JP2009102285A - Agent for promoting intercellular adhesion - Google Patents

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intercellular adhesion
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Yorihisa Uetake
順久 上竹
Norio Hoshi
範男 星
Atsushi Hattori
篤司 服部
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NIPPON TENGANYAKU KENKYUSHO KK
Nitten Pharmaceutical Co Ltd
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide an agent exhibiting the effect of promoting intercellular adhesion on the epithelium or endothelium cell by inducing ZO-1, especially PHSRN and Ac-PHSRN-NH<SB>2</SB>which is a derivative of PHSRN. <P>SOLUTION: The purpose is achieved by PHSRN or Ac-PHSRN-NH<SB>2</SB>to induce ZO-1 and their pharmaceutically allowable salts. The pentapeptide or derivative can be used e. g. as an agent for promoting intercellular adhesion, a treating agent or protecting agent for ocular surface disorder , an intraocular perfusate, a protection agent for corneal endothelium, an injection liquid for intravitreal, a vitreal perfusate or a protection agent for arteriole endothelium of renal glomerular. <P>COPYRIGHT: (C)2009,JPO&INPIT

Description

本発明は、ZO−1を誘導することにより上皮あるいは内皮細胞間接着増強効果を示すもの、特にポリペプチドであるPHSRN及びその誘導体であるAc−PHSRN−NHに関する。 The present invention shows the epithelial or endothelial cell-cell adhesion enhancing effect by inducing ZO-1, it relates Ac-PHSRN-NH 2 is PHSRN and its derivatives in particular polypeptides.

上皮あるいは内皮細胞における細胞間接着部位であるタイトジャンクションには、タイトジャンクション構成タンパクとしてオクルディン(occludin)とクローディン(claudin)が存在している。このうち、オクルディンは、細胞内アクチンフィラメントとリンカーであるZO−1を介して結合していることが知られている(特許文献1,2)。
タイトジャンクションの一般的な機能として、例えば、上皮組織では外界と生体内を隔てるバリア機能がある。消化器官では有害物の体内進入を阻止しており、タイトジャンクション形成を促進することで、有害物に対する抵抗力を増加できることが報告されている(特許文献3)。
また、上皮組織あるいは血管内皮組織の障害が発生した場合、その治癒過程において、上皮あるいは内皮細胞が各組織で接着・伸展・移動ののち、最終的に細胞間のタイトジャンクションが形成されて治癒が完結する。このように、ZO−1がそのタイトジャンクション形成による細胞間接着の一翼を担っている。
一方、PHSRNは、特許文献4に開示されているペンタペプチドであり、外傷治癒及びがん細胞浸潤・増殖抑制効果を有することが知られているが、ZO−1との関連を示唆する報告はない。
Occludin and claudin are present as tight junction constituent proteins in tight junctions, which are cell-cell adhesion sites in epithelial or endothelial cells. Of these, it is known that occludin is bound to intracellular actin filaments via ZO-1 as a linker (Patent Documents 1 and 2).
As a general function of the tight junction, for example, an epithelial tissue has a barrier function that separates the outside from the living body. It has been reported that in the digestive organs, harmful substances are prevented from entering the body, and resistance to harmful substances can be increased by promoting the formation of tight junctions (Patent Document 3).
In addition, when an epithelial tissue or vascular endothelial tissue is damaged, the epithelial or endothelial cells adhere to, spread, and move in each tissue, and finally a tight junction is formed between the cells. Complete. Thus, ZO-1 plays a role in cell-cell adhesion due to the formation of the tight junction.
On the other hand, PHSRN is a pentapeptide disclosed in Patent Document 4 and is known to have wound healing and cancer cell invasion / proliferation inhibitory effects. However, there is a report suggesting an association with ZO-1. Absent.

再表97/032982号公報No. 97/032982 publication 特開2002−191382号公報JP 2002-191382 A 特開2007−210948号公報JP 2007-210948 A WO98/22617号公報WO98 / 22617

従来、手術時または人工透析等の処置時に、上皮あるいは内皮細胞に与える物理的外傷、化学的組織障害は、灌流液、組織の洗浄液等を使用することで創傷の発生を予防してきた。しかし、例えば眼科領域において使用されている電解質溶液、還元型及び酸化型グルタチオン製剤は、直接的な上皮、内皮細胞の創傷保護作用を十分に持たない。一方、積極的な作用が期待されるフィブロネクチンは生体成分であるため、取扱い、特に製剤化が困難であり、製剤化ができる積極的な創傷保護作用を持つ細胞間接着増強剤の開発が望まれてきた。
本発明は、上記した事情に鑑みてなされたものであり、その目的は、ZO−1を誘導することにより細胞間接着増強効果を示すもの、特にPHSRN及びその誘導体であるAc−PHSRN−NH、それらの医薬として許容される塩類を提供することにある。
Conventionally, physical trauma and chemical tissue damage given to epithelium or endothelial cells during surgery or treatment such as artificial dialysis have been prevented from occurring by using a perfusion solution, tissue washing solution, or the like. However, for example, electrolyte solutions, reduced and oxidized glutathione preparations used in the ophthalmological field do not have sufficient epithelial and endothelial cell wound protective effects. On the other hand, fibronectin, which is expected to have an active action, is a biological component, and therefore it is difficult to handle, particularly to formulate, and the development of an intercellular adhesion enhancer that has an active wound-protecting action that can be formulated is desired. I came.
The present invention has been made in view of the above-described circumstances, and the object thereof is to exhibit an intercellular adhesion enhancing effect by inducing ZO-1, particularly, PHSRN and its derivative Ac-PHSRN-NH 2. It is to provide pharmaceutically acceptable salts thereof.

上皮あるいは内皮細胞に創傷が発生すると、ヒトの持つ恒常性によって、その創傷は自然に治癒される。この創傷治癒過程は、ZO−1が誘導され細胞間接着が強固となり、正常な組織となることで終了する。本発明者らは、上皮細胞あるいは内皮細胞において、ポリペプチドであるPHSRN(配列番号1)及びその誘導体であるAc−PHSRN−NHで、ZO−1を誘導できることを見出し、基本的には本発明を完成するに至った。 When a wound occurs in the epithelium or endothelial cells, the wound is naturally healed by the homeostasis of humans. This wound healing process is terminated when ZO-1 is induced, cell-cell adhesion is strengthened, and a normal tissue is obtained. The present inventors have found that ZO-1 can be induced in epithelial cells or endothelial cells with the polypeptide PHSRN (SEQ ID NO: 1) and its derivative Ac-PHSRN-NH 2. The invention has been completed.

第1の発明は、ZO−1を誘導する物質を含むことを特徴とする上皮あるいは内皮細胞間接着増強剤である。本発明においては、前記ZO−1を誘導する物質が、PHSRNまたはAc−PHSRN−NHであることが好ましい。
また、上記上皮細胞間接着増強剤を含有するオキュラーサーフェース障害治療剤または保護剤であることが好ましい。
また、上記上皮細胞間接着増強剤を含有する眼内灌流液であることが好ましい。
また、上記上皮細胞間接着増強剤を含有する角膜内皮保護剤であることが好ましい。
また、上記上皮細胞間接着増強剤を含有する硝子体内注入液または硝子体灌流液であることが好ましい。
また、上記細胞間接着増強剤を含有する腎糸球体血管内皮保護剤であることが好ましい。
The first invention is an epithelial or endothelial intercellular adhesion enhancer characterized by containing a substance that induces ZO-1. In the present invention, substances that induce the ZO-1 is preferably a PHSRN or Ac-PHSRN-NH 2.
Moreover, it is preferable that the therapeutic agent or protective agent is an ocular surface disorder containing the above-mentioned epithelial cell adhesion enhancer.
Further, an intraocular perfusate containing the above epithelial cell adhesion enhancer is preferable.
Moreover, it is preferable that it is a corneal-endothelial protective agent containing the said epithelial cell adhesion enhancer.
Further, an intravitreal injection solution or a vitreous perfusion solution containing the above epithelial cell adhesion enhancer is preferable.
Moreover, it is preferable that it is a renal glomerular vascular endothelial protective agent containing the said intercellular adhesion enhancer.

また、上記、細胞間接着増強剤は、手術時または、人工透析等の処置時における灌流液、組織の洗浄液とできる。また、この使用では、既存の組織灌流液、例えば眼内灌流液ではオペガード(登録商標:千寿製薬)、ビーエスエスプラス(登録商標:日本アルコン)、人工透析液ではソリタ(登録商標:味の素)等と混合して用いる事ができる。
また、第2の発明は、ZO−1を誘導することを特徴とするPHSRNまたはAc−PHSRN−NH、及びそれらポリペプチドの医薬として許容される塩類である。
In addition, the intercellular adhesion enhancer can be used as a perfusate or a tissue washing solution during surgery or treatment such as artificial dialysis. In addition, in this use, existing tissue perfusate, for example, Operguard (registered trademark: Senju Pharmaceutical), BS SPLUS (registered trademark: Nippon Alcon) for intraocular perfusate, Solita (registered trademark: Ajinomoto) for artificial dialysis fluid, etc. Can be used as a mixture.
The second invention relates to PHSRN or Ac-PHSRN-NH 2 characterized by inducing ZO-1, and pharmaceutically acceptable salts of these polypeptides.

「ZO−1」とは、分子量が約220KDaの細胞質蛋白であり、細胞間接着接合体であるタイトジャンクション(tight junction)及びアドヘレンスジャンクション(adherens junction)を構成する分子の一つである。
「PHSRN」とは、Pro−His−Ser−Arg−Asnの五個のアミノ酸から構成されるペンタペプチドを意味する。このペンタペプチドは、フィブロネクチンの活性部位として知られている。本願出願人は、このペプチドの生理効果に着目し、鋭意研究を行っている(例えば、特開2004−210692号公報)。また、上記アミノ酸は多数の鏡像異性体を生じ得る場合、これらすべての鏡像体及びそれらの混合物はすべて本発明に含まれるものであり、PHSRNをモチーフとして形成された組成物についても均等の範囲として本発明の権利範囲に解釈されるべきである。
“ZO-1” is a cytoplasmic protein having a molecular weight of about 220 KDa, and is one of molecules constituting a tight junction and an adherence junction that are cell-cell adhesion conjugates.
“PHSRN” means a pentapeptide composed of five amino acids, Pro-His-Ser-Arg-Asn. This pentapeptide is known as the active site of fibronectin. The applicant of the present application pays attention to the physiological effect of this peptide and conducts earnest research (for example, JP-A-2004-210692). Further, when the above amino acids can give rise to a large number of enantiomers, all these enantiomers and mixtures thereof are all included in the present invention, and the composition formed using PHSRN as a motif is also regarded as an equivalent range. The scope of the present invention should be construed.

「Ac−PHSRN−NH」とは、上記PHSRNにおいて、N末端側をアセチル化し、C末端側をアミド化したものを意味する。
なお、本明細書中において、アミノ酸残基については、次のような省略記号を用いる。つまり、アスパラギンはAsnまたはNを、アルギニンはArgまたはRを、ヒスチジンはHisまたはHを、プロリンはProまたはPを、セリンはSerまたはSを意味する。また、Acはアセチル基を、NHはアミド基を意味する。
「上皮」とは、体の内外の遊離面を覆うものを意味し、例えば角結膜、皮膚、呼吸器、口腔、鼻腔、消化器、膣、血管組織などが含まれる。発生学的には、外胚葉由来(皮膚の表皮など)、内胚葉由来(腸の粘膜上皮など)、中胚葉由来(腹膜の上皮など)がある。
“Ac-PHSRN-NH 2 ” means the above PHSRN in which the N-terminal side is acetylated and the C-terminal side is amidated.
In the present specification, the following abbreviations are used for amino acid residues. That is, asparagine means Asn or N, arginine means Arg or R, histidine means His or H, proline means Pro or P, and serine means Ser or S. Ac represents an acetyl group, and NH 2 represents an amide group.
The “epithelium” means something that covers a free surface inside or outside the body, and includes, for example, the keratoconjunctiva, skin, respiratory organ, oral cavity, nasal cavity, digestive organ, vagina, vascular tissue and the like. Developmentally, they are derived from ectoderm (such as skin epidermis), endoderm (such as intestinal mucosal epithelium), and mesoderm (such as peritoneal epithelium).

「オキュラーサーフェース障害治療剤または保護剤」とは、オキュラーサーフェースを障害から治癒する、または障害から保護する製剤を意味し、例えば点眼液として点眼使用されるものを含む。オキュラーサーフェース障害にはドライアイ等を含む。
「眼内灌流液」とは、眼内を灌流させる液を意味し、例えば白内障及び硝子体等の手術時において手術補助剤として使用されるものを含む。
「角膜内皮保護剤」とは、角膜内皮を保護する剤を意味し、例えば白内障及び硝子体等の手術時において手術補助剤として使用されるものを含む。
「硝子体内注入液または硝子体灌流液」とは、硝子体の内部に注入される液及び硝子体内を灌流する液を意味し、例えば糖尿病性網膜症の治療のために使用されるものを含む。
「腎糸球体血管内皮保護剤」とは、腎糸球体の血管内皮を保護する剤を意味し、例えば人工腎臓透析において使用されるものを含む。
“Ocular surface disorder therapeutic agent or protective agent” means a preparation that cures or protects an ocular surface from a disorder, and includes, for example, an ophthalmic solution used as an eye drop. Ocular surface disorders include dry eye.
The “intraocular perfusate” means a liquid that perfuses the inside of the eye, and includes, for example, those used as a surgical aid during surgery for cataracts and vitreous.
The “corneal endothelium protective agent” means an agent that protects the corneal endothelium, and includes, for example, those that are used as a surgical aid during surgery for cataracts and vitreous.
The term “intravitreal injection solution or vitreous perfusion solution” means a solution injected into the vitreous body or a solution perfusing the vitreous body, and includes, for example, those used for the treatment of diabetic retinopathy .
The “renal glomerular vascular endothelial protective agent” means an agent that protects the vascular endothelium of the renal glomerulus, and includes, for example, those used in artificial kidney dialysis.

本発明によれば、創傷発生過程において、ZO−1を誘導することにより、組織を創傷発生から保護させるものを提供することができる。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, what can protect a structure | tissue from wound generation | occurrence | production can be provided by inducing ZO-1 in a wound generation | occurrence | production process.

次に、本発明の実施形態について、図面を参照しつつ説明するが、本発明の技術的範囲は、これらの実施形態によって限定されるものではなく、発明の要旨を変更することなく様々な形態で実施することができる。また、本発明の技術的範囲は、均等の範囲にまで及ぶものである。
細胞間接着部位であるタイトジャンクションには、構成タンパクとして、オクルディンとクローディンが存在している。このうち、オクルディンは、細胞内アクチンフィラメントとリンカーであるZO−1を介して結合している(特許文献1,2)。上皮組織あるいは血管内皮組織の障害が発生した場合、その治癒過程において、上皮あるいは内皮細胞が各組織で接着・伸展・移動ののち、最終的に細胞間のタイトジャンクションが形成されて治癒が完結する。このとき、ZO−1が、タイトジャンクション形成による細胞間接着の一翼を担っていると考えられる。
Next, embodiments of the present invention will be described with reference to the drawings. However, the technical scope of the present invention is not limited by these embodiments, and various forms are possible without changing the gist of the invention. Can be implemented. Further, the technical scope of the present invention extends to an equivalent range.
Occludin and claudin exist as constituent proteins in tight junctions, which are cell-cell adhesion sites. Of these, occludin is bound to intracellular actin filaments via ZO-1 as a linker (Patent Documents 1 and 2). When an epithelial or vascular endothelial tissue injury occurs, the epithelial or endothelial cells adhere to, spread, and move in each tissue, and finally a tight junction is formed between the cells to complete the healing. . At this time, ZO-1 is considered to play a role in cell-cell adhesion by tight junction formation.

タイトジャンクションの一般的な機能として、例えば上皮組織では外界と生体内を隔てるバリア機能がある。消化器官では有害物の体内進入を阻止しており、タイトジャンクション形成を促進することで、有害物に対する抵抗力を増加できる。例えば、特許文献3にはトコフェリルリン酸化合物が、クローディンとオクルディンの発現を増加させることにより、紫外線照射に対して、抵抗力を増加させることが示されている。
本発明者らは、ペンタペプチドであるPHSRNと、ZO−1との関連を調べるための試験を行った。
As a general function of the tight junction, for example, an epithelial tissue has a barrier function that separates the outside from the living body. In the digestive tract, the entry of harmful substances into the body is prevented, and the resistance to harmful substances can be increased by promoting the formation of tight junctions. For example, Patent Document 3 shows that a tocopheryl phosphate compound increases resistance to ultraviolet irradiation by increasing the expression of claudin and occludin.
The present inventors conducted a test to investigate the association between PHSRN, which is a pentapeptide, and ZO-1.

<不死化ヒト角膜上皮細胞>
不死化ヒト角膜上皮(HCE)細胞は独立行政法人理化学研究所より入手し、37℃、5% CO下、非働化したウシ胎児血清(15%FBS)、インスリン(5μg/mL)、コレラ毒素(0.1μg/mL)、組換えヒト上皮成長因子(EGF:10ng/mL)、ゲンタマイシン(40μg/mL)を含むダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)/F12培地(SHEM)中で培養した。
<Immortalized human corneal epithelial cells>
Immortalized human corneal epithelial (HCE) cells were obtained from RIKEN, and inactivated fetal bovine serum (15% FBS), insulin (5 μg / mL), cholera toxin at 37 ° C. and 5% CO 2. (0.1 μg / mL), recombinant human epidermal growth factor (EGF: 10 ng / mL), and Dulbecco's modified Eagle medium (DMEM) / F12 medium (SHEM) containing gentamicin (40 μg / mL).

その他の試薬として、次のものを用いた。ZO−1ウサギポリクロナール抗体、occludinウサギポリクロナール抗体、およびclaudinウサギポリクロナール抗体はZymed Laboratories社より、E−cadherinウサギポリクロナール抗体、N−cadherinウサギポリクロナール抗体、およびTublinウサギポリクロナール抗体はTransduction Laboratories社より、I型コラーゲンウサギポリクロナール抗体はLSL社より、西洋ワサビペルオキシダーゼ2次抗体はPromega社より購入した。   The following were used as other reagents. The ZO-1 rabbit polyclonal antibody, the occludin rabbit polyclonal antibody, and the claudin rabbit polyclonal antibody are from Zymed Laboratories, the E-cadherin rabbit polyclonal antibody, the N-cadherin rabbit polyclonal antibody, and the Tublin rabbit polyclonal antibody are from TransLedc. Collagen rabbit polyclonal antibody was purchased from LSL, and horseradish peroxidase secondary antibody was purchased from Promega.

<実施例1>
試験には、不死化ヒト角膜上皮細胞(HCE)をSHEMで24時間培養したものを用いた。HCEをPBSで洗浄後、(FBSなど添加物を含まない)DMEM/F12培地について、(1)PHSRNを0.5μg/mL添加したもの、(2)N末端とC末端とを逆向きとしたリバース体であるNRSHP(配列番号2)を0.5μg/mL添加したもの、及び(3)コントロール(無添加)の三通りに分けた後、24時間再培養した。
<Example 1>
For the test, immortalized human corneal epithelial cells (HCE) cultured in SHEM for 24 hours were used. After washing HCE with PBS, for DMEM / F12 medium (without additives such as FBS), (1) PHSRN added at 0.5 μg / mL, (2) N-terminal and C-terminal reversed NRSHP (SEQ ID NO: 2) as a reverse form was added in 0.5 μg / mL, and (3) control (no addition) was divided into three types, and then recultured for 24 hours.

免疫ブロット分析(Immunoblot Analysis)
上記のPHSRN添加、NRSHP添加、または無添加のDMEM/F12で24時間培養したHCE細胞の培地を除去し、PBSで2回洗浄した。PBS除去後、細胞に150mM NaCl、2%SDS、5nM EDTA、20mM Tris−HCl(pH7.5)を含む水溶液20μLを加え融解した。この細胞溶解液をSDS−ポリアクリルアミドゲルで電気泳動し、分離したタンパク質をニトロセルロース膜に転写し、1次抗体と西洋ワサビペルオキシダーゼ2次抗体で暴露した。免疫複合体を化学蛍光試薬であるECLウエスタンブロット検出試薬(GE Healthcare)で増強し、化学発光法によりZO−1、occludin、claudin、N−cadherin、E−cadherinおよびtublinをそれぞれ検出した。
結果を図1に示した。図より明らかなように、特にZO−1の検出において、PHSRNは、コントロールおよびNRSHPに比較して顕著に増加していた。残りの二つについては、ほぼ同等の検出量であった。
Immunoblot analysis (Immunoblot Analysis)
The medium of HCE cells cultured for 24 hours in DMEM / F12 supplemented with PHSRN, NRSHP, or not added was removed and washed twice with PBS. After removing the PBS, the cells were thawed by adding 20 μL of an aqueous solution containing 150 mM NaCl, 2% SDS, 5 nM EDTA, 20 mM Tris-HCl (pH 7.5). This cell lysate was electrophoresed on SDS-polyacrylamide gel, the separated protein was transferred to a nitrocellulose membrane, and exposed with a primary antibody and a horseradish peroxidase secondary antibody. The immune complex was enhanced with an ECL Western blot detection reagent (GE Healthcare), which is a chemiluminescent reagent, and ZO-1, occludin, claudin, N-cadherin, E-cadherin, and tubelin were detected by chemiluminescence.
The results are shown in FIG. As is clear from the figure, PHSRN was significantly increased compared to control and NRSHP, particularly in the detection of ZO-1. About the remaining two, it was a detection amount substantially equivalent.

<実施例2>
SHEMで24時間前培養した不死化ヒト角膜上皮(HCE)細胞をPBSで洗浄後、PHSRN(5、25、100、および200μM)を添加したDMEM/F12培地、又は無添加のDMEM/F12培地で24時間培養した細胞を洗浄・融解し、実施例1と同様に、ZO−1をウエスタンブロットにより検出した。
結果を図2に示した。図より明らかなように、PHSRNの濃度に依存して、ZO−1の発現量が増加することが示された。
図2について、誘導されたZO−1の各スポットをデンシトメトリにより定量化し、統計分析(ダネット検定)した結果を図3に示した。PHSRN(200μM)は、コントロール(無添加)に対し、有意にZO−1の発現を亢進することが明らかとなった。
<Example 2>
Immortalized human corneal epithelial (HCE) cells pre-cultured with SHEM for 24 hours were washed with PBS, and then added with DMEM / F12 medium supplemented with PHSRN (5, 25, 100, and 200 μM) or without addition of DMEM / F12 medium. Cells cultured for 24 hours were washed and thawed, and ZO-1 was detected by Western blot as in Example 1.
The results are shown in FIG. As is clear from the figure, it was shown that the expression level of ZO-1 increased depending on the concentration of PHSRN.
FIG. 3 shows the result of quantification of each induced ZO-1 spot by densitometry and statistical analysis (Dunnett test). It was revealed that PHSRN (200 μM) significantly enhanced ZO-1 expression relative to the control (no addition).

このように、本実施形態によれば、PHSRN及びその誘導体であるAc−PHSRN−NHが細胞間接着において、ZO−1を誘導することにより、細胞間接着を増強し、治療または保護を促進させることが明らかとなった。このペンタペプチド又は誘導体は、細胞間接着増強剤、オキュラーサーフェース障害治療剤または保護剤、眼内環流液、角膜内皮保護剤、硝子体内注入液または硝子体灌流液、または腎糸球体血管内皮保護剤などに用いることができる。 Thus, according to the present embodiment, PHSRN and its derivative Ac-PHSRN-NH 2 induce ZO-1 in cell-cell adhesion, thereby enhancing cell-cell adhesion and promoting treatment or protection. It became clear that This pentapeptide or derivative is an intercellular adhesion enhancer, an agent for treating or protecting an ocular surface disorder, an intraocular reflux, a corneal endothelium protectant, an intravitreal injection or a vitreous perfusate, or a renal glomerular vascular endothelium protection It can be used for agents.

HCEにPHSRN、またはNRSHPを添加して培養したときのZO−1、occludin、claudin、N−cadherin、E−Cadherinおよびtublinの発現を確認したときのSDS−PAGE写真図である。It is a SDS-PAGE photograph figure when the expression of ZO-1, occludin, claudin, N-cadherin, E-cadherin, and tublin is confirmed when PHSRN or NRSHP is added to HCE and cultured. HCEにPHSRN(5、25、100、及び200μM)を添加して培養したときのZO−1及びTublinの発現を確認したときのSDS−PAGE写真図である。It is a SDS-PAGE photograph figure when the expression of ZO-1 and Tubulin is confirmed when PHSRN (5, 25, 100, and 200 μM) is added to HCE and cultured. 図2について、誘導されたZO−1をデンシトメトリにより定量化した結果を示すグラフである。FIG. 3 is a graph showing the results of quantifying induced ZO-1 by densitometry for FIG.

Claims (9)

ZO−1を誘導する物質を含むことを特徴とする細胞間接着増強剤。 A cell adhesion enhancer comprising a substance that induces ZO-1. 前記ZO−1を誘導する物質が、PHSRNまたはAc−PHSRN−NHであることを特徴とする請求項1に記載の細胞間接着増強剤。 Cell adhesion enhancement agent according to claim 1, wherein the substance that induces the ZO-1 is a PHSRN or Ac-PHSRN-NH 2. 請求項1または2に記載の細胞間接着増強剤を含有する上皮ないし内皮保護剤。 An epithelial or endothelial protective agent containing the intercellular adhesion enhancer according to claim 1 or 2. 請求項1または2に記載の細胞間接着増強剤を含有するオキュラーサーフェース障害治療または保護剤。 An agent for treating or protecting an ocular surface disorder comprising the intercellular adhesion enhancer according to claim 1 or 2. 請求項1または2に記載の細胞間接着増強剤を含有する眼内灌流液。 An intraocular perfusate containing the intercellular adhesion enhancer according to claim 1 or 2. 請求項1または2に記載の細胞間接着増強剤を含有する角膜内皮保護剤。 A corneal endothelial protective agent comprising the intercellular adhesion enhancer according to claim 1 or 2. 請求項1または2に記載の細胞間接着増強剤を含有する硝子体内注入液または硝子体灌流液。 An intravitreal injection solution or a vitreous perfusion solution containing the intercellular adhesion enhancer according to claim 1 or 2. 請求項1または2に記載の細胞間接着増強剤を含有する腎糸球体血管内皮保護剤。 A renal glomerular vascular endothelial protective agent comprising the intercellular adhesion enhancer according to claim 1 or 2. ZO−1を誘導することを特徴とするPHSRNまたはAc−PHSRN−NH、及びそれらの医薬として許容される塩類。 PHSRN or Ac-PHSRN-NH 2, characterized in that induces ZO-1 and salts that are their pharmaceutically acceptable.
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US6025150A (en) * 1996-11-21 2000-02-15 The Regents Of The University Of Michigan Methods and compositions for wound healing
JP2004210692A (en) * 2002-12-27 2004-07-29 Nippon Tenganyaku Kenkyusho:Kk Therapeutic composition for ophthalmic use

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