、前記有効成分そのものであってもよく、また、前記有効成分を含む組成物であってもよい。成長因子産生増強剤は、たとえば、前記有効成分を当該有効成分と同じ用途に使用可能な他の成分などと配合し、上記治療剤または予防剤の製造方法に準じて通常使用される試薬の形態に製造すればよい。かかる増強剤における前記有効成分の含有量は、当該増強剤の投与方法、使用目的などを考慮し、本発明の所望の効果の発現が得られ得るような量であればよく、特に限定されるものではない。また、該増強剤の使用量も、本発明の所望の効果の発現が得られ得るようであれば特に限定されるものではない。特に、生体に投与して使用する場合には、好ましくは前記治療剤または予防剤における有効成分の投与量範囲内で有効成分を投与できる量で使用すればよい。成長因子産生増強剤は、成長因子産生増強、特にＨＧＦまたはＮＧＦ産生増強を必要とする疾患における当該成長因子の増強に有用である。また、該増強剤は、成長因子の機能研究、成長因子に関連する疾患用医薬のスクリーニングにも有用である。

さらに、本発明の別の態様として、本発明に係る前記有効成分を動物に投与する成長因子産生の増強方法を提供することもできる。かかる方法は、成長因子産生の増強が必要であると予想される、または、その必要のある動物に対し、前記有効成分を、好ましくは、前記成長因子産生増強剤として投与することにより行うことができ、かかる投与により、成長因子の産生を増強せしめる。有効成分の投与方法、投与量などは、前記成長因子産生増強剤の場合と同様とすればよい。なお、成長因子産生の増強方法では、本発明の治療剤または予防剤、後述の食品、飲料または飼料を用いることもできる。また、「動物」としては、たとえば、哺乳動物であるヒト、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、ウマ等を挙げることができ、中でも、ヒトに対し好適に用いられる。かかる成長因子産生の増強方法は、たとえば、成長因子産生増強を必要とする疾患の治療または予防における成長因子産生増強に有用である。また、該増強方法は、成長因子の機能研究、成長因子に関連する疾患用医薬のスクリーニングにも有用である。

次に本発明で使用される植物由来の成長因子産生増強用組成物、または植物由来の成長因子産生増強物質を含有してなる食品、飲料又は飼料は、その成長因子産生増強作用により、本発明で使用する植物由来の成長因子産生増強用組成物等に感受性を示す成長因子産生増強を要する疾患の症状改善、予防に、もしくは後述のように生物の体調改善に極めて有用である。

なお、本発明の態様において、「含有」の語は、含有、添加、希釈の意を含むものであり、「含有」とは食品、飲料または飼料中に本発明で使用される有効成分が含まれるという態様を、「添加」とは食品、飲料または飼料の原料に、本発明で使用される有効成分を添加するという態様を、「希釈」とは本発明で使用される有効成分に、食品、飲料または飼料の原料を添加するという態様をいうものである。

本発明の食品又は飲料の製造法は、特に限定はない。たとえば、配合、調理、加工等は一般の食品、飲料に用いられているものに従えばよく、かかる食品、飲料の製造法により製造することができ、製造された食品又は飲料に成長因子産生増強作用を有する、植物由来の成長因子産生増強用組成物、又は植物由来の成長因子産生増強物質が含有されていれば良い。また、食品または飲料中に植物を混合して加熱、放置等を行い、必要に応じて植物の抽出残渣を除去して得られる成長因子産生増強用食品又は飲料も本発明に包含される。また、成長因子産生増強物質を含有する食品、飲料又はその処理物を含有する成長因子産生増強作用を有する食品又は飲料も本発明の食品又は飲料である。なお、処理物とは、例えば、成長因子産生増強作用を有する飲料の濃縮及び希釈等を挙げることができる。

その態様としては、ビール類を含有する成長因子産生増強用の食品、飲料又は飼料が好適であり、ビール類には、ビール、発泡酒、ノンアルコールビール飲料、これらの濃縮物、これらの希釈物、ホップ抽出物含有飲料が包含される。

本発明の食品又は飲料とは、特に限定はないが、例えば穀物加工品（小麦粉加工品、デンプン類加工品、プレミックス加工品、麺類、マカロニ類、パン類、あん類、そば類、麩、ビーフン、はるさめ、包装餅等）、油脂加工品（可塑性油脂、てんぷら油、サラダ油、マヨネーズ類、ドレッシング等）、大豆加工品（豆腐類、味噌、納豆等）、食肉加工品（ハム、ベーコン、プレスハム、ソーセージ等）、水産製品（冷凍すりみ、かまぼこ、ちくわ、はんぺん、さつま揚げ、つみれ、すじ、魚肉ハム、ソーセージ、かつお節、魚卵加工品、水産缶詰、つくだ煮等）、乳製品（原料乳、クリーム、ヨーグルト、バター、チーズ、練乳、粉乳、アイスクリーム等）、野菜・果実加工品（ペースト類、ジャム類、漬け物類、果実飲料、野菜飲料、ミックス飲料等）、菓子類（チョコレート、ビスケット類、菓子パン類、ケーキ、餅菓子、米菓類、ウイスキーボンボン等）、アルコール飲料（日本酒、中国酒、ワイン、ウイスキー、焼酎、ウオッカ、ブランデー、ジン、ラム酒、ビール、清涼アルコール飲料、果実酒、リキュール等）、嗜好飲料（緑茶、紅茶、ウーロン茶、コーヒー、清涼飲料、乳酸飲料等）、調味料（しょうゆ、ソース、酢、みりん等）、缶詰・瓶詰め・袋詰め食品（牛飯、釜飯、赤飯、カレー、その他の各種調理済み食品）、半乾燥又は濃縮食品（レバーペースト、その他のスプレッド、そば・うどんの汁、濃縮スープ類）、乾燥食品（即席麺類、即席カレー、インスタントコーヒー、粉末ジュース、粉末スープ、即席味噌汁、調理済み食品、調理済み飲料、調理済みスープ等）、冷凍食品（すき焼き、茶碗蒸し、うなぎかば焼き、ハンバーグステーキ、シュウマイ、餃子、各種スティック、フルーツカクテル等）、固形食品、液体食品（スープ等）、香辛料類等の農産・林産加工品、畜産加工品、水産加工品等が挙げられる。

本発明の食品又は飲料中の植物由来の成長因子産生増強作用を有する有効成分の含有量は特に限定されず、その官能と活性発現の観点から適宜選択できるが、例えば食品中、好ましくは０．０００００１重量％以上、より好ましくは０．００００１〜１００重量％、更に好適には０．０００３〜９０重量％であり、例えば、飲料中、好ましくは０．０００００１重量％以上、より好ましくは０．００００１〜１００重量％、更に好適には０．０００３〜９０重量％である。また本発明の食品又は飲料は、好ましくは、それらに含有される有効成分が、例えば成人１日当たり好ましくは０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは０．００１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、更に好ましくは０．０１〜１ｍｇ／ｋｇ体重となるように摂取すればよい。

また、本発明により、前記成長因子産生増強用組成物を高濃度及び／又は高純度に含有してなる食品又は飲料が提供される。なお、「前記成長因子産生増強用組成物を高濃度及び／又は高純度に含有してなる」とは、本発明の態様における食品又は飲料に、成長因子産生増強用組成物に由来する成長因子産生増強物質が高濃度及び／又は高純度に含有されている程度に、もしくは成長因子産生増強作用の発現の観点から、成長因子産生増強物質が高濃度及び／又は高純度に含有されているに匹敵する程度に、成長因子産生増強用組成物が含有されていることをいう。

当該食品又は飲料の製造においては、成長因子産生増強用組成物として、たとえば、成長因子産生増強物質が含まれる植物抽出物、例えばセリ科植物抽出物、キク科植物抽出物、ユリ科植物抽出物、イチョウ科植物抽出物、イネ科植物抽出物、バラ科植物抽出物、クワ科植物抽出物、マメ科植物抽出物、シナノキ科植物抽出物、アブラナ科植物抽出物及びショウガ科植物抽出物から選択される抽出物を使用してもよく、有効成分として、好ましくはクロロゲン酸、ジカフェオイルキナ酸、カフォイルキナ酸、イソオリエンチン、サフロミンＡ、グアイアノライド、キサントアンゲノール、３’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノイルケラクトン、７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−８−プレニルクマリン、コーヒー酸メチルエステル、コーヒー酸エチルエステル、８−カルボキシル−３−ヒドロキシ−５−メトキシル−２−ジメチルクロマン、７−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−６−プレニルクマリン，４’−Ｏ−アンゲロイル−３’−Ｏ−[６−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル]−ケラクトン、イソキサントフモール、キサントフモールＢ、キサントフモールＤ及びキサントフモールからなる群より選択される１以上の化合物を含有する組成物、たとえば、植物由来の抽出物を使用してもよい。

本発明は、植物由来の成長因子産生増強物質を高濃度及び／又は高純度に含有する健康増強用食品又は飲料をも提供するものであり、当該食品又は飲料を日常的に摂取することにより、生体内での成長因子の産生が増強され、健康が維持・増強され得る。

すなわち、本発明の態様においては、植物由来の成長因子産生増強物質を高濃度及び／又は高純度に含有してなることを特徴とする食品又は飲料が提供される。

本発明の態様においては、植物由来の成長因子産生増強増強物質としては、クロロゲン酸、ジカフェオイルキナ酸、カフェオイルキナ酸、イソオリエンチン、サフロミンＡ、グアイアノライド、キサントアンゲロール３’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノイルケラクトン、７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−８−プレニルクマリン、コーヒー酸メチルエステル、コーヒー酸エチルエステル、８−カルボキシル−３−ヒドロキシ−５−メトキシル−２−ジメチルクロマン、７−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−６−プレニルクマリン，４’−Ｏ−アンゲロイル−３’−Ｏ−[６−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル]−ケラクトン、イソキサントフモール、キサントフモールＢ、キサントフモールＤおよびキサントフモールからなる群より選択される１以上の化合物が好適であり、当該化合物を高濃度及び／又は高純度に含有する食品又は飲料が提供される。

たとえば、本発明において、ＨＧＦ産生増強物質を含む組成物としてタケ抽出物を使用する場合は、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で好ましくは０．００００１重量％以上含有させるのが好適である。タケ抽出物は、例えばタケの葉を温水中で保持することにより調製することができる。また抽出物中のイソオリエンチン含量を測定し、その有効量を食品又は飲料に含有させてもよい。イソオリエンチンの含有量としては、食品又は飲料中に、好ましくは０．０１重量％以上含有させるのが好適である。

本発明において、ＨＧＦ産生増強物質を含む組成物としてタマネギ抽出物を使用する場合は、例えばタマネギ薄皮の熱水抽出物、例えば５ｇのタマネギ薄皮を１００ｍｌの水中で１００℃、１５分間加熱処理したものを、食品又は飲料中に乾燥重量換算で好ましくは１重量％以上含有させればよい。

本発明において、ＨＧＦ産生増強物質を含む組成物としてイチョウ抽出物を使用する場合は、例えばイチョウ茶葉の熱水抽出物、例えば３ｇのイチョウ茶葉を２００ｍｌの水中で１００℃、１５分間加熱処理したものを、食品又は飲料中に乾燥重量換算で好ましくは５重量％以上含有させればよい。

本発明において、ＨＧＦ産生増強物質を含む組成物としてヨモギ抽出物を使用する場合は、食品又は飲料中に、抽出物燥物換算で好ましくは０．０００１重量％以上含有させるのが好適である。例えばヨモギ１０ｇを１５０ｍｌの水中で６０℃、１時間処理し抽出物を調製すればよい。またヨモギ抽出物中の３，５−ジカフェオイルキナ酸をＨＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中に、３，５−ジカフェオイルキナ酸が好ましくは０．０００５重量％以上含有されるのが好適である。

またヨモギ抽出物中のクロロゲン酸をＨＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中に、クロロゲン酸を好ましくは０．００１重量％以上含有させるのが好適である。

本発明においてアシタバ由来のクロロゲン酸をＨＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中に好ましくは０．００１重量％以上含有させるのが好適である。

本発明において、ＨＧＦ産生増強物質を含む組成物として菊花抽出物を使用する場合は、例えば菊花の熱水抽出物、例えば１０ｇの菊花を１００ｍｌの水中で６０℃、２時間加熱処理したものを、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で好ましくは１重量％以上含有させればよい。

本発明において、ＨＧＦ産生増強物質を含む組成物として紫ウコン抽出物を使用する場合は、例えば紫ウコンの温水抽出物、例えば２０ｇの紫ウコンを１００ｍｌの水中で６０℃、２時間加熱処理したものを、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で好ましくは０．００１重量％以上含有させればよい。

本発明において、ＨＧＦ産生増強物質を含む組成物としてプラム抽出物を使用する場合は、例えばプラムのエタノール抽出物、例えば６０ｇのプラムを１００ｍｌのエタノールで抽出処理したものを、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で好ましくは０．１重量％以上含有させればよい。また抽出物中の５−カフェオイルキナ酸又は４−カフェオイルキナ酸をＨＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中に、５−カフェオイルキナ酸又は４−カフェオイルキナ酸を好ましくは０．０１重量％以上含有させるのが好適である。

本発明において、ＨＧＦ産生増強物質を含む組成物としてブロッコリー抽出物を使用する場合は、例えばブロッコリーの５０％エタノール抽出物、例えば１００ｇのブロッコリーを１００ｍｌの５０％エタノール抽出処理したものを、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で好ましくは０．２重量％以上含有させればよい。

本発明において、ＨＧＦ産生増強物質を含む組成物として春菊抽出物を使用する場合は、例えば春菊の温水抽出物、例えば１０ｇの春菊粉砕物をエタノールで洗浄し、１００ｍｌの水で６０℃、１時間抽出処理したものを、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で好ましくは０．１重量％以上含有させればよい。

また例えば、春菊のエタノール抽出物、例えば春菊５０ｇを８０％エタノール１リットルでホモゲナイズし、得られる抽出物を、食品又は飲料中に、０．１重量％以上含有させるのが好適である。また抽出物中の３，５−ジカフェオイルキナ酸を含有させる場合は、食品又は飲料中に好ましくは０．０００５重量％以上である。

本発明において、ビール類、例えばビール、発泡酒、ノンアルコールビール飲料をＨＧＦ産生増強物質を含む組成物として使用する場合は、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で好ましくは２重量％以上含有させるのが好適である。

本発明において、ＨＧＦ産生増強物質を含む組成物として大豆抽出物を使用する場合は、例えば大豆由来物質の温水抽出物、例えば大豆胚芽、大豆種皮、又はソヤミールをそれぞれエタノール洗浄後、水で６０℃、２時間処理して得られる抽出物を使用すればよく、更にこの抽出物をエタノール可溶画分とエタノール不溶画分に分画したものを使用することができる。

例えば、大豆胚芽細断物１０ｇをエタノールで洗浄し、水２００ｍｌで６０℃、２時間処理し、得られる抽出液に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分とエタノール不溶画分に分別することできる。食品又は飲料中に、当該エタノール可溶画分は乾燥重量換算で好ましくは０．０２重量％以上含有させるのが好適であり、エタノール不溶画分は好ましくは０．０１重量％以上含有させるのが好適である。

例えば、大豆種皮細断物１０ｇをエタノールで洗浄し、水７０ｍｌで６０℃、２時間処理し、得られる抽出物に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分とエタノール不溶画分に分別することできる。食品又は飲料中に、当該エタノール可溶画分は乾燥重量換算で好ましくは０．０１重量％以上含有させるのが好適であり、エタノール不溶画分は好ましくは０．００３重量％以上含有させるのが好適である。

例えば、ソヤミール細断物１０ｇをエタノールで洗浄し、水１００ｍｌで６０℃、２時間処理し、得られる抽出液に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分とエタノール不溶画分に分別することできる。食品又は飲料中に、当該エタノール可溶画分は乾燥重量換算で好ましくは０．０１重量％以上含有させるのが好適であり、エタノール不溶画分は好ましくは０．００５重量％以上含有させるのが好適である。

本発明において、ＨＧＦ産生増強物質を含む組成物としてモロヘイヤ抽出物を使用する場合は、例えばモロヘイヤ葉の温水抽出物、例えば１０ｇのモロヘイヤ粉末をエタノールで洗浄したものを８０ｍｌの水で６０℃、２時間抽出処理し、得られる抽出物に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分とエタノール不溶画分に分別しものを使用することできる。食品又は飲料中に、当該エタノール可溶画分は乾燥重量換算で好ましくは０．０００２重量％以上含有させるのが好適であり、エタノール不溶画分は好ましくは０．０００４重量％以上含有させるのが好適である。

本発明において、ＨＧＦ産生増強物質を含む組成物として米ぬか抽出物を使用する場合は、例えば米ぬかの温水抽出物、例えば１０ｇの米ぬかをエタノールで洗浄し、１００ｍｌの水で６０℃、２時間抽出処理し、得られる抽出物に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分とエタノール不溶画分に分別したものを使用することできる。食品又は飲料中に、当該エタノール可溶画分は乾燥重量換算で好ましくは０．１重量％以上含有させるのが好適である。

本発明において、ＮＧＦ産生増強物質を含む組成物としてベニバナ色素を使用する場合は、食品又は飲料中に好ましくは０．１重量％以上含有させるのが好適である。

本発明においてベニバナ由来サフロミンＡをＮＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中に好ましくは０．３重量％以上含有させるのが好適である。

本発明において、ＮＧＦ産生増強物質を含む組成物として菊花抽出物を使用する場合は、例えば菊花の温水抽出物、例えば１０ｇの菊花を１００ｍｌの水中で６０℃、２時間加熱処理したものを、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で２重量％以上含有させればよい。また本発明において菊花由来グアイアノライドをＮＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中に好ましくは０．００２重量％以上含有させるのが好適である。

本発明において、ＮＧＦ産生増強物質を含む組成物としてアシタバ抽出物を使用する場合は、例えば菊花の温水抽出物、例えば１０ｇのアシタバ葉茎部を２００ｍｌの水中で６０℃、２時間加熱処理したものを、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で好ましくは０．０４重量％以上含有させればよい。本発明において、ＮＧＦ産生増強物質を含む組成物としてアシタバ根部抽出物を使用する場合は、例えば１０ｇのアシタバ根部を２００ｍｌの水中で６０℃、２時間加熱処理したものを、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で好ましくは０．０６重量％以上含有させるのが好適である。

本発明においてアシタバ由来キサントアンゲロールをＮＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中に好ましくは０．００１重量％以上含有させるのが好適である。

本発明においてアシタバ由来３’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノイルケラクトンをＮＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中に好ましくは０．００５重量％以上含有させるのが好適である。

本発明においてアシタバ由来７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−８−プレニルクマリンをＮＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中に好ましくは０．００３重量％以上含有させるのが好適である。

本発明においてアシタバ由来コーヒー酸メチルエステルをＮＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中に好ましくは０．００２重量％以上含有させるのが好適である。

本発明においてアシタバ由来８−カルボキシル−３−ヒドロキシ−５−メトキシル−２−ジメチルクロマンをＮＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中に好ましくは０．０００３重量％以上含有させるのが好適である。

本発明においてアシタバ由来７−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−６−プレニルクマリンをＮＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中に好ましくは０．０３重量％以上含有させるのが好適である。

本発明においてアシタバ由来４’−Ｏ−アンゲロイル−３’−Ｏ−[６−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル]−ケラクトンをＮＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中に好ましくは０．０４重量％以上含有させるのが好適である。

本発明においてアシタバ由来コーヒー酸エチルエステルをＮＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中に好ましくは０．０４重量％以上含有させるのが好適である。

本発明においてタマネギ薄皮抽出物をＮＧＦ産生増強物質として使用する場合は、例えばタマネギ薄皮のエタノール抽出物、例えばタマネギ薄皮２５ｇをエタノール５００ｍｌで抽出して得た抽出物を、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で好ましくは０．０１重量％以上含有させるのが好適である。

本発明において、ＮＧＦ産生増強物質を含む組成物としてイチョウ茶葉抽出物を使用する場合は、例えばイチョウ茶葉の熱水抽出物、例えばイチョウ茶葉３ｇを水２００ｍｌ中で、１００℃、１時間抽出して得られる抽出物を、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で好ましくは０．０７重量％以上含有させるのが好適である。

本発明においてバラ花抽出物をＮＧＦ産生増強物質として使用する場合は、例えばバラ花の温水抽出物、例えばバラ花２ｇを水４０ｍｌで、６０℃、１時間抽出して得られる抽出物を、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で好ましくは０．００８重量％以上含有させるのが好適である。

本発明においてホップ由来キサントフモールをＮＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中に好ましくは０．０００３重量％以上含有させるのが好適である。

本発明において、ＮＧＦ産生増強物質を含む組成物としてホップエキスを使用する場合は、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で好ましくは０．０００１重量％以上、より好ましくは０．００１重量％以上含有させるのが好適である。

本発明においてキサントフモールＢ、キサントフモールＤをＮＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中にそれぞれを好ましくは０．００２重量％以上含有させるのが好適である。

本発明においてイソキサントフモールをＮＧＦ産生増強物質として使用する場合は、食品又は飲料中にそれぞれを好ましくは０．００８重量％以上含有させるのが好適である。

本発明において、ＮＧＦ産生増強物質を含む組成物としてビール類、例えばビール、発泡酒、ノンアルコールビール飲料を使用する場合は、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で好ましくは２重量％以上含有させるのが好適である。

本発明において、ＮＧＦ産生増強物質を含む組成物としてホップエキスを使用する場合は、食品又は飲料中にキサントフモールを好ましくは０．０００００４重量％以上、イソキサントフモールを好ましくは０．０００１３重量％以上含有させるようにホップエキスを含有させるのが好適である。

また本発明において、ＮＧＦ産生増強物質を含む組成物としてホップエキスを使用する場合は、例えばホップのエタノール抽出物、例えばホップ乾燥物粉砕物５０ｇを１リットルのエタノールで抽出して得た抽出物を、食品又は飲料中に、乾燥重量換算で好ましくは０．０００１重量％以上、より好ましくは０．００１重量％以上含有させればよい。

本発明において、ＮＧＦ産生増強物質を含む組成物として紫ウコン抽出物を使用する場合は、例えば紫ウコンの温水抽出物、例えば紫ウコン５ｇを水２５ｍｌで、６０℃、２時間抽出して得られる抽出物を、食品又は飲料中に乾燥重量換算で好ましくは０．０６重量％以上含有させるのが好適である
本発明において、ＮＧＦ産生増強物質を含む組成物として大豆抽出物を使用する場合は、例えば大豆由来物質の温水抽出物、例えば大豆胚芽、大豆種皮、又はソヤミールをそれぞれエタノール洗浄後、水で６０℃、２時間処理して得られる抽出物を使用すればよく、更にこの抽出物をエタノール可溶画分とエタノール不溶画分に分画したものを使用することができる。

例えば、大豆胚芽細断物１０ｇをエタノールで洗浄し、水２００ｍｌで６０℃、２時間処理し、得られる抽出物に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分とエタノール不溶画分に分別することができる。食品又は飲料中に、当該エタノール可溶画分は乾燥重量換算で好ましくは０．５重量％以上含有させるのが好適であり、エタノール不溶画分は好ましくは０．３重量％以上含有させるのが好適である。

例えば、大豆種皮細断物１０ｇをエタノールで洗浄し、水７０ｍｌで６０℃、２時間処理し、得られる抽出物に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分とエタノール不溶画分に分別することができる。食品又は飲料中に、当該エタノール可溶画分は乾燥重量換算で好ましくは０．３重量％以上含有させるのが好適であり、エタノール不溶画分は好ましくは０．０６重量％以上含有させるのが好適である。

例えば、ソヤミール細断物１０ｇをエタノールで洗浄し、水１００ｍｌで６０℃、２時間処理し、得られる抽出物に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分とエタノール不溶画分に分別することできる。食品又は飲料中に、当該エタノール可溶画分は乾燥重量換算で好ましくは０．３重量％以上含有させるのが好適であり、エタノール不溶画分は好ましくは０．００６重量％以上含有させるのが好適である。

本発明において、ＮＧＦ産生増強物質を含む組成物としてモロヘイヤ抽出物を使用する場合は、例えばモロヘイヤ葉の温水抽出物、例えば１０ｇのモロヘイヤ粉末をエタノールで洗浄し、８０ｍｌの水で６０℃、２時間抽出処理し、得られる抽出物に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分とエタノール不溶画分に分別しものを使用することできる。食品又は飲料中に、当該エタノール可溶画分は乾燥重量換算で好ましくは０．０５重量％以上含有させるのが好適であり、エタノール不溶画分は好ましくは０．０００５重量％以上含有させるのが好適である。

本発明において、ＮＧＦ産生増強物質を含む組成物として米ぬか抽出物を使用する場合は、例えば米ぬかの温水抽出物、例えば１０ｇの米ぬかをエタノールで洗浄したものを１００ｍｌの水で６０℃、２時間抽出処理し、得られる抽出物に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分とエタノール不溶画分に分別したものを使用することできる。食品又は飲料中に、当該エタノール可溶画分は乾燥重量換算で好ましくは０．０５重量％以上、エタノール不溶画分は好ましくは０．０５重量％以上含有させるのが好適である。

たとえば、本発明のＨＧＦ産生増強用の食品又は飲料は、以下のようにして公知の方法により製造することができる。

（１）ウーロン茶葉に対し抽出溶媒を加えて抽出し、抽出物をエチルアルコール及びその他成分と混合することによりアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該抽出物を、当該抽出物の１００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（２）タケの葉粉末に対し抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し、抽出物の凍結乾燥物を調製し、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該乾燥物を０．１μｇ／ｍｌとなるように添加することにより、イソオリエンチンが１００μｇ／ｍｌ含まれるアルコール含有飲料を調製できる。

（３）タマネギ薄皮に対し抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し、抽出物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該抽出物を、当該抽出物の１００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（４）イチョウ茶葉に対し抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、１００℃で１５分間抽出）、抽出物の凍結乾燥物を調製し、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該乾燥物を、当該乾燥物の１００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（５）ヨモギ乾燥品に対し抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で１時間抽出）、抽出物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該抽出物から得られる３，５−ジカフェオイルキナ酸を５μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。また、当該抽出物から得られるクロロゲン酸を４０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（６）アシタバ（葉茎部）乾燥品に対し抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で１時間抽出）、抽出物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該抽出物から得られるクロロゲン酸を１０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（７）菊花乾燥物に対し抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該抽出物を、当該抽出物の１００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（８）紫ウコン乾燥品に対し抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物の凍結乾燥物を調製し、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該乾燥物を１０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（９）プラムに対し抽出溶媒（たとえば、エタノール）を加えてホモゲナイズし、ろ過によりろ液を調製し、得られた抽出物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該抽出物を、当該抽出物の１０００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。また、当該抽出物から得られる５−カフェオイルキナ酸及び４−カフェオイルキサン酸を各々１００μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（１０）ブロッコリーに対し抽出溶媒（たとえば、５０％エタノール水溶液）を加えてホモゲナイズし、ろ過によりろ液を調製し、当該ろ液を濃縮する。得られた濃縮物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該濃縮物を、当該濃縮液の１０００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（１１）春菊の凍結乾燥物を粉砕し、有機溶媒（たとえば、エタノール）で洗浄後、抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で１時間抽出）、抽出物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該抽出物を、当該抽出物の１０００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（１２）春菊に対し抽出溶媒（たとえば、８０％エタノール）を加えてホモゲナイズし、ろ過によりろ液を調製し、当該ろ液を濃縮する。得られた濃縮物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該抽出物を、当該抽出物の１０００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。また、当該抽出物から得られる３，５−ジカフェオイルキナ酸を１０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（１３）ビールを濃縮し、当該濃縮物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該濃縮物を、当該濃縮物の１００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（１４）ノンアルコールビール飲料を濃縮し、当該濃縮物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該濃縮物を、当該濃縮物の１００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（１５）大豆胚芽細断物を有機溶媒（たとえば、エタノール）で洗浄した後、抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物を得る。抽出物をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に有機溶媒（たとえば、２．５倍量のエタノール）を加え、有機溶媒可溶画分と有機溶媒不溶画分に分け、それぞれの乾燥物を調製する。当該乾燥物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、エタノール可溶画分の乾燥物を２００μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。また、エタノール不溶画分の乾燥物を１３０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（１６）大豆種皮細断物を有機溶媒（たとえば、エタノール）で洗浄した後、抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物を得る。抽出物をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に有機溶媒（たとえば、２．５倍量のエタノール）を加え、有機溶媒可溶画分と有機溶媒不溶画分に分け、それぞれの乾燥物を調製する。当該乾燥物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、エタノール可溶画分の乾燥物を１３０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。また、エタノール不溶画分の乾燥物を３０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（１７）ソヤミール細断物を有機溶媒（たとえば、エタノール）で洗浄した後、抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物を得る。抽出物をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に有機溶媒（たとえば、２．５倍量のエタノール）を加え、有機溶媒可溶画分と有機溶媒不溶画分に分け、それぞれの乾燥物を調製する。当該乾燥物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、エタノール可溶画分の乾燥物を１００μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。また、エタノール不溶画分の乾燥物を６０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（１８）モロヘイヤ葉粉末を有機溶媒（たとえば、エタノール）で洗浄した後、抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物を得る。抽出物をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に有機溶媒（たとえば、２．５倍量のエタノール）を加え、有機溶媒可溶画分と有機溶媒不溶画分に分け、それぞれの乾燥物を調製する。当該乾燥物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、エタノール可溶画分の乾燥物を２μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。また、エタノール不溶画分の乾燥物を４μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（１９）米ぬかを有機溶媒（たとえば、エタノール）で洗浄した後、抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物を得る。抽出物をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に有機溶媒（たとえば、２．５倍量のエタノール）を加え、有機溶媒可溶画分を得て、その乾燥物を調製する。当該乾燥物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、エタノール可溶画分の乾燥物を１ｍｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（２０）前記（１）〜（１９）に記載のアルコール含有飲料に対し常法によりカーボネーションを行い、発泡タイプの飲料を調製することができる。また、各飲料につき、有効成分を前記記載の飲料の２０倍量含有させたノンアルコールタイプの飲料を調製することができる。成長因子産生増強物質を高濃度および／または高純度に含有する、これらの飲料は、高いＨＧＦ産生増強作用を示し得るので好ましい。

また、たとえば、本発明のＮＧＦ産生増強用の食品又は飲料は、以下のようにして公知の方法により製造することができる。

（１）常法に従い、グレープフルーツ果汁をエチルアルコール及びその他成分と混合することによりアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該グレープフルーツ果汁を、当該果汁の６倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（２）ベニバナ黄色色素を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該色素を１．２５ｍｇ／ｍｌとなるように添加した、サフロミンＡが高含有されるアルコール含有飲料を調製できる。

また、ベニバナ乾燥物に対し抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物の凍結乾燥物を調製し、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該乾燥物を、当該乾燥物に含まれるサフロミンＡの量で３ｍｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

（３）菊花乾燥物に対し抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物の凍結乾燥物を調製し、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該乾燥物を２０ｍｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。また、当該乾燥物を、当該乾燥物に含まれるグアイアノライドの量で２０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

（４）アシタバ乾燥物（葉茎部）に対し抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物の凍結乾燥物を調製し、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該乾燥物を４００μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

また、アシタバ乾燥物（根部）に対し抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物の凍結乾燥物を調製し、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該乾燥物を６００μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

また、当該乾燥物を、当該乾燥物に含まれるキサントアンゲロールの量で１０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。当該乾燥物を、当該乾燥物に含まれる３’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノイルケラクトンの量で５０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

当該乾燥物を、当該乾燥物に含まれる７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−８−プレニルクマリンの量で３０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

当該乾燥物を、当該乾燥物に含まれるコーヒー酸メチルエステルの量で２０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

当該乾燥物を、当該乾燥物に含まれる８−カルボキシル−３−ヒドロキシ−５−メトキシル−２−ジメチルクロマンの量で３μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

当該乾燥物を、当該乾燥物に含まれる７−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−６−プレニルクマリンの量で３００μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

当該乾燥物を、当該乾燥物に含まれる４’−Ｏ−アンゲロイル−３’−Ｏ−[６−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル]−ケラクトンの量で４００μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

当該乾燥物を、当該乾燥物に含まれるコーヒー酸エチルエステルの量で３０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

（５）タマネギ薄皮に対し抽出溶媒（たとえば、９５容量％エチルアルコール）を加えて抽出し、抽出物の凍結乾燥物を調製し、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該乾燥物を１００μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

（６）イチョウ茶葉に対し抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、１００℃で１時間抽出）、抽出物の凍結乾燥物を調製し、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該乾燥物を７００μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

（７）バラ花に対し抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で１時間抽出）、抽出物の凍結乾燥物を調製し、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該乾燥物を８０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

（８）常法に従い、ホップエキスを用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該ホップエキスを、当該ホップエキスに含まれるキサントフモールの量で３μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

（９）常法に従い、ホップエキスを用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該ホップエキスを乾燥重量で２０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

（１０）常法に従い、ホップエキスを用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該ホップエキスを、当該ホップエキスに含まれるキサントフモールＢおよびキサントフモールＤの総量で２０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

（１１）常法に従い、ホップエキスを用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該ホップエキスを、当該ホップエキスに含まれるイソキサントフモールの量で８０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

（１２）ビールを濃縮し、当該濃縮物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該濃縮物を、当該濃縮物の１０倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（１３）ノンアルコールビール飲料を濃縮し、当該濃縮物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該濃縮物を、当該濃縮物の１０倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（１４）常法に従い、ホップエキスを用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該ホップエキスを、当該ホップエキスに含まれるキサントフモールの量が０．０４μｇ／ｍｌ、イソキサントフモールの量が１．３μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

また、当該ホップエキスを、当該ホップエキスに含まれるキサントフモールの量が０．９μｇ／ｍｌ、イソキサントフモールの量が４μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

（１５）ホップ乾燥物を粉砕し、抽出溶媒（たとえば、エタノール）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で１時間抽出）、得られた抽出物を濃縮し、当該濃縮物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該濃縮物を乾燥重量で２０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

（１６）紫ウコン細断物に対し抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物の凍結乾燥物を調製し、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、当該乾燥物を６００μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製することができる。

（１７）大豆胚芽細断物を有機溶媒（たとえば、エタノール）で洗浄した後、抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物を得る。抽出物をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に有機溶媒（たとえば、２．５倍量のエタノール）を加え、有機溶媒可溶画分と有機溶媒不溶画分に分け、それぞれの乾燥物を調製する。当該乾燥物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、エタノール可溶画分の乾燥物を５ｍｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。また、エタノール不溶画分の乾燥物を３ｍｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（１８）大豆種皮細断物を有機溶媒（たとえば、エタノール）で洗浄した後、抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物を得る。抽出物をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に有機溶媒（たとえば、２．５倍量のエタノール）を加え、有機溶媒可溶画分と有機溶媒不溶画分に分け、それぞれの乾燥物を調製する。当該乾燥物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、エタノール可溶画分の乾燥物を３ｍｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。また、エタノール不溶画分の乾燥物を６００μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（１９）ソヤミール細断物を有機溶媒（たとえば、エタノール）で洗浄した後、抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物を得る。抽出物をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に有機溶媒（たとえば、２．５倍量のエタノール）を加え、有機溶媒可溶画分と有機溶媒不溶画分に分け、それぞれの乾燥物を調製する。当該乾燥物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、エタノール可溶画分の乾燥物を３ｍｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。また、エタノール不溶画分の乾燥物を６０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（２０）モロヘイヤ葉粉末を有機溶媒（たとえば、エタノール）で洗浄した後、抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物を得る。抽出物をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に有機溶媒（たとえば、２．５倍量のエタノール）を加え、有機溶媒可溶画分と有機溶媒不溶画分に分け、それぞれの乾燥物を調製する。当該乾燥物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、エタノール可溶画分の乾燥物を５００μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。また、エタノール不溶画分の乾燥物を５μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（２１）米ぬかを有機溶媒（たとえば、エタノール）で洗浄した後、抽出溶媒（たとえば、水）を加えて抽出し（たとえば、６０℃で２時間抽出）、抽出物を得る。抽出物をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に有機溶媒（たとえば、２．５倍量のエタノール）を加え、有機溶媒可溶画分と有機溶媒不溶画分に分け、それぞれの乾燥物を調製する。当該乾燥物を用いて、前記（１）と同様にしてアルコール含有飲料を調製する。たとえば、エタノール可溶画分の乾燥物を５００μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。また、エタノール不溶画分の乾燥物を５００μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製できる。

（２２）前記（１）〜（２１）に記載のアルコール含有飲料に対し常法によりカーボネーションを行い、発泡タイプの飲料を調製することができる。また、各飲料につき、有効成分を前記の飲料の２０倍量含有させたノンアルコールタイプの飲料を調製することができる。成長因子産生増強物質を高濃度および／または高純度に含有する、これらの飲料は、高いＮＧＦ産生増強作用を示し得るので好ましい。

以上、本発明により植物由来のＨＧＦ産生増強物質、ＮＧＦ産生増強物質を有効成分とする、ＨＧＦ産生増強用食品又は飲料、ＮＧＦ産生増強用食品又は飲料が提供される。

例えば本発明により、ＮＧＦ産生増強物質の有効量を含有する食品又は飲料、ホップエキスを含有し、食品又は飲料中、キサントフモールの含有量が好ましくは０．００００４重量％以上及び／又はイソキサントフモールの含有量が好ましくは０．０００１３重量％以上であるＮＧＦ産生増強用の食品又は飲料が提供され、当該食品又は飲料はＮＧＦ産生を要する疾患、例えばパーキンソン病、老年性痴呆、例えばアルツハイマー症、脳血管性痴呆等の症状改善や疾病の予防に極めて有用である。

また、本発明により、植物由来の成長因子産生増強作用を有する有効成分を高含有するアルコール含有飲料が提供される。本明細書においてアルコール含有飲料とはエチルアルコールを含有する飲料をいう。アルコール含有飲料中のエチルアルコール含量は、例えば０．１〜５０容量％である。また、本発明のアルコール含有飲料を使用した、食品、例えばウイスキーボンボンも提供される。

アルコール含有飲料として好適には、植物由来の成長因子産生増強作用を有する有効成分を高濃度及び／又は高純度に含有するアルコール含有飲料が例示され、例えば植物由来の成長因子産生増強作用を有する有効成分が添加された日本酒、合成清酒、中国酒、パイチュウ、ワイン、ウイスキー、焼酎、ウオッカ、ブランデー、ジン、ラム酒、ビール、発泡酒、清涼アルコール飲料、サワー、カクテル、果実酒、リキュール等が例示される。

前記アルコール含有飲料のエチルアルコール濃度は通常好ましくは０．１〜１２容量％であり、より好ましくは０．５〜８容量％、さらに好ましくは１〜６容量％である。使用するアルコールには特に限定はないが、例えば、醸造用アルコール、スピリッツ類（ラム酒、ウオッカ、ジン等）、ウイスキー、ブランデー、又は焼酎等をそれぞれ単独又は併用して用いることができる。

また、当該アルコール含有飲料は、植物由来の成長因子産生増強作用を有する有効成分をエチルアルコール、所望によりその他成分と混合することにより製造することができる。また、エチルアルコール濃度が前記所望の範囲にあるアルコール含有飲料中に所望の植物を浸漬し、当該植物から成長因子産生増強作用を有する有効成分を抽出することにより、本発明のアルコール含有飲料を製造してもよい。

本発明のアルコール含有飲料は成長因子産生増強用飲料である。本発明の当該飲料の製造には従来より製造されている原材料や方法を用いることができる。例えば原材料として、甘味料、着色料、酸味料、調味料、乳化剤、ビタミン強化剤、食物繊維等の機能性食品素材、香辛料、香料、造粘剤、ミネラル等の食品素材や食品添加物等の飲食可能な物質が使用可能である。

本発明のアルコール含有飲料のｐＨは、通常の食品の取る範囲で選択することが可能であり、通常はｐＨ２〜７の範囲で選択することが可能である。本発明の清涼アルコール飲料は、カーボネーションの有無は任意である。カーボネーションを行う場合には、製品のガスボリューム１以上が好ましく、より好ましくは１．３〜３の範囲である。また本発明のアルコール含有飲料は、果汁、野菜汁、果肉、野菜片の添加も任意に行うことができる。

また本発明により、キサントフモールを食品又は飲料中、０．０００３重量％以上含有する成長因子産生増強用の食品又は飲料が提供される。

従来のホップエキス（抽出物）含有飲料であるビール、ノンアルコールビール中には、本発明に使用するキサントフモールが含有されているが、Ａ社製ビール中のキサントフモール含量は０．７３μｇ／１００ｍｌ、Ｂ社製ビール中のキサントフモール含量は２．１μｇ／１００ｍｌ、Ｃ社製ビール中のキサントフモール含量は０．７０μｇ／１００ｍｌであり、いずれのビールも本発明のキサントフモールを０．００００７重量％以上含有する飲料には該当しない。

本発明の、食品又は飲料中、キサントフモールを０．００００７重量％以上含有する食品又は飲料の製造法としては限定はないが、例えばビール中にキサントフモールを含有するホップエキスを添加してもよく、ノンアルコールビールを原料として使用してもよく、清涼アルコール飲料、嗜好飲料等の製造原料にキサントフモールを含有するホップエキスを使用してもよい。ホップエキスの代わりにホップ自体を使用するのも当然本発明の範囲である。なお、ホップエキス自体を、本発明の成長因子産生増強用組成物として使用することもできる。

本発明の食品又は飲料中のキサントフモール含量は、生理学的効果と官能結果より決定すればよく、食品又は飲料中、好ましくは０．００００７重量％以上含有されていればよく、通常、０．０００１〜０．００１重量％の範囲であるのが好適である。

また本発明は、成長因子産生増強物質を含有する食品、飲料又はその処理物を有効成分として含有する成長因子産生増強用の食品又は飲料を提供する。成長因子産生増強物質を含有する食品又は飲料としては、ビール類が例示される。ビール類としては、ビール、発泡酒、ノンアルコールビール飲料、これらの濃縮物、これらの希釈物、ホップ抽出物含有飲料が例示され、例えばビール、発泡酒を成長因子産生増強用の飲料としてもよく、食品又は飲料の原料としてもよい。またビール類の処理物、例えば濃縮物や希釈物を食品又は飲料の原料としてもよい。

本発明は更に、ホップ抽出物を含有する成長因子産生増強用の食品又は飲料に関する。ホップ抽出物としては市販のホップ抽出物を使用することができ、通常、食品又は飲料中、好ましくは０．０００１重量％以上、より好ましくは０．００２〜０．０２重量％含有されていればよい。いずれにしても本発明により開示される方法（たとえば、実施例４−（１）および実施例１３）により、ホップエキス中の成長因子産生増強活性を測定し、官能と生理活性の点から、ホップエキスの含有量を決定し、本発明の食品又は飲料を製造すればよい。

本発明により、ホップエキスを含有し、食品又は飲料中にキサントフモールを好ましくは０．０００００００６重量％以上、イソキサントフモールを好ましくは０．０００００５重量％以上含有する成長因子産生増強用の食品又は飲料が提供される。

また本発明により、ホップエキスを含有し、食品又は飲料中にキサントフモールを好ましくは０．０００００３２重量％以上、イソキサントフモールを好ましくは０．０００１３重量％以上含有する濃厚タイプの成長因子産生増強用食品又は飲料が提供される。

更に本発明により、ホップエキスを含有し、食品又は飲料中にキサントフモールを好ましくは０．００００７重量％以上、イソキサントフモールを好ましくは０．０００４重量％以上含有する食品又は飲料が提供され、当該食品又は飲料は高活性の成長因子産生増強作用を有する。

本発明の食品又は飲料としては、成長因子産生増強作用を有する植物由来の成長因子産生増強用組成物が含有されており、その生理機能を発現するための必要量が含有されていれば特にその形状に限定はなく、タブレット状、顆粒状、カプセル状等の形状の経口的に摂取可能な形状物も包含する。

また、本発明は、有効成分としての成長因子産生増強物質を含有してなる、成長因子産生増強作用を有する生物用の飼料を提供する。当該飼料としては、前記食品又は飲料と同様、前記成長因子産生増強用組成物を含有してなる成長因子産生増強用の飼料、前記成長因子産生増強物質を高濃度及び／又は高純度に含有してなることを特徴とする飼料、前記成長因子産生増強用組成物を高濃度及び／又は高純度に含有してなる飼料、キサントフモールを飼料中、０．００００７重量％以上含んでなる神経成長因子産生増強用の飼料、前記成長因子産生増強物質を含有してなる飼料又はその処理物を含有してなる成長因子産生増強用の飼料（好ましくはビール類を含有する態様）、ならびにホップ抽出物を含有してなる成長因子産生増強用の飼料が提供される。使用される成長因子産生増強物質としては、前記食品又は飲料と同様、クロロゲン酸、ジカフェオイルキナ酸、カフェオイルキナ酸、イソオリエンチン、サフロミンＡ、グアイアノライド、キサントアンゲロール、３’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノイルケラクトン、７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−８−プレニルクマリン、コーヒー酸メチルエステル、コーヒー酸エチルエステル、８−カルボキシル−３−ヒドロキシ−５−メトキシル−２−ジメチルクロマン、７−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−６−プレニルクマリン，４’−Ｏ−アンゲロイル−３’−Ｏ−[６−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル]−ケラクトン、イソキサントフモール、キサントフモールＢ、キサントフモールＤおよびキサントフモールからなる群より選択される１以上の化合物が好ましい。

さらに、別の一態様として、前記有効成分を生物に投与することを特徴とする生物の飼育方法をも提供する。また、本発明の別の一態様として、前記有効成分を含有することを特徴とする生物飼育用剤が提供される。

これらの発明において、生物とはたとえば養殖動物、ペット動物などであり、養殖動物としては家畜、実験動物、家禽、魚類、甲殻類または貝類が例示される。飼料としては体調の維持および／または改善用飼料が例示される。生物飼育用剤としては浸漬用剤、飼料添加剤、飲料用添加剤が例示される。

これらの発明によれば、それらを適用する前記例示するような生物において、本発明に使用される前記有効成分の成長因子産生増強作用に基づき、本発明の前記治療剤または予防剤と同様の効果の発現が期待できる。すなわち、これらの発明により、当該生物における成長因子産生増強作用を要する疾患の治療または予防効果を期待できる。

本発明に使用される前記有効成分は通常、対象生物の体重１ｋｇ、１日当たり好ましくは０．０１〜２０００ｍｇ投与される。投与は、たとえば、当該有効成分を、対象生物に供する人工配合飼料の原料中に添加混合しておくか、人工配合飼料の粉末原料と混合した後、その他の原料にさらに添加混合することで行うことができる。また、前記有効成分の飼料中の含有量は特に限定されるものではなく、目的に応じて適宜設定すれば良いが、０．００１〜１５重量％の割合が好適である。

人工配合飼料としては、魚粉、カゼイン、イカミールなどの動物性原料、大豆粕、小麦粉、デンプンなどの植物性原料、飼料用酵母などの微生物原料、タラ肝油、イカ肝油などの動物性油脂、大豆油、菜種油などの植物性油脂、ビタミン類、ミネラル類、アミノ酸、抗酸化剤などを原料とする人工配合飼料が挙げられる。また魚肉ミンチなどの魚類用飼料が挙げられる。

本発明の飼料の製造法に特に限定はなく、また配合も一般の飼料に準ずるものであればよく、製造された飼料中に成長因子産生増強作用を有する本発明に係る前記有効成分が含まれていればよい。

また、成長因子産生増強作用を有する本発明に係る前記有効成分をプール、水槽、保持タンクまたは飼育領域の水、海水などに直接、添加し、対象生物を浸漬することにより、投与することもできる。この浸漬方法は対象生物の飼料摂取量が低下したときに特に有効である。水または海水中の成長因子産生増強作用を有する本発明に係る有効成分の濃度は特に限定はなく、目的に応じて使用すれば良いが、好ましくは０．００００１〜１重量％の割合が適当である。

また、成長因子産生増強作用を有する本発明に係る前記有効成分を含有する飲料を飼育用飲料として対象生物に摂取させても良い。該飲料中の成長因子産生増強作用を有する本発明に使用される有効成分の濃度は特に限定はなく、目的に応じて使用すれば良いが、０．０００１〜１重量％の割合が適当である。成長因子産生増強作用を有する本発明に係る前記有効成分を含んでなる生物飼育用剤、たとえば浸漬用剤、飼料添加剤、飲料用添加剤はそれ自体公知の配合および製造法で製造すれば良い。該生物飼育用剤における有効成分の含有量は、本発明の所望の効果が得られ得る限り特に限定されるものではない。

本発明が適用できる生物としては限定はないが、養殖動物としては、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ラクダ、ラマなどの家畜、マウス、ラット、モルモット、ウサギなどの実験動物、ニワトリ、アヒル、七面鳥、駝鳥などの家禽、マダイ、イシダイ、ヒラメ、カレイ、ブリ、ハマチ、ヒラマサ、マグロ、シマアジ、アユ、サケ・マス類、トラフグ、ウナギ、ドジョウ、ナマズなどの魚類、クルマエビ、ブラックタイガー、タイショウエビ、ガザミなどの甲殻類など、アワビ、サザエ、ホタテ貝、カキなどの貝類、ペット動物としてはイヌ、ネコなどが挙げられ、陸上・水中動物に広く適用できる。

成長因子産生増強作用を有する本発明に使用される前記有効成分を含んでなる飼料を摂取させること、または成長因子産生増強作用を有する本発明に使用される前記有効成分の含有液に対象生物を浸漬することにより、家畜、実験動物、家禽、魚類、甲殻類、貝類、ペット動物などの体調を良好に維持し、または、改善させたりすることができる。

以上のように、本発明により、成長因子産生増強作用を有する種々の医薬品、食品、飲料、飼料等が提供されるが、中でも、本発明の所望の効果の発現の観点から、成長因子産生増強物質としてグアイアノライドを含有してなる成長因子産生増強用組成物、治療剤もしくは予防剤、ならびに食品、飲料もしくは飼料が特に好ましい。

さらに、本発明の別の態様として、成長因子産生増強を必要とする疾患の治療剤もしくは予防剤、成長因子産生増強剤、または成長因子産生増強用の食品、飲料もしくは飼料の製造における本発明に係る前記有効成分の使用を提供する。かかる使用の態様としては、本発明の前記治療剤もしくは予防剤、成長因子産生増強剤、または成長因子産生増強用の食品、飲料もしくは飼料の製造における前記有効成分の使用の態様を挙げることができる。たとえば、成長因子産生増強を必要とする疾患の治療剤もしくは予防剤、または成長因子産生増強剤の製造における、前記有効成分の使用としては、前記のような錠剤、顆粒剤、散剤、粉末剤、カプセル剤などの固形剤、通常液剤、懸濁剤、乳剤などの液剤、また、使用前に適当な担体の添加によって液状となし得る乾燥品の製造においての使用が例示される。

なお、本発明で有効成分として使用される成長因子産生増強物質は、ラットに対し１ｇ／ｋｇ体重で経口単回投与しても死亡例は認められない。

以下、実施例を挙げて、本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。なお、特段の事情がない限り実施例における％は重量％を意味する。また、フラクションを画分という場合がある。
実施例１
（１）タケの葉を凍結乾燥後粉砕したタケの葉粉末６．７ｇを１００ｍｌのクロロホルムに懸濁し、ろ過して不溶画分を回収する操作を３回繰り返した。その後、１００ｍｌのエタノールに懸濁してろ過し、不溶画分を回収する操作を３回繰り返した。この操作で得た不溶画分からエタノールを完全に除去し、１００ｍｌの蒸留水に懸濁した。この懸濁液を１時間６０℃で保温した後、ろ過した。濾液に２．５倍量のエタノールを添加して、−２０℃で冷却した後、低温で遠心分離して沈殿を得た。この沈殿を蒸留水に溶解し、凍結乾燥してパウダー状の糖を含有するタケの葉抽出物を得た。

（２）実施例１−（１）で調製したタケの葉抽出物の１０ｍｇ／ｍｌ水溶液３００μｌをマイクロコン３０００カット（アミコン社製）に入れ、１００００ｒｐｍで９０分間遠心し、フィルターを通り抜けた画分（下層画分）を調製した。さらに、上層に残留していた画分は、３００μｌの蒸留水に再溶解し、上層画分を調製した。
実施例２
タマネギの茶色の薄皮５ｇを蒸留水１００ｍｌに懸濁し、１００℃で１５分間保温した後、タマネギ薄皮を取り除いて、５％タマネギ薄皮抽出物を得た。
実施例３
イチョウ茶葉（１００％GINKGO、BILOBA TEA：商品名GINGOTON、Gingoton Inc., Gardena OA 90248 USA）３ｇを蒸留水２００ｍｌに懸濁し、１００℃で１５分間保温した後、ろ過でイチョウ茶葉を取り除いて、上清を得た。この上清を凍結乾燥後、８ｍｌの蒸留水に溶解し、イチョウ茶葉抽出物を得た。
実施例４
（１）実施例１−（１）で調製したタケの葉抽出物（試料(1)）、実施例１−（２）で調製した下層画分（試料(2)）上層画分（試料(3)）のＨＧＦ産生増強活性を測定した。１×１０⁵ｃｅｌｌｓ／ｍｌとなるように１０％牛胎児血清を含んだＤＭＥ培地に懸濁したMRC-５細胞（CCL １７１：大日本製薬社製、ｃｏｄｅ．０２−０２１）５００μｌを４８穴の細胞培養プレートに入れ、３７℃、５％ＣＯ₂存在下で２４時間培養後に１％牛胎児血清を含んだＤＭＥ培地に交換した。その後、試料を添加し、さらに２４時間培養した後、培地を回収し、Quantikine Human Hepatocyte Growth Factor (HGF) ELISA Kit（フナコシ社製、Code．RS-０６４１-００）を用いて、培地中のＨＧＦの量を測定した。ＨＧＦの産生量は、ネガティブコントロール１００％として表した。試料(1)は、最終濃度が、０．００１、０．０１、０．１、１μｇ／ｍｌになるように、試料(2)、(3)は、最終濃度が、１、１０、１００μｇ／ｍｌになるように添加した。ネガティブコントロールとして、試料と同量の蒸留水を添加した。ＨＧＦの産生量は、ネガティブコントロール１００％として表した。試料(1)の結果を表１に、試料(2)、(3)の結果を表２に示した。実験は全て２連で行いその平均値を採用した。表１、２に示したように、これらの試料はＨＧＦの産生を増強した。特に試料(1)及び(3)添加群は、強くＨＧＦの産生量が増加していた。このことより、タケの葉抽出物には、ＨＧＦの産生を増強する活性があることが示された。さらに上層画分にＨＧＦ産生増強活性があったことより、分子量３０００より高分子の物質にＨＧＦ産生誘導活性が認められた。

（２）細かくしたタケの葉約5ｇを50%アセトン70ｍｌと共に15分以上撹拌し、得られた抽出液を吸引ろ過し、残渣を再び同量の溶媒で抽出した。この粗抽出液のHGF産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法で調べたところ、表３に示すように活性が確認された。粗抽出液を減圧濃縮し、濃縮液を水で20倍に希釈し、その一部を10mL分のアンバーライトXAD-2（オルガノ社製）に供し、30%、40%、50%、60%メタノール水溶液、及びメタノール各30mlで順次溶出した。各画分のHGF産生誘導活性を測定したところ、40%メタノール、30%メタノール溶出画分に活性が確認された。30%、40%メタノール溶出画分を濃縮・乾固し、クロロホルム：メタノール：酢酸＝3：1：2.5%を展開溶としたシリカカラムクロマトグラフィーに供し、10mLずつ分取した。

¹H-NMR、FAB-MSにより分析した結果、フラクション１９〜３５本目に、イソオリエンチン（isoorientin）を高濃度に含有する画分が得られ、この画分に表４に示す様にＨＧＦ産生増強活性が確認された。
¹H-NMR
isoorientin: σ7.57(1H, dd, J 8,2Hz), 7.55(1H, d, J 2Hz), 7.02(1H, d, J 8Hz),6.81(1H, s), 6.63(1H, d, J 8Hz), 4.74(1H, d, J 10Hz), 4.19(1H, t, J 4.5Hz)
FAB-MASS
449(M+H)

（３）市販の乾燥プラム約300ｇをメタノール500mlと共にミキサーにかけて磨砕し、吸引ろ過によりろ液を得た。このろ液１ｍｌを濃縮乾固し、１ｍｌのＤＭＳＯに溶解したプラム粗抽出液のHGF産生増強活性を調べたところ、表５に示すような活性が確認された。

得られた粗抽出液を濃縮して抽出溶媒を除き、水で1リットルに希釈し、200ｍｌのアンバーライトXAD-2(オルガノ社製)に供し、500mlのH₂Oで洗浄後、メタノールで吸着画分を溶出した。得られた溶出画分を濃縮後、少量の水に溶解した後、コスモシール140C₁₈-OPN(ナカライテスク社製)に供し、水と25%のアセトニトリル水溶液、合計800ｍｌの勾配で溶出し、約10mlずつ分取した。得られたフラクションを、¹H-NMRにより分析した結果、26本目〜32本目のフラクションと41本目〜48本目のフラクションにそれぞれ、５−カフェオイルキナ酸（5-caffeoyl-quinic acid）、４−カフェオイルキナ酸（4-caffeoyl-quinic acid）を高濃度に含む画分を得、それぞれ表６に示すようにＨＧＦ産生増強活性が確認された。
¹H-NMR
5-caffeoyl-quinic acid:σ7.63(1H, d, J 15.5Hz), 7.19(1H, s), 7.12(1H, d, J 8Hz), 6.93(1H, d, J 8Hz), 5.40(1H, m), 4.18(1H, m), 3.77(1H, dd, J 9.5, 4.5Hz), 2.2〜1.6(5H, m)
4-caffeoyl-quinic acid:σ7.49(1H, d, J 15.5Hz), 7.04(1H, d, J 4Hz), 6.99(1H, dd, J 8, 4Hz), 6.73(1H, d, J 8Hz), 6.27(1H, d, 16Hz), 4.65(1H, dd, J 8, 3Hz), 4.08 (1H, m), 2.2〜1.6(5H, m)

（４）市販のブロッコリー約300gを50%エタノール水溶液350ｍｌと共にホモジナイズし、ろ過によりろ液を得た。残渣を50%エタノール水溶液350ｍｌで再度ホモジナイズし、得られたろ液をまとめて150ｍｌに減圧濃縮した。この濃縮液のHGF産生増強活性を実施例４−（１）と同様に調べたところたところ、表７に示すようにＨＧＦ産生増強活性が確認された。

実施例５
実施例２で調製したタマネギ薄皮抽出物（試料(1)）、実施例３で調製したイチョウ葉抽出物（試料(2)）のＨＧＦ産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法で検討した。それぞれの試料を蒸留水で１、１０、１００倍希釈し、それぞれの希釈液５μｌを培地に添加した。ネガティブコントロールとして、試料と同量の蒸留水を添加した。ＨＧＦの産生量は、ネガティブコントロール１００％として表した。その結果を表８に示した。実験は全て２連で行いその平均値を採用した。表８に示したように、試料(1)、(2)はＨＧＦの産生を増強した。このことより、タマネギ薄皮抽出物、イチョウ葉抽出物はＨＧＦ産生増強活性があることが示された。

実施例６
（１）キク科植物であるヨモギとして、サザバルヨモギを収穫後、３年熟成させたものを使用し、当該熟成物を水洗後、蒸気加熱方式の抽出機で、１００〜１０５℃、７時間の熱水抽出を行い、ヨモギ抽出物を調製した。この抽出物をさらに２４時間煎じてアメ状とし、次に製錠機で錠剤化した。

（２）実施例６−（１）で調製した錠剤（泉湖食品社製）を粉砕した粉末15．563gを１００ｍｌのクロロホルムに懸濁し、ろ過して不溶画分を回収する操作を２回繰り返した。その後、１００ｍｌのエタノールに懸濁してろ過し、不溶画分を回収する操作を２回繰り返した。この操作で得た不溶画分からエタノールを完全に除去し、１００ｍｌの蒸留水に懸濁した。この懸濁液を１時間６０℃で保温した後、ろ過した。濾液に2.5倍量のエタノールを添加して、-20℃で冷却した後、低温で遠心分離して沈殿を得た。この沈殿を蒸留水に溶解し、凍結乾燥してパウダー状の糖を含有する画分を得た。

（３）実施例４−（１）と同様の方法で実施例６−（２）で調製したサザバルヨモギ抽出物のＨＧＦ産生増強活性を検討した。サザバルヨモギ抽出物は、最終濃度が１、10、100μg/mlになるように添加した。ネガティブコントロールとして、試料と同量の蒸留水を添加した。ＨＧＦの産生量は、ネガティブコントロール１００％として表した。その結果を表９に示した。実験は全て２連で行いその平均値を採用した。表９に示したように、サザバルヨモギ抽出物はＨＧＦ産生を増強した。

実施例７
（１）アシタバ乾燥品（阪本漢方堂社製）480gを酢酸エチル１リットルで2回、エタノール１リットルで2回抽出した残渣に水２リットルを添加し60℃、１時間抽出した。抽出ろ液を250mlに濃縮した後、エタノール50mlを添加し、不溶物質を除去した後、得られた上澄を減圧濃縮した。濃縮物の約半分量をXAD-2(オルガノ社製)300mlに供し、水600mlで洗浄した後、吸着画分を30％メタノール600ml(画分1)、60％メタノール500ml(画分2)、100％メタノール600ml(画分3)の順に段階的に溶出した。これらの溶出液を乾固した後、それぞれ50mlの水に溶解し、各画分のＨＧＦ産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法にて測定した。ただし、それぞれの画分を最終濃度が0.01、0.1、1％となるように添加した。その結果を表１０に示した。実験は2連で行ない、その平均値を採用した。表１０に示すようにこれらの画分はいずれもＨＧＦ産生増強活性を示した。

（２）更に、画分3をブタノール：エタノール：酢酸：水＝10：10：1：1を展開溶媒としたシリカゲルプレート（メルク社製）上で展開し、分画を行い、各スポットのＨＧＦ産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法で測定した。その結果、Rf値0.3付近のUV254nmに吸収を示す化合物（以下、化合物（１）と示す）にHGF産生増強活性が存在した。この化合物（１）を、¹H-NMRで解析したところ第１図に示すようにクロロゲン酸標品（シグマ社製）のものと一致し、化合物（１）はクロロゲン酸であることが確認された。また、クロロゲン酸標品のHGF産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法で、検討したところ表１１に示す様に確かにそのＨＧＦ産生増強活性が確認された。

（３）更に、クロロゲン酸標品をスタンダードとして、HPLC(TSK gel ODS-80Ts(東ソー社製)、A液：水(0.1％TFA含有）、B液：50％アセトニトリル(0.1％TFA含有）、0分−B25％、20分−B75％）で画分1〜3の中に含まれるクロロゲン酸量を分析し、その結果を表１２に示した。

また、表１０、１２の結果から画分1〜3に含まれるクロロゲン酸濃度と各画分のＨＧＦ産生増強活性の相関関係を第２図に、表１１の結果からクロロゲン酸標品濃度とＨＧＦ産生増強活性の相関関係を第３図に示した。これらの相関関係はほぼ一致した。このことから、各画分のＨＧＦ産生増強活性は主にクロロゲン酸によるものであることが確認された。なお、第２図、第３図において、横軸はクロロゲン酸濃度の対数、縦軸はＨＧＦ濃度を示す。
実施例８
ヨモギ乾燥品（阪本漢方堂社製）40gを50％アセトン500ｍｌで3回抽出した後、約15ｍｌに減圧濃縮した。濃縮液に10％クエン酸水溶液を35ｍｌ添加し、酢酸エチル100ｍＬで3回抽出した後、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、減圧濃縮した。濃縮物をクロロホルム：メタノール：酢酸=2：1：1を展開溶媒としたシリカクロマトグラフィーに供じ、8ｍＬずつ分取した。得られた、フラクション7〜13を集め、減圧濃縮した後、クロロホルム：メタノール：酢酸=1：1：0.05を展開溶媒としたシリカゲルプレート上で展開し、Ｒｆ値0.5付近のUV254nmに吸収を示す物質（以下、化合物（２）と称す。）225mgを回収した。この物質の構造を¹H-核磁気共鳴(NMR)スペクトル（JNM-A500：日本電子社製）により構造解析した。

¹H-NMR: σ7.46(1H, d, J 15.5Hz), 7.45(1H, d, J 15.5Hz), 7.02(1H, m), 7.00(1H,m), 6.93(2H, m), 6.72(1H, d, J 8.5Hz), 6.70(1H, d, J 8.5Hz), 6.20(1H, d, J 15.5Hz), 6.17(1H, d, J 15.5Hz), 5.33(1H, td, J 10.5, 4.5Hz), 5.13(1H, m), 3.68(1H, dd, J 10, 3Hz), 2.2〜1.6(5H, m)
第４図に¹H-NMRスペクトルを示す。第４図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。これらの結果から、化合物（２）は3,5-ジカフェオイルキナ酸であることが確認された。3,5-ジカフェオイルキナ酸のＨＧＦ産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法でＨＧＦ産生増強活性を検討した。その結果、表１３に示すように3,5-ジカフェオイルキナ酸はＨＧＦ産生増強活性を有することが分かった。

実施例９
（１）ヨモギ乾燥品（阪本漢方堂社製）10gを細断し、クロロホルム100mlで5回、エタノール100mlで5回抽出した残渣に、水150mlを加え、60度で1時間抽出し、抽出ろ液を得た。このろ液131mlにエタノール326mlを加え、-20度に30分静置後、遠心を行ない、得られた上澄を凍結乾燥し、ヨモギ熱水抽出低分子画分（画分4）を得た。これを水4.5mlに溶解し、最終濃度が0.01、0.1％となるように添加し、HGF産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法で検討した。その結果、表１４に示すように画分４にHGF産生増強活性があることが分かった。

（２）また、画分４に含まれる、クロロゲン酸、3,5-ジカフェオイルキナ酸の含量を実施例７−（３）と同様の方法で定量したところ、サンプル原液中にそれぞれ7.7mM、13mMの濃度で含まれていた。以上の結果から、クロロゲン酸、3,5-ジカフェオイルキナ酸は、それぞれヨモギ抽出物によるHGF産生増強活性の活性物質の１つであることが明らかになった。
実施例１０
（１）国産菊花（ほし菊：JA青森経済連JA南部町製）15gを凍結乾燥後、細断したものに1000mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固しクロロホルム抽出画分を得た。つぎに、残渣に500mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固しエタノール抽出画分を得た。つぎに、残渣に150mlの蒸留水を加え60度で2時間抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス30度で2時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固し国産菊花の水抽出画分を得た。

（２）実施例１０−（１）で得た国産菊花の水抽出画分のHGF産生増強活性をを実施例４−（１）と同様の方法で検討した。国産菊花の水抽出画分は最終濃度が1％となるように添加した。その結果、表１５に示すように国産菊花の水抽出画分にHGF産生増強活性があることが分かった。

（３）中国産菊花（中国、大連市のローカルマーケットにて入手）20gを凍結乾燥後、細断したものに500mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固しクロロホルム抽出画分を得た。つぎに、残渣に500mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固しエタノール抽出画分を得た。つぎに、残渣に300mlの蒸留水を加え６０度で2時間抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス30度で2時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物と液体部分に分画した。液体部分は、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固し水抽出画分を得た。

（４）実施例１０−（３）で得た中国産菊花の水抽出画分のHGF産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法で検討した。中国産菊花の水抽出画分は最終濃度が1、5、10％となるように添加した。その結果、表１６に示すように中国産菊花の水抽出画分にHGF産生増強活性があることが分かった。

実施例１１
実施例４−（１）と同様の方法で後述の実施例３８−（１）で調製した紫ウコンエタノール抽出画分−２、水抽出画分−１、水抽出画分−２のＨＧＦ産生増強活性を検討した。エタノール抽出画分−２は最終濃度が10μg/ml、水高分子画分−１は最終濃度が132、1320μg/ml、水高分子画分−２は最終濃度が2.2、22μg/mlになるように添加した。ＨＧＦの産生量は、ネガティブコントロール１００％として表した。その結果を表１７に示した。実験は全て２連で行い、その平均値を採用した。表１７に示したように、紫ウコンエタノール抽出画分−２、水抽出画分−１、水抽出画分−２はＨＧＦ産生を増強した。

実施例１２
（１）春菊を凍結乾燥し、粉砕したもの10gにクロロホルム100mlを加え攪拌し、濾過して残渣を回収した。このクロロホルム添加、残渣回収を計5回行なった。残渣にエタノール100mlを加え攪拌し、濾過して残渣を回収した。このエタノール添加、残渣回収を計5回行なった。残渣に蒸留水100mlを加え、60℃で1時間保温したのち、濾過した濾液を凍結乾燥し、試料を得た。この抽出物を蒸留水に溶解し、HGF産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法で調べたところ、表１８示すように活性が確認された。

（２）市販の春菊900ｇを凍結乾燥し、80％エタノール２リットルと共にミキサーにかけて磨砕し、ガーゼを用いてろ過を行ない、抽出液を得た。この抽出液を減圧濃縮により200ｍｌに濃縮し、春菊の粗抽出液を調製した。

次に得られた、粗抽出液100ｍｌ分をアンバーライトXAD-2樹脂（オルガノ社製）200mLに供し、水、メタノール30％、40％、60％の各水溶液、メタノール、それぞれ500ｍｌで順次、溶出した。それぞれの溶出画分を50ｍｌにまで濃縮し、実施例４−（１）と同様の方法で、各画分のHGF産生増強活性を確認したところ、表１９に示すように60%メタノール溶出画分の濃縮物にHGF産生増強活性が見られた。
なおこの濃縮物は０．１％、１０％（容量比）となるように添加した。

この60%メタノール溶出画分を¹H-NMRで解析したところ、高濃度の3,5-ジカフェオイルキナ酸が含有されている事が分かった。

実施例１３
マウス繊維芽細胞Ｌ−Ｍ細胞（ATCC CCL-1.2）を0.5％のバクトペプトン（ギブコ社製）を含むＭ199培地（ICN社製）で１．５×１０⁵細胞／ｍｌに懸濁し、９６穴プレートに０．１ｍｌずつまき無菌的に培養した。３日間培養後、培地を取り除き、0.5％のウシ血清アルブミン（シグマ社製）を含むＭ199培地に置き換えた。これにキク科ベニバナ（Carthamus tinctorius LINNE）の花より抽出して得られた黄色色素（粉末サンエローNo.2、三栄源エフ・エフ・アイ社製）を最終濃度が１．２５、２．５、５ｍｇ／ｍｌとなるように添加し、２０時間培養した。培養終了後、培養液中の神経増殖因子の濃度をエンザイムイムノアッセイ法（NGF Emax Immuno Assay System：プロメガ社製）にて測定した。試料を添加していない細胞培養液中のＮＧＦ濃度を100%として、ＮＧＦ産生増強を表した。実験は２連で行い、その平均値を採用した。その結果、ベニバナ黄色色素は濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。その結果を表２０に示す。

実施例１４
実施例１３に記載のベニバナ黄色色素中の活性成分を逆相クロマトグラフィーを用いて精製単離した。以下にその条件について示す。カラムはTSK gel ODS-80Ts（径21.5mm×長30cm：東ソー社製）を用いた。溶媒Ａ（0.1%トリフルオロ酢酸水溶液）と溶媒Ｂ（蒸留水とアセトニトリルを容量比１対１で混合したもので0.1%トリフルオロ酢酸を含む）の溶出比は０分から５０分にかけて溶媒Ｂ比を直線的に０％から１００％に、続く１５分間は溶媒Ｂ比を１００％に保持、最後に溶媒Ｂ比を０％にし１５分間保持とした。溶出速度は5ml/分、検出は215nmで行った。3分後ごとにフラクションを採取し、各フラクションのＮＧＦ産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。その結果、３２．５分と４１．８分のピークを含むフラクションにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。３２．５分のピークを含むフラクションについてマススペクトル解析を行ったところ、分子量が６１３のシグナルが検出された。さらに、¹H-NMRスペクトル、¹³C-NMRスペクトル解析の結果、活性成分がサフロミンＡ（分子量612.53）であることを確定した。このようにして得られた精製サフロミンＡのＮＧＦ産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。精製サフロミンＡは2.5mg/mlとなるように添加した。その結果、精製したサフロミンＡはＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。サフロミンＡの結果については表２１に、４１．８分のピークを含むフラクションの結果については表２２に示す。

実施例１５
キク科ベニバナ（Carthamus tinctorius LINNE:阪本漢方堂製）10gを細断したものに800mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固しクロロホルム抽出画分を得た。つぎに、残渣に1400mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固しエタノール抽出画分を得た。つぎに、残渣に150mlの蒸留水を加え60度で２時間抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス30度で2時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固し水抽出画分を得た。このようにして調製した各画分のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。ベニバナクロロホルム抽出画分は0.393、0.785mg/mlとなるように添加した。エタノール抽出画分は0.313、0.625mg/mlとなるように添加した。水抽出画分は2.76、5.51mg/mlとなるように添加した。その結果を表２３に示した。ベニバナクロロホルム抽出画分、エタノール抽出画分、水抽出画分は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

実施例１６
国産菊花（Chrysanthemum morifolium、ほし菊：JA青森経済連JA南部町製）15gを凍結乾燥後、細断したものに1000mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固しクロロホルム抽出画分を得た。つぎに、残渣に500mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固しエタノール抽出画分を得た。つぎに、残渣に150mlの蒸留水を加え60度で2時間抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス30度で2時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固し水抽出画分を得た。このようにして調製した各画分のＮＧＦ産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。菊花クロロホルム抽出画分は1.8、3.6、7.2mg/mlとなるように添加した。菊花エタノール抽出画分は0.517、1.03、2.07mg/mlとなるように添加した。菊花水抽出画分は16.8、33.7、67.3mg/mlとなるように添加した。その結果、菊花クロロホルム抽出画分、エタノール抽出画分、水抽出画分は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。それらの結果を表２４〜２６に示す。

実施例１７
（１）国産菊花（ほし菊：JA青森経済連JA南部町製）245gを凍結乾燥後、細断したものに9000mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこない、クロロホルム抽出液とクロロホルム抽出残渣に分画した。クロロホルム抽出液をロータリーエバポレーターで濃縮し、菊花クロロホルム抽出物を得た。

（２）菊花クロロホルム抽出物をシリカクロマトに供しクロロホルム：メタノール=100：1（1250ml）を溶出溶媒として溶出し、1フラクション8mlずつ分取した。得られたフラクション44〜99を減圧濃縮し国産菊花クロロホルム抽出画分Ａを得た。次にメタノール（400ml）を溶出溶媒として溶出をし、溶出物を減圧濃縮し国産菊花クロロホルム抽出画分Ｂを得た。

（３）実施例１７−（２）で調製した画分Ａ、画分ＢのＮＧＦ産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。画分Ａは0.5、1.0、2.0mg/mlとなるように添加した。画分Ｂは0.5、1.0、2.0mg/mlとなるように添加した。その結果を表２７に示した。画分Ａ、画分Ｂは、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

実施例１８
（１）実施例１７−（２）で調製した国産菊花クロロホルム抽出画分Ａをさらにシリカクロマトに供し酢酸エチル:ヘキサン=1:10(500ml)、1:8(500ml)、1:6(500ml)、1:4(500ml)の順に段階的に溶出し、1フラクション6mlずつ分取した。得られたフラクション264〜290を減圧濃縮し国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ−ａを得た。得られたフラクション206〜240を減圧濃縮し国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ−ｂを得た。得られたフラクション241〜263を減圧濃縮し国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ−ｃを得た。得られたフラクション291〜320と続いてメタノール（400ml）を展開溶媒として得られた溶出物を合わせたものを減圧濃縮し国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ−ｄを得た。

（２）実施例１８−（１）で調製した画分Ａ−ａ、画分Ａ−ｂ、画分Ａ−ｃ、画分Ａ−ｄのＮＧＦ産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。画分Ａ−ａは0.125、0.25mg/mlとなるように添加した。画分Ａ−ｂは0.25、0.5mg/mlとなるように添加した。画分Ａ−ｃは0.25、0.5mg/mlとなるように添加した。画分Ａ−ｄは0.25、0.5mg/mlとなるように添加した。その結果を表２８、２９に示した。画分Ａ−ａ、画分Ａ−ｂ、画分Ａ−ｃ、画分Ａ−ｄは、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

実施例１９
（１）実施例１８−（１）で調製した国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ−ａをクロロホルム：メタノール=50：1を展開溶媒とする薄層クロマト上で展開した。Ｒｆ値0.9〜0.95の部分をかきとり、展開溶媒で再溶出して国産菊花クロロホルム抽出画分A-a-1を得た。Ｒｆ値0.55〜0.68の部分をかきとり、展開溶媒で再溶出して国産菊花クロロホルム抽出画分A-a-2を得た。Ｒｆ値0.30〜0.38の部分をかきとり、展開溶媒で再溶出して国産菊花クロロホルム抽出画分A-a-3を得た。

（２）実施例１９−（１）で調製した画分A-a-1、画分A-a-2、画分A-a-3のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。画分A-a-1は0.25、0.5mg/mlとなるように添加した。画分A-a-2は0.025、0.05mg/mlとなるように添加した。画分A-a-3は1.0mg/mlとなるように添加した。その結果を表３０に示した。画分A-a-1、画分A-a-2、画分A-a-3は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

（３）実施例１９−（１）で調製し、実施例１９−（２）で活性を確認した国産菊花クロロホルム抽出画分A-a-2の質量スペクトル(ＭＳ)を質量分析計(DX302：日本電子社製)によりＦＡＢ−ＭＳの手法で測定した。マトリックスにはニトロメチルベンジルアルコールを用いた。その結果、m/z 345 (M+H)⁺のピークを検出した。第５図に、国産菊花クロロホルム抽出画分A-a-2のMSスペクトルを示す。第５図において、横軸はm/z値、縦軸は相対強度を示す。

（４）実施例１９−（１）で調製し、実施例１９−（２）で活性を確認した国産菊花クロロホルム抽出画分A-a-2を核磁気共鳴(NMR)スペクトル装置（JNM-A500：日本電子社製）を用い各種スペクトルを測定し構造解析した。以下にNMRの帰属の信号を示した。

¹H-NMR：δ1.42(3H, d, J=7.0 Hz, 14-H), 1.85(1H, dt, J=14.0, 2.5 Hz, 9-H), 1.88(3H, t, J=1.5 Hz, 5'-H), 1.94(1H, t, =5.5 Hz, 1-H), 2.00(3H, dd, J=1.5, 7.0 Hz, 4'-H), 2.10(1H, d, J=14.0Hz, 9-H), 2.17(1H, m, 10-H), 2.29(3H, s, 15-H), 2.96(1H, dd, J=5.5, 10.0 Hz, 5-H), 3.11(1H, tt, J=3.0, 10.0 Hz, 7-H), 3.96(1H, t, J=10.0 Hz, 6-H), 5.25(1H, dt, J=2.5, 10.0 Hz, 8-H), 5.63(1H, d, J=3.0 Hz, 13-H), 5.94(1H, brs, 3-H), 6.18(1H, d, J=3.0 Hz, 13-H), 6.22(1H, dq, J=1.5, 7.0 Hz, 3'-H)
但し、サンプルは重クロロホルムに溶解し、残留クロロホルムの化学シフト値を7.24ppmとして表した。第６図に、国産菊花クロロホルム抽出画分A-a-2の¹H-NMRスペクトルを示す。第６図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

（５）実施例１９−（１）で調製し、実施例１９−（２）で活性を確認した国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ-a-2について行ったマススペクトル、NMRスペクトル解析の結果、活性成分がグアイアノライド（2-Oxo-8-angeloyloxy-guaia-3(4),11(13)-dien-12,6-olide(分子量344）)であることが確定した。
実施例２０
（１）実施例１８−（１）で得た国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ-bをクロロホルム：メタノール=100：1を展開溶媒とする薄層クロマトに供した。Ｒｆ値0.43〜0.57の部分をかきとり、展開溶媒で再溶出して国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ-b-1を得た。

（２）実施例２０−（１）で得た画分A-b-1のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。画分A-b-1は0.025、0.05mg/mlとなるように添加した。その結果を表３１に示した。画分A-b-1は濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

（３）実施例２０−（１）で調製し、実施例２０−（２）で活性を確認した国産菊花クロロホルム抽出画分A-b-1の質量スペクトル(ＭＳ)を質量分析計(DX302：日本電子社製)により解析した。マトリックスにはニトロメチルベンジルアルコールを用いた。その結果、m/z 345 (M+H)⁺のピークを検出した。第７図に、国産菊花クロロホルム抽出画分A-b-1のMSスペクトルを示す。第７図において、横軸はm/z値、縦軸は相対強度を示す。

（４）実施例２０−（１）で調製し、実施例２０−（２）で活性を確認した国産菊花クロロホルム抽出画分A-b-1を赤外線吸収(IR)スペクトル(FTIR-8200PC：島津製作所社製)により構造解析した。その結果、1716.5cm^-1、1774.4cm^-1の吸収を検出した。第８図に、国産菊花クロロホルム抽出画分A-b-1のIRスペクトルを示す。第８図において、横軸は赤外線波長の逆数、縦軸は透過率を示す。

（５）実施例２０−（１）で調製し、実施例２０−（２）で活性を確認した国産菊花クロロホルム抽出画分A-b-1を¹H-核磁気共鳴(NMR)スペクトル（JNM-A500：日本電子社製）により構造解析した。

¹H-NMR：δ1.66(3H, s, H-15), 1.74(3H, d, 1.0 Hz, H-14), 1.88(3H, t, J_3',5'1.5 Hz, J_4',5' 1.5 Hz, H-5'), 2.0(3H, dd, J_3',4' 7.5 Hz, H-4'), 2.26(1H, dd, J _a,b13.5 Hz, J_8,9 2.0 Hz, H-9), 2.45 - 2.5(2H, m, H-2, H-9),2.72(1H, d, J _a,b 17.0 Hz, H-2), 3.09(1H, d, J_5,6 10.0 Hz, H-5), 3.18(1H, ddd, J_6,710.0 Hz, J_7,8 10.5 Hz, J_7,13 3.0 Hz, H-7), 3.4(1H, s, H-3), 3.71(1H, t, H-6), 4.92(1H, dd, H-8), 5.52(1H, d, H-13), 6.13(1H, d, H-13), 6.18(1H, qd, H-3')
但し、サンプルは重クロロホルムに溶解し、残留クロロホルムの化学シフト値を7.24ppmとして表した。第９図に、国産菊花クロロホルム抽出画分A-b-1の¹H-NMRスペクトルを示す。第９図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

（６）実施例２０−（１）で調製し、実施例２０−（２）で活性を確認した国産菊花クロロホルム抽出画分A-b-1を¹³C-核磁気共鳴(NMR)スペクトル（JNM-A500：日本電子社製）により構造解析した。

¹³C-NMR：δ15.87(C-4'), 18.88(C-15), 20.45(C-5'), 22.06(C-14), 33.18(C-2), 41.45(C-9), 51.39(C-5), 56.59(C-7), 64.33(C-3), 66.78(C-4), 69.64(C-8), 77.93(C-6), 120.62(C-13), 128.0(C-2'), 128.61(C-1),136.41(C-10), 136.95(C-11), 140.13(C-3'), 167.0(C-1'), 169.0(C-12)
但し、サンプルは重クロロホルムに溶解し、重クロロホルムの化学シフト値を77.93ppmとして表した。第１０図に、国産菊花クロロホルム抽出画分A-b-1の¹³C-NMRスペクトルを示す。第１０図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

（７）実施例２０−（１）で調製し、実施例２０−（２）で活性を確認した国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ-b-1について行ったマススペクトル、IRスペクトル、¹H-NMRスペクトル、¹³C-NMRスペクトル解析の結果、活性成分がグアイアノライド（3,4-Epoxy-8-angeloyloxy-guaia-1(10),11(13)-dien-12,6-olide(分子量344）)であることが確定した。
実施例２１
（１）実施例１８−（１）で調製した国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ−ｃをクロロホルム：酢酸エチル=10：1を展開溶媒とする薄層クロマトに供した。Ｒｆ値0.33〜0.42の部分をかきとり、展開溶媒で再溶出して国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ-c-1を得た。

（２）実施例２１−（１）で調製した画分A-c-1のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。画分A-c-1は0.25、0.5mg/mlとなるように添加した。その結果を表３２に示した。画分A-c-1は濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

実施例２２
（１）実施例１８−（１）で得た国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ-dをさらにシリカクロマトに供し酢酸エチル:ヘキサン=1:3(600ml)、1:2(600ml)の順に段階的に溶出し、1フラクション6mlずつ分取した。得られたフラクション1〜43を減圧濃縮し国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ-d-1を得た。得られたフラクション44〜73を減圧濃縮し国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ-d-2を得た。得られたフラクション74〜80を減圧濃縮し国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ-d-3を得た。得られたフラクション124〜140と続いてメタノール（400ml）を展開溶媒として得られた溶出物を合わせたものを減圧濃縮し国産菊花クロロホルム抽出画分Ａ-d-4を得た。

（２）実施例２２−（１）で調製した画分A-d-1、画分A-d-2、画分A-d-3、画分A-d-4のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。画分A-d-1は2.0mg/mlとなるように添加した。画分A-d-2は0.5、1.0mg/mlとなるように添加した。画分A-d-3は0.25、0.5mg/mlとなるように添加した。画分A-d-4は0.5、1.0mg/mlとなるように添加した。その結果を表３３、３４に示した。画分A-d-1、画分A-d-2、画分A-d-3、画分A-d-4画分は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

実施例２３
（１）実施例１７−（２）で調製した国産菊花クロロホルム抽出画分Ｂをシリカクロマトに供しクロロホルム：メタノール=20：1（600ml）を展開溶媒として溶出し、1フラクション6mlずつ分取した。得られたフラクション15〜29を減圧濃縮し国産菊花クロロホルム抽出画分B-aを得た。

調製したB-a画分のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。B-a画分は1.0mg/mlとなるように添加した。その結果を表３５に示した。B-a画分は、Ｌ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

実施例２４
（１）実施例１６で調製したクロロホルム抽出残渣に8000mlのエタノールを加え室温でエタノール抽出をおこない、菊花エタノール抽出液とエタノール抽出残渣に分画した。菊花エタノール抽出液をロータリーエバポレーターで濃縮し、菊花エタノール抽出物を調製した。

（２）実施例２４−（１）で調製した菊花エタノール抽出物をシリカクロマトに供しクロロホルム：メタノール=9：1（600ml）を展開溶媒として溶出し、1フラクション6mlずつ分取した。得られたフラクション15〜22を減圧濃縮し国．菊花エタノール抽出画分Cを得た。次にメタノール（400ml）を展開溶媒として溶出し、得られた溶出物を減圧濃縮し国産菊花エタノール抽出画分Dを得た。

（３）実施例２４−（２）で調製したC画分、D画分のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。C画分は1.0mg/mlとなるように添加した。D画分は2.0mg/mlとなるように添加した。その結果を表３６に示した。C画分、D画分はＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

実施例２５
中国産菊花（中国、大連市のローカルマーケットにて入手）20gを凍結乾燥後、細断したものに500mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固しクロロホルム抽出画分を得た。つぎに、残渣に500mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固しエタノール抽出画分を得た。つぎに、残渣に300mlの蒸留水を加え６０度で2時間抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス30度で2時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物と液体部分に分画した。液体部分は、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固し水抽出画分−１を得た。一方、沈殿物は、再び蒸留水に溶解し水抽出画分−２を得た。このようにして調製した各画分のＮＧＦ産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。菊花クロロホルム抽出画分は0.114、0.227、0.454mg/mlとなるように添加した。菊花エタノール抽出画分は0.241、0.481、0.962mg/mlとなるように添加した。菊花水抽出画分−１は8.88、17.8、35.5mg/mlとなるように添加した。菊花水抽出画分−２は0.02、0.04mg/mlとなるように添加した。その結果、菊花クロロホルム抽出画分、エタノール抽出画分、水抽出画分−１および２は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。それらの結果を表３７に示す。

実施例２６
乾燥アシタバ（Angelica keiskei koidz.）茎葉部（阪本漢方堂社製）20gを細断したものに600mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。液体部分を除いた残渣に600mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。液体部分を除いた残渣に360mlの蒸留水を加え60度で2時間抽出をおこなった。固形残渣を除いた液体部分に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス30度で2時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物と液体部分に分画した。液体部分は、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固しアシタバ茎葉部水抽出画分−１を得た。一方、沈殿物は、再び蒸留水に溶解しアシタバ茎葉部水抽出画分−２を得た。このようにして調製したアシタバ茎葉部水抽出画分−１および２のＮＧＦ産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。アシタバ茎葉部水抽出画分−１は2.59、5.19mg/mlとなるように添加した。アシタバ茎葉部水抽出画分−２は0.35、0.7mg/mlとなるように添加した。その結果、アシタバ茎葉部水抽出画分−１および２は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。それらの結果を表３８に示す。

実施例２７
乾燥アシタバ根部（韓国にて採取）20gを細断したものに300mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固しクロロホルム抽出画分を得た。つぎに、残渣に300mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固しエタノール抽出画分を得た。つぎに、残渣に150mlの蒸留水を加え60度で2時間抽出をおこなった。固形残渣を除いた液体部分に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス30度で2時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物と液体部分に分画した。液体部分は、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固しアシタバ根部水抽出画分−１を得た。一方、沈殿物は、再び蒸留水に溶解しアシタバ根部水抽出画分−２を得た。このようにして調製した各画分のＮＧＦ産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。アシタバ根部クロロホルム抽出画分は0.03mg/mlとなるように添加した。アシタバ根部エタノール抽出画分は0.275、0.55、1.1mg/mlとなるように添加した。アシタバ根部水抽出画分−１は4.15、8.3、16.6mg/mlとなるように添加した。アシタバ根部水抽出画分−２は0.55、1.1mg/mlとなるように添加した。その結果、アシタバ根部クロロホルム抽出画分、アシタバ根部エタノール抽出画分、アシタバ根部水抽出画分−１および２はＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。それらの結果を表３９に示す。

実施例２８
（１）アシタバ根部（韓国にて採取）の凍結乾燥品600gを細断し、18,000mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。クロロホルム抽出液をろ過で除いた残渣に18,000mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。エタノール抽出液をろ過で除いた残渣に4,000mlの蒸留水を加え60度で2時間抽出をおこなった。固形残渣を除いた液体部分に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス30度で2時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物を除き、液体部分をロータリーエバポレーターで200mlにまで濃縮した。濃縮液をアンバーライトXAD-2（オレガノ社製：樹脂量400ml）に供し、蒸留水2,000mlで非吸着物を十分に洗いだし、次に、2,000mlのメタノールで吸着物を溶出した。メタノール溶出液をロータリーエバポレーターで濃縮し、アシタバ根部水抽出低分子XAD-2処理物を得た。

（２）実施例２８−（１）で調製したアシタバ根部水抽出低分子XAD-2処理物の活性成分を逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。以下にその条件について示す。カラムはTSK gel ODS-80Ts（径21.5mm X 長30cm：東ソー社製）を用いた。溶媒Ａ（蒸留水）と溶媒Ｂ（蒸留水とアセトニトリルを容量比１対１で混合したもの）の溶出比は0分から120分にかけて溶媒Ｂ比を直線的に0％から100％に、続く20分間は溶媒Ｂ比を100％に保持、最後に溶媒Ｂ比を0％にし20分間保持とした。溶出速度は5ml/分、検出は215nmで行った。8分ごとにフラクションを採取し、各フラクションの活性を実施例１３と同様の方法で行った。その結果、21.0、22.8、23.6、26.7、34.8、42.4、47.8、51.5、51.7、51.9、52.1、52.2、53.8、55.6、56.2、56.6、56.7、58.1、61.5、68.6、71.4、79.7、84.9、85.8、89.7、101.5、104.5、120.9、124.7分の検出のピークを含むフラクションに、ＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表４０にその結果を示す。

（３）アシタバ根部水抽出低分子XAD-2処理物の活性成分をゲルろ過クロマトグラフィーを用いて分画した。以下にその条件について示す。カラム樹脂はトヨパールHW-40C（樹脂量2000ml：東ソー社製）を用いた。溶媒は蒸留水を用いた。乾燥重量にして1.0g分のアシタバ根部水抽出低分子XAD-2処理物濃縮液を供し、10mlごとにフラクションを採取した。各フラクションのＮＧＦ産生増強活性を実施例１３と同様の方法で行った。各フラクション試料は10倍濃縮後、培地の10分の1となるよう添加した。その結果、多くのフラクションにＮＧＦ産生増強活性が確認された。

（４）実施例２８−（３）で活性が確認されたフラクションの一部のフラクション69〜79を集め濃縮したものを逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。以下にその条件について示す。カラムはTSK gel ODS-80Ts（径21.5mm X 長30cm：東ソー社製）を用いた。溶媒Ａ（0.1％トリフルオロ酢酸水溶液）と溶媒Ｂ（蒸留水とアセトニトリルを容量比１対１で混合したもので0.1％トリフルオロ酢酸を含む）の溶出比は0分から60分にかけて溶媒Ｂ比を直線的に25％から100％に、続く10分間は溶媒Ｂ比を100％に保持、最後に溶媒Ｂ比を25％にし10分間保持とした。溶出速度は5ml/分、検出は215nmで行った。採取したフラクションのＮＧＦ産生増強活性を実施例１３と同様の方法で行った。その結果、保持時間0〜22.5分、22.5〜25分、25〜31.5分、31.5〜32.5分、32.5〜37分、37〜43.5分、43.5〜47分、47〜50.5分、50.5〜77分、77〜78.5分、78.5〜81.5分のフラクションにＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表４１にその結果を示す。

（５）実施例２８−（４）で強い活性が確認された保持時間25〜31.5分のフラクションを逆相クロマトグラフィーを用いてさらに分画した。以下にその条件について示す。カラムはTSK-GEL Carbon-500（径4.6mm X 長10cm：東ソー社製）を用いた。溶媒Ａ（蒸留水）と溶媒Ｂ（蒸留水とアセトニトリルを容量比1対１で混合したもの）の溶出比は0分から15分にかけて溶媒Ｂ比を直線的に25％から45％に、続く10分間は溶媒Ｂ比を45％に保持、最後に溶媒Ｂ比を25％にし5分間保持とした。溶出速度は1ml/分、検出は215nmで行った。その結果、7.82分と11.09分のそれぞれのピークを含む二つのフラクションに分画することができた。

（６）実施例２８−（５）においてTSK-GEL Carbon-500クロマトグラフィーで分画された7.82分のピークを含むフラクションの質量スペクトル(ＭＳ)を質量分析計(DX302：日本電子社製)により解析した。マトリックスにはグリセロールを用いた。その結果、m/z 131、185、223、321のピークを検出した。第１１図に質量スペクトルを示す。第１１図において、横軸はm/z値、縦軸は相対強度を示す。

（７）実施例２８−（５）においてTSK-GEL Carbon-500クロマトグラフィーで分画された7.82分のピークを含むフラクションを赤外線吸収(IR)スペクトル(FTIR-8200PC：島津製作所社製)により構造解析した。第１２図にIRスペクトルを示す。第１２図において、横軸は赤外線波長の逆数、縦軸は透過率を示す。

（８）実施例２８−（５）においてTSK-GEL Carbon-500クロマトグラフィーで分画された7.82分のピークを含むフラクションを¹H-核磁気共鳴(NMR)スペクトル（JNM-A500：日本電子社製）により構造解析した。サンプルは重水に溶解した。第１３図に¹H-NMRスペクトルを示す。第１３図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

（９）実施例２８−（５）においてTSK-GEL Carbon-500クロマトグラフィーで分画された7.82分のピークを含むフラクションを¹³C-核磁気共鳴(NMR)スペクトル（JNM-A500：日本電子社製）により構造解析した。サンプルは重水に溶解した。第１４図に¹³C-NMRスペクトルを示す。第１４図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

（１０）実施例２８−（５）においてTSK-GEL Carbon-500クロマトグラフィーで分画された11.09分のピークを含むフラクションの質量スペクトル(ＭＳ)を質量分析計(DX302：日本電子社製)により解析した。マトリックスにはグリセロールを用いた。その結果、m/z 131、185、223、321のピークを検出した。第１５図に質量スペクトルを示す。第１５図において、横軸はm/z値、縦軸は相対強度を示す。

（１１）実施例２８−（５）においてTSK-GEL Carbon-500クロマトグラフィーで分画された11.09分のピークを含むフラクションを赤外線吸収(IR)スペクトル(FTIR-8200PC：島津製作所社製)により構造解析した。第１６図にIRスペクトルを示す。第１６図において、横軸は赤外線波長の逆数、縦軸は透過率を示す。

（１２）実施例２８−（５）においてTSK-GEL Carbon-500クロマトグラフィーで分画された11.09分のピークを含むフラクションを¹H-核磁気共鳴(NMR)スペクトル（JNM-A500：日本電子社製）により構造解析した。サンプルは重水に溶解した。第１７図に¹H-NMRスペクトルを示す。第１７図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

（１３）実施例２８−（５）においてTSK-GEL Carbon-500クロマトグラフィーで分画された11.09分のピークを含むフラクションを¹³C-核磁気共鳴(NMR)スペクトル（JNM-A500：日本電子社製）により構造解析した。サンプルは重水に溶解した。第１８図にピークを含むフラクションの¹³C-NMRスペクトルを示す。第１８図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。
実施例２９
（１）アシタバ乾燥品(阪本漢方堂社製)480gをフードプロセッサで粉砕し、酢酸エチル約1Lで2回抽出し、得られた有機層画分を減圧濃縮した後、濃縮物をシリカクロマトに供した。吸着物をクロロホルム:メタノール=100:1(600mL)、12:1(600mL)の順に段階的に溶出し、1フラクションに8mLずつ分取した。得られたフラクション76以降を集めて減圧濃縮し、濃縮物をヘキサン：酢酸エチル=1.8：1を展開溶媒としたシリカクロマトに供することによりフラクション25〜50にキサントアンゲロールを高濃度に含む画分を得た。この画分から、酢酸エチルとヘキサンにより再結晶することで、高純度のキサントアンゲロール約200mgを得た。NMRスペクトルの測定結果を以下に示す。

¹H-NMR：δ 1.58 (3H, s, -Me), 1.66 (3H, s, -Me), 1.81 (3H, s,-Me), 2.08(4H, m), 3.48 (2H, d, J 7Hz), 5.04 (1H, m), 5.29 (1H, m), 6.40 (1 H, d J_5',6'9 Hz, H-5'), 6.86 (2 H, d, J_5,69, J_2,3 9 Hz,H-2, 6), 7.45 (1 H, d, Jα,β 15 Hz, H- α), 7.54 (2 H, d, H-3, 5), 7.71 (1 H, d, H-6'), 7.82(1 H, d, H-β)
但し、サンプルは重クロロホルムに溶解し、残留クロロホルムの化学シフト値を2.49ppmとして表した。

（２）実施例２９−（１）で調製したキサントアンゲロールのNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。キサントアンゲロールは２５、５０、１００μＭとなるように添加した。その結果を表４２に示した。キサントアンゲロールはＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

実施例３０
（１）乾燥アシタバ根部粉末5.8kgに24リットルの酢酸エチルを加え室温で３時間、抽出をおこなった。吸引ろ過後の残渣に18リットルのエタノールを加え室温で一晩抽出をおこなった。つぎに、吸引ろ過後の残渣に52リットルの蒸留水を加え60度で3時間抽出をおこなった。固形残渣を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮したものに2.5倍量のエタノールを加え、4℃で一晩静置した。その後、吸引ろ過で沈殿物と液体部分に分画した。液体部分を、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固しアシタバ根部水抽出低分子画分を得た。つぎにアシタバ根部水抽出低分子画分をアンバーライトXAD-2（オレガノ社製：樹脂量2リットル）に供し、蒸留水30リットルで非吸着物を十分に洗いだし、次に、16リットルのメタノールで吸着物を溶出した。メタノール溶出液をロータリーエバポレーターで濃縮乾固し、アシタバ根部水抽出低分子XAD-2画分処理物を得た。

（２）実施例３０−（１）記載の上記アシタバ根部水抽出低分子画分XAD-2処理物のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。アシタバ根部水抽出低分子画分XAD-2処理物は0.85、1.7、3.4mg/mlとなるように添加した。表４３に示すように、アシタバ根部水抽出低分子画分XAD-2処理物は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

（３）実施例３０−（１）記載のアシタバ根部水抽出低分子画分XAD-2処理物の活性成分を逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。以下にその条件について示す。樹脂はコスモシール140 C18-OPN（ナカライテスク社製：樹脂量400ml）を用いた。アシタバ根部水抽出低分子画分XAD-2処理物を供し、展開溶媒としてそれぞれ1リットルの蒸留水、20％アセトニトリル水溶液、25％アセトニトリル水溶液、40%アセトニトリル水溶液、メタノールの順に溶出を行い、各溶出画分を減圧濃縮し、各コスモシール分画物を調製した。

（４）実施例３０−（３）記載のコスモシール１４０クロマトグラフィー分画物のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。その結果、20％アセトニトリル水溶液溶出画分、25％アセトニトリル水溶液溶出画分、40%アセトニトリル水溶液溶出画分にNGF産生増強活性があることが明らかになった。表４４にその結果を示す。

（５）実施例３０−（３）記載のコスモシール１４０の25％アセトニトリル水溶液溶出画分の活性成分を逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。

以下にその条件について示す。カラムはTSK gel ODS-80Ts（21.5mm X 30cm：東ソー社製）を用いた。溶媒Ａ（蒸留水）と溶媒Ｂ（蒸留水とアセトニトリルを容量比１対１で混合したもの）の溶出比は、0分から120分にかけて溶媒Ｂ比を直線的に25％から100％に、続く20分間は溶媒Ｂ比を100％に保持、最後に溶媒Ｂ比を25％にし、20分間保持とした。溶出速度は5ml/分、検出は235nmで行った。紫外線吸収を指標にフラクションを採取した。

（６）実施例３０−（５）記載のコスモシール25%アセトニトリル水溶液溶出画分のＯＤＳ−８０Ｔｓクロマトグラフィー分画物の活性を実施例１３と同様の方法で行った。その結果、多くのフラクションに、ＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表４５にその結果を示す。

（７）実施例３０−（６）で活性を確認したアシタバ根部由来フラクション１０（保持時間62.2分の検出のピークを含むフラクション）の質量スペクトル(MS)を質量分析計(DX302：日本電子社製)によりＦＡＢ−ＭＳの手法で測定した。マトリックスにはグリセロールを用いた。その結果、m/z 245 (M-OGlc)⁺のピークを検出した。第１９図に、アシタバ根部由来フラクション１０のＦＡＢ−MSスペクトルを示す。第１９図において、横軸はm/z値、縦軸は相対強度を示す。

アシタバ根部由来フラクション１０を核磁気共鳴(NMR)スペクトル装置（JNM-A500：日本電子社製）を用い各種NMRスペクトルを測定し構造解析した。以下にNMRの帰属の信号を示した。

¹H-NMR：δ1.36(3H, s, 2'-CH₃), 1.37(3H, s, 2'-CH₃), 3.08(2H, m, 2''-H および4''-H), 3.12(1H, m, 3''-H), 3.41(1H, m, 5''-H), 3.81(1H, d, J=4.5 Hz, 3'-H), 4.11(1H, dd, J=7.0, 11.5 Hz, 6''-H), 4.35,(1H, brd, J=11.5 Hz, 6''-H), 4.53(1H, d, J=7.5 Hz, 1''-H), 5.14(1H, d, J=4.5 Hz, 4'-H), 6.28(1H, d, J=9.5 Hz, 3-H), 6.78(1H, d, J=8.5 Hz, 6-H), 7.54(1H, d, J=8.5Hz, 5-H), 7.98(1H, d, J=9.5 Hz, 4-H)
但し、以下¹H-NMRにおいては、サンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、残留ジメチルスルホキシドの化学シフト値を2.49ppmとして表した。第２０図に、アシタバ根部由来フラクション１０の¹H-NMRスペクトルを示す。第２０図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

アシタバ根部由来フラクション１０について行ったマススペクトル、NMRスペクトル解析の結果、活性成分が3'-O-β-D-Glucopyranoyl Khellactone(分子量424）であることが確定した。

（８）実施例３０−（６）で強い活性が確認されたフラクション１３（保持時間66.9分の検出のピークを含むフラクション）を逆相クロマトグラフィーを用いてさらに分画した。

以下にその条件について示す。カラムはTSK gel ODS-80TsQA（4.6mm X 25cm：東ソー社製）を用いた。溶媒Ａ（0.1%トリフルオロ酢酸を含む蒸留水）と溶媒Ｂ（蒸留水とアセトニトリルを容量比１対１で混合したもので0.1%トリフルオロ酢酸を含む）の溶出比は20分間、溶媒Ｂ比を50％保持とした。溶出速度は1ml/分、検出は235nmで行い、紫外線吸収を指標にフラクションを採取した。

（９）実施例３０−（８）においてTSK gel ODS-80TsQAクロマトグラフィーで分画されたフラクションの活性を実施例１３と同様の方法で行った。その結果、7.9、8.7、9.2、10.2、11.5、12.7、13.9分の検出のピークを含むフラクションに、ＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表４６にその結果を示す。

（１０）実施例３０−（９）で活性が認められたアシタバ根部由来フラクション１３−２の質量スペクトル、NMRスペクトルを実施例３０−（７）と同様に測定した。

質量分析により、m/z 393 (M+H)⁺のピークを検出した。第２１図に、アシタバ根部由来フラクション１３−２のMSスペクトルを示す。第２１図において、横軸はm/z値、縦軸は相対強度を示す。

アシタバ根部由来フラクション１３−２を核磁気共鳴(NMR)のNMRの帰属の信号を示す。

¹H-NMR：δ1.61(3H, s, 3'-CH₃), 1.78(3H, s, 3'-CH₃), 3.17(1H, t, J=9.5 Hz, 4''-H), 3.28(1H, m, 3''-H), 3.29(1H, m, 2''-H), 3.38(1H, m, 5''-H),3.40(1H, m, 1'-H), 3.46(1H, m, 6''-H), 3.58(1H, m, 1'-H), 3.69(1H, m, 6''-H), 4.94(1H, d, J=7.5 Hz, 1''-H), 5.20(1H, m, 2'-H), 6.30(1H, d, J=9.5 Hz, 3-H), 7.11(1H, d, J=8.5 Hz, 6-H), 7.51(1H, d, J=8.5 Hz, 5-H), 7.98 (1H, d, J=9.5 Hz, 4-H)
第２２図に、アシタバ根部由来フラクション１３−２の¹H-NMRスペクトルを示す。第２２図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

¹³C-NMR：δ17.8(3'-CH₃), 21.6(1'-c), 25.5(3'-CH₃), 60.6(6''-c), 69.7(4''-c), 73.4(2''-c), 76.7(3''-c), 77.1(5''-c), 100.8(1''-c), 111.5(6-c),112.8(3-c), 113.4(10-c), 117.4(8-c), 121.3(2'-c), 126.8(5-c), 131.5(3'-c), 144.5(4-c), 152.1(9-c), 157.8(7-c), 160.2(2-c)
但し、以下¹³C-NMRにおいてはサンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、重ジメチルスルホキシドの化学シフト値を39.5ppmとして表した。第２３図に、アシタバ根部由来フラクション１３−２の¹³C-NMRスペクトルを示す。第２３図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

アシタバ根部由来フラクション１３−２について行ったマススペクトル、NMRスペクトル解析の結果、活性成分が7-O-β-D-Glucopyranosyloxy-8-prenylcoumarin(分子量392）であることが確定した。

（１１）実施例３０−（６）で強い活性が確認されたフラクション１８（保持時間73.0、73.8、74.97分の検出のピークを含むフラクション）を実施例３０−（８）と同様の方法で逆相クロマトグラフィーを用いてさらに分画した。

（１２）実施例３０−（１１）においてTSK gel ODS-80TsQAクロマトグラフィーで分画されたフラクションの活性を実施例１３と同様の方法で行った。その結果、9.3、10.1、10.6、11.2、12.0、12.8、13.3、14.0、15.2、16.1、18.6分の検出のピークを含むフラクションに、ＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表４７にその結果を示す。

（１３）実施例３０−（１２）で活性を確認したアシタバ根部由来フラクション１８−３の質量スペクトル、NMRスペクトルを実施例３０−（７）と同様に測定した。

質量分析により、m/z 195 (M+H)⁺のピークを検出した。第２４図に、アシタバ根部由来フラクション１８−３のMSスペクトルを示す。第２４図において、横軸はm/z値、縦軸は相対強度を示す。

NMRの帰属の信号を示す。

¹H-NMR：δ3.68(3H, s, OCH₃₎, 6.25(1H, d, J ＝16.0 Hz, 2'-H), 6.75(1H, d, J ＝8.0 Hz, 5-H), 6.98(1H, dd, J＝2.0, 8.0 Hz, 6-H), 7.03(1H, d, J＝2.0, 2-H), 7.46(1H, d, J＝16.0 Hz, 3'-H), 9.10(1H, s, 3-OH), 9.56(1H, s, 4-OH)
第２５図に、アシタバ根部由来フラクション１８−３の¹H-NMRスペクトルを示す。第２５図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

アシタバ根部由来フラクション１８−３について行ったマススペクトル、NMRスペクトル解析の結果、活性成分がコーヒー酸メチルエステル(分子量194）であることが確定した。

（１４）実施例３０−（１２）で活性を確認した記載のアシタバ根部由来フラクション１８−４の質量スペクトル、NMRスペクトルを実施例３０−（５）と同様に測定した。

質量分析により、m/z 253 (M+H)⁺のピークを検出した。第２６図に、アシタバ根部由来フラクション１８−４のMSスペクトルを示す。第２６図において、横軸はm/z値、縦軸は相対強度を示す。

NMRの帰属の信号を示す。

¹H-NMR：δ1.15(3H, s, 2-CH₃), 1.27(3H, s, 2-CH₃), 2.39(1H, dd, J=8.0, 17.0 Hz, 4-H), 2.76(,1H, dd, J=5.0, 17.0 Hz, 4-H), 3.62(1H, m, 3-H), 3.81(3H, s, 5-OCH₃), 5.16(1H, d, J=4.5 Hz, 3-OH), 6.56(1H, d, J=9.0 Hz, 6-H), 7.59(1H, d, J=9.0 Hz, 10-H), 11.86(1H, brs, 8-COOH)
第２７図に、アシタバ根部由来フラクション１８−４の¹H-NMRスペクトルを示す。第２７図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

¹³C-NMR：δ20.4(2-CH₃), 25.4(2-CH₃), 26.2(4-C), 55.7(5-OCH₃), 67.0(3-C), 77.6(2-C), 101.8(6-C), 109.4(10-C), 112.5(8-C), 130.7(7-C), 153.3(9-C), 160.4(5-C), 166.6(8-COOH)
第２８図に、アシタバ根部由来フラクション１８−４の¹³C-NMRスペクトルを示す。第２８図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

アシタバ根部由来フラクション１８−４のマススペクトル、NMRスペクトル解析の結果、活性成分が8-Carboxyl-3-hydroxy-5-methoxyl-2-dimethylchroman(分子量252）であることが確定した。

（１５）実施例３０−（６）で強い活性が確認されたフラクション１９（保持時間75.4の検出のピークを含むフラクション）、フラクション２０（76.5分の検出のピークを含むフラクション）を混合し、実施例３０−（８）と同様の方法で逆相クロマトグラフィーを用いてさらに分画した。

（１６）実施例３０−（１５）においてTSK gel ODS-80TsQAクロマトグラフィーで分画されたフラクションの活性を実施例１３と同様の方法で行った。その結果、13.7、14.3、15.1、15.5、16.4、18.8、20.5分の検出のピークを含むフラクションに、ＮＧＦ産生増強活性があることが明らかになった。表４８にその結果を示す。

（１７）実施例３０−（１６）で活性を確認したアシタバ根部由来フラクション１９、２０−５の質量スペクトル、NMRスペクトルを実施例３０−（７）と同様に測定した。

質量分析で、m/z 393 (M+H)⁺のピークを検出した。第２９図に、アシタバ根部由来フラクション１９、２０−５のMSスペクトルを示す。第２９図において、横軸はm/z値、縦軸は相対強度を示す。

NMRの帰属の信号を示す。

¹H-NMR：δ1.67(3H, s, 3'-CH₃), 1.69(3H, s, 3'-CH₃), 3.15(1H, m, 4''-H), 3.29(3H, m, 1'-H, 2''-H および3''-H), 3.37(1H, dd, J=7.5, 15.5 Hz, 1'-H), 3.45(2H, m, 5''-H および6''-H), 3.72(1H, dd, J=10.5, 6''-H), 4.97(1H, d, J=7.5 Hz, 1''-H), 5.31(1H, t, J=7.5 Hz, 2'-H), 6.28(1H, d, J=9.0 Hz, 3-H), 7.07(1H, s, 5-H), 7.41(1H, s, 8-H), 7.98(1H, d, J=9.0 Hz, 4-H)
第３０図に、アシタバ根部由来フラクション１９、２０−５の¹H-NMRスペクトルを示す。第３０図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

¹³C-NMR：δ17.6(3'-CH₃), 25.5(3'-CH₃), 27.4(1'-C), 60.6(6''-C), 69.6 (4''-C), 73.1(2''-C), 76.3(3''-C), 77.0(5''-C), 100.4(1''-C), 102.0(8-C), 112.8(10-C), 112.9(3-C), 121.8(2'-C), 127.4(6-C), 128.0(5-C), 132.4(3'-C), 144.4(4-C), 153.4(9-C), 157.9(7-C), 160.6(2-C)
第３１図に、アシタバ根部由来フラクション１９、２０−５の¹³C-NMRスペクトルを示す。第３１図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

アシタバ根部由来フラクション１９、２０−５について行ったマススペクトル、NMRスペクトル解析の結果、活性成分が7-β-D-Glucopyranosyloxy-6-prenylcoumarin(分子量392）であることが確定した。

（１８）実施例３０−（１５）記載のアシタバ根部由来フラクション１９、２０−６の質量スペクトル、NMRスペクトルを測定した。

質量分析計で、m/z 245 (M-2Glc-Angel)⁺、669 (M+H)⁺、691 (M+Na)⁺、707 (M+K)⁺のピークを検出した。第３２図に、アシタバ根部由来フラクション１９、２０−６のMSスペクトルを示す。第３２図において、横軸はm/z値、縦軸は相対強度を示す。

NMRの帰属の信号を示す。

¹H-NMR：δ1.36(3H, s, 2'-CH₃), 1.43(3H, s, 2'-CH₃), 1.79(3H, brs, , 2''-CH₃), 1.86(3H, brd, J=7.0 Hz, 3''-CH₃), 2.90(1H, t, J=8.0 Hz, 2b-H),2.99(1H, m, 2a-H), 3.01(1H, m, 4a-H), 3.02(1H, m, 4b-H), 3.05(1H, m, 3b-H), 3.13(1H, t, J=9.5 Hz, 3a-H), 3.35(1H, m, 5a-H), 3.39(1H, m, 5b-H), 3.39(1H, m, 6b-H), 3.49(1H, dd, J=8.0, 11.0Hz, 6a-H), 3.64(1H, d, J=11.5 Hz, 6b-H), 4.02(1H, d, J=11.0 Hz, 6a-H), 4.21(1H, d, J=8.0 Hz, 1b-H), 4.37(1H, d, J=4.5 Hz, 3'-H), 4.46(1H, brs, 6b-OH), 4.48(1H, d, J=7.5 Hz, 1a-H), 4.51(1H, brs, 2a-OH), 4.72(1H, brs, 3b-OH), 4.83(1H, brs, 2b-OH), 4.86(1H, brs, 4a-OH), 5.03(2H, brs, 4b-OH, 3a-OH), 5.96(1H, brq, J=7.0 Hz, 3''-H), 6.26(1H, d, J=9.5 Hz, 3-H), 6.61(1H, d, J=4.5 Hz, 4'-H), 6.83(1H, d, J=8.5 Hz, 6-H), 7.59(1H, d, J=8.5 Hz, 5-H), 7.96(1H, d, J=9.5Hz, 4-H)
第３３図に、アシタバ根部由来フラクション１９、２０−６の¹H-NMRスペクトルを示す。第３３図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

¹³C-NMR：δ15.2(3''-CH₃), 20.0(2''-CH₃), 21.3(2'-CH₃), 26.4(2'-CH₃), 59.1(4'-C), 61.0(6b-C), 69.2(6a-C), 70.0(glucose-C), 70.4(glucose-C), 73.4(glucose-C), 73.7(3'-C), 73.9(glucose-C), 76.1(glucose-C), 76.55(glucose-C), 76.59(glucose-C), 76.8(glucose-C), 77.8(2'-C'), 100.5(1a-C), 103.8(1b-C), 107.7(8-C), 112.1(3-C), 112.1(10-C), 114.2(6-C), 128.0(2''-C), 129.8(5-C), 136.1(3''-C), 144.5(4-C), 153.6(9-C), 156.2(7-C), 159.4(2-C), 166.3(1''-C)
第３４図に、アシタバ根部由来フラクション１９、２０−６の¹³C-NMRスペクトルを示す。第３４図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

アシタバ根部由来フラクション１９、２０−６について行ったマススペクトル、スペクトル解析の結果、活性成分が4'-O-Angeloyl-3'-O-[6-O-(β-D-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranosyl]-Khellactone(分子量668）)であることが確定した。

（１９）実施例３０−（６）で活性を確認したアシタバ根部由来フラクション２８（保持時間91.4分の検出のピークを含むフラクション）の質量スペクトル、NMRスペクトルを実施例３０−（７）と同様に測定した。

質量分析で、m/z 209 (M+H)⁺のピークを検出した。第３５図に、アシタバ根部由来フラクション２８のMSスペクトルを示す。第３５図において、横軸はm/z 値、縦軸は相対強度を示す。

NMRの帰属の信号を示す。

¹H-NMR：δ1.23(3H, t, J=7.0 Hz, 2''-H), 4.14(2H, q, J=7.0 Hz, 1''-H), 6.24(1H, d, J=16.0 Hz, 2'-H), 6.74(1H, d, J=8.0 Hz, 5-H), 6.98(1H, dd,J=2.0, 8.0 Hz, 6-H), 7.03(1H, d, J=2.0 Hz, 2-H), 7.45(1H, d, J=16.0 Hz, 3'-H), 9.11(1H, s, 3-OH), 9.57(1H, s, 4-OH)
第３６図に、アシタバ根部由来フラクション２８の¹H-NMRスペクトルを示す。第３６図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。アシタバ根部由来フラクション２８について行ったマススペクトル、NMRスペクトル解析の結果、活性成分がコーヒー酸エチルエステル(分子量208)であることが確定した。

コーヒ酸エチルエステル、コーヒー酸メチルエステルのＮＧＦ産生増強活性を実施例４−（１）と同様に測定した。表４９に示すようにコーヒー酸エチルエステル、コーヒー酸メチルエステルはＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

実施例３１
（１）タマネギの薄皮２５ｇを凍結乾燥後、細断したものに500mlのメタノールを加え室温で抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固しメタノール抽出物を得た。このようにして調製したメタノール抽出物のＮＧＦ産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。タマネギ薄皮メタノール抽出物は0.096、0.192、0.384、0.576、0.768、0.96mg/mlとなるように添加した。その結果、タマネギ薄皮メタノール抽出物は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。その結果を表５０示す。

（２）イチョウ葉（100% GINKGO BILOBA TEA：GINKGOTON社製）3gに蒸留水200mlを加え１００℃で抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分をとりイチョウ葉水抽出物を得た。このようにして調製した水抽出物のＮＧＦ産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。イチョウ葉水抽出物は0.625、1.25、2.5、5％（v/v）となるように添加した。その結果、イチョウ葉抽出物は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。その結果を表５１に示す。

実施例３２
バラ花（中国のローカルマーケットにて入手）2gを細断したものに40mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。クロロホルム抽出液をろ過で除いた残渣に40mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固しエタノール抽出画分を得た。つぎに、残渣に40mlの蒸留水を加え60度で1時間抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス30度で2時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物と液体部分に分画した。液体部分は、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固し水抽出画分−１を得た。一方、沈殿物は、再び蒸留水に溶解し水抽出画分−２を得た。このようにして調製した各画分のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。バラ花エタノール抽出画分は0.115、0.23mg/mlとなるように添加した。水抽出画分−１は0.41、0.821mg/mlとなるように添加した。水抽出画分−2は0.084、0.167mg/mlとなるように添加した。その結果を表５２に示した。バラ花エタノール抽出画分、水抽出画分−１、水抽出画分−２は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

実施例３３
ホップ由来キサントフモールフラクション（ホップスタイナー社製）のＮＧＦ産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。キサントフモールフラクションは最終濃度が0.0148、0.0297、0.0594、0.119mg/mlとなるように添加した。その結果を表５３に示した。キサントフモールフラクションは濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

実施例３４
（１）実施例３３にて、ＮＧＦ産生促進活性が確認されたキサントフモールフラクション（ホップシュタイナー社製）0.4gをクロロホルム3mlで溶解しシリカクロマトに供した。クロロホルム(1000ml)、クロロホルム：メタノール＝50:1(1000ml)、クロロホルム：メタノール＝20:1(1000ml)の順に段階的に溶出し、１フラクションに8mlずつ分取した。得られたフラクション67〜100を減圧濃縮し、ホップ由来キサントフモールフラクション−画分Ａを得た。

（２）上記キサントフモールフラクション−画分Ａをさらに逆相クロマトグラフィーを用いて精製単離した。以下にその条件について示す。カラムはTSK gel ODS-80Ts（径21.5mm X 長30cm：東ソー社製）を用いた。溶媒Ａ（蒸留水とアセトニトリルを容量比３対２で混合したもので0.1%トリフルオロ酢酸を含む）と溶媒Ｂ（蒸留水とアセトニトリルを容量比１対４で混合したもので0.1%トリフルオロ酢酸を含む）の溶出比は0分から60分にかけて溶媒Ｂ比を直線的に50％から100％に、続く20分間は溶媒Ｂ比を100％に保持、最後に溶媒Ｂ比を50％にし20分間保持とした。溶出速度は5ml/分、検出は370nmで行い、１分間ごとにフラクションを採取した。

（３）上記キサントフモールフラクション−画分Ａの逆相クロマトフラクションのNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。その結果、21.1、22.2、24.2、25.7、28.6分のピークを含むフラクションにNGF産生増強活性があることが明らかになった。表５４にその結果を示す。

（４）上記フラクションＡ−５（保持時間28.6分の検出のピークを含むフラクション）の質量スペクトル（ＭＳ)を質量分析計(DX302：日本電子社製)によりＦＡＢ−ＭＳの手法で測定した。マトリックスにはグリセロールを用いた。その結果、m/z 371 (M+H)⁺のピークを検出した。第３７図に、キサントフモールフラクション由来のフラクションＡ−５のMSスペクトルを示す。第３７図において、横軸はm/z値、縦軸は相対強度を示す。

さらに、核磁気共鳴(NMR)スペクトル装置（JNM-A500：日本電子社製）を用い各種NMRスペクトルを測定し構造解析した結果、活性成分がキサントフモールB(分子量370)とキサントフモールD(分子量370)の混合物（混合比1：1.65）であることが確定した。以下にNMRの帰属の信号を示した。
キサントフモールB
¹H-NMR：δ1.21(3H, s, 6''-H), 1.27(3H, s, 6''-H), 2.70(2H, m, 4''-H), 3.65((1H, m, 5''-H), 3.87(3H, s, 6'-OCH₃), 6.00(1H, s, 5'-H), 6.80(2H, m, 3-Hおよび5-H), 7.55(2H, m, 2-Hおよび6-H), 7.70(1H, m, β-H), 7.75(1H, m,α-H), 10.12(1H, s, 4-OH), 14.18(1H, s, 2'-OH)
キサントフモールD
¹H-NMR：δ1.71(3H, s, 5''-H), 2.60(2H, m, 1''-H), 3.85(3H, s, 6'-OCH₃), 4.20(1H, m, 2''-H), 4.58(1H, s, 4''-H), 4.61(1H, s, 4''-H), 6.04(1H, s, 5'-H), 6.80(2H, m, 3-Hおよび5-H), 7.55(2H, m, 2-H および6-H), 7.70(1H, m, β-H), 7.75(1H, m,α-H), 10.09(1H, s, 4-OH), 10.58(1H, s, 4'-OH), 14.69(1H, s, 2'-OH)
但し、サンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、残留ジメチルスルホキシドの化学シフト値を2.49ppmとして表した。第３８図に、キサントフモールフラクション由来のフラクションＡ−５の¹H-NMRスペクトルを示す。第３８図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。

（５）ホップ由来キサントフモールフラクション中の活性成分を逆相クロマトグラフィーを用いて下記のように精製単離した。

以下にその条件について示す。

カラムはTSK gel ODS-80TsQA（径4.6mm X 長25cm：東ソー社製）を用いた。溶媒Ａ（蒸留水とアセトニトリルを容量比3対1で混合したもので0.1%トリフルオロ酢酸を含む）と溶媒Ｂ（蒸留水とアセトニトリルを容量比1対3で混合したもので0.1%トリフルオロ酢酸を含む）の溶出比は0分から20分にかけて溶媒Ｂ比を直線的に50％から100％に、続く5分間は溶媒Ｂ比を100％に保持、最後に溶媒Ｂ比を50％にし5分間保持とした。溶出速度は1ml/分、検出は215nmで行った。1分ごとにフラクションを採取し、各フラクションの活性を実施例１３と同様の方法で行った。

その結果、12.8分の検出のピークを含むフラクションに、活性があることが明らかになった。このフラクションについてマススペクトル解析を行ったところ分子量が、355のシグナルが検出された。さらに、¹H-NMRスペクトル解析を行ったところ、活性成分がキサントフモール（分子量354.4）であることが明らかになった。NMRスペクトル、質量スペクトルの測定結果は、以下に示す。

¹H-NMR:δ 1.60 (3H, s, -Me), 1.69 (3H, s, -Me), 3.12 (2H, d, J 7Hz, H-1''_a,b), 3.86 (3H, s, -OMe), 5.13 (1H, t, J 7Hz, H-2''), 6.07 (1H, s, H-5'), 6.83 (2H, d, J_2,39Hz, J_5,6 9Hz, H-2,6), 7.56 (2H, d, H-3,5), 7.66 (1H, d, J _a,b 16 Hz), 7.75 (1H, d), 10.05 (1H, s, OH-4), 10.55 (1H, s, OH-4'), 14.63 (1H, s, OH-2')
但し、サンプルは重ジメチルスルホキシドに溶解し、残留ジメチルスルホキシドの化学シフト値を2.49ppmとして表した。第３９図に、¹H-NMRスペクトルを示す。第３９図において、横軸は化学シフト値(ppm)、縦軸はシグナルの強度を示す。
FAB-MS: m/z 355 (M+H)⁺（但し、グリセロールをマトリックスに用いた。）
実施例３５
（１）実施例３４で得られた精製キサントフモールのNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。精製キサントフモールは12.5、25、50μMとなるように添加した。その結果を表５５に示した。精製したキサントフモールはＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

（２）ホップ由来キサントフモールフラクション（ホップシュタイナー社製）0.4gをクロロホルム3mlで溶解しシリカクロマトに供した。クロロホルム(1000ml)、クロロホルム：メタノール＝50:1 (1000ml)、クロロホルム：メタノール＝20:1 (1000ml)の順に段階的に溶出し、１フラクションに8mlずつ分取した。得られたフラクション67〜100を減圧濃縮し、ホップ由来キサントフモールフラクション−画分Ａを得た。さらに逆相クロマトグラフィーを用いてホップ由来キサントフモールフラクション−画分Ａを精製した。以下にその条件について示す。カラムはTSK gel ODS-80Ts（径21.5mm X 長30cm：東ソー社製）を用いた。溶媒Ａ（蒸留水とアセトニトリルを容量比３対２で混合したもので0.1%トリフルオロ酢酸を含む）と溶媒Ｂ（蒸留水とアセトニトリルを容量比１対４で混合したもので0.1%トリフルオロ酢酸を含む）の溶出比は0分から60分にかけて溶媒Ｂ比を直線的に50％から100％に、続く20分間は溶媒Ｂ比を100％に保持、最後に溶媒Ｂ比を50％にし20分間保持とした。溶出速度は5ml/分、検出は370nmで行い、１分間ごとにフラクションを採取した。保持時間42.5分の検出のピークを含むフラクションを濃縮乾固することにより、高純度のキサントフモール(19.4mg)を調製することができた。

（３）調製したキサントフモールl3.5mgをジメチルスルホキシド溶液0.75mlに溶解したものを、200mlの10mM酢酸ナトリウム緩衝液（pH5.5、10％のサッカロースを含む）に添加し、１００℃で２時間加熱した。冷却後、反応液を逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。以下にその条件について示す。樹脂はコスモシール140 C18-OPN（ナカライテスク社製：樹脂量20ml）を用いた。反応液をカラムに供し、展開溶媒としてそれぞれ50mlの蒸留水、20％、30％、40%、50%、60%、70%アセトニトリル水溶液、メタノールの順に溶出を行った。その結果、40%アセトニトリル水溶液溶出画分を濃縮乾固することにより、イソキサントフモール(2.1mg)を得る事ができ、その構造を各種NMRスペクトルを測定し解析することにより構造を確認した。

（４）調製したイソキサントフモールのＮＧＦ産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。イソキサントフモールは50、100、200μMとなるように添加した。表５６に示すようにイソキサントフモールは、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強し、ビール類飲料中のイソキサントフモールの生理活性が明らかとなった。

実施例３６
（１）ビール３銘柄（市販品Ａ、市販品Ｂ、市販品Ｃ）、およびノンアルコールビール飲料（市販品Ｄ）それぞれ150mlをロータリーエバポレーターで60mlまで濃縮し、それぞれの濃縮物を得た。

（２）上記濃縮物のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。ビール３銘柄濃縮物は2.5、5、10％（容量比）となるように添加した。ノンアルコール飲料濃縮物は10％（容量比）となるように添加した。その結果を表５７に示した。ビール３銘柄濃縮物およびノンアルコール飲料濃縮物は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

また市販品Ｂ濃縮物、市販品Ｄ濃縮物のＨＧＦ産生増強活性を実施例４−（１）と同様に測定した。市販品Ｂ濃縮物は1％（容量比）となるように添加した。市販品Ｄ濃縮物は1及び5％（容量比）となるように添加した。その結果を表５８に示した。各濃縮物は、MRC-5細胞のHGF産生を増強した。

（３）市販品Ａ〜Ｄ、及びビール市販品Ｅ〜Ｉ、発泡酒市販品Ｊ〜Ｏ中のキサントフモール及びイソキサントフモール含有量を質量分析装置を用いて測定した（Journal of Chromatography A、第８３２巻、第９７〜１０７頁（１９９７）参照）。結果を表５９に示す。各市販品には０．０００５〜０．０３２μｇ／ｍｌの範囲でキサントフモールが含有されていた。また０．００８２〜１．２７μｇ／ｍｌの範囲でイソキサントフモールが含有されていた。これらの化合物、特にキサントフモール含量が多いほど、良好なビール風味の官能を示した。

実施例３７
（１）ホップ(Humulus lupulus)乾燥品50gを粉砕し、1,000mlの蒸留水を加え60℃で１時間抽出をおこなった。ろ過により残渣を除いたホップ水抽出液をロータリーエバポレーターで１５０mlにまで濃縮した。濃縮液２２５mlのクロロホルムを加えてしんとうし、水層とクロロホルム層および中間層に分画した。クロロホルム層画分を、ロータリーエバポレーターで溶媒留去後、濃縮し、ホップ水抽出物−クロロホルム移行画分を得た。

（２）上記のホップ水抽出物−クロロホルム移行画分のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。ホップ水抽出物−クロロホルム移行画分は最終濃度が0.02、0.04mg/mlとなるように添加した。その結果を表６０に示した。ホップ水抽出物−クロロホルム移行画分は濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

（３）ホップ乾燥品50gを粉砕し、1,000mlのエタノールを加え4℃で１８時間抽出をおこなった。ろ過により残渣を除いたホップエタノール抽出液をロータリーエバポレーターで濃縮し、濃縮液にクロロホルム：水＝３：２の混液を加え、しんとうして水層とクロロホルム層に分画した。クロロホルム層画分を、ロータリーエバポレーターで溶媒留去後、濃縮し、ホップエタノール抽出物−クロロホルム移行画分を得た。

（４）実施例３７−（３）で得られたホップエタノール抽出物−クロロホルム移行画分のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。ホップエタノール抽出物−クロロホルム移行画分は最終濃度が0.05、0.1mg/mlとなるように添加した。その結果を表６１に示した。ホップエタノール抽出物−クロロホルム移行画分はＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

実施例３８
（１）紫ウコン（ガジュツ）５ｇを凍結乾燥後、細断したものに200mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。吸引ろ過後の残渣に対してこの抽出操作を２回繰り返した。ろ過後の液体部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固しクロロホルム抽出画分を得た。つぎに、クロロホルム抽出後の残渣に200mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。吸引ろ過後の残渣に対してこの操作を２回繰り返した。ろ過後の液体部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固し、乾固物を4mlのエタノールに溶解した。エタノールに溶解した部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固しエタノール抽出画分−１を得た。また、エタノールに溶解せず蒸留水に溶解した部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固しエタノール抽出画分−２を得た。つぎに、エタノール抽出後の残渣に25mlの蒸留水を加え60度で２時間抽出をおこなった。残渣を除いた液体部分に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス20度で１時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物と液体部分に分画した。液体部分は、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固し水抽出画分−１を得た。一方、沈殿物は、再び蒸留水に溶解し水抽出画分−２を得た。

（２）実施例３８−（１）で調製した紫ウコンクロロホルム抽出画分、エタノール抽出画分−１、水抽出画分−１、水抽出画分−２のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。紫ウコンクロロホルム抽出画分は0.108、0.215mg/mlとなるように添加した。紫ウコンエタノール抽出画分−１は0.02、0.04mg/mlとなるように添加した。紫ウコン水抽出画分−１は0.825、1.65、3.3mg/mlとなるように添加した。紫ウコン水抽出画分−２は0.55mg/mlとなるように添加した。その結果を表６２に示した。紫ウコンクロロホルム抽出画分、エタノール抽出画分−１、水抽出画分−１、水抽出画分−２は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦを増強した。

（３）150gの紫ウコンを凍結乾燥後、細断したものに300mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。吸引ろ過後の残渣に対してこの抽出操作を2回繰り返した。クロロホルム抽出後の残渣に300mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。吸引ろ過後の残渣に対してこの操作を2回繰り返した。エタノール抽出後の残渣に900mlの蒸留水を加え60度で2時間抽出をおこなった。吸引ろ過後の残渣に対してこの操作を繰り返した。吸引ろ過で残渣を除いた液体部分を500mlまで濃縮後、2.5倍量のエタノールを加え、マイナス20度で1時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿部分を除いた液体部分をロータリーエバポレーターで濃縮乾固し紫ウコン水抽出画分−３を得た。
つぎに、紫ウコン水抽出画分−３の活性成分を合成吸着剤を用いて分画した。以下にその条件について示す。

樹脂はアンバーライトXAD-2（オレガノ社製：樹脂量70ml）を用いた。3.4gの紫ウコン水抽出画分−３をXAD-2に供し、蒸留水140mlで非吸着物を十分に洗い出し、次に350mlのメタノールで吸着物を溶出した。メタノール溶出物をロータリーエバポレーターで濃縮し、紫ウコン水抽出低画分−３のXAD-2処理物を得た。

（４）上記の紫ウコン水抽出画分−３のXAD-2処理物のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。紫ウコン水抽出画分−３のXAD-2処理物は0.5、1、2mg/mlとなるように添加した。その結果を表６３に示した。紫ウコン水抽出画分−３のXAD-2処理物は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

またこの処理物のHGF産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法で測定した。紫ウコン水抽出低画分−３のXAD-2処理物は2000、1000、500、250μg/mlとなるように添加した。その結果を表６４に示した。紫ウコン水抽出低画分−３XAD-2処理物は、濃度依存的にMRC-5細胞のHGF産生を増強した。

（５）紫ウコン水抽出画分−３のXAD-2処理物の活性成分を逆相クロマトグラフィーを用いて分画した。

以下にその条件について示す。

樹脂はコスモシール140 C18-OPN（ナカライテスク社製：樹脂量70ml）を用いた。紫ウコン水抽出画分−３のXAD-2処理物0.444gを供し、展開溶媒としてそれぞれ140mlの蒸留水、5％アセトニトリル水溶液、10%アセトニトリル水溶液、20％アセトニトリル水溶液、40%アセトニトリル水溶液、アセトニトリル、アセトンの順に溶出を行い、各溶出画分を減圧濃縮した。

（６）紫ウコン水抽出画分−３のXAD-2由来の逆相クロマトグラフィー画分のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。表６５にその結果を示す。表に示すように、蒸留水溶出画分、10%アセトニトリル水溶液溶出画分、20％アセトニトリル水溶液溶出画分、40%アセトニトリル水溶液溶出画分、アセトニトリル溶出画分、アセトン溶出画分にNGF産生増強活性があることが明らかになった。

また紫ウコン水抽出低画分−３のXAD-2由来の逆相クロマトグラフィー画分のHGF産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法で測定した。その結果、蒸留水溶出画分、5%アセトニトリル水溶液溶出画分、10%アセトニトリル水溶液溶出画分、20%アセトニトリル水溶液溶出画分にHGF産生増強活性があることが明らかになった。表６６にその結果を示す。

実施例３９
（１）大豆胚芽（紀文社製）を細断したもの10gに200mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。吸引ろ過後の残渣に対してこの抽出操作を２回繰り返した。クロロホルム抽出後の残渣に200mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。吸引ろ過後の残渣に対してこの操作を２回繰り返した。ろ過後の液体部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固し、乾固物を5mlのエタノールに溶解した。エタノールに溶解した部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固しエタノール抽出画分−１を得た。また、エタノールに溶解せず蒸留水に溶解した部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固しエタノール抽出画分−２を得た。つぎに、エタノール抽出後の残渣に200mlの蒸留水を加え60度で2時間抽出をおこなった。10,000Ｇの遠心で残渣を除いた液体部分に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス20度で1時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物と液体部分に分画した。液体部分は、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固し水抽出画分−１を得た。一方、沈殿物を蒸留水に溶解し水抽出画分−２を得た。

（２）上記の大豆胚芽エタノール抽出画分−２、水抽出画分−１、水抽出画分−２のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。大豆胚芽エタノール抽出画分−２は0.8875、1.775、3.55mg/mlとなるように添加した。大豆胚芽水抽出画分−１は4.998、9.975、19.95mg/mlとなるように添加した。大豆胚芽水抽出画分−２は3.36、6.72、13.44mg/mlとなるように添加した。その結果を表６７、６８示した。大豆胚芽エタノール抽出画分−２、水抽出画分−１、水抽出画分−２は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

また大豆胚芽水抽出画分−1、水抽出画分−2のHGF産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法で測定した。大豆胚芽水抽出画分−1は1995、199.5μg/mlとなるように添加した。大豆胚芽水抽出画分−2は1344、134.4μg/mlとなるように添加した。その結果を表６９に示した。大豆胚芽水抽出画分−1、水抽出画分−2は、濃度依存的にMRC-5細胞のHGF産生を増強した。

（３）大豆種皮（紀文社製）を細断したもの10gに200mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。吸引ろ過後の残渣に対してこの抽出操作を２回繰り返した。クロロホルム抽出後の残渣に200mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。吸引ろ過後の残渣に対してこの操作を２回繰り返した。ろ過後の液体部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固し、乾固物を3mlのエタノールに溶解した。エタノールに溶解した部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固し、種皮エタノール抽出画分−１を得た。また、エタノールに溶解せず蒸留水に溶解した部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固し、種皮エタノール抽出画分−２を得た。つぎに、エタノール抽出後の残渣に70mlの蒸留水を加え60度で2時間抽出をおこなった。吸引ろ過で残渣を除いた液体部分に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス20度で1時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物と液体部分に分画した。液体部分は、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固し、種皮水抽出画分−１を得た。一方、沈殿物を蒸留水に溶解し、種皮水抽出画分−２を得た。

（４）上記の大豆種皮エタノール抽出画分−２、種皮水抽出画分−１、種皮水抽出画分−２のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。大豆種皮エタノール抽出画分−２は0.275、0.55mg/mlとなるように添加した。大豆種皮水抽出画分−１は3.125、6.25、12.5mg/mlとなるように添加した。大豆種皮水抽出画分−２は0.654、1.308、2.616mg/mlとなるように添加した。その結果を表７０、７１に示した。大豆種皮エタノール抽出画分−２、種皮水抽出画分−１、種皮水抽出画分−２は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

また大豆種皮水抽出画分−１、水抽出画分−２のHGF産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法で測定した。大豆種皮水抽出画分−１は125、1250μg/mlとなるように添加した。大豆種皮水抽出画分−２は26.16、261.6μg/mlとなるように添加した。その結果を表７２、７３に示した。大豆種皮水抽出画分−１、水抽出画分−２は、濃度依存的にMRC-5細胞のHGF産生を増強した。

（５）ソヤミール（紀文社製）を細断したもの10gに200mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。吸引ろ過後の残渣に対してこの抽出操作を２回繰り返した。クロロホルム抽出後の残渣に200mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。吸引ろ過後の残渣に対してこの操作を２回繰り返した。ろ過後の液体部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固し、乾固物を3mlのエタノールに溶解した。エタノールに溶解した部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固し、ソヤミールのエタノール抽出画分−１を得た。また、エタノールに溶解せず蒸留水に溶解した部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固し、ソヤミールのエタノール抽出画分−２を得た。つぎに、エタノール抽出後の残渣に100mlの蒸留水を加え60度で2時間抽出をおこなった。10,000Ｇの遠心で残渣を除いた液体部分に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス20度で1時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物と液体部分に分画した。液体部分は、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固し、ソヤミール水抽出画分−１を得た。一方、沈殿物を蒸留水に溶解し、ソヤミール水抽出画分−２を得た。

（６）上記のソヤミールのエタノール抽出画分−２、ソヤミール水抽出画分−１のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。ソヤミールのエタノール抽出画分−２は0.488、0.975mg/mlとなるように添加した。ソヤミール水抽出画分−１は2.625、5.25mg/mlとなるように添加した。その結果を表７４、７５に示した。ソヤミールのエタノール抽出画分−２、ソヤミール水抽出画分−１は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

またソヤミール水抽出画分−１、水抽出画分−２のHGF産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法で測定した。ソヤミール水抽出画分−１は105、1050μg/mlとなるように添加した。ソヤミール水抽出画分−２は56.5、565μg/mlとなるように添加した。その結果を表７６に示した。ソヤミール水抽出画分−１、水抽出画分−２は、濃度依存的にMRC-5細胞のHGF産生を増強した。

実施例４０
（１）モロヘイヤ葉粉末（皇漢薬品研究所製）5gに200mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。吸引ろ過後の残渣に対してこの抽出操作を２回繰り返した。クロロホルム抽出後の残渣に200mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。吸引ろ過後の残渣に対してこの操作を２回繰り返した。ろ過後の液体部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固し、乾固物を17mlのエタノールに溶解した。エタノールに溶解した部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固しエタノール抽出画分−１を得た。また、エタノールに溶解せず蒸留水に溶解した部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固しエタノール抽出画分−２を得た。つぎに、エタノール抽出後の残渣に80mlの蒸留水を加え60度で2時間抽出をおこなった。10,000Ｇの遠心で残渣を除いた液体部分に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス20度で1時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物と液体部分に分画した。液体部分は、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固し水抽出画分−１を得た。一方、沈殿物は蒸留水に再溶解後、蒸留水に対して透析（透析膜：Seamless Cellurose Tubing UC36-32-100、三光純薬社製）を行った。透析内液に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス20度で１時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物と液体部分に分画した。沈殿物を蒸留水に溶解し水抽出画分−２を得た。

（２）上記のモロヘイヤ葉エタノール抽出画分−２、水抽出画分−１、水抽出画分−２のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。モロヘイヤ葉エタノール抽出画分−２は0.15、0.3mg/mlとなるように添加した。モロヘイヤ葉水抽出画分−１は1.41mg/mlとなるように添加した。モロヘイヤ葉水抽出画分−２は0.01、0.02、0.04mg/mlとなるように添加した。その結果を表７７に示した。モロヘイヤ葉エタノール抽出画分−２、水抽出画分−１、水抽出画分−２は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

また、モロヘイヤ葉水抽出画分−１、水抽出画分−２のHGF産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法で測定した。モロヘイヤ葉水抽出画分−１は225.5、22.55、2.255μg/mlとなるように添加した。モロヘイヤ葉水抽出画分−２は20、8、4、0.4、0.04μg/mlとなるように添加した。その結果を表７８、７９に示した。モロヘイヤ葉水抽出画分−１、水抽出画分−２は、濃度依存的にMRC-5細胞のHGF産生を増強した。

実施例４１
（１）米糠10gに200mlのクロロホルムを加え室温で抽出をおこなった。吸引ろ過後の残渣に対してこの抽出操作を２回繰り返した。ろ過後の液体部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固しクロロホルム抽出画分を得た。クロロホルム抽出後の残渣に200mlのエタノールを加え室温で抽出をおこなった。残渣に対してこの操作を２回繰り返した。ろ過後の液体部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固し、乾固物を35mlのエタノールに溶解した。エタノールに溶解した部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固しエタノール抽出画分−１を得た。また、エタノールに溶解せず蒸留水に溶解した部分を集めロータリーエバポレーターで濃縮乾固しエタノール抽出画分−２を得た。つぎに、エタノール抽出後の残渣に100mlの蒸留水を加え60度で2時間抽出をおこなった。10,000Ｇの遠心で残渣を除いた液体部分に2.5倍量のエタノールを加え、マイナス20度で1時間静置した。その後、10,000Ｇの遠心で沈殿物と液体部分に分画した。液体部分は、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固し水抽出画分−１を得た。一方、沈殿物を蒸留水に溶解し水抽出画分−２を得た。

（２）上記の調製した米糠クロロホルム抽出画分、エタノール抽出画分−１、エタノール抽出画分−２、水抽出画分−１、水抽出画分−２のNGF産生増強活性を実施例１３と同様の方法で測定した。米糠クロロホルム抽出画分は4.4、8.8mg/mlとなるように添加した。米糠エタノール抽出画分−１は0.125、0.25、0.5、1.0mg/mlとなるように添加した。米糠エタノール抽出画分−２は0.625、1.25、2.5、5.0mg/mlとなるように添加した。米糠水抽出画分−１は.625、1.25、2.5、5.0mg/mlとなるように添加した。米糠水抽出画分−２は0.625、1.25、2.5、5.0mg/mlとなるように添加した。その結果を表８０に示した。米糠クロロホルム抽出画分、エタノール抽出画分−１、エタノール抽出画分−２、水抽出画分−１、水抽出画分−２は、濃度依存的にＬ−Ｍ細胞のＮＧＦ産生を増強した。

また水抽出画分−１のHGF産生増強活性を実施例４−（１）と同様の方法で測定した。米糠水抽出画分−１は1000、100μｇ/mlとなるように添加した。その結果を表８１に示した。米糠水抽出画分−１は、濃度依存的にMRC-5細胞のHGF産生を増強した。

実施例４２
（１）市販のウーロン茶葉を通常の２倍濃度に抽出し、５００ｍｌを得た。これに表８２に示す配合に従ってアルコール含有ウーロン茶を１０００ｍｌ調製した。

（２）タケの葉粉末７ｇを１００ｍｌの精製水にけんだくし、６０℃で１時間抽出した抽出物の凍結乾燥物を調製し、上記アルコール含有ウーロン茶に、当該乾燥物が０．１μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール飲料を調製した。当該乾燥物中のイソオリエンチンが１００μｇ／ｍｌとなるように当該乾燥物を添加したアルコール飲料を調製した。

（３）タマネギ薄皮５ｇを１００ｍｌの精製水にけんだくし、１００℃で１５分抽出した抽出物を調製し、上記アルコール含有ウーロン茶に、当該抽出物が１００倍希釈液となるように添加したアルコール飲料を調製した。

（４）イチョウ茶葉３ｇを精製水２００ｍｌにけんだくし、１００℃で１５分抽出した抽出物の凍結乾燥物を調製し、当該乾燥物を精製水８ｍｌに溶解した後、上記アルコール含有ウーロン茶に、当該溶解液が１００倍希釈となるように添加したアルコール飲料を調製した。

（５）ヨモギ乾燥品１０ｇに精製水１５０ｍｌを添加し、６０℃で１時間抽出した抽出物を調製し、上記アルコール含有ウーロン茶に、当該抽出物由来の３，５−ジカフェオイルキナ酸が５μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製した。また当該抽出物由来のクロロゲン酸が４０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製した。

（６）アシタバ（葉茎部）乾燥品４８０ｇを精製水２リットルにけんだくし、６０℃で１時間抽出した抽出物を調製し、上記アルコール含有ウーロン茶に、当該抽出物中のクロロゲン酸が１０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製した。

（７）菊花乾燥物１５ｇを精製水１５０ｍｌにけんだくし、６０℃で２時間抽出した抽出物を調製し、上記アルコール含有ウーロン茶に、当該抽出物が１００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製した。

（８）紫ウコン乾燥品５ｇを精製水２５ｍｌにけんだくし、６０℃で２時間抽出した抽出物の凍結乾燥物を調製し、上記アルコール含有ウーロン茶に、当該乾燥物が１０μｇ／ｍｌとなるように添加したアルコール含有飲料を調製した。

（９）プラム３００ｇを５００ｍｌのエタノールとともにホモゲナイズし、ろ過によりろ液を調製し、上記アルコール含有ウーロン茶に、当該抽出物が１０００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製した。当該抽出物を使用し、飲料中の５−カフェオイルキナ酸、４−カフェオイルキサン酸がそれぞれ１００μｇ／ｍｌとなるアルコール含有飲料を調製した。

（１０）ブロッコリー３００ｇを５０％エタノール水溶液３５０ｍｌとともにホモゲナイズし、ろ過によりろ液を調製し、当該ろ液を１５０ｍｌに濃縮した。上記アルコール含有ウーロン茶に、当該濃縮液が１０００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製した。

（１１）春菊の凍結乾燥物１０ｇを粉砕し、エタノールで洗浄後、１００ｍｌの水を添加し、６０℃で１時間加熱し、抽出液を調製し、上記アルコール含有ウーロン茶に、当該濃縮液が１０００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製した。

（１２）春菊９００ｇを８０％エタノール水溶液２リットルとともにホモゲナイズし、ろ過によりろ液を調製し、当該ろ液を５０ｍｌに濃縮した。上記アルコール含有ウーロン茶に、当該濃縮液が１０００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製した。また当該アルコール含有飲料には３，５−ジカフェオイルキナ酸が１０μｇ／ｍｌとなるように当該濃縮液を使用しアルコール含有飲料を調製した。

（１３）市販のビール（前出市販品Ｂ）１５リットルを６リットルに濃縮し、上記アルコール含有ウーロン茶に、当該濃縮液が１００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製した。

（１４）市販のノンアルコールビール飲料（前出市販品Ｄ）１５リットルを６リットルに濃縮し、上記アルコール含有ウーロン茶に、当該濃縮液が１００倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製した。

（１５）大豆胚芽細断物１０ｇをエタノール２００ｍｌで洗浄した後、２００ｍｌの水を添加し、６０℃で２時間加熱し、抽出液を調製した。抽出液をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分と、エタノール不溶画分のそれぞれの乾燥物を調製した。エタノール可溶画分の乾燥物が２００μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有ウーロン茶に添加したアルコール含有飲料を調製した。

またエタノール不溶画分の乾燥物が１３０μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有ウーロン茶に添加したアルコール含有飲料を調製した。

（１６）大豆種皮細断物１０ｇをエタノール２００ｍｌで洗浄した後、７０ｍｌの水を添加し、６０℃で２時間加熱し、抽出液を調製した。抽出液をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分と、エタノール不溶画分のそれぞれの乾燥物を調製した。エタノール可溶画分の乾燥物が１３０μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有ウーロン茶に添加したアルコール含有飲料を調製した。

またエタノール不溶画分の乾燥物が３０μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有ウーロン茶に添加したアルコール含有飲料を調製した。

（１７）ソヤミール細断物１０ｇをエタノール２００ｍｌで洗浄した後、１００ｍｌの水を添加し、６０℃で２時間加熱し、抽出液を調製した。抽出液をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分と、エタノール不溶画分のそれぞれの乾燥物を調製した。エタノール可溶画分の乾燥物が１００μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有ウーロン茶に添加したアルコール含有飲料を調製した。

またエタノール不溶画分の乾燥物が６０μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有ウーロン茶に添加したアルコール含有飲料を調製した。

（１８）モロヘイヤ葉粉末５ｇをエタノール２００ｍｌで洗浄した後、８０ｍｌの水を添加し、６０℃で２時間加熱し、抽出液を調製した。抽出液をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分と、エタノール不溶画分のそれぞれの乾燥物を調製した。エタノール可溶画分の乾燥物が２μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有ウーロン茶に添加したアルコール含有飲料を調製した。

またエタノール不溶画分の乾燥物が４μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有ウーロン茶に添加したアルコール含有飲料を調製した。

（１９）米ぬか１０ｇをエタノール２００ｍｌで洗浄した後、１００ｍｌの水を添加し、６０℃で２時間加熱し、抽出液を調製した。抽出液をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分の乾燥物を調製した。エタノール可溶画分の乾燥物が１ｍｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有ウーロン茶に添加したアルコール含有飲料を調製した。

（２０）上記実施例４２−（２）〜（１９）に記載のアルコール含有飲料は、風味のよい、かつ、ＨＧＦ産生増強能を有する清涼アルコール飲料であった。

またこれらの飲料のカーボネーションを行い、発泡タイプの飲料を調製した。

またこれらの飲料中のＨＧＦ産生増強能を有する有効成分を２０倍量含有するノンアルコールタイプの飲料を調製した。これらの飲料は、いずれも良好な風味と、高いＨＧＦ産生増強能を示した。
実施例４３
（１）表８３に記載の配合に従ってアルコール含有果汁を調製した。

（２）市販のベニバナ黄色色素を、上記アルコール含有果汁に、当該色素が１．２５ｍｇ／ｍｌとなるように添加し、アルコール含有飲料を調製した。当該飲料中にはその有効成分としてサフロミンＡが高含有されていた。またベニバナ乾燥物１０ｇを精製水１５０ｍｌにけんだくし、６０℃で２時間抽出した抽出物の凍結乾燥物を、上記アルコール含有果汁に、当該乾燥物中のサフロミンＡが３ｍｇ／ｍｌとなるように添加しアルコール含有飲料を調製した。

（３）市販の菊花乾燥物１５ｇを精製水１５０ｍｌにけんだくし、６０℃で２時間抽出した抽出物の凍結乾燥物を、上記アルコール含有果汁に、当該乾燥物が２０ｍｇ／ｍｌとなるように添加しアルコール含有飲料を調製した。

また上記アルコール含有果汁に、グアイアノライドが２０μｇ／ｍｌとなるように上記凍結乾燥物を添加し、アルコール含有飲料を調製した。

（４）アシタバ乾燥物（葉茎部）２０ｇを精製水３６０ｍｌにけんだくし、６０℃で２時間抽出した抽出物の凍結乾燥物を、上記アルコール含有果汁に、当該乾燥物が４００μｇ／ｍｌとなるように添加し、アルコール含有飲料を調製した。

またアシタバ乾燥物（根部）２０ｇを精製水３６０ｍｌにけんだくし、６０℃で２時間抽出した抽出物の凍結乾燥物を、上記アルコール含有果汁に、当該乾燥物が６００μｇ／ｍｌとなるように添加し、アルコール含有飲料を調製した。

さらに上記アルコール含有果汁にキサントアンゲロールが１０μｇ／ｍｌとなるように当該乾燥物を添加し、アルコール含有飲料を調製した。

また上記アルコール含有果汁に３’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノイルケラクトンが５０μｇ／ｍｌとなるように当該乾燥物を添加して、アルコール含有飲料を調製した。

また上記アルコール含有果汁に７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−８−プレニルクマリンが３０μｇ／ｍｌとなるように当該乾燥物を添加して、アルコール含有飲料を調製した。

また上記アルコール含有果汁にコーヒー酸メチルエステルが２０μｇ／ｍｌとなるように当該乾燥物を添加して、アルコール含有飲料を調製した。

また上記アルコール含有果汁に８−カルボキシル−３−ヒドロキシ−５−メトキシル−２−ジメチルクロマンが３μｇ／ｍｌとなるように当該乾燥物を添加して、アルコール含有飲料を調製した。

また上記アルコール含有果汁に７−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−６−プレニルクマリンが３００μｇ／ｍｌとなるように当該乾燥物を添加して、アルコール含有飲料を調製した。

また上記アルコール含有果汁に４’−Ｏ−アンゲロイル−３’−Ｏ−[６−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル]−ケラクトンが４００μｇ／ｍｌとなるように当該乾燥物を添加して、アルコール含有飲料を調製した。

また上記アルコール含有果汁にコーヒー酸エチルエステルが３０μｇ／ｍｌとなるように当該乾燥物を添加して、アルコール含有飲料を調製した。

（５）タマネギ薄皮２５ｇを９５％ｖ／ｖエチルアルコール５００ｍｌにけんだくし、室温で抽出した抽出液の乾燥物を調製し、上記アルコール含有果汁に、当該乾燥物が１００μｇ／ｍｌとなるように添加し、アルコール含有飲料を調製した。

（６）イチョウ茶葉３ｇを精製水２００ｍｌにけんだくし、１００℃で１時間抽出した抽出物の凍結乾燥物を調製し、上記アルコール含有果汁に、当該乾燥物が７００μｇ／ｍｌとなるように添加し、アルコール含有飲料を調製した。

（７）市販のバラ花２ｇを精製水４０ｍｌにけんだくし、６０℃で１時間抽出し多抽出物の凍結乾燥物を調製し、上記アルコール含有果汁に、当該乾燥物が８０μｇ／ｍｌとなるように添加し、アルコール含有飲料を調製した。

（８）市販のホップエキスを使用し、キサントフモール含量が３μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有果汁に添加し、アルコール含有飲料を調製した。

（９）市販のホップエキスを乾燥重量として１０μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有果汁に添加し、アルコール含有飲料を調製した。

（１０）市販のホップエキスを使用し、キサントフモールＢ、キサントフモールＤの総量が２０μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有果汁に添加し、アルコール含有飲料を調製した。

（１１）市販のホップエキスを使用し、イソキサントフモール含量が８０μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有果汁に添加し、アルコール含有飲料を調製した。

（１２）市販のビール（前出市販品Ｂ）１５リットルを６リットルに濃縮し、上記アルコール含有果汁に、当該濃縮液が１０倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製した。

（１３）市販のノンアルコールビール飲料（前出市販品Ｄ）１５リットルを６リットルに濃縮し、上記アルコール含有果汁に、当該濃縮液が１０倍希釈液となるように添加したアルコール含有飲料を調製した。

（１４）市販のホップエキスを用いてキサントフモール含量が０．０４μｇ／ｍｌ、イソキサントフモール含量が１．３μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有果汁に添加し、アルコール含有飲料を調製した。

また市販のホップエキスを用いてキサントフモール含量が０．９μｇ／ｍｌ、イソキサントフモール含量が４μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有果汁に添加し、アルコール含有飲料を調製した。

（１５）ホップ乾燥物５０ｇを粉砕し、１リットルのエタノールで抽出し、抽出液を濃縮した。濃縮物を乾燥重量として２０μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有果汁に添加し、アルコール含有飲料を調製した。

（１６）紫ウコン５ｇの細断物を精製水２５ｍｌにけんだくし、６０℃で２時間抽出した抽出物の凍結乾燥物を、上記アルコール含有果汁に、当該乾燥物が６００μｇ／ｍｌとなるように添加し、アルコール含有飲料を調製した。

（１７）大豆胚芽細断物１０ｇをエタノール２００ｍｌで洗浄した後、２００ｍｌの水を添加し、６０℃で２時間加熱し、抽出液を調製した。抽出液をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分と、エタノール不溶画分のそれぞれの乾燥物を調製した。エタノール可溶画分の乾燥物が５ｍｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有果汁に添加したアルコール含有飲料を調製した。

またエタノール不溶画分の乾燥物が３ｍｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有果汁に添加したアルコール含有飲料を調製した。

（１８）大豆種皮細断物１０ｇをエタノール２００ｍｌで洗浄した後、７０ｍｌの水を添加し、６０℃で２時間加熱し、抽出液を調製した。抽出液をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分と、エタノール不溶画分のそれぞれの乾燥物を調製した。エタノール可溶画分の乾燥物が３ｍｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有ウーロン茶に添加したアルコール含有飲料を調製した。

またエタノール不溶画分の乾燥物が６００μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有果汁に添加したアルコール含有飲料を調製した。

（１９）ソヤミール細断物１０ｇをエタノール２００ｍｌで洗浄した後、１００ｍｌの水を添加し、６０℃で２時間加熱し、抽出液を調製した。抽出液をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分と、エタノール不溶画分のそれぞれの乾燥物を調製した。エタノール可溶画分の乾燥物が３ｍｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有果汁に添加したアルコール含有飲料を調製した。

（２０）モロヘイヤ葉粉末５ｇをエタノール２００ｍｌで洗浄した後、８０ｍｌの水を添加し、６０℃で２時間加熱し、抽出液を調製した。抽出液をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分と、エタノール不溶画分のそれぞれの乾燥物を調製した。エタノール可溶画分の乾燥物が５００μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有果汁に添加したアルコール含有飲料を調製した。

またエタノール不溶画分の乾燥物が５μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール果汁に添加したアルコール含有飲料を調製した。

（２１）米ぬか１０ｇをエタノール２００ｍｌで洗浄した後、１００ｍｌの水を添加し、６０℃で２時間加熱し、抽出液を調製した。抽出液をろ過し、ろ液を得た後に、ろ液に２．５倍量のエタノールを加え、エタノール可溶画分とエタノール不溶画分のそれぞれの乾燥物を調製した。エタノール可溶画分の乾燥物が５００μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有果汁に添加したアルコール含有飲料を調製した。またエタノール不溶画分の乾燥物が５００μｇ／ｍｌとなるように、上記アルコール含有果汁に添加したアルコール含有飲料を調製した。

（２２）上記実施例４３−（２）〜（２１）に記載のアルコール含有果汁飲料は、風味のよい、かつ、ＮＧＦ産生増強能を有する清涼アルコール飲料であった。

またこれらの飲料中のＮＧＦ産生増強能を有する有効成分を２０倍量含有するノンアルコールタイプの飲料を調製した。これらの飲料は、いずれも良好な風味と、高いＮＧＦ産生増強能を示した。

なお、本発明の態様として、以下のものが挙げられる。
〔１〕植物由来の成長因子産生増強物質を有効成分として含有してなることを特徴とする成長因子産生増強用組成物。
〔２〕セリ科、キク科、ユリ科、イチョウ科、イネ科、バラ科、クワ科、マメ科、シナノキ科、アブラナ科及びショウガ科に属する植物からなる群より選択される１以上の植物由来の成長因子産生増強物質を有効成分として含有してなる前記〔１〕記載の成長因子産生増強用組成物。
〔３〕植物由来の成長因子産生増強物質がクロロゲン酸(chlorogenic acid)、ジカフェオイルキナ酸(dicaffeoyl-quinic acid)、カフェオイルキナ酸(caffeoyl-quinic acid)、イソオリエンチン(isoorientin)、サフロミンＡ(safflomin A)、グアイアノライド(guaianolide)、キサントアンゲロール(xanthoangelol)、３’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノイルケラクトン(3'-O-β-D-glucopyranoyl khellactone)、７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−８−プレニルクマリン(7-O-β-D-glucopyranosyloxy-8-prenylcoumarin)、コーヒー酸メチルエステル(caffeic acid methyl ester)、コーヒー酸エチルエステル(caffeic acid ethyl ester)、８−カルボキシル−３−ヒドロキシ−５−メトキシル−２−ジメチルクロマン(8-carboxyl-3-hydroxy-5-methoxyl-2-dimethylchroman)、７−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−６−プレニルクマリン(7-β-D-glucopyranosyloxy-6-prenylcoumarin)、４’−Ｏ−アンゲロイル−３’−Ｏ−[６−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル]−ケラクトン(4'-O-angeloyl-3'-O-[6-O-(β-D-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranosyl]-khellactone)、イソキサントフモール(isoxanthohumol)、キサントフモールＢ(xanthohumol B)、キサントフモールＤ(xanthohumol D)及びキサントフモール(xanthohumol)からなる群より選択される１以上の化合物である前記〔１〕または〔２〕記載の成長因子産生増強用組成物。
〔４〕成長因子産生増強物質を含む、植物由来の抽出物もしくは該植物抽出物から得られる画分を含有してなる前記〔１〕〜〔３〕いずれか記載の成長因子産生増強用組成物。
〔５〕植物由来の成長因子産生増強物質を高濃度及び／又は高純度に含有してなる前記〔１〕〜〔４〕いずれか記載の成長因子産生増強用組成物。
〔６〕成長因子が肝細胞増殖因子または神経成長因子である前記〔１〕〜〔５〕いずれか記載の成長因子産生増強用組成物。
〔７〕前記〔１〕〜〔６〕いずれか記載の成長因子産生増強用組成物を含有してなる、成長因子産生増強を必要とする疾患の治療剤または予防剤。
〔８〕前記〔１〕〜〔６〕いずれか記載の成長因子産生増強用組成物を含有してなる成長因子産生増強用の食品、飲料又は飼料。
〔９〕植物由来の成長因子産生増強物質を高濃度及び／又は高純度に含有してなることを特徴とする食品、飲料又は飼料。
〔１０〕植物由来の成長因子産生増強物質が、クロロゲン酸、ジカフェオイルキナ酸、カフェオイルキナ酸、イソオリエンチン、サフロミンＡ、グアイアノライド、キサントアンゲロール、３’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノイルケラクトン、７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−８−プレニルクマリン、コーヒー酸メチルエステル、コーヒー酸エチルエステル、８−カルボキシル−３−ヒドロキシ−５−メトキシル−２−ジメチルクロマン、７−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−６−プレニルクマリン，４’−Ｏ−アンゲロイル−３’−Ｏ−[６−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル]−ケラクトン、イソキサントフモール、キサントフモールＢ、キサントフモールＤおよびキサントフモールからなる群より選択される１以上の化合物である前記〔９〕記載の食品、飲料又は飼料。
〔１１〕前記〔１〕〜〔６〕いずれか記載の成長因子産生増強用組成物を高濃度及び／又は高純度に含有してなる食品、飲料又は飼料。
〔１２〕植物由来の成長因子産生増強用組成物がクロロゲン酸、ジカフェオイルキナ酸、カフェオイルキナ酸、イソオリエンチン、サフロミンＡ、グアイアノライド、キサントアンゲロール、３’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノイルケラクトン、７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−８−プレニルクマリン、コーヒー酸メチルエステル、コーヒー酸エチルエステル、８−カルボキシル−３−ヒドロキシ−５−メトキシル−２−ジメチルクロマン、７−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ−６−プレニルクマリン，４’−Ｏ−アンゲロイル−３’−Ｏ−[６−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル]−ケラクトン、イソキサントフモール、キサントフモールＢ、キサントフモールＤおよびキサントフモールからなる群より選択される１以上の化合物を含有してなる組成物である前記〔１１〕記載の食品、飲料又は飼料。
〔１３〕キサントフモールを０．００００７重量％以上含んでなる神経成長因子産生増強用の食品、飲料又は飼料。
〔１４〕成長因子産生増強物質を含有してなる食品、飲料、飼料又はそれらの処理物を含有してなる成長因子産生増強用の食品、飲料又は飼料。
〔１５〕ビール類を含有してなる前記〔１４〕記載の成長因子産生増強用の食品、飲料又は飼料。
〔１６〕ホップ抽出物を含有してなる成長因子産生増強用の食品、飲料又は飼料。
〔１７〕グアイアノライドを有効成分として含有してなることを特徴とする成長因子産生増強用組成物。
〔１８〕グアイアノライドを有効成分として含有してなることを特徴とする成長因子産生増強を必要とする疾患の治療剤または予防剤。
〔１９〕グアイアノライドを有効成分として含有してなることを特徴とする成長因子産生増強用の食品、飲料又は飼料。

本発明により、植物由来の成長因子産生増強物質を含有する成長因子産生増強用組成物、当該組成物を含有する成長因子産生増強を必要とする疾患に有効な医薬、食品、飲料又は飼料が提供される。該医薬は生体内における成長因子産生増強活性を有し、肝炎、重症肝炎、劇症肝炎、肝硬変、肝内胆汁うっ滞等の肝障害、薬剤等による腎障害、胃腸障害、血管障害、慢性腎炎、肺炎、創傷、糖尿病、がん、痴呆症または神経障害等の成長因子の産生増強を必要とする疾患の治療剤又は予防剤として有用である。また、該食品又は飲料は、日常の飲食品として摂取することにより、成長因子の産生増強を要する疾患の症状改善等が可能となる。従って、植物由来の成長因子産生増強作用を有する物質を有効成分とする機能性飲食品はその成長因子産生増強作用により、生体の恒常性の維持に有用な機能性飲食品である。該飼料は、生物の体調改善等の効果を有し有用である。さらに、本発明により、植物由来の成長因子産生増強剤も提供され、該増強剤は成長因子の機能研究、成長因子に関連する疾患用医薬のスクリーニングに有用である。

Claims

アシタバ、キク、ベニバナ、タマネギ、イネ、バラ、大豆、モロヘイヤ及びガジュツからなる群より選択される１以上の植物由来の神経成長因子産生増強物質を有効成分として含有してなることを特徴とする神経成長因子産生増強用組成物。
神経成長因子産生増強物質を含む、植物の乾燥粉砕物、植物由来の抽出物もしくは該植物抽出物から得られる画分を含有してなる請求項１記載の神経成長因子産生増強用組成物。
請求項１又は２記載の神経成長因子産生増強用組成物を含有してなる、神経成長因子産生増強を必要とする疾患の治療剤または予防剤。
ヨモギ由来の成長因子産生増強物質を有効成分として含有してなることを特徴とする、薬剤等による腎障害、胃腸障害、血管障害、慢性腎炎、肺炎、創傷、糖尿病及びがんからなる群より選択される疾患の治療剤または予防剤。