JP2006322841A

JP2006322841A - 分光測定方法及び分光光度計

Info

Publication number: JP2006322841A
Application number: JP2005146934A
Authority: JP
Inventors: Yasuro Tsukuda; 康郎佃
Original assignee: Shimadzu Corp
Current assignee: Shimadzu Corp
Priority date: 2005-05-19
Filing date: 2005-05-19
Publication date: 2006-11-30
Also published as: US7576855B2; US20060263872A1

Abstract

【課題】ごく微量の液体試料の透過分光測定を簡便に行う。
【解決手段】平板状部材の厚さ方向に逆さ裁頭円錐形状の試料保持孔１５２を穿通させたサンプラ１５を用い、そのサンプラ１５を略水平に保持して試料保持孔１５２に分析対象である液体試料を滴下させてその表面張力により該孔１５２内に液滴Ｓとして保持させる。そして、その保持されている液滴Ｓ対し真上から測定光を照射し、下方に出射された透過光を窓板１７、スリット１８を介して回折格子１９に導入し、波長分散させてマルチチャンネル型検出器２０で多波長同時検出する。
【選択図】図１

Description

本発明は、液体試料に光を照射してその透過光を測定する分光測定方法及びそうした測定に使用する分光光度計に関し、さらに詳しくは、微量の液体試料を測定するのに好適な分光測定方法及び分光光度計に関する。

紫外可視分光光度計等の分光光度計において、液体試料の透過率や吸光度などを測定する際には、液体試料を収容する角形状或いは円筒形状のキュベットセルを用いるのが一般的である。一般的なキュベットセルの内容積は数ｍＬ以上であり、これを満たすために十分な量の液体試料を用意する必要がある。

近年、蛋白質やＤＮＡの定量などの生化学分野で紫外可視分光光度計が利用されることが多くなっているが、こうした際に分析対象とされる液体試料はその量が極めて少ないことが多い。特にＤＮＡ関連の分析においては、試料が貴重で且つ高価であるため、数μＬ以下の液体試料で分析を行う必要がある場合もある。こうした微量の液体試料を分析する目的では上記のようなキュベットセルは使用できない。そこで、こうした微量な液体試料を分光測定するために適した容器が従来より知られている（例えば特許文献１など参照）。

従来よく知られている微量液体試料測定用セルとしては毛細管現象を利用して液体試料を吸い上げて保持するキャピラリセルがある。しかしながら、キャピラリセルの場合でも、一般に、数μＬ以上の液量が必要であり、これよりも少ない液量の液体試料の分析には対応できない。また、キャピラリセルではセルへの液体試料の注入が面倒であったり、測定後の洗浄に手間が掛かったりするという問題もある。

これに対し、１μＬ程度のごく微量な液体試料の分光測定を可能とした装置として、米国ナノドロップテクノロジーズ社が販売している分光光度計ＮＤ−１０００が知られている（非特許文献１参照）。この分光光度計では、図９に示すように、上下に対向させて所定距離離間して設けた上部側基部５０と下部側基部５２との間の空間に表面張力によって液体試料５４を上下方向に橋架し、上部側基部５０内に設けた投光側光ファイバ５１から出射した測定光を液体試料５４中に通過させ、下部側基部５２内に設けた受光側光ファイバ５３で受ける構成としている。液体試料中の光路長は１ｍｍ程度に設定されており、１〜２μＬ程度のごく微量の液体試料の分析が可能であるとされている。

しかしながら、この分光光度計では、１つの試料の測定を終了した後に次の試料の測定を行う際に、投光側・受光側の両方の光ファイバ端面をクリーニングする（非特許文献１の記載によれば「ラボペーパーで拭う」）必要があり、手間が掛かる。また、直前に測定した試料液の影響を完全に除去するにはラボペーパーでの払拭だけでは不十分であって水や有機溶媒で洗浄を行うことが望ましいが、こうした洗浄作業はかなり面倒である。また、１つの試料測定毎にこうした作業が必要とされることもあって、多数の試料を自動的に交換しながら測定することができず分析効率が悪い。さらにまた、装置の一部に液体試料が直接接触する構成となっているため、その接触部分に傷や取れない汚れが付着し易く、その場合に分析性能が低下する。また、そうしたことを回避するには頻繁な装置の保守・点検が必要となり、手間とコストとが掛かる。

特開平５−３０２８９３号公報「ナノドロップＮＤ−１０００オーバービュー (NanoDrop ND-1000 Overview)」、[online]、米国ナノドロップ・テクノロジーズ社 (NanoDrop Technologies)、[平成１７年５月１０日検索]、インターネット<URL : http://www.nanodrop.com/nd-1000-overview.html>

本発明は上記課題に鑑みて成されたものであり、その主な目的は、１〜２μＬ程度或いはそれ以下のごく微量の液体試料の透過測定を簡便な構成且つ手軽な操作で以て行うことができる微量液体試料用の分光測定方法及び分光光度計を提供することである。

上記課題を解決するために成された第１発明に係る分光測定方法は、平板状部材の厚さ方向に第１の面から第２の面に向かってその開口面積が単純減少する形状の試料保持孔を穿通させたサンプラを用い、第１の面を上に向けて前記サンプラを略水平に設置した状態で前記試料保持孔内に分析対象である液体試料を保持させ、その保持されている液体試料に対し上方向又は下方向から測定光を照射して、該液体試料を通過した透過光を分析することを特徴としている。

また上記課題を解決するために成された第２発明は、上記第１発明に係る分光測定方法を実施するための分光光度計であって、
a)平板状部材の厚さ方向に第１の面から第２の面に向かってその開口面積が単純減少する形状の試料保持孔が穿通されてなる液体試料保持用のサンプラと、
b)第１の面を上に向けて前記サンプラを略水平に保持するサンプラ保持手段と、
c)該サンプラ保持手段に保持されているサンプラの試料保持孔に対し上方向又は下方向から測定光を照射するとともに、該試料保持孔を通過した光を受ける測定光学系と、
を備え、前記サンプラ保持手段により略水平に保持された前記サンプラの試料保持孔内に分析対象である液体試料を保持させた状態で前記測定光学系により分析を行うことを特徴としている。

第１発明に係る分光測定方法及び第２発明に係る分光光度計では、第１の面を上に向けて略水平に設置されたサンプラの試料保持孔に例えばピペット等で液体試料を滴下する。滴下された液体試料は試料保持孔内に入るが、下方に向かって開口面積が小さくされているため、液滴の表面張力によって試料保持孔内に保持される。即ち、上下端面が開放した試料保持孔の内側に液体試料がほぼ満たされた状態となる。測定光はこの液体試料を上下方向に貫通し、液体試料により吸収を受けた透過光が分析される。なお、測定光学系の構成としては、測定光を単色光として透過光をそのまま検出する構成と、測定光を多波長光（例えば白色光）として透過光を分光器により波長分散させて検出する構成とのいずれでもよい。

このように第１発明に係る分光測定方法及び第２発明に係る分光光度計によれば、表面張力で以て試料保持孔内に保持されるようなごく微量の液体試料を分析するので、１〜２μＬ程度又はそれ以下の液量で済む。したがって、生体試料等の微量液体試料の分析に好適である。また、試料の準備としてサンプラの試料保持孔に液体試料を滴下すればよいので、分析に関わる作業が非常に簡単で手間が掛からない。また、液体試料が接触するのはサンプラの試料保持孔及びその周辺だけであり、しかも試料保持孔の上下端面は開放されているので、サンプラに付着した液体試料をきれいに除去するための洗浄作業が簡単に行える。また、サンプラ自体は非常に安価なものとすることができるので、サンプラをディスポーザブルとしても分析コストを抑えることが可能である。さらにまた、装置本体には液体試料が接触しないので、高価な装置本体に傷を付けたり汚したりしにくく、保守・点検の負担が増加することもない。

第１及び第２発明において、上記サンプラとしては様々な形状のものが考えられるが、一態様として、そのサンプラの試料保持孔が裁頭円錐状であるものとすると好ましい。例えば試料保持孔の形状として裁頭角錐状等としても表面張力による液体試料の保持は可能であるが、試料保持孔の内側に角が存在するとそこに液体試料の残滓が残り易い。これに対し、試料保持孔を裁頭円錐状とすることでそうした角がなくなり洗浄が容易になる。

上記第１及び第２発明では、サンプラの試料保持孔に滴下される液量がばらつくとそれが光路長のばらつきにつながり、分析精度や再現性を低下させる一因となる。滴下する液量を完全に一定に保つことは困難であるから、上記のような液量のばらつきが或る程度存在することを前提として、サンプラの試料保持孔に保持された液体試料の液量の相違に起因する光路長の相違を補正する補正処理手段をさらに備える構成とするとよい。

補正処理手段の具体例としては、液体試料の溶媒が水である場合には水により吸収を受ける近赤外域の光の吸収量をモニタし、その吸収量に基づいて光路長の差異を補正する係数を算出し、紫外可視域の光の受光強度にこの係数を乗じることで補正を行うことができる。こうした構成によれば、サンプラの試料保持孔に滴下される液体試料の液量の相違に起因する誤差を解消又は軽減して、分析精度や再現性を向上させることができる。

なお、上述したように基本的には分光器は液体試料の前後のいずれに設けてもよいが、液体試料が微量であってしかも試料保持孔の上下端面は開放されているため、液体試料中の溶媒が蒸発し試料成分の濃度が変化し易い。そのため、液体試料をサンプラに滴下した後にできるだけ短時間で測定を終了させることが望ましい。そこで、１波長のみの測定でなく適宜の波長範囲の吸光度スペクトルを取得するような場合には、測定光学系では、液体試料に照射される測定光は多波長光であって液体試料を通過した後の光を分光器により分光し、その分光された波長分散光を多波長同時検出する構成とすることが好ましい。

この構成によれば、いわゆるシーケンシャル型の分光光度計のように分光器から取り出す単色光の波長を順次走査してゆく必要がなく、所定波長範囲の光をほぼ同時に検出することができるので、測定が短時間で済み、上述したような溶媒の蒸発に起因する精度の低下を回避することができる。

本発明に係る分光測定方法を具現化する分光光度計の一実施例である紫外可視分光光度計について、図面を参照して説明する。図１は本実施例の紫外可視分光光度計の概略構成図、図２はこの分光光度計で使用するサンプラ１５の上面平面図（ａ）及びＡ−Ａ’矢視線断面図（ｂ）、図３は分析手順を説明するための概略図である。

図１において、光源１０からの出射光はレンズ１１で平行光化された後に反射鏡１２、１３でそれぞれ反射され、レンズ１４により集光されて測定光として分析対象である試料にほぼ真上から照射される。後述するサンプラ１５により保持された液体試料の液滴Ｓが分析対象であり、サンプラ１５はサンプラホルダ１６によりレンズ１４と窓板１７との間の空間内の所定位置に支持されている。測定光が液滴Ｓを通過する過程で液滴Ｓ中の試料成分に応じた吸収を受け、透過光として下方に出射する。この透過光は透明な窓板１７を通過し、スリット１８で光域が制限された後に回折格子１９に導入される。この回折格子１９で透過光は波長分散され、その波長分散光は例えばＣＣＤリニアセンサ等であるマルチチャンネル型検出器２０によりほぼ同時に検出される。

検出器２０による検出信号はＡ／Ｄ変換器２１でデジタルデータに変換されてデータ処理部２２に送られる。データ処理部２２では入力されたデータに基づいて例えば各波長毎に液滴Ｓによる吸光度を算出し、所定波長範囲の吸光度スペクトルを作成して表示部２４の画面上に表示する。一般的にデータ処理部２２の実体は汎用のパーソナルコンピュータであり、このパーソナルコンピュータで所定の制御・処理プログラムを動作させることでデータ処理部２２としての機能を達成することができる。データ処理部２２はこうした機能の１つとして光路長補正処理部２３を備えるが、その詳細については後述する。

図２に示すようにサンプラ１５は、薄い平板状部材１５１の厚さ方向に裁頭円錐形状の試料保持孔１５２が穿通されたものである。試料保持孔１５２の上側端面開口の直径ｄ１は２ｍｍ、下側端面開口の直径ｄ２は１ｍｍである。また、平板状部材１５１の厚みｔは１ｍｍである。試料保持孔１５２は裁頭円錐形状であるから、図２（ｂ）において平板状部材１５１の上面（本発明における第１の面）から下面（本発明における第２の面）に向かって試料保持孔１５２の開口面積は単純に減少している。

このサンプラ１５の試料保持孔１５２は表面張力を利用して液体試料を保持するものであり、後述する理由により、試料保持孔１５２内で液滴は球形に近い丸まった形状になるようにすることが望ましい。そのためには、液体試料との接触面が液体試料の溶媒をはじく性質を有することが望ましい。そこで、平板状部材１５１は例えば４フッ化エチレン樹脂等の高い撥水性を有する合成樹脂から形成するか、或いは表面に撥水処理を施すようにするとよい。また、光が試料保持孔１５２以外の部分を透過しないように、平板状部材１５１は光を透過する性質を有さない材料とするか、或いは遮光性物質を表面にコーティングするとよい。

次に本実施例の紫外可視分光光度計を用いた分析手順を説明する。図１に示すように略水平に保持されたサンプラ１５の試料保持孔１５２内に、分析者は図３（ａ）に示す如くマイクロピペット３０等を用いて規定量の液体試料を滴下する。サンプラ１５が上述したようなサイズである場合、試料保持孔１５２に滴下する液量は１μＬ程度で十分である。

滴下された液体試料は表面張力によって試料保持孔１５２の下面開口からは流れ出ず、図３（ｂ）に示すように球形状に近い液滴となって試料保持孔１５２内に保持される。仮にサンプラ１５の平板状部材１５１の表面の撥水性が悪い（親水性が高い）と、液体試料の溶媒である水は試料保持孔１５２の内壁面に沿って広がるため、図３（ｃ）に示すように液滴は球形状にならない。この場合、同一液量であっても上下方向に光軸に沿った光路長が一定になりにくく、この光路長の差異が分析精度を損なう一因となる。これが、上述したようにサンプラ１５の平板状部材１５１の表面の撥水性を高めることが望ましい理由である。

上記のようにサンプラ１５の試料保持孔１５２内に液滴Ｓを準備したならば、既に説明したように液滴Ｓに真上から下方に向けて測定光を照射する。測定光の光軸は図３（ｂ）に示すように試料保持孔１５２の中心軸に一致するように設定されており、液滴Ｓ中を通過した透過光が試料保持孔１５２の下面開口から真下に抜ける。つまり、液滴Ｓへの測定光の入射界面と透過光の出射界面はいずれも液体試料と空気（又は真空雰囲気）との界面であり、ガラス等の他の部材が介在しない。

そして、試料保持孔１５２内に保持された液滴Ｓを通過する間に吸収を受けた透過光を波長分散し、その波長分散光の光強度に基づいて吸光度スペクトルを算出することができる。このように、本実施例の紫外可視分光光度計によれば、ごく微量の液体試料の吸光度や透過率等の透過分光測定を簡便に行うことができる。また、上記構成では、マルチチャンネル型検出器２０により多波長同時検出を行うので、広い波長範囲の分光測定を短時間で終了させることができる。したがって、分析対象の液滴Ｓが微量であっても溶媒の蒸発の影響を殆ど無視することができる。

さらにまた、サンプラ１５は単に平板に孔が穿設されたものであり、しかも装置本体から容易に取り外すことができるので、容易に洗浄することができる。それによって、クロスコンタミネーションなどを防止することができる。また、サンプラ１５自体のコストは低く抑えることができるので、サンプラ１５をディスポーザブルとしてもユーザにとって大きな負担とはならない。

サンプラ１５の試料保持孔１５２への液体試料の滴下は分析者がマイクロピペットを用いて行うことができるほか、もちろん自動的に行うようにしてもよい。しかしながら、いずれにしてもマイクロピペットやこれに相当するような試料液滴下装置を用いる場合、液量を常に一定にすることは難しく、通常、±１０％程度の液量のばらつきを考慮する必要がある。図３（ｂ）から明らかなように試料保持孔１５２内の液滴Ｓの液量がばらつくと、測定光が液滴Ｓを通過する際の光路長がばらつく。光路長が長いと見かけ上の試料成分濃度が上がることとなり、吸光度のばらつきとなって現れる。

光路長補正処理部２３はこうした液量のばらつきに起因する光路長のばらつきを補正するためのものである。この補正を行う場合、光源１０としては例えばキセノンランプのように紫外・可視域だけでなく近赤外域にも発光スペクトルを有するランプを用いる。もちろん、紫外可視用ランプとは別に近赤外用ランプを併設し、両ランプからの出射光を選択して試料に照射できるようにしてもよい。

分析対象である液体試料の溶媒が例えば水である場合、水は近赤外域中の特定波長の光を吸収する。液体試料中の試料成分はこの特定波長の光を殆ど吸収しないから、液滴Ｓ中の光路長が長いほど上記特定波長の光の吸収量が大きくなる。そこで、光路長補正処理部２３は、この特定波長の吸収量をモニタし、予め設定されている吸収量の基準値に対する比率に基づいて補正係数を算出する。例えば、或る液滴Ｓに対する特定波長の光の吸収量がＡ１であり、その基準値がＡrefであるとき、補正係数Ｋを次式で定義する。
Ｋ＝Ａref／Ａ１
Ａ１＝Ａrefであれば補正係数Ｋは１であり、Ａ１がＡrefよりも大きくなるほど、つまり吸収量が大きくなるほど補正係数Ｋは小さくなる。

そして、上記のようにして求めた補正係数Ｋを、同じ液滴Ｓに対して取得した紫外可視域の光についての吸収量に乗じることで吸収量を補正する。Ａ１がＡrefよりも大きい場合に光路長は基準として想定したものより長いから、紫外可視域の光に対する吸収量も見かけ上大きくなっている。それに対し、上記のように求めた補正係数Ｋを乗じることで吸収量が小さくなるように補正することができる。これによって、液体試料を滴下する際の液量のばらつきの影響を排除することができ、高い分析精度や再現性を達成することができる。図４は上記のような光路長の補正処理を行わない場合と行った場合との吸光度のばらつきの程度を示す実験結果である。液量２μＬに対して±１０％のばらつきを見込んだときに、補正処理を行わないと吸光度が１０％程度変動してしまうのに対し、補正処理を行うことにより吸光度の変動は１％以下と大きく改善することができることが分かる。

なお、溶媒が水である場合、水の吸収波長は約９８０ｎｍ、１１６０ｎｍ、１４７０ｎｍに存在し、上記特定波長としてはいずれの波長を選択してもよい。一般に紫外可視分光測定に使用されるＰＤＡ検出器では検出可能波長範囲がおおよそ１１００ｎｍまでであるので、この検出器を利用して水による吸収量を求めたい場合には特定波長として９８０ｎｍを選択するのがよい。また、吸収強度の点から言えば１４７０ｎｍでの吸収が最も強いので、これを特定波長とすれば吸収量の算出精度が上がる。但し、この場合には紫外可視分光測定用のＰＤＡ検出器とは別の検出器を設ける必要がある。

図５は上記実施例とは別の形態のサンプラ１５Ａの上面平面図（ａ）及びＢ−Ｂ’矢視線断面図（ｂ）である。この例では、試料保持孔１５２の上部を裁頭四角錐形状とし、下部をその裁頭四角錐の下端面に連続する四角柱形状としている。このような形状でも、試料保持孔１５２の内側に液体試料を液滴として保持することができる。さらに、これに限らず各種の形態が可能であることは容易に想到し得る。

さらに、本発明に係る分光光度計の利点は、サンプラ１５の試料保持孔及びその付近にしか液体試料が接触しないことであり、それ故に、多数の試料を連続的に且つ自動で測定する構成とすることが可能である。こうした多数の試料の連続測定の場合には、図６〜図８に示すように、複数の試料保持孔１５２を有するサンプラ１５Ｂ、１５Ｃ、１５Ｄを用いるとよい。

図６に示すサンプラ１５Ｂは複数（この例では５個）の試料保持孔１５２が一直線上に穿設されており、図中に矢印で示すようにサンプラ１５Ｂを直線往復動させながら１つずつ試料保持孔１５２を測定光照射位置に移動させる駆動機構を設けることで自動連続測定が可能である。

図７に示すサンプラ１５Ｃは複数（この例では２個）の試料保持孔１５２が扇状の平板状部材１５１にあって軸１５３を中心とする円周上に穿設されており、図中に矢印で示すようにサンプラ１５Ｃを回動させながら１つずつ試料保持孔１５２を測定光照射位置に移動させる駆動機構を設けることで自動連続測定が可能である。

図８に示すサンプラ１５Ｄは複数（この例では１６個）の試料保持孔１５２が円環形状の平板状部材１５１にあって軸１５３を中心とする円周上に穿設されており、図中に矢印で示すようにサンプラ１５Ｄを回動させながら１つずつ試料保持孔１５２を測定光照射位置に移動させる駆動機構を設けることで自動連続測定が可能である。

なお、こうした連続測定用のサンプラではそれぞれの試料保持孔１５２の位置を示すマーキングを平板状部材１５１に形成しておき、分光光度計本体に設置した光センサ等によるマーキング検知機構により各試料保持孔１５２の位置を自動的に認識しながらサンプラの移動動作を行うようにするとよい。

また、試料保持孔１５２の数が２個乃至数個程度であれば、連続測定前に全ての試料を各試料保持孔１５２内に用意しておいてもよいが、試料保持孔１５２の数が多い場合には、連続測定前に全ての液体試料を滴下してしまうと上述したように溶媒の蒸発の問題が起こり易くなる。そこで、サンプラの駆動機構と液体試料の自動滴下装置とを連動させ、サンプラを移動させながら次に分析する試料保持孔に液体試料を適下させ、液滴が用意された試料保持孔を順番に測定光の照射位置に移動させるようにして、試料液滴の滴下から測定の実行までの時間をできるだけ短縮するように制御するとよい。

なお、上記実施例は一例であって、本発明の趣旨の範囲で適宜変更や修正を行えることは明らかである。例えば、上記実施例における測定光学系の構成は適宜に変更することができ、一例を挙げると、サンプラの試料保持孔の下方から測定光を照射して上方に抜けた透過光を分光測定するような構成としてもよい。また、サンプラの材料やサイズ等も上記記載に限定されない。

本発明の一実施例である紫外可視分光光度計の概略構成図。図１の紫外可視分光光度計で使用するサンプラの上面平面図（ａ）及びＡ−Ａ’矢視線断面図（ｂ）。図１の紫外可視分光光度計による分析手順を説明するための概略図。光路長の補正処理を行わない場合と行った場合との吸光度のばらつきの程度を示す実験結果のグラフ。別の形態のサンプラの上面平面図（ａ）及びＢ−Ｂ’矢視線断面図（ｂ）。連続測定を行うためのサンプラの一形態を示す上面平面図。連続測定を行うためのサンプラの一形態を示す上面平面図。連続測定を行うためのサンプラの一形態を示す上面平面図。従来の微量液体試料用分光光度計の要部の概略図。

符号の説明

１０…光源
１１、１４…レンズ
１２、１３…反射鏡
１５、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１５Ｄ…サンプラ
１５１…平板状部材
１５２…試料保持孔
１５３…軸
１６…サンプラホルダ
１７…窓板
１８…スリット
１９…回折格子
２０…マルチチャンネル型検出器
２１…Ａ／Ｄ変換器
２２…データ処理部
２３…光路長補正処理部
２４…表示部
３０…マイクロピペット
Ｓ…液体試料の液滴

Claims

平板状部材の厚さ方向に第１の面から第２の面に向かってその開口面積が単純減少する形状の試料保持孔を穿通させたサンプラを用い、第１の面を上に向けて前記サンプラを略水平に設置した状態で前記試料保持孔内に分析対象である液体試料を保持させ、その保持されている液体試料に対し上方向又は下方向から測定光を照射して、該液体試料を通過した透過光を分析することを特徴とする微量液体試料用の分光測定方法。
a)平板状部材の厚さ方向に第１の面から第２の面に向かってその開口面積が単純減少する形状の試料保持孔が穿通されてなる液体試料保持用のサンプラと、
b)第１の面を上に向けて前記サンプラを略水平に保持するサンプラ保持手段と、
c)該サンプラ保持手段に保持されているサンプラの試料保持孔に対し上方向又は下方向から測定光を照射するとともに、該試料保持孔を通過した光を受ける測定光学系と、
を備え、前記サンプラ保持手段により略水平に保持された前記サンプラの試料保持孔内に分析対象である液体試料を保持させた状態で前記測定光学系により分析を行うことを特徴とする分光光度計。
前記サンプラの試料保持孔は裁頭円錐状であることを特徴とする請求項１に記載の分光測定方法又は請求項２に記載の分光光度計。
前記サンプラの試料保持孔に保持された液体試料の液量の相違に起因する光路長の相違を補正する補正処理手段をさらに備えることを特徴とする請求項２に記載の分光光度計。
前記測定光学系では、液体試料に照射される測定光は多波長光であって液体試料を通過した後の光を分光器により分光し、その分光された波長分散光を多波長同時検出することを特徴とする請求項１に記載の分光測定方法又は請求項２に記載の分光光度計。