JP2006313129A - 検出表面と該検出表面の作製方法、並びにプローブ物質の固定密度制御方法 - Google Patents
検出表面と該検出表面の作製方法、並びにプローブ物質の固定密度制御方法 Download PDFInfo
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Abstract
本発明は、物質間の相互作用の定量化に適する検出表面や該検出表面に対するプローブ物質の固定密度の制御方法を提供すること。
【解決手段】
物質間の相互作用を進行させる反応場3に臨む固相の表面であって、遊離アミノ基を有するアミノシラン化合物1とアミノ基がブロック化されているアミノシラン化合物2が、それぞれシランカップリング反応を介して、前記固相表面Sに所定割合で結合されている検出表面、並びに該検出表面が基板に設けられているセンサーチップ、固相表面Sに対するプローブ物質5の固定密度の制御技術を提供する。
【選択図】 図3
Description
1cm角に切断したシリコン基板を洗浄後、オゾン処理、過酸化水素水処理により表面を清浄化し、120度で30分加熱乾燥した。続いて、トルエン中にアミノプロピルシラン及びジメチルアミノプロピルシラン(アミノ基がメチル基でブロックされている)の比率を変えた混合物をトルエンに対する体積比で2%添加し、洗浄した基板を浸漬した。50度で30分反応させた後、トルエン、水で洗浄後、アミノ基と反応するシアニン色素(Cy3)で染色し蛍光観察を行った。この結果を図4に示す。なお、図4の縦軸は蛍光強度であり、横軸には、アミノプロピルシラン(A)とジメチルアミノプロピルシラン(D)の混合比が、100:0、75:25、50:50、25:75、0:100の場合が記載されている。
実施例1と同様に、アミノシランとジメチルアミノシランの比を変えてシランカップリング処理を行った後、コハク酸無水物100mgを10mlのジメチルホルムアミドに溶解した溶液に基板を浸漬し、50度2時間アミド化反応を行った。その後、基板を洗浄し100mlの水に5gのエチレンジクロライド(EDC)、Nヒドロキシコハク酸イミド5gを溶解した反応液を用い活性エステルを形成した。
2 遊離アミノ基がブロックされたアミノシラン化合物(ブロックアミノ化合物)
3 反応場
4 介挿物質
5 プローブ物質
S 固相表面
Claims (8)
- 物質間の相互作用を進行させる反応場に臨む固相の表面であって、
遊離アミノ基を有するアミノシラン化合物とアミノ基がブロック化されたアミノシラン化合物が、それぞれシランカップリング反応を介して、前記固相に所定割合で結合されている検出表面。 - 前記固相は、水酸基を有する基板又はビーズであることを特徴とする請求項1記載の検出表面。
- 前記相互作用に係るプローブ物質が、前記遊離アミノ基に直接又は間接に、結合されていることを特徴とする検出表面。
- 前記プローブ物質は、核酸鎖であることを特徴とする請求項1記載の検出表面。
- 前記相互作用は、ハイブリダイゼーションであることを特徴とする請求項1記載の検出表面。
- 請求項1記載の検出表面を基板に設けたことを特徴とするセンサーチップ。
- 相溶性を有する、遊離アミノ基を有するアミノシラン化合物とアミノ基がブロック化されたアミノシラン化合物とが所望の比率で混合された処理剤を用いて表面処理を施すことを特徴とする検出表面の作製方法。
- 物質間の相互作用を進行させる反応場に臨む固相表面に、遊離アミノ基を有するアミノシラン化合物とアミノ基がブロック化されたアミノシラン化合物とを所望の割合で表面に存在させることにより、前記固相表面に対するプローブ物質の固定密度を制御する方法。
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