JP2006220994A - Observation system - Google Patents

Observation system Download PDF

Info

Publication number
JP2006220994A
JP2006220994A JP2005035281A JP2005035281A JP2006220994A JP 2006220994 A JP2006220994 A JP 2006220994A JP 2005035281 A JP2005035281 A JP 2005035281A JP 2005035281 A JP2005035281 A JP 2005035281A JP 2006220994 A JP2006220994 A JP 2006220994A
Authority
JP
Grant status
Application
Patent type
Prior art keywords
light
optical modulation
modulation element
imaging
observation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
JP2005035281A
Other languages
Japanese (ja)
Inventor
Akiko Fujinoki
明子 藤ノ木
Original Assignee
Olympus Corp
オリンパス株式会社
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date

Links

Images

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To simultaneously perform pupil modulation observation such as phase difference observation, and fluorescence observation.
SOLUTION: The observation system 1 includes; an exciting light source 5 for emitting exciting light L1; an objective lens 4 with which a sample A is irradiated with the exciting light L1; a dichroic mirror 11 for branching the fluorescent light L2 emitted from the sample A from the exciting light L1; a 1st imaging lens 25 for imaging the branched fluorescent light L2; a 1st imaging device 7 arranged in the imaging position of the imaging lens 25; a transmissive-illumination light source 6 arranged opposite to the objective lens 4 across the sample A; a phase film and an absorption film 21 arranged at the pupil position of the objective lens 4; a 1st optical modulation member 18 arranged between the light source 6 and the sample A, and whose transmission peak stands outside a fluorescent wavelength band; a 2nd optical modulation member 22 for branching light L3 passing through the sample A and the objective lens 4 after passing through the 1st optical modulation member 18; a 2nd imaging lens 26 for imaging the branched light L3; and a 2nd imaging device 8 arranged at the imaging position of the 2nd imaging lens 26.
COPYRIGHT: (C)2006,JPO&NCIPI

Description

この発明は、観察システムに関するものである。 The present invention relates to the observation system.

従来、医学、生物学等の分野においては、細胞や組織などの状態を観察する際に、落射蛍光顕微鏡や、瞳変調顕微鏡(位相差顕微鏡)等が使用されている。 Conventionally, medical, in the field of biology such as, in viewing conditions such as cells and tissues, and epifluorescence microscopy, pupil modulation microscopy (phase contrast microscope) and the like are used.
また、落射蛍光観察と位相差観察とを切り替えて行う顕微鏡装置が知られている(例えば、特許文献1参照。)。 Also, the microscope apparatus for performing switching between epifluorescence observation and phase contrast observation is known (e.g., see Patent Document 1.).

この顕微鏡装置は、蛍光観察用の励起用光源と、位相差観察用の透過照明光源とを備え、励起用光源から発せられた励起光を標本に入射させて蛍光を発生させ、発生した蛍光を検出する蛍光観察光学系と、透過照明光源から発せられた光を標本に入射させて位相差観察を行う位相差観察光学系とを備えている。 This microscope apparatus includes an excitation light source for fluorescence observation, a transmitting light source for phase contrast observation, the excitation light emitted from the excitation light source is made incident on the specimen to generate fluorescence, the generated fluorescence includes a fluorescence observation optical system for detecting the light emitted from the transmitting light source is made incident on the specimen and the phase difference observation optical system for performing phase contrast observation.
そして、蛍光観察時には、励起用光源を作動させて励起光を標本に入射させ、標本から発せられる蛍光を接眼レンズまたは撮像装置で観察する一方、位相差観察時には、透過照明光源を作動させ、標本を透過してきた光を接眼レンズまたは撮像装置で観察するようになっている。 At the time of fluorescence observation, to operate the pumping light source is made incident excitation light to the specimen, while observing through the eyepiece or image pickup apparatus fluorescence emitted from the specimen, at the time of phase contrast observation, by operating the transmitting light source, the sample has the light transmitted through such observation through the eyepiece or image pickup device. これにより、蛍光観察または位相差観察のいずれかを選択して観察することができる。 This makes it possible to observe by selecting one of the fluorescent observation or phase difference observation.
特開平8−15612号公報(図1等) JP-8-15612 discloses (Fig. 1, etc.)

しかしながら、特許文献1の顕微鏡装置では、蛍光観察と位相差観察とを同時に行うことができない。 However, in the microscope apparatus of Patent Document 1, it can not be performed fluorescence observation and the phase difference observed at the same time.
蛍光観察は、試料に標識した蛍光色素または蛍光タンパク質そのものの蛍光シグナルを観察する方法であり、観察対象を特異的に検出し、可視化するのに適している。 Fluorescence observation is a method of observing the fluorescence signal of the fluorescent dye or fluorescent protein itself labeled in the sample, specifically detect the observation target is suitable for visualization. 一方、位相差観察は、細胞等のような透明な物体の位相分布をコントラストに変える観察法であり、細胞内の微細構造や外部形態を可視化できる観察法である。 On the other hand, the phase difference observation is an observation method of changing the phase distribution of the transparent objects such as cells or the like in contrast, is an observation method can be visualized microstructures and external form of the cell. これにより、位相差観察は、例えば、細胞活性のような細胞の状態を観測するのに適している。 Accordingly, the phase difference observation, for example, are suitable for observing the state of cells, such as cell activity. これらの観察法の適用の仕方として、例えば、細胞から発せられる蛍光に変化が生じたときに、細胞の状態を確認する場合には、蛍光観察と並行して位相差観察を行うことがある。 As a method of application of these observation methods, for example, when a change in the fluorescence emitted from the cells occurs, in the case of confirming the status of the cells may perform phase contrast observation in parallel with the fluorescent observation. また、標本中の一部から局部的に蛍光が発せられるときに、標本全体のどの位置から蛍光が発せられているのか観察する場合においても、蛍光観察と並行して位相差観察を行うことがある。 Further, when emitted is locally fluorescence from a portion in the specimen, even in the case of the observation whether the emitted fluorescence from which the position of the whole sample, is possible to perform the phase difference observation in parallel with the fluorescent observation is there.

これらの用途に対して、特許文献1の顕微鏡装置では、蛍光観察光学系と位相差観察光学系とを切り替える必要があるため、多量の標本に対して蛍光観察と位相差観察の双方を短時間で行うことは困難であった。 For these applications, the microscope apparatus of Patent Document 1, it is necessary to switch between the fluorescence observation optical system and the phase difference observation optical system, both the fluorescence observation and the phase difference observed for a large amount of specimen short be carried out in was difficult.
本発明は上述した事情に鑑みてなされたものであって、位相差観察等の瞳変調観察と蛍光観察とを同時に行うことを可能とする観察システムを提供することを目的としている。 The present invention was made in view of the above circumstances, and its object is to provide an observation system capable of performing a pupil modulating observation and fluorescence observation, such as the phase difference observation at the same time.

上記目的を達成するために、本発明は以下の手段を提供する。 To achieve the above object, the present invention provides the following means.
本発明は、励起光を出射する励起用光源と、該励起用光源から発せられた励起光を標本に照射させる対物レンズと、標本から発せられ対物レンズを介して戻る蛍光を励起光から分岐するダイクロイックミラーと、分岐された蛍光を結像させる第1の結像レンズと、該第1の結像レンズの結像位置に配置される第1の撮像素子と、前記標本を挟んで前記対物レンズとは反対側に配置された透過照明光源と、前記対物レンズの瞳位置あるいはその共役な位置に配置された位相膜および吸収膜と、前記透過照明光源と前記標本との間に配置され、蛍光波長域外に透過のピークを有する第1の光学変調部材と、該第1の光学変調部材を透過して標本に入射され、対物レンズを通過した光を選択的に分岐する第2の光学変調部材と、該第2の光学変調部 The present invention splits the excitation light source for emitting excitation light, an objective lens for irradiating the specimen with excitation light emitted from 該励 appointed source, a fluorescence returning via the objective lens emitted from the specimen from the excitation light dichroic and dichroic mirror, and the first imaging lens for forming the branched fluorescence, a first imaging device located on the imaging position of the first imaging lens, the objective lens across the specimen It is disposed between the transmissive illumination light source arranged on the opposite side, a phase film and the absorption film disposed at the pupil position or its conjugate position of the objective lens, and the specimen and the transmitted illumination light source and fluorescence a first optical modulation element having a peak of a transmission in wavelengths outside, is incident on the specimen through the first optical modulation element, a second optical modulation element for selectively branching the light passed through the objective lens When, the second optical modulating section により分岐された光を結像させる第2の結像レンズと、該第2の結像レンズの結像位置に配置される第2の撮像素子とを備える観察システムを提供する。 Providing a second imaging lens for forming the light branched, an observation system and a second imaging device located on the imaging position of the second imaging lens by.

本発明によれば、励起用光源から発せられた励起光が対物レンズを介して標本に照射されると、標本に含有されている蛍光物質が励起されて蛍光が発生する。 According to the present invention, excitation light emitted from excitation light source when it is irradiated on the specimen through the objective lens, a fluorescent substance is excited contained in the specimen fluorescence is generated. 標本から発せられた蛍光は対物レンズを介して戻り、ダイクロイックミラーによって励起光から分岐させられる。 Fluorescence emitted from the specimen returns through the objective lens, is branched from the excitation light by a dichroic mirror. そして、励起光から分岐された蛍光は第1の結像レンズによって結像され、その結像位置に配置されている第1の撮像素子により蛍光画像として取得されることになる。 Then, the fluorescence that is branched from the pumping light is imaged by the first imaging lens will be obtained as a fluorescent image by the first image pickup device disposed in the image forming position.

一方、透過照明光源から発せられた光は第1の光学変調部材を通過させられることにより、蛍光波長とは異なる波長の光のみが標本に入射させられる。 Meanwhile, the light emitted from the transmitting light source by being passed through a first optical modulation element is made incident to only the light of different wavelengths specimen and fluorescence wavelength. そして、標本を透過し、対物レンズによって集光された光は、対物レンズの瞳位置あるいはその共役な位置に配置されている位相膜および吸収膜を通過させられることで、直接光が位相変調および強度変調させられる。 Then, through the sample, light condensed by the objective lens, by being passed through a phase film and the absorption layer is disposed at the pupil position or its conjugate position of the objective lens, the light is directly phase modulation and It is caused to intensity modulation. その後、第2の光学変調部材に入射されることにより、波長の異なる他の光から分岐させられる。 Then, by being incident on the second optical modulation element, it is branched from other different wavelengths of light. そして、分岐された光は第2の結像レンズにより結像され、その結像位置に配置されている第2の撮像素子において回折光と直接光とを干渉させて位相差画像として取得されることになる。 The light branching is imaged by the second imaging lens, it is obtained by interference between direct and diffracted light as a phase difference image in the second image sensor disposed in the image forming position It will be.

このように、本発明によれば、蛍光観察と位相差観察との波長帯域を異ならせることによって、別個の結像光路を設けることができ、蛍光画像と位相差画像とを同時に取得することが可能となる。 Thus, according to the present invention, by varying the wavelength band of the fluorescence observation and the phase difference observation, it is possible to provide a separate imaging beam path, it is possible to acquire fluorescence image and a phase difference images simultaneously It can become.

上記発明においては、前記ダイクロイックミラーが、励起光および第1の光学変調部材を透過した光を蛍光から分岐させ、前記第2の光学変調部材が、前記ダイクロイックミラーと励起用光源との間に配置されていることとしてもよい。 In the above invention, the dichroic mirrors, the light transmitted through the excitation light and the first optical modulation element is branched from the fluorescence, the second optical modulation element is disposed between the dichroic mirror and excitation light source it may be being.
このように構成することで、励起用光源からの励起光および第1の光学変調部材を透過した透過照明光源からの光が、ダイクロイックミラーによって蛍光から分岐される。 With this configuration, light from the transmitting light source transmitted through the excitation light and the first optical modulation element from the excitation light source is branched from the fluorescent by the dichroic mirror.

すなわち、励起用光源から発せられた励起光は、ダイクロイックミラーを透過し、または反射されて対物レンズに向かう光路内に入り、対物レンズを介して標本に照射される。 That is, the excitation light emitted from the excitation light source is transmitted through the dichroic mirror, or is reflected enters the optical path towards the objective lens is irradiated to the specimen via the objective lens. 標本において発せられた蛍光は、対物レンズを介して励起光の入射光路を戻る。 Fluorescence emitted in the sample returns the incident light path of the excitation light through the objective lens. また、透過照明光源からの光は、第1の光学変調部材を通過させられた後に標本を通過して対物レンズに入射され、これも励起光の入射光路を辿る。 Further, the light from the transmitting light source is incident on the objective lens passes through the specimen after being passed through the first optical modulation element, which also follows the incident light path of the excitation light. そして、ダイクロイックミラーに入射されることで、第1の光学変調部材を通過した光は、励起用光源の方向に指向され、蛍光から分離される。 Then, by being incident on the dichroic mirror, the light that has passed through the first optical modulation element is directed in the direction of the excitation light source, it is separated from the fluorescence. その後、第1の光学変調部材を通過した光は、ダイクロイックミラーと励起用光源との間に配置されている第2の光学変調部材に入射されることで、励起光の入射光路から分岐させられて第2の結像レンズを介した後、第2の撮像素子により撮像されることになる。 Then, light passing through the first optical modulation element, by being incident on the second optical modulation element disposed between the dichroic mirror and excitation light source, it is branched from the incident optical path of the excitation light after passing through the second imaging lens Te, it will be captured by the second image sensor.
このように、本発明によれば、位相差観察用の光路と励起光の入射光路とを部分的に兼用させることができ、光学系の全長を短縮し、小型化を図ることが可能となる。 Thus, according to the present invention, the optical path for phase contrast observation and the incident light path of the excitation light can be partially shared, to shorten the overall length of the optical system, it becomes possible to downsize .

また、上記発明においては、前記吸収膜が、前記第2の光学変調部材と前記第2の結像レンズとの間に配置されていることが好ましい。 In the above aspect, the absorbent layer is preferably disposed between the second optical modulation element and the second imaging lens.
吸収膜を通過する際に光の強度が低下することになるため、位相差観察用の光を第2の光学変調部材によって蛍光観察用の光から分岐した後に吸収膜を通過させることにより、蛍光観察用の光の強度の低下を防止して、明るい蛍光画像を得ることができる。 Since the intensity of light as it passes through the absorbing layer is lowered, by passing the absorbing film after branching from light for fluorescence observation by light for phase contrast observation second optical modulation element, a fluorescent thereby preventing a decrease in the intensity of the light for observation, it is possible to obtain a bright fluorescence image.

また、上記発明においては、前記第1の光学変調部材が、蛍光波長より長波長側の光を透過することとしてもよい。 In the aspect described above, the first optical modulation element may be able to transmit light from the fluorescence wavelength longer wavelength side.
標本として細胞等の生物を観察する場合に、光の照射による活性酸素の発生等によって、標本が早期に劣化する不都合がある。 When observing the organism such as cells as a sample, the generation of active oxygen by light irradiation, there is a disadvantage that the sample is degraded at an early stage. 位相差観察用の光を蛍光波長より長波長側にすることで、より毒性の少ない光を標本に照射して、標本を健全な状態に維持することができる。 By the longer wavelength side than the fluorescence wavelength of light for phase-contrast observation is irradiated with less light toxic to the specimen, it is possible to maintain the sample in a healthy state.
特に、前記第1の光学変調部材が、700nm以上の光を透過することとしてもよい。 In particular, the first optical modulation member may be transmitted through the above light 700 nm.

また、上記発明においては、前記第1の光学変調部材が、蛍光波長より長波長側の第1の波長帯域の光を透過し、前記対物レンズとダイクロイックミラーとの間に、第1の波長帯域以上の波長の光を選択的に分岐する第3の光学変調部材を備え、前記第2の光学変調部材が、前記第3の光学変調部材と前記第2の結像レンズとの間に配置され、該第2の光学変調部材により分岐された第1の波長帯域より長波長側の光を用いてフォーカス位置を検出するフォーカス検出装置を備えることとしてもよい。 In the aspect described above, the first optical modulation element transmits light in the first wavelength band from the fluorescence wavelength longer wavelength side, between the objective lens and the dichroic mirror, the first wavelength band a third optical modulation element for selectively branching the light of the above wavelength, the second optical modulation element is disposed between the third optical modulation element and the second imaging lens it may be provided with a focus detecting device for detecting the focus position by using the light of the first long wavelength side of the wavelength band of which is branched by the second optical modulation element.

フォーカス検出装置の作動により、第1の波長帯域より長波長側の光が第2の光学変調部材および第3の光学変調部材を介して対物レンズに向かう光路に入射させられる。 By the operation of the focus detection device, the light of the first long wavelength side of the wavelength band of is made incident on the optical path towards the objective lens through the second optical modulation element and the third optical modulation element. そして、フォーカス検出用の光は、対物レンズを介して標本に照射され、標本において反射されることによって同一光路を戻りフォーカス検出装置に検出される。 The light for focus detection is irradiated on the specimen through the objective lens, is detected in the focus detection device returns the same optical path by being reflected in the sample. これにより、フォーカス位置が検出される。 Thus, the focus position is detected. 一方、位相差観察用の光は、標本を通過した後に第3の光学変調部材によって蛍光から分岐され、フォーカス検出用の光路と同一経路を辿り、第2の光学変調部材によってフォーカス検出用の光から分岐させられて第2の結像レンズによって結像され第2の撮像素子により撮像されることになる。 On the other hand, light for phase contrast observation is branched from the fluorescent by the third optical modulation element after passing through the specimen, it follows a light path in the same path for focus detection light for focus detection by the second optical modulation element to be imaged by the second imaging element is imaged by the second imaging lens is branched from.
このように、本発明によれば、位相差観察用の光路とフォーカス検出用の光路とを部分的に兼用させることができ、光学系の全長を短縮し、小型化を図ることが可能となる。 Thus, according to the present invention, the optical path of the optical path and the focus detection for phase contrast observation can be partially shared, to shorten the overall length of the optical system, it becomes possible to downsize .
また、フォーカス検出用の光としても、毒性の少ない光を標本に照射することができ、標本を健全な状態に維持することができる。 Further, even if the light for focus detection, can be irradiated with less light toxic to the specimen, it is possible to maintain the sample in a healthy state.

上記発明においては、前記吸収膜が、前記第2の光学変調部材と前記第2の結像レンズとの間に配置されていることとしてもよい。 In the above invention, the absorbing film, may be disposed between the second optical modulation element and the second imaging lens.
吸収膜による蛍光観察用の光の強度の低下を防止して、明るい蛍光画像を得ることができる。 To prevent a decrease in intensity of light for fluorescence observation by absorbing film, it is possible to obtain a bright fluorescence image.
また、上記発明においては、前記第1の光学変調部材が、700nm以上の光を透過することとしてもよい。 In the aspect described above, the first optical modulation member may be transmitted through the above light 700 nm.

本発明によれば、蛍光観察と位相差観察等の瞳変調観察とを同時に行うことができ、多量の標本に対して蛍光観察と位相差観察の双方を短時間で行うことができるという効果を奏する。 According to the present invention, it is possible to perform fluorescence observation with such phase contrast observation and pupil modulation observed simultaneously, an effect that can be performed in a short time both of the fluorescence observation and the phase difference observed for a large amount of sample unlikely to.

以下、本発明の第1の実施形態に係る観察システム1について、図1を参照して以下に説明する。 DESCRIPTION observation system 1 according to a first embodiment of the present invention will be described below with reference to FIG.
本実施形態に係る観察システム1は、図1に示されるように、培養液W内に細胞等の標本Aを収容した透明なディッシュ2を搭載するステージ3と、該ステージ3の下方に近接して配置された対物レンズ4と、該対物レンズ4を介して標本Aに下方から照射する励起光L1を発生するための励起用光源5と、標本Aの上方から標本Aに光を照射する透過照明光源6と、標本Aにおいて発生した蛍光L2を撮像する第1の撮像素子7と、透過照明光源6から発せられ標本Aを通過した光L3を撮像する第2の撮像素子8とを備えている。 Observation system 1 according to this embodiment, as shown in FIG. 1, a stage 3 for mounting a transparent dish 2 containing a specimen A such as cells in culture within the W, proximate the lower of the stage 3 an objective lens 4 disposed Te is irradiated with the excitation light source 5 for generating excitation light L1 is irradiated from below the specimen a via the objective lens 4, the light in the specimen a from above the specimen a transmission It includes an illumination light source 6, the first imaging device 7 for capturing the fluorescence L2 generated in the specimen a, and a second image sensor 8 for imaging the light L3 having passed through the emitted specimen a from the transmitted illumination light source 6 there.

励起用光源5から対物レンズ4に向かう励起光L1の入射光路には、励起用光源5からの光を略平行光に変換する投光光学系9と、励起用光源5から発せられた光から励起光L1を発生させる励起フィルタ10と、該励起フィルタ10により発生された励起光L1を反射して偏向させ、対物レンズ4に向かう光路に入射させるダイクロイックミラー11とが配置されている。 The incident light path of the excitation light L1 from the excitation light source 5 toward the objective lens 4, a light projecting optical system 9 to convert substantially parallel light light from the excitation light source 5, the light emitted from the excitation light source 5 an excitation filter 10 that generates the excitation light L1, the excitation filter 10 reflected by deflecting the pumping light L1 generated by the dichroic mirror 11 to be incident on the optical path towards the objective lens 4 is arranged.
投光光学系9は、例えば、励起用光源5からの光を集光するコレクタレンズ12と、開口絞り13と、視野絞り14と、集光レンズ15,16とから構成され、励起用光源5からの光を所定の光束径の略平行光にしてダイクロイックミラー11に入射させるようになっている。 Light projecting optical system 9, for example, a collector lens 12 for condensing light from the excitation light source 5, an aperture stop 13, a field stop 14, it is composed of the condenser lens 15 and 16, excitation light source 5 the light from the substantially parallel light of a predetermined beam diameter to be incident on the dichroic mirror 11.

また、透過照明光源6から標本Aに向かう入射光路には、透過照明光源6から発せられた光を集光させるコレクタレンズ17と、蛍光L2の波長帯域より長波長側の波長帯域の光L3のみを通過させ、他の波長帯域の光を遮断する第1の光学変調部材18と、該第1の光学変調部材18を通過した光L3の一部を通過させるリング状のスリットを有するリング絞り19と、該リング絞り19により絞られた光L3を標本Aに結像させるコンデンサレンズ20とが備えられている。 Further, the incident light path toward the specimen A from the transmission illumination light source 6, a collector lens 17 for condensing the light emitted from the transmission illumination light source 6, only light L3 having a wavelength band of the long wavelength side of the wavelength band of the fluorescence L2 is passed through a first optical modulation element 18 for blocking light in other wavelength bands, rings having a ring-shaped slit for passing a portion of the light L3 having passed through the first optical modulation element 18 aperture 19 When the condenser lens 20 for focusing the light L3 which is narrowed by the ring diaphragm 19 in the specimen a is provided.

また、対物レンズ4の瞳位置には、標本Aにおいて回折することなく透過した直接光の位相および強度を変調する位相膜および吸収膜21が備えられている。 Furthermore, the pupil position of the objective lens 4, a phase film and the absorption layer 21 modulates the transmitted phase and intensity of the direct light without diffraction is provided in the specimen A. 位相膜および吸収膜21は、標本Aにおいて回折した光については、変調させることなくそのまま通過させるように構成されている。 Phase film and the absorption layer 21, for the light diffracted in the specimen A, are configured to directly pass without modulation.

対物レンズ4とダイクロイックミラー11との間には、第1の光学変調部材18を通過した光であって、蛍光L2の波長帯域よりも長波長側の波長帯域の光L3を反射して偏向させ、蛍光L2の波長帯域の光を通過させる第2の光学変調部材22と、該第2の光学変調部材22を通過してしまった長波長帯域の光を遮断するバリアフィルタ23とが配置されている。 Between the objective lens 4 and the dichroic mirror 11, a light passing through the first optical modulation element 18, reflected by deflecting the light L3 having a wavelength band of the long wavelength side than the wavelength band of the fluorescence L2 , a second optical modulation element 22 which passes light in the wavelength band of the fluorescence L2, and a barrier filter 23 for blocking light of a long wavelength band having passed through the second optical modulation element 22 is arranged there.

ダイクロイックミラー11と第1の撮像素子7との間には、ダイクロイックミラー11を透過してしまった励起光L1を遮断する吸収フィルタ24と、ダイクロイックミラー11を透過した蛍光L2を集光して第1の撮像素子7に結像させる第1の結像レンズ25とが備えられている。 The dichroic mirror 11 and between the first imaging element 7, and the absorption filter 24 that blocks excitation light L1 and which has been transmitted through the dichroic mirror 11, the condenses the fluorescence L2 having passed through the dichroic mirror 11 first and the imaging lens 25 for imaging is provided in one of the imaging element 7.
また、第2の光学変調部材22と第2の撮像素子8との間には、第2の光学変調部材22によって反射された光L3を集光して第2の撮像素子8に結像させる第2の結像レンズ26が備えられている。 Further, a second optical modulation element 22 is provided between the second image sensor 8 images the light L3 reflected by the second optical modulation element 22 to the second image sensor 8 by condensing the second imaging lens 26 are provided.

このように構成された本実施形態に係る観察システム1の作用について、以下に説明する。 The operation of the observation system 1 according to the thus constructed embodiment will be described below.
本実施形態に係る観察システム1を用いて標本Aを観察するには、ステージ3上に標本Aを配置して、励起用光源5および透過照明光源6を作動させる。 To observe the specimen A using the observation system 1 according to this embodiment, by placing the specimen A on the stage 3, to operate the pumping light source 5 and the transmission illumination light source 6.
励起用光源5から出射された光は投光光学系9を通過させられて略平行光とされ、励起フィルタ10を通過させられることによって、所定の波長帯域の励起光L1となってダイクロイックミラー11に入射させられる。 Light emitted from the excitation light source 5 is substantially parallel light passed through the projection optical system 9, by being passed through an excitation filter 10, dichroic mirror 11 becomes excitation light L1 having a predetermined wavelength band It is to be incident on. ダイクロイックミラー11はこの波長帯域の励起光L1を反射するように構成されているので、励起光L1はダイクロイックミラー11によって反射され対物レンズ4に向かう入射光路に入射される。 Since the dichroic mirror 11 is configured to reflect excitation light L1 in this wavelength band, the excitation light L1 is incident on the incident light path toward the objective lens 4 is reflected by the dichroic mirror 11.

そして、励起光L1はバリアフィルタ23および第2の光学変調部材22を通過させられた後に対物レンズ4に入射され、該対物レンズ4によって集光させられてステージ3上の標本Aに照射される。 Then, the excitation light L1 is incident after being passed through a barrier filter 23 and the second optical modulation element 22 to the objective lens 4 is irradiated to the specimen A on the stage 3 is then condensed by the objective lens 4 .
標本A内には予め含有あるいは注入された蛍光物質が存在するので、照射された励起光L1によって蛍光物質が励起され、蛍光L2が発せられる。 Because in the specimen A exists in advance contained or injected fluorescent substance, the fluorescent substance is excited by the excitation light L1 emitted fluorescence L2 is emitted.

標本Aにおいて発生した蛍光L2は、励起光L1の入射光路をたどって戻り、対物レンズ4、第2の光学変調部材22およびバリアフィルタ23を通過して、ダイクロイックミラー11に入射させられる。 Fluorescence L2 generated in the specimen A returns following the incident light path of the excitation light L1, the objective lens 4, it passes through the second optical modulation element 22 and the barrier filter 23 and is caused to enter the dichroic mirror 11. ダイクロイックミラー11は、蛍光L2を反射することなく通過させるように構成されているので、蛍光L2はダイクロイックミラー11を通過して第1の結像レンズ25によって集光され、第1の撮像素子7によって撮像されることになる。 The dichroic mirror 11, which is configured to pass without reflection fluorescence L2, fluorescence L2 is condensed by the first imaging lens 25 passes through the dichroic mirror 11, the first image sensor 7 It will be imaged by. これにより、第1の撮像素子7により、蛍光画像が取得されることになる。 Thus, the first imaging device 7, so that the fluorescence image is acquired. ダイクロイックミラー11の後段には吸収フィルタ24が配置されているので、ダイクロイックミラー11を通過してしまった励起光L1が迷光となって第1の撮像素子7に入射されてしまうことを防止することができる。 Since the subsequent stage of the dichroic mirror 11 absorption filter 24 is disposed, to prevent the excitation light L1 having passed through the dichroic mirror 11 from being incident on the first imaging element 7 as stray light can.

一方、透過照明光源6から発せられた光は、コレクタレンズ17によって集光された後に第1の光学変調部材18を通過させられる。 Meanwhile, light emitted from the transmission illumination light source 6 is passed through a first optical modulation element 18 after being condensed by the collector lens 17. これにより、蛍光L2の波長帯域とは異なる波長帯域、特に、蛍光L2の波長帯域より長波長側の波長帯域(例えば、700nm以上)の光L3のみが第1の光学変調部材18を通過させられる。 Thus, the wavelength band different from the wavelength band of the fluorescence L2, in particular, the wavelength band of the long wavelength side of the wavelength band of the fluorescence L2 (e.g., 700 nm or higher) is only light L3 of passes through the first optical modulation element 18 . そして、リング絞り19を通過させられた後にコンデンサレンズ20によって集光され、ステージ3上の標本Aに結像される。 Then, it is condensed by the condenser lens 20 after having been passed through the ring aperture 19 is imaged on the specimen A on the stage 3.

標本Aに照射された光L3の内、一部は標本Aにおいて回折することなくそのまま通過し(直接光)、他の一部は標本Aにおいて回折して通過し(回折光)、ステージ3の下方に配置されている対物レンズ4に入射させられる。 Of the light L3 irradiated on the specimen A, a portion thereof is directly passed without diffraction in the specimen A (direct light), the other part passes diffracted in the specimen A (diffracted light), Stage 3 It is caused to enter the objective lens 4 is arranged below. 対物レンズ4の瞳位置には位相膜および吸収膜21が設けられているので、直接光のみの位相および強度が変調され、集光された状態で第2の光学変調部材22に入射させられる。 Since the phase film and the absorption layer 21 to the pupil position of the objective lens 4 is provided, modulated phase and intensity of the direct light only, is made incident on the second optical modulation element 22 in a state of being focused.

第2の光学変調部材22は、第1の光学変調部材18を通過した700nm以上の波長帯域の光L3のみを反射するように構成されているので、標本Aを透過してきた直接光および回折光を含む光L3が反射されて偏向される。 The second optical modulation element 22, which is configured to reflect only light L3 of 700nm or more wavelength band which has passed through the first optical modulation element 18, direct light and diffracted light transmitted through the specimen A light L3 comprising deflected is reflected. そして、第2の結像レンズ26によって結像され、第2の撮像素子8により撮像される。 Then, imaged by the second imaging lens 26 is imaged by the second image sensor 8. これにより、第2の撮像素子8においては、直接光と回折光とが干渉して得られる位相差画像が取得されることになる。 Thus, in the second image sensor 8, so that the phase difference image and the direct light and diffracted light can be obtained by interference is obtained. 第2の光学変調部材22の後段にはバリアフィルタ23が配置されているので、第2の光学変調部材22によって反射されずに透過してしまった直接光および回折光がバリアフィルタ23によって遮断され、第1の撮像素子7に迷光となって到達することが防止される。 Since the subsequent stage of the second optical modulation element 22 barrier filter 23 is arranged, direct light and diffracted light and which has been transmitted without being reflected by the second optical modulation element 22 is blocked by the barrier filter 23 , it is prevented from reaching as stray light on the first image sensor 7.

このように、本実施形態に係る観察システム1によれば、蛍光観察と位相差観察とを異なる波長帯域において行うことにより、蛍光観察用の蛍光L2と位相差観察用の光L3とを分岐して、蛍光画像および位相差画像を同時に別々に取得することができる。 Thus, according to the observation system 1 according to this embodiment, by performing the wavelength band different to the fluorescence observation and the phase difference observation, branched and fluorescence L2 and light L3 for phase contrast observation for fluorescence observation Te can be obtained fluorescence image and phase difference image simultaneously separately. これにより、多量の標本に対して蛍光画像と位相差画像の双方の画像を短時間で取得することができる。 This makes it possible to obtain in a short time both of the image of the fluorescence image and phase difference image with respect to a large amount of the specimen. この結果、細胞から発せられる蛍光に変化が生じたときに、細胞の活性の情報を正確にとらえることが可能となる。 As a result, when a change in the fluorescence emitted from the cells has occurred, it is possible to capture information on the activity of the cells accurately.

また、本実施形態に係る観察システム1においては、位相差観察用の光L3として、第1の光学変調部材18によって、蛍光観察の波長帯域より長波長側の700nm以上の波長帯域の光L3を使用した。 In the observation system 1 according to this embodiment, as light L3 for phase contrast observation, by a first optical modulation element 18, the light L3 of 700nm or more wavelength band on the longer wavelength side than the wavelength band of the fluorescence observation used. 標本Aとして用いる細胞等においては、光の照射により活性酸素を発生させてしまうことがあるが、700nm以上の波長帯域の光L3を照射することとすれば、そのような毒性が少なく、標本Aを長時間にわたって健全な状態に維持しつつ観察することができる。 In cells or the like used as a sample A, but may sometimes by generating active oxygen by light irradiation, if irradiation with light L3 of the above wavelength band 700 nm, such less toxic, the specimen A it can be observed while maintaining the healthy state for a long time.

なお、本実施形態においては、対物レンズ4の瞳位置に位相膜および吸収膜21を配置したが、これに代えて、図2に示されるように、第2の光学変調部材22と第2の結像レンズ26との間に瞳リレー光学系27を配置して、対物レンズ4の瞳位置をリレーし、対物レンズ4の瞳位置と共役な位置関係に配される位置に位相膜および吸収膜21を配置してもよい。 In the present exemplary embodiment has been arranged a phase film and the absorption layer 21 to the pupil position of the objective lens 4, instead of this, as shown in FIG. 2, the second optical modulation element 22 second by placing the pupil relay optical system 27 between the imaging lens 26, and relay the pupil position of the objective lens 4, a phase film and the absorption layer in a position which is disposed at the pupil position conjugate positional relationship of the objective lens 4 21 may be arranged. また、位相膜のみを対物レンズ4の瞳位置に配置し、吸収膜21のみを上記共役位置に配置することにしてもよい。 Also, placing Isomaku only the pupil position of the objective lens 4, only the absorbing film 21 may be be placed in the conjugate position. このようにすることで、位相差観察用の直接光を第2の光学変調部材22によって蛍光L2から分離した後に、吸収膜21を通過させることができる。 By doing so, it is possible to pass after separation from the fluorescent L2 by direct light for phase contrast observation second optical modulation element 22, the absorbing film 21. したがって、吸収膜21に蛍光L2を通過させずに済み、蛍光L2の強度低下を防止して明るい蛍光画像を取得することができる。 Thus, it finished without passing through the fluorescent L2 absorption layer 21, it is possible to obtain a bright fluorescence image by preventing the reduction in strength of the fluorescence L2.

次に、本発明の第2の実施形態に係る観察システム30について、図3を参照して、以下に説明する。 Next, the observation system 30 according to a second embodiment of the present invention, with reference to FIG. 3, described below.
本実施形態の説明において、上述した第1の実施形態に係る観察システム1と構成を共通とする箇所に同一符号を付して説明を省略する。 In the description of this embodiment, the description thereof is omitted the same reference numerals are applied to parts having the same configuration as the observation system 1 according to the first embodiment described above.

本実施形態に係る観察システム30は、第2の光学変調部材22の配置と、ダイクロイックミラー31の波長特性とにおいて第1の実施形態に係る観察システム1と相違している。 Observation system 30 according to this embodiment differs from the arrangement of the second optical modulation element 22, the observation system 1 according to the first embodiment in the wavelength characteristics of the dichroic mirror 31.
本実施形態においては、第2の光学変調部材22は、投光光学系9と励起フィルタ10との間に配置されている。 In the present embodiment, the second optical modulation element 22 is disposed between the projection optical system 9 and the excitation filter 10. また、ダイクロイックミラー31は、励起光L1の波長帯域と、蛍光L2の波長帯域よりも長波長側の700nm以上の波長帯域の光L3とを反射し、蛍光L2のみを透過させるように設計されている。 The dichroic mirror 31 has a wavelength band of the excitation light L1, than the wavelength band of the fluorescence L2 reflects the light L3 of 700nm or more wavelength band on the long wavelength side, it is designed to pass only the fluorescence L2 there.

このように構成された本実施形態に係る観察システム30の作用について、以下に説明する。 The operation of the observation system 30 according to the thus constructed embodiment will be described below.
励起用光源5から発せられた光は、投光光学系9を通過させられることにより略平行光とされ、第2の光学変調部材22に入射される。 Light emitted from the excitation light source 5 is a substantially parallel light by being passed through a light projecting optical system 9, is incident on the second optical modulation element 22. 第2の光学変調部材22は、700nm以上の波長帯域の光L3のみを反射し、それ以外の波長帯域の光を通過させるので、投光光学系9から出射された光は、第2の光学変調部材22を通過させられて励起フィルタ10に入射され、励起フィルタ10によって、所定の波長帯域の励起光L1とされる。 The second optical modulation element 22 reflects only the light L3 of the above wavelength band 700 nm, since the passage of light of other wavelength bands, the light emitted from the light projecting optical system 9, a second optical is passed through a modulation element 22 is incident on the excitation filter 10, the excitation filter 10 is the excitation light L1 having a predetermined wavelength band.

その後、励起光L1がダイクロイックミラー31によって反射され、対物レンズ4を介して標本Aに照射され、標本Aにおいて発生した蛍光L2が対物レンズ4を介してダイクロイックミラー31を通過させられて第1の結像レンズ25により結像して第1の撮像素子7により撮像される点は、第1の実施形態に係る観察システム1と同様である。 Thereafter, the excitation light L1 is reflected by the dichroic mirror 31, is irradiated to the specimen A via the objective lens 4, the fluorescence L2 generated in the specimen A is first being passed through the dichroic mirror 31 via the objective lens 4 the point being imaged by the first imaging element 7 imaged by the imaging lens 25, is similar to the observation system 1 according to the first embodiment.

一方、透過照明光源6から発せられ、標本Aを通過させられた、700nm以上の波長帯域の直接光および回折光を含む光L3は、ダイクロイックミラー31によって反射されることにより、励起光L1の入射光路を辿り、投光光学系9に至るまでの途中位置において第2の光学変調部材22によって反射されることにより、励起光L1から分離される。 On the other hand, emitted from the transmitted illumination light source 6, is passed through a specimen A, the light L3 including direct light and diffracted light of the above wavelength band 700nm, by being reflected by the dichroic mirror 31, the incident excitation light L1 follows the optical path, by being reflected by the second optical modulation element 22 in the middle position up to the light projecting optical system 9, is separated from the excitation light L1. そして、瞳リレー光学系27を介して、対物レンズ4の瞳位置の共役位置に配置されている位相膜および吸収膜21を通過させられ、第2の結像レンズ26によって結像されて第2の撮像素子8により撮像されることになる。 Then, through the pupil relay optical system 27, passed through a phase film and the absorption layer 21 is disposed at a conjugate position of the pupil position of the objective lens 4, a is imaged by the second imaging lens 26 2 to be imaged by the imaging device 8.

本実施形態に係る観察システム30によれば、第1の実施形態に係る観察システム1と同様に、蛍光画像と位相差画像とを同時に取得することができる。 According to the observation system 30 according to this embodiment, similarly to the observation system 1 according to the first embodiment, it is possible to acquire fluorescence image and a phase difference images simultaneously. さらに、本実施形態に係る観察システム30は、位相差観察用の光L3の光路を励起光L1の入射光路と部分的に兼用することにより、光路の全長を短縮して光学系の小型化を図ることができる。 Furthermore, the observation system 30 according to this embodiment, by also serves as a light path incident light path and partly of the excitation light L1 of the light L3 for phase contrast observation, to shorten the length of the optical path the size of the optical system it is possible to achieve. したがって、観察システム30全体をコンパクトに構成することができるという利点がある。 Therefore, there is an advantage that it is possible to construct a observation system 30 overall compact.

次に、本発明の第3の実施形態に係る観察システム40について、図4を参照して以下に説明する。 Next, the observation system 40 according to a third embodiment of the present invention will be described below with reference to FIG.
本実施形態の説明において、上述した第1、第2のの実施形態に係る観察システム1,30と構成を共通とする箇所に同一符号を付して説明を省略する。 In the description of this embodiment, the description thereof is omitted first, the same reference numerals are applied to parts having the same configuration as the observation system 1,30 according to the second of the above-described embodiment.

本実施形態に係る観察システム40においては、第1の光学変調部材18が、700nm〜780nmの第1の波長帯域の光L1を透過させるように構成されている。 In the observation system 40 according to this embodiment, the first optical modulation element 18 is configured to transmit light L1 of the first wavelength band of 700Nm~780nm. また、本実施形態に係る観察システム40は、対物レンズ4とダイクロイックミラー11との間に、700nm以上の波長帯域の光L1,L4を反射し、それ以外の光L2,L3を透過させる第3の光学変調部材41を備えている。 Also, the observation system 40 according to this embodiment, between the objective lens 4 and the dichroic mirror 11 reflects the light L1, L4 of the above wavelength band 700 nm, a third for transmitting light L2, L3 otherwise and a optical modulation element 41. また、本実施形態に係る観察システム40は、上記第1の波長帯域よりも長波長側の光L4を出射し、標本Aにおいて反射して戻ってきた光L4を検出することによりフォーカス位置を検出するフォーカス検出装置42を備えている。 Also, the observation system 40 according to this embodiment, than the first wavelength band to emit light L4 on the long wavelength side, detects the focus position by detecting the light L4 reflected and returned in the specimen A and a focus detection device 42.

また、本実施形態においては、第2の光学変調部材22が、第3の光学変調部材41とフォーカス検出装置42との間に配置されている。 In the present embodiment, the second optical modulation element 22 is disposed between the third optical modulation element 41 and the focus detecting device 42. 第2の光学変調部材22は、700nm〜780nmの第1の波長帯域の光L1を反射し、780nm以上の波長帯域の光L4は透過するように設計されている。 The second optical modulation element 22 reflects light L1 of the first wavelength band of 700Nm~780nm, the light L4 or more wavelength band 780nm is designed to transmit.
第2の光学変調部材22と第2の撮像素子8との間には、第2の実施形態に係る観察システム30と同様に、瞳リレー光学系27と、位相膜および吸収膜21と、第2の結像レンズ26とが配置されている。 And the second optical modulation element 22 is provided between the second image sensor 8, like the observation system 30 according to the second embodiment, the pupil relay optical system 27, a phase film and the absorption layer 21, the and second imaging lenses 26 are arranged.

このように構成された本実施形態に係る観察システム40の作用について、以下に説明する。 The operation of the observation system 40 according to the thus constructed embodiment will be described below.
励起用光源5から投光光学系9、励起フィルタ10およびダイクロイックミラー11を介して対物レンズ4に指向された励起光L1が、ステージ3上の標本Aに照射されると、標本Aにおいて発生した蛍光L2が対物レンズ4、第3の光学変調部材41およびダイクロイックミラー11を透過して第1の結像レンズ25により集光され、第1の撮像素子7によって撮像される。 Light projecting optical system 9 from the excitation light source 5, the excitation light L1 directed to the objective lens 4 through the excitation filter 10 and a dichroic mirror 11 and is irradiated to the specimen A on the stage 3, was generated in the sample A fluorescence L2 is the objective lens 4 is converged by the third optical modulation element 41 and the dichroic first imaging lens 25 is transmitted through the dichroic mirror 11, it is imaged by the first imaging element 7.

一方、透過照明光源6から発せられた光は、第1の光学変調部材18によって700nm〜780nmの第1の波長帯域の光L3のみとなって標本Aに照射され、標本Aを透過した直接光および回折光を含む光L3が対物レンズ4によって照射される。 Meanwhile, light emitted from the transmission illumination light source 6, the first optical modulation element 18 is irradiated to a first wavelength band light L3 only become in the specimen A in 700Nm~780nm, direct light transmitted through the specimen A and light L3 that includes a diffracted light is irradiated by an objective lens 4. そして、この第1の波長帯域の直接光および回折光を含む光L3は、ダイクロイックミラー11に向かう途中において、第3の光学変調部材41により反射されて蛍光L2から分離され、フォーカス検出装置42方向に指向される。 Then, the first light L3 including direct light and diffracted light of a wavelength band of, dichroic in way to the dichroic mirror 11, is reflected by the third optical modulation element 41 is separated from the fluorescence L2, focus detector 42 direction It is directed to. さらに、この第1の波長帯域の直接光および回折光を含む光L3は、フォーカス検出装置42に向かう途中位置において第2の光学変調部材22によって反射され、瞳リレー光学系27、位相膜および吸収膜21および第2の結像レンズ26を通過して第2の撮像素子8によって撮像されることになる。 Further, light L3 that includes a direct light and diffracted light of the first wavelength band is reflected by the second optical modulation element 22 in the middle position toward the focus detection device 42, the pupil relay optical system 27, a phase film and the absorption to be imaged by the second imaging element 8 passes through the film 21 and the second imaging lens 26.

さらに、本発明に係る観察システム40によれば、フォーカス検出装置42から出射された第1の波長帯域よりも長波長側の光L4、すなわち、780nm以上の波長帯域の光L4が、第2の光学変調部材22を通過させられた後に、第3の光学変調部材41によって反射されて対物レンズ4に入射され、対物レンズ4によって標本Aに結像させられる。 Furthermore, according to the observation system 40 according to the present invention, the first light L4 on the longer wavelength side than the wavelength band that is emitted from the focus detecting device 42, i.e., the light L4 or more wavelength band 780 nm, the second after being passed through the optical modulation element 22, is reflected by the third optical modulation element 41 is incident on the objective lens 4, is is focused on the specimen a by the objective lens 4. そして、該光L4は、標本Aにおいて反射されることにより、同一光路を辿って戻り、フォーカス検出装置42により検出される。 Then, the light L4, by being reflected at the specimen A, back tracing the same optical path, is detected by the focus detection device 42. これにより、フォーカス検出装置42は、検出した光L4を解析することによって、フォーカス位置が適正であるか否かを判定してフォーカス調整を行うことにより、鮮明な画像を取得することが可能となる。 Thus, the focus detection device 42, by analyzing the light L4 detected by performing focus adjustment focus position by determining whether a proper, it is possible to obtain a clear image .

本実施形態に係る観察システム40によれば、フォーカスの位置検出に使用する光L4が、第1の波長帯域よりも長波長側の光L4とされているので、標本Aに与える毒性が少なく、標本Aの健全性を阻害することを防止できる。 According to the observation system 40 according to this embodiment, the light L4 to be used for position detection of the focus, because there is a light L4 on the long wavelength side than the first wavelength band, less toxic given to the specimen A, It can be prevented to inhibit the health of the specimen a.
また、位相差観察用の光路の一部をフォーカス検出用の光路の一部と共用することにより、全体として光路長を短縮し、コンパクトに構成することができるという利点がある。 Further, by sharing a part of the optical path for focus detecting part of the optical path for phase contrast observation, to shorten the optical path length as a whole, there is an advantage that it can be made compact.

本発明の第1の実施形態に係る観察システムの全体構成を示す概略図である。 It is a schematic diagram showing the overall configuration of an observation system according to a first embodiment of the present invention. 図1の観察システムの変形例を示す概略図である。 It is a schematic diagram showing a modification of the observation system in FIG. 本発明の第2の実施形態に係る観察システムの全体構成を示す概略図である。 It is a schematic diagram showing the overall configuration of an observation system according to a second embodiment of the present invention. 本発明の第3の実施形態に係る観察システムの全体構成を示す概略図である。 It is a schematic diagram showing the overall configuration of an observation system according to a third embodiment of the present invention.

符号の説明 DESCRIPTION OF SYMBOLS

A 標本 L1 励起光 L2 蛍光 L3,L4 光 1,30,40 観察システム 4 対物レンズ 5 励起用光源 6 透過照明光源 7 第1の撮像素子 8 第2の撮像素子 11,31 ダイクロイックミラー 18 第1の光学変調部材 21 吸収膜 22 第2の光学変調部材 25 第1の結像レンズ 26 第2の結像レンズ 41 第3の光学変調部材 42 フォーカス検出装置 A specimen L1 excitation light L2 fluorescence L3, L4 optical 1,30,40 observation system 4 objective lens 5 excitation light source 6 transmitting light source 7 the first image sensor 8 second image sensor 11, 31 dichroic mirror 18 first the optical modulation element 21 absorbing film 22 and the second optical modulation element 25 first imaging lens 26 and the second imaging lens 41 third optical modulation element 42 focus detection device

Claims (8)

  1. 励起光を出射する励起用光源と、 An excitation light source for emitting excitation light,
    該励起用光源から発せられた励起光を標本に照射させる対物レンズと、 An objective lens for irradiating the specimen with excitation light emitted from 該励 appointment source,
    標本から発せられ対物レンズを介して戻る蛍光を励起光から分岐するダイクロイックミラーと、 A dichroic mirror for splitting the fluorescence returning via the objective lens emitted from the specimen from the excitation light,
    分岐された蛍光を結像させる第1の結像レンズと、 A first imaging lens for forming the branched fluorescence,
    該第1の結像レンズの結像位置に配置される第1の撮像素子と、 A first imaging device located on the imaging position of the first imaging lens,
    前記標本を挟んで前記対物レンズとは反対側に配置された透過照明光源と、 A transmissive illumination light source arranged on the side opposite to the objective lens across the specimen,
    前記対物レンズの瞳位置あるいはその共役な位置に配置された位相膜および吸収膜と、 A phase film and the absorption film disposed at the pupil position or its conjugate position of the objective lens,
    前記透過照明光源と前記標本との間に配置され、蛍光波長域外に透過のピークを有する第1の光学変調部材と、 Wherein disposed between the transmitting light source and said sample, a first optical modulation element having a peak of the transmission in the fluorescence wavelength outside,
    該第1の光学変調部材を透過して標本に入射され、対物レンズを通過した光を選択的に分岐する第2の光学変調部材と、 Is incident on the specimen is transmitted through the first optical modulation element, a second optical modulation element for selectively branching the light passed through the objective lens,
    該第2の光学変調部材により分岐された光を結像させる第2の結像レンズと、 A second imaging lens for forming the light branched by the second optical modulation element,
    該第2の結像レンズの結像位置に配置される第2の撮像素子とを備える観察システム。 Observation system and a second imaging device located on the imaging position of the second imaging lens.
  2. 前記ダイクロイックミラーが、励起光および第1の光学変調部材を透過した光を蛍光から分岐させ、 The dichroic mirror branches the light transmitted through the excitation light and the first optical modulation element from the fluorescence,
    前記第2の光学変調部材が、前記ダイクロイックミラーと励起用光源との間に配置されている請求項1に記載の観察システム。 Wherein the second optical modulation element, observation system according to claim 1 which is disposed between the dichroic mirror and light source for excitation.
  3. 前記吸収膜が、前記第2の光学変調部材と前記第2の結像レンズとの間に配置されている請求項1または請求項2に記載の観察システム。 The absorbing film, observation system according to claim 1 or claim 2 is disposed between the second optical modulation element and the second imaging lens.
  4. 前記第1の光学変調部材が、蛍光波長より長波長側の光を透過する請求項3に記載の観察システム。 Observation system according to claim 3 wherein the first optical modulation element is, for transmission of light having a longer wavelength than the fluorescence wavelength.
  5. 前記第1の光学変調部材が、700nm以上の光を透過する請求項4に記載の観察システム。 Observation system according to claim 4 wherein the first optical modulation element is, that transmits light of at least 700 nm.
  6. 前記第1の光学変調部材が、蛍光波長より長波長側の第1の波長帯域の光を透過し、 The first optical modulation element is transmitted through the light of the first wavelength band on the longer wavelength side than the fluorescence wavelength,
    前記対物レンズとダイクロイックミラーとの間に、第1の波長帯域以上の波長の光を選択的に分岐する第3の光学変調部材を備え、 Wherein between the objective lens and the dichroic mirror, comprising a third optical modulation element for selectively branching the light of the first wavelength band or more wavelengths,
    前記第2の光学変調部材が、前記第3の光学変調部材と前記第2の結像レンズとの間に配置され、 The second optical modulation element is disposed between the third optical modulation element and the second imaging lens,
    該第2の光学変調部材により分岐された第1の波長帯域より長波長側の光を用いてフォーカス位置を検出するフォーカス検出装置を備える請求項1に記載の観察システム。 Observation system according to claim 1, further comprising a focus detecting device for detecting the focus position by using the light of the first long wavelength side of the wavelength band of which is branched by the second optical modulation element.
  7. 前記吸収膜が、前記第2の光学変調部材と前記第2の結像レンズとの間に配置されている請求項6に記載の観察システム。 The absorbing layer is, the observation system according to claim 6, which is disposed between the second optical modulation element and the second imaging lens.
  8. 前記第1の光学変調部材が、700nm以上の光を透過する請求項7に記載の観察システム。 Observation system according to claim 7 wherein the first optical modulation element is, that transmits light above 700 nm.
JP2005035281A 2005-02-10 2005-02-10 Observation system Withdrawn JP2006220994A (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2005035281A JP2006220994A (en) 2005-02-10 2005-02-10 Observation system

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2005035281A JP2006220994A (en) 2005-02-10 2005-02-10 Observation system

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2006220994A true true JP2006220994A (en) 2006-08-24

Family

ID=36983358

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2005035281A Withdrawn JP2006220994A (en) 2005-02-10 2005-02-10 Observation system

Country Status (1)

Country Link
JP (1) JP2006220994A (en)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008047893A1 (en) * 2006-10-19 2008-04-24 Olympus Corporation Microscope
JP2008268027A (en) * 2007-04-20 2008-11-06 Nikon Corp Image analysis method, and fluorescence detection device
JP2012013888A (en) * 2010-06-30 2012-01-19 Nikon Corp Microscope and culture observation device
WO2012023816A2 (en) * 2010-08-18 2012-02-23 주식회사 나노엔텍 Fluorescence microscope for multi-fluorescence image observation, fluorescence image observation method using the same, and multi-fluorescence image observation system
JP2013238797A (en) * 2012-05-17 2013-11-28 Olympus Corp Microscope
JP2015517681A (en) * 2012-05-07 2015-06-22 アンセルム(アンスティチュ ナシオナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラルシェルシュ メディカル) Microscope for imaging the tissue of interest in a sample with high spatial resolution

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008047893A1 (en) * 2006-10-19 2008-04-24 Olympus Corporation Microscope
US9234845B2 (en) 2006-10-19 2016-01-12 Olympus Corporation Microscope with reflecting fluorescence illumination optical system
EP2075615B1 (en) 2006-10-19 2016-07-20 Olympus Corporation Microscope
JP5244605B2 (en) * 2006-10-19 2013-07-24 オリンパス株式会社 microscope
JP2008268027A (en) * 2007-04-20 2008-11-06 Nikon Corp Image analysis method, and fluorescence detection device
JP2012013888A (en) * 2010-06-30 2012-01-19 Nikon Corp Microscope and culture observation device
WO2012023816A2 (en) * 2010-08-18 2012-02-23 주식회사 나노엔텍 Fluorescence microscope for multi-fluorescence image observation, fluorescence image observation method using the same, and multi-fluorescence image observation system
US9395527B2 (en) 2010-08-18 2016-07-19 Nanotek, Inc. Fluorescent microscope for observing multiple fluorescent images, fluorescent image surveying method using the same, and multiple fluorescent image observing system
WO2012023816A3 (en) * 2010-08-18 2012-05-10 주식회사 나노엔텍 Fluorescence microscope for multi-fluorescence image observation, fluorescence image observation method using the same, and multi-fluorescence image observation system
JP2015517681A (en) * 2012-05-07 2015-06-22 アンセルム(アンスティチュ ナシオナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラルシェルシュ メディカル) Microscope for imaging the tissue of interest in a sample with high spatial resolution
JP2013238797A (en) * 2012-05-17 2013-11-28 Olympus Corp Microscope

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5966204A (en) Near-infrared microscope
US20110284767A1 (en) Combination microscopy
US20100245550A1 (en) Fluoroscopy apparatus and fluoroscopy method
WO2001061324A1 (en) Fluorescence microscopy methods and devices using light emission diodes
US20110310395A1 (en) Three-dimensional optical coherence tomography confocal imaging apparatus
JPH0843739A (en) Scanning optical microscope
US20060100524A1 (en) Analysis apparatus and method
US20110174986A1 (en) Apparatus, Especially Microscope, for the Analysis of Samples
US20040245445A1 (en) Laser microscope
JP2004110017A (en) Scanning laser microscope
US7436562B2 (en) Scanning examination apparatus, lens unit, and objective-lens adaptor
US20060152787A1 (en) Scanning microscope comprising a confocal slit scanner for reproducing an object
US20090213362A1 (en) Optical measuring system
JP2004004678A (en) Confocal microscope apparatus and observation method using confocal microscope apparatus
US20060157637A1 (en) Focus detection device and fluorescent observation device using the same
US7474777B2 (en) Device and method for optical measurement of chemical and/or biological samples
JP2006171024A (en) Multi-point fluorescence spectrophotometry microscope and multi-point fluorescence spectrophotometry method
WO2005096058A1 (en) Scanning microscope and method for examining a sample by using scanning microscopy
US20070052958A1 (en) Scanning microscope with evanescent wave illumination
US20060050375A1 (en) Confocal microscope
US20050078362A1 (en) Microscope
US20120289832A1 (en) Illumination Methods And Systems For Improving Image Resolution Of Imaging Systems
JP2006258990A (en) Optical microscope
JP2008203813A (en) Scanning microscope
US20100149519A1 (en) Polarization contrast imager (pci)

Legal Events

Date Code Title Description
A300 Withdrawal of application because of no request for examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300

Effective date: 20080513