JP2006232782A - アカシア属樹皮由来物を含有する抗肥満組成物 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 アカシア属樹皮由来物を含有することを特徴とする、抗肥満組成物。
【選択図】 なし
Description
すなわち、本発明は、アカシア属樹皮由来物を含有することを特徴とする、抗肥満組成物に関する。
しかも、本発明によれば、安全で、長期に服用しても副作用などの心配の少ない組成物を得ることができる。
本発明では、これらアカシア属樹皮由来物を1種のみ使用してもよいし、2種以上併用してもよい。
本発明では、これらアカシア属の樹皮を1種のみ使用してもよいし、2種以上併用してもよい。
アカシア属の樹皮は、外皮とやや繊維質の内皮とからなり、含水率20%程度以下に乾燥するとハンマーミルなどの粉砕機で容易に微粉化する。本発明では、アカシア属樹皮として、このアカシア属の内皮と外皮の両方を一緒に用いてもよいし、いずれか一方のみを用いてもよい。
また、前記アカシア属の樹皮の粉末は、アカシア属の樹皮を慣用の方法で粉砕し粉末化して得ることができるが、特に、粒径が100μm以下、特に50〜70μmである粉末が好ましい。粉末の分画は、含水率20%以下に乾燥した樹皮を適当な大きさ、例えば粒径1.6mm以下程度に粉砕し、得られた粉末を振動ふるい機などで分級して所要の粉末を得ることができる。
このようなアルコールとしてエタノールが、極性溶媒としては水などが使用でき、また必要に応じてそれら溶媒を単独あるいは2種以上を併用してもよい。特に、優れた抗肥満作用を得るために、水とエチルアルコールなどのアルコールとの混合溶媒が好ましい。
さらに、同一又は異なる溶媒によって複数回抽出操作を行ってもよい。
優れた抗肥満作用を有する抽出物を得る上で、アカシア属の樹皮からの水又は熱水による抽出物をさらにエタノールで抽出して得た抽出物を使用してもよい。
さらに、これらの形態で得られた本発明のアカシア属の樹皮抽出物はそのまま抗肥満組成物として使用できるほか、さらに必要に応じて精製し、その精製物も抗肥満成分として使用することができる。
本発明のアカシア樹皮ポリフェノールとは、フラバン−3−オールを基本骨格とするフラバノール類の重合体である縮合型タンニンの一種を意味する。ここで、このような縮合型タンニンとして分子量500〜3000のものが好ましい。本発明で用いるアカシア樹皮ポリフェノールは、上記アカシア属の樹皮の粉末などを熱水抽出することにより得ることができる。
また、アカシア樹皮由来のポリフェノール製品としてはMIMOSA CentralCo−operative Ltd.製の登録商標 MIMOSA ME POWDER、MIMOSA MS POWDER、MIMOSA GS POWDER、MIMOSA FS POWDER、MIMOSA WS POWDER、MIMOSA RG POWDER、MIMOSA RN POWDER、MIMOSA DK POWDER、MIMOSA AL POWDER、MIMOSA CR POWDER、GOLDEN MIMOSA POWDERなどが例示される。
本発明で用いる体脂肪には、脂肪が脂肪細胞の中に貯まって生じる皮下脂肪や内臓脂肪以外に、血液中に流れているコレステロールや中性脂肪(トリグリセライド)、リン脂質、遊離脂肪酸なども含む。
摂取期間は、使用者又は患者の年齢、症状に応じて任意に定めることができる。
以下の製造例、試験例等において、本発明の各アカシアをそれぞれの学名の後の括弧内に示した番号で示す。例えば、学名:Acacia mearnsii De Wild.のアカシアをアカシアNo.1と記す。
学名:Acacia mearnsii De Wild.(No.1)、学名:Acacia mangium Willd.(No.2)、学名:Acacia dealbata Link.(No.3)、学名: Acacia decurrens Willd.(No.4)、学名:Acacia pycnantha Benth.(No.5)。
アカシアNo.1の樹皮を含水率20%以下まで乾燥し、その乾燥樹皮をハンマーミル(Raymond社製)で1.6mm以下(10メッシュ篩(タイラー:Tyler)通過)の粉末に粉砕した後、更に振動ふるい機で分級し、63μm以下(250メッシュ篩下)の微粉末を得た。
同様にして、残り4種のアカシアNo.2〜5の樹皮を粉砕してそれぞれ63μm以下の微粉末を得た。種類によって250メッシュ篩通過の微粉末の収率に多少の差はあるが、目的とする微粉末が得られた。
本発明の各アカシアNo.1〜5の樹皮をそれぞれ含水率20%以下まで乾燥し、その乾燥樹皮をハンマーミルで1.6mm以下の粉末に粉砕した後、この乾燥粉砕樹皮100gに対して5倍量の熱水を加え、沸騰してから15分間抽出し、10〜20μmのフィルターを用いて濾過した。得られた濾液をスプレードライヤで噴霧乾燥し、樹皮抽出物各40gを得た。
以下、各樹皮抽出物はアカシアNo.1〜5熱水抽出物と記す。
本発明のアカシアの樹皮を含水率20%以下まで乾燥し、その乾燥樹皮をハンマーミルで1.6mm以下の粉末に粉砕した後、この乾燥粉砕樹皮100gに対して5倍量のエタノールを加え、沸騰させて還流させながら15分間抽出し、10〜20μmのフィルターを用いて濾過した。得られた濾液からエタノールを蒸発させた後、濃縮液をクローズドスプレードライヤで噴霧乾燥し、樹皮抽出物(以下、アカシアNo.1エタノール抽出物の如く記す)40gを得た。
アカシアNo.1〜5のエタノール抽出物を得た。
製造例2で得られたアカシア熱水抽出物10gに3倍量のエタノールを加え、沸騰させて還流させながら15分間抽出し、10〜20μmのフィルターを用いて濾過した。得られた濾液からエタノールを蒸発させて、それに水を加えてから凍結乾燥させて9gの抽出物(以下、アカシアNo.1熱水抽出物エタノール画分の如く記す)を得た。
アカシアNo.1〜5の熱水抽出物エタノール画分を得た。
ラット脂肪食負荷モデルにアカシア樹皮抽出物を混餌投与して、投与最終日翌日に採血を行い血中のトリグリセリド、総コレステロール、リン脂質、ケトン体、遊離脂肪酸及び腹腔内脂肪量を測定し、体脂肪に及ぼす影響を検討した。
1)媒体
(a)粉末飼料の名称:FR−2、ロット番号:439、販売元:株式会社船橋農場、性状又は剤型:粉末、保存条件:室温保存
(b)脂肪食作成物質の名称:ラード、製造元:雪印乳業株式会社、性状又は剤型:固形、保存条件:室温保存
1)20%ラード混合飼料の調製及び保存
ラード:粉末飼料=20g:80gの割合で混合した。
必要量のラード及び粉末飼料を秤量し、ケンミックスミキサー(株式会社愛工製作所)に移し、充分に混合した。
調製は週1回の頻度で行い、調製後は容器に入れ室温保存した。
2)被験物質混合飼料の調製及び保存
被験物質:ラード:粉末飼料=5g:20g:75gの割合で混合した。
必要量の被験物質、ラード及び粉末飼料を秤量し、ケンミックスミキサー(株式会社愛工製作所)に移し、充分に混合した。調製は週1回の頻度で行い、調製後は容器に入れ室温保存した。
3)残飯の処置
使用後の残飯は廃棄した。
1)動物種、系統及び性別:ラット、S1c:SD、SPF、雄
2)供給元:日本工スエルシー株式会社
3)週齢及び使用数
入荷時週齢:4週齢、使用数:14匹、使用開始時週齢:5週齢、使用開始時の体重範囲:120〜164g
4)検疫及び馴化期間
入荷後1週間の検疫・馴化期間を設けた。
検疫・馴化期間中に、一般状態を1日1回観察し、動物入荷の翌日及び検疫・馴化終了日に体重を測定した。
5)群分け方法
検疫・馴化終了目の体重を用い、コンピュータを用いた完全無作為抽出法により各群にランダムに割り当てた。
6)試験系の識別
(a)検疫・馴化期間
動物は油性インクにより識別した。ケージは、検疫・馴化期間、試験番号、入荷年月日、性別、ケージ番号、検疫番号を記載したケージカードにより識別した。
(b)群分け後
動物は油性インクにより識別した。ケージは、試験番号、性別、投与量、ケージ番号、動物番号を記載した色別ケージカードにより識別した。
7)屠殺方法
動物はエーテル麻酔により安楽死させた。
1)飼育環境
動物は温度20〜26℃、相対湿度40〜70%、換気回数10〜20回/時間、照明時間12時間(7:00〜19:00)に設定したクリーン飼育室で、ステンレス製ハンガーケージ(43cmD×27cmD×15cmH)で飼育した。1ケージあたりの匹数は、検疫・馴化期間中は2〜3匹、群分け後は1匹とした。
2)飼料及び飲料水
飼料は、動物入荷日から投与開始時までは上記粉末飼料を自由に摂取させた。飲料水は上水道水を給水瓶により自由に摂取させた。
1)群構成及び被験物質濃度
2)投与方法
(a)投与経路
経口投与(混餌投与)
(b)投与方法
粉末用給餌器に被験物質混合飼料を入れ、自由に摂取させた。被験物質混合飼料の交換は1回/週の頻度で行い、1回/週の頻度で被験物質混合飼料を追加した。対照群には、20%ラード混合飼料を上記と同様に摂取させた。
(c)被験物質摂取量の算出
各摂餌量測定のデータより投与期間を通した1個体の1週間当たりの摂餌量及び1日当たりの平均摂取量を算出した。
3)投与期間
56日間(投与開始日を0目目と起算した)
1)一般状態及び生死の観察
全例について投与期間中、一般状態及び生死の観察を1日1回以上行った。
2)体重測定
全例について投与開始日、以降の投与期間中は週1回及び剖検目に測定した。
3)摂餌量測定
全例について週2回、給餌量と残飯量を測定し、その差より1週間の摂餌量を求め、1日当たりの平均摂餌量を算出した。
4)摂水量測定
全例について週2回、給水量と残水量を測定し、その差より1週間の摂水量を求め、1日当たりの平均摂水量を算出した。
5)血液生化学的検査
全例について投与最終目から翌日まで絶食し、剖検時に腹大動脈から血液を採取した。採取した血液は4℃、1700×gで15分間遠心分離し、得た血清について、自動分析装置(7170形、日立計測エンジニアリング株式会社)により、トリグリセリド、総コレステロール、リン脂質、ケトン体及び遊離脂肪酸を測定した。
6)内臓脂肪重量測定
全例について投与最終日翌日に剖検を行い、腹腔内の内臓脂肪(内臓脂肪とは内臓の周囲につく脂肪)全てを摘出し、絶対重量を測定するとともに、相対重量(体重100g当たり)を算出した。
測定値は平均値±標準誤差で表した。対照群との有意差検定は、F検定により分散に一様性が認められる場合にはStudentのt検定を、分散に一様性が認められない場合にはAspin Welchのt検定を行った。有意水準は5%及び1%で表示した。
1)一般状態及び生死の観察:全例において死亡及び一般状態異常は認められなかった。
2)体重測定(表2):対照群と比較して、アカシアNo.1熱水抽出物投与群の投与1週目以降で、体重の減少が認められた。
3)摂餌量測定(表3)および被験物質摂取量測定(表4):対照群と比較して、アカシアNo.1熱水抽出物投与群の投与1週目を除き、平均摂餌量の差は認められなかった。アカシアNo.1熱水抽出物投与群の投与1週目の摂餌量が少ないのは、マウスがアカシアNo.1熱水抽出物添加の餌に慣れるのに時間を要したためと考えられる。
4)摂水量測定(表5):対照群と比較して、有意な変化は認められなかった。
5)血液生化学的検査(表6):対照群と比較して、アカシアNo.1熱水抽出物投与群のトリグリセリド及びリン脂質に減少が認められた。
6)内臓脂肪重量測定(表6):対照群と比較して、アカシアNo.1熱水抽出物投与群の内臓脂肪の絶対重量及び相対重量に減少が認められた。
ラット脂肪食負荷モデルにアカシア樹皮抽出物を混餌投与して、投与最終日翌日に採血を行い血中のトリグリセリド、総コレステロール、リン脂質、ケトン体、遊離脂肪酸及び腹腔内の内臓脂肪量を測定した。対照群と比較して、アカシアNo.1熱水抽出物投与群の腹腔内内臓脂肪の絶対重量及び相対重量(体重100g当たり)の減少が認められた。血液生化学検査においても、対照群と比較してアカシアNo.1熱水抽出物投与群のトリグリセリド及びリン脂質の減少が認められた。対照群と比較して、アカシアNo.1熱水抽出物投与群の投与1週目以降で、体重の減少が認められた。
平均摂餌量は投与1週目を除き対照群と比較して差は認められなかった。また、平均摂水量でも差は認められなかった。
平均摂餌量及び平均摂水量において差が認められなかったので、アカシアNo.1熱水抽出物投与群で認められた腹腔内内臓脂肪、トリグリセリド、リン脂質および体重における対照群との差は、アカシアNo.1熱水抽出物の投与によるものと考えられた。
以上の結果から、アカシア樹皮抽出物を投与することにより、体脂肪が有意に減少した。
OECD(Guidelines for the Testing of Chemicals 401、1987)に準拠し、マウスを用いた急性経口毒性試験を実施した。
ICR系雌雄マウスについて、雄では7,000mg/kg、雌では6,500mg/kgを上限として、公差500mg/kgで各9用量の検体(上記製造例2のアカシアNo.1熱水抽出物)を雌雄マウスに単回経口投与した。検体は、製造例2のアカシアNo.1熱水抽出物を純水に懸濁して用いた。その結果、LD50値は雄では4,468mg/kg、雌では3,594mg/kgであり、いずれも3,000mg/kgの投与量で、死亡例を認めなかった。
上記試験を製造例2のアカシアNo.2〜5熱水抽出物について行って同様の結果を得た。これにより、本発明の組成物は、安全性に優れていることがわかった。
労働省告示第77号(昭和63年9月1日)に準拠し、突然変異誘起性試験を実施した。
Escherichia coli WP2 uvrA株及びSalmonella typhimurium TA株系4菌株を用いて代謝活性化を含む復帰突然変異試験を156〜5,000μg/プレートの用量の検体(製造例2のアカシアNo.1〜5熱水抽出物)で行った。その結果、いずれの菌株についても復帰変異コロニー数の増加が見られなかったことから、製造例2のアカシアNo.1〜5熱水抽出物の突然変異誘起性は陰性であると結論づけられ、安全性に優れていることがわかった。
製造例4のアカシア樹皮熱水抽出物エタノール画分を用い、下記に示す組成にて内服剤を調製した。
製造例4の抽出物画分 1.0(重量%)
乳糖 30.0
コーンスターチ 60.0
結晶セルロース 8.0
ポリビニールピロリドン 1.0
計 100.0
製造例2のアカシア樹皮熱水抽出物を用い、下記に示す組成にてペットフードを調製した。
製造例2の抽出物 1.0(重量%)
オートミール 88.0
でんぷん 5.0
食塩 2.5
全卵 3.0
調味料 0.5
計 100.0
製造例4のアカシア樹皮熱水抽出物エタノール画分を用い、下記に示す組成にて錠剤(菓子)を調製した。
製造例4の抽出物画分 1.0(重量%)
クエン酸 1.0
脱脂粉乳 15.0
ショ糖エステル 1.0
フレーバー 0.5
粉糖 20.0
乳糖 61.5
計 100.0
Claims (7)
- アカシア属樹皮由来物を含有することを特徴とする、抗肥満組成物。
- アカシア属樹皮由来物がアカシア属の樹皮の抽出物である、請求項1記載の組成物。
- アカシア属樹皮由来物がアカシア樹皮ポリフェノールである、請求項1記載の組成物。
- 食品である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の組成物。
- 動物用飼料である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の組成物。
- 医薬品である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の組成物。
- 医薬部外品である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の組成物。
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