JP2007246466A - Neurological function reconstruction method using rho kinase inhibitor on transplantation of olfactory mucosa for damage of central nerve - Google Patents

Neurological function reconstruction method using rho kinase inhibitor on transplantation of olfactory mucosa for damage of central nerve Download PDF

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Toshiki Yoshimine
俊樹 吉峰
Koichi Iwatsuki
幸一 岩月
Haruhiko Kishima
晴彦 貴島
Shunei Yamashita
俊英 山下
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a medicine for reinforcing the effect of a regenerative treatment, when olfactory nervous sheath cells or a mucous membrane tissue containing the cells is transplanted to the olfactory nerve site of a central nerve-damaged patient to reconstruct and treat the central nerve. <P>SOLUTION: This medicine for reinforcing the effect of the regenerative treatment on the transplantation of olfactory nervous sheath cells or a mucous membrane tissue containing the cells to the olfactory nerve site of a central nerve-damaged patient to reconstruct and treat the central nerve is characterized by containing an Rho kinase inhibitor as an active ingredient. <P>COPYRIGHT: (C)2007,JPO&INPIT

Description

本発明は、中枢神経損傷の再生治療のための効果増強剤およびそれに用いる再生治療法に関し、さらに詳しくは中枢神経損傷患者に嗅神経鞘細胞もしくは該細胞を含む粘膜組織を移植して中枢神経を再建する再生治療における効果増強剤、および該効果増強剤を用いる中枢神経再生治療法に関する。   The present invention relates to an effect enhancer for regenerative treatment of central nerve damage and a regenerative treatment method used therefor, and more specifically, transplants olfactory nerve sheath cells or mucosal tissue containing the cells to a central nerve injury patient to obtain the central nerve. The present invention relates to an effect enhancer for regenerative treatment to be reconstructed, and a central nerve regenerative treatment method using the effect enhancer.

中枢神経は脳および脊髄からなる。中枢神経損傷は、中枢神経が損傷することにより起きる疾患であり、具体的には、例えば脊髄損傷、脳挫傷などの外傷性脳損傷、脳出血あるいは脳梗塞などの脳血管障害に基づく脳損傷、脳手術後の脳損傷などが挙げられる。   The central nervous system consists of the brain and spinal cord. Central nerve damage is a disease caused by damage to the central nerve. Specifically, for example, traumatic brain injury such as spinal cord injury, cerebral contusion, brain damage based on cerebrovascular disorder such as cerebral hemorrhage or cerebral infarction, brain Examples include brain damage after surgery.

脊髄損傷は、交通事故や高所転落に伴う脊椎脱臼骨折などの外傷により、脊髄実質が損傷されることによって、損傷部以下の末梢の運動・感覚・自律神経系の麻痺を呈する病態のことである。現在、脊髄損傷の患者は、日本では約10万人、米国では約25万人に及ぶとされており、年間日本では5千人、米国では1万人以上の患者が増加している。近年医療の進歩に伴い受傷後も生存することは十分可能になっているが、それだけに日常生活の不便さや精神的な負担が患者を苦しめる結果ともなり、社会的な問題となっているのが現状である。   Spinal cord injury is a pathological condition that causes paralysis of the peripheral motor, sensory, and autonomic nervous system below the injured part due to injury to the spinal cord parenchyma due to trauma such as a spinal dislocation fracture caused by a traffic accident or falling at a high place. is there. Currently, the number of spinal cord injuries is estimated to be approximately 100,000 in Japan and approximately 250,000 in the United States. The number of patients in Japan is 5,000 and more than 10,000 in the United States each year. With the advancement of medical treatment in recent years, it has become possible to survive even after being injured. However, the inconvenience of daily life and the mental burden are causing social problems, resulting in social problems. It is.

長年にわたって、成体哺乳動物の中枢神経系(脳と脊髄)は一度損傷を受けると再生しないと考えられてきた。中枢神経系が再生し難いのに対し、末梢神経系が容易に再生することは古くから知られており、その違いは、中枢神経系ではオリゴデンドロサイト、ミエリンまたは細胞外基質に軸索伸長抑制因子が存在するのに対して、末梢神経系ではそのような因子が存在しないからであると説明されている。つまり、末梢神経系の軸索環境が新しく伸びてくる軸索に対して全体として許容的(permissive)であるのに対して、中枢神経系では拒絶的(non-permissive)すなわち、軸索の新生が阻害される環境にある。もし、この説明が正しければ、哺乳動物の中枢神経系の再生を促すには拒絶的な環境を許容的に変えることが必要になる。その試みの一つとして、嗅神経鞘細胞の移植が挙げられる(非特許文献1参照)。   For many years, it has been thought that the central nervous system (brain and spinal cord) of an adult mammal does not regenerate once damaged. The central nervous system is difficult to regenerate, but it has long been known that the peripheral nervous system regenerates easily, and the difference is that in the central nervous system, oligodendrocytes, myelin, or extracellular matrix suppresses axonal outgrowth. It is explained that the factor exists, whereas such a factor does not exist in the peripheral nervous system. In other words, the peripheral nervous system axon environment is permissive as a whole for newly growing axons, whereas the central nervous system is non-permissive, ie, axonal neoplasia. Is in an environment where If this explanation is correct, it will be necessary to tolerately alter the rejecting environment to promote regeneration of the mammalian central nervous system. One of the attempts is transplantation of olfactory nerve sheath cells (see Non-Patent Document 1).

嗅神経細胞は、哺乳動物の成体細胞の中で生涯を通じて継続的に再生を続ける特異的な細胞である。Luらは、ラット鼻の嗅粘膜由来の嗅神経鞘細胞を、完全切断したラットの脊髄に移植したところ、運動機能が著しく回復し、脊髄反射の下行性抑制が著しく修復され、それに伴って切断部位を越えて軸索が成長したとの知見を得、ヒトの中枢神経である脊髄損傷の再生治療にも応用できる可能性が示された(非特許文献2参照)。   Olfactory neurons are specific cells that continue to regenerate throughout life in adult mammalian cells. Lu et al. Transplanted olfactory nerve sheath cells derived from the nasal olfactory mucosa of the rat into the spinal cord of a completely dissected rat, which markedly restores motor function and significantly reduces the descending inhibition of the spinal reflex. The knowledge that the axon has grown beyond the site has been obtained, and the possibility of application to regeneration treatment of spinal cord injury, which is the central nervous system of humans, has been shown (see Non-Patent Document 2).

嗅粘膜は成人においても採取可能であるため、自家移植できるという点でその期待は急速に高まり、臨床治験が行われている。例えば、ポルトガルでは、カルロス・リマらが脊髄損傷患者に嗅粘膜を自家移植して治療効果があったと報告している(非特許文献3参照)。また自家移植ではないが、中国では、黄らが中心となって、2002年より脊髄損傷患者に対するヒト胎児由来嗅神経鞘細胞移植の臨床治験が行われ、一部患者では改善が得られたと報告している(非特許文献4参照)。   Since the olfactory mucosa can be collected even in adults, the expectation has rapidly increased in that it can be autotransplanted, and clinical trials are being conducted. For example, in Portugal, Carlos Lima et al. Reported that autologous transplantation of the olfactory mucosa to spinal cord injury patients had a therapeutic effect (see Non-Patent Document 3). Although it is not autotransplantation, in China, led by Huang et al., Clinical trials of human fetal olfactory nerve sheath cell transplantation for patients with spinal cord injury have been conducted since 2002, and some patients reported improvements. (See Non-Patent Document 4).

このように、嗅神経鞘細胞や嗅粘膜を損傷部位に移植することにより、中枢神経損傷の一つである脊髄損傷を治療する方法は、一定の成果を上げてはいるが、依然としてその効果は限定的であり、さらなる機能回復を獲得するためには、該治療方法を改良することが必要である。   As described above, the method of treating spinal cord injury, which is one of the central nerve injuries, by transplanting olfactory sheath cells and olfactory mucosa to the damaged site has achieved certain results, but the effect is still In order to obtain limited and further functional recovery, it is necessary to improve the method of treatment.

損傷を受けた脊髄内の軸索が再生しない別な原因の一つは、損傷部位のグリア瘢痕に蓄積するコンドロイチン硫酸プロテオグリカン類(CSPG)や、ミエリン膜上のNogoタンパクなどが軸索伸長の阻害活性を有することであると考えられている。したがって、これら阻害物質の作用を抑制すれば脊髄の軸索再生を促進できる可能性がある。   Another reason why axons in damaged spinal cord do not regenerate is that chondroitin sulfate proteoglycans (CSPG) that accumulate in glial scars at the site of injury and Nogo protein on myelin membrane inhibit axonal elongation It is believed to have activity. Therefore, if the action of these inhibitors is suppressed, spinal cord axonal regeneration may be promoted.

CSPGや、ミエリン膜上のNogoタンパクなどの阻害物質の作用を抑制する因子となり得る有望なターゲットの一つとして、低分子量GTP結合タンパク質Rhoからのシグナルの大部分を媒介する情報伝達分子であるRhoキナーゼを阻害する物質が考えられている(非特許文献5参照)。   Rho, which is a signaling molecule that mediates most of the signal from the low molecular weight GTP-binding protein Rho, is one of the promising targets that can suppress the action of inhibitors such as CSPG and Nogo protein on the myelin membrane. Substances that inhibit kinases have been considered (see Non-Patent Document 5).

そうした背景があり、Rhoキナーゼ阻害剤を脊髄の軸索再生に適用する試みが、様々検討されてきた。例えば、Derghamらは、マウス胸髄背側部の損傷時にRhoキナーゼ阻害剤であるY27632((R)−(+)−トランス−N−(4−ピリジル)−4−(1−アミノエチル)シクロヘキサンカルボキサミド)を損傷部位に適用すると、皮質脊髄路の軸索の再生を促進すること、および該阻害剤がBBBスコアを指標とした運動機能の回復も促進することを示した(非特許文献6参照)。   With this background, various attempts have been made to apply Rho kinase inhibitors to spinal cord axonal regeneration. For example, Dergham et al. Described Y27632 ((R)-(+)-trans-N- (4-pyridyl) -4- (1-aminoethyl) cyclohexane, a Rho kinase inhibitor, upon injury of the dorsal region of the mouse thoracic spinal cord. When carboxamide) was applied to the injured site, it was shown that the axon regeneration of the corticospinal tract was promoted, and that the inhibitor also promoted the recovery of motor function using the BBB score as an index (see Non-Patent Document 6). ).

Rhoキナーゼ阻害剤としては、これまでに様々な物質が知られており、このような化合物としては、例えば、ROKα(ROCK−II)、p160ROCK(ROKβ、ROCK−I)およびその他のセリン/スレオニンキナーゼ活性を有するタンパク質を阻害する化合物が挙げられる。その具体例としては、ヘキサヒドロ−1−(5−イソキノリンスルホニル)−1H−1,4−ジアゼピン(特許文献1および2参照)、(R)−トランス−N−(ピリジン−4−イル)−4−(1−アミノエチル)シクロヘキサンカルボキサミド、(R)−(+)−N−(1H−ピロロ[2,3−b]ピリジン−4−イル)−4−(1−アミノエチル)ベンズアミド等のRhoキナーゼ阻害剤(特許文献2または3参照)、1−(5−イソキノリンスルホニル)ホモピペラジン、1−(5−イソキノリンスルホニル)−2−メチルピペラジン等のRhoキナーゼ阻害剤(特許文献4または非特許文献7参照)、(1−ベンジルピロリジン−3−イル)−(1H−インダゾール−5−イル)アミン等のRhoキナーゼ阻害剤(特許文献5参照)、(1−ベンジルピペリジン−4−イル)−(1H−インダゾール−5−イル)アミン等のRhoキナーゼ阻害剤(特許文献6参照)、N−[2−(4−フルオロフェニル)−6,7−ジメトキシ−4−キナゾリニル]−N−(1H−インダゾール−5−イル)アミン等のRhoキナーゼ阻害剤(特許文献7参照)、N−4−(1H−インダゾール−5−イル)−6,7−ジメトキシ−N−2−ピリジン−4−イル−キナゾリン−2,4−ジアミン等のRhoキナーゼ阻害剤(特許文献8参照)、および4−メチル−5−(2−メチル−[1,4]ジアゼパン−1−スルホニル)イソキノリン等のRhoキナーゼ阻害剤(特許文献9参照)などが知られている。   Various substances have been known as Rho kinase inhibitors, and examples of such compounds include ROKα (ROCK-II), p160ROCK (ROKβ, ROCK-I) and other serine / threonine kinases. Examples thereof include compounds that inhibit a protein having activity. Specific examples thereof include hexahydro-1- (5-isoquinolinesulfonyl) -1H-1,4-diazepine (see Patent Documents 1 and 2), (R) -trans-N- (pyridin-4-yl) -4. Rho such as-(1-aminoethyl) cyclohexanecarboxamide, (R)-(+)-N- (1H-pyrrolo [2,3-b] pyridin-4-yl) -4- (1-aminoethyl) benzamide Rho kinase inhibitors such as kinase inhibitors (see Patent Document 2 or 3), 1- (5-isoquinolinesulfonyl) homopiperazine, 1- (5-isoquinolinesulfonyl) -2-methylpiperazine (Patent Document 4 or non-patent documents) 7), Rho kinase inhibitors such as (1-benzylpyrrolidin-3-yl)-(1H-indazol-5-yl) amine (see Patent Document 5) Rho kinase inhibitors such as (1-benzylpiperidin-4-yl)-(1H-indazol-5-yl) amine (see Patent Document 6), N- [2- (4-fluorophenyl) -6,7- Rho kinase inhibitors such as dimethoxy-4-quinazolinyl] -N- (1H-indazol-5-yl) amine (see Patent Document 7), N-4- (1H-indazol-5-yl) -6,7- Rho kinase inhibitors such as dimethoxy-N-2-pyridin-4-yl-quinazoline-2,4-diamine (see Patent Document 8), and 4-methyl-5- (2-methyl- [1,4] diazepane Rho kinase inhibitors (see Patent Document 9) such as -1-sulfonyl) isoquinoline are known.

しかしながら、脊髄損傷などの中枢神経損傷に対する中枢神経再生治療に際して、嗅神経鞘細胞または該細胞を含む粘膜組織の移植とRhoキナーゼ阻害剤の投与を組み合わせて行うことを特徴とする中枢神経の再建に関しての報告は、未だかつてない。
特開昭61−227581号公報 特開平11−349482号公報 国際公開第98/06433号パンフレット 国際公開第00/09162号パンフレット 国際公開第97/23222号パンフレット 国際公開第01/56988号パンフレット 国際公開第02/100833号パンフレット 国際公開第02/076976号パンフレット 国際公開第02/076977号パンフレット 国際公開第99/64011号パンフレット 川口、実験医学、第20巻、第5号(増刊)、796−803頁、2002年 Lu et al.,Brain,125,14−21(2002) Laurance Johnston et al.,”OLFACTORY−TISSUE TRANSPLANTATION FOR SCI: PORTUGAL CLINICAL TRIALS”,[online],2003年,[平成18年2月15日検索],インターネット<URL: http://www.healingtherapies.info/OlfactoryTissue2.htm> 岩波ら、PTジャーナル、第39巻、第6号、539−546頁、2005年 香月、日本薬理学雑誌、第120巻、第4号、260頁、2002年 Dergham P.,et al.,J. Neurosci.,22,6570−6577(2002) Uehata,M.,et al.,Nature,389,990−994(1997)
However, regarding central nerve regeneration treatment for central nerve damage such as spinal cord injury, the reconstruction of the central nerve is characterized by combining transplantation of olfactory nerve sheath cells or mucosal tissue containing the cells and administration of a Rho kinase inhibitor. Has never been reported before.
JP 61-227581 A JP 11-349482 A International Publication No. 98/06433 Pamphlet International Publication No. 00/09162 International Publication No. 97/23222 Pamphlet International Publication No. 01/569888 Pamphlet International Publication No. 02/100833 Pamphlet International Publication No. 02/076976 Pamphlet International Publication No. 02/076797 Pamphlet International Publication No. 99/64011 Pamphlet Kawaguchi, Experimental Medicine, Vol. 20, No. 5 (extra number), 796-803, 2002 Lu et al. , Brain, 125, 14-21 (2002) Laurance Johnston et al. "OLFACTORY-TISSUE TRANSPLANTATION FOR SCI: PORTUGAL CLINICAL TRIALS", [online], 2003, [February 15, 2006 search], Internet <URL: http: // www. healingtherapies. info / OlfactoryTissue2. htm> Iwanami et al., PT Journal, Vol. 39, No. 6, pp. 539-546, 2005 Katsuki, Pharmacological Journal of Japan, Vol. 120, No. 4, pp. 260, 2002 Dergham P.M. , Et al. , J .; Neurosci. , 22, 6570-6577 (2002) Uehata, M .; , Et al. , Nature, 389, 990-994 (1997).

本発明の目的は、中枢神経損傷(例えば、脊髄損傷)の損傷部位に嗅神経鞘細胞または該細胞を含む粘膜組織を移植することにより中枢神経を再建する再生治療を行うに際して、その再生治療の効果を増強させる薬剤を提供するものである。また本発明の他の目的は、前記薬剤を用いて前記再生治療の効果を増強する方法を提供するものである。   An object of the present invention is to perform regenerative treatment for reconstructing the central nerve by transplanting olfactory sheath cells or mucosal tissue containing the cells to the damaged site of central nerve injury (for example, spinal cord injury). It provides a drug that enhances the effect. Another object of the present invention is to provide a method for enhancing the effect of the regenerative treatment using the drug.

本発明者らは、前記課題を解決すべく種々検討を重ねた結果、中枢神経損傷(例えば、脊髄損傷)に対して嗅神経鞘細胞または該細胞を含む粘膜組織を損傷部位に移植して中枢神経を再建する再生治療を行うに際し、当該患者にRhoキナーゼ阻害剤を投与することにより、その再生治療効果を顕著に増強させ得ることを見出し、さらに検討を重ねて本発明を完成するに至った。   As a result of various studies to solve the above-mentioned problems, the present inventors have transplanted olfactory sheath cells or mucosal tissues containing the cells to the damaged site for central nerve damage (for example, spinal cord injury). When performing regenerative treatment to reconstruct nerves, it was found that the regenerative treatment effect can be remarkably enhanced by administering a Rho kinase inhibitor to the patient, and the present invention was completed through further studies. .

すなわち、本発明は、
[1]中枢神経損傷患者に嗅神経鞘細胞または該細胞を含む粘膜組織を移植して中枢神経を再建する再生治療における効果増強剤であって、Rhoキナーゼ阻害剤を有効成分とすることを特徴とする効果増強剤、
[2]中枢神経損傷が、脊髄損傷、外傷性脳損傷、脳血管障害に基づく脳損傷、または脳手術後の脳損傷である上記[1]に記載の効果増強剤、
[3]中枢神経損傷が脊髄損傷であることを特徴とする上記[2]に記載の効果増強剤、
[4]注射剤の剤形である上記[1]〜[3]のいずれかに記載の効果増強剤、
[5]点滴静注するための上記[4]に記載の効果増強剤、
[6]嗅神経鞘細胞を含む粘膜組織が嗅粘膜である上記[1]〜[5]のいずれかに記載の効果増強剤、
[7]嗅粘膜が自家嗅粘膜である上記[1]〜[6]のいずれかに記載の効果増強剤、
[8]Rhoキナーゼ阻害剤が塩酸ファスジル水和物であることを特徴とする上記[1]〜[7]のいずれかに記載の効果増強剤、
[9]中枢神経損傷患者に嗅神経鞘細胞または該細胞を含む粘膜組織を移植して中枢神経を再建する再生治療に際し、前記患者にRhoキナーゼ阻害剤を投与することを特徴とする中枢神経再生治療の効果増強法、および
[10]中枢神経損傷患者に嗅神経鞘細胞または該細胞を含む粘膜組織を移植して中枢神経を再建する再生治療における効果増強剤を製造するためのRhoキナーゼ阻害剤の使用
に関する。
That is, the present invention
[1] An effect-enhancing agent in regenerative treatment for reconstructing the central nerve by transplanting olfactory sheath cells or mucosal tissue containing the cells to a patient with central nerve injury, comprising a Rho kinase inhibitor as an active ingredient An effect enhancer,
[2] The effect enhancer according to the above [1], wherein the central nerve injury is spinal cord injury, traumatic brain injury, brain injury based on cerebrovascular disorder, or brain injury after brain surgery,
[3] The effect enhancer according to the above [2], wherein the central nerve injury is spinal cord injury,
[4] The effect enhancer according to any one of the above [1] to [3], which is a dosage form of an injection,
[5] The effect enhancer according to [4] above for intravenous infusion,
[6] The effect enhancer according to any one of [1] to [5] above, wherein the mucosal tissue containing olfactory sheath cells is the olfactory mucosa,
[7] The effect enhancer according to any one of the above [1] to [6], wherein the olfactory mucosa is an autologous olfactory mucosa,
[8] The effect enhancer according to any one of [1] to [7] above, wherein the Rho kinase inhibitor is fasudil hydrochloride hydrate,
[9] A central nerve regeneration characterized in that a Rho kinase inhibitor is administered to a patient during regenerative treatment in which a central nerve is reconstructed by transplanting an olfactory sheath cell or a mucosal tissue containing the cell to a patient with central nerve injury. [10] Rho kinase inhibitor for producing an effect enhancer for regenerative treatment in which olfactory sheath cells or mucosal tissues containing the cells are transplanted into a patient with central nerve injury to reconstruct the central nerve About the use of.

中枢神経損傷(例えば、脊髄損傷)患者に嗅神経鞘細胞または該細胞を含む粘膜組織を移植して中枢神経を再建する再生治療に際し、当該患者にRhoキナーゼ阻害剤を投与することによって、再生治療の効果を顕著に増強することができる。   Regenerative treatment is performed by administering a Rho kinase inhibitor to a patient during regenerative treatment in which a central nerve is reconstructed by transplanting an olfactory nerve sheath cell or a mucosal tissue containing the cell to a patient with central nerve injury (for example, spinal cord injury). The effect of can be remarkably enhanced.

本発明の効果増強剤は、中枢神経損傷患者に嗅神経鞘細胞または該細胞を含む粘膜組織を移植して脊髄を再建する再生治療における効果増強剤であって、Rhoキナーゼ阻害剤を有効成分とすることを特徴とする。   The effect-enhancing agent of the present invention is an effect-enhancing agent in regenerative treatment for reconstructing the spinal cord by transplanting olfactory sheath cells or mucosal tissue containing the cells into a patient with central nerve injury, and comprising a Rho kinase inhibitor as an active ingredient It is characterized by doing.

本発明でいう「中枢神経損傷」とは、脳および脊髄からなる中枢神経に損傷を受けることによる疾患をいい、例えば、脊髄損傷、外傷性脳損傷、脳血管障害(例えば、脳出血、脳梗塞など)に基づく脳損傷、脳手術後の脳損傷などが挙げられる。   The “central nerve injury” as used in the present invention refers to a disease caused by damage to the central nerve composed of the brain and spinal cord. For example, spinal cord injury, traumatic brain injury, cerebrovascular disorder (eg cerebral hemorrhage, cerebral infarction, etc.) ) Based brain injury, brain injury after brain surgery, and the like.

本発明でいう「嗅神経鞘細胞」とは、嗅神経細胞の軸索の周りを取り囲む細胞である。ヒトにおける嗅神経鞘細胞の位置を図1に示す。   As used herein, “olfactory nerve sheath cell” refers to a cell that surrounds the axon of an olfactory nerve cell. The position of olfactory nerve sheath cells in humans is shown in FIG.

本発明でいう「該細胞を含む粘膜組織」とは、具体的には「嗅粘膜」が好適に挙げられる。   Specific examples of the “mucosal tissue containing the cells” in the present invention include “olfactory mucosa”.

本発明でいう「嗅粘膜」は、主嗅覚器として鼻腔内の鼻中隔上部と左右の上部鼻甲介上部に囲まれた部位にあり、例えばヒトにおいては左右各々約2cm程度の面積を持つものである。嗅粘膜は、嗅上皮および嗅粘膜固有層から構成され、嗅神経鞘細胞は、主に嗅粘膜固有層に存在する。 Referred to in the present invention "olfactory mucosa" is in part surrounded by the upper nasal turbinate top of left and right nasal隔上portion of the nasal cavity as a main olfactory, for example in humans those having an area of about the right and left each about 2 cm 2 is there. The olfactory mucosa is composed of the olfactory epithelium and the olfactory mucosa lamina, and olfactory nerve sheath cells are mainly present in the olfactory mucosa lamina.

本発明に係る再生治療を実施するに際して、まず、「嗅神経鞘細胞または該細胞を含む粘膜組織」を調製する。
嗅神経鞘細胞を含む粘膜組織の調製は、哺乳動物の鼻に存在する「嗅粘膜」を含む粘膜組織を摘出することで行われ、好ましくは嗅粘膜、さらに好ましくは嗅粘膜固有層を摘出することで行われる。ヒトにおける該摘出箇所は、図2に示す部位が好ましいが、嗅粘膜が主体となっておれば、呼吸粘膜(嗅神経鞘細胞を含まない)が混在していてもよい。摘出された嗅粘膜は、必要に応じて細断するなどして脊髄損傷部位に移植しやすい形態にすることができる。
In carrying out the regenerative treatment according to the present invention, first, “olfactory nerve sheath cells or mucosal tissues containing the cells” are prepared.
Preparation of mucosal tissue containing olfactory nerve sheath cells is performed by removing mucosal tissue containing "olfactory mucosa" present in the nose of mammals, preferably removing the olfactory mucosa, more preferably the olfactory mucosa lamina propria Is done. The site shown in FIG. 2 is preferable as the excision site in humans, but if the olfactory mucosa is the main component, respiratory mucosa (not including olfactory nerve sheath cells) may be mixed. The excised olfactory mucosa can be made into a form that can be easily transplanted to a spinal cord injury site by chopping as necessary.

また、嗅粘膜由来の嗅神経鞘細胞を培養し、単離して用いることもでき、そのための培養・単離方法は、自体公知の方法で行うことができる。例えば、摘出した嗅神経鞘細胞を含む粘膜組織を、10%ウシ胎仔血清を加えたダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)で3〜4日間培養し、その後DMEM無血清培地で2〜3週間培養し、後者の培地を週2回投入して培養してからトリプシン−EDTAを用いることによって、嗅神経鞘細胞を単離してもよい。さらに、この単離した嗅神経鞘細胞を適当な培地(例えば、DMEM、血清添加DMEMなど)に懸濁して使用することもできる。   In addition, olfactory nerve sheath cells derived from the olfactory mucosa can be cultured and isolated for use, and the culture and isolation method therefor can be carried out by a method known per se. For example, the mucosal tissue containing the extracted olfactory nerve sheath cells is cultured in Dulbecco's modified Eagle medium (DMEM) supplemented with 10% fetal calf serum for 3 to 4 days, and then cultured in DMEM serum-free medium for 2 to 3 weeks. The olfactory nerve sheath cells may be isolated by using trypsin-EDTA after the latter medium is added twice a week and cultured. Further, the isolated olfactory nerve sheath cells can be suspended in an appropriate medium (for example, DMEM, serum-added DMEM, etc.) and used.

嗅神経鞘細胞および該細胞を含む粘膜組織のソースとしては、ヒト成体(自家移植または他家移植)、ヒト胎児(同種移植)、ヒト死体(同種移植)およびブタなど他の哺乳動物(異種移植)などが挙げられるが、ドナーの問題、移植後に起こり得る免疫拒絶反応の問題、倫理の問題などを考慮すると、移植を受けるヒト成体(自家移植)が好ましい。   Olfactory nerve sheath cells and the source of mucosal tissue containing the cells include adult humans (autologous or allogeneic transplantation), human fetuses (allografts), human cadaver (allografts), and other mammals such as pigs (xenotransplantation) In consideration of donor problems, problems of immune rejection that can occur after transplantation, ethical problems, and the like, human adults who undergo transplantation (autologous transplantation) are preferable.

嗅神経鞘細胞および該細胞を含む粘膜組織の移植は中枢神経損傷部位で行われる。移植は、様々な方法で行うことができるが、中枢神経損傷が脊髄損傷である場合、例えば次のようにして行うことができる。
患者を全身麻酔下で、正中切開を行い、適切なレベルで筋肉を骨膜下に剥離する。硬膜開口中、筋肉、骨、硬膜外腔を慎重に扱う。病変部全体にわたる範囲で椎弓切除を行う。外科的処置による脊髄変形を避けるため、かつ嗅神経鞘細胞移植後に構造的な再生が可能になるように、椎弓の全体を切除する。培養した嗅神経鞘細胞の懸濁液を、脊髄の病変部における頭側部と尾側部に隣接した部位に注入するか、嗅神経鞘細胞を含む粘膜組織を切除部位の空隙に充填することによって移植する。
Transplantation of olfactory nerve sheath cells and mucosal tissues containing the cells is performed at the site of central nerve injury. The transplantation can be performed by various methods. When the central nerve injury is a spinal cord injury, for example, it can be performed as follows.
Under general anesthesia, the patient is made a midline incision and the muscles are removed under the periosteum at an appropriate level. Carefully handle muscles, bones, and epidural space during dural opening. A laminectomy is performed over the entire lesion. The entire vertebral arch is excised to avoid spinal deformity due to surgical procedures and to allow structural regeneration after olfactory nerve sheath cell transplantation. Inject the cultured suspension of olfactory sheath cells into the site adjacent to the cranial and caudal side of the spinal cord lesion, or fill the void in the excision site with mucosal tissue containing olfactory sheath cells Transplant by.

また、中枢神経損傷が脳損傷である場合、例えば次のようにして行われる。
患者に対して全身麻酔下、開頭術を施行し、患部を開いて嗅粘膜鞘細胞または該細胞を含む粘膜組織(例えば、嗅粘膜)を移植する。脳梗塞などでは患部周辺に定位的に嗅粘膜鞘細胞を注入してもよい。また、脳梗塞急性期などでは経血管的に嗅粘膜鞘細胞を患部に投与してもよい。さらに、脳損傷慢性期においては、すでに形成されたグリア瘢痕組織を除去した後に移植を行ってもよく、または患部周辺に嗅粘膜鞘細胞を注入してもよい。
When the central nerve damage is brain damage, for example, it is performed as follows.
The patient is subjected to craniotomy under general anesthesia, and the affected part is opened to transplant olfactory mucosal sheath cells or mucosal tissue containing the cells (for example, olfactory mucosa). In cerebral infarction or the like, olfactory mucosal sheath cells may be injected stereotactically around the affected area. In the acute phase of cerebral infarction, olfactory mucosal sheath cells may be administered transvascularly to the affected area. Furthermore, in the chronic stage of brain injury, transplantation may be performed after removing already formed glial scar tissue, or olfactory mucosal sheath cells may be injected around the affected area.

また移植時期としては、患者の状態などに応じて、中枢神経損傷後直ちに行ってもよいし、または1〜数週間後に行ってもよい。さらに慢性期移植では、損傷後数ヶ月から数年経過している場合も対象になり、場合によってはリハビリテーション等で回復が望めなくなった患者に対して行ってもよい。   Further, the transplantation time may be performed immediately after the central nerve injury or may be performed one to several weeks later depending on the condition of the patient. Furthermore, chronic phase transplantation is also applicable to cases where months to years have passed since injury, and in some cases, it may be performed on patients who are unable to recover due to rehabilitation or the like.

本発明では、上記移植治療の効果を増強するために、下記するRhoキナーゼ阻害剤を用いる。   In the present invention, the following Rho kinase inhibitor is used to enhance the effect of the transplantation treatment.

本発明でいう「Rhoキナーゼ阻害剤」は、Rhoキナーゼの活性を阻害する物質である。Rhoキナーゼは、GTP(グアノシン三リン酸)の分解酵素であるGTPアーゼの範疇に含まれる低分子量GTP結合タンパク質(低分子量Gタンパク質)の1種である。Rhoキナーゼは、アミノ酸末端にセリン/スレオニンキナーゼ領域、中央部にコイルドコイル領域およびカルボキシ末端にRho相互作用領域を有する(Amano et al.,Exp.Cell.Res.,261,44−51(2000))。   The “Rho kinase inhibitor” referred to in the present invention is a substance that inhibits the activity of Rho kinase. Rho kinase is a kind of low molecular weight GTP-binding protein (low molecular weight G protein) included in the category of GTPase which is a degrading enzyme of GTP (guanosine triphosphate). Rho kinase has a serine / threonine kinase region at the amino acid terminus, a coiled-coil region at the center, and a Rho interaction region at the carboxy terminus (Amano et al., Exp. Cell. Res., 261, 44-51 (2000)). .

本発明の有効成分であるRhoキナーゼ阻害剤としては、前記特許文献1〜9に記載の化合物が挙げられ、具体的には、例えばヘキサヒドロ−1−(5−イソキノリンスルホニル)−1H−1,4−ジアゼピン、(R)−トランス−N−(ピリジン−4−イル)−4−(1−アミノエチル)シクロヘキサンカルボキサミド、(R)−(+)−N−(1H−ピロロ[2,3−b]ピリジン−4−イル)−4−(1−アミノエチル)ベンズアミド、1−(5−イソキノリンスルホニル)ホモピペラジン、1−(5−イソキノリンスルホニル)−2−メチルピペラジン、(1−ベンジルピロリジン−3−イル)−(1H−インダゾール−5−イル)アミン、(1−ベンジルピペリジン−4−イル)−(1H−インダゾール−5−イル)アミン、N−[2−(4−フルオロフェニル)−6,7−ジメトキシ−4−キナゾリニル]−N−(1H−インダゾール−5−イル)アミン、N−4−(1H−インダゾール−5−イル)−6,7−ジメトキシ−N−2−ピリジン−4−イル−キナゾリン−2,4−ジアミン、および4−メチル−5−(2−メチル−[1,4]ジアゼパン−1−スルホニル)イソキノリンなど、または上記各化合物の薬学的に許容される塩が挙げられる。本発明においては、上記各化合物またはその薬学的に許容される塩は、含水物、水和物及び溶媒和物も包含される。   Examples of the Rho kinase inhibitor that is an active ingredient of the present invention include the compounds described in Patent Documents 1 to 9, specifically, for example, hexahydro-1- (5-isoquinolinesulfonyl) -1H-1,4. -Diazepine, (R) -trans-N- (pyridin-4-yl) -4- (1-aminoethyl) cyclohexanecarboxamide, (R)-(+)-N- (1H-pyrrolo [2,3-b ] Pyridin-4-yl) -4- (1-aminoethyl) benzamide, 1- (5-isoquinolinesulfonyl) homopiperazine, 1- (5-isoquinolinesulfonyl) -2-methylpiperazine, (1-benzylpyrrolidine-3 -Yl)-(1H-indazol-5-yl) amine, (1-benzylpiperidin-4-yl)-(1H-indazol-5-yl) amine, N- [ 2- (4-Fluorophenyl) -6,7-dimethoxy-4-quinazolinyl] -N- (1H-indazol-5-yl) amine, N-4- (1H-indazol-5-yl) -6,7 -Dimethoxy-N-2-pyridin-4-yl-quinazoline-2,4-diamine, 4-methyl-5- (2-methyl- [1,4] diazepan-1-sulfonyl) isoquinoline, etc., or each of the above Pharmaceutically acceptable salts of the compounds are mentioned. In the present invention, each of the above-mentioned compounds or pharmaceutically acceptable salts thereof includes hydrates, hydrates and solvates.

Rhoキナーゼ阻害剤の薬学的に許容される塩としては、例えば、無機酸(例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸)との塩、あるいは有機酸(例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、蓚酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸)との塩などが挙げられる。   Examples of pharmaceutically acceptable salts of Rho kinase inhibitors include salts with inorganic acids (eg, hydrochloric acid, phosphoric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid), or organic acids (eg, acetic acid, formic acid, propionic acid). , Fumaric acid, maleic acid, succinic acid, tartaric acid, citric acid, malic acid, succinic acid, benzoic acid, methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid) and the like.

本発明においては、上記各化合物のうち、ヘキサヒドロ−1−(5−イソキノリンスルホニル)−1H−1,4−ジアゼピンまたはその薬学的に許容できる塩が好ましく、ヘキサヒドロ−1−(5−イソキノリンスルホニル)−1H−1,4−ジアゼピン塩酸塩(塩酸ファスジル)がさらに好ましく、塩酸ファスジル1/2水和物が特に好ましい。   In the present invention, among the above compounds, hexahydro-1- (5-isoquinolinesulfonyl) -1H-1,4-diazepine or a pharmaceutically acceptable salt thereof is preferable, and hexahydro-1- (5-isoquinolinesulfonyl) is preferable. -1H-1,4-diazepine hydrochloride (fasudil hydrochloride) is more preferred, and fasudil hydrochloride hemihydrate is particularly preferred.

本発明の効果増強剤は、種々の製剤形態、例えば液剤、固形剤、半固形剤などをとり得るが、一般的にはRhoキナーゼ阻害剤のみ、またはそれと薬学的に許容される担体と共に注射剤、噴霧剤、徐放性製剤(例えば、多孔性スポンジ、デポ剤など)、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤などの製剤として、経口または非経口に適した剤形とされる。   The effect-enhancing agent of the present invention can take various preparation forms such as liquids, solids, semi-solids, etc., but generally an injection with a Rho kinase inhibitor alone or with a pharmaceutically acceptable carrier. , Sprays, sustained-release preparations (for example, porous sponges, depots, etc.), tablets, pills, powders, granules, capsules, etc.

上記担体としては、製剤素材として慣用の各種有機あるいは無機担体物質が用いられ、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤、pH調整剤等として配合される。また必要に応じて、保存剤、抗酸化剤、甘味剤等の製剤添加物を用いることもできる。上記賦形剤の好適な例としては、例えば乳糖、白糖、D−マンニトール、デンプン、結晶セルロース、軽質無水ケイ酸等が挙げられる。上記滑沢剤の好適な例としては、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、コロイドシリカ等が挙げられる。上記結合剤の好適な例としては、例えば結晶セルロース、白糖、D−マンニトール、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等の高分子化合物等が挙げられる。上記崩壊剤の好適な例としては、例えばデンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム等が挙げられる。上記溶剤の好適な例としては、例えば注射用水、アルコール(エタノールなど)、ポリアルコール(プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど)、マクロゴール、ゴマ油、大豆油、トウモロコシ油、プロピレングリコール脂肪酸エステル等が挙げられる。上記溶解補助剤の好適な例としては、例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコール、D−マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。上記懸濁化剤の好適な例としては、例えばステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリン等の界面活性剤;例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース等が挙げられる。上記等張化剤の好適な例としては、例えば塩化ナトリウム、グリセリン、D−マンニトール等が挙げられる。上記緩衝剤の好適な例としては、例えばリン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩、ホウ酸塩、グルタミン酸塩、イプシロンアミノカプロン酸塩、トリス緩衝液等の緩衝液等が挙げられる。無痛化剤の好適な例としては、例えばベンジルアルコール等が挙げられる。上記pH調整剤の好適な例としては、例えば塩酸、水酸化ナトリウム、リン酸、酢酸等が挙げられる。上記保存剤の好適な例としては、例えばパラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸等が挙げられる。上記抗酸化剤の好適な例としては、例えば亜硫酸塩、アスコルビン酸等が挙げられる。上記甘味料の好適な例としては、例えばアスパルテーム、サッカリンナトリウム、ステビア等が挙げられる。   As the carrier, various organic or inorganic carrier substances commonly used as pharmaceutical materials are used, and excipients, lubricants, binders, disintegrants, solvents, solubilizers, suspending agents, isotonic agents, It is blended as a buffer, a soothing agent, a pH adjuster and the like. If necessary, formulation additives such as preservatives, antioxidants, sweeteners and the like can also be used. Preferable examples of the excipient include lactose, sucrose, D-mannitol, starch, crystalline cellulose, light anhydrous silicic acid and the like. Preferable examples of the lubricant include magnesium stearate, calcium stearate, talc, colloidal silica and the like. Preferable examples of the binder include polymer compounds such as crystalline cellulose, sucrose, D-mannitol, dextrin, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, and polyvinylpyrrolidone. Preferable examples of the disintegrant include starch, carboxymethyl cellulose, carboxymethyl cellulose calcium, croscarmellose sodium, carboxymethyl starch sodium and the like. Preferable examples of the solvent include water for injection, alcohol (such as ethanol), polyalcohol (such as propylene glycol and polyethylene glycol), macrogol, sesame oil, soybean oil, corn oil, and propylene glycol fatty acid ester. Preferable examples of the solubilizer include polyethylene glycol, propylene glycol, D-mannitol, benzyl benzoate, ethanol, trisaminomethane, cholesterol, triethanolamine, sodium carbonate, sodium citrate and the like. Suitable examples of the suspending agent include surfactants such as stearyltriethanolamine, sodium lauryl sulfate, laurylaminopropionic acid, lecithin, benzalkonium chloride, benzethonium chloride, and glyceryl monostearate; , Polyvinylpyrrolidone, sodium carboxymethylcellulose, methylcellulose, hydroxymethylcellulose and the like. Preferable examples of the isotonic agent include sodium chloride, glycerin, D-mannitol and the like. Preferable examples of the buffer include phosphates, acetates, carbonates, citrates, borates, glutamates, epsilon aminocaproate, buffers such as Tris buffer, and the like. Preferable examples of the soothing agent include benzyl alcohol. Preferable examples of the pH adjuster include hydrochloric acid, sodium hydroxide, phosphoric acid, acetic acid and the like. Preferable examples of the preservative include paraoxybenzoic acid esters, chlorobutanol, benzyl alcohol, phenethyl alcohol, dehydroacetic acid, sorbic acid and the like. Preferable examples of the antioxidant include sulfite and ascorbic acid. Preferable examples of the sweetener include aspartame, saccharin sodium, stevia and the like.

上記注射剤は、水性注射剤または油性注射剤のいずれでもよい。水性注射剤とする場合、公知の方法に従って、例えば、水性溶媒(注射用水、精製水など)に、薬学上許容される添加剤、例えば上記した等張化剤、緩衝剤、保存剤、増粘剤、安定化剤、pH調整剤などを適宜添加した溶液に、Rhoキナーゼ阻害剤を溶解することにより調製することができる。溶解後、その溶液をフィルターなどで濾過して滅菌し、次いで無菌的な容器に充填してもよく、また適当な上記溶解補助剤などを使用してもよい。また、油性注射剤とする場合、油性溶媒としては、例えば、ゴマ油、トウモロコシ油または大豆油などが用いられる。適当な上記溶解補助剤などを使用してもよい。調製された注射剤は、通常、適当なアンプルまたはバイアルなどに充填される。   The injection may be either an aqueous injection or an oily injection. In the case of an aqueous injection, according to a known method, for example, an aqueous solvent (water for injection, purified water, etc.), a pharmaceutically acceptable additive, for example, an isotonic agent, buffer, preservative, thickening agent as described above. It can be prepared by dissolving a Rho kinase inhibitor in a solution to which an agent, a stabilizer, a pH adjuster and the like are appropriately added. After dissolution, the solution may be sterilized by filtration with a filter or the like, and then filled into an aseptic container, or an appropriate solubilizing agent may be used. Moreover, when it is set as an oil-based injection, sesame oil, corn oil, soybean oil etc. are used as an oil-based solvent, for example. A suitable solubilizing agent may be used. The prepared injection is usually filled in an appropriate ampoule or vial.

噴霧剤も製剤上の常套手段によって調製することができる。噴霧剤として製造する場合、その添加剤としては、一般に吸入用製剤に使用される添加剤であればいずれのものであってもよく、例えば、噴霧剤の他、上記した溶剤、保存剤、安定化剤、等張化剤、pH調整剤などが用いられる。噴霧剤としては、液化ガス噴霧剤または圧縮ガスなどが用いられる。液化ガス噴霧剤としては、例えば、フッ化炭化水素(HCFC22、HCFC−123、HCFC−134a、HCFC142などの代替フロン類など)、液化石油、ジメチルエーテルなどが挙げられる。圧縮ガスとしては、例えば、可溶性ガス(炭酸ガス、亜酸化窒素ガスなど)または不溶性ガス(窒素ガスなど)などが挙げられる。   Propellants can also be prepared by routine pharmaceutical methods. When manufactured as a spray, the additive may be any additive as long as it is generally used in inhalation preparations. For example, in addition to a spray, the above-mentioned solvents, preservatives, An agent, an isotonic agent, a pH adjuster and the like are used. As the propellant, a liquefied gas propellant or a compressed gas is used. Examples of the liquefied gas propellant include fluorinated hydrocarbons (alternative chlorofluorocarbons such as HCFC22, HCFC-123, HCFC-134a, and HCFC142), liquefied petroleum, dimethyl ether, and the like. Examples of the compressed gas include soluble gas (such as carbon dioxide gas and nitrous oxide gas) or insoluble gas (such as nitrogen gas).

また、本発明の効果増強剤は、生体分解性高分子を用いて、徐放性製剤(例えば、多孔性スポンジ、デポ剤など)とすることもできる。該徐放性製剤は公知の方法に従って製造することができる。前記徐放性製剤に使用される生体内分解性高分子は、公知の生体内分解性高分子のなかから適宜選択できるが、例えばデンプン、デキストランまたはキトサンなどの多糖類、コラーゲンまたはゼラチンなどのタンパク質、ポリグルタミン酸、ポリリジン、ポリロイシン、ポリアラニンまたはポリメチオニンなどのポリアミノ酸、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸・グリコール酸重合体または共重合体、ポリカプロラクトン、ポリ−β−ヒドロキシ酪酸、ポリリンゴ酸、ポリ酸無水物またはフマル酸・ポリエチレングリコール・ビニルピロリドン共重合体などのポリエステル、ポリオルソエステルまたはポリメチル−α−シアノアクリル酸などのポリアルキルシアノアクリル酸、ポリエチレンカーボネートまたはポリプロピレンカーボネートなどのポリカーボネートなどが挙げられる。   The effect enhancer of the present invention can also be made into a sustained-release preparation (for example, porous sponge, depot etc.) using a biodegradable polymer. The sustained-release preparation can be produced according to a known method. The biodegradable polymer used in the sustained-release preparation can be appropriately selected from known biodegradable polymers. For example, a polysaccharide such as starch, dextran or chitosan, a protein such as collagen or gelatin, and the like. Polyamino acids such as polyglutamic acid, polylysine, polyleucine, polyalanine or polymethionine, polylactic acid, polyglycolic acid, lactic acid / glycolic acid polymer or copolymer, polycaprolactone, poly-β-hydroxybutyric acid, polymalic acid, Poly acid anhydride or polyester such as fumaric acid / polyethylene glycol / vinyl pyrrolidone copolymer, polyorthoester or polyalkyl cyanoacrylic acid such as polymethyl-α-cyanoacrylic acid, polyethylene carbonate or polypropylene carbonate Any polycarbonate etc. are mentioned.

投与方法としては、全身的または局所的に、経口または非経口で投与できる。例えば、注射剤を用いる場合は、静脈内投与、腹腔内投与、または嗅神経鞘細胞もしくは該細胞を含む粘膜組織(例えば、嗅粘膜)を移植した部位もしくはその近傍に直接注射(徐放性ポンプによる持続投与など)して投与することができ、好ましくは静脈内投与、さらに好ましくは点滴静注である。また、徐放性製剤として多孔性スポンジまたは埋め込み式ポンプを用いる場合には、移植した嗅神経鞘細胞もしくは該細胞を含む粘膜組織(例えば、嗅粘膜)に接するか、あるいはそれに近い部位に埋め込む方法が挙げられる。   As an administration method, it can be administered systemically or locally, orally or parenterally. For example, when an injection is used, intravenous injection, intraperitoneal administration, or direct injection (sustained release pump) at or near the site where olfactory nerve sheath cells or mucosal tissues containing the cells (for example, olfactory mucosa) are transplanted Etc.), preferably intravenous administration, more preferably intravenous drip infusion. In the case of using a porous sponge or an implantable pump as a sustained-release preparation, a method of contacting or implanting the transplanted olfactory nerve sheath cell or a mucosal tissue containing the cell (for example, the olfactory mucosa) or a portion close thereto. Is mentioned.

有効成分の投与量は、剤形、疾患(中枢神経損傷)の程度または年齢などに応じて適宜選択されるが、通常、1日当たり約1mg〜1g、好ましくは約10mg〜500mgである。1日の投与回数は1〜数回とすることができる。   The dose of the active ingredient is appropriately selected according to the dosage form, the degree of disease (central nerve injury) or age, and is usually about 1 mg to 1 g, preferably about 10 mg to 500 mg per day. The number of administrations per day can be 1 to several times.

本発明の効果増強剤は、さらに肝実質細胞増殖因子(以下、HGFと略記する)タンパク質と併用してもよい。   The effect enhancer of the present invention may be used in combination with a hepatocyte growth factor (hereinafter abbreviated as HGF) protein.

上記HGFタンパク質としては、例えば特開平3−72833号公報の第1図に記載されているアミノ酸配列、または該アミノ酸配列の161〜165番目の5個のアミノ酸残基が欠失している5アミノ酸欠損型HGFタンパク質などが挙げられる。これらアミノ酸配列を有するタンパク質は、HGFとしてのマイトーゲン活性、モートゲン活性などを有する。   Examples of the HGF protein include the amino acid sequence described in FIG. 1 of Japanese Patent Application Laid-Open No. 3-72833, or five amino acids from which the 161st to 165th amino acid residues of the amino acid sequence are deleted. Examples thereof include defective HGF protein. Proteins having these amino acid sequences have mitogenic activity, motogenic activity, etc. as HGF.

HGFタンパク質を併用する場合、該HGFタンパク質は、注射剤や噴霧剤、あるいは生体分解性高分子と共に、徐放性製剤(例えば、多孔性スポンジ、デポ剤など)などとすることができる。   When HGF protein is used in combination, the HGF protein can be used as a sustained-release preparation (for example, a porous sponge, a depot, etc.) together with an injection, a spray, or a biodegradable polymer.

徐放性製剤を用いる場合には、例えば、移植した嗅神経鞘細胞もしくは該細胞を含む粘膜組織(例えば、嗅粘膜)に接するか、あるいはそれに近い部位に埋め込む方法が挙げられる。注射剤または噴霧剤を用いる場合は、移植した嗅神経鞘細胞または該細胞を含む粘膜組織(例えば、嗅粘膜)に直接注射(徐放性ポンプによる持続投与など)するか、噴霧する方法が挙げられる。また注射剤を用いる場合は、髄腔内(intrathecal)投与してもよい。   When a sustained-release preparation is used, for example, a method of contacting or embedding in a site close to a transplanted olfactory nerve sheath cell or a mucosal tissue containing the cell (for example, the olfactory mucosa) is used. In the case of using an injection or a spray, a method of directly injecting (such as continuous administration with a sustained-release pump) or spraying into the transplanted olfactory nerve sheath cells or mucosal tissue containing the cells (for example, the olfactory mucosa) is mentioned. It is done. When an injection is used, it may be administered intrathecal.

以下に実施例を用いて本発明を説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。   The present invention will be described below with reference to examples, but the present invention is not limited to these examples.

[試験方法]
(嗅粘膜および呼吸粘膜の摘出および調製)
8週齢のSprague−Dawley(SD)雌ラットをネンブタール500μg/100gの腹腔内投与により麻酔し、ラット鼻腔を頭部方向に縦割し鼻中隔を露出した。嗅神経鞘細胞を含む嗅粘膜は鼻中隔上の尾側上部に存在し黄色調である。これの吻側に存在する嗅神経鞘細胞を含まない呼吸粘膜は灰白色調で、嗅粘膜よりやや薄い色調である。嗅粘膜および呼吸粘膜をそれぞれ摘出し、1mm四方に細切した。
[Test method]
(Extraction and preparation of olfactory and respiratory mucosa)
An 8-week-old Sprague-Dawley (SD) female rat was anesthetized by intraperitoneal administration of Nembutal 500 μg / 100 g, and the rat nasal cavity was vertically divided in the head direction to expose the nasal septum. The olfactory mucosa containing olfactory nerve sheath cells exists in the upper caudal side of the nasal septum and is yellowish. The respiratory mucosa that does not contain olfactory nerve sheath cells present on the rostral side of this is a grayish white tone and a slightly lighter tone than the olfactory mucosa. The olfactory mucosa and respiratory mucosa were respectively removed and cut into 1 mm squares.

(脊髄損傷動物の調製)
他の同種ラットをネンブタール100μg/100gの腹腔内投与により麻酔し、保温器を用いて直腸温度を37±0.5℃に維持した。該ラットに対して第8−9胸椎レベルにて椎弓切除を行い、脊髄を露出した。露出した脊髄を幅2mm摘出し、腹側の硬膜まで確認し、幅2mmの完全離断とした。図3にラットの脊髄を幅2mmで完全離断した部位の写真を示す。このようにして、2mm幅の脊髄摘出腔をもつラット脊髄離断モデルを調製した。
(Preparation of animals with spinal cord injury)
Other homogenous rats were anesthetized by intraperitoneal administration of Nembutal 100 μg / 100 g, and the rectal temperature was maintained at 37 ± 0.5 ° C. using an incubator. The rats were subjected to laminectomy at the 8th-9th thoracic vertebrae level to expose the spinal cord. The exposed spinal cord was extracted 2 mm in width and confirmed to the ventral dura mater, and was completely cut off 2 mm in width. FIG. 3 shows a photograph of a site where the spinal cord of a rat is completely cut off with a width of 2 mm. In this manner, a rat spinal cord transection model having a 2 mm-wide spinal excision space was prepared.

(嗅粘膜または呼吸粘膜の移植)
ラット脊髄離断モデル(1群5匹)の2mm幅の脊髄摘出腔に、上記細切した嗅粘膜または呼吸粘膜をその脊髄に作った2mm幅の空隙が埋まるまで充填した後、閉創した。図3に嗅粘膜を移植した部位の写真を示す。
(Transplantation of olfactory or respiratory mucosa)
The rat spinal cord transection model (5 mice per group) was filled in the 2 mm-wide spinal excision cavity until the 2 mm-wide gap created in the spinal cord was filled with the chopped olfactory mucosa or respiratory mucosa, and then closed. FIG. 3 shows a photograph of the site where the olfactory mucosa was transplanted.

(Rhoキナーゼ阻害剤の投与)
Rhoキナーゼ阻害剤として、塩酸ファスジル水和物注射剤(商品名:エリル注S、旭化成ファーマ株式会社製)を用い、この注射剤を嗅粘膜を移植したラット脊髄離断モデルに1日1回、10mg/kg/日、腹腔内投与した。14日間継続して投与を行った。
(Administration of Rho kinase inhibitor)
As a Rho kinase inhibitor, fasudil hydrochloride hydrate injection (trade name: Eril Injection S, manufactured by Asahi Kasei Pharma Co., Ltd.) was used once a day in a rat spinal cord transection model in which the olfactory mucosa was transplanted, 10 mg / kg / day was administered intraperitoneally. Administration was continued for 14 days.

(運動機能評価方法)
本発明に無関係な独立した2人が、BBBスコア(Bassoら、Journal of Neurotrauma(1995)12、1−21頁)を用いて、後肢運動機能評価を術後8週まで毎週行った。
(Motor function evaluation method)
Two independent individuals unrelated to the present invention performed hindlimb motor function assessment weekly until 8 weeks after surgery using the BBB score (Basso et al., Journal of Neurotrauma (1995) 12, pages 1-21).

[試験結果]
結果を図4および図5に示す。図4は嗅粘膜移植の対照群(OM)と呼吸粘膜移植の対照群(RM)とを比較したものであり、図5は嗅粘膜移植の対照群(OM)と嗅粘膜移植Rhoキナーゼ阻害剤投与群(OM+fasudil)とを比較したものである。
図4の結果より、ラット脊髄離断モデルにおいて、嗅粘膜移植の対照群は呼吸粘膜移植の対照群に比べて有意に後肢運動機能の改善されたことが判る。また図5から嗅粘膜移植に際してRhoキナーゼ阻害剤を投与することで、運動機能がさらに改善されたことが判る。
[Test results]
The results are shown in FIG. 4 and FIG. FIG. 4 compares the control group (OM) of olfactory mucosal transplantation with the control group (RM) of respiratory mucosal transplantation, and FIG. 5 shows the control group (OM) of olfactory mucosal transplantation and Rho kinase inhibitor of olfactory mucosa transplantation. This is a comparison with the administration group (OM + fasudil).
From the results of FIG. 4, it can be seen that in the rat spinal cord transection model, the control group of olfactory mucosa transplantation significantly improved hindlimb motor function compared to the control group of respiratory mucosal transplantation. It can also be seen from FIG. 5 that the motor function was further improved by administering a Rho kinase inhibitor during olfactory mucosa transplantation.

中枢神経損傷に対して、嗅神経鞘細胞または該組織を含む粘膜組織(例えば、嗅粘膜)を損傷部位に移植して中枢神経を再建する再生治療を行うに際して、Rhoキナーゼ阻害剤を投与することによって、再生治療の効果を増強することができる。   Administering a Rho kinase inhibitor when performing regenerative treatment to reconstruct the central nerve by transplanting olfactory nerve sheath cells or mucosal tissue containing the tissue (for example, olfactory mucosa) to the damaged site for central nerve injury Thus, the effect of regenerative treatment can be enhanced.

図1は、ヒトの嗅神経鞘細胞の位置を示す模式図を示す。FIG. 1 shows a schematic diagram showing the position of human olfactory nerve sheath cells. 図2は、ヒトの鼻部分の断面と嗅粘膜の摘出箇所を示す模式図である。FIG. 2 is a schematic diagram showing a cross-section of a human nose part and a location where an olfactory mucosa is removed. 図3は、ラットの脊髄を露出した写真(A)、そのラット脊髄を2mm幅で完全離断した写真(B)、および前記完全離断した脊髄損傷部位にラットの嗅粘膜を移植した部位の写真(C)を示す。FIG. 3 shows a photograph (A) in which the spinal cord of a rat is exposed, a photograph (B) in which the spinal cord of the rat is completely cut off at a width of 2 mm, and a site where the rat olfactory mucosa is transplanted to the site of spinal cord injury that has been completely cut off. A photograph (C) is shown. 図4は、実施例におけるラット脊髄離断モデルの運動機能評価について、嗅粘膜移植群(OM)と呼吸粘膜移植群(RM)とを比較した結果を示す。FIG. 4 shows the result of comparison between the olfactory mucosa transplant group (OM) and the respiratory mucosa transplant group (RM) for the motor function evaluation of the rat spinal cord transection model in the examples. 図5は、実施例において嗅粘膜移植を行ったラット脊髄離断モデルの運動機能評価について、Rhoキナーゼ投与群とRhoキナーゼ非投与群とを比較した結果を示す。FIG. 5 shows the result of comparison between the Rho kinase administration group and the Rho kinase non-administration group regarding the motor function evaluation of the rat spinal cord transection model in which olfactory mucosa transplantation was performed in Examples.

Claims (10)

中枢神経損傷患者に嗅神経鞘細胞または該細胞を含む粘膜組織を移植して中枢神経を再建する再生治療における効果増強剤であって、Rhoキナーゼ阻害剤を有効成分とすることを特徴とする効果増強剤。   An effect-enhancing agent in regenerative treatment in which olfactory nerve sheath cells or a mucosal tissue containing the cells are transplanted into a patient with central nerve injury to reconstruct the central nerve, comprising a Rho kinase inhibitor as an active ingredient Enhancer. 中枢神経損傷が、脊髄損傷、外傷性脳損傷、脳血管障害に基づく脳損傷、または脳手術後の脳損傷である請求項1に記載の効果増強剤。   The effect enhancer according to claim 1, wherein the central nerve injury is spinal cord injury, traumatic brain injury, brain injury based on cerebrovascular disorder, or brain injury after brain surgery. 中枢神経損傷が脊髄損傷であることを特徴とする請求項2に記載の効果増強剤。   3. The effect enhancer according to claim 2, wherein the central nerve injury is spinal cord injury. 注射剤の剤形である請求項1〜3のいずれかに記載の効果増強剤。   The effect enhancer according to any one of claims 1 to 3, which is a dosage form of an injection. 点滴静注するための請求項4に記載の効果増強剤。   The effect enhancer according to claim 4 for intravenous infusion. 嗅神経鞘細胞を含む粘膜組織が嗅粘膜である請求項1〜5のいずれかに記載の効果増強剤。   The effect enhancer according to any one of claims 1 to 5, wherein the mucosal tissue containing olfactory nerve sheath cells is the olfactory mucosa. 嗅粘膜が自家嗅粘膜である請求項1〜6のいずれかに記載の効果増強剤。   The effect enhancer according to any one of claims 1 to 6, wherein the olfactory mucosa is an autologous olfactory mucosa. Rhoキナーゼ阻害剤が塩酸ファスジル水和物であることを特徴とする請求項1〜7のいずれかに記載の効果増強剤。   The effect enhancer according to any one of claims 1 to 7, wherein the Rho kinase inhibitor is fasudil hydrochloride hydrate. 中枢神経損傷患者に嗅神経鞘細胞または該細胞を含む粘膜組織を移植して中枢神経を再建する再生治療に際し、前記患者にRhoキナーゼ阻害剤を投与することを特徴とする中枢神経再生治療の効果増強法。   The effect of the central nerve regeneration treatment, comprising administering a Rho kinase inhibitor to the patient in the regeneration treatment for transplanting the olfactory nerve sheath cell or the mucosal tissue containing the cell to a patient with central nerve injury to reconstruct the central nerve Augmentation method. 中枢神経損傷患者に嗅神経鞘細胞または該細胞を含む粘膜組織を移植して中枢神経を再建する再生治療における効果増強剤を製造するためのRhoキナーゼ阻害剤の使用。
Use of a Rho kinase inhibitor for producing an effect-enhancing agent in regenerative therapy for transplanting olfactory sheath cells or a mucosal tissue containing the cells to a patient with central nerve injury to reconstruct the central nerve.
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Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7470787B2 (en) 2005-07-11 2008-12-30 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Isoquinoline compounds
US8357699B2 (en) 2007-01-10 2013-01-22 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-aminoisoquinoline compounds
US8394826B2 (en) 2009-05-01 2013-03-12 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Dual mechanism inhibitors for the treatment of disease
US8450344B2 (en) 2008-07-25 2013-05-28 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Beta- and gamma-amino-isoquinoline amide compounds and substituted benzamide compounds
US8455514B2 (en) 2008-01-17 2013-06-04 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-and 7-amino isoquinoline compounds and methods for making and using the same
WO2013135596A1 (en) * 2012-03-12 2013-09-19 Georg-August-Universität Göttingen Stiftung Öffentlichen Rechts, Universitätsmedizin Rho kinase inhibitors for use in treating amyotrophic lateral sclerosis
US8809326B2 (en) 2006-09-20 2014-08-19 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Isoquinolinone Rho kinase inhibitors
US9415043B2 (en) 2013-03-15 2016-08-16 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy
US9643927B1 (en) 2015-11-17 2017-05-09 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Process for the preparation of kinase inhibitors and intermediates thereof
US10550087B2 (en) 2015-11-17 2020-02-04 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Process for the preparation of kinase inhibitors and intermediates thereof
US10858339B2 (en) 2017-03-31 2020-12-08 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Aryl cyclopropyl-amino-isoquinolinyl amide compounds
US11389441B2 (en) 2016-08-31 2022-07-19 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Ophthalmic compositions
US11427563B2 (en) 2018-09-14 2022-08-30 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Aryl cyclopropyl-amino-isoquinolinyl amide compounds

Cited By (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8455647B2 (en) 2005-07-11 2013-06-04 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-aminoisoquinoline compounds
US7671205B2 (en) 2005-07-11 2010-03-02 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-aminoisoquinoline compounds
US8034943B2 (en) 2005-07-11 2011-10-11 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-aminoisoquinoline compounds
US7470787B2 (en) 2005-07-11 2008-12-30 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Isoquinoline compounds
US8809326B2 (en) 2006-09-20 2014-08-19 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Isoquinolinone Rho kinase inhibitors
US10624882B2 (en) 2006-09-20 2020-04-21 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Rho kinase inhibitors
US8357699B2 (en) 2007-01-10 2013-01-22 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-aminoisoquinoline compounds
US8455513B2 (en) 2007-01-10 2013-06-04 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-aminoisoquinoline compounds
US10899714B2 (en) 2007-01-10 2021-01-26 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-aminoisoquinoline compounds
US10472327B2 (en) 2007-01-10 2019-11-12 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-aminoisoquinoline compounds
US9890123B2 (en) 2007-01-10 2018-02-13 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-aminoisoquinoline compounds
US9365518B2 (en) 2007-01-10 2016-06-14 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-aminoisoquinoline compounds
US8921392B2 (en) 2007-01-10 2014-12-30 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-aminoisoquinoline compounds
US8455514B2 (en) 2008-01-17 2013-06-04 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-and 7-amino isoquinoline compounds and methods for making and using the same
US8871757B2 (en) 2008-01-17 2014-10-28 Aerie Pharmaceuticals, Inc. 6-and 7-amino isoquinoline compounds and methods for making and using the same
US10882840B2 (en) 2008-07-25 2021-01-05 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Beta- and gamma-amino-isoquinoline amide compounds and substituted benzamide compounds
US9096569B2 (en) 2008-07-25 2015-08-04 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Beta- and gamma-amino-isoquinoline amide compounds and substituted benzamide compounds
US10532993B2 (en) 2008-07-25 2020-01-14 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Beta- and gamma-amino-isoquinoline amide compounds and substituted benzamide compounds
US9512101B2 (en) 2008-07-25 2016-12-06 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Beta- and gamma-amino-isoquinoline amide compounds and substituted benzamide compounds
US10112920B2 (en) 2008-07-25 2018-10-30 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Beta- and gamma-amino-isoquinoline amide compounds and substituted benzamide compounds
US11021456B2 (en) 2008-07-25 2021-06-01 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Beta- and gamma-amino-isoquinoline amide compounds and substituted benzamide compounds
US9884840B2 (en) 2008-07-25 2018-02-06 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Beta- and gamma-amino-isoquinoline amide compounds and substituted benzamide compounds
US8759388B2 (en) 2008-07-25 2014-06-24 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Beta- and gamma-amino-isoquinoline amide compounds and substituted benzamide compounds
US8450344B2 (en) 2008-07-25 2013-05-28 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Beta- and gamma-amino-isoquinoline amide compounds and substituted benzamide compounds
US9951059B2 (en) 2009-05-01 2018-04-24 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Dual mechanism inhibitors for the treatment of disease
US8394826B2 (en) 2009-05-01 2013-03-12 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Dual mechanism inhibitors for the treatment of disease
US11028081B2 (en) 2009-05-01 2021-06-08 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Dual mechanism inhibitors for the treatment of disease
US10174017B2 (en) 2009-05-01 2019-01-08 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Dual mechanism inhibitors for the treatment of disease
US10316029B2 (en) 2009-05-01 2019-06-11 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Dual mechanism inhibitors for the treatment of disease
US8716310B2 (en) 2009-05-01 2014-05-06 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Dual mechanism inhibitors for the treatment of disease
US11618748B2 (en) 2009-05-01 2023-04-04 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Dual mechanism inhibitors for the treatment of disease
US10654844B2 (en) 2009-05-01 2020-05-19 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Dual mechanism inhibitors for the treatment of disease
US9980972B2 (en) 2012-03-12 2018-05-29 Georg-August-Universität Göttingen Stiftung Öffentlichen Rechts, Universitätsmedizin Rho kinase inhibitors for use in treating familial amyotrophic lateral sclerosis
WO2013135596A1 (en) * 2012-03-12 2013-09-19 Georg-August-Universität Göttingen Stiftung Öffentlichen Rechts, Universitätsmedizin Rho kinase inhibitors for use in treating amyotrophic lateral sclerosis
US10588901B2 (en) 2013-03-15 2020-03-17 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy
US11185538B2 (en) 2013-03-15 2021-11-30 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Compositions for treating glaucoma or reducing intraocular pressure
US9415043B2 (en) 2013-03-15 2016-08-16 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy
US11197853B2 (en) 2013-03-15 2021-12-14 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy
US9993470B2 (en) 2013-03-15 2018-06-12 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy
US9931336B2 (en) 2013-03-15 2018-04-03 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy
US9849122B2 (en) 2013-03-15 2017-12-26 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy
US11020385B2 (en) 2013-03-15 2021-06-01 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy
US10568878B2 (en) 2013-03-15 2020-02-25 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy
US9643927B1 (en) 2015-11-17 2017-05-09 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Process for the preparation of kinase inhibitors and intermediates thereof
US10550087B2 (en) 2015-11-17 2020-02-04 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Process for the preparation of kinase inhibitors and intermediates thereof
US11389441B2 (en) 2016-08-31 2022-07-19 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Ophthalmic compositions
US11590123B2 (en) 2016-08-31 2023-02-28 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Ophthalmic compositions
US11707460B2 (en) 2016-08-31 2023-07-25 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Ophthalmic compositions
US10858339B2 (en) 2017-03-31 2020-12-08 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Aryl cyclopropyl-amino-isoquinolinyl amide compounds
US11312700B2 (en) 2017-03-31 2022-04-26 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Aryl cyclopropyl-amino-isoquinolinyl amide compounds
US11427563B2 (en) 2018-09-14 2022-08-30 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Aryl cyclopropyl-amino-isoquinolinyl amide compounds
US11891376B2 (en) 2018-09-14 2024-02-06 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Aryl cyclopropyl-amino-isoquinolinyl amide compounds

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